Molecular identification and histological aspects of Renicola sloanei (Digenea: Renicolidae) in Puffinus puffinus (Procellariiformes): a first record / Identificação molecular e aspectos histológicos de Renicola sloanei (Digenea: Renicolidae) em Puffinus puffinus (Procellariiformes): primeiros registros

Renicolids are parasites that inhabit the renal tubules and ureters of molluscivorous and piscivorous birds. Puffinus puffinus is a migratory seabird that was identified as the definitive host of Renicola spp. Studies focusing on the renicolid species and the resulting renal lesions are valuable for their association with causes of stranding in seabirds. The aim of this study was to identify the renicolid trematodes and evaluate the histological findings in two P. puffinus stranded on the coast of Paraná state, Brazil. The parasites were evaluated by histologic, ultrastructural and molecular assays, while tissue changes were analyzed by histologic methods. The morphological and morphometrical characteristics of the parasites, along with polymerase chain reaction and sequencing assays (ribosomal and mitochondrial regions), identified the species as Renicola sloanei. The results also suggest that this helminth can be the adult form of Cercaria pythionike. The dilation of collecting ducts was the main histological finding in the kidneys. In conclusion, R. sloanei was identified, and for the first time, P. puffinus was described as a host of this digenean inducing mild renal changes.(AU)

Renicolídeos são parasitos que habitam túbulos renais e ureteres de aves que se alimentam de moluscos e peixes. Puffinus puffinus, ave marinha migratória, foi registrada como hospedeiro definitivo de Renicola spp. Estudos relacionados com as espécies de renicolídeos e as lesões renais resultantes são importantes para o entendimento das causas de óbito de aves marinhas. O objetivo deste estudo foi identificar os trematódeos renicolídeos e avaliar os achados histológicos em dois P. puffinus encalhados no litoral do Estado do Paraná, Brasil. Os parasitos foram avaliados por ensaios histológicos, ultraestruturais e moleculares, enquanto as alterações teciduais foram analisadas por métodos histológicos. As características morfológicas e morfométricas dos parasitos, juntamente com a reação em cadeia da polimerase e sequenciamento (regiões ribossomal e mitocondrial), identificaram a espécie como Renicola sloanei. Os resultados também sugerem que este helminto pode ser a forma adulta de Cercaria pythionike. A dilatação dos ductos coletores foi o principal achado histológico renal. Em conclusão, R. sloanei foi identificado, e pela primeira vez P. puffinus foi descrito como hospedeiro deste digenético induzindo alterações renais discretas.(AU)

Histological characterization of reproductive tract and fetal annexes of the West Indian Manatee (Trichechus manatus) from Brazil / Caracterização histológica do trato reprodutor e anexos fetais do peixe-boi marinho (Trichechus manatus) do Brasil

The West Indian manatee (Trichechus manatus) is one of the most threatened aquatic mammals in Brazil, and is currently classified as "endangered" (MMA). The objective of this study was to characterize histologically the reproductive tract and fetal annexes of stranded manatees in northeastern Brazil. Tissue samples were collected from the reproductive tract of 23 manatees, which were fixed in 10% buffered formalin, processed using standard histological protocols and stained with hematoxylin eosin. We qualitatively described the histological and histomorphometric characteristics of each structure. Six ovaries were analyzed. In four ovaries, we found a large number of primordial and primary follicles. Two ovaries were different from the others: one had inflammatory infiltration and the other had a thickening in the cortex and absence of follicles. We also analyzed seven uteri (of which four were in the proliferative phase, two in the secretory phase, and one in the recovery phase), four placentas, one vagina, six testes (four were in the immature phase, one in the pubertal phase, and one in the mature phase), two epididymides, two penises, and one umbilical cord. The histological and morphometric findings in our work will support future analyses of the reproductive tract of T. manatus from Brazil.(AU)

