Equine tracheobronchial wash filtration and its effects on differential cell count / Efeito da filtração do lavado traqueobrônquico de equinos sobre a contagem diferencial de células

Tracheobronchial wash (TBW) is a method to recover cell samples from the airways. The cytology of TBW fluid is an important technique for the diagnosis of pulmonary diseases in horses. Excessive mucus in TBW may cause cell damage and morphological changes that hinder cell type recognition, resulting in a misdiagnosis. The aim of this study was to compare the results of differential cell count in a tracheobronchial wash of filtered and non-filtered samples. Endoscopy and TBW procedures were performed in thirty horses. Each TBW sample was split into two aliquots. Two groups were formed: non-filtrated aliquots (NF) and filtrated aliquots (F). The filtration was performed using a hydrophilic gauze pad. After centrifugation, the differential cell count was performed considering 300 nucleated cells. The filtrated aliquots results presented a significant increase of macrophages count and a significant decrease in neutrophils count comparing to the results of non-filtrated aliquots. These findings were consistent with results of filtered bronchoalveolar wash published studies. Therefore, the filtration of TBW is not an efficient method

O lavado traqueobrônquico (LTB) é um método usado para recuperar uma amostra de células das vias respiratórias. A citologia do LTB é descrita como uma importante ferramenta no diagnóstico de doença pulmonar em equinos. O excesso de muco geralmente presente no LTB pode alterar a morfologia, dificultando a identificação dos tipos celulares e, por consequência, prejudicando a contagem diferencial de células e a interpretação diagnóstica. O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito da filtração do LTB de equinos sobre a contagem diferencial de células na avaliação citológica do lavado traqueobrônquico. Foram utilizados 30 equinos que foram submetidos a coletas de amostras de LTB via endoscópio. De cada amostra obtida foi separada uma primeira alíquota não filtrada (NF). Uma segunda alíquota (F) foi obtida filtrando-se o LTB, utilizando-se uma compressa de gaze hidrófila. As alíquotas F e NF foram submetidas à citocentrifugação para contagem diferencial de 300 células nucleadas. Verificou-se um aumento significativo no percentual de macrófagos e redução significativa de neutrófilos nas amostras filtradas. As alterações observadas foram condizentes com achados de estudos prévios realizados em lavado broncoalveolar. Conclui-se que a filtração do LTB não é uma metodologia aconselhável, pois acarreta em alterações de contagem significativas nas proporções de importantes marcadores celulares de inflamação, podendo gerar possíveis erros de diagnóstico

Equine tracheobronchial wash filtration and its effects on differential cell count / Efeito da filtração do lavado traqueobrônquico de equinos sobre a contagem diferencial de células

Tracheobronchial wash (TBW) is a method to recover cell samples from the airways. The cytology of TBW fluid is an important technique for the diagnosis of pulmonary diseases in horses. Excessive mucus in TBW may cause cell damage and morphological changes that hinder cell type recognition, resulting in a misdiagnosis. The aim of this study was to compare the results of differential cell count in a tracheobronchial wash of filtered and non-filtered samples. Endoscopy and TBW procedures were performed in thirty horses. Each TBW sample was split into two aliquots. Two groups were formed: non-filtrated aliquots (NF) and filtrated aliquots (F). The filtration was performed using a hydrophilic gauze pad. After centrifugation, the differential cell count was performed considering 300 nucleated cells. The filtrated aliquots results presented a significant increase of macrophages count and a significant decrease in neutrophils count comparing to the results of non-filtrated aliquots. These findings were consistent with results of filtered bronchoalveolar wash published studies. Therefore, the filtration of TBW is not an efficient method(AU)

O lavado traqueobrônquico (LTB) é um método usado para recuperar uma amostra de células das vias respiratórias. A citologia do LTB é descrita como uma importante ferramenta no diagnóstico de doença pulmonar em equinos. O excesso de muco geralmente presente no LTB pode alterar a morfologia, dificultando a identificação dos tipos celulares e, por consequência, prejudicando a contagem diferencial de células e a interpretação diagnóstica. O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito da filtração do LTB de equinos sobre a contagem diferencial de células na avaliação citológica do lavado traqueobrônquico. Foram utilizados 30 equinos que foram submetidos a coletas de amostras de LTB via endoscópio. De cada amostra obtida foi separada uma primeira alíquota não filtrada (NF). Uma segunda alíquota (F) foi obtida filtrando-se o LTB, utilizando-se uma compressa de gaze hidrófila. As alíquotas F e NF foram submetidas à citocentrifugação para contagem diferencial de 300 células nucleadas. Verificou-se um aumento significativo no percentual de macrófagos e redução significativa de neutrófilos nas amostras filtradas. As alterações observadas foram condizentes com achados de estudos prévios realizados em lavado broncoalveolar. Conclui-se que a filtração do LTB não é uma metodologia aconselhável, pois acarreta em alterações de contagem significativas nas proporções de importantes marcadores celulares de inflamação, podendo gerar possíveis erros de diagnóstico(AU)

A IMPORTÂNCIA DOS EXAMES COMPLEMENTARES DE TRAQUEOBRONCOSCOPIA E LAVADO TRAQUEOBRÔNQUICO NO DIAGNÓSTICO DE HEMORRAGIA PULMONAR INDUZIDA PELO EXERCÍCIO EM CAVALOS DE PROVA DE TRÊS TAMBORES

A hemorragia pulmonar induzida pelo exercício (HPIE) é um dos problemas mais relevantes e importantes, que afetam cavalos atletas de alto desempenho em todo o mundo, promovendo diminuição do desempenho atlético. Embora sua etiopatogenia não esteja totalmente esclarecida, sabe-se que fatores como aumento repentino da pressão arterial associado a eventos físicos que ocorrem durante a atividade física causam ruptura do endotélio capilar pulmonar, levando a hemorragia. Este estudo tem como objetivo demonstrar a importância do uso das técnicas de traqueobroncoscopia e lavado traqueobrônquico no diagnóstico de HPIE em cavalos da modalidade esportiva de três tambores, no município de Colatina/ES, caracterizando os principais tipos celulares presentes na avaliação citológica. Foram utilizados oito equinos da raça Quarto de Milha, condicionados para a execução da prova de três tambores em pista padrão. Os animais foram submetidos a duas passagens na pista, sequenciais, e posteriormente foram avaliados quanto aspectos clínicos e submetidos a traqueobroncoscopia e lavado traqueobrônquico. Com a realização deste estudo pôde-se constatar a prevalência de hemorragia pulmonar induzida pelo esforço em cavalos atletas da prova de três tambores foi de 75%, um índice diagnóstico muito similar aos encontrados em outros estudos com cavalos de outras modalidades esportivas e que a atividade física realizada pelos animais aumentou em vinte vezes a chance destes em apresentar HPIE.

Exercise-induced pulmonary hemorrhage (EIPH) is one of the most relevant and important problems that affect high-performance athlete horses worldwide, promoting decreased athletic performance. Although its etiopathogenesis is not fully understood, factors such as a sudden increase in blood pressure associated with physical events that occur during physical activity are known to cause rupture of the pulmonary capillary endothelium, leading to hemorrhage. This study aims to demonstrate the importance of using the techniques of tracheobronchoscopy and tracheobronchial lavage in the diagnosis of EIPH in horses of the three-barrel racing modality, in the city of Colatina / ES, characterizing the main cell types present in the cytological evaluation. Eight quarter horses were used, conditioned for the performance of the three-barrel racing in standard track. The animals were subjected to two passages on the track, sequentially, and were subsequently evaluated for clinical aspects, and submitted to tracheobronchoscopy and tracheobronchial lavage. With this study, it was possible to verify the prevalence of exercise-induced pulmonary hemorrhage in three-barrel racing athletic horses was 75%, a diagnostic index very similar to those found in other studies with horses of other modalities, and that physical activity performed by the animals increased their chance of presenting EIPH 20 times.

