Portrayal of Punica granatum L. peel extract through High Performance Liquid Chromatography and antimicrobial activity evaluation

Abstract Increasing trend in antimicrobial resistance and failure of chemically synthesized antibiotics lead to discover alternative methods for the treatment of bacterial infections. Various medicinal plants are in use traditionally and their active compounds can be further applied for treatment of bacterial diseases. This study was designed to determine the antibacterial activity of Punica granatum (P. granatum L.) (pomegranate) peel extract against Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) and Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae)] and gram-positive bacterium [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. Methanolic extract of P. granatum L. peel was prepared by Soxhlet apparatus method. Total flavonoid and phenolic contents from the extract were determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The antibacterial activity of P. granatum L. peel extract was evaluated through agar well diffusion method. HPLC showed the range of phenolics (gallic acid, caffeic acid, benzoic acid, cinnamic acid) and flavonoid compounds. The chemical structures of flavonoid and phenolics found in the methanolic extract of P. granatum L. peel have been reported for the first time. The methanolic peel extract (50 ul) of yellow P. granatum L. showed 26, 10, 10 and 9mm zones of inhibition (ZOI) against S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. The methanolic extract of red P. granatum L. (100 ul) showed 27, 8, 12 and 15 mm ZOI against Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. Highest ZOI was observed against Staph. aureus. Many of the bacteria studied in the present work may cause serious gastrointestinal infections, which can lead to hemorrhagic diarrhea in children. These infections can be life-threatening to young children and the elderly. There is an incentive to find alternative control measures, such as plant and herbal extracts, especially in lesser-developed countries where traditional antibiotics may not be readily available.

Resumo A tendência crescente na resistência antimicrobiana e na falha dos antibióticos sintetizados quimicamente leva à descoberta de métodos alternativos para o tratamento de infecções bacterianas. Várias plantas medicinais estão em uso tradicionalmente e seus compostos ativos podem ser posteriormente aplicados para o tratamento de doenças bacterianas. Este estudo foi desenhado para determinar a atividade antibacteriana do extrato de casca de Punica granatum (P. granatum L.) (romã) contra Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) e Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae) ] e bactéria gram-positiva [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. O extrato metanólico da casca de P. granatum L. foi preparado pelo método do aparelho de Soxhlet. O conteúdo total de flavonoides e fenólicos do extrato foi determinado por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). A atividade antibacteriana do extrato da casca de P. granatum L. foi avaliada através do método de difusão em ágar. HPLC mostrou a gama de compostos fenólicos (ácido gálico, ácido cafeico, ácido benzoico, ácido cinâmico) e flavonoides. As estruturas químicas de flavonoides e fenólicos encontradas no extrato metanólico da casca de P. granatum L. foram relatadas pela primeira vez. O extrato metanólico da casca (50 ul) de P. granatum L. amarelo apresentou zonas de inibição (ZOI) de 26, 10, 10 e 9mm contra S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O extrato metanólico de P. granatum L. vermelho (100 ul) apresentou 27, 8, 12 e 15 mm IOI contra Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O ZOI mais alto foi observado contra Staph. aureus. Muitas das bactérias estudadas no presente trabalho podem causar infecções gastrointestinais graves, que podem levar à diarreia hemorrágica em crianças. Essas infecções podem ser fatais para crianças pequenas e idosos. Há um incentivo para encontrar medidas de controle alternativas, como extratos de plantas e ervas, especialmente em países menos desenvolvidos, onde os antibióticos tradicionais podem não estar prontamente disponíveis.

Portrayal of Punica granatum L. peel extract through High Performance Liquid Chromatography and antimicrobial activity evaluation / Retrato do extrato de casca de Punica granatum L. por meio de cromatografia líquida de alto desempenho e avaliação da atividade antimicrobiana

Abstract Increasing trend in antimicrobial resistance and failure of chemically synthesized antibiotics lead to discover alternative methods for the treatment of bacterial infections. Various medicinal plants are in use traditionally and their active compounds can be further applied for treatment of bacterial diseases. This study was designed to determine the antibacterial activity of Punica granatum (P. granatum L.) (pomegranate) peel extract against Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) and Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae)] and gram-positive bacterium [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. Methanolic extract of P. granatum L. peel was prepared by Soxhlet apparatus method. Total flavonoid and phenolic contents from the extract were determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The antibacterial activity of P. granatum L. peel extract was evaluated through agar well diffusion method. HPLC showed the range of phenolics (gallic acid, caffeic acid, benzoic acid, cinnamic acid) and flavonoid compounds. The chemical structures of flavonoid and phenolics found in the methanolic extract of P. granatum L. peel have been reported for the first time. The methanolic peel extract (50 ul) of yellow P. granatum L. showed 26, 10, 10 and 9mm zones of inhibition (ZOI) against S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. The methanolic extract of red P. granatum L. (100 ul) showed 27, 8, 12 and 15 mm ZOI against Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. Highest ZOI was observed against Staph. aureus. Many of the bacteria studied in the present work may cause serious gastrointestinal infections, which can lead to hemorrhagic diarrhea in children. These infections can be life-threatening to young children and the elderly. There is an incentive to find alternative control measures, such as plant and herbal extracts, especially in lesser-developed countries where traditional antibiotics may not be readily available.

Resumo A tendência crescente na resistência antimicrobiana e na falha dos antibióticos sintetizados quimicamente leva à descoberta de métodos alternativos para o tratamento de infecções bacterianas. Várias plantas medicinais estão em uso tradicionalmente e seus compostos ativos podem ser posteriormente aplicados para o tratamento de doenças bacterianas. Este estudo foi desenhado para determinar a atividade antibacteriana do extrato de casca de Punica granatum (P. granatum L.) (romã) contra Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) e Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae) ] e bactéria gram-positiva [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. O extrato metanólico da casca de P. granatum L. foi preparado pelo método do aparelho de Soxhlet. O conteúdo total de flavonoides e fenólicos do extrato foi determinado por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). A atividade antibacteriana do extrato da casca de P. granatum L. foi avaliada através do método de difusão em ágar. HPLC mostrou a gama de compostos fenólicos (ácido gálico, ácido cafeico, ácido benzoico, ácido cinâmico) e flavonoides. As estruturas químicas de flavonoides e fenólicos encontradas no extrato metanólico da casca de P. granatum L. foram relatadas pela primeira vez. O extrato metanólico da casca (50 ul) de P. granatum L. amarelo apresentou zonas de inibição (ZOI) de 26, 10, 10 e 9mm contra S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O extrato metanólico de P. granatum L. vermelho (100 ul) apresentou 27, 8, 12 e 15 mm IOI contra Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O ZOI mais alto foi observado contra Staph. aureus. Muitas das bactérias estudadas no presente trabalho podem causar infecções gastrointestinais graves, que podem levar à diarreia hemorrágica em crianças. Essas infecções podem ser fatais para crianças pequenas e idosos. Há um incentivo para encontrar medidas de controle alternativas, como extratos de plantas e ervas, especialmente em países menos desenvolvidos, onde os antibióticos tradicionais podem não estar prontamente disponíveis.

Portrayal of Punica granatum L peel extract through High Performance Liquid Chromatography and antimicrobial activity evaluation / Retrato do extrato de casca de Punica granatum L por meio de cromatografia líquida de alto desempenho e avaliação da atividade antimicrobiana

ncreasing trend in antimicrobial resistance and failure of chemically synthesized antibiotics lead to discover alternative methods for the treatment of bacterial infections. Various medicinal plants are in use traditionally and their active compounds can be further applied for treatment of bacterial diseases. This study was designed to determine the antibacterial activity of Punica granatum (P. granatum L.) (pomegranate) peel extract against Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) and Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae)] and gram-positive bacterium [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. Methanolic extract of P. granatum L. peel was prepared by Soxhlet apparatus method. Total flavonoid and phenolic contents from the extract were determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The antibacterial activity of P. granatum L. peel extract was evaluated through agar well diffusion method. HPLC showed the range of phenolics (gallic acid, caffeic acid, benzoic acid, cinnamic acid) and flavonoid compounds. The chemical structures of flavonoid and phenolics found in the methanolic extract of P. granatum L. peel have been reported for the first time. The methanolic peel extract (50 ul) of yellow P. granatum L. showed 26, 10, 10 and 9mm zones of inhibition (ZOI) against S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. The methanolic extract of red P. granatum L. (100 ul) showed 27, 8, 12 and 15 mm ZOI against Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. Highest ZOI was observed against Staph. aureus. Many of the bacteria studied in the present work may cause serious gastrointestinal infections, which can lead to hemorrhagic diarrhea in children. These [...].

