Rhabditis spp., in the Espírito Santo, State of Brazil and evaluation of biological control / Rhabditis spp., no Espírito Santo, estado do Brasil e avaliação do controle biológico

The objectives of this study were to describe occurrences of Rhabditis spp. causing parasitic otitis in dairy cattle of Gir breed in the state of Espírito Santo, southeastern Brazil, and to evaluate the biological control of this nematode using the nematophagous fungi Duddingtonia flagrans (AC001) and Monacrosporium thaumasium (NF34). After nematode detection and collection, three groups were formed: two groups that were treated, respectively, with the fungal isolates; and a control group, without fungus. The treatments were as follows: (a) Petri dishes containing the culture medium 2% water agar (WA) + 250 nematodes + AC001; (b) Petri dishes containing 2% WA + 250 nematodes + NF34; and (c) Petri dishes containing only 2% WA + 250 nematodes. After seven days at 27 °C the treatments with fungi were able to capture and destroy the nematodes, with percentages of 82.0% (AC001) and 39.0% (NF34) in relation to the control group. The results demonstrate the occurrence of Rhabditis spp. after animals physical examination and that there was efficacy of the in vitro predatory activity of both fungal isolates. Thus, these results are important because they can assist in future in vivo control of this nematode in cattle.(AU)

Os objetivos neste estudo foram descrever ocorrências do nematódeo Rhabditis spp., causando otite parasitária em bovinos leiteiros da raça Gir no estado do Espírito Santo, sudeste do Brasil, e avaliar o controle biológico desse nematódeo utilizando os fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001) e Monacrosporium thaumasium (NF34). Após a detecção e coleta dos nematódeos, três grupos foram formados: dois grupos que foram tratados com os isolados fúngicos, respectivamente; e um grupo controle, sem fungos. Os tratamentos foram os seguintes: (a) placas de Petri contendo o meio de cultura 2% ágar de água (WA) + 250 nematoides + AC001; (b) placas de Petri contendo 2% de WA + 250 nematoides + NF34; e (c) placas de contendo apenas 2% de nematódeos WA + 250. Após sete dias a 27 °C os tratamentos com fungos foram capazes de capturar e destruir os nematódeos, com porcentagens de 82,0% (AC001) e 39,0% (NF34) em relação ao grupo controle. Os resultados demonstram a ocorrência de Rhabditis spp., no Estado do Espírito Santo e a eficácia da atividade predatória in vitro dos isolados fúngicos utilizados. Assim, esses resultados são importantes, pois podem auxiliar no controle alternativo in vivo de Rhabditis spp. em bovinos com otite parasitária.(AU)

Influence of storage time of Monacrosporium thaumasium pellets on the predation of infective larvae of sheep gastrointestinal nematodes / Influência do tempo de armazenamento de peletes de Monacrosporuim thaumasium na predação de larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos

The objective of this study was to evaluate the influence of the storage time of Monacrosporium thaumasium pellets on the predation of infective larvae of sheep gastrointestinal nematodes in the semi-arid area of Paraíba, Northeast Brazil. 24 sheep with zero in the count of eggs per gram of faeces – EPG, were divided into four experimental groups: Group I, 3 g/10 kg live weight M. thaumasium pellets - 36 months of storage, single dose; Group II, 3 g/10 kg live weight M. thaumasium newly produced, single dose; Group III, 3 g/10 kg live weight pellets without fungi; and Group IV (control group) did not receive pellets. Every 24 h, up to 120 h, the faeces of the animals were collected and submitted to the laboratory for analysis. Fifteen grams of faeces were weighed from each animal and five grams of expanded vermiculite were added to produce the coprocultures. Subsequently, 1000 larvae (L3) sheep trichostrongilides were added, and larval recovery was performed after 7 days. Predation of larvae in Group I (M. thaumasium - 36 months) did not differ significantly (p > 0.01) from Group II (M. thaumasium - recent), with reductions of 75% and 79%. Both groups reached peak predation to larvae at 72 h. The helminth genus most recovered in the coprocultures was Haemonchus sp. The data indicate that the 36-month stocking period of M. thaumasium pellets in alginate matrix did not influence the efficacy of predation of infective larvae of sheep gastrointestinal nematodes, with fungal activity in the faeces up to 96 hours after administration to the animals.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do tempo de armazenamento de péletes de Monacrosporium thaumasium na predação de larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos no semiárido da Paraíba, Nordeste do Brasil. 24 ovelhas, com contagem de ovos por grama de fezes – OPG, negativo, foram divididas em quatro grupos experimentais: Grupo I, 3 g / 10 kg de peso vivo, péletes de M. thaumasium - 36 meses de armazenamento, dose única; Grupo II, 3 g / 10 kg de peso vivo M. thaumasium recém-produzido, dose única; Grupo III, 3 g / 10 kg de peso vivo sem fungos; e Grupo IV (grupo controle), não recebeu péletes. A cada 24 h, até 120 h, as fezes dos animais foram coletadas e submetidas ao laboratório para análise. Quinze gramas de fezes foram pesados de cada animal e cinco gramas de vermiculita expandida foram adicionados para produzir as coproculturas. Subsequentemente, 1000 larvas (L3) de tricostrongilídeos de ovinos foram adicionadas e a recuperação larval foi realizada após sete dias. A predação de larvas no Grupo I (M. thaumasium - 36 meses) não diferiu significativamente (p> 0,01) do Grupo II (M. thaumasium - recente), com reduções de 75% e 79%. Ambos os grupos atingiram o pico de predação para larvas em 72 h. O gênero helminto mais recuperado nas coproculturas foi Haemonchus sp. Os dados indicam que o período de estocagem de 36 meses de péletes de M. thaumasium na matriz de alginato não influenciou a eficácia da predação de larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos, com atividade fúngica nas fezes até 96 horas após a administração aos animais.

Influence of storage time of Monacrosporium thaumasium pellets on the predation of infective larvae of sheep gastrointestinal nematodes / Influência do tempo de armazenamento de peletes de Monacrosporuim thaumasium na predação de larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos

The objective of this study was to evaluate the influence of the storage time of Monacrosporium thaumasium pellets on the predation of infective larvae of sheep gastrointestinal nematodes in the semi-arid area of Paraíba, Northeast Brazil. 24 sheep with zero in the count of eggs per gram of faeces EPG, were divided into four experimental groups: Group I, 3 g/10 kg live weight M. thaumasium pellets - 36 months of storage, single dose; Group II, 3 g/10 kg live weight M. thaumasium newly produced, single dose; Group III, 3 g/10 kg live weight pellets without fungi; and Group IV (control group) did not receive pellets. Every 24 h, up to 120 h, the faeces of the animals were collected and submitted to the laboratory for analysis. Fifteen grams of faeces were weighed from each animal and five grams of expanded vermiculite were added to produce the coprocultures. Subsequently, 1000 larvae (L3) sheep trichostrongilides were added, and larval recovery was performed after 7 days. Predation of larvae in Group I (M. thaumasium - 36 months) did not differ significantly (p > 0.01) from Group II (M. thaumasium - recent), with reductions of 75% and 79%. Both groups reached peak predation to larvae at 72 h. The helminth genus most recovered in the coprocultures was Haemonchus sp. The data indicate that the 36-month stocking period of M. thaumasium pellets in alginate matrix did not influence the efficacy of predation of infective larvae of sheep gastrointestinal nematodes, with fungal activity in the faeces up to 96 hours after administration to the animals.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do tempo de armazenamento de péletes de Monacrosporium thaumasium na predação de larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos no semiárido da Paraíba, Nordeste do Brasil. 24 ovelhas, com contagem de ovos por grama de fezes OPG, negativo, foram divididas em quatro grupos experimentais: Grupo I, 3 g / 10 kg de peso vivo, péletes de M. thaumasium - 36 meses de armazenamento, dose única; Grupo II, 3 g / 10 kg de peso vivo M. thaumasium recém-produzido, dose única; Grupo III, 3 g / 10 kg de peso vivo sem fungos; e Grupo IV (grupo controle), não recebeu péletes. A cada 24 h, até 120 h, as fezes dos animais foram coletadas e submetidas ao laboratório para análise. Quinze gramas de fezes foram pesados de cada animal e cinco gramas de vermiculita expandida foram adicionados para produzir as coproculturas. Subsequentemente, 1000 larvas (L3) de tricostrongilídeos de ovinos foram adicionadas e a recuperação larval foi realizada após sete dias. A predação de larvas no Grupo I (M. thaumasium - 36 meses) não diferiu significativamente (p> 0,01) do Grupo II (M. thaumasium - recente), com reduções de 75% e 79%. Ambos os grupos atingiram o pico de predação para larvas em 72 h. O gênero helminto mais recuperado nas coproculturas foi Haemonchus sp. Os dados indicam que o período de estocagem de 36 meses de péletes de M. thaumasium na matriz de alginato não influenciou a eficácia da predação de larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos, com atividade fúngica nas fezes até 96 horas após a administração aos animais.(AU)

