Resumo
Copaifera multijuga, commonly known as copaiba, is popularly used in the form of tea for various conditions due to the presence of antioxidant substances in its composition, which protect cells against damage caused by free radicals. Its oleoresin is also used as an anti-inflammatory and antitumoral agent. The present study investigated the antioxidant effect of the ethanolic extract of copaiba stem bark on Swiss mice inoculated with solid Ehrlich tumors. Mice were inoculated subcutaneously with 1x106 Ehrlichs tumor cells and treated via gavage with ethanolic extract of copaiba for thirty days, with doses varying between 100 and 200 mg kg-1. Biochemical analyses of enzymatic antioxidants [superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione-S-transferase (GST)], non-enzymatic antioxidants [reduced glutathione (GSH) and ascorbic acid (ASA)], substances reactive to thiobarbituric acid (TBARS) and protein carbonylation (carbonyl) in different tissues were significantly affected. The extract administered at 200 mg kg-1 presented higher antioxidant capacity in the liver, increased CAT, GST, GSH and decreased TBARS, as well as increased CAT activity and protein carbonylation in brain tissue. The results showed that the copaiba extract was able to reverse the oxidative stress caused by solid Ehrlich tumor, probably due to the presence of antioxidant compounds, and had potential antineoplasic effect after a 30-day treatment.(AU)
Copaifera multijuga, ou copaíba, é utilizada popularmente como chá para o tratamento de diversas afecções, o que se deve à presença de substâncias antioxidantes em sua composição, que protegem as células contra danos causados pelos radicais livres. O óleo-resina da árvore é usado como antiinflamatório e antitumoral. O presente estudo avaliou o efeito antioxidante do extrato etanólico da casca da copaíba sobre camundongos Swiss machos inoculados com tumor sólido de Ehrlich. Os camundongos foram inoculados subcutaneamente com 1x106 células de tumor de Ehrlich e foram tratados, via gavagem durante 30 dias, com doses de extrato etanólico de copaíba variando de 100 a 200 mg kg-1. Realizou-se análise bioquímica dos antioxidantes enzimáticos [superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa-S-transferase (GST)], antioxidantes não-enzimáticos [glutationa reduzida (GSH) e ácido ascórbico (ASA)], substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e carbonilação proteica (carbonil) em diferentes tecidos e apresentando resultados significativos. O extrato administrado na concentração de 200 mg kg-1 apresentou melhor capacidade antioxidante no fígado, aumentando a CAT, GST, GSH e diminuindo TBARS, além de aumentar a atividade da CAT e da carbonilação proteica no tecido cerebral. Os resultados mostram que o extrato de copaíba foi capaz de reverter o estresse oxidativo causado pelo tumor sólido de Ehrlich, provavelmente por conter compostos antioxidantes, e possivelmente teve um efeito antineoplásico após 30 dias de tratamento.(AU)
Assuntos
Animais , Camundongos , Fabaceae/imunologia , Carcinógenos/administração & dosagem , Carcinógenos/farmacologia , Homeopatia , Homeopatia/veterinária , Antioxidantes/administração & dosagem , Antioxidantes/uso terapêutico , Anti-Inflamatórios/imunologia , Anti-Inflamatórios/administração & dosagem , Radicais LivresResumo
Electrochemotherapy is a local anticancer treatment in which non-permeant chemotherapeutic drugs are associated with electric pulses of well-established parameters. The electric pulses cause pores to open on the plasma membrane and facilitate drug transport, enhancing cytotoxicity and reducing side effects. Assessment of electrochemotherapy effects on Ehrlich solid tumor development in this work aims to evaluate in vivo usage of the electroporator device developed by the Department of Electrical Engineering of Engineering School of UFMG. Therefore, 40 Swiss mice were inoculated with Ehrlich tumor cells, and developed the tumor in solid form. After 21 days, mice were subjected to specific treatment protocols (control, bleomycin, electric pulses and electrochemotherapy); 17 days later they were euthanized and the tumors collected for histopathology analysis. Electrochemotherapy induced discrete weight loss and an inflammatory response in the tumor, which was not seen on the other treatment groups. Bleomycin alone induced necrosis. Both groups showed lower cellular proliferation rates. From this study, it was concluded that the animals tolerated electrochemotherapy treatment under anesthesia and the electroporator device developed by the Engineering School of UFMG was adequate when used in an electrochemotherapy protocol.(AU)
Eletroquimioterapia é uma modalidade de tratamento local contra o câncer em que a administração de quimioterápicos não penetrantes à membrana plasmática é associada à aplicação de pulsos elétricos com parâmetros bem estabelecidos, que abrem poros na membrana plasmática e facilitam a entrada desses fármacos nas células, aumentando sua citotoxicidade e reduzindo efeitos colaterais. A avaliação dos efeitos da eletroquimioterapia sobre o desenvolvimento do tumor sólido de Ehrlich em camundongos Swiss neste trabalho teve como objetivo testar o uso in vivo do aparelho eletroporador desenvolvido pelo Departamento de Engenharia Elétrica da Escola de Engenharia da UFMG. Para tanto, foram utilizados 40 camundongos fêmeas da linhagem Swiss, nos quais foram inoculadas células de tumor de Ehrlich, para o desenvolvimento do tumor na forma sólida. Após 21 dias, os camundongos foram submetidos ao protocolo de tratamento específico (controle, bleomicina, pulsos elétricos e eletroquimioterapia); 17 dias depois foram eutanasiados e seus tumores coletados para análise histopatológica e imuno-histoquímica. A eletroquimioterapia induziu perda de peso discreta e uma resposta inflamatória no tumor que não foi observada nos outros grupos. O grupo bleomicina apresentou maior porcentagem de necrose. Ambos os grupos apresentaram menor índice de proliferação celular. Com este estudo, pode-se concluir que o tratamento sob anestesia foi bem tolerado pelos animais e que o aparelho eletroporador desenvolvido pela Escola de Engenharia da UFMG é adequado para utilização em um protocolo de eletroquimioterapia.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Camundongos , Carcinoma de Ehrlich/terapia , Eletroquimioterapia/veterinária , Eletroporação/veterináriaResumo
Electrochemotherapy is a local anticancer treatment in which non-permeant chemotherapeutic drugs are associated with electric pulses of well-established parameters. The electric pulses cause pores to open on the plasma membrane and facilitate drug transport, enhancing cytotoxicity and reducing side effects. Assessment of electrochemotherapy effects on Ehrlich solid tumor development in this work aims to evaluate in vivo usage of the electroporator device developed by the Department of Electrical Engineering of Engineering School of UFMG. Therefore, 40 Swiss mice were inoculated with Ehrlich tumor cells, and developed the tumor in solid form. After 21 days, mice were subjected to specific treatment protocols (control, bleomycin, electric pulses and electrochemotherapy); 17 days later they were euthanized and the tumors collected for histopathology analysis. Electrochemotherapy induced discrete weight loss and an inflammatory response in the tumor, which was not seen on the other treatment groups. Bleomycin alone induced necrosis. Both groups showed lower cellular proliferation rates. From this study, it was concluded that the animals tolerated electrochemotherapy treatment under anesthesia and the electroporator device developed by the Engineering School of UFMG was adequate when used in an electrochemotherapy protocol.(AU)
Eletroquimioterapia é uma modalidade de tratamento local contra o câncer em que a administração de quimioterápicos não penetrantes à membrana plasmática é associada à aplicação de pulsos elétricos com parâmetros bem estabelecidos, que abrem poros na membrana plasmática e facilitam a entrada desses fármacos nas células, aumentando sua citotoxicidade e reduzindo efeitos colaterais. A avaliação dos efeitos da eletroquimioterapia sobre o desenvolvimento do tumor sólido de Ehrlich em camundongos Swiss neste trabalho teve como objetivo testar o uso in vivo do aparelho eletroporador desenvolvido pelo Departamento de Engenharia Elétrica da Escola de Engenharia da UFMG. Para tanto, foram utilizados 40 camundongos fêmeas da linhagem Swiss, nos quais foram inoculadas células de tumor de Ehrlich, para o desenvolvimento do tumor na forma sólida. Após 21 dias, os camundongos foram submetidos ao protocolo de tratamento específico (controle, bleomicina, pulsos elétricos e eletroquimioterapia); 17 dias depois foram eutanasiados e seus tumores coletados para análise histopatológica e imuno-histoquímica. A eletroquimioterapia induziu perda de peso discreta e uma resposta inflamatória no tumor que não foi observada nos outros grupos. O grupo bleomicina apresentou maior porcentagem de necrose. Ambos os grupos apresentaram menor índice de proliferação celular. Com este estudo, pode-se concluir que o tratamento sob anestesia foi bem tolerado pelos animais e que o aparelho eletroporador desenvolvido pela Escola de Engenharia da UFMG é adequado para utilização em um protocolo de eletroquimioterapia.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Camundongos , Carcinoma de Ehrlich/terapia , Eletroquimioterapia/veterinária , Eletroporação/veterináriaResumo
ABSTRACT Electrochemotherapy is a local anticancer treatment in which non-permeant chemotherapeutic drugs are associated with electric pulses of well-established parameters. The electric pulses cause pores to open on the plasma membrane and facilitate drug transport, enhancing cytotoxicity and reducing side effects. Assessment of electrochemotherapy effects on Ehrlich solid tumor development in this work aims to evaluate in vivo usage of the electroporator device developed by the Department of Electrical Engineering of Engineering School of UFMG. Therefore, 40 Swiss mice were inoculated with Ehrlich tumor cells, and developed the tumor in solid form. After 21 days, mice were subjected to specific treatment protocols (control, bleomycin, electric pulses and electrochemotherapy); 17 days later they were euthanized and the tumors collected for histopathology analysis. Electrochemotherapy induced discrete weight loss and an inflammatory response in the tumor, which was not seen on the other treatment groups. Bleomycin alone induced necrosis. Both groups showed lower cellular proliferation rates. From this study, it was concluded that the animals tolerated electrochemotherapy treatment under anesthesia and the electroporator device developed by the Engineering School of UFMG was adequate when used in an electrochemotherapy protocol.
