Olfactory stimulus as environmental enrichment for shelter dogs: a pilot study / Estímulo olfativo como enriquecimento ambiental para cães de abrigo: um estudo piloto

Environmental enrichment techniques include olfactory stimuli for improving animal welfare. This study aimed to analyze the reactions of 41 shelter dogs exposed to odorous stimuli, such as the method used in another study on wild canids. The focal animal method analyzed the dogs' reactions, with all behaviors recorded. Behavioral responses were classified as positive (P+), negative (N-), or other (Ot). Independent variables were all dogs and the size of the packs. The behavior between the basal (without stimulus), exposure, and after-stimulus withdrawal was analyzed. For all dogs, olfactory stimuli significantly increased P+ (P=0.001) and N- (P=0.004), contrasting with the decrement of Ot behaviors (P=0.001) from the basal to the exposure phase. After the withdrawal of the stimuli, P+, N-, and Ot behaviors returned to basal levels (P>0.05). There were no significant differences (P>0.05) in the conduct of small or large packs exposed to stimuli. Dogs are sensitive to olfactory stimuli, but arousal is generalized to P+ and N-. It is undesirable to an N- increase for improvement of animal welfare. Contrary to what was observed in a study with wild canids, the method failed in shelter dogs because N- was increased. The introduction of sudden novelty (olfactory stimulus) in an impoverished shelter environment may have caused excitement in the dogs. It is suggested that changes in the method, such as stimuli exposition to each dog in an isolated room, are necessary to increase sheltered dog well-being.(AU)

As técnicas de enriquecimento ambiental incluem estímulos olfativos para aumentar o bem-estar animal. O objetivo deste estudo foi analisar as reações de 41 cães de abrigo expostos a estímulos odoríferos, como o método utilizado em outro estudo com canídeos selvagens. As reações dos cães foram analisadas pelo método animal focal, com todos os comportamentos registrados. As respostas comportamentais foram classificadas como positivas (P+), negativas (N-) ou outras (Ot). As variáveis independentes foram todos os cães e o tamanho das matilhas. Foi analisado o comportamento entre o basal (sem estímulo), exposição e após a retirada do estímulo. Para todos os cães, os estímulos olfativos aumentaram significativamente P+ (P=0,001) e N- (P=0,004), contrastando com a diminuição dos comportamentos Ot (P=0,001) da fase basal para a de exposição. Após a retirada dos estímulos, os comportamentos P+, N- e Ot retornaram aos níveis basais (P>0,05). Não houve diferenças significativas (P>0,05) no comportamento de matilhas pequenas ou grandes expostas a estímulos. Os cães são sensíveis a estímulos olfativos, mas a excitação parece ser generalizada para ambos, P+ e N-. É indesejável um aumento de N- para melhoria do bem-estar animal. Ao contrário do que foi observado em um estudo com canídeos selvagens, o método falhou em abrigar cães porque o N- foi aumentado. A introdução de uma novidade repentina (estímulo olfativo) em um ambiente de abrigo empobrecido, pode ter causado excitação exagerada nos cães. Sugere-se alterações no método, como a exposição de estímulos a cada cão em uma sala isolada necessária para aumentar o bem-estar do cão abrigado.(AU)

Utilization of Biotechnology, Neurotransmitter and Cytogenetic Indices in Selecting Pigeon Breeds

Investigations into LDH-A and DR-D4 genes polymorphism, neurotransmitter values and cytogenetic indices of 3 sexed pigeon breeds; non-racing pigeons, (wild rock), racing long distances pigeons (Jan Aarden) and racing short distances pigeons (Janssen) have been performed. The long-distances pigeon showed the highest brain neurotransmitters concentration (p<0.001) among pigeon breeds. Both LDH-A and DR-D4 genes polymorphism indicate the presence of different biodiversity values among pigeon breeds. The variations appeared on the position length 389bp for LDH-A polymorphism, and on two positions length of 418bp and 524bp for DR-D4 polymorphism of long distances male pigeon indicate the presence of unique diversity and overall differences in the amino acids structure in this breed. The protein sequence of both genes showed that in the position of 60 for LDH-A gene the amino acid K (lys) was converted to E (glu), while, in the positions of 117 and 153 for DR-D4 gene the amino acid R (arg) and L (leu) were converted to S (ser) and F (phe) only in long distances male pigeon compared to the other breeds. Moreover, there were slight differences in cytogenetic indices detected among the three pigeon breeds. It can be concluded that both DR-D4 and LDH-A genes polymorphism and neurotransmitters estimations in the brain tissue of racing pigeon would be useful indices for the differentiation and genetic characterization of pigeon breeds and provide a foundation for developing sustainable genetic improvement and conservation programs of the breeding and selecting racing pigeon breeders.(AU)

Changes in expression levels of Nod-like receptors in the spleen of ewes

Nucleotide-binding oligomerization domain receptors (NOD-like receptors, NLRs) have critical effects on interfaces of the immune and reproductive systems, and the spleen plays a key role in both innate and adaptive immune functions. It is hypothesized that NLR family participates in maternal splenic immune regulation during early pregnancy in sheep. In this study, maternal spleens were collected on day 16 of the estrous cycle, and days 13, 16 and 25 of gestation (n = 6 for each group) in ewes. Expression of NLR family, including NOD1, NOD2, class II transactivator (CIITA), NLR family apoptosis inhibitory protein (NAIP), nucleotide-binding oligomerization domain, Leucine rich repeat and Pyrin domain containing 1 (NLRP1), NLRP3 and NLRP7, was analyzed using quantitative real-time PCR, Western blot and immunohistochemistry analysis. The results revealed that expression levels of NOD1, NOD2, CIITA and NLRP3 were downregulated at days 13 and 16 of pregnancy, but expression of NLRP3 was increased at day 25 of pregnancy. In addition, expression values of NAIP and NLRP7 mRNA and proteins were improved at days 16 and 25 of pregnancy, and NLRP1 was peaked at days 13 and 16 of pregnancy in the maternal spleen. Furthermore, NOD2 and NLRP7 proteins were limited to the capsule, trabeculae and splenic cords. In summary, early pregnancy changes expression of NLR family in the maternal spleen, which may be related with the maternal splenic immunomodulation during early pregnancy in sheep.(AU)

Naringenin attenuates cerebral ischemia/reperfusion injury by inhibiting oxidative stress and inflammatory response via the activation of SIRT1/FOXO1 signaling pathway in vitro

Purpose: To explore the protection of naringenin against oxygen-glucose deprivation/reperfusion (OGD/R)-induced HT22 cell injury, a cell model of cerebral ischemia/reperfusion (I/R) injury in vitro, focusing on SIRT1/FOXO1 signaling pathway. Methods: Cytotoxicity, apoptosis, reactive oxygen species (ROS) generation, malondialdehyde (MDA) content, 4-hydroxynonenoic acid (4-HNE) level, superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px) and catalase (CAT) activities were measured by commercial kits. Inflammatory cytokines levels were determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The protein expressions were monitored by Western blot analysis. Results: Naringenin significantly ameliorated OGD/Rinduced cytotoxicity and apoptosis in HT22 cells. Meanwhile, naringenin promoted SIRT1 and FOXO1 protein expressions in OGD/R-subjected HT22 cells. In addition, naringenin attenuated OGD/R-induced cytotoxicity, apoptosis, oxidative stress (the increased ROS, MDA and 4-HNE levels, and the decreased SOD, GSH-Px and CAT activities) and inflammatory response (the increased tumor necrosis factor-α, interleukin [IL]-1ß, and IL-6 levels and the decreased IL-10 level), which were blocked by the inhibition of the SIRT1/FOXO1 signaling pathway induced by SIRT1-siRNA transfection. Conclusion: Naringenin protected HT22 cells against OGD/R injury depending on its antioxidant and anti-inflammatory activities via promoting the SIRT1/FOXO1 signaling pathway.

