Isolation and molecular identification of Mycobacterium bovis in tissue lesions of cattle slaughtered in slaughterhouses located in the State of Ceará / [Isolamento e identificação molecular de Mycobacterium bovis em lesões teciduais de bovinos abatidos em matadouros-frigoríficos localizados no estado do Ceará]

The objective of this research was to identify Mycobacterium bovis in lesions suggestive of tuberculosis in bovine carcasses in the State of Ceará, by means of bacteriological and molecular diagnostic tests. Between August 2017 and January 2019, the State inspection service (SIE) inspected 59,512 cattle, of which 7.4% (44 / 59,512) presented suggestive lesions. Of these animals, 68 samples were sent, of which 4.5% (31/68) located in the lung, 2.9% (20/68) in lymph nodes, 2.0% (14/68) in the liver, and 0.4% in the carcass (3/68). When performing bacteriological isolation, 15.9% (7/44) of bovines showed colony growth in the samples. The smears of the isolates were submitted to Zielh-Neelsen staining and all confirmed acid-fast bacilli. The polymerase chain reaction identified all isolates 100% (7/7) as M. bovis. The association of diagnostic techniques allowed to identify the presence of the agent in the State and the molecular analysis proved to be a beneficial technique in the monitoring of bovine tuberculosis and can be used as an auxiliary method in the bovine tuberculosis control and eradication program in the State of Ceará.

O objetivo do trabalho foi pesquisar Mycobacterium bovis em lesões sugestivas de tuberculose nas carcaças de bovinos no estado do Ceará, por meio dos testes de diagnóstico bacteriológico e molecular. Entre agosto de 2017 e janeiro de 2019, o Serviço de Inspeção Estadual (SIE) inspecionou 59.512 bovinos; destes, 7,4% (44/59.512) apesentaram lesões sugestivas. Desses animais foram enviadas 68 amostras, das quais 4,5% (31/68) estavam localizadas no pulmão, 2,9% (20/68) nos linfonodos, 2,0% (14/68) no fígado e 0,4% (3/68) na carcaça. Ao realizar o isolamento bacteriológico, 15,9% (7/44) dos bovinos evidenciaram crescimento de colônias nas amostras. Os esfregaços dos isolados foram submetidos à coloração de Zielh-Neelsen e todos eles confirmaram bacilo álcool-ácido resistente. A reação em cadeia da polimerase identificou todos os isolados, 100% (7/7), como M. bovis. A associação das técnicas de diagnóstico permitiu identificar a presença do agente no estado, e a análise molecular demonstrou ser uma técnica benéfica no monitoramento da tuberculose bovina, podendo ser utilizada como um método auxiliar no programa de controle e erradicação da tuberculose bovina no estado do Ceará.

Tuberculose bovina: impactos para a pecuária e riscos para a Saúde Pública / Bovine tuberculosis: impacts for livestock and risks for Public Health / Tuberculosis bovina: impactos para el ganado y riesgos para la Salud Pública

A tuberculose bovina está entre as principais zoonoses detectadas pelo serviço de inspeção durante o exame post-mortem das carcaças bovinas, sendo responsável por gerar consideráveis prejuízos econômicos para a pecuária e riscos para a saúde pública. Tem como agente etiológico o microrganismo Mycobacterium bovis, o qual possui tropismo pela espécie bovina, porém pode acometer outras espécies, incluindo a humana. Estima-se que nos países desenvolvidos, 1 a 2% dos casos de tuberculose em humanos seja causada por M. bovis, enquanto nos subdesenvolvidos, esta estimativa é de 10 a 20%, podendo ser ainda maior. Já, para a pecuária, as perdas são decorrentes da redução de 10 a 25% na eficiência produtiva, no ganho de peso, pela necessidade de sacrifício dos animais positivos e das condenações totais ou parciais das carcaças oriundas de animais infectados. O presente estudo teve por objetivo abordar os impactos da tuberculose bovina para a pecuária e sua importância para a saúde pública.

Bovine tuberculosis is among the main zoonosis detected by the inspection service during the postmortem examination of bovine carcasses, and is responsible for generating considerable economic damage to livestock and risks to public health. Its etiological agent is the microorganism Mycobacterium bovis, which has tropism for the bovine species, but can affect other species, including the human one. It is estimated that in developed countries 1 to 2% of tuberculosis cases in humans are caused by M. bovis, while in underdeveloped countries, this estimate is 10 to 20% and may be even higher. For livestock, losses are due to a 10 to 25% reduction in productive efficiency, weight gain, the need to sacrifice positive animals and total or partial condemnation of carcasses from infected animals. This study aimed to address the impacts of bovine tuberculosis on livestock and its importance to public health.

La tuberculosis bovina se encuentra entre las principales zoonosis detectadas por el servicio de inspección durante el examen post mortem de los cadáveres bovinos, y es responsable de generar considerables daños económicos para el ganado y riesgos para la salud pública. Su agente etiológico es el microorganismo Mycobacterium bovis, que tiene tropismo para las especies bovinas, pero puede afectar a otras especies, incluida la humana. Se estima que en los países desarrollados 1 a 2% de los casos de tuberculosis en humanos son causados por M. bovis, mientras que en los países subdesarrollados, esta estimación es del 10 al 20% y puede ser aún mayor. Para el ganado, las pérdidas se deben a una reducción del 10 al 25% en la eficiencia productiva, el aumento de peso, la necesidad de sacrificar animales positivos y la condena total o parcial de los cadáveres de animales infectados. Este estudio tuvo como objetivo abordar los impactos de la tuberculosis bovina en el ganado y su importancia para la salud pública.

Tuberculose bovina: impactos para a pecuária e riscos para a Saúde Pública / Bovine tuberculosis: impacts for livestock and risks for Public Health / Tuberculosis bovina: impactos para el ganado y riesgos para la Salud Pública

A tuberculose bovina está entre as principais zoonoses detectadas pelo serviço de inspeção durante o exame post-mortem das carcaças bovinas, sendo responsável por gerar consideráveis prejuízos econômicos para a pecuária e riscos para a saúde pública. Tem como agente etiológico o microrganismo Mycobacterium bovis, o qual possui tropismo pela espécie bovina, porém pode acometer outras espécies, incluindo a humana. Estima-se que nos países desenvolvidos, 1 a 2% dos casos de tuberculose em humanos seja causada por M. bovis, enquanto nos subdesenvolvidos, esta estimativa é de 10 a 20%, podendo ser ainda maior. Já, para a pecuária, as perdas são decorrentes da redução de 10 a 25% na eficiência produtiva, no ganho de peso, pela necessidade de sacrifício dos animais positivos e das condenações totais ou parciais das carcaças oriundas de animais infectados. O presente estudo teve por objetivo abordar os impactos da tuberculose bovina para a pecuária e sua importância para a saúde pública.(AU)

Bovine tuberculosis is among the main zoonosis detected by the inspection service during the postmortem examination of bovine carcasses, and is responsible for generating considerable economic damage to livestock and risks to public health. Its etiological agent is the microorganism Mycobacterium bovis, which has tropism for the bovine species, but can affect other species, including the human one. It is estimated that in developed countries 1 to 2% of tuberculosis cases in humans are caused by M. bovis, while in underdeveloped countries, this estimate is 10 to 20% and may be even higher. For livestock, losses are due to a 10 to 25% reduction in productive efficiency, weight gain, the need to sacrifice positive animals and total or partial condemnation of carcasses from infected animals. This study aimed to address the impacts of bovine tuberculosis on livestock and its importance to public health.(AU)

La tuberculosis bovina se encuentra entre las principales zoonosis detectadas por el servicio de inspección durante el examen post mortem de los cadáveres bovinos, y es responsable de generar considerables daños económicos para el ganado y riesgos para la salud pública. Su agente etiológico es el microorganismo Mycobacterium bovis, que tiene tropismo para las especies bovinas, pero puede afectar a otras especies, incluida la humana. Se estima que en los países desarrollados 1 a 2% de los casos de tuberculosis en humanos son causados por M. bovis, mientras que en los países subdesarrollados, esta estimación es del 10 al 20% y puede ser aún mayor. Para el ganado, las pérdidas se deben a una reducción del 10 al 25% en la eficiencia productiva, el aumento de peso, la necesidad de sacrificar animales positivos y la condena total o parcial de los cadáveres de animales infectados. Este estudio tuvo como objetivo abordar los impactos de la tuberculosis bovina en el ganado y su importancia para la salud pública.(AU)

Isolation and identification of Mycobacterium bovis in cattle slaughtered from an abattoir in Garanhuns, Pernambuco / Isolamento e identificação de Mycobacterium bovis em bovinos abatidos em matadouro público de Garanhuns, Pernambunco

Tuberculosis is a chronic infectious disease caused by the Mycobacterium tuberculosis complex (CMT), members including M. bovis. The sanitary inspection in slaughterhouses has a great importance on public health for the removal of contaminated meat with pathological lesions. Cattle slaughtered in the abattoir of Garanhuns were subjected to macroscopic, histological, bacteriological, and molecular analyses. Lung inspection revealed gross lesions suggestive of tuberculosis. The characterization of tuberculous granulomas was performed by histopathology and hematoxylin and eosin (HE) staining. The identification of acid-fast bacilli (AFB) was performed on smears with fresh material and histological staining using Ziehl-Neelsen stain. Bacteriological diagnosis was carried out using Stonebrink and Lowenstein-Jensen media, and polymerase chain reaction (PCR) was performed from the DNA extracted from colonies for the identification of Mycobacterium spp. We found that 1% (32/3,.180) of the collected lungs showed lesions suggestive of tuberculosis. Histopathological analysis revealed that 65.62% (21/32) samples had granulomatous pneumonia. AFB was detected in 46.88% (15/32) smears and 4.16% (1/24) histological sections, as analyzed by Ziehl-Neelsen staining. Moreover, 68.75% (22/32) samples showed bacterial growth and molecular identification 90% (18/20) of the samples were positive...

