Characterization and differentiation of chicken mycoplasma isolates using 16S-23S intergenic spacer region sequencing

The objective of this study was to identify the species and characterize the genetic relationships among mycoplasma isolates from commercial layer hen flocks using 16S-23S rDNA intergenic spacer region (IGSR) sequencing. Twenty-one isolates were obtained from samples collected from commercial layer flocks in four Brazilian states: São Paulo, Minas Gerais, Rio de Janeiro and Espírito Santo. The isolates were recovered from the São Paulo, Rio de Janeiro and Espírito Santo states. Eleven isolates were originated from tracheal swabs, five from shell gland swabs and five from ovary fragment collection. The 16S-23S rDNA IGSR of isolates were amplified by PCR, and the obtained products were subsequently sequenced. The consensus of each isolate was compared to the available sequences using Nucleotide BLAST® to determine the mycoplasma species. A phylogenetic analysis of the Mycoplasma gallisepticum (MG) sequences was performed. Pairwise analyses showed homologies of 99% to 100% with the previously characterized sequences listed in GenBank®. Four Mycoplasma gallinaceum were isolated from three flocks and seven M. pullorum isolates were obtained from a single flock. The other 10 isolates were all identified as MG and were obtained from four flocks. The 16S-23S rDNA IGSR sequencing was a good method to identify Mycoplasma species isolated from field samples, providing fast and reliable results at relatively low costs. The results were also satisfactory for the single-locus sequence typing of MG isolates.(AU)

Characterization and differentiation of chicken mycoplasma isolates using 16S-23S intergenic spacer region sequencing

The objective of this study was to identify the species and characterize the genetic relationships among mycoplasma isolates from commercial layer hen flocks using 16S-23S rDNA intergenic spacer region (IGSR) sequencing. Twenty-one isolates were obtained from samples collected from commercial layer flocks in four Brazilian states: São Paulo, Minas Gerais, Rio de Janeiro and Espírito Santo. The isolates were recovered from the São Paulo, Rio de Janeiro and Espírito Santo states. Eleven isolates were originated from tracheal swabs, five from shell gland swabs and five from ovary fragment collection. The 16S-23S rDNA IGSR of isolates were amplified by PCR, and the obtained products were subsequently sequenced. The consensus of each isolate was compared to the available sequences using Nucleotide BLAST® to determine the mycoplasma species. A phylogenetic analysis of the Mycoplasma gallisepticum (MG) sequences was performed. Pairwise analyses showed homologies of 99% to 100% with the previously characterized sequences listed in GenBank®. Four Mycoplasma gallinaceum were isolated from three flocks and seven M. pullorum isolates were obtained from a single flock. The other 10 isolates were all identified as MG and were obtained from four flocks. The 16S-23S rDNA IGSR sequencing was a good method to identify Mycoplasma species isolated from field samples, providing fast and reliable results at relatively low costs. The results were also satisfactory for the single-locus sequence typing of MG isolates.

Redescription of Ventania avellanedae (Stylommatophora: Odontostomidae), a land snail endemic to the Ventania Mountain System, Argentina

Although the presence of apertural folds and lamellae is the most recognizable character of the Odontostomidae, some species lack them, mostly in Anctus Martens, 1860, Bahiensis Jousseaume, 1877 and Moricandia Pilsbry & Vanatta, 1898. Eudioptus avellanedae Doering, 1881 - a slender odontostomid species that lacks even the slightest trace of folds or lamellae in its shell aperture - was however transferred to Odontostomus by Pilsbry in 1902 on the basis of its building forward of the aperture-margins. It is currently placed in its own monotypic subgenus, Cyclodontina (Ventania) Parodiz, 1940, on the basis of about the same argument. In this paper we redescribe its shell morphology and, for the first time, describe the internal anatomy of the pallial complex and the reproductive and digestive systems. The presence of a spongy gland in the pallial complex; of a short penis sheath with no retractor muscle; of a bursa copulatrix duct longer than spermoviduct, and of an epiphallic gland strongly support the inclusion of this unusual species in Odontostomidae. The species is diagnosable by the sculpture of the protoconch, which is not smooth as previously described, but has waved axial ribs crossed by spiral lines in young specimens; the distinctive external and internal shape of the bursa copulatrix duct; the internal penis wall divided in three regions of different sculpture; the smooth inner wall of the vagina; the long and cylindrical epiphallus with a distal widening indicating the presence of an epiphallic gland, and the penis retractor muscle inserted in the distal end of a short flagellum. These characters support the validity of Ventania Parodiz, 1940, different from Cyclodontina Beck, 1837.

Redescription of Ventania avellanedae (Stylommatophora: Odontostomidae), a land snail endemic to the Ventania Mountain System, Argentina

Although the presence of apertural folds and lamellae is the most recognizable character of the Odontostomidae, some species lack them, mostly in Anctus Martens, 1860, Bahiensis Jousseaume, 1877 and Moricandia Pilsbry & Vanatta, 1898. Eudioptus avellanedae Doering, 1881 - a slender odontostomid species that lacks even the slightest trace of folds or lamellae in its shell aperture - was however transferred to Odontostomus by Pilsbry in 1902 on the basis of its building forward of the aperture-margins. It is currently placed in its own monotypic subgenus, Cyclodontina (Ventania) Parodiz, 1940, on the basis of about the same argument. In this paper we redescribe its shell morphology and, for the first time, describe the internal anatomy of the pallial complex and the reproductive and digestive systems. The presence of a spongy gland in the pallial complex; of a short penis sheath with no retractor muscle; of a bursa copulatrix duct longer than spermoviduct, and of an epiphallic gland strongly support the inclusion of this unusual species in Odontostomidae. The species is diagnosable by the sculpture of the protoconch, which is not smooth as previously described, but has waved axial ribs crossed by spiral lines in young specimens; the distinctive external and internal shape of the bursa copulatrix duct; the internal penis wall divided in three regions of different sculpture; the smooth inner wall of the vagina; the long and cylindrical epiphallus with a distal widening indicating the presence of an epiphallic gland, and the penis retractor muscle inserted in the distal end of a short flagellum. These characters support the validity of Ventania Parodiz, 1940, different from Cyclodontina Beck, 1837.(AU)

High expression of HMOX1 in blue-shelled chickens is associated with a TG haplotype

HMOX1 is an important gene in biosynthesis of the eggshell pigment of blue eggs. Previous studies found that HMOX1 is highly expressed in the shell gland of hens laying blue eggs (BlueH) compared with hens laying brown eggs (BrownH); however, the reasons for the differential expression are unclear. In this study five single nucleotide polymorphism (SNP) in HMOX1 were genotyped in 111 BlueH and 115 BrownH. The association of haplotypes of these SNP with the blue egg phenotype was tested. Haplotype-specific expression of HMOX1 was detected in the shell gland. The interaction of sequence variants and transcription factors was analyzed using electrophoretic mobility shift assay (EMSA). A TG haplotype covering upstream 1.4 kb region of HMOX1 was significantly associated with blue eggs (p 0.05). Furthermore, the birds (n=12) with the haplotype expressed 3.8 fold more transcripts than those (n=12) without the haplotype (p 0.05). After re-sequencing a 2.2 kb region harboring the TG haplotype, a total of 26 SNP were found, of which a SNP was predicted to create a binding site of Nrf2, a transcription factor initiating HMOX1 expression. However, subsequent EMSA failed to confirm the Nrf2-DNA interaction. Taken together, the data suggested that the TG haplotype is not directly involved in regulation of HMOX1 expression; a regulatory mutation located near the haplotype and linked with the haplotype may exist and be responsible for the differential expression of HMOX1.(AU)

High expression of HMOX1 in blue-shelled chickens is associated with a TG haplotype

