Genistein and Daidzein effects on the physiological indices of Soybean Cyst Nematodes

ABSTRACT: Soybean cyst nematode (SCN, Heterodera glycines) is a chief plantparasitic nematode of soybean. Application of synthetic chemical nematicides poses negative side effects to human health and the environment. Therefore, the search for a safe and effective approach is more relevant. This study evaluated the effects of Genistein and Daidzein on the physiological index of soybean cyst nematodes, individual morphology, reversal frequency, respiration, and body fluid leaking of secondstage juveniles (J2s) of soybean cyst nematode. The results showed that body length of J2s decreased, while stylet and tail transparent area elongated. Additionally, after the treatment, the body became hollow and shrunken, the J2s stiffened, whereas the reversal frequency decreased dramatically after 24 h of treatment. Moreover, the body fluid leakage was intensified and respiration was inhibited. Oxygen consumption decreased by 86.7 % and 70.1 %, while, in contrast, electrical conductivity increased by 40.1 % and 36 % at 100 g mL1 of Genistein and Daidzein, respectively, after 48 h of exposure. The smaller number of J2s in soybean roots, the slower development rate, and the abnormal sexual differentiation were found in greenhouse assay. Thus, Genistein and Daidzein, especially Genistein, have strong effects on the physiological index of soybean cyst nematodes. Moreover, the effects were time and dosagedependent.

Genistein and Daidzein effects on the physiological indices of Soybean Cyst Nematodes

Soybean cyst nematode (SCN, Heterodera glycines) is a chief plant-parasitic nematode of soybean. Application of synthetic chemical nematicides poses negative side effects to human health and the environment. Therefore, the search for a safe and effective approach is more relevant. This study evaluated the effects of Genistein and Daidzein on the physiological index of soybean cyst nematodes, individual morphology, reversal frequency, respiration, and body fluid leaking of second-stage juveniles (J2s) of soybean cyst nematode. The results showed that body length of J2s decreased, while stylet and tail transparent area elongated. Additionally, after the treatment, the body became hollow and shrunken, the J2s stiffened, whereas the reversal frequency decreased dramatically after 24 h of treatment. Moreover, the body fluid leakage was intensified and respiration was inhibited. Oxygen consumption decreased by 86.7 % and 70.1 %, while, in contrast, electrical conductivity increased by 40.1 % and 36 % at 100 μg mL−1 of Genistein and Daidzein, respectively, after 48 h of exposure. The smaller number of J2s in soybean roots, the slower development rate, and the abnormal sexual differentiation were found in greenhouse assay. Thus, Genistein and Daidzein, especially Genistein, have strong effects on the physiological index of soybean cyst nematodes. Moreover, the effects were time and dosage-dependent.

Antimicrobial resistance profile of Staphylococcus spp. isolates in cattle herds from Western Amazon / Perfil de resistência antimicrobiana de Staphylococcus spp. isolados em rebanhos leiteiros da Amazônia Ocidental

Staphylococcus is one of the most frequent etiological agents of bovine mastitis, causing economic losses to milk farming. This study aimed to describe the milk production and management practices in 15 herds located in three microregions of the State of Rondônia and to identify the antimicrobial resistance profile of 97 isolates of the genus Staphylococcus from these herds. The isolates were subjected to antimicrobial susceptibility tests using the agar diffusion method. Twenty-nine S. aureus isolates were selected to determine their minimum inhibitory concentration (MIC). In the farms studied, the breeding system was semi-intensive, with the Girolando breed being predominant. Milking was performed predominantly using a mechanical milking system (86.7%), twice a day (66.7%), in the presence of the calf (53.8%). The average number of lactating cows in the farms was 24, with an average milk production of 204.9 L d-1 and a milk productivity of 10.2 L animal-1 d-1. The use of antimicrobials for the treatment and prevention of bovine mastitis was reported for all properties, and therapy for dry cows was adopted in 80% of the herds. The percent susceptibility to antimicrobials ranged from 85.5% to 100% for S. aureus, 22.2% to 88.9% for coagulase-positive staphylococci (CPS), and 69.2% to 100% for coagulase-negative staphylococci (CNS), with the highest resistance frequencies for penicillin, ampicillin, and tetracycline. Among the S. aureus isolates, 100% susceptibility to oxacillin, cefalexin, and gentamicin was observed, and among the CNS isolates, 100% susceptibility to gentamicin was observed. None of the antimicrobials tested showed 100% in vitro effectiveness for CPS. CPS and CNS presented lower percentages of susceptibility to penicillin, ampicillin, and tetracycline than the S. aureus isolates. Twelve resistance patterns were detected, six of which were multiresistance patterns. The most prevalent resistance patterns were penicillin and ampicillin (PEN-AMP) and penicillin, ampicillin, and tetracycline (PEN-AMP-TET). Results of the MIC assay revealed that all 29 S. aureus isolates were susceptible to cephalothin, cefoxitin, tetracycline, and erythromycin, whereas 25 (86.2%) were susceptible to penicillin.(AU)