Nematicide activity of microfungi (Orbiliales, Orbiliaceae) after transit through gastrointenstinal tract of Gallus gallus domesticus / Atividade nematiciada de microfungos (“Orbiliales, Orbiliaceae”) após trânsito gastrointestinal de Gallus gallus domesticus

Parasites are common in intensive or organics systems destined for chickens, which is more conducive to the emergence of gastrointestinal parasites, favored by direct contact with soil and other organisms. The growing demand for animal protein stimulates an expansion of production systems, increasing the stocking density. Outdoor poultry breeding systems (organic or not) that enable lower population density and higher animal welfare does not exclude these animals the presence of environmental pathogens. The control of gastrointestinal helminthosis in non-organic intensive and extensive systems is accomplished by administering anthelmintics with high cost and results unsatisfactory due to the misuse of drugs with consequent selection parasite strains resistant to chemical bases. This problem stimulate research into alternative control measures. Nematophagous fungi are used by its enzymatic action in controlled conditions and how environmental biocontrolers of larvae of gastrointestinal nematodes of livestock. This study evaluated the capacity of conidia/chlamydospores of nematophagous fungi as Duddingtonia flagrans(AC001 and CG722) and Monacrosporium thaumasium (NF34A) for cross the gastrointestinal tract of domestic chickens (Gallus gallus domesticus), and yours germination after traffic and predatory activity “in vitro” on larvae of Panagrellus spp. Fungi conidia/chlamydospores was identified in feces of chickens at times of 6, 12 and 24 hours after administration and spores viability was found after observing the germination, mycelial growth, followed by production of traps, capture and death of Panagrellus spp larvae in feces. Fungi Nematophagous are alternative control measures, efficient and innovative technology for the biological control of helminth parasites of chickens.(AU)

Parasitas são comuns em sistemas intensivos avícolas ou orgânicos, mais propício para o surgimento de parasitas gastrointestinais, favorecido pelo contato direto dos animais com o solo e outros organismos. O aumento da demanda por proteína animal estimula a expansão dos sistemas de produção com aumento da densidade animal. Sistemas de criação livres (orgânicos ou não) com baixa densidade e alto padrão tecnológico não excluem estes animais do contato com patógenos ambientais. O controle das helmintoses gastrointestinais em sistemas extensivos ou intensivos não orgânicos é realizado pela administração de anti helmínticos com elevado custo e resultados insatisfatórios devido ao mau uso dos produtos com consequente seleção de cepas parasitárias resistentes às bases químicas. Este problema estimula a pesquisa de medidas alternativas de controle. Fungos nematófagos são utilizados por sua atividade enzimática em condições controladas e como biocontroladores de larvas de namatóides gastrointestinais em animais. Este estudo avaliou a capacidade de conídios/clamidósporos dos fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001 e CG722) e Monacrosporium thaumasium (NF34A) passar pelo trato gastrointestinal de galinhas domésticas (Gallus gallus domesticus), a germinação após passagem e atividade predatória “in vitro” sobre larvas de Panagrellus spp. Conídios/clamidósporos fúngicos foram identificados nas fezes das aves nos tempos 6, 12 e 24 horas após administração e a viabilidade dos esporos foi contatada após germinação, crescimento micelial, seguido pela produção de armadilhas, captura e destruição de larvas de Panagrellus spp. nas fezes. Fungos nematófagos são medidas alternativas de controle, uma eficiente tecnologia e inovadora para o controle biológico de helmintos parasitas de aves.(AU)

Nematicide activity of microfungi (Orbiliales, Orbiliaceae) after transit through gastrointenstinal tract of Gallus gallus domesticus / Atividade nematiciada de microfungos (“Orbiliales, Orbiliaceae”) após trânsito gastrointestinal de Gallus gallus domesticus

Parasites are common in intensive or organics systems destined for chickens, which is more conducive to the emergence of gastrointestinal parasites, favored by direct contact with soil and other organisms. The growing demand for animal protein stimulates an expansion of production systems, increasing the stocking density. Outdoor poultry breeding systems (organic or not) that enable lower population density and higher animal welfare does not exclude these animals the presence of environmental pathogens. The control of gastrointestinal helminthosis in non-organic intensive and extensive systems is accomplished by administering anthelmintics with high cost and results unsatisfactory due to the misuse of drugs with consequent selection parasite strains resistant to chemical bases. This problem stimulate research into alternative control measures. Nematophagous fungi are used by its enzymatic action in controlled conditions and how environmental biocontrolers of larvae of gastrointestinal nematodes of livestock. This study evaluated the capacity of conidia/chlamydospores of nematophagous fungi as Duddingtonia flagrans(AC001 and CG722) and Monacrosporium thaumasium (NF34A) for cross the gastrointestinal tract of domestic chickens (Gallus gallus domesticus), and yours germination after traffic and predatory activity “in vitro” on larvae of Panagrellus spp. Fungi conidia/chlamydospores was identified in feces of chickens at times of 6, 12 and 24 hours after administration and spores viability was found after observing the germination, mycelial growth, followed by production of traps, capture and death of Panagrellus spp larvae in feces. Fungi Nematophagous are alternative control measures, efficient and innovative technology for the biological control of helminth parasites of chickens.

Parasitas são comuns em sistemas intensivos avícolas ou orgânicos, mais propício para o surgimento de parasitas gastrointestinais, favorecido pelo contato direto dos animais com o solo e outros organismos. O aumento da demanda por proteína animal estimula a expansão dos sistemas de produção com aumento da densidade animal. Sistemas de criação livres (orgânicos ou não) com baixa densidade e alto padrão tecnológico não excluem estes animais do contato com patógenos ambientais. O controle das helmintoses gastrointestinais em sistemas extensivos ou intensivos não orgânicos é realizado pela administração de anti helmínticos com elevado custo e resultados insatisfatórios devido ao mau uso dos produtos com consequente seleção de cepas parasitárias resistentes às bases químicas. Este problema estimula a pesquisa de medidas alternativas de controle. Fungos nematófagos são utilizados por sua atividade enzimática em condições controladas e como biocontroladores de larvas de namatóides gastrointestinais em animais. Este estudo avaliou a capacidade de conídios/clamidósporos dos fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001 e CG722) e Monacrosporium thaumasium (NF34A) passar pelo trato gastrointestinal de galinhas domésticas (Gallus gallus domesticus), a germinação após passagem e atividade predatória “in vitro” sobre larvas de Panagrellus spp. Conídios/clamidósporos fúngicos foram identificados nas fezes das aves nos tempos 6, 12 e 24 horas após administração e a viabilidade dos esporos foi contatada após germinação, crescimento micelial, seguido pela produção de armadilhas, captura e destruição de larvas de Panagrellus spp. nas fezes. Fungos nematófagos são medidas alternativas de controle, uma eficiente tecnologia e inovadora para o controle biológico de helmintos parasitas de aves.