HMOX1 is an important gene in biosynthesis of the eggshell pigment of blue eggs. Previous studies found that HMOX1 is highly expressed in the shell gland of hens laying blue eggs (BlueH) compared with hens laying brown eggs (BrownH); however, the reasons for the differential expression are unclear. In this study five single nucleotide polymorphism (SNP) in HMOX1 were genotyped in 111 BlueH and 115 BrownH. The association of haplotypes of these SNP with the blue egg phenotype was tested. Haplotype-specific expression of HMOX1 was detected in the shell gland. The interaction of sequence variants and transcription factors was analyzed using electrophoretic mobility shift assay (EMSA). A TG haplotype covering upstream 1.4 kb region of HMOX1 was significantly associated with blue eggs (p 0.05). Furthermore, the birds (n=12) with the haplotype expressed 3.8 fold more transcripts than those (n=12) without the haplotype (p 0.05). After re-sequencing a 2.2 kb region harboring the TG haplotype, a total of 26 SNP were found, of which a SNP was predicted to create a binding site of Nrf2, a transcription factor initiating HMOX1 expression. However, subsequent EMSA failed to confirm the Nrf2-DNA interaction. Taken together, the data suggested that the TG haplotype is not directly involved in regulation of HMOX1 expression; a regulatory mutation located near the haplotype and linked with the haplotype may exist and be responsible for the differential expression of HMOX1.

Morphological analysis of the oviduct, oviducal gland and isthmus of the blue shark Prionace glauca (Linnaeus, 1758) (Elasmobranchii: Carcharhiniformes)

Oviducal gland present in elasmobranchs is correlated to the organism's reproductive strategy, and its functions are to produce mucus, to form the egg's tertiary envelope and to store sperm. The gland contains four zones: club, papillary,baffle and terminal. The structures of the oviduct, oviducal gland and isthmus of blue shark Prionace glauca were described using macroscopic, light microscopy and scanning electron microscopy techniques. The epithelium of the oviduct and isthmus is folded and is a simple, columnar, ciliated lining epithelium with glandular cells. In the oviducal gland, the lining tissues in the four zones are similar to the oviduct and isthmus lining. The terminal zone shows the presence of sperm in the lumen of the secretory tubules, which remains stored even in the absence of recent copulation. Here, these organs were studied and their connections in an attempt to elucidate the mechanisms of reproduction in the blue shark, showing the three-dimensional aspects, thus adding morphological information important for the understanding of the structure and functioning of these organs of fundamental importance in the life of the majority of elasmobranchs.(AU)

A glândula oviducal presente nos elasmobrânquios está correlacionada com a estratégia reprodutiva, cuja função é de produzir o muco, formar o envelope terciário do ovo e armazenar espermatozóides. A glândula contém quatro zonas: club, papilar, baffle e terminal. Foi descrita a estrutura do oviduto, glândula oviducal e istmo do tubarão-azul, Prionace glauca , pelas técnicas macroscópica, microscópica de luz e eletrônica de varredura. Foi observado que no oviduto e istmo o epitélio é pregueado de revestimento simples, colunar, ciliado com células glandulares. Na glândula oviducal o tecido de revestimento é semelhante ao oviduto e istmo nas quatro zonas. Na zona terminal observou-se a presença de espermatozoides no lúmen dos túbulos secretores que permanecem estocados mesmo na ausência de copula recente. Aqui, estudaram-se esses órgãos e suas conexões na tentativa de elucidar os mecanismos da reprodução no tubarão azul, apresentando os aspectos tridimensionais, desta forma agregando informações morfológicas importantes para o entendimento da estrutura e funcionamento desses órgãos de fundamental importância na vida da maioria dos elasmobrânquios.(AU)

Anatomy of predator snail Huttonella bicolor, an invasive species in Amazon rainforest, Brazil (Pulmonata, Streptaxidae)

The morpho-anatomy of the micro-predator Huttonella bicolor (Hutton, 1838) is investigated in detail. The species is a micro-predator snail, which is splaying in tropical and subtropical areas all over the world, the first report being from the Amazon Rainforest region of northern Brazil. The shell is very long, with complex peristome teeth. The radula bears sharp pointed teeth. The head lacks tentacles, bearing only ommatophores. The pallial cavity lacks well-developed vessels (except for pulmonary vessel); the anus and urinary aperture are on pneumostome. The kidney is solid, with ureter totally closed (tubular); the primary ureter is straight, resembling orthurethran fashion. The buccal mass has an elongated and massive odontophore, of which muscles are described; the odontophore cartilages are totally fused with each other. The salivary ducts start as one single duct, bifurcating only prior to insertion. The mid and hindguts are relatively simple and with smooth inner surfaces; there is practically no intestinal loop. The genital system has a zigzag-fashioned fertilization complex, narrow prostate, no bursa copulatrix, short and broad vas deferens, and simple penis with gland at distal tip. The nerve ring bears three ganglionic masses, and an additional pair of ventral ganglia connected to pedal ganglia, interpreted as odontophore ganglia. These features are discussed in light of the knowledge of other streptaxids and adaptations to carnivory.(AU)

A morfo-anatomia do micro-predador Huttonella bicollor (Hutton, 1838) é investigada em detalhe. A espécie é um caracol micro-predador que está se espalhando pelas áreas tropicais e subtropicais pelo mundo, sendo este o primeiro registro para a Floresta Amazônica, região Norte do Brasil. A concha é muito longa, com complexos dentes no perístoma. A rádula possui dentes pontiagudos. A cabeça carece de tentáculos, possuindo somente omatóforos. A cavidade palial carece de vasos bem desenvolvidos (exceto a veia pulmonar); o ânus e a abertura urinária estão sobre o pneumóstoma. O rim é maciço, com ureter totalmente fechado (tubular); o ureter primário é reto, lembrando o modelo orturetra. A massa bucal tem um odontóforo alongado e maciço, cujos músculos estão descritos; as cartilagens do odontóforo são totalmente fundidas uma com a outra. Os ductos das glândulas salivares começam como único ducto, bifurcando somente antes da inserção. Os tubos digestivos médio e posterior são relativamente simples e com superfície interna lisa; praticamente não há alça intestinal. O sistema reprodutor possui um complexo de fertilização em zigzag, próstata estreita, ausência de bursa copulatrix, vaso deferente curto e grosso e pênis simples com glândula no topo. O anel nervoso possui três massas ganglionares e um par adicional ventral conectado aos gânglios pediosos, interpretados com gânglios odontofóricos. Estas características são discutidas sob a luz do conhecimento atual sobre outros Streptaxidae e adaptações à carnivoria.(AU)

Anatomy of predator snail Huttonella bicolor, an invasive species in Amazon rainforest, Brazil (Pulmonata, Streptaxidae)

The morpho-anatomy of the micro-predator Huttonella bicolor (Hutton, 1838) is investigated in detail. The species is a micro-predator snail, which is splaying in tropical and subtropical areas all over the world, the first report being from the Amazon Rainforest region of northern Brazil. The shell is very long, with complex peristome teeth. The radula bears sharp pointed teeth. The head lacks tentacles, bearing only ommatophores. The pallial cavity lacks well-developed vessels (except for pulmonary vessel); the anus and urinary aperture are on pneumostome. The kidney is solid, with ureter totally closed (tubular); the primary ureter is straight, resembling orthurethran fashion. The buccal mass has an elongated and massive odontophore, of which muscles are described; the odontophore cartilages are totally fused with each other. The salivary ducts start as one single duct, bifurcating only prior to insertion. The mid and hindguts are relatively simple and with smooth inner surfaces; there is practically no intestinal loop. The genital system has a zigzag-fashioned fertilization complex, narrow prostate, no bursa copulatrix, short and broad vas deferens, and simple penis with gland at distal tip. The nerve ring bears three ganglionic masses, and an additional pair of ventral ganglia connected to pedal ganglia, interpreted as odontophore ganglia. These features are discussed in light of the knowledge of other streptaxids and adaptations to carnivory.

