Assessment of tributyltin contamination based on imposex in Stramonita rustica (Mollusca: Gastropoda) along southern Bahia coast, northeastern Brazil / Avaliação da contaminação por tributil-estanho baseada em imposex em Stramonita rustica (Mollusca: Gastropoda) ao longo do Litoral Sul da Bahia

This study investigated the effects of tributyltin (TBT) on the morphology of the genital system of the gastropod Stramonita rustica in southern Bahia, Brazil. For this, 330 specimens were collected during the summer of 2014 at eight sampling points to ascertain whether male sex organs had developed in addition to the complete female genital tract in females (= imposex). The analyses were made under a stereoscopic microscope. Imposex and their associated indexes, and the sterile females, exhibited the highest rates in harbors and shipyards areas. Despite the total ban of TBT in anti-fouling paints on a global scale since 2003, the results of this and other studies indicate the continued use of those paints on the Brazilian coast. This shows the inefficiency of existing legislation and the need to strengthen enforcement of the ban.(AU)

Este estudo investigou os efeitos de tributil-estanho (TBT) sobre a morfologia do sistema genital do gastrópode Stramonita rustica (Lamarck, 1822) no Litoral Sul da Bahia, Brasil. Para isso, 330 espécimens foram coletados durante o verão de 2014 em oito pontos de amostragem, para verificar se os órgãos sexuais masculinos tinham se desenvolvido para além do trato genital feminino completo (= imposex). As análises foram feitas sob um microscópio estereoscópico. O imposex e seus índices associados, assim como as fêmeas estéreis, apresentaram as maiores taxas em áreas portuárias e estaleiros. Apesar da proibição total do TBT em tintas anti-incrustantes em escala global desde 2003, os resultados deste e de outros estudos indicam a continuidade de uso dessas tintas na costa brasileira. Isso mostra a ineficácia da legislação vigente e reforça a necessidade de se cumprir integralmente o banimento.(AU)

Substâncias obesogênicas alteram a expressão de RNAs longos não-codificadores de maneira transgeracional

A epidemia da obesidade é considerada uma crise mundial de Saúde Pública, tendo como fatores contribuintes o aumento da ingestão calórica, estilos de vida sedentários e/ou predisposições genéticas. Ainda que o balanço energético positivo seja uma das causas mais significativas da obesidade, pesquisas recentes relacionam a epidemia da doença à exposição precoce a produtos químicos desreguladores endócrinos (DEs) (do inglês, Endocrine-Disrupting Chemicals - EDCs). A Sociedade Endócrina define DEs como substâncias químicas exógenas, ou misturas de substâncias químicas, que interferem em qualquer aspecto da ação hormonal. Substâncias obesogênicas compõem um subconjunto de DEs que estimulam inadequadamente a adipogênese e o armazenamento de gordura direta ou indiretamente, aumentando o número e/ou o tamanho das células adiposas, ou interferindo na regulação hormonal do metabolismo, apetite e saciedade. A exposição a essas substâncias químicas durante o período intrauterino e/ou de lactação pode influenciar fortemente a predisposição tardia à obesidade. Os RNAs longos não-codificadores (lncRNAs) são caracterizados por desempenhar relevantes papéis regulatórios em diversos processos biológicos. Considerando a importância da nutrição materna para a regulação dos padrões epigenéticos da prole, o presente estudo visa elucidar os efeitos da exposição ancestral a substâncias obesogênicas na expressão de lncRNAs no tecido adiposo gonadal de camundongos. Os dados de RNA-Seq de 8 amostras de tecido adiposo gonadal de camundongos F4 adultos expostos ancestralmente a dimetilsulfóxido (DMSO) (0,1%) como grupo controle, ou ao DE TBT (50 nM) durante o desenvolvimento uterino e lactação, foram obtidos de estudo previamente realizado (NCBI - GEO Datasets - GSE105051). Após alinhamento e contagem das reads, foi realizada análise de expressão diferencial, e identificamos 74 lncRNAs diferencialmente expressos (p<0.05), visto que 22 apresentaram expressão aumentada no grupo TBT e 52 estavam mais expressos no grupo DMSO em relação ao TBT. As análises dos termos de ontologia gênica (do inglês Gene Ontology - GO) revelaram o enriquecimento dos processos relacionados ao metabolismo da glicose e11 à atividade do receptor ativado por Wnt. Sendo assim, nossos resultados sugerem que a regulação dos lncRNAs e de seus genes parceiros podem contribuir para o controle do processo de adipogênese.