O peixe-boi marinho (Trichechus manatus) é um dos mamíferos aquáticos mais ameaçados do Brasil e, atualmente é classificado como "em perigo" (MMA). O objetivo deste estudo foi caracterizar histologicamente o trato reprodutor e os anexos fetais de peixes-bois marinhos encalhados no Nordeste do Brasil. Foram coletadas amostras de tecidos do trato reprodutor de 23 peixes-bois marinhos (T. manatus), que foram fixadas em formol tamponado a 10%, processados usando protocolos histológicos padrão e corados com hematoxilina eosina. Foi realizada a descrição qualitativa das características histológicas e histomorfométricas de cada estrutura. Foram analisados seis ovários. Em quatro ovários, foi encontrado um grande número de folículos primordiais e primários. Dois ovários eram diferentes dos outros: um tinha infiltração inflamatória e o outro tinha um espessamento no córtex e ausência de folículos. Também foram analisadas sete amostras uterinas (das quais quatro estavam na fase proliferativa, duas na fase secretória e uma na fase de recuperação), quatro placentas, uma vagina, seis testículos (quatro na fase imatura, um na fase puberal e um na fase madura), dois epidídimos, dois pênis e um cordão umbilical. Os achados histológicos e morfométricos em nosso trabalho apoiarão futuras análises do trato reprodutivo de T. manatus do Brasil.(AU)

Histological characterization of reproductive tract and fetal annexes of the West Indian Manatee (Trichechus manatus) from Brazil / Caracterização histológica do trato reprodutor e anexos fetais do peixe-boi marinho (Trichechus manatus) do Brasil

The West Indian manatee (Trichechus manatus) is one of the most threatened aquatic mammals in Brazil, and is currently classified as "endangered" (MMA). The objective of this study was to characterize histologically the reproductive tract and fetal annexes of stranded manatees in northeastern Brazil. Tissue samples were collected from the reproductive tract of 23 manatees, which were fixed in 10% buffered formalin, processed using standard histological protocols and stained with hematoxylin eosin. We qualitatively described the histological and histomorphometric characteristics of each structure. Six ovaries were analyzed. In four ovaries, we found a large number of primordial and primary follicles. Two ovaries were different from the others: one had inflammatory infiltration and the other had a thickening in the cortex and absence of follicles. We also analyzed seven uteri (of which four were in the proliferative phase, two in the secretory phase, and one in the recovery phase), four placentas, one vagina, six testes (four were in the immature phase, one in the pubertal phase, and one in the mature phase), two epididymides, two penises, and one umbilical cord. The histological and morphometric findings in our work will support future analyses of the reproductive tract of T. manatus from Brazil.(AU)

O peixe-boi marinho (Trichechus manatus) é um dos mamíferos aquáticos mais ameaçados do Brasil e, atualmente é classificado como "em perigo" (MMA). O objetivo deste estudo foi caracterizar histologicamente o trato reprodutor e os anexos fetais de peixes-bois marinhos encalhados no Nordeste do Brasil. Foram coletadas amostras de tecidos do trato reprodutor de 23 peixes-bois marinhos (T. manatus), que foram fixadas em formol tamponado a 10%, processados usando protocolos histológicos padrão e corados com hematoxilina eosina. Foi realizada a descrição qualitativa das características histológicas e histomorfométricas de cada estrutura. Foram analisados seis ovários. Em quatro ovários, foi encontrado um grande número de folículos primordiais e primários. Dois ovários eram diferentes dos outros: um tinha infiltração inflamatória e o outro tinha um espessamento no córtex e ausência de folículos. Também foram analisadas sete amostras uterinas (das quais quatro estavam na fase proliferativa, duas na fase secretória e uma na fase de recuperação), quatro placentas, uma vagina, seis testículos (quatro na fase imatura, um na fase puberal e um na fase madura), dois epidídimos, dois pênis e um cordão umbilical. Os achados histológicos e morfométricos em nosso trabalho apoiarão futuras análises do trato reprodutivo de T. manatus do Brasil.(AU)

PARASITOSE PULMONAR EM LOBOS-MARINHOSSULAMERICANOS (Arctocephalus australis) NA REGIÃO SUL DO BRASIL

