Amazonian soil fungi are efficient degraders of glyphosate herbicide; novel isolates of Penicillium, Aspergillus, and Trichoderma / Os fungos do solo amazônico são degradadores eficientes do herbicida glifosato; novos isolados de Penicillium, Aspergillus e Trichoderma

Pesticide residues that contaminate the environment circulate within the hydrological cycle can accumulate within the food chain and cause problems to both environmental and human health. Microbes, however, are well known for their metabolic versatility and the ability to degrade chemically stable substances, including recalcitrant xenobiotics. The current study focused on bio-prospecting within Amazonian rainforest soils to find novel strains fungi capable of efficiently degrading the agriculturally and environmentally ubiquitous herbicide, glyphosate. Of 50 fungal strains isolated (using culture media supplemented with glyphosate as the sole carbon-substrate), the majority were Penicillium strains (60%) and the others were Aspergillus and Trichoderma strains (26 and 8%, respectively). All 50 fungal isolates could use glyphosate as a phosphorous source. Eight of these isolates grew better on glyphosate-supplemented media than on regular Czapek Dox medium. LC-MS revealed that glyphosate degradation by Penicillium 4A21 resulted in sarcosine and aminomethylphosphonic acid.

Resíduos de agrotóxicos que contaminam o meio ambiente circulam no ciclo hidrológico, podendo se acumular na cadeia alimentar e causar problemas tanto à saúde ambiental quanto humana. Por sua vez, microrganismos são bem conhecidos por sua versatilidade metabólica e capacidade de degradar substâncias quimicamente estáveis, incluindo xenobióticos recalcitrantes. O estudo atual se concentrou na bioprospecção nos solos da floresta amazônica para encontrar novas linhagens de fungos capazes de degradar com eficiência o herbicida onipresente na agricultura e no meio ambiente, o glifosato. Entre os 50 fungos isolados (usando meio de cultura suplementado com glifosato como única fonte de carbono), a maioria eram isolados do gênero Penicillium (60%) e os outros eram isolados de Aspergillus e Trichoderma (26 e 8%, respectivamente). Todos os 50 isolados de fungos foram capazes de usar glifosato como fonte de fósforo. Oito desses isolados cresceram melhor em meio suplementado com glifosato do que em meio Czapek Dox regular. LC-MS revelou que a degradação do glifosato por Penicillium 4A21 resultou nos metabólitos sarcosina e ácido aminometilfosfônico.

Amazonian soil fungi are efficient degraders of glyphosate herbicide; novel isolates of Penicillium, Aspergillus, and Trichoderma / Os fungos do solo amazônico são degradadores eficientes do herbicida glifosato; novos isolados de Penicillium, Aspergillus e Trichoderma

Pesticide residues that contaminate the environment circulate within the hydrological cycle can accumulate within the food chain and cause problems to both environmental and human health. Microbes, however, are well known for their metabolic versatility and the ability to degrade chemically stable substances, including recalcitrant xenobiotics. The current study focused on bio-prospecting within Amazonian rainforest soils to find novel strains fungi capable of efficiently degrading the agriculturally and environmentally ubiquitous herbicide, glyphosate. Of 50 fungal strains isolated (using culture media supplemented with glyphosate as the sole carbon-substrate), the majority were Penicillium strains (60%) and the others were Aspergillus and Trichoderma strains (26 and 8%, respectively). All 50 fungal isolates could use glyphosate as a phosphorous source. Eight of these isolates grew better on glyphosate-supplemented media than on regular Czapek Dox medium. LC-MS revealed that glyphosate degradation by Penicillium 4A21 resulted in sarcosine and aminomethylphosphonic acid.(AU)

Resíduos de agrotóxicos que contaminam o meio ambiente circulam no ciclo hidrológico, podendo se acumular na cadeia alimentar e causar problemas tanto à saúde ambiental quanto humana. Por sua vez, microrganismos são bem conhecidos por sua versatilidade metabólica e capacidade de degradar substâncias quimicamente estáveis, incluindo xenobióticos recalcitrantes. O estudo atual se concentrou na bioprospecção nos solos da floresta amazônica para encontrar novas linhagens de fungos capazes de degradar com eficiência o herbicida onipresente na agricultura e no meio ambiente, o glifosato. Entre os 50 fungos isolados (usando meio de cultura suplementado com glifosato como única fonte de carbono), a maioria eram isolados do gênero Penicillium (60%) e os outros eram isolados de Aspergillus e Trichoderma (26 e 8%, respectivamente). Todos os 50 isolados de fungos foram capazes de usar glifosato como fonte de fósforo. Oito desses isolados cresceram melhor em meio suplementado com glifosato do que em meio Czapek Dox regular. LC-MS revelou que a degradação do glifosato por Penicillium 4A21 resultou nos metabólitos sarcosina e ácido aminometilfosfônico.(AU)

Amazonian soil fungi are efficient degraders of glyphosate herbicide; novel isolates of Penicillium, Aspergillus, and Trichoderma

Abstract Pesticide residues that contaminate the environment circulate within the hydrological cycle can accumulate within the food chain and cause problems to both environmental and human health. Microbes, however, are well known for their metabolic versatility and the ability to degrade chemically stable substances, including recalcitrant xenobiotics. The current study focused on bio-prospecting within Amazonian rainforest soils to find novel strains fungi capable of efficiently degrading the agriculturally and environmentally ubiquitous herbicide, glyphosate. Of 50 fungal strains isolated (using culture media supplemented with glyphosate as the sole carbon-substrate), the majority were Penicillium strains (60%) and the others were Aspergillus and Trichoderma strains (26 and 8%, respectively). All 50 fungal isolates could use glyphosate as a phosphorous source. Eight of these isolates grew better on glyphosate-supplemented media than on regular Czapek Dox medium. LC-MS revealed that glyphosate degradation by Penicillium 4A21 resulted in sarcosine and aminomethylphosphonic acid.

Resumo Resíduos de agrotóxicos que contaminam o meio ambiente circulam no ciclo hidrológico, podendo se acumular na cadeia alimentar e causar problemas tanto à saúde ambiental quanto humana. Por sua vez, microrganismos são bem conhecidos por sua versatilidade metabólica e capacidade de degradar substâncias quimicamente estáveis, incluindo xenobióticos recalcitrantes. O estudo atual se concentrou na bioprospecção nos solos da floresta amazônica para encontrar novas linhagens de fungos capazes de degradar com eficiência o herbicida onipresente na agricultura e no meio ambiente, o glifosato. Entre os 50 fungos isolados (usando meio de cultura suplementado com glifosato como única fonte de carbono), a maioria eram isolados do gênero Penicillium (60%) e os outros eram isolados de Aspergillus e Trichoderma (26 e 8%, respectivamente). Todos os 50 isolados de fungos foram capazes de usar glifosato como fonte de fósforo. Oito desses isolados cresceram melhor em meio suplementado com glifosato do que em meio Czapek Dox regular. LC-MS revelou que a degradação do glifosato por Penicillium 4A21 resultou nos metabólitos sarcosina e ácido aminometilfosfônico.

