Diagnosis of goat tuberculosis using tuberculinization and molecular techniques

Tuberculosis is an infectious, chronic, and worldwide disease. It has been known since the beginning of humanity and still negatively influences public health and livestock, especially, in Brazil, in the northeast. Etiologic agents are the mycobacteria of the Mycobacterium tuberculosis complex, which is the most important in mammals' involvement. The state of Bahia has 68.7% of its territory located in the semiarid region and holds the largest goat herd in the country. Goat breeding is a social and economic activity that adds value to this region. Up to the present, data on goat tuberculosis is unknown in this state. Thus, this study seeks data on tuberculosis prevalence in goats in a semiarid region of Bahia by using the comparative tuberculin test and multiplex polymerase chain reaction (PCR). A total of 600 adult animals of both sexes were evaluated. A prevalence of 0.33% (2/600) and 33.33% (1/3) properties were found for positive animals. Each assessed property had a questionnaire to analyze the epidemiological data management and relevant aspects for the disease occurrence. To confirm the positive tuberculin test results, PCR was used to detect and identify the pathogenic mycobacteria involved in the infection. It is concluded that most of the properties performing goat breeding in the region show low technification levels and promote farming between different species. Low prevalence of the disease alerts preventive measures to avoid major proportion situations that could influence the goat breeding in the state.

Bovine tuberculosis: diagnosis in dairy cattle through the association of analyzes / Tuberculose bovina: diagnóstico em bovinos leiteiros através da associação de análises

Tuberculosis is a chronic anthropozoonosis of worldwide occurrence, caused by the bacterium Mycobacterium tuberculosis and its variants. In Brazil, the National Program for the Control and Eradication of Brucellosis and Tuberculosis in cattle, is responsible for diagnosing and the correctly allocate positive animals, but there is still a lack of definitive diagnosis of the disease. This study described the use of five diagnostic tools that can be used, preferably together, for the confirmation of suspected cases. These tools included the clinical examination comparative cervical tuberculin test, macroscopic findings during the slaughtering and histopathology of the damaged tissues followed by histochemistry. We evaluated a total of 211 dairy cattle, where 15.1% (32/211) had classic clinical signs of bovine tuberculosis, 74 (35%) showed reactivity in the comparative cervical tuberculin test. Of the total number of animals, 141 (66.8%) were referred for sanitary slaughter due to legal and control issues in the outbreaks of the disease. In the follow-up of slaughtering and inspection of viscera and carcasses, 74 (52.5%) had macroscopic lesions compatible with bovine tuberculosis, while 67 (47.5%) showed no visible changes. During the inspection, fragments of lymph nodes and liver and lung parenchyma were collected from five cattle with macroscopic lesions and five with no lesions. The histopathological analysis showed numerous areas of caseous necrosis with or without central calcification and granulomatous inflammatory infiltrate. In the special staining of Ziehl-Neelsen, numerous acid-fast bacilli were evidenced in all cases.(AU)

A tuberculose é uma antropozoonose crônica de ocorrência mundial, causada pela bactéria Mycobacterium tuberculosis e suas variantes. No Brasil existe o Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose em bovinos que viabiliza o diagnóstico e a destinação correta dos animais positivos, porém ainda há carência quanto ao diagnóstico da doença. Assim, este trabalho descreve a utilização de cinco ferramentas diagnósticas para a confirmação de casos suspeitos de tuberculose. As ferramentas utilizadas compreenderam o exame clínico, teste tuberculínico cervical comparativo, os achados macroscópicos durante o abate sanitário e a histopatologia dos tecidos lesados seguido de histoquímica. O estudo avaliou um total de 211 bovinos leiteiros, dos quais 15,1% (32/211) apresentaram sinais clínicos clássicos de tuberculose bovina, 35,1% (74/211) apresentaram reatividade no teste tuberculínico cervical comparativo, e 143 animais (67,8%) foram encaminhados para abate sanitário devido a questões legais e de controle nos focos da doença. No acompanhamento do abate e inspeção sanitária de vísceras e carcaças verificou-se que 51,8% (74/143) dos bovinos abatidos apresentavam lesões macroscópicas compatíveis com tuberculose bovina, enquanto 48,2% (69/143) não apresentavam alterações visíveis. Durante a inspeção foram coletados fragmentos de linfonodos e parênquima de fígado e pulmão de cinco bovinos com lesões macroscópicas e de cinco sem lesões, que na análise histopatológica apresentaram numerosas áreas de necrose caseosa com ou sem calcificação central e infiltrado inflamatório granulomatoso. Na coloração de Ziehl-Neelsen foram evidenciados numerosos bacilos álcool-ácido resistentes em todos os casos. Assim, diante dos resultados obtidos verifica-se que as análises empregadas no presente estudo foram de extrema importância para o diagnóstico acurado de tuberculose em bovinos.(AU)

Bovine tuberculosis: diagnosis in dairy cattle through the association of analyzes / Tuberculose bovina: diagnóstico em bovinos leiteiros através da associação de análises

Tuberculosis is a chronic anthropozoonosis of worldwide occurrence, caused by the bacterium Mycobacterium tuberculosis and its variants. In Brazil, the National Program for the Control and Eradication of Brucellosis and Tuberculosis in cattle, is responsible for diagnosing and the correctly allocate positive animals, but there is still a lack of definitive diagnosis of the disease. This study described the use of five diagnostic tools that can be used, preferably together, for the confirmation of suspected cases. These tools included the clinical examination comparative cervical tuberculin test, macroscopic findings during the slaughtering and histopathology of the damaged tissues followed by histochemistry. We evaluated a total of 211 dairy cattle, where 15.1% (32/211) had classic clinical signs of bovine tuberculosis, 74 (35%) showed reactivity in the comparative cervical tuberculin test. Of the total number of animals, 141 (66.8%) were referred for sanitary slaughter due to legal and control issues in the outbreaks of the disease. In the follow-up of slaughtering and inspection of viscera and carcasses, 74 (52.5%) had macroscopic lesions compatible with bovine tuberculosis, while 67 (47.5%) showed no visible changes. During the inspection, fragments of lymph nodes and liver and lung parenchyma were collected from five cattle with macroscopic lesions and five with no lesions. The histopathological analysis showed numerous areas of caseous necrosis with or without central calcification and granulomatous inflammatory infiltrate. In the special staining of Ziehl-Neelsen, numerous acid-fast bacilli were evidenced in all cases.(AU)

A tuberculose é uma antropozoonose crônica de ocorrência mundial, causada pela bactéria Mycobacterium tuberculosis e suas variantes. No Brasil existe o Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose em bovinos que viabiliza o diagnóstico e a destinação correta dos animais positivos, porém ainda há carência quanto ao diagnóstico da doença. Assim, este trabalho descreve a utilização de cinco ferramentas diagnósticas para a confirmação de casos suspeitos de tuberculose. As ferramentas utilizadas compreenderam o exame clínico, teste tuberculínico cervical comparativo, os achados macroscópicos durante o abate sanitário e a histopatologia dos tecidos lesados seguido de histoquímica. O estudo avaliou um total de 211 bovinos leiteiros, dos quais 15,1% (32/211) apresentaram sinais clínicos clássicos de tuberculose bovina, 35,1% (74/211) apresentaram reatividade no teste tuberculínico cervical comparativo, e 143 animais (67,8%) foram encaminhados para abate sanitário devido a questões legais e de controle nos focos da doença. No acompanhamento do abate e inspeção sanitária de vísceras e carcaças verificou-se que 51,8% (74/143) dos bovinos abatidos apresentavam lesões macroscópicas compatíveis com tuberculose bovina, enquanto 48,2% (69/143) não apresentavam alterações visíveis. Durante a inspeção foram coletados fragmentos de linfonodos e parênquima de fígado e pulmão de cinco bovinos com lesões macroscópicas e de cinco sem lesões, que na análise histopatológica apresentaram numerosas áreas de necrose caseosa com ou sem calcificação central e infiltrado inflamatório granulomatoso. Na coloração de Ziehl-Neelsen foram evidenciados numerosos bacilos álcool-ácido resistentes em todos os casos. Assim, diante dos resultados obtidos verifica-se que as análises empregadas no presente estudo foram de extrema importância para o diagnóstico acurado de tuberculose em bovinos.(AU)

