Simultaneous determination of mycotoxins in peruvian purple maize / Determinação simultânea de micotoxinas em milho roxo peruano

Purple maize is an important foodstuff for the Peruvian people. Its unique nutritional and antioxidant characteristics makes it widely exported to other countries. However, when contaminated by fungi, it can trigger numerous health problems in the consumers. This study aimed to evaluate the presence of 27 mycotoxins in 63 samples of purple maize collected in Peru. Frequency of occurrence and mean concentration of the following mycotoxins were determined: alternariolmetileter (AME), alternariol (AOH), tentoxin, neosolaniol, nivalenol, wortmannin, deoxynivalenol, 3-acetyl deoxynivalenol, 15-acetyl deoxynivalenol, zearalenone, aflatoxin B1, aflatoxin B2, aflatoxin G1, aflatoxin G2, fumonisin B1, fumonisin B2, fumonisin B3, ochratoxin A, ochratoxin , T-2 toxin, HT-2 toxin, fusarenon x, cyclopiazonic acid, gliotoxin, agroclavin and citreoviridin. The main mycotoxins reported in purple maize were AME and AOH, with a frequency of occurrence of 14.3 and 7.9%, and mean concentration of 23.3% and 1.8%, respectively. AME and AOH do not have guidance levels in the Brazilian legislation. Contrastingly, levels of mycotoxins which are within the standards of the countrys regulations were below the limit of quantification. The present results suggested that purple maize is a raw material with a great potential for the production and industrialization of special products.(AU)

O milho roxo é um alimento importante para o povo peruano. Suas características nutricionais e antioxidantes únicas fazem com que seja amplamente exportado para outros países. No entanto, quando contaminado por fungos, pode desencadear inúmeros problemas de saúde nos consumidores. Este estudo teve como objetivo avaliar a presença de 27 micotoxinas em 63 amostras de milho roxo coletadas no Peru. A frequência de ocorrência e a concentração média das seguintes micotoxinas foram determinadas: alternariolmetileter (AME), alternariol (AOH), tentoxina, neosolaniol, nivalenol, wortmanina, desoxinivalenol, 3-acetil desoxinivalenol, 15-acetil desoxinivalenol, zearalenona, aflatoxina B1, aflatoxina B2 , aflatoxina G1, aflatoxina G2, fumonisina B1, fumonisina B2, fumonisina B3, ocratoxina A, ocratoxina, toxina T-2, toxina HT-2, fusarenona x, ácido ciclopiazonico, gliotoxina, agroclavina e citreoviridina. As principais micotoxinas encontradas no milho roxo foram AME e AOH, com frequência de ocorrência de 14,3% e 7,9% e concentração média de 23,3% e 1,8%, respectivamente. AME e AOH não possuem níveis de orientação na legislação brasileira. Contrastantemente, os níveis de micotoxinas que estão dentro dos padrões das regulamentações do país estavam abaixo do limite de quantificação. Os presentes resultados sugerem que o milho roxo é uma matéria-prima com grande potencial para a produção e industrialização de produtos especiais.(AU)

Mycotoxins in broiler production / Micotoxinas na produção de frangos de corte

The occurrence of mycotoxins has become a problem to be discussed, due to its harmfulness to humans and animals health, and may be an obstacle to the poultry economy. Mycotoxins are toxic metabolites produced by certain species of fungi and may contaminate food. Aflatoxins are mainly produced by Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus, and B1, B2, G1 and G2 are its best known types. Fumonisin, with its B1, B2 or B3 types, are produced by Fusarium, while ochratoxin A is produced by Penicillium and Aspergillus. The main trichothecenes mycotoxins are T-2 toxin, deoxynivalenol and diacetoxyscirpenol. Zearalenone, produced by different species of Fusarium fungi affects chickens only when they are exposed to extremely high levels of contamination. Generally, immunosuppression, hepatotoxicity and nephrotoxicity as a decrease in performance and production gains are the most observed effects. There are several laboratory methods that can be used for the determination of mycotoxins. In order to control the contamination, it is necessary to adopt proper farming practices which prevent fungi growth. Once grains and feed are contaminated, biological, physical and/or chemical decontamination methods may be employed, although the physical process with adsorbents mixed to the feed is more widely used. Due to the importance of mycotoxins to poultry production, it is necessary to adopt measures to prevent contamination, and also develop a control and an anti-fungal growth and toxin production program by reviewing the critical points favorable to the emergence of toxin-producing fungi.

A ocorrência de micotoxinas tornou-se um problema a ser discutido, pois representa riscos à saúde dos animais e humanos, podendo constituir um obstáculo à economia avícola. Micotoxinas são metabólitos tóxicos produzidos por algumas espécies de fungos e podem contaminar os alimentos. Aflatoxinas são majoritariamente produzidas por Aspergillus flavus e Aspergillus parasiticus, sendo B1, B2, G1 e G2 os tipos mais conhecidos. Fumonisinas são do tipo B1, B2 e B3, e produzidas pelo gênero Fusarium, enquanto a ocratoxina A é produzida por fungos da espécie Penicillium e Aspergillus. As principais micotoxinas dos tricotecenos são toxina T-2, deoxynivalenol e diacetoxyscirpenol. A zearalenona, produzida por diferentes espécies de fungos do gênero Fusarium, afeta os frangos apenas quando estes são expostos a níveis extremamente altos de contaminação. De modo geral, são observados efeitos imunossupressores, hepatotóxicos e nefrotóxicos, com queda no desempenho e nos ganhos de produção. Vários são os métodos laboratoriais que podem ser utilizados para a determinação de micotoxinas. Para o controle da contaminação, é necessário adoção de práticas agrícolas correta, com vistas à prevenção do crescimento de fungos. Após a contaminação de grãos e rações, métodos de descontaminação, biológicos, físicos e/ou químicos podem ser empregados, embora o processo físico com adsorventes misturados às rações seja o mais utilizado. Pela importância que as micotoxinas representam à produção de frangos, é necessário adotar medidas que previnam a contaminação e desenvolver programas de controle e combate ao desenvolvimento fúngico e produção de toxinas, revendo os pontos críticos propícios ao aparecimento dos fungos geradores das toxinas.

Mycotoxins in broiler production / Micotoxinas na produção de frangos de corte

The occurrence of mycotoxins has become a problem to be discussed, due to its harmfulness to humans and animals health, and may be an obstacle to the poultry economy. Mycotoxins are toxic metabolites produced by certain species of fungi and may contaminate food. Aflatoxins are mainly produced by Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus, and B1, B2, G1 and G2 are its best known types. Fumonisin, with its B1, B2 or B3 types, are produced by Fusarium, while ochratoxin A is produced by Penicillium and Aspergillus. The main trichothecenes mycotoxins are T-2 toxin, deoxynivalenol and diacetoxyscirpenol. Zearalenone, produced by different species of Fusarium fungi affects chickens only when they are exposed to extremely high levels of contamination. Generally, immunosuppression, hepatotoxicity and nephrotoxicity as a decrease in performance and production gains are the most observed effects. There are several laboratory methods that can be used for the determination of mycotoxins. In order to control the contamination, it is necessary to adopt proper farming practices which prevent fungi growth. Once grains and feed are contaminated, biological, physical and/or chemical decontamination methods may be employed, although the physical process with adsorbents mixed to the feed is more widely used. Due to the importance of mycotoxins to poultry production, it is necessary to adopt measures to prevent contamination, and also develop a control and an anti-fungal growth and toxin production program by reviewing the critical points favorable to the emergence of toxin-producing fungi.(AU)

A ocorrência de micotoxinas tornou-se um problema a ser discutido, pois representa riscos à saúde dos animais e humanos, podendo constituir um obstáculo à economia avícola. Micotoxinas são metabólitos tóxicos produzidos por algumas espécies de fungos e podem contaminar os alimentos. Aflatoxinas são majoritariamente produzidas por Aspergillus flavus e Aspergillus parasiticus, sendo B1, B2, G1 e G2 os tipos mais conhecidos. Fumonisinas são do tipo B1, B2 e B3, e produzidas pelo gênero Fusarium, enquanto a ocratoxina A é produzida por fungos da espécie Penicillium e Aspergillus. As principais micotoxinas dos tricotecenos são toxina T-2, deoxynivalenol e diacetoxyscirpenol. A zearalenona, produzida por diferentes espécies de fungos do gênero Fusarium, afeta os frangos apenas quando estes são expostos a níveis extremamente altos de contaminação. De modo geral, são observados efeitos imunossupressores, hepatotóxicos e nefrotóxicos, com queda no desempenho e nos ganhos de produção. Vários são os métodos laboratoriais que podem ser utilizados para a determinação de micotoxinas. Para o controle da contaminação, é necessário adoção de práticas agrícolas correta, com vistas à prevenção do crescimento de fungos. Após a contaminação de grãos e rações, métodos de descontaminação, biológicos, físicos e/ou químicos podem ser empregados, embora o processo físico com adsorventes misturados às rações seja o mais utilizado. Pela importância que as micotoxinas representam à produção de frangos, é necessário adotar medidas que previnam a contaminação e desenvolver programas de controle e combate ao desenvolvimento fúngico e produção de toxinas, revendo os pontos críticos propícios ao aparecimento dos fungos geradores das toxinas.(AU)

Biogenic amines and mycotoxins concentrations in baled silage from organic and conventional farms / Concentrações de aminas biogênicas e micotoxinas em silagem embalada de fazendas orgânicas e convencionais

The aim of the current study was to investigate biogenic amines and mycotoxins concentrations in baled silage (mainly Poaceae family grasses) prepared in organic and conventional farms and to relate these parameters to fermentative parameters. The mean dry matter (DM) content was 364.10±93.31 and 424.70±95.93g/kg in the silage from organic and conventional farms respectively. The silage samples from organic farms had 17.00% higher (P≤ 0.05) tyramine (TY) than the silage from conventional farms. Conventional farm samples were characterized by 46.00% higher histamine (HIS) (P≤ 0.05), 9.80% higher putrescine (PUT) (P≤ 0.05), 17.30% higher cadaverine (CAD) (P≤ 0.05). Aflatoxins (AFL) (total) and zearalenone (ZEN), T-2/HT-2 concentrations were higher respectively 16.00% (P≤ 0.05) and 13.40% (P≤ 0.05), 1.80% (P≤ 0.05) in the silage prepared in organic farms. Deoxynivalenol (DON) concentration was higher 42.40% (P≤ 0.05) in silage from conventional farms. Volatile fatty acids (VFA), lactic acid, ethanol, pH and ammonia nitrogen showed that the silage samples from organic and conventional farms were of good quality. Our study suggests differences in biogenic amine formation or mycotoxins content in silage from organic and conventional farming, but, overall, the measured values are too low to be relevant for animal health. Furthermore, these differences might as well be due to the difference in dry matter content and plant maturity between the organic and conventional silage samples.(AU)