PERFIL BACTERIOLÓGICO E CITOLÓGICO DE LAVADO TRAQUEOBRÔNQUICO DE EQUINOS SADIOS EM SISTEMA INTENSIVO E EXTENSIVO

A equinocultura é uma atividade econômica relevante em grande parte do mundo, sendo as afecções respiratórias responsáveis por grandes perdas econômicas e quedas de desempenho esportivo. Objetivou-se com essa pesquisa traçar qualitativamente o perfil citológico e microbiológico do aparelho respiratório superior de equinos em duas situações de regimes de criações por meio de lavado traqueobrônquico. Para tanto, foram analisados dezoito animais, separados em dois grupos: G1, com nove equinos mantidos em sistema extensivo de criação e G2, com nove equinos mantidos em baias no regime intensivo. Foram realizadas análises citológicas e bacteriológicas desses lavados. Os resultados citológicos foram condizentes com a literatura, observando-se a predominância celular de macrófagos alveolares. Numa avaliação comparativa, o G2 permitiu a detecção de hemossiderófagos, comprovando que os animais mantidos em baias possuem alto índice de partículas em superfície, aumentando a incidência de Hemorragia Pulmonar Induzida por Exercício (HPIE). A avaliação bacteriana evidenciou no G1 isolamento de 13 espécies no G1 e 19 no G2, com predominância de bacilos em ambos os grupos. Na pesquisa, foi possível concluir que há diferença qualitativa da flora bacteriana e de células inflamatórias entre os dois regimes de criação.

Echinoculture is a relevant economic activity in much of the world, with respiratory diseases responsible for large economic losses and declines in sports performance. The objective of this research was to qualitatively trace the cytological and microbiological profile of the upper respiratory tract of horses in two situations of breeding regimes. Among the various methods of diagnosis and prognosis evaluation for patients with respiratory diseases, it was decided to evaluate the samples obtained in this study by means of tracheobronchial lavage. For this, eighteen animals were analyzed, separated into two groups: G1, with nine horses kept in an extensive breeding system and G2, with nine horses kept in bays under intensive regime. Cytological and bacteriological analyzes of these washes were carried out. The cytological results were consistent with the literature, observing the cellular predominance of alveolar macrophages. In a comparative evaluation, the G2 allowed the detection of haemosiderophages, proving that the animals kept in bays have a high surface particle index, increasing the incidence of Exercise Induced Pulmonary Hemorrhage (HPIE). The bacterial avalieted evidenced in G1 isolation of 13 species in G1 and 19 in G2, with predominance of bacilli in both groups. In the research, it was possible to conclude that there is qualitative and quantitative difference of bacterial flora and inflammatory cells between the two breeding regimes.

SÍNDROME DA ASMA EQUINA A CAMPO: AVALIAÇÃO DE PARÂMETROS INFLAMATÓRIOS DO TRATO RESPIRATÓRIO POSTERIOR

A Síndrome da Asma Equina (SAE) é um conjunto de transtornos pulmonares inflamatórios crônicos, incluindo a Doença Inflamatória das Vias Aéreas e a Obstrução Recorrente das Vias Aéreas, variáveis fenotípicas que afetam a saúde e o desempenho dos cavalos. As duas condições apresentam características clínicas, citológicas e funcionais sobrepostas que surgem da resposta pulmonar a alérgenos encontrados no ambiente. Dentre os mecanismos fisiopatológicos das afecções inflamatórias pulmonares estão o estresse oxidativo e a atividade dos neutrófilos, em especial a NETose, fenômeno inovador e pouco estudado em equinos, com significado clínico ainda não compreendido. Tais mecanismos são apontados como importantes contribuintes para a inflamação crônica e o dano tecidual pulmonar. O objetivo do presente estudo é confirmar a hipótese de associação direta entre o estresse oxidativo pulmonar e sistêmico à presença de redes extracelulares de neutrófilos (NETs) em secreções respiratórias de cavalos mantidos à pasto com diagnóstico de SAE. Para tal, foi realizado um estudo analítico transversal com 39 equinos, sadios, sem confirmação diagnóstica de asma ou com diagnóstico de asma. Foram realizados exame clínico, endoscópico, colheita de sangue, lavado traqueal e broncoalveolar. Além da citologia das secreções respiratórias, foram determinados o índice de peroxidação lipídica pulmonar e sistêmico (TBARS), bem como a existência de NETs no trato respiratório posterior. Os resultados demonstraram que a asma em sua variável fenotípica branda apresenta curso assintomático e que os animais com mais de sete anos são os mais acometidos. Percebe-se que a distinção entre cavalos saudáveis e com asma leve/moderada mantidos à pasto é limitada. A mensuração do TBARS pulmonar e sistêmico não possui correlação direta com a presença das NETs, mas houve correlação do estresse oxidativo pulmonar com as NETs verificado pela atividade da enzima mieloperoxidase (MPO). O lavado traqueal mostrou-se melhor para avaliação das NETs, havendo correlação entre as variáveis que a compõem. O escore de muco traqueal esta associado ao desequilíbrio oxidativo na árvore traqueobrônquica. As atividades das enzimas DNAse e MPO no lavado traqueal mostraram-se ferramentas potenciais para entender a dinâmica inflamatória da asma. A metodologia proposta permitiu pressupor a presença das NETs nos fluidos respiratórias. Entretanto, apenas a MPO mostrou-se útil na diferenciação entre animais sadios e com SAE leve/moderada, sendo uma ferramenta importante para o diagnóstico de equinos com asma subclínica.

Equine Asthma Syndrome (EAS) is a set of chronic inflammatory pulmonary disorders, including airway inflammatory disease and recurrent airway obstruction, phenotypic variables that affect horse health and performance. Both conditions present overlapping clinical, cytological and functional characteristics that arise from the pulmonary response to allergens found in the environment. Among the pathophysiological mechanisms of inflammatory lung diseases are oxidative stress and neutrophil activity, especially NETosis, an innovative phenomenon that has not been studied in equines, with clinical significance not understood yet. Such mechanisms are identified as important contributors to chronic inflammation and lung tissue damage. The objective of the present study is to confirm the hypothesis of a direct association between pulmonary and systemic oxidative stress to the presence of neutrophil extracellular traps (NETs) in respiratory secretions of horses kept on grass with a diagnosis of EAS. For this, a cross-sectional analytical study was performed with 39 horses: healthy animals, with asthma or without asthma diagnosis confirmation. Clinical, endoscopic, blood collection, tracheal and bronchoalveolar lavage were performed. In addition to the cytology of respiratory secretions, the pulmonary and systemic lipid peroxidation index (TBARS) was determined, as well as the existence of NETs in the respiratory tract. The results showed that asthma in its mild phenotypic variable presents an asymptomatic course and that animals older than seven years are the most affected. It can be seen that the distinction between healthy horses and mild asthma maintained in pasture is limited. The measurement of pulmonary and systemic TBARS does not have a direct correlation with the presence of NETs, but there was a correlation of pulmonary oxidative stress with the NETs verified by the activity of the myeloperoxidase (MPO) enzyme. The tracheal wash was better for evaluation of the NETs, and there was a correlation between the variables that compose it. The tracheal mucus score is associated with oxidative imbalance in the tracheobronchial tree. The activities of the DNAse and MPO enzymes in the tracheal lavage were potential tools to understand the inflammatory dynamics of asthma. The proposed methodology allowed us to assume the presence of NETs in respiratory fluids. However, only MPO has been shown to be useful in the differentiation between healthy animals and with mild / moderate EAS, being an important tool for the diagnosis of horses with subclinical asthma.