First record of bovine tuberculosis in the State of Acre, Brazil / Primeiro registro da tuberculose bovina no Estado do Acre, Brasil

Bovine tuberculosis is an infectious disease caused by the bacterium Mycobacterium bovis. It has great health and economic relevance for dairy herds, in addition to being a zoonosis. Therefore, the aim of this study was to check the frequency of bovine tuberculosis in dairy herds in the microregion of Rio Branco, Acre. For diagnosis, the tuberculin skin test wasused through the comparative technique. Of 527 cattle subjected to testing, one animal (0.2%) tested positive for the reagent. According to the results of this preliminary study, which reports the first record of bovine tuberculosis in Acre, it can be seen that the frequency of this disease in the microregion of Rio Branco indicates a low spread of M. bovis in dairy herds. This condition can assist with elimination of possible outbreakswithout incurring high costs to producers and, subsequently, help Acre achieve a tuberculosis-free status through the process of eradication.

A tuberculose bovina é uma doença infectocontagiosa ocasionada pelo Mycobacterium bovis, a qual possui grande relevância sanitária e econômica para rebanhos leiteiros, além de ser uma zoonose. Objetivou-se verificar a freqüência da tuberculose bovina em rebanhos leiteiros da microrregião de Rio Branco, Acre. Para o diagnóstico, foi utilizado o teste tuberculínico pela técnica comparativa. Dos 527 bovinos submetidos ao teste, um animal (0,2%) foi reagente positivo. Conforme os resultados deste estudo preliminar, que se configura o primeiro registro da tuberculose bovina no Acre, observa-se que a frequência da enfermidade na microrregião de Rio Branco denota uma baixa propagaçãodo M. bovis nos rebanhos leiteiros. Esta condição é favorável para eliminar possíveis focos sem elevados custos ao produtor e, posteriormente, alcançar o status de estado livre pelo processo de erradicação.

First record of bovine tuberculosis in the State of Acre, Brazil / Primeiro registro da tuberculose bovina no Estado do Acre, Brasil

Bovine tuberculosis is an infectious disease caused by the bacterium Mycobacterium bovis. It has great health and economic relevance for dairy herds, in addition to being a zoonosis. Therefore, the aim of this study was to check the frequency of bovine tuberculosis in dairy herds in the microregion of Rio Branco, Acre. For diagnosis, the tuberculin skin test wasused through the comparative technique. Of 527 cattle subjected to testing, one animal (0.2%) tested positive for the reagent. According to the results of this preliminary study, which reports the first record of bovine tuberculosis in Acre, it can be seen that the frequency of this disease in the microregion of Rio Branco indicates a low spread of M. bovis in dairy herds. This condition can assist with elimination of possible outbreakswithout incurring high costs to producers and, subsequently, help Acre achieve a tuberculosis-free status through the process of eradication.(AU)

A tuberculose bovina é uma doença infectocontagiosa ocasionada pelo Mycobacterium bovis, a qual possui grande relevância sanitária e econômica para rebanhos leiteiros, além de ser uma zoonose. Objetivou-se verificar a freqüência da tuberculose bovina em rebanhos leiteiros da microrregião de Rio Branco, Acre. Para o diagnóstico, foi utilizado o teste tuberculínico pela técnica comparativa. Dos 527 bovinos submetidos ao teste, um animal (0,2%) foi reagente positivo. Conforme os resultados deste estudo preliminar, que se configura o primeiro registro da tuberculose bovina no Acre, observa-se que a frequência da enfermidade na microrregião de Rio Branco denota uma baixa propagaçãodo M. bovis nos rebanhos leiteiros. Esta condição é favorável para eliminar possíveis focos sem elevados custos ao produtor e, posteriormente, alcançar o status de estado livre pelo processo de erradicação.(AU)

Prevalence of bovine tuberculosis in the Aksu Region of Xinjiang, China, between 1985 and 2016 / Prevalência de tuberculose bovina na região Aksu de Xinjiang, China, entre 1985 e 2016

Prevalence of bovine tuberculosis infection in cattle in Aksu Prefecture determined by intradermal tuberculin skin test (TST), between 1985 and 2016. Cattle were analyzed according to region, feeding pattern, herds and age. A total of 890,009 cattle were tested, with overall bovine tuberculosis prevalence of 0.13% (1172/890009). Statistically significant difference was found in feeding pattern and herds. Prevalence in cows (0.19%, 615/327022) was higher than that in beeves (P< 0.01, OR= 1.903, 95% CI = 1.696 to 2.134). Significant difference (P< 0.01; OR= 2.238, 95%; CI= 1.937 to 2.585) was evident for rates for bovine tuberculosis in the peasant household (0.12%, 942/802343) and farm groups (0.26%, 230/87666). The overall prevalence of bTB was decreased in the Aksu Prefecture, especially the positive rate was under 0.1% in 2010s. We concluded that the control measures forbovine tuberculosis in the Aksu region cattle herds are effective.(AU)

Prevalência de infecção por tuberculose bovina em gado na prefeitura de Aksu determinada por teste cutâneo tuberculínico (TST) entre 1985 e 2016 foi avaliada. O gado foi analisado de acordo com região, padrão alimentar, rebanho e idade. Um total de 890009 animais foram testados, com prevalência de 0,13% de tuberculose bovina (1172/890009). Diferença estatisticamente significativa foi encontrada em padrão alimentar e rebanhos. Prevalência em vacas (0,19%, 615/327022) foi mais alta que em bois (P< 0,01, OR= 1,903, 95% CI = 1,696 a 2,134). Diferenças significativas (P< 0,01; OR= 2,238, 95%; CI= 1,937 a 2,585) foram evidentes em taxas para tuberculose bovina em casas de camponeses (0,12%, 942/802343) e grupos de fazendeiros (0,26%, 230/87666). A prevalência de bTB caiu na prefeitura Aksu, a taxa positiva se encontrava abaixo de 0.1% a partir de 2010. Conclui-se que as medidas de controle para tuberculose bovina na região de Aksu foram eficazes.(AU)

Prevalence of bovine tuberculosis in the Aksu Region of Xinjiang, China, between 1985 and 2016 / Prevalência de tuberculose bovina na região Aksu de Xinjiang, China, entre 1985 e 2016

Prevalence of bovine tuberculosis infection in cattle in Aksu Prefecture determined by intradermal tuberculin skin test (TST), between 1985 and 2016. Cattle were analyzed according to region, feeding pattern, herds and age. A total of 890,009 cattle were tested, with overall bovine tuberculosis prevalence of 0.13% (1172/890009). Statistically significant difference was found in feeding pattern and herds. Prevalence in cows (0.19%, 615/327022) was higher than that in beeves (P< 0.01, OR= 1.903, 95% CI = 1.696 to 2.134). Significant difference (P< 0.01; OR= 2.238, 95%; CI= 1.937 to 2.585) was evident for rates for bovine tuberculosis in the peasant household (0.12%, 942/802343) and farm groups (0.26%, 230/87666). The overall prevalence of bTB was decreased in the Aksu Prefecture, especially the positive rate was under 0.1% in 2010s. We concluded that the control measures forbovine tuberculosis in the Aksu region cattle herds are effective.(AU)