O objetivo do presente estudo foi investigar concentrações de aminas biogênicas micotoxinas em silagem embalada (principalmente gramíneas da família Poaceae) preparada em fazendas orgânicas e convencionais e relacionar esses parâmetros a parâmetros fermentativos. A massa seca média (MS) foi 364,10±93,31 e 424,70±95,93g/kg na silagem de fazendas orgânicas e convencionais, respectivamente. As amostras de silagem de fazendas orgânicas tinham 17% a mais de tyramina (TY) (p≤ 0,05) que as de fazendas convencionais. As amostras de fazendas convencionais foram caracterizadas por histamina (HIS) 46,00% mais alta (P≤ 0,05), 9,80% putrecina (PUT) mais alta (P≤ 0,05), 17,30% de cadaverina (CAD) mais alta (P≤ 0,05). Aflatoxnas (AFL) (total) e zearalenone (ZEN), T-2/HT-2 tinham concentrações mais altas em respectivamente 16,00% (P≤ 0,05) e 13,40% (P≤ 0,05), 1,80% (P≤ 0,05) na silagem preparada em fazendas orgânicas. Deoxinivalenol (DON) tinha concentração mais alta 42,40% (P≤ 0,05) na silagem de fazendas convencionais. Ácidos graxos voláteis (AGV), ácido lático, etanol, pH e nitrogênio de amônia mostraram que as amostras de silagem de fazendas orgânicas e convencionais tinham boa qualidade. Nosso estudo sugere diferenças na formação biogênica de amônia ou micotoxinas em silagem de fazendas orgânicas ou convencionais mas, em geral, os valores medidos foram muito baixos para serem relevantes à saúde animal. Ademais, essas diferenças podem ser devido à diferença na matéria sólida e maturidade da planta entre as amostras de silagem orgânica e convencional.(AU)

Biogenic amines and mycotoxins concentrations in baled silage from organic and conventional farms / Concentrações de aminas biogênicas e micotoxinas em silagem embalada de fazendas orgânicas e convencionais

The aim of the current study was to investigate biogenic amines and mycotoxins concentrations in baled silage (mainly Poaceae family grasses) prepared in organic and conventional farms and to relate these parameters to fermentative parameters. The mean dry matter (DM) content was 364.10±93.31 and 424.70±95.93g/kg in the silage from organic and conventional farms respectively. The silage samples from organic farms had 17.00% higher (P≤ 0.05) tyramine (TY) than the silage from conventional farms. Conventional farm samples were characterized by 46.00% higher histamine (HIS) (P≤ 0.05), 9.80% higher putrescine (PUT) (P≤ 0.05), 17.30% higher cadaverine (CAD) (P≤ 0.05). Aflatoxins (AFL) (total) and zearalenone (ZEN), T-2/HT-2 concentrations were higher respectively 16.00% (P≤ 0.05) and 13.40% (P≤ 0.05), 1.80% (P≤ 0.05) in the silage prepared in organic farms. Deoxynivalenol (DON) concentration was higher 42.40% (P≤ 0.05) in silage from conventional farms. Volatile fatty acids (VFA), lactic acid, ethanol, pH and ammonia nitrogen showed that the silage samples from organic and conventional farms were of good quality. Our study suggests differences in biogenic amine formation or mycotoxins content in silage from organic and conventional farming, but, overall, the measured values are too low to be relevant for animal health. Furthermore, these differences might as well be due to the difference in dry matter content and plant maturity between the organic and conventional silage samples.(AU)

O objetivo do presente estudo foi investigar concentrações de aminas biogênicas micotoxinas em silagem embalada (principalmente gramíneas da família Poaceae) preparada em fazendas orgânicas e convencionais e relacionar esses parâmetros a parâmetros fermentativos. A massa seca média (MS) foi 364,10±93,31 e 424,70±95,93g/kg na silagem de fazendas orgânicas e convencionais, respectivamente. As amostras de silagem de fazendas orgânicas tinham 17% a mais de tyramina (TY) (p≤ 0,05) que as de fazendas convencionais. As amostras de fazendas convencionais foram caracterizadas por histamina (HIS) 46,00% mais alta (P≤ 0,05), 9,80% putrecina (PUT) mais alta (P≤ 0,05), 17,30% de cadaverina (CAD) mais alta (P≤ 0,05). Aflatoxnas (AFL) (total) e zearalenone (ZEN), T-2/HT-2 tinham concentrações mais altas em respectivamente 16,00% (P≤ 0,05) e 13,40% (P≤ 0,05), 1,80% (P≤ 0,05) na silagem preparada em fazendas orgânicas. Deoxinivalenol (DON) tinha concentração mais alta 42,40% (P≤ 0,05) na silagem de fazendas convencionais. Ácidos graxos voláteis (AGV), ácido lático, etanol, pH e nitrogênio de amônia mostraram que as amostras de silagem de fazendas orgânicas e convencionais tinham boa qualidade. Nosso estudo sugere diferenças na formação biogênica de amônia ou micotoxinas em silagem de fazendas orgânicas ou convencionais mas, em geral, os valores medidos foram muito baixos para serem relevantes à saúde animal. Ademais, essas diferenças podem ser devido à diferença na matéria sólida e maturidade da planta entre as amostras de silagem orgânica e convencional.(AU)

Evaluation of the supplementation of a feed additive as a potential protector against the adverse effects of 2. 5 ppm T-2 toxin on growing broiler chickens / Avaliação da suplementação de um aditivo alimentar como um protetor potencial contra os efeitos adversos de 2, 5ppm de toxina T-2 em frangos em crescimento

A trial was conducted to evaluate a feed additive containing epoxidase activity from a bacterium (Mycofix-S) as a potential protection against the adverse effects of 2.5 ppm dietary T-2 toxin in male growing broiler chickens. A total of 144 one-day-old Ross 308 male chicks were individually wing-banded and allotted into each of the four experimental groups. Group 1: negative control, no T-2 toxin or additive; group 2: Mycofix-S, 2.5 g/kg; group 3: positive control, 2.5 ppm T-2 toxin; group 4: 2.5 ppm T-2 toxin + 2.5 g/kg Mycofix-S. Feed and water were provided ad libitum for 28 days (days 1 to 28 of age). Each experimental treatment was replicated 6 times, with 6 birds per replicate pen. Response variables included performance parameters, serum activity of alkaline phosphatase (ALP) and amylase, relative weight of selected organs and histology of the upper digestive system. T-2 toxin at 2.5 ppm significantly (P = 0.016) decreased the 28-day body weight gain and cumulative feed intake without affecting feed conversion. The feed additive counteracted these adverse effects. Serum enzyme activities were not significantly (P>0.05) affected for the four experimental groups but when data from the groups receiving T-2 toxin was pooled and compared against the pooled data from groups without the toxin a significant decrease in amylase activity was observed in chickens receiving T-2 toxin. The histological examination of the upper digestive system revealed lesions in mouth, esophagus, proventriculus, gizzard and duodenum in the chickens fed T-2 toxin without the additive. Chickens fed T-2 toxin plus the additive showed lesions in the same tissues except in the duodenum. The results of the present study show that the addition of 2.5 g/kg of the feed additive tested protects against adverse effects on performance and also the integrity of the duodenal mucosa.(AU)

Foi realizado um experimento com o objetivo de avaliar um aditivo alimentar contendo atividade de epoxidase de uma bactéria (Mycofix-S) como proteção potencial contra os efeitos adversos de uma dieta com 2,5ppm de toxina T-2 em frangos de corte machos. Um total de 144 pintos machos Ross 308 de um dia de idade foram marcados na asa individualmente e alocados em um de quatro grupos experimentais: grupo 1: controle negativo, sem toxina T-2 ou aditivo; grupo 2: 2,5g/kg de Mycofix-S; grupo 3: controle positivo, 2,5ppm de toxina T-2; grupo 4: 2,5ppm de toxina T-2 + 2,5g/kg de Mycofix-S. Alimento e água foram fornecidos ad libitum por 28 dias (dias um a 28 de idade). Cada tratamento experimental foi replicado seis vezes, com seis pintos por gaiola de replicação. As variáveis de resposta incluíram parâmetros de desempenho, atividade sérica de fosfatase alcalina (ALP) e amilase, peso relativo de órgãos selecionados e histologia do sistema digestivo superior. A toxina T-2 a 2,5ppm diminuiu significativamente (P = 0.016) o ganho de peso corporal aos 28 dias e o consumo de alimento acumulado, sem afetar a conversão alimentar. O aditivo diminuiu os efeitos adversos. As atividades séricas das enzimas não foram afetadas significativamente (P>0.05) nos quatro grupos experimentais, porém, quando os dados dos grupos que receberam a toxina T-2 foram combinados e comparados com o pool de dados dos grupos sem toxina, foi observado um decréscimo significativo da atividade de amilase nos frangos que receberam a toxina T-2. O exame histológico do sistema digestivo superior revelou lesões em boca, esôfago, pró-ventrículo, moela e duodeno nos frangos alimentados com toxina T-2 sem aditivo. Frangos alimentados com toxina T-2 mais aditivo mostraram lesões nos mesmos tecidos, exceto no duodeno. Os resultados do presente estudo mostram que a adição de 2,5g/kg do aditivo alimentar testado protege contra os efeitos adversos sobre o desempenho e a integridade da mucosa duodenal.(AU)

Evaluation of the supplementation of a feed additive as a potential protector against the adverse effects of 2.5 ppm T-2 toxin on growing broiler chickens / Avaliação da suplementação de um aditivo alimentar como um protetor potencial contra os efeitos adversos de 2.5 ppm de toxina T-2 em frangos em crescimento

A trial was conducted to evaluate a feed additive containing epoxidase activity from a bacterium (Mycofix-S) as a potential protection against the adverse effects of 2.5 ppm dietary T-2 toxin in male growing broiler chickens. A total of 144 one-day-old Ross 308 male chicks were individually wing-banded and allotted into each of the four experimental groups. Group 1: negative control, no T-2 toxin or additive; group 2: Mycofix-S, 2.5 g/kg; group 3: positive control, 2.5 ppm T-2 toxin; group 4: 2.5 ppm T-2 toxin + 2.5 g/kg Mycofix-S. Feed and water were provided ad libitum for 28 days (days 1 to 28 of age). Each experimental treatment was replicated 6 times, with 6 birds per replicate pen. Response variables included performance parameters, serum activity of alkaline phosphatase (ALP) and amylase, relative weight of selected organs and histology of the upper digestive system. T-2 toxin at 2.5 ppm significantly (P = 0.016) decreased the 28-day body weight gain and cumulative feed intake without affecting feed conversion. The feed additive counteracted these adverse effects. Serum enzyme activities were not significantly (P>0.05) affected for the four experimental groups but when data from the groups receiving T-2 toxin was pooled and compared against the pooled data from groups without the toxin a significant decrease in amylase activity was observed in chickens receiving T-2 toxin. The histological examination of the upper digestive system revealed lesions in mouth, esophagus, proventriculus, gizzard and duodenum in the chickens fed T-2 toxin without the additive. Chickens fed T-2 toxin plus the additive showed lesions in the same tissues except in the duodenum. The results of the present study show that the addition of 2.5 g/kg of the feed additive tested protects against adverse effects on performance and also the integrity of the duodenal mucosa.(AU)