O gênero Staphylococcus destaca-se como um dos agentes etiológicos mais frequentes da mastite bovina, causando prejuízos econômicos à pecuária de leite. Este estudo teve o objetivo de descrever a produção de leite e práticas de manejo de 15 rebanhos localizados em três microrregiões do Estado de Rondônia, e identificar o perfil de resistência aos antimicrobianos de 97 isolados do gênero Staphylococcus provenientes destes rebanhos. Os isolados foram submetidos a testes de suscetibilidade a antimicrobianos, utilizandose a técnica de difusão em ágar. Foram selecionados 29 isolados de Staphylococcus aureus (S. aureus) para determinação da concentração inibitória mínima (CIM). Nas propriedades estudadas, o sistema de criação era semi-intensivo, com predomínio da raça Girolando. A ordenha era realizada predominantemente em sistema de ordenha mecânica (86,7%), duas vezes ao dia (66,7%) e com a presença do bezerro (53,8%). A média do número de vacas em lactação das propriedades era de 24 animais, com média de produção de leite de 204,9 L d-1 e produtividade de leite de 10,2 L animal-1 d-1. O uso de antimicrobianos para o tratamento e prevenção da mastite bovina foi relatado em todas as propriedades, sendo adotada a terapia da vaca seca em 80% dos rebanhos. A percentagem de susceptibilidade aos antimicrobianos variou de 85,5 a 100% para S. aureus, 22,2 a 88,9% para Staphylococcus coagulase positivos (SCP) e 69,2 a 100% para Staphylococcus coagulase negativos (SCN), sendo as maiores frequências de resistência para penicilina, ampicilina e tetraciclina. Entre os isolados de S. aureus foi observada 100% de susceptibilidade aos antimicrobianos oxacilina, cefalexina e gentamicina, e entre os isolados de SCN, 100% de susceptibilidade à gentamicina. Nenhum dos antimicrobianos testados apresentou 100% de efetividade in vitro para SCP. SCP e SCN apresentaram menores percentagens de susceptibilidade à penicilina, ampicilina e tetraciclina do que os isolados de S. aureus. Foram observados 12 padrões de resistência, sendo seis padrões de multirresistência. Os padrões de resistência mais prevalentes foram resistência à penicilina e ampicilina (PEN-AMP) e à penicilina, ampicilina e tetraciclina (PEN-AMP-TET). A determinação da CIM dos 29 isolados de S. aureus mostraram que todos foram susceptíveis à cefalotina, cefoxitina, tetraciclina e eritromicina, e 25 (86,2%) foram susceptíveis à penicilina.(AU)

Genistein and Daidzein effects on the physiological indices of Soybean Cyst Nematodes

Soybean cyst nematode (SCN, Heterodera glycines) is a chief plant–parasitic nematode of soybean. Application of synthetic chemical nematicides poses negative side effects to human health and the environment. Therefore, the search for a safe and effective approach is more relevant. This study evaluated the effects of Genistein and Daidzein on the physiological index of soybean cyst nematodes, individual morphology, reversal frequency, respiration, and body fluid leaking of second–stage juveniles (J2s) of soybean cyst nematode. The results showed that body length of J2s decreased, while stylet and tail transparent area elongated. Additionally, after the treatment, the body became hollow and shrunken, the J2s stiffened, whereas the reversal frequency decreased dramatically after 24 h of treatment. Moreover, the body fluid leakage was intensified and respiration was inhibited. Oxygen consumption decreased by 86.7 % and 70.1 %, while, in contrast, electrical conductivity increased by 40.1 % and 36 % at 100 μg mL–¹ of Genistein and Daidzein, respectively, after 48 h of exposure. The smaller number of J2s in soybean roots, the slower development rate, and the abnormal sexual differentiation were found in greenhouse assay. Thus, Genistein and Daidzein, especially Genistein, have strong effects on the physiological index of soybean cyst nematodes. Moreover, the effects were time and dosage–dependent.

In vitro efficacy of iodine in the pre and post dipping against coagulase negative Staphylococcus isolated in milk of cows with subclinical mastitis / Eficácia in vitro do iodo no pré e pós dipping frente a Staphylococcus coagulase negativa isolados em leite de vacas com mastite subclínica

The efficiency of the disinfectants used in the milking management is fundamental to the success in the dairy activity, being a critical point to the control of mastitis. The objective was to evaluate the in vitro efficacy of iodine used in pre and post-dipping against coagulase negative Staphylococcus (CNS). Thus, 53 CNS isolates were studied for the action of the 1.0% disinfectant and their serial dilutions of 0.5%, 0.375% and 0.25%, in addition to two commercial presentations of iodine in concentrations of 0.5% and 0.25%. The rate of CNS inhibition achieved by iodine at 0.375%, 0.5% and 1.0% for 60 seconds, was 60.4%. In 30 seconds, iodine at 0.5% and 1.0% showed a microbial inhibition rate of 52.8% and 56.6%, respectively. The other protocols tested were less efficient. It is concluded that the greatest in vitro disinfectant activity for CNS was demonstrated by iodine at 0.375%, 0.5% and 1.0%, for 60 seconds. Microbial susceptibility tests should be carried out periodically, as well as health education practices and corrective training on the property, in order to ensure udder health and mastitis control.(AU)

A eficiência dos desinfetantes empregados no manejo de ordenha é fundamental no sucesso na atividade leiteira, sendo um ponto crítico ao controle da mastite. Objetivou-se avaliar a eficácia in vitro do iodo utilizado no pré e pós-dipping frente à Staphylococcus coagulase negativa (SCN). Foram estudados 53 isolados de SCN quanto à ação do desinfetante a 1,0% e suas diluições seriadas de 0,5%, 0,375% e 0,25%, além de duas apresentações comerciais nas concentrações de 0,5% e 0,25%. A taxa de inibição de SCN alcançada pelo iodo a 0,375%, 0,5% e 1,0% durante 60 segundos, foi de 60,4%. Em 30 segundos, o iodo a 0,5% e 1,0% apresentaram taxa de inibição microbiana de 52,8% e 56,6%, respectivamente. Os demais protocolos testados foram menos eficientes. Conclui-se que a maior atividade desinfetante in vitro para SCN foi demonstrada pelo iodo a 0,375%, 0,5% e 1,0%, durante 60 segundos. Testes de susceptibilidade microbiana devem ser realizados periodicamente, assim como práticas de educação em saúde e treinamentos corretivos na propriedade, visando garantir a saúde do úbere e o controle da mastite.(AU)