Amazonian soil fungi are efficient degraders of glyphosate herbicide; novel isolates of Penicillium, Aspergillus, and Trichoderma / Os fungos do solo amazônico são degradadores eficientes do herbicida glifosato; novos isolados de Penicillium, Aspergillus e Trichoderma

Abstract Pesticide residues that contaminate the environment circulate within the hydrological cycle can accumulate within the food chain and cause problems to both environmental and human health. Microbes, however, are well known for their metabolic versatility and the ability to degrade chemically stable substances, including recalcitrant xenobiotics. The current study focused on bio-prospecting within Amazonian rainforest soils to find novel strains fungi capable of efficiently degrading the agriculturally and environmentally ubiquitous herbicide, glyphosate. Of 50 fungal strains isolated (using culture media supplemented with glyphosate as the sole carbon-substrate), the majority were Penicillium strains (60%) and the others were Aspergillus and Trichoderma strains (26 and 8%, respectively). All 50 fungal isolates could use glyphosate as a phosphorous source. Eight of these isolates grew better on glyphosate-supplemented media than on regular Czapek Dox medium. LC-MS revealed that glyphosate degradation by Penicillium 4A21 resulted in sarcosine and aminomethylphosphonic acid.

Resumo Resíduos de agrotóxicos que contaminam o meio ambiente circulam no ciclo hidrológico, podendo se acumular na cadeia alimentar e causar problemas tanto à saúde ambiental quanto humana. Por sua vez, microrganismos são bem conhecidos por sua versatilidade metabólica e capacidade de degradar substâncias quimicamente estáveis, incluindo xenobióticos recalcitrantes. O estudo atual se concentrou na bioprospecção nos solos da floresta amazônica para encontrar novas linhagens de fungos capazes de degradar com eficiência o herbicida onipresente na agricultura e no meio ambiente, o glifosato. Entre os 50 fungos isolados (usando meio de cultura suplementado com glifosato como única fonte de carbono), a maioria eram isolados do gênero Penicillium (60%) e os outros eram isolados de Aspergillus e Trichoderma (26 e 8%, respectivamente). Todos os 50 isolados de fungos foram capazes de usar glifosato como fonte de fósforo. Oito desses isolados cresceram melhor em meio suplementado com glifosato do que em meio Czapek Dox regular. LC-MS revelou que a degradação do glifosato por Penicillium 4A21 resultou nos metabólitos sarcosina e ácido aminometilfosfônico.

Diversity of fungi obtained from bats captured in urban forest fragments in Sinop, Mato Grosso, Brazil / Diversidade de fungos em morcegos de fragmentos florestais urbanos de Sinop, Mato Grosso, Brasil

Bats are important for the homeostasis of ecosystems and serve as hosts of various microorganisms including bacteria, viruses, and fungi with pathogenic potential. This study aimed to isolate fungi from biological samples obtained from bats captured in the city of Sinop (state of Mato Grosso, Brazil), where large areas of deforestation exist due to urbanization and agriculture. On the basis of the flow of people and domestic animals, 48 bats were captured in eleven urban forest fragments. The samples were processed and submitted to microbiological cultures, to isolate and to identify the fungal genera. Thirty-four (70.83%) of the captured bats were positive for fungi; 18 (37.5%) and 16 (33.33%) of these bats were female and male, respectively. Penicillium sp., Scopulariopsis sp., Fusarium sp., Aspergillus sp., Alternaria sp., Cryptococcus sp., Trichosporon sp., and Candida sp., which may cause opportunistic infections, were isolated. The bat species with the highest number of fungal isolates was Molossus molossus: 21 isolates (43.8%). According to our results, bats captured in urban forest fragments in Sinop harbor pathogenic fungi, increasing the risk of opportunistic fungal infections in humans and domestic animals.

Os morcegos apresentam grande importância na homeostasia dos ecossistemas e são hospedeiros de uma rica diversidade de micro-organismos como bactérias, vírus e fungos com potencial patogênico. Portanto, este estudo visou isolar fungos presentes em amostras biológicas de morcegos na cidade de Sinop - MT, que possui grandes áreas de desmatamento devido à urbanização e agricultura. Foram capturados 48 morcegos de diferentes espécies, em onze fragmentos florestais urbanos definidos de acordo com fluxo de pessoas e animais domésticos, para obtenção de amostras biológicas. Essas amostras foram processadas e submetidas aos cultivos microbiológicos, para isolamento e identificação dos gêneros dos fungos. Dos 48 morcegos, 34 (70,83%) foram positivos para pelos menos um gênero de fungo, sendo 18 (37,5%) fêmeas e 16 (33,33%) machos, e os gêneros isolados a partir das amostras biológicas foram Penicillium sp., Scopulariopsis sp., Fusarium sp., Aspergillus sp., Alternaria sp., Cryptococcus sp., Trichosporon sp. e Candida sp., que podem ser causadores de infecções oportunistas. Desse total, a espécie que apresentou maior positividade para pelo menos um gênero de fungo foi Molossus molossus com 21 (43,8%). Nossos resultados demonstram que os morcegos capturados nos fragmentos florestais urbanos na cidade de Sinop - MT, podem atuar como agentes veiculadores de fungos com potencial patogênico, aumentando assim o risco de exposição e aquisição de infecções fúngicas oportunistas por pessoas e animais domésticos.