A morfo-anatomia do micro-predador Huttonella bicollor (Hutton, 1838) é investigada em detalhe. A espécie é um caracol micro-predador que está se espalhando pelas áreas tropicais e subtropicais pelo mundo, sendo este o primeiro registro para a Floresta Amazônica, região Norte do Brasil. A concha é muito longa, com complexos dentes no perístoma. A rádula possui dentes pontiagudos. A cabeça carece de tentáculos, possuindo somente omatóforos. A cavidade palial carece de vasos bem desenvolvidos (exceto a veia pulmonar); o ânus e a abertura urinária estão sobre o pneumóstoma. O rim é maciço, com ureter totalmente fechado (tubular); o ureter primário é reto, lembrando o modelo orturetra. A massa bucal tem um odontóforo alongado e maciço, cujos músculos estão descritos; as cartilagens do odontóforo são totalmente fundidas uma com a outra. Os ductos das glândulas salivares começam como único ducto, bifurcando somente antes da inserção. Os tubos digestivos médio e posterior são relativamente simples e com superfície interna lisa; praticamente não há alça intestinal. O sistema reprodutor possui um complexo de fertilização em zigzag, próstata estreita, ausência de bursa copulatrix, vaso deferente curto e grosso e pênis simples com glândula no topo. O anel nervoso possui três massas ganglionares e um par adicional ventral conectado aos gânglios pediosos, interpretados com gânglios odontofóricos. Estas características são discutidas sob a luz do conhecimento atual sobre outros Streptaxidae e adaptações à carnivoria.

A new genus and species of cavernicolous Pomatiopsidae (Mollusca, Caenogastropoda) in Bahia, Brazil

Spiripockia punctatais a new genus and species of Pomatiopsidae found in a cave from Serra Ramalho, SW Bahia, Brazil. The taxon is troglobiont (restricted to subterranean realm), and is characterized by the shell weakly elongated, fragile, translucent, normally sculptured by pustules with periostracum hair on tip of pustules; peristome highly expanded; umbilicus opened; radular rachidian with 6 apical and 3 pairs of lateral cusps; osphradium short, arched; gill filaments with rounded tip; prostate flattened, with vas deferens inserting subterminally; penis duct narrow and weakly sinuous; pallial oviduct simple anteriorly, possessing convoluted bypass connecting base of bulged portion of transition between visceral and pallial oviducts with base of seminal receptacle; spermathecal duct complete, originated from albumen gland. The description of this endemic species may raise protective environmental actions to that cave and to the Serra Ramalho Karst area.

Spiripockia punctata é gênero e espécie novos de Pomatiopsidae encontrado em uma caverna da Serra Ramalho, SW Bahia, Brasil. O táxon é troglóbio (restrito à vida subterrânea), caracterizado pela concha levemente alongada, frágil, translúcida, normalmente esculturada por pústulas contendo pelos do perióstraco no topo das pústulas; perístoma altamente expandido; umbílico aberto; dente raquidiano da rádula com 6 cúspides apicais e 3 pares de basais; osfrádio curto e curvo; filamentos branquiais com topo arredondado; próstata achatada, com vaso deferente inserindo subterminalmente; ducto do pênis fracamente sinuoso; oviduto palial anteriormente simples, possuindo um by-pass convoluto da base da porção bulbosa da porção entre oviduto visceral e palial com a base do receptáculo seminal; ducto da espermateca completo, originado da glândula de albume. A descrição dessa espécie endêmica deve contribuir com ações protetivas do ambiente da caverna e à área da Serra Ramalho.

A new genus and species of cavernicolous Pomatiopsidae (Mollusca, Caenogastropoda) in Bahia, Brazil

Spiripockia punctatais a new genus and species of Pomatiopsidae found in a cave from Serra Ramalho, SW Bahia, Brazil. The taxon is troglobiont (restricted to subterranean realm), and is characterized by the shell weakly elongated, fragile, translucent, normally sculptured by pustules with periostracum hair on tip of pustules; peristome highly expanded; umbilicus opened; radular rachidian with 6 apical and 3 pairs of lateral cusps; osphradium short, arched; gill filaments with rounded tip; prostate flattened, with vas deferens inserting subterminally; penis duct narrow and weakly sinuous; pallial oviduct simple anteriorly, possessing convoluted bypass connecting base of bulged portion of transition between visceral and pallial oviducts with base of seminal receptacle; spermathecal duct complete, originated from albumen gland. The description of this endemic species may raise protective environmental actions to that cave and to the Serra Ramalho Karst area.

Spiripockia punctata é gênero e espécie novos de Pomatiopsidae encontrado em uma caverna da Serra Ramalho, SW Bahia, Brasil. O táxon é troglóbio (restrito à vida subterrânea), caracterizado pela concha levemente alongada, frágil, translúcida, normalmente esculturada por pústulas contendo pelos do perióstraco no topo das pústulas; perístoma altamente expandido; umbílico aberto; dente raquidiano da rádula com 6 cúspides apicais e 3 pares de basais; osfrádio curto e curvo; filamentos branquiais com topo arredondado; próstata achatada, com vaso deferente inserindo subterminalmente; ducto do pênis fracamente sinuoso; oviduto palial anteriormente simples, possuindo um by-pass convoluto da base da porção bulbosa da porção entre oviduto visceral e palial com a base do receptáculo seminal; ducto da espermateca completo, originado da glândula de albume. A descrição dessa espécie endêmica deve contribuir com ações protetivas do ambiente da caverna e à área da Serra Ramalho.

Angiostrongylus cantonensis (Nematoda): ESTUDO COMPARATIVO DOS EFEITOS DA INFECÇÃO SOBRE O METABOLISMO DE Biomphalaria straminea E Biomphalaria tenagophila (Mollusca) MARIANA GOMES LIMA 2016