Efficacy of three methods used to control staphylococcal mastitis in dairy goats / Eficácia de três métodos empregados no controle da mastite estafilocócica em cabras leiteiras

Goat and sheep farming in Brazil relies on an expressive herd, especially in the Northeast region of the country, where small ruminants constitute a relevant economic activity, with milk production being an important source of income in some dry areas of the Northeastern states. However, there are still some sanitary problems in the management of dairy goats, among which mastitis is highlighted, especially that of the subclinical type. Therefore, the aim of this study was to evaluate the use of antibiotics, exclusively or in combination with vaccines, in the control of sub-clinical mastitis in small ruminants. The study was conducted on a rural property located in Santa Maria da Boa Vista-PE. Fifty-three female Saanen dairy goats were allocated into four experimental groups. An antibiotic therapy with a commercial antimicrobial based on cloxacillin was used in group 1. Group 2 received the commercial vaccine indicated for herds with an incidence of Staphylococcus strains and the same antibiotic described for Group 1. Group 3 was evaluated for the exclusive use of vaccination, and Group 4 was the control group. A microbiological examination of the milk was carried out to confirm cases of mastitis. The percentage of udders, infected by coagulase-negative Staphylococcus spp. (CNS) before and after the antibiotic + vaccine treatment was 42.8 and 7.1%, respectively. It was observed that the cloxacillinbased antibiotic could be used alone or in combination with mastitis vaccines to control staphylococcal mastitis in small ruminants. Vaccination alone was not effective in reducing the number of mastitis cases; therefore, a cross reaction against CNS was not observed. Thus, further studies to determine the potential of vaccines to control sub-clinical mastitis in small ruminants are necessary.

A caprinovinocultura brasileira dispõe de um expressivo rebanho, principalmente na região Nordeste do país, onde os pequenos ruminantes constituem uma relevante atividade econômica sendo a produção de leite uma importante fonte renda em algumas zonas secas dos estados do Nordeste. No entanto, ainda existem alguns problemas de ordem sanitária no manejo de cabras leiteiras, dentre esses, tem-se a mastite, principalmente aquela do tipo subclínica. Portanto, objetivou-se com este trabalho avaliar o uso isolado ou combinação de antibióticos e vacinas no controle da mastite em pequenos ruminantes. O estudo foi realizado em uma propriedade localizada no município de Santa Maria da Boa Vista - PE. Um total de 53 fêmeas leiteiras Saanen foram divididas em quatros grupos experimentais. No grupo 01 foi utilizada a antibioticoterapia, com antimicrobiano comercial a base de cloxacilina. O grupo 02 recebeu vacina comercial indicada para rebanhos com incidência de cepas do gênero Staphylococcus e o mesmo antibiótico descrito para o grupo 01. Em um terceiro grupo apenas a vacina foi empregada, e por último, foi constituído um grupo controle. Empregou-se o exame microbiológico do leite para confirmação dos casos de mastite. A porcentagem de tetos infectados por Staphylococcus coagulase negativa (SCN) antes e após o tratamento Antibiótico + Vacina foi de 42,8 e 7,1%, respectivamente. Observou-se que o antibiótico a base de cloxacilina pode ser usado isoladamente ou em associação a vacinas anti-mastíticas para controle da mastite estafilocócica em pequenos ruminantes. O tratamento que preconizava a aplicação apenas da vacina não foi eficiente na redução dos casos da doença, portanto, não foi observada uma reação cruzada contra os SCN. Assim, faz-se necessária a continuidade dos estudos acerca do potencial das vacinas para o controle da mastite em pequenos ruminantes.

Efficacy of three methods used to control staphylococcal mastitis in dairy goats / Eficácia de três métodos empregados no controle da mastite estafilocócica em cabras leiteiras

Goat and sheep farming in Brazil relies on an expressive herd, especially in the Northeast region of the country, where small ruminants constitute a relevant economic activity, with milk production being an important source of income in some dry areas of the Northeastern states. However, there are still some sanitary problems in the management of dairy goats, among which mastitis is highlighted, especially that of the subclinical type. Therefore, the aim of this study was to evaluate the use of antibiotics, exclusively or in combination with vaccines, in the control of sub-clinical mastitis in small ruminants. The study was conducted on a rural property located in Santa Maria da Boa Vista-PE. Fifty-three female Saanen dairy goats were allocated into four experimental groups. An antibiotic therapy with a commercial antimicrobial based on cloxacillin was used in group 1. Group 2 received the commercial vaccine indicated for herds with an incidence of Staphylococcus strains and the same antibiotic described for Group 1. Group 3 was evaluated for the exclusive use of vaccination, and Group 4 was the control group. A microbiological examination of the milk was carried out to confirm cases of mastitis. The percentage of udders, infected by coagulase-negative Staphylococcus spp. (CNS) before and after the antibiotic + vaccine treatment was 42.8 and 7.1%, respectively. It was observed that the cloxacillinbased antibiotic could be used alone or in combination with mastitis vaccines to control staphylococcal mastitis in small ruminants. Vaccination alone was not effective in reducing the number of mastitis cases; therefore, a cross reaction against CNS was not observed. Thus, further studies to determine the potential of vaccines to control sub-clinical mastitis in small ruminants are necessary.(AU)