A tendência crescente na resistência antimicrobiana e na falha dos antibióticos sintetizados quimicamente leva à descoberta de métodos alternativos para o tratamento de infecções bacterianas. Várias plantas medicinais estão em uso tradicionalmente e seus compostos ativos podem ser posteriormente aplicados para o tratamento de doenças bacterianas. Este estudo foi desenhado para determinar a atividade antibacteriana do extrato de casca de Punica granatum (P. granatum L.) (romã) contra Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) e Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae) ] e bactéria gram-positiva [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. O extrato metanólico da casca de P. granatum L. foi preparado pelo método do aparelho de Soxhlet. O conteúdo total de flavonoides e fenólicos do extrato foi determinado por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). A atividade antibacteriana do extrato da casca de P. granatum L. foi avaliada através do método de difusão em ágar. HPLC mostrou a gama de compostos fenólicos (ácido gálico, ácido cafeico, ácido benzoico, ácido cinâmico) e flavonoides. As estruturas químicas de flavonoides e fenólicos encontradas no extrato metanólico da casca de P. granatum L. foram relatadas pela primeira vez. O extrato metanólico da casca (50 ul) de P. granatum L. amarelo apresentou zonas de inibição (ZOI) de 26, 10, 10 e 9mm contra S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O extrato metanólico de P. granatum L. vermelho (100 ul) apresentou 27, 8, 12 e 15 mm IOI contra Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O ZOI mais alto foi observado contra Staph. aureus. Muitas das bactérias estudadas no presente trabalho podem causar infecções gastrointestinais graves, que podem levar à diarreia [...].

Portrayal of Punica granatum L peel extract through High Performance Liquid Chromatography and antimicrobial activity evaluation / Retrato do extrato de casca de Punica granatum L por meio de cromatografia líquida de alto desempenho e avaliação da atividade antimicrobiana

ncreasing trend in antimicrobial resistance and failure of chemically synthesized antibiotics lead to discover alternative methods for the treatment of bacterial infections. Various medicinal plants are in use traditionally and their active compounds can be further applied for treatment of bacterial diseases. This study was designed to determine the antibacterial activity of Punica granatum (P. granatum L.) (pomegranate) peel extract against Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) and Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae)] and gram-positive bacterium [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. Methanolic extract of P. granatum L. peel was prepared by Soxhlet apparatus method. Total flavonoid and phenolic contents from the extract were determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The antibacterial activity of P. granatum L. peel extract was evaluated through agar well diffusion method. HPLC showed the range of phenolics (gallic acid, caffeic acid, benzoic acid, cinnamic acid) and flavonoid compounds. The chemical structures of flavonoid and phenolics found in the methanolic extract of P. granatum L. peel have been reported for the first time. The methanolic peel extract (50 ul) of yellow P. granatum L. showed 26, 10, 10 and 9mm zones of inhibition (ZOI) against S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. The methanolic extract of red P. granatum L. (100 ul) showed 27, 8, 12 and 15 mm ZOI against Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. Highest ZOI was observed against Staph. aureus. Many of the bacteria studied in the present work may cause serious gastrointestinal infections, which can lead to hemorrhagic diarrhea in children. These [...].(AU)

A tendência crescente na resistência antimicrobiana e na falha dos antibióticos sintetizados quimicamente leva à descoberta de métodos alternativos para o tratamento de infecções bacterianas. Várias plantas medicinais estão em uso tradicionalmente e seus compostos ativos podem ser posteriormente aplicados para o tratamento de doenças bacterianas. Este estudo foi desenhado para determinar a atividade antibacteriana do extrato de casca de Punica granatum (P. granatum L.) (romã) contra Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) e Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae) ] e bactéria gram-positiva [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. O extrato metanólico da casca de P. granatum L. foi preparado pelo método do aparelho de Soxhlet. O conteúdo total de flavonoides e fenólicos do extrato foi determinado por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). A atividade antibacteriana do extrato da casca de P. granatum L. foi avaliada através do método de difusão em ágar. HPLC mostrou a gama de compostos fenólicos (ácido gálico, ácido cafeico, ácido benzoico, ácido cinâmico) e flavonoides. As estruturas químicas de flavonoides e fenólicos encontradas no extrato metanólico da casca de P. granatum L. foram relatadas pela primeira vez. O extrato metanólico da casca (50 ul) de P. granatum L. amarelo apresentou zonas de inibição (ZOI) de 26, 10, 10 e 9mm contra S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O extrato metanólico de P. granatum L. vermelho (100 ul) apresentou 27, 8, 12 e 15 mm IOI contra Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O ZOI mais alto foi observado contra Staph. aureus. Muitas das bactérias estudadas no presente trabalho podem causar infecções gastrointestinais graves, que podem levar à diarreia [...].(AU)

Punica granatum and amygdalin extracts plus cobalamin combined with albendazole reduce larval burden and myositis in experimental trichinosis / Extratos de Punica granatum e amígdalina mais cobalamina combinado com albendazol reduzem a carga larvar e a miosite na triquinose experimental

Abstract Trichinellosis is a zoonosis results from eating raw or semi-cooked meat of infected animals. Medicinal plants have been used lately as alternatives and/or combined therapies to resolve some drawbacks of the current regimens. This work analyzed the effect of albendazole monotherapy on Trichinella spiralis experimental infection (group A), in comparison to P. granatum and amygdalin extracts +cobalamin (group B), plus its combination with albendazole (group C). The study revealed that the extracts alone or combined with albendazole had an inferior effect to albendazole monotherapy regarding number of adult worms (40.83 ±3.82, 18.67 ±1.86 and 16.83 ±2.32, respectively). However, their effect was more obvious in muscle phase combined with albendazole, achieving the lower number of larvae/mL tissue homogenate (22.33 ±3.27 in comparison to 39.67 ±2.58 achieved by albendazole monotherapy). The extracts exerted a significant immunomodulatory effect by reducing the local CD4+ expression in the intestine as well as in muscle phase (1.15 ±0.25 and 3.80 ±0.65 in comparison to 4.97 ±0.37 and 12.20 ±0.87 with albendazole monotherapy, respectively). So, these extracts improved the therapeutic efficacy of albendazole, specifically in muscle phase and counteracted the inflammatory reaction caused by albendazole monotherapy, thus extensively alleviating the resulting myositis.

Resumo Trichinellosis é uma zoonose resultante da ingestão de carne crua ou semicozida de animais infectados. As plantas medicinais têm sido usadas, ultimamente, como alternativas e/ou terapias combinadas, para resolver algumas desvantagens dos regimes atuais. Este trabalho analisou o efeito da monoterapia albendazole na infecção experimental por Trichinella spiralis (grupo A), em comparação com extratos de P. granatum e amígdalina +cobalamina (grupo B), além de sua combinação com albendazol (grupo C). O estudo revelou que os extratos sozinho ou combinado com albendazol teve efeito inferior à monoterapia albendazol em relação ao número de vermes adultos (40,83 ±3,82, 18,67 ±1,86 e 16,83 ±2,32, respectivamente). No entanto, seu efeito foi mais óbvio na fase muscular combinado com o albendazol, alcançando o menor número de larvas/mL homogeneizado de tecido (22,33 ±3,27 em comparação com 39,67 ±2,58 obtidos pela monoterapia albendazol). Os extratos exerceram um efeito imunomodulatório significativo, ao reduzir a expressão local CD4+ no intestino, bem como na fase muscular (1,15 ±0,25 e 3,80 ±0,65 em comparação com 4,97 ±0,37 e 12,20 ±0,87 com monoterapia albendazol, respectivamente). Assim, esses extratos melhoraram a eficácia terapêutica do albendazol, especificamente na fase muscular e neutralizaram a reação inflamatória causada pela monoterapia albendazol, aliviando extensivamente a miosite resultante.