O nematódeo Angiostrongylus cantonensis tem ganhado notoriedade sob o ponto de vista da saúde pública fora de sua área endêmica na Ásia, uma vez que nos últimos anos casos de meningoencefalíte eosinofílica vêm sendo reportados em outros continentes, como nas Américas. No Brasil mais de trinta casos dessa zoonose já foram registrados e há relatos da presença desse nematódeo em 11 estados. Em seu ciclo de vida heteroxeno A. cantonensis tem, ao longo do seu desenvolvimento, a necessidade de hospedeiro intermediário e definitivo, envolvendo predominantemente, moluscos e roedores, respectivamente, além de vários hospedeiros paratênicos, sendo o homem um hospedeiro acidental. Pode infectar uma rica variedade de moluscos terrestres e aquáticos e neste estudo, foram utilizadas para infecção experimental populações nascidas e criadas em laboratório de duas espécies de planorbídeos neotropicais transmissores da esquistossomose mansônica, Biomphalaria straminea e Biomphalaria tenagophila. Com a finalidade de caracterizar o perfil fisiológico resultante dessa relação hospedeiro-parasito, os moluscos hospedeiros foram separados em grupos de infectados e não infectados, contendo trinta moluscos por grupo, todos feitos em triplicatas. A investigação durou 21 dias, ao fim do período pré-patente os moluscos foram dissecados para a coleta de hemolinfa, retirada de tecidos e utilização da concha para verificação de concentração de cálcio. A oviposição dos moluscos de ambas as espécies foi observada quanto à viabilidade dos ovos, assim como (A) Número de massas ovígeras/molusco; (B) Número de ovos/molusco; (C) Número de ovos/massa ovígera e (D) Número de moluscos eclodidos/molusco. Na hemolinfa foram quantificadas as proteínas totais, glicose, ácido úrico, ureia, a atividade das transaminases ALT e AST, lactato desidrogenase - LDH, e os ácidos orgânicos (oxálico, pirúvico, succínico e lático). Na massa cefalopediosa e glândula digestiva, foram mensurados os conteúdos de glicogênio e na glândula de albúmen, foi mensurado o galactogênio. Os resultados obtidos mostraram que os moluscos infectados, de ambas as espécies, apresentaram redução significativa na viabilidade dos ovos, de 50% para B. straminea e de 10% para B. tenagophila. O estado energético também foi vigorosamente afetado, com mobilização das reservas de glicogênio, e queda da glicemia de 68% para B. straminea e de 6,48% para B. tenagophila, seguida de uma elevação na atividade da LDH de 518,25% para B. straminea e 320,14% para B. tenagophila, bem como na concentração do ácido lático, 5,7mM para B. straminea e 0,34 mM para B. tenagophila, e redução na concentração dos ácidos pirúvico e succínico. A intensa liberação de aminoácidos gliconeogênicos a partir do catabolismo proteico inverteu o padrão excretor de uricotélico para ureotélico tanto em B. tenagophila quanto em B. straminea. A lesão tecidual mostrou elevação de 69% na concentração das proteínas totais na hemolinfa de B. straminea, bem como a intensa atividade das aminotransferases, AST e ALT, com aumento de 241,26% e 360%, respectivamente, em relação ao grupo controle. A infecção reduziu em 51,57% a concentração de proteínas totais circulantes para B. tenagophila, e elevou a atividade de ALT e AST em 310% e xi 280% em comparação com os moluscos não infectados. Os resultados observados neste estudo indicam que o metabolismo energético e estrutural de ambas as espécies foi vigorosamente afetado pela infecção, mostrando a ativação de uma via anaeróbia para compensar a exaustão das reservas glicídicas, assim como a mudança no padrão excretor em função da utilização de substratos proteicos para produção de ATP. Embora, estudos sobre aspectos clínicos, patológicos e epidemiológicos da angiostrongilíase neural têm sido extensivamente realizados, dados acerca do perfil metabólico e reprodutivo de moluscos infectados por A. cantonensis são escassos. Este estudo pioneiro na relação parasito-hospedeiro das espécies focadas seguramente contribuirá tanto para o conhecimento dessa interação, quanto da epidemiologia da transmissão de A. cantonensis, além de fornecer novos subsídios que poderão ser utilizados em medidas de prevenção e controle da meningite eosinofílica, zoonose considerada emergente no Brasil.

The nematode Angiostrongylus cantonensis has gained notoriety under the public health point of view out of its endemic area in Asia, since in recent years cases of eosinophilic meningoencephalitis have been reported in other continents, such as in the Americas. In Brazil over thirty cases of this zoonotic disease have been recorded and there are reports of the presence of this nematode in 11 states. In its life cycle A. cantonensis has, along their development, need for intermediate and final host, involving predominantly molluscs and rodents, respectively, and different paratenic hosts, humans are accidental hosts. They can also infect a rich variety of terrestrial and aquatic molluscs and in this study, there were used specimens of neotropical planorbids transmitters of schistosomiasis, Biomphalaria straminea and Biomphalaria tenagophila, born and reared in the laboratoryfor experimental infection by A. cantonensis. In order to characterize the resulting physiological profile that host-parasite relationship, the host molluscs were separated into groups of infected and uninfected containing thirty molluscs per group, all made in triplicates. The investigation lasted 21 days, after the pre-patent period molluscs were dissected to collect hemolymph, removal of tissues and use the shell for calcium concentration check. The reproductive biology of both species was observed on the viability of the eggs, as well as (A) Number of eggs/ eggs mass; (B) Number of eggs/mollusc; (C) Number of eggs mass/mollusc and (D) Number of hatched molluscs/mollusc. In the hemolymph there were quantified total protein, glucose, uric acid, urea, the activity of transaminases AST and ALT, lactate dehydrogenase - LDH, and organic acids (oxalic, pyruvic, succinic and lactic). In the cephalopedal mass and digestive gland the glycogen content was measured and in the albumen gland, it was measured the galactogen. The results showed that the snails infected, of both species showed significant reduction in the viability of eggs, 50% for B. straminea and 10% for B. tenagophila. The metabolic status was also strongly affected, with mobilization of glycogen and hemolymph glucose reduction of 68% to B. straminea and 6.48% for B. tenagophila, followed by anincrease of LDH activity of 518.25% to 320.14% B. straminea and to B. tenagophila as well as the concentration of lactic acid, 5,7mM to B. straminea and 0.34 mM for B. tenagophila, and reduction in the concentration of pyruvic and succinic acids. The intense release of gluconeogenic amino acids from protein catabolism reversed the excretory pattern from uricotelic to ureotelic in both B. tenagophila and B. straminea. The tissue injury showed increase of 69% in the concentration of total proteins in the hemolymph of B. straminea and the intense activity of aminotransferases, ALT and AST, an increase of 241.26% and 360%, respectively, compared to the control group. The infection reduced by 51.57% the concentration of total circulating proteins to B. tenagophila, and increased ALT and AST activity at 310% and 280% compared to uninfected snails. The results of this study indicate that the energetic and structural metabolism of both species is strongly affected by the infection, showing the activation of an anaerobic to compensate for the depletion of glicidics stores as well as the change in the excretory pattern depending on the use of substrates protein for the production of ATP. Although studies on clinical, pathological and epidemiological neural angiostrongyliasis have been extensively carried xiii out, data on the metabolic and reproductive profile of snails infected by A. cantonensis are scarce. This pioneering study focused on species of host-parasite relationship certainly contribute to the knowledge of this interaction, as well as to the epidemiology of transmission A. cantonensis in addition to providing new subsidies which can be used in prevention and control of eosinophilic meningitis, zoonosis considered emerging in Brazil.

CARACTERIZAÇÃO DO PERFIL MINERAL, LIPÍDICO E OXIDATIVO DE BIOMPHALARIA GLABRATA (MOLLUSCA, GASTROPODA) INFECTADA EXPERIMENTALMENTE POR ANGIOSTRONGYLUS CANTONENSIS, (NEMATODA, METASTRONGYLIDAE).