A caprinovinocultura brasileira dispõe de um expressivo rebanho, principalmente na região Nordeste do país, onde os pequenos ruminantes constituem uma relevante atividade econômica sendo a produção de leite uma importante fonte renda em algumas zonas secas dos estados do Nordeste. No entanto, ainda existem alguns problemas de ordem sanitária no manejo de cabras leiteiras, dentre esses, tem-se a mastite, principalmente aquela do tipo subclínica. Portanto, objetivou-se com este trabalho avaliar o uso isolado ou combinação de antibióticos e vacinas no controle da mastite em pequenos ruminantes. O estudo foi realizado em uma propriedade localizada no município de Santa Maria da Boa Vista - PE. Um total de 53 fêmeas leiteiras Saanen foram divididas em quatros grupos experimentais. No grupo 01 foi utilizada a antibioticoterapia, com antimicrobiano comercial a base de cloxacilina. O grupo 02 recebeu vacina comercial indicada para rebanhos com incidência de cepas do gênero Staphylococcus e o mesmo antibiótico descrito para o grupo 01. Em um terceiro grupo apenas a vacina foi empregada, e por último, foi constituído um grupo controle. Empregou-se o exame microbiológico do leite para confirmação dos casos de mastite. A porcentagem de tetos infectados por Staphylococcus coagulase negativa (SCN) antes e após o tratamento Antibiótico + Vacina foi de 42,8 e 7,1%, respectivamente. Observou-se que o antibiótico a base de cloxacilina pode ser usado isoladamente ou em associação a vacinas anti-mastíticas para controle da mastite estafilocócica em pequenos ruminantes. O tratamento que preconizava a aplicação apenas da vacina não foi eficiente na redução dos casos da doença, portanto, não foi observada uma reação cruzada contra os SCN. Assim, faz-se necessária a continuidade dos estudos acerca do potencial das vacinas para o controle da mastite em pequenos ruminantes.(AU)

Efeitos da mastite por Staphylococcus coagulase negativa sobre a qualidade do leite: uma revisão

Infecções intramamárias por Staphylococcus coagulase negativa (SCN) têm sido relatadas em muitos sistemas de produção leiteira no mundo todo. A qualidade do leite é definida com base na sua composição e higiene. A contagem de células somáticas (CCS) é considerada como o principal indicador de qualidade do leite e da situação da mastite nos rebanhos. Objetivou-se assim, estudar as consequências da mastite por SCN sobre a qualidade do leite através de um estudo de meta-análise. Concluiu-se que os SCN são patógenos emergentes e que vêm causando graves consequências sobre a qualidade do leite.(AU)

Coagulase negative Staphylococcus (CNS) intramammary infections have been reported in many dairy production systems worldwide. Milk quality is defined based on its composition and hygiene. Somatic Cell Count (CCS) is considered the main indicator of milk quality and of the mastitis situation in herds. The aim of this study was to investigate the effects of CNS mastitis on milk quality through a meta-analysis study. In this context, the research pointed out that CNS are emerging pathogens and have been causing serious consequences on milk quality.(AU)

Efeitos da mastite por Staphylococcus coagulase negativa sobre a qualidade do leite: uma revisão

Infecções intramamárias por Staphylococcus coagulase negativa (SCN) têm sido relatadas em muitos sistemas de produção leiteira no mundo todo. A qualidade do leite é definida com base na sua composição e higiene. A contagem de células somáticas (CCS) é considerada como o principal indicador de qualidade do leite e da situação da mastite nos rebanhos. Objetivou-se assim, estudar as consequências da mastite por SCN sobre a qualidade do leite através de um estudo de meta-análise. Concluiu-se que os SCN são patógenos emergentes e que vêm causando graves consequências sobre a qualidade do leite.

Coagulase negative Staphylococcus (CNS) intramammary infections have been reported in many dairy production systems worldwide. Milk quality is defined based on its composition and hygiene. Somatic Cell Count (CCS) is considered the main indicator of milk quality and of the mastitis situation in herds. The aim of this study was to investigate the effects of CNS mastitis on milk quality through a meta-analysis study. In this context, the research pointed out that CNS are emerging pathogens and have been causing serious consequences on milk quality.

Produção de biofilme por Staphylococcus coagulase negativa isolados de queijos e equipamentos / Biofilm production by coagulase-negative Staphylococci isolated from cheese and equipments

Biofilme é uma comunidade organizada de microrganismos que se forma em superfícies mal higienizadas, constituindo um mecanismo de defesa microbiana para permanência no ambiente. O objetivo do presente estudo foi investigar a capacidade de formação de biofilme de espécies de Staphylococcus coagulase negativa (SCN) isoladas de queijo Mussarela fatiado e de fatiadores de frios de estabelecimentos do município de Garanhuns-PE. De 103 isolados de SCN 56 (54,4%) foram negativos para produção de biofilme e 47 (45,6%) positivos, com a maior frequência de detecção nas espécies S. saprophyticus e S. cohnii subsp. urealyticum. Os resultados apontam para o potencial risco de contaminação cruzada de outros alimentos, uma vez que cepas bacterianas produtoras de biofilmes podem colonizar e persistir em superfícies de diversos equipamentos.(AU)

Produção de biofilme por Staphylococcus coagulase negativa isolados de queijos e equipamentos / Biofilm production by coagulase-negative Staphylococci isolated from cheese and equipments

Biofilme é uma comunidade organizada de microrganismos que se forma em superfícies mal higienizadas, constituindo um mecanismo de defesa microbiana para permanência no ambiente. O objetivo do presente estudo foi investigar a capacidade de formação de biofilme de espécies de Staphylococcus coagulase negativa (SCN) isoladas de queijo Mussarela fatiado e de fatiadores de frios de estabelecimentos do município de Garanhuns-PE. De 103 isolados de SCN 56 (54,4%) foram negativos para produção de biofilme e 47 (45,6%) positivos, com a maior frequência de detecção nas espécies S. saprophyticus e S. cohnii subsp. urealyticum. Os resultados apontam para o potencial risco de contaminação cruzada de outros alimentos, uma vez que cepas bacterianas produtoras de biofilmes podem colonizar e persistir em superfícies de diversos equipamentos.