Producción de conidios y clamidosporas de los hongos Duddingtonia flagrans y Monacrosporium thaumasium en diferentes medios sólidos / Produção de conídios e clamidósporos de Dunddingtonia flagrans e Monacrosporium thaumasium em diferentes meios sólidos / Production of conidia and clamidospores of Duddingtonia flagrans and Monacrosporium thaumasium fungi in different solid media

Las especies Duddingtonia flagrans y Monacrosporium thaumasium son micro-hongos considerados promisorios agentes del control biológico de parásitos. Bajo condiciones adversas como la falta de nutrientes, estos hongos producen esporas capaces de sobrevivieren después de pasar por el tracto gastrointestinal de los animales. La formación de estas estructuras es una característica deseable ya que promueve la sobrevivencia y la diseminación de los hongos para propósitos de biocontrol. El objetivo de este estudio fue evaluar la producción de esporas de dos especies de hongos nematófagos D. flagrans (aislados AC001 y CG722) y M. thaumasium (NF34A). Estos fueron cultivados en los subproductos agroindustriales, que tenían el intento de identificar el mejor medio para uso en programas de biocontrol de nematodos. Diferentes volúmenes (10, 15 y 20 mL) de masa micelial fueron utilizados como inóculos iniciales y adicionados a 100 gramos de medios de crecimientos sólidos (sémola de arroz - QA; sémola de maíz - QM; bagazo de caña - BC; paja de arroz - PA y cascara de café - CC) y mantenidos a 25°C en la obscuridad para evaluar la producción de esporas. Los aislados AC001 y CG722 mostraron las mejores producciones en el medio de la QA (p<0,05). El volumen de 20 mL de masa micelial utilizado como inóculo inicial proporcionó una mayor recuperación de esporas. El aislado NF34A presentó una baja o nula producción de estructuras reproductivas en los diferentes volúmenes y medios de crecimientos utilizados. La mejor producción de esporas se obtuvo utilizando subproductos de la agroindustria con mayor densidad proteica y energética.(AU)

As espécies Duddingtonia flagrans e Monacrosporium thaumasium são microfungos considerados promissores agentes de controle biológico de parasitos. Sob condições adversas, como a falta de nutrientes, estes fungos produzem esporos capazes de sobreviverem após a passagem pelo trato gastrintestinal dos animais. A formação destas estruturas é uma característica desejável, já que promove a sobrevivência fúngica e a sua disseminação para fins de biocontrole. Este estudo teve como objetivo avaliar a produção de esporos das espécies de fungos nematófagos D. flagrans (isolados AC001 e CG722) e M. thaumasium (NF34A). Estes foram cultivados em subprodutos agroindustriais, a fim de identificar o melhor meio para uso em programas de controle biológico de nematoides. Diferentes volumes de massa micelial (10, 15 e 20 mL) foram utilizados como inóculo inicial e adicionados sobre 100 gramas dos meios de crescimento sólidos (quirera de arroz - QA; quirera de milho - QM; bagaço de cana - BC; palha de arroz - PA e casca de café - CC) e mantidos a 25°C ao abrigo da luz para avaliar a produção de esporos. Os isolados AC001 e CG722 mostraram as melhores produções no meio QA (p<0,05). O volume de 20 mL de massa micelial usado como inóculo inicial permitiu maior recuperação de esporos. O isolado NF34A apresentou produção baixa ou nula de estruturas reprodutivas nos diferentes volumes e meios de crescimento utilizados. A melhor produção de esporos foi obtida nos subprodutos agroindustriais com maior densidade proteica/energética.(AU)

Producción de conidios y clamidosporas de los hongos Duddingtonia flagrans y Monacrosporium thaumasium en diferentes medios sólidos

RESUMEN Las especies Duddingtonia flagrans y Monacrosporium thaumasium son micro-hongos considerados promisorios agentes del control biológico de parásitos. Bajo condiciones adversas como la falta de nutrientes, estos hongos producen esporas capaces de sobrevivieren después de pasar por el tracto gastrointestinal de los animales. La formación de estas estructuras es una característica deseable ya que promueve la sobrevivencia y la diseminación de los hongos para propósitos de biocontrol. El objetivo de este estudio fue evaluar la producción de esporas de dos especies de hongos nematófagos D. flagrans (aislados AC001 y CG722) y M. thaumasium (NF34A). Estos fueron cultivados en los subproductos agroindustriales, que tenían el intento de identificar el mejor medio para uso en programas de biocontrol de nematodos. Diferentes volúmenes (10, 15 y 20 mL) de masa micelial fueron utilizados como inóculos iniciales y adicionados a 100 gramos de medios de crecimientos sólidos (sémola de arroz - QA; sémola de maíz - QM; bagazo de caña - BC; paja de arroz - PA y cascara de café - CC) y mantenidos a 25°C en la obscuridad para evaluar la producción de esporas. Los aislados AC001 y CG722 mostraron las mejores producciones en el medio de la QA (p 0,05). El volumen de 20 mL de masa micelial utilizado como inóculo inicial proporcionó una mayor recuperación de esporas. El aislado NF34A presentó una baja o nula producción de estructuras reproductivas en los diferentes volúmenes y medios de crecimientos utilizados. La mejor producción de esporas se obtuvo utilizando subproductos de la agroindustria con mayor densidad proteica y energética.

RESUMO As espécies Duddingtonia flagrans e Monacrosporium thaumasium são microfungos considerados promissores agentes de controle biológico de parasitos. Sob condições adversas, como a falta de nutrientes, estes fungos produzem esporos capazes de sobreviverem após a passagem pelo trato gastrintestinal dos animais. A formação destas estruturas é uma característica desejável, já que promove a sobrevivência fúngica e a sua disseminação para fins de biocontrole. Este estudo teve como objetivo avaliar a produção de esporos das espécies de fungos nematófagos D. flagrans (isolados AC001 e CG722) e M. thaumasium (NF34A). Estes foram cultivados em subprodutos agroindustriais, a fim de identificar o melhor meio para uso em programas de controle biológico de nematoides. Diferentes volumes de massa micelial (10, 15 e 20 mL) foram utilizados como inóculo inicial e adicionados sobre 100 gramas dos meios de crescimento sólidos (quirera de arroz - QA; quirera de milho - QM; bagaço de cana - BC; palha de arroz - PA e casca de café - CC) e mantidos a 25°C ao abrigo da luz para avaliar a produção de esporos. Os isolados AC001 e CG722 mostraram as melhores produções no meio QA (p 0,05). O volume de 20 mL de massa micelial usado como inóculo inicial permitiu maior recuperação de esporos. O isolado NF34A apresentou produção baixa ou nula de estruturas reprodutivas nos diferentes volumes e meios de crescimento utilizados. A melhor produção de esporos foi obtida nos subprodutos agroindustriais com maior densidade proteica/energética.

Producción de conidios y clamidosporas de los hongos Duddingtonia flagrans y Monacrosporium thaumasium en diferentes medios sólidos

RESUMEN Las especies Duddingtonia flagrans y Monacrosporium thaumasium son micro-hongos considerados promisorios agentes del control biológico de parásitos. Bajo condiciones adversas como la falta de nutrientes, estos hongos producen esporas capaces de sobrevivieren después de pasar por el tracto gastrointestinal de los animales. La formación de estas estructuras es una característica deseable ya que promueve la sobrevivencia y la diseminación de los hongos para propósitos de biocontrol. El objetivo de este estudio fue evaluar la producción de esporas de dos especies de hongos nematófagos D. flagrans (aislados AC001 y CG722) y M. thaumasium (NF34A). Estos fueron cultivados en los subproductos agroindustriales, que tenían el intento de identificar el mejor medio para uso en programas de biocontrol de nematodos. Diferentes volúmenes (10, 15 y 20 mL) de masa micelial fueron utilizados como inóculos iniciales y adicionados a 100 gramos de medios de crecimientos sólidos (sémola de arroz - QA; sémola de maíz - QM; bagazo de caña - BC; paja de arroz - PA y cascara de café - CC) y mantenidos a 25°C en la obscuridad para evaluar la producción de esporas. Los aislados AC001 y CG722 mostraron las mejores producciones en el medio de la QA (p 0,05). El volumen de 20 mL de masa micelial utilizado como inóculo inicial proporcionó una mayor recuperación de esporas. El aislado NF34A presentó una baja o nula producción de estructuras reproductivas en los diferentes volúmenes y medios de crecimientos utilizados. La mejor producción de esporas se obtuvo utilizando subproductos de la agroindustria con mayor densidad proteica y energética.

