Immunogenicity of Streptococcus equi subsp. equi recombinant SeM protein and bacterin in mice / Imunogenicidade da proteína recombinante SeM de Streptococcus equi subsp. equi e da bacterina em camundongos

The infection caused by Streptococcus equi, known as strangles, affects the respiratory system of horses, causing high morbidity and rapid spread among the herd. Bacterin vaccines, composed of inactivated whole cells of S. equi, have variable efficacy and duration. Infected animals produce specific antibodies against SeM, the immunodominant antigen of S. equi. This makes it a promising target for vaccine development. In this context, the objective of this work was to evaluate a vaccine combining S. equi bacterin and recombinant SeM protein. Mice were vaccinated with bacterin (S. equi ~1.2 × 108CFU/ml); rSeM protein (20μg); bacterin-rSeM combination; or PBS (Control Group) and challenged with a suspension of S. equi, containing 10 × LD50. All vaccinated mice survived the challenge and produced anti-rSeM and anti-S. equi antibodies, which were assessed by indirect ELISA. The Control Group reached endpoint criteria 96 h after infection. These results demonstrate that a vaccine combining the S. equi bacterin with rSeM protein protects mice against strangles. This combination vaccine could potentially protect horses and overcome the limitations of currently available strangle vaccines.(AU)

A infecção causada por Streptococcus equi, denominada adenite, atinge o sistema respiratório de equinos, causando alta morbidade e rápida disseminação entre o rebanho. Vacinas bacterinas, compostas de células inteiras inativadas de S. equi apresentam eficácia e duração variáveis. Animais infectados apresentam anticorpos específicos à proteína SeM, antígeno imunodominante de S. equi, o que a torna um alvo promissor para o desenvolvimento de vacinas. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar uma vacina baseada na administração simultânea da bacterina e da proteína SeM recombinante. Camundongos foram vacinados com a bacterina (S. equi ~1.2 × 108CFU/ml); a proteína rSeM (20μg); a bacterina e rSeM simultaneamente; ou PBS (Grupo Controle) e, posteriormente, foram desafiados com uma suspensão de S. equi contendo 10 × LD50. Todos os animais vacinados apresentaram anticorpos anti-rSeM e contra S. equi, avaliados através de ELISA indireto, e mantiveram-se e sobreviveram ao desafio letal. O Grupo Controle atingiu critérios de endpoint 96 h após a infecção. Estes resultados demonstram que uma vacina constituída de células inteiras de S. equi com rSeM protege camundongos contra adenite, sugerindo a capacidade de proteção a equinos e, possivelmente, superando as limitações das vacinas contra adenite atualmente disponíveis.(AU)

Immunogenicity of Streptococcus equi subsp. equi recombinant SeM protein and bacterin in mice / Imunogenicidade da proteína recombinante SeM de Streptococcus equi subsp. equi e da bacterina em camundongos

The infection caused by Streptococcus equi, known as strangles, affects the respiratory system of horses, causing high morbidity and rapid spread among the herd. Bacterin vaccines, composed of inactivated whole cells of S. equi, have variable efficacy and duration. Infected animals produce specific antibodies against SeM, the immunodominant antigen of S. equi. This makes it a promising target for vaccine development. In this context, the objective of this work was to evaluate a vaccine combining S. equi bacterin and recombinant SeM protein. Mice were vaccinated with bacterin (S. equi ~1.2 × 108CFU/ml); rSeM protein (20μg); bacterin-rSeM combination; or PBS (Control Group) and challenged with a suspension of S. equi, containing 10 × LD50. All vaccinated mice survived the challenge and produced anti-rSeM and anti-S. equi antibodies, which were assessed by indirect ELISA. The Control Group reached endpoint criteria 96 h after infection. These results demonstrate that a vaccine combining the S. equi bacterin with rSeM protein protects mice against strangles. This combination vaccine could potentially protect horses and overcome the limitations of currently available strangle vaccines.(AU)