Study of resveratrol against bone loss by using in-silico and in-vitro methods

Abstract By applying the in-silico method, resveratrol was docked on those proteins which are responsible for bone loss. The Molecular docking data between the resveratrol and Receptor activator of nuclear factor-kappa- ligand [RANKL] receptors proved that resveratrol binds tightly to the receptors, showed the highest binding affinities of 6.9, 7.6, 7.1, 6.9, 6.7, and 7.1 kcal/mol. According to in-vitro data, Resveratrol reduced the osteoclasts after treating Marrow-Derived Macrophages [BMM] with Macrophage colony-stimulating factor [MCSF] 20ng / ml and RANKL 50ng / ml, with different concentrations of resveratrol (2.5, 10 g / ml) For 7 days, the cells were treated with MCSF (20 ng / ml) and RANKL (40 ng / ml) together with concentrated trimethyl ether and resveratrol (2.5, 10 g / ml) within 12 hours. Which, not affect cell survival. After fixing osteoclast cells with formaldehyde fixative on glass coverslip followed by incubation with 0.1% Triton X-100 in PBS for 5 min and after that stain with rhodamine phalloidin staining for actin and Hoechst for nuclei. Fluorescence microscopy was performed to see the distribution of filaments actin [F.actin]. Finally, resveratrol reduced the actin ring formation. Resveratrol is the best bioactive compound for drug preparation against bone loss.

Resumo Com a aplicação do método in-silico, o resveratrol foi ancorado nas proteínas responsáveis pela perda óssea. Os dados de docking molecular entre o resveratrol e o ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa- [Receptor Activator of Nuclear Factor kappa-B Ligant (RANKL)] provaram que o resveratrol se liga fortemente aos receptores, mostraram as afinidades de ligação mais altas de 6,9, 7,6, 7,1, 6,9, - 6,7 e -7,1 kcal / mol. De acordo com dados in-vitro, o resveratrol reduziu os osteoclastos após o tratamento de macrófagos derivados da medula óssea [Bone Marrow-derived Macrophage (BMM)] com fator estimulador de colônias de macrófagos [Macrophage Colony-Stimulating Factor (MCSF)] 20ng / ml e RANKL 50ng / ml, com diferentes concentrações de resveratrol (2,5, 10 g / ml). Durante sete dias, as células foram tratadas com MCSF (20 ng / ml) e RANKL (40 ng / ml) juntamente com éter trimetílico concentrado e resveratrol (2,5, 10 g / ml) em 12 horas, processo que não afeta a sobrevivência celular. Após a fixação de células de osteoclastos com fixador de formaldeído em lamela de vidro seguido de incubação com 0,1% Triton X-100 em PBS por 5 min, foi realizado posteriormente o procedimento para corar com rodamina faloidina a actina e Hoechst os núcleos. A microscopia de fluorescência foi realizada para ver a distribuição dos filamentos de actina [F.actina]. Finalmente, o resveratrol reduziu a formação do anel de actina. O resveratrol é o melhor composto bioativo para o preparo de medicamentos contra a perda óssea.

Evaluation of the antinociceptive effect generated by citronellal monoterpene isomers / Avaliação do efeito antinociceptivo gerado por isômeros do monoterpeno citronelal

Due to the complex nature of pain and the participation of physical, cognitive, psychological and behavioral aspects, pain management has several approaches. The use of medicinal plants in developing countries is quite expressive. Seeking new options for the treatment of emerging or debilitating diseases. Therefore, the present study seeks to elucidate the effects of the monoterpene, citronellal, differentiating its activity by isomers (R)-(+) and (S)-(-) citronellal. The study used several methods to evaluate the effects of citronellal isomers on motor coordination, nociceptive response, and the involvement of opioid, glutamatergic, and transient receptor pathways. The methods included rota-rod, hot-plate, and formalin tests, as well as the use of specific inhibitors and agonists. Data were analyzed using inferential statistics with a 95% confidence level. Both isomers did not significantly affect the motor coordination of the studied animals. The isomer (S)-(-) citronellal showed better results in relation to its structural counterpart, managing to have an antinociceptive effect in the formalin and hot plate tests with a lower concentration (100 mg/kg) and presenting fewer side effects, however, the this study was not able to elucidate the mechanism of action of this isomer despite having activity in studies with substances that act on specific targets such as glutamate and capsaicin, its activity was not reversed with the use of antagonists for pathways related to nociception. While the (R)-(+) citronellal isomer, despite showing total activity only at a concentration of 150 mg/kg, was able to determine its mechanism of action related to the opioid pathway by reversing its activity by the antagonist naloxone, being this is a pathway already correlated with nociception control treatments, however, it is also related to some unwanted side effects. In this way, new studies are sought to elucidate the mechanism related to the isomer (S)-(-) citronellal and a possibility of use in other areas related to the treatment of pain or inflammation.

Devido à natureza complexa da dor e a sua participação de aspectos físicos, cognitivos, psicológicos e comportamentais, o manejo da dor possui diversas abordagens. O uso de plantas medicinais em países em desenvolvimento é bastante expressivo. Buscando novas opções para o tratamento de denças emergentes ou debilitantes. Portanto, o presente estudo busca elucidar os efeitos do monoterpeno, citronelal, diferenciando sua atividade pelos isômeros (R)-(+) e (S)-(-) citronelal. O estudo utilizou diversos métodos para avaliar os efeitos dos isômeros de citronelal na coordenação motora, resposta nociceptiva e o envolvimento de vias opioides, glutamatérgicas e de receptores transitórios. Os métodos incluíram testes de rota-rod, placa quente e formalina, além do uso de inibidores e agonistas específicos. Os dados foram analisados estatisticamente com um intervalo de confiança de 95%. Ambos os isomeros não afetaram significativamente a coordenação motora dos animais em estudo. O isômero (S)-(-) citronelal apresentou melhores resultados em relação ao seu homólogo estrutural, conseguindo ter um efeito antinociceptivo nos testes de formalina e placa quente com menor concentração (100 mg/kg) e apresentando menos efeitos colaterais, entretanto, o presente estudo não foi capaz de elucidar o mecanismo de ação deste isomero apesar de ter atividadade em estudos com substancias que agem em alvos específicos como glutamato e capsaicina, sua atividade não foi revertida com a utilização de antagonistas para as vias relacionadas à nocicepção. Enquanto o isômero (R)-(+) citronelal, apesar de apresentar de apresentar total atividade somente na concentração de 150 mg/kg, foi capaz de determinar seu mecanismo de ação relacionado à via opióide pela reversão da sua atividade pelo antagonista naloxona, sendo esta uma via já correlacionada com os tratamentos de controle da a nocicepção, no entanto, também está relacionada a alguns efeitos colaterais indesejados. Desta forma busca-se novos estudos para elucidação do mecanismo relacionados ao isomero (S)-(-) citronellal e uma possibilidade de utilização em outras areas relacionadas ao tratamento da dor ou inflamação.