RESUMO Eletroquimioterapia é uma modalidade de tratamento local contra o câncer em que a administração de quimioterápicos não penetrantes à membrana plasmática é associada à aplicação de pulsos elétricos com parâmetros bem estabelecidos, que abrem poros na membrana plasmática e facilitam a entrada desses fármacos nas células, aumentando sua citotoxicidade e reduzindo efeitos colaterais. A avaliação dos efeitos da eletroquimioterapia sobre o desenvolvimento do tumor sólido de Ehrlich em camundongos Swiss neste trabalho teve como objetivo testar o uso in vivo do aparelho eletroporador desenvolvido pelo Departamento de Engenharia Elétrica da Escola de Engenharia da UFMG. Para tanto, foram utilizados 40 camundongos fêmeas da linhagem Swiss, nos quais foram inoculadas células de tumor de Ehrlich, para o desenvolvimento do tumor na forma sólida. Após 21 dias, os camundongos foram submetidos ao protocolo de tratamento específico (controle, bleomicina, pulsos elétricos e eletroquimioterapia); 17 dias depois foram eutanasiados e seus tumores coletados para análise histopatológica e imuno-histoquímica. A eletroquimioterapia induziu perda de peso discreta e uma resposta inflamatória no tumor que não foi observada nos outros grupos. O grupo bleomicina apresentou maior porcentagem de necrose. Ambos os grupos apresentaram menor índice de proliferação celular. Com este estudo, pode-se concluir que o tratamento sob anestesia foi bem tolerado pelos animais e que o aparelho eletroporador desenvolvido pela Escola de Engenharia da UFMG é adequado para utilização em um protocolo de eletroquimioterapia.
Resumo
Compounds isolated from Agaricus blazei Murill represent a group of promising natural immunomodulators for use in the treatment of neoplasms. We have evaluated the serum biochemical profile of healthy and Ehrlich tumor-bearing mice treated with different extracts of A. blazei. Total, supernatant, and polysaccharide extracts of A. blazei were obtained from suspensions (at acidic or neutral pH) kept in a water bath at 60 °C or in an ultrasonic bath at 37 °C. After oral administering the extracts to mice for 21 days, blood samples were collected for determination of aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), creatine kinase (CK), urea, total protein, albumin, globulins, and alpha-, beta- and gamma-globulin fractions. The presence of the tumor led to a significant increase in serum CK and AST activities and in the concentrations of total globulin and the gamma-globulin fraction, and to a decrease in the albumin and alpha2-globulin levels. The polysaccharide extracts of A. blazei reduced the serum AST and ALT activities, probably due to a hepatoprotective effect. In addition, polysaccharide and supernatant extracts inhibited the tumor-induced increase in gamma-globulin levels. Thus, the supernatant and polysaccharide fractions of the extract of A. blazei have potential for use in complementary antineoplastic treatments.(AU)
Biocompostos de Agaricus blazei Murril representam imunomoduladores naturais promissores para uso no tratamento de neoplasias. Objetivou-se avaliar o perfil bioquímico hepático sérico camundongos saudáveis ou portadores do tumor de Ehrlich tratados com diferentes extratos de A. blazei. Em pH ácido ou neutro e sob temperatura de extração de 60 ºC em banho-maria ou 37 ºC em banho ultrassônico foram obtidos extratos totais, de sobrenadante e de polissacarídeos de A. blazei. Após administração oral dos tratamentos para camundongos por 21 dias foram realizadas coletas de sangue e determinadas as atividades de aspartato aminotransferase (AST), alanina aminotransferase (ALT), creatina quinase (CK) e as concentrações de ureia, proteína total, albumina, globulinas e frações alfa, beta e gama-globulina. A presença do tumor de Ehrlich foi responsável por aumento significativo nas atividades séricas de AST e CK e das concentrações de globulinas totais e da fração gama-globulina, além de redução dos níveis de albumina e das alfa2-globulinas. Os extratos de polissacarídeos de A. blazei reduziram as atividades séricas de AST e ALT, provavelmente devido a um efeito hepatoprotetor. Além disto, extratos de polissacarídeos e sobrenadante inibiram o aumento das gama-globulinas induzido pelo tumor. Assim, as frações de polissacarídeos e sobrenadante do extrato de A. blazei apresentam bom potencial para uso complementar ao tratamento antineoplásico.(AU)
Assuntos
Animais , Camundongos , Carcinoma de Ehrlich , Agaricales , Anticarcinógenos/análise , Fatores Imunológicos/análise , NeoplasiasResumo
Neoplasias representam uma das principais causas de morte em humanos e animais, é uma doença complexa caracterizada pela modificação permanente do material genético das células. A ozonioterapia é descrita como uma abordagem terapêutica para o tratamento coadjuvante do câncer e dos efeitos colaterais associados à quimioterapia e radioterapia. O objetivo deste trabalho foisemp avaliar os camundongos albinos Swiss (Mus muscullus) com carcinoma de Ehrlich submetidos aos tratamentos com ozonioterapia intrarretal e cisplatina. O experimento, consistiu na utilização de 25 camundongos, albinos Swiss (Mus muscullus), fêmeas com aproximadamente 60 dias de idade, apresentando peso corpóreo entre 35g e 40g, inoculados com o carcinoma de Ehrlich, divididos em quatro grupos, Grupo G1: Controle positivo: 2,5mg/kg de Cisplatina; Grupo G2: Mistura Ozônio Oxigênio via Insuflação Retal; Grupo G3: 2,5mg/kg de Cisplatina + Mistura Ozônio Oxigênio via Insuflação Retal e Grupo G4: Controle negativo 1ml de soro Fisiológico 0,9%. Os animais de todos os grupos foram submetidos a um período de adaptação de oito dias, em que nos grupos G2 e G3 foram submetidos a ozonioterapia via insuflação retal durante seis dias. Após este período realizou-se a inoculação das células do carcinoma de Ehrlich em todos os animais. Após 48h da inoculação se iniciou os diferentes tratamentos durante seis dias, ao fim do experimento, foi realizada a eutanásia dos animais e feita a coleta de sangue, através da punção cardíaca, e a remoção do tumor e órgãos (pulmão, baço, rins e fígado). Os resultados relacionados com o hemograma, perfil renal e hepático não apresentaram diferenças estatisticamente significativas (p < 0,05) entre os grupos para as variáveis analisadas. No peso do tumor e de cada um dos órgãos analisados (Pulmão, Baço, Rim, Fígado) apresentaram diferenças estatisticamente significativas entre os grupos. Para estas variáveis se destaca que a média do peso do tumor foi maior no grupo G4 (3,83 g), foi menor no grupo G3 (0,79 g). E essas diferenças significativas foram notadas entre o controle negativo com os demais grupos. No exame histopatológico não foram notadas diferenças estatisticamente significativas (p < 0,05) entre grupos Conclui-se que de acordo com os resultados a ozonioterapia associada a cisplatina demonstrou ser o tratamento em que os em camundongos com carcinoma de Erhlich apresentaram o menor peso do tumor. As ações terapêuticas no grupo tratado apenas com ozonioterapia proporcionaram aumento no consumo do alimento, como também, uma atividade antitumoral semelhante ao grupo tratado apenas com cisplatina.
