Condição microbiológica após antissepsia da genitália externa em éguas / Microbiological condition after antisepsis of reproductive tract in mares

A endometrite é a principal responsável pela diminuição nas taxas de fertilidade e recuperação embrionária em éguas e em parte, pode ser associada a contaminações por falhas na antissepsia das biotécnicas reprodutivas aplicadas à espécie. O objetivo deste trabalho foi avaliar os níveis de contaminação decorrentes de diferentes protocolos de antissepsia da genitália externa de éguas doadoras de embrião. Éguas sadias tiveram a vulva higienizada conforme um dos três grupos experimentais: (G1) sabão de côco; (G2) detergente neutro e (G3) clorexidina degermante 2%. Foi realizada a coleta de material da região da vulva, vestíbulo e útero com auxílio de swab estéril. As amostras foram processadas com objetivo de se determinar os principais microgranismos presentes, além da avaliação de Unidades Formadoras de Colônia (UFC). O G1 mostrou-se mais efetivo quanto à redução nas contagens de UFC em todas amostras. Por outro lado, G2 apresentou eficiência de 62%, sendo o tratamento menos eficiente na redução da contaminação das diferentes regiões avaliadas. A escolha adequada do agente sanitizante utilizado na higienização de períneo previamente a intervenções ginecológicas são de suma importância afim de se evitar contaminações ascendentes que levem a endometrites.(AU)

Endometritis is mainly responsible for the decrease in fertility and embryonic recovery rates in mares and, in part, it can be associated with contaminations due to failures in the antisepsis of reproductive biotechniques applied to the specie. The objective of this study was to evaluate the levels of contamination resulting from different protocols for antisepsis of the external genitalia of embryo donor mares. Healthy mares had their vulva sanitized according to one of the three experimental groups: (G1) coconut soap; (G2) neutral detergent and (G3) 2% chlorhexidine degerming. It was made the collection of material from the vulva, vestibule and uterus region with the aid of a sterile swab. The samples were processed in order to determine the main microorganisms present, in addition to the evaluation of Colony Forming Units (CFU). G1 was more effective in reducing CFU counts in all samples. On the other hand, G2 showed an efficiency of 62%, being the treatment less efficient in reducing contamination in the different regions evaluated. The proper choice of the sanitizing agent used to clean the perineum prior to gynecological interventions is of paramount importance in order to avoid ascending contamination that lead to endometritis.(AU)

Condição microbiológica após antissepsia da genitália externa em éguas / Microbiological condition after antisepsis of reproductive tract in mares

A endometrite é a principal responsável pela diminuição nas taxas de fertilidade e recuperação embrionária em éguas e em parte, pode ser associada a contaminações por falhas na antissepsia das biotécnicas reprodutivas aplicadas à espécie. O objetivo deste trabalho foi avaliar os níveis de contaminação decorrentes de diferentes protocolos de antissepsia da genitália externa de éguas doadoras de embrião. Éguas sadias tiveram a vulva higienizada conforme um dos três grupos experimentais: (G1) sabão de côco; (G2) detergente neutro e (G3) clorexidina degermante 2%. Foi realizada a coleta de material da região da vulva, vestíbulo e útero com auxílio de swab estéril. As amostras foram processadas com objetivo de se determinar os principais microgranismos presentes, além da avaliação de Unidades Formadoras de Colônia (UFC). O G1 mostrou-se mais efetivo quanto à redução nas contagens de UFC em todas amostras. Por outro lado, G2 apresentou eficiência de 62%, sendo o tratamento menos eficiente na redução da contaminação das diferentes regiões avaliadas. A escolha adequada do agente sanitizante utilizado na higienização de períneo previamente a intervenções ginecológicas são de suma importância afim de se evitar contaminações ascendentes que levem a endometrites.

Endometritis is mainly responsible for the decrease in fertility and embryonic recovery rates in mares and, in part, it can be associated with contaminations due to failures in the antisepsis of reproductive biotechniques applied to the specie. The objective of this study was to evaluate the levels of contamination resulting from different protocols for antisepsis of the external genitalia of embryo donor mares. Healthy mares had their vulva sanitized according to one of the three experimental groups: (G1) coconut soap; (G2) neutral detergent and (G3) 2% chlorhexidine degerming. It was made the collection of material from the vulva, vestibule and uterus region with the aid of a sterile swab. The samples were processed in order to determine the main microorganisms present, in addition to the evaluation of Colony Forming Units (CFU). G1 was more effective in reducing CFU counts in all samples. On the other hand, G2 showed an efficiency of 62%, being the treatment less efficient in reducing contamination in the different regions evaluated. The proper choice of the sanitizing agent used to clean the perineum prior to gynecological interventions is of paramount importance in order to avoid ascending contamination that lead to endometritis.

Formas parasitárias encontradas em hortaliças comercializadas em feira livre de Picos, Piauí: a importância do processo de sanitização / Parasites found in the vegetables sold in open fairs in Picos, Piauí: the importance of sanitation process

O consumo diário de vegetais fornece inúmeros benefícios para a saúde do ser humano, no entanto têm sido um dos alimentos mais relacionados a surtos de toxinfecção alimentar em nível mundial. O objetivo deste estudo foi avaliar a presença de estruturas parasitárias em hortaliças comercializadas na feira livre do município de Picos, Piauí antes e após a utilização de hipoclorito de sódio como sanitizante. Foram analisadas 160 amostras, sendo 40 de alfaces-crespa (Lactuca sativa L.), 40 amostras de acelga (Beta vulgaris var. cicla L.), 40 amostras de coentro (Coriandrum sativum L.) e 40 amostras de cebolinha (Allium fistulosum L.), todas oriundas de plantio convencional. Para a busca parasitária, utilizou-se o método de sedimentação espontânea (Hoffmann). Os resultados mostraram que 75% das amostras, após lavagem com água destilada, estavam contaminadas por alguma estrutura parasitária, incluindo casos de múltipla contaminação. Os parasitos que prevaleceram nas amostras foram Ancilostomídeo (ovo e larva), Ascaris lumbricoides (ovo), Entamoeba histolytica (cisto), Taenia sp. (ovo) e Trichuris trichiura (ovo e larva). Após a sanitização das amostras, houve a redução da carga parasitária, o que torna indispensável esse processo. Esses dados demonstram a situação higiênico-sanitária precária das hortaliças comercializadas na feira livre e a necessidade da realização de campanhas de educação em saúde para produtores, comerciantes e consumidores de hortaliças da região. Essas medidas proporcionam melhora na qualidade das hortaliças e segurança para quem as consome.(AU)