Prevalência de infecção por tuberculose bovina em gado na prefeitura de Aksu determinada por teste cutâneo tuberculínico (TST) entre 1985 e 2016 foi avaliada. O gado foi analisado de acordo com região, padrão alimentar, rebanho e idade. Um total de 890009 animais foram testados, com prevalência de 0,13% de tuberculose bovina (1172/890009). Diferença estatisticamente significativa foi encontrada em padrão alimentar e rebanhos. Prevalência em vacas (0,19%, 615/327022) foi mais alta que em bois (P< 0,01, OR= 1,903, 95% CI = 1,696 a 2,134). Diferenças significativas (P< 0,01; OR= 2,238, 95%; CI= 1,937 a 2,585) foram evidentes em taxas para tuberculose bovina em casas de camponeses (0,12%, 942/802343) e grupos de fazendeiros (0,26%, 230/87666). A prevalência de bTB caiu na prefeitura Aksu, a taxa positiva se encontrava abaixo de 0.1% a partir de 2010. Conclui-se que as medidas de controle para tuberculose bovina na região de Aksu foram eficazes.(AU)

Nasal swab real-time PCR is not suitable for in vivo diagnosis of bovine tuberculosis

ABSTRACT: Bovine tuberculosis (bTB) is a zoonosis causing economic losses and public health risks in many countries. The disease diagnosis in live animals is performed by intradermal tuberculin test, which is based on delayed hypersensitivity reactions. As tuberculosis has complex immune response, this test has limitations in sensitivity and specificity. This study sought to test an alternative approach for in vivo diagnosis of bovine tuberculosis, based on real-time polymerase chain reaction (PCR). DNA samples, extracted from nasal swabs of live cows, were used for SYBR® Green real-time PCR, which is able to differentiate between Mycobacterium tuberculosis and Mycobacterium avium complexes. Statistical analysis was performed to compare the results of tuberculin test, the in vivo gold standard bTB diagnosis method, with real-time PCR, thereby determining the specificity and sensitivity of molecular method. Cervical comparative test (CCT) was performed in 238 animals, of which 193 had suitable DNA from nasal swabs for molecular analysis, as indicated by amplification of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) gene, and were included in the study. In total, 25 (10.5%) of the animals were CCT reactive, of which none was positive in the molecular test. Of the 168 CCT negative animals, four were positive for M. tuberculosis complex at real time PCR from nasal swabs. The comparison of these results generated values of sensitivity and specificity of 0% and 97.6%, respectively; moreover, low coefficients of agreement and correlation (-0.029 and -0.049, respectively) between the results obtained with both tests were also observed. This study showed that real-time PCR from nasal swabs is not suitable for in vivo diagnosis of bovine tuberculosis; thus tuberculin skin test is still the best option for this purpose.

RESUMO: A tuberculose bovina (bTB) é uma zoonose que causa perdas econômicas e riscos à saúde pública em muitos países. O diagnóstico da doença em animais vivos é realizado pelo teste intradérmico da tuberculina, que é baseado em reações de hipersensibilidade tardia. Como a tuberculose tem resposta imunológica complexa, este teste tem limitações em termos de sensibilidade e especificidade. Este estudo procurou desenvolver uma abordagem alternativa para o diagnóstico in vivo da tuberculose bovina, com base na reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. As amostras de DNA, extraídas de suabes nasais de vacas vivas, foram usadas para PCR em tempo real com SYBR® Green, capaz de diferenciar os complexos Mycobacterium tuberculosis e Mycobacterium avium. A análise estatística foi realizada para comparar os resultados de teste de tuberculina, padrão ouro para o diagnóstico in vivo da bTB, com PCR em tempo real, determinando-se assim a especificidade e sensibilidade do método molecular. O teste cervical comparativo (TCC) foi realizado em 238 animais, dos quais 193 tiveram DNA dos suabes nasais adequados para análise molecular, como indicado pela amplificação do gene gliceraldeído-3-fosfato-desidrogenase (GAPDH), e foram incluídos no estudo. No total, 25 (10,5%) animais foram reativos no TCC, dos quais nenhum foi positivo no teste molecular. Dos 168 animais negativos no TCC, quatro foram positivos para o complexo M. tuberculosis na PCR em tempo real a partir dos suabes nasais. A comparação destes resultados gerou valores de sensibilidade e especificidade de 0% e 97,6%, respectivamente; além disso, baixos coeficientes de concordância e correlação (-0,029 e -0,049, respectivamente) entre os resultados obtidos com ambos os testes também foram observados. Este estudo mostrou que a PCR em tempo real a partir de suabes nasais não é adequada para o diagnóstico in vivo da tuberculose bovina; portanto, o teste da tuberculina ainda é a melhor opção para este fim.

Nasal swab real-time PCR is not suitable for in vivo diagnosis of bovine tuberculosis / A PCR em tempo real de swab nasal não é adequada para o diagnóstico in vivo de tuberculose bovina

Bovine tuberculosis (bTB) is a zoonosis causing economic losses and public health risks in many countries. The disease diagnosis in live animals is performed by intradermal tuberculin test, which is based on delayed hypersensitivity reactions. As tuberculosis has complex immune response, this test has limitations in sensitivity and specificity. This study sought to test an alternative approach for in vivo diagnosis of bovine tuberculosis, based on real-time polymerase chain reaction (PCR). DNA samples, extracted from nasal swabs of live cows, were used for SYBR® Green real-time PCR, which is able to differentiate between Mycobacterium tuberculosis and Mycobacterium avium complexes. Statistical analysis was performed to compare the results of tuberculin test, the in vivo gold standard bTB diagnosis method, with real-time PCR, thereby determining the specificity and sensitivity of molecular method. Cervical comparative test (CCT) was performed in 238 animals, of which 193 had suitable DNA from nasal swabs for molecular analysis, as indicated by amplification of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) gene, and were included in the study. In total, 25 (10.5%) of the animals were CCT reactive, of which none was positive in the molecular test. Of the 168 CCT negative animals, four were positive for M. tuberculosis complex at real time PCR from nasal swabs. The comparison of these results generated values of sensitivity and specificity of 0% and 97.6%, respectively; moreover, low coefficients of agreement and correlation (-0.029 and -0.049, respectively) between the results obtained with both tests were also observed. This study showed that real-time PCR from nasal swabs is not suitable for in vivo diagnosis of bovine tuberculosis; thus tuberculin skin test is still the best option for this purpose.(AU)

A tuberculose bovina (bTB) é uma zoonose que causa perdas econômicas e riscos à saúde pública em muitos países. O diagnóstico da doença em animais vivos é realizado pelo teste intradérmico da tuberculina, que é baseado em reações de hipersensibilidade tardia. Como a tuberculose tem resposta imunológica complexa, este teste tem limitações em termos de sensibilidade e especificidade. Este estudo procurou desenvolver uma abordagem alternativa para o diagnóstico in vivo da tuberculose bovina, com base na reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. As amostras de DNA, extraídas de suabes nasais de vacas vivas, foram usadas para PCR em tempo real com SYBR® Green, capaz de diferenciar os complexos Mycobacterium tuberculosis e Mycobacterium avium. A análise estatística foi realizada para comparar os resultados de teste de tuberculina, padrão ouro para o diagnóstico in vivo da bTB, com PCR em tempo real, determinando-se assim a especificidade e sensibilidade do método molecular. O teste cervical comparativo (TCC) foi realizado em 238 animais, dos quais 193 tiveram DNA dos suabes nasais adequados para análise molecular, como indicado pela amplificação do gene gliceraldeído-3-fosfato-desidrogenase (GAPDH), e foram incluídos no estudo. No total, 25 (10,5%) animais foram reativos no TCC, dos quais nenhum foi positivo no teste molecular. Dos 168 animais negativos no TCC, quatro foram positivos para o complexo M. tuberculosis na PCR em tempo real a partir dos suabes nasais. A comparação destes resultados gerou valores de sensibilidade e especificidade de 0% e 97,6%, respectivamente; além disso, baixos coeficientes de concordância e correlação (-0,029 e -0,049, respectivamente) entre os resultados obtidos com ambos os testes também foram observados. Este estudo mostrou que a PCR em tempo real a partir de suabes nasais não é adequada para o diagnóstico in vivo da tuberculose bovina; portanto, o teste da tuberculina ainda é a melhor opção para este fim.(AU)