Neoplasms represent one of the main causes of death in humans and animals, it is a complex disease characterized by permanent modification of the cell's genetic material. Ozone therapy is described as a therapeutic approach for the coadjutant treatment of cancer and side effects associated with chemotherapy and radiotherapy. This paper aims to evaluate albino Swiss mice (Mus muscullus) with Ehrlich carcinoma submitted to treatments with intrarectal ozone therapy and cisplatin. The experiment consisted of using 25 Swiss albino mice (Mus muscullus), females with approximately 60 days old, with body weight between 35g and 40g, inoculated with Ehrlich carcinoma, divided into four groups, Group G1: Positive control: 2.5mg / kg of Cisplatin; Group G2: Ozone-Oxygen Mixture via Rectal Insufflation; Group G3: 2.5mg / kg of Cisplatin + Ozone-Oxygen Mixture via Rectal Insufflation and Group G4: Negative control 1ml of 0.9% saline solution. Animals in all groups underwent an adaptation period of eight days, in which groups G2 and G3 were subjected to ozone therapy via rectal insufflation for six days. After this period, Ehrlich carcinoma cells were inoculated in all animals. After 48h of the inoculation, the different treatments were started for six days, at the end of the experiment the animals were euthanized, blood was collected through cardiac puncture, and the tumor and organs were removed (lung, spleen, kidneys and liver). The results related to the blood count, renal and hepatic profile did not show statistically significant differences (p <0.05) between the groups for the analyzed variables. The weight of the tumor and each of the organs analyzed (Lung, Spleen, Kidney, Liver) showed statistically significant differences between the groups. For these variables, it is highlighted that the tumor average weight was higher in the G4 group (3.83 g), it was lower in the G3 group (0.79 g). And these significant differences were noted between the negative control group with the other groups. In the histopathological exam, there were no statistically significant differences (p <0.05) between groups. It is concluded that, according to the results, ozone therapy associated with cisplatin proved to be the treatment in which mice with Erhlich carcinoma had the lighter tumor weight. The therapeutic actions in the group treated only with ozone therapy provided an increase in food consumption, as well as an antitumor activity similar to the group treated only with cisplatin. Key words: Cancer, Oncology, Ozone, rectal Insuflation.
Resumo
The aim of this study was to investigate the effect of the mushroom Agaricus blazeii Murril (ABM) extracts on the hematological profile of Swiss mice bearing an Ehrlich solid tumor. Three fractions (total extract, polysaccharides, and supernatant) of ABM extracts obtained by four methods (ultrasonic or water bath, at pH 4 or pH 7) were administered to mice over 21 days. Polysaccharide solutions were analyzed by gas and liquid chromatography that showed both mannose and glucose concentrations. The method of extraction influenced the degree of glucose polymerization and the mannose/glucose relationship. The treatment with ABM supernatant at pH 7 and water bath was associated with reduced concentrations of leukocytes and lymphocytes and altered the percentage of CD4+ and CD8+ lymphocytes in Ehrlich tumor-bearing mice. The treatment with the ABM extract in water bath and ultrasound at pH 4 resulted in lower lymphocyte counts, regardless of tumor presence, and greater granulocyte values in mice with Ehrlich tumor than in controls. We concluded that different fractions and methods of extraction of A. blazei produced differing blood profiles in mice inoculated with the Ehrlich tumor(AU)
O objetivo deste estudo foi investigar o efeito de diferentes extratos do cogumelo Agaricus blazeii Murril (ABM) sobre o perfil hematológico de camundongos Swiss portadores de tumor de Ehrlich sólido. Três frações (extrato total, polissacarídeos e sobrenadante) dos extratos de ABM foram obtidas por quatro métodos (sonificador, banho-maria, em pH 4 ou pH 7) e administradas para camundongos durante 21 dias. Soluções de polissacarídeos foram analisadas por cromatografia gasosa e líquida, que mostraram concentrações de glucose e manose. O método de extração influenciou o grau de polimerização da glicose e a relação manose/glucose. O tratamento com o sobrenadante de ABM (em pH 7 e banho-maria) estava associado com reduzidas concentrações de leucócitos e linfócitos, além de alterar a porcentagem de linfócitos CD4+ e CD8+ em camundongos portadores de tumor sólido de Ehrlich. O tratamento com extratos de ABM, obtidos tanto em banho-maria como no sonificador em pH 4, resultou nas mais baixas contagens de linfócitos, independentemente da presença do tumor, e nos maiores valores de granulócitos em camundongos com tumor de Ehrlich. Conclui-se que os diferentes métodos de extração com as respectivas frações de A. blazei são capazes de intereferir no perfil hematológico de camundongos com tumor sólido de Ehrlich(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Camundongos , Agaricus , Carcinoma de Ehrlich/terapia , Testes Sorológicos/veterinária , Polissacarídeos/administração & dosagem , Polimerização , Glucose/química , Manose/química , Métodos Analíticos de Preparação de Amostras/veterinária , Extratos Vegetais/uso terapêuticoResumo
RUSCH, E. Efeitos da morfina e metadona sobre o comportamento e crescimento tumoral de camundongos com tumor de Ehrlich. 2020. Dissertação (Mestrado). Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2020. A morfina e a metadona, embora sejam fármacos recomendados para promover analgesia, parecem promover alterações comportamentais e influenciar no crescimento tumoral em modelos experimentais. Diante disso, o objetivo do estudo consistiu em avaliar os efeitos da morfina e metadona sobre o comportamento, antinocicepção e crescimento tumoral em camundongos. O estudo foi dividido em duas partes. No primeiro experimento foram utilizados 53 camundongos, fêmeas, com 60 ± 10 dias de idade que foram inoculados com tumor ascítico de Ehrlich (TAE) por via intraperitoneal. Após sete dias da inoculação, os animais foram distribuídos aleatoriamente em 7 grupos, morfina 5 mg/kg (Morf5), morfina 7,5 mg/kg (Morf7,5), morfina 10 mg/kg (Morf10), metadona 2,85 mg/kg (Met2,85), metadona 4,3 mg/kg (Met4,3), metadona 5,7 mg/kg (Met5,7) e solução salina NaCl 0,9% (Salina). Os tratamentos foram administrados por via subcutânea, a cada seis horas, durante três dias. Os animais foram avaliados quanto a atividade geral em campo aberto e nocicepção, por meio do teste de pinçamento de cauda, os quais foram realizados antes da inoculação tumoral (dia 0), aos 40, 90, 150, 240 e 360 minutos após o início dos tratamentos (dia 7) e 40, 150 e 360 minutos após os dias 8 e 9 pós-inoculação. Todas as doses promoveram aumento significativo da distância percorrida e velocidade média de maneira dose-dependente, sendo que os efeitos foram mais pronunciados nos dias 8 e 9. As frequências de levantar e de autolimpeza reduziram de maneira significativa após a administração de morfina e metadona em todas as doses até os 90 minutos. O segundo experimento consistiu em avaliar os efeitos sobre o crescimento tumoral das mesmas doses da morfina e metadona administradas por via subcutânea, a cada 6 horas, durante 8 dias, iniciados 24 horas após a inoculação tumoral. Os animais foram avaliados diariamente quanto ao peso e circunferência abdominal e nove dias após a inoculação tumoral, foram submetidos à eutanásia. O líquido ascítico foi colhido para aferição do volume, verificação da característica do líquido, contagem de células tumorais e análise do ciclo celular. Todos os animais apresentaram aumento de peso e de circunferência abdominal ao longo dos dias. O volume do líquido ascítico peritoneal foi menor nos tratamentos Morf5, Morf10 e em todas as doses testadas de metadona em comparação ao grupo Salina. A viabilidade e o número de células totais não diferiram entre os tratamentos. Os tratamentos Morf10 e Met5,7 interferiram no ciclo celular das células tumorais com maior porcentagem de células na fase G1 do ciclo, em comparação ao grupo Salina. Observou-se, a partir do primeiro experimento que todas as doses testadas promovem aumento da locomoção e redução de comportamentos exploratórios que foram mais evidentes ao longo dos dias de tratamento. A antinocicepção é observada por até 40 minutos em dose única e prolonga-se por até 150 minutos após administrações seriadas nas doses intermediárias e maiores. Os tratamentos Morf10 e Met5,7 promovem estase do ciclo celular, mas não interferem de maneira significativa no crescimento do tumor ascítico de Ehrlich.
