Resumo
Nucleotide excision repair (NER) acts repairing damages in DNA, such as lesions caused by cisplatin. Xeroderma Pigmentosum complementation group C (XPC) protein is involved in recognition of global genome DNA damages during NER (GG-NER) and it has been studied in different organisms due to its importance in other cellular processes. In this work, we studied NER proteins in Trypanosoma cruzi and Trypanosoma evansi, parasites of humans and animals respectively. We performed three-dimensional models of XPC proteins from T. cruzi and T. evansi and observed few structural differences between these proteins. In our tests, insertion of XPC gene from T. evansi (TevXPC) in T. cruzi resulted in slower cell growth under normal conditions. After cisplatin treatment, T. cruzi overexpressing its own XPC gene (TcXPC) was able to recover cell division rates faster than T. cruzi expressing TevXPC gene. Based on these tests, it is suggested that TevXPC (being an exogenous protein in T. cruzi) interferes negatively in cellular processes where TcXPC (the endogenous protein) is involved. This probably occurred due interaction of TevXPC with some endogenous molecules or proteins from T. cruzi but incapacity of interaction with others. This reinforces the importance of correctly XPC functioning within the cell.
O reparo por excisão de nucleotídeos (NER) atua reparando danos no DNA, como lesões causadas por cisplatina. A proteína Xeroderma Pigmentosum complementation group C (XPC) está envolvida no reconhecimento de danos pela via de reparação global do genoma pelo NER (GG-NER) e tem sido estudada em diferentes organismos devido à sua importância em outros processos celulares. Neste trabalho, estudamos proteínas do NER em Trypanosoma cruzi e Trypanosoma evansi, parasitos de humanos e animais, respectivamente. Modelos tridimensionais das proteínas XPC de T. cruzi e T. evansi foram feitos e observou-se poucas diferenças estruturais entre estas proteínas. Durante testes, a inserção do gene XPC de T. evansi (TevXPC) em T. cruzi resultou em crescimento celular mais lento em condições normais. Após o tratamento com cisplatina, T. cruzi superexpressando seu próprio gene XPC (TcXPC) foi capaz de recuperar as taxas de divisão celular mais rapidamente do que T. cruzi expressando o gene TevXPC. Com base nesses testes, sugere-se que TevXPC (sendo uma proteína exógena em T. cruzi) interfere negativamente nos processos celulares em que TcXPC (a proteína endógena) está envolvida. Isso provavelmente ocorreu pois TevXPC é capaz de interagir com algumas moléculas ou proteínas endógenas de T. cruzi, mas é incapaz de interagir com outras. Isso reforça a importância do correto funcionamento de XPC dentro da célula.
Assuntos
Animais , Cruzamentos Genéticos , Dano ao DNA , Expressão Gênica , Trypanosoma cruzi/genéticaResumo
Nucleotide excision repair (NER) acts repairing damages in DNA, such as lesions caused by cisplatin. Xeroderma Pigmentosum complementation group C (XPC) protein is involved in recognition of global genome DNA damages during NER (GG-NER) and it has been studied in different organisms due to its importance in other cellular processes. In this work, we studied NER proteins in Trypanosoma cruzi and Trypanosoma evansi, parasites of humans and animals respectively. We performed three-dimensional models of XPC proteins from T. cruzi and T. evansi and observed few structural differences between these proteins. In our tests, insertion of XPC gene from T. evansi (TevXPC) in T. cruzi resulted in slower cell growth under normal conditions. After cisplatin treatment, T. cruzi overexpressing its own XPC gene (TcXPC) was able to recover cell division rates faster than T. cruzi expressing TevXPC gene. Based on these tests, it is suggested that TevXPC (being an exogenous protein in T. cruzi) interferes negatively in cellular processes where TcXPC (the endogenous protein) is involved. This probably occurred due interaction of TevXPC with some endogenous molecules or proteins from T. cruzi but incapacity of interaction with others. This reinforces the importance of correctly XPC functioning within the cell.(AU)
O reparo por excisão de nucleotídeos (NER) atua reparando danos no DNA, como lesões causadas por cisplatina. A proteína Xeroderma Pigmentosum complementation group C (XPC) está envolvida no reconhecimento de danos pela via de reparação global do genoma pelo NER (GG-NER) e tem sido estudada em diferentes organismos devido à sua importância em outros processos celulares. Neste trabalho, estudamos proteínas do NER em Trypanosoma cruzi e Trypanosoma evansi, parasitos de humanos e animais, respectivamente. Modelos tridimensionais das proteínas XPC de T. cruzi e T. evansi foram feitos e observou-se poucas diferenças estruturais entre estas proteínas. Durante testes, a inserção do gene XPC de T. evansi (TevXPC) em T. cruzi resultou em crescimento celular mais lento em condições normais. Após o tratamento com cisplatina, T. cruzi superexpressando seu próprio gene XPC (TcXPC) foi capaz de recuperar as taxas de divisão celular mais rapidamente do que T. cruzi expressando o gene TevXPC. Com base nesses testes, sugere-se que TevXPC (sendo uma proteína exógena em T. cruzi) interfere negativamente nos processos celulares em que TcXPC (a proteína endógena) está envolvida. Isso provavelmente ocorreu pois TevXPC é capaz de interagir com algumas moléculas ou proteínas endógenas de T. cruzi, mas é incapaz de interagir com outras. Isso reforça a importância do correto funcionamento de XPC dentro da célula.(AU)
Assuntos
Animais , Dano ao DNA , Trypanosoma cruzi/genética , Cruzamentos Genéticos , Expressão GênicaResumo
Abstract Nucleotide excision repair (NER) acts repairing damages in DNA, such as lesions caused by cisplatin. Xeroderma Pigmentosum complementation group C (XPC) protein is involved in recognition of global genome DNA damages during NER (GG-NER) and it has been studied in different organisms due to its importance in other cellular processes. In this work, we studied NER proteins in Trypanosoma cruzi and Trypanosoma evansi, parasites of humans and animals respectively. We performed three-dimensional models of XPC proteins from T. cruzi and T. evansi and observed few structural differences between these proteins. In our tests, insertion of XPC gene from T. evansi (TevXPC) in T. cruzi resulted in slower cell growth under normal conditions. After cisplatin treatment, T. cruzi overexpressing its own XPC gene (TcXPC) was able to recover cell division rates faster than T. cruzi expressing TevXPC gene. Based on these tests, it is suggested that TevXPC (being an exogenous protein in T. cruzi) interferes negatively in cellular processes where TcXPC (the endogenous protein) is involved. This probably occurred due interaction of TevXPC with some endogenous molecules or proteins from T.cruzi but incapacity of interaction with others. This reinforces the importance of correctly XPC functioning within the cell.
