Performance of pacific white shrimp fed probiotics Lactobacillus plantarum and Bacillus spp. in a biofloc system / Desempenho do camarão branco pacífico alimentado com probiótico Lactobacillus plantarum e Bacillus spp. em sistema bioflocos

The present study evaluated the use of the indigenous probiotic Lactobacillus plantarum and commercial probiotic containing Bacillus spp. in the culture of Litopenaeus vannamei in a biofloc system. Shrimp were fed four diets: L. plantarum, Bacillus spp., L. plantarum + Bacillus spp. and feed with no additives. Growth performance, water quality variables, microbiological counting of water and digestive tract of shrimp were determined. The control group and L. plantarum treatment showed better growth performance. The highest feed conversion ratio (FCR) and the lowest survival were obtained in the L. plantarum + Bacillus spp. treatment, which had significantly higher nitrite values. Vibrio spp. counts in the water were lower in the L. plantarum and L. plantarum + Bacillus spp. treatments and were lower in the intestinal tract in the L. plantarum treatment. Lactic acid bacteria (LAB) was higher in the L. plantarum treatment in the water and digestive tract. The count of total heterotrophic bacteria (THB) deferred only among Bacillus spp. and L. plantarum + Bacillus spp. treatment, being higher in the latter group. In Bacillus spp. treatment, no presence of LAB was detected in the water or intestinal tract. We conclude that the use of L. plantarum combined with Bacillus spp. negatively affected survival, FCR and water quality, but that the use of L. plantarum alone reduced the presence of Vibrio spp., even though it did not change the growth performance of L. vannamei.

O presente estudo avaliou o uso do probiótico endógeno Lactobacillus plantarum e do probiótico comercial contendo Bacillus spp. no cultivo de Litopenaeus vannamei em sistema de bioflocos. Camarões foram alimentados com quatro dietas: L. plantarum, Bacillus spp., L. plantarum + Bacillus spp. e ração sem aditivos. Foram avaliados o crescimento, a qualidade da água e contagem microbiológica na água e intestino dos camarões. O controle e o tratamento com L. plantarum apresentaram melhor desempenho de crescimento. O maior fator de conversão alimentar (FCA) e a menor sobrevivência foram obtidas no tratamento L. plantarum + Bacillus spp., apresentando valores de nitrito significativamente elevados. As contagens de Vibrio spp na água foram menores nos tratamentos L. plantarum e L. plantarum + Bacillus spp. e igualmente foram menores no intestino no tratamento com L. plantarum. As contagens de bactérias ácido lácticas (BAL) foram maiores no tratamento L. plantarum na água e no trato intestinal. A contagem de bactérias heterotróficas totais (BHT) diferiu apenas entre os tratamentos Bacillus spp. e L. plantarum + Bacillus spp., sendo maior no último grupo. No tratamento Bacillus spp. não foi detectada presença de BAL na água nem no trato intestinal. Concluímos que o uso de L. plantarum combinado com Bacillus spp. afetou negativamente a sobrevivência, o FCA e a qualidade da água, contudo o uso de L. plantarum isoladamente reduziu a presença de Vibrio spp., embora não tenha alterado o desempenho de crescimento de L. vannamei.

Performance of pacific white shrimp fed probiotics Lactobacillus plantarum and Bacillus spp. in a biofloc system / Desempenho do camarão branco pacífico alimentado com probiótico Lactobacillus plantarum e Bacillus spp. em sistema bioflocos

The present study evaluated the use of the indigenous probiotic Lactobacillus plantarum and commercial probiotic containing Bacillus spp. in the culture of Litopenaeus vannamei in a biofloc system. Shrimp were fed four diets: L. plantarum, Bacillus spp., L. plantarum + Bacillus spp. and feed with no additives. Growth performance, water quality variables, microbiological counting of water and digestive tract of shrimp were determined. The control group and L. plantarum treatment showed better growth performance. The highest feed conversion ratio (FCR) and the lowest survival were obtained in the L. plantarum + Bacillus spp. treatment, which had significantly higher nitrite values. Vibrio spp. counts in the water were lower in the L. plantarum and L. plantarum + Bacillus spp. treatments and were lower in the intestinal tract in the L. plantarum treatment. Lactic acid bacteria (LAB) was higher in the L. plantarum treatment in the water and digestive tract. The count of total heterotrophic bacteria (THB) deferred only among Bacillus spp. and L. plantarum + Bacillus spp. treatment, being higher in the latter group. In Bacillus spp. treatment, no presence of LAB was detected in the water or intestinal tract. We conclude that the use of L. plantarum combined with Bacillus spp. negatively affected survival, FCR and water quality, but that the use of L. plantarum alone reduced the presence of Vibrio spp., even though it did not change the growth performance of L. vannamei.(AU)

O presente estudo avaliou o uso do probiótico endógeno Lactobacillus plantarum e do probiótico comercial contendo Bacillus spp. no cultivo de Litopenaeus vannamei em sistema de bioflocos. Camarões foram alimentados com quatro dietas: L. plantarum, Bacillus spp., L. plantarum + Bacillus spp. e ração sem aditivos. Foram avaliados o crescimento, a qualidade da água e contagem microbiológica na água e intestino dos camarões. O controle e o tratamento com L. plantarum apresentaram melhor desempenho de crescimento. O maior fator de conversão alimentar (FCA) e a menor sobrevivência foram obtidas no tratamento L. plantarum + Bacillus spp., apresentando valores de nitrito significativamente elevados. As contagens de Vibrio spp na água foram menores nos tratamentos L. plantarum e L. plantarum + Bacillus spp. e igualmente foram menores no intestino no tratamento com L. plantarum. As contagens de bactérias ácido lácticas (BAL) foram maiores no tratamento L. plantarum na água e no trato intestinal. A contagem de bactérias heterotróficas totais (BHT) diferiu apenas entre os tratamentos Bacillus spp. e L. plantarum + Bacillus spp., sendo maior no último grupo. No tratamento Bacillus spp. não foi detectada presença de BAL na água nem no trato intestinal. Concluímos que o uso de L. plantarum combinado com Bacillus spp. afetou negativamente a sobrevivência, o FCA e a qualidade da água, contudo o uso de L. plantarum isoladamente reduziu a presença de Vibrio spp., embora não tenha alterado o desempenho de crescimento de L. vannamei.(AU)

In vitro antimicrobial activity of carvacrol against shrimp pathogens and its use as feed additive for the pacific white shrimp / Atividade antimocrobiana in vitro do carbacrol contra patógenos de camarões e seu uso como aditivo alimentar na dieta do camarão-branco-do-pacífico

This study aimed to evaluate the in vitro effect of the phenolic compound carvacrol on different microorganisms of importance in shrimp farming, and it's in vivo effect on zootechnical, immunological and microbiological performance, and resistance of Litopenaeus vannamei challenged with Vibrio parahaemolyticus. In particular, the antimicrobial activity of carvacrol was evaluated in vitro by analysis of the minimum inhibitory concentration (MIC) and by agar diffusion with Gram-negative and Gram-positive bacteria. The in vivo experiment was conducted using different concentrations of carvacrol (1, 3, 4 and 6 mg mL-¹) added to shrimp feed, together with a control diet without carvacrol. After four weeks, zootechnical, immunological and microbiological parameters and resistance of animals challenged with V. parahaemolyticus were evaluated. The MIC of carvacrol was 0.078 mg mL-¹ for Vibrio alginolyticus and Vibrio harveyi, while for the other bacteria, it was 0.156 mg mL-¹ of carvacrol. The greatest halos of inhibition were observed in V. parahaemolyticus and V. harveyi with significant differences demonstrated for the other microorganisms, except Escherichia coli. The in vivo results showed no significant differences among treatments. In conclusion, the antimicrobial activity of carvacrol was confirmed with Gram-negative and Gram-positive bacteria, and it is suggested that its antimicrobial potential is more effective against Vibrio spp. However, the concentrations of carvacrol used in vivo did not affect the parameters evaluated.

