Rabies in a previously vaccinated horse: case report / Raiva em equino previamente vacinado: relato de caso

Rabies is an acute, progressive, and fatal encephalomyelitis caused by a Lyssavirus. Horses affected by the disease may be a source of infection for humans. A rapid diagnosis is crucial to initiate a prompt and adequate infection control and public health measures. This manuscript reports the case of a 4-year-old gelding, 370 kg, healthy and routinely used for veterinary teaching purposes that developed rabies although vaccinated against it. Clinical signs included lameness, ataxia, muscle tremors, decubitus and pedalling, progressive paralysis, profuse salivation, teeth grinding, and whinnying. After 4 days, the animal was euthanised and definitive diagnosis was achieved through an animal inoculation test which was positive. Complementary findings included encephalomyelitis with perivascular cuffs and identification of Negri bodies in various areas of the brain.(AU)

A raiva é uma encefalomielite aguda, progressiva e fatal causada por um Lyssavirus. Cavalos acometidos pela doença podem ser uma fonte de infecção para homens. O rápido diagnóstico é crucial para que iniciem medidas de controle de infecção e de saúde pública adequadas. Esse manuscrito descreve o caso clínico de um equino de 4 anos, macho castrado, 370 kg, hígido, usado nas práticas didáticas da escola de veterinária que desenvolveu quadro clínico de raiva, apesar de ser vacinado contra a referida doença. Os sinais clínicos incluíram claudicação, ataxia, tremores musculares, decúbito e movimentos de pedalagem, paralisia progressiva, salivação profusa, bruxismo e relinchos. Após 4 dias, o animal foi eutanasiado e o diagnóstico definitivo foi feito através de prova biológica positivada. Os achados complementares incluíram os achados histopatológicos nos quais destacam-se encefamolielite com manguitos perivasculares e identificação de Corpúsculos de Negri em várias áreas do cérebro.(AU)

Human post exposure anti-rabies prophylactic assistance in the south of Brazil / Assistência profilática anti-rábica pós-exposição humana no sul do Brasil

Rabies is a zoonosis caused by Lyssavirus, with progressive development and a high lethality rate. In Brazil, rabies and accidents caused by animals potentially transmitting the disease are mandatory notification injuries. Exposure to rabies infection places a high financial burden on public health systems, especially for the care of people who are exposed and have a high risk of death. We aimed to define the epidemiological profile of human rabies post-exposure assistance in the municipality of Santa Maria, Rio Grande do Sul, Brazil, from 2010 to 2015. Data from Brazil's Notifiable Diseases Information System were obtained and analyzed; these data were acquired by the completion of individual inquiry forms querying human antirabies assistance. A total of 55% (1,898/3,453) of anti-rabies assistance cases involved women and 45%(1,555/3,453) men. The highest occurrence (54.5%-1,882/3,453) was in the age group of 20–59 years. Most registered cases (87.5%–3,024/3.453) were caused by dogs, followed by cats (10.9%–378/3,453). The lower limb (22.1%–617/2,790) was the area of the body with the highest number of canine bites. We observed incorrect indications for the treatment. We suggest further training for health professionals involved in rabies post-exposure prophylaxis care, and dissemination of information aimed at educating users about the importance of animal-related injuries.

A raiva é uma zoonose causada por Lyssavirus, com desenvolvimento progressivo e alta taxa de letalidade. No Brasil, a raiva e os acidentes causados por animais potencialmente transmissores da doença, são agravos de notificação obrigatória. A exposição à infecção por raiva coloca um alto ônus financeiro para o sistema público de saúde, especialmente para o atendimento de pessoas expostas e com alto risco de morte. O objetivo deste estudo foi definir o perfil epidemiológico da assistência pós-exposição à raiva humana no município de Santa Maria, Rio Grande do Sul, Brasil, de 2010 a 2015. Foram obtidos e analisados os dados do Sistema de Informações sobre Doenças Notificáveis do Brasil (SINAM); adquiridos por meio do preenchimento de formulários de consulta individuais, verificando a assistência antirrábica humana. Um total de 55% (1.898/3.453) e 45% (1.555/3.453) dos casos de assistência anti-rábica envolveu mulheres e homens respectivamente, com maior ocorrência na faixa etária de 20 a 59 anos (54,5% - 1.882/3.453). A maioria dos casos registrados (87,5% - 3.024/3.453) foi causada por cães e 10,9% (378/3.453) por gatos. O membro inferior (22,1% - 617/2.790) foi a área do corpo com o maior número de agressões por cães. Desta forma, sugere-se o treinamento para profissionais de saúde envolvidos no tratamento profilático da raiva após a exposição e disseminação de informações destinadas a educar os usuários sobre a importância das lesões relacionadas a animais.

Human post exposure anti-rabies prophylactic assistance in the south of Brazil / Assistência profilática anti-rábica pós-exposição humana no sul do Brasil

Rabies is a zoonosis caused by Lyssavirus, with progressive development and a high lethality rate. In Brazil, rabies and accidents caused by animals potentially transmitting the disease are mandatory notification injuries. Exposure to rabies infection places a high financial burden on public health systems, especially for the care of people who are exposed and have a high risk of death. We aimed to define the epidemiological profile of human rabies post-exposure assistance in the municipality of Santa Maria, Rio Grande do Sul, Brazil, from 2010 to 2015. Data from Brazil's Notifiable Diseases Information System were obtained and analyzed; these data were acquired by the completion of individual inquiry forms querying human antirabies assistance. A total of 55% (1,898/3,453) of anti-rabies assistance cases involved women and 45%(1,555/3,453) men. The highest occurrence (54.5%-1,882/3,453) was in the age group of 20–59 years. Most registered cases (87.5%–3,024/3.453) were caused by dogs, followed by cats (10.9%–378/3,453). The lower limb (22.1%–617/2,790) was the area of the body with the highest number of canine bites. We observed incorrect indications for the treatment. We suggest further training for health professionals involved in rabies post-exposure prophylaxis care, and dissemination of information aimed at educating users about the importance of animal-related injuries.(AU)

A raiva é uma zoonose causada por Lyssavirus, com desenvolvimento progressivo e alta taxa de letalidade. No Brasil, a raiva e os acidentes causados por animais potencialmente transmissores da doença, são agravos de notificação obrigatória. A exposição à infecção por raiva coloca um alto ônus financeiro para o sistema público de saúde, especialmente para o atendimento de pessoas expostas e com alto risco de morte. O objetivo deste estudo foi definir o perfil epidemiológico da assistência pós-exposição à raiva humana no município de Santa Maria, Rio Grande do Sul, Brasil, de 2010 a 2015. Foram obtidos e analisados os dados do Sistema de Informações sobre Doenças Notificáveis do Brasil (SINAM); adquiridos por meio do preenchimento de formulários de consulta individuais, verificando a assistência antirrábica humana. Um total de 55% (1.898/3.453) e 45% (1.555/3.453) dos casos de assistência anti-rábica envolveu mulheres e homens respectivamente, com maior ocorrência na faixa etária de 20 a 59 anos (54,5% - 1.882/3.453). A maioria dos casos registrados (87,5% - 3.024/3.453) foi causada por cães e 10,9% (378/3.453) por gatos. O membro inferior (22,1% - 617/2.790) foi a área do corpo com o maior número de agressões por cães. Desta forma, sugere-se o treinamento para profissionais de saúde envolvidos no tratamento profilático da raiva após a exposição e disseminação de informações destinadas a educar os usuários sobre a importância das lesões relacionadas a animais.(AU)