Resumo O reparo por excisão de nucleotídeos (NER) atua reparando danos no DNA, como lesões causadas por cisplatina. A proteína Xeroderma Pigmentosum complementation group C (XPC) está envolvida no reconhecimento de danos pela via de reparação global do genoma pelo NER (GG-NER) e tem sido estudada em diferentes organismos devido à sua importância em outros processos celulares. Neste trabalho, estudamos proteínas do NER em Trypanosoma cruzi e Trypanosoma evansi, parasitos de humanos e animais, respectivamente. Modelos tridimensionais das proteínas XPC de T. cruzi e T. evansi foram feitos e observou-se poucas diferenças estruturais entre estas proteínas. Durante testes, a inserção do gene XPC de T. evansi (TevXPC) em T. cruzi resultou em crescimento celular mais lento em condições normais. Após o tratamento com cisplatina, T. cruzi superexpressando seu próprio gene XPC (TcXPC) foi capaz de recuperar as taxas de divisão celular mais rapidamente do que T. cruzi expressando o gene TevXPC. Com base nesses testes, sugere-se que TevXPC (sendo uma proteína exógena em T. cruzi) interfere negativamente nos processos celulares em que TcXPC (a proteína endógena) está envolvida. Isso provavelmente ocorreu pois TevXPC é capaz de interagir com algumas moléculas ou proteínas endógenas de T.cruzi, mas é incapaz de interagir com outras. Isso reforça a importância do correto funcionamento de XPC dentro da célula.
Resumo
Abstract Nucleotide excision repair (NER) acts repairing damages in DNA, such as lesions caused by cisplatin. Xeroderma Pigmentosum complementation group C (XPC) protein is involved in recognition of global genome DNA damages during NER (GG-NER) and it has been studied in different organisms due to its importance in other cellular processes. In this work, we studied NER proteins in Trypanosoma cruzi and Trypanosoma evansi, parasites of humans and animals respectively. We performed three-dimensional models of XPC proteins from T. cruzi and T. evansi and observed few structural differences between these proteins. In our tests, insertion of XPC gene from T. evansi (TevXPC) in T. cruzi resulted in slower cell growth under normal conditions. After cisplatin treatment, T. cruzi overexpressing its own XPC gene (TcXPC) was able to recover cell division rates faster than T. cruzi expressing TevXPC gene. Based on these tests, it is suggested that TevXPC (being an exogenous protein in T. cruzi) interferes negatively in cellular processes where TcXPC (the endogenous protein) is involved. This probably occurred due interaction of TevXPC with some endogenous molecules or proteins from T.cruzi but incapacity of interaction with others. This reinforces the importance of correctly XPC functioning within the cell.
Resumo O reparo por excisão de nucleotídeos (NER) atua reparando danos no DNA, como lesões causadas por cisplatina. A proteína Xeroderma Pigmentosum complementation group C (XPC) está envolvida no reconhecimento de danos pela via de reparação global do genoma pelo NER (GG-NER) e tem sido estudada em diferentes organismos devido à sua importância em outros processos celulares. Neste trabalho, estudamos proteínas do NER em Trypanosoma cruzi e Trypanosoma evansi, parasitos de humanos e animais, respectivamente. Modelos tridimensionais das proteínas XPC de T. cruzi e T. evansi foram feitos e observou-se poucas diferenças estruturais entre estas proteínas. Durante testes, a inserção do gene XPC de T. evansi (TevXPC) em T. cruzi resultou em crescimento celular mais lento em condições normais. Após o tratamento com cisplatina, T. cruzi superexpressando seu próprio gene XPC (TcXPC) foi capaz de recuperar as taxas de divisão celular mais rapidamente do que T. cruzi expressando o gene TevXPC. Com base nesses testes, sugere-se que TevXPC (sendo uma proteína exógena em T. cruzi) interfere negativamente nos processos celulares em que TcXPC (a proteína endógena) está envolvida. Isso provavelmente ocorreu pois TevXPC é capaz de interagir com algumas moléculas ou proteínas endógenas de T.cruzi, mas é incapaz de interagir com outras. Isso reforça a importância do correto funcionamento de XPC dentro da célula.
Assuntos
Humanos , Animais , Trypanosoma cruzi/genética , Xeroderma Pigmentoso , Dano ao DNA/genética , Biologia Computacional , Proteínas de Ligação a DNA/genética , Proteínas de Ligação a DNA/metabolismo , Reparo do DNA/genéticaResumo
Rhodnius neglectus is a wild triatomine, vector of the protozoan Trypanosoma cruzi, which causes Chagas' disease, and feeds on the blood of small mammals, being essential for its growth and reproduction. Accessory glands of the female reproductive tract are important in insect reproduction, but their anatomy and histology in R. neglectus are poorly studied. The aim of this work was to describe the histology and histochemistry of the accessory gland of the female reproductive tract of R. neglectus. The reproductive tract of five females of R. neglectus was dissected and the accessory glands transferred to Zamboni's fixative solution, dehydrated in a crescent series of ethanol, embedded in historesin, sectioned at 2 µm thick, stained with toluidine blue for histological analysis or mercury bromophenol blue for detection of total proteins. The accessory gland R. neglectus is tubular, without branches, opening in the dorsal region of the vagina and differing along its length in proximal and distal regions. In the proximal region, the gland is lined by the cuticle with a layer of columnar cells associated with muscle fibers. In the distal region of the gland, the epithelium has spherical secretory cells with terminal apparatus and conducting canaliculi opening in the lumen through pores in the cuticle. Proteins were identified in the gland lumen, terminal apparatus, nucleus and cytoplasm of secretory cells. The histology of the R. neglectus gland is similar to that found in other species of this genus, but with variations in the shape and size of its distal region.