RESUMO As espécies Duddingtonia flagrans e Monacrosporium thaumasium são microfungos considerados promissores agentes de controle biológico de parasitos. Sob condições adversas, como a falta de nutrientes, estes fungos produzem esporos capazes de sobreviverem após a passagem pelo trato gastrintestinal dos animais. A formação destas estruturas é uma característica desejável, já que promove a sobrevivência fúngica e a sua disseminação para fins de biocontrole. Este estudo teve como objetivo avaliar a produção de esporos das espécies de fungos nematófagos D. flagrans (isolados AC001 e CG722) e M. thaumasium (NF34A). Estes foram cultivados em subprodutos agroindustriais, a fim de identificar o melhor meio para uso em programas de controle biológico de nematoides. Diferentes volumes de massa micelial (10, 15 e 20 mL) foram utilizados como inóculo inicial e adicionados sobre 100 gramas dos meios de crescimento sólidos (quirera de arroz - QA; quirera de milho - QM; bagaço de cana - BC; palha de arroz - PA e casca de café - CC) e mantidos a 25°C ao abrigo da luz para avaliar a produção de esporos. Os isolados AC001 e CG722 mostraram as melhores produções no meio QA (p 0,05). O volume de 20 mL de massa micelial usado como inóculo inicial permitiu maior recuperação de esporos. O isolado NF34A apresentou produção baixa ou nula de estruturas reprodutivas nos diferentes volumes e meios de crescimento utilizados. A melhor produção de esporos foi obtida nos subprodutos agroindustriais com maior densidade proteica/energética.

Producción de conidios y clamidosporas de los hongos Duddingtonia flagrans y Monacrosporium thaumasium en diferentes medios sólidos / Produção de conídios e clamidósporos de Dunddingtonia flagrans e Monacrosporium thaumasium em diferentes meios sólidos

Las especies Duddingtonia flagrans y Monacrosporium thaumasium son micro-hongos considerados promisorios agentes del control biológico de parásitos. Bajo condiciones adversas como la falta de nutrientes, estos hongos producen esporas capaces de sobrevivieren después de pasar por el tracto gastrointestinal de los animales. La formación de estas estructuras es una característica deseable ya que promueve la sobrevivencia y la diseminación de los hongos para propósitos de biocontrol. El objetivo de este estudio fue evaluar la producción de esporas de dos especies de hongos nematófagos D. flagrans (aislados AC001 y CG722) y M. thaumasium (NF34A). Estos fueron cultivados en los subproductos agroindustriales, que tenían el intento de identificar el mejor medio para uso en programas de biocontrol de nematodos. Diferentes volúmenes (10, 15 y 20 mL) de masa micelial fueron utilizados como inóculos iniciales y adicionados a 100 gramos de medios de crecimientos sólidos (sémola de arroz QA; sémola de maíz QM; bagazo de caña BC; paja de arroz PA y cascara de café CC) y mantenidos a 25C en la obscuridad para evaluar la producción de esporas. Los aislados AC001 y CG722 mostraron las mejores producciones en el medio de la QA (p 0,05). El volumen de 20 mL de masa micelial utilizado como inóculo inicial proporcionó una mayor recuperación de esporas. El aislado NF34A presentó una baja o nula producción de estructuras reproductivas en los diferentes volúmenes y medios de crecimientos utilizados. La mejor producción de esporas se obtuvo utilizando subproductos de la agroindustria con mayor densidad proteica y energética.

As espécies Duddingtonia flagrans e Monacrosporium thaumasium são microfungos considerados promissores agentes de controle biológico de parasitos. Sob condições adversas, como a falta de nutrientes, estes fungos produzem esporos capazes de sobreviverem após a passagem pelo trato gastrintestinal dos animais. A formação destas estruturas é uma característica desejável, já que promove a sobrevivência fúngica e a sua disseminação para fins de biocontrole. Este estudo teve como objetivo avaliar a produção de esporos das espécies de fungos nematófagos D. flagrans (isolados AC001 e CG722) e M. thaumasium (NF34A). Estes foram cultivados em subprodutos agroindustriais, a fim de identificar o melhor meio para uso em programas de controle biológico de nematoides. Diferentes volumes de massa micelial (10, 15 e 20 mL) foram utilizados como inóculo inicial e adicionados sobre 100 gramas dos meios de crescimento sólidos (quirera de arroz QA; quirera de milho  QM; bagaço de cana BC; palha de arroz PA e casca de café  CC) e mantidos a 25C ao abrigo da luz para avaliar a produção de esporos. Os isolados AC001 e CG722 mostraram as melhores produções no meio QA (p 0,05). O volume de 20 mL de massa micelial usado como inóculo inicial permitiu maior recuperação de esporos. O isolado NF34A apresentou produção baixa ou nula de estruturas reprodutivas nos diferentes volumes e meios de crescimento utilizados. A melhor produção de esporos foi obtida nos subprodutos agroindustriais com maior densidade proteica/energética.

Producción de conidios y clamidosporas de los hongos Duddingtonia flagrans y Monacrosporium thaumasium en diferentes medios sólidos / Produção de conídios e clamidósporos de Dunddingtonia flagrans e Monacrosporium thaumasium em diferentes meios sólidos

Las especies Duddingtonia flagrans y Monacrosporium thaumasium son micro-hongos considerados promisorios agentes del control biológico de parásitos. Bajo condiciones adversas como la falta de nutrientes, estos hongos producen esporas capaces de sobrevivieren después de pasar por el tracto gastrointestinal de los animales. La formación de estas estructuras es una característica deseable ya que promueve la sobrevivencia y la diseminación de los hongos para propósitos de biocontrol. El objetivo de este estudio fue evaluar la producción de esporas de dos especies de hongos nematófagos D. flagrans (aislados AC001 y CG722) y M. thaumasium (NF34A). Estos fueron cultivados en los subproductos agroindustriales, que tenían el intento de identificar el mejor medio para uso en programas de biocontrol de nematodos. Diferentes volúmenes (10, 15 y 20 mL) de masa micelial fueron utilizados como inóculos iniciales y adicionados a 100 gramos de medios de crecimientos sólidos (sémola de arroz QA; sémola de maíz QM; bagazo de caña BC; paja de arroz PA y cascara de café CC) y mantenidos a 25C en la obscuridad para evaluar la producción de esporas. Los aislados AC001 y CG722 mostraron las mejores producciones en el medio de la QA (p 0,05). El volumen de 20 mL de masa micelial utilizado como inóculo inicial proporcionó una mayor recuperación de esporas. El aislado NF34A presentó una baja o nula producción de estructuras reproductivas en los diferentes volúmenes y medios de crecimientos utilizados. La mejor producción de esporas se obtuvo utilizando subproductos de la agroindustria con mayor densidad proteica y energética.(AU)

As espécies Duddingtonia flagrans e Monacrosporium thaumasium são microfungos considerados promissores agentes de controle biológico de parasitos. Sob condições adversas, como a falta de nutrientes, estes fungos produzem esporos capazes de sobreviverem após a passagem pelo trato gastrintestinal dos animais. A formação destas estruturas é uma característica desejável, já que promove a sobrevivência fúngica e a sua disseminação para fins de biocontrole. Este estudo teve como objetivo avaliar a produção de esporos das espécies de fungos nematófagos D. flagrans (isolados AC001 e CG722) e M. thaumasium (NF34A). Estes foram cultivados em subprodutos agroindustriais, a fim de identificar o melhor meio para uso em programas de controle biológico de nematoides. Diferentes volumes de massa micelial (10, 15 e 20 mL) foram utilizados como inóculo inicial e adicionados sobre 100 gramas dos meios de crescimento sólidos (quirera de arroz QA; quirera de milho  QM; bagaço de cana BC; palha de arroz PA e casca de café  CC) e mantidos a 25C ao abrigo da luz para avaliar a produção de esporos. Os isolados AC001 e CG722 mostraram as melhores produções no meio QA (p 0,05). O volume de 20 mL de massa micelial usado como inóculo inicial permitiu maior recuperação de esporos. O isolado NF34A apresentou produção baixa ou nula de estruturas reprodutivas nos diferentes volumes e meios de crescimento utilizados. A melhor produção de esporos foi obtida nos subprodutos agroindustriais com maior densidade proteica/energética.(AU)