Ocorrência de doenças respiratórias causadas por bactérias e vírus em ovinos

O Brasil é o 18ª maior produtor de carne ovina e, apesar de ser em grande parte informal, é uma cultura crescente no país. Dentre as enfermidades infecciosas que acomete a ovinocultura a broncopneumonia é uma das mais recorrentes, no entanto, não há muitos estudos sobre esta enfermidade em pequenos ruminantes no Brasil. Por isso, esta pesquisa teve como objetivo verificar a ocorrência de doenças respiratórias no estado de São Paulo e Rio de Janeiro causadas por bactérias e vírus. Para a realização desse projeto foi utilizado a técnica de lavado traqueobrônquico transtraqueal e coleta de sangue total para obtenção do soro em 99 ovinos. Essas amostras foram submetidas a teste de virusneutralização para identificação de anticorpos contra vírus da Parainfluenza Tipo 3 (PI-3), Herpesvírus Bovino Tipo 1 (BoHV-1), Vírus Sincicial Respiratório Bovino (BRSV) e Vírus da Diarreia Viral Bovina (VDVB). Utilização do teste de imunodifusão em gel de agarose e Eradikt® para detectar a presença de anticorpos contra Lentivírus de Pequenos Ruminantes (LVPR). Isolamento e identificação bioquímica para M. haemolytica e Pasteurella multocida. Cultivo e isolamento, identificação bioquímica e PCR foram testes utilizados para identificação de micoplasmas (Mycoplasma bovis, M. agalactiae, M. mycoides subsp. capri). Das 99 amostras coletadas, 33 foram de ovinos doentes e 66 de ovinos sadios. Não houve identificação de M. haemolytica e P. multocida, nem presença de anticorpos contra BoHV-1 e VDVB. No entanto, observou-se a prevalência de 52,52%, 48,48% e 21,87% de PI-3, BRSV e LVPR respectivamente. Em relação as bactérias aeróbias, houve maior frequência de isolamento de Bacillus sp. e Gram-negativas não fermentadoras. Apesar de identificar bactérias da classe Mollicutes em colônias isoladas em 23,28% das amostras, houve apenas uma identificação com os oligonucleotídeos utilizados, o M. mycoides subsp. capri, primeiro isolamento em ovinos no estado de São Paulo e Rio de Janeiro. Houve diferença estatística significativa (p<0,05) entre animais com broncopneumonia e manifestações clínicas como taquipneia, hipertermia, secreção nasal, tosse, dispneia, crepitação fina e ronco e entre animais com broncopneumonia e não realizam de quarentena e não separam 10 animais doentes. A broncopneumonia envolve vários fatores, incluindo o manejo, agente infeccioso e a imunidade do animal. Por isso, é necessário conhecer todos esses aspectos e associá-los para uma melhor prevenção e tratamento

Brazil is the 18th largest producer of sheep meat and, despite being largely informal, is a growing crop in the country. Among the infectious diseases that affect sheep production, bronchopneumonia is one of the most recurrent, however, there are not many studies on this disease in small ruminants in Brazil. Therefore, this research aimed to verify the occurrence of respiratory diseases in the state of São Paulo and Rio de Janeiro caused by bacteria and viruses. For the accomplishment of this project was used tracheobronchial lavage technique transtracheal and collection of whole blood to obtain serum in 99 sheep. These samples were submitted to virus neutralization test to identify antibodies against Parainfluenza Type 3 (PI-3), Bovine Herpesvirus Type 1 (BoHV-1), Bovine Respiratory Syncytial Virus (BRSV) and Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV). Use of the Eradikit ® and agarose gel immunodiffusion test to detect the presence of antibodies against Small Ruminant Lentiviruses (LVPR). Isolation and biochemical identification for M. haemolytica and Pasteurella multocida. Cultivation and isolation, biochemical identification and PCR were used to identify mycoplasmas (Mycoplasma bovis, M. agalactiae, M. mycoides subsp. Capri). Of the 99 samples collected, 33 were from diseased sheep and 66 from healthy sheep. There was no identification of M. haemolytica and P. multocida, nor presence of antibodies against BoHV-1 and BVDV. However, the prevalence of 52.52%, 48.48% and 21.87% of PI-3, BRSV and LVPR, respectively, was observed. In relation to aerobic bacteria, there was a higher frequency of isolation of Bacillus sp. and Gram-negative non-fermenters. Despite identifying Mollicute class bacteria in isolated colonies in 23.28% of the samples, there was only one identification with the oligonucleotides used, M. mycoides subsp. capri, first isolation in sheep in the state of São Paulo and Rio de Janeiro. There was a significant statistical difference (p <0.05) between animals with bronchopneumonia and clinical manifestations such as tachypnea, hyperthermia, nasal secretion, cough, dyspnea, fine crackling and snoring, and between animals with bronchopneumonia and quarantine and separation of diseased animals. Bronchopneumonia involves several factors, including management, infectious agent 12 and the immunity of the animal. Therefore, it is necessary to know all these aspects and to associate them for a better prevention and treatment.

Citologia dos lavados traqueobrônquico (LTB) e broncoalveolar (LBA) de bezerros holandeses sadios durante o primeiro mês de vida / Cytology of tracheobronchial and bronchoalveolar lavage in healthy Holteins calves during the first month of life

O período neonatal dos bezerros é um momento crítico para adaptação do recém-nascido à vida extra uterina e o sistema respiratório, um dos mais exigidos funcionalmente, é frequentemente afetado por enfermidades, redundando no prejuízo direto da sua função e acarretando perdas econômicas importantes na pecuária. O ponto básico para reduzir estas perdas, é representado pela adequada avaliação clínica dos neonatos, todavia o diagnóstico baseado exclusivamente no exame físico é muito difícil de ser estabelecido. O uso de exames complementares como a citologia do trato respiratório torna-se uma ferramenta diagnóstica importante nestes casos, porém faz-se necessário, padronizar seus achados frente às diferentes técnicas empregadas para a sua obtenção. Assim, o presente estudo propôs-se acompanhar as variações dos constituintes celulares da região traqueobrônquica e broncoalveolar obtidos por lavados respiratórios pelos métodos de traqueocentese e por colheita nasotraqueal respectivamente, durante o primeiro mês de vida de bezerros sadios. Observou-se alteração no quadro citológico ao longo do tempo, quando a região traqueobrônquica foi lavada, expresso por diminuição da porcentagem de macrófagos alveolares, com aumento de neutrófilos, possivelmente, por maior irritação local provocada pela técnica, que se repetiu sequencialmente e/ou por maior estimulo de microorganismos inalados depositados nesta região. Na região broncoalveolar, não encontraram-se variações nos constituintes celulares em função do tempo. Os resultados permitiram a conclusão que a população celular da região traqueobrônquica modificou-se ao longo das semanas de vida dos bezerros, possivelmente pela técnica empregada e/ou fisiologia normal da região, sendo representadas por maiores magnitudes de neutrófilos. De modo diverso, na região broncolaveolar, as células evidenciaram um comportamento estável durante o primeiro mês de vida dos bezerros neonatos, apresentando predomínio numérico dos macrófagos alveolares.(AU)

The neonatal calf is a critical moment for adaptation of the newborn to extra uterine life. The respiratory tract is functionally very demanded and often affected by disease, resulting in direct loss of their function and causing serious economic losses in livestock. The basic point to reduce these losses is appropriate clinical evaluation of neonates; but the diagnosis based solely in physical examination is very difficult to establish. The use of complementary analysis such cytology of the respiratory tract becomes an important diagnostic tool; however their findings must be standardized in the face of different techniques employed. This research studied the dynamics of the cellularity of the bronchoalveolar and tracheobronchial region obtained through lung lavage harvested by nasotracheal catheterization technique and tracheocenthesis respectively, during the first month of life of healthy calves. The tracheobronchial cytology was influenced by the time, showing decreased number of alveolar macrophages and greater number of neutrophils, possibly increased by local irritation caused by the technique, which was repeated sequentially, and/or through greater stimulation of inhaled microorganisms deposited in this region. In the bronchoalveolar region no variation in the cellular constituents in function of time was found. The results allowed the conclusion the cell population of the tracheobronchial region has changed over the week-old calves, possibly due to the technique used and/or to the normal region physiology, represented by higher magnitudes of neutrophils. Otherwise, the cells of the broncholaveolar region showed a stable behavior during the first month of life of newborn calves, presenting numerical predominance of alveolar macrophages.(AU)