Control agents on the quality of Africanized honeybee queens / Agentes de controle sobre a qualidade de rainhas de abelhas africanizadas

The objective of this study was to evaluate the effect of the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana, used in large field crops, and of the pomegranate Punica granatum aqueous extract, with insecticidal potential for insect control, on the quality of Africanized Apis mellifera queens. The control sample was composed of sterile distilled water with Tween®. The treatments were incorporated into a voile fabric, covered with an acrylic plate and packed with queen rearing nucleus hive, so the worker bees could be in contact with control agents (B. bassiana and P. granatum). In the next day, frames with 30 cell cups for queen rearing with larvae were introduced to produce queens, which were monitored at moment of emergency. Measurements included live weight, wing size, abdomen size, thorax size, the time of emergence, and analysis of the breeding area size. Histological analyses of the hypopharyngeal glands of attendant worker bees and of the midgut of virgin queens were performed. There was no reduction in the weight of queens, no changes in the length, width, and height of their thoraxes, no changes in the width and length of the wing, and no changes in total length. However, B. bassiana increased the weight of the queens and reduced emergency time. The control agents did not interfere in villi height and breeding area. No differences were found in tissues when the treatments were compared with their control. P. granatum extract and the fungus B. bassiana did not interfere in the quality of Africanized A. mellifera queens.(AU)

O objetivo foi avaliar o efeito do fungo entomopatogênico Beauveria bassiana, usado em grandes culturas, e o extrato aquoso de romã Punica granatum, com potencial efeito inseticida para o controle de insetos, sobre a qualidade de rainhas de Apis mellifera africanizadas. A testemunha foi composta por água destilada esterilizada com Tween®. Os tratamentos foram incorporados em um tecido tipo gaze, envolto em uma placa de acrílico e acondicionados no interior de colônias tipo minirrecrias, para que as operárias entrassem em contato com o agente testado (B. bassiana and P. granatum). No dia seguinte foram introduzidos sarrafos com 30 cúpulas com larvas para produção de rainhas, as quais foram monitoradas à emergência, mensurando peso vivo, comprimento e largura da asa e do abdome, comprimento, largura e altura do tórax, tempo de emergência e área de cria. Análises histológicas das glândulas hipofaringeanas das operárias amas e do mesêntero das rainhas virgens também foram realizadas. Não houve redução no peso das rainhas e no comprimento do tórax e tampouco alteração na largura e altura do tórax, comprimento e largura do abdome, comprimento e largura da asa e comprimento total. No entanto B. bassiana induziu aumento no peso das rainhas e redução no tempo de emergência. Os agentes não interferiram na altura das vilosidades do mesêntero e na área de cria. Na análise histológica não foram observadas diferenças nos tecidos quando os tratamentos foram comparados com as respectivas testemunhas. O extrato de P. granatum e o fungo B. bassiana não interferiram na qualidade de rainhas de A. mellifera africanizada.(AU)

Pomegranate (Punica granatum L) peel lyophilized extract delays lipid oxidation in tuscan sausages / Estabilidade oxidativa de linguiça tipo Toscana com extrato liofilizado da casca de romã (Punica granatum L)

Pomegranate (Punica granatum L.) contains a high concentration of antioxidant and phenolic compounds. Pomegranate peel extracts at different concentrations were used as natural antioxidant to increased the lipid stability of fresh Tuscan sausages, comparing with sodium erythorbate (SE). Peels were subjected to ultrasound-assisted aqueous extraction and lyophilization. The extract was previously characterized throught phenol and flavonoids determination. The Tuscan Sausages were prepared, and color, pH, peroxides, and thiobarbituric acid reactive substances were assessed at 1, 15, and 30 days of storage, at a mean temperature of 5 ± 1 ºC and under a 12-hour light cycle/day. Sausages containing 0.05 and 0.1% of peel extract showed results similar to sodium erythorbate in lipid peroxidation. Sausages treated with pomegranate peel extracts showed an adequate global acceptability level in the sensory analysis. Pomegranate peel extracts are; therefore, a promising natural alternative for maintaining the lipid stability of Tuscan sausages, promoting the protection of the meat and in addition, being able to bring beneficial of the pomegranate to the human health.(AU)

A romã (Punica granatum L.) contém uma alta concentração de compostos antioxidantes e fenólicos. Extratos de casca de romã em diferentes concentrações foram utilizados como antioxidante natural para aumentar a estabilidade lipídica de linguiça tipo Toscana, comparados ao eritorbato de sódio. As cascas foram submetidas à extração e liofilização aquosas por ultrassom. O extrato foi caracterizado por determinação de fenol e flavonóides. Os parâmetros cor, pH, peróxidos e ácido tiobarbitúrico foram avaliadas nos dias 1, 15 e 30 pós armazenamento, a temperatura de 5 ± 1 ºC e ciclo de luz de 12 horas/dia. As linguiças contendo 0,05 e 0,1% de extrato de casca apresentaram resultados semelhantes ao eritorbato de sódio quanto a peroxidação lipídica. Também apresentaram aceitabilidade global adequada na análise sensorial. Os extratos de casca de romã são, portanto, uma alternativa natural promissora para manter a estabilidade lipídica das linguiças toscanas, promovendo a proteção e podendo trazer benefícios da romã à saúde humana.(AU)

Effectiveness of flor-de-seda and pomegranate aqueous extracts on eggs of the Heterakoidea Superfamily isolated from naturally infected japanese quails

ABSTRACT The present study aimed to evaluate the in vitro anthelmintic efficacy of flor-de-seda (Calotropis procera S.W.) and pomegranate (Punica granatum L.) extracts on gastrointestinal nematode eggs of Japanese quails. Stool samples were collected from a herd of 5,000 adult birds raised on the floor at a commercial farm in the state of Ceará, Brazil. The samples were packed in plastic bags, kept refrigerated and transported for laboratory analysis. The eggs were placed in 2.5 ml of the suspension and 2.5 ml of flor-de-seda and pomegranate extracts in concentrations of 50; 25; 12.5; 6.25 and 3.12%. Readings were subsequently taken at 24, 48 and 72 hours. The aqueous pomegranate extract at 25 and 50% was more efficient on the larvae hatching. The flor-de-seda aqueous extract in both concentrations and evaluation periods showed similar action to that of the positive control treatment (Albendazole 10%). The pomegranate and flor-de-seda aqueous extracts have anthelmintic activity on the development of larvae in eggs of the Heterakoidea Superfamily and are therefore presented as an alternative to replace the drugs commonly used to control helminths in Japanese quails.

RESUMO O presente estudo teve por objetivo avaliar a eficácia anti-helmíntica in vitro dos extratos de flor de seda (Calatropis procera S. W.) e de romã (Punica Granatum L.) sobre ovos de nematoides gastrintestinais de codornas japonesas. Foram colhidas amostras de fezes em um plantel de cinco mil aves adultas, criadas sobre o piso em uma granja comercial no estado do Ceará, Brasil. As amostras foram acondicionadas em sacos plásticos, mantidas refrigeradas e transportadas ao Laboratório de Doenças Parasitárias dos Animais Domésticos (LDPAD) do Centro de Saúde e Tecnologia Rural da UFCG. Os ovos foram colocados em 2,5 ml da suspensão e 2,5 ml dos extratos de flor de seda e romã, nas concentrações de 50; 25; 12,5; 6,25 e 3,12%. As leituras foram realizadas em 24, 48 e 72 horas. O extrato aquoso de romã a 25 e 50% apresentou uma melhor ação sobre a eclosão de larvas. Já o extrato aquoso de flor de seda em ambas as concentrações e períodos de avaliação apresentou ação semelhante a do tratamento controle positivo (Albendazole 10%). Os extratos aquosos de romã e flor de seda apresentam atividade anti-helmíntica sobre a eclosão de larvas de Ascaridia sp. e se apresentam como uma alternativa para substituição dos fármacos comumente utilizados no controle de helmintos em codornas japonesas.