Study of resveratrol against bone loss by using in-silico and in-vitro methods / Estudo do resveratrol contra a perda óssea usando métodos in silico e in vitro

By applying the in-silico method, resveratrol was docked on those proteins which are responsible for bone loss. The Molecular docking data between the resveratrol and Receptor activator of nuclear factor-kappa-Β ligand [RANKL] receptors proved that resveratrol binds tightly to the receptors, showed the highest binding affinities of −6.9, −7.6, −7.1, −6.9, −6.7, and −7.1 kcal/mol. According to in-vitro data, Resveratrol reduced the osteoclasts after treating Marrow-Derived Macrophages [BMM] with Macrophage colony-stimulating factor [MCSF] 20ng / ml and RANKL 50ng / ml, with different concentrations of resveratrol (2.5, 10 μg / ml) For 7 days, the cells were treated with MCSF (20 ng / ml) and RANKL (40 ng / ml) together with concentrated trimethyl ether and resveratrol (2.5, 10 μg / ml) within 12 hours. Which, not affect cell survival. After fixing osteoclast cells with formaldehyde fixative on glass coverslip followed by incubation with 0.1% Triton X-100 in PBS for 5 min and after that stain with rhodamine phalloidin staining for actin and Hoechst for nuclei. Fluorescence microscopy was performed to see the distribution of filaments actin [F.actin]. Finally, resveratrol reduced the actin ring formation. Resveratrol is the best bioactive compound for drug preparation against bone loss.

Com a aplicação do método in-silico, o resveratrol foi ancorado nas proteínas responsáveis pela perda óssea. Os dados de docking molecular entre o resveratrol e o ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa-Β [Receptor Activator of Nuclear Factor kappa-B Ligant (RANKL)] provaram que o resveratrol se liga fortemente aos receptores, mostraram as afinidades de ligação mais altas de −6,9, −7,6, −7,1, −6,9, - 6,7 e -7,1 kcal / mol. De acordo com dados in-vitro, o resveratrol reduziu os osteoclastos após o tratamento de macrófagos derivados da medula óssea [Bone Marrow derived Macrophage (BMM)] com fator estimulador de colônias de macrófagos [Macrophage Colony-Stimulating Factor (MCSF)] 20ng / ml e RANKL 50ng / ml, com diferentes concentrações de resveratrol (2,5, 10 μg / ml). Durante sete dias, as células foram tratadas com MCSF (20 ng / ml) e RANKL (40 ng / ml) juntamente com éter trimetílico concentrado e resveratrol (2,5, 10 μg / ml) em 12 horas, processo que não afeta a sobrevivência celular. Após a fixação de células de osteoclastos com fixador de formaldeído em lamela de vidro seguido de incubação com 0,1% Triton X-100 em PBS por 5 min, foi realizado posteriormente o procedimento para corar com rodamina faloidina a actina e Hoechst os núcleos. A microscopia de fluorescência foi realizada para ver a distribuição dos filamentos de actina [F.actina]. Finalmente, o resveratrol reduziu a formação do anel de actina. O resveratrol é o melhor composto bioativo para o preparo de medicamentos contra a perda óssea.

Study of resveratrol against bone loss by using in-silico and in-vitro methods / Estudo do resveratrol contra a perda óssea usando métodos in silico e in vitro

Abstract By applying the in-silico method, resveratrol was docked on those proteins which are responsible for bone loss. The Molecular docking data between the resveratrol and Receptor activator of nuclear factor-kappa-Β ligand [RANKL] receptors proved that resveratrol binds tightly to the receptors, showed the highest binding affinities of −6.9, −7.6, −7.1, −6.9, −6.7, and −7.1 kcal/mol. According to in-vitro data, Resveratrol reduced the osteoclasts after treating Marrow-Derived Macrophages [BMM] with Macrophage colony-stimulating factor [MCSF] 20ng / ml and RANKL 50ng / ml, with different concentrations of resveratrol (2.5, 10 μg / ml) For 7 days, the cells were treated with MCSF (20 ng / ml) and RANKL (40 ng / ml) together with concentrated trimethyl ether and resveratrol (2.5, 10 μg / ml) within 12 hours. Which, not affect cell survival. After fixing osteoclast cells with formaldehyde fixative on glass coverslip followed by incubation with 0.1% Triton X-100 in PBS for 5 min and after that stain with rhodamine phalloidin staining for actin and Hoechst for nuclei. Fluorescence microscopy was performed to see the distribution of filaments actin [F.actin]. Finally, resveratrol reduced the actin ring formation. Resveratrol is the best bioactive compound for drug preparation against bone loss.

Resumo Com a aplicação do método in-silico, o resveratrol foi ancorado nas proteínas responsáveis ​​pela perda óssea. Os dados de docking molecular entre o resveratrol e o ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa-Β [Receptor Activator of Nuclear Factor kappa-B Ligant (RANKL)] provaram que o resveratrol se liga fortemente aos receptores, mostraram as afinidades de ligação mais altas de −6,9, −7,6, −7,1, −6,9, - 6,7 e -7,1 kcal / mol. De acordo com dados in-vitro, o resveratrol reduziu os osteoclastos após o tratamento de macrófagos derivados da medula óssea [Bone Marrow-derived Macrophage (BMM)] com fator estimulador de colônias de macrófagos [Macrophage Colony-Stimulating Factor (MCSF)] 20ng / ml e RANKL 50ng / ml, com diferentes concentrações de resveratrol (2,5, 10 μg / ml). Durante sete dias, as células foram tratadas com MCSF (20 ng / ml) e RANKL (40 ng / ml) juntamente com éter trimetílico concentrado e resveratrol (2,5, 10 μg / ml) em 12 horas, processo que não afeta a sobrevivência celular. Após a fixação de células de osteoclastos com fixador de formaldeído em lamela de vidro seguido de incubação com 0,1% Triton X-100 em PBS por 5 min, foi realizado posteriormente o procedimento para corar com rodamina faloidina a actina e Hoechst os núcleos. A microscopia de fluorescência foi realizada para ver a distribuição dos filamentos de actina [F.actina]. Finalmente, o resveratrol reduziu a formação do anel de actina. O resveratrol é o melhor composto bioativo para o preparo de medicamentos contra a perda óssea.