Rhodnius neglectus é um triatomíneo silvestre, vetor do protozoário Trypanosoma cruzi, causador da doença de Chagas. Este inseto se alimenta do sangue de pequenos mamíferos, que é essencial para o seu crescimento e reprodução. As glândulas acessórias do sistema reprodutor feminino são importantes na reprodução de insetos, mas sua anatomia e histologia em R. neglectus são pouco conhecidas. O objetivo deste trabalho foi descrever a histologia e histoquímica da glândula acessória do aparelho reprodutor feminino de R. neglectus. O sistema reprodutor de cinco fêmeas de R. neglectus foi dissecado e as glândulas acessórias transferidas para solução fixadora de Zamboni, desidratadas em série crescente de etanol, embebidas em historesina, seccionadas com 2 µm de espessura, coradas com azul de toluidina para análise histológica ou submetidas ao teste de mercúrio-bromofenol para detecção de proteínas totais. O sistema reprodutor de R. neglectus tem uma glândula acessória tubular, sem ramificações, abrindo-se na região dorsal da vagina, sendo diferenciada em regiões proximal e distal. Na região proximal, a glândula é revestida internamente pela cutícula com uma camada de células colunares associadas a fibras musculares. Na região distal ocorrem células secretoras esféricas com aparato terminal e canalículos condutores que se abrem no lúmen da glândula através de poros na cutícula. O teste histoquímico revelou a presença de proteínas no lúmen da glândula e no aparato terminal, núcleo e citoplasma das células secretoras. A histologia da glândula de R. neglectus é semelhante à das espécies desse gênero, mas com variações na forma e no tamanho de sua região distal.
Assuntos
Reprodução , Rhodnius/anatomia & histologia , Doença de Chagas , Genitália FemininaResumo
A doença de Chagas, também chamada de tripanossomíase americana, é uma antropozoonose causada por um protozoário flagelado denominado Trypanosoma cruzi. A transmissão ocorre de diversas maneiras, sendo as mais relatadas: a forma vetorial, que ocorre quando o paciente inocula as fezes do vetor infectadas pelo tripanossomo por meio do orifício que foi aberto no momento do repasto sanguíneo, ou por via oral, devido principalmente a ingestão de alimentos contaminados com o tripanossomo. Diferentes espécies de animais domésticos e silvestres podem ser acometidas pela doença; contudo, o objetivo deste trabalho é descrever a doença em cães os quais são capazes de desenvolver o curso crônico, assim como os humanos, e são importantes marcadores de saúde pública para a doença, tendo em vista que são animais considerados sentinelas para o seu aparecimento.
Chagas disease, also called American trypanosomiasis, is an anthropozoonosis caused by the flagellated protozoan Trypanosoma cruzi. The transmission occurs in several ways, and the most reported are: the vector form, which occurs when the patient inoculates the feces of the vector infected by the trypanosome, through the hole that was opened during the blood meal, or orally, mainly due to the ingestion of food contaminated with trypanosome. Different species of domestic and wild animals can be affected by the disease; however, this study aims to describe the disease in dogs, which are capable of developing the chronic course, just like humans, and are also important public health indicators for the disease, since they are animals considered sentinels to its appearance.
Assuntos
Animais , Cães , Trypanosoma cruzi/isolamento & purificação , Doença de Chagas/veterinária , Doença de Chagas/epidemiologia , Notificação de Doenças/normas , Vetores de Doenças , Espécies SentinelasResumo
Trypanosoma spp. infection is a problem in many tropical countries, infecting several animal species, including humans. The aim of the present study was to identify the Trypanosoma species in Neotropical primates from Rio de Janeiro state and compare the results with other reports both phylogenetically and geographically. Molecular detection was based on the 18 SSU gene. The sequences obtained in the PCR were sequenced and compared with others previously deposited in GenBank. These sequences were used to perform phylogenetic analysis and make a distribution map of primate species infected by Trypanosoma species in Brazil. Among 34 monkeys, five capuchin monkeys (Sapajus spp.) and one marmoset (Callithrix spp.) showed Trypanosoma spp. sequences in the same clade of Trypanosoma minasense and three capuchin monkeys' sequences were in the same clade of Trypanosoma cruzi. The Atlantic Forest and the Brazilian Amazon are the regions with the highest frequency of studies about Trypanosoma spp. and variety of Neotropical primate hosts. These are areas that deserve attention regarding the conservation of biodiversity, but it also makes evident the lack of studies with Neotropical primates in other regions of the country, as well as multidisciplinary studies to better understand the host pathogen relationships.
A infecção por Trypanosoma spp. é um problema em muitos países tropicais, infectando várias espécies animais, incluindo humanos. O objetivo do presente estudo foi identificar as espécies de Trypanosoma em primatas neotropicais no estado Rio de Janeiro e comparar os resultados com outros relatos, tanto filogeneticamente quando geograficamente. A detecção molecular foi baseada no gene SSU 18. As sequências obtidas na PCR foram sequenciadas e comparadas com outras previamente depositadas no GenBank. Essas sequências foram utilizadas para análises filogenéticas e confeccionar um mapa de distribuição de espécies de primatas infectadas por espécies de Trypanosoma no Brasil. Entre 34 macacos, cinco macacos-prego (Sapajus spp.) e um sagui (Callithrix spp.) apresentaram sequências de Trypanosoma spp. no mesmo clado de Trypanosoma minasense e três sequências de macacos-prego estavam no mesmo clado de Trypanosoma cruzi. A Mata Atlântica e a Amazônia brasileira são as regiões com maior frequência de estudos sobre Trypanosoma spp. e variedade de primatas neotropicais hospedeiros. São áreas que merecem atenção no que se refere à conservação da biodiversidade, mas também evidencia a carência de estudos com PNH em outras regiões do país e de estudos multidisciplinares para melhor compreender as relações do patógeno hospedeiro.