The obesity epidemic is considered a global public health crisis. Increased caloric intake, sedentary lifestyles and/or genetic predisposition are all factors contributing to the epidemic. Although the positive energy balance is one of the most significant causes of obesity, recent research has linked early exposure to Endocrine-Disrupting Chemicals (EDCs) to the disease. The Endocrine Society defines EDCs as "exogenous chemicals, or mixtures of chemicals, that interfere with any aspect of hormonal action". Obesogenic substances make up a subset of EDCs that inadequately stimulate adipogenesis and fat storage directly or indirectly, increasing the number and/or size of fat cells, or interfering with the hormonal regulation of metabolism, appetite and satiety. Exposure to these chemicals during intrauterine and/or lactation periods can strongly influence the late predisposition to obesity. Long noncoding RNAs (lncRNAs) are characterized by playing important regulatory roles in several biological processes. Considering the importance of maternal nutrition to the regulation of epigenetic patterns in the offspring, the present study aimed at investigating the effects of ancestral exposure to obesogenic substances on the expression of lncRNAs in the gonadal adipose tissue of mice. RNA-seq data from 8 gonadal adipose tissue samples from adult F4 mice ancestrally exposed to dimethyl sulfoxide (DMSO) (0.1%) as a control group, or to EDC TBT (50 nM) during uterine development and lactation, were obtained from a previously conducted study (NCBI - GEO Datasets - GSE105051). After reading alignment and counting, differential expression analysis was performed, and we identified 74 differentially expressed lncRNAs were identified (p <0.05), as 22 showed increased expression in the TBT group and 52 were more expressed in the TBT group. The analysis of the GO terms revealed an enrichment for glucose metabolism and the activity of the receptor activated by Wnt. Therefore, our results suggest that the regulation of lncRNAs and their partner genes may contribute to the control of the adipogenesis process.

O uso da halófita Sarcocornia ambigua (Michx.) M.A.Alonso & M.B.Crespo para fitorremediação de Tributilestanho (TBT) em sedimentos costeiros