Foi realizado um experimento com o objetivo de avaliar um aditivo alimentar contendo atividade de epoxidase de uma bactéria (Mycofix-S) como proteção potencial contra os efeitos adversos de uma dieta com 2,5ppm de toxina T-2 em frangos de corte machos. Um total de 144 pintos machos Ross 308 de um dia de idade foram marcados na asa individualmente e alocados em um de quatro grupos experimentais: grupo 1: controle negativo, sem toxina T-2 ou aditivo; grupo 2: 2,5g/kg de Mycofix-S; grupo 3: controle positivo, 2,5ppm de toxina T-2; grupo 4: 2,5ppm de toxina T-2 + 2,5g/kg de Mycofix-S. Alimento e água foram fornecidos ad libitum por 28 dias (dias um a 28 de idade). Cada tratamento experimental foi replicado seis vezes, com seis pintos por gaiola de replicação. As variáveis de resposta incluíram parâmetros de desempenho, atividade sérica de fosfatase alcalina (ALP) e amilase, peso relativo de órgãos selecionados e histologia do sistema digestivo superior. A toxina T-2 a 2,5ppm diminuiu significativamente (P = 0.016) o ganho de peso corporal aos 28 dias e o consumo de alimento acumulado, sem afetar a conversão alimentar. O aditivo diminuiu os efeitos adversos. As atividades séricas das enzimas não foram afetadas significativamente (P>0.05) nos quatro grupos experimentais, porém, quando os dados dos grupos que receberam a toxina T-2 foram combinados e comparados com o pool de dados dos grupos sem toxina, foi observado um decréscimo significativo da atividade de amilase nos frangos que receberam a toxina T-2. O exame histológico do sistema digestivo superior revelou lesões em boca, esôfago, pró-ventrículo, moela e duodeno nos frangos alimentados com toxina T-2 sem aditivo. Frangos alimentados com toxina T-2 mais aditivo mostraram lesões nos mesmos tecidos, exceto no duodeno. Os resultados do presente estudo mostram que a adição de 2,5g/kg do aditivo alimentar testado protege contra os efeitos adversos sobre o desempenho e a integridade da mucosa duodenal.(AU)

ANÁLISE BROMATOLÓGICA E PESQUISA DE MICOTOXINAS EM ALIMENTOS NÃO CONVENCIONAIS PARA CÃES ADULTOS, COMERCIALIZADOS EM BELO HORIZONTE - MG

A alimentação não convencional para cães, comumente denominada alimentação natural, tem ganhado o mercado com a promessa de oferecer um alimento mais saudável, natural e livre dos aditivos utilizados nas indústrias. Porém, os estudos são escassos e não corroboram com essas especulações. Foram adquiridas 44 amostras de 15 empresas que comercializavam seus produtos na cidade de Belo Horizonte (MG), com variados ingredientes. Foram realizadas observações sobre as características dos produtos, além da análise bromatológica em 15 amostras, sendo uma de cada empresa, para quantificação do teor de proteína bruta, extrato etéreo, fibra em detergente neutro, fibra em detergente ácido, cálcio e fósforo, pesquisa bacteriológica em uma amostra e micológica em 12 amostras, além da pesquisa das micotoxinas aflatoxinas, fumonisinas, deoxinivalenol, T2, ocratoxina e zearalenona em 44 amostras. Como principais resultados, foi observado que somente seis empresas possuíam registro no MAPA. Sobre a composição do produto, somente 60% das empresas informaram em rótulo. Constatou-se inadequação em amostras de duas empresas que forneceram os alimentos com peso inferior ao informado na embalagem, chegando a 25% do peso descrito em forma de água livre. Já na análise bromatológica, somente 40% das empresas suplementaram os alimentos com alguma fonte de vitaminas e/ou minerais, e apenas uma apresentou relação Ca:P entre 1:1 e 2:1, conforme recomendado para a espécie. Com exceção de uma amostra, todas apresentaram teor de proteína bruta acima de 30% na matéria seca, contendo cortes cárneos padrão de consumo humano. Sobre a pesquisa microbiológica, foram isoladas as bactérias Enterobacter cloacae e Buttiauxella sp e também foram isolados fungos micotoxigênicos em 58% das amostras analisadas. Já na pesquisa de micotoxinas, foi encontrado um total de 27% das amostras contaminadas, sendo 23% com T-2 e 4% com aflatoxinas. Diante do apresentado, conclui-se que os alimentos não convencionais analisados nesse estudo, apresentaram risco micotoxicológico e poderiam provocar deficiências nutricionais

Unconventional dog food, commonly referred to as natural dog food, has been gaining market share with the promise of offering a healthier, natural, and additive-free dog food. However, studies are scarce and do not support these speculations. A total of 44 samples were acquired from 15 companies that commercialized their products in the city of Belo Horizonte (MG), with varied ingredients. Observations on the characteristics of the products were made, in parallel with bromatological analysis in 15 samples, one from each company, to quantify the content of crude protein, ethereal extract, neutral detergent fiber, acid detergent fiber, calcium and phosphorus, bacteriological research in one sample and mycological research in 12 samples. In addition to research of the mycotoxins aflatoxins, fumonisins, deoxynivalenol, T2, ochratoxin and zearalenone in 44 samples. As main results, it was observed that only six companies were registered in MAPA. About the composition of the product, only 60% of the companies informed on the label. Inadequacy was found in samples from two companies that supplied the food with weight lower than that informed on the package, as much as 25% of the described weight was free water. As for the bromatological analysis, only 40% of the companies supplemented the food with some source of vitamins and/or minerals, and only one presented a Ca:P ratio between 1:1 and 2:1, as recommended for the species. With the exception of one sample, all had crude protein content above 30% in dry matter, containing standard cuts of meat for human consumption. About the microbiological research, Enterobacter cloacae and Buttiauxella sp bacteria were isolated, and mycotoxigenic fungi were also isolated in 58% of the analyzed samples. In mycotoxin research, 27% of the samples were found to be contaminated, 23% with T-2 and 4% with aflatoxins. In view of the presented, it is concluded that the unconventional foods analyzed in this study presented a mycotoxicological risk and could cause nutritional deficiencies.

Aditivos funcionais como alternativas para minimizar os impactos causados pelas micotoxinas na dieta de poedeiras e leitões

As micotoxinas são metabólitos tóxicos secundários produzidos por fungos filamentosos. As diversas espécies de micotoxinas são consideradas uma preocupação mundial quanto a saúde humana e animal. Na cadeia produtiva animal, as micotoxicoses prejudicam a produtividade dos animais. É preciso buscar alternativas que sejam capazes de minimizar os efeitos tóxicos das micotoxinas, por meio de ingredientes adicionados a alimentação com efeitos hepatoprotetores, de adsorção e inativação das toxinas. Desta forma, o objetivo foi determinar os impactos das micotoxinas aflatoxina B1 (AFLB1), T2 e fumonisina B1 (FB1), na produção avícola e de suínos, assim como verificar os efeitos da adição de biocolina vegetal (BV) e um adsorvente à base de lisado de Saccharomyces cerevisiae (LSC) na dieta contaminada desses animais. Para isso, foram realizados três experimentos distintos. No experimento 1, foram utilizadas 64 galinhas poedeiras, divididas em grupo controle T1 (alimentadas com ração basal), grupo T2 (ração basal suplementada com 800 mg/kg de BV), grupo T3 (ração basal contaminada com 2.5 mg/kg de AFLB1) e grupo T4 (ração com 800 mg/kg de BV+ 2.5 mg/kg de AFLAB1). O foco dessa pesquisa foi parâmetros de composição físico-químico de ovos, contagem bacterina total nos ovos (CBT), saúde das aves e desempenho zootécnico. A ingestão de aflatoxina reduziu a taxa de postura das galinhas e a BV não foi capaz de minimizar esse efeito negativo, porém a BV teve efeitos positivos na saúde das galinhas e melhorou a qualidade dos ovos através da ação antioxidante e antimicrobiana. No experimento 2, utilizamos 60 galinhas poedeiras, divididas em grupo NoC (ração basal sem contaminação experimental por micotoxinas, grupo C+ (ração contaminada com 4 ppm de T2 e 20 ppm de fumonisina), grupo C+D500 (ração contaminada com 4 ppm de T2 e 20 ppm de fumonisina + 500 g/ton de LSC, grupo C+D1000 (ração contaminada com 4 ppm de T2 e 20 ppm de fumonisina + 1000 g/ton de LSC e grupo C+D500+U100o (ração contaminada com 4 ppm de T2 e 20 ppm de fumonisina + 500 g/ton de LSC + 1000g/ton Uniwall MOS 25 (ácidos orgânicos, parede celular de levedura e carier mineral). O consumo de ração foi menor nas galinhas que consumiram a ração contaminada pelas micotoxinas. O uso de LSC minimizou os efeitos negativos da micotoxina sobre a taxa de conversão alimentar. As galinhas que ingeriram micotoxinas apresentaram menor resistência e espessura da casca quando comparadas ao NoC. A concentração sérica de espécies reativas de oxigênio foi maior nas galinhas que ingeriram micotoxina apenas no dia 84 em comparação ao NoC. A atividade sérica da glutationa S-transferase foi maior no dia 56 nas galinhas C+D500 e C+D1000 em comparação com outras. Concluímos nesse experimento que o consumo de micotoxinas prejudicou o desempenho e a qualidade dos ovos das galinhas, assim como a adição do lisado de S. cerevisiae e o combinado de outros ingredientes (ácidos orgânicos, a parede celular de leveduras e o transportador mineral) minimizaram alguns efeitos negativos causados por T-2 e FB1. No experimento 3, utilizamos 72 leitões, desmamados com média de 26 dias, divididos em quatro grupos com seis repetições cada. Os tratamentos foram: Afla0Bio0 (sem aflatoxina e sem biocolina); Afla500Bio0 (500 ppb de aflatoxina); Afla0Bio800 800 mg/kg de biocolina; Afla500Bio800 500 ppb de aflatoxina + 800 mg/kg de biocolina. O estudo avaliou o desempenho zootécnico (ganho de peso - GP, consumo de ração CR e conversão alimentar - CA). Amostras de sangue foram coletadas nos dias 0, 10, 20, 30 e 40 do experimento, assim como foram abatidos 24 animais aos 30 dias do experimento para a coleta de fígado, baço e porção do intestino para análise histopatológica. A suplementação com VB na dose usada, nessa fase de creche, teve efeito positivo nos primeitos 10 dias quando consumida por leitões desafiados com AFLB1, mas de modo geral interferiu no desenvolvimento dos leitões quando consumido. Consumo da aflatoxina aumentou atividade das enzimas AST e ALT no soro, assim como uma maior contagem de neutrófilos, menores níveis de triglicerídeos sérico e variáveis de estresse oxidativo tecidual. Muitos dessas alterações foram evitadas e/ou minimizadas pelo consumo de BV, caracterizada por um potencial antioxidante em animais desafiados com aflatoxina B1. Nesse estudo verificamos efeitos positivos da ingestão de BV sobre a saúde dos leitões, mas negativo sobre o desempenho. De maneira geral, concluímos que as micotoxinas prejudicam o desempenho e saúde animal, e que os aditivos aqui estudados podem ser uma alternativa promissora para minimizar estes impactos negativos na produção animal.

