Resumo
Descrito na última década, infectando cães em diversas regiões brasileiras, aspectos biológicos e epidemiológicos da infecção por Trypanosoma caninum ainda são desconhecidos. Devido aos avanços das técnicas de Sequenciamento de Nova Geração (SNG), o estudo sobre a biologia evolutiva dos tripanosomatídeos teve um acréscimo substancial de informações genéticas. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi apresentar informações sobre o genoma desta espécie e realizar a comparação gênica com outros tripanosomatídeos, utilizando a plataforma Miseq para o sequenciamento parcial do genoma. Filogeneticamente, T. caninum demonstrou proximidade com T. cruzi e T. rangeli. A adaptação deste parasito ao cão doméstico e uma provável redução do seu genoma podem estar elencados ao seu processo evolutivo. Ademais, o sequenciamento do genoma também possibilitou a investigação de genes/proteínas alvos para o seu diagnóstico específico. Assim, os oligonucleotídeos sintéticos 5-AGCCAATAGCAAGGGTGGAA-3 5- e GCGTCATCCATTTTCGAGGC-3 foram desenhados baseados na região 18S do rDNA de T. caninum que amplificam um produto de 248 pb. Estes oligonucleotideos mostraram-se específicos e sensíveis para T. caninum, já que o limite mínimo de detecção foi de 10 cópias de DNA do parasito.
Described in the last decade, infecting dogs in several Brazilian regions, biological and epidemiological aspects of Trypanosoma caninum infection are still unknown. Accept advances in New Generation Sequencing (SNG) techniques, the study of an evolutionary biology of trypanosomatids that had a substantial increase in genetic information. Thus, the objective of this study was to present information about the genome of this species and to carry out a genetic comparison with other trypanosomatids, using the Miseq platform for partial genome sequencing. Phylogenetically, T. caninum demonstrated proximity to T. cruzi and T. rangeli. The adaptation of this parasite to the domestic dog and a probable reduction in its genome may be related to its evolutionary process. In addition, genome sequencing also made it possible to investigate target genes / proteins for their specific diagnosis. Thus, the 5 '-AGCCAATAGCAAGGGTGGAA-3' and 5 '- GCGTCATCCATTTTCGAGGC-3' oligonucleotides were designed in the 18S region of the T. caninum rDNA that amplifies a 248 bp product. These oligonucleotides are the most sensitive and sensitive to T. caninum, but the minimum detection limit was 10 DNA records of the parasite.
Resumo
MALAVAZI, Patrícia Fernandes Nunes da Silva. Universidade Federal do Acre, julho de 2019. Infecção natural da fauna triatomínea e reservatórios domésticos por Trypanosoma cruzi no estado do Acre, Brasil. Orientador: Soraia de Figueiredo de Souza, Co-orientador: André Luiz Rodrigues Roque. O Trypanosoma cruzi é um protozoário comum na América Latina, causador da doença de Chagas em humanos e capaz de infectar várias outras espécies de mamíferos. Atualmente a Amazônia brasileira apresenta o maior número de surtos da doença e estudos para avaliar a transmissão do parasito neste bioma são necessários para entender a participação de distintas espécies de mamíferos como reservatórios. O Capítulo 1 tem como objetivo apresentar uma revisão bibliográfica sobre a importância de cães no ciclo de transmissão do protozoário em diferentes estados brasileiros, a partir da procura de termos em bancos de dados eletrônicos. Ceará, Pará e Tocantins são considerados áreas de risco para a Tripanossomíase Americana canina. O papel do cão no ciclo de transmissão do T. cruzi no ambiente doméstico permanece incerto. O Capítulo 2 objetiva relatar a investigação da infecção natural por T. cruzi na fauna triatomínea e em mamíferos domésticos (cães e gatos) residentes em áreas endêmicas do estado do Acre (municípios de Feijó e Rodrigues Alves), além da capital do estado, o município de Rio Branco. Os triatomíneos foram coletados a partir da dissecção das palmeiras ou pela entrega dos residentes das regiões estudadas. Os conteúdos intestinais dos vetores foram avaliados quanto à presença de tripanossomatídeos por microscopia óptica e por análise molecular, que visaram o gene mini-exon de T. cruzi e T. rangeli. Amostras de sangue das veias jugular/cefálica dos mamíferos foram coletadas para avaliação de i) esfregaço sanguíneo, ii) hemocultura, iii) PCR