O Tributilestanho (TBT) é um composto organoestânico que, durante muitos anos, foi utilizado como principal ingrediente ativo com função biocida na formulação de tintas anti-incrustantes. Diversos estudos associaram seu uso a desequilíbrios metabólicos em distintos grupos de animais. Apesar de este composto ter sido banido, a nível mundial, da formulação de tintas anti-incrustantes pela Organização Marítima Internacional em 2008, concentrações significativas de TBT e seus produtos de degradação, dibutilestanho (DBT) e monobutilestanho (MBT), ainda podem ser encontradas em regiões portuárias e ambientes estuarinos costeiros, inclusive no Brasil. A toxicidade deste composto é pouco descrita para o reino vegetal, principalmente quando se trata de plantas costeiras. Algumas plantas crescem em áreas contaminadas e talvez possam ser utilizadas para aumentar o processo de remediação dos compostos organoestânicos em sedimentos costeiros. Sarcocornia ambigua (Michx.) M.A.Alonso & M.B.Crespo (Amaranthaceae) é uma halófita com ampla distribuição em marismas e manguezais da costa brasileira, e também possível agente de fitorremediação do TBT. O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade de S. ambiguade tolerar e descontaminar sedimentos com diferentes concentrações de TBT. Mudas de S. ambigua foram cultivadas durante 78 dias em vasos com sedimentos sem contaminação (controle; n = 15) e contaminados com duas concentrações de TBT (nível baixo: 67,4 ± 7,5 ngSn.g-1; nível alto 499,8 ± 52,1 ngSn.g-1; média ± erro padrão; n = 15 vasos por nível de tratamento). Um grupo adicional de vasos com sedimento, mas sem plantas, foi submetido aos mesmos níveis de contaminação de TBT e também monitorado. O desempenho fitotécnico foi acompanhado através de análises biométricas de altura do caule principal, número de ramificações e comprimento da maior ramificação em três tempos amostrais (0, 53 e 78 dias). Sedimentos contaminados e controle dos vasos com plantas e sem plantas foram coletados no mesmo período amostral, sendo os organoestânicos presentes identificados e quantificados. Todas as plantas expostas aos dois níveis de TBT sobreviveram e cresceram vigorosamente, não ocorrendo diferenças significativas dos parâmetros fitotécnicos em relação às plantas controle. Independente da presença ou ausência de S. ambigua, a degradação de TBT em seus metabólicos (DBT e MBT) foi observada logo após a fortificação dos sedimentos, no início do experimento (6-20% VI do total de organoestânicos; OTs), e aumentou marcadamente ao longo dos primeiros 53 dias (até 42% dos OTs), tanto no nível alto quanto no nível baixo de contaminação. No nível alto de contaminação, a presença de S. ambigua aumentou significativamente a degradação de organoestânicos nos últimos 25 dias do experimento. Ao final dos 78 dias de cultivo, o valor médio de TBT nos sedimentos vegetados (142 ngSn.g-1) foi 55,6% menor e significativamente diferente do valor médio nos sedimentos não vegetados (320 ngSn.g-1). Adicionalmente, nesta data, a concentração média de OTs em sedimentos vegetados reduziu a 56,2% do valor do primeiro dia do experimento, enquanto em sedimentos não vegetados esta redução foi de apenas 13,1%. Consequentemente, a presença das plantas resultou também na redução das concentrações dos metabólitos DBT e MBT, o que pode ter acontecido por alterações induzidas pela planta nas características físico-químicas e/ou microrganismos no sedimento, ou mesmo por incorporação do contaminante na matriz vegetal. A halófita S. ambigua demonstrou tolerância à concentrações de organoestânicos que são potencialmente capazes de acarretar efeitos adversos à biota, encontradas em sedimentos de estuários brasileiros. Esta planta foi capaz de potencializar a degradação do TBT, mostrando-se um possível agente de fitorremediação de organoestânicos.

Tributyltin (TBT) is an organotin compound used for several years as the main biocidal active ingredient in the formulation of antifouling paints. Several studies have associated its use with metabolic imbalances in different groups of animals. Although this compound was globally banned in 2008 from the formulation of antifouling paints by the International Maritime Organization, significant concentrations of TBT and its degradation products, dibutyltin (DBT) and monobutyltin (MBT), can still be found in port regions and coastal estuarine environments, including in Brazil. The toxicity of this compound is poorly described for the plant kingdom, especially when dealing with coastal plants. Some plant species grow on contaminated areas and they may be used to enhance remediation of butyltins from coastal sediments. Sarcocornia ambigua (Michx.) M.A.Alonso & M.B.Crespo (Amaranthaceae) is a halophyte with wide distribution in marshes and mangroves of the Brazilian coast, and it is a potential phytoremediation agent of TBT. The aim of this work was to evaluate the ability of S. ambigua to tolerate and decontaminate sediments with different concentrations of TBT. S. ambigua seedlings were cultivated for 78 days in pots with no contamination (control) and contaminated with two concentrations of TBT (low level: 67.4 ± 7.5 ngSn.g-1; high level 499.8 ± 52.1 ngSn.g-1; mean ± standard error, n = 15 pots per treatment level). An additional pot group submitted to the same levels of TBT contamination but without plants was also monitored. The phytotechnical performance was monitored through biometric analyzes of shoot height, number of branches and length of the largest branch in three sampling times (0, 53 and 78 days). Contaminated and control sediments of pots with plants and without plants were collected in the same sampling period, with organotin present being identified and quantified. All plants exposed to both TBT levels survived and grew vigorously, with no significant differences in plant phytotechnical parameters in relation to control plants. Regardless of the presence or absence of S. ambigua, TBT degradation in its metabolites (DBT and MBT) was observed shortly after sediment fortification, at the beginning of the experiment (6- 20% of total organotin; OTs), and markedly increased along the first 53 days (up to 42% of OTs), both at the high and low level of contamination. At the high level of contamination, the presence of S. ambigua significantly increased the organotin degradation in the last 25 days of the experiment. At the end of the 78 days of culture VIII the mean TBT value in vegetated sediments (142 ngSn.g-1) was 55.6% lower and significantly different from the mean value in non-vegetated sediments (320 ngSn.g- 1). Additionally, on this date, the average concentration of OTs in vegetated sediments reduced to 56.2% of the value of the first day of the experiment, while in non-vegetated sediments this reduction was only 13.1%. Consequently, plant presence also resulted in reduced concentrations of DBT and MBT metabolites, which may have been due to plant-induced changes in physicochemical characteristics and / or microorganisms in the sediment, or even by incorporation of the contaminant into the plant matrix. S. ambigua halophyte has shown tolerance to organotin concentrations that are potentially capable of causing adverse effects on biota found in sediments of Brazilian estuaries. This plant was able to potentiate the degradation of TBT, showing a possible phytoremediation agent of organotin.