Nasal swab real-time PCR is not suitable for in vivo diagnosis of bovine tuberculosis / A PCR em tempo real de swab nasal não é adequada para o diagnóstico in vivo de tuberculose bovina

Bovine tuberculosis (bTB) is a zoonosis causing economic losses and public health risks in many countries. The disease diagnosis in live animals is performed by intradermal tuberculin test, which is based on delayed hypersensitivity reactions. As tuberculosis has complex immune response, this test has limitations in sensitivity and specificity. This study sought to test an alternative approach for in vivo diagnosis of bovine tuberculosis, based on real-time polymerase chain reaction (PCR). DNA samples, extracted from nasal swabs of live cows, were used for SYBR® Green real-time PCR, which is able to differentiate between Mycobacterium tuberculosis and Mycobacterium avium complexes. Statistical analysis was performed to compare the results of tuberculin test, the in vivo gold standard bTB diagnosis method, with real-time PCR, thereby determining the specificity and sensitivity of molecular method. Cervical comparative test (CCT) was performed in 238 animals, of which 193 had suitable DNA from nasal swabs for molecular analysis, as indicated by amplification of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) gene, and were included in the study. In total, 25 (10.5%) of the animals were CCT reactive, of which none was positive in the molecular test. Of the 168 CCT negative animals, four were positive for M. tuberculosis complex at real time PCR from nasal swabs. The comparison of these results generated values of sensitivity and specificity of 0% and 97.6%, respectively; moreover, low coefficients of agreement and correlation (-0.029 and -0.049, respectively) between the results obtained with both tests were also observed. This study showed that real-time PCR from nasal swabs is not suitable for in vivo diagnosis of bovine tuberculosis; thus tuberculin skin test is still the best option for this purpose.(AU)

A tuberculose bovina (bTB) é uma zoonose que causa perdas econômicas e riscos à saúde pública em muitos países. O diagnóstico da doença em animais vivos é realizado pelo teste intradérmico da tuberculina, que é baseado em reações de hipersensibilidade tardia. Como a tuberculose tem resposta imunológica complexa, este teste tem limitações em termos de sensibilidade e especificidade. Este estudo procurou desenvolver uma abordagem alternativa para o diagnóstico in vivo da tuberculose bovina, com base na reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. As amostras de DNA, extraídas de suabes nasais de vacas vivas, foram usadas para PCR em tempo real com SYBR® Green, capaz de diferenciar os complexos Mycobacterium tuberculosis e Mycobacterium avium. A análise estatística foi realizada para comparar os resultados de teste de tuberculina, padrão ouro para o diagnóstico in vivo da bTB, com PCR em tempo real, determinando-se assim a especificidade e sensibilidade do método molecular. O teste cervical comparativo (TCC) foi realizado em 238 animais, dos quais 193 tiveram DNA dos suabes nasais adequados para análise molecular, como indicado pela amplificação do gene gliceraldeído-3-fosfato-desidrogenase (GAPDH), e foram incluídos no estudo. No total, 25 (10,5%) animais foram reativos no TCC, dos quais nenhum foi positivo no teste molecular. Dos 168 animais negativos no TCC, quatro foram positivos para o complexo M. tuberculosis na PCR em tempo real a partir dos suabes nasais. A comparação destes resultados gerou valores de sensibilidade e especificidade de 0% e 97,6%, respectivamente; além disso, baixos coeficientes de concordância e correlação (-0,029 e -0,049, respectivamente) entre os resultados obtidos com ambos os testes também foram observados. Este estudo mostrou que a PCR em tempo real a partir de suabes nasais não é adequada para o diagnóstico in vivo da tuberculose bovina; portanto, o teste da tuberculina ainda é a melhor opção para este fim.(AU)

Situação da tuberculose em ovinos consorciados com bovinos leiteiros na região sudoeste maranhense / State of tuberculosis in sheep bred with dairy cattle in the southwest region of Maranhão

In order to know the situation of ovine tuberculosis in Maranhão, Brazil, we evaluated 343 sheep in the southwest region of the state, of both sexes (247 females and 96 males), aged over six months, through the comparative cervical test (TCC), with tuberculin inoculation in the right cervical region. Cranially, avian purified protein derivate (PPD) was injected; and caudally, beef PPD was injected, in individual doses of 0.1 mL. All animals were negative for tuberculosis; however, 65 sheep had higher reactions to bovine tuberculin than to the avian one. To investigate the possibility of low awareness or anergy in animals with advanced tuberculosis, one cachectic sheep was necropsied, aged four years, with negative results for TCC, but with reaction to avian tuberculin and enlarged hardened lymph nodes. The results indicated C. pseudotuberculosis, Actinomyces pyogenes, Staphylococcus aureus and Mycobacterium sp infections. Culture and isolation resulted in Pseudomonas aeruginosa and Bacillus sp. No bacterial structures compatible with acid-fast bacteria were found. The results confirmed the absence of animals reactive to M. bovis, assuming no tuberculosis in sheep in the study area.

Objetivando conhecer a situação da tuberculose ovina no Maranhão, avaliaram-se 343 ovinos da região sudoeste do estado, 247 fêmeas e 96 machos, com idade acima de 6 meses, por meio do teste cervical comparativo (TCC), com inoculação de tuberculinas na região cervical direita. Cranialmente, injetou-se derivado proteico purificado (PPD) aviário; e caudalmente, PPD bovino, em doses individuais de 0,1 mL. Todos os animais apresentaram resultado negativo para tuberculose, entretanto, 65 ovinos apresentaram reação à tuberculina bovina superior à aviária. Para investigar a possibilidade de baixa sensibilização ou anergia em animais com tuberculose avançada, foi necropsiado um ovino caquético, idade acima de quatro anos, com resultado negativo ao TCC, porém, com reação à tuberculina aviária e linfonodos aumentados com consistência endurecida. Os resultados indicaram infecções por C. pseudotuberculosis, Actinomyces pyogenes, Staphylococcus aureus e Mycobacterium sp. A cultura e o isolamento resultaram em Pseudomonas aeruginosas e Bacillus sp. Não foram visualizadas estruturas bacterianas compatíveis com bacilo álcool ácido resistente (BAAR). Os resultados confirmam ausência de animais reagentes ao M. bovis, pressupondo inexistência da tuberculose em ovinos na região estudada.