O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito in vitro do carvacrol contra diferentes microrganismos de importância na carcinicultura e o seu efeito in vivo no desempenho zootécnico, imunológico, microbiológico e na resistência de Litopenaeus vannamei desafiados com Vibrio parahaemolyticus. A atividade antimicrobiana do carvacrol foi realizada in vitro pela análise da concentração inibitória mínima (CIM) e por difusão em ágar, com bactérias Gram-negativas e Gram-positivas. Para o experimento in vivo foram adicionadas diferentes concentrações do carvacrol (1, 3, 4 e 6 mg mL-¹) na alimentação dos camarões e uma dieta controle. Após quatro semanas, foram avaliados parâmetros zootécnicos, imunológicos, microbiológicos e a resistência dos animais desafiados com V. parahaemolyticus. A CIM do carvacrol para Vibrio alginolyticuse Vibrio harveyi foi de 0,078 mg mL-¹, enquanto nas demais bactérias foi de 0,156 mg mL-¹ de carvacrol. Os maiores halos de inibição foram observados em V. parahaemolyticus e V. harveyie demonstraram diferenças significativas em relação aos demais microrganismos, exceto Escherichia coli. Os resultados in vivo não demonstraram diferenças significativas entre os tratamentos. Em conclusão, a atividade antimicrobiana do carvacrol foi confirmada com bactérias Gram-negativas e Gram-positivas e sugere-se que seu potencial antimicrobiano seja mais eficaz contra Vibrio spp. No entanto, as concentrações de carvacrol utilizadas in vivo não afetaram os parâmetros avaliados.

In vitro antimicrobial activity of carvacrol against shrimp pathogens and its use as feed additive for the pacific white shrimp / Atividade antimocrobiana in vitro do carbacrol contra patógenos de camarões e seu uso como aditivo alimentar na dieta do camarão-branco-do-pacífico

This study aimed to evaluate the in vitro effect of the phenolic compound carvacrol on different microorganisms of importance in shrimp farming, and it's in vivo effect on zootechnical, immunological and microbiological performance, and resistance of Litopenaeus vannamei challenged with Vibrio parahaemolyticus. In particular, the antimicrobial activity of carvacrol was evaluated in vitro by analysis of the minimum inhibitory concentration (MIC) and by agar diffusion with Gram-negative and Gram-positive bacteria. The in vivo experiment was conducted using different concentrations of carvacrol (1, 3, 4 and 6 mg mL-¹) added to shrimp feed, together with a control diet without carvacrol. After four weeks, zootechnical, immunological and microbiological parameters and resistance of animals challenged with V. parahaemolyticus were evaluated. The MIC of carvacrol was 0.078 mg mL-¹ for Vibrio alginolyticus and Vibrio harveyi, while for the other bacteria, it was 0.156 mg mL-¹ of carvacrol. The greatest halos of inhibition were observed in V. parahaemolyticus and V. harveyi with significant differences demonstrated for the other microorganisms, except Escherichia coli. The in vivo results showed no significant differences among treatments. In conclusion, the antimicrobial activity of carvacrol was confirmed with Gram-negative and Gram-positive bacteria, and it is suggested that its antimicrobial potential is more effective against Vibrio spp. However, the concentrations of carvacrol used in vivo did not affect the parameters evaluated.(AU)

O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito in vitro do carvacrol contra diferentes microrganismos de importância na carcinicultura e o seu efeito in vivo no desempenho zootécnico, imunológico, microbiológico e na resistência de Litopenaeus vannamei desafiados com Vibrio parahaemolyticus. A atividade antimicrobiana do carvacrol foi realizada in vitro pela análise da concentração inibitória mínima (CIM) e por difusão em ágar, com bactérias Gram-negativas e Gram-positivas. Para o experimento in vivo foram adicionadas diferentes concentrações do carvacrol (1, 3, 4 e 6 mg mL-¹) na alimentação dos camarões e uma dieta controle. Após quatro semanas, foram avaliados parâmetros zootécnicos, imunológicos, microbiológicos e a resistência dos animais desafiados com V. parahaemolyticus. A CIM do carvacrol para Vibrio alginolyticuse Vibrio harveyi foi de 0,078 mg mL-¹, enquanto nas demais bactérias foi de 0,156 mg mL-¹ de carvacrol. Os maiores halos de inibição foram observados em V. parahaemolyticus e V. harveyie demonstraram diferenças significativas em relação aos demais microrganismos, exceto Escherichia coli. Os resultados in vivo não demonstraram diferenças significativas entre os tratamentos. Em conclusão, a atividade antimicrobiana do carvacrol foi confirmada com bactérias Gram-negativas e Gram-positivas e sugere-se que seu potencial antimicrobiano seja mais eficaz contra Vibrio spp. No entanto, as concentrações de carvacrol utilizadas in vivo não afetaram os parâmetros avaliados.(AU)

Frequency of pathogens in routine bacteriological diagnosis in fish and their antimicrobial resistance / Frequência de patógenos na rotina de diagnóstico bacteriológico em peixes e sua resistência a antimicrobianos

Aquaculture is one of the sectors of animal husbandry with the fastest growth rate. However, the increase in the sector's production chain without proper management can result in factors that favor the development of diseases, especially infectious diseases caused by bacteria. Many factors, such as agriculture or industry resides, improper use of antibiotics in animals or humans, have contributed to increased environmental pressure and the appearance of antibiotic-resistant bacteria, while residues from these drugs can remain in the carcasses and in water a risk to public and environmental health. From that, we identified the bacterial genus/species and their bacterial resistance to antibiotics from samples received from fish disease outbreaks for bacteriosis diagnosis between January 2017 and October 2020. Isolated bacteria were subjected to the Kirby and Bauer sensitivity test for five classes of antibiotics (penicillins, fluoroquinolones, aminoglycosides, amphenicols, and tetracyclines). Of the 181 analyzed outbreaks, 232 bacteria were isolated, including Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp., Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum. Of the 232 bacteria, 40 strains were classified as multidrug resistant (MDR), with Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp., and Edwardsiella spp. representing more than half of this number (22/total). With several bacteria demonstrating resistance to Brazilian aquaculture-legalized drugs (tetracycline and florfenicol), it is mandatory to research, not only for alternatives to the use of antibiotics, but also for other drugs effective against the main circulating bacterial pathogens. In addition, vigilance over the occurrence of resistant bacteria is necessary, considering the appearance of zoonotic bacteria with multi-resistant characteristics, becoming a public health concern.(AU)