Influência da suplementação de vitamina E na profilaxia e tratamento da broncopneumonia moderada e grave em bezerros / Influence of vitamin E on prophylaxis and treatment of moderate and severe bronchopneumonia in calves

Estudou-se a broncopneumonia de ocorrência natural em bezerros e a influência da administração de acetato de DL-α-tocoferol na profilaxia e tratamento desta enfermidade. Foram avaliados 60 bezerros machos, com idade máxima de 10 dias, divididos em dois grupos experimentais: GSV (grupo sem vitamina) e GCV (grupo com vitamina). A suplementação com dose única de 4.500 UI de acetato de DL-α-tocoferol por via intramuscular (IM) foi precedida por exame físico, perfil hematológico, determinação de proteínas séricas, globulinas, gamaglutamiltransferase e citologia do lavado traqueobrônquico (D0) para verificar a sanidade e homogeinização dos grupos. Os bezerros foram mantidos em bezerreiro e distribuídos aleatoriamente, 2 a 2 em baias individuais de 2,40m², onde permaneceram até o 21º dia (D0 ao D21). Foram avaliados por exame físico diário e, na presença de sinais clínicos indicativos de broncopneumonia (DX), retirados do bezerreiro, avaliados por hemograma e citologia do lavado traqueobrônquico, e tratados com enrofloxacina (5mg/kg, IM). Durante o tratamento, o exame físico foi realizado diariamente, e o hemograma e a citologia do lavado traqueobrônquico repetidos uma semana após seu término (DY). Nos bezerros sadios foram repetidos hemograma e citologia do lavado traqueobrônquico, no último dia (D21) do experimento. Não houve diferença significativa quanto às variáveis gamaglutamiltrasfrase (p=0,09), proteínas séricas (p=0,27) e globulinas (p=0,10) e a idade dos bezerros (p=0,15) entre os grupos. Os bezerros do grupo GSV e GCV levaram em média 11 e 12 dias para adoecerem, respectivamente. Contudo, não houve diferença estatística significativa entre os grupos (p=0,68).(AU)

The natural occurrence of bronchopneumonia in calves and the effect of DL-α-tocopherol in the prophylaxis and treatment of this disease is studied. We evaluated 60 male calves, aged up to 10 days, divided into two groups: GSV (group without vitamin) and GCV (group with vitamin). Supplementation with a single dose of 4,500 IU of DL-α-tocopherol administered intramuscularly (IM) was preceded by clinical examination, complete blood count (CBC), determination of serum proteins, globulins, gamaglutamyltransferase and tracheobronchial lavage cytology (D0) to check sanity and homogenization of the groups. The animals were kept two by two in individual 2.40 m² stalls, where they remained until day 21 (D0 to D21). The animals were examined daily and, in the presence of clinical signs of bronchopneumonia (DX), taken from stalls, evaluated by CBC and tracheobronchial lavage cytology, and treated with enrofloxacin (5 mg/kg, IM). During the treatment, clinical examination was performed daily by the CBC and tracheobronchial lavage cytology repeated one week after the end of treatment (DY). In healthy animals, CBC and tracheobronchial lavage cytology were repeated on the last day of the experiment (D21). No significant difference for the blood variables gamaglutamiltrasfrase (p=0.09), serum protein (p=0.27) and globulin (p=0.10) and the age of animals (p=0.15) were observed in both of groups. Animals in group GSV and GCV took an average of 11 and 12 days for get sick, respectively. (AU)

Lavado traqueobrônquico por via nasotraqueal como metodologia de colheita de células do trato respiratório de ovinos sadios e portadores de afecções pulmonares / Tracheobronchial lavage by nasotracheal via to collect cells of respiratory tract of health and broncopneumonic ovines

Os estudos das secreções traqueobrônquicas são amplamente utilizados nas pesquisas de doenças pulmonares nas diversas espécies animais, inclusive no homem. Os objetivos desta pesquisa foram a viabilização da técnica de colheita de lavado traqueobrônquico na espécie ovina e o estudo da relação clínico-citológica do lavado de ovinos portadores de broncopneumonia e sadios. Foram utilizados 33 ovinos, 18 sadios e 15 portadores de enfermidade respiratória com sinais clínicos de envolvimento das vias aéreas, divididos nos respectivos grupos, GS e GD. Após o exame físico foi realizado o lavado traqueobrônquico por via nasotraqueal. A colheita do lavado foi feita com a inoculação e aspiração de solução fisiológica estéril. As amostras foram processadas citologicamente através de citocentrifugação e coradas pelos métodos Wright-Giemsa e Shorr. Tanto a contagem total de células epiteliais quanto o número de hemácias por mililitro foi maior no grupo de animais com broncopneumonia. Nos animais sadios notou-se predomínio de macrófagos, seguido por células epiteliais cilíndricas, neutrófilos e linfócitos. No grupo de animais doentes havia menor número de macrófagos, e predomínio da população de neutrófilos. Por ser de fácil realização, pouco dispendiosa e pela obtenção representativa de material, a técnica estudada mostrou-se eficaz na obtenção de fluidos traqueobrônquicos e, portanto um bom método de colheita de células para uso nas pesquisas de vias aéreas.(AU)

Exams of tracheobronchial secretions are widely used in research of lung diseases in several animal species, including men. The objective of this paper was to investigate feasibility of the technique for harvesting trachea-bronchial lavage in sheep and to verify its clinic-cytological relationship in healthy sheep and others suffering from pneumonia. In this study 33 sheep were used, 18 healthy and 15 sheep with clinical signs of respiratory disease, divided into groups GS and GD. Clinic examination was performed by obtaining tracheobronchial lavage through the nasal route. The crop was washed with the addition and aspiration of sterile saline. The samples were processed by cytospin and staining with Wright-Giemsa and Shorr. The total cell count and the number of red blood cells per milliliter was higher in the group of sheep with bronchopneumonia. In healthy animals predominance of macrophages was noted, followed by the number of epithelial cells, neutrophils and lymphocytes. In the group of sick animals fewer macrophages and predominance of the neutrophil population were noted. Because of its easy performance to obtain representative material, the technique studied was considered effective to obtain tracheobronchial fluid and therefore is a good method to harvest cells for research of the airways.(AU)

"Caracterização anatomopatológica, microbiológica e parasitológica de ratos Wistar (Rattus norvegicus) em diferentes idades