visando o gene ribossômico da subunidade pequena (18S SSU) e iv) sorologia indireta (IFAT) e ensaio imunoenzimático [ELISA]). Questionários epidemiológicos foram aplicados e avaliação clínica de cães e gatos foi realizada. O conteúdo fecal de 28 insetos Rhodnius sp. e um Panstrongylus sp. foram examinados. Quatro triatomíneos foram positivos (13,3%) no exame a fresco. A análise molecular identificou Trypanosoma cruzi TCI no ensaio mini-exon em duas espécimes de Feijó. Amostras de sangue de 90 cães e 3 gatos foram obtidas. Trypanosoma sp. foi encontrado em uma hemocultura (1/92; 1,1%) e em seis esfregaços (6/86, 6,5%). A soropositividade para o T. cruzi (IFAT e ELISA) foi de 8/92 (8,7%). O sequenciamento do DNA da hemocultura revelou infecção por T. rangeli em um cão assintomático. Reações de PCR em coágulos sanguíneos resultaram em um cão positivo (1/75; 1,3%) infectado por T. janseni e este achado fornece um novo hospedeiro mamífero para uma espécie de Trypanosoma recentemente reconhecida. Presença de instalações para pecuária e fossa séptica foram variáveis associadas à infecção por Trypanosoma sp. (p <0,05). Baixa exposição e parasitemia do T. cruzi foram observadas em cães das áreas de doença de Chagas e do município de Rio Branco, sugerindo que estes animais domésticos não são reservatórios de T. cruzi nos municípios estudados.
MALAVAZI, Patrícia Fernandes Nunes da Silva. Universidade Federal do Acre, July, 2019. Triatomines fauna and domestic reservoirs Trypanosoma cruzi infection in the State of Acre, Brazil. Advisor: Soraia de Figueiredo de Souza, Co- advisor: André Luiz Rodrigues Roque. Trypanosoma cruzi is a widespread protozoan in Latin America causative of Chagas disease in humans and it is able to infect several other mammal species. Nowadays the Brazilian Amazon presents the highest number of disease outbreaks and studies to evaluate the parasite transmission in this biome is necessary to understand the participation of distinct mammal species as reservoirs. Chapter 1 aims to present a literature review on the importance of dogs at protozoan transmission cycle in different Brazilian states, considering the evaluated biomes, studied population, diagnostic methods used and identification of genotypes circulating T. cruzi. Chapter 2 aims to investigate the natural infection by T. cruzi infection in triatomine fauna and domestic mammals (dogs and cats) living in endemic areas in the state of Acre (Feijó and Rodrigues Alves municipalities), besides the capital of the state, the municipality of Rio Branco. The triatomines were collected from the dissection of palms or delivered by residents from the studied regions. The intestinal contents of the vectors were evaluated for the presence of trypanosomatids by optical microscopy and by molecular analysis, which target the mini-exon gene of T. cruzi and T. rangeli. Blood samples from the jugular/cephalic veins of the mammals were collected for evaluation of i) blood smear, ii) hemoculture, iii) PCR targeting small subunit ribosomal gene (18S SSU) and iv) serology (indirect fluorescent antibody test [IFAT] and immunoenzymatic assay [ELISA]). Epidemiological questionnaires were applied and clinical evaluation of dogs and cats was realized. The fecal content of 28 bugs from Rhodnius sp. and one Panstrongylus sp. were examined. Four triatomines were positive (13.3%) in the fresh examination. Molecular analysis identified Trypanosoma cruzi TCI in mini- exon assay in two specimens from Feijó. Blood samples from 90 dogs and 3 cats were obtained. Trypanosoma sp. was found in one blood culture (1/92, 1.1%) and in six blood smears (6/86, 6.5%). Seropositivity for T. cruzi (IFAT and ELISA) was 8/92 (8.7%). Sequencing of the blood culture DNA revealed T. rangeli infection in an asymptomatic dog. PCR reactionsin blood clots resulted in one positive dog (1/75, 1.3%) infected by T. janseni and this finding provides a new mammalian host for a recently recognized Trypanosoma species. Presence of facilities for animal husbandry and septic tank were variables associated with Trypanosoma sp. infection (p <0.05). Low exposition and parasitemia for T. cruzi were observed in dogs from Chagas disease areas and Rio Branco municipality suggesting that these domestic animals are not T. cruzi reservoirs in the studied municipalities.