Aquicultura é um dos setores da produção animal com o mais rápido crescimento. Muitos fatores, como resíduos industriais e/ou de agricultura e o uso indevido de antibióticos em animais ou humanos têm contribuído para aumentar a pressão ambiental e o aparecimento de bactérias resistentes a antibióticos contribuindo para os resíduos dessas drogas permanecerem nas carcaças e na água, o que é um risco para a saúde pública / ambiental. A partir disso, foram identificados o gênero / espécie de bactérias e sua resistência bacteriana aos antibióticos de amostras recebidas de surtos de doenças em peixes para diagnóstico bacteriológico no período entre janeiro de 2017 e outubro de 2020. As bactérias isoladas foram submetidas ao teste de sensibilidade de Kirby e Bauer para cinco classes de antibióticos (penicilinas, fluoroquinolonas, aminoglicosídeos, anfenicóis e tetraciclinas). Nos 181 surtos analisados, 232 bactérias foram isoladas, sendo estas Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp., Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum dentre outras. Destas 232 bactérias, 40 cepas foram classificadas como multirresistentes (MDR), com Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp. e Edwardsiella spp. representando mais da metade destas (22 / total). Com várias bactérias demonstrando resistência aos medicamentos legalizados na aquicultura brasileira (tetraciclina e florfenicol), torna-se obrigatória a pesquisa, não apenas de alternativas ao uso de antibióticos, mas também de outros medicamentos eficazes contra os principais patógenos circulantes. Além disso, a vigilância sobre a ocorrência de cepas resistentes é necessária levando-se em consideração o aparecimento de bactérias zoonóticas com essa característica, tornando-se um ponto de interesse à saúde pública.(AU)

Campylobacter fetus in abomasal fluid from spontaneously aborted bovine and ovine fetuses

Pregnancy losses are a major concern in livestock industry due to their economic impact on producers. Campylobacter fetus subspecies fetus (Cff) and C. fetus subspecies venerealis (Cfv) are directly related to reproductive failures in ruminants. Cff colonizes the gastrointestinal tract of a wide range of hosts leading to abortion, while Cfv is restricted to genital tract being generally associated to infertility in bovine. Considering the great economic losses related to campylobacteriosis in cattle and ovine herds, this study aims to investigate the occurrence of C. fetus, considering Cff and Cfv subspecies, in bovine and ovine spontaneously aborted fetuses in state of Rio Grande do Sul, Brazil. In this study, samples of abomasal fluid collected from 30 spontaneously aborted bovine (n = 18) and ovine (n = 12) fetuses were investigated for the detection of Campylobacter fetus throughout conventional PCR. Positive fetuses for C. fetus presence were further analyzed by molecular assays for Cff and Cfv detection, in order to determine subspecies identification. When available, samples of the main organs of the thoracic and abdominal cavities, as well as the brain, skeletal muscle, eyelid, skin, and placenta were collected for further histopathological analyses and bacterial culture, aiming to assess the presence of infection lesions and pathogens in those sites, respectively. Additionally, RT-qPCR assays were also performed for the detection of ruminant pestivirus, in order to detect bovine viral diarrhea cases. Throughout the present methodology, C. fetus was detected in the abomasal fluid samples of 2 bovine fetuses, being both identified as Cfv subspecies by PCR. Histopathological analyses demonstrated that macroscopic and microscopic changes found in the Cfv-positive animals were not either specific or directly related to Campylobacter infections. Moreover, no significant bacterial growth was observed in microbiological culture from the collected tissues, and both fetuses were negative for ruminant pestivirus. Differently, there was no detection of C. fetus in any of the analyzed ovine fetuses. Considering that abortion diagnosis rates reported in cattle and sheep industry are highly variable among the published studies, and that abortion diagnoses are commonly inconclusive due to difficulties in sampling methodology and inadequate identification of the pathogen involved, it is important to investigate the etiological causes of abortion the herds for better understanding the causes of pregnancy issues and monitoring their occurrence. In addition, the absence of pathognomonic lesions in the tissues investigated in the histopathological analyses observed in this study strongly suggests that well-known etiological agents commonly associated to abortion, such as Leptospira spp., Toxoplasma spp., Chlamydia spp. and Neospora caninum, are unlikely to be the cause of infection of the analyzed fetuses. Taking this into account, the presence of C. fetus in the abomasal fluid samples from two bovine fetuses demonstrated in the present study suggests the possible association of Cfv not only with infertility, but also with cases of bovine abortion, highlighting the importance of investigating unusual causal agents of abortions in sheep and cattle. Overall, an adequate diagnosis is essential for establishing better prevention strategies to avoid the circulation of abortion-related infectious agents in the herds.(AU)

Frequency of pathogens in routine bacteriological diagnosis in fish and their antimicrobial resistance / Frequência de patógenos na rotina de diagnóstico bacteriológico em peixes e sua resistência a antimicrobianos

Aquaculture is one of the sectors of animal husbandry with the fastest growth rate. However, the increase in the sector's production chain without proper management can result in factors that favor the development of diseases, especially infectious diseases caused by bacteria. Many factors, such as agriculture or industry resides, improper use of antibiotics in animals or humans, have contributed to increased environmental pressure and the appearance of antibiotic-resistant bacteria, while residues from these drugs can remain in the carcasses and in water a risk to public and environmental health. From that, we identified the bacterial genus/species and their bacterial resistance to antibiotics from samples received from fish disease outbreaks for bacteriosis diagnosis between January 2017 and October 2020. Isolated bacteria were subjected to the Kirby and Bauer sensitivity test for five classes of antibiotics (penicillins, fluoroquinolones, aminoglycosides, amphenicols, and tetracyclines). Of the 181 analyzed outbreaks, 232 bacteria were isolated, including Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp., Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum. Of the 232 bacteria, 40 strains were classified as multidrug resistant (MDR), with Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp., and Edwardsiella spp. representing more than half of this number (22/total). With several bacteria demonstrating resistance to Brazilian aquaculture-legalized drugs (tetracycline and florfenicol), it is mandatory to research, not only for alternatives to the use of antibiotics, but also for other [...].

Aquicultura é um dos setores da produção animal com o mais rápido crescimento. Muitos fatores, como resíduos industriais e/ou de agricultura e o uso indevido de antibióticos em animais ou humanos têmc ontribuído para aumentar a pressão ambiental e o aparecimento de bactérias resistentes a antibióticos contribuindo para os resíduos dessas drogas permanecerem nas carcaças e na água, o que é um risco para a saúde pública / ambiental. A partir disso, foram identificados o gênero / espécie de bactérias e sua resistência bacteriana aos antibióticos de amostras recebidas de surtos de doenças em peixes para diagnóstico bacteriológico no período entre janeiro de 2017 e outubro de 2020. As bactérias isoladas foram submetidas ao teste de sensibilidade de Kirby e Bauer para cinco classes de antibióticos (penicilinas, fluoroquinolonas, aminoglicosídeos, anfenicóis e tetraciclinas). Nos 181 surtos analisados, 232 bactérias foram isoladas, sendo estas Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp.,Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum dentre outras. Destas 232 bactérias, 40 cepas foram classificadas como multirresistentes (MDR), com Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp. e Edwardsiella spp. representando mais da metade destas (22 / total). Com várias bactérias demonstrando resistência aos medicamentos legalizados na aquicultura brasileira (tetraciclina e florfenicol), torna-se obrigatória a pesquisa, não apenas de alternativas ao uso de antibióticos, mas também de outros medicamentos eficazes contra os principais patógenos circulantes. Além disso, a vigilância sobre a ocorrência de cepas resistentes é necessária levando-se em consideração o aparecimento de bactérias zoonóticas com essa característica, tornando-se um ponto de interesse à saúde pública.