Assuntos
Animais , Trypanosoma/isolamento & purificação , Tripanossomíase/epidemiologia , Callithrix , Sapajus , Doenças dos Macacos/epidemiologia , Trypanosoma cruzi , Tripanossomíase/veterináriaResumo
Chagas disease is caused by Trypanosoma cruzi, which has several forms of transmission. Among them, the vector route requires the constant action of the Health Surveillance in the control of triatomines. Our objective is to describe the diversity of triatomines and the rate of natural infection by T. cruzi in these insects, as well as to analyse entomological indicators, through secondary data generated by the Health Surveillance of the municipality of Barra, in the period from 2009 to 2019. The secondary data were subjected to descriptive analysis and the entomological indicators calculated. Williams' G test and Fisher's exact test were used to analyse the categorical data. A total of 10,913 triatomines of the genera Rhodnius sp., Panstrongylus sp., Eratyrus sp. and Triatoma sp. were captured, represented by 12 species. Triatoma sordida was the most prevalent 98.66% (10,767/10,913), reflected in the overall infestation index 7.61% (2,555/33,544) and triatomine density 0.24 (8,247/33,544). While the overall infection rate was 0.81% (41/5,048) and remained low during all years. There was significant association for T. sordida in relation to "T. cruzi infection index" and "Developmental stage" and "Capture site". It is concluded that the municipality of Barra has a high occurrence of triatomines of various species, with T. sordida being the most prevalent species and responsible for the rates of infestation and infection by T. cruzi. The presence of these insects in households is a risk for the domestic cycle of the parasite, and thus can transmit T. cruzi to various domestic animals, including humans.(AU)
doença de Chagas é causada pelo Trypanosoma cruzi, que possui diversas formas de transmissão. Dentre elas, a via vetorial, requer a atuação constante da Vigilância em Saúde no controle dos triatomíneos. Nosso objetivo é descrever a diversidade de triatomíneos e o índice de infecção natural por T. cruzi nestes insetos, bem como analisar os indicadores ento-mológicos, por meio de dados secundários gerados pela Vigilância em Saúde do município de Barra, no período de 2009 a 2019. Os dados secundários foram submetidos a análise descritiva e os indicadores entomológicos calculados. Os testes G de Williams e exato de Fisher foram utilizados para a análise dos dados categóricos. Foram capturados 10.913 triatomíneos, dos gêneros Rhodnius sp., Panstrongylus sp., Eratyrus sp. e Triatoma sp., representados por 12 espécies. Triatoma sordida foi a mais prevalente 98,66% (10.767/10.913), refletindo no índice de infestação geral 7,61% (2.555/33.544) e densidade triatomínea 0,24 (8.247/33.544). Enquanto que o índice de infecção geral foi de 0,81% (41/5.048) e manteve-se baixo durante todos os anos. Houve associação significativa para T. sordida em relação ao "Índice de infecção por T. cruzi" e "Estágio de desenvolvi-mento" e "Local de captura". Conclui-se que o município de Barra apresenta uma alta ocorrência de triatomíneos de diversas espécies, sendo T. sordida a espécie mais prevalente e responsável pelos índices de infestação e infecção por T. cruzi. A presença desses insetos nos domicílios é um risco para o ciclo doméstico do parasito, podendo assim transmitir o T. cruzi para diversos animais domésticos, inclusive humanos.(AU)
Assuntos
Animais , Triatominae/patogenicidade , Doença de Chagas/epidemiologia , Estudos Retrospectivos , Controle de Vetores de Doenças , BiodiversidadeResumo
Chagas disease, caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, has often been linked to oral transmission through açai consumption. Molecular methods that allow fast and accurate identification of the pathogen are important for the detection of the presence of the parasite in this food. This study aimed to optimize polymerase chain reaction (PCR)-based detection of T. cruzi DNA in açai pulp. Several dilutions of T. cruzi DTU TcI trypomastigote forms were cultured in liver infusion tryptose (LIT) medium. Trypanosoma cruzi DNA was extracted from the cells and subjected to PCR. Subsequently, culture dilutions were added to açai pulp to evaluate the detection threshold of the optimized PCR assay. We demonstrate that our assay can detect T. cruzi DNA in açai pulp at a concentration of 1.08 × 10-10 ng µL-1. We conclude that our optimized protocol is effective and can be used as an important tool for the detection of T. cruzi contamination in açaí.(AU)
A doença de Chagas, enfermidade causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, tem sido relacionada com frequência à transmissão oral pelo consumo de açaí. Métodos moleculares que fornecem uma identificação rápida e precisa do patógeno para a detecção da presença do parasita são de extrema importância para a detecção da presença do parasita neste alimento. Este estudo teve como objetivo otimizar a detecção de DNA de T. cruzi em polpa de açaí por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR). Foram preparadas várias diluições das formas tripomastigotas de T. cruzi DTU TcI cultivadas em meio de cultivo Liver Infusion Tryptose. O DNA de T. cruzi foi extraído das células e submetido à PCR. Posteriormente, as diluições da cultura foram adicionadas às polpas de açaí para avaliar o limite de detecção do novo ensaio de PCR otimizado. Mostramos que nosso ensaio pode detectar DNA de T. cruzi em polpas de açaí na concentração de 1.08 × 10-10 ng µL-1. Concluímos que a metodologia desenvolvida se mostra eficaz e pode ser uma ferramenta importante para a detecção de contaminação por T. cruzi em açaí.(AU)
Assuntos
Doença de Chagas/classificação , Doença de Chagas/diagnóstico , Noxas/análise , Euterpe/parasitologia , Trypanosoma cruzi/genéticaResumo
Educational interventions may trigger actions that contribute to prevent parasitic diseases, such as Chagas disease (CD). This study aimed at investigating the impact of an instructional video named Documentary on Chagas Disease on knowledge about CD and its vectors displayed by a population that lives in an endemic area in Brazil, so as to validate it as an educational tool. The video was shown to 226 subjects, divided into two groups. Group 1 was composed of users of Basic Health Units (BHU) in Pelotas and Pinheiro Machado, cities located in Rio Grande do Sul (RS) state, Brazil, where CD is endemic. Group 2 consisted of students who attend three public schools located in the rural area in Pinheiro Machado, RS. Two questionnaires with questions about their knowledge about triatomines and CD were applied, before and after the documentary was shown. After the video was shown, there was significant increase in individuals knowledge (in both groups) about kissing bugs, their notification, the disease and its prevention. Besides, watchers considered that the quality of the material was satisfactory. Since the Documentary on CD can be easily accessed on the internet and was effective in teaching the population that lives in endemic areas, its use should be encouraged in places and meetings connected to health that aim at fighting against triatominae and at exposing an updated view of CD.(AU)
