Characterization and antibacterial activity of raw cotton fabrics treated with date seed extract and silver nanoparticles (AgNPs) / Caracterização e atividade antibacteriana de tecidos de algodão cru tratados com extrato de semente de tâmara e nanopartículas de prata (AgNPs)

Because of their immense economic, wellness, and remedial value, the seeds of palm (Phoenix dactylifera) were selected with synthesized silver nanoparticles (AgNPs) based on their properties for increasing the antibacterial efficacy of medical cotton. This study aimed to be contingent upon the characterisation of raw cotton fabrics treated by AgNPs with date seed extract (DSE) of P. dactylifera both individually and in combination and to investigate their antibacterial activity against various human pathogens. The prepared cotton materials with the synthesized AgNPs and/or DSE were described by both X-ray diffraction (XRD) and scanning electron microscope (SEM). At the same time, gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) and High-performance liquid chromatography (HPLC) were employed to determine the bioactive components in the aqueous date seed extract. The greater antibacterial activity was recorded by cotton treated with DSE and AgNPs mix, in which inhibition zones of all treatments were against Escherichia coli (8 cm), followed by Staphylococcus aureus (2.33-5.87cm) and Bacillus subtilis (2.17-4.63 cm), respectively. Overall, these findings indicate that treated cotton fabrics with synthesised AgNPs and DSE may be widely applied in various potential biological and medical applications, which could enhance environmental sustainability in closed production and consumption.

Devido ao imenso valor econômico, propriedades curativas e de bem-estar, as sementes de palmeira (Phoenix dactylifera) foram selecionadas com nanopartículas de prata sintetizadas (AgNPs), com base em suas propriedades, visando aumentar a eficácia antibacteriana do algodão medicinal. Este estudo teve como objetivo a caracterização de tecidos de algodão cru tratados por AgNPs com extrato de semente de tâmara (DSE) de P. dactylifera tanto individualmente quanto em combinação e investigar sua atividade antibacteriana contra vários patógenos humanos. Os materiais de algodão preparados com os AgNPs sintetizados e/ou DSE foram descritos por difração de raios-X (XRD) e microscópio eletrônico de varredura (SEM). Ao mesmo tempo, cromatografia gasosa-espectrometria de massa (GC-MS) e cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) foram empregadas para determinar os componentes bioativos no extrato aquoso de sementes de tâmaras. A maior atividade antibacteriana foi registrada pelo algodão tratado com mistura de DSE e AgNPs, em que os halos de inibição de todos os tratamentos foram contra Escherichia coli (8 cm), seguido por Staphylococcus aureus (2,33-5,87 cm) e Bacillus subtilis (2,17-4,63 cm), respectivamente. De modo geral, essas descobertas indicam que os tecidos de algodão tratados com AgNPs sintetizados e DSE podem ser amplamente aplicados em várias aplicações biológicas e médicas potenciais, o que pode aumentar a sustentabilidade ambiental na produção e consumo fechados.

Determination of lipids and fatty acids in infant formula: comparison of the conventional x direct method / Lipídios e ácidos graxos em fórmula infantil: comparação de metodologias de extração convencional x direta

Lipids in food are conventionally analyzed in two stages: extraction with organic solvent and fat esterification reaction, in this case, the type of fat of each food influences the choice of extraction and esterification reagents. In the direct method, such procedures are performed in one step. This work compared the conventional extraction method and quantification of lipids and fatty acids, with a direct method in infant formula. A reference sample of infant formula conteining certified lipids and fatty acids values from the National Institute of Standards and Technology was used. The conventional method for lipid analysis used the acid hydrolysis method; for the determination of fatty acids, the fats were extracted with a mixture of ethyl ether and petroleum ether. The direct method consisted of direct trans esterification with sodium methoxide. In the analysis of fatty acids, the majority of the results showed statistically equal values (α < 0.05) for both methods. The direct method proved suitable, mainly because of reduction in analytical time and quantity of solvents (AU).

Os lipídios em alimentos são analisados, de forma convencional, em duas etapas: extração com solvente orgânico e reação de esterificação da gordura, neste caso o tipo de gordura de cada alimento influencia na escolha dos reagentes da extração e esterificação. No método direto, estes procedimentos são realizados em uma etapa única. Este trabalho comparou a metodologia convencional de extração e quantificação de lipídios e ácidos graxos, com um método direto em fórmula infantil. Foi utilizada uma amostra de referência de fórmula infantil com valores certificados para lipídios e ácidos graxos da Nacional Institute of Standards and Technology. A metodologia convencional para a análise de lipídios empregou método com hidrólise ácida; para a determinação dos ácidos graxos, a gordura foi extraída com uma mistura de éter etílico e éter de petróleo. O método direto fundamentou-se na transesterificação direta com metóxido de sódio. Na análise dos ácidos graxos, a maioria dos resultados demonstrou valores estatisticamente iguais (α < 0,05) para os dois métodos. O método direto demonstrou ser apropriado, principalmente pela diminuição do tempo de análise e quantidade de solventes (AU).

Ozonioterapia quando a compreensão faz toda a diferença

O ozônio (O3 ) é uma molécula formada por três átomos de oxigênio, encontrada no estado gasoso em condições específicas de pressão e temperatura. Sua obtenção para fins terapêuticos ocorre pela passagem de oxigênio medicinal através de um gerador específico para essa finalidade, onde um fluxo de oxigênio é submetido a uma determinada carga elétrica, gerando a formação de uma concentração de ozônio. A ozonioterapia é uma terapia que utiliza uma mistura gasosa com 5% de ozônio (O3 ) e 95% de oxigênio (O2 ) medicinal puro que funciona como “gatilho” para um efeito modulador nas mais variadas funções celulares já conhecidas. Essas atividades a nível bioquímico, e não a ação direta do ozônio, é que são as responsáveis pelos efeitos terapêuticos positivos observados nas mais diversas patologias.

Ozonioterapia quando a compreensão faz toda a diferença

O ozônio (O3 ) é uma molécula formada por três átomos de oxigênio, encontrada no estado gasoso em condições específicas de pressão e temperatura. Sua obtenção para fins terapêuticos ocorre pela passagem de oxigênio medicinal através de um gerador específico para essa finalidade, onde um fluxo de oxigênio é submetido a uma determinada carga elétrica, gerando a formação de uma concentração de ozônio. A ozonioterapia é uma terapia que utiliza uma mistura gasosa com 5% de ozônio (O3 ) e 95% de oxigênio (O2 ) medicinal puro que funciona como “gatilho” para um efeito modulador nas mais variadas funções celulares já conhecidas. Essas atividades a nível bioquímico, e não a ação direta do ozônio, é que são as responsáveis pelos efeitos terapêuticos positivos observados nas mais diversas patologias.(AU)

Chemical composition and antioxidant activity of geopropolis produced by Melipona fasciculata (Meliponinae) in flooded fields and cerrado areas of Maranhão State, northeastern Brazil / Composição química e atividade antioxidante da geoprópolis de Melipona fasciculata (Meliponinae) produzida em áreas de campos alagados e de cerrado no Estado do Maranhão, Nordeste do Brasil

Geopropolis, a mixture of plant resin, wax, soil and salivary secretion, is produced by the stingless bee Melipona fasciculata. This aim of this study was to investigate the chemical composition and antioxidant activity of geopropolis collected from beehives in two phytogeographical regions, flooded fields and cerrado, in the municipalities of Palmeirândia and Fernando Falcão, Maranhão State, northeastern Brazil. The geopropolis compounds were identified by gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS). Additionally, total phenolic content was determined with the FolinCiocalteu reagent and antioxidant activity was evaluated in vitro by 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and ferric reducing antioxidant power (FRAP) assays. The four geopropolis samples varied in terms of total phenolic content and antioxidant activity and the highest values were observed for geopropolis from Fernando Falcão. Triterpenes such as cycloartane, ursane and oleanane and phenolic acids (protocatechuic acid and gallic acid) were identified in the geopropolis from Palmeirândia, while the phenolic acids, gallic and ellagic acid were the main compounds in geopropolis from Fernando Falcão. The antioxidant property of geopropolis is due to its high total phenolic content and predominance of gallic acid and ellagic acid. The results showed that the plant resources in two phytogeographical regions of Maranhão used by bees for the production of geopropolis contribute to the chemical composition and bioactivity of this product.(AU)

