Atividade in vitro do extrato etanólico de própolis e do digluconato de clorexidina sobre as espécies de Candida isoladas da mucosa bucal de pacientes internados em Unidade de Terapia Intensiva (UTI) / In vitro activity of ethanolic extract of propolis and chlorhexidine digluconate on Candida species isolated from the oral mucosa of patients hospitalized in the Intensive Care Unit (ICU)

Avaliou-se a atividade dos extratos de própolis e digluconato de clorexidina em Candida sp isoladas da mucosa bucal de pacientes em UTI. Foram determinadas as concentrações fungicidas mínimas (CFM) e comparadas, nas doses sub-inibitórias, à produção de exoenzimas proteinase e fosfolipase e formação de franjas. Em 72 isolados foram avaliadas a atividade antifúngica pela técnica de microdiluição em série, na “base 2”, a produção das exoenzimas proteinase e fosfolipase, e a formação de franjas, antes e após a exposição às própolis e clorexidina. Dos 72 isolados, 53 eram C. albicans, 11 C. tropicalis, quatro C. guilhermondii e quatro sugestivas de C. dubliniensis. CFM 90% do extrato de própolis foi de 5% para C. albicans, 20% C. tropicalis, 0,625% C. guilhermondii e 0,312% sugestivas de C. dubliniensis. CFM 90% da clorexidina foi de 0,0018% para C. albicans, 0,012% C. tropicalis, de 0,0018% C. guilhermondii e de 0,00375% sugestivas de C. dubliniensis. Ocorreu inibição das exoenzimas e franjas, em ambos os produtos. Apesar da inibição da clorexidina ser menor que a da própolis, seu uso diário não causa efeitos colaterais indesejáveis como manchas nos dentes e na língua, perda do paladar e sensação de queimação na mucosa bucal.

The activity of propolis extract and chlorhexidine digluconate on Candida sp isolated from oral mucosa of patients in ICU was evaluated. The minimum fungicidal concentrations (MFC) were determined, and also the production of proteinase and phospholipase exoenzymes and the fringe formation. Seventy-two isolates were used and identified by the API 20C AUX® System. The antifungal activity was evaluated by “at base 2” serial microdilution technique. Also the exoenzymes production (proteinase and phospholipase), the fringes formation, before and after being exposed to propolis and chlorhexidine, were analysed. Of 72 isolates, 53 were C. albicans, 11 C. tropicalis, four C. guilhermondii and four suggestive C. dubliniensis. The MFC 90% of propolis extract was 5% C. albicans, 20% C. tropicalis, 0.625% C. guilhermondii; and 0.312% suggestive of C. dubliniensis. MFC 90% of chlorhexidine was 0.0018% C. albicans, 0.012% C. tropicalis, 0.0018% C. guilhermondii and 0.00375% suggestive of C. dubliniensis. The inhibition of exoenzymes and fringes occurred in the both products. Although the inhibition of chlorhexidine is lower than that showed by propolis, its daily use neither cause undesirable side effects as blemishes on the teeth and tongue, nor the loss of the taste and the burning sensation in the oral mucosa.

Atividade in vitro do extrato etanólico de própolis e do digluconato de clorexidina sobre as espécies de Candida isoladas da mucosa bucal de pacientes internados em Unidade de Terapia Intensiva (UTI) / In vitro activity of ethanolic extract of propolis and chlorhexidine digluconate on Candida species isolated from the oral mucosa of patients hospitalized in the Intensive Care Unit (ICU)

Avaliou-se a atividade dos extratos de própolis e digluconato de clorexidina em Candida sp isoladas da mucosa bucal de pacientes em UTI. Foram determinadas as concentrações fungicidas mínimas (CFM) e comparadas, nas doses sub-inibitórias, à produção de exoenzimas proteinase e fosfolipase e formação de franjas. Em 72 isolados foram avaliadas a atividade antifúngica pela técnica de microdiluição em série, na “base 2”, a produção das exoenzimas proteinase e fosfolipase, e a formação de franjas, antes e após a exposição às própolis e clorexidina. Dos 72 isolados, 53 eram C. albicans, 11 C. tropicalis, quatro C. guilhermondii e quatro sugestivas de C. dubliniensis. CFM 90% do extrato de própolis foi de 5% para C. albicans, 20% C. tropicalis, 0,625% C. guilhermondii e 0,312% sugestivas de C. dubliniensis. CFM 90% da clorexidina foi de 0,0018% para C. albicans, 0,012% C. tropicalis, de 0,0018% C. guilhermondii e de 0,00375% sugestivas de C. dubliniensis. Ocorreu inibição das exoenzimas e franjas, em ambos os produtos. Apesar da inibição da clorexidina ser menor que a da própolis, seu uso diário não causa efeitos colaterais indesejáveis como manchas nos dentes e na língua, perda do paladar e sensação de queimação na mucosa bucal.(AU)