Diversity of fungi obtained from bats captured in urban forest fragments in Sinop, Mato Grosso, Brazil / Diversidade de fungos em morcegos de fragmentos florestais urbanos de Sinop, Mato Grosso, Brasil

Bats are important for the homeostasis of ecosystems and serve as hosts of various microorganisms including bacteria, viruses, and fungi with pathogenic potential. This study aimed to isolate fungi from biological samples obtained from bats captured in the city of Sinop (state of Mato Grosso, Brazil), where large areas of deforestation exist due to urbanization and agriculture. On the basis of the flow of people and domestic animals, 48 bats were captured in eleven urban forest fragments. The samples were processed and submitted to microbiological cultures, to isolate and to identify the fungal genera. Thirty-four (70.83%) of the captured bats were positive for fungi; 18 (37.5%) and 16 (33.33%) of these bats were female and male, respectively. Penicillium sp., Scopulariopsis sp., Fusarium sp., Aspergillus sp., Alternaria sp., Cryptococcus sp., Trichosporon sp., and Candida sp., which may cause opportunistic infections, were isolated. The bat species with the highest number of fungal isolates was Molossus molossus: 21 isolates (43.8%). According to our results, bats captured in urban forest fragments in Sinop harbor pathogenic fungi, increasing the risk of opportunistic fungal infections in humans and domestic animals.(AU)

Os morcegos apresentam grande importância na homeostasia dos ecossistemas e são hospedeiros de uma rica diversidade de micro-organismos como bactérias, vírus e fungos com potencial patogênico. Portanto, este estudo visou isolar fungos presentes em amostras biológicas de morcegos na cidade de Sinop - MT, que possui grandes áreas de desmatamento devido à urbanização e agricultura. Foram capturados 48 morcegos de diferentes espécies, em onze fragmentos florestais urbanos definidos de acordo com fluxo de pessoas e animais domésticos, para obtenção de amostras biológicas. Essas amostras foram processadas e submetidas aos cultivos microbiológicos, para isolamento e identificação dos gêneros dos fungos. Dos 48 morcegos, 34 (70,83%) foram positivos para pelos menos um gênero de fungo, sendo 18 (37,5%) fêmeas e 16 (33,33%) machos, e os gêneros isolados a partir das amostras biológicas foram Penicillium sp., Scopulariopsis sp., Fusarium sp., Aspergillus sp., Alternaria sp., Cryptococcus sp., Trichosporon sp. e Candida sp., que podem ser causadores de infecções oportunistas. Desse total, a espécie que apresentou maior positividade para pelo menos um gênero de fungo foi Molossus molossus com 21 (43,8%). Nossos resultados demonstram que os morcegos capturados nos fragmentos florestais urbanos na cidade de Sinop - MT, podem atuar como agentes veiculadores de fungos com potencial patogênico, aumentando assim o risco de exposição e aquisição de infecções fúngicas oportunistas por pessoas e animais domésticos.(AU)

Diversity of fungi obtained from bats captured in urban forest fragments in Sinop, Mato Grosso, Brazil

Abstract Bats are important for the homeostasis of ecosystems and serve as hosts of various microorganisms including bacteria, viruses, and fungi with pathogenic potential. This study aimed to isolate fungi from biological samples obtained from bats captured in the city of Sinop (state of Mato Grosso, Brazil), where large areas of deforestation exist due to urbanization and agriculture. On the basis of the flow of people and domestic animals, 48 bats were captured in eleven urban forest fragments. The samples were processed and submitted to microbiological cultures, to isolate and to identify the fungal genera. Thirty-four (70.83%) of the captured bats were positive for fungi; 18 (37.5%) and 16 (33.33%) of these bats were female and male, respectively. Penicillium sp., Scopulariopsis sp., Fusarium sp., Aspergillus sp., Alternaria sp., Cryptococcus sp., Trichosporon sp., and Candida sp., which may cause opportunistic infections, were isolated. The bat species with the highest number of fungal isolates was Molossus molossus: 21 isolates (43.8%). According to our results, bats captured in urban forest fragments in Sinop harbor pathogenic fungi, increasing the risk of opportunistic fungal infections in humans and domestic animals.

Resumo Os morcegos apresentam grande importância na homeostasia dos ecossistemas e são hospedeiros de uma rica diversidade de micro-organismos como bactérias, vírus e fungos com potencial patogênico. Portanto, este estudo visou isolar fungos presentes em amostras biológicas de morcegos na cidade de Sinop - MT, que possui grandes áreas de desmatamento devido à urbanização e agricultura. Foram capturados 48 morcegos de diferentes espécies, em onze fragmentos florestais urbanos definidos de acordo com fluxo de pessoas e animais domésticos, para obtenção de amostras biológicas. Essas amostras foram processadas e submetidas aos cultivos microbiológicos, para isolamento e identificação dos gêneros dos fungos. Dos 48 morcegos, 34 (70,83%) foram positivos para pelos menos um gênero de fungo, sendo 18 (37,5%) fêmeas e 16 (33,33%) machos, e os gêneros isolados a partir das amostras biológicas foram Penicillium sp., Scopulariopsis sp., Fusarium sp., Aspergillus sp., Alternaria sp., Cryptococcus sp., Trichosporon sp. e Candida sp., que podem ser causadores de infecções oportunistas. Desse total, a espécie que apresentou maior positividade para pelo menos um gênero de fungo foi Molossus molossus com 21 (43,8%). Nossos resultados demonstram que os morcegos capturados nos fragmentos florestais urbanos na cidade de Sinop - MT, podem atuar como agentes veiculadores de fungos com potencial patogênico, aumentando assim o risco de exposição e aquisição de infecções fúngicas oportunistas por pessoas e animais domésticos.

Diversity of fungi obtained from bats captured in urban forest fragments in Sinop, Mato Grosso, Brazil / Diversidade de fungos em morcegos de fragmentos florestais urbanos de Sinop, Mato Grosso, Brasil

Abstract Bats are important for the homeostasis of ecosystems and serve as hosts of various microorganisms including bacteria, viruses, and fungi with pathogenic potential. This study aimed to isolate fungi from biological samples obtained from bats captured in the city of Sinop (state of Mato Grosso, Brazil), where large areas of deforestation exist due to urbanization and agriculture. On the basis of the flow of people and domestic animals, 48 bats were captured in eleven urban forest fragments. The samples were processed and submitted to microbiological cultures, to isolate and to identify the fungal genera. Thirty-four (70.83%) of the captured bats were positive for fungi; 18 (37.5%) and 16 (33.33%) of these bats were female and male, respectively. Penicillium sp., Scopulariopsis sp., Fusarium sp., Aspergillus sp., Alternaria sp., Cryptococcus sp., Trichosporon sp., and Candida sp., which may cause opportunistic infections, were isolated. The bat species with the highest number of fungal isolates was Molossus molossus: 21 isolates (43.8%). According to our results, bats captured in urban forest fragments in Sinop harbor pathogenic fungi, increasing the risk of opportunistic fungal infections in humans and domestic animals.