A tuberculose é uma doença infecciosa crônica causada por membros do complexo Mycobacterium tuberculosis (CMT), incluindo M. bovis. A inspeção sanitária em matadouros frigoríficos possui grande importância para a saúde pública pela remoção de carne contaminada com lesões patológicas. Os bovinos abatidos no matadouro de Garanhuns-PE foram submetidos a análises macroscópicas, histológicas, bacteriológicas e moleculares. A inspeção pulmonar revelou lesões sugestivas de tuberculose.A caracterização de granulomas tuberculoides foi realizada através da histopatologia e coloração de hematoxilina e eosina (HE). A identificação de bacilo álcool - ácido resistente (BAAR) foi realizado em esfregaços com material fresco e em cortes histológicos sob a coloração de Zihel-Neelsen. O diagnóstico bacteriológico foi realizado em meio de cultivo Stonebrink e Lowenstein-Jensen e a reação em cadeia da polimerase (PCR) sucedeu a partir de DNA extraído de colônias para identificação do Mycobacterium sp... Verificou-se que1% (32/3.180) dos pulmões coletados apresentaram lesões sugestivas de tuberculose. Na análise histopatológica 65.62% (21/32) amostras tinham pneumonia granulomatosa. BAAR foram detectados em 46,88% (15/32) esfregaços e 4,16% (1/24) em corte histológico conforme analisado pela coloração de Ziehl-Neelsen. Além disso, em 68,75% (22/32) das amostras houve crescimento bacteriano e na...

Isolation and identification of Mycobacterium bovis in cattle slaughtered from an abattoir in Garanhuns, Pernambuco / Isolamento e identificação de Mycobacterium bovis em bovinos abatidos em matadouro público de Garanhuns, Pernambunco

Tuberculosis is a chronic infectious disease caused by the Mycobacterium tuberculosis complex (CMT), members including M. bovis. The sanitary inspection in slaughterhouses has a great importance on public health for the removal of contaminated meat with pathological lesions. Cattle slaughtered in the abattoir of Garanhuns were subjected to macroscopic, histological, bacteriological, and molecular analyses. Lung inspection revealed gross lesions suggestive of tuberculosis. The characterization of tuberculous granulomas was performed by histopathology and hematoxylin and eosin (HE) staining. The identification of acid-fast bacilli (AFB) was performed on smears with fresh material and histological staining using Ziehl-Neelsen stain. Bacteriological diagnosis was carried out using Stonebrink and Lowenstein-Jensen media, and polymerase chain reaction (PCR) was performed from the DNA extracted from colonies for the identification of Mycobacterium spp. We found that 1% (32/3,.180) of the collected lungs showed lesions suggestive of tuberculosis. Histopathological analysis revealed that 65.62% (21/32) samples had granulomatous pneumonia. AFB was detected in 46.88% (15/32) smears and 4.16% (1/24) histological sections, as analyzed by Ziehl-Neelsen staining. Moreover, 68.75% (22/32) samples showed bacterial growth and molecular identification 90% (18/20) of the samples were positive...(AU)

A tuberculose é uma doença infecciosa crônica causada por membros do complexo Mycobacterium tuberculosis (CMT), incluindo M. bovis. A inspeção sanitária em matadouros frigoríficos possui grande importância para a saúde pública pela remoção de carne contaminada com lesões patológicas. Os bovinos abatidos no matadouro de Garanhuns-PE foram submetidos a análises macroscópicas, histológicas, bacteriológicas e moleculares. A inspeção pulmonar revelou lesões sugestivas de tuberculose.A caracterização de granulomas tuberculoides foi realizada através da histopatologia e coloração de hematoxilina e eosina (HE). A identificação de bacilo álcool - ácido resistente (BAAR) foi realizado em esfregaços com material fresco e em cortes histológicos sob a coloração de Zihel-Neelsen. O diagnóstico bacteriológico foi realizado em meio de cultivo Stonebrink e Lowenstein-Jensen e a reação em cadeia da polimerase (PCR) sucedeu a partir de DNA extraído de colônias para identificação do Mycobacterium sp... Verificou-se que1% (32/3.180) dos pulmões coletados apresentaram lesões sugestivas de tuberculose. Na análise histopatológica 65.62% (21/32) amostras tinham pneumonia granulomatosa. BAAR foram detectados em 46,88% (15/32) esfregaços e 4,16% (1/24) em corte histológico conforme analisado pela coloração de Ziehl-Neelsen. Além disso, em 68,75% (22/32) das amostras houve crescimento bacteriano e na...(AU)

Diagnóstico histopatológico e molecular de lesões sugestivas de tuberculose em búfalos abatidos nos municípios de Macapá e Santana, estado do Amapá / Histopathological and molecular diagnosis of lesions suggestive of tuberculosis in buffaloes slaughtered in the municipalities of Macapá and Santana, Amapá state, Brazil

Este estudo teve como objetivo avaliar lesões sugestivas de tuberculose em búfalos abatidos em matadouros oficiais no Estado do Amapá, Brasil, a fim de confirmar o diagnóstico de tuberculose por avaliação histopatológica e molecular. As amostras de tecido de 20 búfalos que apresentavam lesões sugestivas de tuberculose, dos municípios de Macapá e Santana, foram coletadas. As amostras foram divididas em duas partes: uma delas foi fixada em formalina a 10% tamponada e rotineiramente processadas para avaliação histopatológica, coradas pela hematoxilina-eosina e Ziehl-Neelsen; e o outra parte foi usado para Nested-PCR para o complexo de Mycobacterium tuberculosis (CMT) e para Mycobacterium bovis. As lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose foram observadas nos pulmões, linfonodos brônquicos, mediastínicos, retrofaríngeos e submandibulares, fígado e pleura. Histopatologicamente, todas as amostras apresentaram lesões sugestivas de tuberculose, caracterizadas por granulomas compostos por grande quantidade de infiltração de células epitelióides, células de Langerhans e linfócitos, margeando um centro necrótico, calcificado ou não, rodeado por cápsula de tecido conjuntivo fibroso. Bacilos álcool-ácido resistentes foram observados nos tecidos de 3/20 (15%) búfalos. Com relação à detecção molecular, 13/20 (65%) bubalinos apresentaram amostras de tecidos positivos: 6 foram positivos nas Nested-PCRs para CMT e M. bovis, um foi positivo apenas na Nested-PCR para CMT, e 6 foram positivos apenas na Nested-PCR para M. bovis. Os resultados deste estudo demonstram a importância de diagnosticar a tuberculose em búfalos na região e apontam para a necessidade de implementar medidas eficazes para controlar e erradicar a enfermidade.(AU)

This study aimed to evaluate suggestive lesions of tuberculosis in buffaloes slaughtered in official slaughterhouses in the State of Amapá, Brazil, in order to confirm the diagnosis of tuberculosis by histopathological and molecular evaluation. Tissue samples of 20 buffaloes showing lesions suggestive of tuberculosis, from the municipalities of Macapá and Santana, were collected. The samples were divided into two parts: one was fixed in 10% buffered formalin and routinely processed for histopathological evaluation, stained by hematoxylin-eosin and Ziehl-Neelsen; and the other was used for Nested-PCRs for Mycobacterium tuberculosis complex (MTC) and for Mycobacterium bovis. Gross lesions suggestive of tuberculosis were observed in the lungs, bronchial, mediastinic, retropharyngeal and submandibular lymph nodes, liver and pleura. Histopathologically, all samples showed lesions suggestive of tuberculosis, characterized by granulomas composed of large amount of infiltration of epithelioid cells, Langhans cells and lymphocytes, bordering a necrotic core, calcified or not, surrounded by a fibrous connective tissue capsule. Acid-fast bacilli were observed in the tissues of 3/20 (15%) buffaloes. With regards to the molecular detection, 13/20 (65%) buffaloes showed positive tissue samples: 6 were positive both in the MTC and M. bovis Nested-PCRs, one was positive only in the MTC Nested-PCR, and 6 were positive only in the M. bovis Nested-PCR. The results of this study demonstrate the importance of diagnosing TB in buffaloes in the region and point to the requirement to implement effective measures to control and eradicate the disease.(AU)