O uso da halófita Spartina alterniflora para fitorremediação de Tributilestanho (TBT) em sedimentos costeiros.

Plantas superiores aquáticas expostas a solos costeiros contaminados por compostos inorgânicos e orgânicos, como a grama rizomatosa de zonas entremarés Spartina alterniflora Loisel., têm mostrado potencial de serem utilizadas como fitorremediadoras. O tributilestanho (TBT) é considerado um dos organoestânicos mais tóxicos liberados no ambiente, capaz de provocar alterações no desenvolvimento de bivalves e o efeito imposex em gastrópodes (masculinização de fêmeas), assim como pode afetar o sistema imune humano. Desde a década de 1960 foi empregado em escala global como biocida ativo em tintas anti-incrustantes, sendo esta prática proibida pela Organização Marítima Internacional em 2008. Uma ampla variação de concentrações do TBT e outros butilestanhos, resultantes de sua degradação (DBT e MBT) são detectados em solos estuarinos próximos aos principais portos brasileiros, indicando sua utilização clandestina, comercialização e uma elevada persistência ambiental. O presente estudo investigou, através de um cultivo em condições controladas de laboratório, a tolerância e a capacidade de fitorremediar solos contaminados por tributilestanho (TBT) da grama S. alterniflora. Mudas de S. alterniflora foram cultivadas em vasos com 450g de sedimento fortificados com concentrações médias iniciais de 0 (controle), 179,04 ngTBT.g¹ (nível baixo) e 834,72 ngTBT.g¹ (nível alto) por 90 dias. Nos dias 0, 60 e 90 do experimento, o desenvolvimento das plantas foi quantificado e as concentrações dos butilestanhos medidas no solo dos vasos com plantas, como em vasos adicionais sem plantas. S. alterniflora mostrou uma alta tolerância à contaminação sedimentar por TBT. Nenhuma planta morreu durante o experimento. Hastes inicialmente plantadas (plantas mãe) e os vários perfilhos formados cresceram vigorosamente (médias de altura de 40-70 cm e 3-6 folhas vivas por haste) no solo controle e contaminados com TBT. Plantas mãe em solos contaminados com TBT apresentaram uma pequena redução da renovação foliar (possível menor atividade metabólica) nos primeiros 60 dias. A biomassa foliar nos vasos em todos os níveis de TBT dobrou nos últimos 30 dias, mas plantas no nível baixo de TBT apresentaram biomassa de raízes significativamente (p< 0,05) maiores e menores alocações em biomassa foliar do que os demais níveis de TBT. A presença de S. alterniflora resultou em uma degradação 196% maior dos butilestânicos totais no nível alto de contaminação de TBT do que em vasos controle não vegetados após 90 dias de crescimento. As reduções observadas em vasos com e sem plantas foram, respectivamente, de 72,05% e 25,35%. A rápida metabolização do IX TBT nos solos contaminados e o aumento das frações de DBT e MBT no bioensaio nos primeiros 60 dias sugerem um importante papel de microorganismos na degradação do TBT. A marcada redução dos níveis de DBT, MBT e butilestânicos totais nos últimos 30 dias de cultivo em solos vegetados e com alto nível de TBT sugerem um aumento da capacidade de fitorremediação devido ao crescimento das plantas. Dentro das condições experimentais da S. alterniflora foi capaz de remediar solos contaminados por altos teores de TBT.