Resumo
MORAES, Julio Cesar. Desenvolvimento de bibliotecas de phage display para a obtenção de marcadores e/ou inibidores biológicos contra Trypanosoma evansi. 2017. 115 f. Tese (Doutorado em Ciência Animal). Universidade do Estado de Santa Catarina. Programa de Pós-graduação em Ciência Animal, Lages, 2017. Trypanosoma evansi é um hemoprotozoário parasito, causador da doença conhecida como Surra ou Mal das Cadeiras, tendo sido descrito em várias espécies, como cães, capivaras, quatis, bovinos, búfalos, sendo os equinos a espécie mais acometida. É responsável por prejuízos diretos no setor de equinocultura e, indiretos no setor pecuário que utilizam essa espécie no manejo de outros animais de produção. O T. evansi é transmitido de maneira acíclica por insetos (Tabanidae e Stomoxydae) e morcegos hematófagos e, de maneira iatrogênica (vacinações e coleta de sangue). Com o objetivo de identificar novos alvos para o controle e ou diagnóstico do T. evansi, utilizamos a tecnologia de phage display associada à técnica Kunkel de mutagênese direcionada para construir uma biblioteca de proteínas com diversidade superior a um milhão de proteínas distintas e mesmo após a diversificação, a biblioteca manteve como base estrutural o esqueleto protéico de uma toxina atenuada com Domínio Kunitz presente no veneno do escorpião Mesobuthus tamulus As mutações foram direcionadas, com auxílio da estrutura cristalográfica da toxina, para resíduos específicos na porção C-terminal da -hélice e no loop menor da proteína. O DNA mutante foi purificado e amplificado pela técnica de Círculo Rolante Seletivo. Clones da biblioteca foram sequenciados, onde foi evidenciado uma taxa próxima de 100% de inserções de mutações resíduo específicas. Em seguida a biblioteca foi utilizada em seleções de afinidade contra o T. evansi para busca de ligantes específicos ao parasito. Após um round in vivo e dois in vitro, seis clones foram selecionados para estudos individuais de potência, especificidade de ligação e toxicidade. Entre todos os clones, em especial, os clones 5 e 1 apresentaram um maior potencial de ligação ao T. evansi e ausência de ligação contra outros tripanosomatídeos (T. cruzi e T. rangeli). Os clones 1, 2 e 5 demostraram ser tóxicos para o T. evansi causando uma mortalidade de 13%, 31,5% e 19,7%, respectivamente. O DNA dos clones 1, 2 e 5 foram sequenciados, demonstrando que houve a inserção de mutações. A biblioteca derivada de toxinas, bem como os clones 1 e 5 identificados demonstraram possuir potencial para o desenvolvimento de novos testes para o diagnóstico direto de T. evansi. Os clones 1, 2 e 5 que demonstraram atividade tóxica, poderão servir como base para outros estudos, visando o desenvolvimento de novas drogas com atividade tripanocida.