Daily intake of vegetables provides numerous benefits to human health, yet they have been one of the foods most related to food poisoning outbreaks worldwide. The aim of this study was to evaluate the presence of parasitic structures in vegetables sold in the open fairs in Picos Piauí, before and after the use of 2% sodium hypochlorite as a sanitizer. One hundred and sixty samples were analyzed: 40 of lettuce (Lactuca sativa L.), 40 samples of Swiss chard (Beta vulgaris var. cicla L.), 40 samples of coriander (Coriandrum sativum L.) and 40 samples of chives (Allium fistulosum L.), all from conventional planting. For parasitic search, the spontaneous sedimentation method (Hoffmann) was used. All samples examined were contaminated by some parasitic structure and had multiple contamination. The predominant parasites were hookworm (egg and larva), Ascaris lumbricoides (egg), Entamoeba histolytica (cyst), Taenia sp. (egg) and Trichuris trichiura (egg and larva). The samples were sanitized, and the process reduced the parasite load by more than half. It is important to carry out health education campaigns for producers, traders and consumers of vegetables in the region and a strict supervision of the hygienic-sanitary quality of these foods, measures that provide improvement in the quality of vegetables and safety for those who consume them.(AU)

Formas parasitárias encontradas em hortaliças comercializadas em feira livre de Picos, Piauí: a importância do processo de sanitização / Parasites found in the vegetables sold in open fairs in Picos, Piauí: the importance of sanitation process

O consumo diário de vegetais fornece inúmeros benefícios para a saúde do ser humano, no entanto têm sido um dos alimentos mais relacionados a surtos de toxinfecção alimentar em nível mundial. O objetivo deste estudo foi avaliar a presença de estruturas parasitárias em hortaliças comercializadas na feira livre do município de Picos, Piauí antes e após a utilização de hipoclorito de sódio como sanitizante. Foram analisadas 160 amostras, sendo 40 de alfaces-crespa (Lactuca sativa L.), 40 amostras de acelga (Beta vulgaris var. cicla L.), 40 amostras de coentro (Coriandrum sativum L.) e 40 amostras de cebolinha (Allium fistulosum L.), todas oriundas de plantio convencional. Para a busca parasitária, utilizou-se o método de sedimentação espontânea (Hoffmann). Os resultados mostraram que 75% das amostras, após lavagem com água destilada, estavam contaminadas por alguma estrutura parasitária, incluindo casos de múltipla contaminação. Os parasitos que prevaleceram nas amostras foram Ancilostomídeo (ovo e larva), Ascaris lumbricoides (ovo), Entamoeba histolytica (cisto), Taenia sp. (ovo) e Trichuris trichiura (ovo e larva). Após a sanitização das amostras, houve a redução da carga parasitária, o que torna indispensável esse processo. Esses dados demonstram a situação higiênico-sanitária precária das hortaliças comercializadas na feira livre e a necessidade da realização de campanhas de educação em saúde para produtores, comerciantes e consumidores de hortaliças da região. Essas medidas proporcionam melhora na qualidade das hortaliças e segurança para quem as consome.

Daily intake of vegetables provides numerous benefits to human health, yet they have been one of the foods most related to food poisoning outbreaks worldwide. The aim of this study was to evaluate the presence of parasitic structures in vegetables sold in the open fairs in Picos – Piauí, before and after the use of 2% sodium hypochlorite as a sanitizer. One hundred and sixty samples were analyzed: 40 of lettuce (Lactuca sativa L.), 40 samples of Swiss chard (Beta vulgaris var. cicla L.), 40 samples of coriander (Coriandrum sativum L.) and 40 samples of chives (Allium fistulosum L.), all from conventional planting. For parasitic search, the spontaneous sedimentation method (Hoffmann) was used. All samples examined were contaminated by some parasitic structure and had multiple contamination. The predominant parasites were hookworm (egg and larva), Ascaris lumbricoides (egg), Entamoeba histolytica (cyst), Taenia sp. (egg) and Trichuris trichiura (egg and larva). The samples were sanitized, and the process reduced the parasite load by more than half. It is important to carry out health education campaigns for producers, traders and consumers of vegetables in the region and a strict supervision of the hygienic-sanitary quality of these foods, measures that provide improvement in the quality of vegetables and safety for those who consume them.

Antibacterial and anti-biofilm activity of cinnamon essential oil and eugenol / Atividade antibacteriana e anti-biofilme de óleo essencial de canela e eugenol

Biofilms are responsible for most of the interference caused by microorganisms in food processing. The aim of this study was to evaluate the cinnamon (Cinnamomum zeylanicum) essential oil and eugenol sanitizer and anti-biofilm activity against biofilms. Concentrations used of essential oil were 0.0% (control) 0.12%; 0.48%; 0.96% and 1.92%; the amount of eugenol was 0.76%. Concentrations were determined from other published studies. Number of viable cells and quantification the bacterial biomass were determined. Anti-biofilm treatment was effective in preventing the formation of biofilms. The 1.92% concentration was the most satisfactorily with Escherichia coli reduction of 5.91log CFUcm-2 and Staphylococcus aureus reduction of 5.17log CFUcm-2 (P<0.05) biomass of the two bacteria. Sanitizing treatment was not effective in reducing biomass. Seen this, the cinnamon and eugenol essential oil may be promising alternatives for controlling biofilms.(AU)

Os biofilmes são responsáveis pela maior parte da interferência causada pelos micro-organismos no processamento de alimentos. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade anti-biofilme do óleo essencial de canela (Cinnamomum zeylanicum) e do composto majoritário eugenol. As concentrações utilizadas de óleo essencial foram de 0,0% (controle), 0,12%; 0,48%; 0,96% e 1,92%; a concentração de eugenol foi de 0,76%. As concentrações foram determinadas a partir de outros estudos publicados. Determinou-se o número de células viáveis e quantificou-se a biomassa bacteriana. O tratamento anti-biofilme foi eficaz na prevenção e formação de biofilmes. A concentração de 1,92% foi satisfatória, com redução de 5,91log CFUcm-2 de células viáveis em biofilme de Escherichia coli e redução de 5,17log CFU cm-2 de Staphylococcus aureus. A biomassa de ambas bactérias foi reduzida significativamente (P<0,05), entretanto, o tratamento sanitizante não foi eficaz na redução da biomassa. Diante dos resultados, o óleo essencial de canela e eugenol podem ser alternativas promissoras no controle de biofilmes.(AU)