Frequency of pathogens in routine bacteriological diagnosis in fish and their antimicrobial resistance / Frequência de patógenos na rotina de diagnóstico bacteriológico em peixes e sua resistência a antimicrobianos

Aquaculture is one of the sectors of animal husbandry with the fastest growth rate. However, the increase in the sector's production chain without proper management can result in factors that favor the development of diseases, especially infectious diseases caused by bacteria. Many factors, such as agriculture or industry resides, improper use of antibiotics in animals or humans, have contributed to increased environmental pressure and the appearance of antibiotic-resistant bacteria, while residues from these drugs can remain in the carcasses and in water a risk to public and environmental health. From that, we identified the bacterial genus/species and their bacterial resistance to antibiotics from samples received from fish disease outbreaks for bacteriosis diagnosis between January 2017 and October 2020. Isolated bacteria were subjected to the Kirby and Bauer sensitivity test for five classes of antibiotics (penicillins, fluoroquinolones, aminoglycosides, amphenicols, and tetracyclines). Of the 181 analyzed outbreaks, 232 bacteria were isolated, including Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp., Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum. Of the 232 bacteria, 40 strains were classified as multidrug resistant (MDR), with Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp., and Edwardsiella spp. representing more than half of this number (22/total). With several bacteria demonstrating resistance to Brazilian aquaculture-legalized drugs (tetracycline and florfenicol), it is mandatory to research, not only for alternatives to the use of antibiotics, but also for other [...].(AU)

Aquicultura é um dos setores da produção animal com o mais rápido crescimento. Muitos fatores, como resíduos industriais e/ou de agricultura e o uso indevido de antibióticos em animais ou humanos têmc ontribuído para aumentar a pressão ambiental e o aparecimento de bactérias resistentes a antibióticos contribuindo para os resíduos dessas drogas permanecerem nas carcaças e na água, o que é um risco para a saúde pública / ambiental. A partir disso, foram identificados o gênero / espécie de bactérias e sua resistência bacteriana aos antibióticos de amostras recebidas de surtos de doenças em peixes para diagnóstico bacteriológico no período entre janeiro de 2017 e outubro de 2020. As bactérias isoladas foram submetidas ao teste de sensibilidade de Kirby e Bauer para cinco classes de antibióticos (penicilinas, fluoroquinolonas, aminoglicosídeos, anfenicóis e tetraciclinas). Nos 181 surtos analisados, 232 bactérias foram isoladas, sendo estas Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp.,Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum dentre outras. Destas 232 bactérias, 40 cepas foram classificadas como multirresistentes (MDR), com Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp. e Edwardsiella spp. representando mais da metade destas (22 / total). Com várias bactérias demonstrando resistência aos medicamentos legalizados na aquicultura brasileira (tetraciclina e florfenicol), torna-se obrigatória a pesquisa, não apenas de alternativas ao uso de antibióticos, mas também de outros medicamentos eficazes contra os principais patógenos circulantes. Além disso, a vigilância sobre a ocorrência de cepas resistentes é necessária levando-se em consideração o aparecimento de bactérias zoonóticas com essa característica, tornando-se um ponto de interesse à saúde pública.(AU)

Phenotypic and molecular characterization of erythromycin resistance in Campylobacter jejuni and Campylobacter coli strains isolated from swine and broiler chickens / Caracterização fenotípica e molecular da resistência à eritromicina em cepas de Campylobacter jejuni e Campylobacter coli isoladas de suínos e frangos de corte

Campylobacter spp. is a bacterial agent that causes gastroenteritis in humans and may trigger Guillain-Barré Syndrome (GBS) and is also considered one of the main foodborne diseases in developed countries. Poultry and pigs are considered reservoirs of these microorganisms, as well as raw or undercooked by-products are often incriminated as a source of human infection. Treatment in human cases is with macrolide, such erythromycin, that inhibits the protein synthesis of the microorganism. This study aimed to isolate Campylobacter jejuni and Campylobacter coli from intestinal content samples of broiler chickens (n=20) and swine (n=30) to characterize the erythromycin resistance profile of the strains and to detect molecular mechanisms involved in this resistance. The minimum inhibitory concentration was determined by agar dilution. The Mismatch Amplification Mutation Assay-Polymerase Chain Reaction (MAMA-PCR) was performed to detect mutations at positions 2074 and 2075 of 23S rRNA region, in addition to PCR test to detect the erm(B) gene. From the intestinal content of broiler chickens, 18 strains of C. jejuni and two strains of C. coli were isolated, whereas, from swine samples, no C. jejuni strain and 14 strains of C. coli were isolated. All C. coli strains were resistant, and three C. jejuni strains from broilers chickens were characterized with intermediate resistance to erythromycin. The MIC of the strains ranged from ≤0.5mg/μL to ≥128mg/μL. All resistant strains had the A2075G mutation, and one strain with intermediate resistance had the A2075G mutation. However, the A2074C mutation and the erm(B) gene were not detected. High resistance levels were detected in C. coli strains isolated from swine. The MAMA-PCR is a practical tool for detecting the erythromycin resistance in Campylobacter strains.(AU)

Campylobacter spp. é um agente bacteriano causador de gastroenterite em humanos e associado à síndrome de Guillain-Barré, sendo a campilobacteriose considerada uma das principais enfermidades de origem alimentar. Aves e suínos são importantes reservatórios desses microrganismos e seus produtos derivados crus ou mal cozidos são muitas vezes incriminados como fonte de infecção humana. A primeira escolha para o tratamento em casos humanos são os antimicrobianos da classe dos macrolídeos como à eritromicina. Dentro desse contexto, o objetivo deste estudo foi isolar Campylobacter jejuni e C. coli a partir de 20 amostras de conteúdo intestinal de frangos de corte e de 30 de suínos ao abate e investigar a resistência à eritromicina das estirpes obtidas e os possíveis mecanismos moleculares envolvidos nesta resistência. A concentração inibitória mínima foi determinada pela diluição em ágar e a técnica MAMA-PCR foi utilizada para detecção de mutações nas posições 2074 e 2075 da região 23s rRNA, foi pesquisado também a presença do gene erm(B) pela PCR. A partir do conteúdo intestinal de frangos de corte foram isoladas 18 estirpes de C. jejuni e duas de C. coli, enquanto de suínos foram obtidas 14 estirpes de C. coli e nenhuma estirpe de C. jejuni. Todas as estirpes de C. coli de suínos foram identificadas como resistentes e três estirpes de C. jejuni de frangos foram caracterizadas com resistência intermediária. A CIM das estirpes variou de ≤0,5mg/μL a ≥128mg/μL. Todas as estirpes resistentes tinham a mutação A2075G e uma cepa com resistência intermediária também apresentou a mutação A2075G. Não foi detectada a mutação A2074C ou a presença do gene erm(B) em nenhuma das estirpes obtidas. Os resultados revelam um alto nível de resistência em estirpes de C. coli isoladas de suínos frente a eritromicina. A técnica MAMA PCR utilizada se constitui em uma ferramenta prática para detecção da resistência à eritromicina em estirpes de C. jejuni e C. coli.(AU)

Phenotypic and molecular characterization of erythromycin resistance in Campylobacter jejuni and Campylobacter coli strains isolated from swine and broiler chickens / Caracterização fenotípica e molecular da resistência à eritromicina em cepas de Campylobacter jejuni e Campylobacter coli isoladas de suínos e frangos de corte

Campylobacter spp. is a bacterial agent that causes gastroenteritis in humans and may trigger Guillain-Barré Syndrome (GBS) and is also considered one of the main foodborne diseases in developed countries. Poultry and pigs are considered reservoirs of these microorganisms, as well as raw or undercooked by-products are often incriminated as a source of human infection. Treatment in human cases is with macrolide, such erythromycin, that inhibits the protein synthesis of the microorganism. This study aimed to isolate Campylobacter jejuni and Campylobacter coli from intestinal content samples of broiler chickens (n=20) and swine (n=30) to characterize the erythromycin resistance profile of the strains and to detect molecular mechanisms involved in this resistance. The minimum inhibitory concentration was determined by agar dilution. The Mismatch Amplification Mutation Assay-Polymerase Chain Reaction (MAMA-PCR) was performed to detect mutations at positions 2074 and 2075 of 23S rRNA region, in addition to PCR test to detect the erm(B) gene. From the intestinal content of broiler chickens, 18 strains of C. jejuni and two strains of C. coli were isolated, whereas, from swine samples, no C. jejuni strain and 14 strains of C. coli were isolated. All C. coli strains were resistant, and three C. jejuni strains from broilers chickens were characterized with intermediate resistance to erythromycin. The MIC of the strains ranged from ≤0.5mg/μL to ≥128mg/μL. All resistant strains had the A2075G mutation, and one strain with intermediate resistance had the A2075G mutation. However, the A2074C mutation and the erm(B) gene were not detected. High resistance levels were detected in C. coli strains isolated from swine. The MAMA-PCR is a practical tool for detecting the erythromycin resistance in Campylobacter strains.(AU)