RUSCH, E. Effects of morphine and methadone on the behavior and tumor growth of mice with Ehrlich tumor. 2020. 26 f. M.Sc. Dissertation - Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, University of Sao Paulo, Pirassununga, 2020. The objective of this research is to evaluate the effects of morphine and methadone on behavior, antinociception and tumor growth in mice. The study was dived into two parts. In the first experiment, Fifty-three female mice, 60 ± 10 days old, were inoculated with Ehrlich's ascitic tumor (EAT) intraperitoneally. Seven days after intraperitoneal tumour inoculation (2 × 106 cells), the animals were randomised into seven groups: morphine 5 mg/kg (MO5), morphine 7.5 mg/kg (MO7.5), morphine 10 mg/kg (MO10), methadone 2.85 mg/kg (ME2.85), methadone 4.3 mg/kg (ME4.3), methadone 5.7 mg/kg (ME5.7), and 0.9% NaCl (Sal). Treatments were administered subcutaneously, every 6 h, for 3 days. The animals were evaluated for general activity and nociception using the open field and tail clip tests, respectively. These tests were performed before tumour inoculation (day 0); at 40, 90, 150, 240, and 360 min following treatment initiation (day 7); and at 40, 150, and 360 min after days 8 and 9 post-inoculation. All evaluated doses promoted a significant dose-dependent increase in the total distance travelled and the average speed, markedly pronounced on days 8 and 9 than on day 7. The frequencies of rearing and self-grooming decreased significantly after morphine or methadone administration. The second experiment consisted of evaluating the effects on tumor growth of the same doses of morphine and methadone administered subcutaneously, every 6 hours, for 8 days, starting 24 hours after tumor inoculation. The animals were evaluated daily for weight and abdominal circumference and they were euthanized nine days after the tumor inoculation. The ascitic fluid was collected to measure the volume, check the characteristic of the liquid, count the tumor cells and analyze the cell cycle. All animals had increased weight and waist circumference over the days. The volume of peritoneal ascitic fluid was lower in the Morf5, Morf10 treatments and in all tested methadone doses compared to the Saline group. Viability and number of total cells did not differ between treatments. Morf10 and Met5,7 treatments interfered in the cell cycle of tumor cells, with a higher percentage of cells in the G1 phase of the cycle, compared to the Saline group. It was observed, from the first experiment, that all doses tested promote increased locomotion and reduced exploratory behaviors that were more evident over the treatment days. Antinociception was observed for up to 40 minutes in a single dose and continued for up to 150 minutes after serial administrations in intermediate and higher doses. The Morf10 and Met5,7 treatments promoted cell cycle stasis, but did not significantly interfere with the growth of Ehrlich's ascites tumor.
Resumo
Ketoprofen, a nonsteroidal anti-inflammatory drug (NSAID) has proven to exert anti-inflammatory, anti-proliferative and anti-angiogenic activities in both neoplastic and non-neoplastic conditions. We investigated the effects of this compound on tumor development in Swiss mice previously inoculated with Ehrlich tumor cells. To carry out this study the solid tumor was obtained from cells of the ascites fluid of Ehrlich tumor re-suspended in physiological saline to give 2.5x106 cells in 0.05mL. After tumor inoculation, the animals were separated into two groups (n = 10). The animals treated with ketoprofen 0.1µg/100µL/animal were injected intraperitoneally at intervals of 24h for 10 consecutive days. Animals from the control group received saline. At the end of the experiment the mice were killed and the tumor removed. We analyzed tumor growth, histomorphological and immunohistochemical characteristics for CDC47 (cellular proliferation marker) and for CD31 (blood vessel marker). Animals treated with the ketoprofen 0.1µg/100µL/animal showed lower tumor growth. The treatment did not significantly influence the size of the areas of cancer, inflammation, necrosis and hemorrhage. Moreover, lower rates of tumor cell proliferation were observed in animals treated with ketoprofen compared with the untreated control group. The participation of ketoprofen in controlling tumor malignant cell proliferation would open prospects for its use in clinical and antineoplasic therapy.(AU)
O cetoprofeno é uma droga anti-inflamatória não esteroidal (NSAID), que exerce efeito anti-inflamatório, antiproliferativo e antitumoral em condições neoplásicas e não neoplásicas. Foram investigados os efeitos desse composto sobre o desenvolvimento tumoral de camundongos Swiss previamente inoculados com células do tumor de Ehrlich. Para realização deste estudo, o tumor sólido foi obtido a partir de células do fluido ascítico do tumor de Ehrlich suspendido em solução salina fisiológica para se obter 2,5x106 de células em 0,05mL. Após a inoculação do tumor, os animais foram separados em dois grupos (n = 10). Os animais do grupo tratado receberam cetoprofeno 0,1μg/100μL/animal por via intraperitoneal, em intervalos de 24 horas durante 10 dias consecutivos, e o controle 100µL de solução salina. No final do experimento, os animais foram sacrificados, e o tumor removido. Foram analisados o crescimento do tumor e as características histomorfológicas e imunoistoquímicas para CDC47 (marcador de proliferação celular) e para CD31 (marcador de vasos sanguíneos). Os animais tratados com o cetoprofeno 0,1μg/100μL/animal apresentaram menor crescimento do tumor. O tratamento não influenciou significativamente o tamanho das áreas de neoplasia, inflamação, necrose e hemorragia. Em contraste, uma menor taxa de proliferação das células neoplásicas foi observada nos animais tratados com cetoprofeno em comparação com o grupo controle. A participação do cetoprofeno em controlar a proliferação de células neoplásicas abre perspectivas para sua utilização em terapia clínica antineoplásica.(AU)
Assuntos
Animais , Ratos , Cetoprofeno/administração & dosagem , Neoplasias/veterinária , Proliferação de Células , Antineoplásicos , Inflamação , Conduta do Tratamento Medicamentoso , CamundongosResumo
A esquizofrenia é uma desordem psiquiátrica de origem multifatorial que acomete cerca de 1% da população mundial. Estudos epidemiológicos indicam menor incidência de câncer em pacientes esquizofrênicos. Além de um importante componente genético, aspectos ambientais estão relacionados ao aparecimento da condição, sendo a infecção materna durante a prenhez um dos fatores de risco. Neste estudo foi avaliado o crescimento tumoral em animais submetidos ou não a modelo murino de esquizofrenia, fundamentado na influência permanente de infecção pré-natal sobre a prole de camundongos, em um período com efeitos que simulam a esquizofrenia. Os parâmetros avaliados foram o volume neoplásico, histopatologia, atividade proliferativa tumoral, vascularização, matriz extracelular e expressão de COX-2 por leucócitos infiltrantes. Foram utilizadas as progênies de camundongos Swiss, totalizando 54 animais, machos e fêmeas. As matrizes foram inoculadas ou não ao nono dia de prenhez com Poli-I:C. Aos 2 meses de idade suas progênies receberam subcutaneamente suspensão contendo 5,0 x 106 células do tumor de Ehrlich. Após 30 dias de inoculação, os tumores foram excisionados, mensurados e submetidos à avaliação histológica, histoquímica e imuno-histoquímica. Houve diferença estatisticamente significante relativa ao volume tumoral, porém sem diferença quanto à atividade proliferativa de suas células, sendo os tumores presentes em animais do grupo experimental em média menores, com maior densidade microvascular, maior deposição de matriz extracelular e menor expressão de COX-2. Tais achados corroboram os relatos de restrição ao crescimento tumoral em pacientes esquizofrênicos, reforçando a ação do Poli-I:C no nono dia de prenhez como modelo desse transtorno psiquiátrico. Particularmente, as alterações na quantidade e padrão de deposição de elementos da matriz extracelular podem alterar as interações mecânicas e potencialmente a expressão gênica nesse microambiente, interferindo na sinalização celular e na evolução tumoral. Também a resposta inflamatória apresenta sinais de modulação, com uma menor expressão leucocitária de COX-2 no microambiente tumoral no grupo experimental, interferindo potencialmente na sobrevida das células tumorais. Por fim, merece referência a presença de alterações também na composição da matriz extracelular em regiões encefálicas no paciente esquizofrênico, sugerindo uma participação ativa da matriz extracelular na modulação de diferentes processos no paciente esquizofrênico.