Diagnóstico histopatológico e molecular de lesões sugestivas de tuberculose em búfalos abatidos nos municípios de Macapá e Santana, estado do Amapá / Histopathological and molecular diagnosis of lesions suggestive of tuberculosis in buffaloes slaughtered in the municipalities of Macapá and Santana, Amapá state, Brazil

Este estudo teve como objetivo avaliar lesões sugestivas de tuberculose em búfalos abatidos em matadouros oficiais no Estado do Amapá, Brasil, a fim de confirmar o diagnóstico de tuberculose por avaliação histopatológica e molecular. As amostras de tecido de 20 búfalos que apresentavam lesões sugestivas de tuberculose, dos municípios de Macapá e Santana, foram coletadas. As amostras foram divididas em duas partes: uma delas foi fixada em formalina a 10% tamponada e rotineiramente processadas para avaliação histopatológica, coradas pela hematoxilina-eosina e Ziehl-Neelsen; e o outra parte foi usado para Nested-PCR para o complexo de Mycobacterium tuberculosis (CMT) e para Mycobacterium bovis. As lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose foram observadas nos pulmões, linfonodos brônquicos, mediastínicos, retrofaríngeos e submandibulares, fígado e pleura. Histopatologicamente, todas as amostras apresentaram lesões sugestivas de tuberculose, caracterizadas por granulomas compostos por grande quantidade de infiltração de células epitelióides, células de Langerhans e linfócitos, margeando um centro necrótico, calcificado ou não, rodeado por cápsula de tecido conjuntivo fibroso. Bacilos álcool-ácido resistentes foram observados nos tecidos de 3/20 (15%) búfalos. Com relação à detecção molecular, 13/20 (65%) bubalinos apresentaram amostras de tecidos positivos: 6 foram positivos nas Nested-PCRs para CMT e M. bovis, um foi positivo apenas na Nested-PCR para CMT, e 6 foram positivos apenas na Nested-PCR para M. bovis. Os resultados deste estudo demonstram a importância de diagnosticar a tuberculose em búfalos na região e apontam para a necessidade de implementar medidas eficazes para controlar e erradicar a enfermidade.(AU)

This study aimed to evaluate suggestive lesions of tuberculosis in buffaloes slaughtered in official slaughterhouses in the State of Amapá, Brazil, in order to confirm the diagnosis of tuberculosis by histopathological and molecular evaluation. Tissue samples of 20 buffaloes showing lesions suggestive of tuberculosis, from the municipalities of Macapá and Santana, were collected. The samples were divided into two parts: one was fixed in 10% buffered formalin and routinely processed for histopathological evaluation, stained by hematoxylin-eosin and Ziehl-Neelsen; and the other was used for Nested-PCRs for Mycobacterium tuberculosis complex (MTC) and for Mycobacterium bovis. Gross lesions suggestive of tuberculosis were observed in the lungs, bronchial, mediastinic, retropharyngeal and submandibular lymph nodes, liver and pleura. Histopathologically, all samples showed lesions suggestive of tuberculosis, characterized by granulomas composed of large amount of infiltration of epithelioid cells, Langhans cells and lymphocytes, bordering a necrotic core, calcified or not, surrounded by a fibrous connective tissue capsule. Acid-fast bacilli were observed in the tissues of 3/20 (15%) buffaloes. With regards to the molecular detection, 13/20 (65%) buffaloes showed positive tissue samples: 6 were positive both in the MTC and M. bovis Nested-PCRs, one was positive only in the MTC Nested-PCR, and 6 were positive only in the M. bovis Nested-PCR. The results of this study demonstrate the importance of diagnosing TB in buffaloes in the region and point to the requirement to implement effective measures to control and eradicate the disease.(AU)

Prevalence and risk factors for bovine tuberculosis in the State of Bahia, Brazil / Prevalência e fatores de risco para tuberculose bovina na Bahia, Brasil

An epidemiological study was carried out in order to characterize the bovine tuberculosis situation and to support the planning and implementation of the National Program for the Control and Eradication of Bovine Tuberculosis in the State of Bahia, owing to the importance of the disease in causing economic burdens and its impact on public health. The State was divided into four regions. In each region, properties were randomly chosen and, a pre-established number of animals was also randomly selected; these animals then subjected to the intradermal comparative cervical tuberculin diagnostic test. Animals with inconclusive test results were retested with the same diagnostic procedure within a minimum interval of 60 days. Within each sampled property, a questionnaire was administered to verify possible risk factors for the disease. In the State, the prevalence of infected herds was 1.6% [1.02.6] and that of infected animals 0,21% [0,07; 0,60]. In the regions, the prevalence of infected herds and infected animals were, respectively, 2,0% [1,0; 4,2%] and 2,0% [1,0; 4,2%] in region 1; , 2,9% [1,5; 5,5] and 0,66% [0,20; 2,16] in region 2; 0,3% [0,04; 2,1] and 0,02% [0,002; 0,12] in region 3; and 0,6% [0,2; 2,5] and 0,05% [0,01; 0,20] in region 4. The risk factors associated with tuberculosis infection were dairy farm (odds ratio [OR] = 9.72) or mixed farm (OR = 6.66), and size of herd ≥ 18 cows ≥ 24 months of age (OR = 8.44). In conclusion, it is recommended that the State of Bahia implement a surveillance system for the detection of herds with bovine tuberculosis to certifying them in free herds, with special attention to dairy properties, and develop a solid program of health education so that producers test animals for bovine tuberculosis before introducing them into their herds.(AU)

Em virtude da importância da tuberculose bovina como enfermidade causadora de prejuízos econômicos, o impacto em saúde pública e visando apoiar o planejamento e execução do Programa Nacional de Controle e Erradicação da Tuberculose Bovina no Estado da Bahia, foi realizado estudo epidemiológico para caracterizar a situação da enfermidade no estado. O Estado foi estratificado em quatro regiões. Em cada região, propriedades foram sorteadas aleatoriamente e, dentro dessas, escolheu-se de forma também aleatória um número pré-estabelecido de animais, os quais foram submetidos ao teste tuberculínico Cervical Comparativo. Os animais que resultaram inconclusivos foram retestados com o mesmo procedimento diagnóstico em intervalo mínimo de 60 dias. Em cada propriedade amostrada aplicou-se um questionário para se verificar possíveis fatores de risco para a doença. No Estado, a prevalência de focos foi de 1,6% [1,0; 2,6%] e a de animais 0,21% [0,07; 0,60]. Nas regiões, as prevalências de focos e de animais foram, respectivamente de 2,0% [1,0; 4,2%] e 0,08% [0,035; 0,17] na região 1, 2,9% [1,5; 5,5] e 0,66% [0,20; 2,16] na região 2, 0,3% [0,04; 2,1] e 0,02% [0,002; 0,12] na região 3 e 0,6% [0,2; 2,5] e 0,05% [0,01; 0,20] na região 4. Os fatores de risco associados a condição de foco foram: ser propriedade leiteira (OR= 9,72), ser propriedade mista (OR= 6,66) e tamanho do rebanho ≥ 18 fêmeas ≥ 24 meses (OR= 8,44). Concluindo, recomenda-se que o Estado da Bahia implemente um sistema de vigilância para detecção e saneamento dos focos de tuberculose bovina, com especial atenção para as propriedades produtoras de leite, e que desenvolva uma sólida ação de educação sanitária para que seus produtores passem a testar os animais para tuberculose bovina antes de introduzi-los em seus plantéis.(AU)

Prevalence and risk factors for bovine tuberculosis in the State of Bahia, Brazil / Prevalência e fatores de risco para tuberculose bovina na Bahia, Brasil

An epidemiological study was carried out in order to characterize the bovine tuberculosis situation and to support the planning and implementation of the National Program for the Control and Eradication of Bovine Tuberculosis in the State of Bahia, owing to the importance of the disease in causing economic burdens and its impact on public health. The State was divided into four regions. In each region, properties were randomly chosen and, a pre-established number of animals was also randomly selected; these animals then subjected to the intradermal comparative cervical tuberculin diagnostic test. Animals with inconclusive test results were retested with the same diagnostic procedure within a minimum interval of 60 days. Within each sampled property, a questionnaire was administered to verify possible risk factors for the disease. In the State, the prevalence of infected herds was 1.6% [1.02.6] and that of infected animals 0,21% [0,07; 0,60]. In the regions, the prevalence of infected herds and infected animals were, respectively, 2,0% [1,0; 4,2%] and 2,0% [1,0; 4,2%] in region 1; , 2,9% [1,5; 5,5] and 0,66% [0,20; 2,16] in region 2; 0,3% [0,04; 2,1] and 0,02% [0,002; 0,12] in region 3; and 0,6% [0,2; 2,5] and 0,05% [0,01; 0,20] in region 4. The risk factors associated with tuberculosis infection were dairy farm (odds ratio [OR] = 9.72) or mixed farm (OR = 6.66), and size of herd ≥ 18 cows ≥ 24 months of age (OR = 8.44). In conclusion, it is recommended that the State of Bahia implement a surveillance system for the detection of herds with bovine tuberculosis to certifying them in free herds, with special attention to dairy properties, and develop a solid program of health education so that producers test animals for bovine tuberculosis before introducing them into their herds.