Intervenções educacionais podem desencadear ações que contribuam para a prevenção de doenças parasitárias, como a doença de Chagas (DC). Este estudo teve como objetivo investigar o impacto de um vídeo instrucional denominado Documentário Doença de Chagas no conhecimento sobre DC e seus vetores exibidos a uma população que vive em área endêmica no Brasil, para validá-lo como uma ferramenta educacional. O vídeo foi exibido para 226 indivíduos, divididos em dois grupos. O grupo 1 foi composto por usuários das Unidades Básicas de Saúde (UBS) de Pelotas e Pinheiro Machado, cidades do estado do Rio Grande do Sul (RS), Brasil, onde a DC é endêmica. O grupo 2 foi formado por estudantes que frequentam três escolas públicas localizadas na zona rural de Pinheiro Machado, RS. Dois questionários com perguntas sobre conhecimentos sobre triatomíneos e DC foram aplicados, antes e depois da exibição do documentário. Após a exibição do vídeo, houve um aumento significativo no conhecimento dos indivíduos (em ambos os grupos) sobre triatomíneos, sua notificação, a doença e sua prevenção. Além disso, os observadores consideraram que a qualidade do material era satisfatória. Como o Documentário DC pode ser facilmente acessado na Internet e ser eficaz no ensino à população que vive em áreas endêmicas, seu uso deve ser incentivado em locais e reuniões relacionadas à saúde, que visam combater os triatomíneos e exibir uma informação atualizada sobre a DC.(AU)
Assuntos
Doença de Chagas , Doenças Endêmicas , Trypanosoma cruzi , Educação em Saúde , Recursos AudiovisuaisResumo
We report the first known occurrence of Panstrongylus megistus (Burmeister, 1835) (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae) in the Metropolitan Region of São Paulo, Brazil. In 2018, adult specimens were sent by residents to the competent authorities and, in the inspection of the property, a large focus associated with a marsupial nest was found. This finding reinforces the importance of the species in the state of São Paulo, serves as an alert for epidemiological surveillance and extends the species colonization area in the state of São Paulo.(AU)
Relatamos a primeira ocorrência de Panstrongylus megistus (Burmeister, 1835) (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae) na Região Metropolitana de São Paulo, Brasil. Em 2018, espécimes adultos foram enviados por residentes e a pesquisa na propriedade constatou a presença de um grande foco associado a um ninho marsupial. Este achado reforça a importância da espécie no estado de São Paulo, serve de alerta para a vigilância epidemiológica e amplia a área de colonização da espécie no estado de São Paulo.(AU)
Assuntos
Panstrongylus , Monitoramento Epidemiológico , Doença de Chagas/epidemiologia , BrasilResumo
Triatoma infestans (Hemiptera: Reduviidae) is a hematophagous insect and the main vector of Trypanosoma cruzi (Kinetoplastida: Trypanosomatidae). In the present study, the authors investigated whether a serine protease activity from the saliva of T. infestans has a role in vasomotor modulation, and in the insect-blood feeding by cleaving and activating protease-activated receptors (PARs). Methods T. infestans saliva was chromatographed as previously reported for purification of triapsin, a serine protease. The cleavage activity of triapsin on PAR peptides was investigated based on FRET technology. Mass spectrometry was used to analyze the sites of PAR-2 peptide cleaved by triapsin. NO measurements were performed using the DAN assay (2,3-diaminonapthalene). The vasorelaxant activity of triapsin was measured in vessels with or without functional endothelium pre-contracted with phenylephrine (3 µM). Intravital microscopy was used to assess the effect of triapsin on mouse skin microcirculation. Results Triapsin was able to induce hydrolysis of PAR peptides and showed a higher preference for cleavage of the PAR-2 peptide. Analysis by mass spectrometry confirmed a single cleavage site, which corresponds to the activation site of the PAR-2 receptor. Triapsin induced dose-dependent NO release in cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), reaching a maximum effect at 17.58 nM. Triapsin purified by gel-filtration chromatography (10-16 to 10-9 M) was applied cumulatively to mouse mesenteric artery rings and showed a potent endothelium-dependent vasodilator effect (EC30 = 10-12 M). Nitric oxide seems to be partially responsible for this vasodilator effect because L-NAME (L-NG-nitroarginine methyl ester 300 µM), a nitric oxide synthetase inhibitor, did not abrogate the vasodilation activated by triapsin. Anti-PAR-2 antibody completely inhibited vasodilation observed in the presence of triapsin activity. Triapsin activity also induced an increase in the mouse ear venular diameter. Conclusion Data from this study suggest a plausible association between triapsin activity mediated PAR-2 activation and vasodilation caused by T. infestans saliva.(AU)
Assuntos
Animais , Peptídeos , Triatoma , Trypanosoma cruzi , Vasodilatação , Cromatografia , Receptor PAR-2 , Óxido NítricoResumo
Triatoma infestans (Hemiptera: Reduviidae) is a hematophagous insect and the main vector of Trypanosoma cruzi (Kinetoplastida: Trypanosomatidae). In the present study, the authors investigated whether a serine protease activity from the saliva of T. infestans has a role in vasomotor modulation, and in the insect-blood feeding by cleaving and activating protease-activated receptors (PARs). Methods T. infestans saliva was chromatographed as previously reported for purification of triapsin, a serine protease. The cleavage activity of triapsin on PAR peptides was investigated based on FRET technology. Mass spectrometry was used to analyze the sites of PAR-2 peptide cleaved by triapsin. NO measurements were performed using the DAN assay (2,3-diaminonapthalene). The vasorelaxant activity of triapsin was measured in vessels with or without functional endothelium pre-contracted with phenylephrine (3 µM). Intravital microscopy was used to assess the effect of triapsin on mouse skin microcirculation. Results Triapsin was able to induce hydrolysis of PAR peptides and showed a higher preference for cleavage of the PAR-2 peptide. Analysis by mass spectrometry confirmed a single cleavage site, which corresponds to the activation site of the PAR-2 receptor. Triapsin induced dose-dependent NO release in cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), reaching a maximum effect at 17.58 nM. Triapsin purified by gel-filtration chromatography (10-16 to 10-9 M) was applied cumulatively to mouse mesenteric artery rings and showed a potent endothelium-dependent vasodilator effect (EC30 = 10-12 M). Nitric oxide seems to be partially responsible for this vasodilator effect because L-NAME (L-NG-nitroarginine methyl ester 300 µM), a nitric oxide synthetase inhibitor, did not abrogate the vasodilation activated by triapsin. Anti-PAR-2 antibody completely inhibited vasodilation observed in the presence of triapsin activity. Triapsin activity also induced an increase in the mouse ear venular diameter. Conclusion Data from this study suggest a plausible association between triapsin activity mediated PAR-2 activation and vasodilation caused by T. infestans saliva.(AU)