Schizophrenia is a psychiatric disorder of multifactorial origin, which affects about 1% of the world population. Epidemiological studies indicate a lower incidence of cancer in schizophrenic patients. In addition to an important genetic component, environmental aspects are related to the onset of the condition, and maternal infection during pregnancy is one of the risk factors. In this study the tumor growth was evaluated in animals submitted or not to the murine model of schizophrenia, based on the permanent influence of prenatal infection on the offspring of mice, in a period with effects that simulate schizophrenia. The parameters evaluated were neoplastic volume, histopathology, tumor proliferative activity, vascularization, extracellular matrix and expression of COX-2 by infiltrating leukocytes. Progenies of swiss mice were used, totalizing 54 animals, males and females. The matrices were or were not inoculated on the ninth day of pregnancy with Poly-I: C. At 2 months of age, their progenies received subcutaneously suspension containing 5.0 x 106 Ehrlich tumor cells. After 30 days of inoculation the tumors were excised, measured and submitted to histological, histochemical and immunohistochemical evaluation. There was a statistically significant difference regarding the tumor volume, but no difference in the proliferative activity of the cells. Tumors were present in animals of the experimental group, on average, with a higher microvascular density, higher deposition of extracellular matrix and lower expression of COX-2. These findings corroborate the reports of restriction to tumor growth in schizophrenic patients, reinforcing the action of Poli-I: C on the ninth day of pregnancy as a model of this psychiatric disorder. Particularly changes in the amount and pattern of deposition of extracellular matrix elements may alter the mechanical interactions and potentially the gene expression in this microenvironment, interfering with cell signaling and tumor evolution. Also, the inflammatory response shows signs of modulation, with a lower leukocyte expression of COX-2 in the tumor microenvironment of the experimental group, potentially interfering in tumor cell survival. Finally, the presence of alterations in the composition of the extracellular matrix in brain regions in the schizophrenic patient deserve mention, suggesting an active participation of the extracellular matrix in the modulation of different processes in the schizophrenic patient.
Resumo
It is estimated that venoms of marine cone snails (genus Conus) contain more than 100,000 different small peptides with a wide range of pharmacological and biological actions. Some of these peptides were developed into potential therapeutic agents and as molecular tools to understand biological functions of nervous and cardiovascular systems. In this study we examined the cytotoxic and anticancer properties of the marine vermivorous cone snail Conus vexillum (collected from Hurgada and Sharm El-Shaikh, Red Sea, Egypt) and suggest the possible mechanisms involved. The in vitro cytotoxic effects of Conus venom were assessed against Ehrlichs ascites carcinoma (EAC) cells. Results Conus venom treatment resulted in concentration-dependent cytotoxicity as indicated by a lactate dehydrogenase leakage assay. Apoptotic effects were measured in vivo by measuring levels of reactive oxygen species and oxidative defense agents in albino mice injected with EAC cells. Conus venom (1.25 mg/kg) induced a significant increase ( p < 0.05) in several oxidative stress biomarkers (lipid peroxidation, protein carbonyl content and reactive nitrogen intermediates) of EAC cells after 3, 6, 9 and 12 hours of venom injection. Conus venom significantly reduced ( p < 0.05) the activities of oxidative defense enzymes (catalase and superoxide dismutase) as well as the total antioxidant capacity of EAC cells, as evidenced by lowered levels of reduced glutathione.Conclusions These results demonstrate the cytotoxic potential of C. vexillum venom by inducing oxidative stress mediated mechanisms in tumor cells and suggest that the venom contains novel.
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Animais , Camundongos , Carcinoma/complicações , Venenos de Moluscos , Venenos/toxicidade , Camundongos/fisiologia , CaramujosResumo
PURPOSE: To demonstrate the irreversible poisoning action of the acetone cyanohydrin (AC) in malignant cells. METHODS: Thirty male Swiss mice were inoculated with 1x10³ Ehrlich tumor (ET) cells. The mice were divided into three groups (n=10): CG (saline); ACG1 (1.864 mg/Kg of AC) and ACG2 (2.796 mg/Kg of AC), treated every 48 hours from day 3 until day 13. On day 15 the mice were euthanized and the number of viable cells in ascites was determined. In the meantime, ET cells were incubated with AC (0.5, 1.0, 2.0 μg/mL). Cell viability and percentage of growth inhibition (PGI) were checked after one, two, three, four, 18 and 24 hours. RESULTS: There was reduction in volume and number of viable cells in ACG1 and ACG2 compared to CG. In ACG1 one of the animals did not present ascites. In ACG2 two mice did not present ascites and in CG none of the mice present ascites. The action of AC was dose and time dependent and there was no significant difference among the three doses. CONCLUSION: The acetone cyanohydrin promoted reduction of the tumor and also prevented tumor development in 20% of the treated animals.(AU)
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Animais , Ratos , Acetona/análise , Neoplasias/patologia , Ratos/classificação , AntineoplásicosResumo
It is estimated that venoms of marine cone snails (genus Conus) contain more than 100,000 different small peptides with a wide range of pharmacological and biological actions. Some of these peptides were developed into potential therapeutic agents and as molecular tools to understand biological functions of nervous and cardiovascular systems. In this study we examined the cytotoxic and anticancer properties of the marine vermivorous cone snail Conus vexillum (collected from Hurgada and Sharm El-Shaikh, Red Sea, Egypt) and suggest the possible mechanisms involved. The in vitro cytotoxic effects of Conus venom were assessed against Ehrlichs ascites carcinoma (EAC) cells. Results Conus venom treatment resulted in concentration-dependent cytotoxicity as indicated by a lactate dehydrogenase leakage assay. Apoptotic effects were measured in vivo by measuring levels of reactive oxygen species and oxidative defense agents in albino mice injected with EAC cells. Conus venom (1.25 mg/kg) induced a significant increase ( p < 0.05) in several oxidative stress biomarkers (lipid peroxidation, protein carbonyl content and reactive nitrogen intermediates) of EAC cells after 3, 6, 9 and 12 hours of venom injection. Conus venom significantly reduced ( p < 0.05) the activities of oxidative defense enzymes (catalase and superoxide dismutase) as well as the total antioxidant capacity of EAC cells, as evidenced by lowered levels of reduced glutathione.Conclusions These results demonstrate the cytotoxic potential of C. vexillum venom by inducing oxidative stress mediated mechanisms in tumor cells and suggest that the venom contains novel.(AU)
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Animais , Camundongos , Carcinoma/complicações , Venenos/toxicidade , Venenos de Moluscos , Camundongos/fisiologia , CaramujosResumo
O tumor de Ehrlich (TE) foi descrito inicialmente, como adenocarcinoma mamário de camundongos, desenvolvendo-se na forma ascítica ou sólida a partir de sucessivos transplantes no peritônio ou tecido subcutâneo destes animais. O tumor ascítico de Ehrlich (TAE) tem sido utilizado como um tumor transplantável para o desenvolvimento de pesquisas relacionadas à oncologia. Estudos tem demonstrado que o desenvolvimento de TAE resulta no estímulo de células citotóxicas, como os linfócitos T e células Natural Killer (NK), mediadas principalmente por macrófagos. Os macrófagos e as células dendríticas (DCs), podem induzir a síntese da enzima indoleamina 2,3 dioxigenase (IDO) em tecidos tumorais, via ligação das moléculas co-estimuladoras B7-1 e B7-2, presentes nestas células, com a molécula CTLA-4 (antígeno 4 associado a linfócitos T citotóxicos), presente em linfócitos T reguladores CD4+ CD25+. A IDO é uma enzima que degrada o aminoácido essencial triptofano, processo que além de levar à privação do mesmo no microambiente celular, gera metabólitos que impedem a ativação e proliferação de linfócitos T e, consequentemente, mecanismos a eles associados como os de rejeição podem ser seriamente comprometidos. Mediante o exposto e pela presença de células imunológicas que expressam IDO no microambiente do tumor ascítico de Ehrlich, este trabalho teve como objetivo verificar a expressão da IDO após o bloqueio da interação B7/CTLA-4 por meio da citometria de fluxo. De acordo com as análises realizadas, os resultados demostraram que houve redução de 4,9% para 2,53% na expressão da enzima IDO. Em face dos resultados, parece plausível sugerir que o bloqueio desta via de ligação foi eficaz na redução dos níveis de atividade da IDO, o que poderia restaurar a capacidade de resposta dos linfócitos T contra as células tumorais. Nesta perspectiva sobre a IDO como mediadora no controle do escape imune feito pelas células tumorais, tais resultados podem colaborar para modulação desta enzima no microambiente tumoral.