Geoprópolis, uma mistura de resinas vegetais, cera, terra e secreção salivar, produzida pela abelha sem ferrão Melipona fasciculata. Este estudo investigou a composição química e a atividade antioxidante da geoprópolis coletada em colmeias em duas regiões fitogeográficas de campos alagados e de cerrado, nos municípios de Palmeirândia e Fernando Falcão, no Estado do Maranhão, Nordeste do Brasil. Os compostos da geoprópolis foram identificados por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas (CG/EM). Foram determinados os teores de fenólicos totais pelo reagente de FolinCiocalteu, e atividade antioxidante utilizando o ensaio in vitro com 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH) e capacidade redutora do ferro (FRAP). As quatro amostras de geoprópolis apresentaram variações no teor de fenólicos totais e atividade antioxidante, as geoprópolis de Fernando Falcão, apresentaram maiores teores. Nas geoprópolis do município de Palmeirândia foram identificados, triterpenos do tipo cicloartano, ursano e oleanano e ácidos fenólicos (ácido protocatecuico e ácido gálico), enquanto que na geoprópolis de Fernando Falcão, ácidos fenólicos, ácido gálico e elágico foram os principais constituintes. A propriedade antioxidante da geoprópolis pode ser atribuída aos altos teores de fenólicos totais e de ácido gálico e elágico. Os resultados demonstram que as fontes vegetais das duas regiões fitogeográficas do Maranhão, Brasil, utilizadas pelas abelhas para a produção da geoprópolis contribuem para a composição química e bioatividade deste produto.(AU)

Chemical composition and antioxidant activity of geopropolis produced by Melipona fasciculata (Meliponinae) in flooded fields and cerrado areas of Maranhão State, northeastern Brazil / Composição química e atividade antioxidante da geoprópolis de Melipona fasciculata (Meliponinae) produzida em áreas de campos alagados e de cerrado no Estado do Maranhão, Nordeste do Brasil

Geopropolis, a mixture of plant resin, wax, soil and salivary secretion, is produced by the stingless bee Melipona fasciculata. This aim of this study was to investigate the chemical composition and antioxidant activity of geopropolis collected from beehives in two phytogeographical regions, flooded fields and cerrado, in the municipalities of Palmeirândia and Fernando Falcão, Maranhão State, northeastern Brazil. The geopropolis compounds were identified by gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS). Additionally, total phenolic content was determined with the FolinCiocalteu reagent and antioxidant activity was evaluated in vitro by 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and ferric reducing antioxidant power (FRAP) assays. The four geopropolis samples varied in terms of total phenolic content and antioxidant activity and the highest values were observed for geopropolis from Fernando Falcão. Triterpenes such as cycloartane, ursane and oleanane and phenolic acids (protocatechuic acid and gallic acid) were identified in the geopropolis from Palmeirândia, while the phenolic acids, gallic and ellagic acid were the main compounds in geopropolis from Fernando Falcão. The antioxidant property of geopropolis is due to its high total phenolic content and predominance of gallic acid and ellagic acid. The results showed that the plant resources in two phytogeographical regions of Maranhão used by bees for the production of geopropolis contribute to the chemical composition and bioactivity of this product.

Geoprópolis, uma mistura de resinas vegetais, cera, terra e secreção salivar, produzida pela abelha sem ferrão Melipona fasciculata. Este estudo investigou a composição química e a atividade antioxidante da geoprópolis coletada em colmeias em duas regiões fitogeográficas de campos alagados e de cerrado, nos municípios de Palmeirândia e Fernando Falcão, no Estado do Maranhão, Nordeste do Brasil. Os compostos da geoprópolis foram identificados por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas (CG/EM). Foram determinados os teores de fenólicos totais pelo reagente de FolinCiocalteu, e atividade antioxidante utilizando o ensaio in vitro com 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH) e capacidade redutora do ferro (FRAP). As quatro amostras de geoprópolis apresentaram variações no teor de fenólicos totais e atividade antioxidante, as geoprópolis de Fernando Falcão, apresentaram maiores teores. Nas geoprópolis do município de Palmeirândia foram identificados, triterpenos do tipo cicloartano, ursano e oleanano e ácidos fenólicos (ácido protocatecuico e ácido gálico), enquanto que na geoprópolis de Fernando Falcão, ácidos fenólicos, ácido gálico e elágico foram os principais constituintes. A propriedade antioxidante da geoprópolis pode ser atribuída aos altos teores de fenólicos totais e de ácido gálico e elágico. Os resultados demonstram que as fontes vegetais das duas regiões fitogeográficas do Maranhão, Brasil, utilizadas pelas abelhas para a produção da geoprópolis contribuem para a composição química e bioatividade deste produto.

EFEITO DO GÁS OZÔNIO E DO ÓLEO DE GIRASSOL OZONIZADO NO CRESCIMENTO IN VITRO DO Pythium insidiosum CANINO

A pitiose é uma doença infecciosa granulomatosa causada pelo oomiceto aquático Pythium insidiosum. Trata-se de uma infecção crônica responsável por graves danos locais e sistêmicos. Os tratamentos convencionais possuem eficácia reduzida. Assim, a busca por terapias alternativas se faz necessária para o devido combate da doença. Neste contexto, o ozônio (O3) tem apresentado alto poder antimicrobiano frente a patógenos diversos, como fungos e bactérias. Assim, o presente estudo teve por objetivo caracterizar o efeito do gás ozônio e do óleo de girassol ozonizado no crescimento in vitro do P. insidiosum isolado de cães. No Experimento 1, o patógeno foi exposto à mistura gasosa O2-O3 por períodos distintos (72 g O3 mL-1 durante 5, 15 ou 30 minutos) ou com diferentes concentrações por 30 minutos (32, 52 ou 72 gO3 mL-1 ). No Experimento 2, fragmentos de P. insidiosum foram recobertos com óleos de girassol ozonizados com índice de peróxido distintos (25, entre 400 e 500 ou 600 mmolequiv. kg-1 ). As amostras foram cultivas em Ágar Sabouraud Dextrose durante os primeiros 14 dias pós-tratamento ao logo dos quais, a área de crescimento foi mensurada digitalmente. Amostras que não apresentaram crescimento nesses foram recultivadas para avaliar a ação germicida ou germiostática do respectivo tratamento. No Experimento 1, a exposição do P. insidiosum ao gás O3 por 30 minutos apresentou ação germicida independente da concentração utilizada. Todavia, amostras do patógeno expostas ao gás O3 por tempos inferiores (15 ou 05 min) apresentaram taxa de crescimento semelhante ao grupo controle (P>0,1). No Experimento 2, o óleo de girassol ozonizado com índice de peróxido ou 600 mmol-equiv. kg-1 foi o único a inibir o crescimento do patógeno. Frente as condições experimentais do presente estudo, conclui-se que a exposição à mistura gasosa O2-O3 durante 30 minutos e ao óleo de girassol com alto índice de peróxido apresentam ação germicida frente ao P. insidiosum isolado de cães.

Pythiosis is an infectious granulomatous disease caused by the aquatic oomycete Pythium insidiosum. Conventional treatments have reduced effectiveness against the chronic infection, which can be responsible for local and systemic damage in several species. In this context, ozone (O3) has shown high antimicrobial action against several pathogens, such as fungi and bacteria. Threfore, the present study aimed to characterize the effect of O3 gas and ozonated sunflower oil on the in vitro growth of P. insidiosum isolated from dogs. In Experiment 1, the pathogen was exposed to the O2-O3 gas mixture for different periods (72 g O3 mL-1 for 5, 15 or 30 minutes) or with different concentrations (32, 52 or 72 gO3 mL-1 for 30 minutes). In Experiment 2, fragments of P. insidiosum were covered with ozonized sunflower oils with different peroxide index (25, between 400 and 500 or 600 mmol-equiv. Kg-1 ). The growth area of the pathogen was digitally measured during the first 14 days post-treatment. Samples with absence of grow were recultured to assess the germicidal or germiostatic action of the respective treatment. In Experiment 1, exposure of P. insidiosum to O3 gas for 30 minutes showed germicidal action regardless of the concentration. However, samples of the pathogen exposed to O3 gas for 15 or 05 min showed similar growth rate when compared to the control group (P> 0.1). In Experiment 2, ozonized sunflower oil with a peroxide index 600 mmolequiv. kg-1 inhibit the growth of the pathogen. Considering the experimental conditions of the present study, the treatment with O2-O3 gas mixture for 30 minutes or sunflower oil with a high peroxide index have a germicidal action against P. insidiosum isolated from dogs.