UTILIZAÇÃO DOS FUNGOS Duddingtonia flagrans E Monacrosporium thaumasium NO CONTROLE DOS NEMATOIDES Rhabditis spp., E CIATOSTOMÍNEOS

As nematodioses em animais domésticos são obstáculos na saúde e na produção animal. Neste contexto, a rhabditiose e a ciatostomíase são infecções causadas por nematoides, que se comportam de maneiras distintas, mas que culminam em sérios problemas na saúde de bovinos e equídeos, respectivamente. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a utilização dos fungos Duddingtonia flagrans (AC001) e Monacrosporium thaumasium (NF34) associados ao controle químico do Rhabditis spp., e na biossíntese de nanopartículas (AgNP) no controle in vitro de ciatostomíneos. Foram realizados dois ensaios experimentais em etapas distintas: ensaio A: Uso combinado de ivermectina, dimetilsulfóxido, óleo mineral e fungos nematófagos no controle de Rhabditis spp., e ensaio B: Efeito de nanopartículas de prata (AgNP's) de D. flagrans em larvas de Ciatostomíneos (subfamília: Cyathostominae). No ensaio A foram formados 12 grupos experimentais, com oito repetições cada: G1 (nematoides + AC001); G2 (nematoides + NF34); G3 (nematoides + ivermectina 1%/controle positivo); G4 (nematoides + dimetilsulfóxido 1%/controle positivo); G5 (nematoides + óleo mineral 100%/controle positivo); G6 (nematoides + AC001 + ivermectina 1%); G7 (nematoides + NF34 + ivermectina 1%); G8 (nematoides + AC001 + óleo mineral 100%); G9 (nematoides + NF34 + óleo mineral 100%); G10 (nematoides + AC001 + dimetilsulfóxido 1%); G11 (nematoide + NF34 + dimetilsulfóxido 1%); G12 (nematoide + água destilada/controle negativo). No ensaio B foi utilizado filtrado fúngico de D. flagrans, obtido a partir de meio com baixo teor de nutrientes (LMN) e enriquecido com quitina. Para a biossíntese das AgNP, solução de AgNO3 [1:50] foi adicionada ao filtrado. A formação das AgNP D. flagrans foi confirmada por absorção óptica (UV-Vis). A microscopia eletrônica de transmissão (MET) foi utilizada para avaliar o tamanho e a monodispersão dos AgNP. Dois grupos experimentais foram formados em microtubos, com 5 repetições para cada grupo: grupo tratado (G1) e grupo controle (G2), durante um período de 24 horas. Nos microtubos do G1, foram adicionadas aproximadamente 120 L3 de ciatostomíneos e 1 mL de solução de AgNP's - D. flagrans, na concentração de 43,4 g/mL. Nos microtubos do G2, aproximadamente 120 L3 e 1 mL de água destilada. Os resultados demonstraram que, a utilização de compostos químicos associados aos conídios fúngicos foi eficiente no controle in vitro de Rhabditis spp. Por outro lado, as nanopartículas de prata de D. flagrans apresentaram atividade larvicida e percentual de redução de 43% na população de larvas de ciatostomíneos, ao final de 24 horas. Sendo assim, concluiu-se que a utilização de controle biológico foi eficiente e pode vir a ser usada como estratégia integrada no manejo sanitário de rebanhos

Nematodes in domestic animals are obstacles in animal health and production. In this context, rhabditiosis and cyiatostomiasis are infections caused by nematodes, which behave in different ways, but which culminate in serious problems in the health of cattle and horses, respectively. The objective of the present work was to evaluate the use of the fungi Duddingtonia flagrans (AC001) and Monacrosporium thaumasium (NF34) associated with the chemical control of Rhabditis spp., and in the biosynthesis of nanoparticles in the in vitro control of cyathostomins. Two experimental tests were carried out in different steps: assay A: Combined use of ivermectin, dimethyl sulfoxide, mineral oil and nematophagous fungi in the control of Rhabditis spp., and assay B: Effect of silver nanoparticles (AgNP's) of D. flagrans in larvae of Cyathostomins (subfamily: Cyathostominae). In test A, 12 experimental groups were formed, with eight repetitions each: G1 (nematodes + AC001); G2 (nematodes + NF34); G3 (nematodes + 1% ivermectin / positive control); G4 (nematodes + 1% dimethyl sulfoxide / positive control); G5 (nematodes + 100% mineral oil / positive control); G6 (nematodes + AC001 + 1% ivermectin); G7 (nematodes + NF34 + 1% ivermectin); G8 (nematodes + AC001 + 100% mineral oil); G9 (nematodes + NF34 + 100% mineral oil); G10 (nematodes + AC001 + 1% dimethyl sulfoxide); G11 (nematode + NF34 + 1% dimethyl sulfoxide); G12 (nematode + distilled water / negative control). In assay B, D. flagrans fungal filtrate was used, obtained from medium with low nutrient content (LMN) and enriched with chitin. For the biosynthesis of AgNP, AgNO3 solution [1:50] was added to the filtrate. The formation of AgNP - D. flagrans was confirmed by optical absorption (UV-Vis). Transmission electron microscopy (MET) was used to evaluate the size and monodispersion of AgNP. Two experimental groups were formed in microtubes, with 5 repetitions for each group: treated group (G1) and control group (G2), during a period of 24 hours. In G1 microtubes, approximately 120 L3 of cyiatostomines and 1 mL of AgNP's solution - D. flagrans, at 43.4 g / mL were added. In G2 microtubes, approximately 120 L3 and 1 mL of distilled water. The results showed that the use of chemical compounds associated with fungal conidia was efficient in the in vitro control of Rhabditis spp. On the other hand, the silver nanoparticles of D. flagrans showed larvicidal activity and a percentage reduction of 43% in the population of cyathostomins larvae, after 24 hours. Thus, it was concluded that the use of biological control was efficient and may come to be used as an integrated strategy in the health management of herds.

Avaliação da eficácia de fungos nematófagos na predação de larvas nematódeos gastrintestinais de asininos submetidos a diferentes períodos de estocagem, sob baixas temperaturas

Objetivou-se avaliar a eficácia de formulações peletizadas em matriz de alginato de sódio de Duddingtonia flagrans e Monacrosporium thaumasium armazendados por dois e cinco anos, em temperatura entre 2° a 8°C, sobre a predação de larvas infectantes de nematódeos após passagem do trato gastrintestinal de asininos. Foram coletadas amostras de fezes de 64 asininos, para realização da contagem de Ovos Por Grama de fezes (OPG). Os asininos foram divididos em grupos, cada grupo contendo oito animais, cada animal recebeu dosagem única de 100g (20% de micélio fúngico) de péletes juntamente com ração comercial para facilitar a ingestão. No experimento com formulações de D. flagrans, os grupos foram divididos da seguinte forma: GI - receberam péletes de D. flagrans estocados por cinco anos; GII- receberam péletes de D. flagrans estocados por dois anos; GIII receberam péletes de D. flagrans recém-produzidos; e Controle - receberam péletes sem fungos nematófagos. No experimento com formulações de M. thaumasium foram divididos: GI - receberam péletes de M. thaumasium estocados por cinco anos; GII - receberam péletes de M. thaumasium estocados por dois anos; GIII - receberam péletes de M. thaumasium estocados recém-produzidos; e Controle - receberam péletes sem fungos nematófagos. Observou-se que após passagem dos péletes contendo D. flangras (ACOO1) e M. thaumasium pelo trato gastrintestinal dos asininos, independente do tempo de estocagem dos péletes, houve redução larval significativa (p<0,01) até o intervalo de 72 horas nos ensaios A e B. Formulações contendo D. flagrans, apresentaram redução larval de até 97% e formulações contendo M. thaumasium redução larval de até 93.6%. Concluiu-se que o uso de péletes em matriz de alginato de sódio contendo D. flagrans e M. thaumasium armazenados até cinco anos foram efetivos sobre a predação de larvas infectantes de nematódeos após passagem do trato gastrintestinal de asininos.

