Resumo
Considerando a importância dos flebotomíneos nos ciclos de transmissão das leishmanioses, este estudo teve como objetivo avaliar a fauna local das espécies vetores da doença em área de transmissão endêmica para a Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA). Foram realizadas coletas de amostras nas regiões rurais do município de Iúna, estado do Espírito Santo, Brasil. As capturas dos dípteros abrangeram cinco localidades rurais aonde casos de LTA já haviam sido previamente relatados. Quatorze pontos de coletas foram estabelecidos no peridomicílio de moradores dessas localidades. Os critérios de escolha para a instalação das armadilhas foram propriedades com histórico anterior de casos clínicos humanos de leishmanioses tegumentares e atualmente com a presença de cães sem sinais clínicos da doença, podendo ser soropositivos ou não para antígenos de Leishmania (Viannia) braziliensis pela técnica de ELISA (EnzymeLinked Immunosorbent Assay) indireta convencional, assim como terem sido vacinados contra Leishmaniose Visceral Canina com vacinas comerciais. As capturas foram realizadas em dezembro de 2015 respeitando os hábitos comportamentais dos insetos. As coletas realizaram-se com o auxílio de armadilhas luminosas do tipo CDC (Centers for Diseases Controls) instaladas às 18h00min e recolhidas às 06h00min totalizando 336 horas de funcionamento. Entre quatorze pontos de coletas, dez apresentaram a presença de flebotomíneos sendo um total de 1148 espécimes. Uma parcela de 60 fêmeas, sendo 20 de cada um dos três pontos com maiores frequências de flebotomíneos, foram separadas e submetidas à extração de DNA e posteriormente a reação em cadeia da polimerase (PCR), com o intuito de se verificar a presença de ácidos nucleicos condizentes com o gênero Leishmania spp. nos seus tubos digestivos, porém, todas as análises apresentaram resultado negativos. Os 1088 flebotomíneos restantes foram processados e posteriormente identificados. A espécie Migonemyia migonei a foi a que se apresentou mais abundante sendo responsável por 71,7% dos espécimes, seguida por Nyssomyia intermedia 21,5%, somando as demais espécies capturadas 6,8%. Considerando a capacidade vetorial de Mg. migonei e Ny. intermedia , bem como seus hábitos antropofílicos já descritos na literatura, podemos sugerir que essas espécies possam estar atuando como transmissoras de LTA na região.
Considering the importance of sandflies in the transmission cycles of leishmaniasis, this study aimed to evaluate the local fauna of the species vectors of the disease in an area of endemic transmission to American Cutaneous Leishmaniasis (ACL). Samples were collected in the rural regions of the municipality of Iúna, state of Espírito Santo, Brazil. Diptera catches were made in five rural locations where cases of ACL had previously been reported. Fourteen collection points were established in the peridomicile of residents of these localities. The selection criteria for the installation of the traps were properties with a previous history of human clinical cases of tegumentary leishmaniasis and currently with dogs without clinical signs of the disease, and may be seropositive or not for antigens of Leishmania (Viannia) braziliensis by the technique of conventional indirect ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), and that they had been vaccinated against Visceral Canine Leishmaniasis with commercial vaccines. The catches were carried out in December of 2015 respecting the behavioral habits of the insects. The collections were carried out with the aid of "CDC" light traps (Centers for Diseases Controls) installed at 6:00 p.m. and collected at 06:00 a.m., totaling 336 operating hours. Between the fourteen collection points, ten presented the presence of sand flies, with a total of 1148 specimens. A sample of 60 females, 20 of each of the three points with higher frequencies of sandflies, were separated and submitted to DNA extraction and then the polymerase chain reaction (PCR), with the intention to verify the presence of nucleic acids compatible with the genus Leishmania spp. in their digestive tubes, however, all analyzes showed negative results. The remaining 1088 phlebotomines were processed and subsequently identified. Migonemyia migonei was the most abundant species in this study, accounting for 71.7% of the specimens, followed by Nyssomyia intermedia 21.5%, the other species added 6.8%. Considering the vector capacity of Mg. Migonei and Ny. Intermedia, as well as their anthropophilic habits already described in the literature, we can suggest that these species may be acting as transmitters of ACL in the region.
Resumo
A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma zoonose causada por protozoários do gênero Leishmania. Atualmente, a região sul do Espírito Santo é endêmica para a LTA causada por Leishmania (Viannia) braziliensis, com diversos casos clínicos em humanos e animais ao longo da última década. Uma das maneiras mais eficazes de prevenir a LTA é a utilização de vacinas, sendo que o desenvolvimento de uma vacina eficaz contra a doença tem sido alvo de muitos estudos nos últimos anos. Diante do exposto o presente estudo avaliou a resposta imune humoral induzida por duas diferentes vacinas comercialmente disponíveis para proteção contra leishmaniose visceral para induzir imunidade contra LTA em cães. Para tanto, foram selecionados cães soronegativos para L. brasiliensis no município de Iúna, Espírito Santo pela técnica sorológica de ELISA. Posteriormente, esses animais foram divididos em dois grupos de igual número e vacinados com três doses segundo orientação dos fabricantes. Como resultado inédito observou-se que cães imunizados com tais vacinas resultaram em resposta sorológica positiva frente a antígenos solúveis de Leishmania (V.) braziliensis quando avaliados pela técnica de ELISA mostrando proteção em sua maioria aos 120 dias (75,47%) e residualmente aos 240 dias (20,75%). Complementarmente concluiu-se que os resultados desse estudo discordam da informação dos fabricantes que relatam que os cães vacinados estão imunizados, mas não responsivos sorologicamente para técnica de ELISA convencional a partir de 21 dias após a terceira dose. Assim, cães vacinados devem ser rigorosamente cadastrados para não serem identificados como positivos assintomáticos para leishmaniose.