EFEITO DA OZONIZAÇÃO EM DISTINTAS CONCENTRAÇÕES SOBRE O DESENVOLVIMENTO IN VITRO DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS

As infecções bacterianas são uma ocorrência clínica frequente e representam grande problema na saúde e produção animal, sendo o Staphylococcus uma das infecções mais relatadas na medicina veterinária. A ozonioterapia apresenta-se como uma importante alternativa no tratamento deste patógeno, sendo uma alternativa de fácil acesso, baixo custo e poucos efeitos colaterais. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a ação bactericida do ozônio (O3) a partir da ozonização de amostras contendo bactérias do gênero Staphylococcus aureus (ATCC 25923) cultivadas in vitro. Foi realizado um teste experimental no qual sete grupos experimentais foram formados em tubos de vidro de 5mL, cada grupo com três repetições. Os grupos foram: G1 (BHI + S. aureus + ozônio na concentração de 20 g; G2 (BHI + S. aureus + ozônio na concentração de 25 g); G3 (BHI + S. aureus + ozônio na concentração de 39 g); G4 (BHI + S. aureus + ozônio na concentração de 74 g); G5 (BHI + S. aureus + 1 mL de óleo de girassol); G6 (BHI + S. aureus + 1 mL de girassol hiper ozonizado óleo); e o controle negativo G7 (BHI + S. aureus). A ozonização dos grupos que receberam ozônio na forma gasosa foi feita borbulhando ozônio através de uma agulha submersa no caldo contendo os inoculantes. Os grupos tratados com óleo receberam o substância e, em seguida, a mistura foi homogeneizada por meio de um aparelho de vórtice, em seguida, todos os tubos foram incubados em estufa bacteriológica a 35°C - 37°C por 4 horas, após o que a turbidez de todos os tubos foi lida com o auxílio de um aparato e, em seguida, as soluções de todos os tubos foram inoculadas em ágar sangue adicionado de 5% de sangue de ovelha. m incubadas em incubadora bacteriológica a 35°C - 37 °C por 24 horas e os tubos contendo as soluções foram incubados novamente. O mesmo processo foi realizado novamente após 8 horas de tratamentos. Todos os grupos apresentaram inibição do crescimento bacteriano, sendo que os grupos tratados com concentrações de 39 e 74 g e óleo hiperozonizado foram mais eficientes do que aqueles com concentrações de 20 e 25 g. Assim, a ozonioterapia mostra-se uma importante alternativa no tratamento de afecções bacterianas em animais.

Bacterial infections are a frequent clinical occurrence that represent a major problem in animal health and production, with Staphylococcus being one of the most reported infections in veterinary medicine. Ozone therapy presents itself as an important alternative in the treatment of this pathogen, being an alternative of easy access, low cost and few side effects. The aim of the present work was to evaluate the bactericidal action of ozone (O3) from the ozonation of samples containing bacteria of the genus Staphylococcus aureus (ATCC 25923) grown in vitro. An experimental test was carried out in which seven experimental groups were formed in 5mL glass tubes, each group with three replications. The groups were: G1 (BHI + S. aureus + ozone at a concentration of 20 g; G2 (BHI + S. aureus + ozone at a concentration of 25 g); G3 (BHI + S. aureus + ozone at a concentration of 39 g); G4 (BHI + S. aureus + ozone at a concentration of 74 g); G5 (BHI + S. aureus + 1 mL of sunflower oil); G6 (BHI + S. aureus + 1 mL of hyper ozonized sunflower oil); and the negative control G7 (BHI + S. aureus). The ozonation of the groups that received ozone in gaseous form was done by bubbling ozone through a needle submerged in the broth containing the inoculants. The groups treated with oil received the substance and, then, the mixture was homogenized by means of a vortex apparatus, then all tubes were incubated in a bacteriological oven at 35 ° C - 37 ° C for 4 hours, after which the turbidity of all tubes was read with the aid of an apparatus and then the solutions of all tubes were inoculated in blood agar added with 5% of sheep blood. m incubated in a bacteriological incubator at 35 ° C - 37 ° C for 24 hours and the tubes containing the solutions were incubated again. The same process was performed again after 8 hours of treatments. All groups showed inhibition of bacterial growth, and the groups treated with concentrations of 39 and 74 g and hyper ozonized oil were more efficient than those with concentrations of 20 and 25 g. Thus, ozone therapy is shown to be an important alternative in the treatment of bacterial disorders in animals.

Effect of electrical and controlled atmosphere stunning methods on broiler chicken behavior at slaughter, blood stress indicators and meat traits / Efeito da eletronarcose e do método de insensibilização por atmosfera controlada no comportamento das aves ao abate, nos indicadores sanguíneos de estresse e nas características da carne

Brazil is the world's largest exporter and third largest producer of chicken meat. To maintain competitiveness, the productive sector must always be alert to consumer demands, and concern about animal welfare is a growing tendency. Aspects involving animal welfare are especially critical in the slaughter of broiler chickens. This study evaluated the stunning of chickens in a CO2- enriched atmosphere chamber to reduce bird stress, comparing with electrical water bath stunning, the most usual desensitization method used in chicken slaughter. The reaction of birds when exposed to a high CO2 concentration (30%) and to a 10% initial CO2 level, gradually elevated to 30% was compared. The effect of mixing argon with CO2 was also evaluated, always aiming to reduce the discomfort of birds. In all the gas stunning parameters evaluated, evident discomfort reactions before stunning were observed in about two thirds of the birds, but the blood levels of corticosterone and glucose, used as stress indicators, indicated that gas increased the birds' welfare. Gas exposure time required to stun the birds and time to regain consciousness after exiting the gas chamber presented a wide variation. Controlled atmosphere stunning method facilitated bird handling during slaughter, but more studies will be necessary to develop this technological alternative and make it viable for industrial use.(AU)

O Brasil é o maior exportador e terceiro maior produtor mundial de carne de frango. A fim de manter a competitividade, o setor produtivo deve estar sempre alerta às exigências dos consumidores e a preocupação com o bem-estar animal é uma tendência crescente. Aspectos envolvendo bem-estar animal são particularmente críticos no abate de frangos de corte. Este estudo avaliou a insensibilização de frangos em uma câmara com atmosfera enriquecida deCO2para reduzir o estresse das aves, em comparação com a insensibilização elétrica em cuba d'água, o método de atordoamento mais usual no abate de frangos. Foi comparada a reação das aves quando expostas a uma alta concentração de CO2 (30%) ou a uma concentração inicial de 10% de CO2, elevada gradualmente até 30%. O efeito da mistura de argônio com CO2 também foi avaliado, sempre visando a redução das reações de desconforto das aves. Cerca de dois terços das aves apresentaram reações evidentes de desconforto antes do atordoamento, em todos os parâmetros de insensibilização gasosa utilizados, porém, as concentrações sanguíneas de corticosterona e glicose, usados como indicadores de estresse, indicaram que a insensibilização com CO2 promoveu o bem-estar das aves. O tempo de exposição ao CO2 necessário para o atordoamento das aves e o tempo de recuperação da consciência após a saída da câmara de gás apresentou ampla variação. A insensibilização por atmosfera controlada de CO2 facilitou o manejo das aves durante o abate, mas serão necessários mais estudos para desenvolver essa alternativa tecnológica, de forma a torná-la viável para aplicação industrial.(AU)

Effect of electrical and controlled atmosphere stunning methods on broiler chicken behavior at slaughter, blood stress indicators and meat traits / Efeito da eletronarcose e do método de insensibilização por atmosfera controlada no comportamento das aves ao abate, nos indicadores sanguíneos de estresse e nas características da carne

Brazil is the worlds largest exporter and third largest producer of chicken meat. To maintain competitiveness, the productive sector must always be alert to consumer demands, and concern about animal welfare is a growing tendency. Aspects involving animal welfare are especially critical in the slaughter of broiler chickens. This study evaluated the stunning of chickens in a CO2-enriched atmosphere chamber to reduce bird stress, comparing with electrical water bath stunning, the most usual desensitization method used in chicken slaughter. The reaction of birds when exposed to a high CO2 concentration (30%) and to a 10% initial CO2 level, gradually elevated to 30% was compared. The effect of mixing argon with CO2 was also evaluated, always aiming to reduce the discomfort of birds. In all the gas stunning parameters evaluated, evident discomfort reactions before stunning were observed in about two thirds of the birds, but the blood levels of corticosterone and glucose, used as stress indicators, indicated that gas increased the birds welfare. Gas exposure time required to stun the birds and time to regain consciousness after exiting the gas chamber presented a wide variation. Controlled atmosphere stunning method facilitated bird handling during slaughter, but more studies will be necessary to develop this technological alternative and make it viable for industrial use.(AU)