Resumo Os morcegos apresentam grande importância na homeostasia dos ecossistemas e são hospedeiros de uma rica diversidade de micro-organismos como bactérias, vírus e fungos com potencial patogênico. Portanto, este estudo visou isolar fungos presentes em amostras biológicas de morcegos na cidade de Sinop - MT, que possui grandes áreas de desmatamento devido à urbanização e agricultura. Foram capturados 48 morcegos de diferentes espécies, em onze fragmentos florestais urbanos definidos de acordo com fluxo de pessoas e animais domésticos, para obtenção de amostras biológicas. Essas amostras foram processadas e submetidas aos cultivos microbiológicos, para isolamento e identificação dos gêneros dos fungos. Dos 48 morcegos, 34 (70,83%) foram positivos para pelos menos um gênero de fungo, sendo 18 (37,5%) fêmeas e 16 (33,33%) machos, e os gêneros isolados a partir das amostras biológicas foram Penicillium sp., Scopulariopsis sp., Fusarium sp., Aspergillus sp., Alternaria sp., Cryptococcus sp., Trichosporon sp. e Candida sp., que podem ser causadores de infecções oportunistas. Desse total, a espécie que apresentou maior positividade para pelo menos um gênero de fungo foi Molossus molossus com 21 (43,8%). Nossos resultados demonstram que os morcegos capturados nos fragmentos florestais urbanos na cidade de Sinop - MT, podem atuar como agentes veiculadores de fungos com potencial patogênico, aumentando assim o risco de exposição e aquisição de infecções fúngicas oportunistas por pessoas e animais domésticos.

Crescimentos de fungos produtores de micotoxinas em grãos de amendoim / Growths of mycotoxin-producing fungi on peanut grains

O amendoim (Arachis hypogaea L.) é uma oleaginosa com alto valor energético e nutricional, servindo de substrato ideal para o crescimento de fungos durante o processo de colheita, estocagem e processamento dos grãos. As micotoxinas são originadas a partir do metabolismo secundário de fungos toxigênicos; quando essas toxinas são ingeridas, podem causar efeitos tóxicos em humanos e animais. O objetivo deste trabalho foi avaliar a contaminação fúngica em amostras de grãos de amendoim disponíveis para o consumo humano. Foram analisadas amostras de amendoim torrado na vagem, amendoim cru (in natura) e amendoim torrado sem a vagem. A metodologia utilizada foi o método de plaqueamento direto em placas de Petri, contendo o meio cultura Sabouraud Dextrose Ágar (SDA). Porções de 40 grãos de amendoim de cada amostra foram utilizadas para o teste. Os resultados obtidos foram expressos em quantidade de grãos que apresentaram crescimento fúngico em porcentagem. Para identificação ao nível do género das colônias fúngicas isoladas, foi efetuada uma observação microscópica das suas estruturas morfológicas. Em todas as amostras estudadas ocorreram o crescimento de fungos potencialmente micotoxigênicos. Os grãos de amendoim cru (in natura) sem a vagem foram os mais contaminados por fungos como Aspergillus sp. (20%), Alternaria sp. (13,1%), Penicillium sp. (13,3%) e Fusarium sp. (23,3%) quando comparados com os grãos torrados. A presença desses fungos nas amostras de amendoim indica a possibilidade de desenvolvimento de micotoxinas potencialmente tóxicas para o humano. O processo de torrefação inibe o crescimento de determinadas espécies de fungos micotoxigênicos.(AU)

Peanut is an oilseed with high energy and nutritional value, serving as an ideal substrate for the growth of fungi during the process of harvesting, storing and processing the grains. Mycotoxins originate from the secondary metabolism of toxigenic fungi; when ingested, they can cause toxic effects in humans and animals. The objective of this work was to evaluate the fungal contamination in samples of peanut grains available for human consumption. The methodology used was the direct plating method in Petri dishes containing Sabouraud Dextrose Agar (SDA) culture. Portions of 40 peanut kernels from the samples were immersed in a 0.4% sodium hypochlorite solution for two minutes for surface disinfection, then rinsed once in distilled water. Incubation was carried out at room temperature for 7 days and the results were expressed as the amount of grains that showed fungal growth in percentage. To identify the colonies of isolated filamentous fungi at the genus level, a microscopic observation of their morphological structures was carried out, which consists of removing a sample from the edge of the colony and placing it in a drop of cotton blue (1g/L in lactic acid 88%), between slide and coverslip. Potentially toxigenic fungi were identified: Aspergillus sp., Rhizopus sp., Alternaria sp., Penicillium sp. and Fusarium sp. The presence of these fungi in peanut samples indicates the possibility of development of mycotoxins potentially toxic to humans. The roasting process may not be sufficient to destroy some mycotoxins.(AU)

Optimization of oxalic acid production by fungi for biotechnological solubilization of rock phosphate

This study describes a biotechnological strategy for producing and applying oxalic acid to solubilize phosphorus (P) from rock phosphate (RP). We evaluated six fungal species (Aspergillus niger FS1, Penicillium islandicum FS41, Pleurotus ostreatus PO1, Rhizoctonia solani Rhiz555, Sclerotium rolfsii Sr25, and Sclerotinia sclerotiorum Scl134) and three culture media (potato dextrose broth, Tsao and Strasser media) to maximize oxalic acid production. Among the fungal isolates tested and culture media, S. rolfsii Sr25 and Tsao medium showed efficient oxalic acid production. Tsao medium was optimized following a response surface methodology after initial screening of factors affecting RP solubilization. The optimized concentrations were 1 g L-1 NaNO3, 100 g L-1 glucose, 2 g L-1 KH2PO4, 4.5 g L-1 yeast extract, and 25 mg L-1 MgSO4·7H2O used for 20 days of incubation. Under these conditions, 71 mmol L-1 oxalic acid was obtained, representing a three-fold increase over production under non-optimized conditions (20 mmol L-1). Under optimized conditions, oxalic acid produced by S. rolfsii Sr25 reacted with low-solubility RP and solubilized 100 % of the P contained in ore. Thus, using S. rolfsii Sr25 to produce oxalic acid seems a promising biotechnological alternative for P solubilization from RP.(AU)

Plant metabolite 5-pentadecyl resorcinol is produced by the Amazonian fungus Penicillium sclerotiorum LM 5679 / O metabólito vegetal 5-pentadecil resorcinol é produzido pelo fungo amazônico Penicillium sclerotiorum LM 5679

Since the classic studies of Alexander Flemming, Penicillium strains have been known as a rich source of antimicrobial substances. Recent studies have identified novel metabolites produced by Penicillium sclerotiorum that have antibacterial, antifouling and pharmaceutical activities. Here, we report the isolation of a P. sclerotiorum (LM 5679) from Amazonian soil and carry out a culture-based study to determine whether it can produce any novel secondary metabolite(s) that are not thus-far reported for this genus. Using a submerged culture system, secondary metabolites were recovered by solvent extract followed by thin-layer chromatography, nuclear magnetic resonance, and mass spectroscopy. One novel secondary metabolite was isolated from P. sclerotiorum (LM 5679); the phenolic compound 5-pentadecyl resorcinol widely known as an antifungal, that is produced by diverse plant species. This metabolite was not reported previously in any Penicillium species and was only found once before in fungi (that time, in a Fusarium). Here, we discuss the known activities of 5-pentadecyl resorcinol in the context of its mode-of-action as a hydrophobic (chaotropicity-mediated) stressor.