Detecção de beta-lactamase por Staphylococcus coagulase-negativo isolados de queijo mussarela fatiados e fatiadores de frios / Beta-lactamase detection in coagulase-negative Staphylococci isolated from sliced mozzarella cheese and cold-cut slicers

A resistência de bactérias a antimicrobianos é considerada um problema de saúde pública, sendo a resistência aos beta-lactâmicos uma das mais importantes. O objetivo do presente estudo foi detectar a produção da enzima β-lactamase por isolados de Staphylococcus coagulase-negativo (SCN), provenientes de queijos Mussarela fatiados e equipamentos de fatiamento de frios. Os testes foram realizados utilizando discos impregnados com cefalosporina cromógena para detecção da β-lactamase. Dos 103 isolados de Staphylococcus spp. analisados, 55 (53%) produziram β-lactamase e 48 (47%) não produziram. Portanto, é possível inferir que SCN isolados neste estudo, podem inativar antimicrobianos β-lactâmicos e assim, exercer influência negativa na saúde pública, devido ao potencial em transferir genes de resistência antimicrobiana para outras bactérias.(AU)

Detecção de beta-lactamase por Staphylococcus coagulase-negativo isolados de queijo mussarela fatiados e fatiadores de frios / Beta-lactamase detection in coagulase-negative Staphylococci isolated from sliced mozzarella cheese and cold-cut slicers

A resistência de bactérias a antimicrobianos é considerada um problema de saúde pública, sendo a resistência aos beta-lactâmicos uma das mais importantes. O objetivo do presente estudo foi detectar a produção da enzima β-lactamase por isolados de Staphylococcus coagulase-negativo (SCN), provenientes de queijos Mussarela fatiados e equipamentos de fatiamento de frios. Os testes foram realizados utilizando discos impregnados com cefalosporina cromógena para detecção da β-lactamase. Dos 103 isolados de Staphylococcus spp. analisados, 55 (53%) produziram β-lactamase e 48 (47%) não produziram. Portanto, é possível inferir que SCN isolados neste estudo, podem inativar antimicrobianos β-lactâmicos e assim, exercer influência negativa na saúde pública, devido ao potencial em transferir genes de resistência antimicrobiana para outras bactérias.

Pesquisa de Staphylococcus spp. em profissionais de ordenha de propriedades leiteiras no Estado de Pernambuco, Brasil / Search for Staphylococcus spp. in milkers of dairy farms in Pernambuco State, Brazil

A contaminação de ordenhadores por Staphylococcus spp. tem sido descrita como um fator de risco para infecções intramamárias em animais durante o procedimento de ordenha. Objetivou-se avaliar a colonização por Staphylococcus spp. da região palmar/interdigital e da cavidade nasal em funcionários de ordenha de propriedades leiteiras no Município de Venturosa-PE. Foram coletadas amostras de swab nasal e das mãos de funcionários (n=6) de três propriedades leiteiras. Em todas as amostras de swab nasal (6/6) e em 33,3% (2/6) de swab das mãos foram isolados Staphylococcus spp. Além disso, todos os isolados foram classificados como Staphylococcus Coagulase Negativo (SCN), o que indica a disseminação desses micro-organismos.(AU)

Pesquisa de Staphylococcus spp. em profissionais de ordenha de propriedades leiteiras no Estado de Pernambuco, Brasil / Search for Staphylococcus spp. in milkers of dairy farms in Pernambuco State, Brazil

A contaminação de ordenhadores por Staphylococcus spp. tem sido descrita como um fator de risco para infecções intramamárias em animais durante o procedimento de ordenha. Objetivou-se avaliar a colonização por Staphylococcus spp. da região palmar/interdigital e da cavidade nasal em funcionários de ordenha de propriedades leiteiras no Município de Venturosa-PE. Foram coletadas amostras de swab nasal e das mãos de funcionários (n=6) de três propriedades leiteiras. Em todas as amostras de swab nasal (6/6) e em 33,3% (2/6) de swab das mãos foram isolados Staphylococcus spp. Além disso, todos os isolados foram classificados como Staphylococcus Coagulase Negativo (SCN), o que indica a disseminação desses micro-organismos.