Mycotoxins are toxic secondary metabolites produced by filamentous fungi. The various species of mycotoxins are considered a worldwide concern in terms of human and animal health. In the animal production chain, mycotoxicosis impair animal productivity. It is necessary to look for alternatives that are able to minimize the toxic effects of mycotoxins, through ingredients added to the diet with hepatoprotective effects, adsorption and inactivation of toxins. Thus, the objective was to determine the impacts of mycotoxins aflatoxin B1 (AFLB1), T2 and fumonisin B1 (FB1), on poultry and swine production, as well as to verify the effects of the addition of vegetable biocolline (BV) and an adsorbent to the base of Saccharomyces cerevisiae (LSC) lysate in the contaminated diet of these animals. For this, three different experiments were carried out. In experiment 1, 64 laying hens were used, divided into control group T1 (fed with basal feed), group T2 (basal feed supplemented with 800 mg / kg BV), group T3 (basal feed contaminated with 2.5 mg / kg of AFLB1 ) and group T4 (diets with 800 mg / kg of BV + 2.5 mg / kg of AFLAB1). The focus of this research was parameters of physical-chemical composition of eggs, total bacterial egg count (CBT), bird health and zootechnical performance. Ingestion of aflatoxin reduced the laying rate of the chickens and BV was not able to minimize this negative effect, however BV had positive effects on the health of the chickens and improved the quality of the eggs through the antioxidant and antimicrobial action. In experiment 2, we used 60 laying hens, divided into a NoC group (basal feed without experimental mycotoxin contamination, group C + (feed contaminated with 4 ppm of T2 and 20 ppm of fumonisin), group C + D500 (feed contaminated with 4 ppm of T2 and 20 ppm of fumonisin + 500 g / ton of LSC, group C + D1000 (ration contaminated with 4 ppm of T2 and 20 ppm of fumonisin + 1000 g / ton of LSC and group C + D500 + U100o (ration contaminated with 4 ppm of T2 and 20 ppm of fumonisin + 500 g / ton of LSC + 1000g / ton Uniwall MOS 25 (organic acids, yeast cell wall and mineral carier). Feed consumption was lower in chickens that consumed the feed contaminated by mycotoxins The use of LSC minimized the negative effects of mycotoxin on the feed conversion rate Chickens that ingested mycotoxins showed less resistance and thickness of the shell when compared to NoC. The serum concentration of reactive oxygen species was higher in chickens that ingested mycotoxin. only on di to 84 compared to NoC. The serum activity of glutathione S-transferase was higher on day 56 in chickens C + D500 and C + D1000 compared to others. We concluded in this experiment that the consumption of mycotoxins impaired the performance and quality of the eggs of the chickens, as well as the addition of the S. cerevisiae lysate and the combination of other ingredients (organic acids, the yeast cell wall and the mineral transporter) minimized some negative effects caused by T-2 and FB1. In experiment 3, we used 72 piglets, weaned for an average of 26 days, divided into four groups with six repetitions each. The treatments were: Afla0Bio0 - (without aflatoxin and without biocolina); Afla500Bio0 - (500 ppb of aflatoxin); Afla0Bio800 - 800 mg / kg of biocholine; Afla500Bio800 - 500 ppb of aflatoxin + 800 mg / kg of biocholine. The study evaluated zootechnical performance (weight gain - GP, feed intake - CR and feed conversion - CA). Blood samples were collected on days 0, 10, 20, 30 and 40 of the experiment, as well as 24 animals were slaughtered at 30 days of the experiment for the collection of liver, spleen and intestine portion for histopathological analysis. Supplementation with BV in the dose used, in this daycare phase, had a positive effect in the first 10 days when consumed by piglets challenged with AFLB1, but in general it interfered in the development of the piglets when consumed. Aflatoxin consumption increased the activity of the AST and ALT enzymes in the serum, as well as a higher neutrophil count, lower serum triglyceride levels and tissue oxidative stress variables. Many of these changes were avoided and / or minimized by the consumption of BV, characterized by an antioxidant potential in animals challenged with aflatoxin B1. In this study, we verified positive effects of BV ingestion on piglet health, but negative on performance. In general, we conclude that mycotoxins impair animal performance and health, and that the additives studied here can be a promising alternative to minimize these negative impacts on animal production.

Exposure Assessment to Multiple Mycotoxins in Rural Areas of São Paulo and Santa Catarina States, Brazil

As micotoxinas são metabólitos secundários produzidos por fungos que ocorrem naturalmente em alimentos, das quais podem causar uma grande variedade de efeitos tóxicos em vertebrados, incluindo humanos. Os objetivos deste trabalho foram avaliar a co-ocorrência de 11 micotoxinas em alimentos, rações para frangos de corte, poedeiras e gado leiteiro, avaliar a exposição humana a micotoxinas através de análise de alimentos versus dados de consumo e biomarcadores de múltiplas micotoxinas na urina, e caracterizar o risco associado de exposição a micotoxinas em áreas rurais brasileiras. Os procedimentos de amostragem foram conduzidos em 38 propriedades leiteiras e avícolas de pequeno porte nos arredores de Pirassununga e Descalvado (SP), Pinhalzinho e Erval Velho (SC). Nestas fazendas, um total de 86 voluntários foram recrutados e instruídos a fornecer amostras da primeira urina da manhã (N = 162) em dois períodos de amostragem (abril-maio/2016 e dezembro/2016), juntamente com amostras de arroz (N = 66) , feijão (N = 59), trigo (N = 39), farinha de milho (N = 21) e fubá (N = 18) disponíveis em suas residências. Amostras de ração para frangos de corte (N = 10), poedeiras (N = 20) e bovinos leiteiros (N = 15) também foram coletadas. Todas as amostras foram analisadas por cromatografia líquida de ultra-performance acoplada a espectrometria de massas (UPLC-MS/MS) para determinação de aflatoxinas (AF) B1, B2, G1 e G2, fumonisinas (FB) B1 e B2, ocratoxina A (OTA), zearalenona (ZEN), desoxinivalenol (DON), toxina T-2 e toxina HT-2 em produtos alimentícios e rações, e AFM1, AFP1, AFQ1, FB1, OTA, T-2, HT-2, DON, de-epóxido-oxinivalenol (DOM-1), ZEN, -zearalenol (-ZEL), -zearalenol (-ZEL) e 15-acetil-DON em amostras de urina. Os níveis de micotoxinas na urina foram ajustados à concentração de creatinina em cada amostra analisada. Em amostras de ração, os níveis médios de AF total, FB total, ZEN e DON foram de 100 g/kg, 680 g/kg, 160 g/kg e 200 g/kg, respectivamente. A co-ocorrência de duas ou mais micotoxinas foi confirmada em 51% das amostras de ração. Os resultados indicam uma alta exposição de animais de fazenda à micotoxinas na ração, enfatizando a necessidade de melhorar a qualidade das rações em fazendas de pequena escala no Brasil, referente as micotoxinas, e a necessidade de incluir ração na legislação brasileira, especialmente para AF, FB e ZEN. Os níveis de micotoxinas acima dos níveis máximos permitidos no Brasil (LMP) foram encontrados em arroz (1,5%), farinha de trigo (12,8%) e farinha de milho (14,3%). As determinações da urina revelaram a presença de AFM1 e AFP1, DON, OTA, FB1 e ZEN nos níveis de 0,02-12,0 ng/mg de creatinina. Em relação à ingestão provável diária (IPD) com base em dados de alimentos, apenas ZEN (0,156 g/kg p.c./dia) apresentou um Quociente de Risco (HQ) acima do tolerável (> 1). Os valores de IPD baseados nos níveis urinários para DON, OTA e AF total foram 84,914, 0,031 e 0,001 g/kg p.c./dia, respectivamente, resultando em valores de HQ> 1, o que pode indicar riscos para a saúde da população estudada. Uma intervenção informal por meio de atividades educacionais e entrega de um folheto informativo durante o primeiro período de amostragem não alterou os níveis de exposição às micotoxinas no segundo período de amostragem. Mais estudos são necessários para identificar itens alimentares além dos analisados neste trabalho como fontes de micotoxinas diárias, bem como a contribuição da inalação de pós contaminados para a exposição. Este é o primeiro estudo a relatar a avaliação de risco de micotoxinas com base em alimentos e níveis urinários em áreas rurais no Brasil.