MORAES, Julio Cesar. Development of phage display libraries for obtaining markers and/or biological inhibitors against Trypanosoma evansi. 2017. 115 f. Thesis (DSc in Animal Science). Universidade do Estado de Santa Catarina. Programa de Pós-graduação em Ciência Animal, Lages, 2017. Trypanosoma evansi is a parasitic hemoprotozoan, which causes the disease known as "surra" or "mal das cadeiras" and has been described in several species, such as dogs, capybaras, quatis, cattle, buffaloes, and horses are the most affected species. It is responsible for direct losses in the equinoculture sector and indirect in the livestock sector that use this species in the handling of other production animals. T. evansi is transmitted acyclically by insects (Tabanidae and Stomoxydae) and hematophagous bats and iatrogenically (vaccinations, collection of blood). With the objective of identify new compounds for the control and / or diagnosis of T. evansi, We used phage display technology associated with Kunkel's mutagenesis technique aimed at constructing a protein library with diversity of more than one million distinct proteins and even after diversification, the library retained as a structural basis the protein skeleton of an attenuated toxin with Kunitz Domain present in the venom of Mesobuthus tamulus scorpion The mutations were directed, with the support of the crystallographic structure of the toxin, to specific residues in the C-terminal portion of the -helix and in the smaller loop of the protein. The mutant DNA was purified and amplified by the Selective Rolling Circle technique. Clones from the library were sequenced, where a close to 100% rate of insertions of specific residue mutations was evidenced. Then the library was used in affinity selections against T. evansi to search for specific ligands to the parasite. After one round in vivo and two in vitro, six clones were selected for individual studies of potency, binding specificity and toxicity. Among all clones, in particular, clones 5 and 1 showed a greater potential for binding to T. evansi and lack of binding against other trypanosomatids (T. cruzi and T. rangeli). Clones 1, 2 and 5 proved to be toxic to T. evansi causing a mortality of 13%, 31.5% and 19.7%, respectively. DNA from clones 1, 2 and 5 were sequenced, demonstrating that mutations were inserted. The toxin-derived library as well as clones 1 and 5 identified has potential for the development of new tests for the direct diagnosis of T. evansi. Clones 1, 2 and 5 that demonstrated toxic activity may serve as the basis for other studies aimed at the development of new drugs with trypanocidal activity.
Resumo
A infestação dos ecótopos artificiais por triatomíneos, as ações de controle vetorial, a infecção natural por tripanossomatídeos e a distribuição territorial desses vetores foram avaliadas nos municípios do Rio Grande do Norte, Brasil, a partir dos dados disponibilizados pela Secretaria de Estado de Saúde Pública no período de 2005 a 2015 e no município de Caraúbas no período de 2010 a 2016. A fauna triatomínica silvestre, a infecção natural por tripanossomatídeos e a sua associação com a fonte de alimentação foram avaliadas na Estação Ecológica do Seridó, em Serra Negra do Norte. Além disso, a possibilidade da existência de híbridos naturais entre Triatoma brasiliensis e Triatoma petrocchiae também foi analisada morfologicamente e por sequenciamento do DNA mitocondrial, o citocromo b (Cyt b), e nuclear, o espaçador interno transcrito (ITS-1). Os dados mostraram que 67,7% (113/167) dos municípios realizaram a busca ativa e 110 registraram a ocorrência de triatomíneos nas unidades domiciliares (UDs). Os índices de colonização foram elevados ao logo dos anos pesquisados e, apesar disso, o número de UDs borrifadas foi inferior ao de positivas. Um total de 51.569 triatomíneos foi capturado, sendo T. brasiliensis (47,20%) e Triatoma pseudomaculata (40,22%) as espécies mais capturadas. A colonização intradomiciliar e peridomiciliar foi demonstrada pelas espécies