Em virtude da importância da tuberculose bovina como enfermidade causadora de prejuízos econômicos, o impacto em saúde pública e visando apoiar o planejamento e execução do Programa Nacional de Controle e Erradicação da Tuberculose Bovina no Estado da Bahia, foi realizado estudo epidemiológico para caracterizar a situação da enfermidade no estado. O Estado foi estratificado em quatro regiões. Em cada região, propriedades foram sorteadas aleatoriamente e, dentro dessas, escolheu-se de forma também aleatória um número pré-estabelecido de animais, os quais foram submetidos ao teste tuberculínico Cervical Comparativo. Os animais que resultaram inconclusivos foram retestados com o mesmo procedimento diagnóstico em intervalo mínimo de 60 dias. Em cada propriedade amostrada aplicou-se um questionário para se verificar possíveis fatores de risco para a doença. No Estado, a prevalência de focos foi de 1,6% [1,0; 2,6%] e a de animais 0,21% [0,07; 0,60]. Nas regiões, as prevalências de focos e de animais foram, respectivamente de 2,0% [1,0; 4,2%] e 0,08% [0,035; 0,17] na região 1, 2,9% [1,5; 5,5] e 0,66% [0,20; 2,16] na região 2, 0,3% [0,04; 2,1] e 0,02% [0,002; 0,12] na região 3 e 0,6% [0,2; 2,5] e 0,05% [0,01; 0,20] na região 4. Os fatores de risco associados a condição de foco foram: ser propriedade leiteira (OR= 9,72), ser propriedade mista (OR= 6,66) e tamanho do rebanho ≥ 18 fêmeas ≥ 24 meses (OR= 8,44). Concluindo, recomenda-se que o Estado da Bahia implemente um sistema de vigilância para detecção e saneamento dos focos de tuberculose bovina, com especial atenção para as propriedades produtoras de leite, e que desenvolva uma sólida ação de educação sanitária para que seus produtores passem a testar os animais para tuberculose bovina antes de introduzi-los em seus plantéis.

Epidemiological status of bovine tuberculosis in the State of Minas Gerais, Brazil, 2013 / Situação epidemiológica da tuberculose bovina no Estado de Minas Gerais, 2013

A cross sectional study was performed to assess the epidemiological status of bovine tuberculosis in the state of Minas Gerais, Brazil, in 2013. The state was divided into seven regions, and a preset number of herds was randomly sampled in each region. From each farm, female cattle aged 24 months or older were randomly sampled and subjected to the comparative cervical tuberculin test (CCTT). Animals with inconclusive test results were re-tested with the same diagnostic procedure after a minimum interval of 60 days. A total of 31?832 animals were tested from 2?182 farms. An epidemiological questionnaire was administered in the farms to identify risk factors associated with bovine tuberculosis. Prevalence in the state was estimated at 4.25% (95% CI: 3.36% 5.15%) for herds and at 0.56% (95% CI: 0.46% 0.66%) for animals. Data on herd prevalence for bovine tuberculosis for each stratum showed the highest prevalences at region Sul e Sudoeste (stratum 5) and region Central (stratum 3) which were significantly different from the lowest prevalences found at regions Noroeste, Norte e Nordeste (stratum 1) and region Leste (stratum 2). The highest animal prevalences observed for the region Sul e Sudoeste (stratum 5), region Zona da Mata (stratum 4) and region Central (stratum 3) were significantly different from the lowest ones at region Triângulo Mineiro (stratum 7), region Noroeste, Norte, e Nordeste (stratum 1) and region Leste (stratum 2). The presence of bovine tuberculosis was associated with animal purchase from cattle traders (OR = 2.59 [95% CI: 1.28 – 5.20]), higher yield intensive dairy (OR = 7.55 [95% CI: 1.89% – 30.09%]) and non-intensive dairy production (OR = 3.58 [95% CI: 1.06% – 12.04%]), as well as with herds with 30 or more cows (OR = 1.97 [95% CI: 1.02 – 3.80]). Non-specific reactors to the CCTT were found in 95.07% (95% CI: 94.05% – 96.09%) of the herds.

Foi realizado um estudo transversal para avaliar a situação epidemiológica da tuberculose bovina no estado de Minas Gerais em 2013. O Estado foi dividido em sete regiões e um número predefinido de fazendas foi amostrado aleatoriamente em cada região. Dentro de cada propriedade, fêmeas com idade igual ou superior a 24 meses foram escolhidas aleatoriamente e submetidas ao Teste Tuberculínico Cervical Comparativo (CCTT). Os animais com resultados inconclusivos foram retestados com o mesmo procedimento diagnóstico após um intervalo mínimo de 60 dias. Um total de 31832 animais foram testados provenientes de 2182 propriedades. Um questionário epidemiológico foi aplicado em cada fazenda para identificar fatores de risco associados à tuberculose bovina. A prevalência de focos no estado foi de 4,25% (IC 95%: 3,36 5,15) e 0,56% (IC 95%: 0,46 - 0,66) de animais. Em relação a prevalência de rebanho com tuberculose bovina para cada estrato, as maiores prevalências foram observadas nas regiões Sul e Sudoeste (estrato 5) e Central (estrato 3), que foram significativamente diferentes das menores prevalências encontradas nas regiões Noroeste, Norte e Nordeste (estrato 1) e Leste (estrato 2). As maiores prevalências de animais observadas nas regiões Sul e Sudoeste (estrato 5), Zona da Mata (estrato 4) e Central (estrato 3) foram significativamente diferentes das menores encontradas nas regiões do Triângulo Mineiro (estrato 7), Noroeste, Norte, e Nordeste (estrato 1) e Leste (estrato 2). A presença de tuberculose bovina foi associada com a compra de animais de comerciantes de gado (OR = 2,59 [IC 95%: 1,28-5,20]), propriedades leiteiras tecnificadas (OR = 7,55 [IC 95%: 1,89% – 30,09%]) e propriedades leiteiras não-tecnificadas (OR [IC 95%: 1,06% – 12,04%] = 3,58), bem como com rebanhos com 30 ou mais fêmeas (OR = 1,97 [95% IC: 1,02-3,80]). Reações inespecíficas ao CCTT foram observadas em cerca de 95,07% (IC 95%: 94,05 – 96,09%) dos rebanhos.

Epidemiological status of bovine tuberculosis in the State of Minas Gerais, Brazil, 2013 / Situação epidemiológica da tuberculose bovina no Estado de Minas Gerais, 2013

A cross sectional study was performed to assess the epidemiological status of bovine tuberculosis in the state of Minas Gerais, Brazil, in 2013. The state was divided into seven regions, and a preset number of herds was randomly sampled in each region. From each farm, female cattle aged 24 months or older were randomly sampled and subjected to the comparative cervical tuberculin test (CCTT). Animals with inconclusive test results were re-tested with the same diagnostic procedure after a minimum interval of 60 days. A total of 31?832 animals were tested from 2?182 farms. An epidemiological questionnaire was administered in the farms to identify risk factors associated with bovine tuberculosis. Prevalence in the state was estimated at 4.25% (95% CI: 3.36% 5.15%) for herds and at 0.56% (95% CI: 0.46% 0.66%) for animals. Data on herd prevalence for bovine tuberculosis for each stratum showed the highest prevalences at region Sul e Sudoeste (stratum 5) and region Central (stratum 3) which were significantly different from the lowest prevalences found at regions Noroeste, Norte e Nordeste (stratum 1) and region Leste (stratum 2). The highest animal prevalences observed for the region Sul e Sudoeste (stratum 5), region Zona da Mata (stratum 4) and region Central (stratum 3) were significantly different from the lowest ones at region Triângulo Mineiro (stratum 7), region Noroeste, Norte, e Nordeste (stratum 1) and region Leste (stratum 2). The presence of bovine tuberculosis was associated with animal purchase from cattle traders (OR = 2.59 [95% CI: 1.28 5.20]), higher yield intensive dairy (OR = 7.55 [95% CI: 1.89% 30.09%]) and non-intensive dairy production (OR = 3.58 [95% CI: 1.06% 12.04%]), as well as with herds with 30 or more cows (OR = 1.97 [95% CI: 1.02 3.80]). Non-specific reactors to the CCTT were found in 95.07% (95% CI: 94.05% 96.09%) of the herds.(AU)