Desde os estudos clássicos de Alexander Flemming, as cepas de Penicillium são conhecidas como uma fonte rica em substâncias antimicrobianas. Estudos recentes identificaram novos metabólitos produzidos pela espécie Penicillium sclerotiorum com atividades antibacteriana, anti-incrustante e farmacêutica. Aqui, relatamos o isolamento de uma colônia de P. sclerotiorum (LM 5679) do solo amazônico e relatamos também o estudo baseado em cultura para determinar se ele pode produzir qualquer novo metabólito (s) secundário (s) que não foram relatados até agora para este gênero. Usando um sistema de cultura submerso, os metabólitos secundários foram recuperados por extrato de solvente seguido por cromatografia em camada delgada, ressonância magnética nuclear e espectroscopia de massa. Um novo metabólito secundário foi isolado de P. sclerotiorum (LM 5679); o composto fenólico 5-pentadecil resorcinol que é amplamente conhecido como um antifúngico que é produzido por diversas espécies de plantas. Este metabólito não foi relatado anteriormente em nenhuma espécie de Penicillium, e foi encontrado apenas uma vez em fungos (Fusarium). Aqui, discutimos as atividades conhecidas do 5-pentadecil resorcinol no contexto de seu modo de ação como um estressor hidrofóbico (mediado pela caotropicidade).

Plant metabolite 5-pentadecyl resorcinol is produced by the Amazonian fungus Penicillium sclerotiorum LM 5679 / O metabólito vegetal 5-pentadecil resorcinol é produzido pelo fungo amazônico Penicillium sclerotiorum LM 5679

Since the classic studies of Alexander Flemming, Penicillium strains have been known as a rich source of antimicrobial substances. Recent studies have identified novel metabolites produced by Penicillium sclerotiorum that have antibacterial, antifouling and pharmaceutical activities. Here, we report the isolation of a P. sclerotiorum (LM 5679) from Amazonian soil and carry out a culture-based study to determine whether it can produce any novel secondary metabolite(s) that are not thus-far reported for this genus. Using a submerged culture system, secondary metabolites were recovered by solvent extract followed by thin-layer chromatography, nuclear magnetic resonance, and mass spectroscopy. One novel secondary metabolite was isolated from P. sclerotiorum (LM 5679); the phenolic compound 5-pentadecyl resorcinol widely known as an antifungal, that is produced by diverse plant species. This metabolite was not reported previously in any Penicillium species and was only found once before in fungi (that time, in a Fusarium). Here, we discuss the known activities of 5-pentadecyl resorcinol in the context of its mode-of-action as a hydrophobic (chaotropicity-mediated) stressor.(AU)

Desde os estudos clássicos de Alexander Flemming, as cepas de Penicillium são conhecidas como uma fonte rica em substâncias antimicrobianas. Estudos recentes identificaram novos metabólitos produzidos pela espécie Penicillium sclerotiorum com atividades antibacteriana, anti-incrustante e farmacêutica. Aqui, relatamos o isolamento de uma colônia de P. sclerotiorum (LM 5679) do solo amazônico e relatamos também o estudo baseado em cultura para determinar se ele pode produzir qualquer novo metabólito (s) secundário (s) que não foram relatados até agora para este gênero. Usando um sistema de cultura submerso, os metabólitos secundários foram recuperados por extrato de solvente seguido por cromatografia em camada delgada, ressonância magnética nuclear e espectroscopia de massa. Um novo metabólito secundário foi isolado de P. sclerotiorum (LM 5679); o composto fenólico 5-pentadecil resorcinol que é amplamente conhecido como um antifúngico que é produzido por diversas espécies de plantas. Este metabólito não foi relatado anteriormente em nenhuma espécie de Penicillium, e foi encontrado apenas uma vez em fungos (Fusarium). Aqui, discutimos as atividades conhecidas do 5-pentadecil resorcinol no contexto de seu modo de ação como um estressor hidrofóbico (mediado pela caotropicidade).(AU)

Plant metabolite 5-pentadecyl resorcinol is produced by the Amazonian fungus Penicillium sclerotiorum LM 5679

Abstract Since the classic studies of Alexander Flemming, Penicillium strains have been known as a rich source of antimicrobial substances. Recent studies have identified novel metabolites produced by Penicillium sclerotiorum that have antibacterial, antifouling and pharmaceutical activities. Here, we report the isolation of a P. sclerotiorum (LM 5679) from Amazonian soil and carry out a culture-based study to determine whether it can produce any novel secondary metabolite(s) that are not thus-far reported for this genus. Using a submerged culture system, secondary metabolites were recovered by solvent extract followed by thin-layer chromatography, nuclear magnetic resonance, and mass spectroscopy. One novel secondary metabolite was isolated from P. sclerotiorum (LM 5679); the phenolic compound 5-pentadecyl resorcinol widely known as an antifungal, that is produced by diverse plant species. This metabolite was not reported previously in any Penicillium species and was only found once before in fungi (that time, in a Fusarium). Here, we discuss the known activities of 5-pentadecyl resorcinol in the context of its mode-of-action as a hydrophobic (chaotropicity-mediated) stressor.