Situação da tuberculose em ovinos consorciados com bovinos leiteiros na região sudoeste maranhense / State of tuberculosis in sheep bred with dairy cattle in the southwest region of Maranhão

Objetivando conhecer a situação da tuberculose ovina no Maranhão, avaliaram-se 343 ovinos da região sudoeste do estado, 247 fêmeas e 96 machos, com idade acima de 6 meses, por meio do teste cervical comparativo (TCC), com inoculação de tuberculinas na região cervical direita. Cranialmente, injetou-se derivado proteico purificado (PPD) aviário; e caudalmente, PPD bovino, em doses individuais de 0,1 mL. Todos os animais apresentaram resultado negativo para tuberculose, entretanto, 65 ovinos apresentaram reação à tuberculina bovina superior à aviária. Para investigar a possibilidade de baixa sensibilização ou anergia em animais com tuberculose avançada, foi necropsiado um ovino caquético, idade acima de quatro anos, com resultado negativo ao TCC, porém, com reação à tuberculina aviária e linfonodos aumentados com consistência endurecida. Os resultados indicaram infecções por C. pseudotuberculosis, Actinomyces pyogenes, Staphylococcus aureus e Mycobacterium sp. A cultura e o isolamento resultaram em Pseudomonas aeruginosas e Bacillus sp. Não foram visualizadas estruturas bacterianas compatíveis com bacilo álcool ácido resistente (BAAR). Os resultados confirmam ausência de animais reagentes ao M. bovis, pressupondo inexistência da tuberculose em ovinos na região estudada.(AU)

In order to know the situation of ovine tuberculosis in Maranhão, Brazil, we evaluated 343 sheep in the southwest region of the state, of both sexes (247 females and 96 males), aged over six months, through the comparative cervical test (TCC), with tuberculin inoculation in the right cervical region. Cranially, avian purified protein derivate (PPD) was injected; and caudally, beef PPD was injected, in individual doses of 0.1 mL. All animals were negative for tuberculosis; however, 65 sheep had higher reactions to bovine tuberculin than to the avian one. To investigate the possibility of low awareness or anergy in animals with advanced tuberculosis, one cachectic sheep was necropsied, aged four years, with negative results for TCC, but with reaction to avian tuberculin and enlarged hardened lymph nodes. The results indicated C. pseudotuberculosis, Actinomyces pyogenes, Staphylococcus aureus and Mycobacterium sp infections. Culture and isolation resulted in Pseudomonas aeruginosa and Bacillus sp. No bacterial structures compatible with acid-fast bacteria were found. The results confirmed the absence of animals reactive to M. bovis, assuming no tuberculosis in sheep in the study area.(AU)

Situação da tuberculose em ovinos consorciados com bovinos leiteiros na região sudoeste maranhense / State of tuberculosis in sheep bred with dairy cattle in the southwest region of Maranhão

In order to know the situation of ovine tuberculosis in Maranhão, Brazil, we evaluated 343 sheep in the southwest region of the state, of both sexes (247 females and 96 males), aged over six months, through the comparative cervical test (TCC), with tuberculin inoculation in the right cervical region. Cranially, avian purified protein derivate (PPD) was injected; and caudally, beef PPD was injected, in individual doses of 0.1 mL. All animals were negative for tuberculosis; however, 65 sheep had higher reactions to bovine tuberculin than to the avian one. To investigate the possibility of low awareness or anergy in animals with advanced tuberculosis, one cachectic sheep was necropsied, aged four years, with negative results for TCC, but with reaction to avian tuberculin and enlarged hardened lymph nodes. The results indicated C. pseudotuberculosis, Actinomyces pyogenes, Staphylococcus aureus and Mycobacterium sp infections. Culture and isolation resulted in Pseudomonas aeruginosa and Bacillus sp. No bacterial structures compatible with acid-fast bacteria were found. The results confirmed the absence of animals reactive to M. bovis, assuming no tuberculosis in sheep in the study area.(AU)

Objetivando conhecer a situação da tuberculose ovina no Maranhão, avaliaram-se 343 ovinos da região sudoeste do estado, 247 fêmeas e 96 machos, com idade acima de 6 meses, por meio do teste cervical comparativo (TCC), com inoculação de tuberculinas na região cervical direita. Cranialmente, injetou-se derivado proteico purificado (PPD) aviário; e caudalmente, PPD bovino, em doses individuais de 0,1 mL. Todos os animais apresentaram resultado negativo para tuberculose, entretanto, 65 ovinos apresentaram reação à tuberculina bovina superior à aviária. Para investigar a possibilidade de baixa sensibilização ou anergia em animais com tuberculose avançada, foi necropsiado um ovino caquético, idade acima de quatro anos, com resultado negativo ao TCC, porém, com reação à tuberculina aviária e linfonodos aumentados com consistência endurecida. Os resultados indicaram infecções por C. pseudotuberculosis, Actinomyces pyogenes, Staphylococcus aureus e Mycobacterium sp. A cultura e o isolamento resultaram em Pseudomonas aeruginosas e Bacillus sp. Não foram visualizadas estruturas bacterianas compatíveis com bacilo álcool ácido resistente (BAAR). Os resultados confirmam ausência de animais reagentes ao M. bovis, pressupondo inexistência da tuberculose em ovinos na região estudada.(AU)

Infecção por Mycobacterium sp. em herbívoros selvagens de cativeiro no Rio Grande do Sul: estudo retrospectivo e detecção imuno-histoquímica (2003-2015)

ABSTRACT: Tuberculosis is a debilitating infecto-contagious disease, caused by an acid-fast bacillus (AFB) that belong to different species of the Mycobacterium tuberculosis complex (MTC). Mycobacteriosis are important diseases in veterinary medicine because of their zoonotic potential and worldwide distribution, affecting all classes of vertebrates. In wild animals the mycobacteriosis have been reported mainly as a problem in captivity. There are also reports in free-ranging wildlife, endangering and hampering tuberculosis erradication programs in animal production. The diagnosis of the disease in wildlife is usually postmortem, because the tuberculin test is not standardized for wildlife species, and also it is not reliable for screening. The postmortem diagnosis is based on macroscopic findings, microscopic detection of AFB at Ziehl-Neelsen staining (ZN), and mainly isolation and identification of the agent. However, only gross and microscopic exams do not allow to distinguish the species of Mycobacterium involved. The immunostaining with polyclonal anti-Mycobacterium tuberculosis confirms tuberculosis infection, but is not specific; there may be marking of other mycobacteria. The aim of this study was to describe the histologic findings, of ZN staining and immunohistochemistry technique (IHC) of 13 cases of wildlife herbivores diagnosed with tuberculosis in the Setor de Patologia Veterinária of the Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) during the 2003- 2015 period. Formalin fixed paraffin embedded tissues were recut, stained with hematoxylin and eosin and ZN, and samples were submitted to the IHC (anti-M. tuberculosis marking, streptavidin-biotin peroxidase method). All animals included were adults living in captivity and belonged to the following species: llama (5/13), sambar deer (4/13), camel (1/13), red deer (1/13), Brazilian tapir (1/13) and Nilgai antelope (1/13). The IHC revealed immunostaining of accentuated (4/13), moderate (4/13) and discrete (4/13) intensity, except in a case with insufficient material. The histological features, findings in ZN staining and IHC in the wild herbivores with tuberculosis lesions allowed the diagnosis of infection with Mycobacterium sp., turning into fast and efficient methods of diagnosis, which can help to prevent the spread of this disease in animals from the same herd.

