Resumo
O gênero Cryptococcus caracteriza-se por ser uma levedura responsável por infecção sistêmica, causada pelas espécies Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii. O fungo é encontrado em substratos de origem animal e vegetal, e a infecção ocorre com a inalação de basidiósporos ou leveduras desidratadas infectantes presentes no ambiente. O presente trabalho teve por objetivo pesquisar a existência de microfocos de Cryptococcussp.em amostras ambientais da cidade de Araçatuba, São Paulo, com a finalidade de minimizar os riscos de contaminação do homem e dos animais, buscando o conhecimento da ecoepidemiologia do Cryptococcus. Foram colhidas 50 amostras oriundas de ocos e troncos de árvores (Cassiasp., Ficussp., Caesalpinea peltophorides) de 10 locais representativos do perímetro urbano, as quais foram encaminhadas ao Laboratório de Bacteriologia e Micologia da Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba-Unesp, onde foram processadas e semeadas em placas de Petri contendo ágar semente de Níger e Sabouraud dextrose com clorafenicol e incubadas à temperatura de 30ºC, por um período não inferior a cinco dias. Posteriormente, foram submetidas às provas bioquímicas: produção de urease, termotolerância a 37ºC e quimiotipagem em ágar CGB (L-canavanina-glicina-azul de bromotimol). A análise dos resultados revelaram que 17 (34%) dos cultivos foram positivos para o gênero Cryptococcus, sendo nove (18%) para Cryptococcus gattiie oito (16%) para Cryptococcus neoformans. Outras leveduras correlacionadas, como Rhodotorula sp. e Candida sp., também foram isoladas. Conclui-se que os basidiósporos de Cryptococcusencontram-se dispersos na natureza, constituindo microfocos ambientais, não vinculados necessariamente a um único hospedeiro.
Cryptococcosis is an opportunistic fungal infection caused by Cryptococcusyeasts, especially C. neoformans and Cryptococcus gattii. The fungus is found in substrates of animal and vegetable origin, and infection occurs through inhalation and seedlings present in the environment. The present study aimed to investigate the existence of microfocus Cryptococcus sp. from the environmental samples of Araçatuba city, São Paulo, featuring new niches, by decoupling the direct relationship between fungus and host in order to minimize the risk of contamination of man and animals, understanding the ecoepidemiology of Cryptococcus. Fifty samples from hollows and tree trunks were harvested (Cassia sp., Ficus sp., Caesalpinea peltophorides) from ten representatives in the urban perimeter. The samples were immediately sent to the Laboratory of Bacteriology and Mycology, Faculty of Veterinary Medicine Araçatuba - Unesp where they were processed and plated on Petri dishes containing agar seed Niger and Sabouraud dextrose agar with chloramphenicol, incubated at 30ºC for a period of no less than 5 days. Afterwards they were subimitted to biochemical tests: urease production, thermotolerance at 37°C and quimiotipagem in CGB agar (L- Canavanine-Glycine-Bromothymol blue). The results showed that 17 (34%) cultures were positive for Cryptococcus, 9 (18%) for Cryptococcus gattii and 8 (16%) for Cryptococcus neoformans. Other yeast correlated as Rhodotorula sp. and Candida sp. were isolated. We conclude that the infectious propagules of Cryptococcus are dispersed in nature and constitute an environmental microfocus, not necessarily being bound to a single host.
Assuntos
Cryptococcus neoformans , Fungos , Infecções , Cassia , Entomophthorales , Ficus , LevedurasResumo
A criptococose é uma doença sistêmica causada pela inalação de basidiosporos desidratados de espécies patogênicas do gênero Cryptococcus presentes no ambiente. Os complexos espécies mais associados à doença são os complexos de espécies Cryptococcus neoformans e C. gattii. O complexo de espécies C. neoformans está associado a casos de criptococose em pacientes imunossuprimidos, sendo comumente isolados do solo e de fezes de aves. O complexo de espécies de C. gattii, por sua vez, afeta principalmente indivíduos imunocompetentes e geralmente é isolado em espécies de árvores nativas ou exóticas em estado de biodegradação. Este estudo teve como objetivo realizar o mapeamento ambiental de espécies patogênicas do gênero Cryptococcus em amostras ambientais arbóreas em locais públicos da cidade de Birigui, São Paulo. Para a coleta das amostras, foram selecionadas regiões com maior trânsito neste município. Após processamento, foram realizados testes morfo-fisiológicos, bioquímicos, teste de assimilação de carbono e nitrogênio e PCR URA5 e RFLP com dupla digestão enzimática para caracterização do complexo de espécies/espécie de Cryptococcus. Entre fevereiro de 2018 e março de 2019, foram coletadas 100 amostras de diferentes árvores em locais arborizados públicos. A porcentagem de colonização das árvores por C. gattii VGII foi de 5%, por C. neoformans VNIV de 1% e foram encontrados 6% de C. laurentii e 3% de C. albidus. Estes resultados sugerem a existência de micro-focos e diversidade de espécies patogênicas de Cryptococcus em algumas árvores dos ambientes investigados neste estudo.