Resumo Desde os estudos clássicos de Alexander Flemming, as cepas de Penicillium são conhecidas como uma fonte rica em substâncias antimicrobianas. Estudos recentes identificaram novos metabólitos produzidos pela espécie Penicillium sclerotiorum com atividades antibacteriana, anti-incrustante e farmacêutica. Aqui, relatamos o isolamento de uma colônia de P. sclerotiorum (LM 5679) do solo amazônico e relatamos também o estudo baseado em cultura para determinar se ele pode produzir qualquer novo metabólito (s) secundário (s) que não foram relatados até agora para este gênero. Usando um sistema de cultura submerso, os metabólitos secundários foram recuperados por extrato de solvente seguido por cromatografia em camada delgada, ressonância magnética nuclear e espectroscopia de massa. Um novo metabólito secundário foi isolado de P. sclerotiorum (LM 5679); o composto fenólico 5-pentadecil resorcinol que é amplamente conhecido como um antifúngico que é produzido por diversas espécies de plantas. Este metabólito não foi relatado anteriormente em nenhuma espécie de Penicillium, e foi encontrado apenas uma vez em fungos (Fusarium). Aqui, discutimos as atividades conhecidas do 5-pentadecil resorcinol no contexto de seu modo de ação como um estressor hidrofóbico (mediado pela caotropicidade).

Plant metabolite 5-pentadecyl resorcinol is produced by the Amazonian fungus Penicillium sclerotiorum LM 5679 / O metabólito vegetal 5-pentadecil resorcinol é produzido pelo fungo amazônico Penicillium sclerotiorum LM 5679

Since the classic studies of Alexander Flemming, Penicillium strains have been known as a rich source of antimicrobial substances. Recent studies have identified novel metabolites produced by Penicillium sclerotiorum that have antibacterial, antifouling and pharmaceutical activities. Here, we report the isolation of a P. sclerotiorum (LM 5679) from Amazonian soil and carry out a culture-based study to determine whether it can produce any novel secondary metabolite(s) that are not thus-far reported for this genus. Using a submerged culture system, secondary metabolites were recovered by solvent extract followed by thin-layer chromatography, nuclear magnetic resonance, and mass spectroscopy. One novel secondary metabolite was isolated from P. sclerotiorum (LM 5679); the phenolic compound 5-pentadecyl resorcinol widely known as an antifungal, that is produced by diverse plant species. This metabolite was not reported previously in any Penicillium species and was only found once before in fungi (that time, in a Fusarium). Here, we discuss the known activities of 5-pentadecyl resorcinol in the context of its mode-of-action as a hydrophobic (chaotropicity-mediated) stressor.

Desde os estudos clássicos de Alexander Flemming, as cepas de Penicillium são conhecidas como uma fonte rica em substâncias antimicrobianas. Estudos recentes identificaram novos metabólitos produzidos pela espécie Penicillium sclerotiorum com atividades antibacteriana, anti-incrustante e farmacêutica. Aqui, relatamos o isolamento de uma colônia de P. sclerotiorum (LM 5679) do solo amazônico e relatamos também o estudo baseado em cultura para determinar se ele pode produzir qualquer novo metabólito (s) secundário (s) que não foram relatados até agora para este gênero. Usando um sistema de cultura submerso, os metabólitos secundários foram recuperados por extrato de solvente seguido por cromatografia em camada delgada, ressonância magnética nuclear e espectroscopia de massa. Um novo metabólito secundário foi isolado de P. sclerotiorum (LM 5679); o composto fenólico 5-pentadecil resorcinol que é amplamente conhecido como um antifúngico que é produzido por diversas espécies de plantas. Este metabólito não foi relatado anteriormente em nenhuma espécie de Penicillium, e foi encontrado apenas uma vez em fungos (Fusarium). Aqui, discutimos as atividades conhecidas do 5-pentadecil resorcinol no contexto de seu modo de ação como um estressor hidrofóbico (mediado pela caotropicidade).

Diversity of entomopathogenic fungi from soils of eucalyptus and soybean crops and natural forest areas / Diversidade de fungos entomopatogênicos em solos de culturas de eucalipto e soja e área de mata nativa

Soils present high fungal diversity, including entomopathogenic species. These fungi are used in pest control, providing easy production, multiplication, application, and dispersion in the field. The objective of the present study was to evaluate entomopathogenic fungal diversity in soils from eucalyptus and soybean crops and natural forest areas. These fungi were isolated using the "Bait Method" with Tenebrio molitor (Linnaeus, 1758) (Coleoptera: Tenebrionidae) larvae from 10 soil samples per area, collected at 10 cm deep in a zig-zag pattern. The isolated entomopathogenic fungi were cultivated in Petri dishes using PDA medium and their mycelia separated after seven days of incubation in a BOD-type chamber. Species of Aspergillus, Beauveria, Cordyceps, Fusarium, Metarhizium, Penicillium and Purpureocillium were identified. The "Bait Method" with T. molitor larvae is efficient to isolate entomopathogenic fungi with higher diversity from soils of the natural forest than the cultivated area.

A diversidade de fungos, incluindo espécies entomopatogênicas, é alta nos solos. Esses fungos são utilizados no manejo de pragas com facilidade de produção, multiplicação, aplicação e dispersão no campo. O objetivo foi avaliar a diversidade de fungos entomopatogênicos em solos de culturas de eucalipto e soja e áreas de mata nativa. Fungos entomopatogênicos foram isolados pelo "Bait Method" com larvas de Tenebrio molitor (Linnaeus, 1758) (Coleoptera: Tenebrionidae) de 10 amostras de solo por área, coletadas a 10 cm de profundidade em zig-zag. Os fungos isolados foram cultivados em três placas de Petri em meio BDA e seus micélios separados após sete dias de incubação em câmara tipo BOD. Fungos dos gêneros Aspergillus, Beauveria, Cordyceps, Fusarium, Metarhizium, Penicillium e Purpureocillium foram identificados. O "Bait Method" com larvas de T. molitor é eficiente para isolar fungos entomopatogênicos com maior diversidade em solos de área de mata nativa que naqueles com culturas de eucalipto e soja.