Avaliação antimicrobiana de hidrogel de PVA e gel de Propilenoglicol incorporado com Nanopartículas de Prata como sanitizantes / Antimicrobial evaluation of PVA hydrogel and propilene glycol incorporated with silver nanoparticles

As Doenças Transmitidas por Alimentos causam diversos problemas de saúde e prejuízos econômicos e tem como principal causa a má manipulação dos alimentos. Portanto, é necessário o uso de estratégias de higiene pessoal e de sanitização das instalações e equipamentos. Pensando nisso, este trabalho apresenta a síntese e análise antimicrobiana por disco-difusão e contagem bacteriana de um gel sanitizante a base de Polietileno Glicol e um hidrogel de PVA com a incorporação de Nanopartículas de Prata (AgNP). Para o primeiro gel, com AgNP, o resultado foi quatro vezes maior que o controle. Para o segundo gel, o aumento na concentração de AgNP garantiu uma maior inibição bacteriana. Os resultados obtidos comprovam a potencialidade deste sanitizante para aplicação industrial, comercial e laboratorial.(AU)

Avaliação antimicrobiana de hidrogel de PVA e gel de Propilenoglicol incorporado com Nanopartículas de Prata como sanitizantes / Antimicrobial evaluation of PVA hydrogel and propilene glycol incorporated with silver nanoparticles

As Doenças Transmitidas por Alimentos causam diversos problemas de saúde e prejuízos econômicos e tem como principal causa a má manipulação dos alimentos. Portanto, é necessário o uso de estratégias de higiene pessoal e de sanitização das instalações e equipamentos. Pensando nisso, este trabalho apresenta a síntese e análise antimicrobiana por disco-difusão e contagem bacteriana de um gel sanitizante a base de Polietileno Glicol e um hidrogel de PVA com a incorporação de Nanopartículas de Prata (AgNP). Para o primeiro gel, com AgNP, o resultado foi quatro vezes maior que o controle. Para o segundo gel, o aumento na concentração de AgNP garantiu uma maior inibição bacteriana. Os resultados obtidos comprovam a potencialidade deste sanitizante para aplicação industrial, comercial e laboratorial.

Atividade antimicrobiana e citotoxicidade in vitro do óleo essencial de Tagetes minuta L. visando à aplicação no controle da mastite bovina / In vitro antibacterial and cytotoxicity activities of Tagetes minuta L. essential oil towards bovine mastitis treatment

O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana in vitro do óleo essencial de Tagetes minuta L. contra Staphylococcus aureus e Escherichia coli e a citotoxicidade sobre células epiteliais da glândula mamária bovina (MAC-T), visando a seu uso no tratamento da mastite bovina. A análise qualitativa do óleo revelou cis-tagetona (24,24%), di-hidrotagetona (16,65%), 1,3,6-octatrieno-3,7-dimetil-E (13,61%), trans-ocimenona (13,52%) e cis-ocimenona (10,06%) como compostos majoritários. Nos ensaios da atividade antimicrobiana, a concentração inibitória mínima (CIM) verificada foi de 1 mg/mL para a cepa padrão (ATCC 25923), cinco isolados de S. aureus provenientes de leite de vacas com mastite e a cepa padrão resistente à meticilina (MRSA) (ATCC 33592). Para a cepa padrão de E. coli (ATCC 8739) e dois isolados de leite de vacas com mastite, a CIM foi de 3 mg/mL. Elevado efeito citóxico do óleo sobre as células da linhagem MAC-T foi constatado. Concentrações superiores a 10 (g/mL do óleo resultaram em mais de 90% de morte celular. Tais resultados sugerem que, apesar da atividade antimicrobiana contra agentes causadores da mastite bovina, a utilização intramamária do óleo de T. minuta não seria recomendada. É importante destacar a sensibilidade da cepa MRSA ao óleo essencial, o que evidencia seu potencial como antisséptico e sanitizante.(AU)

The aim of this study was to evaluate the in vitro antimicrobial activity of Tagetes minuta L. essential oil against Staphylococcus aureus and Escherichia coli, and its cytotoxicity to bovine mammary epithelial cells (MAC-T line), aiming at its use for bovine mastitis treatment. The qualitative analysis of the oil by GC-MS identified cis-tagetone (24.24%), dihydrotagetone (16.65%), 1,3,6-Octatriene 3,7-Dimethyl-E (13.61%); trans-ocimenone (13.52%) and cis-ocimenone (10.06%) as major compounds. Antimicrobial activity was determined by broth microdilution technique and revealed the minimum inhibitory concentration of 1mg/mL for the standard strain of S. aureus (ATCC 25923) and five bacterias isolated from mastitic milk, including a multiresistant strain (ATCC 33592); and 3mg/ml for the standard strain of E. coli (ATCC 8739) and two bacterias isolated from mastitic milk. However, a strong citotoxic effect on MAC-T cells was found. Oil concentrations from 10(g/mL resulted in over 90% of cell death. The results suggest that although the antimicrobial activity was identified against the main agents of bovine mastitis, the intramammary use of T. minuta oil may not be recommended. On the other hand, it is important to highlight the sensibility of the MSRA strain to the essential oil, which evidences its potential as an antiseptic or sanitizer.(AU)

Encapsulação de antimicrobianos naturais em nanolipossomas para inibição de bactérias causadoras de surtos alimentares / Encapsulation of natural antimicrobials in nanoliposomas for the inhibition of bacterials causing foodborne disease