A infecção causada por Streptococcus equi, denominada adenite, atinge o sistema respiratório de equinos, causando alta morbidade e rápida disseminação entre o rebanho. Vacinas bacterinas, compostas de células inteiras inativadas de S. equi apresentam eficácia e duração variáveis. Animais infectados apresentam anticorpos específicos à proteína SeM, antígeno imunodominante de S. equi, o que a torna um alvo promissor para o desenvolvimento de vacinas. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar uma vacina baseada na administração simultânea da bacterina e da proteína SeM recombinante. Camundongos foram vacinados com a bacterina (S. equi ~1.2 × 108CFU/ml); a proteína rSeM (20μg); a bacterina e rSeM simultaneamente; ou PBS (Grupo Controle) e, posteriormente, foram desafiados com uma suspensão de S. equi contendo 10 × LD50. Todos os animais vacinados apresentaram anticorpos anti-rSeM e contra S. equi, avaliados através de ELISA indireto, e mantiveram-se e sobreviveram ao desafio letal. O Grupo Controle atingiu critérios de endpoint 96 h após a infecção. Estes resultados demonstram que uma vacina constituída de células inteiras de S. equi com rSeM protege camundongos contra adenite, sugerindo a capacidade de proteção a equinos e, possivelmente, superando as limitações das vacinas contra adenite atualmente disponíveis.(AU)

Prevalência da leishmaniose visceral canina e coinfecções em região periurbana no Distrito Federal - Brasil / Prevalence of visceral canine leishmaniosis and co-infections in periurban region in the Federal District - Brazil

Objetivou-se verificar a prevalência da leishmaniose visceral canina (LVC) em área periurbana com foco de transmissão no Distrito Federal (DF) e também avaliar a prevalência de coinfecções como dirofilariose, anaplasmose, erliquiose e doença de Lyme em cães sororreagentes para LVC. Inicialmente, amostras de soros dos cães da área de estudo foram testadas à reação imunocromatográfica que contém dois antígenos recombinantes ̶ rK39 e rK26 − (DPP) para Leishmania sp. O soro dos animais reagentes ao teste de DPP foi confirmado para LVC com ELISA. As amostras reagentes a ambos os testes foram analisadas para possíveis coinfecções através do teste de SNAP (IDEXX 4Dx Plus). Foram avaliados 240 cães, dos quais 132 (55%) obtiveram resultados reagentes para DPP e para ELISA concomitantemente, sendo diagnosticados com LVC. Destes, 26 (20%) foram reagentes para Ehrlichia canis ou E. ewangii, 9 (7%) apresentaram positividade para Anaplasma phagocytophilum ou A. platys e, nessas amostras que se apresentaram reagentes, observou-se a ocorrência de coinfecção de anaplasmose, erliquiose e leishmaniose em 3 (2,3%) animais. Verificou-se alta prevalência da LVC na região periurbana do DF, destacando-se a necessidade de diagnóstico mais preciso quanto a coinfecções que possivelmente podem influenciar no prognóstico e manifestação do quadro clínico desses pacientes.

The aim of this study was to verify the prevalence of Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) in periurban area focusing on transmissions that occurred on Distrito Federal (DF), and also, evaluate the prevalence of co-infections like dirofilariosis, anaplasmosis, ehrlichiosis and Lyme disease in dogs seroreagents to CLV. Initially the serum of the dogs inhabitants of the study area was tested according to the immunochromatographic reaction that contained two recombinant antigens - rK39 e rK26 - (DPP) to Leishmania sp. The animal plasma that reacted to the DPP test was confirmed for CVL with ELI-SA. Through confirmation of diagnose of VL by both tests, the samples were analyzed for possible co-infections through SNAP test (IDEXX 4Dx Plus). 240 dogs were tested, 132 (55%) of which obtained reacting results for DPP and for ELISA concomitantly, being diagnosed with CVL. Amongst those, 26 (20%) were positive for Ehrlichia canis or E. ewangii, meanwhile 9 (7%) presented positive results for Anaplasma phagocytophilum or A. platys, from those samples that showed to be positive, co-infection of anaplasmosis, ehrlichiosis and leishmaniasis was observed in 3 (2.3%) dogs. The high prevalence of CVL was observed in the periurban region of DF, highlighting the need for more precise diagnosis regarding co-infections that may possibly influence on the prognosis and clinical manifestation of these patients.

Prevalência da leishmaniose visceral canina e coinfecções em região periurbana no Distrito Federal - Brasil / Prevalence of visceral canine leishmaniosis and co-infections in periurban region in the Federal District - Brazil