Effectiveness of flor-de-seda and pomegranate aqueous extracts on eggs of the Heterakoidea Superfamily isolated from naturally infected japanese quails

The present study aimed to evaluate the in vitro anthelmintic efficacy of flor-de-seda (Calotropis procera S.W.) and pomegranate (Punica granatum L.) extracts on gastrointestinal nematode eggs of Japanese quails. Stool samples were collected from a herd of 5,000 adult birds raised on the floor at a commercial farm in the state of Ceará, Brazil. The samples were packed in plastic bags, kept refrigerated and transported for laboratory analysis. The eggs were placed in 2.5 ml of the suspension and 2.5 ml of flor-de-seda and pomegranate extracts in concentrations of 50; 25; 12.5; 6.25 and 3.12%. Readings were subsequently taken at 24, 48 and 72 hours. The aqueous pomegranate extract at 25 and 50% was more efficient on the larvae hatching. The flor-de-seda aqueous extract in both concentrations and evaluation periods showed similar action to that of the positive control treatment (Albendazole 10%). The pomegranate and flor-de-seda aqueous extracts have anthelmintic activity on the development of larvae in eggs of the Heterakoidea Superfamily and are therefore presented as an alternative to replace the drugs commonly used to control helminths in Japanese quails.(AU)

O presente estudo teve por objetivo avaliar a eficácia anti-helmíntica in vitro dos extratos de flor de seda (Calatropis procera S. W.) e de romã (Punica Granatum L.) sobre ovos de nematoides gastrintestinais de codornas japonesas. Foram colhidas amostras de fezes em um plantel de cinco mil aves adultas, criadas sobre o piso em uma granja comercial no estado do Ceará, Brasil. As amostras foram acondicionadas em sacos plásticos, mantidas refrigeradas e transportadas ao Laboratório de Doenças Parasitárias dos Animais Domésticos (LDPAD) do Centro de Saúde e Tecnologia Rural da UFCG. Os ovos foram colocados em 2,5 ml da suspensão e 2,5 ml dos extratos de flor de seda e romã, nas concentrações de 50; 25; 12,5; 6,25 e 3,12%. As leituras foram realizadas em 24, 48 e 72 horas. O extrato aquoso de romã a 25 e 50% apresentou uma melhor ação sobre a eclosão de larvas. Já o extrato aquoso de flor de seda em ambas as concentrações e períodos de avaliação apresentou ação semelhante a do tratamento controle positivo (Albendazole 10%). Os extratos aquosos de romã e flor de seda apresentam atividade anti-helmíntica sobre a eclosão de larvas de Ascaridia sp. e se apresentam como uma alternativa para substituição dos fármacos comumente utilizados no controle de helmintos em codornas japonesas.(AU)

Effectiveness of flor-de-seda and pomegranate aqueous extracts on eggs of the Heterakoidea Superfamily isolated from naturally infected japanese quails

The present study aimed to evaluate the in vitro anthelmintic efficacy of flor-de-seda (Calotropis procera S.W.) and pomegranate (Punica granatum L.) extracts on gastrointestinal nematode eggs of Japanese quails. Stool samples were collected from a herd of 5,000 adult birds raised on the floor at a commercial farm in the state of Ceará, Brazil. The samples were packed in plastic bags, kept refrigerated and transported for laboratory analysis. The eggs were placed in 2.5 ml of the suspension and 2.5 ml of flor-de-seda and pomegranate extracts in concentrations of 50; 25; 12.5; 6.25 and 3.12%. Readings were subsequently taken at 24, 48 and 72 hours. The aqueous pomegranate extract at 25 and 50% was more efficient on the larvae hatching. The flor-de-seda aqueous extract in both concentrations and evaluation periods showed similar action to that of the positive control treatment (Albendazole 10%). The pomegranate and flor-de-seda aqueous extracts have anthelmintic activity on the development of larvae in eggs of the Heterakoidea Superfamily and are therefore presented as an alternative to replace the drugs commonly used to control helminths in Japanese quails.

O presente estudo teve por objetivo avaliar a eficácia anti-helmíntica in vitro dos extratos de flor de seda (Calatropis procera S. W.) e de romã (Punica Granatum L.) sobre ovos de nematoides gastrintestinais de codornas japonesas. Foram colhidas amostras de fezes em um plantel de cinco mil aves adultas, criadas sobre o piso em uma granja comercial no estado do Ceará, Brasil. As amostras foram acondicionadas em sacos plásticos, mantidas refrigeradas e transportadas ao Laboratório de Doenças Parasitárias dos Animais Domésticos (LDPAD) do Centro de Saúde e Tecnologia Rural da UFCG. Os ovos foram colocados em 2,5 ml da suspensão e 2,5 ml dos extratos de flor de seda e romã, nas concentrações de 50; 25; 12,5; 6,25 e 3,12%. As leituras foram realizadas em 24, 48 e 72 horas. O extrato aquoso de romã a 25 e 50% apresentou uma melhor ação sobre a eclosão de larvas. Já o extrato aquoso de flor de seda em ambas as concentrações e períodos de avaliação apresentou ação semelhante a do tratamento controle positivo (Albendazole 10%). Os extratos aquosos de romã e flor de seda apresentam atividade anti-helmíntica sobre a eclosão de larvas de Ascaridia sp. e se apresentam como uma alternativa para substituição dos fármacos comumente utilizados no controle de helmintos em codornas japonesas.

In-vitro evaluation of Nigella sativa and Punica granatum effect on protoscolices of hydatid cysts / Avaliação in vitro do efeito de Nigella sativa e Punica granatum em protoescólices de cistos hidáticos

Cystic echinococcosis (CE) are commonly found in the liver and lungs of affected hosts. The treatment approach is usually surgical, or giving drugs in conjunction before surgery to kill protoscolices, to avoid anaphylactic shock from leakage of hydatid fluid into the peritoneum and to decrease opportunities for recurrences. The present study was to evaluate the in vitro scolicidal efficacy of hydroalcoholic extract of Punica granatum peel and Nigella sativa, on the protoscolices of CE that collected from the lungs of infected camels. Different concentrations of extracts with different exposure times were used and a viability assay was applied to measure the scolicidal effect. N. sativa showed its highest scolicidal efficacy at 100 mg/mL and 10 mg/mL concentrations after 30 and 60 min. P. granatum peel extract showed its maximum scolicidal efficacy at 100 mg/mL concentration after 120 min. All experiments of the current study revealed that the extracts of both N. sativa and P. granatum had a scolicidal effects on the protoscolices of camel hydatid cysts. It could be concluded that N. sativa extract is more potent than P. granatum peel extract regarding scolicidal effect, but the efficacies of both extracts were of moderate significant correlation to exposure time and concentrations.(AU)

Os cistos hidáticos (equinococose cística, CE) são comumente encontrados no fígado e nos pulmões dos hospedeiros afetados. A abordagem do tratamento geralmente é cirúrgica, e algumas drogas são administradas em conjunto antes da cirurgia para matar protoscólices e evitar choque anafilático devido ao vazamento de fluido hidático no peritônio e diminuir as oportunidades de recorrência. O presente estudo foi avaliar a eficácia in-vitro do extrato hidroalcoólico de casca de Punica granatum e Nigella sativa, sobre os protoescólices de cistos hidáticos, que foram coletados dos pulmões de camelos infectados. Concentrações dos extratos com diferentes tempos de exposição foram utilizados e um ensaio de viabilidade foi aplicado para medir o efeito escolicida. A N. sativa apresentou sua maior eficácia escolicida nas concentrações de 100 mg/mL e 10 mg/mL após 30 e 60 min. O extrato de casca de P. granatum mostrou sua máxima eficácia escolicida na concentração de 100 mg/mL após 120 min. Todos os experimentos do presente estudo revelaram que os extratos de N. sativa e P. granatum tiveram efeito escolicida dependente da dose e do tempo nos protoescólices dos cistos hidáticos de camelo. Pode-se concluir que o extrato de N. sativa é mais potente que o extrato de casca de P. granatum em relação ao efeito escolicida, mas a eficácia de ambos os extratos foi de correlação significativa moderada com o tempo de exposição e as concentrações.(AU)

Mature pomegranate recognition methods in natural environments using machine vision / Métodos de reconhecimento de romã madura em ambientes naturais usando visão de máquina

The use of machine vision to recognize mature pomegranates in natural environments is of major significance in improving the applicability and work efficiency of picking robots. By analyzing the color characteristics of color images of mature pomegranates under different illumination conditions, the feasibility of the YCbCr color model for pomegranate image recognition under different illumination conditions was proven. First, the Cr component map of pomegranate image is selected and then the pomegranate fruit is segmented by the kernel fuzzy C-means clustering algorithm to obtain the pomegranate image. Contrast experiments of pomegranate image segmentation under different illumination conditions were then performed using the proposed kernel fuzzy C-means clustering algorithm, the fuzzy C-means clustering algorithm, the Otsu algorithm and the threshold segmentation algorithm. Results of the experiments verified the effectiveness and superiority of the proposed algorithm.(AU)