Assuntos
Animais , Peptídeos , Triatoma , Trypanosoma cruzi , Vasodilatação , Cromatografia , Receptor PAR-2 , Óxido NítricoResumo
Chagas disease (CD) is considered a typical low-income population sickness of the developing countries in Latin America. Given the historical relevance of CD in individuals in southern Rio Grande do Sul (RS) State, Brazil, the aim of this study was to identify the knowledge of the CD and its vectors by cardiac patients, and the prevalence of anti-T cruzi antibodies in these individuals in Pelotas, city located in Rio Grande do Sul (RS) state, Brazil. The subjects with cardiac disease were submitted to a semi-structured questionnaire as well as two serological tests in order to detect anti-T. cruzi IgG antibodies. Of the individuals that born in municipalities showing the highest triatomine infestation rates in recent decades, 81.8% were able to recognize the vector insect (p = 0.0042; OR = 5.9), and 83.3% reported either themselves or someone in their families to have CD (p = 0.043, OR = 5.2). Of the 54 patients submitted to serological analysis, only 01 patient (1.9%) was positive for anti-T. cruzi antibodies, a 55 year old man from the rural area of Canguçu county. This study provides support for the evaluation to be extended to other cardiology centers, given the importance of Chagas disease in Brazil.(AU)
A doença de Chagas (DC) é considerada uma doença típica da população de baixa renda dos países em desenvolvimento da América Latina. Dada a relevância histórica da DC em indivíduos do sul do Estado do Rio Grande do Sul (RS), o objetivo deste estudo foi identificar o conhecimento da doença de Chagas (DC) e seus vetores em pacientes cardíacos, e a prevalência de anticorpos anti-T cruzi nesses indivíduos, em Pelotas, cidade localizada no Rio Grande do Sul (RS), Brasil. Os pacientes cardiopatas foram submetidos a um questionário semiestruturado, e também a dois testes sorológicos para detecção de anticorpos anti-T. cruzi IgG. Dos indivíduos que nasceram em municípios com as maiores taxas de infestação por triatomíneos nas últimas décadas, 81,8% foram capazes de reconhecer o inseto vetor (p = 0,0042; OR = 5,9), e 83,3% relataram que eles próprios ou alguém em suas famílias tem DC (p = 0,043, OR = 5,2). Dos 54 pacientes submetidos à análise sorológica, apenas 01 paciente (1,9%) foi positivo para anticorpos anti-T.cruzi, um homem de 55 anos da área rural do município de Canguçu. Este estudo fornece subsídios para que a avaliação seja estendida a outros centros de cardiologia, devido à importância da doença de Chagas no Brasil.(AU)
Assuntos
Humanos , Doença de Chagas/epidemiologia , Estudos Soroepidemiológicos , Cardiopatias , Vetores de Doenças , BrasilResumo
Xylella fastidiosa is a plant-pathogenic bacterium that lives inside host xylem vessels, where it forms biofilm which is believed to be responsible for disrupting the passage of water and nutrients. Pectobacterium carotovorum is a Gram-negative plant-specific bacterium that causes not only soft rot in various plant hosts, but also blackleg in potato by plant cell wall degradation. Chagas disease, which is caused by Trypanosoma cruzi, has been commonly treated with nifurtimox and benzonidazole, two drugs that cause several side effects. As a result, the use of natural products for treating bacterial and neglected diseases has increased in recent years and plants have become a promising alternative to developing new medicines. Therefore, this study aimed to determine, for the first time, the chemical composition of essential oil from Psidium guajava flowers (PG-EO) and to evaluate its in vitro anti-Xylella fastidiosa, anti-Pectobacterium carotovorum, anti-Trypanosoma cruzi and cytotoxic activities. PG-EO was obtained by hydrodistillation in a Clevenger apparatus while its chemical composition was determined by gas chromatography-flame ionization detection (GC-FID) and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Major compounds identified in PG-EO were alpha-cadinol (37.8%), beta-caryophyllene (12.2%), nerolidol (9.1%), alpha-selinene (8.8%), beta-selinene (7.4%) and caryophyllene oxide (7.2%). Results showed that the PG-EO had strong trypanocidal activity against the trypomastigote forms of Trypanosoma cruzi (IC50 = 14.6 ug/mL), promising antibacterial activity against X. fastidiosa (MIC = 12.5 ug/mL) and P. carotovorum (MIC = 62.5 ug/mL), and moderate cytotoxicity against LLCMK2 adherent epithelial cells in the concentration range (CC50 = 250.5 ug/mL). In short, the PG-EO can be considered a new source of bioactive compounds for the development of pesticides and trypanocide drugs.(AU)
Xylella fastidiosa é uma bactéria patogênica que vive dentro dos vasos do xilema hospedeiro, onde forma um biofilme responsável por interromper a passagem de água e nutrientes. Pectobacterium carotovorum é uma bactéria Gram-negativa que causa não só podridão macia em várias plantas hospedeiras, mas também canela-preta na batata por degradação da parede celular da planta. A doença de Chagas, causada pelo Trypanosoma cruzi, é comumente tratada com nifurtimox e benzonidazol, duas drogas que causam vários efeitos colaterais. Como resultado, o uso de produtos naturais para o tratamento de doenças bacterianas e negligenciadas aumentou nos últimos anos e as plantas continuam sendo uma alternativa promissora para o desenvolvimento de novos medicamentos. Portanto, este estudo teve como objetivo determinar, pela primeira vez, a composição química do óleo essencial de flores de Psidium guajava (PG-EO) e avaliar suas propriedades anti-Xylella fastidiosa, anti-Pectobacterium carotovorum, anti-Trypanosoma cruzi e citotóxica in vitro. PG-EO foi obtido por hidrodestilação em um aparelho Clevenger, enquanto sua composição química foi determinada por cromatografia em fase gasosa com detecção por ionização por chama (CG-DIC) e por cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massa (CG-EM). Os principais compostos identificados no PG-EO foram alfa-cadinol (37,8%), beta-cariofileno (12,2%), nerolidol (9,1%), alfa-selineno (8,8%), beta-selineno (7,4%) e óxido de cariofileno (7,2%). Os resultados mostraram que o PG-EO apresentou forte atividade tripanocida contra as formas tripomastigotas de T. cruzi (CI50 = 14,6 ug/mL), promissora atividade antibacteriana contra X. fastidiosa (MIC = 12,5 ug/mL) e P. carotovorum (MIC = 62,5 ug/mL) e citotoxicidade moderada contra células epiteliais aderentes (LLCMK2) na faixa de concentração (CC50 = 250,5 ug/mL). Em suma, o PG-EO pode ser considerado uma nova fonte de compostos bioativos para o desenvolvimento de pesticidas e drogas tripanocidas.(AU)