RESUMO: A tuberculose é uma enfermidade infectocontagiosa, debilitante, causada por bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR), pertencentes ao complexo Mycobacterium tuberculosis (CMT). As micobacterioses têm importância em Medicina Veterinária devido ao seu potencial zoonótico e sua distribuição mundial, afetando todas as classes de vertebrados. Em animais selvagens as micobacterioses têm sido um problema relatado principalmente em cativeiro. Contudo, há relatos de sua ocorrência também em animais de vida livre, colocando em risco e dificultando os programas de erradicação da tuberculose em animais de produção. O diagnóstico nas espécies selvagens em geral é post mortem, uma vez que o teste de tuberculina não está padronizado para essas espécies, assim como não é confiável para triagem. São consideradas para o diagnóstico lesões de necropsia, observação microscópica de BAAR na coloração de Ziehl-Neelsen (ZN) e, principalmente, isolamento e identificação do agente. No entanto, apenas os achados morfológicos macro e microscópicos não permitem distinguir a espécie de Mycobacterium envolvida. A técnica de imuno-histoquímica (IHQ) com anticorpo policlonal anti-M. tuberculosis confirma a infecção pelo CMT, mas não é específica, pois pode ocorrer marcação de outras micobactérias. As características histológicas, os achados na coloração de ZN e na IHQ de 13 casos de herbívoros selvagens diagnosticados com tuberculose no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) no período de 2003 a 2015 são descritos. A partir das amostras em blocos de parafina foram confeccionadas novas lâminas histológicas, coradas com hematoxilina e eosina (HE) e ZN. Cortes foram submetidos à técnica de IHQ para detecção do CMT. Todos os animais eram adultos, provenientes de cativeiro e incluíram lhama (5/13), cervo sambar (4/13), camelo (1/13), cervo vermelho (1/13), anta brasileira (1/13) e antílope Nilgai (1/13). Na IHQ observou-se imunomarcação acentuada (4/13), moderada (4/13) ou discreta (4/13), exceto em um caso, em que não havia quantidade suficiente de material. As características histológicas, bem como os achados na coloração de ZN e na técnica de IHQ confirmaram o diagnóstico de infecção por Mycobacterium sp. e foram considerados métodos rápidos e eficientes, de forma que podem ajudar na prevenção da disseminação da doença em animais.

Infecção por Mycobacterium sp. em herbívoros selvagens de cativeiro no Rio Grande do Sul: estudo retrospectivo e detecção imuno-histoquímica (2003-2015) / Mycobacterium sp. in captive-reared wild herbivores in Rio Grande do Sul: a retrospective study and immunohistochemical detection (2003-2015)

A tuberculose é uma enfermidade infectocontagiosa, debilitante, causada por bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR), pertencentes ao complexo Mycobacterium tuberculosis (CMT). As micobacterioses têm importância em Medicina Veterinária devido ao seu potencial zoonótico e sua distribuição mundial, afetando todas as classes de vertebrados. Em animais selvagens as micobacterioses têm sido um problema relatado principalmente em cativeiro. Contudo, há relatos de sua ocorrência também em animais de vida livre, colocando em risco e dificultando os programas de erradicação da tuberculose em animais de produção. O diagnóstico nas espécies selvagens em geral é post mortem, uma vez que o teste de tuberculina não está padronizado para essas espécies, assim como não é confiável para triagem. São consideradas para o diagnóstico lesões de necropsia, observação microscópica de BAAR na coloração de Ziehl-Neelsen (ZN) e, principalmente, isolamento e identificação do agente. No entanto, apenas os achados morfológicos macro e microscópicos não permitem distinguir a espécie de Mycobacterium envolvida. A técnica de imuno-histoquímica (IHQ) com anticorpo policlonal anti-M. tuberculosis confirma a infecção pelo CMT, mas não é específica, pois pode ocorrer marcação de outras micobactérias. As características histológicas, os achados na coloração de ZN e na IHQ de 13 casos de herbívoros selvagens diagnosticados com tuberculose no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) no período de 2003 a 2015 são descritos. A partir das amostras em blocos de parafina foram confeccionadas novas lâminas histológicas, coradas com hematoxilina e eosina (HE) e ZN. Cortes foram submetidos à técnica de IHQ para detecção do CMT. Todos os animais eram adultos, provenientes de cativeiro e incluíram lhama (5/13), cervo sambar (4/13), camelo (1/13), cervo vermelho (1/13), anta brasileira (1/13) e antílope Nilgai (1/13). Na IHQ observou-se imunomarcação acentuada (4/13), moderada (4/13) ou discreta (4/13), exceto em um caso, em que não havia quantidade suficiente de material. As características histológicas, bem como os achados na coloração de ZN e na técnica de IHQ confirmaram o diagnóstico de infecção por Mycobacterium sp. e foram considerados métodos rápidos e eficientes, de forma que podem ajudar na prevenção da disseminação da doença em animais.(AU)

Tuberculosis is a debilitating infecto-contagious disease, caused by an acid-fast bacillus (AFB) that belong to different species of the Mycobacterium tuberculosis complex (MTC). Mycobacteriosis are important diseases in veterinary medicine because of their zoonotic potential and worldwide distribution, affecting all classes of vertebrates. In wild animals the mycobacteriosis have been reported mainly as a problem in captivity. There are also reports in free-ranging wildlife, endangering and hampering tuberculosis erradication programs in animal production. The diagnosis of the disease in wildlife is usually postmortem, because the tuberculin test is not standardized for wildlife species, and also it is not reliable for screening. The postmortem diagnosis is based on macroscopic findings, microscopic detection of AFB at Ziehl-Neelsen staining (ZN), and mainly isolation and identification of the agent. However, only gross and microscopic exams do not allow to distinguish the species of Mycobacterium involved. The immunostaining with polyclonal anti-Mycobacterium tuberculosis confirms tuberculosis infection, but is not specific; there may be marking of other mycobacteria. The aim of this study was to describe the histologic findings, of ZN staining and immunohistochemistry technique (IHC) of 13 cases of wildlife herbivores diagnosed with tuberculosis in the Setor de Patologia Veterinária of the Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) during the 2003- 2015 period. Formalin fixed paraffin embedded tissues were recut, stained with hematoxylin and eosin and ZN, and samples were submitted to the IHC (anti-M. tuberculosis marking, streptavidin-biotin peroxidase method). All animals included were adults living in captivity and belonged to the following species: llama (5/13), sambar deer (4/13), camel (1/13), red deer (1/13), Brazilian tapir (1/13) and Nilgai antelope (1/13). The IHC revealed immunostaining of accentuated (4/13), moderate (4/13) and discrete (4/13) intensity, except in a case with insufficient material. The histological features, findings in ZN staining and IHC in the wild herbivores with tuberculosis lesions allowed the diagnosis of infection with Mycobacterium sp., turning into fast and efficient methods of diagnosis, which can help to prevent the spread of this disease in animals from the same herd.(AU)

Infecção por Mycobacterium sp. em herbívoros selvagens de cativeiro no Rio Grande do Sul: estudo retrospectivo e detecção imuno-histoquímica (2003-2015) / Mycobacterium sp. in captive-reared wild herbivores in Rio Grande do Sul: a retrospective study and immunohistochemical detection (2003-2015)

Tuberculosis is a debilitating infecto-contagious disease, caused by an acid-fast bacillus (AFB) that belong to different species of the Mycobacterium tuberculosis complex (MTC). Mycobacteriosis are important diseases in veterinary medicine because of their zoonotic potential and worldwide distribution, affecting all classes of vertebrates. In wild animals the mycobacteriosis have been reported mainly as a problem in captivity. There are also reports in free-ranging wildlife, endangering and hampering tuberculosis erradication programs in animal production. The diagnosis of the disease in wildlife is usually postmortem, because the tuberculin test is not standardized for wildlife species, and also it is not reliable for screening. The postmortem diagnosis is based on macroscopic findings, microscopic detection of AFB at Ziehl-Neelsen staining (ZN), and mainly isolation and identification of the agent. However, only gross and microscopic exams do not allow to distinguish the species of Mycobacterium involved. The immunostaining with polyclonal anti-Mycobacterium tuberculosis confirms tuberculosis infection, but is not specific; there may be marking of other mycobacteria. The aim of this study was to describe the histologic findings, of ZN staining and immunohistochemistry technique (IHC) of 13 cases of wildlife herbivores diagnosed with tuberculosis in the Setor de Patologia Veterinária of the Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) during the 2003- 2015 period. Formalin fixed paraffin embedded tissues were recut, stained with hematoxylin and eosin and ZN, and samples were submitted to the IHC (anti-M. tuberculosis marking, streptavidin-biotin peroxidase method). All animals included were adults living in captivity and belonged to the following species: llama (5/13), sambar deer (4/13), camel (1/13), red deer (1/13), Brazilian tapir (1/13) and Nilgai antelope (1/13). The IHC revealed immunostaining of accentuated (4/13), moderate (4/13) [...](AU)