Objetivou-se verificar a prevalência da leishmaniose visceral canina (LVC) em área periurbana com foco de transmissão no Distrito Federal (DF) e também avaliar a prevalência de coinfecções como dirofilariose, anaplasmose, erliquiose e doença de Lyme em cães sororreagentes para LVC. Inicialmente, amostras de soros dos cães da área de estudo foram testadas à reação imunocromatográfica que contém dois antígenos recombinantes ̶ rK39 e rK26 − (DPP) para Leishmania sp. O soro dos animais reagentes ao teste de DPP foi confirmado para LVC com ELISA. As amostras reagentes a ambos os testes foram analisadas para possíveis coinfecções através do teste de SNAP (IDEXX 4Dx Plus). Foram avaliados 240 cães, dos quais 132 (55%) obtiveram resultados reagentes para DPP e para ELISA concomitantemente, sendo diagnosticados com LVC. Destes, 26 (20%) foram reagentes para Ehrlichia canis ou E. ewangii, 9 (7%) apresentaram positividade para Anaplasma phagocytophilum ou A. platys e, nessas amostras que se apresentaram reagentes, observou-se a ocorrência de coinfecção de anaplasmose, erliquiose e leishmaniose em 3 (2,3%) animais. Verificou-se alta prevalência da LVC na região periurbana do DF, destacando-se a necessidade de diagnóstico mais preciso quanto a coinfecções que possivelmente podem influenciar no prognóstico e manifestação do quadro clínico desses pacientes.(AU)

The aim of this study was to verify the prevalence of Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) in periurban area focusing on transmissions that occurred on Distrito Federal (DF), and also, evaluate the prevalence of co-infections like dirofilariosis, anaplasmosis, ehrlichiosis and Lyme disease in dogs seroreagents to CLV. Initially the serum of the dogs inhabitants of the study area was tested according to the immunochromatographic reaction that contained two recombinant antigens - rK39 e rK26 - (DPP) to Leishmania sp. The animal plasma that reacted to the DPP test was confirmed for CVL with ELI-SA. Through confirmation of diagnose of VL by both tests, the samples were analyzed for possible co-infections through SNAP test (IDEXX 4Dx Plus). 240 dogs were tested, 132 (55%) of which obtained reacting results for DPP and for ELISA concomitantly, being diagnosed with CVL. Amongst those, 26 (20%) were positive for Ehrlichia canis or E. ewangii, meanwhile 9 (7%) presented positive results for Anaplasma phagocytophilum or A. platys, from those samples that showed to be positive, co-infection of anaplasmosis, ehrlichiosis and leishmaniasis was observed in 3 (2.3%) dogs. The high prevalence of CVL was observed in the periurban region of DF, highlighting the need for more precise diagnosis regarding co-infections that may possibly influence on the prognosis and clinical manifestation of these patients.(AU)

Cloning and expression of an endoglucanase gene from the thermotolerant fungus Aspergillus fumigatus DBiNU-1 in Kluyveromyces lactis

An intronless endoglucanase from thermotolerant Aspergillus fumigatus DBINU-1 was cloned, characterized and expressed in the yeast Kluyveromyces lactis. The full-length open reading frame of the endoglucanase gene from A. fumigatus DBiNU-1, designated Cel7, was 1383 nucleotides in length and encoded a protein of 460 amino acid residues. The predicted molecular weight and the isoelectric point of the A. fumigatus Cel7 gene product were 48.19 kDa and 5.03, respectively. A catalytic domain in the N-terminal region and a fungal type cellulose-binding domain/module in the C-terminal region were detected in the predicted polypeptide sequences. Furthermore, a signal peptide with 20 amino acid residues at the N-terminus was also detected in the deduced amino acid sequences of the endoglucanase from A. fumigatus DBiNU-1. The endoglucanase from A. fumigatus DBiNU-1 was successfully expressed in K. lactis, and the purified recombinant enzyme exhibited its maximum activity at pH 5.0 and 60 °C. The enzyme was very stable in a pH range from 4.0 to 8.0 and a temperature range from 30 to 60 °C. These features make it suitable for application in the paper, biofuel, and other chemical production industries that use cellulosic materials.(AU)

rROP2 from Toxoplasma gondii as a potential vaccine against oocyst shedding in domestic cats / rROP2 de Toxoplasma gondii como potencial vacina contra a eliminação de oocistos em gatos domésticos

The aim of the present study was to evaluate oocyst shedding in cats immunized by nasal route with T. gondiiproteins ROP2. Twelve short hair cats (Felis catus) were divided in three groups G1, G2 and G3 (n=4). Animals from G1 received 100 μg of rROP2 proteins plus 20 μg of Quil-A, G2 received 100 μg of BSA plus 20 μg of Quil-A, and the G3 only saline solution (control group). All treatments were done by intranasal route at days 0, 21, 42, and 63. The challenge was performed in all groups on day 70 with ≅ 800 tissue cysts of ME-49 strain by oral route. Animals from G1 shed less oocysts (86.7%) than control groups. ELISA was used to detect anti-rROP2 IgG and IgA, however, there were no correlation between number of oocyst shedding by either IgG or IgA antibody levels. In the present work, in spite of lesser oocysts production in immunized group than control groups, it was not possible to associate the use of rROP2 via nostrils with protection against oocyst shedding. For the future, the use of either other recombinant proteins or DNA vaccine, in combination with rROP2 could be tested to try improving the efficacy of this kind of vaccine. (AU)