Foi realizado um estudo transversal para avaliar a situação epidemiológica da tuberculose bovina no estado de Minas Gerais em 2013. O Estado foi dividido em sete regiões e um número predefinido de fazendas foi amostrado aleatoriamente em cada região. Dentro de cada propriedade, fêmeas com idade igual ou superior a 24 meses foram escolhidas aleatoriamente e submetidas ao Teste Tuberculínico Cervical Comparativo (CCTT). Os animais com resultados inconclusivos foram retestados com o mesmo procedimento diagnóstico após um intervalo mínimo de 60 dias. Um total de 31832 animais foram testados provenientes de 2182 propriedades. Um questionário epidemiológico foi aplicado em cada fazenda para identificar fatores de risco associados à tuberculose bovina. A prevalência de focos no estado foi de 4,25% (IC 95%: 3,36 5,15) e 0,56% (IC 95%: 0,46 - 0,66) de animais. Em relação a prevalência de rebanho com tuberculose bovina para cada estrato, as maiores prevalências foram observadas nas regiões Sul e Sudoeste (estrato 5) e Central (estrato 3), que foram significativamente diferentes das menores prevalências encontradas nas regiões Noroeste, Norte e Nordeste (estrato 1) e Leste (estrato 2). As maiores prevalências de animais observadas nas regiões Sul e Sudoeste (estrato 5), Zona da Mata (estrato 4) e Central (estrato 3) foram significativamente diferentes das menores encontradas nas regiões do Triângulo Mineiro (estrato 7), Noroeste, Norte, e Nordeste (estrato 1) e Leste (estrato 2). A presença de tuberculose bovina foi associada com a compra de animais de comerciantes de gado (OR = 2,59 [IC 95%: 1,28-5,20]), propriedades leiteiras tecnificadas (OR = 7,55 [IC 95%: 1,89% 30,09%]) e propriedades leiteiras não-tecnificadas (OR [IC 95%: 1,06% 12,04%] = 3,58), bem como com rebanhos com 30 ou mais fêmeas (OR = 1,97 [95% IC: 1,02-3,80]). Reações inespecíficas ao CCTT foram observadas em cerca de 95,07% (IC 95%: 94,05 96,09%) dos rebanhos.(AU)

Epidemiological situation of bovine tuberculosis in the State of Mato Grosso, Brazil / Situação epidemiológica da tuberculose bovina no Estado de Mato Grosso, Brasil

In 2009, the epidemiological situation of bovine tuberculosis was studied in the state of Mato Grosso, which is a traditional beef exporter. The state was divided into four regions. In each region, properties were selected randomly. A predetermined random number of animals were chosen from these properties, and comparative cervical tuberculin tests were conducted. In total, 28,878 animals from 1,133 properties underwent examination. The animals with inconclusive results were reexamined with the same diagnostic procedure in a minimal interval of 60 days. In each sampled property, a questionnaire-based survey was conducted to identify possible risk factors for the disease. In the state, the prevalence of infected herds and animals was 1.3% [0.7; 2.4] and 0.12% [0.03; 0.44], respectively. Further, the prevalence of infected herds and animals were 0.0% [0.0; 2.0] and 0.0% [0.0; 0.08] in the Pantanal region, 1.3% [0.5; 3.1] and 0.04% [0.01; 0.17] in the dairy region, 0.7% [0.2; 2.7] and 0.01% [0.003; 0.04] in the fattening region, and 1.7% [0.7; 4.1] and 0.24% [0.06; 0.90] in the breeding region, respectively. It was observed that the condition of the herds infected with bovine tuberculosis was associated with milk production, European or mestizo breeds, degree of sophistication in the production mode, and herd size of up to 486 animals. Therefore, the implementation of a monitoring system for detection and elimination of the residual infected herds along with incorporation of risk-based monitoring elements is the best strategy for the state.(AU)

Em 2009, a situação epidemiológica da tuberculose bovina foi estudada no Estado de Mato Grosso, tradicional exportador de carne. O Estado foi estratificado em quatro regiões. Em cada região, propriedades foram sorteadas aleatoriamente e, dentro dessas, escolheu-se de forma também aleatória um número pré-estabelecido de animais, os quais foram submetidos ao teste tuberculínico Cervical Comparativo. No total, foram testados 28.878 animais, provenientes de 1.133 propriedades. Os animais que resultaram inconclusivos foram retestados com o mesmo procedimento diagnóstico em intervalo mínimo de 60 dias. Em cada propriedade amostrada aplicou-se um questionário para se verificar possíveis fatores de risco para a doença. No Estado, a prevalência de focos foi de 1,3% [0,7; 2,4] e a de animais 0,12% [0,03; 0,44]. Nas regiões, as prevalências de focos e de animais foram, respectivamente, de 0,0% [0,0; 2,0] e 0,0% [0,0; 0,08] na região pantanal, 1,3% [0,5; 3,1] e 0,04% [0,01; 0,17] na região leite, 0,7% [0,2; 2,7] e 0,01% [0,003; 0,04] na região engorda e 1,7% [0,7; 4,1] e 0,24% [0,06; 0,90] na região cria. Verificou-se que a condição do foco de tuberculose bovina está associada à produção de leite, com raças europeias ou mestiças, com algum grau de sofisticação no modo de produção e em rebanhos com até 486 animais. Assim, a implementação de um sistema de vigilância para detecção e saneamento dos focos residuais constitui a melhor estratégia para o Estado.(AU)

Epidemiological situation of bovine tuberculosis in the State of Mato Grosso, Brazil / Situação epidemiológica da tuberculose bovina no Estado de Mato Grosso, Brasil

In 2009, the epidemiological situation of bovine tuberculosis was studied in the state of Mato Grosso, which is a traditional beef exporter. The state was divided into four regions. In each region, properties were selected randomly. A predetermined random number of animals were chosen from these properties, and comparative cervical tuberculin tests were conducted. In total, 28,878 animals from 1,133 properties underwent examination. The animals with inconclusive results were reexamined with the same diagnostic procedure in a minimal interval of 60 days. In each sampled property, a questionnaire-based survey was conducted to identify possible risk factors for the disease. In the state, the prevalence of infected herds and animals was 1.3% [0.7; 2.4] and 0.12% [0.03; 0.44], respectively. Further, the prevalence of infected herds and animals were 0.0% [0.0; 2.0] and 0.0% [0.0; 0.08] in the Pantanal region, 1.3% [0.5; 3.1] and 0.04% [0.01; 0.17] in the dairy region, 0.7% [0.2; 2.7] and 0.01% [0.003; 0.04] in the fattening region, and 1.7% [0.7; 4.1] and 0.24% [0.06; 0.90] in the breeding region, respectively. It was observed that the condition of the herds infected with bovine tuberculosis was associated with milk production, European or mestizo breeds, degree of sophistication in the production mode, and herd size of up to 486 animals. Therefore, the implementation of a monitoring system for detection and elimination of the residual infected herds along with incorporation of risk-based monitoring elements is the best strategy for the state.

Em 2009, a situação epidemiológica da tuberculose bovina foi estudada no Estado de Mato Grosso, tradicional exportador de carne. O Estado foi estratificado em quatro regiões. Em cada região, propriedades foram sorteadas aleatoriamente e, dentro dessas, escolheu-se de forma também aleatória um número pré-estabelecido de animais, os quais foram submetidos ao teste tuberculínico Cervical Comparativo. No total, foram testados 28.878 animais, provenientes de 1.133 propriedades. Os animais que resultaram inconclusivos foram retestados com o mesmo procedimento diagnóstico em intervalo mínimo de 60 dias. Em cada propriedade amostrada aplicou-se um questionário para se verificar possíveis fatores de risco para a doença. No Estado, a prevalência de focos foi de 1,3% [0,7; 2,4] e a de animais 0,12% [0,03; 0,44]. Nas regiões, as prevalências de focos e de animais foram, respectivamente, de 0,0% [0,0; 2,0] e 0,0% [0,0; 0,08] na região pantanal, 1,3% [0,5; 3,1] e 0,04% [0,01; 0,17] na região leite, 0,7% [0,2; 2,7] e 0,01% [0,003; 0,04] na região engorda e 1,7% [0,7; 4,1] e 0,24% [0,06; 0,90] na região cria. Verificou-se que a condição do foco de tuberculose bovina está associada à produção de leite, com raças europeias ou mestiças, com algum grau de sofisticação no modo de produção e em rebanhos com até 486 animais. Assim, a implementação de um sistema de vigilância para detecção e saneamento dos focos residuais constitui a melhor estratégia para o Estado.