O nematóide Angiostrongylus cantonensis foi primeiramente descrito como parasito de artéria pulmonar de Rattus norvegicus e Rattus rattus em Canton, China. Este helminto tem sido mencionado como principal agente etiológico da meningoencefalite eosinofílica humana, uma metazoonose endêmica no continente asiático e que recentemente, tem-se disseminado para África, Norte e Sul da América e Ilhas do Caribe. Atualmente, o Brasil é considerado área de alto risco ao estabelecimento da angiostrongilíase humana, justificado não somente pela presença de moluscos, mas também roedores naturalmente infectados, que atuam respectivamente como hospedeiros intermediários e definitivos desse parasito, fatores que favorecem diretamente a dinâmica de transmissão da angiostrongilíase neural. Em seu ciclo de vida moluscos atuam como hospedeiros intermediários, possibilitando a partir se sua infecção, o desenvolvimento de formas larvais infectantes ao hospedeiro definitivo. Nos últimos anos, a caracterização de padrões metabólicos de moluscos infectados experimentalmente, tem sido estudada como base para o desenvolvimento de medidas focadas principalmente no controle de patologias transmitidas por estes organismos. Porém, quando nos referimos a modelos experimentais utilizando A. cantonensis e Biomphalaria glabrata, os dados ainda são escassos, o que preocupa, não apenas pela importância do parasito, mas também pela ampla distribuição da espécie B. glabrata no Brasil. Neste estudo, foram observadas alterações no metabolismo mineral, lipídico e oxidativo de B. glabrata, decorrentes da infecção experimental por A. cantonensis. Para isso, foram utilizados moluscos da linhagem pigmentada criados desde a oviposição e mantidos em condições laboratóriais. Foram formados dois grupos: controle (C1, C2, C3) com animais não infectados e infectados (I1, I2 e I3). Os grupos eram compostos por 10 moluscos. Todo experimento foi feito em duplicata, utilizando um total de 120 moluscos. Após 1, 2 e 3 semanas de infecção, 20 moluscos de cada grupo eram dissecados para a coleta da hemolinfa e tecidos. As leituras espectrofotométricas foram realizadas a partir de kits comercias da marca Doles. As dosagens bioquímicas demonstraram que a infecção por A. cantonensis induziu uma diminuição significativa nos conteúdos hemolinfáticos de cálcio após primeira semana de infecção, seguido por um aumento nas concentrações desse íon na segunda semana de estudo. Este cenário foi acompanhado por uma intensa mobilização de CaCO3 na concha de moluscos infectados, possivelmente como tentativa em restabelecer o equilíbrio ácido-base alterado durante o desenvolvimento do parasito. Resultados histopatológicos demonstraram ainda alterações morfológicas na glândula digestiva de moluscos infectados, caracterizadas principalmente na forma de reações granulomatosas e áreas de calcificação metastática. Variações nas reservas de lipídios neutros estocados no complexo glândula digestiva-gônoda foram também demonstradas. A infecção resultou em um decréscimo significativo nos conteúdos de colesterol e no aumento dos níveis de ácido graxo e triacilglicerol após as duas primeiras semanas de infecção. O aumento nos conteúdos de ácido graxo foi associado ao aumento da atividade lipásica, indicando que A. cantonensis induz de fato a ativação de um processo lipolítico durante etapa de desenvolvimento em seu hospedeiro intermediário. Por fim, a infecção de A. cantonensis resultou em mudanças no metabolismo oxidativo de B. glabrata. Além da depleção de reservas polissacarídicas estocadas na glândula digestiva e massa cefalopodal, o parasitismo por A. cantonensis induziu a ativação do metabolismo anaeróbio de seu hospedeiro, resultando não apenas no aumento da atividade da lactato desidrogenase hemolinfática, mas também na redução dos níveis de ácido pirúvico e acúmulo de lactato. Isso representa uma interessante resposta adaptativa do hospedeiro frente à infecção, possibilitando o hospedeiro a partir do metabolismo anaeróbio, gerar energia e ao mesmo tempo mantém seu balanço redox. Adicionalmente, a redução nas concentrações de ácido oxálico observado nos períodos finais do desenvolvimento parasitário, sugere o seu desvio para a gliconeogênese, destacando o envolvimento dessa molécula como precursora na síntese de glicose-6-fosfato. Este cenário metabólico foi acompanhado por uma supressão na fosforilação oxidativa de moluscos infectados (1 e 2 semanas) de infecção, sugerindo uma diminuição na quantidade de mitocôndrias no tecido analisado, ou ainda, na inibição de centros enzimáticos relacionados às reações oxidativas.

Angiostrongylus cantonensis Chen, 1935 was first described as a parasite of the pulmonary artery of Rattus norvegicus and Rattus rattus in Canton, China. This helminth is an etiological agent of eosinophilic meningoencephalitis, a zoonotic disease endemic to certain Asian countries, which has recently dispersed to Africa, North and South America, and Caribbean islands. Currently Brazil is considered an area of high risk for the establishment of human angiostrongyliasis, due mainly to the occurrence of naturally infected snails and rodents, acting respectively as definitive and intermediate hosts of this parasite, directly favoring the transmission dynamics of neural angiostrongyliasis. In its life cycle, snails act as intermediate hosts, allowing the development of infective larval forms in the definitive host. In recent years, the metabolic characteristics of experimentally infected snails have been studied in an effort to develop measures to control the pathologies transmitted by these organisms. However, there is little information on the relationship between A. cantonensis and the freshwater snail Biomphalaria glabrata, which is cause for concern, not only because of the importance of this parasite, but also due to the widespread distribution of this snail in Brazil. In this study, the metabolic alterations of B. glabrata resulting from experimental infection by A. cantonensis were evaluated. For this purpose, snails of the pigmented strain were used, reared in the laboratory since oviposition. Two overall groups were formed: control (C1, C2 and C3), with uninfected animals, and treated (I1, I2 and I3), with infected snails. Each subgroup was composed of 10 snails. The entire experiment was performed in duplicate, utilizing a total of 120 snails. After one, two and three weeks of infection, 20 snails from each group were dissected to collect the hemolymph and tissues. The spectrophotometric readings were performed with Doles commercial reagent kits. The biochemical measurement demonstrated that infection by A. cantonensis induced a significant reduction in the hemolymph concentrations of calcium after one week of infection, followed by an increase in the concentrations of this ion in the second week of infection. This situation was accompanied by intense mobilization of CaCO3 in the shell of the infected snails, possibly as an attempt to reestablish the acid-base equilibrium after its alteration during the parasites development. The histopathology results also demonstrated morphological changes in the digestive gland of infected snails, mainly in the form of granulomatous reactions and areas of metastatic calcification. Variations in the reserves of neutral lipids stored in the digestive gland-gonad complex were also observed. Infection resulted in a significant decrease in the concentrations of cholesterol and an increase in the levels of fatty acid and triacylglycerol after the first two weeks of infection. The increase in the concentration of fatty acid was associated with an increase in lipase activity, indicating that A. cantonensis induces activation of a lipolytic process during development in its intermediate host. Finally, infection by A. cantonensis resulted in changes in the oxidative metabolism of B. glabrata. Besides depletion of the polysaccharide reserves stored in the digestive gland and cephalopodal mass, parasitism by A. cantonensis induced activation of the hosts anaerobic metabolism, resulting not only in an increase in activity of lactate dehydrogenase in the hemolymph, but also reduction of the levels of pyruvic acid and accumulation of lactate. This is an interesting adaptive response of the host to infection, enabling the host, through anaerobic metabolism, to generate energy while still maintaining its redox balance. Additionally, the reduction in the concentrations of oxalic acid in the final parasite development periods suggests its diversion to gluconeogenesis, indicating the involvement of this molecule as a precursor in the synthesis of glucose-6-phosphate. This metabolic condition was accompanied by a deletion in oxidative phosphorylation infected snails (1 and 2 weeks) after infection, suggesting a decrease in the number of mitochondria in the examined tissue, or suppression of enzymatic centers related to oxidative reactions.