Selectivity of Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana to adults of Telenomus podisi (Hymenoptera: Scelionidae) / Seletividade de Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana para adultos de Telenomus podisi (Hymenoptera: Scelionidae)

The selectivity of entomopathogenic fungi to non-target organisms needs to be considered in Integrated Pest Management (IPM), because even though they are biological control agents, if used incorrectly, they can negatively alter the functioning of agroecosystems. Therefore, studies that assess the selectivity of these fungi to beneficial organisms are extremely important. The objective of this work was to evaluate the selectivity of Metarhizium anisopliae (Metarril®) and Beauveria bassiana (Boveril®) to adults of Telenomus podisi Ashmead (Hymenoptera: Scelionidae), under laboratory conditions. The products were evaluated on adult females of T. podisi, at the concentrations recommended by the manufacturer. To this, 0.2 mL of suspensions of each product and control (treatments) were applied to the inner surface of glass tubes, and then a female T. podisi was placed in it (≤ 48 h of emergence). After 24 h of contact, cards with 25 eggs of Euschistus heros Fabricius (Hemiptera: Pentatomidae) were offered for 24 h (COF24). After this period, the COF24 were withdrawn. After 72 h of contact of the female with the tube surface, new E. heros egg cards were made available (COF72) for 24 h for T. podisi ovipositioning. The mortality of T. podisi females was evaluated daily to determine longevity, percentage of parasitism and emergence, sex ratio, and egg-adult period of the T. podisi offspring. Metarril® and Boveril®, considered selective for adult females of T. podisi, did not negatively affect most of the parameters evaluated.(AU)

A seletividade de fungos entomopatogênicos a organismos não-alvo deve ser considerada no Manejo Integrado de Pragas (MIP), pois mesmo sendo agentes de controle biológico, se utilizados de forma incorreta, podem alterar negativamente o funcionamento dos agroecossistemas. Portanto, estudos que avaliam a seletividade desses fungos a organismos benéficos são extremamente importantes. O objetivo deste trabalho foi avaliar a seletividade de Metarhizium anisopliae (Metarril®) e Beauveria bassiana (Boveril®) a adultos de Telenomus podisi Ashmead (Hymenoptera: Scelionidae), em condições de laboratório. Os produtos foram avaliados em fêmeas adultas de T. podisi, nas concentrações recomendadas pelo fabricante. Para tanto, 0,2 mL das suspensões de cada produto e controle (tratamentos) foram aplicados na superfície interna dos tubos de vidro, sendo então colocada uma fêmea de T. podisi (≤ 48 h de emergência). Após 24 h de contato, cartões com 25 ovos de Euschistus heros Fabricius (Hemiptera: Pentatomidae) foram oferecidos por 24 h (COF24). Após esse período, o COF24 foi retirado. Após 72 h de contato da fêmea com a superfície do tubo, foram disponibilizadas novas cartelas de ovos de E. heros (COF72) por 24 h para oviposição de T. podisi. A mortalidade de fêmeas de T. podisi foi avaliada diariamente para determinar longevidade, porcentagem de parasitismo e emergência, proporção sexual e período de ovo-adulto da prole de T. podisi. Metarril® e Boveril® foram considerados seletivos para fêmeas adultas de T. podisi, não afetaram negativamente a maioria dos parâmetros avaliados.(AU)

Compatibility of different Metarhizium spp. propagules with synthetic acaricides for controlling Rhipicephalus microplus / Compatibilidade de diferentes propágulos de Metarhizium spp. com acaricidas sintéticos para o controle de Rhipicephalus microplus

The inappropriate use of synthetic acaricides has selected resistant Rhipicephalus microplus populations. The present study evaluated the compatibility of different Metarhizium spp. propagules (conidia, blastospores, and microsclerotia) by incubating them with synthetic acaricides (amitraz, deltamethrin, and a combination of cypermethrin, chlorpyrifos, and citronellal) for 1 h, 5 h, 10 h, and 24 h. Conidia and microsclerotia of the tested isolates were usually more tolerant to synthetic acaricides than blastospores. Our study also analyzed the in vitro effect of deltamethrin associated with fungal propagules for controlling a population of R. microplus females that were not susceptible to this synthetic acaricide. The use of entomopathogenic fungi in association with deltamethrin in this tick population caused a greater tick control than did the use of the fungus or the synthetic acaricide separately.(AU)

O uso inadequado de acaricidas sintéticos selecionou populações resistentes de Rhipicephalus microplus. O presente estudo avaliou a compatibilidade de diferentes propágulos de Metarhizium spp. (conídios, blastosporos e microscleródios), incubando-os com acaricidas sintéticos (amitraz, deltametrina e uma combinação de cipermetrina, clorpirifós e citronelal) por 1 h, 5 h, 10 h e 24 h. Conídios e microescleródios dos isolados testados foram geralmente mais tolerantes a acaricidas sintéticos do que os blastosporos. Este estudo também analisou o efeito in vitro da deltametrina associada a propágulos fúngicos no controle de uma população de fêmeas de R. microplus não suscetíveis a este acaricida sintético. O uso de fungos entomopatogênicos em associação com deltametrina, nesta população de carrapatos, causou maior controle do carrapato do que o uso do fungo ou acaricida sintético isoladamente.(AU)

Applying different infective structures of Beauveria bassiana to Coffea arabica infested with Hypothenemus hampei (Coleoptera: Curculionidae) under field

Coffee is the most appreciated beverage in worldwide; Brazil is the largest producer and exporter of this commodity. Organochlorine endosulfan was banned from the country in 2013 due to its teratogenic agent-related features. Since then, coffee plantations have experienced increased Hypothenemus hampei infestation rates. The aim of the current study is to assess variations in the rates of Coffea arabica fruits brocaded by H. hampei after the application of entomopathogenic fungal species Beauveria bassiana IBCB66. Experiments were carried out with 'Catuaí' and 'Mundo Novo' cultivars between 2018 and 2020, during the borer transit period. Three experiments were carried out based on the application of the aforementioned fungal species on the investigated coffee plant species, both by spraying and sprinkling, at 30-day intervals; 10 fruits were collected per face of each useful plant in each repetition. The experiment has followed a randomized blocks design with five treatments, including the control, and five repetitions, each. Beauveria bassiana Ecobass (IBCB66) wettable powder spray, at the concentration of 2 × 1013·ha­1, was used in experiments I and II. On the other hand, the mix used in experiment III was prepared with blastospores at concentration of 5 × 1012·ha­1 blastospores + 0.1% Silwet. The sprinkling process in all three experiments has used dry aerial conidia at concentration of 2 × 1013·ha­1. Collected data were subjected to analysis of variance (ANOVA), which was followed by Fisher's test at 5% probability level, in the SISVAR software. More than 35,000 fruits were assessed. In addition to variations between experiments, results have evidenced that the rate of brocaded fruits remained high.