GENOMIC STUDIES OF Babesia bigemina AND Anaplasma marginale INFECTION LEVELS IN CATTLE

Carrapatos são responsáveis pela propagação de patógenos como a Babesia bigemina e Anaplasma marginale que causam as doenças babesiose e anaplamose bovina, respectivamente. A presença constante do carrapato nos rebanhos nacionais acarreta perdas econômicas e dificuldade na inclusão de raças taurinas, por serem animais mais susceptíveis a doenças parasitárias. Assim, o objetivo desse estudo foi estimar componentes de variância, acurácia de predição dos valores genéticos genômicos (GEBV), e realizar estudo de associação genômica ampla (GWAS) para os níveis de infecção da B. bigemina (BigIL) e A. marginale (AmIL). No capítulo dois foram feitas as análises para BigIL utilizando 1.882 animais (1.716 Braford e 166 Hereford) com genótipos imputados para painel de ~777.000 marcadores. Os componentes de variância foram obtidos por abordagem bayesiana. Para as estimativas de valores genéticos genômicos (GEBV) os fenótipos de contagem de carrapato (CC) e níveis de infecção por B. bovis (BovIL) foram incluídos no modelo multivariado visando ganhos em acurácia de predição da BigIL. As análises de predição genômica e GWAS foram realizadas utilizando o melhor preditor linear não viesado genômico (GBLUP). Foi observada baixa herdabilidade para BigIL (0,090) indicando maior influência ambiental do que genética aditiva. A estimativa da correlação genética entre BigIL e CC foi baixa (0.240), em contraste com a correlação entre BigIL e BovIL que foi alta (0,624). Os valores de correlação genética podem ter contribuído com aumento da acurácia quando comparamos o modelo univariado (0.246±0.189) e multivariado (0.606±0.180). No GWAS foi possível observar o a herança poligênica da BigIL. Nas regiões próximas dos SNP que explicaram maior parte da variância foram identificados 35 genes, os quais têm sido relacionados com resposta imune nos cromossomos 1, 4, 5, 7, 10, 13, 18, 20, 27, 29. No capítulo três foi realizada quantificação do número de cópias da A. marginale no sangue dos animais pela técnica de qPCR. Os componentes de variância foram estimados por análise Bayesiana e o método empregado para GWAS e estimação dos valores GEBV foi o melhor preditor linear não viesado genômico (GBLUP) usando modelo multivariado. As estimativas de herdabilidade e acurácia de predição foram baixas 0,090 e 0,180, respectivamente. A correlação genética entre AmIL com BigIL foi alta 0,793, enquanto as correlações entre AmIL com BovIL e contagem de carrapato foram próximas a zero. Ao explorar as top 10 regiões do GWAS, foram encontrados genes candidatos relacionados com interação entre hospedeiro e patógeno e resposta à inflamação, localizadas nos cromossomos 2, 5, 8, 10, 13, 15, 17, 20, 24, e 29. Foram identificadas sobreposições com QTL previamente descritos para susceptibilidade a tuberculose em bovinos e QTL com escore de células somáticas. Assim, os resultados obtidos no presente trabalho podem contribuir para estabelecimento de estratégias de seleção de animais que consigam manter níveis mais baixos de infecções por agentes causadores da Tristeza Parasitária Bovina.

Ticks are responsible for the spread of pathogens such as Babesia bigemina and Anaplasma marginale that cause the diseases babesiosis and anaplamosis, respectively. The constant presence of the tick in national herds leads to economic losses and difficulty in the inclusion of taurine breeds, as they are animals more susceptible to parasitic diseases than indicine cattle. Thus, the objective of this study was to estimate components of variance, accuracy of prediction, and to conduct a genome-wide association study (GWAS) for the levels of infection of B. bigemina (BigIL) and A. marginale (AmIL). In chapter two, analyses for BigIL were performed using 1,882 animals (1,716 Braford and 166 Hereford) with genotypes imputed to a panel of ~777,000 markers. The variance components were obtained using the Bayesian approach. For the estimation of genomic breeding values (GEBV), tick count (CC) phenotype and levels of B. bovis infection (BovIL) were included in the multivariate model aiming at gains in BigIL prediction accuracy. Genomic prediction and GWAS analyses were performed using genomic best linear unbiased prediction method (GBLUP). Low heritability was observed for BigIL (0.090) indicating greater environmental influence than genetic. The estimate of the genetic correlation between BigIL and CC was low (0.240), in contrast to the correlation between BigIL and BovIL which was high (0.624). The genetic correlation values may have contributed to an increase in accuracy when comparing the univariate (0.246±0.189) and multivariate (0.606±0.180) models. GWAS results showed a polygenic inheritance of BigIL. In the regions close to the SNPs that explained most of the additive variance were identified 35 genes previously related to the immune response located on chromosomes 1, 4, 5, 7, 10, 13, 18, 20, 27, 29. In chapter three, the variance components were estimated by Bayesian analysis and the method used for GWAS and estimation of the values was the best linear biased genomic predictor (GBLUP) using the multivariate model. The estimates of heritability and prediction accuracy were 0.090 and 0.180, respectively. The genetic correlation between AmIL and BigIL was high 0.793, while the correlations between AmIL and BovIL and tick count were close to zero. Exploring the top 10 regions of GWAS, candidate genes were found related to host-pathogen interaction and response to inflammation, located on chromosomes 2, 5, 8, 10, 13, 15, 17, 20, 24, and 29, overlapping with QTL previously described for susceptibility to tuberculosis in cattle and QTL with somatic cell score were identified. Thus, the results obtained in the present work can contribute to the establishment of selection strategies that result in animals that are able to maintain lower levels of infections by agents that cause Bovine Parasitic Sadness.

DETECÇÃO MOLECULAR DO M. bovis EM LESÕES TECIDUAIS SUGESTIVAS DE TUBERCULOSE BOVINA

A tuberculose é uma doença infectocontagiosa de caráter zoonótico de grande importância em saúde pública, portanto, sua identificação e diagnóstico são fundamentais no controle desta enfermidade. Objetivou-se o diagnóstico da tuberculose bovina pelo cultivo microbiológico e detecção molecular do M. bovis em lesões teciduais sugestivas de tuberculose bovina. Foram coletadas 50 lesões de bovinos abatidos em dois matadouros-frigoríficos sob SIF na região nordeste do Estado de São Paulo. Foi realizado o cultivo microbiológico em meios de cultura sólidos e a presença do M. bovis foi confirmada pela PCR. A detecção molecular do M. bovis nas lesões sugestivas de tuberculose foi realizada utilizando-se a PCR e a nested PCR. Houve crescimento de colônias características de M. bovis em 56% (28/50) das amostras e 100% (28 amostras) foram confirmadas como M. bovis pela PCR a partir de DNA extraído das colônias. A PCR a partir de DNA extraído das lesões teciduais apresentou 20% (10/50) das amostras positivas para M. bovis. Entretanto, ao se utilizar a nested PCR, técnica aplicada às amostras negativas na PCR, 18% (09 amostras) apresentaram bandas amplificadas, sendo consideradas positivas. Assim, o número de amostras positivas quase dobrou (38% - 19/50). O teste kappa (95%) mostrou concordância perfeita entre a identificação molecular e o cultivo microbiológico e fraca a sofrível entre o cu

Perfil sanitário e eficiência da inseminação artificial em tempo fixo de rebanhos bovinos de pequenos produtores da região de Piracicaba / Health profile and efficiency of fixed-time artificial insemination of cattle herds owned by small-scale producers in the region of Piracicaba

O objetivo do estudo foi avaliar os índices reprodutivos de rebanhos bovinos submetidos a um programa de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) na região de Piracicaba, SP. Vinte rebanhos, formados de 10 a 80 vacas leiteiras mestiças, foram selecionados para participar de um programa de melhoramento genético, através de IATF. Inicialmente, foi realizado um levantamento da incidência de doenças reprodutivas presentes nos rebanhos. Para tanto, amostras de sangue foram coletadas aleatoriamente de cada rebanho para o diagnóstico sorológico de Brucelose, Leptospirose, Rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR), Diarreia viral bovina (BVD), Leucose enzoótica bovina (LEB) e Neosporose. Os exames laboratoriais foram realizados conforme metodologia recomendada pela Organização Mundial de Saúde Animal. Todos os rebanhos apresentaram pelo menos um animal positivo para uma ou mais doenças reprodutivas. Brucelose foi detectada em 3/20 (15%), IBR e BVD em 19/20 (95,0%), LEB em 20/20 (100%), Neosporose em 13/20 (65,0%) e Tuberculose em 8/8 (100%) rebanhos. Seis meses após, vacas (n=203) dos diferentes rebanhos foram submetidas a um tratamento hormonal a base de estradiol-progesterona e PGF2α para sincronizar o cio e a ovulação, visando a IATF. Os dados foram analisados por regressão logística e pelo teste exato de Fisher. As taxas de prenhez aos 30 e 60 dias após IATF foram de 55,7% e 48,3%, respectivamente, sendo que essas taxas não foram influenciadas pelo rebanho, inseminador, escore corporal, dias pós-parto ou número de lactação. A taxa de parição (42,4%) diferiu da taxa de prenhez aos 30 (P=0,01), mas não aos 60 (P=0,27) dias pós IA. A perda gestacional até o parto foi de 23,2% (26/112), porém, não foi identificada a causa precisa desse evento...(AU)