T. brasiliensis, T. pseudomaculata, Panstrongylus lutzi e Rhodnius nasutus. A infecção natural por tripanossomatídeos foi detectada em 2,4% dos espécimes, sendo mais elevada em T. brasiliensis (3,2%). Em Caraúbas, as atividades de controle ocorreram de forma descontínua, e mesmo com a presença de ninfas, as UDs não foram borrifadas em 2013, 2014 e 2016. As espécies mais capturadas nos últimos anos foram T. brasiliensis (n = 244) e T. pseudomaculata (n = 315). Os dados primários revelaram a elevada infestação dos ecótopos peridomiciliares como galinheiro, curral e pilha de telhas, onde T. brasiliensis e T. pseudomaculata apresentaram elevados percentuais de infecção pelo T. cruzi. A espécie T. brasiliensis foi a mais eclética, sendo o Homo sapiens a fonte alimentar frequentemente identificada no intradomicílio e peridomicílio, enquanto para o T. pseudomaculata a fonte mais detectada foi Gallus gallus. No ambiente silvestre, T. brasiliensis foi encontrado em afloramentos de rochas, juntamente com espécimes de Triatoma sp., e T. pseudomaculata em troncos de árvores da espécie Anadenanthera colubrina. As fontes alimentares do T. brasiliensis foram os roedores Thrichomys apereoides (30%) e Galea spixii (30%). Nesse estudo nós registramos o primeiro encontro de Psammolestes tertius no estado, aumentando a área de distribuição geográfica dessa espécie. O P. lutzi apresentou o índice de infecção pelo T. cruzi mais elevado (64,8%), e o genótipo identificado foi TcIII. O Trypanosoma rangeli foi identificado em apenas um espécime dessa espécie. T. cruzi II e III foram detectados na espécie T. brasiliensis. Na análise morfológica, Triatoma sp. apresentou semelhança com o T. petrocchiae. A similaridade genética entre essas duas espécies foi demonstrada utilizando o marcador ITS-1, as quais formaram um único clado. Entretanto, na análise das sequências do Cytb, o Triatoma sp., T. brasiliensis e T. petrocchiae formaram clados distintos, sugerindo a existência de uma nova espécie, porém, é necessário a realização de outras análises para essa comprovação. O aumento dos índices de infestação e colonização dos triatomíneos, a presença desses vetores infectados e alimentados com sangue humano e de vários animais e, a circulação de animais silvestres infectados no ambiente antrópico, alerta para a possibilidade de transmissão do T. cruzi para o homem e animais domésticos. Os dados desse estudo reforçam que a VE e o controle vetorial nos municípios são imprescindíveis para evitar o contato de espécies como, T. brasiliensis, T. pseudomaculata e P. lutzi com a população e animais.
The infestation of the artificial ecotopes by triatomines, the vector control actions, the natural infection by trypanosomatids and the territorial distribution of these vectors were evaluated in the municipalities of the State of Rio Grande do Norte, Brazil, based on the temporal analysis of the data provided by the State Secretariat of Public Health in the period from 2005 to 2015 and in the municipality of Caraúbas in the period from 2010 to 2016. The wild triatomine fauna, the natural infection by trypanosomatids and their association with the food source were evaluated at the Seridó Ecological Station, in Serra Negra do Norte. In addition, the possibility of natural hybrids between Triatoma brasiliensis and Triatoma petrocchiae, was analyzed morphologically and by sequencing of mitochondrial DNA, cytochrome b (Cyt b), and nuclear, internal transcribed spacer (ITS-1). The data showed that 67,7% (113/167) of the municipalities performed the active search and 110 municipalities registered the occurrence of triatomines in the domiciliary units (DUs). Colonization rates were high during the surveyed years, and despite that, the number of DUs sprayed was lower than the positive ones. A total of 51.569 triatomines were captured, with T. brasiliensis (47,20%) and T. pseudomaculata (40,22%) being the most captured species. The indoor and outdoor colonization was demonstrated by the species T. brasiliensis, T. pseudomaculata, Panstrongylus