Educação em saúde para prevenção da raiva humana / Health education for prevention of human rabies / Educación en salud para prevención de la rabia humana

A raiva é uma antropozoonose viral que se desenvolve de forma progressiva e aguda podendo apresentar até 100% de letalidade. O seu agente etiológico é o vírus rábico do gênero Lyssavirus pertencente à família Rhabdoviridae. O presente trabalho teve como objetivo divulgar informações acerca da ocorrência da raiva em humanos em virtude da sua expressiva importância para saúde pública e analisar a percepção da população sobre a raiva humana, de forma a obter dados relacionados a conhecimentos básicos sobre a doença. Para isso, foi criada uma página informativa denominada "@contraraiva_" na rede social Instagram para a realização de postagens interativas sobre o tema abordado, e uso de um questionário criado a partir da plataforma Google Forms em diferentes mídias sociais para a obtenção e coleta de dados. Foram obtidas 1.075 respostas, provenientes de diferentes localidades. O questionário alcançou todas as regiões brasileiras, todos 26 estados e o Distrito Federal. As informações publicadas pela página criada ajudaram a sanar dúvidas relacionadas aos principais aspectos da doença. Os dados obtidos a partir do questionário contribuem para o planejamento de ações voltadas para a educação em saúde de forma mais estratégica, visando contribuir para os pontos em que a população tem menos conhecimentos.(AU)

Rabies is a viral anthropozoonosis that is developed in a progressive and acute way and can present up to 100% lethality. Its etiologic agent is the rabies virus of the Lyssavirus gene belonging to the Rhabdoviridae family. This study aimed at disseminating information about the occurrence of rabies in humans due to its expressive importance for public health, and at analyzing the population perception on human rabies in order to obtain data related to basic knowledge about the disease. For that purpose, an information page called "@ contraraiva _" was created on the social network Instagram for providing interactive posts on the topic, and a questionnaire was created from the Google Forms platform on different social media to obtain and collect data. A total of 1,075 responses were obtained from different locations. The questionnaire included all Brazilian regions, all 26 states and the Federal District. The information published on the created page helped to clarify doubts related to the main aspects of the disease. The data obtained from the questionnaire contribute towards the planning of actions aimed at health education in a more strategic way, aiming at contributing to the points where the population is less knowledgeable.(AU)

La rabia es una antropozoonosis viral que se desarrolla de forma progresiva y aguda y puede presentar hasta un 100% de letalidad. Su agente etiológico es el virus de la rabia del género Lyssavirus perteneciente a la familia Rhabdoviridae. Este estudio tuvo como objetivo difundir informaciones sobre la ocurrencia de la rabia en humanos en virtud de su importancia expresiva para la salud pública, y analizar la percepción de la población sobre la rabia humana, con el fin de obtener datos relacionados a los conocimientos básicos sobre la enfermedad. Para ello, se creó una página de información denominada "@ contraraiva _" en la red social Instagram para realizar publicaciones interactivas sobre el tema abordado, y utilizar un cuestionario creado a partir de la plataforma Google Forms en diferentes redes sociales para la obtención y recolección de datos. Se obtuvieron 1.075 respuestas de diferentes lugares. El cuestionario llegó a todas las regiones brasileñas, a los 26 estados y al Distrito Federal. Las informaciones publicadas en el sitio web creado, ayudaron a sanar dudas relacionadas a los principales aspectos de la enfermedad. Los datos obtenidos del cuestionario contribuyen a la planificación de acciones orientadas a la educación para la salud de forma más estratégica, con el objetivo de contribuir a los puntos donde la población tiene menos conocimientos.(AU)

Educação em saúde para prevenção da raiva humana / Health education for prevention of human rabies / Educación en salud para prevención de la rabia humana

A raiva é uma antropozoonose viral que se desenvolve de forma progressiva e aguda podendo apresentar até 100% de letalidade. O seu agente etiológico é o vírus rábico do gênero Lyssavirus pertencente à família Rhabdoviridae. O presente trabalho teve como objetivo divulgar informações acerca da ocorrência da raiva em humanos em virtude da sua expressiva importância para saúde pública e analisar a percepção da população sobre a raiva humana, de forma a obter dados relacionados a conhecimentos básicos sobre a doença. Para isso, foi criada uma página informativa denominada "@contraraiva_" na rede social Instagram para a realização de postagens interativas sobre o tema abordado, e uso de um questionário criado a partir da plataforma Google Forms em diferentes mídias sociais para a obtenção e coleta de dados. Foram obtidas 1.075 respostas, provenientes de diferentes localidades. O questionário alcançou todas as regiões brasileiras, todos 26 estados e o Distrito Federal. As informações publicadas pela página criada ajudaram a sanar dúvidas relacionadas aos principais aspectos da doença. Os dados obtidos a partir do questionário contribuem para o planejamento de ações voltadas para a educação em saúde de forma mais estratégica, visando contribuir para os pontos em que a população tem menos conhecimentos.(AU)

Rabies is a viral anthropozoonosis that is developed in a progressive and acute way and can present up to 100% lethality. Its etiologic agent is the rabies virus of the Lyssavirus gene belonging to the Rhabdoviridae family. This study aimed at disseminating information about the occurrence of rabies in humans due to its expressive importance for public health, and at analyzing the population perception on human rabies in order to obtain data related to basic knowledge about the disease. For that purpose, an information page called "@ contraraiva _" was created on the social network Instagram for providing interactive posts on the topic, and a questionnaire was created from the Google Forms platform on different social media to obtain and collect data. A total of 1,075 responses were obtained from different locations. The questionnaire included all Brazilian regions, all 26 states and the Federal District. The information published on the created page helped to clarify doubts related to the main aspects of the disease. The data obtained from the questionnaire contribute towards the planning of actions aimed at health education in a more strategic way, aiming at contributing to the points where the population is less knowledgeable.(AU)

La rabia es una antropozoonosis viral que se desarrolla de forma progresiva y aguda y puede presentar hasta un 100% de letalidad. Su agente etiológico es el virus de la rabia del género Lyssavirus perteneciente a la familia Rhabdoviridae. Este estudio tuvo como objetivo difundir informaciones sobre la ocurrencia de la rabia en humanos en virtud de su importancia expresiva para la salud pública, y analizar la percepción de la población sobre la rabia humana, con el fin de obtener datos relacionados a los conocimientos básicos sobre la enfermedad. Para ello, se creó una página de información denominada "@ contraraiva _" en la red social Instagram para realizar publicaciones interactivas sobre el tema abordado, y utilizar un cuestionario creado a partir de la plataforma Google Forms en diferentes redes sociales para la obtención y recolección de datos. Se obtuvieron 1.075 respuestas de diferentes lugares. El cuestionario llegó a todas las regiones brasileñas, a los 26 estados y al Distrito Federal. Las informaciones publicadas en el sitio web creado, ayudaron a sanar dudas relacionadas a los principales aspectos de la enfermedad. Los datos obtenidos del cuestionario contribuyen a la planificación de acciones orientadas a la educación para la salud de forma más estratégica, con el objetivo de contribuir a los puntos donde la población tiene menos conocimientos.(AU)