Higher aquatic plants exposed to coastal soils contaminated with inorganic and organic compounds, such as the rhizomatous grass of intertidal zones Spartina alterniflora Loisel., have shown potential to be used as phytoremediation agents. Tributyltin (TBT) is considered to be one of the most toxic organotins released into the environment, capable of causing changes in bivalve development and the imposex effect on gastropods (masculinisation of females), as well as affecting the human immune system. Since the 1960s it has been used on a global scale as an active biocide in antifouling paints, and this practice was banned by the International Maritime Organization in 2008. A wide range of TBT concentrations and other butyltins, its degradation products, are detected in estuarine soils close to the main Brazilian ports, indicating its clandestine use, commercialization and a high environmental persistence. The present study investigated the tolerance and phytoremediation of tributyltin contaminated soils (TBT) of the grass S. alterniflora, under laboratory controlled conditions. S. alterniflora sprouts were cultivated in pots with 450g of fortified soil with initial average concentrations of 0 (control), 179.04 ngTBT.g¹ (low level) and 834.72 ngTBT.g¹ (high level) per 90 days. On days 0, 60 and 90 of the experiment, the development of the plants was quantified and the concentrations of the butyltins measured in the soil of the pots with plants, as in additional pots without plants. S. alterniflora showed a high tolerance to sediment contamination by TBT. No plant died during the experiment. Initially planted tillers ("mother plants") and sprouted tillers formed vigorously (mean height 40-70 cm and 3-6 live leaves per tiller) in the control soil and soils contaminated with TBT. Mother plants in TBT-contaminated soils showed a small reduction in leaf turnover (possible lower metabolic activity) in the first 60 days. At all TBT levels, leaf biomass in the pots doubled in the last 30 days, but plants at low TBT level had significantly higher (p <0.05) root biomass and lower leaf biomass allocations than the other TBT levels. After 90 days of growth, the presence of S. alterniflora resulted in a 196% higher degradation of total butyltins at the high level of TBT contamination than in non-vegetated control pots. The reductions observed in pots with and without plants were 72.05% and 25.35%, respectively. The rapid metabolism of TBT in contaminated soils and the increase of DBT and MBT fractions during the first 60 days of the bioassay suggest an important role of microorganisms in the degradation of TBT. In the XI last 30 days of cultivation, the marked reduction of DBT, MBT and total butyltins in vegetated pots with high TBT level suggests an increase in phytoremediation capacity due to plant growth. Within the experimental conditions used, S. alterniflora was able to remediate soils contaminated by high levels of TBT.

EFEITO DO TRIBUTIL-ESTANHO (TBT) SOBRE STRAMONITA RUSTICA (NEOGASTROPODA) E LITTORARIA ANGULIFERA (MESOGASTROPODA)