O uso de máquina para reconhecer romãs maduras em ambientes naturais é de grande importância para melhorar a aplicabilidade e a eficiência do trabalho de robôs de colheita. Ao analisar as características de cor das imagens coloridas de romãs maduras sob diferentes condições de iluminação, a viabilidade do modelo de cores YCbCr para o reconhecimento de imagens de romãs sob diferentes condições de iluminação foi comprovada. Primeiro, o mapa do componente Cr da imagem da romã é selecionado e, em seguida, o fruto da romãzeira é segmentado pelo algoritmo de agrupamento C-means fuzzy do kernel para obter a imagem da romã. Experimentos contrastados de segmentação de imagens de romã sob diferentes condições de iluminação foram então realizados usando o algoritmo proposto de agrupamento C-means fuzzy, o algoritmo fuzzy de agrupamento C-means, o algoritmo Otsu e o algoritmo de segmentação de limiares. Os resultados dos experimentos verificaram a efetividade e superioridade do algoritmo proposto.(AU)

Desenvolvimento e caracterização de filmes poliméricos contendo extrato de cascas de frutos de Punica granatum para uso como cobertura bioativa na farmacoterapia veterinária

A busca por compostos bioativos provenientes de plantas medicinais para uso cicatrizante, o desenvolvimento de novas formas farmacêuticas para veicular os mesmos é uma demanda crescente na atualidade. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo, produzir filmes poliméricos baseados em blendas entre opoli(álcool vinílico) (PVA), amido de milho e o poli(ácido acrílico) (PAA), contendo extrato seco total das cascas de Punica granatum (romã) (ESTCR), com vistas ao uso como cobertura bioativa na farmacoterapia veterinária. O trabalho foi desenvolvido emduas etapas. Na primeira, após determinação da concentração inibitória mínima do ESTCR sobre cepas de bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e um fungo e, definição da melhor concentração do extrato nas formulações, foram preparados filmes com diferentes proporções dos polímeros, que foram caracterizados por análises térmicas (DSC e TG/DTG) e tiveram as propriedades de barreira pesquisadas. Ainda, a biocompatibilidade e a capacidade cicatrizante foram preliminarmente avaliadas empregando técnicas in vitro. A partir da análise dos dados, foi eleita a melhor formulação, preparada a partir dos polímeros na razão 75:15:10 (PVA/amido/PAA) e na presença de 1,25% p/p do extrato. Na segunda etapa, a melhorformulação, foi submetida à ensaios complementares de caracterização físico-químicapor microscopia eletrônica de varredura (MEV), espectroscopia na região do infravermelho por transformada de Fourier (FTIR) e difração de raios X (DRX); ensaiosde tração, para pesquisa das propriedades mecânicas; e, a testes de disco-difusão, para avaliação da atividade antifúngica. Foram obtidos filmes lisos, transparentes, brilhantes, de cor amarelo-clara, sem a presença de domínios quando avaliados visualmente. As diferentes proporações dos polímeros nas blendas provocou alterações nas características estudadas dos filmes. A blenda PVA:S:PAA:PPE4originou um filme liso, transparente, livre de domínio e sem separação de fases. Além disso, o filme apresentou propriedades de barreira adequadas para o uso como cobertura bioativa. Quando submetido ao ensaio de atividade hemolítica in vitro, o filme se mostrou não hemolítico e biocompatível. Além da confirmação da atividade antibacteriana sobre as cepas pesquisadas, os filmes foram eficientes em promover a proliferação celular in vitro, em 48 h, sem citotoxicidade. Análises complementares no filme eleito (PVA:S:PAA:PPE4) comprovaram a existência de interações químicas entre os componentes do extrato e os polímeros, contribuindo para a formação de filmes íntegros, uniformes, resistentes ao manuseio e com propriedades mecânicas consideradas apropriadas para o uso como coberturas bioativas. Análises das fotomicrografias das superfícies fraturadas apontam a presença de descontinuidades na matriz, justificando a pequena redução observada nos parâmetros de resistência mecânica quando comparados aos valores para o filme sem extrato. A alteração na organização das cadeias poliméricas também foi confirmada por DRX. Finalmente, os filmes com extrato apresentaram atividade antifúngica sobre a cepa estudada Candida albicans. A análise conjunta de todos os resultados permite inferir que o filme PVA:S:PAA:PPE4, preparado a partir dos polímeros na proporção 75:15:10 (PVA:amido:PAA) contendo o ESTCR na concentração de 1,25% p/p é potencialmente últil para o uso como cobertura bioativa.

The search for bioactive compounds from medicinal plants with healing activity, the development of new pharmaceutical dosage forms to convey them is a growing demand. In this context, the present work aimed to produce polymeric films based on blends between poly(vinyl alcohol) (PVA), corn starch and poly (acrylic acid) (PAA), containing total dry extract of Punica granatum (pomegranate) peels (ESTCR), to use as bioactive wound dressing in veterinary pharmacotherapy. The work was carried out in two stages. In the first phase, the minimum inhibitory concentration of ESTCR on Gram-positive and Gram-negative bacteria strains and a fungus and, the best concentration of the extract in films prepared by solvent casting with different proportions of polymers were defined. The films were characterized by thermal analysis (DSC and TG/DTG) and their barrier properties were evaluated. Furthermore, biocompatibility and healing activity were preliminarily evaluated using in vitro techniques. From the data analysis, the best formuation was chosen, prepared from polymers in the 75:15:10 ratio (PVA/starch/PAA) and in the presence of 1.25% w/w of the extract. In the second phase, the best formulation was submitted to complementary tests of physicochemical characterization: scanning electron microscopy (SEM), Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) and X-ray diffraction (XRD); tensile tests to investigate mechanical properties; and, to disc diffusion tests, to evaluate the antifungal activity. Were obtained smooth, transparent, bright, light yellow films, without the presence of domains when evaluated visually. The different proportions of polymers in the formulations caused changes in the studied characteristics of the films. The PVA:S:PAA:PPE4 produced a smooth, transparent film, free of domination and without phase separation. Furthermore, the film showed barrier properties appropriate for use as a bioactive wound dressing. When submitted to the in vitro hemolytic activity assay, the film proved to be non-hemolytic and biocompatible. In addition to the antibacterial activity on the strains studied, the films were efficient in promoting cell proliferation in vitro, within 48 h, without cytotoxicity. Complementary analysis in the chosen film (PVA:S:PAA:PPE4) proved the existence of interactions between the extract components and the polymers, contributing to the formation of uniform, handling-resistant films with mechanical properties necessary for use as bioactive covers. Analysis of the photomicrographs of the fractured surfaces point to the presence of discontinuities in the matrix, justifying the small reduction observed in the parameters of mechanical resistance when compared to the values for the film without extract. The change in the organization of polymer chains was also confirmed by XRD. Finally, films with extract showed antifungal activity on the studied Candida albicans strain. The analysis of all results allows us to infer that the film PVA:S:PAA:PPE4, prepared from polymers in the proportion 75:15:10 (PVA:starch:PAA) containing ESTCR at a concentration of 1.25% w/w is potentially useful for use as a bioactive cover

Desenvolvimento farmacotécnico e atividade antimicrobiana e antioxidante de gel de carbômero contendo extrato de casca de Punica granatum para uso em lesões cutâneas em cães