The activity of propolis extract and chlorhexidine digluconate on Candida sp isolated from oral mucosa of patients in ICU was evaluated. The minimum fungicidal concentrations (MFC) were determined, and also the production of proteinase and phospholipase exoenzymes and the fringe formation. Seventy-two isolates were used and identified by the API 20C AUX® System. The antifungal activity was evaluated by “at base 2” serial microdilution technique. Also the exoenzymes production (proteinase and phospholipase), the fringes formation, before and after being exposed to propolis and chlorhexidine, were analysed. Of 72 isolates, 53 were C. albicans, 11 C. tropicalis, four C. guilhermondii and four suggestive C. dubliniensis. The MFC 90% of propolis extract was 5% C. albicans, 20% C. tropicalis, 0.625% C. guilhermondii; and 0.312% suggestive of C. dubliniensis. MFC 90% of chlorhexidine was 0.0018% C. albicans, 0.012% C. tropicalis, 0.0018% C. guilhermondii and 0.00375% suggestive of C. dubliniensis. The inhibition of exoenzymes and fringes occurred in the both products. Although the inhibition of chlorhexidine is lower than that showed by propolis, its daily use neither cause undesirable side effects as blemishes on the teeth and tongue, nor the loss of the taste and the burning sensation in the oral mucosa.(AU)

AVALIAÇÃO DO DANO BUCAL FRENTE À EXPOSIÇÃO AGUDA E CRÔNICA AO HERBICIDA ÁCIDO 2,4-DICLOROFENÓXIACÉTICO (2,4-D)

Introdução: O ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) foi o primeiro herbicida seletivo produzido e é amplamente utilizado no mundo todo. Suas características (toxicidade, persistência e bioacumulação) o tornam prejudicial à saúde humana. A mucosa bucal é umas das primeiras a serem contaminadas por agrotóxicos. Objetivo: Avaliar os possíveis efeitos sobre a mucosa bucal da exposição aguda e crônica ao herbicida 2,4-D. Material e métodos: Fase aguda: foram utilizados 80 camundondos Swiss adultos, machos, divididos em 4 grupos (n=20), avaliados em diferentes intervalos de tempo (24h, 48h, 72h e 8 dias), 5 animais/período: SG: nebulização com solução de cloreto de sódio; LCG: nebulização do pesticida com 3,71 x 10-3 gramas de ingrediente ativo por hectare (g.i.a/ha); MCG: nebulização do pesticida com 6,19 x 10-3 g.i.a/ha; HCG: nebulização do pesticida com 9,28 x 10-3 g.i.a/ha. Fase crônica: foram utilizados 80 ratos Wistar albinos, machos, adultos, divididos em oito grupos (n=10): ICG - Grupo Controle Inalatório, expostos à nebulização com água destilada; OCG - Grupo Controle Oral, receberam ração nebulizada com água destilada; ILCG Grupo de Baixa Concentração Inalatório: expostos à nebulização ao herbicida com 3,71 x 10-3 g.i.a/ha; OLCG: Grupo de Baixa Concentração Oral: receberam ração nebulizada com o herbicida com 3,71 x 10-3 g.i.a/ha; IMCG: Grupo de Média Concentração Inalatório, expostos à nebulização ao herbicida com 6,19 x 10-3 g.i.a/ha; OMCG: Grupo de Média Concentração Oral, receberam ração nebulizada com o herbicida com 6,19 x 10-3 g.i.a/ha; IHCG: Grupo de Alta Concentração Inalatório, expostos à nebulização ao herbicida com 9,28 x 10-3 g.i.a/ha; OHCG: Grupo de Alta Concentração Oral, receberam ração nebulizada com o herbicida com 9,28 x 10-g.i.a/ha. Os animais da fase crônica foram eutanasiados 6 meses após o início do experimento. Coletou-se a língua para análise histopatológica. Resultados: Houve diferença entre as concentrações de exposição e a intensidade de congestão tecidual na exposição aguda e crônica. Hiperceratose só ocorreu nos animais expostos cronicamente por via oral. Houve aumento no número de regiões organizadoras de nucléolos (NORs) no epitélio do dorso em associação com a concentração do 2,4-D na exposição aguda e crônica (p <0,001). A via inalatória foi mais associada a aumento de figuras de mitose e NORs. A via oral esteve mais relacionada à hiperceratose e intensidade de congestão tecidual. Conclusão: A exposição aguda e crônica a altas doses de 2,4-D causou um aumento na intensidade de congestão, no índice de proliferação celular, e na espessura do epitélio da língua e estimulou a resposta inflamatória precoce do tecido.