O objetivo do presente estudo foi avaliar a eliminação de oocistos de Toxoplasma gondii em gatos imunizados pela via nasal com proteínas ROP2 de T. gondii. Doze gatos sem raça definida (Felis catus) foram divididos em três grupos experimentais G1, G2 e G3 (n = 4). Os animais do G1 receberam 100 μg de proteínas de rROP2 mais 20 μg de Quil-A, G2 recebeu 100 μg de albumina de soro bovino (BSA) junto com 20 μg de Quil-A, e o G3 recebeu apenas solução salina (grupo de controle). Todos os tratamentos foram realizados pela via intranasal nos dias 0, 21, 42 e 63. O desafio foi realizado em todos os grupos no dia 70 com aproximadamente 800 cistos de tecido da cepa ME-49 por via oral. Os animais de todos os grupos tiveram as suas fezes examinadas e o número de oocistos foi determinado durante 20 dias após o desafio. Os animais de G1 eliminaram menos oocistos (86,7%) do que os grupos controles. O ELISA foi utilizado para detectar IgG e IgA anti-rROP2, no entanto, não houve correlação entre o número de eliminhação de oocistos com os níveis de anticorpos IgG ou IgA. No presente trabalho, apesar da menor produção de oocistos no grupo imunizado (G1) em relação aos grupos controles (G2 e G3), não foi possível associar o uso de rROP2 pela via nasal com proteção contra eliminação de oocistos de T. gondii. Para o futuro, a utilização de outras proteínas recombinantes, ou mesmo vacina de DNA, em combinação com rROP2 poderia ser utilizada para tentar melhorar a eficácia deste tipo de vacina.(AU)

Cultivation of Pichia pastoris carrying the scFv anti LDL (-) antibody fragment. Effect of preculture carbon source

Antibodies and antibody fragments are nowadays among the most important biotechnological products, and Pichia pastoris is one of the most important vectors to produce them as well as other recombinant proteins. The conditions to effectively cultivate a P. pastoris strain previously genetically modified to produce the single-chain variable fragment anti low density lipoprotein (-) under the control of the alcohol oxidase promoter have been investigated in this study. In particular, it was evaluated if, and eventually how, the carbon source (glucose or glycerol) used in the preculture preceding cryopreservation in 20% glycerol influences both cell and antibody fragment productions either in flasks or in bioreactor. Although in flasks the volumetric productivity of the antibody fragment secreted by cells precultured, cryopreserved and reactivated in glycerol was 42.9% higher compared with cells precultured in glucose, the use of glycerol in bioreactor led to a remarkable shortening of the lag phase, thereby increasing it by no less than thrice compared to flasks. These results are quite promising in comparison with those reported in the literature for possible future industrial applications of this cultivation, taking into account that the overall process time was reduced by around 8h.(AU)

Engenharia genética no probiótico Bacillus subtilis: expressão de fitase fúngica melhora parâmetros zootécnicos, sistema imune, resposta inflamatória e defesa antioxidante em zebrafish (Danio rerio) alimentado com dieta rica em matéria vegetal