Campylobacter spp. é um agente bacteriano causador de gastroenterite em humanos e associado à síndrome de Guillain-Barré, sendo a campilobacteriose considerada uma das principais enfermidades de origem alimentar. Aves e suínos são importantes reservatórios desses microrganismos e seus produtos derivados crus ou mal cozidos são muitas vezes incriminados como fonte de infecção humana. A primeira escolha para o tratamento em casos humanos são os antimicrobianos da classe dos macrolídeos como à eritromicina. Dentro desse contexto, o objetivo deste estudo foi isolar Campylobacter jejuni e C. coli a partir de 20 amostras de conteúdo intestinal de frangos de corte e de 30 de suínos ao abate e investigar a resistência à eritromicina das estirpes obtidas e os possíveis mecanismos moleculares envolvidos nesta resistência. A concentração inibitória mínima foi determinada pela diluição em ágar e a técnica MAMA-PCR foi utilizada para detecção de mutações nas posições 2074 e 2075 da região 23s rRNA, foi pesquisado também a presença do gene erm(B) pela PCR. A partir do conteúdo intestinal de frangos de corte foram isoladas 18 estirpes de C. jejuni e duas de C. coli, enquanto de suínos foram obtidas 14 estirpes de C. coli e nenhuma estirpe de C. jejuni. Todas as estirpes de C. coli de suínos foram identificadas como resistentes e três estirpes de C. jejuni de frangos foram caracterizadas com resistência intermediária. A CIM das estirpes variou de ≤0,5mg/μL a ≥128mg/μL. Todas as estirpes resistentes tinham a mutação A2075G e uma cepa com resistência intermediária também apresentou a mutação A2075G. Não foi detectada a mutação A2074C ou a presença do gene erm(B) em nenhuma das estirpes obtidas. Os resultados revelam um alto nível de resistência em estirpes de C. coli isoladas de suínos frente a eritromicina. A técnica MAMA PCR utilizada se constitui em uma ferramenta prática para detecção da resistência à eritromicina em estirpes de C. jejuni e C. coli.(AU)

MALDI-TOF MS as a tool for the identification of Vibrio alginolyticus from Perna perna mussels (Linnaeus, 1758) / MALDI-TOF MS como ferramenta na identificação de Vibrio alginolyticus isolados de mexilhões Perna perna (Linnaeus, 1758)

Vibrio species are ubiquitous in aquatic environments, including coastal and marine habitats. Vibrio alginolyticus is an opportunistic pathogen for fish, crustaceans and mussels and their identification by biochemical tests may be impaired due their nutritional requirements. The study used Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF MS) to identify 49 Vibrio spp. isolates associated with mussels (Perna perna) from different locations along the Rio de Janeiro coast. The rpoA gene was used as a genus-specific marker of Vibrio spp. and was positive in all 209 isolates. MALDI-TOF MS confirmed 87.8% of V. alginolyticus when compared to the results of the biochemical tests. Four isolates were identified as Shewanella putrefaciens (8.16%) and one was identified as V. parahaemolyticus (2.0%). Just one isolate was not identified by this technique (2.0%). The pyrH sequencing confirmed 75% of the proteomic technique results. MALDI-TOF MS is an excellent option for characterization of bacterial species, as it is efficient, fast and easy to apply. In addition, our study confirms its high specificity and sensitivity in these marine bacteria identification.(AU)

Espécies de Vibrio são ubiquitárias em ambientes aquáticos, incluindo habitats costeiros e marinhos. A espécie Vibrio alginolyticus é oportunista para peixes, crustáceos e moluscos e a sua identificação através de testes bioquímicos pode ter a qualidade prejudicada devido às suas exigências nutricionais. O presente estudo utilizou Espectrometria de Massa por Tempo de Vôo de Ionização/Desorção por Laser Assistida por Matriz (MALDI-TOF MS) para identificar diferentes espécies de Vibrio provenientes de mexilhões (Perna perna) coletados em diferentes locais ao longo da costa do Rio de Janeiro. O gene rpoA foi utilizado como um marcador gênero-específico de Vibrio spp. sendo positivo em todos os 209 isolados. MALDI-TOF MS confirmou 87,75% de V. alginolyticus quando comparados com os resultados dos testes bioquímicos. Quatro isolados foram identificados como Shewanella putrefaciens (8,16%), um como V. parahaemolyticus (2,0%) e apenas um (2,0%) não foi identificado pela técnica proteômica. E o sequenciamento do pyrH confirmou 75% dos resultados da técnica proteomica. MALDI-TOF MS tem sido considerada uma excelente opção para a caracterização bacteriana, por ser eficiente, rápida, de fácil aplicação e este estudo confirmou a sua elevada especificidade e sensibilidade na identificação de bactérias marinhas.(AU)

MALDI-TOF MS as a tool for the identification of Vibrio alginolyticus from Perna perna mussels (Linnaeus, 1758) / MALDI-TOF MS como ferramenta na identificação de Vibrio alginolyticus isolados de mexilhões Perna perna (Linnaeus, 1758)

Vibrio species are ubiquitous in aquatic environments, including coastal and marine habitats. Vibrio alginolyticus is an opportunistic pathogen for fish, crustaceans and mussels and their identification by biochemical tests may be impaired due their nutritional requirements. The study used Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF MS) to identify 49 Vibrio spp. isolates associated with mussels (Perna perna) from different locations along the Rio de Janeiro coast. The rpoA gene was used as a genus-specific marker of Vibrio spp. and was positive in all 209 isolates. MALDI-TOF MS confirmed 87.8% of V. alginolyticus when compared to the results of the biochemical tests. Four isolates were identified as Shewanella putrefaciens (8.16%) and one was identified as V. parahaemolyticus (2.0%). Just one isolate was not identified by this technique (2.0%). The pyrH sequencing confirmed 75% of the proteomic technique results. MALDI-TOF MS is an excellent option for characterization of bacterial species, as it is efficient, fast and easy to apply. In addition, our study confirms its high specificity and sensitivity in these marine bacteria identification.(AU)

Espécies de Vibrio são ubiquitárias em ambientes aquáticos, incluindo habitats costeiros e marinhos. A espécie Vibrio alginolyticus é oportunista para peixes, crustáceos e moluscos e a sua identificação através de testes bioquímicos pode ter a qualidade prejudicada devido às suas exigências nutricionais. O presente estudo utilizou Espectrometria de Massa por Tempo de Vôo de Ionização/Desorção por Laser Assistida por Matriz (MALDI-TOF MS) para identificar diferentes espécies de Vibrio provenientes de mexilhões (Perna perna) coletados em diferentes locais ao longo da costa do Rio de Janeiro. O gene rpoA foi utilizado como um marcador gênero-específico de Vibrio spp. sendo positivo em todos os 209 isolados. MALDI-TOF MS confirmou 87,75% de V. alginolyticus quando comparados com os resultados dos testes bioquímicos. Quatro isolados foram identificados como Shewanella putrefaciens (8,16%), um como V. parahaemolyticus (2,0%) e apenas um (2,0%) não foi identificado pela técnica proteômica. E o sequenciamento do pyrH confirmou 75% dos resultados da técnica proteomica. MALDI-TOF MS tem sido considerada uma excelente opção para a caracterização bacteriana, por ser eficiente, rápida, de fácil aplicação e este estudo confirmou a sua elevada especificidade e sensibilidade na identificação de bactérias marinhas.(AU)