Relationship between virulence factor genes in coagulase-negative Staphylococcus spp. and failure of antimicrobial treatment of subclinical mastitis in sheep

ABSTRACT: Coagulase-negative Staphylococcus spp. (CNS) are the main microorganisms involved in ovine mastitis. Treatment at the end of lactation can contribute towards cure and prevention of subclinical cases during the subsequent lactation. However, virulence factors and resistance mechanisms presented by CNS can decrease cure rates. The aims of the study were to identify the species of CNS in milk of mastitic ewes with and without antimicrobial treatment, and to investigate the presence of genes relating to resistance of -lactam antimicrobials, formation of biofilms, production of enterotoxins and production of the toxic shock syndrome toxin. Cases of failure in the treatment were related with the presence/absence of the respective genes. Sixty sheep were divided into three groups: G1, without treatment; G2, animals treated via the intramammary route with 100mg of cloxacillin during drying off; and G3, sheep treated via the intramammary route with 50 mg of nanoparticulate cloxacillin. Milk samples were gathered during drying off and 15 and 30 days after the parturition of the subsequent lactation. The analyses to identify the species of CNS were carried out by means of the internal transcribe spacer technique and the investigation of the genes responsible for the virulence factors and resistance to oxacillin was performed using the polymerase chain reaction (PCR) technique. No sample was positive for the mecA gene. The only gene relating to production of enterotoxins was sec. Among the genes relating to production of biofilm, icaD was the only one identified in the three experimental groups. Staphylococcus warneri was the main species of CNS isolated during the pre and post-partum periods of the sheep. The species carrying genes relating to production of enterotoxins and biofilms were present in uncured sheep.

RESUMO: Staphylococus spp. coagulase-negativos (SCN) estão entre os principais micro-organismos envolvidos na mastite ovina. O tratamento ao final da lactação pode contribuir com a cura e a prevenção de casos subclínicos durante a lactação seguinte. Todavia, fatores de virulência e mecanismos de resistência apresentados por SCN podem reduzir as taxas de cura. Os objetivos desse estudo foram identificar as espécies de SCN no leite de ovelhas com mastite com e sem tratamento antimicrobiano e investigar a presença de genes relacionados com resistência a antibióticos beta lactâmicos, formação de biofilmes, produção de enterotoxinas e produção da toxina da síndrome do choque tóxico. Casos de falhas no tratamento foram relacionados com a presença/ausência dos respectivos genes. Sessenta ovelhas foram divididas em três grupos: G1, sem tratamento; G2, animais tratados via intramamária com 100mg de cloxacilina antes da secagem; e G3, ovelhas tratadas via intramamária com 50 mg de cloxacilina nanoparticulada. Amostras de leite foram obtidas durante a secagem e 15 e 30 dias depois do parto na lactação seguinte. As análises para identificar as espécies de SCN foram conduzidas por meio da técnica de Internal transcribe spacer e a investigação dos genes responsáveis pelos fatores de virulência e resistência à oxacilina foi realizada usando a técnica reação em cadeia da polimerase. Nenhuma amostra foi positiva para o gene mecA. O único gene relacionado com a produção de enterotoxinas foi o sec. Dentre os genes relacionados com a produção de biofilme, icaD foi o único identificado nos três grupos experimentais. Staphylococcus warneri foi a principal espécie de SCN isolada durante o pré e pós-parto. As espécies que apresentaram genes relacionados com a produção de enterotoxinas e biofilmes estavam presentes nas ovelhas não curadas.

Relationship between virulence factor genes in coagulase-negative Staphylococcus spp. and failure of antimicrobial treatment of subclinical mastitis in sheep / Relação entre genes de fatores de virulência em Staphylococcus spp. coagulase-negativos e a falha do tratamento antimicrobiano da mastite subclínica ovina

Coagulase-negative Staphylococcus spp. (CNS) are the main microorganisms involved in ovine mastitis. Treatment at the end of lactation can contribute towards cure and prevention of subclinical cases during the subsequent lactation. However, virulence factors and resistance mechanisms presented by CNS can decrease cure rates. The aims of the study were to identify the species of CNS in milk of mastitic ewes with and without antimicrobial treatment, and to investigate the presence of genes relating to resistance of β-lactam antimicrobials, formation of biofilms, production of enterotoxins and production of the toxic shock syndrome toxin. Cases of failure in the treatment were related with the presence/absence of the respective genes. Sixty sheep were divided into three groups: G1, without treatment; G2, animals treated via the intramammary route with 100mg of cloxacillin during drying off; and G3, sheep treated via the intramammary route with 50 mg of nanoparticulate cloxacillin. Milk samples were gathered during drying off and 15 and 30 days after the parturition of the subsequent lactation. The analyses to identify the species of CNS were carried out by means of the internal transcribe spacer technique and the investigation of the genes responsible for the virulence factors and resistance to oxacillin was performed using the polymerase chain reaction (PCR) technique. No sample was positive for the mecA gene. The only gene relating to production of enterotoxins was sec. Among the genes relating to production of biofilm, icaD was the only one identified in the three experimental groups. Staphylococcus warneri was the main species of CNS isolated during the pre and post-partum periods of the sheep. The species carrying genes relating to production of enterotoxins and biofilms were present in uncured sheep.(AU)

Staphylococus spp. coagulase-negativos (SCN) estão entre os principais micro-organismos envolvidos na mastite ovina. O tratamento ao final da lactação pode contribuir com a cura e a prevenção de casos subclínicos durante a lactação seguinte. Todavia, fatores de virulência e mecanismos de resistência apresentados por SCN podem reduzir as taxas de cura. Os objetivos desse estudo foram identificar as espécies de SCN no leite de ovelhas com mastite com e sem tratamento antimicrobiano e investigar a presença de genes relacionados com resistência a antibióticos beta lactâmicos, formação de biofilmes, produção de enterotoxinas e produção da toxina da síndrome do choque tóxico. Casos de falhas no tratamento foram relacionados com a presença/ausência dos respectivos genes. Sessenta ovelhas foram divididas em três grupos: G1, sem tratamento; G2, animais tratados via intramamária com 100mg de cloxacilina antes da secagem; e G3, ovelhas tratadas via intramamária com 50 mg de cloxacilina nanoparticulada. Amostras de leite foram obtidas durante a secagem e 15 e 30 dias depois do parto na lactação seguinte. As análises para identificar as espécies de SCN foram conduzidas por meio da técnica de Internal transcribe spacer e a investigação dos genes responsáveis pelos fatores de virulência e resistência à oxacilina foi realizada usando a técnica reação em cadeia da polimerase. Nenhuma amostra foi positiva para o gene mecA. O único gene relacionado com a produção de enterotoxinas foi o sec. Dentre os genes relacionados com a produção de biofilme, icaD foi o único identificado nos três grupos experimentais. Staphylococcus warneri foi a principal espécie de SCN isolada durante o pré e pós-parto. As espécies que apresentaram genes relacionados com a produção de enterotoxinas e biofilmes estavam presentes nas ovelhas não curadas.(AU)