Study of resveratrol against bone loss by using in-silico and in-vitro methods / Estudo do resveratrol contra a perda óssea usando métodos in silico e in vitro

By applying the in-silico method, resveratrol was docked on those proteins which are responsible for bone loss. The Molecular docking data between the resveratrol and Receptor activator of nuclear factor-kappa-Β ligand [RANKL] receptors proved that resveratrol binds tightly to the receptors, showed the highest binding affinities of −6.9, −7.6, −7.1, −6.9, −6.7, and −7.1 kcal/mol. According to in-vitro data, Resveratrol reduced the osteoclasts after treating Marrow-Derived Macrophages [BMM] with Macrophage colony-stimulating factor [MCSF] 20ng / ml and RANKL 50ng / ml, with different concentrations of resveratrol (2.5, 10 μg / ml) For 7 days, the cells were treated with MCSF (20 ng / ml) and RANKL (40 ng / ml) together with concentrated trimethyl ether and resveratrol (2.5, 10 μg / ml) within 12 hours. Which, not affect cell survival. After fixing osteoclast cells with formaldehyde fixative on glass coverslip followed by incubation with 0.1% Triton X-100 in PBS for 5 min and after that stain with rhodamine phalloidin staining for actin and Hoechst for nuclei. Fluorescence microscopy was performed to see the distribution of filaments actin [F.actin]. Finally, resveratrol reduced the actin ring formation. Resveratrol is the best bioactive compound for drug preparation against bone loss.(AU)

Com a aplicação do método in-silico, o resveratrol foi ancorado nas proteínas responsáveis pela perda óssea. Os dados de docking molecular entre o resveratrol e o ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa-Β [Receptor Activator of Nuclear Factor kappa-B Ligant (RANKL)] provaram que o resveratrol se liga fortemente aos receptores, mostraram as afinidades de ligação mais altas de −6,9, −7,6, −7,1, −6,9, - 6,7 e -7,1 kcal / mol. De acordo com dados in-vitro, o resveratrol reduziu os osteoclastos após o tratamento de macrófagos derivados da medula óssea [Bone Marrow derived Macrophage (BMM)] com fator estimulador de colônias de macrófagos [Macrophage Colony-Stimulating Factor (MCSF)] 20ng / ml e RANKL 50ng / ml, com diferentes concentrações de resveratrol (2,5, 10 μg / ml). Durante sete dias, as células foram tratadas com MCSF (20 ng / ml) e RANKL (40 ng / ml) juntamente com éter trimetílico concentrado e resveratrol (2,5, 10 μg / ml) em 12 horas, processo que não afeta a sobrevivência celular. Após a fixação de células de osteoclastos com fixador de formaldeído em lamela de vidro seguido de incubação com 0,1% Triton X-100 em PBS por 5 min, foi realizado posteriormente o procedimento para corar com rodamina faloidina a actina e Hoechst os núcleos. A microscopia de fluorescência foi realizada para ver a distribuição dos filamentos de actina [F.actina]. Finalmente, o resveratrol reduziu a formação do anel de actina. O resveratrol é o melhor composto bioativo para o preparo de medicamentos contra a perda óssea.(AU)

Molecular transduction in receptor-ligand systems by planar electromagnetic fields / Transdução molecular em sistemas receptor-ligante por campos electromagnéticos planares

The coupling of a ligand with a molecular receptor induces a signal that travels through the receptor, reaching the internal domain and triggering a response cascade. In previous work on T-cell receptors and their coupling with foreign antigens, we observed the presence of planar molecular patterns able to generate electromagnetic fields within the proteins. These planes showed a coherent (synchronized) behavior, replicating immediately in the intracellular domain that which occurred in the extracellular domain as the ligand was coupled. In the present study, we examined this molecular transduction - the capacity of the coupling signal to penetrate deep inside the receptor molecule and induce a response. We verified the presence of synchronized behavior in diverse receptorligand systems. To appreciate this diversity, we present four biochemically different systems - TCR-peptide, calcium pump-ADP, haemoglobin-oxygen, and gp120-CD4 viral coupling. The confirmation of synchronized molecular transduction in each of these systems suggests that the proposed mechanism would occur in all biochemical receptor-ligand systems.

A ligação de um ligante com um receptor molecular induz um sinal que viaja através do receptor, chegando ao domínio interno e disparando uma cascata de resposta. Em trabalhos anteriores em receptores de células T e sua ligação com antígenos estranhos, observamos a presença de padrões moleculares planares capazes de gerar campos eletromagnéticos dentro das proteínas. Esses planos mostraram um comportamento coerente (sincronizado), replicando, instantaneamente, no domínio intracelular o que ocorreu no domínio extracelular, enquanto o ligante era acoplado. No presente estudo, examinamos essa transdução ­ a capacidade de um sinal de acoplamento de penetrar profundamente a molécula receptora e induzir uma resposta. Verificamos a presença de um comportamento coerente em sistemas diversos de receptor-ligante. Para apreciar essa diversidade, apresentamos quatro sistemas bioquímicos diferentes: TCR-peptídeo, ADP-bomba de cálcio, hemoglobina-oxigênio e gp120-CD4 acoplamento viral. A confirmação de transdução molecular sincronizada em cada um desses sistemas sugere que o mecanismo proposto ocorreria em todos os sistemas bioquímicos receptor-ligante.

Regulation of progesterone during follicular development by FSH and LH in sheep

Progesterone (P4) can participate in the development of female mammalian antral follicles through nuclear receptor (PGR). In this experiment, the differences of P4 synthesis and PGR expression in different developmental stages of sheep antral follicles (large > 5mm, medium 2-5mm, small < 2mm) were detected by enzyme-linked immunosorbent assay, immunohistochemistry, qRT-PCR and Western blotting. Secondly, sheep follicular granulosa cells were cultured in vitro. The effects of different concentrations of FSH and LH on P4 synthesis and PGR expression were studied. The results showed that acute steroid regulatory protein (StAR), cholesterol side chain lyase (P450scc) and 3β Hydroxysteroid dehydrogenase (3β-HSD) and PGR were expressed in antral follicles, and with the development of antral follicles in sheep, StAR, P450scc and the expression of 3β-HSD and PGR increased significantly. In vitro experiments showed that FSH and LH alone or together treatment could regulate P4 secretion and PGR expression in sheep follicular granulosa cells to varying degrees, hint P4 and PGR by FSH and LH, and LH was the main factor. Our results supplement the effects of FSH and LH on the regulation of P4 synthesis during follicular development, which provides new data for further study of steroid synthesis and function in follicular development.(AU)

Molecular transduction in receptor-ligand systems by planar electromagnetic fields / Transdução molecular em sistemas receptor-ligante por campos electromagnéticos planares

The coupling of a ligand with a molecular receptor induces a signal that travels through the receptor, reaching the internal domain and triggering a response cascade. In previous work on T-cell receptors and their coupling with foreign antigens, we observed the presence of planar molecular patterns able to generate electromagnetic fields within the proteins. These planes showed a coherent (synchronized) behavior, replicating immediately in the intracellular domain that which occurred in the extracellular domain as the ligand was coupled. In the present study, we examined this molecular transduction - the capacity of the coupling signal to penetrate deep inside the receptor molecule and induce a response. We verified the presence of synchronized behavior in diverse receptor ligand systems. To appreciate this diversity, we present four biochemically different systems - TCR-peptide, calcium pump-ADP, haemoglobin-oxygen, and gp120-CD4 viral coupling. The confirmation of synchronized molecular transduction in each of these systems suggests that the proposed mechanism would occur in all biochemical receptor-ligand systems.