Genes of virulence and antimicrobial resistance in Vibrio parahaemolyticus prevalent in areas of ostreiculture / Genes de virulencia e resistência antimicrobiana de Vibrio parahaemolyticus em áreas de ostreicultura

This study aimed to quantify Vibrio spp. and evaluate the profile of antimicrobial susceptibility and virulence factors in Vibrio parahaemolyticus strains in the samples of oysters collected from two estuaries of the Baixo Sul, Bahia. The samples were collected between June 2015 and January 2016 from natural banks (E1) (oyster) and from cultivation areas (E2) (water and oyster). For the quantification of Vibrio spp., the most probable number (MPN) was determined and the characterization of V. parahaemolyticus marker (species-specific) gene tl was performed. Pathogenicity was observed with the Kanagawa test, and the presence of the tdh, trh and ure genes were tested. The antimicrobial sensitivity test included disc diffusion method with 15 antimicrobial discs, β-lactamase enzyme production, and the presence of blaTEM, blaSHV, and blaCTX-M. The maximum density of Vibrio spp. in the samples from cultivation was 4.70 log MPN g-1 and extractivism was 6.10 log MPN g-1, with the temperature being the most influencing variable on the presence of microorganisms in the cultivation area (E2). The tl gene was detected in 71% of the isolates, without the presence of tdh, trh and ure genes. All strains of V. parahaemolyticus were Kanagawa negative. High antimicrobial resistance was observed in the β-lactam antibiotics (cephalothin - 72%, ampicillin - 60%) and aminoglycosides (amikacin - 64%), with multi-resistance in 88% of the strains of V. parahaemolyticus, of which 68% of the resistance was mediated by plasmids. Phenotypically, no production of β-lactamase enzymes was observed, but the presence of blaTEM genes was observed. The multiresistant character of plasmids reported in V. parahaemolyticus strains increases the concern about native bacteria in the marine environment since it can potentially compromise the control of this bacterium infection in bivalve mollusks.

Este estudo teve como objetivo quantificar Vibrio spp. e avaliar o perfil de suscetibilidade antimicrobiana e fatores de virulência em cepas de Vibrio parahaemolyticus em amostras de ostras em dois estuários do Baixo Sul da Bahia. As coletas foram realizadas no período de junho de 2015 a janeiro de 2016, com coletas de ostras provenientes de bancos naturais (E1) e coletas de água e ostras provenientes de cultivo (E2). Para a quantificação de Vibrio spp. usou-se o número mais provável (NMP) e para a caracterização de V. parahaemolyticus o marcador (espécie-específica) gene tl. A patogenicidade foi observada com o teste de Kanagawa e presença dos genes tdh, trh e ure. Para o perfil de suscetibilidade antimicrobiana foram usados 15 antimicrobianos (método disco difusão), produção de enzimas β-lactamases e presença dos genes blaTEM, blaSHV e blaCTX-M. A densidade máxima de Vibrio spp. em ostras de cultivo foi de log 4,70 NMP g-1 e de extrativismo log 6,10 NMP g-1, sendo a temperatura a variável que mais influenciou na presença dos microrganismos na área de cultivo (E2). O gene tl foi encontrado em 71% dos isolados, sem a presença dos genes tdh, trh e ure. Todas as cepas de V. parahaemolyticus foram Kanagawa negativo. Elevada resistência antimicrobiana foi observada aos antimicrobianos betalactâmicos (cefalotina - 72% e ampicilina - 60%) e aminoglicosídeos (amicacina - 64%), com multirresistência em 88% das cepas de V. parahaemolyticus, e dessas, em 68% a resistência era mediada por plasmídeos. Fenotipicamente não foi observada produção de enzimas β-lactamases, embora tenha sido observado a presença de genes blaTEM. O caráter de multirresistência sobretudo por plasmídeos em cepas de V. parahaemolyticus aumenta a preocupação de bactérias autóctones do meio marinho, pois compromete o controle de infecção por esta bactéria em moluscos bivalves.

Genes of virulence and antimicrobial resistance in Vibrio parahaemolyticus prevalent in areas of ostreiculture / Genes de virulencia e resistência antimicrobiana de Vibrio parahaemolyticus em áreas de ostreicultura

This study aimed to quantify Vibrio spp. and evaluate the profile of antimicrobial susceptibility and virulence factors in Vibrio parahaemolyticus strains in the samples of oysters collected from two estuaries of the Baixo Sul, Bahia. The samples were collected between June 2015 and January 2016 from natural banks (E1) (oyster) and from cultivation areas (E2) (water and oyster). For the quantification of Vibrio spp., the most probable number (MPN) was determined and the characterization of V. parahaemolyticus marker (species-specific) gene tl was performed. Pathogenicity was observed with the Kanagawa test, and the presence of the tdh, trh and ure genes were tested. The antimicrobial sensitivity test included disc diffusion method with 15 antimicrobial discs, β-lactamase enzyme production, and the presence of blaTEM, blaSHV, and blaCTX-M. The maximum density of Vibrio spp. in the samples from cultivation was 4.70 log MPN g-1 and extractivism was 6.10 log MPN g-1, with the temperature being the most influencing variable on the presence of microorganisms in the cultivation area (E2). The tl gene was detected in 71% of the isolates, without the presence of tdh, trh and ure genes. All strains of V. parahaemolyticus were Kanagawa negative. High antimicrobial resistance was observed in the β-lactam antibiotics (cephalothin - 72%, ampicillin - 60%) and aminoglycosides (amikacin - 64%), with multi-resistance in 88% of the strains of V. parahaemolyticus, of which 68% of the resistance was mediated by plasmids. Phenotypically, no production of β-lactamase enzymes was observed, but the presence of blaTEM genes was observed. The multiresistant character of plasmids reported in V. parahaemolyticus strains increases the concern about native bacteria in the marine environment since it can potentially compromise the control of this bacterium infection in bivalve mollusks.(AU)

Este estudo teve como objetivo quantificar Vibrio spp. e avaliar o perfil de suscetibilidade antimicrobiana e fatores de virulência em cepas de Vibrio parahaemolyticus em amostras de ostras em dois estuários do Baixo Sul da Bahia. As coletas foram realizadas no período de junho de 2015 a janeiro de 2016, com coletas de ostras provenientes de bancos naturais (E1) e coletas de água e ostras provenientes de cultivo (E2). Para a quantificação de Vibrio spp. usou-se o número mais provável (NMP) e para a caracterização de V. parahaemolyticus o marcador (espécie-específica) gene tl. A patogenicidade foi observada com o teste de Kanagawa e presença dos genes tdh, trh e ure. Para o perfil de suscetibilidade antimicrobiana foram usados 15 antimicrobianos (método disco difusão), produção de enzimas β-lactamases e presença dos genes blaTEM, blaSHV e blaCTX-M. A densidade máxima de Vibrio spp. em ostras de cultivo foi de log 4,70 NMP g-1 e de extrativismo log 6,10 NMP g-1, sendo a temperatura a variável que mais influenciou na presença dos microrganismos na área de cultivo (E2). O gene tl foi encontrado em 71% dos isolados, sem a presença dos genes tdh, trh e ure. Todas as cepas de V. parahaemolyticus foram Kanagawa negativo. Elevada resistência antimicrobiana foi observada aos antimicrobianos betalactâmicos (cefalotina - 72% e ampicilina - 60%) e aminoglicosídeos (amicacina - 64%), com multirresistência em 88% das cepas de V. parahaemolyticus, e dessas, em 68% a resistência era mediada por plasmídeos. Fenotipicamente não foi observada produção de enzimas β-lactamases, embora tenha sido observado a presença de genes blaTEM. O caráter de multirresistência sobretudo por plasmídeos em cepas de V. parahaemolyticus aumenta a preocupação de bactérias autóctones do meio marinho, pois compromete o controle de infecção por esta bactéria em moluscos bivalves.(AU)

Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Salmonella spp. e Yersinia enterocolitica isoladas de animais silvestres em um centro de reabilitação / Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Salmonella spp. and Yersinia enterocolitica isolated from wildlife animals of a reabilitation center

Muitas espécies de animais silvestres de vida livre servem como reservatório de bactérias patogênicas que ameaçam a saúde humana e dos animais domésticos. Algumas bactérias, como Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Yersinia enterocolitica e Salmonella enterica, causam enfermidades em humanos e podem contaminar os animais domésticos e silvestres. O Núcleo de Reabilitação da Fauna Silvestre da Universidade Federal de Pelotas (NURFS-UFPel) soluciona uma demanda regional específica de atenção à fauna silvestre brasileira. O objetivo desse trabalho foi identificar a presença de Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Salmonella spp. e Yersinia enterocolitica em animais silvestres que se encontravam em processo de reabilitação. Foram coletadas amostras de fezes, com uso de zaragatoas estéreis, de 34 aves, 16 mamíferos e 23 répteis. Dos 73 animais amostrados, quatro (5,48%) albergavam Y. enterocolitica, sendo duas aves, um mamífero e um réptil. Salmonella e Campylobacter não foram isolados. Os perfis de bandas dos isolados de Y. enterocolitica analisados pela rep-PCR foram diferentes entre si. Esses resultados indicam que as cepas isoladas não estão relacionadas entre si, não possuindo uma origem comum recente. Vanellus chilensis, Turdus rufiventris, Didelphis albiventris e Pantherophis guttatus podem albergar Y. enterocolitica e eliminá-la nas fezes, oferecendo risco de disseminação desse micro-organismo no ambiente, além de constituírem possíveis fontes de contaminação para humanos e outros animais.(AU)

Wild animals can transmit pathogenic bacteria to human and domestic animal's health. Some bacteria, such as Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Yersinia enterocolitica and Salmonella enterica, cause diseases in humans and can contaminate domestic and wild animais. The Núcleo de Reabilitação da Fauna Silvestre of Universidade Federal de Pelotas (Nurfs-UFPel) attend a specific regional demand of wildlife in Brazil. The aim of this paper was to identify the presence of these pathogenic bacteria in wild animals in rehabilitation. Stool samples were collected using sterile swabs from 34 birds, 16 mammals and 23 reptilian that were housed at Nurfs. Of the 73 collections, Y. enterocolitica was isolated from four (5.48%) of two birds, one mammal and one reptile. Salmonella and Campylobacter were not isolated. The molecular profile of bands of Y. enterocolitica identified in rep-PCR had differences. These results indicated that the isolates did not have a recent common origin. Pantherophis guttatus, Didelphis albiventris, Turdus rufiventris and Vanellus chilensis could shelt Y. enterocolitica and eliminate the bacteria in stool, offering risk of dissemination of these microorganisms in the environment with possible contamination of humans and other animals.(AU)

Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Salmonella spp. e Yersinia enterocolitica isoladas de animais silvestres em um centro de reabilitação / Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Salmonella spp. and Yersinia enterocolitica isolated from wildlife animals of a reabilitation center

Muitas espécies de animais silvestres de vida livre servem como reservatório de bactérias patogênicas que ameaçam a saúde humana e dos animais domésticos. Algumas bactérias, como Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Yersinia enterocolitica e Salmonella enterica, causam enfermidades em humanos e podem contaminar os animais domésticos e silvestres. O Núcleo de Reabilitação da Fauna Silvestre da Universidade Federal de Pelotas (NURFS-UFPel) soluciona uma demanda regional específica de atenção à fauna silvestre brasileira. O objetivo desse trabalho foi identificar a presença de Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Salmonella spp. e Yersinia enterocolitica em animais silvestres que se encontravam em processo de reabilitação. Foram coletadas amostras de fezes, com uso de zaragatoas estéreis, de 34 aves, 16 mamíferos e 23 répteis. Dos 73 animais amostrados, quatro (5,48%) albergavam Y. enterocolitica, sendo duas aves, um mamífero e um réptil. Salmonella e Campylobacter não foram isolados. Os perfis de bandas dos isolados de Y. enterocolitica analisados pela rep-PCR foram diferentes entre si. Esses resultados indicam que as cepas isoladas não estão relacionadas entre si, não possuindo uma origem comum recente. Vanellus chilensis, Turdus rufiventris, Didelphis albiventris e Pantherophis guttatus podem albergar Y. enterocolitica e eliminá-la nas fezes, oferecendo risco de disseminação desse micro-organismo no ambiente, além de constituírem possíveis fontes de contaminação para humanos e outros animais.(AU)

Wild animals can transmit pathogenic bacteria to human and domestic animal's health. Some bacteria, such as Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Yersinia enterocolitica and Salmonella enterica, cause diseases in humans and can contaminate domestic and wild animais. The Núcleo de Reabilitação da Fauna Silvestre of Universidade Federal de Pelotas (Nurfs-UFPel) attend a specific regional demand of wildlife in Brazil. The aim of this paper was to identify the presence of these pathogenic bacteria in wild animals in rehabilitation. Stool samples were collected using sterile swabs from 34 birds, 16 mammals and 23 reptilian that were housed at Nurfs. Of the 73 collections, Y. enterocolitica was isolated from four (5.48%) of two birds, one mammal and one reptile. Salmonella and Campylobacter were not isolated. The molecular profile of bands of Y. enterocolitica identified in rep-PCR had differences. These results indicated that the isolates did not have a recent common origin. Pantherophis guttatus, Didelphis albiventris, Turdus rufiventris and Vanellus chilensis could shelt Y. enterocolitica and eliminate the bacteria in stool, offering risk of dissemination of these microorganisms in the environment with possible contamination of humans and other animals.(AU)

Quorum sensing in Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis and Bacillus cereus strains isolated from ricotta processing / Quorum sensing em cepas de Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis e Bacillus cereus isoladas do processamento de ricota

The quorum sensing phenomenon is a process of intra- and inter-species microbial communication involving the production and detection of extracellular signaling molecules. The autoinducer AI-2 has been proposed to serve as a universal signal for interspecies communication. This study aimed to evaluate the capability of Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, and Bacillus cereus strains isolated from ricotta processing to produce quorum sensing signalling molecules (AI-2). The strains were evaluated for the presence of the luxS gene using the polymerase chain reaction. AI-2 quorum sensing signalling molecules were measured in relative light units (RLUs) using a luminometer. A total of 74% of E. faecium, 91% of E. faecalis, and 95% of B. cereus isolates were positive for luxS gene. In addition, the induced bioluminescence in Vibrio harveyi BB170 was observed in all strains, indicating the presence of the AI-2 autoinducer.(AU)