Avaliou-se ação bactericida e caracterização físico-química de duas diferentes formulações de nanolipossomas preparados utilizando técnica de hidratação do filme lipídico. Nanolipossomas contendo carvacrol apresentaram diâmetro médio de 270,83 nm, PDI de 0,20 e potencial zeta de + 8,64 mV. Nanolipossomas contendo carvacrol e nisina apresentaram diâmetro médio de 205,25 nm, PDI de 0,31 e potencial zeta de - 22,48 mV. Para ambas formulações a concentração bactericida mínima foi de 3,53 mg/mL para Salmonella e 5,3 mg/mL para Escherichia coli e Staphylococcus aureus. Não ocorreu efeito sinérgico entre carvacrol e nisina, porém os nanolipossomas contendo carvacrol apresentaram ação bactericida contra os microrganismos testados, demonstrando potencial para sua utilização no desenvolvimento de um sanitizante para uso em indústrias de alimentos.(AU)

Atividade antimicrobiana e citotoxicidade in vitro do óleo essencial de Tagetes minuta L. visando à aplicação no controle da mastite bovina / In vitro antibacterial and cytotoxicity activities of Tagetes minuta L. essential oil towards bovine mastitis treatment

O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana in vitro do óleo essencial de Tagetes minuta L. contra Staphylococcus aureus e Escherichia coli e a citotoxicidade sobre células epiteliais da glândula mamária bovina (MAC-T), visando a seu uso no tratamento da mastite bovina. A análise qualitativa do óleo revelou cis-tagetona (24,24%), di-hidrotagetona (16,65%), 1,3,6-octatrieno-3,7-dimetil-E (13,61%), trans-ocimenona (13,52%) e cis-ocimenona (10,06%) como compostos majoritários. Nos ensaios da atividade antimicrobiana, a concentração inibitória mínima (CIM) verificada foi de 1 mg/mL para a cepa padrão (ATCC 25923), cinco isolados de S. aureus provenientes de leite de vacas com mastite e a cepa padrão resistente à meticilina (MRSA) (ATCC 33592). Para a cepa padrão de E. coli (ATCC 8739) e dois isolados de leite de vacas com mastite, a CIM foi de 3 mg/mL. Elevado efeito citóxico do óleo sobre as células da linhagem MAC-T foi constatado. Concentrações superiores a 10 (g/mL do óleo resultaram em mais de 90% de morte celular. Tais resultados sugerem que, apesar da atividade antimicrobiana contra agentes causadores da mastite bovina, a utilização intramamária do óleo de T. minuta não seria recomendada. É importante destacar a sensibilidade da cepa MRSA ao óleo essencial, o que evidencia seu potencial como antisséptico e sanitizante.(AU)

The aim of this study was to evaluate the in vitro antimicrobial activity of Tagetes minuta L. essential oil against Staphylococcus aureus and Escherichia coli, and its cytotoxicity to bovine mammary epithelial cells (MAC-T line), aiming at its use for bovine mastitis treatment. The qualitative analysis of the oil by GC-MS identified cis-tagetone (24.24%), dihydrotagetone (16.65%), 1,3,6-Octatriene 3,7-Dimethyl-E (13.61%); trans-ocimenone (13.52%) and cis-ocimenone (10.06%) as major compounds. Antimicrobial activity was determined by broth microdilution technique and revealed the minimum inhibitory concentration of 1mg/mL for the standard strain of S. aureus (ATCC 25923) and five bacterias isolated from mastitic milk, including a multiresistant strain (ATCC 33592); and 3mg/ml for the standard strain of E. coli (ATCC 8739) and two bacterias isolated from mastitic milk. However, a strong citotoxic effect on MAC-T cells was found. Oil concentrations from 10(g/mL resulted in over 90% of cell death. The results suggest that although the antimicrobial activity was identified against the main agents of bovine mastitis, the intramammary use of T. minuta oil may not be recommended. On the other hand, it is important to highlight the sensibility of the MSRA strain to the essential oil, which evidences its potential as an antiseptic or sanitizer.(AU)

Encapsulação de antimicrobianos naturais em nanolipossomas para inibição de bactérias causadoras de surtos alimentares / Encapsulation of natural antimicrobials in nanoliposomas for the inhibition of bacterials causing foodborne disease

Avaliou-se ação bactericida e caracterização físico-química de duas diferentes formulações de nanolipossomas preparados utilizando técnica de hidratação do filme lipídico. Nanolipossomas contendo carvacrol apresentaram diâmetro médio de 270,83 nm, PDI de 0,20 e potencial zeta de + 8,64 mV. Nanolipossomas contendo carvacrol e nisina apresentaram diâmetro médio de 205,25 nm, PDI de 0,31 e potencial zeta de - 22,48 mV. Para ambas formulações a concentração bactericida mínima foi de 3,53 mg/mL para Salmonella e 5,3 mg/mL para Escherichia coli e Staphylococcus aureus. Não ocorreu efeito sinérgico entre carvacrol e nisina, porém os nanolipossomas contendo carvacrol apresentaram ação bactericida contra os microrganismos testados, demonstrando potencial para sua utilização no desenvolvimento de um sanitizante para uso em indústrias de alimentos.

Biofilm formation by Vibrio parahaemolyticus on different surfaces and its resistance to sodium hypochlorite / Formação de biofilme por Vibrio parahaemolyticus em diferentes superficies e resistência ao hipoclorito de sódio

Vibrio parahaemolyticus is an important pathogen for both fish industry and consumers. It forms biofilm which makes it difficult to eliminate this microorganism using sanitizers. This study aimed to assess biofilm formation on different surfaces and effect of biofilm on resistance to sanitizers. Eight isolates of biofilm-forming V. parahaemolyticus were tested for the ability to form biofilms on a number of surfaces including high density polyethylene, stainless steel, glass, exoskeleton of Farfantepenaeus paulensis (Pink Shrimp), and operculum of Micropogonias furnieri (Whitemouth Croaker). Efficiency of sanitizer sodium hypochlorite against the bacteria was evaluated in the biofilms formed on the surface of the materials used; out the eight strains analyzed four formed biofilm on different surfaces. The present study shows that there are variations between surfaces in terms of biofilm formation, with more than one bacterial strain being able to form biofilm on the surface of the operculum of M. furnieri and on high density polyethylene as well. One isolate formed biofilm on glass, and one isolate formed biofilm on stainless steel. Sanitizers reduced biofilm formation on all surfaces. Based on our findings, we concluded that V. parahaemolyticus isolates have different ability to form biofilm on different surfaces. No isolates formed biofilm on shrimp shells. Results of this study also showed that sodium hypochlorite eat a concentration of 20 parts per million (20ppm) of Cl2, albeit not able to eliminate bacteria reported in biofilms, is still capable of reducing bacterial populations.(AU)