The Ehrlich tumor (TE) was first described, as breast adenocarcinoma of mice. The TE develops in ascitic or solid form from successive transplantations in the peritoneum or subcutaneous tissue of these animals. The Ehrlich ascites tumor (TAE) has been used as a transplantable tumor for the development of research related to oncology. Studies have shown that the development of TAE results in stimulation of cytotoxic cells, such as T lymphocytes and Natural Killer cells (NK), mediated mainly by macrophages. Macrophages and dendritic cells (DCs) in tumor tissues, via co-stimulation of molecules B7-1 and B7-2, present in these cells, toghether with the CTLA-4 (Cytotoxic T-Lymphocyte-Associated antigen 4) molecule, present on regulatory T CD4 + CD25 + lymphocytes , may induce the synthesis of indoleamine 2, 3 dioxygenase (IDO). IDO is an enzyme that catabolizes the essential amino acid tryptophan, impairing activation and proliferation of T lymphocytes and consequently, compromising mechanisms associated with them such as rejection. Considering the presence of immune cells in the tumor microenvironment Ehrlich ascites that express IDO, this study aimed to verify the expression of IDO after the blockade of interaction B7/CTLA-4 by flow cytometry. Results demonstrated that there was a reduction of 4.9% to 2.53%in the expression of IDO. Given the results, it seems plausible to suggest that blocking this binding via was effective in reducing the levels of expression of IDO, which could restore the responsiveness of T cells against tumor cells. In this perspective on the IDO as a mediator in the control of immune escape made by tumor cells, these results may collaborate for modulation of this enzyme in the microenvironment.
Resumo
A pesquisa para o diagnóstico precoce, prevenção e novos tratamentos do câncer é um dos principais desafios da medicina atual e os modelos tumorais in vivo são imprescindíveis para esse fim. Técnicas de imagem, como a ultrassonografia, auxiliam a obter dados mais precisos e diminuir o número de animais para obter resultados estatisticamente significativos. O carcinoma de Ehrlich é um dos modelos mais usados, mas não existem descrições ultrassonográficas dele. Nesse trabalho, foram realizados exames ultrassonográficos seriados, em modo-B e Doppler, em carcinomas sólidos de Ehrlich (ESC) inoculados em camundongos. A partir das medidas obtidas por ultrassom, foram analisados os padrões de crescimento e os tumores foram separados em dois grupos dependendo da taxa específica de crescimento (SGR). Foram comparadas as características ultrassonográficas da capsula, margens, ecotextura, distribuição e quantidade de fluxo e os índices Doppler, Índice de Resistividade (IR) e Índice de Pulsabilidade (IP), entre os grupos. Os ESCs apresentaram-se como tumores com padrões de crescimento variáveis; uma capsula detectável por ultrassonografia, mas que pode apresentar descontinuidade em alguns casos; fluxo detectável na maioria dos exames; e que podem apresentam um foco de necrose central ou vários focos de necrose separados. Conclui-se que os tumores que apresentam alta vascularização tendem a ter alta SGR enquanto os que apresentam ausência de fluxo e ecotextura homogênea estão correlacionados com baixa SGR. O estudo também demonstrou que as alterações e mudanças nos vasos tumorais se encontram refletidas nos índices Doppler, apresentando IR e IP significativamente menores as dos vasos extratumorais.
The research to prevent cancer, diagnose early, and find new therapies is one of the main challenges of current medicine, and in vivo tumor models are essential for this aim. Imaging techniques, such as ultrasound, assists the research by helping to obtain data that are more accurate and to reduce the number of animals necessary to obtain statistically significant results. Ehrlich carcinoma is one of the most widely used models but it has not an ultrasonographic description. In this study, serial ultrasound examinations were performed, in B-mode and Doppler, on Ehrlich solid carcinomas (ESC) inoculated in mice. From the measurements obtained by ultrasound, the growth patterns were analyzed and the tumors were separated in two groups depending on the specific growth rate (SGR). Ultrasonographic characteristics of capsule, margins, echotexture, vascular flow, and Doppler indices of Resistivity Index (RI) and Pulsability Index (PI) were compared between groups. ESC presents variable growth patterns; a capsule detectable by ultrasound, which sometimes present discontinuity; detectable flow in most of the exams; and the possibility of a central focus of necrosis or several necrosis focuses separated by tissue. In conclusion, tumors with high vascularization tend to have high SGR, while tumors that presented homogeneous echotexture and absence of blood flow tend to have lower SGR. The study also showed that changes in tumor vessels are reflected in Doppler indices, with significantly lower RI and PI, than normal vessels.
Resumo
A proteína Kint3-4 (PKint3-4), codificadora da angiostatina, é reconhecida por sua potencialidade antiangiogênica. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da proteína Kint3-4 no crescimento do tumor sólido de Ehrlich. Para isso, foram analisados a curva de desenvolvimento tumoral, o índice apoptótico e a dosagem de hemoglobina, a fim de se avaliar a angiogênese, em 20 camundongos Swiss fêmeas, inoculadas com o tumor sólido de Ehrlich em seus coxins plantares. Os resultados demonstraram a participação de PKint3-4 na indução à apoptose de células neoplásicas, na diminuição da concentração de hemoglobina e, principalmente, na diminuição do desenvolvimento tumoral. Sugere-se que a ação antitumoral, determinada pela sequência proteica utilizada, possa estar associada ao papel antiangiogênico da angiostatina, que indiretamente aumentaria o índice apoptótico das células neoplásicas, e/ou a uma ação direta da proteína Kint3-4 sobre essas células, estimulando-as a sofrerem apoptose.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Camundongos , Camundongos/fisiologia , Antígenos de Neoplasias/administração & dosagem , Proteínas , Angiostatinas , Hemoglobinas/análise , Células Tumorais CultivadasResumo
Avaliou-se os aspectos comportamentais, hematológicos, perfis renal e hepático e histopatológico de camundongos com carcinoma de Ehrlich submetidos aos tratamentos com cisplatina, acupuntura e Euphorbia tirucalli L. Foram utilizados 25 camundongos albinos swiss, fêmeas, com 60 dias de idade e pesos entre 25 - 35 g. Todos foram mantidos em gaiolas de polipropileno, sob condições controladas de iluminação (ciclo de 12 horas claro/escuro), temperatura 22oC variando 2oC para mais ou menos e água ad libitum. Os animais foram distribuídos em Grupos: Grupo 1 Controle negativo - 1ml de Soro Fisiológico 0,9%; Grupo 2 Padrão - 2,5mg/kg de Cisplatina; Grupo 3 - Pré-tratamento com acupuntura + 2mg/kg da Euphorbia tirucalli; Grupo 4 Acupuntura; Grupo 5 - Acupuntura + 2mg/kg Euphorbia tirucalli. Todos tiveram administração por via oral. O Grupo que recebeu o Pré-tratamento (Grupo 3) passou por um período de adaptação de oito dias e os demais de 15 dias. Posteriormente ao período de adaptação, foram inoculados suspensões de células do Carcinoma de Erhlich e após 48 horas iniciou-se os diferentes tratamentos, sendo estes, administrados uma vez ao dia durante oito dias. No nono dia, os camundongos foram pesados, eutanasiados por deslocamento cervical e necropsiados para avaliação histológica e o tumor extirpado. Os acupontos utilizados foram B10, VB30 e F3. As reações comportamentais excitatórias, estimulantes e depressoras dos animais foram observadas diariamente e anotadas em um caderno de acompanhamento. A avaliação nutricional foi feita a partir da pesagem diária dos animais e das sobras da ração. Os animais do Grupo G3 apresentou uma diminuição na agressividade, dos Grupos G4 e G5 mantiveram o comportamento natural da espécie, G2 foi observado uma intensa prostração, apatia, piloereção e pelos sem brilho, enquanto que o controle negativo (G1) apresentaram sintomas similares, porém menos intensos. Os animais do Grupo G2 ingeriram uma quantidade maior de alimento, no entanto tiveram um baixo ganho de peso quando comparado ao Grupo controle negativo. Observou-se que os animais dos Grupos G3, G4 e G5 tiveram um aumento de peso quando comparado ao Grupo controle negativo. No entanto, os camundongos dos Grupos G3 e G5 consumiram uma quantidade menor de alimentos, enquanto que os animais do G4 ingeriram uma quantidade maior de alimento. No hemograma e perfis renal e hepático apenas o HCM, CHCM, Leucócitos, Segmentados, Linfócitos, Monócitos e creatinina foram estatisticamente significativos entre os Grupos. O peso dos órgãos (Rins, Baço, Fígado) e do Tumor foram significativos e as principais alterações histopatológicas foram pneumonia, hepatite, necrose, degeneração gordurosa e hiperplasia da polpa branca. Conclui-se que de acordo com os resultados a cisplatina demonstrou ser o tratamento mais eficaz em camundongos com carcinoma de Erhlich quanto a redução do tumor. No entanto, a utilização da acupuntura e Euphorbia tirucalli L. em camundongos com carcinoma de Ehrlich, provavelmente, pelas ações terapêuticas do equilíbrio das energias Yin e Yang que circulam nos meridianos e dos efeitos antitumorais da planta proporcionaram uma estabilização do quadro comportamental, nutricional e uma resposta imunológica o que demonstrou que o melhor tratamento foi o da associação da acupuntura com o fitoterápico. Assim, sugere-se a associação da acupuntura e da Euphorbia tirucalli L. como tratamentos coadjuvantes em pacientes com carcinoma.