Os ratos Wistar são amplamente empregados como modelo animal na pesquisa biomédica e o controle sanitário dos biotérios é essencial para garantir a qualidade dos experimentos. O objetivo do estudo foi a caracterização do estado sanitário da colônia de ratos Wistar em sistema de criação convencional e para tanto determinar as bactérias, fungos, virus e parasitos, bem como caracterizar as lesões anatomopatológicas do sistema respiratório. Foram utilizados 273 ratos (N), machos (M) e fêmeas (F), das faixas etárias 4, 8, 12, 16 a 20 semanas e entre 12 a 18 meses, para as determinações de peso e condição corpórea (N=273, 140M, 133F); avaliação bacteriológica de orofaringe, mucosa intestinal e lavado traqueobrônquico (N=40, 20M, 20F); determinação de anticorpos para vírus e bactérias (N=20, 10M, 10F); exame parasitológico (N=60, 30M, 30F); identificação molecular de Mycoplasma pulmonis em amostras de pulmão (N=25, 15M, 10F), e caracterização anatomopatológica da cavidade nasal, orofaringe, laringe, traqueia e pulmão (N=106, 53M, 53F). Foram realizadas ainda avaliações microbiológicas das salas dos ratos em três períodos com isolamento de Micrococcus spp., Staphylococcus spp., Bacillus spp., Aspergillus spp. e Penicillium spp. O peso se mostrou homogêneo dentro da faixa etária e gênero, com apenas sete animais magros (2,56%) e nove em sobrepeso (3,30%). Não foram isoladas bactérias patogênicas na orofaringe, mucosa intestinal e lavado traqueobrônquico por cultivo. Mycoplasma pulmonis foi determinado em 72% das amostras pulmonares e em 100% dos soros testados. Em 35% foram detectados anticorpos para Reovirus tipo III e em 100% para bacilos associados ao epitélio respiratório ciliado. Syphacia muris foi diagnosticada em 91,67%, Eimeria spp. em 3,33% e Entamoeba muris em 1,67%. Lesões relacionadas a infecção por agentes exógenos foram observadas em cavidade nasal e na orofaringe, laringe e traqueia a partir da 4 semanas de idade e, em pulmão desde as 12 semanas, com aumento de frequência de ocorrência e do grau de progressão, com o avançar da idade, nos vários segmentos estudados. Concluímos que a caracterização do estado sanitário dos ratos permite conhecer as particularidades do modelo biológico utilizado e compor base de dados para auxiliar no desenho e na interpretação experimental dos pesquisadores, além de garantir uma base para o programa de monitorização sanitária de biotérios em condições similares.

The Wistar rats are widely used as an animal model in biomedical research and the health monitoring of animal facilities is essential to ensure the experiments quality. The aim of this study was to characterize the Wistar rats colonys health status in a conventional breeding facility, to determine both bacteria, fungi, viruses and parasites, as well as characterize the anatomopathological lesions of the respiratory system. 273 rats (N) were used, males (M) and females (F), ages 4, 8, 12, 16 and 20 weeks, and between 12 to 18 months, for weight and body condition determination (N=273, 140M,133F); bacteriological evaluation of the oropharynx, intestinal mucosa and tracheobronchial lavage (N=40, 20M, 20F); antibodies to viruses and bacteria determination (10M, 10F); parasite examination (N=60, 30M, 30F); molecular identification of Mycoplasma pulmonis in lung samples (N=25, 15M, 10F) and histopathological characterization of the nasal cavity, oropharynx, larynx, trachea and lung (N=106, 53M, 53F). Microbiological evaluations of the rats rooms were made in three periods with isolation of Micrococcus spp., Staphylococcus spp., Bacillus spp., Aspergillus spp. and Penicillium spp. Weight proved to be homogeneous within age and gender, with only seven lean animals (2.56%) and nine overweight (3.30%). Pathogenic bacteria werent isolated by cultivation in the oropharynx, intestinal mucosa and tracheobronchial lavage. Mycoplasma pulmonis was determined in 72% of lung samples and in 100% of tested serum. In 35% antibodies were detected to Reovirus type III and 100% for cilia-associated respiratory bacillus. Syphacia muris was diagnosed in 91.67%, Eimeria spp. in 3.33%, and Entamoeba muris in 1.67%. Lesions related to infection by exogenous agents were observed in the nasal cavity and oropharynx, larynx and trachea from the 4 weeks of age, and lungs from 12 weeks, with an increase of occurrence frequency and degree of progression, with advancing age, in the various studied segments. We conclude that the characterization of rats health status allows us to know the particularities of the animal model used, and compose a database to assist in the design and experimental interpretation of researchers, as well as ensure a basis for the health monitoring program of breeding and research facilities in similar conditions

Influência meteorológica no leucograma e na população citológica do trato respiratório de bezerros / Meteorologic influence on leucogram and cytology in the respiratory tract of healthy calves

Com o intuito de verificar a influência de diferentes condições meteorológicas na sanidade de bovinos, foi realizado citologia de lavados traqueobrônquicos obtidos por traqueocentese e leucograma sanguíneo de cinco bezerros em situações de extremos de temperatura ambiental, sendo T1 = T (temperatura ambiental) de 5oC e UR (umidade relativa do ar) 93%; T2 = temperatura controle de T 22oC e UR 80%; e T3 = T 30oC e UR 41%. Pode-se observar que a condição T3 provavelmente gerou estresse nos animais, pois se observou monocitose significativa no leucograma e na análise do lavado traqueobrônquico, uma diminuição significativa de macrófagos alveolares gigantes, provavelmente por diminuição da atividade macrofágica alveolar, caracterizando esta temperatura e umidade relativa do ar como favoráveis ao aparecimento de doenças respiratórias.(AU)

The study sought to evaluate whether environment temperature (T) and relative humidity (UR) had an impact on the leucogram and cytology of the respiratory tract of healthy cattle. Blood and tracheobronchial lavage were collected from 5 female healthy 4 to 7- month-old Jersey calves in three moments: T1 (T=5oC, UR=93%) T2 (control environment temperature, T 22oC, UR 80%), and T3 (T=30oC, UR=41%). Monocytosis in the leucogram and a decrease in alveolar giant macrophages were observed in T3. It appears that the weather condition had an influence on the respiratory immune system of the calves due to a stress situation. We conclude that elevated temperature associated with low relative humidity appears to favor respiratory disease in 4 to 7-month-old calves.(AU)

Avaliação da broncopneumonia de bezerros criados nos assentamentos de Presidente Venceslau e Presidente Epitácio

O complexo respiratório bovino é um dos principais problemas encontrados em bovinos tanto confinados quanto àqueles criados a pasto, levando a importantes perdas econômicas devido aos altos índices de morbidade e mortalidade. O objetivo geral deste trabalho foi determinar a prevalência de M. bovis, M. díspar, M. mycoides subsp. mycoides SC, P. multocida, M. haemolytica, Parainfluenza Bovino tipo-3 (PIb-3) e Influenza vírus D e a prevalência de anticorpos contra Vírus da Diarreia Viral Bovina (VDVB), Herpesvírus tipo -1 (BoHV1) e o Vírus Respiratório Sincicial Bovino (VRSB) em bezerros sadios e com broncopneumonia criados nos assentamentos de Caiuá, Presidente Epitácio e Mirante de Paranapanema - SP. Além disso, objetiva-se avaliar a associação destes micro-organismos com a presença da broncopneumonia e dos sinais e sintomas apresentados pelos animais durante a avaliação física. Estudou-se 141 bezerros, machos e fêmeas de até um ano de idade, os quais, após exame físico, foram classificados em sadios e com pneumonia. Foram coletadas amostras de lavado traqueobrônquico e sangue total para obtenção do soro. As amostras foram utilizadas para isolamento e identificação de M. bovis, M. díspar, M. mycoides subsp. mycoides SC, P. multocida e M. haemolytica, detecção molecular de Parainfluenza Bovino tipo-3 (PIb-3) e Influenza vírus D (IVD) e detecção de anticorpos contra Vírus da Diarreia Viral Bovina (VDVB), Herpesvírus tipo -1 (HVBo-1) e o Vírus Respiratório Sincicial Bovino (VRSB). Não houve isolamento de P. multocida e M. haemolytica. Dentre as bactérias aeróbias isoladas, observou-se maior frequência de isolamento de Bacillus sp., Staphylococcus intermedius e bactérias Gram-negativas não fermentadoras. M. díspar foi a única espécie de micoplasma identificada com os oligonucleotídeos iniciadores utilizados. Faz-se necessário a busca por outras espécies de micoplasmas que podem estar relacionadas aos casos de broncopneumonia em bovinos. Não houve detecção de Parainfluenza Bovino tipo 3 e Influenza vírus D nas amostras de lavado traqueobrônquico. Os três municípios estudados apresentaram anticorpos para os vírus estudados. Observou-se prevalência de BoHV, VDVB e VRSB de 31,7%, 24,6 e 38,8%, respectivamente. Não houve associação entre o status de saúde dos bezerros e os achados microbiológicos e sorológicos. Foi observada associação entre M. díspar e a variável alerta (p<0,001). Associação entre enterobactérias e a variável desidratação leve (p=0,033/ OR= 11,25, IC: 1,809-41,834) foi observada. Foi observada associação entre a presença de anticorpos contra VDVB e a variável mucosa rósea (p=0,069/ OR=2,037; IC: 1,059-8,709). Observou-se associações entre Mollicutes e as variáveis secreção nasal serosa (p=0,03) e fluxo de ar nasal (p=0,055). Para concluir, foi observada associação entre S. intermedius e a variável fluxo de ar nasal (p=0,097).