A casca é um dos biorresíduos dos frutos de romã formados após a extração do suco, com potencial de ser convertido em produtos de valor agregado para inúmeras aplicações, entre elas, a farmacêutica, uma vez que contém inúmeros compostos bioativos de interesse farmacológico. O objetivo do presente trabalho foi preparar um gel contendo extrato bruto seco das cascas de romã (EBSCR) com vistas ao uso como antimicrobiano no manejo de lesões na farmacoterapia veterinária de cães, com o intuito de fundamentar o interesse pela agregação de valor aos biorresíduos do romã. Inicialmente, realizou-se a determinação do teor de fenóis totais e da atividade antioxidante do extrato, sendo definidas a CE50(Concentração efetiva para inibir 50%) e a CE90 (Concentração efetiva para inibir 90%), utilizando BHT (Butilhidroxitolueno) como padrão. Após caracterização química, foram preparadas formulações de géis de carbômero a 1% p/p contendo o EBSCR em diferentes concentrações (1,25, 2,5 e 3,75% p/p), nomeadas FG1, FG2 e FG3, que foram submetidas à pesquisa de atividade antimicrobiana pelo método de disco-difusão. Para tal, foram empregadas cepas de Staphylococcus aureus (ATCC 25.923), Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228), Escherichia coli (ATCC 25.922) e Candide albicans (ATCC 24.433). Depois de eleita a formulação com a melhor concentração do extrato para a continuidade do estudo, foram preparados 1,5 Kg do gel base (GB) e em 1 Kg foi incorporado o extrato na concentração eleita para o estudo (FG2; 2,5% p/p). O produto foi fracionado e as amostras foram armazenados sob refrigeração (5 ± 2 ºC) e em temperatura ambiente (27 ± 2º C), determinada no período de execução do estudo, para avaliação da estabilidade preliminar. Os seguintes testes físico-químicos foram realizados em FG2 ao longo de 90 dias: aspecto, pH, resistência ao estresse térmico e mecânico, perfil de textura, determinação do teor de fenóis totais, qualidade microbiológica e manutenção da atividade antimicrobiana. O teor de fenóis totais encontrado foi de 61,92% EAG e a atividade antioxidante total determinada para uma solução a 40 4µg.mL-1 foi 93,8%, com valores das concentrações mínimas eficazes (CE) para reduzir o DPPH em 50% e 90% de 14,44 µg.mL-1 e 39,82 µg.mL-1, respectivamente. A incorporação do EBSCR a 2,5% p/p no gel base originou um gel opaco, de cor amarelo-intensa, com pH de 6,10. Ao longo do tempo, o pH, os parâmetros de textura e o teor de fenóis totais diminuíram, sendo as maiores alterações notadas nos produtos armazenados sob refrigeração. Ao final de 30 dias a redução no teor de fenóis totais na formulação foi inferior a 9% somente para a amostra armazenada sob refrigeração. No que diz respeito à qualidade microbiológica, as formulações atenderam aos requisitos farmacopeicos para a contagem de microrganismos mesófilos totais e ausência de microrganismos patogênicos, sem alterações no período de 90 dias. A eficácia antimicrobiana foi mantida ao longo tempo. A partir dos resultados pode-se inferir que a formulação FG2, preparada a partir do gel base de carbômero a 1% p/p contendo EBSCR a 2,5% p/p, armazenada durante 30 dias sob refrigeração, pode ser empregada para a finalidade pretendida, sendo útil para agregar valor à biorresíduos do romã.

The peel is one of the biowaste of pomegranates fruits formed after the extract of the juice, with the potential to be converted into products with added value for many applications, including the pharmaceutical. The purpose of this present work was to prepare a gel containing dry total extract from pomegranate peel (named EBSCR) with purpose on the use of handling of skin lesions in veterinarys pharmacotherapy of dogs, with the intention of substantiating the interest of values added on the biowastes of pomegranate. At first, was carried out the determination of the content of total phenols and the total antioxidant activity on the extract, being defined as CE50 (effective concentration to suppress 50%) e a CE90 (effective concentration to suppress 90%), using BHT (butylhydroxytoluene) as a pattern. After chemical characterization, was prepared formulations of carbomers gel with 1% p/p containing the EBSCR with different concentrations (1.25, 2.5, and 3.75% p/p), called FG1, FG2, and FG3, then was submitted to activitys research antimicrobial through the disc-diffusion method. In order to do this, was used strains of Staphylococcus aureus (ATCC 25.923), Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228), Escherichia coli (ATCC 25.922) e Candida albicans (ATCC 24.433). After of being elected the formulation with the best concentration of the extract for the continuation of the research was prepared 1.5 kg of base gel e in 1 kg was incorporated the extract in the concentration elected for theresearch (FG2; 2.5% p/p). The product was fractionated, and the samples were stored under refrigeration (5 ± 2º C) and at a temperature (27 ± 2º C), determined on executions period of the research to the evaluation of preliminary stability. The phy sicochemical tests were carried out on FG2 for 90 days: aspect, pH, thermal and mechanical stress, texture profile, contents of all phenols, microbiological quality, and antimicrobial activity maintenance. The research of the constituents on the extract by UHPLC suggests the existence of phenols composites of interest to the antimicrobial and healing activity in the extract. The content of total phenols found was of 61.92 g/EAG and the antioxidant activity total determined for a solution with 40 µg.mL-1 was 6 93.8% with the values of the minimum effective concentrations (EC) to reduce the DPPH to 50% and 90% of 14.44 µg.mL-1 and 39.82 µg.mL-1, respectively. The incorporation of the EBSCR to 2.5% on the bases gel created an opaque gel, with intense yellow color, with a pH of 6.10. During the time, the pH, texture profile, and phenols content decreased, being the biggest alterations noted on the products kept out of the refrigerator. At the end of 30 days, the reduction on the phenols content total in the formulation was lower than 9%, only to the sample stored under refrigeration. Concerning about the microbiological quality, the formulations were in according to the count of mesophiles microorganism total and absence of pathogenic microorganisms, without changes for 90 days. The antimicrobial effectiveness was kept during the study time. With the results can infer that the formulation FG2, prepared as of carbomer bases gel to 1% p/p containing EBSCR at 2.5% p/p, stored during 30 days under refrigeration can be used to the intended purpose, being useful to add value to biowastes of pomegranate.

Avaliação do extrato etanólico de casca de Punica granatum (romã) na diminuição da replicação viral do BoHV-1 Colorado em embriões murinos experimentalmente infectados

ABSTRACT The aim of this study was to evaluate the reduction of viral replication (Colorado BoHV-1) in murine embryos after the treatment of ethanol extract of Punica granatum peel (PgEE). Swiss female mice aged 6 to 8 weeks were superovulated with 0.2 mL of the 5 UI hormones (eCG and hCG) and mated with males of the same age. After 18 hours, the females were euthanized in a CO2 chamber, and through the opening in the peritoneum, zygotes were collected and washed with 0.5% pronase solution. The zygotes were divided into four groups: G1 (control), G2 (exposed to the virus Colorado BoHV -1 to 108 TCID50/mL), G3 (exposed to PgEE) and G4 (exposed to the virus and to PgEE). The groups were maintained at 37.5ºC in TCM199 (100 mL) with 10% fetal bovine serum in an incubator at 5% CO2 and 95% humidity. After 24 h, we analyzed the cleavage rate (Fisher's exact test; p 0.05), the morphology (by light microscopy), the nested-PCR and the titration of embryos in co-culture with MDBK cells after over 72 h of treatment (Mann-Whitney test; p 0.05) and transmission electron microscopy (TEM). The murine embryos treated with PgEE showed satisfactory results: no morphological changes, cleavage rate similar to controls, despite the detection of the presence of virus by nested PCR and TEM, there was a decrease of the viral titer after the treatment with this extract, which suggests interference of this treatment in the viral cycle BoHV-1 Colorado without altering the embryo development.

RESUMO O objetivo do trabalho foi avaliar a diminuição da replicação viral (BoHV-1 Colorado) em embriões murinos após tratamento do extrato etanólico da casca de Punica granatum (EEPg). Camundongos fêmeas Swiss com idade entre 6 e 8 semanas foram superovuladas com 0,2 mL a 5 UI de hormônios (eCG e hCG), e acasaladas com machos da mesma idade. Após 18 horas, as fêmeas sofreram eutanásia em câmara de CO2 e, através de abertura no peritônio, os zigotos foram coletados e lavados com solução de pronase 0,5%.Os zigotos foram divididos em quatro grupos: G1 (controle), G2 (expostos aos vírus BoHV-1 Colorado a 108 TCID50/mL), G3 (expostos ao EEPg) e G4 (expostos aos vírus e ao EEPg). Os grupos foram mantidos a 37,5ºC em meio TCM199 (100µL) com 10% de soro fetal bovino em estufa a 5% de CO2 e 95% de umidade. Após 24 h, analisamos a taxa de clivagem (teste exato de Fisher; p 0,05), a morfologia (por microscopia óptica), a nested-PCR e a titulação dos embriões em cocultura com células MDBK após mais 72 h do tratamento (teste de Mann-Whitney; p 0,05) e microscopia eletrônica de transmissão (ME). Os embriões murinos tratados com EEPg apresentaram resultados satisfatórios: sem alterações morfológicas, taxa de clivagem semelhante ao controle e, apesar da detecção da presença do vírus pela nested-PCR e ME, houve diminuição do título viral após tratamentos com esse extrato, o que sugere interferência desse tratamento no ciclo viral do BoHV-1 Colorado sem alterar o desenvolvimento dos embriões.