The objective of this study was to evaluate the reproductive indices of different cattle herds submitted to a fixed-time artificial insemination program (FTAI) in the region of Piracicaba, SP. Twenty herds composed of 10 to 80 crossbred dairy cows were selected to participate in a breeding program through FTAI. First, a survey was conducted to determine the incidence of reproductive system diseases in the herds. For this purpose, blood samples were collected randomly from each herd for the serological diagnosis of brucellosis, leptospirosis, infectious bovine rhinotracheitis (IBR), bovine viral diarrhea (BVD), enzootic bovine leukosis (EBL), and neosporosis. The laboratory tests were conducted according to the methods of the World Organisation for Animal Health. All herds had at least one animal that tested positive for one or more reproductive system diseases. Brucellosis was detected in 3/20 (15%) herds, IBR and BVD in 19/20 (95%), EBL in 20/20 (100%), neosporosis in 13/20 (65%), and tuberculosis in 8/8 (100%). Six months later, cows (n=203) of the different herds were submitted to hormone treatment consisting of estradiol-progesterone and PGF2α for heat synchronization and ovulation and subsequent FTAI. The data were analyzed by logistic regression and Fishers exact test. The pregnancy rates at 30 and 60 days after FTAI were 55.7% and 48.3%, respectively. These rates were not influenced by herd, inseminator, body score, post-calving days, or number of lactations. The calving rate (42.4%) differed from the pregnancy rate at 30 (P=0.01), but not at 60 (P=0.27) days after FTAI. The gestation loss until calving was 23.2% (26/112), but no exact cause of this event was identified. Despite the presence (seroreactivity) of reproductive diseases, cattle herds owned by small-scale producers exhibit acceptable pregnancy rates after FTAI. However, additional prophylactic measures such as vaccination and improvement of livestock management should be adopted...(AU)

Perfil sanitário e eficiência da inseminação artificial em tempo fixo de rebanhos bovinos de pequenos produtores da região de Piracicaba / Health profile and efficiency of fixed-time artificial insemination of cattle herds owned by small-scale producers in the region of Piracicaba

O objetivo do estudo foi avaliar os índices reprodutivos de rebanhos bovinos submetidos a um programa de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) na região de Piracicaba, SP. Vinte rebanhos, formados de 10 a 80 vacas leiteiras mestiças, foram selecionados para participar de um programa de melhoramento genético, através de IATF. Inicialmente, foi realizado um levantamento da incidência de doenças reprodutivas presentes nos rebanhos. Para tanto, amostras de sangue foram coletadas aleatoriamente de cada rebanho para o diagnóstico sorológico de Brucelose, Leptospirose, Rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR), Diarreia viral bovina (BVD), Leucose enzoótica bovina (LEB) e Neosporose. Os exames laboratoriais foram realizados conforme metodologia recomendada pela Organização Mundial de Saúde Animal. Todos os rebanhos apresentaram pelo menos um animal positivo para uma ou mais doenças reprodutivas. Brucelose foi detectada em 3/20 (15%), IBR e BVD em 19/20 (95,0%), LEB em 20/20 (100%), Neosporose em 13/20 (65,0%) e Tuberculose em 8/8 (100%) rebanhos. Seis meses após, vacas (n=203) dos diferentes rebanhos foram submetidas a um tratamento hormonal a base de estradiol-progesterona e PGF2α para sincronizar o cio e a ovulação, visando a IATF. Os dados foram analisados por regressão logística e pelo teste exato de Fisher. As taxas de prenhez aos 30 e 60 dias após IATF foram de 55,7% e 48,3%, respectivamente, sendo que essas taxas não foram influenciadas pelo rebanho, inseminador, escore corporal, dias pós-parto ou número de lactação. A taxa de parição (42,4%) diferiu da taxa de prenhez aos 30 (P=0,01), mas não aos 60 (P=0,27) dias pós IA. A perda gestacional até o parto foi de 23,2% (26/112), porém, não foi identificada a causa precisa desse evento...

The objective of this study was to evaluate the reproductive indices of different cattle herds submitted to a fixed-time artificial insemination program (FTAI) in the region of Piracicaba, SP. Twenty herds composed of 10 to 80 crossbred dairy cows were selected to participate in a breeding program through FTAI. First, a survey was conducted to determine the incidence of reproductive system diseases in the herds. For this purpose, blood samples were collected randomly from each herd for the serological diagnosis of brucellosis, leptospirosis, infectious bovine rhinotracheitis (IBR), bovine viral diarrhea (BVD), enzootic bovine leukosis (EBL), and neosporosis. The laboratory tests were conducted according to the methods of the World Organisation for Animal Health. All herds had at least one animal that tested positive for one or more reproductive system diseases. Brucellosis was detected in 3/20 (15%) herds, IBR and BVD in 19/20 (95%), EBL in 20/20 (100%), neosporosis in 13/20 (65%), and tuberculosis in 8/8 (100%). Six months later, cows (n=203) of the different herds were submitted to hormone treatment consisting of estradiol-progesterone and PGF2α for heat synchronization and ovulation and subsequent FTAI. The data were analyzed by logistic regression and Fisher’s exact test. The pregnancy rates at 30 and 60 days after FTAI were 55.7% and 48.3%, respectively. These rates were not influenced by herd, inseminator, body score, post-calving days, or number of lactations. The calving rate (42.4%) differed from the pregnancy rate at 30 (P=0.01), but not at 60 (P=0.27) days after FTAI. The gestation loss until calving was 23.2% (26/112), but no exact cause of this event was identified. Despite the presence (seroreactivity) of reproductive diseases, cattle herds owned by small-scale producers exhibit acceptable pregnancy rates after FTAI. However, additional prophylactic measures such as vaccination and improvement of livestock management should be adopted...

Padronização do teste imunoalérgico aplicado ao diagnóstico da tuberculose e micobacterioses em suínos (Sus scrofa) experimentalmente sensibilizados com suspensões oleosas de Mycobacterium bovis ou M. avium inativados / Standardization of the immunoallergic skin test applied for the diagnosis of tuberculosis and mycobacterioses in swine (Sus scrofa) experimentally sensitized with oil suspensions of inactivated Mycobacterium bovis or M. avium

Foi investigado o valor diagnóstico da resposta alérgica cutânea em leitões experimentalmente sensibilizados, pela via intramuscular, com suspensões oleosas de Mycobacterium bovis ou M. avium inativados pelo calor.Foram utilizados 91 animais, divididos em quatro grupos: grupos A e B, cada um com 25 indivíduos, grupos C e D com 21 e 20 indivíduos respectivamente, balanceando-se as características de raça, linhagem, faixa etária e sexo. Aos 30 dias de idade, todos os animais foram submetidos a uma triagem com a aplicação de tuberculina PPD bovina, pela via intradérmica na base da orelha e não houve qualquer tipo de reação. Decorridos 60 dias do teste tuberculínico de triagem, o grupo A recebeu injeção intramuscular de 0,5 mL de uma suspensão oleosa de M. avium estirpe D4; o grupo B recebeu 0,5 mL de uma suspensão oleosa de M. bovis estirpe AN5; o grupo C (controle I), recebeu 0,5 mL do adjuvante oleoso; e o grupo D (controle II), recebeu 0,5 mL de solução fisiológica. Após 30 dias da sensibilização foi realizada a prova de tuberculinização comparativa com reação medida pela variação da espessura da pele com cutímetro de mola às 0h, 24h, 48h e 72h, após a aplicação das tuberculinas. No teste comparativo, lido às 48 ou 72 horas, a reação foi considerada negativa quando a diferença das reações entre o PPD bovino e o PPD aviário foi menor que 6,7 mm; suspeito ou inconclusivo quando a diferença se situou na faixa de 6,7 a 7,5 mm; e positiva de acordo com o tipo de PPD, considerando-se tuberculose para PPD M. bovis e micobacteriose para PPD M. avium, quando a diferença da reação foi superior a 7,5 mm.(AU)

The diagnostic value of the cutaneous allergic response to tuberculin in piglets experimentally sensitized intramuscularly with the oily suspensions of heat inactivated M. bovis or M. avium was investigated. Ninety-one animals were used and divided into four groups: groups A and B were formed each with 25 individuals, and groups C and D, with 21 and 20 individuals, respectively, balancing the characteristics of race, ancestry, age and sex. At the age of 30 days, all the animals were submitted to the screening test with the use of M. bovis PPD, by the intradermal route at the base of the ear and no reaction was detected. Sixty days after the screening tuberculin test, animals of the group A were injected intramuscularly with 0.5 mL of oily suspension of M. avium D4 strain; animals of the group B received 0.5 mL of an oily suspension of M. bovis, AN5 strain; group C (control I) received 0.5 mL of an oily adjuvant; and the individuals of the group D (control II) received 0.5 mL of saline solution. Following 30 days of sensitization, comparative skin reactions were measured by the variation in skin thickness with a caliper at 0h, 24h, 48h an 72h after applications of tuberculins. In the comparative test measured at 48 or 72h, the reaction was considered negative when the difference of the reactions between bovine PPD and avian PPD was less than 6.7 mm; suspected or inconclusive, when the difference stood in the range of 6.7 to 7.5 mm; and positive according to the type of PPD, considering tuberculosis the M. bovis PPD and mycobacteriosis the M. avium PPD, when the difference of the reaction was greater than 7.5 mm.(AU)

AVALIAÇÃO BACTERIOLÓGICA E MOLECULAR POR SPOLIGOTYPING DA TUBERCULOSE A PARTIR DE BOVINOS E BUBALINOS ABATIDOS EM ABATEDOUROS OFICIAIS E EM VÍSCERAS COMERCIALIZADOS NAS FEIRAS LIVRES NO ESTADO DA BAHIA - BRASIL