O tributilestanho (TBT) é um composto organoestânico (COEs) utilizado como biocida em tintas antiincrustantes (AI) para o controle do fouling em embarcações e superfícies submersas. É altamente tóxico aos ecossistemas aquáticos e aos organismos não alvo e, apesar do banimento mundial em 2008, continua sendo amplamente utilizado no Brasil. Em gastrópodes, o TBT atua como disruptor endócrino. Em neogastrópodes provoca a sobreposição de caracteres sexuais masculinos sobre o trato reprodutivo das fêmeas, alteração conhecida por Imposex, sendo este o bioindicador mais usado para esse tipo de contaminação. Em mesogastrópodes pode ocorrer uma transformação gradual do oviduto palial das fêmeas em caracteres reprodutivos masculinos, alteração denominada de Intersex. No litoral sul da Bahia há diversas atividades náuticas potenciais de contaminação por TBT, como portos, estaleiros e marinas. Até o momento, não havia sido registrada a contaminação por TBT neste trecho do litoral. Dessa forma, este estudo teve como objetivo avaliar áreas potencialmente contaminadas por COEs, utilizando, na primeira etapa, o neogastrópode Stramonita rustica como bioindicador e sequencialmente o mesogastrópode Littoraria angulifera, espécie estritamente estuarina. Com esta última realizou-se, além de estudos in situ, bioensaios, com o fim de propor um novo protocolo para avaliação da contaminação por COEs nos estuários. As coletas, processamentos laboratoriais e ensaios foram feitos durante três anos (2014-2016), com amostragem em 30 locais e análise de um total de 1.856 exemplares (S. rustica: n = 330; L. angulifera: n = 1.526). Os animais foram anestesiados com Cloreto de Magnésio (MgCl) e as conchas foram medidas e quebradas para análise dos parâmetros sexuais de cada espécie. Foi confirmado o uso do TBT em áreas com portos, atividades de manutenção de pequenas embarcações e docas no litoral sul da Bahia, através do indicador Imposex em S. rustica. Os atributos populacionais, reprodutivos e comportamentais analisados em populações de L. angulifera, evidenciaram reprodução contínua, diferenças morfométricas entre os sexos e diferenças na altura da concha entre locais antropizados e não antropizados. Esses resultados serviram como subsídio para a avaliação do efeito do TBT nessa espécie e a utilização da mesma como organismo teste para contaminação por esse organometal. Para testar e confirmar as alterações sexuais causadas pelo TBT em fêmeas de L. angulifera através de bioensaios, foi inicialmente determinado o melhor anestésico e a concentração mais eficiente, sendo que o MgCl a 10% atendeu aos critérios (indução ao relaxamento, recuperação e sobrevivência pós anestesia), após, dois bioensaios foram conduzidos: (i) via dieta contaminada com TBT em papel A4 (utilizando duas concentrações de TBTCl e duas classes de tamanho) e (ii) via injeção com o contaminante, onde os animais foram anestesiados, inoculados com TBTCl a 4g/g do espécime. As análises morfométricas foram feitas em microscópio estereoscópico. Os resultados foram comparados aos de L. angulifera de locais contaminados por TBT (em que se fez também análise química de sedimento) e de um sítio controle. Alterações morfométricas sexuais foram confirmadas em ambos os ensaios. Os parâmetros analisados (comprimento do oviduto palial e distância entre a abertura anal e a vulva) nos animais contaminados assemelharam-se com a biometria do aparelho reprodutor masculino, evidenciando alteração sexual. Dessa forma, este estudo confirmou: (i) a utilização de tintas antincrustantes à base de TBT no litoral sul da Bahia através do bioindicador S. rustica e da análise do sedimento; (ii) que L. angulifera obedece aos critérios de escolha para organismo teste em estudos de contaminação ambiental; (iii) que L. angulifera sofre alterações sexuais em decorrência de exposição ao TBT; (iv) que o alongamento do oviduto palial, uma das alterações observadas, pode comprometer a eficiência reprodutiva das populações; (v) que novos estudos relacionados à contaminação ambiental utilizando L. angulifera e os parâmetros biométricos aqui empregados serão importantes para a proposição final desta espécie como organismo sentinela para contaminação por TBT em ambientes estuarinos.