Assuntos
Óleos Voláteis , Psidium , Doenças Negligenciadas , Plantas MedicinaisResumo
Background: Chagas Disease (CD) is a parasitic anthropozoonosis caused by the Trypanosoma cruzi (T. cruzi), a protozoan transmitted by insects from the Reduviidae family. Several species of wild and domestic animals, humans included, are susceptible, developing acute clinical signals (myocarditis and cardiac arrhythmias) or chronic signals (drop on the performance and syncope) of the disease. In Brazil, the disease in dogs shows variable indexes of occurrence. The present paper describes the natural infection by T. cruzi in a canine living in the city of Barra, in the state of Bahia, Brazil, a region classified as high risk of vulnerability for the CD in the northeast of Brazil. Case: A 9-year-old male dog, non-specific breed, was referred to the clinic the Veterinary Clinic for Small Animals, at the Veterinary Medical Teaching Hospital), at the Federal University of the West of Bahia. Its owner reported the presence of bloody secretion in the penile region. During the physical exam it was possible to observe an increase in the volume of the penis base. All of the animals physiological parameters were within normal levels. Blood samples and cytological laminas from the lesioned area were collected and sent to the Laboratory of Veterinary Clinical Pathology in the same institution. The cytological exam showed monomorphic population of great round cells with a round nucleus, condensed chromatin and one to two prominent nucleolus, abundant and slightly basophilic cytoplasm, with multiple stippled vacuoles, thus confirming a Transmissible venereal tumor (TVT) case. With the blood exam one observed a thrombocytopenia, neutrophilia with a deviation on the left and the presence of a trypomastigote form of Trypanosoma sp. in the blood smears...
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Masculino , Animais , Cães , Doença de Chagas/diagnóstico , Doença de Chagas/veterinária , Trypanosoma cruzi/isolamento & purificação , Vetores de Doenças , Brasil , Reação em Cadeia da Polimerase/veterináriaResumo
Background: Chagas Disease (CD) is a parasitic anthropozoonosis caused by the Trypanosoma cruzi (T. cruzi), a protozoan transmitted by insects from the Reduviidae family. Several species of wild and domestic animals, humans included, are susceptible, developing acute clinical signals (myocarditis and cardiac arrhythmias) or chronic signals (drop on the performance and syncope) of the disease. In Brazil, the disease in dogs shows variable indexes of occurrence. The present paper describes the natural infection by T. cruzi in a canine living in the city of Barra, in the state of Bahia, Brazil, a region classified as high risk of vulnerability for the CD in the northeast of Brazil. Case: A 9-year-old male dog, non-specific breed, was referred to the clinic the Veterinary Clinic for Small Animals, at the Veterinary Medical Teaching Hospital), at the Federal University of the West of Bahia. Its owner reported the presence of bloody secretion in the penile region. During the physical exam it was possible to observe an increase in the volume of the penis base. All of the animals physiological parameters were within normal levels. Blood samples and cytological laminas from the lesioned area were collected and sent to the Laboratory of Veterinary Clinical Pathology in the same institution. The cytological exam showed monomorphic population of great round cells with a round nucleus, condensed chromatin and one to two prominent nucleolus, abundant and slightly basophilic cytoplasm, with multiple stippled vacuoles, thus confirming a Transmissible venereal tumor (TVT) case. With the blood exam one observed a thrombocytopenia, neutrophilia with a deviation on the left and the presence of a trypomastigote form of Trypanosoma sp. in the blood smears...(AU)
Assuntos
Animais , Masculino , Cães , Trypanosoma cruzi/isolamento & purificação , Doença de Chagas/diagnóstico , Doença de Chagas/veterinária , Vetores de Doenças , Brasil , Reação em Cadeia da Polimerase/veterináriaResumo
Esta revisão integrativa tem como objetivo analisar as publicações científicas nos últimos doze anos sobre triatomíneos encontrados no Estado do Ceará. Para tal, nos bancos de dados da Biblioteca Virtual em Saúde (BVS) foi realizada uma busca com associação dos descritores Doença de Chagas, Triatomíneos e Brasil. Após aplicação dos critérios de inclusão, exclusão e da análise dos seus conteúdos, oito artigos realizados no Estado do Ceará foram selecionados para a análise do estudo. Algumas espécies de triatomíneos encontradas no Nordeste são de extrema importância epidemiológica para o homem, pois estão associadas com domicílios humanos. As espécies mais predominantes com maior importância epidemiológica, com distribuição ampla no Ceará e presente no ambiente peridoméstico foram: Triatoma brasiliensis, Triatoma pseudomaculata, Panstrogylus megistus, Panstrogylus lutzi e Rhodnius nasutus. Várias espécies de triatomíneos tem a capacidade de transmitir Trypanosoma cruzi e de se adaptar com o ambiente peridoméstico e doméstico tornando o homem mais suscetível a infecção, sendo assim necessário estratégias de vigilância e controle do vetor.
This integrative review aims to analyze the scientific publications in the last twelve years on triatomines found at Ceará State. For this, a search was performed in the Biblioteca Virtual em Saúde (BVS) databases with association of the descriptors Chagas Disease, Triatomines and Brazil. After applying the inclusion, exclusion criteria and analysis of their content, eight articles were selected for the analysis and discussion. Some species of triatomines found in the Northeast region are of extreme epidemiological importance since they are associated with human households. The most prevalent species with epidemiological importance due to their large distribution in Ceará and presence in the peridomestic environment are: Triatoma brasiliensis, Triatoma pseudomaculata, Panstrogylus megistus, Panstrogylus lutzi and Rhodnius nasutus. Several species of triatomines have the capacity to transmit T. cruzi and the ability to adapt to the peridomestic and domestic environment turning humans more susceptible to infection, thus requiring surveillance and vector control strategies.