The objective of this study was to evaluate the efficacy of pelleted formulations of Duddingtonia flagrans and Monacrosporium thaumasium sodium alginate, stored for two and five years, at temperatures between 2° and 8° C, on the predation of nematode infecting larvae after passage of the treatment gastrointestinal tract. Faecal samples were collected from 64 asininos for the counting of eggs per gram of feces (OPG). Asinins were divided into groups, each group containing eight animals, each animal received a single dose of 100g (20% fungal mycelium) of pellets along with commercial feed to facilitate ingestion. In the experiment with formulations of D. flagrans, the groups were divided as follows: GI - received D. flagrans pellets stored for five years; GII- received pellets of D. flagrans stored for two years; GIII - received newly produced D. flagrans pellets; and Control - received pellets without nematophagous fungi. In the experiment with formulations of M. thaumasium were divided: GI - received pellets of M. thaumasium stored for five years; GII - received pellets of M. thaumasium stored for two years; GIII - received pellets of M. thaumasium stored in newly produced pellets; and Control - received pellets without nematophagous fungi. It was observed that after passage of the pellets containing D. flangras (ACOO1) and M. thaumasium by the gastrointestinal tract of the asinines, regardless of pellet storage time, there was a significant larval reduction (p <0.01) up to 72 hours in assays A and B. Formulations containing D. flagrans showed larval reduction of up to 97% and formulations containing M. thaumasium larval reduction of up to 93.6%. It was concluded that the use of sodium alginate pellets containing D. flagrans and M. thaumasium stored up to five years were effective on the predation of infective nematode larvae after passage of the gastrointestinal tract of asinines

Optimization of protease production by the fungusMonacrosporium thaumasium and its action againstAngiostrongylus vasorum larvae

The objectives of this study were to optimize protease production from the nematophagous fungus Monacrosporium thaumasium (NF34a) and evaluate its larvicidal activity and biological stability. An isolate of the nematophagous fungus Monacrosporium thaumasium (NF34a) was used to produce the enzyme. The Plackett-Burman design was used in order to scan which components of the culture medium could have a significant influence on protease production by the fungus NF34a. An in vitro assay was also performed to evaluate the larvicidal activity of NF34a. It was observed that only one component of the culture medium (yeast extract), at the levels studied, had any significant effect (p 0.05) on protease production. There was a reduction (p 0.01) in the mean number of larvae recovered from the treated groups, compared with the control groups. The results confirm previous reports on the efficiency of nematophagous fungi for controlling nematode larvae that are potentially zoonotic. Thus, given the importance of biological control, we suggest that further studies should be conducted on the protease produced by the fungus Monacrosporium thaumasium.

O objetivo deste trabalho foi otimizar a produção de proteases do fungo nematófago Monacrosporium thaumasium (NF34a), avaliar sua atividade larvicida e sua estabilidade biológica. Foi utilizado um isolado do fungo nematófago Monacrosporium thaumasium (NF34a) para a produção de enzima. O delineamento Plackett-Burman foi utilizado com o objetivo de se escanear quais componentes do meio de cultura, poderiam ter influência significava na produção de protease pelo fungo NF34a. Foi realizado um ensaioin vitro para avaliar a atividade larvicida de NF34a. Observou-se que apenas um dos componentes do meio de cultura (extrato de levedura), nos níveis avaliados, apresentou um efeito significativo (p 0,05) sobre a produção de protease. Houve reducão (p 0,01) entre as médias de larvas recuperadas dos grupos tratados em relação ás dos grupos controle. Os resultados confirmam trabalhos anteriores da eficiência de fungos nematófagos no controle de larvas de nematóides potencialmente zoonóticos. Assim, devido á importãncia do controle biológico, os autores sugerem estudos mais aprofundados sobre a protease produzida pelo fungo Monacrosporium thaumasium.

Control of infective larvae of gastrointestinal nematodes in heifers using different isolates of nematophagous fungi

The effect of different nematophagous fungi [Duddingtonia flagrans (AC001 and CG722) and Monacrosporium thaumasium (NF34)] with regard to controlling infective larvae (L3) of nematodes after gastrointestinal transit in female cattle (3/4 Holstein × Zebu) was evaluated. A total of 24 pubescent female cattle were used, weighing approximately 320 kg each one. There were three treatment groups, each contained six animals that received 150 g of pellets (0.2 g of mycelium), orally in a single dose, in a sodium alginate matrix containing mycelial mass of the fungus D. flagrans (AC001 or CG722) or M. thaumasium (NF34); and one control group (without fungi). Fecal samples were collected from the animals at intervals of 12, 15, 18, 21, 24, 48, and 72 hours. At the end of 17 days, the L3 not subjected to predation were recovered by means of the Baermann method. The fungal isolates tested were capable of destroying the L3 after gastrointestinal transit. It was observed that within 72 hours, the isolates AC001, CG722, and NF34 showed a higher predatory activity (81.2%, 97.3%, and 98.3%, respectively). The results justify the need for studies in the field, and over longer intervals, in order to observe the efficiency of the fungus D. flagrans, or even M. thaumasium, for environmental control over nematodes in naturally infected cattle.

No presente estudo, foi avaliado o efeito de diferentes fungos nematófagos [Duddingtonia flagrans (AC001 e CG722) eMonacrosporium thaumasium (NF34)] no controle de larvas infectantes (L3) de nematóides após o trânsito gastrointestinal em fêmeas bovinas (3/4 Holandês x Zebu). Um total de 24 fêmeas bovinas pubescentes foram utilizadas, pesando aproximadamente 320 kg cada. Foram utilizados três grupos de tratamento; cada um contendo seis animais que receberam por via oral de 150 g de péletes (0,2 g de micélio), em dose única, em uma matriz de alginato de sódio contendo massa micelial dos fungos D. flagrans (AC001 ou CG722), M. thaumasium (NF34), além de um grupo controle (sem fungo). Amostras de fezes foram colhidas dos animais em intervalos de 12, 15, 18, 21, 24, 48 e 72 horas. No final de 17 dias, as L3 não predadas foram recuperadas pelo método de Baermann. Os isolados de fungos testados foram capazes de destruir as L3 após trânsito gastrointestinal. Observou-se após 72 horas, os isolados AC001, CG722 e NF34 mostraram uma maior atividade predatória (81,2%, 97,3% e 98,3%, respectivamente). Estes resultados justificam a necessidade de estudos a campo e em intervalos mais longos, a fim de observar a eficácia dos fungos D. flagrans ou mesmoM. thaumasium no controle ambiental dos nematóides de bovinos naturalmente infectados.

Optimization of protease production by the fungus Monacrosporium thaumasium and its action against Angiostrongylus vasorum larvae / Otimização da produção de protease pelo fungo Monacrosporium thaumasium e sua ação contra larvas de Angiostrongylus vasorum

The objectives of this study were to optimize protease production from the nematophagous fungus Monacrosporium thaumasium (NF34a) and evaluate its larvicidal activity and biological stability. An isolate of the nematophagous fungus Monacrosporium thaumasium (NF34a) was used to produce the enzyme. The Plackett-Burman design was used in order to scan which components of the culture medium could have a significant influence on protease production by the fungus NF34a. An in vitro assay was also performed to evaluate the larvicidal activity of NF34a. It was observed that only one component of the culture medium (yeast extract), at the levels studied, had any significant effect (p < 0.05) on protease production. There was a reduction (p < 0.01) in the mean number of larvae recovered from the treated groups, compared with the control groups. The results confirm previous reports on the efficiency of nematophagous fungi for controlling nematode larvae that are potentially zoonotic. Thus, given the importance of biological control, we suggest that further studies should be conducted on the protease produced by the fungus Monacrosporium thaumasium.