A enzima fitase catalisa a hidrólise de fitato, o qual representa a forma de armazenamento do fósforo nos vegetais. O fitato é um fator antinutricional para animais monogástricos, pois estes são ineficientes na produção de fitases intestinais. Portanto, o incremento de ingredientes vegetais na ração em sistemas de produção animal é limitado. Com isso, o objetivo da presente tese foi obter um Bacillus subtilis geneticamente modificado capaz de expressar uma fitase fúngica e avaliar a eficácia desta enzima na dieta do zebrafish (Danio rerio). No capítulo I desenvolvemos uma construção genética baseada em plasmídeo replicativo contendo o gene da fitase do fungo Aspergillus fumigatus (Phy-Af) fusionado ao sinal de secreção do gene da levansacarase (SacB) do próprio B. subtilis. A atividade da fitase produzida pelo B. subtilis transgênico no sobrenadante da cultura foi 2,7 vezes superior do que os controles. Após determinar a atividade da fitase, realizamos um experimento de alimentação do zebrafish, durante 30 dias, com uma dieta rica em vegetais. O experimento foi constituído por dois grupos: Phy-Af (com dieta suplementada com B. subtilis expressando a fitase) e o grupo controle (dieta com B. subtilis não transgênico). Foi realizada a biometria inicial dos animais e final para avaliar o desempenho zootécnico e foram analisados genes relacionados com o transporte de peptídeos (slc15a1b e slc15a2), apetite (ghrl), fatores de crescimento muscular (igf1, myod e myog) e metabolismo de minerais (bglap). Os peixes alimentados com o B. subtilis transgênico apresentam melhores índices de desempenho quando comparados ao controle. Neste mesmo sentido, todos os genes analisados foram superexpressados no grupo tratado com o probiótico expressando a fitase fúngica. No capítulo II, o objetivo foi avaliar o efeito do B. subtilis transgênico sobre o sistema imune e a resposta inflamatória no zebrafish alimentado com a ração rica em matéria vegetal. Neste caso, foram analisados genes relacionados com a produção de linfócitos (cd4 e ikzf1), resposta inflamatória (ifnphi1, ifng, tnf- e il1b) e a resposta ao estresse oxidativo (sod1). Novamente, todos os genes analisados foram induzidos nos zebrafish alimentados com dieta suplementada com o probiótico transgênico. Considerando que plasmídeo replicativo pode ser instável e levar a perda da característica ao longo das gerações bacterianas, no capítulo III abordamos a aplicação da tecnologia CRISPRCas9 para edição do genoma do B. subtilis usando a construção da fitase fúngica desenvolvida no capítulo I. Como resultado, obtivemos a cepa BsJJ14 com o gene da vi fitase fúngica (oriunda de A. fumigatus) integrada ao genoma do B. subtilis e comparamos capacidade de manutenção da resistência ao antibiótico com a cepa PhyAf, que no capítulo III denominamos de BsJJ5. Os resultados mostraram que após 65 gerações, apenas 11% das células (BsJJ5) mantiveram o fenótipo de resistência a antibióticos, e a linhagem transformada pelo método CRISPR-Cas9 não perdeu o fenótipo no final do experimento. O perfil de atividade da cepa BsJJ14 foi 20% maior do que na cepa BsJJ5 transformada com o plasmídeo replicativo. Em conclusão, a presente tese demostrou que as técnicas usadas para a transformação de Bacillus tanto via epissomal quanto integrada ao genoma foram eficientes e, além disso, a fitase recombinante apresentou atividade enzimática e promoveu efeitos benéficos à saúde do zebrafish alimentado com uma dieta rica em ingrediente vegetal

The phytase enzyme catalyzes the phytate hydrolysis, which represents the form of storage of phosphorus in vegetables. Phytate is an antinutritional factor for monogastric animals, since they are inefficient in the production of intestinal phytases. Therefore, the increment of plant ingredients in the feed in animal production systems is limited. The objective of the present thesis was to obtain a genetically modified Bacillus subtilis capable of expressing a fungal phytase and to evaluate the efficacy of this enzyme in the diet of zebrafish (Danio rerio). In chapter I we developed a replicative plasmid-based genetic construct containing the phytase gene from the fungus Aspergillus fumigatus (Phy-Af) fused to the secretory signal of the B. subtilis levansacarase (SacB) gene. The phytase activity produced by transgenic B. subtilis in the culture supernatant was 2.7 fold higher than the controls. After determining phytase activity, we performed a zebrafish feeding experiment for 30 days on a plant-rich diet. The experiment consisted of two groups: Phy-Af (with diet supplemented with B. subtilis expressing phytase) and the control group (diet with non-transgenic B. subtilis). The initial and final biometrics were used to evaluate the performance of the animals and to analyze the genes related to peptide transport (slc15a1b and slc15a2), appetite (ghrl), muscle growth factors (igf1, myod and myog) and mineral metabolism (bglap). The fish fed with transgenic B. subtilis presented better performance indices when compared to the control. In the same sense, all the genes analyzed were induced in the group treated with the probiotic expressing fungal phytase. In chapter II, the objective was to evaluate the effect of transgenic B. subtilis on the immune system and the inflammatory response in zebrafish fed with the feed rich in vegetable matter. In this case, genes related to the production of lymphocytes (cd4 and ikzf1), inflammatory response (ifn1, ifng, tnf-alpha and il1b) and the response to oxidative stress (sod1) were analyzed. Again, all genes analyzed were induced in zebrafish fed a diet supplemented with the transgenic probiotic. Considering that the replicative plasmid may be unstable and lead to loss of trait throughout the bacterial generations, in chapter III we approached the application of CRISPR-Cas9 technology for editing the genome of B. subtilis using the fungal phytase construct developed in Chapter I. As a result, we obtained the strain BsJJ14 with fungal phytase integrated into the genome of B. subtilis and compared maintenance capacity of antibiotic resistance with the strain Phy-Af, which in chapter III we call BsJJ5. The results showed that after 65 generations, only 11% of the BsJJ5 cells maintained the viii antibiotic resistance phenotype, and the strain transformed by the CRISPR-Cas9 method did not lose the phenotype at the end of the experiment. The activity profile of the BsJJ14 strain was 20% greater than in the BsJJ5 strain transformed with the replicative plasmid. In conclusion, the present thesis demonstrated that the techniques used for the transformation of B. subtilis both episomal and integrated into the genome were efficient and, in addition, recombinant phytase showed enzymatic activity and promoted beneficial health effects of zebrafish fed on a diet rich in vegetable ingredient