Vibrio parahaemolyticus é uma bactéria patogênica importante tanto para a indústria como para os consumidores de pescados, uma vez que pode formar biofilme, dificultando a sua eliminação por sanitizantes. Este estudo teve como objetivo verificar a formação de biofilme em diferentes superfícies e o efeito do biofilme sobre a resistência a sanitizante. Oito isolados de V. parahaemolyticus formadores de biofilme foram testados quanto à capacidade de formar biofilme em superfícies de polietileno de alta densidade, aço inoxidável, vidro, exoesqueleto de Farfantepenaeus paulensis (Camarão-rosa) e opérculo de Micropogonias furnieri (Corvina). A eficiência do sanitizante hipoclorito de sódio foi avaliada frente às bactérias nos biofilmes formados sobre a superfície dos materiais utilizados. Das oito cepas analisadas, quatro foram consideradas formadoras de biofilme em diferentes superfícies. Os resultados mostraram variação entre as superfícies, sendo que mais de uma cepa formou biofilme na superfície do opérculo de M. furnieri e do polietileno de alta densidade. Um isolado formou biofilme em vidro e um em aço inoxidável. Nenhum isolado formou biofilme na carapaça de camarão. O sanitizante reduziu a formação do biofilme em todas as superfícies. Conclui-se que os isolados de V. parahaemolyticus apresentam distinta capacidade de formar biofilme em diferentes superfícies e que o hipoclorito de sódio na concentração de 20 partes por milhão (20ppm) de Cl2, embora não elimine as bactérias que se encontram em biofilme, reduz a sua população.(AU)

Single- and Multispecies Biofilms by Escherichia coli, Staphylococcus aureus, and Salmonella spp. Isolated from Raw Fish and a Fish Processing Unit / Formação de Biofilmes Mono e Multi-espécies de Escherichia coli, Staphylococcus aureus, e Salmonella spp. Isoladas de Pescado Cru e Indústria de Pescado

The consumption of fish by the Brazilian population is increasing. However, fish and seafood are highly perishable and can be contaminated with several microorganisms. In addition, the possibility of biofilm formation is a greater cause for concern. In this study, biofilm formation was evaluated in single- and multispecies cultures at 25°C for incubation periods of 0, 4, 8, 24, and 48h in stainless steel coupons (size, 1.0×1.0cm) immersed in tryptic soy broth. The characteristics of the formed biofilms after sanitizing by immersing the coupons in 200ppm sodium hypochlorite solution for 10min were also evaluated under the same experimental conditions but with some modifications. Biofilm structure was evaluated using scanning electron microscopy. Analysis of single-species biofilms indicated that all bacterial strains formed biofilms at different intervals without any statistically significant difference. However, comparison of the growth of single- and multispecies cultures indicated a significantly higher biofilm formation by the pure cultures. In multispecies biofilms, compared with the other microorganisms, growth of Salmonella spp. was significantly lower for all tested incubation periods; whereas, of Staphylococcus aureus was significantly higher than that of E. coli until 8h of incubation; the differences in growth were not significantly different after this incubation period. Sanitizing with sodium hypochlorite was effective because no cell growth was observed in the coupons that were treated with 200ppm sodium hypochlorite for 10min. This study demonstrated the ability of isolated microorganisms to form biofilms, reinforcing the need for food handling establishments to adopt good manufacturing practices, developing adequate protocols for cleaning and disinfecting surfaces and equipment used in food production, maintaining and replacing equipment when necessary.

A população brasileira tem apresentado um elevado consumo de peixes, no entanto pescados são alimentos altamente perecíveis e podem ser contaminados por uma diversidade de microrganismos. A situação ainda é mais alarmante quando se trata da formação de biofilmes. Para verificação da formação de biofilme, as cepas foram testadas dentro de cultivos mono e multi-espécies a 25°C durante o tempo total de 48h, onde as análises foram realizadas no tempo 0 e nos intervalos de 4, 8, 24 e 48h em cupom de aço inoxidável medindo 1,0x1,0cm, imersos em caldo TSB (Tryptic Soy Broth).O comportamento dos biofilmes formados, diante da sanitização por imersão dos cupons em solução de hipoclorito de sódio a 200ppm por 10 minutos, também foi avaliado, nas mesmas condições citadas acima, com algumas particularidades. A avaliação estrutural foi procedida por microscopia de varredura eletrônica (MEV). Nos resultados de biofilmes mono-espécie, foi verificado que todas as cepas foram capazes de formar biofilme, nos diferentes tempos, sem diferenças estatisticamente significativas. Entretanto, comparando-se o crescimento de culturas mono e múltiplas espécies observou-se formação de biofilme, estatisticamente maior, entre as culturas puras. Nas culturas multi-espécies, Salmonella spp. apresentou crescimento, estatisticamente menor, em todos os tempos, entre os microrganismos testados, enquanto S. aureus apresentou maior crescimento que E. coli até 8 horas de incubação, deste tempo em diante a diferença não foi significativa. Quanto ao comportamento frente sanitização com hipoclorito, o sanitizante foi eficaz, uma vez que não foi observado crescimento celular nas análises dos cupons tratados com a solução de hipoclorito a 200ppm por 10 minutos.