Relationship between virulence factor genes in coagulase-negative Staphylococcus spp. and failure of antimicrobial treatment of subclinical mastitis in sheep / Relação entre genes de fatores de virulência em Staphylococcus spp. coagulase-negativos e a falha do tratamento antimicrobiano da mastite subclínica ovina

Coagulase-negative Staphylococcus spp. (CNS) are the main microorganisms involved in ovine mastitis. Treatment at the end of lactation can contribute towards cure and prevention of subclinical cases during the subsequent lactation. However, virulence factors and resistance mechanisms presented by CNS can decrease cure rates. The aims of the study were to identify the species of CNS in milk of mastitic ewes with and without antimicrobial treatment, and to investigate the presence of genes relating to resistance of β-lactam antimicrobials, formation of biofilms, production of enterotoxins and production of the toxic shock syndrome toxin. Cases of failure in the treatment were related with the presence/absence of the respective genes. Sixty sheep were divided into three groups: G1, without treatment; G2, animals treated via the intramammary route with 100mg of cloxacillin during drying off; and G3, sheep treated via the intramammary route with 50 mg of nanoparticulate cloxacillin. Milk samples were gathered during drying off and 15 and 30 days after the parturition of the subsequent lactation. The analyses to identify the species of CNS were carried out by means of the internal transcribe spacer technique and the investigation of the genes responsible for the virulence factors and resistance to oxacillin was performed using the polymerase chain reaction (PCR) technique. No sample was positive for the mecA gene. The only gene relating to production of enterotoxins was sec. Among the genes relating to production of biofilm, icaD was the only one identified in the three experimental groups. Staphylococcus warneri was the main species of CNS isolated during the pre and post-partum periods of the sheep. The species carrying genes relating to production of enterotoxins and biofilms were present in uncured sheep.(AU)

Staphylococus spp. coagulase-negativos (SCN) estão entre os principais micro-organismos envolvidos na mastite ovina. O tratamento ao final da lactação pode contribuir com a cura e a prevenção de casos subclínicos durante a lactação seguinte. Todavia, fatores de virulência e mecanismos de resistência apresentados por SCN podem reduzir as taxas de cura. Os objetivos desse estudo foram identificar as espécies de SCN no leite de ovelhas com mastite com e sem tratamento antimicrobiano e investigar a presença de genes relacionados com resistência a antibióticos beta lactâmicos, formação de biofilmes, produção de enterotoxinas e produção da toxina da síndrome do choque tóxico. Casos de falhas no tratamento foram relacionados com a presença/ausência dos respectivos genes. Sessenta ovelhas foram divididas em três grupos: G1, sem tratamento; G2, animais tratados via intramamária com 100mg de cloxacilina antes da secagem; e G3, ovelhas tratadas via intramamária com 50 mg de cloxacilina nanoparticulada. Amostras de leite foram obtidas durante a secagem e 15 e 30 dias depois do parto na lactação seguinte. As análises para identificar as espécies de SCN foram conduzidas por meio da técnica de Internal transcribe spacer e a investigação dos genes responsáveis pelos fatores de virulência e resistência à oxacilina foi realizada usando a técnica reação em cadeia da polimerase. Nenhuma amostra foi positiva para o gene mecA. O único gene relacionado com a produção de enterotoxinas foi o sec. Dentre os genes relacionados com a produção de biofilme, icaD foi o único identificado nos três grupos experimentais. Staphylococcus warneri foi a principal espécie de SCN isolada durante o pré e pós-parto. As espécies que apresentaram genes relacionados com a produção de enterotoxinas e biofilmes estavam presentes nas ovelhas não curadas.(AU)

Etioligia de las mastitis: participación de microorganismos de la clase Mollicutes / Etiology of mastitis: participation of mocroorganisms of the class Mollicutes / Etiologia das mastites: pesquisa de micro-organismos da classe Mollicutes

La mastitis es la principal afección del ganado destinado a la producción lechera, que pesa el productor y la industria láctea. En el primer caso por la pérdida en cuanto a la producción, y en el segundo por el menor rendimiento industrial de los derivados lácteos. Es una enfermedad multifactorial, de múltiple etiología, incluyendo microorganismos como bacterias, virus, hongos, levaduras y algas. Entre los microorganismos bacterianos se destacan los estafilococos coagulosa-positivos (SCP) y la negativa (SCN), siendo el principal Staphylococcus aureus y varias especies de SCN, todas caracterizadas como contagiosas, además de Corynebacterium bovis. Con una elevada contagiosidad se tiene Mycoplasma spp., Con destaque para M. bovis importante patógeno en otros países, sin embargo, menos estudiado en Brasil. El objetivo del presente estudio fue evaluar la presencia de bacterias de la clase Mollicutes, en muestras de leche bovina con mastitis clínica, a partir de técnicas moleculares. De las 170 muestras de leche evaluadas, procedentes de cuatro propiedades lecheras de pequeño porte de la región de Botucatu, no fue posible detectar la presencia de Mollicutes.(AU)