It was evaluated aspects behavioral, hematological, renal and hepatic and histopathological of mice with Ehrlich carcinomas submitted to treatment with cisplatin, acupuncture and Euphorbia tirucalli L. We used 25 swiss albino mice, females, 60 days old, weighing 25 35g. All were kept in polypropylene cages under controlled lighting conditions (12-h light/dark cycle), temperature 22oC varying by 2oC for more or less, and water ad libitum. The animals were distributed in Groups: Group 1 - Negative control - 1ml of Physiological Serum 0,9%; Group 2 - Positive control - 2.5mg / kg Cisplatin; Group 3 - Pre-treatment with acupuncture + 2mg / kg of Euphorbia tirucalli; Group 4 - Acupuncture; Group 5 - Acupuncture + 2mg / kg Euphorbia tirucalli. All had oral administration. The group that received the pre-treatment (Group 3) underwent an adaptation period of eight days and the remainder of 15 days. After the adaptation period, suspensions of Erhlich's Carcinoma cells were inoculated and after 48 hours the different treatments were started, and these were administered once a day for eight days. On the ninth day, the mice were weighed, euthanized by cervical dislocation and necropsied for histological evaluation and the tumor excised. The acupoints used were BL10, GB30 and LR3. The excitatory, stimulatory and depressant behavioral reactions of the animals were observed daily and recorded in a follow-up notebook. The nutritional evaluation was done from the daily weighing of the animals and the leftovers of the ration. The animals of the Group G3 presented a decrease in the aggressiveness, of Groups G4 and G5 maintained the natural behavior of the species, G2 (positive control) was observed intense prostration, apathy, piloerection and nonluster hairs, while the negative control (G1) presented similar but less intense symptoms. The animals in Group G2 ate a greater amount of food, however they had a low weight gain when compared to the negative Control Group. It was observed that the G3, G4 and G5 Groups had an increase in weight when compared to the negative control Group. However, mice in Groups G3 and G5 consumed less food, while G4 animals ingested more food. In the hemogram and renal and hepatic profiles only HCM, CHCM, Leukocytes, Segmented, Lymphocytes, Monocytes and creatinine were statistically significant between Groups. The weight of organs (Kidneys, Spleen, Liver) and Tumor were significant and the main histopathological changes were pneumonia, hepatitis, necrosis, fat degeneration and white pulp hyperplasia. It is concluded that according to the results cisplatin has been shown to be the most effective treatment in mice with Erhlich's carcinoma for tumor reduction. However, the use of acupuncture and Euphorbia tirucalli L. in mice with Ehrlich carcinoma probably due to the therapeutic actions of the balance of the Yin and Yang energies circulating in the meridians and the antitumor effects of the plant provided a stabilization of the behavioral, nutritional and an immune response which demonstrated that the best treatment was the association of acupuncture with the herbal remedy. Thus, the association of acupuncture and Euphorbia tirucalli L. is suggested as adjuvant treatments in patients with carcinoma.
Resumo
Apesar do desenvolvimento de novas técnicas terapêuticas, o câncer ainda é uma das doenças que mais causa mortes no mundo. Paralelamente, a redução da qualidade de vida do paciente oncológico, tanto pelo progredir da doença quanto pelos efeitos colaterais dos tratamentos convencionais, é um fato relevante. Assim sendo, as terapias complementares têm sido de grande valia no auxílio ao tratamento de pacientes oncológicos. Resultados prévios sobre o papel do medicamento homeopático Carbo animalis (CA) na resposta imune de camundongos portadores de tumor de Ehrlich indicaram modificações na migração de macrófagos e células B1 (progenitoras) para sítio primário do tumor, implicando mudanças na expressão de sintomas pelos animais. Contudo, a literatura sobre esse tema é ainda rara e os mecanismos de ação envolvidos, obscuros. Neste trabalho, avaliamos parâmetros morfofuncionais de macrófagos RAW 264.7, em cocultura com células 4T1 (adenocarcinoma murino), após o tratamento com CA em diferentes potências (6cH, 30cH e a mistura de ambas, chamada de MIX). Assim, a morfologia, a produção de óxido nítrico e a produção de citocinas/quimiocinas (IL1-, IL-1, IFN-, IL-10, IL-6, VEGF-A, TNF-, RANTES/CCL5, GM-CSF, IL12-p40, IL12-p70, MIP-1 /CCL4, MCP-1/CCL2) foram analisadas. A cocultura de macrófagos e células 4T1 exibiu redução do número de células por poço, após seis horas de incubação, em comparação à monocultura de macrófagos, sugerindo que as células 4T1 provavelmente exercem papel inibitório sobre os mesmos. Esse padrão de interação foi parcialmente revertido pelo tratamento com CA 6cH. O tratamento com MIX, ao contrário, reduziu ainda mais o número de células por poço, sugerindo certa citotoxicidade. Em paralelo, notou-se aumento significativo na produção de IL12-p40 apenas nas células tratadas com CA 6cH, corroborando os resultados obtidos anteriormente in vivo. Os dados obtidos nesse estudo indicam a atividade imunomoduladora do CA sobre macrófagos presentes no microambiente tumoral, com ênfase na produção de IL12-p40 e ainda evidenciam a importância da diluição na especificidade dos efeitos. O papel citotóxico do MIX ainda merece estudos futuros.
Despite the development of new therapeutic techniques, cancer is still a world's most deadly diseases. At the same time, quality of life of cancer patient for the progression of the disease or for the side effects of conventional treatments, is a relevant fact. In addition, complementary therapies have been of a great value in helping treatment of cancer patients. Previous results on the effect of homeopathic medicine Carbo animalis (CA) in the immune response of mice with Ehrlich tumor indicated changes in macrophage migration and B1 (progenitor) cells to the primary tumor site, implying changes in the expression of symptoms by animals. However, the literature on this subject still rare and the mechanisms of action still obscure. In this work, we evaluated morphological and functional parameters of RAW 264.7 macrophages in co-culture with cells 4T1 (murine adenocarcinoma) after treatment with CA in different potencies (6cH, 30cH and the mixture of both, called MIX). Thus, the morphology, production of nitric oxide and the production of cytokines / chemokines (IL1-, IL-1, IFN-, IL-10, IL-6, VEGF-A, TNF-, RANTES / CCL5, GM-CSF, IL12- p40, IL12-p70, MIP-1 / CCL4, MCP-1 / CCL2) were analyzed. Co-culture of macrophages and 4T1 cells showed a reduction in the number of cells per well after six hours of incubation in compared to macrophage monoculture, suggesting that 4T1 cells probably play an inhibitory role on them. This pattern of interaction was partially reversed by treatment with CA 6cH. Treatment with MIX, reduced the number of cells per well, suggesting cytotoxicity. In parallel, a significant increase in IL12-p40 production was noted only in cells treated with CA 6cH, corroborating with the results obtained previously in vivo. The data obtained in this study indicate a immunomodulatory action on macrophages present in the tumor microenvironment, with emphasis on the production of IL-12-p40 and also evidence the importance of dilution in the specificity of the effects. The MIX´s cytotoxic still deserves futures studies to be better elucidated.