Assuntos
Humanos , Doença de Chagas/epidemiologia , Triatominae , Trypanosoma cruzi , Brasil/epidemiologia , Saúde PúblicaResumo
Esta revisão integrativa tem como objetivo analisar as publicações científicas nos últimos doze anos sobre triatomíneos encontrados no Estado do Ceará. Para tal, nos bancos de dados da Biblioteca Virtual em Saúde (BVS) foi realizada uma busca com associação dos descritores Doença de Chagas, Triatomíneos e Brasil. Após aplicação dos critérios de inclusão, exclusão e da análise dos seus conteúdos, oito artigos realizados no Estado do Ceará foram selecionados para a análise do estudo. Algumas espécies de triatomíneos encontradas no Nordeste são de extrema importância epidemiológica para o homem, pois estão associadas com domicílios humanos. As espécies mais predominantes com maior importância epidemiológica, com distribuição ampla no Ceará e presente no ambiente peridoméstico foram: Triatoma brasiliensis, Triatoma pseudomaculata, Panstrogylus megistus, Panstrogylus lutzi e Rhodnius nasutus. Várias espécies de triatomíneos tem a capacidade de transmitir Trypanosoma cruzi e de se adaptar com o ambiente peridoméstico e doméstico tornando o homem mais suscetível a infecção, sendo assim necessário estratégias de vigilância e controle do vetor.(AU)
This integrative review aims to analyze the scientific publications in the last twelve years on triatomines found at Ceará State. For this, a search was performed in the Biblioteca Virtual em Saúde (BVS) databases with association of the descriptors Chagas Disease, Triatomines and Brazil. After applying the inclusion, exclusion criteria and analysis of their content, eight articles were selected for the analysis and discussion. Some species of triatomines found in the Northeast region are of extreme epidemiological importance since they are associated with human households. The most prevalent species with epidemiological importance due to their large distribution in Ceará and presence in the peridomestic environment are: Triatoma brasiliensis, Triatoma pseudomaculata, Panstrogylus megistus, Panstrogylus lutzi and Rhodnius nasutus. Several species of triatomines have the capacity to transmit T. cruzi and the ability to adapt to the peridomestic and domestic environment turning humans more susceptible to infection, thus requiring surveillance and vector control strategies.(AU)
Assuntos
Humanos , Triatominae , Trypanosoma cruzi , Doença de Chagas/epidemiologia , Saúde Pública , Brasil/epidemiologiaResumo
Abstract Xylella fastidiosa is a plant-pathogenic bacterium that lives inside host xylem vessels, where it forms biofilm which is believed to be responsible for disrupting the passage of water and nutrients. Pectobacterium carotovorum is a Gram-negative plant-specific bacterium that causes not only soft rot in various plant hosts, but also blackleg in potato by plant cell wall degradation. Chagas disease, which is caused by Trypanosoma cruzi, has been commonly treated with nifurtimox and benzonidazole, two drugs that cause several side effects. As a result, the use of natural products for treating bacterial and neglected diseases has increased in recent years and plants have become a promising alternative to developing new medicines. Therefore, this study aimed to determine, for the first time, the chemical composition of essential oil from Psidium guajava flowers (PG-EO) and to evaluate its in vitro anti-Xylella fastidiosa, anti-Pectobacterium carotovorum, anti-Trypanosoma cruzi and cytotoxic activities. PG-EO was obtained by hydrodistillation in a Clevenger apparatus while its chemical composition was determined by gas chromatography-flame ionization detection (GC-FID) and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Major compounds identified in PG-EO were -cadinol (37.8%), -caryophyllene (12.2%), nerolidol (9.1%), -selinene (8.8%), -selinene (7.4%) and caryophyllene oxide (7.2%). Results showed that the PG-EO had strong trypanocidal activity against the trypomastigote forms of Trypanosoma cruzi (IC50 = 14.6 g/mL), promising antibacterial activity against X. fastidiosa (MIC = 12.5 g/mL) and P. carotovorum (MIC = 62.5 g/mL), and moderate cytotoxicity against LLCMK2 adherent epithelial cells in the concentration range (CC50 = 250.5 g/mL). In short, the PG-EO can be considered a new source of bioactive compounds for the development of pesticides and trypanocide drugs.
Resumo Xylella fastidiosa é uma bactéria patogênica que vive dentro dos vasos do xilema hospedeiro, onde forma um biofilme responsável por interromper a passagem de água e nutrientes. Pectobacterium carotovorum é uma bactéria Gram-negativa que causa não só podridão macia em várias plantas hospedeiras, mas também canela-preta na batata por degradação da parede celular da planta. A doença de Chagas, causada pelo Trypanosoma cruzi, é comumente tratada com nifurtimox e benzonidazol, duas drogas que causam vários efeitos colaterais. Como resultado, o uso de produtos naturais para o tratamento de doenças bacterianas e negligenciadas aumentou nos últimos anos e as plantas continuam sendo uma alternativa promissora para o desenvolvimento de novos medicamentos. Portanto, este estudo teve como objetivo determinar, pela primeira vez, a composição química do óleo essencial de flores de Psidium guajava (PG-EO) e avaliar suas propriedades anti-Xylella fastidiosa, anti-Pectobacterium carotovorum, anti-Trypanosoma cruzi e citotóxica in vitro. PG-EO foi obtido por hidrodestilação em um aparelho Clevenger, enquanto sua composição química foi determinada por cromatografia em fase gasosa com detecção por ionização por chama (CG-DIC) e por cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massa (CG-EM). Os principais compostos identificados no PG-EO foram -cadinol (37,8%), -cariofileno (12,2%), nerolidol (9,1%), -selineno (8,8%), -selineno (7,4%) e óxido de cariofileno (7,2%). Os resultados mostraram que o PG-EO apresentou forte atividade tripanocida contra as formas tripomastigotas de T. cruzi (CI50 = 14,6 g/mL), promissora atividade antibacteriana contra X. fastidiosa (MIC = 12,5 g/mL) e P. carotovorum (MIC = 62,5 g/mL) e citotoxicidade moderada contra células epiteliais aderentes (LLCMK2) na faixa de concentração (CC50 = 250,5 g/mL). Em suma, o PG-EO pode ser considerado uma nova fonte de compostos bioativos para o desenvolvimento de pesticidas e drogas tripanocidas.