A tuberculose é uma enfermidade infectocontagiosa, debilitante, causada por bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR), pertencentes ao complexo Mycobacterium tuberculosis (CMT). As micobacterioses têm importância em Medicina Veterinária devido ao seu potencial zoonótico e sua distribuição mundial, afetando todas as classes de vertebrados. Em animais selvagens as micobacterioses têm sido um problema relatado principalmente em cativeiro. Contudo, há relatos de sua ocorrência também em animais de vida livre, colocando em risco e dificultando os programas de erradicação da tuberculose em animais de produção. O diagnóstico nas espécies selvagens em geral é post mortem, uma vez que o teste de tuberculina não está padronizado para essas espécies, assim como não é confiável para triagem. São consideradas para o diagnóstico lesões de necropsia, observação microscópica de BAAR na coloração de Ziehl-Neelsen (ZN) e, principalmente, isolamento e identificação do agente. No entanto, apenas os achados morfológicos macro e microscópicos não permitem distinguir a espécie de Mycobacterium envolvida. A técnica de imuno-histoquímica (IHQ) com anticorpo policlonal anti-M. tuberculosis confirma a infecção pelo CMT, mas não é específica, pois pode ocorrer marcação de outras micobactérias. As características histológicas, os achados na coloração de ZN e na IHQ de 13 casos de herbívoros selvagens diagnosticados com tuberculose no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) no período de 2003 a 2015 são descritos. A partir das amostras em blocos de parafina foram confeccionadas novas lâminas histológicas, coradas com hematoxilina e eosina (HE) e ZN. Cortes foram submetidos à técnica de IHQ para detecção do CMT. Todos os animais eram adultos, provenientes de cativeiro e incluíram lhama (5/13), cervo sambar (4/13), camelo (1/13), cervo vermelho (1/13), anta brasileira (1/13) e antílope Nilgai (1/13). [...](AU)

Detecção de Mycobacterium bovis por reação em cadeia de polimerase no leite de vacas reagentes ao teste de tuberculinização no estado de Alagoas / Mycobacterium bovis for detection of reaction polymerase chain in cows milk to reagents tuberculin test in Alagoas state

A tuberculose é uma afecção de caráter infectocontagiosa de ocorrência global responsável por grandes prejuízos à pecuária leiteria. Devido à importância da doença para a saúde animal e humano, objetivou-se detectar por Reação em Cadeia de Polimerase M. bovis reagentes no leite de vacas reagentes no teste de tuberculinização. O estudo foi desenvolvido em rebanhos leiteiros localizados em municípios da bacia leiteira do estado de Alagoas. Utilizou-se 130 fêmeas da espécie bovina com idades e raças variadas, em diferentes períodos de lactação. Nessas fêmeas foi realizado o teste de tuberculinização cervical comparativo. Após a realização dos testes, observou-se a frequência de 5,38% (7/130) para tuberculose bovina na região. O município diagnosticado com maior frequência de animais reagentes foi Batalha com 57,14% (4/7), seguido de Monteirópolis, Jaramataia e Jacaré dos Homens, todos com 14,28 %.(1/7) de fêmeas positivas onde identificou-se 66,67% de focos de infecção para tuberculose bovina na região. O DNA foi extraído de sete amostras de leite dos animais reagentes a tuberculinização para realização da PCR, todas as amostras foram positivas na PCR específica para M. bovis. A presença do M. bovis no leite de vacas reagentes evidencia o risco da infecção humana através da ingestão de leite cru e seus derivados. Ficando evidente a importância da realização do teste de tuberculinização para a vigilância epidemiológica da tuberculose nos rebanhos de bovinos no estado de Alagoas.

Tuberculosis is a contagious infectious disease character of global occurrence responsible for major losses to dairy cattle. Because of the importance of the disease to animal and human health, aimed of detect by Polymerase Chain Reaction,at contamination at M. bovis in milk cows in the tuberculin test. The study was conducted in dairy herds located in municipalities in the dairy region of the state of Alagoas. We used 130 female bovine animals aged and varied races, in different periods of lactation. These females was performed comparative cervical tuberculin test. After the tests, the frequency was observed in 5.38% (7/130) for bovine tuberculosis in the region. The municipality diagnosed with greater frequency of positive animals was Battle with 57.14% (4/7), followed by Monteirópolis, Jaramataia and Alligator Men, all with 14.28%. (1/7) of positive females where checking 66.67% of outbreaks of infection for bovine tuberculosis in the region. The DNA was extracted from seven samples of milk from tuberculin animals reagents for the PCR, all samples were positive in the PCR specific for M. bovis. The M. bovis presence in the milk of cows reagents shows the risk of human infection through the ingestion of raw milk and its derivatives. Evidencing the importance of carrying out the tuberculin test for tuberculosis surveillance in cattle herds in the state of Alagoas.

Detecção de Mycobacterium bovis por reação em cadeia de polimerase no leite de vacas reagentes ao teste de tuberculinização no estado de Alagoas / Mycobacterium bovis for detection of reaction polymerase chain in cows milk to reagents tuberculin test in Alagoas state

A tuberculose é uma afecção de caráter infectocontagiosa de ocorrência global responsável por grandes prejuízos à pecuária leiteria. Devido à importância da doença para a saúde animal e humano, objetivou-se detectar por Reação em Cadeia de Polimerase M. bovis reagentes no leite de vacas reagentes no teste de tuberculinização. O estudo foi desenvolvido em rebanhos leiteiros localizados em municípios da bacia leiteira do estado de Alagoas. Utilizou-se 130 fêmeas da espécie bovina com idades e raças variadas, em diferentes períodos de lactação. Nessas fêmeas foi realizado o teste de tuberculinização cervical comparativo. Após a realização dos testes, observou-se a frequência de 5,38% (7/130) para tuberculose bovina na região. O município diagnosticado com maior frequência de animais reagentes foi Batalha com 57,14% (4/7), seguido de Monteirópolis, Jaramataia e Jacaré dos Homens, todos com 14,28 %.(1/7) de fêmeas positivas onde identificou-se 66,67% de focos de infecção para tuberculose bovina na região. O DNA foi extraído de sete amostras de leite dos animais reagentes a tuberculinização para realização da PCR, todas as amostras foram positivas na PCR específica para M. bovis. A presença do M. bovis no leite de vacas reagentes evidencia o risco da infecção humana através da ingestão de leite cru e seus derivados. Ficando evidente a importância da realização do teste de tuberculinização para a vigilância epidemiológica da tuberculose nos rebanhos de bovinos no estado de Alagoas.(AU)

Tuberculosis is a contagious infectious disease character of global occurrence responsible for major losses to dairy cattle. Because of the importance of the disease to animal and human health, aimed of detect by Polymerase Chain Reaction,at contamination at M. bovis in milk cows in the tuberculin test. The study was conducted in dairy herds located in municipalities in the dairy region of the state of Alagoas. We used 130 female bovine animals aged and varied races, in different periods of lactation. These females was performed comparative cervical tuberculin test. After the tests, the frequency was observed in 5.38% (7/130) for bovine tuberculosis in the region. The municipality diagnosed with greater frequency of positive animals was Battle with 57.14% (4/7), followed by Monteirópolis, Jaramataia and Alligator Men, all with 14.28%. (1/7) of positive females where checking 66.67% of outbreaks of infection for bovine tuberculosis in the region. The DNA was extracted from seven samples of milk from tuberculin animals reagents for the PCR, all samples were positive in the PCR specific for M. bovis. The M. bovis presence in the milk of cows reagents shows the risk of human infection through the ingestion of raw milk and its derivatives. Evidencing the importance of carrying out the tuberculin test for tuberculosis surveillance in cattle herds in the state of Alagoas.(AU)