Mycotoxins are secondary metabolites produced by fungi that occur naturally in foodstuffs, which can cause a large variety of toxic effects on vertebrates including humans. The objectives of this work were to evaluate the co-occurrence of 11 mycotoxins in food products, feed for broiler chicks, laying hens and dairy cattle, assess the human exposure to mycotoxins through food analysis versus consumption data and multimycotoxin biomarkers in urine, and characterize the associated risk of mycotoxin exposure in Brazilian rural areas. Sampling procedures were conducted in 38 small-scale dairy and poultry farms in the surroundings of Pirassununga and Descalvado (State of São Paulo), Pinhalzinho and Erval Velho (State of Santa Catarina). In these farms a total of 86 volunteers were recruited and instructed to provide samples of the morning urine (N = 162) in two sampling periods (April-May/2016 and December/2016), along with samples of rice (N = 66), bean (N = 59), wheat (N = 39), corn flour (N = 21) and corn meal (N = 18) available in their households. Samples of feed for broilers (N = 10), laying hens (N = 20) and dairy cattle (N = 15) were also collected. All samples were analyzed by ultra-performance liquid chromatography coupled to mass spectrometry (UPLCMS/MS) for determination of aflatoxins (AF) B1, B2, G1 and G2, fumonisins (F) B1 and B2, ochratoxin A (OTA), zearalenone (ZEN), deoxynivalenol (DON), toxin T-2 and toxin HT-2 in food products and feeds, and AFM1, AFP1, AFQ1, FB1, OTA, T-2, HT-2, DON, de-epoxideoxynivalenol (DOM-1), ZEN, -zearalenol (-ZEL), -zearalenol (-ZEL) and 15-acetyl-DON in urine samples. The mycotoxin levels in urine were adjusted to creatinine concentration in each sample analyzed. In feed samples, median levels of total AF, total FB, ZEN and DON were 100 µg/kg, 680 µg/kg, 160 µg/kg and 200 µg/kg, respectively. The co-occurrence of two or more mycotoxins was confirmed in 51% of feed samples. Results indicate a high exposure of farm animals to mycotoxins in the feed, hence emphasizing the need to improve the feed quality regarding the contamination with mycotoxins in small-scale farms in Brazil, and the necessity of include feed in Brazilian regulation, especially for AF, FB, and ZEN. Mycotoxin levels above the Brazilian maximum permitted levels (MPL) were found in rice (1.5%), wheat flour (12.8%) and corn flour (14.3%) samples. Urine determinations revealed the presence of AFM1 and AFP1, DON, OTA, FB1 and ZEN at levels of 0.02-12.0 ng/mg creatinine. Regarding the probable daily intake (PDI) based on food data, only ZEN (0.156 µg/kg b.w./day) had a Hazard Quotient (HQ) above the tolerance (> 1). PDI values based on urinary levels for DON, OTA and total AF were 84.914, 0.031 and 0.001 µg/kg b.w./day, respectively, resulting in HQ values > 1, which may indicate health risks for the population studied. An informal intervention by means of educational activities and delivery of an information flyer during the first sampling period did not change the exposure levels to mycotoxins in the second sampling period. Further studies are needed to identify food items other than those analyzed in this work as sources of dietary mycotoxins, as well as the contribution of inhalation of contaminated dusts for the exposure. This is the first study to report the risk assessment of mycotoxins based on food and urinary levels in rural areas in Brazil.

Determinação simultânea de micotoxinas em cereais.

Micotoxinas são metabólitos secundários produzidos por fungos filamentosos que podem estar presentes em inúmeros alimentos consumidos mundialmente. Quando alimentos contaminados são ingeridos por humanos ou animais podem ser considerados tóxicos. Diante disso, o objetivo do estudo foi aplicar um método quantitativo para as micotoxinas com e sem legislação vigente presentes em amostras de trigo e aveia em 2016 e 2017 e milho roxo em 2017. Foram analisadas 465 amostras, sendo 91 de aveia e 374 de trigo provenientes dos estados de Santa Catarina e Rio Grande do Sul e 63 amostras de milho roxo provenientes do Peru. Determinou-se a frequência de ocorrência e a concentração das micotoxinas alternariol (AOH), alternariolmetileter (AME), tentoxina, neosolaniol, nivalenol (NIV), vortmanina, 3-acetil deoxinivalenol, 15-acetil deoxinivalenol, deoxinivalenol (DON), zearalenona (ZEA), aflatoxina B1 (AB1), aflatoxina B2, aflatoxina G1, aflatoxina G2, fumonisina B1, fumonisina B2, fumonisina B3, ocratoxina A, ocratoxina , toxina T2, toxina HT2, diacetoxiscirpenol, fusarenon-x, ácido ciclopiazônico, gliotoxina, agroclavina e citroviridina. Foram encontrados níveis médios de micotoxinas dentro dos padrões da legislação brasileira, porém alguns metabólitos detectados não apresentam especificações para os cereais estudados. As principais micotoxinas encontradas em aveia foram AME e AOH, com frequência de ocorrência de 100 e 98%, respectivamente. As mesmas micotoxinas foram as principais encontradas em trigo,, seguidas de NIV, DON, ZEA e AB1, dependendo do ano de coleta das amostras. No milho roxo não foram encontrados micotoxinas presentes na legislação brasileira. Todas as micotoxinas presentes na legislação apresentaram níveis abaixo do limite de quantificação. As principais micotoxinas encontradas em milho roxo foram AME e AOH, com frequência de ocorrência de 14,3 e 7,9%, respectivamente. Para as amostras de trigo e aveia conclui-se que em ambos os anos e cereais foram detectadas micotoxinas não incluídas na legislação, e alerta-se para a contaminação por micotoxinas que estão regulamentadas, em alguns casos acima dos níveis permitidos. A metodologia utilizada para determinação das micotoxinas foi cromatografia liquida de alta eficiência acoplada a espectrometria de massas. Esta é a primeira pesquisa de micotoxinas emergentes em aveia, trigo e milho roxo.

Mycotoxins are secondary metabolites produced by filamentous fungi present in oat and wheat and several foodstuffs consumed worldwide. When contaminated food items are ingested, they may be toxic to humans and animals. Thus, this study aimed to apply a qualitative screening method and quantify the mycotoxins with and without current legislation present in oat and wheat samples in 2016 and 2017 and in purple maize in 2017. Four hundred and sixty-five samples of oat (91) and wheat (374) from the states of Rio Grande do Sul and Santa Catarina states and 63 samples of Peuvian purple maize from Peru were analyzed. The frequency of occurrence and concentration of the following mycotoxins were determined: alternariolmetileter (AME), alternariol (AOH), tentoxin, neosolaniol, nivalenol (NIV), wortmannin, deoxynivalenol (DON), 3-acetyl deoxynivalenol, 15-acetyl deoxynivalenol, zearalenone (ZEA), aflatoxin B1 (AFB1), aflatoxin B2, aflatoxin G1, aflatoxin G2, fumonisin B1, fumonisin B2, fumonisin B3, ochratoxin A, ochratoxin , T-2 toxin, HT-2 toxin, fusarenon x, cyclopiazonic acid, gliotoxin, agroclavin and citreoviridin. Mean levels of mycotoxins within the standards of the Brazilian legislation were found, but some of the detected metabolites do not present specifications for the studied cereals. The main mycotoxins detected in oat were AME and AOH, with a frequency of occurrence of 100 and 98%, respectively. These were also the main mycotoxins found in wheat, followed by NIV, DON, ZEA and AFB1, depending on the year of sample collection. For purple maize no mycotoxins were found in the Brazilian legislation. All mycotoxins present in the legislation had levels below the limit of quantification. The main mycotoxins found in purple maize were also AME and AOH, with frequency of occurrence of 14.3 and 7.9%, respectively It may be concluded that mycotoxins without guidance levels were detected in both cereals and years. Moreover, a warning must be made regarding the contamination at high concentrations by mycotoxins which are regulated, in some cases exceeding the permitted levels. For wheat and oatmeal samples, it may be concluded that in both years and cereals mycotoxins not included in the legislation were detected, and a warning must be made for the contamination by mycotoxins that are regulated, in some cases above the permitted levels. This is the first survey to analyze emerging mycotoxins in oats, wheat and purple corn.

AVALIAÇÃO DA RESPOSTA IMUNE CELULAR APÓS A VACINA DE Salmonella GALLINARUM EM AVES INTOXICADAS COM AFLATOXINAS

O objetivo da pesquisa foi avaliar o comportamento das células do sistema imune após a aplicação da vacina SG9R (Salmonella Gallinarum), correlacionando a intoxicação deaflatoxinas (AFLA) em poedeiras comerciais com e sem adsorvente (AAM) na dieta. Foram utilizadas poedeiras comerciais de linhagem Brown com um dia de idade. A vacina foi utilizada de forma subcutânea na região dorsal do pescoço, aplicando 0,2 ml por ave. As coletas de sangue foram realizadas 3, 14 e 21 dias após a vacinação. Durante o experimento foram utilizadas duas doses de Aflatoxinas (1 e 2,5 ppm) e duas concentrações de adsorvente (1 e 2,5 kg/ton), de acordo com os seguintes tratamentos: T1 (controle); T2: 9R + 2,5 ppm AFLA + 2,5 kg/ton AAM; T3: 9R; T4: 9R +2,5 ppm AFLA; T5: 2,5 ppm AFLA; T6: 2,5 ppm AFLA + 2,5kg/ ton AAM; T7: 9R + 1 ppm AFLA; T8: 9R + 1 ppm AFLA + 1 kg/ton AAM. As avescomeçaram a consumir AFLA/AAM desde o primeiro dia. As células avaliadas foram: linfócitos T citotóxicos de mucosa (CD4-TCRv1+), linfócitos T citotóxicos ativados (CD8+CD28-), linfócitos T auxiliares de mucosa (CD4+TCRv1+), linfócitos B (Bu-1ª +), monócitos (Kul+MHCII+), monócitos fagocíticos (%) e heterófilos fagocíticos (%). Os marcadores celulares foram interpretados por citometria de fluxo. A vacina SG9R reduziu de forma significativa (p0,05) a concentração de linfócitos T citotóxicos ativados (CD8+CD28-), tornando esse marcador um bom parâmetro para ser analisado antes e após a imunização com SG9R. Os monócitos (Kul+MHCII+), apresentaram aumento estatisticamente significante (p0,05) de concentração após a vacinação. As aflatoxinas demonstraram um efeito supressivo sobre os linfócitos T auxiliares de mucosa (CD4 + TCRV1+), linfócitos T auxiliares periféricos (CD4 +TCRV1-) e linfócitos T citotóxicos de mucosa (CD4-TCRV1+) em aves vacinadas, apresentando diferença significativa (p0,05) nas coletas com 3 e 14 dias após a vacinação. A inclusão de 2,5 kg/ton de adsorvente na ração na presença da vacina, neutralizou os efeitos da aflatoxicose relatados acima, especialmente nas concentrações de linfócitos T auxiliares de mucosa (CD4+TCRV1+), linfócitos T auxiliares periféricos (CD4+TCRV1-) e linfócitos T citotóxicos de mucosa (CD4-TCRV1+). As concentrações dessas células aumentaram significativamente (p0,05) 21 dias após a vacinação. Portanto, a concentração de células do sistema imune pode apresentar diferenças após a vacina SG9R. Os efeitos supressivos das aflatoxinas junto a população de linfócitos T ficaram evidentes após a vacinação. No entanto, esses efeitos foram neutralizados quando utilizado 2,5 kg/ton de adsorvente na ração. Tifo Aviário; Aflatoxinas; Aditivo Antimicotoxinas.