A ligação de um ligante com um receptor molecular induz um sinal que viaja através do receptor, chegando ao domínio interno e disparando uma cascata de resposta. Em trabalhos anteriores em receptores de células T e sua ligação com antígenos estranhos, observamos a presença de padrões moleculares planares capazes de gerar campos eletromagnéticos dentro das proteínas. Esses planos mostraram um comportamento coerente (sincronizado), replicando, instantaneamente, no domínio intracelular o que ocorreu no domínio extracelular, enquanto o ligante era acoplado. No presente estudo, examinamos essa transdução – a capacidade de um sinal de acoplamento de penetrar profundamente a molécula receptora e induzir uma resposta. Verificamos a presença de um comportamento coerente em sistemas diversos de receptor-ligante. Para apreciar essa diversidade, apresentamos quatro sistemas bioquímicos diferentes: TCR-peptídeo, ADP-bomba de cálcio, hemoglobina-oxigênio e gp120-CD4 acoplamento viral. A confirmação de transdução molecular sincronizada em cada um desses sistemas sugere que o mecanismo proposto ocorreria em todos os sistemas bioquímicos receptor-ligante.

Molecular transduction in receptor-ligand systems by planar electromagnetic fields / Transdução molecular em sistemas receptor-ligante por campos electromagnéticos planares

The coupling of a ligand with a molecular receptor induces a signal that travels through the receptor, reaching the internal domain and triggering a response cascade. In previous work on T-cell receptors and their coupling with foreign antigens, we observed the presence of planar molecular patterns able to generate electromagnetic fields within the proteins. These planes showed a coherent (synchronized) behavior, replicating immediately in the intracellular domain that which occurred in the extracellular domain as the ligand was coupled. In the present study, we examined this molecular transduction - the capacity of the coupling signal to penetrate deep inside the receptor molecule and induce a response. We verified the presence of synchronized behavior in diverse receptor ligand systems. To appreciate this diversity, we present four biochemically different systems - TCR-peptide, calcium pump-ADP, haemoglobin-oxygen, and gp120-CD4 viral coupling. The confirmation of synchronized molecular transduction in each of these systems suggests that the proposed mechanism would occur in all biochemical receptor-ligand systems.(AU)

A ligação de um ligante com um receptor molecular induz um sinal que viaja através do receptor, chegando ao domínio interno e disparando uma cascata de resposta. Em trabalhos anteriores em receptores de células T e sua ligação com antígenos estranhos, observamos a presença de padrões moleculares planares capazes de gerar campos eletromagnéticos dentro das proteínas. Esses planos mostraram um comportamento coerente (sincronizado), replicando, instantaneamente, no domínio intracelular o que ocorreu no domínio extracelular, enquanto o ligante era acoplado. No presente estudo, examinamos essa transdução a capacidade de um sinal de acoplamento de penetrar profundamente a molécula receptora e induzir uma resposta. Verificamos a presença de um comportamento coerente em sistemas diversos de receptor-ligante. Para apreciar essa diversidade, apresentamos quatro sistemas bioquímicos diferentes: TCR-peptídeo, ADP-bomba de cálcio, hemoglobina-oxigênio e gp120-CD4 acoplamento viral. A confirmação de transdução molecular sincronizada em cada um desses sistemas sugere que o mecanismo proposto ocorreria em todos os sistemas bioquímicos receptor-ligante.(AU)

Efeitos da castração imunológica no epitélio seminífero de machos bubalinos / Effects of immunological castration on the seminipheral epithelium of buffaloes males

O procedimento de imunocastração vem sendo utilizado como técnica alternativa amplamente favorável ao bem-estar animal, por ser indolor, pouco invasiva e com eficácia semelhante à da castração cirúrgica, que causa maior estresse aos animais, principalmente quando realizada de forma inadequada. A imunocastração estimula a produção de anticorpos contra o Hormônio Liberador de Gonadotrofina (GnRH), bloqueando temporariamente a produção da testosterona pelas gônadas masculinas. Face a escassez de informações sobre este procedimento em touros bubalinos, o estudo teve como objetivo analisar os possíveis efeitos da imunocastração no parênquima testicular de búfalos. Vinte touros bubalinos, com idade entre 2 a 3 anos, oriundos da ilha do Marajó ­ PA, foram avaliados e divididos aleatoriamente em dois grupos composto por dez animais no grupo controle (GC) e dez do grupo imunocastrado (GIM). O produto utilizado foi a vacina anti-GnRH Bopriva ® (Zoetis, SP, Brasil). O GIM recebeu duas doses de 1,0ml contendo 400µg da vacina Bopriva ® com intervalo de 8 semanas entre as aplicações e o grupo controle recebeu 1,0 ml de solução fisiológica. Após 14 dias da última dose, os animais foram abatidos e coletado os 20 pares de testículos para analises de parâmetros macroscópicos como: comprimento, largura, circunferência e peso. Além disso, foi realizada a retirada de fragmentos do parênquima testicular para confecção de lâminas histológicas. Para comparação dos dados foi aplicado o teste t de Student (Nonparametric Test) considerando a significância com p<0,05 e intervalo de confiança de 95%. Foi observado diferença significativa entre os dois grupos para grupos para peso (direto p<0001; esquerdo p≤ 0,0001), circunferência (direita p< <0,0001), 1; esquerda p<0,0001), ), largura (somente lado direito p<0,0372) e comprimento (direita p≤ 0,0013; esquerda p<0,0437). Na avaliação microscópica, os animais do GC não apresenteram alterações. Nos animais do GIM houve degeneração em todas as amostras, sendo visualizado descamação, tortuosidade e espessamento da membrana basal do túbulo seminífero, assim como vacuolização e atrofia das células de Sertoli. Foi observado também uma redução do número de células de Leydig, fibrose intertubular pronunciada, núcleos picnóticos, azoospermia e células multinucleadas no interior dos túbulos. Conclui-se a vacina anti-GnRH mostrou-se eficaz em provocar lesões no parênquima testicular, comprometendo significativamente a espermatogênese a partir da possível supressão de testosterona.(AU)