O Brasil é o maior exportador e terceiro maior produtor mundial de carne de frango. A fim de manter a competitividade, o setor produtivo deve estar sempre alerta às exigências dos consumidores e a preocupação com o bem-estar animal é uma tendência crescente. Aspectos envolvendo bem-estar animal são particularmente críticos no abate de frangos de corte. Este estudo avaliou a insensibilização de frangos em uma câmara com atmosfera enriquecida de CO2 para reduzir o estresse das aves, em comparação com a insensibilização elétrica em cuba dágua, o método de atordoamento mais usual no abate de frangos. Foi comparada a reação das aves quando expostas a uma alta concentração de CO2 (30%) ou a uma concentração inicial de 10% de CO2, elevada gradualmente até 30%. O efeito da mistura de argônio com CO2 também foi avaliado, sempre visando a redução das reações de desconforto das aves. Cerca de dois terços das aves apresentaram reações evidentes de desconforto antes do atordoamento, em todos os parâmetros de insensibilização gasosa utilizados, porém, as concentrações sanguíneas de corticosterona e glicose, usados como indicadores de estresse, indicaram que a insensibilização com CO2 promoveu o bem-estar das aves. O tempo de exposição ao CO2 necessário para o atordoamento das aves e o tempo de recuperação da consciência após a saída da câmara de gás apresentou ampla variação. A insensibilização por atmosfera controlada de CO2 facilitou o manejo das aves durante o abate,mas serão necessários mais estudos para desenvolver essa alternativa tecnológica, de forma a torná-la viável para aplicação industrial.(AU)

Effect of electrical and controlled atmosphere stunning methods on broiler chicken behavior at slaughter, blood stress indicators and meat traits / Efeito da eletronarcose e do método de insensibilização por atmosfera controlada no comportamento das aves ao abate, nos indicadores sanguíneos de estresse e nas características da carne

Brazil is the worlds largest exporter and third largest producer of chicken meat. To maintain competitiveness, the productive sector must always be alert to consumer demands, and concern about animal welfare is a growing tendency. Aspects involving animal welfare are especially critical in the slaughter of broiler chickens. This study evaluated the stunning of chickens in a CO2-enriched atmosphere chamber to reduce bird stress, comparing with electrical water bath stunning, the most usual desensitization method used in chicken slaughter. The reaction of birds when exposed to a high CO2 concentration (30%) and to a 10% initial CO2 level, gradually elevated to 30% was compared. The effect of mixing argon with CO2 was also evaluated, always aiming to reduce the discomfort of birds. In all the gas stunning parameters evaluated, evident discomfort reactions before stunning were observed in about two thirds of the birds, but the blood levels of corticosterone and glucose, used as stress indicators, indicated that gas increased the birds welfare. Gas exposure time required to stun the birds and time to regain consciousness after exiting the gas chamber presented a wide variation. Controlled atmosphere stunning method facilitated bird handling during slaughter, but more studies will be necessary to develop this technological alternative and make it viable for industrial use.

O Brasil é o maior exportador e terceiro maior produtor mundial de carne de frango. A fim de manter a competitividade, o setor produtivo deve estar sempre alerta às exigências dos consumidores e a preocupação com o bem-estar animal é uma tendência crescente. Aspectos envolvendo bem-estar animal são particularmente críticos no abate de frangos de corte. Este estudo avaliou a insensibilização de frangos em uma câmara com atmosfera enriquecida de CO2 para reduzir o estresse das aves, em comparação com a insensibilização elétrica em cuba dágua, o método de atordoamento mais usual no abate de frangos. Foi comparada a reação das aves quando expostas a uma alta concentração de CO2 (30%) ou a uma concentração inicial de 10% de CO2, elevada gradualmente até 30%. O efeito da mistura de argônio com CO2 também foi avaliado, sempre visando a redução das reações de desconforto das aves. Cerca de dois terços das aves apresentaram reações evidentes de desconforto antes do atordoamento, em todos os parâmetros de insensibilização gasosa utilizados, porém, as concentrações sanguíneas de corticosterona e glicose, usados como indicadores de estresse, indicaram que a insensibilização com CO2 promoveu o bem-estar das aves. O tempo de exposição ao CO2 necessário para o atordoamento das aves e o tempo de recuperação da consciência após a saída da câmara de gás apresentou ampla variação. A insensibilização por atmosfera controlada de CO2 facilitou o manejo das aves durante o abate,mas serão necessários mais estudos para desenvolver essa alternativa tecnológica, de forma a torná-la viável para aplicação industrial.

AÇÃO IN VITRO DE DIFERENTES APRESENTAÇÕES DO OZÔNIO NA INATIVAÇÃO DO PYTHIUM INSIDIOSUM EQUINO

Costa, G.B. Ação in vitro de diferentes apresentações do ozônio na inativação do Pythium insidiosum equino. 2020. Dissertação de mestrado pelo Programa de Pós-graduação em Ciência Animal, Universidade de Franca, SP. A baixa eficácia dos tratamentos atuais faz da pitiose uma infecção crônica e com alta reincidência tanto em seres humanos como em equinos. Todavia, o ozônio (O3) tem se mostrado altamente eficaz na inativação de microrganismos diversos. Dessa forma, o presente estudo teve por objetivo principal caracterizar o efeito antimicrobiano in vitro de diferentes apresentações do O3 frente a culturas de P. insidiosum isoladas de equinos. No Experimento 1, fragmentos de P. insidiosum foram tratadas com água enriquecida com O3, óleos ozonizados com índice de peróxido distintos ou mistura gasosa O2-O3 (72 gO3 mL-1). No Experimento 2, foram realizados um ou três tratamentos com mistura gasosa O2-O3 (72 gO3 mL-1). No Experimento 3, as culturas foram expostas à mistura gasosa O2-O3 (72 gO3 mL-1) por 05, 15 ou 30 minutos. No Experimento 4, foram realizados tratamentos com diferentes concentrações de mistura gasosa O2-O3: 32, 52 ou 72 gO3 mL-1. Os fragmentos foram mantidos em ágar Sabouraud dextrose (ASD) em conjunto com veículo utilizado em cada experimento sendo incubados por 14 dias a 35°C. A zona de crescimento foi mensurada digitalmente durante os primeiros 14 dias pós-tratamento. Amostras que não apresentaram crescimento ao longo dos primeiros 14 dias pós-tratamento foram recultivas para avaliar a ação germicida/ germistática respectivo tratamento. No Experimento 1, o óleo de girassol ozonizado com alto índice de peróxido foi a única apresentação com ação germicida frente ao patógeno. Os fragmentos submetidos aos demais tratamentos apresentaram taxas de crescimento semelhantes (p>0.1) ao dos grupos controle. No Experimento 2, o tratamento por três dias consecutivos com mistura O2-O3 foi efetivo na inibição do P. insidiosum. No Experimento 3, um efeito negativo do tempo de exposição sobre a taxa de crescimento das culturas foi detectado (p<0.05). No Experimento 4, todos os tratamentos apresentaram efeito germicida independente da concentração de O3. Conclui-se que a exposição ao gás O3, com múltiplos tratamentos, tempo entre 15 a 30 minutos e concentrações entre 32 a 72 gO3 mL-1 e tratamento com óleo de girassol ozonizado com alto índice de xiv peróxido >600 mEq kg-1 possuem ação germicida frente ao P. insidiosum isolado de equino.

Costa, G.B. In vitro action of different ozone presentations in the inactivation of equine Pythium insidiosum. 2020. Dissertation (masters in animal science) University of Franca, Franca SP. The low effectiveness of current treatments makes pythiosis a chronic infection with a high recurrence in both humans and horses. However, ozone (O3) has been shown to be highly effective in inactivating various microorganisms. Thus, the present study aimed to characterize the in vitro antimicrobial effect of different O3 presentations against P. insidiosum cultures isolated from horses. In Experiment 1, fragments of P. insidiosum were treated with water enriched with O3, ozonized oils with different peroxide index or gas mixture O2-O3 (72 gO3 mL-1). In Experiment 2, one or three treatments with O2-O3 gas mixture (72 gO3 mL-1) were performed. In Experiment 3, the cultures were exposed to the O2-O3 gas mixture (72 gO3 mL-1) for 05, 15 or 30 minutes. In Experiment 4, treatments were carried out with different concentrations of gas mixture O2-O3: 32, 52 or 72 gO3 mL-1. The fragments were kept on Sabouraud dextrose agar (ASD) together with the vehicle used in each experiment and incubated for 14 days at 35 ° C. The growth zone was digitally measured during the first 14 days after treatment. Samples that did not grow over the first 14 days after treatment were cultured to assess the germicidal / germ mystatic action of the respective treatment. In Experiment 1, ozonized sunflower oil with a high peroxide index was the only presentation with germicidal action against the pathogen. The fragments submitted to the other treatments showed similar growth rates (P> 0.1) to the control groups. In Experiment 2, treatment for three consecutive days with an O2-O3 mixture was effective in inhibiting P. insidiosum. In Experiment 3, a negative effect of the exposure time on the growth rate of the cultures was detected (P <0.05). In Experiment 4, all treatments showed a germicidal effect regardless of O3 concentration. It is concluded that exposure to O3 gas, with multiple treatments, time between 15 to 30 minutes and concentrations between 32 to 72 gO3 mL-1 and treatment with ozonized sunflower oil with a high peroxide index> 600 mEq kg-1 have an action germicidal against P. insidiosum isolated from equine. xvi