Diversas espécies de pinípedes são anualmente identificadas no Brasil, principalmente na costa gaúcha. O lobo-marinho-sulamericano (Arctocephalus australis) é a espécie de maior ocorrência na região litorânea Norte do Rio Grande do Sul devido ao seu tráfego para descanso e alimentação. Muitas vezes são encontrados encalhados, debilitados ou mortos e ao exame de necropsia, a pneumonia parasitária é um achado frequente. Dois gêneros são descritos em otarideos incriminados etiologicamente nas pneumonias parasitarias, Parafilaroides spp. e Otostrongylus circumlitus. Dentre eles o nematódeo Parafilaroides spp., é observado tanto de forma incidental, quanto como causa mortis em lobo-marinho-sulamericano. Todavia, pouco se sabe sobre as características da doença, do nematódeo e de sua ocorrência no Brasil. O presente trabalho visa identificar, descrever e detalhar os aspectos morfológicos e moleculares da pnemonia parasitária no lobo-marinho-sulamericano. Para este estudo, foram analisados 26 espécimes de A. australis, encontrados mortos na costa norte do litoral gaúcho, no período de 2019 e 2020. Estes animais foram identificados, analisados macroscopicamente através da técnica de necropsia, e seus tecidos foram processados para análise histopatológica. Foram coletados também, fragmentos pulmonares para análise molecular por PCR convencional para amplificação do gene ITS-2 e COX-1 para a identificação dos metastrongilídeos. No total 12 animais apresentaram parasitos no parênquima pulmonar na análise histopatológica e desses, um exibiu lesão no exame de necropsia, caracterizada por nódulos, esbranquiçados e multfocais em todos os lobos pulmonares. Microscopicamente os nematódeos encontravam-se, sobretudo, nos alvéolos e apresentavam caracterísicas compatíveis com outros metastrongilídeos. O aparelho reprodutor feminino, por vezes continha ovos larvados. Seis sequências de qualidade do gene ITS-2 foram obtidas, e após análise comparativa via BLAST, sequências de Parafilaroides normani foram determinadas. Desta maneira, pneumonia parasitária por Parafilaroides normani é um importante diagnóstico diferencial de doença pulmonar em lobos-marinhos-sulamericanos encontrados no litoral norte do Rio Grande do Sul e seu conhecimento permite que os centros de reabilitação atuem de forma direcionada nos casos de encalhe dessa espécie.

Several species of pinnipeds are identified in Brazil, mainly on the coast of Rio Grande do Sul. The South American fur seal (Arctocephalus australis) is a species of greater occurrence in the northern coastal region of Rio Grande do Sul due to its traffic for rest and feeding. They are often found stranded, debilitated or killed and at necropsy, a parasitic pneumonia is a frequent finding. Two genera are identified in otarids etiologically incriminated in verminotic pneumonias, Parafilaroides spp. and Otostrongylus circumlitus. Among them, the nematode Parafilaroides spp., is observed both incidentally and as a cause of death in the South American fur seal. However, little is known about the characteristics of the disease, the nematode and its occurrence in Brazil. The present work aims to identify, and involve the morphological and molecular aspects of parasitic pneumonia in the South American fur seal. For this study, 26 specimens of A. australis were forced, found dead on the north coast of the south brazilian coast, in the period of 2019 and 2020. These animals were identified, displaced macroscopically using the necropsy technique, and their tissues were processed for histopathological analysis. Lung fragments were also collected for molecular analysis by conventional PCR to amplify the ITS-2 and COX-1 gene for the identification of metastrongylids. In total 12 animals presented lungworms in the histological analysis, and one exhibited a lesion in the necropsy exam, characterized by whitish and multifocal nodules in all pulmonary lobes. Microscopically, nematodes were found mainly in the alveoli and had characteristics compatible with other metastrongylids. The female reproductive system sometimes contained larvae. Six quality sequences of ITS-2 gene were avaliable, and after comparative analysis via BLAST, sequences of Parafilaroides normani were determined. Thus, verminotic pneumonia caused by Parafilaroides normani is an important differential diagnosis of lung disease in South American fur seals found on the north coast of Rio Grande do Sul and its knowledge that allows rehabilitation centers in a targeted manner in cases of strandings of this species.

Histopathological findings in lungs of hawksbill turtles collected on the coasts of the states of Espírito Santo and Rio de Janeiro, Brazil / Achados histopatológicos em pulmões de tartarugas-de-pente procedentes dos litorais dos estados do Espírito Santo e do Rio de Janeiro, Brasil

The present work aimed to report the histopathological findings verified in lungs of hawksbill turtles (Eretmochelys imbricata) retrieved from the coasts of the states of Espírito Santo and Rio de Janeiro, Brazil. Between the years 2010 and 2014, 29 E. imbricata individuals were found stranded on the coasts, already dead or dying during treatment. Lung samples of all specimens were collected during necropsies, fixed in 10% neutral buffered formalin, subjected to routine histological processing and classified histomorphologically. The findings revealed that 37.93% of the specimens presented lung lesions. Of these, 90.91% were rescued alive and 9.09% were found dead; 63.63% were females and 36.37% were males. The mean weight was 5.44 Kg and the mean length 39 cm, characterizing young individuals. The animals originated from São Francisco de Itabapoana - RJ, Aracruz - ES, São Mateus - ES, Guarapari - ES, Linhares - ES, Itapemirim - ES, and Anchieta - ES. Macroscopic analysis revealed presence of foam, hyperemia, nodules in the parenchyma, cyst and caseous material. Microscopic examination evidenced heterophilic bronchopneumonia, parasitic granulomatous pneumonia caused by spirorchiids, bacterial granulomatous pneumonia, fungal granulomatous pneumonia, and congestion. It was concluded that juvenile specimens of Eretmochelys imbricata, females and males, originated from the states of Espírito Santo and Rio de Janeiro and found stranded both alive or dead, have significant lung lesions, mainly inflammatory ones, associated or not with infectious agents.(AU)