The immunocastration procedure has been used as an alternative technique widely favorable to animal welfare, as it is painless, minimally invasive and with similar efficacy to surgical castration, which causes greater stress to animals, especially when performed improperly. Immunocastration stimulates the production of antibodies against Gonadotropin Releasing Hormone (GnRH), temporarily blocking the production of testosterone by the male gonads. Due to the scarcity of information about this procedure in buffalo bulls, the study aimed to analyze the possible effects of immunocastration on the testicular parenchyma of buffaloes. Twenty buffalo bulls, aged between 2 and 3 years, from the island of Marajó - PA, were evaluated and randomly divided into two groups consisting of ten animals in the control group (CG) and ten from the immunocastrated group (GIM). The product used was the anti-GnRH vaccine Bopriva ® (Zoetis, SP, Brazil). The GIM received two doses of 1.0ml containing 400µg of Bopriva ® vaccine with an interval of 8 weeks between applications and the control group received 1.0 ml of saline solution. After 14 days of the last dose, the animals were slaughtered and the 20 pairs of testes were collected for analysis of macroscopic parameters such as: length, width, circumference and weight. In addition, fragments of the testicular parenchyma were removed for the preparation of histological slides. To compare the data, Student's t test (Nonparametric Test) was applied, considering the significance with p< 0.0372) and length (right p≤ 0.0013; left p<0.0437). In the microscopic evaluation, the animals of the CG showed no alterations. In the GIM animals there was degeneration in all samples, with desquamation, tortuosity and thickening of the seminiferous tubule basement membrane, as well as vacuolization and atrophy of Sertoli cells. A reduction in the number of Leydig cells, pronounced intertubular fibrosis, pyknotic nuclei, azoospermia and multinucleated cells within the tubules were also observed. In conclusion, the anti-GnRH vaccine proved to be effective in causing lesions in the testicular parenchyma, significantly compromising spermatogenesis from the possible suppression of testosterone.(AU)

Comparative study between ketamine-S-dexmedetomidine and ketamine-S-midazolam-methadone in the anesthesia of capuchin monkeys (Sapajus apella) / Estudo comparativo entre quetamina-S-dexmedetomidina e quetamina-S-midazolam- metadona na anestesia de macacos-prego (Sapajus apella)

Anesthetic protocols have been developed to obtain the most effective and safe association in wildlife. This study compared the anesthetic effects and cardiorespiratory parameters of ketamine-S (+) (10 mg/kg)/dexmedetomidine (0.020 mg/kg) (KD ) and ketamine-S (+) (10 mg/kg)/midazolam (0.5 mg/kg)/methadone (1.0 mg/kg) (KMM ) in capuchin monkeys (Sapajus apella). Eight capuchin monkeys were randomly assigned to KD (n = 4) or KMM (n = 4) to evaluate induction, immobilization, and recovery scores, heart and respiratory rate parameters, besides systolic, mean, diastolic arterial pressure and arterial blood gas. There was no difference (P = 0.56) in the quality of induction, immobilization, and anesthetic recovery between the protocols. The time for anesthetic induction was 4 ± 1 min in the KD group and 5 ± 1 min in the KMM group, and these values were statistically equal (P = 0.28). The mean immobilization time in the KD and KMM groups were 35 ± 13 and 33 ± 15 min, respectively. Heart rate was lower in animals in the KD group (P < 0.001), while respiratory rate (P = 0.03), and mean blood pressure (P = 0.046) were higher than that of the animals in the KMM group. Respiratory acidosis occurred in the KMM group, with lower pH (7.25±0.047; P = 0.0055) and higher pCO2 (51 ± 6;mmHg; P = 0.008). Both protocols exhibited good induction quality, immobilization, and anesthetic recovery, despite cardiorespiratory and blood gas alterations observed, which warrants monitoring of cardiorespiratory variables during KD or KMM chemical restraint.

Protocolos anestésicos foram desenvolvidos para obter a associação mais eficaz e segura em animais selvagens. O objetivo deste estudo foi comparar os efeitos anestésicos e os parâmetros cardiorrespiratórios de cetamina-S (+) (10 mg / kg) / dexmedetomidina (0,020 mg / kg) (KD) e cetamina-S (+) (10 mg / kg) / midazolam (0,5 mg / kg) / metadona (1,0 mg / kg) (KMM) em macacos-prego (Sapajus apella). Oito macacos-prego foram distribuídos aleatoriamente em KD (n = 4) ou KMM (n = 4) para avaliar os escores de indução, imobilização e recuperação, parâmetros de frequência cardíaca e respiratória, além da pressão arterial sistólica, média, diastólica e gasometria arterial. Não houve diferença (P = 0,56) na qualidade da indução, imobilização e recuperação anestésica entre os protocolos. O tempo de indução anestésica foi de 4 ± 1 min no grupo KD e 5 ± 1 min no grupo KMM, sendo esses valores estatisticamente iguais (P = 0,28). O tempo médio de imobilização nos grupos KD e KMM foram 35 ± 13min e 33 ± 15 min, respectivamente. A frequência cardíaca foi menor nos animais do grupo KD (P < 0,001), enquanto a frequência respiratória (P = 0,03) e a pressão arterial média (P = 0,046) foram maiores do que nos animais do grupo KMM. Acidose respiratória ocorreu no grupo KMM, com menor pH (7,25 ± 0,047; P = 0,0055) e maior pCO2 (51 ± 6; mmHg; P = 0,008). Ambos os protocolos apresentaram boa qualidade de indução, imobilização e recuperação anestésica, apesar das alterações cardiorrespiratórias e gasométricas observadas, o que justifica o monitoramento das variáveis cardiorrespiratórias durante a contenção química com KD ou KMM.

Avanços na andrologia de animais selvagens / Advances in wild animal andrology

As tecnologias de reprodução assistida (TRA) são de fundamental importância para a conexão de indivíduos em diferentes localidades, facilitando assim o intercâmbio genético e favorecendo a variabilidade genética de uma espécie. Por esta razão, as TRAS podem ser ferramentas importantes para a conservação de espécies ameaçadas de extinção. Apesar dos esforços nas últimas décadas, o avanço no desenvolvimento de tais tecnologias está aquém à urgência de reverter processos de baixa variabilidade genética em algumas espécies. A necessidade de refinamento das técnicas para as particularidades fisiológicas e comportamentais de cada espécie, somada à raridade de acesso aos animais são os principais fatores relacionados as dificuldades em se avançar com as TRAS. As técnicas mais recentes desenvolvidas para a recuperação de espermatozoides em animais selvagens são a colheita farmacológica, com uso de alfa-2-agonistas e a criopreservação / vitrificação testicular com posterior cultivo. Pouco de avançou, no entanto, em relação aos métodos de criopreservação, prevalecendo associação clássica de TRIS-gema-glicerol. Discutimos, então os métodos usados para acesso ao gameta masculino em espécies selvagens e suas aplicações na conservação animal.(AU)

Assisted reproduction technologies (ART) are of fundamental importance for connecting individuals in different locations, thus facilitating genetic exchange and favoring the genetic variability of a species. For this reason, TRAS can be important tools for the conservation of endangered species. Despite efforts in recent decades, the advance in the development of such technologies is short of the urgency of reversing processes of low genetic variability in some species. The need to refine the techniques for the physiological and behavioral particularities of each species, added to the rarity of access to animals, are the main factors related to the difficulties in advancing with TRAS. The most recent techniques developed for sperm collection in wild animals are pharmacological collection, with the use of alpha-2-agonists and testicular cryopreservation / vitrification with subsequent cultivation. Little progress has been made, however, in relation to cryopreservation methods, prevailing the classic association of TRIS-yolk-glycerol. We therefore discuss the methods used to access the male gamete in wild species and their applications in animal conservation.(AU)