Cryptococcosis is a systemic disease caused by the inhalation of dehydrated basidiospores of pathogenic species of Cryptococcus genus present in the environment. The two species complex associated with the disease are the Cryptococcus neoformans and C. gattii species complex. C. neoformans species complex are associated with cases of cryptococcosis in immunosuppressed patients, being commonly isolated from the soil and birds feces. C. gattii species complex affects mainly immunocompetent individuals and are often isolated in native or exotic tree species in some state of biodegradation. This study aimed to perform the environmental mapping of pathogenic species of the genus Cryptococcus in tree samples of public places of the city of Birigui, São Paulo. For collection, the samples were collected from regions with greater traffic in this city. After processing, morphophysiological, biochemical, carbon and nitrogen assimilation and URA5 PCR and RFLP with double enzymatic digestion tests were performed to characterize the Cryptococcus species/species complex. Between february 2018 and march 2019 was collected a total of 100 samples from different trees in public arborized locations. The percentage of tree colonization by the C. gattii VGII was 5%, for C. neoformans VNIV was 1% and was found 6% of C. laurentii and 3% of C. albidus species. These results obtained suggests that there are a micro-foci and diversity of pathogenic Cryptococcus species in some arboreal environment locations investigated in this study.
Resumo
As espécies de Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii são os agentes etiológicos da criptococose, que se caracteriza por ser uma infecção sistêmica de caráter crônico e com potencial zoonótico. São micro-organismos oportunistas, encontrados em substratos de origem animal e vegetal amplamente distribuídos. O objetivo deste trabalho foi identificar a presença de microfocos de C. neoformans e C. gattii, a partir de amostras ambientais da cidade de Penápolis SP. Foram coletadas 100 amostras provenientes de praças e locais públicos, escolhidos de forma aleatória, de cobertura abrangente à área da cidade. Após a coleta as amostras foram devidamente acondicionadas e encaminhadas ao laboratório de microbiologia da Faculdade de Medicina Veterinária (Unesp/FMVA), onde foram processadas e semeadas em meios de ágares semente de Níger e Sabouraud dextrose acrescido de cloranfenicol e incubadas a 30ºC em estufa microbiológica por um período não inferior a cinco dias e monitoradas diariamente. As colônias que apresentaram crescimento macromorfológico sugestivo para Cryptococcus spp. foram coradas com tinta nanquim e lactofenol azul de algodão para análise micromorfológica e posteriormente submetidas aos testes bioquímicos: Hidrólise da ureia, Termotolerância e Ágar CGB (L-canavanina-glicina-azul de bromotimol). Os resultados demonstraram a presença de 14% (14/100) de C. gattii sendo negativo para cultivo e isolamento de C. neoformans. As amostras que apresentaram crescimento positivo foram provenientes das espécies Ficus benjamina, Syzygium cumini, Caesalpinia pluviosa, Licania tomentosa, Bauhinia forficata, Pachira aquática, Artocarpus heterophyllus, Lagerstroemia speciosa e Samanea tubulosa. O local de maior isolamento para o fungo ocorreu em amostras oriundas da estrada municipal Boa Esperança com incidência de 28,57% (4/14). Conclui-se que o C. gattii encontra-se presente em amostras ambientais constituindo-se em microfocos, provenientes de árvores de locais Públicos da cidade de Penápolis.
The species of Cryptococcus neoformans and Cryptococcus gattii are the etiological agents of cryptococcosis, which is characterized as a chronic systemic infection with zoonotic potential. They are opportunistic microorganisms, found in widely distributed substrates of animal and vegetal origin. The objective of this work was to identify the presence of microfocus of C. neoformans and C. gattii, from environmental samples in the city of Penápolis - SP. We collected 100 samples from public squares and public places, randomly chosen to cover the city area. After collection, the samples were duly conditioned and sent to the microbiology laboratory of the Faculty of Veterinary Medicine (Unesp / FMVA), where they were processed and seeded in media of Niger seed agar and Sabouraud dextrose agar plus, chloramphenicol and incubated at 30ºC in a microbiological oven for a period of not less than 5 days and monitored daily. The colonies that presented macromorphological growth suggestive of Cryptococcus spp. were stained with nanquim ink and blue cotton lactophenol for micromorphological analysis and subsequently submitted to biochemical tests: Urea hydrolysis, Thermotolerance and Agar CGB (L-canavanine-glycine-bromothymol blue). The results demonstrated the presence of 14% (14/100) of C. gattii being negative for cultivation and isolation of C. neoformans. The samples that showed positive growth were from the species Ficus benjamina, Syzygium cumini, Caesalpinia pluviosa, Licania tomentosa, Bauhinia forficata, Pachira aquatica, Artocarpus heterophyllus, Lagerstroemia speciosa and Samanea tubulosa. The site of greatest isolation for the fungus occurred in samples from the Boa Esperança municipal road with incidence of 28.57% (4/14). It was concluded that C. gattii is present in environmental samples constituting in microfocus, coming from trees of public places of the city of Penápolis.