DIFERENTES FRAÇÕES INSPIRADAS DE OXIGÊNIO, ASSOCIADAS OU NÃO AO ÓXIDO NITROSO, EM SUÍNOS ANESTESIADOS COM PROPOFOL E MANTIDOS EM VENTILAÇÃO ESPONTÂNEA

A anestesia intravenosa com propofol é amplamente utilizada em Medicina Veterinária, entretanto, apesar de ser um bom hipnótico e apresentar indução e recuperação rápidas, esse fármaco não possui efeito analgésico. A fim de proporcionar aos suínos, espécie largamente utilizada na experimentação animal, uma anestesia multimodal, foi proposto nesse estudo a avaliação da associação de propofol ao óxido nitroso (N2O), o qual produz analgesia. Além disso, buscou-se definir as concentrações mais adequadas de oxigênio e N2O a serem fornecidas durante a anestesia. Para tal, foram utilizados 48 leitões em fase de creche, pré-medicados com azaperone, induzidos à anestesia com propofol e mantidos em infusão contínua deste agente sob ventilação espontânea. Os animais foram distribuídos em 6 grupos, que receberam as concentrações de 10, 30 e 50% de N2O (GN10, GN30 e GN50) ou ar comprimido (GA10, GA30 e GA50), associadas às frações inspiradas de oxigênio (FiO2) de 0,9, 0,7 e 0,5, respectivamente. Foi estudada a hemogasometria arterial e venosa mista, além da dinâmica cardiovascular, dinâmica respiratória e parâmetros intracranianos. A coleta de dados teve início 40 minutos após a indução anestésica e repetidas a cada 15 minutos, durante 60 minutos. Para a análise estatística dos resultados foi feita a análise de variância de duas vias para comparação entre grupos e de uma via para comparação de momentos, ambas seguidas pelo teste de Bonferroni. A dinâmica cardiovascular não apresentou diferença entre os grupos para frquência cardíaca (FC), pressão arterial sistólica (PAS), média (PAM) e diastólica (PAD), pressão venosa central (PVC) e índice cardíaco (IC), porém, os resultados ficaram abaixo do fisiológico para a espécie. Além disso, não houve diferenças para frequência respiratória (f), pressão de perfusão cerebral (PPC), temperatura intracraniana (TIC) e temperatura corporal (TC). Todos os animais apresentaram hipercapnia, redução do pH e déficit de bases (DB), sugerindo que o protocolo experimental determinou acidose respiratória devido à formação de shunt pulmonar e metabólica devido à hipoperfusão tecidual. O emprego de FiO2 de 0,9 ou a adição de N2O à mistura gasosa, determinaram alterações mais graves na dinâmica respiratória e no shunt pulmonar. Houve aumento de pressão intracraniana (PIC) em todos os grupos, com diferenças pontuais, de modo que o N2O não interferiu diretamente nesse parâmetro. A ventilação espontânea não foi adequada para suínos anestesiados com propofol em cirurgias acima de 40 minutos, sendo que o GA30 (FiO2 de 0,7 associada ao ar comprimido) foi o menos prejudicial aos animais.

Intravenous anesthesia with propofol is common practice in Veterinary Medicine. However, despite being a good hypnotic and provides fast anesthetic induction and recovery, has no analgesic effect. In order to provide pigs with a multimodal anesthetic protocol, it was proposed to evaluate the association of propofol with nitrous oxide (N2O), due to its analgesic properties. Moreover, the aim of this study was to define the most appropriate concentrations of oxygen and N2O to be provided during anesthesia. To that purposes, a total of 48 pigs in nursery phase were used. They were premedicated with azaperone and anesthetized with propofol, which was also used during anesthesia maintenance. The animals were assigned into 6 groups, as follows concentrations of 10, 30 and 50% N2O (GN10, GN30 and GN50) or compressed air (GA10, GA30 and GA50) associated with fraction of inspired oxygen (FiO2) of 0.9, 0.7 and 0.5, respectively. It was studied the arterial and mixed venous blood gas analysis, as well as cardiovascular dynamics, respiratory dynamics and intracranial parameters. Data collection began 40 minutes after the induction and it was repeated every 15 minutes for 60 minutes. The statistical analysis of results was performed by two- ay analysis of variance for comparison between groups and one-way for times comparison, both followed by the Bonferroni test. Cardiovascular dynamics showed no difference between groups for heart rate (HR), systolic arterial pressure (SAP), diastolic arterial pressure (DAP), mean arterial pressure (MAP), central venous pressure (CVP) e cardiac index (CI), although the results were below the physiological for this species. Also, there is no difference for respiratory rate (RR), cerebral perfusion pressure (CPP), intracranial temperature (ICT) and esophageal temperature (Tes). All animals presented hypercapnia, pH reduction and base excess (BE), suggesting that the experimental protocol determined respiratory and metabolic acidosis due to ventilation-perfusion mismatch. The use of FiO2 of 0.9 or the addition of N2O to the gas mixture determined more severe changes in respiratory dynamics and pulmonary shunt. There was an increase in intracranial pressure (ICP) in all groups, with few differences, so that N2O did not interfere directly with this parameter. The spontaneous ventilation was not adequate for pigs anesthetized with propofol in surgeries over 40 minutes, and the GA30 (FiO2 of 0.7 associated with compressed air) was the least harmful to the animals.

Quantificação de metano entérico e metabolismo ruminal de bovinos alimentados com enzimas fibrolíticas e amilolíticas

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de enzimas sobre a ingestão de matéria seca, digestibilidade dos nutrientes, comportamento alimentar, produção de CH4 entérico e os parâmetros fermentativos, além da produção de metano nas fezes de bovinos, utilizando biodigestores. O experimento foi conduzido na Universidade de São Paulo, Pirassununga/SP, Brasil. Foram utilizadas cinco vacas, com peso médio de 923,04 ± 86,76 kg, canuladas no rúmen, distribuídas em cinco tratamentos utilizando delineamento experimental em quadrado latino 5x5: 1) Controle: dieta sem adição de enzimas; 2) Amilase: dieta com 7,5 g de amilase/animal/dia (Amaize, ALLTECH); 3) Xilanase: dieta com 15 g de xilanase/animal/dia (Fibrozyme, ALLTECH); 4) Celulase + protease: dieta com 7,5 g celulase + protease/animal/dia (Allzyme VegPro PO, ALLTECH); 5) Pool: dieta com 30 g de mistura de enzimas (amilase, xilanase e celulase + protease)/animal/dia. Cada período experimental consistiu de 21 dias (os primeiros 15 dias foram utilizados para adaptação da dieta e os últimos 5 dias para a coleta de dados). Nos dias 10 e 20, foi avaliada a digestibilidade utilizando o marcador de óxido crômico e coleta de fezes. No dia 17, foi avaliada o comportamento ingestivo por 24 horas, através de monitoramento visual a cada 5 minutos. No dia 19, foi mensurado o pH ruminal a cada 10 minutos, utilizando-se probes de mensuração contínua. Para quantificar os ácidos graxos de cadeia curta (AGCC), metano, concentração de N-NH3 e protozoários, coletou-se conteúdo ruminal antes, 3, 6, 9 e 12 horas após a alimentação matinal. A técnica de fermentação consistiu na incubação de conteúdo de rúmen líquido e sólido em frascos em banho-maria 39 ºC durante 30 minutos. Na subsequente medição da produção de metano usou-se cromatografia gasosa. Nos dias 20 e 21, foi avaliada a dinâmica ruminal. Os dados foram analisados pelo programa SAS, através do procedimento PROC MIXED. O modelo, o efeito de tratamento como fator fixo e os efeitos de animal e período como fatores aleatórios, considerado nível de significância de 5%. A adição de enzimas não mostrou diferença significativa em relação ao consumo de matéria seca (CMS), digestibilidade, comportamento ingestivo, produção de CH4, N-NH3, protozoários ou dinâmica ruminal. A associação de enzimas (tratamento Pool) aumentou a produção de acético, propiônico e AGCC totais em relação à dieta controle. As variáveis pH mínimo, médio e máximo, tempo de pH abaixo de 5,8, 6,0, 6,2 e 6,5, assim como área de pH abaixo de 5,8, 6,0, 6,2 e 6,5 não diferiram significativamente entre os tratamentos. Não foram verificadas diferenças para a produção de biogás ou teores sólidos do efluente. Concluiu-se que a utilização destes aditivos, nas proporções usadas, não afetou as variáveis de CMS, digestibilidade, comportamento ingestivo, produção de CH4, pH, protozoários, N-NH3 ou dinâmica ruminal. A associação de enzimas apresentou melhora na produção de AGCC ruminal sem aumentar a emissão de CH4.