Bovine respiratory disease complex is one of the major problems observed in feedlot and grazing cattle, causing economic losses due to high morbidity and mortality rates. The aim of this study was to determine the prevalence of M. bovis, M. díspar, M. mycoides subsp. mycoides SC, P. multocida, M. haemolytica, Bovine Parainfluenza type-3 (bPI-3) and Influenza vírus D (IVD) and the prevalence of antibodies against Bovine Viral Diarrhea Vírus (BVDV), Bovine Herpesvírus type -1 (BoHV1) and Bovine Respiratory Syncytial Vírus (VRSB) in healthy and pneumonic calves raised in settlements located in Caiuá, Presidente Epitácio e Mirante de Paranapanema São Paulo State. Moreover, we aimed to evaluate the association between those microorganisms and antibodies and the presence of bronchopneumonia and the symptoms observed during the physical examination. We studied 141 males and females calves that were classified as healthy and pneumonic calves. We collected tracheobronchial lavage samples and total blood to obtain serum samples. Isolation and biochemical/ molecular identification were performed in order to detect M. bovis, M. díspar, M. mycoides subsp. mycoides SC, P. multocida, M. haemolytica, Bovine Parainfluenza type-3 and Influenzavírus D. Serological survey was performed to detect antibodies aginst Bovine Viral Diarrhea Vírus (BVDV), Bovine Herpesvírus type -1 (BoHV1) and Bovine Respiratory Syncytial Vírus (VRSB). There was not any isolation of P. multocida and M. haemolytica. Bacillus sp., Staphylococcus intermedius and Non-fermenter Gram-negative bacteria were higher prevalent compared to the other aerobic bacteria isolated. M. díspar was the only mycoplasma species identified by the primers used. It is necessary the identification of other mycoplasma species that could be related to the cases of bronchopneumonia in cattle. Bovine Parainfluenza type-3 and Influenza vírus D were not identified. Antibodies were detected in all municipalities. The prevalence of BoHV, BVDV e VRSB was 31.7%, 24.6 and 38.8%, respectively. The association between health status and microbial/ serological findings was not observed. Association between M. díspar and the variable alert (p<0.001) was detected. Enterobacterias were associated to mild dehydration (p=0.033/OR=11.25; IC: 1.809-41.834). The association between the presence of antibodies against BVDV and mucosa rosea (p=0.069/ OR=2.037; IC: 1.059-8.709). Associations between Mollicutes and serous nasal discharge (p=0.03) and nasal air flow (p=0.055) were also detected. In conclusion, S. intermedius was associated to nasal air flow (p=0.097).

Ureia como marcador de diluição em amostras de lavado traqueobrônquico de potros com rodococose / / Urea as a dilution mark in tracheobronchial wash samples of foals with rodhococosis

No estudo das infecções e dos mecanismos inflamatórios do trato respiratório posterior, a diluição desconhecida de amostras de lavados traqueobrônquicos leva a um grave problema na interpretação das concentrações de várias substâncias. Foi investigada a amplitude da diluição em uma situação clínica verdadeira, com o objetivo de determinar a validez do uso da dosagem da ureia em lavados traqueobrônquicos para correção da diluição. As amostras do estudo consistiram em lavados traqueobrônquicos obtidos de sete potros com infecção por Rhodococcus equi. Foi realizada a contagem celular total e diferencial e comprado com o quadro clínico e a recuperação bacteriana de todas as amostras. Os fatores de diluição dos lavados variaram entre 14,3 e 130 (média 59,7). O uso da ureia como marcador de diluição melhorou a exatidão na determinação da concentração total de células nos lavados. Estes resultados sugerem que a prática de mensurar substâncias em lavado traqueobrônquico sem correção da diluição possa induzir a falsas conclusões.

In the study of infection and inflammatory mechanisms of the lower respiratory tract, the unknown dilution of tracheobronchial wash samples is a serious problem for interpretation of the measured concentrations of various substances. The range of dilution in a true clinical situation was investigated with the goal to determine the validity of using urea dosage in tracheobronchial wash to correct the dilution. The study samples consisted of tracheobronchial wash specimens from 7 foals with Rhodococcus equi infection. Total and differential cell counts were made and compared with clinical status and bacterial recuperation of all samples. The dilution factors of the nasal lavage specimens varied between 14.3 and 130 (median 59.7). The use of urea as a dilution mark improves the accuracy of quantifying total cell concentration in washes. These findings suggest that the most common current practice of meansuring substances in tracheobronchial wash, without correction for the dilution, may induce to false conclusions.

Ureia como marcador de diluição em amostras de lavado traqueobrônquico de potros com rodococose / / Urea as a dilution mark in tracheobronchial wash samples of foals with rodhococosis

No estudo das infecções e dos mecanismos inflamatórios do trato respiratório posterior, a diluição desconhecida de amostras de lavados traqueobrônquicos leva a um grave problema na interpretação das concentrações de várias substâncias. Foi investigada a amplitude da diluição em uma situação clínica verdadeira, com o objetivo de determinar a validez do uso da dosagem da ureia em lavados traqueobrônquicos para correção da diluição. As amostras do estudo consistiram em lavados traqueobrônquicos obtidos de sete potros com infecção por Rhodococcus equi. Foi realizada a contagem celular total e diferencial e comprado com o quadro clínico e a recuperação bacteriana de todas as amostras. Os fatores de diluição dos lavados variaram entre 14,3 e 130 (média 59,7). O uso da ureia como marcador de diluição melhorou a exatidão na determinação da concentração total de células nos lavados. Estes resultados sugerem que a prática de mensurar substâncias em lavado traqueobrônquico sem correção da diluição possa induzir a falsas conclusões.(AU)

In the study of infection and inflammatory mechanisms of the lower respiratory tract, the unknown dilution of tracheobronchial wash samples is a serious problem for interpretation of the measured concentrations of various substances. The range of dilution in a true clinical situation was investigated with the goal to determine the validity of using urea dosage in tracheobronchial wash to correct the dilution. The study samples consisted of tracheobronchial wash specimens from 7 foals with Rhodococcus equi infection. Total and differential cell counts were made and compared with clinical status and bacterial recuperation of all samples. The dilution factors of the nasal lavage specimens varied between 14.3 and 130 (median 59.7). The use of urea as a dilution mark improves the accuracy of quantifying total cell concentration in washes. These findings suggest that the most common current practice of meansuring substances in tracheobronchial wash, without correction for the dilution, may induce to false conclusions.(AU)

La identificación bacteriana y sensibilidad antimicrobiana de líquido de lavado tracheobronchial de sanos y enfermos perros / Bronchoalveolar lavage fluid bacterial isolation and sensibility in health and sick dogs / Identificação bacteriana e sensibilidade antimicrobiana do fluido de lavagem traqueobrônquica de cães sadios e doentes

Nacional de Encuestas sobre el uso de antibióticos y la resistencia a los antibióticos en la producción animal se llevan a cabo en varios países, sin embargo pocos estudios que incluyen agentes bacterianos asociados con las vías respiratorias de los animales domésticos. El objetivo de este estudio fue verificar el perfil de resistencia a los antimicrobianos en el líquido de lavado tracheobronchial sanos y enfermos perros. Hemos utilizado 20 animales, 10 clínicamente sanos (grupo 1) y 10 con trastorno respiratorio (grupo 2). La colección de la tracheobronchial lavado se realizó con el tubo endotraqueal o guiado con la ayuda de un endoscopio rígido. Se han realizado el cultivo y la identificación bacteriana de las muestras y de pruebas de sensibilidad a los antibióticos por el método de difusión en agar. Las bacterias aisladas fueron: Haemophilus aphrophilus, Staphylococcus aureus, S. epidermidis, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosas y Proteus mirabilis. Entre las muestras analizadas, 63% mostraron resistencia a diversos antibióticos. Se concluyó que la resistencia a la acción de los antibióticos está presente tanto en animales sanos como los enfermos, y que la ceftriaxona asociada con amoxicilina clavulánico y son eficaces contra las bacterias en el tracto respiratorio de perros.