Mastitis is the main disease of livestock destined for dairy production, which affects the dairy producer and the dairy industry. In the first case the loss of production, and the second because of the lower industrial yield of dairy products. It is a multifactorial, multiple etiology, including microorganisms such as bacteria, viruses, fungi, yeasts and algae. Staphylococcus aureus and several species of SCN, all characterized as contagious, in addition to Corynebacterium bovis, are prominent among bacterial microorganisms (SCP) and negative (SCN) staphylococci. Mycoplasma spp. Is highly contagious, with M. bovis being an important pathogen in other countries, but less studied in Brazil. The objective of the present study was to evaluate the presence of bacteria of the class Mollicutesin samples of bovine milk with clinical mastitis, based on molecular techniques. Of the 170 milk samples evaluated, from four small dairy farms in the Botucatu region, it was not possible to detect the presence of Mollicutes.(AU)

A mastite é a principal afecção do gado destinado à produção leiteira, que onera o produtor e a indústria de laticínios. No primeiro caso pela perda quanto a produção, e no segundo pelo menor rendimento industrial dos derivados lácteos. É uma enfermidade multifatorial, de múltipla etiologia, incluindo micro-organismos como bactérias, vírus, fungos, leveduras e algas. Entre os micro-organismos bacterianos ganham destaque os estafilococos coagulase-positivas (SCP) e negativa (SCN), sendo o principal Staphylococcus aureus e várias espécies de SCN, todas caracterizadas como contagiosos, além de Corynebacterium bovis. Com elevada contagiosidade tem-se Mycoplasma spp., com destaque para M. bovis importante patógeno em outros países, entretanto, menos estudado no Brasil. O objetivo do presente estudo foi avaliar a presença de bactérias da classe Mollicutes, em amostras de leite bovino com mastite clinica, a partir de técnicas moleculares. Das 170 amostras de leite avaliadas, procedentes de quatro propriedades leiteiras de pequeno porte da região de Botucatu, não foi possível detectar a presença de Mollicutes.(AU)

Etioligia de las mastitis: participación de microorganismos de la clase Mollicutes / Etiology of mastitis: participation of mocroorganisms of the class Mollicutes / Etiologia das mastites: pesquisa de micro-organismos da classe Mollicutes

La mastitis es la principal afección del ganado destinado a la producción lechera, que pesa el productor y la industria láctea. En el primer caso por la pérdida en cuanto a la producción, y en el segundo por el menor rendimiento industrial de los derivados lácteos. Es una enfermedad multifactorial, de múltiple etiología, incluyendo microorganismos como bacterias, virus, hongos, levaduras y algas. Entre los microorganismos bacterianos se destacan los estafilococos coagulosa-positivos (SCP) y la negativa (SCN), siendo el principal Staphylococcus aureus y varias especies de SCN, todas caracterizadas como contagiosas, además de Corynebacterium bovis. Con una elevada contagiosidad se tiene Mycoplasma spp., Con destaque para M. bovis importante patógeno en otros países, sin embargo, menos estudiado en Brasil. El objetivo del presente estudio fue evaluar la presencia de bacterias de la clase Mollicutes, en muestras de leche bovina con mastitis clínica, a partir de técnicas moleculares. De las 170 muestras de leche evaluadas, procedentes de cuatro propiedades lecheras de pequeño porte de la región de Botucatu, no fue posible detectar la presencia de Mollicutes.

Mastitis is the main disease of livestock destined for dairy production, which affects the dairy producer and the dairy industry. In the first case the loss of production, and the second because of the lower industrial yield of dairy products. It is a multifactorial, multiple etiology, including microorganisms such as bacteria, viruses, fungi, yeasts and algae. Staphylococcus aureus and several species of SCN, all characterized as contagious, in addition to Corynebacterium bovis, are prominent among bacterial microorganisms (SCP) and negative (SCN) staphylococci. Mycoplasma spp. Is highly contagious, with M. bovis being an important pathogen in other countries, but less studied in Brazil. The objective of the present study was to evaluate the presence of bacteria of the class Mollicutesin samples of bovine milk with clinical mastitis, based on molecular techniques. Of the 170 milk samples evaluated, from four small dairy farms in the Botucatu region, it was not possible to detect the presence of Mollicutes.

A mastite é a principal afecção do gado destinado à produção leiteira, que onera o produtor e a indústria de laticínios. No primeiro caso pela perda quanto a produção, e no segundo pelo menor rendimento industrial dos derivados lácteos. É uma enfermidade multifatorial, de múltipla etiologia, incluindo micro-organismos como bactérias, vírus, fungos, leveduras e algas. Entre os micro-organismos bacterianos ganham destaque os estafilococos coagulase-positivas (SCP) e negativa (SCN), sendo o principal Staphylococcus aureus e várias espécies de SCN, todas caracterizadas como contagiosos, além de Corynebacterium bovis. Com elevada contagiosidade tem-se Mycoplasma spp., com destaque para M. bovis importante patógeno em outros países, entretanto, menos estudado no Brasil. O objetivo do presente estudo foi avaliar a presença de bactérias da classe Mollicutes, em amostras de leite bovino com mastite clinica, a partir de técnicas moleculares. Das 170 amostras de leite avaliadas, procedentes de quatro propriedades leiteiras de pequeno porte da região de Botucatu, não foi possível detectar a presença de Mollicutes.