lutzi and Rhodnius nasutus. The natural infection by trypanosomatids was detected in 2,4% of the specimens, being higher in T. brasiliensis (3,2%). In Caraúbas, the vector control activities occurred discontinuously, and even with the presence of nymphs, the DUs were not sprayed in 2013, 2014 and 2016. The most captured species in the last years were T. brasiliensis (n = 244) and T. pseudomaculata (n = 315). The primary data revealed the high infestation of outdoors ecotopes such as chicken coop, corral and pile of shingles, where T. brasiliensis and T. pseudomaculata presented high percentages of Trypanosoma cruzi infection. T. brasiliensis was the most eclectic species, with Homo sapiens being the food source frequently identified in the intradomicile and peridomicile, while for T. pseudomaculata the food source was Gallus gallus. In the wild environment, T. brasiliensis was found in rock outcrops, along with specimens of Triatoma sp., and T. pseudomaculata on tree trunks of the species Anadenanthera colubrina. The food sources of T. brasiliensis were the rodents Thrichomys apereoides (30%) and Galea spixii (30%). In this study, we recorded the first encounter of Psammolestes tertius in the state, expanding the geographic distribution of this species. P. lutzi presented the highest T. cruzi infection rate (64,8%) and the genotype identified was TcIII. Trypanosoma rangeli was identified in only one specimen of this species. T. cruzi II and III were detected in the species T. brasiliensis. The morphological analysis of Triatoma sp. presented similarity to T. petrocchiae. The genetic similarity between both species was demonstrated using the ITS-1 marker, which formed a single clade. Nevertheless, in the analysis of Cytb sequences, Triatoma sp., T. brasiliensis and T. petrocchiae formed distinct clades, suggesting the existence of a new species, however, further analysis are necessary for this confirmation. The increase of infestation and colonization rates of triatomines, the presence of these infected vectors fed with human blood and of several animals and the circulation of infected wild animals in the anthropic environment, point out the possibility of T. cruzi transmission to humans and domestic animals. The data of this study reinforce that ES and vector control in the municipalities are essential to avoid the contact of species, such as T. brasiliensis, T. pseudomaculata and P. lutzi, with the population and animals.
Resumo
Os marsupiais da família Didelphidae podem albergar diferentes espécies de Trypanosoma e por possuírem características ecológicas generalistas e oportunistas, têm sido considerados importantes reservatórios, podendo atuar como um elo entre os ciclos doméstico e silvestre desses agentes. Portanto, o presente estudo teve como objetivos pesquisar a infecção natural por Trypanosoma spp. e construir mapas de risco da infecção por T. cruzi em marsupiais de vida livre capturados em um fragmento florestal com diferentes graus de ação antrópica no município de Viseu, estado do Pará. Amostras de sangue total foram coletadas de 46 marsupiais capturados em um fragmento florestal no município de Viseu, estado do Pará. Esfregaços sanguíneos foram confeccionados em 39 animais para a pesquisa de formas tripomastigotas de Trypanosoma spp.. Para a detecção de DNA de T. cruzi foi realizada a Nested-PCR com os iniciadores TCZ1, TCZ2, TCZ3 e TCZ4. O mapa de risco foi construído segundo o estimador de densidade kernel de 500 metros. DNA de T. cruzi foi detectado em 60,9% (28/46) das amostras de sangue dos marsupiais e formas tripomastigotas de T. cruzi e de T. rangeli-like foram observadas em um exemplar de M. murina e em um P. opossum, respectivamente. O mapa de risco revelou a presença de três aglomerados, sendo o de maior intensidade observado na área de borda do fragmento florestal. Pode-se concluir que os marsupiais do município de Viseu estão infectados por T. cruzi e T. rangeli-like e a região de estudo é uma área de risco para a transmissão de T. cruzi.