The objective of this research was to evaluate the behavior of some specific immune cells after applying SG9R (Salmonella Gallinarum) live vaccine. The effect of adding Aflatoxin (AFLA) and an anti-mycotoxin absorbent to the rations was also evaluated. One-day-old commercial layers were used in this experiment. Each bird was vaccinated subcutaneously in the neck with 0.2 ml of the vaccine.Blood samples were collected at 3, 14 and 21 days post vaccination. The concentrations of the Aflatoxins mixed in the feed in the trial were 1 and 2.5 ppm (1 and 2.5 kg/ton). The concentrations of the anti-mycotoxins absorbent used were 1-2.5 kg / ton. The following treatments were used: T1: control; T2: 9R + 2.5 ppm AFLA + 2.5 kg/ton AAM; T3: 9R; T4: 9R +2.5 ppm AFLA; T5: 2.5 ppm AFLA; T6: 2.5 ppm AFLA + 2.5 kg/ton AAM; T7: 9R + 1 ppm AFLA; T8: 9R + 1 ppm AFLA + 1 kg/ton AAM. Birds started consuming Aflatoxin and the anti-mycotoxin absorbent at one day of age. The following cells were evaluated: peripheral helper T lymphocytes (CD4+TCRv1-), helper T lymphocytes of mucosa (CD4+TCRv1+), cytotoxic T lymphocytes of mucosa (CD4-TCRv1+), Activated cytotoxic T lymphocytes (CD8+CD28-), B lymphocytes (Bu-1a+), monocytes (Kul+MHCII+), phagocytic monocytes (%) and phagocytic heterophils (%). Cells markers were measured by flow cytometry. SG9R vaccination significantly decreased (p0.05) the concentration of activated cytotoxic T lymphocytes (CD8+CD28-). Making this marker a good parameter to be analyzed before and after immunization with SG9R. The monocytes (Kul+MHCII+) presented a statistically significant increase (p0.05) in concentration after vaccination. In the treatments where aflatoxins were present we detected a large suppressive effect on the mucosal helper T lymphocytes (CD4+TCRV1+), peripheral helper T lymphocytes (CD4+TCRV1-) and cytotoxic T lymphocytes of mucosa (CD4-TCRV1+) in vaccinated birds. With significant difference (p0.05) in the collections with 3 and 14 days after vaccination. The inclusion of 2.5 kg of the adsorbent in the diet per tonne of feed neutralized the effects of aflatoxicoses reported above, especially in the concentrations of helper T lymphocytes of mucosa (CD4+TCRV1+), peripheral (CD4+TCRV1-) and cytotoxic of mucosa (CD4-TCRV1+). Increasing the concentration of these cells in the significant difference (p0.05) 21 days after vaccination. Therefore, the concentration of immune system cells may show differences after the SG9R vaccine. The suppressive effects of aflatoxins on the T lymphocyte population were evident after vaccination. However, these effects were neutralized with 2.5 kg / ton of adsorbent.

Production of aflatoxin and cyclopiazonic acid by Aspergillus flavus strains isolate from peanuts / Produção de aflatoxinas e ácido ciclopiazônico por cepas de Aspergillus flavus isoladas de amendoim

Aspergillus flavus is a filamentous fungus that can produce aflatoxins and cyclopiazonic acid, and the presence of these mycotoxins in food and feed can lead to a toxic effect on humans and animals. Strains of A. flavus producing aflatoxin and cyclopiazonic acid are often isolated from peanuts, indicating the the co-occcurrence of these toxins in the natural substrate. In this study, we isolated 47 strains of A. flavus on peanut kernels and hulls during different stages of fruit ripening and its storage. Of the isolated strains, we assessed the potential for aflatoxin and cyclopiazonic acid production, in which 91.5% could produce aflatoxins and 70% produced cyclopiazonic acid; 63.8% produced both toxins and 2.1% produced no toxin. The presence of toxigenic A. flavus strains in peanut samples indicate a potential risk of contamination of these products, if they are exposed to environmental conditions that are favorable to fungal growth and mycotoxin production.

Aspergillus flavus é um fungo filamentoso que pode produzir aflatoxinas e لcido ciclopiazônico, sendo que a presença dessas micotoxinas em alimentos e raçُes pode levar a um efeito tَxico no homem e em animais. Cepas de A. flavus produtoras de aflatoxinas e لcido ciclopiazônico sمo frequentemente isoladas do amendoim, indicando a natural co-ocorrência dessas toxinas neste substrato. Neste estudo, foram isoladas 47 cepas de Aspergillus flavus em grمos e cascas de amendoim durante diferentes fases de maturaçمo do fruto e também durante seu armazenamento. Das cepas isoladas, foram avaliados os potenciais para produçمo de aflatoxinas e لcido ciclopiazônico, em que 91,5% foram produtoras de aflatoxinas e 70% produziram لcido ciclopiazônico, sendo que 63,8% produziram ambas as toxinas e 2,1% nمo produziu nenhuma. A presença de cepas toxigênicas de A. flavus nas amostras de amendoim analisadas indica um risco potencial da contaminaçمo deste produto, caso seja exposto a condiçُes ambientais favorلveis ao crescimento do fungo e produçمo de micotoxinas.

Production of aflatoxin and cyclopiazonic acid by Aspergillus flavus strains isolate from peanuts / Produção de aflatoxinas e ácido ciclopiazônico por cepas de Aspergillus flavus isoladas de amendoim

Aspergillus flavus is a filamentous fungus that can produce aflatoxins and cyclopiazonic acid, and the presence of these mycotoxins in food and feed can lead to a toxic effect on humans and animals. Strains of A. flavus producing aflatoxin and cyclopiazonic acid are often isolated from peanuts, indicating the the co-occcurrence of these toxins in the natural substrate. In this study, we isolated 47 strains of A. flavus on peanut kernels and hulls during different stages of fruit ripening and its storage. Of the isolated strains, we assessed the potential for aflatoxin and cyclopiazonic acid production, in which 91.5% could produce aflatoxins and 70% produced cyclopiazonic acid; 63.8% produced both toxins and 2.1% produced no toxin. The presence of toxigenic A. flavus strains in peanut samples indicate a potential risk of contamination of these products, if they are exposed to environmental conditions that are favorable to fungal growth and mycotoxin production. (AU)

Aspergillus flavus é um fungo filamentoso que pode produzir aflatoxinas e لcido ciclopiazônico, sendo que a presença dessas micotoxinas em alimentos e raçُes pode levar a um efeito tَxico no homem e em animais. Cepas de A. flavus produtoras de aflatoxinas e لcido ciclopiazônico sمo frequentemente isoladas do amendoim, indicando a natural co-ocorrência dessas toxinas neste substrato. Neste estudo, foram isoladas 47 cepas de Aspergillus flavus em grمos e cascas de amendoim durante diferentes fases de maturaçمo do fruto e também durante seu armazenamento. Das cepas isoladas, foram avaliados os potenciais para produçمo de aflatoxinas e لcido ciclopiazônico, em que 91,5% foram produtoras de aflatoxinas e 70% produziram لcido ciclopiazônico, sendo que 63,8% produziram ambas as toxinas e 2,1% nمo produziu nenhuma. A presença de cepas toxigênicas de A. flavus nas amostras de amendoim analisadas indica um risco potencial da contaminaçمo deste produto, caso seja exposto a condiçُes ambientais favorلveis ao crescimento do fungo e produçمo de micotoxinas. (AU)

Micotoxinas no milho roxo peruano.

O milho roxo é uma variedade de milho que é produzido nos Andes peruanos. Sua cor característica é pela presença do pigmento antiocianina que apresenta propriedades antioxidantes, antimutagênicas, anticancerígenas e antidiabéticas. Estas características fizeram com que além de ser usado como corante, seja utilizado como matéria prima na elaboração de vários subprodutos. Atualmente o Peru exporta este insumo, porém, pela falta de regulamentação e por ser considerado um produto orgânico, não são exigidas análises de micotoxinas. Estas toxinas, podem ser produzidas por fungos filamentosos em qualquer etapa da cadeia alimentícia do milho. O seu consumo por humanos ou animais pode provocar efeitos carcinogênicos, mutagênicos, hepatotóxicos, estrogênicos, imunotóxicos e nefrotóxicos, motivo pelo qual órgãos internacionais determinaram limites máximos toleráveis (LMT) de micotoxinas em alimentos para tentar controlar a exposição. Considerando os possíveis efeitos que as micotoxinas podem ocasionar nos consumidores de milho roxo peruano, objetivou-se determinar a presença de micotoxinas neste milho através da identificação e quantificação por LC-MS/MS. 82 amostras de milho roxo foram obtidas em diferentes mercados do Peru em dois períodos: dezembro de 2015 a março de 2016 e março a abril de 2017. As micotoxinas analisadas foram as aflatoxinas, fumonisinas, zearelenona, ocratoxina A e os seguintes tricotecenos: deoxinivalenol, nivalenol, fusarenona X, deacetoxiscirpenol, 3 acetil-DON, toxina HT-2 e toxina T-2. As micotoxinas com maior frequência foram aflatoxinas e fumonisinas, 64,6 e 63,4%, respectivamente, com co-ocorrência destas duas micotoxinas em 45,1% das amostras. Somente em uma amostra foi quantificado zearalenona (24,4 µg/kg), enquanto que a ausência de ocratoxina A e tricotecenos foi verificado. Considerando os LMT, implementados pela Comunidade Europeia (EC, 2006; 2007; 2013), 12% das amostras analisadas apresentaram concentrações superiores ao LMT de 1000 µg kg-1 para fumonisinas e uma amostra apresentou LMT de 10 µg kg-1 superior para aflatoxinas. No entanto, considerando a legislação brasileira, 9,8% das amostras apresentaram níveis superiores ao LMT de 5000 µg/kg de fumonisinas (BRASIL, 2011; 2013; 2017). Esta é a primeira pesquisa que avalia a ocorrência de micotoxinas no milho roxo peruano e identifica que esse milho pode constituir uma fonte de intoxicação, oferecendo risco à saúde pública. A cadeia produtiva deste grau precisa de controles para determinar os fatores que influenciam na apresentação de micotoxinas e implementar uma legislação com os LMT de micotoxinas neste produto.