Research of antimicrobials use and resistance in food animals have been developed in various countries, although few studies include the bacteria prevalence in respiratory tract of companion animal. The aim of this paper was to verify antimicrobial resistance profile from bronchoalveolar lavage fluid of health and sick dogs. Twenty animals were evaluated, 10 in the health group (group 1) and 10 in respiratory distress group (group 2). The bronchoalveolar lavage was performed through an endotracheal tube or guided by a rigid endoscope. Culture, identification and bacterial sensibility of the fluid were performed through agar diffusion method. The bacterial isolated were: Haemophilus aphrophilus, Staphylococcus aureus, S. epidermidis, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosas e Proteus mirabilis. Of all samples, 63% showed resistance to at least one class of antibiotics. Therefore antibiotic resistance is present in sick as well in health animals and ceftriaxone and amoxicilin associated with clavulanic acid are effective against respiratory tract bacteria.KEY WORDS: Antibiotic resistance, bacteria, respiratory distress.

Pesquisas sobre a utilização de antibióticos e a resistência aos antimicrobianos em animais de produção são realizadas em diversos países. No entanto, poucos estudos incluem os agentes bacterianos associados ao trato respiratório de animais de companhia. O objetivo deste trabalho foi verificar o perfil de resistência antimicrobiana no fluido do lavado traqueobrônquico de cães saudáveis e doentes. Utilizaram-se vinte animais, dez clinicamente saudáveis (Grupo 1) e dez com distúrbio respiratório (Grupo 2). A colheita do lavado traqueobrônquico foi realizada com tubo endotraqueal ou guiada com o auxílio de um endoscópio rígido. Efetuaram-se o cultivo e a identificação bacteriana das amostras e teste de sensibilidade a antimicrobianos pelo método de difusão em ágar. As bactérias isoladas foram: Haemophilus aphrophilus, Staphylococcus aureus, S. epidermidis, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosas e Proteus mirabilis. Dentre as amostras analisadas, 63% demonstraram resistência bacteriana a diferentes antimicrobianos. Conclui-se que resistência à ação dos antibióticos está presente tanto nos animais sadios quanto nos doentes e que a ceftriaxona e a amoxicilina associada com ácido clavulânico são efetivas contra as bactérias do trato respiratório de cães.PALAVRAS-CHAVES: Bactérias, distúrbio respiratório, resistência antibiótica.

Obtention methods of respiratory tract celss in healthy sheep by the tracheobroncheal lavage technique by nasotracheal via / Metodologia de colheita de células do trato respiratório em ovinos sadios através da técnica de lavagem traqueobrônquica por via nasotraqueal

The technique of pulmonary cells obtention by nasotracheal intubation was evaluated and the cellular population of 19 healthy sheep was characterized. The animals were hold standing still with head and neck strait; aligned with the vertebral spine and a silicone tube guide till the carina, to introduce a lower caliber tube for precede the tracheobronchial lavage. The average counting of nucleated cells was 64.650 ± 49.674. The cytological analyses of the samples slowed by the average of obtained percentages: 62.74% of macrophages, 15.01% cylindrical epithelial cells, 20.04% of neutrophills, 1.44 of lymphocytes and 0.77% of eosinophills. It was concluded that this methods of sample obtention by nasotracheal intubation to reach the tracheobronchial region was efficient to cytological characterization and cellular differentiation in the obtained samples, being well supported by the animals. KEY WORDS: Citocentrifugation, cytology, tracheobronchial lavage, sheep.

Avaliou-se a técnica de colheita de células do trato respiratório em ovinos, por sondagem nasotraqueal, e caracterizou-se a população celular em dezenove ovinos clinicamente sadios. Os animais foram contidos em estação, com cabeça e pescoço estendidos e alinhados com a coluna vertebral. Após a contenção, introduziu-se uma sonda-guia siliconizada até a bifurcação da traquéia, por dentro da qual se passou uma sonda de menor calibre, para realização do lavado traqueobrônquico. A média da contagem de células nucleadas foi de 64.650 ± 49.674. A análise citológica das amostras evidenciou, pelas médias das porcentagens obtidas, 62,74% de macrófagos, 15,01% de células epiteliais cilíndricas, 20,04% de neutrófilos, 1,44% de linfócitos e 0,77% de eosinófilos. Concluiu-se que o método de colheita por sondagem nasotraqueal foi eficiente na obtenção de amostras de regiões traqueobrônquicas para caracterização citológica e diferenciação celular nas amostras obtidas, sendo bem suportado pelos ovinos. PALAVRAS-CHAVES: Citologia, citocentrífuga, lavado traqueobrônquico, ovinos

Imunoglobulinas no trato respiratório de bezerros sadios durante o primeiro mês de vida / Immunoglobulin in the respiratory tract of healthy calves during their first month of life

Estudou-se o perfil de variação das imunoglobulinas em lavados das regiões traqueobrônquica e broncoalveolar do trato respiratório de bezerros neonatos sadios. Vinte bezerros da raça Holandesa, recém-nascidos e clinicamente sadios, receberam o colostro e foram distribuídos em dois grupos de dez animais cada. O Grupo 1 foi submetido à técnica de sondagem nasotraqueal para obtenção de lavado bronco-alveolar (LBA) e o Grupo 2, à traqueocentese para colheita de lavado traqueobrônquico (LTB), sendo estes procedimentos realizados em intervalos semanais, iniciando-se nos primeiros dias pós-nascimento até, aproximadamente, um mês de vida. Verificaram-se maiores teores de IgG que IgA ao longo do trato respiratório e estas imunoglobulinas sofreram influências da região do trato respiratório lavado, bem como influência do tempo de vida dos bezerros. Pôde-se detectar maiores teores de imunoglobulinas no LTB, assim como as maiores taxas de IgM e IgA em comparação com aquelas do LBA. As imunoglobulinas do LBA tenderam a aumentar seus teores com a evolução das semanas de vida dos bezerros, enquanto tenderam a diminuir no LTB.(AU)

The immunoglobulin variation profile in lavages from the broncoalveolar and tracheo-bronchial regions of 20 healthy newborn Holstein male calves was studied. They were fed with colostrum and distributed into 2 groups, 10 animals each. Group 1 underwent the nasotracheal catheterization technique to get the bronchoalveolar lavage (BAL), and Group 2 underwent the tracheocenthesis to collect the tracheobronchial lavage (TBL), both procedures being carried out at a 7-day-interval, starting on the first days up to about one month of life. Higher IgG contents, as compared to IgA, were noted across the respiratory tract. These immunoglobulins were impacted by the site of the respiratory tract washed, as well as by the calves' life time in weeks. Higher immunoglobulin contents were detected in TBL, as well as higher IgM and IgA rates, as compared to BAL. The BAL immunoglobulins showed a tendency to be reduced in TBL.(AU)

Estudo clínico-citológico e da ativação de neutrófilos sanguíneos e do lavado traqueobrônquico de ovinos clinicamente sadios e portadores de broncopneumonia