The objective of this study was to evaluate the effect of enzymes on dry matter intake, nutrient digestibility, feeding behavior, production of enteric CH4 and fermentative parameters, as well as the production of methane in bovine feces using digester. The experiment was conducted at the University of São Paulo, Pirassununga/SP, Brazil. Five cows were used, with a mean weight of 923.04 ± 86.76 kg, cannulated in the rumen, distributed in five treatments using 5x5 Latin square experimental design: 1) Control: diet without addition of enzymes; 2) Amylase: diet with 7.5 g of amylase/animal.day(Amaize,Alltech); 3) Xylanase: diet with 15 g of xylanase/animal.day(Fibrozyme, Alltech); 4) Cellulase + protease: diet with 7.5 g of cellulase + protease/animal.day (Allzyme VegPro PO, Alltech); 5) Pool: diet with 30 g of enzymes pool (amylase, xylanase and cellulase + protease)/animal.day. Each experimental period consisted of 21 days (first 15 days were used for diet adaptation and the last 5 days for data collection). On days 10th and 20th, digestibility was evaluated using the chromic oxide marker and fecal collection. On the 17th day, ingestive behavior was evaluated for 24 hours, through visual monitoring every 5 minutes. On day 19th, ruminal pH was measured every 10 minutes, using a continuous measurement device. In order to quantify short-chain fatty acids (SCFA), methane, concentration of NH3-N and protozoa, rumen contents were sampled prior to and 3, 6, 9 and 12 hours after morning feeding. The fermentation technique consisted of incubation of liquid and solid rumen contents in bottles in a water bath 39 ºC for 30 minutes. Subsequent measurement of methane production using gas chromatography On days 20th and 21th, ruminal dynamic was evaluated by emptying this organ. Data were analyzed using SAS, through the PROC MIXED procedure. The model included the effect of treatment as fixed factor, animal and period effects as random factors, considered level of significance of 5%. The addition of enzymes showed no significant difference in relation to dry matter intake (DMI), digestibility, ingestive behavior, CH4 production, NH3-N, protozoa or ruminal dynamics parameters. The association of enzymes (pool treatment) increased acetic, propionic and total SCFA production in relation to the control diet. Not significant differences were observed for the pH variables, as minimum, average and maximum pH, as well as time and area which pH was below to 5.8, 6.0, 6.2 and 6.5. No differences were verified for biogas production or solid effluent contents. It is concluded that these additives, in the proportions used, did not affect the variables of DMI, digestibility, ingestive behavior, CH4 production, pH, protozoa, NH3-N or ruminal dynamic. The association of the enzymes showed improvement in the production of rumen SCFA without increasing the CH4 emission.

Viabilidade de oócitos bovinos transportados por diferentes períodos em meio de maturação suplementado com análogo da Vitamina E

Oócitos com diminuída capacidade de desenvolvimento têm sido apontados como a principal causa para o potencial reduzido dos embriões produzidos in vitro. O transporte dos oócitos das propriedades até os laboratórios é um fator fundamental, pois a maturação inicia-se imediatamente após retirada do oócito de seu folículo, e o intervalo entre a recuperação e maturação em laboratório influenciam diretamente o desenvolvimento do oócito. O tempo do transporte pode se prolongar por várias horas, podendo prejudicar o desenvolvimento embrionário subsequente. Além disso, as condições in vitro resultam em maiores concentrações de oxigênio, levando a um aumento nos níveis de Espécies Reativas ao Oxigênio (EROs), sendo as membranas celulares muito sensíveis à lipoperoxidação ocasionada por esses agentes. O Trolox® é um análogo da Vitamina E, e atua como agente protetor contra a lipoperoxidação. Dessa forma, foi avaliada a viabilidade do transporte de oócitos com o controle da atmosfera gasosa, durante diferentes períodos de tempo, e os efeitos da adição de Trolox® ao meio utilizado no transporte. Foram utilizados 1107 oócitos provenientes de ovários de abatedouro, divididos em oito grupos, conforme o período de transporte simulado e a presença de Trolox®: zero (G0), seis (G6), doze (G12) e dezoito (G18) horas de transporte simulado sem antioxidante, e os mesmos períodos (GT0, GT6, GT12, GT18), com a adição de 0,1 mg/mL de Trolox® ao meio de transporte. Os oócitos foram acondicionados em tubos criogênicos de 1,5 mL, contendo 500µL de meio de transporte (TCM-199® suplementado com HEPES, glutamina, piruvato, antibiótico, estradiol, LH, FSH e SFB), recobertos por 350µL de óleo mineral, gaseificados com uma mistura de 5% de CO2, 5% de O2, 90% de N2 balanço, e lacrados. Os oócitos dos grupos G0 e GT0 foram colocados abertos na estufa e maturados por 24 horas, a 38,5°C com 5% de CO2 em ar. Os outros grupos foram colocados fechados dentro da estufa, e abertos conforme passado seu respectivo período de transporte, completando o tempo restante da maturação nas mesmas condições dos grupos controle. Esse sistema estaria mimetizando o transporte de oócitos em incubadoras portáteis, simulando o que ocorre do campo para o laboratório após a OPU. O período de fecundação foi de 18-22 horas em condições semelhantes de temperatura e atmosfera gasosa, em Talp-Stock acrescido de BSA, piruvato, gentamicina, heparina e PHE. Os prováveis zigotos foram cultivados durante sete dias em meio SOFaaci + 5% SFB, em estufa à 38,5ºC, com 5% CO2, 5% O2 e 90% N2. Foram avaliadas as taxas de clivagem, produção embrionária, contagem celular e o estresse oxidativo. Os dados paramétricos foram avaliados através da ANOVA e do teste de Tukey, já os não paramétricos através do teste de Wilcoxon. Todas as análises utilizaram 5% como nível de significância. As taxas de clivagem foram similares entre todos os grupos, sendo observada diferença (p<0,05) apenas entre G0 (87,05%) e o G12 (68,30%). Não foi encontrado diferença (p>0,05) entre os grupos para produção de blastocistos, o número total de células embrionárias e concentração de TBARS no meio de transporte. Estes resultados indicam que é possível o transporte de oócitos bovinos até 18 horas sem que haja prejuízos ao desenvolvimento embrionário subsequente e que a adição de Trolox® ao meio de transporte não influencia os índices de clivagem e de blastocistos.

Oocytes with decreased development capacity have been identified as the main cause for the reduced potential of embryos in vitro produced. The transport of the oocytes from properties to the laboratories is a fundamental factor, since the maturation begins immediately after the oocyte removal from its follicle, and the interval between the recovery and the laboratory maturation directly influence its development. The transport duration can last for several hours and can hinder subsequent embryonic development. Furthermore, the in vitro conditions results in higher oxygen concentrations, leading to an increase in the Reactive Oxygen Species (ROS) levels, and the cell membranes is very susceptible to lipid peroxidation caused by these agents. The Trolox® is a vitamin E analogue and acts as a protective agent against lipid peroxidation. Thus, it was assessed the viability of oocytes transported with a controlled gaseous atmosphere for different periods of time, and the effects of adding Trolox® the medium used on the transport. Were used 1107 oocytes from slaughterhouse ovaries, divided into eight groups according to the simulated transport period and the presence of Trolox®: zero (G0), six (G6), twelve (G12) and eighteen (G18) hours of simulated transport without antioxidant, and same periods (GT0, GT6, GT12, GT18), with the addition of 0.1 mg / ml Trolox® to the transport medium. Oocytes were placed in 1.5 ml cryogenic tubes containing 500L transport medium (TCM-199® supplemented with HEPES, glutamine, pyruvate, antibiotics, estradiol, LH, FSH and SFB), covered with 350L of mineral oil, gassed with a mixture of 5% CO2, 5% O2, 90% N2 balance and sealed. Oocytes of groups G0 and G10 were placed unclosed in the incubator and matured for 24 hours at 38.5 ° C with 5% CO2 in air. The other groups were placed closed inside the incubator and opened as pasted their respective transport period, completing the remaining time of maturation under the same conditions of the control group. This system would mimic the transport of oocytes in a portable incubator, simulating what occurs from the countryside to the laboratory after OPU. The fertilization period was 18-22 hours in similar conditions of temperature and gaseous atmosphere in medium Talp-Stock plus BSA, pyruvate, gentamicin, heparin and PHE. Presumptive zygotes were cultured for seven days in SOFaaci medium + 5% fetal calf serum, in an incubator at 38.5 ° C with 5% CO2, 5% O2 and 90% N2. The rates of cleavage, embryo production, cell count and oxidative stress were evaluated. Data were analyzed with SAS® version 9.2. Parametric data were analyzed using ANOVA and Tukey's test, as the nonparametric using the Wilcoxon test. All analyzes used 5% level of significance. Cleavage rates were similar among all groups, with difference (p <0.05) only between G0 (87.05%) and G12 (68.30%). The blastocyst production, total number of embryonic cells and TBARS concentration in the transport medium were not different (p> 0.05). These results indicate that transportation of bovine oocytes up to 18 hours can happen without any losses to the subsequent embryonic development and the addition of Trolox® in the transport medium does not influence the cleavage and blastocyst rates.