Educação em saúde para prevenção da raiva humana / Health education for prevention of human rabies / Educación en salud para prevención de la rabia humana

A raiva é uma antropozoonose viral que se desenvolve de forma progressiva e aguda podendo apresentar até 100% de letalidade. O seu agente etiológico é o vírus rábico do gênero Lyssavirus pertencente à família Rhabdoviridae. O presente trabalho teve como objetivo divulgar informações acerca da ocorrência da raiva em humanos em virtude da sua expressiva importância para saúde pública e analisar a percepção da população sobre a raiva humana, de forma a obter dados relacionados a conhecimentos básicos sobre a doença. Para isso, foi criada uma página informativa denominada "@contraraiva_" na rede social Instagram para a realização de postagens interativas sobre o tema abordado, e uso de um questionário criado a partir da plataforma Google Forms em diferentes mídias sociais para a obtenção e coleta de dados. Foram obtidas 1.075 respostas, provenientes de diferentes localidades. O questionário alcançou todas as regiões brasileiras, todos 26 estados e o Distrito Federal. As informações publicadas pela página criada ajudaram a sanar dúvidas relacionadas aos principais aspectos da doença. Os dados obtidos a partir do questionário contribuem para o planejamento de ações voltadas para a educação em saúde de forma mais estratégica, visando contribuir para os pontos em que a população tem menos conhecimentos.(AU)

Rabies is a viral anthropozoonosis that is developed in a progressive and acute way and can present up to 100% lethality. Its etiologic agent is the rabies virus of the Lyssavirus gene belonging to the Rhabdoviridae family. This study aimed at disseminating information about the occurrence of rabies in humans due to its expressive importance for public health, and at analyzing the population perception on human rabies in order to obtain data related to basic knowledge about the disease. For that purpose, an information page called "@ contraraiva _" was created on the social network Instagram for providing interactive posts on the topic, and a questionnaire was created from the Google Forms platform on different social media to obtain and collect data. A total of 1,075 responses were obtained from different locations. The questionnaire included all Brazilian regions, all 26 states and the Federal District. The information published on the created page helped to clarify doubts related to the main aspects of the disease. The data obtained from the questionnaire contribute towards the planning of actions aimed at health education in a more strategic way, aiming at contributing to the points where the population is less knowledgeable.(AU)

La rabia es una antropozoonosis viral que se desarrolla de forma progresiva y aguda y puede presentar hasta un 100% de letalidad. Su agente etiológico es el virus de la rabia del género Lyssavirus perteneciente a la familia Rhabdoviridae. Este estudio tuvo como objetivo difundir informaciones sobre la ocurrencia de la rabia en humanos en virtud de su importancia expresiva para la salud pública, y analizar la percepción de la población sobre la rabia humana, con el fin de obtener datos relacionados a los conocimientos básicos sobre la enfermedad. Para ello, se creó una página de información denominada "@ contraraiva _" en la red social Instagram para realizar publicaciones interactivas sobre el tema abordado, y utilizar un cuestionario creado a partir de la plataforma Google Forms en diferentes redes sociales para la obtención y recolección de datos. Se obtuvieron 1.075 respuestas de diferentes lugares. El cuestionario llegó a todas las regiones brasileñas, a los 26 estados y al Distrito Federal. Las informaciones publicadas en el sitio web creado, ayudaron a sanar dudas relacionadas a los principales aspectos de la enfermedad. Los datos obtenidos del cuestionario contribuyen a la planificación de acciones orientadas a la educación para la salud de forma más estratégica, con el objetivo de contribuir a los puntos donde la población tiene menos conocimientos.(AU)

Raiva animal no Brasil: revisão de literatura / Animal rabies in Brazil: literature review

A raiva é uma doença infecciosa ocasionada por vírus do gênero Lyssavirus. Considerada uma antropozoonose é caracterizada por encefalite progressiva e de curso fatal. A doença é transmitida através da inoculação do agente em indivíduos suscetíveis, sendo a principal forma de transmissão a mordedura praticada por animal raivoso. A vacinação animal é a principal estratégia para controle da doença, a vigilância e diagnóstico de casos suspeitos são essenciais para desencadear as medidas de profilaxia e controle de foco. Esta revisão bibliográfica objetiva apresentar a raiva animal bem como as atividades de controle e vigilância da raiva em cães e gatos.

Rabies is an infectious disease caused by viruses of the Lyssavirus genus. Considered an anthropozoonosis, it is characterized by progressive encephalitis with a fatal course. The disease is transmitted through the inoculation of the agent in susceptible individuals, the main form of transmission being the biting practiced by a rabid animal. Animal vaccination is the main strategy for disease control, surveillance and diagnosis of suspected cases are essential to trigger prophylaxis and outbreak control measures. This literature review aims to present animal rabies as well as rabies control and surveillance activities in dogs and cats.

Influence of euthanasia, the intensity of inflammatory lesion and viral load in the laboratory diagnosis of rabies in cattle

ABSTRACT: This research reports the use of different diagnostic tests in cattle, naturally infected by Rabies lyssavirus (RABV), and correlates the positivity of the tests with the clinical moment of euthanasia, the intensity of the inflammatory lesion and viral load. It also highlights the possibility of euthanasia in early stages of the disease as a way to improve animal welfare. For that, samples of 34 bovine brains were collected for analysis, preserved in 10% buffered formaline and refrigerated with subsequent freezing. The samples were subjected to direct immunofluorescence antibody technique (DFAT) tests, viral isolation in cell culture (VICC), histopathology with hematoxylin and eosin staining (HE), immunohistochemistry (IHC), Shorr stainied neural tissue smears (DSS), Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and polymerase chain reaction by quantitative reverse transcriptase (qRT-PCR). The areas used for analysis were the cerebellum, parietal telencephalon and thalamus. Samples with Negri bodies (NBs) or immunostaining in at least one of the analyzed areas were considered positive. For the study of the intensity of histological lesions, the lesions were classified into grades 0, 1, 2 and 3 and the positivity of the test in the presence or absence of NBs in one of the three areas analyzed. To verify the influence of the disease clinical evolution, 4-four groups of analysis were created according to the animals clinical status at moment of the euthanasia, being: M1 = animal euthanized while standing, M2 = euthanized when in sternal recumbence, M3 = euthanized when in lateral recumbence, M4 = animal with natural death. Of the 34 brains evaluated, IHC was positive in 100% of cases, DFAT was positive in 97.05% of them, and in this negative sample the presence of RABV was confirmed by VICC. NBs ere seen in 88.23% of the cases, and the DSS test was positive in 82.35% of them. All diagnostic techniques showed positive cases in all groups analyzed. Each case was positive in at least two diagnostic methods. All cases that contained NBs were positive for rabies in the other tests. In this study, it was observed that the variables analyzed (intensity of injury and clinical evolution at the moment of euthanasia) had an influence only on HE and DSS techniques, which are based on NB research to form the diagnosis, but did not interfere with the effectiveness of the diagnosis performed by detecting the viral antigen performed by DFAT and IHC. All isolated RABV samples included in the present study have a genetic lineage characteristic of hematophagous bats Desmodus rotundus. The evaluation of qRT-PCR showed that the amount of virus did not interfere in the positivity of the tests. This work shows that IHC and DFAT are safe diagnostic techniques. They are capable of detecting RABV even in euthanized animals in the early stages of clinical evolution with mild intensities of histological lesions.