Marsupials of the Didelphidae family may harbor a variety of Trypanosoma species and having generalist and opportunistic ecological characteristics have been considered significant reservoirs and act as a link between domestic and wild cycles of these agents. Therefore, this study aimed to investigate the natural infection by Trypanosoma spp. and building risk maps of T. cruzi infection in free living marsupials captured in a forest fragment with different degrees of human activities in the municipality of Viseu, Para State. Whole blood samples were collected from 46 marsupials captured in a forest fragment in the municipality of Viseu, Pará State. Blood smears were made from 39 animals for research of trypomastigotes forms of the Trypanosoma spp.. For DNA detection of T. cruzi was performed nested PCR with primers TCZ1, TCZ2, TCZ3 and TCZ4.The risk map was built in the kernel density estimator 500 meters. T. cruzi DNA was detected in 60.9% (28/46) of samples of blood marsupials and trypomastigotes of T. cruzi and T. rangeli-like were observed in one M. murina and one P. opossum, respectively. The risk map revealed the presence of three clusters, and the most intense were observed in the edge area of forest fragment. It can be concluded that marsupials in the municipality of Viseu are infected by T. cruzi and T. rangeli-like and the study area is an area of risk for the transmission of T. cruzi.
Resumo
The authors had described the morphologic characteristics of Triatoma klugi Carcavallo, Jurberg, Lent & Galvão, 2001 to the group of species belonging to "T. oliveirai complex". Until the moment it has been difficult to separate on the nymphs characteristics basis these species, what it justifies the development of this work. The specimens had been collected in openings of rocks in the Malavok mount in the locality of Linha Brazil, city of Nova Petrópolis, in the State of Rio Grande do Sul. The local of capture of the Triatominae is placed enters 700 and 800 m of altitud (29º18'38''S, 51º04'57''W). Together with T. oliveirai (Neiva, Pinto & Lent, 1939), its morphologically related species, is the only ones of the complex that had not been found, until the moment, in the State of Mato Grosso, Mato Grosso do Sul and Goiás, Brazil. In experimental conditions, already it was tested and proven its susceptibilities to the infection for Trypanosoma cruzi (Chagas, 1909) and Trypanosoma rangeli (Tejera, 1920). The comparative analysis of the ornaments of the exocorium of eggs and of three nymphs of T. klugi by optic microscopy and scanning electron microscopy showed some morphologic particularities, with prominence for: the ventral face of the head, the stridulatory sulcus and the last abdominal segments (IX, X - future genitalia and XI - anal duct). These data contribute for the magnifying of the distinguishing parameters aiming at diagnosis of T. klugi during its nymphal development.
Os autores descreveram as características morfológicas de Triatoma klugi Carcavallo, Jurberg, Lent & Galvão, 2001 pertencente ao grupo de espécies que compõem o "complexo T. oliveirai". Até o presente tem sido difícil separar essas espécies com base nas características ninfais, o que justifica o desenvolvimento deste trabalho. Os espécimes foram coletados em frestas de rochas no morro Malavok na localidade de Linha Brasil, município de Nova Petrópolis, no Estado do Rio Grande do Sul. O local de captura dos triatomíneos situa-se entre 700 e 800 m de altitude (29º18'38''S, 51º04'57''W). Juntamente com T. oliveirai (Neiva, Pinto & Lent, 1939), espécie morfologicamente mais próxima, são as únicas do complexo que não foram encontradas, até o momento, no Estado do Mato Grosso, Mato Grosso do Sul e Goiás, Brasil. Em condições experimentais, já foi testada e comprovada a sua susceptibilidade à infecção pelo Trypanosoma cruzi (Chagas, 1909) e Trypanosoma rangeli (Tejera, 1920). A análise comparativa das ornamentações do exocório dos ovos e de três estádios ninfais de T. klugi por microscopia óptica e microscopia eletrônica de varredura mostrou algumas particularidades morfológicas, com destaque para: a face ventral da cabeça, o sulco estridulatório e os últimos segmentos abdominais (IX, X - futura genitália e XI - tubo anal). Esses dados contribuem para a ampliação dos parâmetros diferenciais visando à diagnose de T. klugi durante o seu desenvolvimento ninfal.