Cysticercosis in experimentally and naturally infected pigs: parasitological and immunological diagnosis / Cisticercose em suínos infectados experimentalmente e naturalmente: diagnósticos parasitológico e imunológico

Our objective was to evaluate the diagnosis of swine cysticercosis by examining "ante mortem" (inspection of the tongue), "post mortem" (inspection and detailed necropsy) and ELISA for research in serum of antibodies (Ab-ELISA) and antigens (Ag-ELISA). Seven (7) pigs were experimentally infected orally with eggs of Taenia solium and another 10 were naturally infected. In the pigs experimentally infected, inspection of the tongue was negative in all animals, in the routine inspection detailed necropsy and cysticercis were identified in all of them. In pigs with heavy natural infection, inspection of the tongue identified cysticerci in two (20%), while at inspection with necropsy the parasites were identified in large quantities in all animals. In ELISA for antibody search (Ab-ELISA) TS-14 recombinant protein was used, and in search for antigen (Ag-ELISA) a monoclonal antibody against this protein. In animals experimentally infected, blood was collected weekly for 140 days. The Ab-ELISA identified an increase in titers of antibody to cysticerci 21 days after infection, and at the end of the experimental period six animals (86%) were positive to the test. The search for circulating antigens (Ag-ELISA) was positive in two pigs 28 to 91 days after infection. All naturally infected pigs were positive for Ag-ELISA and Ab-ELISA. The search for antibodies and antigens by ELISA in serum from 30 pigs of a local farm and without history of cysticercosis was negative. Thus, the use of TS-14 antigen in ELISA test (Ab-ELISA) can be useful for the diagnosis of cysticercosis in pigs with low infection.(AU)

Nosso objetivo foi avaliar o diagnóstico de cisticercose suína através do exame "ante mortem" (inspeção da língua), "post mortem" (inspeção e necropsia detalhada) e teste de ELISA para a pesquisa no soro de anticorpos (Ab-ELISA) e antígenos (Ag -ELISA). Sete (7) suínos foram infectados experimentalmente por via oral com ovos de Taenia solium e outros 10 eram portadores de infecção natural generalizada. Nos suínos experimentalmente infectados, a inspeção da língua foi negativa em todos os animais, na inspeção 4 (57%) estavam infectados, a necropsia detalhada identificou cisticercos em todos os animais. Nos animais com infecção natural generalizada, a inspeção da língua identificou cisticercos em 2 (20%), enquanto que a inspeção e a necropsia os parasitas foram identificados em grande quantidade em todos os animais. No teste de ELISA para a pesquisa de anticorpos (Ab-ELISA) foi utilizada a proteína recombinante TS-14 e para a pesquisa de antígenos (Ag-ELISA) um anticorpo monoclonal produzido contra esta proteína. Nos animais experimentalmente infectados o sangue foi coletado semanalmente por um período de 140 dias. O Ab-ELISA identificou um aumento nos títulos de anticorpos para cisticercos 21 dias após a infecção, sendo que no final do período experimental 6 animais (86%) foram positivos ao teste. A pesquisa de antígenos circulantes (Ag-ELISA), foi positiva em 2 animais, entre os dias 21 e 91 após a infecção . Todos os suínos com infecção natural generalizada foram positivos para Ag-ELISA e Ab-ELISA.A pesquisa de anticorpos e antígenos pelo ELISA realizada no soro de 30 suínos procedentes de uma criação local sem historia de cisticercose foi negativa. Assim o uso do antígeno TS-14 (Ac-ELISA), pode ser útil para o diagnóstico da cisticercose em suínos com baixa infecção.(AU)