RELAÇÃO ENTRE ENERGIA METABOLIZÁVEL E AMINOÁCIDOS SULFUROSOS PARA FRANGAS E POEDEIRAS LEVES

O objetivo foi determinar a relação ideal existente entre o nível de energia metabolizável (EM) e o de metionina + cistina digestível (M+C dig.) a ser recomendado para poedeiras leves, em diferentes fases de crescimento e postura. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado distribuído em esquema fatorial com 4 níveis de M+C dig. e 3 níveis de EM. As dietas tiveram duas bases de recomendação para M+C dig.; uma atendendo 100% da recomendação, e outra que além de atender o proposto, variou ±10% desta recomendação. Para EM foram sugeridos três níveis, sendo um nível a recomendação da literatura e os outros variando 5% acima e abaixo da exigência, totalizando 12 tratamentos. Na fase de 1 a 6 semanas observou-se respostas significativas quanto à interação dos fatores analisados em todas as variáveis testadas (P<0,05), mostrando que alterações dietéticas tanto em metionina+cistina quanto na densidade energética podem resulta em melhor desenvolvimento do trato gastrintestinal, aumentando a eficiência de absorção dos alimentos e consequentemente melhorando a conversão alimentar. Na fase de 7 a 12 semanas só houve diferença significativa para peso de bursa, análises sorológicas, histomorfométricas de intestino delgado e nas variáveis que compõem o balanço de nitrogênio. Não ocorreu esteatose hepática em nenhuma das fases. Recomenda-se a utilização de 0,667% de M+C dig. associado a 2755 kcal/kg de EM (relação EM: M+C digestível de 4130,43) na dieta para as aves entre 1 e 6 semanas de idade, que corresponde a um consumo diário de 184 mg/ave de M+C dig/ave. E para a fase de 7 a 12 semanas, a recomendação foi de 0,497% de M+C dig. associado a 2.755 kcal/kg de EM (relação EM: M+C digestível de 5543,26), que corresponde a um consumo diário de 136 mg/ave de M+C dig./ave. Na fase de postura entre 24 e 44 semanas observou-se interação (P<0,05) dos fatores estudados para as variáveis de desempenho e qualidade dos ovos, exceto para peso de ovo, massa de ovo, gravidade específica, espessura de casca, peso de gema, porcentagem de albúmen e gema. Nas variáveis de abate houve interação (P<0,05) para peso de gordura celomática e fígado, mas não apresentou esteatose hepática grave. Nas variáveis sorológicas e histomorfométricas de intestino delgado e útero houve interação (P<0,05) e ajuste à 24 regressão para todas as variáveis analisadas, mostrando que diferentes níveis de metionina+cistina associado a diferentes níveis energéticos podem alterar positivamente a atividade sorológica e de proliferação celular, aumentando a absorção de nutrientes e promovendo uma maior atividade da glândula da casca presente no útero. Na fase de postura entre 45 e 65 semanas houve interação (P<0,05) dos fatores avaliados para todas as variáveis de desempenho, exceto para peso do ovo. Houve também ajuste quadrático na regressão para todos os grupos testados, exceto para consumo de ração. E nas variáveis de qualidade de ovo, os pesos de casca e gema e a porcentagem de gema foram os únicos que não apresentaram interação, e houve resposta significativa à regressão para peso de gema e porcentagens de gema e albúmen. Para as variáveis de abate não houve interação para peso vivo e fígado, e nem resposta significativa à regressão fatorial. Todas as variáveis sorológicas apresentaram interação (P<0,05) dos fatores estudados, e para regressão fatorial só não houve ajuste significativo ao modelo quadrático para aspartato aminotransferase e albumina. Nas variáveis ligadas ao balanço de nitrogênio houve interação (P<0,05) e efeito significativo à regressão fatorial para todas as análises. E para histomorfometria de intestino delgado, útero e fígado não houve efeitos significativos nas respostas encontradas. Portanto, recomenda-se a utilização de 0,704% de M+C dig. (que corresponde a um consumo diário de 638 mg/ave de M+C dig.) associado a um nível de 2900 kcal/kg de EM (relação EM: M+C digestível de 4119,32) na dieta de poedeiras leves entre 24 e 44 semanas de idade. E para aves leves entre 45 e 65 semanas de idade, recomenda-se a utilização de 0,685% de M+C dig., correspondendo a um consumo de 781 mg de M+C dig. /ave, associado a um nível de 2940 kcal/kg de EM (relação EM: M+C digestível de 4291,97).

The aim of this study was to determine the optimal relationship between the level of recommendation of metabolizable energy (ME) and digestible methionine + cystine (M+C dig.) for pullets and laying hens. The experimental design was completely randomized factorial distributed in 4 levels of digestible methionine+cystine (M+C dig.) x 3 levels metabolizable energy (ME). The diets had two recommendation bases for M+C dig.; one for 100% of the recommendation, and one which can meet the proposed varied ± 10% of this recommendation. For ME were suggested three levels, one being the recommendation of literature and other varying ± 5% to 12 treatments. From 1 to 6 weeks there was a significant extent on the interaction of the factors analyzed in all tested variables, showing that dietary changes both in M+C as the energy density can result in better development of gastrointestinal tract, increasing the efficiency of absorption of feed, and consequently improving feed conversion. In 7 to 12 weeks, there was only significant difference for bursa weight, serological tests, small intestine histomorphometric and the variables that the nitrogen balance. No hepatic steatosis occurred at any phases. It is recommended to use 0.667% M+C dig. associated with 2755 kcal / kg of EM (ratio MS: M + of 4130.32 digestible C) in the diet for pullets (1 to 6 weeks), which corresponds to a daily intake of 184 mg M+C dig/pullet. For 7-12 weeks, the recommendation was 0.497% of M+C dig. associated to 2,755 kcal/kg of EM (ME:M+C of 5543.26), which corresponds to a daily intake of 136 mg of M+C/pullet. In the laying period (24 to 44 weeks) was observed interaction the factors tested for the performance variables and quality of the eggs except for egg weight, egg mass, specific gravity, shell thickness, yolk weight, percentage of albumen and yolk. In the slaughter of variables was no interaction abdominal fat weight and liver, but had no severe hepatic steatosis degree. In serological tests and small intestine and uterus histomorphometric was no interaction, and adjust the regression for all variables analyzed, showing that different levels of M+C dig. associated with different energy levels can positively change the serological activity and cell proliferation, increases 26 nutrient absorption and promotes greater gland activity in the uterus of this shell. In laying (45 to 65 weeks) was no interaction of the evaluated factors for all performance variables except for egg weight. There was a quadratic regression for all groups tested, except for feed intake. And in the egg quality variables, the shell weights and yolk and yolk percentage were the only ones that do no interference, and there was significant response to regression for yolk weight and yolk and albumen percentages. For the slaughter of variables there was no interaction to live and liver weight, and not significant response to factor regression. All serological tests showed interaction and factorial regression was not only significant adjustment to the quadratic model for aspartate aminotransferase and albumin. In the variables linked to nitrogen balance was no interaction and significant effect to factor regression for all analyzes. And for small intestine and uterus histomorphometry, and liver had no significant effect on the responses found. Therefore, we recommend the use of 0.704% M+C dig. (corresponded to a daily intake of 676 mg M+C dig./layer). Associated with a level of 2900 kcal/kg ME (ratio ME:M+C of 4119.32) in the diet of laying hens between 24 and 44 weeks of age. And for laying hens, between 45 and 65 weeks of age, we recommend the use of 0.685% M+C dig., corresponding a consumption of 781 mg of M + C dig. /layer/day, associated with a level of 2940 kcal/kg ME (ratio ME:M + C dig. of 4291.97).

Histomorfologia do órgão acessório de perfuração de Thais haemastoma (Mollusca, Gastropoda)

The mollusks of the family Thaididae are predators of others mollusks drilling their shell using alternately secretions from the accessory boring organ (ABO) and scraping movements of the radula. In this family the ABO is located in the median-anterior ventral part of the foot. The animals examined in the study were collected in the "Praia do Futuro", Fortaleza, Ceará, Brazil. The glandular part of ABO in Thais haemastoma (Linnaeus, 1758) is located in a cavity inside the foot, surrounded by foot muscle, and shows an excretory duct connecting that glandular portion to the outside. The analysis of microscopic sections stained by eosin-hematoxylin showed an epithelial tissue lining the cavity, and separating the glandular portion of ABO from the foot muscle. This ephitelial tissue is continuous with the excretory duct ephitelium. Under this tissue was observed a loose connective tissue. The ABO gland of T. haemastoma has a discoidal format and an irregular surface due to the presence of reentrances heading to the central part of the gland. The pseudoestratificated glandular epithelium with cylindrical and ciliated cells reacted negatively to the histochemical tests. Under the epithelium a connective loose tissue of support was observed.