Medida da solubilidade de óleo de café verde (Coffea arabica L.) em dióxido de carbono supercrítico e modelagem termodinâmica

O objetivo do presente estudo foi medir experimentalmente a solubilidade do óleo de café verde em dióxido de carbono supercrítico em condições preestabelecidas de pressão (P) e temperatura (T), e a partir dos dados experimentais estabelecer ajustes em modelos termodinâmicos que empregam a equação de estado (EDE) de Peng-Robinson com a regra de mistura clássica de van der Waals para predição do equilíbrio de fases. Foi obtido óleo a partir de grãos de café verde (Coffea arabica), cultivar (cv.) Catuaí Amarelo moído (dm de 0,8409 mm) usando CO2 supercrítico, nas condições de 40, 50, 60, 70, 80 °C e nas pressões de 300 e 350 bar. A solubilidade foi medida pelos métodos dinâmico e estático nas mesmas condições. Foi determinado o perfil de ácidos graxos por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG/EM) e, a partir destes resultados, a composição em triacilgliceróis (TAGs) foi estimada. Foram determinadas as propriedades físico-químicas dos TAGs pelo método de contribuição de grupos. Nas condições de P e T estudadas, os maiores rendimentos do óleo de grãos de café verde, 7,58% e 7,60%, foram obtidos nas condições de 70 °C e 300 bar e 80 °C e 350 bar, respectivamente. Normalmente o rendimento do óleo aumentou com o aumento da temperatura, com exceção das condições de 80 °C e 300 bar e 70 °C e 350 bar. O aumento do rendimento com a temperatura refletenos dados experimentais da solubilidade (0,0099 a 0,026 g/gCO2) que aumentou com a temperatura a 300 e 350 bar para o método estático e para o método dinâmico a 350 bar (0,0058 a 0,0065 g/gCO2). Um comportamento distinto ocorreu com a medida de solubilidade pelo método dinâmico a 300 bar. Neste caso a solubilidade diminuiu com o aumento da temperatura. Para a maioria das condições de P e T estudadas, o comportamento da solubilidade foi semelhante em função destas variáveis, o mesmo para os métodos estático e dinâmico, no entanto com ordens de grandezas distintas. As condições de extração não influenciaram na composição dos ácidos graxos no óleo nem na predição dos TAGs presentes. Os TAGs apresentaram variações entre número de carbonos (C50 a C58). As propriedades físico-químicas dos seis principais TAGs presentes no óleo de grãos de café verde (PSL, PLL, PLP, PLO, PLA e POP), temperatura do ponto de ebulição normal (Tb), temperatura crítica (Tc), pressão crítica (Pc) e fator acêntrico () foram estimadas por métodos de contribuição de grupos. Estas variáveis são dados de entrada para a predição do equilíbrio de fases entre o óleo de grãos de café verde, representadopela mistura dos seis TAGs em maior concentração neste óleo, e o CO2 supercrítico. Os valores de Tb dos TAGs variaram de 821,52 a 844,50 K, os valores de Tc de 909,12 a 930,02 K, os valores de Pc de 5,0115 a 4,7221 bar e o de 1,5704 a 1,7452. Os dados de propriedades físicas e da solubilidade convertida em fração molar foram usados para predizer os parâmetros de interação binária da regra de mistura clássica de van der Waals entre cada TAG e o CO2 supercrítico, já que estes parâmetros também são dados de entrada para a modelagem termodinâmica que emprega a EDE de Peng-Robinson. No entanto, o programa não rodou, não sendo possível este cálculo, nem tão pouco a predição do equilíbrio de fases. Os dados experimentais da solubilidade do óleo de grãos de café verde em CO2 supercrítico determinados pelos métodos estático e dinâmico indicou que àqueles determinados pelo método estático são mais precisos e confiáveis.

The objective of this study was to experimentally measure the solubility of green coffee oil in supercritical carbon dioxide under predetermined pressure (P) and temperature (T) conditions and, from the experimental data, establish thermodynamic models that use the Peng-Robinson equation of state (EOS) and the classic mixing rule of van der Waals to predict phase equilibrium. The oil was obtained from ground green coffee beans (Coffea Arabica L.) cultivar (cv.) Yellow Catuaí (dm of 0.8409 mm) using supercritical CO2 under temperatures of 40, 50, 60, 70 and 80 °C and pressures of 300 and 350 bar. The solubility was measured by dynamic and static methods under the same conditions. The fatty acid profile was determined by gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS) and, from these results, the composition of triacylglycerols (TAGs) was estimated. Physicochemical properties of TAGs were determined by the group contribution method. In the studied conditions of P and T, higher yields of green coffee beans oil, 7.58% and 7.60%, were obtained at 70 °C and 300 bar and 80 °C and 350 bar, respectively. Normally, the oil yield increased with increasing temperatures, except for the conditions of 80 °C and 300 bar and 70 °C and 350 bar. The increase of yield with temperature reflects in the experimental solubility data (from 0.0099 to 0.026 g/g CO2), which, also increased with T at 300 and 350 bar for the static method and, for the dynamic method, at 350 bar (from 0.0058 to 0.0065 g/gCO2). A different behavior occurred with the solubility measured by dynamic method at 300 bar. In this case, the solubility decreased with increasing temperature. For most of the P and T conditions studied, the solubility behavior was similar in function of these variables, the same for static and dynamic methods, but with different magnitude orders. The extraction conditions did not affect the composition of fatty acids in the oil and nor the TAGs prediction. The TAGs showed variations between carbon numbers (from C50 to C58). The physicochemical properties of the six major TAGs present in green coffee bean oil (PSL, PLL, PLP, PLO, PLA and POP), boiling temperature (Tb), critical temperature (Tc), critical pressure (Pc) and acentric factor () were estimated by group contribution methods. These are input variables for the prediction for the phase equilibrium between the green coffee oil, represented by the mixture of the six TAGs in higher concentration in this oil, and supercritical CO2. The Tb values of TAG ranged from 821.52 to 844.50 K, Tc values from 909.12 to 930.02 K, Pc values from 5.0115 to 4.7221 bar and from 1, 5704 to 1.7452. Thedata of physical properties and solubility converted to mole fraction were used to predict the binary interaction parameters of the classic mixing rule of van der Waals between each TAG and supercritical CO2, since these are also input parameters for the thermodynamic modeling that use Peng-Robinson EOS. However, the program did not run and this calculation was not possible, nor the prediction for the phase equilibrium. The experimental data on the solubility of the green coffee beans oil in supercritical CO2 determined by static and dynamic methods indicated that those determined by the static method are more accurate and reliable.

Screening mitosporic fungi for organochlorides degradation

Fifty-five isolates of filamentous fungi were studied regarding their ability to decolorize Remazol brilliant blue R dye. The fungi were isolated from soil in the Baixada Santista region, which is contaminated with industrial residues containing a mixture of organochlorine compounds, mainly hexachlorobenzene. The fungi were grown in liquid malt extract medium with 0.02% of dye and shaken at 200 rpm for 14 days at 28 ± 2ºC. Two types of behavior regarding the dye were observed: adsorption and degradation. Eupenicillium baarnenseSsp1951 and Ssp1952 and Eupenicilliumcrustaceum SSP1953 presented high RBBR decolorization and were then analyzed regarding their ability to degrade 14C-hexachlobenzene (4138.31 mg HCB per kg soil) during a 56 days culture at 28 ± 2ºC. Eupenicillium crustaceum SSP1953 was able to reduce n-hexane soluble 14C-compounds (24.6%) and to form non-extractable 14C-residues (20.5%). The same behavior was also observed in the two E. baarnense strains (Ssp1951 and Ssp1952) but the percentages were lower than those obtained for Eupenicilliumcrustaceum. The main action of Eupenicillium spp on HCB is to transform it into non-extractable 14C-residues as confirmed by the gas chromatography results.