Os ovinos são muito susceptíveis às doenças pulmonares, sendo a broncopneumonia mais frequente e responsável por desencadear intensa resposta inflamatória, sistêmica e local, principalmente neutrofílica. O objetivo deste estudo foi analisar a resposta inflamatória sistêmica e pulmonar de ovinos portadores de broncopneumonia moderada e grave e as atividades neutrofílicas através dos testes estimulado (NBT-E) ou não (NBT-NE), com Tetrazólio Nitroazul, no sangue periférico e no lavado traqueobrônquico. Para isso, por exame clínico, 50 ovinos foram selecionados e subdivididos em três grupos: G1 ? animais sadios (n=19); G2 ? portadores de broncopneumonia moderada (n=21); e G3 ? portadores de broncopneumonia grave (n=10). A resposta inflamatória sistêmica foi avaliada pela interpretação do exame físico, leucograma e fibrinogênio plasmático. A resposta inflamatória local, por sua vez, pela associação das alterações respiratórias ao exame físico específico e à celularidade do lavado traqueobrônquico (LTB). A atividade dos neutrófilos sanguíneos dos grupos G1 e G2 foi percentualmente semelhante e a daqueles do LTB nula. O G3 apresentou diminuição da porcentagem de neutrófilos sanguíneos ativados e atividade de NBT significativa dessas células no LTB. Nestas condições experimentais, os resultados demonstraram que o exame clínico minucioso e a associação dos sinais clínicos são fidedignos para a graduação dos estágios da broncopneumonia; a gravidade das respostas inflamatórias, sistêmica e local, é dependente do grau de comprometimento pulmonar e há tendência à leucocitose neutrofílica e ao aumento do número de células nucleadas no LTB conforme a gravidade da doença; há redução do número de neutrófilos ativos circulantes e presença destes no LTB nas broncopneumonias graves

Ovine are highly susceptible to lung diseases, being bronchopneumonia the most frequent and responsible for triggering intense inflammatory response, systemic and local, mainly neutrophilic. The aim of this study was analyze lung and systemic inflammation of moderate and severe bronchopneumonia affected ovine and the neutrophilic activity through stimulated (S-NBT) and not stimulated (NS-NBT) assays with Nitroblue Tetrazolium, on peripheral blood and on tracheobronchial lavage (TBL). For that, 50 animals were selected and divided based on clinical examination into three groups: G1 ? healthy animals (n=19), G2 ? moderate bronchopneumonia (n=21), and G3 ? severe bronchopneumonia (n=10). The systemic inflammation was evaluated by the interpretation of physics parameters, white blood cells (WBC) counts and plasma fibrinogen. The local inflammatory response, in turn, by the association of respiratory abnormalities on physical examination and the TBL cellularity. The systemic neutrophils activity from G1 and G2 were similar, and the lung neutrophils activity was null. The G3 showed a reduction of the activated systemic neutrophils rate, and expressive activity of these cells on the TBL. On these experimental conditions the results showed that a detailed clinical examination associated with the clinical signs is a reliable method for the graduation of the bronchopneumonia severity; the gravity of the local and systemic inflammation relies on the lung commitment degree and there is a tendency to neutrophilic leukocytosis and increase of the nucleated cells number on the TBL, associated with the illness severity; there is a reduction of active circulating neutrophils and its presence on the TBL when the animal is stricken by severe bronchopneumonia

Lavagem traqueobrônquica por sondagem nasotraqueal em bezerros / Tracheobronchial lavage in calves using a nasotracheal technique

Avaliou-se a técnica de lavagem traqueobrônquica por sondagem nasotraqueal e caracterizou-se a população celular em 10 bezerros clinicamente sadios. Após a contenção dos animais em decúbito lateral e auxílio de sonda guia, foi introduzida uma sonda de menor diâmetro até a bifurcação da traquéia, para produzir tosse e obter o lavado traqueobrônquico. A média de células totais nas amostras de lavado foi de 133.750 células/ml. À citologia, foram observados na contagem diferencial: 77,2% macrófagos, 14,9% células epiteliais cilíndricas, 6,0% neutrófilos e 1,8% linfócitos. Das células epiteliais cilíndricas, 79,0% eram do tipo ciliadas e 21,0% não-ciliadas. A média de contagem de macrófagos binucleados foi de 78,5 células/lâmina, a de macrófagos trinucleados de 20,5/lâmina e a de células gigantes 28,5/lâmina. Concluiu-se que o método de colheita por sondagem nasotraqueal é eficiente para caracterizar a citologia do lavado traqueobrônquico de bezerros clinicamente sadios.(AU)

Tracheobronchial lavage through nasotracheal via was performed in 10 clinically health calves. They were maintained in lateral recumbence to perform the procedure. A small tube inserted into a guide tube was introduced until the tracheal bifurcation, producing cough, facilitating the collection of the lavage fluid. The mean number of total cells present in the samples was 133,750 cells/ml. The differential counting was represented by 77.2% of macrophages, 14.9% of cylindrical epithelial cells, 6.0% of neutrophils, 1.8% of lymphocytes. The cylindrical ciliated cells represented 79.0% of the sample and the nonciliated cells represented 21.0%. The mean number of macrophages was 78.5 of binucleated cells, 20.5 of trinucleated cells, and 28.5 of giant cells per smear. The tracheobronchial lavage obtained by this technique was an efficient method to characterize the cytological population of the lungs of clinically health calves.(AU)

OBTENTION METHODS OF RESPIRATORY TRACT CELSS IN HEALTHY SHEEP BY THE TRACHEOBRONCHEAL LAVAGE TECHNIQUE BY NASOTRACHEAL VIA / METODOLOGIA DE COLHEITA DE CÉLULAS DO TRATO RESPIRATÓRIO EM OVINOS SADIOS ATRAVÉS DA TÉCNICA DE LAVAGEM TRAQUEOBRÔNQUICA POR VIA NASOTRAQUEAL

The technique of pulmonary cells obtention by nasotracheal intubation was evaluated and the cellular population of 19 healthy sheep was characterized. The animals were hold standing still with head and neck strait; aligned with the vertebral spine and a silicone tube guide till the carina, to introduce a lower caliber tube for precede the tracheobronchial lavage. The average counting of nucleated cells was 64.650 ± 49.674. The cytological analyses of the samples slowed by the average of obtained percentages: 62.74% of macrophages, 15.01% cylindrical epithelial cells, 20.04% of neutrophills, 1.44 of lymphocytes and 0.77% of eosinophills. It was concluded that this methods of sample obtention by nasotracheal intubation to reach the tracheobronchial region was efficient to cytological characterization and cellular differentiation in the obtained samples, being well supported by the animals. KEY WORDS: Citocentrifugation, cytology, tracheobronchial lavage, sheep.

Avaliou-se a técnica de colheita de células do trato respiratório em ovinos, por sondagem nasotraqueal, e caracterizou-se a população celular em dezenove ovinos clinicamente sadios. Os animais foram contidos em estação, com cabeça e pescoço estendidos e alinhados com a coluna vertebral. Após a contenção, introduziu-se uma sonda-guia siliconizada até a bifurcação da traquéia, por dentro da qual se passou uma sonda de menor calibre, para realização do lavado traqueobrônquico. A média da contagem de células nucleadas foi de 64.650 ± 49.674. A análise citológica das amostras evidenciou, pelas médias das porcentagens obtidas, 62,74% de macrófagos, 15,01% de células epiteliais cilíndricas, 20,04% de neutrófilos, 1,44% de linfócitos e 0,77% de eosinófilos. Concluiu-se que o método de colheita por sondagem nasotraqueal foi eficiente na obtenção de amostras de regiões traqueobrônquicas para caracterização citológica e diferenciação celular nas amostras obtidas, sendo bem suportado pelos ovinos. PALAVRAS-CHAVES: Citologia, citocentrífuga, lavado traqueobrônquico, ovinos