SANTOS, VASCONCELOS E.S. AVALIAÇÃO BACTERIOLÓGICA E MOLECULAR POR SPOLIGOTYPING DA TUBERCULOSE A PARTIR DE BOVINOS E BUBALINOS ABATIDOS EM ABATEDOUROS OFICIAIS E EM VÍSCERAS COMERCIALIZADOS NAS FEIRAS LIVRES NO ESTADO DA BAHIA BRASIL, Salvador, 2019. 99p. Tese (Doutorado em Ciência Animal nos Trópicos)- Universidade Federal da Bahia- Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia. O Mycobacterium bovis é o principal responsável pela tuberculose bovina e bubalina, doença zoonótica importante e com distribuição global. A investigação precisa dessa enfermidade, incluindo diagnósticos mais avançados, a exemplo do Spoligotyping, permite escolher as melhores estratégias de combate ao avanço da doença. Assim como ocorre em outros Estados, a compreensão da frequência e do padrão de distribuição da enfermidade na Bahia contribui para planejamento efetivo das ações de controle além de possibilitar o acompanhamento do andamento do programa nacional de controle e erradicação da TB e, neste contexto, os abatedouros frigoríficos exercem papel fundamental. Objetivou-se investigar a ocorrência de lesões sugestivas de tuberculose nas carcaças de bovinos e bubalinos inspecionadas em frigoríficos sob regime de inspeção oficial bem como identificar a presença de micobactérias nas mesmas e em vísceras (pulmão e fígado) comercializadas em feiras livres no estado da Bahia. Das 29 amostras de feira livre, 20 puderam ser analisadas, excluindo-se as autolisadas e contaminadas, e foi evidenciado crescimento em 25% (5/20) delas, mas não foi evidenciado BAAR, no entanto, o ambiente das feiras revelou-se com inapropriadas condições sanitárias. Foram investigadas 453.417 carcaças sob o serviço de inspeção estadual e federal dentre as quais 31 animais (0,007%) foram considerados suspeitos, de onde se coletou 49 lesões sugestivas de TB em animais oriundos de 17 municípios. Desses, 27 bovinos puderam ser analisados resultando em 74,1% (20/27) de crescimento em meio de cultura seletivo e 95% (19/20) foram BAAR. O DNA das colônias foi extraído por termólise. Todos os isolados foram submetidos ao Spoligotyping sendo 95% confirmados perfis de M. bovis (SB0120, SB0121, SB0852, SB0828, SB0295, SB0881, SB1648, SB6119, SB0140, SB1055) demostrando-se a estirpe genômica SB0120 ser a mais prevalente e relacionada com casos de tuberculose humana indicando o potencial zoonótico desse perfil. O Spoligotyping permitiu atestar existência de infecções mistas, uma elevada diversidade dos padrões de estirpes dos isolados na Bahia e permitiu também a comparação com outros estados e países demonstrando nas amostras isoladas, linhagens nunca antes descritas no Brasil, sendo um dos isolados inédito na literatura. A análise da distribuição espacial mostrou-se uma ferramenta x importante para direcionamento das ações de defesa sanitária possibilitando recomendações mais específicas do programa nacional para controle e erradicação da tuberculose bovina no estado da Bahia.

SANTOS, VASCONCELOS E.S. BACTERIOLOGICAL AND MOLECULAR EVALUATION BY SPOLIGOTYPING OF TUBERCULOSIS FROM CATTLE AND BUFFALO SLAUGHTERED UNDER OFFICIAL INSPECTION SERVICE AND VISCERA COMMERCIALIZED IN STREET MARKET IN BAHIA - BRASIL, Salvador, 2019. 99p. Thesis (PhD in Animal Science in the Tropics) - Federal University of Bahia - School of Veterinary Medicine and Animal Science. Mycobacterium bovis is the main responsible for bovine and buffalo tuberculosis, an important zoonotic disease with global distribution. The precise investigation of this disease, including more advanced diagnoses, like Spoligotyping, allows to choose the best strategies to combat the disease progression. As in other states, understanding the frequency and distribution pattern of the disease in Bahia contributes to effective planning of control actions, as well as monitoring the progress of the national TB control and eradication program and, in this context, slaughterhouses play a key role. The objective was to investigate the occurrence of lesions suggestive of tuberculosis in bovine and buffalo carcasses inspected in slaughterhouses under an official inspection regime, as well as to identify the presence of mycobacteria in the same and in viscera samples marketed in open fairs in the state of Bahia. Of the 29 free-trade samples, 20 could be analyzed, excluding autolysed and contaminated, and growth was shown in 25% (5/20) of them, but no evidence of BAAR was shown, however, the environment of the fairs was revealed with inappropriate sanitary conditions. A total of 453,417 carcasses were investigated under the state and federal inspection service, of which 31 animals (0.007%) were considered suspect, from which 49 lesions suggestive of TB were collected from animals from 17 municipalities. Of these, 27 cattle could be analyzed resulting in 74.1% (20/27) growth in selective culture medium and 95% (19/20) were BAAR. DNA from the colonies was extracted by thermolysis. All isolates were submitted to Spoligotyping with 95% confirmed profiles of M. bovis (SB0120, SB0121, SB0852, SB0828, SB0295, SB0881, SB1648, SB0140, SB0140, SB1055) showing the genotype strain SB0120 xi to be the most prevalent and related with cases of human tuberculosis indicating the zoonotic potential of this profile. Spoligotyping allowed to confirm the presence of mixed infections, a high diversity of isolate strains patterns in Bahia and also allowed comparison with other states and countries, showing isolated strains in Brazil, one of the isolated isolates in the literature. The analysis of the spatial distribution has proved to be an important tool for directing health protection actions, allowing for more specific recommendations of the national program for the control and eradication of bovine tuberculosis in the state of Bahia, Brazil.

Análise de detecção de cluster na caracterização espaço-temporal da tuberculose bovina no estado da Bahia / Cluster detection analyses for temporal-spatial characterization of bovine tuberculosis in Bahia, Brazil

A tuberculose bovina (BTB) é uma enfermidade causada pela infecção pelo Mycobacterium bovis que acomete o homem e diversas espécies de mamíferos. A BTB tem grande importância por causar prejuízos econômicos nas regiões infectadas e por seu impacto na saúde pública. Foi realizado inquérito epidemiológico no Estado da Bahia, entre 2008 e 2010, com o objetivo de estimar a prevalência e conhecer a distribuição espaço temporal da enfermidade. O Estado foi estratificado em quatro regiões, cada uma com características epidemiológicas e demográficas homogêneas representativas de formas de produção pecuária. Um total de 18.810 cabeças com idade superior a 2 anos foi amostrado em 1350 propriedades. O teste cervical comparativo foi aplicado em cada animal selecionado, sendo considerados positivos os animais reagentes positivos ou duas vezes inconclusivos. Latitude e Longitude foram tomadas para cada propriedade amostrada com o auxilio do aparelho de Global Positioning System (GPS). O teste de Cuzick-and-Edwards e a análise de rastreio espacial (spatial scan statistic) foram utilizados para identificar qualquer agrupamento espacial de BTB. A prevalência de rebanho na Bahia, indicando a proporção de propriedades foco, foi de 1,6% (IC 95%: 1,0% - 2,69% por região). Nenhuma evidência significativa (P<0.05) de aglomeração espacial ou clustering foi detectada, possivelmente devido à baixa prevalência da doença. Estes resultados sugerem que a BTB tem baixa prevalência no estado da Bahia e que, nestas condições epidemiológicas, os focos encontrados não podem ser explicados por fatores espacialmente estruturados. (AU)

Bovine tuberculosis (BTB) is a disease caused by the infection with Mycobacterium bovis that affects humans and several mammalian species. BTB is important, because it inflicts far-reaching economic losses to infected regions, and due to its impact on public health. Epidemiological surveys were conducted in the State of Bahia between 2008 and 2010 with the objective to estimate the prevalence and to assess the spatial distribution of the disease. The State of Bahia has been stratified into four regions, each of them representing a set of homogeneous epidemiological and demographic characteristics, referred to as Production Circuits. A total of 18,810 more than 2-year-old cattle in 1,305 herds, ranging from 320 to 370 ones per region, and 20 to 40 cattle per herd were randomly selected. A cervical comparative test was applied to each selected animal; reactive cattle and cattle with two consecutive inconclusive tests were considered BTB-positive, whereas non-reactive cattle were considered BTB-negative. Positive herds were classified as those with <20 sampled cattle and at least one BTB-positive, as well as those with 40 cattle sampled with <2 BTB-positive animals. Latitude and longitude were recorded for each sampled herd with a generic Global Positioning System (GPS). The Cuzick-and-Edwards' test and the spatial scan statistic were used to assess whether BTB was spatially clustered. Herd-level prevalence, as indicated by the proportion of case-herds, was 1.6% (range 0.3 to 2.9% per region). No significant evidence (P<0.05) of spatial clustering was detected, most likely due to the low disease prevalence in the region. Results here suggest that BTB is low prevalent in the State of Bahia and that under these conditions epidemiological outbreaks found cannot be explained by spatially-structured factors. (AU)