Evaluation of buccal damage associated with acute and chronic exposure to herbicide 2,4-dichlorofenoxyacetic acid (2,4-D) Introduction: The 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) was the first selective herbicide produced and is widely used worldwide. Its characteristics (toxicity, persistence and bioaccumulation) make it harmful to human health. The mucosa of the oral cavity is one of the first areas that is contaminated by pesticides. Objective: To evaluate the possible effect on the oral mucosa of acute and chronic exposure to the 2,4-D herbicide. Material and methods: Acute phase: 80 male adult Swiss mice were divided into 4 groups (n = 20), evaluated at different time intervals (24h, 48h, 72h and 8 days), 5 animals/period: SG: nebulization with sodium chloride solution; LCG: pesticide nebulization with 3.71 x 10-3 grams of active ingredient per hectare (g.a.i./ha); MCG: pesticide nebulization at 6.19 x 10-3 g.a.i./ha; HCG: pesticide nebulization at 9.28 x 10-3 g.a.i./ha. Chronic phase: 80 adult male albino Wistar rats were divided into eight groups (n = 10): ICG - Inhaled Control Group, exposed to nebulization with distilled water; OCG - Oral Control Group, received nebulized ration with distilled water; ILCG Inhaled Low Concentration Group: exposed to nebulization to the herbicide at 3.71 x 10-3 g.a.i./ha; OLCG: Low Oral Concentration Group: received 3.71 x 10-3 g.a.i./ha nebulized feed with herbicide; IMCG: Inhalation Medium Concentration Group, exposed to nebulization to the herbicide at 6.19 x 10-3 g.a.i./ha; OMCG: Medium Oral Concentration Group, received nebulized ration with the herbicide with 6.19 x 10-3 g.a.i./ha; IHCG: Inhalation High Concentration Group, exposed to nebulization to 9.28 x 10-3 g.a.i./ha herbicide; OHCG: Group of High Oral Concentration, received nebulized ration with the herbicide with 9.28 x 10-3 g.a.i./ha. The animals of the chronic phase were euthanized 6 months after the beginning of the experiment. The tongue was collected for histopathological analysis. Results: There was a difference between exposure concentrations and tissue congestion intensity in acute (p = 0.002) and chronic (p = 0.000) exposure. Hyperkeratosis only occurred in chronically exposed animals orally. There was an increase in the number of nucleoli organizing regions (NORs) in dorsum in association with the concentration of 2,4-D in acute and chronic exposure (p < 0.001). The inhalation route was more associated with increased of mitotic figures and NORs. The oral route was more related to hyperkeratosis and intensity of tissue congestion. Conclusion: Acute and chronic exposure to high doses of 2,4-D caused an increase in congestion intensity, cell proliferation index, and tongue epithelium thickness and stimulated early inflammatory tissue response.