O objetivo deste trabalho foi otimizar a produção de proteases do fungo nematófago Monacrosporium thaumasium (NF34a), avaliar sua atividade larvicida e sua estabilidade biológica. Foi utilizado um isolado do fungo nematófago Monacrosporium thaumasium (NF34a) para a produção de enzima. O delineamento Plackett-Burman foi utilizado com o objetivo de se escanear quais componentes do meio de cultura, poderiam ter influência significava na produção de protease pelo fungo NF34a. Foi realizado um ensaio in vitro para avaliar a atividade larvicida de NF34a. Observou-se que apenas um dos componentes do meio de cultura (extrato de levedura), nos níveis avaliados, apresentou um efeito significativo (p < 0,05) sobre a produção de protease. Houve redução (p < 0,01) entre as médias de larvas recuperadas dos grupos tratados em relação às dos grupos controle. Os resultados confirmam trabalhos anteriores da eficiência de fungos nematófagos no controle de larvas de nematóides potencialmente zoonóticos. Assim, devido a importância do controle biológico, os autores sugerem estudos mais aprofundados sobre a protease produzida pelo fungo Monacrosporium thaumasium.

EFEITO DOS FUNGOS Duddingtonia flagrans E Monacrosporium thaumasium SOBRE OS ESTÁGIOS LARVAIS DE NEMATÓDEOS PARASITAS DE OVINOS

Um dos maiores problemas enfrentados pelos criadores de ovinos são as helmintoses gastrintestinais. A utilização de fungos nematófagos predadores como controle biológico é uma das alternativas pesquisadas para auxiliar na profilaxia das helmintoses. O objetivo do presente trabalho foi avaliar se os fungos D. flagrans e M. thaumasium tem efeito direto sobre estágios larvais de nematódeos parasitas presentes no meio ambiente e indireto sobre a carga parasitária. O experimento foi realizado em uma propriedade, localizada no município de Londrina, norte do estado do Paraná, Brasil, durante os meses de novembro de 2013 a maio de 2014. Foram utilizados 40 ovinos da raça Texel, fêmeas matrizes, entre 12 a 24 meses de idade. Durante o período do experimento, dois grupos foram tratados com os fungos nematófagos, um com anti-helmíntico Ivermectina e um grupo controle que não recebeu tratamento. Foi realizada a coleta de fezes dos animais de cada grupo diretamente da ampola retal semanalmente. A avaliação da contaminação ambiental foi realizada a cada 14 dias através da colheita de aproximadamente 500g de pastagem dos piquetes de cada grupo. Os fungos D. flagrans e M. thaumasium exerceram efeito sobre as larvas infectantes presentes no meio ambiente, determinando a sua diminuição em relação ao controle. Também foram observados efeitos indiretos de ambos os fungos na diminuição da eliminação de ovos nas fezes das matrizes. Nas condições em que o experimento foi realizado, conclui-se que os grupos D. flagrans e M. thaumasium exerceram efeito nas larvas infectantes presentes no meio ambiente e houve reflexo na carga parasitária. O grupo controle foi à diretriz para apontar os efeitos ambientais e de modo geral os demais tratamentos seguiram a tendência do controle. E, finalmente, existem indícios de resistência dos nematódeos à ivermectina.

One of the biggest problems faced by sheep farmers is the gastrointestinal helminths. The use of predatory nematophagous fungi as biological control is one of the alternatives researched to aid in the prophylaxis of helminthes. The objective of the present work was to evaluate if the fungi D. flagrans and M. thaumasium have direct effect on larval stages of parasitic nematodes present in the environment and indirect on the parasitic load. The experiment was carried out in a property located in the city of Londrina, northern Paraná state, Brazil, from November 2013 to May 2014. Four hundred Texel sheep, matrices, between 12 and 24 months of age were used. During the experiment period, two groups were treated with nematological fungi, one with anthelmintic and one control group that received no treatment. Feces were collected weekly from the animals of each group directly from the rectal ampulla. The evaluation of the environmental contamination was carried out every 14 days through the harvesting of approximately 500g of pastures of the pickets of each group. The fungi D. flagrans and M. thaumasium had an effect on the infecting larvae present in the environment, determining its decrease in relation to the control. Indirect effects of both fungi were also observed in the decrease of egg elimination in the feces of the matrices. Under the conditions in which the experiment was carried out, it was concluded that the groups D. flagrans and M. thaumasium had an effect on the infecting larvae present in the environment and there was a reflex on the parasitic load. The control group were the guideline to indicate the environmental effects and in general the other treatments followed the trend of the control. And finally, there is evidence of nematode resistance to ivermectin.

Control of infective larvae of gastrointestinal nematodes in heifers using different isolates of nematophagous fungi / Controle de larvas infectantes de nematóides gastrintestinais de novilhas por diferentes isolados dos fungos nematófagos

The effect of different nematophagous fungi [Duddingtonia flagrans (AC001 and CG722) and Monacrosporium thaumasium (NF34)] with regard to controlling infective larvae (L3) of nematodes after gastrointestinal transit in female cattle (3/4 Holstein × Zebu) was evaluated. A total of 24 pubescent female cattle were used, weighing approximately 320 kg each one. There were three treatment groups, each contained six animals that received 150 g of pellets (0.2 g of mycelium), orally in a single dose, in a sodium alginate matrix containing mycelial mass of the fungus D. flagrans (AC001 or CG722) or M. thaumasium (NF34); and one control group (without fungi). Fecal samples were collected from the animals at intervals of 12, 15, 18, 21, 24, 48, and 72 hours. At the end of 17 days, the L3 not subjected to predation were recovered by means of the Baermann method. The fungal isolates tested were capable of destroying the L3 after gastrointestinal transit. It was observed that within 72 hours, the isolates AC001, CG722, and NF34 showed a higher predatory activity (81.2%, 97.3%, and 98.3%, respectively). The results justify the need for studies in the field, and over longer intervals, in order to observe the efficiency of the fungus D. flagrans, or even M. thaumasium, for environmental control over nematodes in naturally infected cattle.

No presente estudo, foi avaliado o efeito de diferentes fungos nematófagos [Duddingtonia flagrans (AC001 e CG722) eMonacrosporium thaumasium (NF34)] no controle de larvas infectantes (L3) de nematóides após o trânsito gastrointestinal em fêmeas bovinas (3/4 Holandês x Zebu). Um total de 24 fêmeas bovinas pubescentes foram utilizadas, pesando aproximadamente 320 kg cada. Foram utilizados três grupos de tratamento; cada um contendo seis animais que receberam por via oral de 150 g de péletes (0,2 g de micélio), em dose única, em uma matriz de alginato de sódio contendo massa micelial dos fungos D. flagrans (AC001 ou CG722), M. thaumasium (NF34), além de um grupo controle (sem fungo). Amostras de fezes foram colhidas dos animais em intervalos de 12, 15, 18, 21, 24, 48 e 72 horas. No final de 17 dias, as L3 não predadas foram recuperadas pelo método de Baermann. Os isolados de fungos testados foram capazes de destruir as L3 após trânsito gastrointestinal. Observou-se após 72 horas, os isolados AC001, CG722 e NF34 mostraram uma maior atividade predatória (81,2%, 97,3% e 98,3%, respectivamente). Estes resultados justificam a necessidade de estudos a campo e em intervalos mais longos, a fim de observar a eficácia dos fungos D. flagrans ou mesmoM. thaumasium no controle ambiental dos nematóides de bovinos naturalmente infectados.