Efeito da somatotropina recombinante bovina (rbST) sobre os níveis de marcadores metabólicos de touros semiconfinados das raças Aberdeen Angus e Brangus / Effect of recombinant bovine somatotropin (rbST) on the concentrations of metabolic markers in semi-confined sires Aberdeen Angus and Brangus

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da somatotropina recombinante bovina (rbST) sobre os marcadores do metabolismoenergético, proteico, mineral e hepático de touros mantidos em semiconfinamento. Foram utilizados 20 touros de raçasAberdeen Angus e Brangus, sendo divididos aleatoriamente em dois grupos (Placebo e rbST), para que no Placebo fosseadministrado via subcutânea duas doses de NaCl, 0,9% e no rbST fosse administrado o rbST (Lactotropin®). Foram realizadascinco coletas de sangue, com intervalo de 14 dias, para avaliação da concentração de triacilgliceróis e colesterol comomarcadores energéticos, ureia, como indicador proteico, fosfatase alcalina e fósforo como marcadores minerais e asenzimas aspartato aminotransferase (AST) e a gama glutamiltransferase (GGT) como indicadoras da função hepática. Aaplicação de rbST não influenciou os marcadores energéticos, minerais, e proteico, exceto a enzima hepática GGT (P 0,05).Estes resultados indicam que a utilização do rbST em touros não alterou o metabolismo, pois os parâmetros avaliadosmantiveram-se dentro dos padrões considerados fisiológicos para a espécie.

The aim of this study was to evaluate the effect of recombinant bovine somatotropin (rbST) on metabolic markers for energy, protein, mineral and hepatic metabolism of sires kept grazing and receiving concentrate. Twenty sires Aberdeen Angus and Brangus used for this experiment were divided in two groups (Placebo and rbST). The group Placebo received subcutaneous administration of NaCl, 0.9% and rbST receive rbST twice. Five blood collections with 14 days of interval were made for evaluation of triglyceride and cholesterol as energetic metabolism markers, urea, as proteic marker, alkaline phosphatase and phosphorus as minerals markers and aspartate aminotransferase (AST) and gamma glutamyltransferase (GGT) as indicators of the hepatic function. The rbST did not influence the energetic, mineral and proteic markers, except the hepatic enzyme GGT (P<0,05). These results indicated that the use of rbST in sires did not affect metabolism, therefore evaluated parameters remaining in the physiological range for the specie.(AU)

Efeito da somatotropina recombinante bovina (rbST) sobre os níveis de marcadores metabólicos de touros semiconfinados das raças Aberdeen Angus e Brangus / Effect of recombinant bovine somatotropin (rbST) on the concentrations of metabolic markers in semi-confined sires Aberdeen Angus and Brangus

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da somatotropina recombinante bovina (rbST) sobre os marcadores do metabolismoenergético, proteico, mineral e hepático de touros mantidos em semiconfinamento. Foram utilizados 20 touros de raçasAberdeen Angus e Brangus, sendo divididos aleatoriamente em dois grupos (Placebo e rbST), para que no Placebo fosseadministrado via subcutânea duas doses de NaCl, 0,9% e no rbST fosse administrado o rbST (Lactotropin®). Foram realizadascinco coletas de sangue, com intervalo de 14 dias, para avaliação da concentração de triacilgliceróis e colesterol comomarcadores energéticos, ureia, como indicador proteico, fosfatase alcalina e fósforo como marcadores minerais e asenzimas aspartato aminotransferase (AST) e a gama glutamiltransferase (GGT) como indicadoras da função hepática. Aaplicação de rbST não influenciou os marcadores energéticos, minerais, e proteico, exceto a enzima hepática GGT (P 0,05).Estes resultados indicam que a utilização do rbST em touros não alterou o metabolismo, pois os parâmetros avaliadosmantiveram-se dentro dos padrões considerados fisiológicos para a espécie.

The aim of this study was to evaluate the effect of recombinant bovine somatotropin (rbST) on metabolic markers for energy, protein, mineral and hepatic metabolism of sires kept grazing and receiving concentrate. Twenty sires Aberdeen Angus and Brangus used for this experiment were divided in two groups (Placebo and rbST). The group Placebo received subcutaneous administration of NaCl, 0.9% and rbST receive rbST twice. Five blood collections with 14 days of interval were made for evaluation of triglyceride and cholesterol as energetic metabolism markers, urea, as proteic marker, alkaline phosphatase and phosphorus as minerals markers and aspartate aminotransferase (AST) and gamma glutamyltransferase (GGT) as indicators of the hepatic function. The rbST did not influence the energetic, mineral and proteic markers, except the hepatic enzyme GGT (P<0,05). These results indicated that the use of rbST in sires did not affect metabolism, therefore evaluated parameters remaining in the physiological range for the specie.