Perinatal exposure to a high-fat diet alters proopiomelanocortin, neuropeptide Y and dopaminergic receptors gene expression and the food preference in offspring adult rats / Exposição perinatal a uma dieta hiperlipídica altera a expressão gênica de proopiomelanocortina, neuropepitídeo Y e receptores dopaminérgicos e a preferência alimentar em ratos adultos descendentes

Exposure to the hight-fat diet may alter the control of food intake promoting hyperphagia and obesity. The objective of this study was to investigate the effects of this diet on dopamine receptors (drd1 and drd2), proopiomelanocortin (pomc), neuropeptideY (npy) genes expression, and preference food in adult rats. Wistar female rats were fed a hight-fat or control diet during pregnancy and lactation. The offspring were allocated into groups: Lactation - Control (C) and High-fat (H). Post-weaning ­ Control Control (CC), offspring of mothers C, fed a control diet after weaning; Control Hight-fat (CH), offspring of mothers C, fed a hight-fat diet after weaning; Hight-fat Control (HC), offspring of mothers H, fed with control diet after weaning; and Hight-fat Hight-fat (HH), offspring of mothers H, fed a H diet after weaning. The groups CH and HH presented greater expression of drd1 in comparison to the CC. The drd2 of CH and HC presented higher gene expression than did CC. HH presented higher pomc expression in comparison to the other groups. HC also presented greater expression in comparison to CH. The npy of HH presented greater expression in relation to CH and HC. HH and HC have had a higher preference for a high-fat diet at 102º life's day. The high-fat diet altered the gene expression of the drd1, drd2, pomc and npy, and influencing the food preference for high-fat diet.

A exposição à dieta hiperlipídica pode alterar o controle da ingestão de alimentos, promovendo hiperfagia e obesidade. O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos dessa dieta sobre a expressão gênica dos receptores de dopamina (drd1 e drd2), da proopiomelanocortina (pomc) e neuropeptídeo Y (npy), e preferência alimentar em ratos adultos. Ratas Wistar foram alimentadas com uma dieta hiperlipídica ou controle durante a gestação e lactação. Os descendentes foram alocados em grupos: Lactação ­ Controle (C) e Hiperlipídica (H). Pós-desmame - Controle Controle (CC), descendentes das genitoras do grupo controle e alimentados com dieta controle após o desmame; Controle Hiperlipídica (CH), descendentes das genitoras do grupo controle e alimentados com dieta hiperlipídica após o desmame; Hiperlipídica Controle (HC), descendentes das genitoras do grupo hiperlipídica e alimentados com dieta controle após o desmame; Hiperlipídica Hiperlipídica (HH), descendentes das genitoras do grupo hiperlipídica e alimentados com dieta hiperlipídica após o desmame. Os grupos CH e HH apresentaram maior expressão de drd1 em comparação ao CC. O drd2 de CH e HC apresentou maior expressão gênica que o CC. HH apresentou maior expressão de pomc em comparação com os outros grupos. O HC também apresentou maior expressão de pomc em comparação ao CH. O npy do HH apresentou maior expressão em relação ao CH e HC. HH e HC tiveram uma preferência maior por uma dieta rica em gordura no 102º dia de vida. A dieta hiperlipídica alterou a expressão gênica dos drd1, drd2, pomc e npy e influenciou na preferência alimentar pela dieta hiperlipídica.

Inclusão da ractopamina na nutrição de peixes: revisão de literatura / Inclusion of ractopamine in fish nutrition: literature review / Inclusión de ractopamina en nutrición de peces: revisión de literatura

A demanda da população mundial por produtos aquáticos esta se incrementando, enquanto que a produção da pesca extrativa reduzindo, alcançando em muitos casos, seu máximo potencial produtivo. Como consequência, não será possível em curto prazo, sustentar o fornecimento de produtos aquáticos, direcionado a uma população que constantemente cresce e demanda pescados. O setor produtivo segue a tendência atual de outros sistemas de produção animal, os quais vêm buscando o aumento da produtividade, de maneira sustentável, do ponto de vista econômico e ambiental, requerendo, principalmente, o aporte da nutrição para contribuir com essa tendência. Os estudos com os aditivos adicionados a dieta dos animais de cativeiro é uma estratégia que tem demonstrado alto potencial para sua inclusão na aquicultura, havendo a possibilidade de um aumento nos índices produtivos e/ou melhora na qualidade do produto para o consumidor. A ractopamina é um aditivo classificado como um agonista beta-adrenérgico e seu mecanismo de ação esta associado com efeitos sobre o metabolismo dos peixes que diminuem o acúmulo de gorduras, por meio da inibição da lipogêneses e estimulo da lipólise, e por mecanismos que favorecem a síntese de proteínas muscular. Os estudos realizados até o momento comprovam que existem alterações metabólicas nos peixes, embora, não se tem encontrado, em todos os estudos, diferenças significativas nos índices zootécnicos, para assim, estabelecer seu uso na indústria. A realização de mais pesquisas é necessária para o melhor entendimento da ractopamina na alimentação dos peixes, sobretudo, no entendimento dos receptores e mecanismos de ação dos peixes.(AU)

The demand of the global population for aquatic products is increasing while the production of extractive fisheries is reducing, and, in many cases, even reaching its maximum productive potential. As a consequence, it will not be possible in the short term to sustain the supply of aquatic products aimed at a population in constant growth and in demand for fish. The productive sector follows the current trend of other animal production systems, which have been seeking to sustainably increase productivity from an economic and environmental point of view, mainly requiring the contribution of nutrition to this trend. Studies with additives to the diet of captive animals is a strategy that has shown high potential for inclusion in aquaculture, with the possibility of an increase in production rates and/or improvement in the quality of the product for the consumer. Ractopamine is an additive classified as a beta-adrenergic agonist and its mechanism of action is associated with effects on fish metabolism that reduce the accumulation of fats through the inhibition of lipogenesis and stimulation of lipolysis, and by mechanisms that favor the synthesis of muscle protein. The studies carried out so far prove that there are metabolic changes in fish, although no significant differences have been found in zootechnical indexes in order to establish its use in the industry. Further research is required for a better understanding of ractopamine in fish nutrition, especially in understanding the receptors and mechanisms of action in fish.(AU)