Single- and Multispecies Biofilms by Escherichia coli, Staphylococcus aureus, and Salmonella spp. Isolated from Raw Fish and a Fish Processing Unit / Formação de Biofilmes Mono e Multi-espécies de Escherichia coli, Staphylococcus aureus, e Salmonella spp. Isoladas de Pescado Cru e Indústria de Pescado

The consumption of fish by the Brazilian population is increasing. However, fish and seafood are highly perishable and can be contaminated with several microorganisms. In addition, the possibility of biofilm formation is a greater cause for concern. In this study, biofilm formation was evaluated in single- and multispecies cultures at 25°C for incubation periods of 0, 4, 8, 24, and 48h in stainless steel coupons (size, 1.0×1.0cm) immersed in tryptic soy broth. The characteristics of the formed biofilms after sanitizing by immersing the coupons in 200ppm sodium hypochlorite solution for 10min were also evaluated under the same experimental conditions but with some modifications. Biofilm structure was evaluated using scanning electron microscopy. Analysis of single-species biofilms indicated that all bacterial strains formed biofilms at different intervals without any statistically significant difference. However, comparison of the growth of single- and multispecies cultures indicated a significantly higher biofilm formation by the pure cultures. In multispecies biofilms, compared with the other microorganisms, growth of Salmonella spp. was significantly lower for all tested incubation periods; whereas, of Staphylococcus aureus was significantly higher than that of E. coli until 8h of incubation; the differences in growth were not significantly different after this incubation period. Sanitizing with sodium hypochlorite was effective because no cell growth was observed in the coupons that were treated with 200ppm sodium hypochlorite for 10min. This study demonstrated the ability of isolated microorganisms to form biofilms, reinforcing the need for food handling establishments to adopt good manufacturing practices, developing adequate protocols for cleaning and disinfecting surfaces and equipment used in food production, maintaining and replacing equipment when necessary.(AU)

A população brasileira tem apresentado um elevado consumo de peixes, no entanto pescados são alimentos altamente perecíveis e podem ser contaminados por uma diversidade de microrganismos. A situação ainda é mais alarmante quando se trata da formação de biofilmes. Para verificação da formação de biofilme, as cepas foram testadas dentro de cultivos mono e multi-espécies a 25°C durante o tempo total de 48h, onde as análises foram realizadas no tempo 0 e nos intervalos de 4, 8, 24 e 48h em cupom de aço inoxidável medindo 1,0x1,0cm, imersos em caldo TSB (Tryptic Soy Broth).O comportamento dos biofilmes formados, diante da sanitização por imersão dos cupons em solução de hipoclorito de sódio a 200ppm por 10 minutos, também foi avaliado, nas mesmas condições citadas acima, com algumas particularidades. A avaliação estrutural foi procedida por microscopia de varredura eletrônica (MEV). Nos resultados de biofilmes mono-espécie, foi verificado que todas as cepas foram capazes de formar biofilme, nos diferentes tempos, sem diferenças estatisticamente significativas. Entretanto, comparando-se o crescimento de culturas mono e múltiplas espécies observou-se formação de biofilme, estatisticamente maior, entre as culturas puras. Nas culturas multi-espécies, Salmonella spp. apresentou crescimento, estatisticamente menor, em todos os tempos, entre os microrganismos testados, enquanto S. aureus apresentou maior crescimento que E. coli até 8 horas de incubação, deste tempo em diante a diferença não foi significativa. Quanto ao comportamento frente sanitização com hipoclorito, o sanitizante foi eficaz, uma vez que não foi observado crescimento celular nas análises dos cupons tratados com a solução de hipoclorito a 200ppm por 10 minutos.(AU)

Aplicação de combinações enzima-sanitizante contra biofilmes de Staphyloccocus aureus

O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito do hipoclorito de sódio (HS, 0,5%, v/v), ácido peracético (APA, 0,3%, v/v) e alfa-amilase (100 mg/mL, v/v), isolados ou em combinação, sobre biofilmes mono-espécies de Staphylococcus aureus (P01F2T1, P01FTT2, P16 e P24) isolados de fazenda leiteira localizada no estado de São Paulo, Brasil. Os ensaios de índice de formação de biofilmes (IFB) e contagem de células cultiváveis foram realizados em microplacas de poliestireno em condições experimentais por 72 horas a 25ºC. O IFB dos isolados P16 e P24 diminuiu significativamente (P <0,05) após o tratamento com APA ou HS combinado com AA, em comparação com os sanitizantes isolados. Os biofilmes formados pelos isolados P01F2T1 e P01F5T2 apresentaram menores valores de IFB (P <0,05) após o tratamento com as combinações de APA+ AA e HS + AA, respectivamente. No entanto, reduções significativas nas contagens de biofilme cultiváveis foram observadas apenas para os isolados P01F2T1 tratados com HS + AA e APA + AA, P01F5T2 tratado com HS + AA e P24 tratado com APA + AA. Mais estudos são necessários para definir as melhores combinações de AA e HS ou APA para remover completamente os biofilmes de S. aureus formados em superfícies de plástico em ambientes de processamento de laticínios.

This work aimed to evaluate the effect of alpha-amylase (AA, 100 mg/mL), sodium hypochlorite (SH,0.5%), peracetic acid (PAA, 0.3%), and enzyme-biocide combinations (SH or PAA and AA) on mono-species biofilms formed by four Staphylococcus aureus strains (P01F2T1, P01F5T2, P16 and P24) previously isolated from dairy farms in São Paulo state, Brazil. Biofilm formation index (BFI) and culturable cell counts were evaluated for biofilms formed on polystyrene microplates for 72 h at 25ºC. The BFI of isolates P16 and P24 significantly decreased (P < 0.05) after treatment with PAA or SH combined with AA, compared with the biocides alone. The biofilms formed by isolates P01F2T1 and P01F5T2 had lower BFI values (P<0.05) after treatment with combinations of PAA + AA and SH +AA, respectively. However, significant reductions in the biofilm culturable counts were observed only for isolates P01F2T1 treated with HS + AA and PAA + AA, P01F5T2 treated with HS + AA, and P24 treated with PAA + AA. Further studies are required to define the best combinations of AA and SH or PAA to completely remove S. aureus biofilms formed on plastic surfaces in processing dairy environments.