RESUMO: Esta pesquisa relata a utilização de diferentes testes de diagnóstico em bovinos, naturalmente infectados pelo Rabies lyssavirus (RABV), e correlaciona a positividade dos testes com o momento clínico da eutanásia, a intensidade da lesão inflamatória, e a carga viral. Salienta também a possibilidade da eutanásia em estágios precoces da doença como forma de melhorar o bem-estar animal. Para isso amostras de 34 encéfalos bovinos foram coletados para análise, conservadas em formol tamponado 10% e sob refrigeração com posterior congelamento. As amostras foram submetidas aos testes de imunofluorescência direta (IFD), isolamento viral em cultivo de células (IVCC), histopatologia com coloração de hematoxilina e eosina (HE), imuno-histoquímica (IHQ), esfregaço direto com coloração de Shorr (EDS), reação da polimerase em cadeia por transcriptase reversa (RT-PCR) e reação da polimerase em cadeia por transcriptase reversa quantitativo (qRT-PCR). As áreas utilizadas para análise foram o cerebelo, telencéfalo parietal e tálamo. Foram consideradas positivas as amostras que apresentaram Corpúsculo de Negri (CNs) ou imuno-marcação em ao menos uma das áreas analisadas. Para o estudo da intensidade das lesões histológicas, as lesões foram classificadas em graus 0, 1, 2 e 3 e a positividade do teste na presença ou ausência de CN em uma das três áreas analisadas. Para verificar a influência da evolução clínica da doença foram criados 4 grupos de análise conforme o estado clínico do animal no momento da eutanásia, sendo: M1 = animal eutanasiado em estação, M2 = eutanasiado em decúbito esternal, M3 = eutanasiado em decúbito lateral, M4 = animal com morte natural. Dos 34 encéfalos avaliados a IHQ foi positiva em 100% dos casos, a IFD foi positiva em 97,05%, sendo que na amostra negativa a presença de RABV foi confirmada por IVCC. A histologia com HE, através da visualização das CNs, foi positiva em 88,23 % dos casos, e o teste de EDS, foi positivo em 82,35%. Todas as técnicas de diagnóstico apresentaram casos positivos em todos os grupos analisados. Cada caso foi positivo em, pelo menos, dois métodos de diagnóstico. Todos os casos que continham CN foram positivos para raiva nos demais testes. Nesse estudo observou-se que as variáveis analisadas intensidade de lesão e evolução clínica no momento da eutanásia tiveram influência somente nas técnicas de HE e EDS, que se baseiam na pesquisa do CN para formação do diagnóstico, mas não interferiram na eficácia do diagnóstico realizado através da detecção do antígeno viral realizado por IFD e IHQ. Todas as amostras RABV isoladas incluídas no presente estudo apresentam linhagem genética característica de morcegos hematófagos Desmodus rotundus. A avaliação de qRT-PCR demostrou que a quantidade de vírus não interferiu na positividade dos testes. Esse trabalho mostra que a IHQ e a IFD são técnicas seguras de diagnóstico e que mesmo em animais eutanasiados em estágios iniciais de evolução clínica com intensidades leve de lesões histológicas, são capazes de detectar o RABV.

Influence of euthanasia, the intensity of inflammatory lesion and viral load in the laboratory diagnosis of rabies in cattle / Influência da eutanásia, intensidade da lesão inflamatória e carga viral no diagnóstico laboratorial da raiva em bovinos

This research reports the use of different diagnostic tests in cattle, naturally infected by Rabies lyssavirus (RABV), and correlates the positivity of the tests with the clinical moment of euthanasia, the intensity of the inflammatory lesion and viral load. It also highlights the possibility of euthanasia in early stages of the disease as a way to improve animal welfare. For that, samples of 34 bovine brains were collected for analysis, preserved in 10% buffered formaline and refrigerated with subsequent freezing. The samples were subjected to direct immunofluorescence antibody technique (DFAT) tests, viral isolation in cell culture (VICC), histopathology with hematoxylin and eosin staining (HE), immunohistochemistry (IHC), Shorr stainied neural tissue smears (DSS), Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and polymerase chain reaction by quantitative reverse transcriptase (qRT-PCR). The areas used for analysis were the cerebellum, parietal telencephalon and thalamus. Samples with Negri bodies (NBs) or immunostaining in at least one of the analyzed areas were considered positive. For the study of the intensity of histological lesions, the lesions were classified into grades 0, 1, 2 and 3 and the positivity of the test in the presence or absence of NBs in one of the three areas analyzed. To verify the influence of the disease clinical evolution, 4-four groups of analysis were created according to the animal's clinical status at moment of the euthanasia, being: M1 = animal euthanized while standing, M2 = euthanized when in sternal recumbence, M3 = euthanized when in lateral recumbence, M4 = animal with natural death. Of the 34 brains evaluated, IHC was positive in 100% of cases, DFAT was positive in 97.05% of them, and in this negative sample the presence of RABV was confirmed by VICC. NBs ere seen in 88.23% of the cases, and the DSS test was positive in 82.35% of them.(AU)

Esta pesquisa relata a utilização de diferentes testes de diagnóstico em bovinos, naturalmente infectados pelo Rabies lyssavirus (RABV), e correlaciona a positividade dos testes com o momento clínico da eutanásia, a intensidade da lesão inflamatória, e a carga viral. Salienta também a possibilidade da eutanásia em estágios precoces da doença como forma de melhorar o bem-estar animal. Para isso amostras de 34 encéfalos bovinos foram coletados para análise, conservadas em formol tamponado 10% e sob refrigeração com posterior congelamento. As amostras foram submetidas aos testes de imunofluorescência direta (IFD), isolamento viral em cultivo de células (IVCC), histopatologia com coloração de hematoxilina e eosina (HE), imuno-histoquímica (IHQ), esfregaço direto com coloração de Shorr (EDS), reação da polimerase em cadeia por transcriptase reversa (RT-PCR) e reação da polimerase em cadeia por transcriptase reversa quantitativo (qRT-PCR). As áreas utilizadas para análise foram o cerebelo, telencéfalo parietal e tálamo. Foram consideradas positivas as amostras que apresentaram Corpúsculo de Negri (CNs) ou imuno-marcação em ao menos uma das áreas analisadas. Para o estudo da intensidade das lesões histológicas, as lesões foram classificadas em graus 0, 1, 2 e 3 e a positividade do teste na presença ou ausência de CN em uma das três áreas analisadas.(AU)

Influence of euthanasia, the intensity of inflammatory lesion and viral load in the laboratory diagnosis of rabies in cattle / Influência da eutanásia, intensidade da lesão inflamatória e carga viral no diagnóstico laboratorial da raiva em bovinos