Avaliação do extrato etanólico de casca de Punica granatum (romã) na diminuição da replicação viral do BoHV-1 Colorado em embriões murinos experimentalmente infectados

ABSTRACT The aim of this study was to evaluate the reduction of viral replication (Colorado BoHV-1) in murine embryos after the treatment of ethanol extract of Punica granatum peel (PgEE). Swiss female mice aged 6 to 8 weeks were superovulated with 0.2 mL of the 5 UI hormones (eCG and hCG) and mated with males of the same age. After 18 hours, the females were euthanized in a CO2 chamber, and through the opening in the peritoneum, zygotes were collected and washed with 0.5% pronase solution. The zygotes were divided into four groups: G1 (control), G2 (exposed to the virus Colorado BoHV -1 to 108 TCID50/mL), G3 (exposed to PgEE) and G4 (exposed to the virus and to PgEE). The groups were maintained at 37.5ºC in TCM199 (100 mL) with 10% fetal bovine serum in an incubator at 5% CO2 and 95% humidity. After 24 h, we analyzed the cleavage rate (Fisher's exact test; p 0.05), the morphology (by light microscopy), the nested-PCR and the titration of embryos in co-culture with MDBK cells after over 72 h of treatment (Mann-Whitney test; p 0.05) and transmission electron microscopy (TEM). The murine embryos treated with PgEE showed satisfactory results: no morphological changes, cleavage rate similar to controls, despite the detection of the presence of virus by nested PCR and TEM, there was a decrease of the viral titer after the treatment with this extract, which suggests interference of this treatment in the viral cycle BoHV-1 Colorado without altering the embryo development.

RESUMO O objetivo do trabalho foi avaliar a diminuição da replicação viral (BoHV-1 Colorado) em embriões murinos após tratamento do extrato etanólico da casca de Punica granatum (EEPg). Camundongos fêmeas Swiss com idade entre 6 e 8 semanas foram superovuladas com 0,2 mL a 5 UI de hormônios (eCG e hCG), e acasaladas com machos da mesma idade. Após 18 horas, as fêmeas sofreram eutanásia em câmara de CO2 e, através de abertura no peritônio, os zigotos foram coletados e lavados com solução de pronase 0,5%.Os zigotos foram divididos em quatro grupos: G1 (controle), G2 (expostos aos vírus BoHV-1 Colorado a 108 TCID50/mL), G3 (expostos ao EEPg) e G4 (expostos aos vírus e ao EEPg). Os grupos foram mantidos a 37,5ºC em meio TCM199 (100µL) com 10% de soro fetal bovino em estufa a 5% de CO2 e 95% de umidade. Após 24 h, analisamos a taxa de clivagem (teste exato de Fisher; p 0,05), a morfologia (por microscopia óptica), a nested-PCR e a titulação dos embriões em cocultura com células MDBK após mais 72 h do tratamento (teste de Mann-Whitney; p 0,05) e microscopia eletrônica de transmissão (ME). Os embriões murinos tratados com EEPg apresentaram resultados satisfatórios: sem alterações morfológicas, taxa de clivagem semelhante ao controle e, apesar da detecção da presença do vírus pela nested-PCR e ME, houve diminuição do título viral após tratamentos com esse extrato, o que sugere interferência desse tratamento no ciclo viral do BoHV-1 Colorado sem alterar o desenvolvimento dos embriões.

Avaliação do extrato etanólico de casca de Punica granatum (romã) na diminuição da replicação viral do BoHV-1 Colorado em embriões murinos experimentalmente infectados / Evaluation of ethanol extract of Punica granatum (Pomegranate) peel decrease in viral replication of BoHV-1 in Colorado murine embryos experimentally infected

O objetivo do trabalho foi avaliar a diminuição da replicação viral (BoHV-1 Colorado) em embriões murinos após tratamento do extrato etanólico da casca de Punica granatum (EEPg). Camundongos fêmeas Swiss com idade entre 6 e 8 semanas foram superovuladas com 0,2 mL a 5 UI de hormônios (eCG e hCG), e acasaladas com machos da mesma idade. Após 18 horas, as fêmeas sofreram eutanásia em câmara de CO2 e, através de abertura no peritônio, os zigotos foram coletados e lavados com solução de pronase 0,5%.Os zigotos foram divididos em quatro grupos: G1 (controle), G2 (expostos aos vírus BoHV-1 Colorado a 108 TCID50/mL), G3 (expostos ao EEPg) e G4 (expostos aos vírus e ao EEPg). Os grupos foram mantidos a 37,5ºC em meio TCM199 (100µL) com 10% de soro fetal bovino em estufa a 5% de CO2 e 95% de umidade. Após 24 h, analisamos a taxa de clivagem (teste exato de Fisher; p<0,05), a morfologia (por microscopia óptica), a nested-PCR e a titulação dos embriões em cocultura com células MDBK após mais 72 h do tratamento (teste de Mann-Whitney; p<0,05) e microscopia eletrônica de transmissão (ME). Os embriões murinos tratados com EEPg apresentaram resultados satisfatórios: sem alterações morfológicas, taxa de clivagem semelhante ao controle e, apesar da detecção da presença do vírus pela nested-PCR e ME, houve diminuição do título viral após tratamentos com esse extrato, o que sugere interferência desse tratamento no ciclo viral do BoHV-1 Colorado sem alterar o desenvolvimento dos embriões.(AU)

The aim of this study was to evaluate the reduction of viral replication (Colorado BoHV-1) in murine embryos after the treatment of ethanol extract of Punica granatum peel (PgEE). Swiss female mice aged 6 to 8 weeks were superovulated with 0.2 mL of the 5 UI hormones (eCG and hCG) and mated with males of the same age. After 18 hours, the females were euthanized in a CO2 chamber, and through the opening in the peritoneum, zygotes were collected and washed with 0.5% pronase solution. The zygotes were divided into four groups: G1 (control), G2 (exposed to the virus Colorado BoHV -1 to 108 TCID50/mL), G3 (exposed to PgEE) and G4 (exposed to the virus and to PgEE). The groups were maintained at 37.5ºC in TCM199 (100 mL) with 10% fetal bovine serum in an incubator at 5% CO2 and 95% humidity. After 24 h, we analyzed the cleavage rate (Fisher's exact test; p<0.05), the morphology (by light microscopy), the nested-PCR and the titration of embryos in co-culture with MDBK cells after over 72 h of treatment (Mann-Whitney test; p<0.05) and transmission electron microscopy (TEM). The murine embryos treated with PgEE showed satisfactory results: no morphological changes, cleavage rate similar to controls, despite the detection of the presence of virus by nested PCR and TEM, there was a decrease of the viral titer after the treatment with this extract, which suggests interference of this treatment in the viral cycle BoHV-1 Colorado without altering the embryo development.(AU)

Evaluation of ethanol extract of Punica granatum (Pomegranate) peel decrease in viral replication of BoHV-1 in Colorado murine embryos experimentally infected / Avaliação do extrato etanólico de casca de Punica granatum (romã) na diminuição da replicação viral do BoHV-1 Colorado em embriões murinos experimentalmente infectados

The aim of this study was to evaluate the reduction of viral replication (Colorado BoHV-1) in murine embryos after the treatment of ethanol extract of Punica granatum peel (PgEE). Swiss female mice aged 6 to 8 weeks were superovulated with 0.2 mL of the 5 UI hormones (eCG and hCG) and mated with males of the same age. After 18 hours, the females were euthanized in a CO2 chamber, and through the opening in the peritoneum, zygotes were collected and washed with 0.5% pronase solution. The zygotes were divided into four groups: G1 (control), G2 (exposed to the virus Colorado BoHV -1 to 108 TCID50/mL), G3 (exposed to PgEE) and G4 (exposed to the virus and to PgEE). The groups were maintained at 37.5ºC in TCM199 (100 mL) with 10% fetal bovine serum in an incubator at 5% CO2 and 95% humidity. After 24 h, we analyzed the cleavage rate (Fishers exact test; p 0.05), the morphology (by light microscopy), the nestedPCR and the titration of embryos in co-culture with MDBK cells after over 72 h of treatment (Mann-Whitney test; p 0.05) and transmission electron microscopy (TEM). The murine embryos treated with PgEE showed satisfactory results: no morphological changes, cleavage rate similar to controls, despite the detection of the presence of virus by nested PCR and TEM, there was a decrease of the viral titer after the treatment with this extract, which suggests  interference of this treatment in the viral cycle BoHV-1 Colorado without altering the embryo development.