Comparação de três testes de tuberculina usados para o diagnóstico de tuberculose em búfalos de água na Ilha de Marajó / Comparison of three tuberculin skin tests used to diagnose tuberculosis in water buffaloes in Marajó Island / Comparación de tres pruebas de tuberculina utilizadas para diagnóstico de la tuberculosis en búfalos de agua de la Isla de Marajó

O Estado do Pará corresponde a 26 % da região Amazônia brasileira e estima-se que o rebanho de búfalos represente em torno de 45% da população de búfalos do Brasil, principalmente, localizados na ilha de Marajó. Este trabalho teve como objetivo comparar três diferentes tipos de testes tuberculínicos utilizados para o diagnóstico da tuberculose em búfalos de água (Bubalus bubalis) e os resultados comparados com animais com e sem tuberculose. Os resultados deste trabalho permitiram fazer as seguintes conclusões: o teste cervical simples em búfalos não é recomendável devido à baixa especificidade, produzindo uma grande margem de erros (sacrifício de animais falsos positivos); a prova intradérmica dupla tem baixa especificidade e com o inconveniente de aplicar duas vezes tuberculina, sendo assim há necessidade de três visitas a fazenda, elevando o custo e manejo; o teste cervical comparativo é o melhor método, pois possui alta especificidade e sensibilidade, pois as reações à tuberculina em búfalos se caracterizam por elevado número de reações inespecíficas devido ao seu hábito aquático.

The state of Pará corresponds to 26% of the Brazilian Amazon Region and contains a herd of buffaloes that represent around 45% of the buffalo population in Brazil. This herd is located especially in the Marajó Island. The aim of this study was to compare three different types of tuberculin skin tests used for the diagnosis of tuberculosis in buffaloes (Bubalus bubalis) and compare the results with infected and uninfected animals by tuberculosis. The results of this study allows to the following conclusions: The single cervical test in buffaloes is not recommended due to the low specificity, producing a large margin of error (sacrifice of false positive animals); the double intradermal tuberculin test has a low specificity and the inconvenience of applying twice tuberculin, therefore is necessary three visits in the farm, raising the costs. The comparative cervical testis is the best method, because it has high specificity and sensitivity, and the reactions of tuberculin in buffaloes are characterized by a high number of nonspecific reactions, due mainly to the buffalo aquatic habit.

El estado de Pará corresponde con el 26% en la región Amazonica brasileña y se estima que la manada de búfalos representa al rededor del 45% de la población de búfalos de Brasil, principalmente ubicados en la isla de Marajó. Este estudio tuvo como objetivo comparar tres tipos distinto de pruebas de tuberculina utilizadas para el diagnóstico de la tuberculosis en búfalos de agua (Bubalus bubalis) y los resultados en comparación con los animales con y sin tuberculosis. Los resultados de este estudio proporcionan las siguientes conclusiones: la prueba cervical en los búfalos no se recomienda debido a la baja especificidad, la producción de una gran margen de error (sacrificio de los animales falsos positivos ), la prueba intradérmica doble tiene una baja especificidad y la inconveniencia de aplicar dos veces la tuberculina, lo que no necesita de tres visitas al campo, elevando el costo y la gestión, la prueba cervical comparativa es el mejor método, ya que tiene una alta especificidad y sensibilidad, como las reacciones a la tuberculina en los búfalos se caracterizan por un alto número de reacciones inespecíficas debido a su hábito acuático.

Adenocarcinoma pulmonar en vaca de raza nelore: relato del caso / Pulmonary adenocarcinoma in nelore cow: case report / Adenocarcinoma pulmonar em vaca nelore: relato de caso

El cáncer de pulmón se considera raro en el ganado. Este informe describe un caso de adenocarcinoma pulmonar em vaca de la raza Nelore vaca servido en la Clínica de Grandes Animales FMVZ-UNESP/Botucatu, SP. El animal tenía anorexia, sin movimientos del rumen, tosiendo y creptación fina y aumento en los ruidos traqueobronquiales y en la auscultación de ambos pulmones. Por la pérdida de peso progresiva se procedido a la prueba de la tuberculina la prueba doble comparativa y el resultado fue negativo. Dado el diagnóstico no concluyente de los hallazgos clínicos y pruebas de laboratorio, se realizo laparotomía exploratoria, y era sospechoso de mesotelioma. Sin embargo, el mal pronóstico, se decidió la eutanasia del animal. Durante la necropsia se encontraron nódulos de diversos tamaños, principalmente serosa parietal y visceral del bazo, y el parénquima pulmonar. El examen histopatológico mostró neoplasia epiteliales que forman acinos, con marcado pleomorfismo nuclear y de alta relación núcleo: citoplasma. La inmunohistoquímica fue positiva para células neoplásicas, donde estas eran difusa y citoplasmática (Citoqueratina A1/E1). El diagnóstico de neoplasia de pulmón se debe considerar en el ganado con la edad y/o la historia avanzada y signos clínicos de la pérdida de apetito y pérdida de peso, sobre todo cuando hay signos clínicos relacionados con el sistema respiratorio.(AU)

Lung neoplasms are considered rare in cattle. This report describes a case of pulmonary adenocarcinoma in a Nelore cow treated in the Large Animal Internal Medicine of FMVZUNESP/Botucatu, SP. The animal had anorexia, no rumen movements, coughing and thin crackling noises and increased tracheobronchial and bronchobronchiolar in the auscultation of both lungs. Because of progressive weight loss, the comparative tuberculin double test was proceeded, but the result was negative. Given the inconclusive diagnosis of clinical findings and laboratory tests, exploratory laparotomy was performed, and the suspicion of mesothelioma. However, due to poor prognosis, it was decided to euthanize the animal. Gross lesions were nodules of various sizes primarily in the parietal and visceral serous spleen, and lung parenchyma. The histopathological epithelial neoplasia found forming acini, with marked nuclear pleomorphism and high in nucleus: cytoplasm. Immunohistochemistry was positive for neoplastic cells, it is cytoplasmic and diffuse (Cytokeratin A1/E1). The diagnosis of lung neoplasms should be considered in cattle with advanced age and/or historical and clinical signs of inappetence, progressive weight loss, especially when there are clinical signs related to respiratory system.(AU)

Neoplasias pulmonares são consideradas raras em bovinos. Este relato descreve um caso de adenocarcinoma pulmonar em vaca Nelore atendida na Clínica de Grandes Animais da FMVZ-UNESP/Botucatu, SP. O animal apresentava anorexia, atonia ruminal, tosse e crepitação fina e aumento dos ruídos traqueobrônquico e broncobronquiolar à auscultação de ambos os pulmões. Pelo emagrecimento progressivo, procedeu-se o teste de tuberculina pelo teste duplo comparativo e o resultado foi negativo. Diante do diagnóstico inconclusivo dos achados clínicos e exames laboratoriais, realizou-se laparotomia exploratória, e suspeitou-se de mesotelioma. Porém, pelo mau prognóstico, decidiu-se a eutanásia do animal. Na necropsia havia nódulos de dimensões variadas principalmente em serosa parietal e visceral do baço, e no parênquima pulmonar. No exame histopatológico, constatou-se neoplasia epitelial formando ácinos, com pleomorfismo nuclear acentuado e alta relação núcleo:citoplasma. A imuno-histoquímica foi positiva para as células neoplásicas, sendo ela citoplasmática e difusa (Citoqueratina A1/E1). O diagnóstico de neoplasia pulmonar deve ser considerado em bovinos com idade avançada e/ou histórico e sinais clínicos de inapetência e emagrecimento progressivo, especialmente quando associado a sinais clínicos relacionados ao aparelho respiratório.(AU)