Objetivou-se com este trabalho relatar os achados histopatológicos em pulmões de Eretmochelys imbricata provenientes dos litorais dos estados do Espírito Santo e do Rio de Janeiro, Brasil. Amostras de pulmões de 29 E. imbricata foram coletadas, durante os anos de 2010 a 2014, em necropsias de espécimes encalhadas mortas ou que vieram a óbito durante o tratamento, nos litorais dos estados do Espírito Santo e do Rio de Janeiro, fixadas em formalina tamponada neutra a 10%, submetidas ao processamento histológico de rotina e classificadas histomorfologicamente. Os dados dos animais mostraram que 37,93% dos animais apresentaram lesões pulmonares. Destes, 90,91% foram encontrados vivos e 9,09% morto, 63,63% eram fêmeas e 36,37% machos. O peso médio foi de 5,44kg, e o comprimento médio de 39cm, o que caracterizou animais juvenis. Os animais eram provenientes de São Francisco de Itabapoana - RJ, Aracruz - ES, São Mateus - ES, Guarapari - ES, Linhares - ES, Itapemirim - ES e Anchieta - ES. Á macroscopia, observou-se: presença de espuma, hiperemia, nódulos no parênquima, cisto e cáseo. Ao exame microscópico, foram encontrados broncopneumonia heterofílica, pneumonia granulomatosa parasitária, causadas por espirorquídeos, pneumonia granulomatosa bacteriana, pneumonia granulomatosa fúngica e congestão. Conclui-se que exemplares juvenis de Eretmochelys imbricata, fêmeas e machos, provenientes dos estados do Espírito Santo e do Rio de Janeiro e encalhados tanto vivos quanto mortos, apresentam lesões pulmonares importantes, principalmente as de origem inflamatória, associadas ou não a agentes infecciosos.(AU)

Histopathological findings in lungs of hawksbill turtles collected on the coasts of the states of Espírito Santo and Rio de Janeiro, Brazil / Achados histopatológicos em pulmões de tartarugas-de-pente procedentes dos litorais dos estados do Espírito Santo e do Rio de Janeiro, Brasil

The present work aimed to report the histopathological findings verified in lungs of hawksbill turtles (Eretmochelys imbricata) retrieved from the coasts of the states of Espírito Santo and Rio de Janeiro, Brazil. Between the years 2010 and 2014, 29 E. imbricata individuals were found stranded on the coasts, already dead or dying during treatment. Lung samples of all specimens were collected during necropsies, fixed in 10% neutral buffered formalin, subjected to routine histological processing and classified histomorphologically. The findings revealed that 37.93% of the specimens presented lung lesions. Of these, 90.91% were rescued alive and 9.09% were found dead; 63.63% were females and 36.37% were males. The mean weight was 5.44 Kg and the mean length 39 cm, characterizing young individuals. The animals originated from São Francisco de Itabapoana - RJ, Aracruz - ES, São Mateus - ES, Guarapari - ES, Linhares - ES, Itapemirim - ES, and Anchieta - ES. Macroscopic analysis revealed presence of foam, hyperemia, nodules in the parenchyma, cyst and caseous material. Microscopic examination evidenced heterophilic bronchopneumonia, parasitic granulomatous pneumonia caused by spirorchiids, bacterial granulomatous pneumonia, fungal granulomatous pneumonia, and congestion. It was concluded that juvenile specimens of Eretmochelys imbricata, females and males, originated from the states of Espírito Santo and Rio de Janeiro and found stranded both alive or dead, have significant lung lesions, mainly inflammatory ones, associated or not with infectious agents.(AU)