Os representantes da família Thaididae são organismos predadores de outros moluscos, perfurando suas conchas pela ação alternada de secreção oriunda do "Accessory Boring Organ" (ABO) e por raspagem através da rádula. Nesta família, o ABO está localizado na porção ventral mediano-anterior do pé. Os animais examinados neste estudo foram coletados na praia do Futuro, Fortaleza, em seguida levados ao laboratório para fixação e posterior tratamento histológico rotineiro. A porção glandular do ABO de Thais haemastoma (Linnaeus, 1758) se encontra alojada em uma cavidade circundada pela musculatura do pé e apresentando um ducto excretório que a comunica com o meio externo. Esta cavidade é revestida por um epitélio cilíndrico simples separando a porção glandular deste órgão do músculo pedioso, sendo contínuo com o epitélio de revestimento do ducto excretório. Subjacente a este tecido foi visualizado um tecido conjuntivo frouxo. A região glandular do ABO da espécie apresenta um formato discoidal com superfície irregular devido à presença de reentrâncias em direção à porção central da glândula. O epitélio glandular pseudoestratificado com células cilíndricas e ciliadas reagiu negativamente aos testes histoquímicos. Abaixo do epitélio, foi observado um tecido conjuntivo frouxo de sustentação.

Histomorfologia do órgão acessório de perfuração de Thais haemastoma (Mollusca, Gastropoda)

The mollusks of the family Thaididae are predators of others mollusks drilling their shell using alternately secretions from the accessory boring organ (ABO) and scraping movements of the radula. In this family the ABO is located in the median-anterior ventral part of the foot. The animals examined in the study were collected in the "Praia do Futuro", Fortaleza, Ceará, Brazil. The glandular part of ABO in Thais haemastoma (Linnaeus, 1758) is located in a cavity inside the foot, surrounded by foot muscle, and shows an excretory duct connecting that glandular portion to the outside. The analysis of microscopic sections stained by eosin-hematoxylin showed an epithelial tissue lining the cavity, and separating the glandular portion of ABO from the foot muscle. This ephitelial tissue is continuous with the excretory duct ephitelium. Under this tissue was observed a loose connective tissue. The ABO gland of T. haemastoma has a discoidal format and an irregular surface due to the presence of reentrances heading to the central part of the gland. The pseudoestratificated glandular epithelium with cylindrical and ciliated cells reacted negatively to the histochemical tests. Under the epithelium a connective loose tissue of support was observed.

Os representantes da família Thaididae são organismos predadores de outros moluscos, perfurando suas conchas pela ação alternada de secreção oriunda do "Accessory Boring Organ" (ABO) e por raspagem através da rádula. Nesta família, o ABO está localizado na porção ventral mediano-anterior do pé. Os animais examinados neste estudo foram coletados na praia do Futuro, Fortaleza, em seguida levados ao laboratório para fixação e posterior tratamento histológico rotineiro. A porção glandular do ABO de Thais haemastoma (Linnaeus, 1758) se encontra alojada em uma cavidade circundada pela musculatura do pé e apresentando um ducto excretório que a comunica com o meio externo. Esta cavidade é revestida por um epitélio cilíndrico simples separando a porção glandular deste órgão do músculo pedioso, sendo contínuo com o epitélio de revestimento do ducto excretório. Subjacente a este tecido foi visualizado um tecido conjuntivo frouxo. A região glandular do ABO da espécie apresenta um formato discoidal com superfície irregular devido à presença de reentrâncias em direção à porção central da glândula. O epitélio glandular pseudoestratificado com células cilíndricas e ciliadas reagiu negativamente aos testes histoquímicos. Abaixo do epitélio, foi observado um tecido conjuntivo frouxo de sustentação.

Ciclo reprodutivo da caninana, Spilotes pullatus (Linnaeus, 1758) (SERPENTES: COLUBRIDAE) / Reproductive cycle of tiger rat snake, Spilotes pullatus (Linnaeus, 1758) (SERPENTES: COLUBRIDAE)

O ciclo reprodutivo de Spilotes pullatus na região sudeste do Brasil é descrito para machos e fêmeas a partir de análises macroscópicas e microscópicas do aparelho reprodutor e órgãos acessórios envolvidos na reprodução ao longo do ano. Os machos da espécie apresentam o ciclo sazonal com o início da espermatogênese no verão, e durante o outono ocorre a espermiação. Os gametas são estocados ao longo dos ductos deferentes que possuem um formato convoluto. Os testículos entram em regressão e durante o inverno e a primavera apresentam-se inativos. Não é incomum encontrar machos de Spilotes com anomalia gonadal, apresentando uma massa testicular funcional próximo aos testículos. A cópula ocorre durante o inverno, principalmente na metade final da estação, os gametas estocados nos ductos deferentes não são esgotados durante a estação de acasalamento de forma que durante todo o ano os machos possuem espermatozóides estocados nos ductos. Os rins, órgão reprodutor acessório em Squamata, não apresentam variação em tamanho ao longo das estações em nenhum dos sexos, mas mudanças microscópicas ocorrem no néfron dos machos na região do segmento sexual renal, essa estrutura encontra-se hipertrofiada durante a estação de acasalamento. Combate pode ocorrer durante a primavera e os machos tendem a ficar com a porção cranial do corpo na vertical durante o duelo, diferentemente da maioria dos outros colubrídeos que mantém quase todo o corpo na horizontal. Durante o combate os machos podem expor o hemipênis. As fêmeas iniciam a vitelogênese no outono quando os folículos menores do que 10 mm começam a receber depósito de vitelo. O forrageio das fêmeas diminui de acordo com o desenvolvimento folicular. No final do inverno os folículos encontram-se pré-ovulatórios e no oviduto médio observa-se uma hipertrofia das glândulas da casca. As fêmeas parecem apresentar um período de proestro de seis dias e em seguida o estro. Os hemipênes da espécie são únicos, sem nenhum tipo de bifurcação, enquanto que a fêmea possui uma cloaca longa e com bolsas (vaginas) marcadamente bilobadas. Após a cópula, no final do inverno, ocorre a ovulação. Nessa espécie parece haver ovulação reflexa, sendo a cópula o estímulo para que ocorra a ovulação. A primavera é a estação onde as fêmeas encontram-se prenhas e realizam a ovipostura. As fêmeas que não ovularam parecem ter os folículos absorvidos pelo organismo. As caninanas produzem em média oito ovos que 12 podem estar distribuídos igualmente ou não entre os ovários. Os ovos postos na prprimavera são incubados em média por 73 dias e a eclosão ocorre durante o verão

The reproductive cycle of Spilotes pullatus in southeastern of Brazil is described for males and females from macroscopic and microscopic analysis of the reproductive tract and accessory organs involved in reproduction throughout the year. Males of the species exhibit a seasonal cycle with the onset of spermatogenesis in the summer and during autumn spermiation occurs. The gametes are stored along the vas deferens, which have a convoluted shape. The testicles come in regression and during the winter and spring appear inactive. It is not unusual to find male Spilotes with gonadal failure, with a testicular mass function next to the testicles. Mating occurs during the winter, especially in the latter half of the season, gametes stored in the vas deferens are not depleted during the breeding season so that throughout the years, males have sperm stored in the vas. The kidneys, reproductive organ accessory in Squamatas not show variation in size throughout the seasons in either sex, but microscopic changes occur in the nephron of male sexual segment in the region of the kidney, this structure is hypertrophied during the mating season. The kidneys, reproductive organ accessory Squamatas not show variation in size throughout the seasons in either sex, but microscopic changes occur in the nephron of male sexual segment in the region of the kidney, this structure is hypertrophied during the mating season. Combat can occur during the spring and the males tend to stay with the cranial portion of the body vertical during the duel, unlike most other colubrids that keeps most of the body horizontally. During combat, males may expose the hemipenis. The females begin the vitellogenesis on fall when the follicles smaller than 10 mm start receiving tank calf. Female foraging decreases with the follicle development. At the end of winter follicles are pre-ovulatory and in the medium oviduct there is a hypertrophy of gland shell. Females appear to have a period of six days of proestrus and then estrus. The specie hemipenes are unique, without any kind of bifurcation, while the female has a long cloaca with pouch (or vaginal pouch) markedly bilobed. After mating in the end of winter, ovulation occurs. In this species seems to be reflex ovulation, copulation being the stimulus for ovulation to occur. Spring is the season when females are pregnant and do the oviposition. Females that did not ovulate have to seem the follicles absorbed by the body. The 14 tiger rat snake produce an average of eight eggs that may or may not be distributed equally between the ovaries. The eggs laid in spring are incubated in medium for 73 days and hatching occurs during the summer