This research reports the use of different diagnostic tests in cattle, naturally infected by Rabies lyssavirus (RABV), and correlates the positivity of the tests with the clinical moment of euthanasia, the intensity of the inflammatory lesion and viral load. It also highlights the possibility of euthanasia in early stages of the disease as a way to improve animal welfare. For that, samples of 34 bovine brains were collected for analysis, preserved in 10% buffered formaline and refrigerated with subsequent freezing. The samples were subjected to direct immunofluorescence antibody technique (DFAT) tests, viral isolation in cell culture (VICC), histopathology with hematoxylin and eosin staining (HE), immunohistochemistry (IHC), Shorr stainied neural tissue smears (DSS), Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and polymerase chain reaction by quantitative reverse transcriptase (qRT-PCR). The areas used for analysis were the cerebellum, parietal telencephalon and thalamus. Samples with Negri bodies (NBs) or immunostaining in at least one of the analyzed areas were considered positive. For the study of the intensity of histological lesions, the lesions were classified into grades 0, 1, 2 and 3 and the positivity of the test in the presence or absence of NBs in one of the three areas analyzed. To verify the influence of the disease clinical evolution, 4-four groups of analysis were created according to the animal's clinical status at moment of the euthanasia, being: M1 = animal euthanized while standing, M2 = euthanized when in sternal recumbence, M3 = euthanized when in lateral recumbence, M4 = animal with natural death. Of the 34 brains evaluated, IHC was positive in 100% of cases, DFAT was positive in 97.05% of them, and in this negative sample the presence of RABV was confirmed by VICC. NBs ere seen in 88.23% of the cases, and the DSS test was positive in 82.35% of them. All diagnostic techniques showed positive cases in all groups analyzed. Each case was positive in at least two diagnostic methods. All cases that contained NBs were positive for rabies in the other tests. In this study, it was observed that the variables analyzed (intensity of injury and clinical evolution at the moment of euthanasia) had an influence only on HE and DSS techniques, which are based on NB research to form the diagnosis, but did not interfere with the effectiveness of the diagnosis performed by detecting the viral antigen performed by DFAT and IHC. All isolated RABV samples included in the present study have a genetic lineage characteristic of hematophagous bats Desmodus rotundus. The evaluation of qRT-PCR showed that the amount of virus did not interfere in the positivity of the tests. This work shows that IHC and DFAT are safe diagnostic techniques. They are capable of detecting RABV even in euthanized animals in the early stages of clinical evolution with mild intensities of histological lesions.(AU)

Esta pesquisa relata a utilização de diferentes testes de diagnóstico em bovinos, naturalmente infectados pelo Rabies lyssavirus (RABV), e correlaciona a positividade dos testes com o momento clínico da eutanásia, a intensidade da lesão inflamatória, e a carga viral. Salienta também a possibilidade da eutanásia em estágios precoces da doença como forma de melhorar o bem-estar animal. Para isso amostras de 34 encéfalos bovinos foram coletados para análise, conservadas em formol tamponado 10% e sob refrigeração com posterior congelamento. As amostras foram submetidas aos testes de imunofluorescência direta (IFD), isolamento viral em cultivo de células (IVCC), histopatologia com coloração de hematoxilina e eosina (HE), imuno-histoquímica (IHQ), esfregaço direto com coloração de Shorr (EDS), reação da polimerase em cadeia por transcriptase reversa (RT-PCR) e reação da polimerase em cadeia por transcriptase reversa quantitativo (qRT-PCR). As áreas utilizadas para análise foram o cerebelo, telencéfalo parietal e tálamo. Foram consideradas positivas as amostras que apresentaram Corpúsculo de Negri (CNs) ou imuno-marcação em ao menos uma das áreas analisadas. Para o estudo da intensidade das lesões histológicas, as lesões foram classificadas em graus 0, 1, 2 e 3 e a positividade do teste na presença ou ausência de CN em uma das três áreas analisadas. Para verificar a influência da evolução clínica da doença foram criados 4 grupos de análise conforme o estado clínico do animal no momento da eutanásia, sendo: M1 = animal eutanasiado em estação, M2 = eutanasiado em decúbito esternal, M3 = eutanasiado em decúbito lateral, M4 = animal com morte natural. Dos 34 encéfalos avaliados a IHQ foi positiva em 100% dos casos, a IFD foi positiva em 97,05%, sendo que na amostra negativa a presença de RABV foi confirmada por IVCC. A histologia com HE, através da visualização das CNs, foi positiva em 88,23 % dos casos, e o teste de EDS, foi positivo em 82,35%. Todas as técnicas de diagnóstico apresentaram casos positivos em todos os grupos analisados. Cada caso foi positivo em, pelo menos, dois métodos de diagnóstico. Todos os casos que continham CN foram positivos para raiva nos demais testes. Nesse estudo observou-se que as variáveis analisadas intensidade de lesão e evolução clínica no momento da eutanásia tiveram influência somente nas técnicas de HE e EDS, que se baseiam na pesquisa do CN para formação do diagnóstico, mas não interferiram na eficácia do diagnóstico realizado através da detecção do antígeno viral realizado por IFD e IHQ. Todas as amostras RABV isoladas incluídas no presente estudo apresentam linhagem genética característica de morcegos hematófagos Desmodus rotundus. A avaliação de qRT-PCR demostrou que a quantidade de vírus não interferiu na positividade dos testes. Esse trabalho mostra que a IHQ e a IFD são técnicas seguras de diagnóstico e que mesmo em animais eutanasiados em estágios iniciais de evolução clínica com intensidades leve de lesões histológicas, são capazes de detectar o RABV.(AU)

Avaliação da ocorrência de raiva canina no estado do Maranhão no período de 2010 a 2018 / Evaluation of the occurrence of rage syndrome in dogs in the state of Maranhão in the period 2010 to 2018

Trata-se de um estudo observacional, descritivo, retrospectivo, realizado com dados epidemiológicos obtidos pela Vigilância Epidemiológica do estado do Maranhão e pelo Laboratório de Virologia do Curso de Medicina Veterinária da Universidade Estadual do Maranhão UEMA, com objetivo de avaliar a ocorrência de raiva canina no período de 2010 a 2018. Houve uma redução do número de casos positivos, com exceção dos anos de 2011 e 2012. A maior ocorrência de casos de raiva foi observada em cães sem raça definida (S.R.D.), machos, e nos municípios que fazem parte da grande Ilha de São Luís, entre eles a capital São Luís, e os municípios de São José de Ribamar e Paço do Lumiar, com aumento do diagnóstico para amostras positivas no período de seca. Sugere-se que sejam intensificados medidas de controle populacional canina, programas adequados de vacinação em massa de cães no estado e realização efetiva das notificações, visto que a raiva é um grave problema de saúde pública e os cães importantes transmissores aos humanos.

This is an observational, descriptive, retrospective study, carried out with epidemiological data obtained by the Epidemiological Surveillance of the state of Maranhão and by the Virology Laboratory of the Veterinary Medicine Course at the State University of Maranhão - UEMA, with the objective of evaluating the occurence of rabies canine in the period from 2010 to 2018. There was a reduction in the number of positive cases, except for the years 2011 and 2012. It The highest occurrence of cases of rabies was observed in mixed breed dogs (S.R.D), males, and in the municipalities that do part of the great São Luís Island, including the capital São Luís, and the municipalities of São José de Ribamar and Paço do Lumiar, with an increase in the diagnosis for positive samples in the dry season. It is suggested that intensified measures for canine population control, adequate programs for vaccination of dogs in the State and effective reporting, since rage syndrome in dogs is a serious public health problem and dogs are important transmitters to humans.