O fenômeno quorum sensing corresponde a um processo de comunicação intra e interespécies microbianas e é mediado por sinais químicos extracelulares, denominados moléculas sinalizadoras ou auto indutoras (AI). A molécula AI2 está envolvida na comunicação interespécies, denominada sistema universal de comunicação. Este estudo teve como objetivo avaliar a capacidade de Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis e Bacillus cereus isolados do processamento de ricota em produzir moléculas sinalizadoras de Quorum sensing (AI-2). Os isolados foram avaliados quanto à presença do gene luxS utilizando a reação em cadeia da polimerase (PCR). As moléculas sinalizadoras (AI-2) foram medidas em unidades relativas de luz (RLU) através de um luminômetro. Um total de 74% dos isolados de E. faecium, 91% de E. faecalis e 95% de B. cereus foram positivos para o gene luxS. Além disso, todos os isolados apresentaram capacidade de induzir o fenômeno de bioluminescência em Vibrio harveyi BB170, indicando a presença de auto indutores AI-2.(AU)

Dietary supplementation with probiotic and butyrate in the shrimp nursery in biofloc / Suplementação dietética com probiótico e butirato no berçário do camarão em bioflocos

This study aimed to evaluate the combined and isolated effect of sodium butyrate and the probiotic Lactobacillus plantarum on the performance and midgut microbiological parameters of Litopenaeus vannamei post-larvae reared on biofloc technology, as well as the water quality of the system. Feed additives were added at the concentrations of 200 mL of probiotic (1.0x107 CFU mL-1) and 2.0% of organic salt (w/w) in the diet, as follows: 1) Probiotic; 2) Butyrate; 3) Probiotic+Butyrate; 4) Control. Each treatment was composed of three replicates. Biometric measurements were performed once a week, as well as analysis of water quality. At the end of the experiment, statistical difference was observed in the counts of lactic acid bacteria from the intestinal tract of shrimp fed diets containing probiotic. Therefore, while the addition of probiotic and sodium butyrate had no effect on the productive parameters of shrimp or water quality, the inclusion of the probiotic L. plantarum in the diet did increase the counts of lactic acid bacteria in the intestine of L. vannamei without altering the counts of Vibrio spp. or total heterotrophic bacteria in the intestine.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito conjunto e isolado do sal orgânico butirato de sódio e do probiótico Lactobacillus plantarum para pós-larvas do camarão Litopenaeus vannamei cultivado em tecnologia de bioflocos sobre os parâmetros zootécnicos, microbiológicos e histológicos, além da qualidade da água do sistema. Os aditivos alimentares foram adicionados nas concentrações de 200 mL de probiótico (1,0x107 UFC mL-1) e 2,0% do sal orgânico (p/p) na ração, com o seguinte delineamento: 1) Probiótico; 2) Butirato; 3) Probiótico+Butirato; 4) Controle, e cada tratamento foi composto por três réplicas. Biometrias foram realizadas uma vez por semana e, da mesma forma, foram feitas análises dos parâmetros de qualidade de água das unidades experimentais. Ao final do experimento, os resultados mostraram diferença estatística nas contagens de bactérias ácido lácticas do trato intestinal dos camarões alimentados com as dietas contendo probiótico. Conclui-se que a adição de probiótico e o butirato de sódio não influenciaram nos parâmetros produtivos dos camarões nem os parâmetros de qualidade de água, mas a inclusão do probiótico L. plantarum na dieta aumentou as contagens de bactérias ácido lácticas no intestino do camarão L. vannamei, contudo sem alterar as contagens de Vibrio spp. e bactérias heterotróficas totais no intestino.

Dietary supplementation with probiotic and butyrate in the shrimp nursery in biofloc / Suplementação dietética com probiótico e butirato no berçário do camarão em bioflocos

This study aimed to evaluate the combined and isolated effect of sodium butyrate and the probiotic Lactobacillus plantarum on the performance and midgut microbiological parameters of Litopenaeus vannamei post-larvae reared on biofloc technology, as well as the water quality of the system. Feed additives were added at the concentrations of 200 mL of probiotic (1.0x107 CFU mL-1) and 2.0% of organic salt (w/w) in the diet, as follows: 1) Probiotic; 2) Butyrate; 3) Probiotic+Butyrate; 4) Control. Each treatment was composed of three replicates. Biometric measurements were performed once a week, as well as analysis of water quality. At the end of the experiment, statistical difference was observed in the counts of lactic acid bacteria from the intestinal tract of shrimp fed diets containing probiotic. Therefore, while the addition of probiotic and sodium butyrate had no effect on the productive parameters of shrimp or water quality, the inclusion of the probiotic L. plantarum in the diet did increase the counts of lactic acid bacteria in the intestine of L. vannamei without altering the counts of Vibrio spp. or total heterotrophic bacteria in the intestine.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito conjunto e isolado do sal orgânico butirato de sódio e do probiótico Lactobacillus plantarum para pós-larvas do camarão Litopenaeus vannamei cultivado em tecnologia de bioflocos sobre os parâmetros zootécnicos, microbiológicos e histológicos, além da qualidade da água do sistema. Os aditivos alimentares foram adicionados nas concentrações de 200 mL de probiótico (1,0x107 UFC mL-1) e 2,0% do sal orgânico (p/p) na ração, com o seguinte delineamento: 1) Probiótico; 2) Butirato; 3) Probiótico+Butirato; 4) Controle, e cada tratamento foi composto por três réplicas. Biometrias foram realizadas uma vez por semana e, da mesma forma, foram feitas análises dos parâmetros de qualidade de água das unidades experimentais. Ao final do experimento, os resultados mostraram diferença estatística nas contagens de bactérias ácido lácticas do trato intestinal dos camarões alimentados com as dietas contendo probiótico. Conclui-se que a adição de probiótico e o butirato de sódio não influenciaram nos parâmetros produtivos dos camarões nem os parâmetros de qualidade de água, mas a inclusão do probiótico L. plantarum na dieta aumentou as contagens de bactérias ácido lácticas no intestino do camarão L. vannamei, contudo sem alterar as contagens de Vibrio spp. e bactérias heterotróficas totais no intestino.(AU)

Campylobacter coli no fluxograma de abate de suínos e pesquisa dos genes cdt / Campylobacter coli in swine slaughtering flowchart and research of cdt genes

Background: Campylobacter spp. are among the microorganisms most commonly associated with foodborne disease. Campylobacter spp. isolation from pigs during the slaughter and final products have been reported in several countries, including Brazil. However, very little is known about the sources of contamination in the slaughtering flowchart and how these microorganisms are spread in processing plants. Considering the possibility of the pigs carry Campylobacter spp. since the farm or its products are contaminated in the slaughterhouse, this study had as aim to track Campylobacter spp. in pig slaughtering flowchart to understand the behavior of these pathogens in the production line.Materials, Methods & Results: Forty animals of 10 lots, four from each lot, were followed during slaughter. Stool samples were collected from the floor of each enclosure where the pigs were housed on the farm and immediately after stunning on slaughterhouse. Samples from carcass surface were collected after removal of the animals from scrap machine, after evisceration and before the refrigeration chamber. It was also collected surface samples from jowls and samples from the scalding tank water before and after the passage of animals. The swabs containing samples were plated onto Columbia agar supplemented with activated charcoal, oxygen reduction solution and antibiotics supplement, and incubated at 42°C for 48 h under microaerobic conditions. The colonies which presented with a shiny and moist appearance were analyzed by Gram staining for identification of Campylobacter by morphology, and then tested for catalase and oxidase. The Campylobacter isolates were identified for species C. jejuni or C. coli by PCR. Bands profiles were determined by rep-PCR and used to compare the strains. Campylobacter was isolated from 19 (9.5%) of the 200 pig samples analyzed, seven (36.8%) of the rectum, seven (36.8%) after evisceration and five (26.3%) before the refrigeration chamber.[...]