Biofilm formation of Shiga toxin-producing Escherichia coli O153 H25, O113 H21 and O111 H8 on the stainless steel surface and the effectiveness of sanitizer / Formação de biofilmes de Escherichia coli produtora de toxina Shiga sorotipos O153 H25, O113 H21 e O111 H8 em superfície de aço inoxidável e eficácia de sanitizante

This study aimed at evaluating the biofilm formation of Shiga toxin-producing Escherichia coli O153:H25, O113:H21 and O111:H8 (STEC non-O157), isolated from Brazilian cattle, on the stainless steel surface, and also the efficacy of different s concentrations of sodium hypochlorite for inactivating these biofilms. The ability to form biofilm was demonstrated in all of Shiga toxin-producing E. coli strains. In assessing the effectiveness of sodium hypochlorite sanitizer, a reduction to 1 log CFU/cm2 was observed in all of the evaluated strains and times. These data strengthen the relevance of the correct cleaning procedure, considering that biofilms formations might be an important source of food contamination(AU)

Neste estudo as cepas de Escherichia coli produtora de toxina Shiga (STEC) O153:H25, O113:H21 e O111:H8, isoladas de rebanhos do país, foram avaliadas quanto à capacidade de formar biofilmes em superfície de aço inoxidável utilizada na indústria de alimentos, bem como a eficácia de diferentes concentrações de hipoclorito de sódio na inativação desses biofilmes. A capacidade de formação de biofilme foi detectada em todas as cepas de E. coli produtoras de toxina Shiga. Na avaliação da eficácia do sanitizante hipoclorito de sódio, nas concentrações de 100 mg.L-1 e 200 mg.L-1, observou-se a redução a 1 log UFC/cm2 em todas as cepas e nos tempos avaliados. Estes dados reforçam a importância do correto procedimento de higienização, uma vez que biofilmes podem tornar-se importantes fontes de contaminação no ambiente de produção de alimentos(AU)

Sanitizer resistance of biofilm-forming Salmonellaisolated from meat products / Resistência de Salmonella formadora de biofilme isolada de produtos cárneos a sanitizantes

Este estudo avaliou a capacidade de Salmonella enterica subsp. enterica isolada de produtos cárneos formar biofilme e testou sua resistência a diferentes sanitizantes. Vinte cepas foram avaliadas quanto à capacidade de formar biofilme em placas de microtitulação. As cepas formadoras de biofilme foram testadas em superfícies de polietileno de alta densidade, aço inoxidável e vidro e tiveram a sensibilidade ao hipoclorito de sódio e ao iodo avaliada. Duas cepas de Salmonella Enteritidis isoladas de produtos de frango apresentaram capacidade de formar biofilme nas superfícies testadas. Essas cepas alcançaram maiores populações nas superfícies do que aquelas não formadoras de biofilme, e foram mais difíceis de remover ou reduzir. Devido à ação sanitizante ser menos eficiente sobre bactérias formadoras de biofilme, esses micro-organismos podem persistir no biofilme formado sobre as superfícies de equipamentos e utensílios e ocasionalmente contaminar os alimentos antes da sua expedição, aumentando dessa forma o risco de ocorrência de doenças transmitidas por alimentos.(AU)

Sanitizer resistance of biofilm-forming Salmonellaisolated from meat products / Resistência de Salmonella formadora de biofilme isolada de produtos cárneos a sanitizantes

Este estudo avaliou a capacidade de Salmonella enterica subsp. enterica isolada de produtos cárneos formar biofilme e testou sua resistência a diferentes sanitizantes. Vinte cepas foram avaliadas quanto à capacidade de formar biofilme em placas de microtitulação. As cepas formadoras de biofilme foram testadas em superfícies de polietileno de alta densidade, aço inoxidável e vidro e tiveram a sensibilidade ao hipoclorito de sódio e ao iodo avaliada. Duas cepas de Salmonella Enteritidis isoladas de produtos de frango apresentaram capacidade de formar biofilme nas superfícies testadas. Essas cepas alcançaram maiores populações nas superfícies do que aquelas não formadoras de biofilme, e foram mais difíceis de remover ou reduzir. Devido à ação sanitizante ser menos eficiente sobre bactérias formadoras de biofilme, esses micro-organismos podem persistir no biofilme formado sobre as superfícies de equipamentos e utensílios e ocasionalmente contaminar os alimentos antes da sua expedição, aumentando dessa forma o risco de ocorrência de doenças transmitidas por alimentos.(AU)

INATIVAÇÃO FOTODINÂMICA DE Salmonella Typhimurium E Salmonella Heidelberg NA CADEIA AVÍCOLA

Na busca de métodos alternativos ao uso de antimicrobianos utilizados na atividade avícola no controle de Salmonella sp., a inativação fotodinâmica (PDI) surge como uma possibilidade de aplicação neste cenário. Este trabalho foi realizado com a finalidade de avaliar a atividade fotodinâmica do azul de metileno (MB) na redução de Salmonella Typhimurium e Salmonella Heidelberg. No primeiro experimento foi avaliada a atividade antimicrobiana do MB in vitro, de forma que os sorovares foram incubados, separadamente, com o fotossensibilizador em três concentrações (10, 20 e 30 M) e irradiados durante 30 minutos. Realizou-se também avaliação da fotodegradação do DNA genômico e alterações nas estruturas celulares. No segundo experimento, foi analisada a capacidade sanitizante da PDI em fragmentos de caixa de transporte e amostras de ração. Esses foram contaminados com Salmonella Typhimurium e Heidelberg e posteriormente, incubados com MB nas concentrações de 10, 20 e 30 M (caixa de transporte) e 1%, 1,5% e 2% (ração) e irradiados por até 45 minutos. A irradiação em ambos experimentos foi realizada com lâmpada halógena com faixa espectral de 400 a 900 nm e a viabilidade bacteriana expressa em UFC/mL. Nos estudos in vitro, o fotossensibilizador testado na concentração de 30 M foi eficaz na completa inativação de Salmonella Typhimurium e Salmonella Heidelberg, após 20 e 30 minutos (156 e 234 J/cm2) de irradiação, respectivamente. A viabilidade bacteriana foi alterada devido aos fotodanos observados no DNA, citoplasma e parede bacteriana. Nos fragmentos de caixa de transporte a menor taxa de sobrevivência bacteriana foi obtida utilizando azul de metileno na concentração de 20 M; enquanto para ração a concentração de 2% de azul de metileno foi a mais eficiente, ambos irradiados durante 45 minutos (351 J/cm2). Os resultados obtidos neste estudo apontam uma possível utilização dessa técnica na avicultura.