Objetivou-se com este trabalho relatar os achados histopatológicos em pulmões de Eretmochelys imbricata provenientes dos litorais dos estados do Espírito Santo e do Rio de Janeiro, Brasil. Amostras de pulmões de 29 E. imbricata foram coletadas, durante os anos de 2010 a 2014, em necropsias de espécimes encalhadas mortas ou que vieram a óbito durante o tratamento, nos litorais dos estados do Espírito Santo e do Rio de Janeiro, fixadas em formalina tamponada neutra a 10%, submetidas ao processamento histológico de rotina e classificadas histomorfologicamente. Os dados dos animais mostraram que 37,93% dos animais apresentaram lesões pulmonares. Destes, 90,91% foram encontrados vivos e 9,09% morto, 63,63% eram fêmeas e 36,37% machos. O peso médio foi de 5,44kg, e o comprimento médio de 39cm, o que caracterizou animais juvenis. Os animais eram provenientes de São Francisco de Itabapoana - RJ, Aracruz - ES, São Mateus - ES, Guarapari - ES, Linhares - ES, Itapemirim - ES e Anchieta - ES. Á macroscopia, observou-se: presença de espuma, hiperemia, nódulos no parênquima, cisto e cáseo. Ao exame microscópico, foram encontrados broncopneumonia heterofílica, pneumonia granulomatosa parasitária, causadas por espirorquídeos, pneumonia granulomatosa bacteriana, pneumonia granulomatosa fúngica e congestão. Conclui-se que exemplares juvenis de Eretmochelys imbricata, fêmeas e machos, provenientes dos estados do Espírito Santo e do Rio de Janeiro e encalhados tanto vivos quanto mortos, apresentam lesões pulmonares importantes, principalmente as de origem inflamatória, associadas ou não a agentes infecciosos.(AU)

Caracterização histopatológica, imuno-histoquímica e molecular de doenças emergentes em cetáceos no litoral do Paraná

Há evidências crescentes sobre a importância dos mamíferos aquáticos para os ecossistemas e sobre as consequências das atividades humanas. As alterações no ecossistema causadas pelas atividades humanas geram impactos à biodiversidade e inúmeras consequências, incluindo o aumento da suscetibilidade a patógenos e doenças emergentes. Entre as doenças infecciosas emergentes, a morbilivirose de cetáceos, a toxoplasmose e a brucelose, representam, de fato, um potencial risco para a conservação e preservação dos cetáceos. Essas doenças podem desencadear mortalidade massiva, restringir o crescimento de indivíduos, aumentar o risco de extinção e provocar perda da biodiversidade. Ademais, a frequente detecção de novas cepas virais de morbillivírus de cetáceos (CeMV) aumenta a preocupação com a preservação de cetáceos em todo o mundo. Portanto, o objetivo do presente estudo foi verificar a prevalência e os achados patológicos associados ao CeMV e outros patógenos em cetáceos encalhados no litoral do Estado do Paraná sob condições naturais e a possível relação com impactos antrópicos e naturais. O estudo foi realizado no litoral do Paraná e no Complexo Estuarino de Paranaguá compreendendo uma área total de 618 km2. A base de dados do Programa de Monitoramento de Praias da Bacia de Santos foi consultada para verificar os registros de todos os cetáceos encalhados entre fevereiro, 2016 a novembro, 2018, de onde todas as amostras foram obtidas. Como critério de inclusão, apenas animais em boa ou moderada condição de preservação post-mortem e com amostras suficientes para análise molecular, histopatológica e imuno-histoquímica (IHQ) foram avaliados. Amostras de pulmão, sistema nervoso central (SNC) e linfonodos foram imersas em solução de formalina tamponada a 10% e rotineiramente processadas para avaliação histopatológica e imuno-histoquímica anti-CDV e anti-Toxoplasma gondii. Um anticorpo monoclonal anti-CDV foi utilizado para a pesquisa de CeMV devido a reação cruzada entre diferentes cepas de morbillivírus demonstradas por estudos sorológicos. Amostras de pulmão e SNC foram congeladas a -20º para posterior transcrição reversa e reação em cadeia da polimerase (RT-PCR). Do total de 325 registros de cetáceos autopsiados, 40 animais apresentaram todos os critérios de inclusão. A espécie mais comumente observada foi o boto-cinza (Sotalia guianensis, 30/40; 75%) e a interação antrópica mais frequente foi a interação com a pesca (21/40; 52,5%). Na histopatologia, foi observado infiltrado inflamatório linfoplasmocitário peribronquial ou peribronquiolar e encefalite discreta com manguitos de até duas camadas foram os principais achados patológicos associados à infecção por CeMV. A sobreposição de lesões típicas de CeMV por agentes secundários, como o nematoide Halocercus brasiliensis, foi observada em cinco (12,5%) animais. