Culture of rat mesenchymal stem cells on PHBV-PCL scaffolds: analysis of conditioned culture medium by FT-Raman spectroscopy

Abstract Mesenchymal stem cells (MSCs) have great potential for application in cell therapy and tissue engineering procedures because of their plasticity and capacity to differentiate into different cell types. Given the widespread use of MSCs, it is necessary to better understand some properties related to osteogenic differentiation, particularly those linked to biomaterials used in tissue engineering. The aim of this study was to develop an analysis method using FT-Raman spectroscopy for the identification and quantification of biochemical components present in conditioned culture media derived from MSCs with or without induction of osteogenic differentiation. All experiments were performed between passages 3 and 5. For this analysis, MSCs were cultured on scaffolds composed of bioresorbable poly(hydroxybutyrate-co-hydroxyvalerate) (PHBV) and poly(-caprolactone) (PCL) polymers. MSCs (GIBCO®) were inoculated onto the pure polymers and 75:25 PHBV/PCL blend (dense and porous samples). The plate itself was used as control. The cells were maintained in DMEM (with low glucose) containing GlutaMAX® and 10% FBS at 37oC with 5% CO2 for 21 days. The conditioned culture media were collected and analyzed to probe for functional groups, as well as possible molecular variations associated with cell differentiation and metabolism. The method permitted to identify functional groups of specific molecules in the conditioned medium such as cholesterol, phosphatidylinositol, triglycerides, beta-subunit polypeptides, amide regions and hydrogen bonds of proteins, in addition to DNA expression. In the present study, FT-Raman spectroscopy exhibited limited resolution since different molecules can express similar or even the same stretching vibrations, a fact that makes analysis difficult. There were no variations in the readings between the samples studied. In conclusion, FT-Raman spectroscopy did not meet expectations under the conditions studied.

Resumo As células-tronco mesenquimais (MSCs) possuem grande potencial para aplicação em procedimentos terapêuticos ligados a terapia celular e engenharia de tecidos, considerando-se a plasticidade e capacidade de formação em diferentes tipos celulares por elas. Dada a abrangência no emprego das MSCs, há necessidade de se compreender melhor algumas propriedades relacionadas à diferenciação osteogênica, particularmente liga à biomateriais usados em engenharia de tecidos. Este projeto objetiva o desenvolvimento de uma metodologia de análise empregando-se a FT-Raman para identificação e quantificação de componentes bioquímicos presentes em meios de cultura condicionados por MSCs, com ou sem indução à diferenciação osteogênica. Todos os experimentos foram realizados entre as passagens 3 e 5. Para essas análises, as MSCs foram cultivadas sobre arcabouços de polímeros biorreabsorvíveis de poli (hidroxibutirato-co-hidroxivalerato) (PHBV) e o poli (-caprolactona) (PCL). As MSCs (GIBCO®) foram inoculadas nos polímeros puros e na mistura 75:25 de PHBV / PCL (amostras densas e porosas). As células foram mantidas em DMEM (com baixa glicose) contendo GlutaMAX® e 10% de SFB a 37oC com 5% de CO2 por 21 dias. A própria placa foi usada como controle. Os meios de cultura condicionados foram coletados e analisadas em FT-Raman para sondagem de grupos funcionais, bem como possíveis variações moleculares associadas com a diferenciação e metabolismo celular. Foi possível discernir grupos funcionais de moléculas específicas no meio condicionado, como colesterol, fosfatidilinositol, triglicerídeos, forma Beta de polipeptídeos, regiões de amida e ligações de hidrogênio de proteínas, além da expressão de DNA. Na presente avaliação, a FT-Raman apresentou como uma técnica de resolução limitada, uma vez que modos vibracionais de estiramento próximos ou mesmo iguais podem ser expressos por moléculas diferente, dificultando a análise. Não houve variações nas leituras entre as amostras estudadas, concluindo-se que a FT-Raman não atendeu às expectativas nas condições estudadas.

Culture of rat mesenchymal stem cells on PHBV-PCL scaffolds: analysis of conditioned culture medium by FT Raman spectroscopy / Cultivo de células-tronco mesenquimais de rato sobre arcabouços de PHBV-PCL: análise do meio de cultura condicionado por espectroscopia de FT-Raman

Mesenchymal stem cells (MSCs) have great potential for application in cell therapy and tissue engineering procedures because of their plasticity and capacity to differentiate into different cell types. Given the widespread use of MSCs, it is necessary to better understand some properties related to osteogenic differentiation, particularly those linked to biomaterials used in tissue engineering. The aim of this study was to develop an analysis method using FT-Raman spectroscopy for the identification and quantification of biochemical components present in conditioned culture media derived from MSCs with or without induction of osteogenic differentiation. All experiments were performed between passages 3 and 5. For this analysis, MSCs were cultured on scaffolds composed of bioresorbable poly(hydroxybutyrate co-hydroxyvalerate) (PHBV) and poly(ε-caprolactone) (PCL) polymers. MSCs (GIBCO®) were inoculated onto the pure polymers and 75:25 PHBV/PCL blend (dense and porous samples). The plate itself was used as control. The cells were maintained in DMEM (with low glucose) containing GlutaMAX® and 10% FBS at 37ºC with 5% CO2 for 21 days. The conditioned culture media were collected and analyzed to probe for functional groups, as well as possible molecular variations associated with cell differentiation and metabolism. The method permitted to identify functional groups of specific molecules in the conditioned medium such as cholesterol, phosphatidylinositol, triglycerides, beta-subunit polypeptides, amide regions and hydrogen bonds of proteins, in addition to DNA expression. In the present study, FT-Raman spectroscopy exhibited limited resolution since different molecules can express similar or even the same stretching vibrations, a fact that makes analysis difficult. There were no variations in the readings between the samples studied. In conclusion, FT-Raman spectroscopy did not meet expectations under the conditions studied.

As células-tronco mesenquimais (MSCs) possuem grande potencial para aplicação em procedimentos terapêuticos ligados a terapia celular e engenharia de tecidos, considerando-se a plasticidade e capacidade de formação em diferentes tipos celulares por elas. Dada a abrangência no emprego das MSCs, há necessidade de se compreender melhor algumas propriedades relacionadas à diferenciação osteogênica, particularmente liga à biomateriais usados em engenharia de tecidos. Este projeto objetiva o desenvolvimento de uma metodologia de análise empregando-se a FT-Raman para identificação e quantificação de componentes bioquímicos presentes em meios de cultura condicionados por MSCs, com ou sem indução à diferenciação osteogênica. Todos os experimentos foram realizados entre as passagens 3 e 5. Para essas análises, as MSCs foram cultivadas sobre arcabouços de polímeros biorreabsorvíveis de poli (hidroxibutirato-co-hidroxivalerato) (PHBV) e o poli (ε-caprolactona) (PCL). As MSCs (GIBCO®) foram inoculadas nos polímeros puros e na mistura 75:25 de PHBV / PCL (amostras densas e porosas). As células foram mantidas em DMEM (com baixa glicose) contendo GlutaMAX® e 10% de SFB a 37oC com 5% de CO2 por 21 dias. A própria placa foi usada como controle. Os meios de cultura condicionados foram coletados e analisadas em FT-Raman para sondagem de grupos funcionais, bem como possíveis variações moleculares associadas com a diferenciação e metabolismo celular. Foi possível discernir grupos funcionais de moléculas específicas no meio condicionado, como colesterol, fosfatidilinositol, triglicerídeos, forma Beta de polipeptídeos, regiões de amida e ligações de hidrogênio de proteínas, além da expressão de DNA. Na presente avaliação, a FT-Raman apresentou como uma técnica de resolução limitada, uma vez que modos vibracionais de estiramento próximos ou mesmo iguais podem ser expressos por moléculas diferente, dificultando a [...].

Culture of rat mesenchymal stem cells on PHBV-PCL scaffolds: analysis of conditioned culture medium by FT-Raman spectroscopy / Cultivo de células-tronco mesenquimais de rato sobre arcabouços de PHBV-PCL: análise do meio de cultura condicionado por espectroscopia de FT-Raman

Abstract Mesenchymal stem cells (MSCs) have great potential for application in cell therapy and tissue engineering procedures because of their plasticity and capacity to differentiate into different cell types. Given the widespread use of MSCs, it is necessary to better understand some properties related to osteogenic differentiation, particularly those linked to biomaterials used in tissue engineering. The aim of this study was to develop an analysis method using FT-Raman spectroscopy for the identification and quantification of biochemical components present in conditioned culture media derived from MSCs with or without induction of osteogenic differentiation. All experiments were performed between passages 3 and 5. For this analysis, MSCs were cultured on scaffolds composed of bioresorbable poly(hydroxybutyrate-co-hydroxyvalerate) (PHBV) and poly(ε-caprolactone) (PCL) polymers. MSCs (GIBCO®) were inoculated onto the pure polymers and 75:25 PHBV/PCL blend (dense and porous samples). The plate itself was used as control. The cells were maintained in DMEM (with low glucose) containing GlutaMAX® and 10% FBS at 37oC with 5% CO2 for 21 days. The conditioned culture media were collected and analyzed to probe for functional groups, as well as possible molecular variations associated with cell differentiation and metabolism. The method permitted to identify functional groups of specific molecules in the conditioned medium such as cholesterol, phosphatidylinositol, triglycerides, beta-subunit polypeptides, amide regions and hydrogen bonds of proteins, in addition to DNA expression. In the present study, FT-Raman spectroscopy exhibited limited resolution since different molecules can express similar or even the same stretching vibrations, a fact that makes analysis difficult. There were no variations in the readings between the samples studied. In conclusion, FT-Raman spectroscopy did not meet expectations under the conditions studied.

Resumo As células-tronco mesenquimais (MSCs) possuem grande potencial para aplicação em procedimentos terapêuticos ligados a terapia celular e engenharia de tecidos, considerando-se a plasticidade e capacidade de formação em diferentes tipos celulares por elas. Dada a abrangência no emprego das MSCs, há necessidade de se compreender melhor algumas propriedades relacionadas à diferenciação osteogênica, particularmente liga à biomateriais usados em engenharia de tecidos. Este projeto objetiva o desenvolvimento de uma metodologia de análise empregando-se a FT-Raman para identificação e quantificação de componentes bioquímicos presentes em meios de cultura condicionados por MSCs, com ou sem indução à diferenciação osteogênica. Todos os experimentos foram realizados entre as passagens 3 e 5. Para essas análises, as MSCs foram cultivadas sobre arcabouços de polímeros biorreabsorvíveis de poli (hidroxibutirato-co-hidroxivalerato) (PHBV) e o poli (ε-caprolactona) (PCL). As MSCs (GIBCO®) foram inoculadas nos polímeros puros e na mistura 75:25 de PHBV / PCL (amostras densas e porosas). As células foram mantidas em DMEM (com baixa glicose) contendo GlutaMAX® e 10% de SFB a 37oC com 5% de CO2 por 21 dias. A própria placa foi usada como controle. Os meios de cultura condicionados foram coletados e analisadas em FT-Raman para sondagem de grupos funcionais, bem como possíveis variações moleculares associadas com a diferenciação e metabolismo celular. Foi possível discernir grupos funcionais de moléculas específicas no meio condicionado, como colesterol, fosfatidilinositol, triglicerídeos, forma Beta de polipeptídeos, regiões de amida e ligações de hidrogênio de proteínas, além da expressão de DNA. Na presente avaliação, a FT-Raman apresentou como uma técnica de resolução limitada, uma vez que modos vibracionais de estiramento próximos ou mesmo iguais podem ser expressos por moléculas diferente, dificultando a análise. Não houve variações nas leituras entre as amostras estudadas, concluindo-se que a FT-Raman não atendeu às expectativas nas condições estudadas.

Culture of rat mesenchymal stem cells on PHBV-PCL scaffolds: analysis of conditioned culture medium by FT Raman spectroscopy / Cultivo de células-tronco mesenquimais de rato sobre arcabouços de PHBV-PCL: análise do meio de cultura condicionado por espectroscopia de FT-Raman

Mesenchymal stem cells (MSCs) have great potential for application in cell therapy and tissue engineering procedures because of their plasticity and capacity to differentiate into different cell types. Given the widespread use of MSCs, it is necessary to better understand some properties related to osteogenic differentiation, particularly those linked to biomaterials used in tissue engineering. The aim of this study was to develop an analysis method using FT-Raman spectroscopy for the identification and quantification of biochemical components present in conditioned culture media derived from MSCs with or without induction of osteogenic differentiation. All experiments were performed between passages 3 and 5. For this analysis, MSCs were cultured on scaffolds composed of bioresorbable poly(hydroxybutyrate co-hydroxyvalerate) (PHBV) and poly(ε-caprolactone) (PCL) polymers. MSCs (GIBCO®) were inoculated onto the pure polymers and 75:25 PHBV/PCL blend (dense and porous samples). The plate itself was used as control. The cells were maintained in DMEM (with low glucose) containing GlutaMAX® and 10% FBS at 37ºC with 5% CO2 for 21 days. The conditioned culture media were collected and analyzed to probe for functional groups, as well as possible molecular variations associated with cell differentiation and metabolism. The method permitted to identify functional groups of specific molecules in the conditioned medium such as cholesterol, phosphatidylinositol, triglycerides, beta-subunit polypeptides, amide regions and hydrogen bonds of proteins, in addition to DNA expression. In the present study, FT-Raman spectroscopy exhibited limited resolution since different molecules can express similar or even the same stretching vibrations, a fact that makes analysis difficult. There were no variations in the readings between the samples studied. In conclusion, FT-Raman spectroscopy did not meet expectations under the conditions studied.(AU)

As células-tronco mesenquimais (MSCs) possuem grande potencial para aplicação em procedimentos terapêuticos ligados a terapia celular e engenharia de tecidos, considerando-se a plasticidade e capacidade de formação em diferentes tipos celulares por elas. Dada a abrangência no emprego das MSCs, há necessidade de se compreender melhor algumas propriedades relacionadas à diferenciação osteogênica, particularmente liga à biomateriais usados em engenharia de tecidos. Este projeto objetiva o desenvolvimento de uma metodologia de análise empregando-se a FT-Raman para identificação e quantificação de componentes bioquímicos presentes em meios de cultura condicionados por MSCs, com ou sem indução à diferenciação osteogênica. Todos os experimentos foram realizados entre as passagens 3 e 5. Para essas análises, as MSCs foram cultivadas sobre arcabouços de polímeros biorreabsorvíveis de poli (hidroxibutirato-co-hidroxivalerato) (PHBV) e o poli (ε-caprolactona) (PCL). As MSCs (GIBCO®) foram inoculadas nos polímeros puros e na mistura 75:25 de PHBV / PCL (amostras densas e porosas). As células foram mantidas em DMEM (com baixa glicose) contendo GlutaMAX® e 10% de SFB a 37oC com 5% de CO2 por 21 dias. A própria placa foi usada como controle. Os meios de cultura condicionados foram coletados e analisadas em FT-Raman para sondagem de grupos funcionais, bem como possíveis variações moleculares associadas com a diferenciação e metabolismo celular. Foi possível discernir grupos funcionais de moléculas específicas no meio condicionado, como colesterol, fosfatidilinositol, triglicerídeos, forma Beta de polipeptídeos, regiões de amida e ligações de hidrogênio de proteínas, além da expressão de DNA. Na presente avaliação, a FT-Raman apresentou como uma técnica de resolução limitada, uma vez que modos vibracionais de estiramento próximos ou mesmo iguais podem ser expressos por moléculas diferente, dificultando a [...].(AU)

Characterization of progesterone loaded biodegradable blend polymeric nanoparticles / Caracterização de nanopartículas blenda poliméricas biodegradáveis contendo progesterona

The encapsulation of progesterone in poly (hydroxybutirate-co-hydroxyvalerate) (PHBV), poly (-caprolactone) (PCL), poly (L-lactic acid) (PLLA) nanoparticles and PHBV/PCL and PHBV/PLLA blend nanoparticles was investigated in this research. Nanoparticles were produced by miniemulsion/solvent evaporation technique with lecithin as surfactant and were characterized regarding to z-average diameter (Dz) and polydispersity (PDI), progesterone recovery yield and encapsulation efficiency. Possible interactions between progesterone and the polymer matrices were investigated by Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR). High recoveries (up to 102.43±1.80% for the PHBV/PLLA blend) and encapsulation efficiencies (up to 99.53±0.04% for PCL) were achieved and the nanoparticles presented narrow size distribution (0.12±0.03 for PLLA). PCL nanoparticles (217.5±2.12nm) presented significant difference with the Dz from all the other formulations (P 0.05). The most evident interaction between progesterone and the nanoparticles polymeric matrix was found to PHBV/PCL due to the increase in the intensity of the band located in 1631 cm-1.(AU)

A encapsulação de progesterona em nanopartículas de poli(hidroxibutirato-co-hidroxivalerato) (PHBV), poli (-caprolactona) (PCL), poli (L-ácido lático) (PLLA) e em nanopartículas blenda de PHBV/PCL e PHBV/PLLA foi investigada neste trabalho. As nanopartículas foram produzidas pela técnica de miniemulsificação/evaporação do solvente com lecitina como surfactante e foram caracterizadas em relação ao diâmetro médio em intensidade (Dz) e o índice de polidispersão (PDI), rendimento de recuperação e eficiência de encapsulação de progesterona. Possíveis interações entre progesterona e as matrizes poliméricas foram investigadas por Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR). Valores elevados de rendimento de recuperação (de até 102,43±1,80% para a blenda PHBV/PLLA) e eficiência de encapsulação (de até 99,53±0,04% para PCL) foram obtidos e as nanopartículas apresentaram distribuição de tamanho estreita (0,12±0,03 para PLLA). As nanopartículas de PCL (217,5±2,12nm) apresentaram diferença significativa com todas as outras formulações (P 0,05) quanto ao Dz. A interação mais evidente entre progesterona e a matriz polimérica das nanopartículas foi para a blenda PHBV / PCL, devido ao aumento na intensidade da banda localizada em 1631 cm-1.(AU)

Bioatividade de nanoformulações de nim sobre a traça-do-tomateiro

The use of insecticide plants is an important tool in the management of insect pests. Aiming to control Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae), neem nanoformulations were evaluated. After estimating the LC50 for a commercial neem oil formulation, selection bioassays were performed with 22 nanoformulations. In order to do that, newly emerged caterpillars were fed on leaflets treated with nanoformulation solutions for 10 days. The effect on the development and longevity of the insect was evaluated with the two most promising nanoformulations, aqueous NC40 and powdered NC40 (NC 40 = Poly--hydroxibutirate nanocapsules). The LC50 for neem oil was estimated in 0.20% or 1.31mgL-1 of azadiractin. The nanoformulations aqueous NC40 and powdered NC40 affected the insect development.

O uso de plantas inseticidas é uma importante ferramenta para o manejo de insetos-praga. Visando ao controle de Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae), nanoformulações de nim foram avaliadas. Após a estimativa de uma CL50 para uma formulação de óleo comercial de nim, bioensaios de seleção foram realizados com 22 nanoformulações. Para isso, lagartas neonatas foram alimentadas sobre folíolos tratados com soluções das nanoformulações durante 10 dias. Com as duas nanoformulações mais promissoras, NC40 aquoso e NC40 pó (NC 40=nanocápsulas de Poli- -hidroxibutirato), foi avaliado o efeito sobre o desenvolvimento e a longevidade do inseto. A CL50 para o óleo de nim foi estimada em 0,20% ou 1,31mgL-1 de azadiractina. As nanoformulações NC40 aquoso e NC40 pó afetaram o desenvolvimento do inseto.

Bioatividade de nanoformulações de nim sobre a traça-do-tomateiro

The use of insecticide plants is an important tool in the management of insect pests. Aiming to control Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae), neem nanoformulations were evaluated. After estimating the LC50 for a commercial neem oil formulation, selection bioassays were performed with 22 nanoformulations. In order to do that, newly emerged caterpillars were fed on leaflets treated with nanoformulation solutions for 10 days. The effect on the development and longevity of the insect was evaluated with the two most promising nanoformulations, aqueous NC40 and powdered NC40 (NC 40 = Poly--hydroxibutirate nanocapsules). The LC50 for neem oil was estimated in 0.20% or 1.31mgL-1 of azadiractin. The nanoformulations aqueous NC40 and powdered NC40 affected the insect development.

O uso de plantas inseticidas é uma importante ferramenta para o manejo de insetos-praga. Visando ao controle de Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae), nanoformulações de nim foram avaliadas. Após a estimativa de uma CL50 para uma formulação de óleo comercial de nim, bioensaios de seleção foram realizados com 22 nanoformulações. Para isso, lagartas neonatas foram alimentadas sobre folíolos tratados com soluções das nanoformulações durante 10 dias. Com as duas nanoformulações mais promissoras, NC40 aquoso e NC40 pó (NC 40=nanocápsulas de Poli- -hidroxibutirato), foi avaliado o efeito sobre o desenvolvimento e a longevidade do inseto. A CL50 para o óleo de nim foi estimada em 0,20% ou 1,31mgL-1 de azadiractina. As nanoformulações NC40 aquoso e NC40 pó afetaram o desenvolvimento do inseto.

PERFIL ENDÓCRINO, METABÓLICO, COMPOSIÇÃO DE LEITE E TAXA DE PRENHEZ DE VACAS GIROLANDA RECEBENDO DIETA COM GORDURA PROTEGIDA

Há uma crescente demanda pelo leite a nível mundial e, como as áreas territoriais produtivas estão cada vez mais limitadas para este fim, torna-se necessário buscar uma maior eficiência para produzir mais em menor área. O emprego da tecnologia é fundamental, sendo a inseminação artificial em tempo fixo (IATF) uma biotecnologia responsável por aumenta a eficiência reprodutiva do rebanho e, que quando associada a uma estratégia nutricional, torna a atividade pecuária mais produtiva. A suplementação com gordura protegida para ruminantes tem demonstrado bons resultados, com aumento dos índices reprodutivos e produtivos dos rebanhos. O objetivo deste experimento foi avaliar a resposta endócrina, metabólica, composição de leite e taxa de prenhez em vacas leiteiras da raça Girolando submetidas à IATF e suplementadas com gordura protegida (Megalac-E®, QGN, RJ, Brasil) a base de sais de cálcio e ácidos graxos poli-insaturados (PF), determinar os perfis hormonal, energético, proteico e mineral associando ao aumento nos índices reprodutivos dos animais. Foram sincronizadas 35 vacas multíparas, em lactação, divididas em dois grupos: o grupo controle (G1), com dieta convencional da fazenda, e o grupo tratado (G2), com adição de 250g do Megalac-E® (QGN, RJ, Brasil) à dieta convencional durante o inicio da sincronização, até o diagnostico de gestação. Foi avaliado se a suplementação com gordura protegida causou alterações no perfil endócrino e metabólico, associando com alterações na taxa de prenhez dos animais tratados. No soro e plasma sanguíneo, houve variação entre os diferentes fatores de variabilidade, verificando-se que, para o fator Grupos, diferenças foram observadas para glicose, colesterol, ureia, creatinina, ácido úrico, globulina, fósforo, progesterona e T4. Quanto ao fator Coletas, foram observadas variações para glicose, frutosamina, - Hidroxibutirato, proteína total, ureia, creatinina, ácido úrico, globulina, cálcio, fósforo, triglicerídeos e T3. Já em relação à interação entre os fatores Grupos x Coletas, apenas para glicose e -Hidroxibutirato registraram-se variações significativas. Não houve variação na concentração de gordura, proteína, lactose, sólidos totais, sólidos não gordurosos e CCS do leite das vacas controle e as que receberam Megalac-E, tanto vazias quanto prenhas. A taxa de prenhez foi superior no grupo suplementado com o Megalac-E. Assim, considera-se que a suplementação com gordura protegida (Megalac-E®) na dieta de vacas Girolando submetidas à IATF promove adequada resposta metabólica e hormonal, por funcionar como precursor para a regulação metabólica, sem causar transtornos nutricionais e metabólicos, além de promover aumento na taxa de prenhez e de manter a qualidade do leite com boas características químicas e da celularidade.

Efeito de antioxidantes sobre o estresse oxidativo e a qualidade do leite de vacas Holandesas

Foram conduzidos três experimentos para avaliar o efeito da suplementação de antioxidantes naturais em vacas leiteiras em diferentes estágios de lactação recebendo dietas ricas em ácidos graxos poli-insaturados. No primeiro experimento foram avaliadas vacas em início de lactação. Este período é associado principalmente ao balanço energético negativo pelo aumento repentino das exigências nutricionais junto com uma baixa ingestão de matéria seca. Além disso, doenças são correlacionadas, pois há aumento na concentração de ácido beta-hidroxibutirato e ácidos graxos não esterificados no plasma sanguíneo. O total de 20 vacas multíparas da raça Holandês com cânulas ruminais foi dividido em duas dietas: (1) dieta COFO (controle) com perfusão 250 g de óleo de linhaça/d no abomaso; e (2) dieta FMFO (com 136 g farelo de linhaça na matéria seca) com perfusão de 250 g de óleo de linhaça no abomaso. Em um fatorial simples (2 níveis: COFO e FMFO) e análises de variância com medidas repetidas foram conduzidas para todos os dados. As vacas foram submetidas aos procedimentos experimentais do sétimo dia ao 28o após o parto, e durante os dias 28 aos 49 de lactação, as vacas receberam uma dieta basal. A ingestão de MS expressa em kg/d e em porcentagem no peso vivo aumentou para vacas alimentadas com FMFO quando comparadas com COFO. Consequentemente, o balanço energético negativo foi melhor nos animais tratados com FMFO. No segundo experimento, foram avaliadas vacas em meio lactação recebendo erva-mate (EMa) a qual possui antioxidantes naturais. O trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar os efeitos de níveis crescentes de EMa na alimentação de vacas leiteiras e o efeito da EMa na digestibilidade e qualidade do leite. Os animais foram distribuídos em um duplo quadrado latino 4 × 4, cada período experimental foi de 21 dias, sendo 14 dias para adaptação e sete dias para coleta de dados e amostras. Os tratamentos experimentais foram: 1) ração-controle sem suplementação de EMa (CONT); 2) ração-controle + suplementação com 250 g de EMa/dia (250EM); 3) ração-controle + suplementação de 500 g de EMa/dia (500EM); 4) ração-controle + suplementação de 750 g de EMa/dia (750EM). O poder de redução da erva mate no leite mostrou efeito linear positivo (P=0,04) em relação ao controle e efeito linear decrescente foi observado com a lactose (P=0.0001) e no N-ureico (P=0,04) para os níveis de inclusão de EMa. A digestibilidade de extrato etéreo também apresentou efeito linear positivo (P=0,05). Os resultados sugerem que a inclusão de EMa foi capaz de aumentar o poder de redução do leite das vacas demonstrando ser um aditivo viável para o aumento do poder antioxidante. Apesar da redução linear de lactose no leite e consequentemente sólidos totais, a EMa não alterou a produção de leite. Em função da oxidação dos ácidos graxos do leite, a inclusão de antioxidantes na alimentação animal é uma alternativa para reduzir oxidação dos AGPI presentes no leite, evitar a formação de compostos tóxicos e, ainda, melhorar a saúde dos animais que os consomem. No terceiro experimento, estudou-se a inclusão de vitamina E e erva mate na dieta de vacas leiteiras recebendo grãos de soja com objetivo de mensurar a transferência do antioxidante para o leite. Foram utilizadas quatro vacas multíparas da raça Holandês (549 ± 57 kg de peso corporal e 62 ± 15 dias em lactação) distribuídas em quadrado latino (4×4) com quatro dietas e quatro períodos experimentais. As dietas experimentais foram: 1) Dieta-controle sem suplementação de EMa e de vit. E; 2) Dieta-controle + suplementação de 350 UI de vit E/kg de MS/dia; 3) Dieta controle + suplementação de 3% de EMa/kg de MS/dia; 4) Dieta-controle + suplementação de 350 UI de vit E/kg de MS/dia + suplementação de 3% de EMa/kg de MS/dia. Cápsulas contendo 10 g de óxido de titânio (via sonda esofágica) foram inseridas no rúmen, após a alimentação da manhã (9h00min) para determinação do fluxo fecal e da digestibilidade. O período experimental foi de 28 dias, sendo 21 dias de adaptação e sete dias de coleta. A ingestão de vit E diminuiu a ingestão de MS e outros nutrientes, enquanto a EMa teve efeito positivo sobre o consumo e a digestibilidade de MS. O consumo de EMa não aumentou a produção de leite, até mesmo diminuindo a concentração de proteína e sólidos totais no leite. Nenhuma alteração foi observada para a composição em ácidos graxos e nos antioxidantes TBARS, dienos conjugados e polifenóis. Entretanto, a suplementação de EMa aumentou o poder de redução do leite. Concluiu-se assim que a erva mate pode ser capaz de substituir a suplementação de vit E na transferência do poder antioxidante para o leite.

Three experiments were conducted to evaluated the supplementation of natural antioxidant in dairy cows in different lactation stage fed rich diet of polyunsaturated fatty acids. In the first experiment evaluated dairy cows in early lactation. The period between delivery and lactation peak is commonly associated to negative energy balance (NEB) due to a rapid increase in of nutritional requirements coupled with a low dry matter intake. Futhermore, diseases are correlated with concentrated volume of beta-hydroxybutyrate acid (BHBA) and non-esterified fatty acids (NEFA) in plasma. A total of 20 multiparous dairy cows fitted with rumen cannulas were stratified by groups in two treatments: (1) control diet with 250 g flax oil/d infused in the abomasum (n=10, COFO); and (2) diet with 136 g/kg flax meal (n=10, FMFO) in the dry matter (DM) with 250 g flax oil/d infused in the abomasum. All data were analyzed using the MIXED procedure of SAS, release 9.2. A one-way factorial (2 levels: COFO and FMFO) analysis of variance with repeated measure was conducted for all data. Cows were subjected to experimental treatments from day 7 to 28 of post-partum and fed a common total mixed diet from day 28 to 49 of lactation. Intake of DM, expressed in kg/d and as a percentage of BW was increased for cows fed FMFO when compared with cows fed COFO. Likewise, the NEB was less severe for cows fed FMFO. However, thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) increased when cows fed flax meal.The second experiment evaluated cows in middle lactation receiving yerba mate (YM) that has good levels of natural antioxidants. The study was to evaluate the effects of increasing levels of YM in dairy cows and the effect of YM in digestibility and quality of milk. The animals were distributed in a double Latin square 4x4, each experimental period was 21 days, 14 days for adaptation and seven days to harvest data and samples. The treatments were: 1) control diet without supplementation YM (CONT); 2) diet + supplementation with 250 g of YM / day (250EM); 3) diet + supplementation of 500 g of YM / day (500EM); 4) control diet + supplementation of 750 g of YM / day (750EM). The reduction (P = 0.04) of yerba mate in milk showed a positive linear effect on the control and decreasing linear effect was observed with lactose (P = 0.0001) and urea (P = 0.04) for levels inclusion of YM. The ether extract digestibility (P = 0.05) also had a positive linear effect. Our results suggest that the inclusion of EMA was able to increase the power reduction of milk cows demonstrated to be a viable additive for increasing the antioxidant power. Despite the linear reduction of lactose in milk and consequently total solids, YM did not affect milk production. After we studied the inclusion of vitamin E (vit E) and yerba mate (YM) in the diet of dairy cows fed soybeans to compare the transfer of the antioxidant for milk. There were four multiparous Holstein cows (549 ± 57 kg body weight and 62 ± 15 days in milk) distributed in Latin square (4 × 4) with four treatments and four experimental periods. The treatments were: 1) Control diet without supplementation YM and vit E; 2) diet plus supplementation of 350 IU of vit E / kg DMI per day; 3) diet plus supplementation of 3% of YM / kg IMS per day; 4) diet plus supplementation of 350 IU of vit E / kg IMS daily supplementation + 3% of YM / kg IMS per day. Capsules containing 10 g of titanium oxide was inserted into the rumen (by gavage) after the morning feeding (9h00min) for determination of fecal flow and digestibility. The experimental period was 21 days and then seven days of collection. The intake of vit E reduces DM intake and other nutrients, while YM had a positive effect on the intake and digestibility of MS. The intake of YM did not increase milk production, even decreasing the concentration of protein and total solids in milk. No change was observed for the fatty acid composition and TBARS antioxidants, conjugated diene and polyphenols. However, supplementation of YM increased the power reduction of milk. We can conclude that yerba mate can replace the supplementation of vit E is even better than the vit E in the transfer of the antioxidant power to the milk.

Avaliação mecânica da placa de compósito de poli-hidroxibutirato e hidroxiapatita em modelos ósseos de gato / Evaluation of the mechanics of of polyhydroxybutyrate and hydroxyapatite composite plates in bone models of cat

Avaliou-se mecanicamente o compósito de poli-hidroxibutirato 70 por cento e hidroxiapatita 30 por cento na forma de placas para fixação óssea. Foram utilizadas 15 placas do compósito com 60mm de comprimento por 10mm de largura e espessura variando de 3mm no centro a 5mm nas extremidades, com seis orifícios. As placas foram fixadas em um modelo acrílico de fêmur de gato, e o conjunto foi submetido aos testes de flexão com quatro pontos, compressão axial e torção, empregando-se como referência microplacas de aço ASTM-F138 2,0mm. As médias das forças máximas nos testes de flexão e de compressão foram, respectivamente, de 323,20N e 617,70N, para as placas de compósito, e de 352,33N e 547,70N, para as placa de aço. No teste de torção, as médias dos torques máximos foram de 1,01Nm para as placas de compósito e de 1,15Nm para as placas de aço. Não houve diferença estatística entre as placas de compósito e de aço. O comportamento físico do material foi diferente, pois as placas de compósito se romperam e as de aço apenas se deformaram, revelando baixa ductilidade das placas de compósito.(AU)

Fixation bone plates made of 70 percent polyhydroxybutyrate and 30 percent hydroxyapatite composite were mechanically evaluated. The fifteen composite plates employed presented six holes and measured 60 x 10mm, length and width, respectively, with thickness ranging from 3 to 5mm according to the region. The plates were fixed in acrylic models of cat femur, then were subjected to tests of four-points bending, axial compression, and torsion, using as reference 2mm stainless steel plates. The means of the maximum force in flexion and compression tests were, respectively, 323.20N and 617,70N for the composite plates and 352.33N and 547.70N for the steel plates. In the torsional test, the means of torque were 1.01Nm for the composite plates and 1.15Nm for steel plates. There were no statistical differences between the plates of composite and steel. The physical behavior of the material was different once the composite plates broke up while the stainless steel ones only presented deformation, revealing the low ductility of the composite plates.(AU)

Emprego experimental da placa de compósito poli-hidroxibutirado/hidroxiapatita na fixação femoral em gatos / Experimental employment of polyhydroxybutyrate/hydroxyapatite composite plates in femoral fixation in cats

Avaliou-se o compósito de poli-hidroxibutirado (PHB) 70 por cento e hidroxiapatita (HA) 30 por cento na forma de placas para fixação óssea em gatos. Foram usadas placas do compósito com 60mm de comprimento por 10mm de largura e espessura variando de 3mm no centro a 5mm nas extremidades, com seis orifícios. A placa do compósito foi empregada na fixação de osteotomia de fêmur em quatro gatos, totalizando seis intervenções. Verificou-se a ruptura de cinco placas (83,3 por cento) até o quarto dia e de uma placa (16,7 por cento) aos 21 dias, quando se observou um calo ósseo exuberante. O resultado da implantação da placa no gato mostrou que o compósito não possui resistência suficiente para ser empregado como placas de fixação de fêmur em gatos.(AU)

The composite of polyhydroxybutyrate (PHB) 70 percent and hydroxyapatite (HA) 30 percent was evaluated as plate for bone fixation in cats. The employed composite plates presented six orifices and measured 60 x 10mm, length and width, respectively, with thickness ranging from 3 to 5mm according to the region. The composite plate was used in the fixation of femoral osteotomy in four cats, in a total of six interventions. There were ruptures in five plates (83.3 percent) until day 4 and in one plate (16.7 percent) on the day 21, when it was possible to observe an exuberant osseous callus. The result of the plate deployment in the cat showed that the composite does not have sufficient strength to be used as plate of femoral fixation in cats.(AU)

Resposta tecidual ao compósito 50 por cento hidroxiapatita: 50 por cento poli-hidroxibutirato para substituição óssea em coelhos / Tissue response to the composite 50 percent hydroxyapatite: 50 percent polyhydroxybutyrate for bone substitution in rabbits

Avaliaram-se a biocompatibilidade, a osseointegração, a osseocondução e a biodegradação de compósitos de 50 por cento hidroxiapatita (HAP-91®) e 50 por cento poli-hidroxibutirato. O compósito foi implantado em defeitos ósseos em 12 coelhos (grupo experimental), sendo comparado a defeitos não preenchidos (grupo-controle, de igual número). Os parâmetros clínicos dor, claudicação, infecção, deiscência e edema foram avaliados nos primeiros oito dias após a cirurgia e aos 45 e 90 dias. Radiografias foram realizadas aos oito, 45 e 90 dias após a cirurgia em quatro animais por grupo que, em seguida, foram submetidos à eutanásia para coleta de amostras destinadas a análises histológica e histomorfométrica. Não ocorreram diferenças entre os grupos para todos os parâmetros clínicos. Radiografias demonstraram um compósito com radiopacidade semelhante à do osso vizinho e contato direto entre osso e compósito aos 45 e 90 dias. Diferença significativa foi observada entre a porcentagem dos tecidos ósseo e conjuntivo dentro do defeito nos dias oito, 45 e 90, assim como na interface aos 45 e 90 dias. Foram observadas projeções dos tecidos ósseo e conjuntivo no interior do compósito e sinais de biodegradação na ausência de infiltrado inflamatório. Pode-se concluir que o compósito é biocompatível, osseocondutor, biodegradável e se integra ao tecido ósseo.(AU)

The biocompatibility, osseointegration, osseoconductivity, and biodegradation of a 50-50 percent hydroxyapatite (HAP-91®)-polyhydroxybutyrate were evaluated. The composite was implanted in bone defects of 12 rabbits (experimental group), being compared to unfilled defects (control group, 12 animals). The clinical parameters of pain, lameness, infection, dehiscence, and edema were evaluated during the first eight days and on the 45th and 90th days after surgery. Radiographs were taken in four animals per group at 8, 45, and 90 days after surgery, when animals were euthanized to collect samples for histology and histomorphometry. Significant differences between groups for all clinical parameters were not observed. Radiographs showed a similar radiopacity of the composite and bone and their direct contact. More bone than connective tissue was found within the defect at 8, 45, and 90 days and at the interface on the 45th and 90th days. Projections of bone and connective tissue were seen inside the composite. Biodegradation signs became evident, with absence of inflammatory infiltrate. Data support that such composite is biocompatible, osseoconductive, biodegradable, and integrate to bone.(AU)

Cinética de liberação de progesterona em dispositivos confeccionados a partir de blendas com PCL (Poli-ɛ-caprolactona) + PHB (Poli-hidroxibutirato) / Release kinetics of progesterone in devices made from blends with PCL (Poly-ɛ-caprolactone) + PHB (poly-hydroxybutyrate)

No Brasil, o uso da Inseminação Artificial em tempo fixo (IATF) vem crescendo rapidamente, uma vez que elimina a necessidade de observação do cio e induz a ciclicidade de vacas em anestro (MADUREIRA et al., 2004). Na maioria dos protocolos de IATF, empregam-se dispositivos de liberação sustentada de progesterona (P4) introduzidos na cavidade vaginal. Estes dispositivos são, na sua grande maioria, importados e confeccionados com uma armação de nylon, recoberta com silicone e progesterona. Visando a diminuição dos custos de produção e impacto ambiental, Pimentel (2006) confeccionaram dispositivos vaginais de liberação sustentada de progesterona, empregando uma mistura biopolimérica de PHB (Poli-hidroxibutirato) e PCL (poli-ɛ-caprolactona), para utilização no controle farmacológico do ciclo estral de vacas. No presente trabalho, foi estudado o mecanismo pelo qual, a progesterona é liberada da mistura biopolimérica (PHB46%+PCL46%+P48%). Para o estudo da cinética de liberação de P4 foram utilizados dispositivos (n=21) para experimento in vivo, onde foram introduzidos na cavidade vaginal das vacas e coletados a cada 24 horas durante 7 dias. Para experimentos in vitro foram utilizados 12 dispositivos que foram colocados em dissolutor de comprimidos e foram retirados em triplicata a cada 24 horas por 4 dias. Foi realizado experimento para avaliação da distribuição e quantidade de P4 em dispositivos de duas partidas diferentes em diversos pontos. A cinética de liberação de 4 tipos de dispositivos compostos de PHB+PCL+P4+ IrganoxB215® adicionados ou não de um protetor anti raios ultra violeta ( Tinuvin®) foi avaliada. Foi observado que a cinética de liberação de P4 se comportou de forma diferente entre sistemas in vivo e in vitro; em sistema in vivo foi de forma linear (R2=0,929), sugerindo que a progesterona possa ser liberada de acordo com o mecanismo de ordem zero e in vitro a liberação pode ser explicada pelo modelo matemático de Higuchi (R2=0,99) com o coeficiente de difusão calculado conforme a segunda lei de Fick foi de 2,09 x10-8 (cm2/s). Observou-se que a P4 no dispositivo está distribuída uniformemente (P= 0,519) e que aditivos e diferentes proporções de PHB+PCL não influenciaram a liberação de P4 por um período de 96 horas de testes in vitro

In Brazil, the use of fixed-time artificial insemination (TAI) has been growing rapidly since it eliminates the need for estrus detection and induce cyclicity in anestrous cows (MADUREIRA et al., 2004). In most TAI protocols, devices are employed for the sustained release of progesterone (P4) introduced into the vaginal cavity. These devices are mostly imported and made with a nylon frame, covered with silicone and progesterone. Seeking to reduce production costs and environmental impact, Pimentel (2006) crafted devices for the sustained release vaginal progesterone, using a mixture biopolymer PHB (poly-hydroxybutyrate) and PCL (poly-ɛ-caprolactone), for use in pharmacological control estrous cycle of cows. In the present work was to study the mechanism by which the progesterone is released from the mixture biopolymers (PHB46 PCL46% +% +% P48). To study the kinetics of release of P4 device was used (n = 21) for in vivo experiment, where they were introduced into the vaginal cavity of cows and collected every 24 hours for 7 days. For in vitro experiments were used 12 devices were placed in dissolutor tablets and were taken in triplicate every 24 hours for 4 days. Experiment was conducted to assess the distribution and amount of P4 in two matches and different devices on several points. The release kinetics of four types of devices composed of PHB + PCL + P4 + IrganoxB215 ®, added to a protective anti ultraviolet rays (Tinuvin ®) was evaluated. It was observed that the kinetics of release of P4 behaved differently between systems in vivo and in vitro, the in vivo system was linear (R2 = 0.929), suggesting that progesterone may be released according to the mechanism of order zero and in vitro release can be explained by the mathematical model of Higuchi (R2 = 0.99) with the diffusion coefficient calculated according to Fick\'s second law was 2.09 x10-8 (cm2 / s). It was noted that a P4 is evenly distributed on the device (P = 0.519) and additives that different proportions of PHB and PCL + did not influence the release of P4for a period of 96 hours of in vitro tests

Emprego de um novo dispositivo intravaginal para liberação de progesterona em programa de IATF em vacas Nelore (Bos taurus indicus) / Use of an intravaginal device for releasing progesterone-based TAI program in Nelore cows (Bos taurus indicus)

A Inseminação Artificial (IA) é a biotécnica que proporciona a maior pressão de seleção no melhoramento genético de um rebanho e, portanto deveria ser imprescindível na pecuária moderna. A ineficiência na detecção de estro e a baixa ciclicidade ovariana no período pós-parto constituem um grande entrave na aplicabilidade de programas de IA. Frente a estas dificuldades, o uso da Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF) vem incrementando os resultados obtidos, uma vez que elimina a necessidade de observação de estro e induz a ciclicidade de vacas em anestro pós-parto. Nos protocolos de IATF é de fundamental importância o uso dos dispositivos intravaginais para liberação de progesterona (P4). No mercado atual, estes dispositivos importados são fabricados à base de silicone, um polímero biocompatível, porém não biodegradável. Recentemente, dispositivos intravaginais de P4, incorporada à matriz polimérica biodegradável de poli-hidroxibutirato (PHB), vêm sendo estudados. Este trabalho teve como objetivo comparar a eficiência, em programa de IATF, de um novo dispositivo intravaginal (Progestar®), na taxa de prenhez, em bovinos da raça Nelore, com a do dispositivo à base de silicone, DIB®, atualmente disponível no mercado brasileiro. Foram utilizadas 240 vacas da raça Nelore, em um delineamento de blocos casualizados generalizados, divididas em dois grupos (controle - DIB® e tratamento - Progestar®, usados nos protocolos de sincronização e IATF). Foram realizados 2 experimentos distintos: no primeiro experimento utilizaram-se dispositivos de 1º uso (n=136), enquanto que no segundo experimento, dispositivos de 2º uso (n=104). As taxas de prenhez, decorrentes da IATF (TPIATF) e ao final da estação de monta (TPEM) (variáveis dependentes), foram comparadas por análise de variância, separando o efeito de tratamento, dos blocos e das interações. No experimento 1: não houve interação das variáveis com o tratamento; não houve efeito de tratamento sobre a TPIATF (DIB® - 66,7% e Progestar® - 65,8%) nem sobre a TPEM (DIB® - 95% e Progestar® - 94,7%); houve interação entre período pós-parto (PPP) e escore de condição corporal (ECC). Animais no PPP1 (45 a 70 dias) e ECC4 apresentaram resultados inferiores na TPIATF em relação aos animais ECC5 e 6; houve também interação entre PPP e escore de condição ovariana (ECO), em que animais no PPP2 (71 a 90 dias) que não estavam ciclando apresentaram resultados inferiores de TPIATF, em relação aos animais ciclando; e também não houve efeito das demais variáveis sobre a TPIATF e TPEM. No experimento 2: não houve interação das variáveis com o tratamento; não houve efeito de tratamento sobre a TPIATF (DIB® 2 - 61,6% e Progestar® 2 - 55,8%) nem sobre a TPEM (DIB® 2 - 94,2% e Progestar® 2 - 88,5%); houve interação entre categoria animal (Cat) e PPP, em que primíparas no PPP1 (32 a 55 dias) apresentaram resultados inferiores na TPEM em relação às primíparas no PPP2 (56 a 90 dias); houve também interação entre PPP e ECC, em que animais no PPP2 e com ECC4 apresentaram resultados inferiores de TPEM, em relação aos animais com ECC5; e também houve efeito negativo do PPP1 sobre a TPIATF e de um dos touros na TPEM. Após a realização do experimento concluiu-se que o Progestar® possui semelhante eficiência na taxa de prenhez, quando comparado ao DIB® e que ambos tratamentos têm potencial para proporcionar TPIATF acima de 50% e TPEM acima de 90%

The artificial insemination (AI) is a biotechnique that causes the fastest genetic improvement of a herd and, therefore should be essential in the modern livestock. Heat detection inefficiency and low ovarian ciclicity in the postpartum period establish a great obstacle on applicability of AI programs. In front of these difficulties, the use of timed artificial insemination (TAI) improves the results, because eliminates the heat detection and induces the ciclicity of cows in anestrous postpartum. In TAI protocols is fundamental the use of intravaginal devices for releasing progesterone (P4). In the current market, these devices are imported and made of silicone, a biocompatible polymer, but not biodegradable. Recently intravaginal progesterone devices made of PHB, a biodegradable polymer, have been studied. The aim of this study was to compare the efficiency, in TAI program, of a new intravaginal device (Progestar®), on pregnancy rate, in Nelore cows, with a device made of silicone DIB®, currently available in the brazilian market. Were used 240 Nelore cows, in a generalized randomized block design, divided in two groups (control - DIB® and treatment - Progestar®, used in the synchronization protocols and TAI). Two experiments were done: the first experiment used new intravaginal devices (n=136), while the second experiment utilized used intravaginal devices (n=104). The pregnancy rates, of TAI (TAIPR) and breeding season (BSPR) (dependent variables), were compared by analysis of variance, separating the treatment, blocks and interactions effect. In experiment 1: there was no interaction between variables and treatment; there was no effect of treatment on TAIPR (DIB® - 66,7% and Progestar® - 65,8%) and on BSPR (DIB® - 95% and Progestar® - 94,7%); there was an interaction between postpartum period (PPP) and body condition score (BCS), in which animals in PPP1 (45 to 70 days) and BCS4 showed inferior results on TAIPR related to animals BCS5 and 6; there was also an interaction between PPP and ovary condition score (OCS), in which animals in PPP2 (71 to 90 days) not cyclic showed inferior results on TAIPR, related to cyclic animals; and there was also no effect of variables on TAIPR and BSPR. In experiment 2: there was no interaction between variables and treatment; there was no effect of treatment on TAIPR (DIB® 2 - 61,6% and Progestar® 2 - 55,8%) and on BSPR (DIB® 2 - 94,2% and Progestar® 2 - 88,5%); there was an interaction between animal category (Cat) and PPP, in which primiparous in PPP1 (32 to 55 days) showed inferior results on BSPR, related to primiparous in PPP2 (56 to 90 days); there was also an interaction between PPP and BCS, in which animals in PPP2 and BCS4 showed inferior results on BSPR, related animals BCS5; and there was also negative effect of PPP1 on TAIPR and one of the bulls on BSPR. This experiment showed that the Progestar® had the same efficiency on pregnancy rate, as the commercially available DIB® and both treatments have the potential to provide TAIPR above 50% and BSPR above 90%