In the search for alternative methods to the use of antimicrobials used in poultry activity to control Salmonella sp., photodynamic inactivation (PDI) appears as a possibility of application. This work was carried out with the purpose of evaluating the photodynamic activity of methylene blue (MB) in the reduction of Salmonella Typhimurium and Salmonella Heidelberg. In the first experiment, the antimicrobial activity of the MB was evaluated in vitro, so that the serovars were incubated separately with the photosensitizer in three concentrations (10, 20 and 30 M) and irradiated for 30 minutes. An evaluation of genomic DNA photodegradation and changes in cell structures were also carried out. In the second experiment, the sanitizing capacity of the PDI was analyzed in fragments of the transport cages and samples of poultry feed. These were contaminated with Salmonella Typhimurium and Heidelberg and later incubated with MB in concentrations of 10, 20 and 30 M (transport cages) and 1%, 1.5% and 2% (feed) and irradiated for up to 45 minutes. The irradiation in both experiments was performed with a halogen lamp with a spectral range from 400 to 900 nm and the bacterial viability expressed in CFU/mL. In in vitro studies, the photosensitizer tested at a concentration of 30 M was effective in completely inactivating Salmonella Typhimurium and Salmonella Heidelberg, after 20 and 30 minutes (156 and 234 J/cm2) of irradiation, respectively. The bacterial viability was altered due to the photodamage observed in the DNA, cytoplasm and bacterial wall. In the fragments of the transport cages, the lowest bacterial survival rate was obtained using methylene blue at a concentration of 20 M; while for feed the concentration of 2% methylene blue was the most efficient, both irradiated for 45 minutes (351 J/cm2). The results obtained in this study point to a possible use of this technique in poultry.

Bioprospecção da atividade do óleo essencial de Thymus vulgaris contra Salmonella enterica sorovar Heidelberg isolada de frango de corte

Salmonella enterica sorovar Heidelberg (SH) frequentemente é isolada em coletas de amostras de frango de corte a campo, sua elevada resistência ao ambiente é um fator que traz prejuízos a toda cadeia produtiva. Mesmo com a intensificação de procedimentos de biosseguridade nas granjas, há pressão por parte da indústria para a eliminação deste patógeno. Comercialmente há diversos produtos, a base de amoníacos, utilizados para a limpeza e desinfecção do galpão, contudo, são de alta toxicidade tanto para o ambiente e animais quanto também para as pessoas que aplicam. A busca por agentes desinfetantes alternativos aos usuais faz com que diversos estudos avaliem a ação de óleos essenciais (OEs) frente a distintas bactérias. Por conta disto, o objetivo deste trabalho foi avaliar, in vitro, o efeito do OE de Thymus vulgaris (OET) e timol em SH isoladas de frango de corte, visando seu uso como agente antimicrobiano aditivo para rações. De acordo com as análises cromatográficas, os componentes majoritários OET foram: timol (47,3%), p-cinemo (26,8%) e linalol (5,2%). Para os ensaios antibacterianos in vitro foi utilizada a técnica de quantificação de células planctônicas viáveis em ensaios de microdiluição em caldo. Foram utilizadas quatro diferentes concentrações de OET (0,1%, 0,2%, 0,4% e 0,8%, v/v) contra cinco isolados de SH de frango de corte e ATCC 8326. Além disto, foi avaliada também a atividade do monoterpeno timol nas concentrações de 0,023%, 0,047%, 0,071% e 0,094% (v/v). Para a avaliação da citotoxicidade, foi utilizada a técnica de MTT em células intestinais IEC-6 e fibroblastos NCTC em concentrações de 0,0625%, 0,125%, 0,25% e 0,5% de OET e timol, em 24h, para a avaliação do IC50. A partir da concentração de 0,2% de OET houve atividade bactericida, uma vez que não ocorreu crescimento de unidades formadoras de colônias em todas as bactérias testadas. Já o timol na concentração de 0,094% controlou 83,33% das bactérias, sendo menos eficaz que o óleo. O OET apresentou IC50 de 0,14% e 1,22% enquanto para timol o IC50 foi de 0,068% e 0,001%, para as células IEC-6 e NCTC, respectivamente. Concui-se que ambos compostos testados apresentaram certa citotoxicidade in vitro em células intestinais, limitando seu uso como aditivo para raçoes. Além disso, o timol sozinho não foi capaz de controlar os isolados estudados e teve uma citotoxicidade in vitro maior quando comparado ao OE. Por outro lado, o OET apresentou baixa citotoxicidade em fibroblastos e demonstrou potencial capacidade de ação para eliminação in vitro de cepas de SH na concentração de 0,2%, sugerindo a possibilidade de utilização deste composto na sanitização de estruturas dos aviários contaminados com este sorovar.

Salmonella enterica serovar Heidelberg (SH) is often isolated from samples in broiler chickens farms. Its environmental resistance is a factor that harms the entire meat production chain. Although there is a higher intensification in farms biosecurity procedures, the pressure from the industry to eliminate this pathogen is increasing once salmonellosis can be a problem to the costumers. There are several products with ammonia in its composition that are used for the disinfection of poultry shed structures. These products usually have high toxicity to the environment, the animals, and people who manipulate it. On the other hand, research on essential oils (EO) and its bacterial activity has been increasing through the years. The objective of this study was to evaluate the in vitro effects of Thymus vulgaris essential oil (TEO), popularly known as thyme, on Salmonella enterica sorovar Heidelberg. Qualitative analysis of the oil revealed thymol (47,3%), p-Cimene (26.8%) and linalool (5.2%) as major compounds. Viable plankton cell quantification technique was used for in vitro antibacterial assays. Four different concentrations of TEO (0.1%, 0.2%, 0.4% and 0.8%) were tested in 5 strains of SH isolated from broiler chickens farms plus ATCC 8623. In addition, the activity of the monoterpene thymol at concentrations of 0.023%, 0.047%, 0.071% and 0.094% was also evaluated. For the cytotoxicity assay, MTT technique was used in IEC-6 intestinal cells and NCTC fibroblasts in concentrations of 0.0625%, 0.125%, 0.25% and 0.5% of TEO and thymol, in 24h, to find the IC50. Antibacterial activity was found from 0.2% of TEO in all SH strains tested. Thymol at 0.094% controlled 83.33% of the strains, not being as effective as TEO. TEO cytotoxicity assay showed IC50of 0.14% and 1.22% while thymol presented IC50 of 0.068% and 0.001% for cells IEC-6 and NCTC, respectively. The monoterpene had higher cytotoxicity and did not control all strains of SH. Moreover, TEO presented low cytotoxicity in fibroblasts and demonstrated potential antibacterial activity 0.2%. These results suggest the possible use of TEO as a substitute for commercial products used for the disinfection of poultry sheds that were challenged by these bacteria.