Avaliação da ocorrência de raiva canina no estado do Maranhão no período de 2010 a 2018 / Evaluation of the occurrence of rage syndrome in dogs in the state of Maranhão in the period 2010 to 2018

Trata-se de um estudo observacional, descritivo, retrospectivo, realizado com dados epidemiológicos obtidos pela Vigilância Epidemiológica do estado do Maranhão e pelo Laboratório de Virologia do Curso de Medicina Veterinária da Universidade Estadual do Maranhão UEMA, com objetivo de avaliar a ocorrência de raiva canina no período de 2010 a 2018. Houve uma redução do número de casos positivos, com exceção dos anos de 2011 e 2012. A maior ocorrência de casos de raiva foi observada em cães sem raça definida (S.R.D.), machos, e nos municípios que fazem parte da grande Ilha de São Luís, entre eles a capital São Luís, e os municípios de São José de Ribamar e Paço do Lumiar, com aumento do diagnóstico para amostras positivas no período de seca. Sugere-se que sejam intensificados medidas de controle populacional canina, programas adequados de vacinação em massa de cães no estado e realização efetiva das notificações, visto que a raiva é um grave problema de saúde pública e os cães importantes transmissores aos humanos.(AU)

This is an observational, descriptive, retrospective study, carried out with epidemiological data obtained by the Epidemiological Surveillance of the state of Maranhão and by the Virology Laboratory of the Veterinary Medicine Course at the State University of Maranhão - UEMA, with the objective of evaluating the occurence of rabies canine in the period from 2010 to 2018. There was a reduction in the number of positive cases, except for the years 2011 and 2012. It The highest occurrence of cases of rabies was observed in mixed breed dogs (S.R.D), males, and in the municipalities that do part of the great São Luís Island, including the capital São Luís, and the municipalities of São José de Ribamar and Paço do Lumiar, with an increase in the diagnosis for positive samples in the dry season. It is suggested that intensified measures for canine population control, adequate programs for vaccination of dogs in the State and effective reporting, since rage syndrome in dogs is a serious public health problem and dogs are important transmitters to humans.(AU)

Raiva em equino na região Sul do estado do Piauí / Equine rabies in the Southern region of Piauí state

Background: Rabies is an infectious disease that is important in the “One Health” worldwide with high lethality rate. The etiological agent is a neurotropic virus, genus Lyssavirus, transmitted mainly through the saliva of infected animals. For equines, the bite of hematophagous bats is the main source of infection. Piauí is an important state for equestrian sports and the increase in the number of horses with neurological clinical signs without diagnosis has increased in recent years. In this context, the aim of this study is to report to the scientific community a confirmed case of equine rabies in the Santa Luz county, Southernmost state of Piauí, Brazil. Case: A 3-year-old female non-defined breed horse, was admitted to the Hospital Veterinário da Universidade Federal do Piauí (UFPI/CPCE). The equine had difficulty walking 2 days ago, in the panoramic inspection was restless and disoriented in the paddock. Rectal temperature of 38.2°C, heart rate of 60 bpm, respiratory rate of 40 mpm, congested mucosa and dyspnea were verified. With the progression of the neurological signals, it positioned itself in a lateral decubitus with pedaling movements, hyperesthesia, dysphagia and paralysis of the hindlimbs. The clinical suspicion was rabies and the Agência de Defesa Agropecuária do Piauí (ADAPI) was communicated to euthanize the animal and collect samples for diagnosis in accordance with official standards of the Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA). At necropsy, there was slight brain hyperemia, with no other significant organ changes. Fragments of the cerebellum, cortex, hippocampus and spinal cord were collected and sent at a temperature of 4°C to perform the Direct Immunofluorescence (DIF) assay. Samples for histopathology were not collected because they do not include assay for confirmatory diagnosis of rabies. The DIF technique with...

Raiva em equino na região Sul do estado do Piauí / Equine rabies in the Southern region of Piauí state

Background: Rabies is an infectious disease that is important in the “One Health” worldwide with high lethality rate. The etiological agent is a neurotropic virus, genus Lyssavirus, transmitted mainly through the saliva of infected animals. For equines, the bite of hematophagous bats is the main source of infection. Piauí is an important state for equestrian sports and the increase in the number of horses with neurological clinical signs without diagnosis has increased in recent years. In this context, the aim of this study is to report to the scientific community a confirmed case of equine rabies in the Santa Luz county, Southernmost state of Piauí, Brazil. Case: A 3-year-old female non-defined breed horse, was admitted to the Hospital Veterinário da Universidade Federal do Piauí (UFPI/CPCE). The equine had difficulty walking 2 days ago, in the panoramic inspection was restless and disoriented in the paddock. Rectal temperature of 38.2°C, heart rate of 60 bpm, respiratory rate of 40 mpm, congested mucosa and dyspnea were verified. With the progression of the neurological signals, it positioned itself in a lateral decubitus with pedaling movements, hyperesthesia, dysphagia and paralysis of the hindlimbs. The clinical suspicion was rabies and the Agência de Defesa Agropecuária do Piauí (ADAPI) was communicated to euthanize the animal and collect samples for diagnosis in accordance with official standards of the Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA). At necropsy, there was slight brain hyperemia, with no other significant organ changes. Fragments of the cerebellum, cortex, hippocampus and spinal cord were collected and sent at a temperature of 4°C to perform the Direct Immunofluorescence (DIF) assay. Samples for histopathology were not collected because they do not include assay for confirmatory diagnosis of rabies. The DIF technique with...(AU)

Caracterização do atendimento antirrábico humano quanto ao animal agressor no município de Blumenau, Santa Catarina / Characterization of human antirabic service for animal agressor in the municipality of Blumenau, Santa Catarina

Este estudo objetivou quantificar e caracterizar os atendimentos antirrábicos humanos notificados à Vigilância Epidemiológica do município de Blumenau/Santa Catarina de acordo com as espécies agressoras entre 2007 e 2017. Coletaram-se dados do Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN) analisando-se a espécie do animal agressor, sua condição, agressão provocada e situação final do animal. No período estudado houve um total de 10918 notificações de acidentes antirrábicos humanos. Lesões únicas causadas mais frequentemente por cães foram os agravos mais notificados durante o período e a maioria encontrava-se saudável no momento da agressão. Sugere-se campanhas educativas no município a fim de reduzir o número de mordeduras e ampliar a prevenção dessa doença que causa tanto impacto à população e que pode ser prevenida com êxito.