Purple corn is a variety of corn that is produced in the Peruvian Andes. Its characteristic color is by the presence of the pigment called antiocyanine that presents antioxidant, antimutagenic, anticancer and anti-diabetic properties. These characteristics have made that in addition to being used as a dye, is used as raw material in the elaboration of several by-products. Currently Peru exports this input, however, due to the lack of regulation and because it is considered an organic product, mycotoxin analyzes are not required. These toxins can be produced by filamentous fungi at any stage of the maize food chain. Its consumption by humans or animals can cause carcinogenic, mutagenic, hepatotoxic, estrogenic, immunotoxic and nephrotoxic effects, which is why international organisms have established maximum tolerable limits (MTL) of mycotoxins in foods to try to control exposure. Considering the possible effects of mycotoxins on consumers of Peruvian purple maize, the objective was to determine the presence of mycotoxins in this corn through LC-MS/MS. A total of 82 samples of purple maize were obtained from different Peruvian markets in two periods: December 2015 to March 2016 and March to April 2017. The mycotoxins analyzed were aflatoxins, fumonisins, zearelenone, ochratoxin A and the following trichothecenes: deoxynivalenol, nivalenol, fusarenone X, deacetoxyscirpenol, 3-acetyl-DON, HT-2 and T-2. It was verified that the most prevalent mycotoxins were aflatoxins and fumonisins, with a prevalence of 64.6 and 63.4%, respectively, with co-occurrence of these two mycotoxins in 45.1% of the samples. Only one sample had a quantifiable concentration for zearalenone and any sample was contaminated by ochratoxin A and trichothecenes. Considering the MTLs implemented by the European Community (EC, 2006, 2007, 2013), 12% of the analyzed samples had concentrations higher than the MTL of 1000 g kg-1 for fumonisins and one sample had MTL of 10 g kg-1 higher for aflatoxins. However, considering the Brazilian legislation, 9.8% of the samples had levels above the MTL of 5000 g kg-1 of fumonisins (BRASIL, 2011, 2013, 2017). This is the first research that evaluates the occurrence of mycotoxins analyzed by LC-MS/MS in Peruvian purple maize and identifies that maize may constitute a source of intoxication, posing a risk to public health. Controls are required in the production chain of this grain and the implementation of legislation with MTLs of mycotoxins.

Efeitos da administração da aflatoxina, fumonisina e curcumina, isoladas ou associadas, sobre a resposta imunológica humoral e determinação de produtos de biotransformação em frangos de corte

O objetivo da pesquisa foi avaliar os efeitos da AFB1 e FB1, isoladas e associadas e com ou sem a inclusão de um antioxidante (cúrcuma) em frangos de corte, utilizando-se os seguintes tratamentos (T): T1 (controle): 0 AFB1 + 0 FB1 + 0 Cúrcuma; T2: 0 AFB1 + 0 FB1 + 222 mg/kg Cúrcuma; T3: 0 AFB1 + 20 mg/kg FB1 + 0 Cúrcuma; T4: 0 AFB1 + 20 mg/kg FB1 + 222 mg/kg Cúrcuma; T5: 0,5 mg/kg AFB1 + 0 FB1 + 0 Cúrcuma; T6: 0,5 mg/kg AFB1 + 0 FB1 + 222 mg/kg Cúrcuma; T7: 0,5 mg/kg AFB1 + 20 mg/kg FB1 + 0 Cúrcuma; T8: 0,5 mg/kg AFB1 + 20 mg/kg FB1 + 222 mg/kg Cúrcuma. Os parâmetros avaliados incluíram: conversão alimentar, ganho de peso, consumo alimentar, proteínas séricas, hematologia, enzimas hepáticas, histopatologia de vísceras, resposta vacinal, resíduos de aflatoxinas e fumonisina em vísceras e músculos. Os dados foram analisados como um fatorial 2 x 2 x 2 por análise de variância. Não houve interação significativa para os três fatores analisados no desempenho zootécnico, porém houve diferença significativa nas dietas contendo aflatoxina, quando comparada com as outras dietas, para todas as variáveis analisadas. A AST e LDH foram as únicas variáveis significativas para a interação de todos os fatores (AFB1, FB1 e CMT), porém as outras variáveis, exceto a GGT, apresentaram diferença significativa nas dietas contendo aflatoxina, quando comparada com as outras dietas, para todas as variáveis analisadas. As lesões histopatológicas no fígado, rim e bursa de Fabricius foram aumentando gradualmente do tratamento controle até o tratamento contendo adição de aflatoxina e fumonisina, com ou sem cúrcuma, sendo que o efeito mais severo foi observado nos órgãos desses tratamentos. Não houve diferença significativa com a inclusão da cúrcuma. Não houve nenhuma variável significativa para a interação de todos os fatores avaliados para a biometria dos órgãos, porém fígado, rim e coração apresentaram diferença significativa nas dietas contendo aflatoxina, quando comparada com as outras dietas, para todas as variáveis analisadas. Nenhuma variável foi significativa para a interação de todos os fatores avaliados para o hemograma aos 21 dias, porém aos 42 dias, leucócitos, linfócitos e basófilos apresentaram diferença significativa para a interação de todos os fatores. Não houve diferença estatística para a interação dos três fatores analisados para os títulos de anticorpos para a doença de Newcastle. Os resíduos de FB2 no fígado e AFB2 no músculo peitoral foram as únicas variáveis significativas para a interação de todos os fatores analisados. Os resultados obtidos indicam que não houve efeito da cúrcuma na diminuição dos efeitos deletérios da aflatoxina e fumonisina.

The objective of this research project was to evaluate the effects of AFB1 and FB1, alone or in combination and associated or not with an antioxidant (turmeric) in broiler chickens, using the following treatments (T): T1 (control): 0 AFB1 + 0 FB1 + 0 Turmeric; T2: 0 AFB1 + 0 FB1 + 222 mg/kg Turmeric; T3: 0 AFB1 + 20 mg/kg FB1 + 0 Turmeric; T4: 0 AFB1 + 20 mg/kg FB1 + 222 mg/kg Turmeric; T5: 0.5 mg/kg AFB1 + 0 FB1 + 0 Turmeric; T6: 0.5 mg/kg AFB1 + 0 FB1 + 222 mg/kg Turmeric; T7: 0.5 mg/kg AFB1 + 20 mg/kg FB1 + 0 Turmeric; T8: 0.5 mg/kg AFB1 + 20 mg/kg FB1 + 222 mg/kg Turmeric. The parameters evaluated included: feed conversion, weight gain, food intake, serum proteins, hematology, liver enzymes, histopathology of viscera, vaccine response and residues of aflatoxin and fumonisin in tissues of viscera and muscles. Data were analyzed as a 2 x 2 x 2 factorial by analysis of variance. There was no significant interaction for the three analyzed factors on the performance, but there were significant differences in the diets containing aflatoxin when compared to the other diets, for all variables analyzed. AST and LDH were the only significant variables for the interaction of all factors (AFB1, FB1 e CMT), but other variables, with the exception of GGT, showed significant difference in diets containing aflatoxin when compared to other diets for all the variables analyzed. Histopathological lesions in the liver, kidney and bursa of Fabricius were gradually increased from the control treatment to aflatoxin and fumonisin treatment, with or without turmeric, with the most severe effect being observed in the organs of these treatments. There was no significant variable for the interaction of all factors evaluated for organ biometry, but liver, kidney and heart showed a significant difference in diets containing aflatoxin when compared to other diets for all variables analyzed. No variable was significant for the interaction of all factors evaluated for the blood test at 21 days, but at 42 days leukocytes, lymphocytes and basophils showed significant differences for the interaction of all factors. There was no statistical difference for the interaction of all factors analyzed for antibody titers to Newcastle disease. The residues of FB2 in the liver and AFB2 in the pectoral muscle were significant for the interaction of all the factors. The results showed no effect of turmeric powder in reducing the deleterious effects of aflatoxin and fumonisin.

IMPACTO DA AFLATOXINA B1, MONTMORILONITA E -GLUCANA NA FERMENTAÇÃO RUMINAL In vitro

Foram avaliados os efeitos da aflatoxina B1 (AFB1) (1g/mL) e os adsorventes -glucanas devivadas de Saccharomyces cerevisae com 65% de princípio ativo (-glu) (1mg/mL) e montmorilonita (MMT) (5mg/mL) sobre a fermentação ruminal. Foram conduzidos dois ensaios in vitro, no primeiro ensaio o propósito foi determinar a produção de ácidos graxos de cadeia curta, a produção de amônia em 24h de incubação. Enquanto no segundo ensaio determinou-se a produção de metano (CH4) e os parâmetros da cinética da produção de gases (Vf = volume final de gás (ml) no tempo t; L = tempo de colonização; S = taxa de degradação (h-1)) no período de 72h de incubação. Em cada ensaio seis repetições foram realizadas para os seguintes tratamentos: CONT: controle (sem AFB1 ou adsorventes); AF: AFB1 (1g/mL); -glu (1mg/mL); -glu + AF: (1mg/mL de -glu + 1g/mL de AFB1); MMT: (5mg/mL); MMT + AF: (5mg/mL de MMT + 1g/mL de AFB1). A quantidade produzida de AGCC foi significativamente maior no tratamento -glu (67,7 mM) em relação aos tratamentos CONT (57,72 mM) e MMT (53,3 mM). A MMT reduziu significativamente a produção de NH3 (9,6 mM) em relação aos tratamentos CONT (11,4 mM), AF (12,6 mM) e -glu (12,2 mM). O tratamento -glu produziu maior volume de gás (103, 4 mL) em relação aos tratamentos CONT (89,0 mL) e MMT (91,6 mL). Também o tratamento -glu teve maior taxa de degradação em relação aos demais tratamentos. A montmorilonita aumentou o tempo de colonização e reduziu a produção de CH4. Os resultados deste estudo sugerem que a AFB1 (1g/mL) não é tóxica a fermentação ruminal. Enquanto, o uso do -glu impacta a fermentação ruminal, aumentando a produção de AGCC. O uso de montmorilonita pode retardar a colonização bacteriana no alimento porém, não interfere significativamente na quantidade total de AGCC produzidos.

The effects of aflatoxin B1 (AFB1) (1g/mL) were evaluated and sorbents -glucans derived from Saccharomyces cerevisae with 65% of active ingredient (-glu) (1mg/mL) and montmirillonite (MMT) (5mg/mL) under ruminal fermentation. Two in vitro assays were conducted. On the first assay the objectives were to determine the production of short chain fatty acids, the production of ammonia during 24-h in vitro. While on the second assay the production of methane (CH4) and kinetic parameters based on gas production date were determined (GPmax= maxim gas production in t time; Lag= lag phase before gas production commenced; S=gas production rate (h-1)) during 72-h in vitro incubation. In each assay six repetitions were made for the following treatments: CONT: control (without AFB1 or sorbents); AF: AFB1 (1g/mL); -glu (1mg/mL); -glu + AF: (1mg/mL of -glu + 1g/mL of AFB1); MMT: (5mg/mL); MMT + AF: (5mg/mL of MMT + 1g/mL of AFB1). The amount of AGCC produced by the -glu (67,7 mM) treatment was significantly higher about CONT (57,72 mM) and MMT (53,3 mM). treatments. On the other hand, MMT clay reduced the production of NH3 (9,6 mM) about CONT (11,4 mM), AF (12,6 mM) and -glu (12,2 mM). The amount of GPmax by the -glu treatment was 103,4 mL, significantly higher about produced CONT (89,0 mL) e MMT (91,6 mL). There was also higher gas production rate by the -glu treatment. The montmorilonite raised the lag phase and reduced the CH4 production. The results of this study suggest that AFB1 (1g/mL) has no toxic effect on ruminal fermentation. Whereas the -glu impacts the ruminal fermentation by increase the AGCC produced. The montmorilonite can delay the bacterial colonization but doest effect the quantity of AGCC produced.