Resumo
Eletroquimioterapia é uma modalidade de tratamento local contra o câncer em que a administração de quimioterápicos não penetrantes à membrana plasmática é associada à aplicação de pulsos elétricos com parâmetros bem estabelecidos, que abrem poros na membrana plasmática e facilitam a entrada destes fármacos nas células, aumentando sua citotoxicidade e reduzindo efeitos colaterais. A avaliação dos efeitos da eletroquimioterapia sobre o desenvolvimento do tumor sólido de Ehrlich em camundongos Swiss neste trabalho teve como objetivo testar o uso in vivo do aparelho eletroporador desenvolvido pelo Departamento de Engenharia Elétrica da Escola de Engenharia da UFMG para futuramente aplicar a técnica no Hospital Veterinário da Escola de Veterinária da UFMG. Para tanto, foram utilizados 40 camundongos fêmeas da linhagem Swiss, nos quais foram inoculadas células de tumor de Ehrlich, para o desenvolvimento do tumor na forma sólida. Após 21 dias, os camundongos foram submetidos ao protocolo de tratamento específico e 17 dias depois foram eutanasiados e seus tumores coletados para análise histopatológica. A eletroquimioterapia induziu perda de peso discreta e uma resposta inflamatória no tumor que não foi observada nos outros grupos. O grupo tratado com bleomicina apenas apresentou maior porcentagem de necrose. Ambos os grupos apresentaram menor índice de proliferação celular. A partir desse estudo pode-se concluir que o tratamento sob anestesia foi bem tolerado pelos animais e que o aparelho eletroporador desenvolvido pela Escola de Engenharia da UFMG é adequado para utilização em um protocolo de eletroquimioterapia.
Electrochemotherapy is a local anticancer treatment in which non-permeant chemotherapeutic drugs are associated with electric pulses of well-established parameters. The electric pulses cause pores to open on the plasma membrane and facilitate drug transport, enhancing cytotoxicity and reducing side effects. Assessment of electrochemotherapy effects on Ehrlich solid tumor development in this work aims to evaluate in vivo usage of the electroporator device developed by Electric Engineering Department of Escola de Engenharia of UFMG, so it can be used on future procedures on Hospital Veterinário of Escola de Veterinária of UFMG. Therefore, 40 Swiss mice were inoculated with Ehrlich tumor cells, and developed the tumor in solid form. After 21 days, mice were subjected to specific treatment protocols and 17 days later they were euthanized and the tumors collected for histopathology analysis. Electrochemotherapy induced discrete weight loss and an inflammatory response in the tumor, which was not seen on the other treatment groups. Bleomycin alone induced necrosis. Both groups showed lower cellular proliferation rates. From this study, it was concluded that the animals tolerated well electrochemotherapy treatment under anesthesia and the electroporator device developed by Escola de Engenharia of UFMG was adequate when used in an electrochemotherapy protocol.
Resumo
As relações bidirecionais entre o Sistema Nervoso e o Sistema Imune são relevantes para a manutenção da homeostase do organismo. Estudos realizados em nosso laboratório mostraram que 14 dias de coabitação com um conspecífico doente (injetado com células do tumor de Ehrlich-TAE) produziu mudanças comportamentais, endócrinas e imunológicas. Este estudo analisa os efeitos da convivência com um animal portador de tumor de Ehrlich em camundongos OVA sensibilizados e desafiados sobre a resposta alérgica pulmonar. Pares de camundongos machos foram separados em três grupos: naïve, controle e experimental. Os animais do grupo naïve não foram manipulados sendo utilizados para a avaliação de parâmetros basais. Um animal de cada par dos grupos experimental e controle foi imunizado com OVA. No dia D(0), os animais imunizados receberam uma dose reforço de OVA. No dia D(0) os camundongos do grupo experimental que não foram manipulados foram inoculados com 5x106 células de tumor de Ehrlich; seus companheiros de gaiola moradia foram designados CAD (companheiro do animal doente). Os camundongos não perturbados de cada par do grupo controle foram tratados (i.p.) em D(0) com 0,9% de NaCl, sendo designados CAS (companheiro do animal saudável). O desafio intranasal com OVA foi realizado nos camundongos CAS e CAD nos dias D(12) e D(13); colheram-se o sangue e os tecidos no dia D(14). Em comparação com o grupo CAS, os camundongos do grupo CAD apresentaram 14 dias após a coabitação: (1) aumento do número de eosinófilos e neutrófilos no LBA, (2) diminuição na contagem de células da medula óssea, (3) aumento do níveis de IL-4 e IL-5 e diminuição de IL-10 e INF- no sobrenadante do LBA, (4) aumento dos níveis de IgG1-OVA, diminuição dos níveis de IgG2a-OVA e nenhuma alteração na IgE-OVA no sangue periférico, (5) aumento na expressão de ICAM-1, VCAM-1 e L-selectina em granulócitos do LBA, (6) diminuição da reatividade da traquéia à metacolina in vitro, (7) aumento da desgranulação de mastócitos, (8) nenhuma alteração nos níveis plasmáticos de corticosterona, (9) aumento dos níveis de adrenalina e noradrenalina plasmáticas, (10) diminuição no tempo de permanência e entradas nos braços abertos do labirinto em cruz elevado, (11) diminuição da expressão de IL-6 no PVN e (12) diminuição da expressão de C-fos no PFC. Estes resultados mostram que a convivência forçada com um animal portador de um tumor ascitico de Ehrlich exacerba a inflamação alérgica pulmonar de camundongos. Eles foram discutidos como decorrentes da estimulação do Sistema Nervoso Autônomo Simpático (SNS) pelo estresse psicológico gerado pela coabitação com o parceiro doente, via liberação de adrenalina e noradrenalina e consequente mudança no perfil de citocinas Th1/Th2 para uma resposta do tipo Th2. Esta alteração seria, provavelmente, um dos mecanismos responsáveis pelo aumento do recrutamento celular para as vias aéreas dos camundongos do grupo CAD.
The bidirectional relationship between the nervous system and the imune system is relevant for homeostatic organism maintenance. Studies from our laboratory showed that 14 days of cohabitation with a sick conspecific (injected with Ehrlich tumor cells-TAE) produced behavioral, endocrinological and immunological changes. This study analyzes the effects of cohabitation with an Ehrlich tumor-bearing animal on ovalbumin (OVA)-induced lung inflammatory response in mice. Pairs of male mice were separate into three groups: naïve, control and experimental. Animals of the naïve group were kept undisturbed being used for assessment of basal parameters. One animal of each experimental and control pair of mice was immunized with OVA. On D(0), these OVA-immunized animals received an OVA booster. At this day (D(0)) the experimental mice that were kept undisturbed were inoculated with 5x106 Ehrlich tumor cells; their immunized cage-mates were then referred as to CSP(companion of sick partner). The undisturbed mice of each control pair were i.p. treated on D(0) with 0.9% NaCl; their sensitized cage-mate were subsequently referred as CHP (companion of health partner). The intranasal OVA challenge was performed on CSP and CHP mice on D(12) and D(13); blood and tissue collection were performed on D(14). Fourteen days after cohabitation, in comparison to the CHP mice, the CSP mice displayed the following: (1) an increased number of eosinophils and neutrophils in the BAL, (2) a decreased bone marrow cell count, (3) increased levels of IL-4 and IL-5 and decreased levels of IL-10 and INF- in the BAL supernatant, (4) increased levels of IgG1-OVA, decreased levels of IgG2a-OVA and no changes in OVA-specific IgE in the peripheral blood, (5) increased expression of ICAM-1, VCAM-1 and L-selectin in the BAL granulocytes, (6) decreased tracheal reactivity to metacholine measured in vitro, (7) increased mast cell degranulation, (8) no changes in plasma corticosterone levels (9) increased levels of plasmatic adrenaline and noradrenaline, (10) decreased time and % of entries on open arms of elevated plus maze, (11) decreased expression of IL-6 on PVN and (12) decreased expression of C-fos on PFC. These results suggest that cohabitation with an Ehrlich tumor bearing mice exacerbates allergic lung inflammatory response in mice. Most probably, the changes observed in CSP mice are a consequence of the psychological stress induced by forced cohabitation with the sick partner. Strong involvement of the sympathetic nervous system through adrenaline and noradrenaline release and a shift of the Th1/Th2 cytokine profile toward a Th2 response were considered to be the mechanisms underlying the cell recruitment to the animal´s airways.