Campanha antirrábica canina e felina: a importância da equipe de trabalho -recursos utilizados e resultados obtidos pelos municípios no desenvolvimento da campanha antirrábica canina e felina na região de São José do Rio Preto/SP, Brasil, no período de 2009 a 2013 / Canine and feline, antirabies vaccination campaign: the importance of the teamwork - applied resources and development of feline and canine antirabies vaccination campaign in São José do Rio Preto/SP, Brazil, during the years of 2009 to 2013

A raiva é uma zoonose transmitida por contato direto com animais infectados pelo vírus rábico do gênero Lyssavirus. A raiva ocorre em mais de 150 países, em 84% dos casos na área rural, e atinge principalmente crianças. É uma enfermidade negligenciada e prevenível, e a vacinação em massa de cães e gatos é um fator primordial para controlar e eliminar a raiva em áreas urbanas. Considerando a importância da campanha antirrábica canina e felina e a dificuldade que os municípios encontram na obtenção de cobertura vacinal igual ou maior que 80% para cães e 70% para gatos, busca-se, com este estudo, conhecer as pessoas, estruturas e recursos envolvidos nessa campanha na região de São José do Rio Preto. Foi elaborado um questionário e enviado a todos os municípios. Verificou-se que é necessário formar equipes específicas para trabalhar com zoonoses, com infraestrutura e remuneração adequadas, e que toda campanha deve contar com a participação do médico-veterinário.

Rabies is a zoonosis transmitted by direct contact with animals infected with rabies virus of the genus Lyssavirus. It occurs in more than 150 countries, 84% of the cases are in rural zone. It's an underestimated preventable disease and the mass vaccination of dogs is a key point to the success of programs for control and elimination of rabies. Considering the importance of holding canine and rabies vaccination campaign and the obstacle that the municipalities face to obtain of vaccination coverage equal or greater than 80% for dogs and 70% for cats, the present study was developed to investigate, who are the people, structures and resources involved in the achievement of this coverage, in the region of São José do Rio Preto, São Paulo State, Brazil (Epidemiological surveillance group - GVE 29 – SJRP). Questionnaire was elaborated and sent to the municipalities. It has been found that it necessary to create specific staffs to work with zoonosis and remuneration. It is also necessary the participation of a veterinarian throughout the campaign.

Campanha antirrábica canina e felina: a importância da equipe de trabalho -recursos utilizados e resultados obtidos pelos municípios no desenvolvimento da campanha antirrábica canina e felina na região de São José do Rio Preto/SP, Brasil, no período de 2009 a 2013 / Canine and feline, antirabies vaccination campaign: the importance of the teamwork - applied resources and development of feline and canine antirabies vaccination campaign in São José do Rio Preto/SP, Brazil, during the years of 2009 to 2013

A raiva é uma zoonose transmitida por contato direto com animais infectados pelo vírus rábico do gênero Lyssavirus. A raiva ocorre em mais de 150 países, em 84% dos casos na área rural, e atinge principalmente crianças. É uma enfermidade negligenciada e prevenível, e a vacinação em massa de cães e gatos é um fator primordial para controlar e eliminar a raiva em áreas urbanas. Considerando a importância da campanha antirrábica canina e felina e a dificuldade que os municípios encontram na obtenção de cobertura vacinal igual ou maior que 80% para cães e 70% para gatos, busca-se, com este estudo, conhecer as pessoas, estruturas e recursos envolvidos nessa campanha na região de São José do Rio Preto. Foi elaborado um questionário e enviado a todos os municípios. Verificou-se que é necessário formar equipes específicas para trabalhar com zoonoses, com infraestrutura e remuneração adequadas, e que toda campanha deve contar com a participação do médico-veterinário.(AU)

Rabies is a zoonosis transmitted by direct contact with animals infected with rabies virus of the genus Lyssavirus. It occurs in more than 150 countries, 84% of the cases are in rural zone. It's an underestimated preventable disease and the mass vaccination of dogs is a key point to the success of programs for control and elimination of rabies. Considering the importance of holding canine and rabies vaccination campaign and the obstacle that the municipalities face to obtain of vaccination coverage equal or greater than 80% for dogs and 70% for cats, the present study was developed to investigate, who are the people, structures and resources involved in the achievement of this coverage, in the region of São José do Rio Preto, São Paulo State, Brazil (Epidemiological surveillance group - GVE 29 SJRP). Questionnaire was elaborated and sent to the municipalities. It has been found that it necessary to create specific staffs to work with zoonosis and remuneration. It is also necessary the participation of a veterinarian throughout the campaign.(AU)

Avaliação do ensaio RT-qPCR LN34 Pan-Lyssavirus para a detecção do vírus da raiva no Brasil

A raiva, causada pelo rabies virus (RABV), caracteriza-se por ser uma encefalomielite viral aguda. O RABV pertence ao gênero Lyssavirus, que contempla outros 17 vírus. Como a raiva é uma doença que apresenta letalidade próxima a 100%, as técnicas de diagnóstico devem se mostrar precisas e fidedignas, para que possa ser realizado o controle da doença. A prova padrão ouro para o diagnóstico é a imunofluorescência direta (IFD), uma vez que apresenta alta sensibilidade e especificidade. Porém, problemas como o estado avançado de autólise das amostras, baixa carga viral, qualidade inapropriada dos insumos e até mesmo a inexperiência de profissionais para a leitura das lâminas, podem diminuir a acurácia dos resultados. O ensaio LN34 Pan-Lyssavirus para RT-PCR em tempo real (RT-qPCR), que combina primers degenerados e múltiplos com sonda de hidrólise do tipo Locked Nucleic Acid (LNA), é um candidato para ser prova confirmatória da IFD, devido a sua facilidade de manuseio e capacidade de detectar as diferentes espécies de vírus dentro do gênero Lyssavirus, e por apresentar alta especificidade e sensibilidade. Esse ensaio detecta e amplifica porção leader 3 do genoma e a região inicial do gene codificador da nucleoproteína, considerada a mais conservada entre os Lyssavirus. Esse estudo visa a padronização e implementação do ensaio LN34 Pan-Lyssavirus de RT-qPCR para detecção das diferentes linhagens genéticas e variantes antigênicas do RABV descritas no Brasil. Para isso, foram coletadas 324 amostras positivas e compatíveis com as diferentes variantes antigênicas e linhagens genéticas do RABV presentes no Brasil, e testadas na RT-qPCR utilizando o ensaio LN34 Pan-Lyssavirus. A RT-qPCR two-steps com ensaio LN34 Pan-Lyssavirus apresentou uma positividade de 87,3%, e 41 amostras obtiveram resultado falso negativo. Estas amostras, que tiveram resultado falso-negativo na RT-qPCR two-steps, foram testadas na técnica de RT-qPCR one-step com ensaio LN34 Pan-Lyssavirus, e todas tiveram o resultado verdadeiro positivo confirmado. Diante desses resultados, é possível inferir que a utilização do ensaio LN34 com a RT-qPCR em duas etapas apresenta dificuldade de detecção das diferentes linhagens genéticas e variantes antigênicas do RABV, possivelmente devido ao não anelamento do primer senso durante a transcrição reversa. Por outro lado, a RT-qPCR em uma etapa com o ensaio LN34 Pan-Lyssavirus foi capaz de detectar e amplificar aquelas amostras falso negativas pela reação em duas etapas, se mostrando um teste altamente sensível, e com potencial para ser utilizado como prova confirmatória à IFD para o diagnóstico da raiva no Brasil.