Hemofilia A em um cão Dachshund: relato de caso

O objetivo deste trabalho foi relatar um caso de hemofilia clássica canina. Um cão da raça Dachshund, macho, de um ano de idade, foi atendido em hospital veterinário de ensino devido a uma intensa epistaxe há mais de um dia. O paciente apresentava membranas mucosas pálidas, hematomas no pescoço, apatia e condição corporal magra. Devido à anemia grave o cão recebeu transfusão de sangue total fresco compatível e, durante o procedimento, a hemorragia cessou. Após recuperação clínica (cerca de 20 dias), o paciente foi encaminhado para orquiectomia e um dia após a cirurgia retornou ao hospital apresentando anemia grave, hemorragia escrotal intensa e hematomas abdominais. A hemorragia foi interrompida após outra transfusão de sangue total fresco compatível. A avaliação da hemostasia identificou tempo de sangramento da mucosa bucal, tempo de protrombina e concentração do antígeno do fator de von Willebrand dentro dos valores de referência. No entanto, um prolongamento do TTPA (39 segundos) e uma redução na atividade coagulante do fator VIII (1%) foram identificados. Com estes resultados, o paciente foi diagnosticado com hemofilia A severa. Atualmente o paciente é mantido com boa qualidade de vida e os episódios hemorrágicos são controlados com sangue total fresco compatível (quando há necessidade de hemácias), plasma fresco congelado ou crioprecipitado.

Desenvolvimento de matrizes poliméricas como veículo de ácido ascórbico: caracterização e avaliação da estabilidade

A administração de princípios ativos pela mucosa oral é uma forma eficiente para a distribuição de fármacos e nutrientes, oferecendo diversas vantagens como uma fácil aplicação, evitando o metabolismo de primeira passagem hepática e potencialmente melhorando a biodisponibilidade dessas substâncias. A acerola e o camu-camu apresentam uma alta concentração de vitamina C e são consideradas fontes de diferentes compostos ativos, porém a vitamina C presente nas frutas é facilmente oxidada pelos fatores ambientais, e essas frutas são pouco acessíveis ao consumo populacional. Filmes de desintegração oral (FDO) podem apresentar rápido tempo de desintegração e fácil administração, o que os torna um material interessante para a veiculação de compostos com atividades farmacêuticas ou nutricionais. Assim, este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento e caracterização de filmes de desintegração oral à base de amido e gelatina com adição de extrato seco de acerola e camu-camu produzidos por spray dryer como uma alternativa para a administração de vitamina C. Os FDOs foram produzidos pela técnica de casting, variando-se a proporção de amido e gelatina. Como plastificante foi utilizado o sorbitol (20 g / 100 g de polímero),mantendo-se constante a concentração de polímeros (2 g /100 g de solução filmogênica) e de extrato seco de acerola (4 g /100 g de solução filmogênica) e camu-camu (4 g / 100 g de solução filmogênica). Os extratos secos de acerola e camu-camu foram caracterizados com relação à concentração da vitamina C e da estabilidade desses extratos nessas condições (30 °C, UR 75 % e 40 °C, UR 75%). Os FDOs foram caracterizados em relação a espessura, propriedades mecânicas, ângulo de contato, FT-IR, microscopia electrônica de varredura, concentração de vitamina C, atividade antioxidante, atividade antimicrobiana, estabilidade da vitamina C, tempo de desintegração, estabilidade da atividade de eliminação de radicais de DPPH, avaliação sensorial. Os extratos secos apresentaram uma boa estabilidade em relação à vitamina C e aos compostos antioxidantes (sequestro do radical DPPH). Os FDOs sem adição de extrato, independente da formulação, mostraram-se homogêneos, com ausência de partículas insolúveis e alta capacidade de formação de filme. Para os FDOs com maior concentração de amido foi observado reduzido tempo de desintegração e pH próximo ao bucal. Após a adição dos extratos, os FDOs apresentaram redução do tempo de desintegração,boa aceitação sensorial, propriedades antioxidantes e estabilidade pelo sequestro do radicalDPPH. O pH de superfície dos filmes com adição de extrato seco de acerola foi mais próximo ao bucal quando comparado com os filmes com camu-camu. No entanto, os FDOs com acerola apresentaram reduzida estabilidade da vitamina C em relação ao tempo de armazenamento, enquanto que os filmes com camu-camu apresentaram melhor estabilidade. De modo geral, na formulação produzida apenas com amido (100 g de amido / 100 g de polímeros) observou-se uma maior concentração da vitamina C no final da estabilidade realizada à 30 °C e umidade relativa de 75 %, elevada estabilidade dos compostos ativos (DPPH) e alta taxa de uniformidade na distribuição da vitamina C no filme de desintegração oral. Dessa forma, os FDOs podem ser considerados uma boa alternativa para a suplementação de vitamina C.