ADITIVO ANTI-MICOTOXINAS ADICIONADO À RAÇÃO MULTICONTAMINADA POR AFLATOXINA, FUMONISINA E ZEARALENONA PARA LEITÕES

Um experimento foi conduzido para avaliar a eficácia de um aditivo anti-micotoxinas para prevenir os efeitos tóxicos simultâneos de aflatoxinas, fumonisinas e zearalenona sobre o desempenho, incidência de diarreia, área de vulva, parâmetros séricos imunológicos e bioquímicos e peso relativo dos órgãos de leitões. Durante 21 dias de experimentação, quarenta e oito leitões recém-desmamados (24 machos castrados e 24 fêmeas), com peso vivo médio inicial de 6,88 ± 0,89 kg foram distribuídos em um delineamento em blocos casualizados completos, com três tratamentos e 8 repetições cada. A unidade experimental foi composta por dois leitões (macho/macho ou fêmea/fêmea). Os tratamentos fornecidos ad libitum foram: T1 - dieta basal (controle negativo sem adição de milho contaminado por micotoxinas); T2 - dieta basal multicontaminada por 107,5 ppb de aflatoxina (82 ppb de AFB1 + 1,5 ppb de AFB2 + 24 ppb de AFG1), 3.794 ppb de fumonisina (2.577 ppb of FB1 + 1.417 ppb de FB2) e 88,5 ppb de zearalenona; e T3 - T2 com um aditivo anti-micotoxinas (0,25% de Elitox®). O peso vivo e o consumo de ração dos leitões foram registrados aos 7, 14 e 21 dias de experimentação. Para avaliar a incidência de diarreia, as amostras fecais foram registradas diariamente pelo mesmo observador, atribuindo os escores 0 para fezes normais, 1 para fezes pastosas, 2 para fezes pastosas/líquidas e 3 para fezes aquosas. Além disso, o comprimento e largura da vulva foram mensurados no dia 21 de experimentação para calcular a área de vulva. Amostras de sangue via punção da veia jugular foram coletadas dos leitões mais pesados de cada baia nos dias 7, 14 e 21 de experimentação, para quantificação dos leucócitos circulantes por citometria de fluxo e análise bioquímica sérica. No final do experimento, 36 animais (24 fêmeas e 12 machos) foram abatidos para registro do peso do fígado, rim, pulmão e trato reprodutor feminino. Os dados paramétricos foram submetidos à análise de variância, enquanto os dados de incidência de diarreia foram analisados por qui-quadrado, ambos considerando 5% de nível de significância. A exposição aos tratamentos não afetou (P>0,05) o desempenho zootécnico dos leitões. No entanto, exceto no período de 14 a 21 dias (T1>T2>T3), a incidência de diarreia foi maior no grupo T2 em relação a T1 e T3 (P<0,05). A área de vulva foi afetada (P<0,05) aos 21 dias de consumo da dieta multicontaminada por micotoxinas, sendo T2>T1=T3. O número de células T citotóxicas (CD4-/CD8+) foi maior (P<0,05) em T2 e T3 comparados ao controle T1, aos 14 dias de experimentação. A concentração sérica de ureia foi reduzida nos animais expostos a T2, comparado ao T3 (P<0,05), mas igual ao controle T1 no dia 7 de exposição. Além disso, a concentração de proteínas totais foi maior (P<0,05) em T2 comparado ao controle T1 e igual a T3, no dia 21 de experimentação. O peso relativo do fígado, rim, pulmão e trato reprodutor feminino não foi influenciado (P>0,05) pelos tratamentos. O aditivo anti-micotoxinas Elitox® demonstrou efeito protetor reduzindo a incidência de diarréia e os efeitos estrogênicos em suínos recém-desmamados expostos à dietas multicontaminadas por aflatoxina, fumonisina e zearalenona.

An experiment was carried out to evaluate the protective efficacy of an anti-mycotoxins additive against the toxic combined effect of aflatoxin, fumonisin, and zearalenone on growth performance, diarrhea incidence, vulva size, concentration of circulating immune cells, serum biochemistry, and organs weights in piglets. Along 21 days of experimental period, a total of forty eight weanling piglets (24 castrated males and 24 females) with initial body weight average of 6.88 ± 0.89 kg were distributed in a randomized complete block design with three treatments with eight pens and two animals per treatment (male/male or female/female). The treatments provided ad libitum were T1 - basal diet (negative control without mycotoxins); T2 - multi-contaminated basal diet with 107.5 ppb of total aflatoxin (82 ppb of AFB1 + 1.5 ppb of AFB2 + 24 ppb of AFG1), 3,794 ppb of total fumonisin (2,577 ppb of FB1 + 1,417 ppb of FB2), and 88.5 ppb of zearalenone; and T3 - T2 plus an anti-mycotoxin additive (0.25% of Elitox®). Individual piglet's body weight and feed consumption for each pen were recorded weekly (7, 14, and 21 d) for growth performance evaluation. For analysis the diarrhea incidence, the animals were observed daily by the same observer for visual assessment of the stool consistency, being attributed the score 0 to normal feces, 1 to pasty feces, 2 to pasty/liquid feces, and 3 to watery stools. Moreover, vulva length and width were measured at 21 day to calculate the vulva area. Blood samples were collected from the heaviest piglets of each pen via vena duct to serum biochemical analysis and to quantify the circulating leucocytes by flow cytometry, at 7, 14, and 21 days of experiment. At the end of the experiment, 36 animals (24 female and 12 male piglets) were slaughtered to evaluate the relative weights of liver, kidney, lung, and whole female genital organ. The parametric data were analyzed by ANOVA and diarrhea frequency data were analyzed by chi-square, both considering 5% of level of significance. In general, there were no effects (P>0.05) of the treatments on piglet's growth performance. Higher diarrhea incidence was observed (P<0.05) in T2 group (T2>T1=T3) along all the experiment, except from 14 to 21d (T1>T2>T3). The contaminated diet (T2) showed (P<0.05) the larger vulva area (T2>T1=T3) on day 21. The number of cytotoxic T cell (CD4-/CD8+) was increased (P<0.05) likely due the multi-contaminated treatment (T2=T3>T1), on day 14 of experimental period. The urea serum concentration was decreased (P<0.05) in T2 group compared to T3, however both treatments were equal T1 on day 7 of exposition. Moreover, the total protein concentration was increased (P<0.05) in animals exposed to T2 compared to T1 on day 21. The relative weight of liver, kidney, lung, and whole female genital organs were not affected (P>0.05) by the treatments. Therefore, Elitox® is efficient to reduce diarrhea and estrogenic effects in piglets exposed to multi-contaminated diet with aflatoxin, fumonisin, and zearalenone.

T-2 mycotoxin intoxication in piglets: a systematic pathological approach and apoptotic immunohistochemical studies

An experimental study was performed in order to analyze the histopathological findings of gastrointestinal mucosa and regional lymph-nodes in piglets intoxicated with T-2 toxin as well as the mechanism of T-2 induced apoptosis in the intestinal crypt epithelia. Sixteen piglets were divided into 4 groups receiving a single oral administration of T-2 toxin. Group A: 2.5 mg T-2/kg b.w.; group B: 2 mg T-2/kg b.w.; group C: 1.5 mg T-2/kg b.w.; group D: control group without toxin. Organ lesions were classified in grades 0 to 4 according with severity and were statistically analyzed. Apoptosis was examined in intestinal sections only in groups A and D. Group A piglets showed clinical signs and pathological changes related with those seen in circulatory shock. Microscopic lesions were observed only in pigs from groups A and B. In stomach, lesions consisted of congestion, hemorrhages and necrotic cells in the isthmus and neck regions. Submucosal edema and necrotic crypt epithelial cells were seen in duodenum, jejunum, ileum, cecum and colon. The greatest grade of lesions was observed in colon. In lymph node, grade of lymphocytes depletion and necrosis was significantly higher in cortex than paracortex. Apoptotic bodies were present in intestinal crypt cells, lymphoid cells from lamina propria and ileal Peyer's patches. Apoptosis seems to be the mechanism involved in the development of intestinal lesions.

Toxina T-2 e alterações do crescimento endocondral em frangos de corte

The ability of T-2 toxin from Fusarium sporotrichioides Sherb in corn culture to induce epiphyseal plate lesions in broiler chicks was tested. One group of day-old male broiler chickens (Hubbard) fed ad libitum balanced diet in which all corn was replaced by T-2 toxin (2.64mg/kg) contaminated autoclaved corn. Another group received the same diet with mycotoxin free corn, and was used as control. All groups were observed for 7, 14 and 21 days. Despite the different periods and amounts of ingested T-2 (estimated in 0.3 to 1.9 mg/kg), the tibia of treated animals presented defective maturation and poor differentiation of chondrocytes, severe vascular lesions and anomalous cartilage vascular invasion and retarded cartilage erosion with a picture similar to that of early tibial dyschondroplasia. The results indicated that the T-2 toxin produced by Fusarium sporotrichioides Sherb could induce tibial dyschondroplasia in broiler chickens.

Foi testada a habilidade da toxina T-2, produzida por Fusarium sporotrichioides Sherb e veiculada por milho experimentalmente contaminado, em induzir alterações da placa epifisária proximal do tibiotarso de frangos de corte. Pintos de um dia, todos machos e da linhagem Hubbard, foram alimentados com ração básica a base de milho e soja, na qual todo o milho foi substituído por milho contaminado, contendo exclusivamente T-2 na quantidade de 2,64mg/kg. Um outro grupo alimentado com milho não contaminado serviu como testemunha e ambos foram observados por três períodos (7, 14 e 21 dias). Independente do período e da quantidade de T-2 ingerida (0,3 a 1,9 mg/kg), o tibiotarso dos animais tratados mostrou maturação e diferenciação defectivas de condrócitos, lesões vasculares e penetração vascular da cartilagem, todas similares às da discondroplasia tibial. Conclui-se que a toxina T-2 oriunda de Fusarium sporotrichioides Sherb é capaz de induzir lesões básicas e iniciais da discondroplasia tibial em frangos de corte.