Levantamento sorológico para Anaplasma sp. em ovinos do Estado de Alagoas, Brasil / Serological survey of "Anaplasma" sp. in sheep from State of Alagoas, Brazil

No Brasil, informações acerca da anaplasmose em pequenos ruminantes são escassas. Neste artigo, é apresentado um levantamento epidemiológico para Anaplasma sp., em ovinos provenientes de três micro-regiões (Sertão, Zona da Mata e Agreste) do estado de Alagoas, Nordeste do Brasil, por ELISA com MSP5 recombinante de Anaplasma marginale. A frequência de ovinos soropositivos foi de 8,92% (20/224). Entre as regiões, as frequências foram: Sertão 6,89% (2/29), Zona da Mata 10,46% (18/172) e Agreste 0% (0/23). Diferenças entre as ocorrências de ovinos soropositivos não foram estatisticamente significativas. No entanto, a baixa frequência detectada na região do Sertão e Agreste em relação à Zona da Mata possivelmente ocorreu devido à influência das condições climáticas sobre o desenvolvimento dos carrapatos vetores. Esses achados pontuais necessitam de futuros estudos para elucidar os aspectos epidemiológicos e econômicos da anaplasmose ovina na região.

In Brazil, information concerning anaplasmosis in small ruminants is scarce. In this paper, it is shown an epidemiological survey of Anaplasma sp. in sheep from three micro-regions (Sertão, Zona da Mata and Agreste) of Alagoas, Northeast of Brazil, by enzyme linked immunosorbent assay - ELISA with recombinant major surface protein - MSP5 of Anaplasma marginale. The frequency of seropositive sheep was 8.92% (20/224). Among regions, frequencies were: Sertão - 6.89% (2/29), Zona da Mata 10.46% (18/172), and Agreste 0% (0/23). Differences in the frequencies of seropositive sheep were not statistically significant. However, the lower frequencies were detected in the semi-arid micro-regions (Sertão and Agreste), possibly, due to the unsuitable climatic conditions for the development of tick vectors. These findings point to the need of further studies, to elucidate epidemiological and economic aspects of sheep anaplasmosis in the region.

Levantamento sorológico para Anaplasma sp. em ovinos do Estado de Alagoas, Brasil / Serological survey of "Anaplasma" sp. in sheep from State of Alagoas, Brazil

No Brasil, informações acerca da anaplasmose em pequenos ruminantes são escassas. Neste artigo, é apresentado um levantamento epidemiológico para Anaplasma sp., em ovinos provenientes de três micro-regiões (Sertão, Zona da Mata e Agreste) do estado de Alagoas, Nordeste do Brasil, por ELISA com MSP5 recombinante de Anaplasma marginale. A frequência de ovinos soropositivos foi de 8,92% (20/224). Entre as regiões, as frequências foram: Sertão 6,89% (2/29), Zona da Mata 10,46% (18/172) e Agreste 0% (0/23). Diferenças entre as ocorrências de ovinos soropositivos não foram estatisticamente significativas. No entanto, a baixa frequência detectada na região do Sertão e Agreste em relação à Zona da Mata possivelmente ocorreu devido à influência das condições climáticas sobre o desenvolvimento dos carrapatos vetores. Esses achados pontuais necessitam de futuros estudos para elucidar os aspectos epidemiológicos e econômicos da anaplasmose ovina na região.

In Brazil, information concerning anaplasmosis in small ruminants is scarce. In this paper, it is shown an epidemiological survey of Anaplasma sp. in sheep from three micro-regions (Sertão, Zona da Mata and Agreste) of Alagoas, Northeast of Brazil, by enzyme linked immunosorbent assay - ELISA with recombinant major surface protein - MSP5 of Anaplasma marginale. The frequency of seropositive sheep was 8.92% (20/224). Among regions, frequencies were: Sertão - 6.89% (2/29), Zona da Mata 10.46% (18/172), and Agreste 0% (0/23). Differences in the frequencies of seropositive sheep were not statistically significant. However, the lower frequencies were detected in the semi-arid micro-regions (Sertão and Agreste), possibly, due to the unsuitable climatic conditions for the development of tick vectors. These findings point to the need of further studies, to elucidate epidemiological and economic aspects of sheep anaplasmosis in the region.