The American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) is a zoonosis caused by Leishmania protozoa. Currently, the southern region of the Espírito Santo is endemic to the ACL caused by Leishmania (V.) braziliensis, with several clinical cases in humans and animals over the past decade. One of the most effective ways to prevent ACL Is the use of vaccine, and the development of an effective vaccine against the disease has been the subject of many studies in recent years. View of these facts the present study evaluated the humoral immune response induced by two different vaccines commercially available for visceral leishmaniasis protection to induce immunity against ACL in dogs. Therefore, dogs seronegative for ACL in the municipality of Iúna, Espírito Santo were selected by the serological technique of ELISA. Subsequently the animals were divided in to two groups and vaccinated with three doses second instructions of the manufacturers. Such as unpublished results were observed that dogs immunized with such vaccines resulted in positive antibody response against soluble antigens of Leishmania (V.) braziliensis when assessed by ELISA showing protection most lyat 120 days (75.47%) and residually to the 240 days (20.75%). In addition it was found that the results of this study disagree with the manufacturers which report information that vaccinated dogs are immunized but not responsive to conventional serology ELISA from 21 days after the third dose. Thus, vaccinated dogs must be strictly registered not to be identified as asymptomatic positive for leishmaniasis.
Resumo
O presente estudo avaliou 2002 amostras de sangue de cães provenientes de áreas endêmicas (região oeste do Estado de São Paulo) e áreas não endêmicas (município de São Paulo) para leishmaniose visceral americana (LVA), com o objetivo de otimizar os testes sorológicos preconizados pelo Programa de Controle nos inquéritos sorológicos caninos, preconizados no Programa de Controle de LVA e produzidos por Biomanguinhos (Reação de Imunofluorescência Indireta / RIFI-BM e Ensaio Imunoenzimático ELISA / ELISA-BM. Para tal as amostras de sangue foram agrupadas em três bancos de dados: Banco (A) constituído por 97 amostras de sangue assim caracterizadas: 51 amostras com exame parasitológico, sorológico e sintomatologia definida como assintomática (2); oligossintomática (18) e sintomática (31); além destas, 46 amostras de sangue sorológicamente negativas das quais 26 tinham exames parasitológico e sorológico negativos e 20 somente exames sorológico negativos; Banco (B) composto por 174 amostras pareadas de soro e sangue colhidos em papel filtro com diagnóstico clínico, sorológico e parasitológico; Banco (C) constituído de 1831 amostras de sangue colhidas em papel-filtro, provenientes de 3 inquéritos sorológicos caninos realizados nos municípios de Rubiácea (504 amostras), Piacatú (607 amostras) e Luiziânia (720 amostras). A RIFI foi realizada quantitativamente nas diluições 1/20, 1/40, 1/8
Resumo
O presente estudo avaliou 2002 amostras de sangue de cães provenientes de áreas endêmicas (região oeste do Estado de São Paulo) e áreas não endêmicas (município de São Paulo) para leishmaniose visceral americana (LVA), com o objetivo de otimizar os testes sorológicos preconizados pelo Programa de Controle nos inquéritos sorológicos caninos, preconizados no Programa de Controle de LVA e produzidos por Biomanguinhos (Reação de Imunofluorescência Indireta / RIFI-BM e Ensaio Imunoenzimático ELISA / ELISA-BM. Para tal as amostras de sangue foram agrupadas em três bancos de dados: Banco (A) constituído por 97 amostras de sangue assim caracterizadas: 51 amostras com exame parasitológico, sorológico e sintomatologia definida como assintomática (2); oligossintomática (18) e sintomática (31); além destas, 46 amostras de sangue sorológicamente negativas das quais 26 tinham exames parasitológico e sorológico negativos e 20 somente exames sorológico negativos; Banco (B) composto por 174 amostras pareadas de soro e sangue colhidos em papel filtro com diagnóstico clínico, sorológico e parasitológico; Banco (C) constituído de 1831 amostras de sangue colhidas em papel-filtro, provenientes de 3 inquéritos sorológicos caninos realizados nos municípios de Rubiácea (504 amostras), Piacatú (607 amostras) e Luiziânia (720 amostras). A RIFI foi realizada quantitativamente nas diluições 1/20, 1/40, 1/8