O objetivo do trabalho foi avaliar a diminuição da replicação viral (BoHV-1 Colorado) em embriões murinos após tratamento do extrato etanólico da casca de Punica granatum (EEPg). Camundongos fêmeas Swiss com idade entre 6 e 8 semanas foram superovuladas com 0,2 mL a 5 UI de hormônios (eCG e hCG), e acasaladas com machos da mesma idade. Após 18 horas, as fêmeas sofreram eutanásia em câmara de CO2 e, através de abertura no peritônio, os zigotos foram coletados e lavados com solução de pronase 0,5%. Os zigotos foram divididos em quatro grupos: G1 (controle), G2 (expostos aos vírus BoHV-1 Colorado a 108  TCID50/mL), G3 (expostos ao EEPg) e G4 (expostos aos vírus e ao EEPg). Os grupos foram mantidos a 37,5ºC em meio TCM199 (100µL) com 10% de soro fetal bovino em estufa a 5% de CO2 e 95% de umidade. Após 24 h, analisamos a taxa de clivagem (teste exato de Fisher; p 0,05), a morfologia (por microscopia óptica), a nested-PCR e a titulação dos embriões em cocultura com células MDBK após mais 72 h do tratamento (teste de Mann-Whitney; p 0,05) e microscopia eletrô- nica de transmissão (ME). Os embriões murinos tratados com EEPg apresentaram resultados satisfatórios: sem alterações morfológicas, taxa de clivagem semelhante ao controle e, apesar da detecção da presença do vírus pela nested-PCR e ME, houve diminuição do título viral após tratamentos com esse extrato, o que sugere interferência desse tratamento no ciclo viral do BoHV-1 Colorado sem alterar o desenvolvimento dos embriões.

Evaluation of ethanol extract of Punica granatum (Pomegranate) peel decrease in viral replication of BoHV-1 in Colorado murine embryos experimentally infected / Avaliação do extrato etanólico de casca de Punica granatum (romã) na diminuição da replicação viral do BoHV-1 Colorado em embriões murinos experimentalmente infectados

The aim of this study was to evaluate the reduction of viral replication (Colorado BoHV-1) in murine embryos after the treatment of ethanol extract of Punica granatum peel (PgEE). Swiss female mice aged 6 to 8 weeks were superovulated with 0.2 mL of the 5 UI hormones (eCG and hCG) and mated with males of the same age. After 18 hours, the females were euthanized in a CO2 chamber, and through the opening in the peritoneum, zygotes were collected and washed with 0.5% pronase solution. The zygotes were divided into four groups: G1 (control), G2 (exposed to the virus Colorado BoHV -1 to 108 TCID50/mL), G3 (exposed to PgEE) and G4 (exposed to the virus and to PgEE). The groups were maintained at 37.5ºC in TCM199 (100 mL) with 10% fetal bovine serum in an incubator at 5% CO2 and 95% humidity. After 24 h, we analyzed the cleavage rate (Fishers exact test; p 0.05), the morphology (by light microscopy), the nestedPCR and the titration of embryos in co-culture with MDBK cells after over 72 h of treatment (Mann-Whitney test; p 0.05) and transmission electron microscopy (TEM). The murine embryos treated with PgEE showed satisfactory results: no morphological changes, cleavage rate similar to controls, despite the detection of the presence of virus by nested PCR and TEM, there was a decrease of the viral titer after the treatment with this extract, which suggests  interference of this treatment in the viral cycle BoHV-1 Colorado without altering the embryo development.(AU)

O objetivo do trabalho foi avaliar a diminuição da replicação viral (BoHV-1 Colorado) em embriões murinos após tratamento do extrato etanólico da casca de Punica granatum (EEPg). Camundongos fêmeas Swiss com idade entre 6 e 8 semanas foram superovuladas com 0,2 mL a 5 UI de hormônios (eCG e hCG), e acasaladas com machos da mesma idade. Após 18 horas, as fêmeas sofreram eutanásia em câmara de CO2 e, através de abertura no peritônio, os zigotos foram coletados e lavados com solução de pronase 0,5%. Os zigotos foram divididos em quatro grupos: G1 (controle), G2 (expostos aos vírus BoHV-1 Colorado a 108  TCID50/mL), G3 (expostos ao EEPg) e G4 (expostos aos vírus e ao EEPg). Os grupos foram mantidos a 37,5ºC em meio TCM199 (100µL) com 10% de soro fetal bovino em estufa a 5% de CO2 e 95% de umidade. Após 24 h, analisamos a taxa de clivagem (teste exato de Fisher; p 0,05), a morfologia (por microscopia óptica), a nested-PCR e a titulação dos embriões em cocultura com células MDBK após mais 72 h do tratamento (teste de Mann-Whitney; p 0,05) e microscopia eletrô- nica de transmissão (ME). Os embriões murinos tratados com EEPg apresentaram resultados satisfatórios: sem alterações morfológicas, taxa de clivagem semelhante ao controle e, apesar da detecção da presença do vírus pela nested-PCR e ME, houve diminuição do título viral após tratamentos com esse extrato, o que sugere interferência desse tratamento no ciclo viral do BoHV-1 Colorado sem alterar o desenvolvimento dos embriões.(AU)

Quality and post-harvest life organic pomegranate Molar produced in Paraiba semiarid / Qualidade e vida útil pós-colheita de romã Molar orgânica produzida no semi-árido paraibano

A pomegranate is a species of wide use, especially due to the medicinal importance, where the fruits were appreciated around the world. The marketing of pomegranate has increased and aroused the interest of fruit producers in Brazil, however, knowledge of the quality and commercial viability of the fruit in natura is incipient. In this sense, this study aimed to determine the quality and postharvest life of pomegranates Molar stored at 27ºC and 28% RH. Was used in a completely randomized design with four replications, each replicate consisting of five fruits and seven evaluation periods. At each assessment time 0, 3, 6, 9, 12, 15 and 18 days of storage after harvest is conducted through analysis of samples of fruits (n = 20), obtained at random from the container type plastic boxes, condition where the total of 140 fruit was stored in the experiment. In each evaluation period was assessed longitudinal and transverse length, fresh weight loss, weight of arils, juice volume, seed mass, shell mass, soluble solids (SS), titratable acidity (TA), pH, SS / TA, vitamin C and extern and interns appearance. Pomegranate Molar produced in an organic system in semiarid from Paraíba is classified as sweet, with low acidity, less than 0,75% citric acid and soluble solid between 12 and 15%. The storage of fruits at 27 º C, 28% RH up to six days maintains appropriate biometric...(AU)

A romãzeira é uma espécie de ampla utilização, especialmente devido à importância medicinal, sendo os frutos apreciados no Mundo todo. A comercialização de romã tem aumentado e despertado o interesse de fruticultores no Brasil, porém, o conhecimento da qualidade e da viabilidade comercial do fruto in natura é incipiente. Neste sentido, objetivou-se neste trabalho determinar a qualidade e a vida útil pós-colheita da romã Molar armazenada a 27ºC e 28% UR. Utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições, sendo cada repetição constituída por cinco frutos, e sete épocas de avaliação. Em cada época de avaliação 0, 3, 6, 9, 12, 15 e 18 dias de armazenamento após a colheita, realizaram-se análises através de amostragens de frutos (n=20), obtidos ao acaso de caixas plásticas do tipo contentores, condição na qual o total de 140 frutos do experimento foi armazenado. Em cada época de avaliação determinou-se comprimento longitudinal e transversal, perda de massa fresca, massa dos arilos, volume de suco, massa das sementes, massa da casca, sólidos solúveis (SS), acidez titulável (AT), pH, relação SS/AT, vitamina C e aparência externa e interna. A romã Molar produzida em sistema orgânico no semi-árido paraibano é classificada como doce, com baixa acidez, inferior a 0,75% de ácido cítrico e sólido solúveis entre 12 e 15%. O armazenamento dos frutos a 27ºC, 28%...(AU)