Tributyltin (TBT) is an organostanic compound (OC) used as a biocide in antifouling paints (AI) to prevent bioincrustation in vessels and submerged surfaces. It is highly toxic to aquatic environment and to non-target organisms. Despite the worldwide ban in 2008, it still widely used in Brazil. In gastropods, TBT acts as an endocrine disruptor. In neogastropods its causes the superimposition of male sexual characters onto females reproductive tract, called Imposex, it was been the bioindicator most used for this type of contamination. In mesogastropods, occurs a gradual transformation of female palial oviduct in reproductive masculine characters, denominated Intersex. The southern coast of Bahia has a several nautical activities that are potentially source of contamination by TBT, such as ports, shipyards and marinas. To date, TBT contamination has not been recorded on this stretch of coast. In this way, this study aimed to evaluate areas potentially contaminated by OC´s, using, in the first stage, the neogastropod Stramonita rustica as bioindicator and sequentially the mesogastropod Littoraria angulifera, a strictly estuarine species. With this last one, in addition to wild studies, bioassays were carried out, in order to propose a new protocol for evaluation of OCs contamination in estuaries. The samples, laboratory procedures and bioassays were made during three years (2014-2016), in 30 stations samples where were analyzed a total of 1,856 specimens (S. rustica: n = 330; L. angulifera: n = 1,526). The animals were anesthetized with Magnesium Chloride (MgCl) and the shells were measured and broken to analyze the sexual parameters of each species. Through the indicator Imposex in S. rustica, the use of TBT in areas with ports, maintenance activities of small vessels and docks were confirmed in the southern coast of Bahia. Atributes in L. angulifera populations, such as populational, reproductive and behavioral were analyzed and showed continuous reproduction, morphometric differences between the sexes and differences in shell height between anthropized and non- anthropized sites. These results served as a subsidy for evaluating the effect of TBT in this species and its use as a test organism for contamination by this organometal. To test and confirm the sexual changes caused by TBT in L. angulifera females through bioassays, initially were determinated the best anesthetic and the most efficient concentration for L. angulifera, and the 10% MgCl met the criteria (induction to relaxation, recovery and survival after anesthesia). After, two bioassays were conducted: (i) through a contaminated diet with TBT on A4 paper (using two concentrations of TBTCl and two size classes) and (ii) through injection with contaminant, where the animals were anesthetized, inoculated with TBTC1 at 4g / g of each specimen. Morphometric analyzes were performed under a stereoscopic microscope. The results were compared to those L. angulifera from sites contaminated by TBT (in which chemical sediment analysis was also done) and from a control site. Sexual morphometric changes were confirmed in both bioassys. The analyzed parameters (palial oviduct length and distance between anal opening to vulva) in the intoxicated animals resembled the biometry of the male reproductive tract, evidencing sexual alteration. Thus, this study confirmed: (i) the use of TBT-based antifouling paints on the southern coast of Bahia confirmed through the bioindicator S. rustica and the sediment analysis; (ii) L. angulifera follows the criteria of choice for test organisms in environmental contamination studies; (iii) L. angulifera undergoes sexual changes as a result of exposure to TBT; (iv) the elongation of the palial oviduct, one of the observed changes, can compromise the reproductive efficiency of the populations; (v) and new studies related to environmental contamination using L. angulifera and the biometric parameters used here will be important for the final proposal of this species as a sentinel organism for TBT contamination in estuarine environments.

Imposex em saquaritá Stramonita haemastoma (Neogastropoda: Muricidae) na Baixada Santista / Imposex in the whelk Stramonita haemastoma (Neogastropoda: Muricidae), from Baixada Santista (SP), Brazil