The administration of active ingredients through the oral mucosa is an efficient way to deliver drugs and nutrients because it offers various advantages such as easy application, avoiding the hepatic metabolism of the first pass and potentially improving the bioavailability these substances. Acerola and camu-camu have high concentration of vitamin C and are considered sources of different active compounds, however the vitamin C present in fruits is easily oxidized by environmental factors, and such fruits are poorly accessible to population consumption. Orally disintegrating films (ODF) can provide rapid disintegration and easy administration, which makes them interesting materials to deliver compounds with pharmaceutical or nutritional properties. This work aimed at the development and characterization of orally disintegrating films based on starch and gelatin with addition of acerola and camu-camu dry extract produced by spray dryer as an alternative to vitamin C administration. ODFs were produced with casting technique by varying the ratio of starch and gelatin. Sorbitol (20 g / 100 g polymer) was used as plasticizer, with constant the concentration of polymer (2 g / 100 g filmogenic solution), and dry extracts of acerola and camu-camu (4 g / 100 g filmogenic solution). Acerola and camu-camu dry extracts were characterized regarding vitamin C concentration and stability (30 °C, RH 75% and 40 °C, RH 75%). ODFs were characterized considering thickness, mechanical properties, contact angle, FT-IR, scanning electron microscopy, vitamin C concentration, antioxidant activity, antimicrobial activity, vitamin C stability, disintegration time, stability of the scavenging activity of DPPH radical, and sensory evaluation. Dry extracts showed good stability for vitamin C and antioxidant compounds (scavenging activity of DPPH radical). ODFs without extract addition, regardless of the formulation, were homogeneous, without insoluble particles and with high film formation capacity. Reduced disintegration time and pH similar to oral pH was observed for ODFs with high starch concentration. After the addition of extracts, ODFs presented decreased disintegration time and good sensorial acceptation, antioxidant properties and stability of the scavenging activity of DPPH radical. Surface pH of films with acerola dry extract was the closest to oral pH when compared with films with camu-camu dry extracts. However, ODFs with acerola dry extract showed reduced stability of vitamin C regarding storage time, whereas films with camu-camu dry extract showed better stability. In general, the formulation produced only with starch (100 g starch / 100 g polymer) presented higher concentration of vitamin C at the end of stability assay performed at 30 °C and 75% relative humidity, as well as high stability of active compounds (DPPH) and high uniformity rate in vitamin C distribution in the orally disintegrating film. Thus, ODFs can be considered a good alternative for the supplementation of vitamin C.

Reconstrução uretral com retalho autógeno de mucosa bucal após uretrostomia, em cães

PURPOSE: To verify if the buccal mucosa autogen would be suitable for urethral reconstruction in a presence of fibrous tissue and if the procedures could determine the formation of fistulas and saculation at the receptor sites. METHODS: Seven adult dogs was subjected to pre-escrotal uretrostomy. After 40 days, the urethrostomy was corrected through the inplantation of the buccal mucosa fragments at ventral wall of the urethra. The dogs were observed during 40 days, when, it were subjected to radiografic examination and slaughtered to histological study. RESULTS: All animals showed cystitis and urethrocutaneous fistula in average time of 20 days. The radiografic aspects at 40 days showed: luminal continuity in seven animals and saculations at ventral wall of the urethra in six dogs, without interference in urinary jet quality. The histologic findings indicate the complete integration of the buccal mucosa to receiver site. CONCLUSION: The graft implanted at ventral wall, employing autogen buccal mucosa is suitable to correction of the urethral defects produced by urethrostomy in dogs, although saculations on receiver site can happen.