Resumo
Ambientes internos favorecem riscos para a saúde incluindo alergias, infecções e toxicidade. A conjunção de vários fatores de natureza física (temperatura, luz, umidade), química (respiração, acidez, oxidação da celulose) e biológica (ácaros, fungos, bactérias e vírus) influencia na capacidade ocasionando danos aos acervos bibliográficos. A adoção de medidas de conservação, como a higienização, torna-se imprescindível para evitar riscos de contaminação por agentes nocivos à saúde. O objetivo deste trabalho foi investigar a presença de fungos em ambientes internos de sete bibliotecas públicas e privadas em Cuiabá e Várzea Grande-MT e seu impacto na saúde ocupacional. De 332 amostras de poeira coletadas por três técnicas: impactador/amostrador de ar (2.229/12,3%), exposição em placas (6.578/25,1%) e swab estéril (16.387/62,6%) foram isoladas 26.194 UFCs e identificadas 183 espécies fúngicas. Destas, 157 foram micelianas e 26 leveduriformes, totalizando 53 taxas, sendo (43/81,1%) gêneros micelianos e (10/18,9%) leveduriformes. O gênero Aspergillus (10.628/40,6%) foi um dos principais fungos presentes no ar em ambientes internos. Aspergillus niger (3.219/12,3%) foi identificado como sendo a espécie mais prevalente nos ambientes literários, seguido de Cryptococcus spp (1.865/7,1%) e Cladosporium cladosporioides (1.825/7,0%). Quanto à distribuição sazonal, os propágulos fúngicos foram mais frequentemente isolados no período seco/estiagem (14.132/54%) em comparação com o período úmido/chuvoso (12.062/46%). Dentre os dois períodos climáticos houve predomínio dos seguintes gêneros: Aspergillus spp, Rhodotorula spp, Cladosporium spp, Cryptococcus spp, Fusarium spp, Penicillium spp, Paecilomyces spp, Curvularia spp, Alternaria spp, Trichoderma spp, Rhizopus spp, Aureobasidium spp, Chrysonilia sitophila, Mucor spp, Candida spp. A temperatura foi considerada um agravante na proliferação fúngica nestes estabelecimentos. Os ambientes avaliados apresentaram substratos adequados na forma de livros e documentos associados à poeira e umidade dos condicionadores de ar. Uma diversidade e elevada frequência de fungos anemófilos foi observada. Este fato assume relevância devido a estes ambientes abrigarem funcionários expostos constantemente aos microrganismos identificados. Estes achados trazem à luz a questão de minimizar o risco de exposição aos microfocos de agentes fúngicos patogênicos e toxigênicos em acervos bibliográficos.
Indoor favor health risks including allergies, infections and toxicity. The conjunction of several factors Physical (temperature, light, humidity), chemical (breathing, acidity, oxidation of cellulose) and biological (mites, fungi, bacteria and viruses) influences the ability causing damage to library collections. The adoption of conservation measures, such as hygiene, it is essential to prevent contamination by harmful agents to health. The objective of this study was to investigate the presence of fungi in indoor environments in seven public and private libraries in Cuiabá and Várzea Grande-MT and its impact on occupational health. 332 dust samples collected by three techniques: impactor/air sampler (2,229/12.3%), exposure plating (6,578/25.1%) and sterile swab (16,387/62.6%) were isolated 26,194 UFC's and identified 183 fungal species. Of these, 157 were micelianas and 26 yeast, totaling 53 rates, and (43/81.1%) and mycelial genres (10/18.9%) yeast. The genus Aspergillus (10,628/40.6%) was one of the main fungi present in indoor air. Aspergillus niger (3,219/12.3%) was identified as the most prevalent species in literary environments, followed by Cryptococcus spp. (1,865/7.1%) and Cladosporium cladosporioides (1,825/7.0%). In regard to seasonal distribution, fungal propagules were more frequently isolated in the dry season/drought (14 132/54%) compared to the wet season/rainy (12,062/46%). In regard to seasonal distribution, fungal propagules were more frequently isolated in the dry season/drought (14,132/54%) compared to the wet season/rainy (12,062/46%). Of the two climatic periods predominated of the following genera: Aspergillus spp, Rhodotorula spp, Cladosporium spp, Cryptococcus, Fusarium spp, Penicillium spp, Paecilomyces spp, Curvularia spp, Alternaria spp, Trichoderma spp, Rhizopus, Aureobasidium spp, Chrysonilia sitophila, Mucor spp, Candida spp. The temperature was considered an aggravating factor in fungal proliferation in these establishments. The evaluated environments suitable substrates presented in the form of books and documents associated with dust and moisture from the air conditioners. Diversity and high frequency of airborne fungi was observed. This fact is relevant because of these environments shelter staff constantly exposed to microrganism identified. These findings shed light on the issue of minimizing the risk of exposure to pathogenic and toxigenic microfocus fungal agents in library collections.