Cinqüenta e cinco isolados de fungos filamentosos foram avaliados quanto a capacidade de descolorir o corante remazol brilliant blue R. Estes fungos foram isolados de solos da Região da Baixada Santista contaminados com resíduos industriais contendo uma mistura de organoclorados, principalmente hexaclorobenzeno. O crescimento dos fungos foi realizado em meio líquido de extrato de malte contendo 0,02% do corante, sob agitação de 200 rpm, durante 14 dias a 28ºC ± 2. Foi possível verificar, entre os fungos avaliados, dois comportamentos em relação ao corante: adsorção e degradação. Eupenicillium baarnense SSp1951 e sSp1952 e Eupenicilliumcrustaceum SSP1953 apresentaram altas porcentagens de descoloração do RBBR. Estes fungos foram, então, avaliados quanto a sua capacidade de degradar 14C-hexaclorobenzeno (4138,31 mg de hexaclorobenzeno kg-1 de solo) durante 56 dias a 28ºC ± 2. Eupenicillium crustaceum SSP1953 foi capaz de reduzir em 24,6% os 14C-compostos solúveis em n-hexano e formar 20,5% de 14C-resíduos não extraíveis. As duas linhagens de E. baarnense (Ssp1951 e Ssp1952) também apresentaram o mesmo comportamento, porém com porcentagens inferiores à observada para Eupenicillium crustaceum. A principal ação de Eupenicillium spp sobre hexaclorobenzeno foi transformá-lo em 14C-resíduos não extraíveis, como comprovaram os resultados da cromatografia gasosa.

Phytochemical investigation of dichloromethanic fraction on Ocimum gratissimum L. extract / Estudo químico da fração diclorometânica do extrato de Ocimum gratissimum L

Previous studies showed that ethanolic extract of Ocimum gratissimum inhibited growth of Penicillium chrysogenum, Rhizoctonia sp, Aspergillus niger and Alternaria sp, isolated from tomato and carrot. The aim of this study was to identify the chemical constituents of Ocimum gratissim. Aerial parts of the plant were treated with hexane-dichloromethane-ethanol mixture (1:3:1) at room temperature. The obtained extract was chromatographed on silica gel column eluted with hexane, dichloromethane and ethanol. Fractions eluted with dichloromethane were rechromatographed on a column of silica gel to yield alyphatic hydrocarbon mixture (C31, C33, C34 e C35), eugenol, caryophyllene oxide and a mixture of stigmasterol and sitosterol. The structures of the compounds were deduced by spectral data analysis and by comparison with literature values. Recent studies showed that eugenol is probably one of the responsibles for antifungal activity of O. gratissimum.

Ensaios anteriores de atividade antifúngica do extrato etanólico de Ocimum gratissimum, utilizando a técnica de difusão em meio sólido, evidenciaram a inibição do crescimento de Penicillium chrysogenum, Rhizoctonia sp, Aspergillus niger e de duas espécies de Alternaria sp isoladas de tomate e de cenoura. O objetivo deste trabalho foi identificar os possíveis constituintes químicos responsáveis pela atividade antifúngica da planta, por meio de estudo químico do extrato hexano-diclorometano-etanol (1:3:1) das partes aéreas de O. gratissimum. O extrato foi cromatografado em coluna de sílica gel, eluída com hexano, diclorometano e etanol. A purificação em coluna cromatográfica de sílica gel das frações eluídas com diclorometano (5,9g) resultou na obtenção de quatro constituintes: uma mistura de hidrocarbonetos saturados de cadeia longa (C31, C33, C34 e C35), eugenol, óxido de cariofileno e uma mistura de estigmasterolsitosterol. Os constituintes foram identificados através das análises por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas e das espectrometrias no infravermelho, de ressonância magnética nuclear de 1H e de 13C e comparação com dados espectrais da literatura. Entre os constituintes isolados, concluiuse que o eugenol é um dos prováveis responsáveis pela atividade antifúngica de O. gratissimum, pois registros da literatura comprovaram a atividade deste constituin

Phytochemical investigation of dichloromethanic fraction on Ocimum gratissimum L. extract / Estudo químico da fração diclorometânica do extrato de Ocimum gratissimum L.

Previous studies showed that ethanolic extract of Ocimum gratissimum inhibited growth of Penicillium chrysogenum, Rhizoctonia sp, Aspergillus niger and Alternaria sp, isolated from tomato and carrot. The aim of this study was to identify the chemical constituents of Ocimum gratissim. Aerial parts of the plant were treated with hexane-dichloromethane-ethanol mixture (1:3:1) at room temperature. The obtained extract was chromatographed on silica gel column eluted with hexane, dichloromethane and ethanol. Fractions eluted with dichloromethane were rechromatographed on a column of silica gel to yield alyphatic hydrocarbon mixture (C31, C33, C34 e C35), eugenol, caryophyllene oxide and a mixture of stigmasterol and sitosterol. The structures of the compounds were deduced by spectral data analysis and by comparison with literature values. Recent studies showed that eugenol is probably one of the responsibles for antifungal activity of O. gratissimum.

Ensaios anteriores de atividade antifúngica do extrato etanólico de Ocimum gratissimum, utilizando a técnica de difusão em meio sólido, evidenciaram a inibição do crescimento de Penicillium chrysogenum, Rhizoctonia sp, Aspergillus niger e de duas espécies de Alternaria sp isoladas de tomate e de cenoura. O objetivo deste trabalho foi identificar os possíveis constituintes químicos responsáveis pela atividade antifúngica da planta, por meio de estudo químico do extrato hexano-diclorometano-etanol (1:3:1) das partes aéreas de O. gratissimum. O extrato foi cromatografado em coluna de sílica gel, eluída com hexano, diclorometano e etanol. A purificação em coluna cromatográfica de sílica gel das frações eluídas com diclorometano (5,9g) resultou na obtenção de quatro constituintes: uma mistura de hidrocarbonetos saturados de cadeia longa (C31, C33, C34 e C35), eugenol, óxido de cariofileno e uma mistura de estigmasterolsitosterol. Os constituintes foram identificados através das análises por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas e das espectrometrias no infravermelho, de ressonância magnética nuclear de 1H e de 13C e comparação com dados espectrais da literatura. Entre os constituintes isolados, concluiuse que o eugenol é um dos prováveis responsáveis pela atividade antifúngica de O. gratissimum, pois registros da literatura comprovaram a atividade deste constituin

Saturated fatty acids in foodstuffs: comparison of procedures in gas chromatographic analysis / Ácidos graxos saturados em produtos alimentícios: comparação de procedimentos na análise por cromatografia gasosa

The present paper describes the data observed in comparing procedures for determining saturated fatty acids for nutritional labeling by GC/FID. Two procedures to prepare the fatty acids methyl esters [a cold base-catalyzed with KOH 0,2 molL-1 methanolic, and a base and acid - combined procedure (Hartman and Lago)] were compared. Also, two methods were evaluated for calculating the fatty acid concentration, expressed in grams per 100 grams of food (by means of internal standard, and by normalization of area multiplied by theoretical conversion factors). Six samples were analyzed: egg, two types of cookies, soya extract, cappuccino powder, and coffee powder. Variance analysis and Tukey test (p 0,05%) were applied. No significant difference was observed between the methylation procedures. On the other hand, significant difference was observed in calculating both method for determining the saturated fatty acids in cappuccino and coffee samples. The results point out that it is necessary to use internal standard to quantify the fatty acids in foodstuffs, and further studies should be done to evaluate the use of theoretical factors to calculate fatty acids composition in foodstuffs containing several ingredients.

No presente trabalho são apresentados os resultados obtidos da comparação de metodologias adotadasnas análises de ácidos graxos saturados em laboratórios brasileiros. Foram comparados dois procedimentosde preparação de ésteres metílicos de ácidos graxos a partir dos lipídios extraídos (IUPAC 2301 e Hartmane Lago) e dois métodos de cálculo para expressar a concentração de ácidos graxos saturados em g/100g deamostra (cálculo com padrão interno ou com normalização de área multiplicada por fator de conversãoteórico). As análises foram feitas por cromatografia gasosa. Foram analisadas seis amostras, sendo: ovo,biscoito recheado, biscoito amanteigado, extrato de soja, mistura para cappuccino e café. Para avaliar asdiferenças entre os procedimentos foi aplicada a ANOVA, e no caso de valores com p 0,05 foi utilizado oteste de Tukey (nível de confiança de 95%). Comparando os processos de preparação de ésteres metílicosnão foi observada diferença significativa entre eles para todas as matrizes (considerando mesmo métodode cálculo); com relação ao método de cálculo observou-se diferenças estatisticamente significativas paraas amostras de café e cappuccino. Os resultados mostram que é necessária a utilização de um padrãointerno para determinação quantitativa dos ácidos graxos nos alimentos e que estudos mais abrangentesdevem feitos para verificar a aplicação dos fatores teóricos nos cál