La demanda de la población mundial por productos acuáticos va en aumento, mientras que la producción de la pesca extractiva se reduce, alcanzando, en muchos casos, su máximo potencial productivo. Como consecuencia, no será posible en corto plazo sostener el suministro de productos acuáticos, dirigidos a una población que crece constantemente y demanda pescado. El sector productivo sigue la tendencia actual de otros sistemas de producción animal, que han venido buscando incrementar la productividad, de manera sostenible, desde el punto de vista económico y ambiental, requiriendo, principalmente, del aporte de la nutrición para contribuir a esa tendencia. Los estudios con aditivos agregados a la dieta de animales en cautiverio es una estrategia que ha mostrado un alto potencial para su inclusión en la acuicultura, con posibilidad de incremento en los índices de producción y/o mejora en la calidad del producto para el consumidor. La ractopamina es un aditivo clasificado como agonista beta-adrenérgico y su mecanismo de acción está asociado con efectos sobre el metabolismo de los peces que reducen la acumulación de grasas, a través de la inhibición de la lipogénesis y estimulación del lipólisis, y por mecanismos que favorecen la síntesis de proteínas musculares. Los estudios realizados hasta el momento prueban que existen cambios metabólicos en los peces, aunque en todos los estudios no se han encontrado diferencias significativas en los índices zootécnicos, con el fin de establecer su uso en la industria. Se necesita más investigación para comprender mejor la ractopamina en la nutrición de los peces, especialmente para comprender los receptores y los mecanismos de acción en los peces.(AU)

Differential gene expression pattern and plasma sex steroids during testicular development in Genyatremus luteus (Perciforme: Haemulidae) (Bloch, 1790) / Padrão diferencial de expressão gênica e esteróides sexuais plasmáticos durante o desenvolvimento testicular em Genyatremus luteus (Pisces: Haemulidae) (Bloch, 1790)

The aim of the current study is to evaluate gene expression patterns of LH (lhr) and estrogen (er) receptors and plasma steroid levels during testicular development in Genyatremus luteus. Males were histologically classified as immature (n=7), maturing (n=7) and mature (n=7), based on the cellular structure of their testes. Plasma 11-KT concentration recorded peak at the final maturation stage. The highest plasma 17α-OHP concentrations were observed at the immature stage; they decreased at the maturation and mature stages. On the other hand, 17ß-estradiol (E2) recorded higher concentrations at the maturation stage. Er expression has significantly increased along the maturational development of animals' testes. The mRNA observed for the LH receptor has decreased from immature to maturing stage; it presented expression peak at the mature stage. There was high association between receptor gene expression and plasma steroid levels, mainly E2. The current study was the first to feature different reproductive maturation stages in male G. luteus specimens, based on cellular, endocrine and molecular aspects. In addition, it has shown that the gene expression profile for er and lhr receptors, as well as plasma 11-KT and E2 concentrations, are directly linked to testicular maturation, although they are not necessarily associated with the gonadosomatic index.

O objetivo deste estudo foi avaliar os padrões de expressão gênica dos receptores de LH (lhr) e de estrogênio (er) e dos níveis de esteróides plasmáticos durante o desenvolvimento testicular de Genyatremus luteus. Os machos foram classificados histologicamente em imaturos, em maturação e maduros, de acordo com a estrutura celular dos testículos. A concentração plasmática de 11-KT apresentou um pico na fase de maturação final (P<0.05). As maiores concentrações plasmáticas de 17α-OHP foram encontradas no estádio imaturo (P<0.05), com consequente diminuição nos estádios em maturação e maturo. O 17ß-estradiol (E2) apresentou maiores níveis de concentração no estádio em maturação (P<0.05). A expressão de er aumentou significativamente ao longo do desenvolvimento maturacional dos testículos (P<0.05). O mRNA para o receptor de LH diminuiu do estádio imaturo para o estádio em maturação (P<0.05) com consequente pico de expressão no estádio maduro. Houve alta relação entre a expressão gênica dos receptores e os níveis de esteróides plasmáticos, especialmente com E2. Em conclusão, este estudo caracterizou pela primeira vez, sob os aspectos celular, endócrino e molecular, os diferentes estádios de maturação reprodutiva em machos de G. luteus, demonstrando que o perfil da expressão gênica para os receptores er e lhr, bem como as concentrações plasmáticas de 11-KT e E2 foram diretamente relacionados à maturação testicular, apesar de não se relacionarem necessariamente com o índice gonadossomático.

Assessment of melatonin-alpha adrenergic receptor complexes by molecular docking analysis / Avaliação dos complexos melatonina-receptores alfa-adrenérgicos por análises de docagem molecular

The pineal melatonin (N-acetyl-5-methoxytryptamine) is a molecule associated in a way or another with probably all physiological systems, aiming to fulfil its functional integrative roles in central nervous system activity, sleep and wakefulness cycles, energy metabolism and thermoregulation, immune, reproductive, endocrine, cardiovascular, respiratory and excretory systems. Within this context, the present study aimed to assess in silico the formation of complexes between ligand melatonin and other potential receptor proteins by molecular docking analyses. The main steps established in this experimental procedure were: a) search and selection of the 3D structure of the melatonin from DrugBank; b) search and selection of 3D structures of other target receptor proteins using STRING, protein BLAST and database PDB; and c) formation of the complexes between melatonin and receptors selected using AutoDock4.0 server by molecular docking analyses. High reliability score and significant similarity were only identified between type 1B melatonin and alpha-2A adrenergic receptor. Thus, molecular docking assays were carried out using ligand melatonin and crystallographic structures of the alpha-2A adrenergic receptor coupled to an antagonist (ID PDB 6kux) and a partial agonist (ID PDB 6kuy) available in the database PDB. Binding energy values of -6.79 and -6.98 kcal/mol and structural stability by non-covalent intermolecular interactions were predicted during the formation of complexes between melatonin and alpha-2A adrenergic receptor 6kux and 6kuy, respectively. In this way, the findings described in current study may indicate strong interactions between melatonin and adrenoceptors, suggesting its possible partial agonist effect on the activation of the alfa-2A adrenergic receptor.(AU)

A melatonina pineal (N-acetil-5-metoxitriptamina) é uma molécula associada de um modo ou outro com provavelmente todos os sistemas fisiológicos, visando cumprir seus papéis funcionais integradores na atividade do sistema nervoso central, ciclos de sono e vigília, metabolismo energético e termorregulação, sistemas imunológico, reprodutivo, endócrino, cardiovascular, respiratório e excretor. Assim, o presente estudo objetivou avaliar in silico a formação de complexos entre o ligante melatonina e outras proteínas potenciais receptoras por meio de análises de docagem molecular. As principais etapas estabelecidas neste procedimento experimental foram: a) busca e seleção da estrutura 3D da melatonina a partir do banco de dados DrugBank; b) busca e seleção de estruturas 3D de outras proteínas receptoras-alvo utilizando STRING, proteína BLAST e o banco de dados PDB; e c) avaliação da formação dos complexos entre melatonina e receptores selecionados a partir do servidor AutoDock4.0 para análises de docagem molecular. Alto escore de confiabilidade e similaridade significativa foram identificados apenas entre a melatonina do tipo 1B e o receptor alfa-2A adrenérgico. Valores de energia de ligação de -6,79 e -6,98 kcal/mol e estabilidade estrutural pela presença de interações intermoleculares não covalentes foram preditos durante a formação de complexos entre o ligante melatonina e os receptores adrenérgico alfa-2A 6kux e 6kuy, respectivamente. Dessa forma, os achados descritos no presente estudo podem indicar fortes interações entre melatonina e adrenoceptores, sugerindo seu possível efeito agonista parcial na ativação do receptor alfa-2A adrenérgico.(AU)