Ciclo reprodutivo da caninana, Spilotes pullatus (Linnaeus, 1758) (SERPENTES: COLUBRIDAE) / Reproductive cycle of tiger rat snake, Spilotes pullatus (Linnaeus, 1758) (SERPENTES: COLUBRIDAE)

O ciclo reprodutivo de Spilotes pullatus na região sudeste do Brasil é descrito para machos e fêmeas a partir de análises macroscópicas e microscópicas do aparelho reprodutor e órgãos acessórios envolvidos na reprodução ao longo do ano. Os machos da espécie apresentam o ciclo sazonal com o início da espermatogênese no verão, e durante o outono ocorre a espermiação. Os gametas são estocados ao longo dos ductos deferentes que possuem um formato convoluto. Os testículos entram em regressão e durante o inverno e a primavera apresentam-se inativos. Não é incomum encontrar machos de Spilotes com anomalia gonadal, apresentando uma massa testicular funcional próximo aos testículos. A cópula ocorre durante o inverno, principalmente na metade final da estação, os gametas estocados nos ductos deferentes não são esgotados durante a estação de acasalamento de forma que durante todo o ano os machos possuem espermatozóides estocados nos ductos. Os rins, órgão reprodutor acessório em Squamata, não apresentam variação em tamanho ao longo das estações em nenhum dos sexos, mas mudanças microscópicas ocorrem no néfron dos machos na região do segmento sexual renal, essa estrutura encontra-se hipertrofiada durante a estação de acasalamento. Combate pode ocorrer durante a primavera e os machos tendem a ficar com a porção cranial do corpo na vertical durante o duelo, diferentemente da maioria dos outros colubrídeos que mantém quase todo o corpo na horizontal. Durante o combate os machos podem expor o hemipênis. As fêmeas iniciam a vitelogênese no outono quando os folículos menores do que 10 mm começam a receber depósito de vitelo. O forrageio das fêmeas diminui de acordo com o desenvolvimento folicular. No final do inverno os folículos encontram-se pré-ovulatórios e no oviduto médio observa-se uma hipertrofia das glândulas da casca. As fêmeas parecem apresentar um período de proestro de seis dias e em seguida o estro. Os hemipênes da espécie são únicos, sem nenhum tipo de bifurcação, enquanto que a fêmea possui uma cloaca longa e com bolsas (vaginas) marcadamente bilobadas. Após a cópula, no final do inverno, ocorre a ovulação. Nessa espécie parece haver ovulação reflexa, sendo a cópula o estímulo para que ocorra a ovulação. A primavera é a estação onde as fêmeas encontram-se prenhas e realizam a ovipostura. As fêmeas que não ovularam parecem ter os folículos absorvidos pelo organismo. As caninanas produzem em média oito ovos que 12 podem estar distribuídos igualmente ou não entre os ovários. Os ovos postos na prprimavera são incubados em média por 73 dias e a eclosão ocorre durante o verão (AU)

The reproductive cycle of Spilotes pullatus in southeastern of Brazil is described for males and females from macroscopic and microscopic analysis of the reproductive tract and accessory organs involved in reproduction throughout the year. Males of the species exhibit a seasonal cycle with the onset of spermatogenesis in the summer and during autumn spermiation occurs. The gametes are stored along the vas deferens, which have a convoluted shape. The testicles come in regression and during the winter and spring appear inactive. It is not unusual to find male Spilotes with gonadal failure, with a testicular mass function next to the testicles. Mating occurs during the winter, especially in the latter half of the season, gametes stored in the vas deferens are not depleted during the breeding season so that throughout the years, males have sperm stored in the vas. The kidneys, reproductive organ accessory in Squamatas not show variation in size throughout the seasons in either sex, but microscopic changes occur in the nephron of male sexual segment in the region of the kidney, this structure is hypertrophied during the mating season. The kidneys, reproductive organ accessory Squamatas not show variation in size throughout the seasons in either sex, but microscopic changes occur in the nephron of male sexual segment in the region of the kidney, this structure is hypertrophied during the mating season. Combat can occur during the spring and the males tend to stay with the cranial portion of the body vertical during the duel, unlike most other colubrids that keeps most of the body horizontally. During combat, males may expose the hemipenis. The females begin the vitellogenesis on fall when the follicles smaller than 10 mm start receiving tank calf. Female foraging decreases with the follicle development. At the end of winter follicles are pre-ovulatory and in the medium oviduct there is a hypertrophy of gland shell. Females appear to have a period of six days of proestrus and then estrus. The specie hemipenes are unique, without any kind of bifurcation, while the female has a long cloaca with pouch (or vaginal pouch) markedly bilobed. After mating in the end of winter, ovulation occurs. In this species seems to be reflex ovulation, copulation being the stimulus for ovulation to occur. Spring is the season when females are pregnant and do the oviposition. Females that did not ovulate have to seem the follicles absorbed by the body. The 14 tiger rat snake produce an average of eight eggs that may or may not be distributed equally between the ovaries. The eggs laid in spring are incubated in medium for 73 days and hatching occurs during the summer (AU)

Research on eggshell structure and quality: an historical overview

The eggshell is an important structure for two reasons. Firstly it forms an embryonic chamber for the developing chick, providing mechanical protection and a controlled gas exchange medium. Secondly it is a container for the market egg, providing protection of the contents and a unique package for a valuable food. The superficial structure of the shell has been known for over 100 years. The shell consists of 97% calcium carbonate, and this is provided to the hen in the diet. However, the chemical must be broken down in the digestive system and then re-synthesized in the shell gland to form the shell. This results in a turnover of blood Ca of ~ 100 times each 24 hours. Provision of calcium to layers has been researched at length, but the key work, conducted at Cornell University in the 1960's, showed the necessity for sources with large particle size, for example, oyster shells. Subsequent research has defined guidelines that, if correctly followed, will yield reliable and optimum eggshell quality. Breakage or cracking of eggshells in market channels is a serious concern. Cracks result from a combination of shell strength and integrity, and the extent of the "insult" received by the egg during handling. Measurement of shell strength, and assessment of "insults" is important to the poultry industry. Most recent research has identified the ultra-structure of the shell, with resulting opportunities for industrial remedies, and possible new selection criteria, to ensure maximum shell quality throughout the egg industry.

Research on eggshell structure and quality: an historical overview

The eggshell is an important structure for two reasons. Firstly it forms an embryonic chamber for the developing chick, providing mechanical protection and a controlled gas exchange medium. Secondly it is a container for the market egg, providing protection of the contents and a unique package for a valuable food. The superficial structure of the shell has been known for over 100 years. The shell consists of 97% calcium carbonate, and this is provided to the hen in the diet. However, the chemical must be broken down in the digestive system and then re-synthesized in the shell gland to form the shell. This results in a turnover of blood Ca of ~ 100 times each 24 hours. Provision of calcium to layers has been researched at length, but the key work, conducted at Cornell University in the 1960's, showed the necessity for sources with large particle size, for example, oyster shells. Subsequent research has defined guidelines that, if correctly followed, will yield reliable and optimum eggshell quality. Breakage or cracking of eggshells in market channels is a serious concern. Cracks result from a combination of shell strength and integrity, and the extent of the "insult" received by the egg during handling. Measurement of shell strength, and assessment of "insults" is important to the poultry industry. Most recent research has identified the ultra-structure of the shell, with resulting opportunities for industrial remedies, and possible new selection criteria, to ensure maximum shell quality throughout the egg industry.