Late effects of Beauveria bassiana on larval stages of Aedes aegypti Linneo, 1762 (Diptera: Culicidae) / Efeitos tardios de Beauveria bassiana nos estágios larvais de Aedes aegypti Linneo, 1762 (Diptera: Culicidae)

Aedes aegypti is a culicide that has gained relevance over the years due to its ability to transmit various viruses that cause diseases in humans that all the years cause high mortality rates in the world population. The main problem is that Ae. aegypti has managed to establish and maintain a close relationship with humans and their habitat, which is why the search for alternatives to control vector populations becomes imperative. The objective of the present work was to study the effects of two Beauveria bassiana strains on Aedes aegypti. Third instar larvae of Ae. aegypti in 250 mL plastic containers were inoculated with the GHA and NB3 strains at different concentrations (1.5 × 104, 1.5× 105, 1.5 × 106 and 1.5 × 107 conidia/mL). The NB3 strain presented highest mortality values with 63% in the highest concentration i.e., 1.5 × 107, while for the GHA strain the highest mortality value was 30.7% at the same concentration. The results showed significant difference in mortality with respect to the strain and days post treatment (P = 0.0001), but not with respect to the conidial concentration (P = 0.634). The average mortality of larvae per day for the NB3 for different concentrations ranged from 20 to 25 larvae per day, while for the GHA daily mortality ranged from 5 to 12 larvae. In post-treatment mortality, the highest mortality was recorded in the third stage larvae for the NB3, while for GHA the highest percentage mortality was observed in individuals who managed to reach the adult state. The findings of the current research depicted the noteworthy role of B. bassiana for the management of an important vector of human disease.

O Aedes aegypti é um culicida que vem ganhando relevância ao longo dos anos devido à sua capacidade de transmitir diversos vírus causadores de doenças em humanos que ao longo dos anos ocasionam altas taxas de mortalidade na população mundial. O principal problema é que Ae. aegypti tem conseguido estabelecer e manter uma relação próxima com o homem e seu habitat, por isso a busca por alternativas para o controle das populações de vetores torna-se imperativa. O objetivo do presente trabalho foi estudar os efeitos de duas cepas de Beauveria bassiana sobre Ae. aegypti. Larvas de terceiro instar de Ae. aegypti em recipientes plásticos de 250 mL foram inoculados com as cepas GHA e NB3 em diferentes concentrações (1.5 × 104, 1.5 × 105, 1.5 × 106 e 1.5 × 107 conídios/mL). A cepa NB3 apresentou os maiores valores de mortalidade com 63% na concentração mais alta, ou seja, 1.5 × 107, enquanto para a cepa GHA o maior valor de mortalidade foi 30.7% na mesma concentração. Os resultados mostraram diferença significativa na mortalidade com relação à cepa e dias pós-tratamento (P = 0.0001), mas não com relação à concentração de conídios (P = 0.634). A mortalidade média de larvas por dia para o NB3 para diferentes concentrações variou de 20 a 25 larvas por dia, enquanto para o GHA a mortalidade diária variou de 5 a 12 larvas. Na mortalidade pós-tratamento, a maior mortalidade foi registrada nas larvas de terceiro estágio para o NB3, enquanto para o GHA o maior percentual de mortalidade foi observado em indivíduos que conseguiram atingir o estado adulto. Os resultados da pesquisa atual retratam o papel notável de B. bassiana no manejo de um importante vetor de doenças humanas.

A comparative study on the virulence of entomopathogenic fungi against Trogoderma granarium (Everts) (Coleoptera: Dermestidae) in stored grains rice / Um estudo comparativo da virulência de fungos entomopatogênicos contra Trogoderma granarium (Everts) (Coleoptera: Dermestidae) em grãos armazenados de arroz

Entomopathogenic fungi (EPF) now a possible safer microbial control measure that could be considered as a substitute for chemical control of insect pests. Three EPF viz., Metarihizium anisopliae, Isaria furnosoroseus and Beauveria bassiana were evaluated for their virulence against the grubs of Khapra beetle, Trogoderma granarium (Everts) under laboratory conditions. The isolates were applied by two methods viz., diet incorporation and an immersion method with 3rd instar 20 grubs of T. granarium for each. The virulence of EPF was determined using percent mortality. Significantly higher mortality was observed in M. anisopliae applied through immersion (98.33%) and diet incorporation (93.33%) methods followed by B. bassiana (90.83 and 85.83%, respectively). The mortality caused by I. furnosoroseus was statistically lower in immersion and diet incorporation methods i.e. 81.67 and 73.33%, respectively. Based on the immersion method, all EPF were studied for multiple conidial concentration i.e., 1×104, 1×105, 1×106, 1×107 and 1×108 under the same in-vitro conditions. All the isolates were pathogenic to grub of T. granarium at the highest conidial concentration. M. anisopliae was proved the most effective virulent resulting in 98.33% mortality of the pest with LT50 4.61 days at 1 × 108 conidial concentration followed by 90.83 and 81.67 percent mortality with 5.07 and 8.01 days LT50, in the application of B. bassiana and I. furnosoroseus, respectively. M. anisopliae showed higher efficacy and could be considered as promising EPF for the development of myco-insecticides against effective biocontrol of T. granarium.

Os fungos entomopatogênicos (FPE) são agora a possível medida de controle microbiano mais segura, que pode ser considerada um substituto para o controle químico de pragas de insetos. Três EPF viz., Metarihizium anisopliae, Isaria furnosoroseus e Beauveria bassiana foram avaliados quanto à sua virulência contra as larvas do besouro Khapra, Trogoderma granarium (Everts) em condições de laboratório. Os isolados foram aplicados por dois métodos, a saber: incorporação de dieta e um método de imersão com 20 larvas de T. granarium de 3º ínstar para cada um. A virulência do EPF foi determinada usando a mortalidade percentual. Mortalidade significativamente maior foi observada em M. anisopliae aplicado pelos métodos de imersão (98,33%) e incorporação de dieta (93,33%), seguido por B. bassiana (90,83% e 85,83%, respectivamente). A mortalidade causada por I. furnosoroseus foi estatisticamente menor nos métodos de imersão e incorporação de dieta, ou seja, 81,67% e 73,33%, respectivamente. Com base no método de imersão, todos os EPFs foram estudados para múltiplas concentrações de conídios, ou seja, 1 × 104, 1 × 105, 1 × 106, 1 × 107 e 1 × 108 nas mesmas condições in vitro. Todos os isolados foram patogênicos à larva de T. granarium na maior concentração de conídios. M. anisopliae provou ser o virulento mais eficaz, resultando em 98,33% de mortalidade da praga com LT50 4,61 dias na concentração de 1 × 108 conídios seguido por 90,83% e 81,67% de mortalidade com 5,07 e 8,01 dias LT50, na aplicação de B. bassiana e I. furnosoroseus, respectivamente. M. anisopliae apresentou maior eficácia e pode ser considerada como um PFE promissor para o desenvolvimento de micoinseticidas contra o biocontrole efetivo de T. granarium.