O neogastrópode Stramonita haemastoma sofre ação antrópica pela pesca e pela presença de compostos organoestânicos (tributil-estanho e trifenil-estanho) presentes em tintas anti-incrustantes de embarcações. Esses compostos promovem distúrbios endócrinos gerando masculinização (aparecimento de pênis e vaso deferente) em fêmeas saudáveis (imposex), podendo torná-las estéreis ou mesmo causar morte em casos extremos. Ambas as ações conjugadas podem influenciar a estrutura populacional da espécie, afetando a reprodução e, consequentemente, a reposição de recrutas. Este estudo objetivou avaliar a estrutura populacional da espécie Stramonita haemastoma em dez pontos distintos da Baixada Santista (SP), relacionando-a à pesca e à presença de tributil-estanho. Doze amostragens foram realizadas, entre julho de 2006 e maio de 2007, em localidades com diferentes intensidades quanto às ações antrópicas citadas, sendo analisadas a composição por tamanho e por gênero e a ocorrência indireta do grau de imposex. Os resultados apontaram 100% de fêmeas com imposex em áreas mais próximas ao Porto de Santos. Mesmo em regiões mais afastadas, como Peruíbe, foi registrada a ocorrência de fêmeas imposexadas. Stramonita haemastoma.

The neogastropod Stramonita haemastoma is affected by anthropogenic actions caused by fisheries and pollution from organotin compounds (tributyltin and triphenyltin) present in nautical antifouling paints. These compounds cause an endocrine disruption that imposes male sexual features (penis and vas deferens) to females, which may cause sterilization and even death in extremes cases. Both actions can influence the species population structure, affecting reproduction and, consequently, recruit replacement. The present study aims to evaluate the population structure of S. haemastoma in ten different locations Baixada Santista (SP, Brazil) which were exposed to distinct levels of fishery and tributyltin. Twelve samples were carried out through July 2006 to May 2007 to have size and gender composition analyzed as well as imposex indirect occurrence levels. Results point to a number of 100% female species presenting imposex in areas close to Santos harbor. Even in further areas, in the southward region - Peruibe - the presence of imposex was registered.

Imposex em saquaritá Stramonita haemastoma (Neogastropoda: Muricidae) na Baixada Santista / Imposex in the whelk Stramonita haemastoma (Neogastropoda: Muricidae), from Baixada Santista (SP), Brazil

O neogastrópode Stramonita haemastoma sofre ação antrópica pela pesca e pela presença de compostos organoestânicos (tributil-estanho e trifenil-estanho) presentes em tintas anti-incrustantes de embarcações. Esses compostos promovem distúrbios endócrinos gerando masculinização (aparecimento de pênis e vaso deferente) em fêmeas saudáveis (imposex), podendo torná-las estéreis ou mesmo causar morte em casos extremos. Ambas as ações conjugadas podem influenciar a estrutura populacional da espécie, afetando a reprodução e, consequentemente, a reposição de recrutas. Este estudo objetivou avaliar a estrutura populacional da espécie Stramonita haemastoma em dez pontos distintos da Baixada Santista (SP), relacionando-a à pesca e à presença de tributil-estanho. Doze amostragens foram realizadas, entre julho de 2006 e maio de 2007, em localidades com diferentes intensidades quanto às ações antrópicas citadas, sendo analisadas a composição por tamanho e por gênero e a ocorrência indireta do grau de imposex. Os resultados apontaram 100% de fêmeas com imposex em áreas mais próximas ao Porto de Santos. Mesmo em regiões mais afastadas, como Peruíbe, foi registrada a ocorrência de fêmeas imposexadas. Stramonita haemastoma.(AU)

The neogastropod Stramonita haemastoma is affected by anthropogenic actions caused by fisheries and pollution from organotin compounds (tributyltin and triphenyltin) present in nautical antifouling paints. These compounds cause an endocrine disruption that imposes male sexual features (penis and vas deferens) to females, which may cause sterilization and even death in extremes cases. Both actions can influence the species population structure, affecting reproduction and, consequently, recruit replacement. The present study aims to evaluate the population structure of S. haemastoma in ten different locations Baixada Santista (SP, Brazil) which were exposed to distinct levels of fishery and tributyltin. Twelve samples were carried out through July 2006 to May 2007 to have size and gender composition analyzed as well as imposex indirect occurrence levels. Results point to a number of 100% female species presenting imposex in areas close to Santos harbor. Even in further areas, in the southward region - Peruibe - the presence of imposex was registered.(AU)