Control of Strongyloides westeri by nematophagous fungi after passage through the gastrointestinal tract of donkeys / Controle de Strongyloides westeri por fungos nematófagos após trânsito gastrintestinal em jumentas

Strongyloides westeri is the most prevalent nematode among equines aged up to four months and causes gastrointestinal disorders. The objective of this study was to observe the control of infective S. westeri larvae (L3) by the nematophagous fungi Duddingtonia flagrans (AC001) and Monacrosporium thaumasium (NF34) after passage through the gastrointestinal tract of female donkeys. Twelve dewormed female donkeys that were kept in stables were used. Two treatment groups each comprising four animals received orally 100 g of pellets made of sodium alginate matrix containing a mycelial mass of either D. flagrans (AC001) or M. thaumasium (NF34). The control group consisted of four animals that received pellets without fungus. Feces samples were then collected from the animal groups at different times (after 12, 24, 48 and 72 hours). These feces were placed in Petri dishes containing 2% water-agar medium and 1000 L3 of S. westeri. AC001 and NF34 isolates showed the ability to destroy the L3, after gastrointestinal transit, thus demonstrating their viability and predatory activity.

O Strongyloides westeri é o nematóide de maior prevalência entre equídeos com idade até quatro meses, causando distúrbios gastrintestinais. O objetivo do presente trabalho foi observar o controle de larvas infectantes (L3) de Strongyloides westeri pelos fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001) e Monacrosporium thaumasium (NF34) após trânsito gastrintestinal em jumentas. Foram utilizadas 12 jumentas, estabuladas e previamente vermifugadas. A seguir, dois grupos tratados, contendo cada um 4 animais receberam por via oral 100 g de péletes em matriz de alginato de sódio, contendo massa miceliana dos fungos D. flagrans (AC001) ou M. thaumasium (NF34). O grupo controle foi constituído de 4 animais que receberam péletes sem fungo. A seguir, amostras de fezes dos grupos de animais foram coletadas em distintos intervalos de horas (12, 24, 48 e 72). Essas fezes foram vertidas em placas de Petri contendo meio sólido ágar-água 2% e 1000 L3 de S. westeri. Os isolados AC001 e NF34 apresentaram capacidade de destruir as L3 após o trânsito, demonstrando sua viabilidade e atividade predatória.

Control of Strongyloides westeri by nematophagous fungi after passage through the gastrointestinal tract of donkeys / Controle de Strongyloides westeri por fungos nematófagos após trânsito gastrintestinal em jumentas

Strongyloides westeri is the most prevalent nematode among equines aged up to four months and causes gastrointestinal disorders. The objective of this study was to observe the control of infective S. westeri larvae (L3) by the nematophagous fungi Duddingtonia flagrans (AC001) and Monacrosporium thaumasium (NF34) after passage through the gastrointestinal tract of female donkeys. Twelve dewormed female donkeys that were kept in stables were used. Two treatment groups each comprising four animals received orally 100 g of pellets made of sodium alginate matrix containing a mycelial mass of either D. flagrans (AC001) or M. thaumasium (NF34). The control group consisted of four animals that received pellets without fungus. Feces samples were then collected from the animal groups at different times (after 12, 24, 48 and 72 hours). These feces were placed in Petri dishes containing 2% water-agar medium and 1000 L3 of S. westeri. AC001 and NF34 isolates showed the ability to destroy the L3, after gastrointestinal transit, thus demonstrating their viability and predatory activity.

O Strongyloides westeri é o nematóide de maior prevalência entre equídeos com idade até quatro meses, causando distúrbios gastrintestinais. O objetivo do presente trabalho foi observar o controle de larvas infectantes (L3) de Strongyloides westeri pelos fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001) e Monacrosporium thaumasium (NF34) após trânsito gastrintestinal em jumentas. Foram utilizadas 12 jumentas, estabuladas e previamente vermifugadas. A seguir, dois grupos tratados, contendo cada um 4 animais receberam por via oral 100 g de péletes em matriz de alginato de sódio, contendo massa miceliana dos fungos D. flagrans (AC001) ou M. thaumasium (NF34). O grupo controle foi constituído de 4 animais que receberam péletes sem fungo. A seguir, amostras de fezes dos grupos de animais foram coletadas em distintos intervalos de horas (12, 24, 48 e 72). Essas fezes foram vertidas em placas de Petri contendo meio sólido ágar-água 2% e 1000 L3 de S. westeri. Os isolados AC001 e NF34 apresentaram capacidade de destruir as L3 após o trânsito, demonstrando sua viabilidade e atividade predatória.

Fungos Helmintófagos Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium e Arthrobotrys robusta no Controle de Oesophagostomum spp. parasito intestinal de suinos

A produção de suínos em sistemas semi-intensivo e extensivo constitui uma alternativa aos sistemas tradicionais de criação, entretanto, a infecção por helmintos parasitas pode ser favorecida. Dentre as parasitoses que acometem os suínos, se destacam os helmintos pertencentes aos gêneros Ascaris, Strongyloides, Hyostrongylus e Oesophagostomum, que apresentam suas formas infectantes presentes no ambiente, causando perdas econômicas no rebanho. Diante disso, esse trabalho teve como objetivos: Avaliar a eficácia in vitro da formulação fúngica contendo o fungo helmintófago Duddingtonia flagrans sobre larvas infectantes de Oesophagostomum spp.; Observar a dinâmica de eliminação de esporos do fungo helmintófago Duddingtonia flagrans e avaliar a viabilidade após a passagem pelo trato gastrintestinal de suínos; Avaliar a eficácia in vitro dos isolados dos fungos helmintófagos Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium e Arthrobotrys robusta, sobre larvas infectantes de Oesophagostomum spp. O trabalho foi dividido em dois capítulos, onde o primeiro verificou a eficácia in vitro dos isolados de Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium e Arthrobotrys robusta, sobre larvas infectantes de Oesophagostomum spp., onde todos os isolados demonstraram capacidade predatória eficaz sobre larvas infectantes. O segundo capitulo foi subdivido em três ensaios, que foi verificado a predação in vitro da formulação fúngica sobre larvas infectantes de Oesophagostomum spp. em placas de Petri, em coproculturas, e após a passagem pelo trato gastrintestinal de suínos. Ambos os ensaios obtiveram resultados satisfatórios, quanto a predação das larvas infectantes, e os isolados fúngicos suportaram a passagem pelo trato gastrintestinal, sem perder a capacidade de predação sobre as larvas infectantes. Os resultados apresentados nesse trabalho demonstram alta eficiência da formulação fúngica feita a partir do isolado de Duddingtonia flagrans em farelo de arroz, e dos isolados Monacrosporium thaumasium e Arthrobotrys robusta na predação de larvas infectantes de Oesophagostomum spp., podendo xii ser uma alternativa no controle de formas infectantes de nematoides parasitas de suínos.

The pigs production in semi-intensive and extensive systems constitute an alternative to traditional farming systems, however, infection with parasitic helminths can be favored. Among the parasites that affect pigs, stand out helminths belonging to the genera Ascaris, Strongyloides, Hyostrongylus and Oesophagostomum, which present their infective forms present in the environment causing economic losses in the herd. Thus, this study aimed: To evaluate the in vitro efficacy of fungi isolated from helmintófagos Duddingtonia flagrans on infective larvae of the Oesophagostomum spp.; Observing the dynamics of elimination of spores and assessing the viability after passage through the gastrointestinal tract of pigs; and to assess the in vitro efficacy of fungi isolated helmintófagos Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium and Arthrobotrys robust on infective larvae of the Oesophagostomum spp. The study was divided in two chapters, where the first verified in vitro efficacy of isolated Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium and Arthrobotrys robust on infective larvae of Oesophagostomum spp., where all isolates showed predatory capacity. The second chapter subdivided into three tests, to verified in vitro predation of fungal formulation rises infective larvae of Oesophagostomum spp. in Petri dishes in fecal cultures and after passage through the gastrointestinal tract of pigs. Both assays obtained satisfactory results, and predation of infective larvae, and supporting the passage through the gastrointestinal tract without losing predation capacity. The results presented in this study demonstrate high efficiency of the fungal formulation made from the isolated Duddingtonia flagrans in rice bran, and isolated Monacrosporium thaumasium and Arthrobotrys robust in predation infective larvae of the Oesophagostomum spp., could be an alternative to control infective forms of nematode parasites pigs.