Rabies, caused by rabies virus (RABV), is characterized by viral acute progressive encephalitis. The RABV belongs to Lyssavirus genus, that includes seventeen others virus. Due to the high lethality, almost 100%, diagnosis techniques for rabies must be accurate and reliable for the accomplishment of diseases control. The gold standard for rabies diagnostic is the direct fluorescent antibody test (dFAT), due to its high sensibility and specificity. Although, sample conservation, low viral title, poor quality inputs, and skilled technicians may hamper results accurate. The RT-qPCR LN34 Pan-Lyssavirus assay is a combination of degenerated and multiple primers with Locked Nucleic Acid (LNA) probe that can be used as secondary test for dFAT, due to its ease manipulation and capacity for detecting the different virus species within the Lyssavirus genus, and due its high sensitivity and specificity. This assay detects and amplifies the leader region 3 and the initial portion of nucleoprotein gene that is considered the most conserved gene within the Lyssavirus. This study aims the LN34 Pan-Lyssavirus RT-qPCR assay standardization and implementation for detecting the different RABV genetic lineages and antigenic variants described in Brazil. Therefore, 324 positive samples compatible with different RABV genetic lineages or antigenic variants were collected and tested in RT-qPCR, using LN34 Pan-Lyssavirus assay. The two steps LN34 Pan-Lyssavirus RT-qPCR assay, showed positivity of 87,3%, and 41 samples obtained false negative result. Those false negative samples in the two steps LN34 Pan-Lyssavirus RT-qPCR assay were tested in the one step LN34 Pan-Lyssavirus RT-qPCR assay, and 100% of those samples confirmed the true positive result. Based in these results, is possible to infer that the two steps RT-qPCR assay may hamper the detection of different RABV genetic lineages and antigenic variants, probably due to mismatches between sense primer and the target region during the revere transcription technique. On the other hand, the one step RT-qPCR LN34 Pan-Lyssavirus assay were able to detect and amplify those false negative samples in two steps RT-qPCR, showing to be a highly sensitivity test, and showing potential to be used as confirmatory test to dFAT for rabies diagnosis.

Epidemiologia descritiva da raiva dos herbívoros notificados no estado do Paraná entre 1977 e 2012 / Epidemiology of rabies in large animals of Parana, Brazil, from 1977 to 2012

Realizou-se estudo epidemiológico descritivo da raiva dos herbívoros no estado do Paraná entre os anos de 1977 e 2012. Os casos confirmados de raiva e o total de amostras de encéfalo encaminhadas para o diagnóstico foram distribuídos por espécie, por ano, por meses, por mesorregião geográfica e por municípios, aplicando-se o teste de Qui-quadrado para verificar se havia associação com esses fatores. Modelo probabilístico foi ajustado à série histórica para verificação de padrões cíclico ou sazonal. Comprovou-se que a raiva é uma doença endêmica no PR, com ocorrência variável entre os anos, sem padrão sazonal e com ciclicidade aparente a cada 18 anos, acometendo, sobretudo, bovinos (86,9%) e equídeos (11,3%). Verificou-se grande difusão no estado (47,6% dos municípios), e a maior expansão geográfica aconteceu na última década. As áreas de ocorrência maior foram as mesorregiões Centro Oriental e de Curitiba, seguidas por Norte Pioneiro e Oeste. O número de casos de raiva por município se correlacionou, ainda que fracamente, com o número de abrigos de Desmodus rotundus (r=0,469; p<0,0001). Sugere-se que a imunização anual de bovinos e equídeos passe a ser adotada nas áreas de maior ocorrência (mesorregiões Centro Oriental e de Curitiba) e encorajada nas de ocorrência intermediária (mesorregiões Norte Pioneiro e Oeste).(AU)

A descriptive epidemiological survey of rabies in herbivorous reared in the state of Parana, Brazil, was carried out from 1977 to 2012. The positive cases and the total number of brain samples processed for diagnostic purposes were distributed according to species, year, month, geographical region and municipality. Chi-square test was used to verify if rabies was associated to these factors. Probabilistic model was applied to historical series in order to verify cyclic and seasonal patterns. In Parana, rabies is an endemic disease with variable yearly occurrence, without seasonal pattern and with a possible cyclic pattern every 18 years. Cattle (86.9%) and equides (11.3%) were mainly affected. Rabies was registered in 47.6% of all municipalities, indicating a great spread of this disease in Parana, mainly during the last decade. Middlewest and Curitiba regions, followed by Pioneer North and West regions, were the areas of most occurrence. The number of cases per municipality was weakly correlated with the number of shelters for Desmodus rotundus (r=0.469; p<0.0001). Therefore, we suggest that annual immunization of cattle and equides should be applied in the high occurrence areas (Middlewest and Curitiba regions) and encouraged in intermediate occurrence areas (Pioneer North and West regions).(AU)

Epidemiologia descritiva da raiva dos herbívoros notificados no estado do Paraná entre 1977 e 2012 / Epidemiology of rabies in large animals of Parana, Brazil, from 1977 to 2012

A descriptive epidemiological survey of rabies in herbivorous reared in the state of Parana, Brazil, was carried out from 1977 to 2012. The positive cases and the total number of brain samples processed for diagnostic purposes were distributed according to species, year, month, geographical region and municipality. Chi-square test was used to verify if rabies was associated to these factors. Probabilistic model was applied to historical series in order to verify cyclic and seasonal patterns. In Parana, rabies is an endemic disease with variable yearly occurrence, without seasonal pattern and with a possible cyclic pattern every 18 years. Cattle (86.9%) and equides (11.3%) were mainly affected. Rabies was registered in 47.6% of all municipalities, indicating a great spread of this disease in Parana, mainly during the last decade. Middlewest and Curitiba regions, followed by Pioneer North and West regions, were the areas of most occurrence. The number of cases per municipality was weakly correlated with the number of shelters for Desmodus rotundus (r=0.469; p < 0.0001). Therefore, we suggest that annual immunization of cattle and equides should be applied in the high occurrence areas (Middlewest and Curitiba regions) and encouraged in intermediate occurrence areas (Pioneer North and West regions).(AU)

Realizou-se estudo epidemiológico descritivo da raiva dos herbívoros no estado do Paraná entre os anos de 1977 e 2012. Os casos confirmados de raiva e o total de amostras de encéfalo encaminhadas para o diagnóstico foram distribuídos por espécie, por ano, por meses, por mesorregião geográfica e por municípios, aplicando-se o teste de Qui-quadrado para verificar se havia associação com esses fatores. Modelo probabilístico foi ajustado à série histórica para verificação de padrões cíclico ou sazonal. Comprovou-se que a raiva é uma doença endêmica no PR, com ocorrência variável entre os anos, sem padrão sazonal e com ciclicidade aparente a cada 18 anos, acometendo, sobretudo, bovinos (86,9%) e equídeos (11,3%). Verificou-se grande difusão no estado (47,6% dos municípios), e a maior expansão geográfica aconteceu na última década. As áreas de ocorrência maior foram as mesorregiões Centro Oriental e de Curitiba, seguidas por Norte Pioneiro e Oeste. O número de casos de raiva por município se correlacionou, ainda que fracamente, com o número de abrigos de Desmodus rotundus (r=0,469; p < 0,0001). Sugere-se que a imunização anual de bovinos e equídeos passe a ser adotada nas áreas de maior ocorrência (mesorregiões Centro Oriental e de Curitiba) e encorajada nas de ocorrência intermediária (mesorregiões Norte Pioneiro e Oeste).(AU)