OBJETIVO: Verificar se fragmentos de mucosa bucal autógena poderiam ser adequados para reconstrução uretral na presença de tecido fibroso, e se tal procedimento poderia determinar a formação de fístulas e ou saculações nos sítios implantares. MÉTODOS: Sete cães adultos foram submetidos à uretrostomia pré-escrotal. Após 40 dias, a uretrostomia foi corrigida por meio da implantação de fragmentos de mucosa bucal na parede ventral da uretra. Os animais foram observados durante 40 dias, quando então, foram submetidos a exames radiográficos e sacrificados para estudo histológico. RESULTADOS: Todos os animais apresentaram cistite e fístulas uretro-cutâneas de duração média de vinte dias foram observadas em seis deles. O aspecto radiográfico aos 40 dias após a reconstrução uretral mostrou: continuidade luminal em sete animais e presença de saculações na parede ventral da uretra em seis, sem interferência na qualidade do jato urinário. As características histológicas indicam integração completa da mucosa bucal ao sítio receptor. CONCLUSÃO: O implante em retalho ventral, com fragmentos de mucosa bucal autógena é adequado para correção de defeito uretral produzido por uretrostomia no cão embora possa ocorrer a formação de saculações no sítio do selamento.

Uretroplastia de substituição com segmentos tubulares autólogos de mucosa bucal em cães

PURPOSE: Evaluate experimental urethral defects reconstruction in dogs through implantation of tubular oral autologous mucosa fragments. METHODS: About 2 cm of penile urethra was resected. The induced defect was repaired through anastomosis of tubular oral autologous mucosa fragment extracted from the lower lip. RESULTS: 14 (70%) of the operated dogs showed normal urinary flow and 6 (30%) revealed stenosis which was revealed by radiological examination carried out at 60 days post-operative. Necropsy findings showed the integrity of the implants to the urethral sulcus, and histological findings confirmed that the implanted fragments were covered by the urethral epithelium and inflammatory infiltration of neutrophils, lymphocytes and macrophages was present. CONCLUSION: Implantation of tubular oral autologous mucosa fragments is adequate to reconstruct urethral iatrogenic defects in dogs, although it may result in post-operative stenosis.

OBJETIVO: Avaliar a reconstrução de defeitos experimentais na uretra do cão com a implantação de segmentos tubulares de mucosa bucal autóloga. MÉTODOS: Procedeu-se à ressecção de cerca de 2 cm da uretra peniana de 20 cães. O defeito produzido foi corrigido por meio da anastomose de fragmento tubular de mucosa bucal autóloga, seccionado do lábio inferior. RESULTADOS: Entre os animais operados, 14 (70%) apresentaram jato urinário normal e seis (30%) evidenciaram estenose confirmada por meio de exame radiológico realizado aos 60 dias do pós-operatório. Durante a necrópsia verificou-se a integridade dos implantes no sulco uretral, associado a infiltrado inflamatório de neutrófilos, linfócitos piócitos e histiócitos. As análises histológicas revelaram que os fragmentos implantados estavam recobertos pelo epitélio uretral. CONCLUSÃO: A implantação de segmentos autólogos de mucosa bucal é adequada para a reconstrução de defeitos uretrais iatrogênicos no cão, embora possa resultar em estenose pós-operatória.

Hemofilia A em um cão Dachshund: relato de caso

O objetivo deste trabalho foi relatar um caso de hemofilia clássica canina. Um cão da raça Dachshund, macho, de um ano de idade, foi atendido em hospital veterinário de ensino devido a uma intensa epistaxe há mais de um dia. O paciente apresentava membranas mucosas pálidas, hematomas no pescoço, apatia e condição corporal magra. Devido à anemia grave o cão recebeu transfusão de sangue total fresco compatível e, durante o procedimento, a hemorragia cessou. Após recuperação clínica (cerca de 20 dias), o paciente foi encaminhado para orquiectomia e um dia após a cirurgia retornou ao hospital apresentando anemia grave, hemorragia escrotal intensa e hematomas abdominais. A hemorragia foi interrompida após outra transfusão de sangue total fresco compatível. A avaliação da hemostasia identificou tempo de sangramento da mucosa bucal, tempo de protrombina e concentração do antígeno do fator de von Willebrand dentro dos valores de referência. No entanto, um prolongamento do TTPA (39 segundos) e uma redução na atividade coagulante do fator VIII (1%) foram identificados. Com estes resultados, o paciente foi diagnosticado com hemofilia A severa. Atualmente o paciente é mantido com boa qualidade de vida e os episódios hemorrágicos são controlados com sangue total fresco compatível (quando há necessidade de hemácias), plasma fresco congelado ou crioprecipitado.