Resumo
The authors had described the morphologic characteristics of Triatoma klugi Carcavallo, Jurberg, Lent & Galvão, 2001 to the group of species belonging to "T. oliveirai complex". Until the moment it has been difficult to separate on the nymphs characteristics basis these species, what it justifies the development of this work. The specimens had been collected in openings of rocks in the Malavok mount in the locality of Linha Brazil, city of Nova Petrópolis, in the State of Rio Grande do Sul. The local of capture of the Triatominae is placed enters 700 and 800 m of altitud (29º18'38''S, 51º04'57''W). Together with T. oliveirai (Neiva, Pinto & Lent, 1939), its morphologically related species, is the only ones of the complex that had not been found, until the moment, in the State of Mato Grosso, Mato Grosso do Sul and Goiás, Brazil. In experimental conditions, already it was tested and proven its susceptibilities to the infection for Trypanosoma cruzi (Chagas, 1909) and Trypanosoma rangeli (Tejera, 1920). The comparative analysis of the ornaments of the exocorium of eggs and of three nymphs of T. klugi by optic microscopy and scanning electron microscopy showed some morphologic particularities, with prominence for: the ventral face of the head, the stridulatory sulcus and the last abdominal segments (IX, X - future genitalia and XI - anal duct). These data contribute for the magnifying of the distinguishing parameters aiming at diagnosis of T. klugi during its nymphal development.
Os autores descreveram as características morfológicas de Triatoma klugi Carcavallo, Jurberg, Lent & Galvão, 2001 pertencente ao grupo de espécies que compõem o "complexo T. oliveirai". Até o presente tem sido difícil separar essas espécies com base nas características ninfais, o que justifica o desenvolvimento deste trabalho. Os espécimes foram coletados em frestas de rochas no morro Malavok na localidade de Linha Brasil, município de Nova Petrópolis, no Estado do Rio Grande do Sul. O local de captura dos triatomíneos situa-se entre 700 e 800 m de altitude (29º18'38''S, 51º04'57''W). Juntamente com T. oliveirai (Neiva, Pinto & Lent, 1939), espécie morfologicamente mais próxima, são as únicas do complexo que não foram encontradas, até o momento, no Estado do Mato Grosso, Mato Grosso do Sul e Goiás, Brasil. Em condições experimentais, já foi testada e comprovada a sua susceptibilidade à infecção pelo Trypanosoma cruzi (Chagas, 1909) e Trypanosoma rangeli (Tejera, 1920). A análise comparativa das ornamentações do exocório dos ovos e de três estádios ninfais de T. klugi por microscopia óptica e microscopia eletrônica de varredura mostrou algumas particularidades morfológicas, com destaque para: a face ventral da cabeça, o sulco estridulatório e os últimos segmentos abdominais (IX, X - futura genitália e XI - tubo anal). Esses dados contribuem para a ampliação dos parâmetros diferenciais visando à diagnose de T. klugi durante o seu desenvolvimento ninfal.
Resumo
Among domestic animals, dogs are considered to be the major reservoirs of trypanosomatids and, due to their proximity to man, the presence of these parasites in dogs is an alert to actions aiming at triatomine control. Fifty dogs (26 males and 24 females), aged from 2 months to 15 years, belonging to 30 chronic Chagas disease individuals from 15 different municipalities in the western region of São Paulo State, Brazil, were subjected to blood collection for the following tests: artificial xenodiagnosis, blood culture, and Polymerase Chain Reaction (PCR). Forty-three (86%) out of 50 dogs were positive to at least one of the tests performed; 34 (68%) were positive to xenodiagnosis, 30 (60%) to blood culture, and 25 (50%) to PCR for T. cruzi and/or T. rangeli. Although triatomines were not detected during the intra and peridomiciliary inspections in the dog owners residences, the results obtained demonstrate that there is a transmission cycle whereby triatomine vector may be participating in the infection epidemiological chain.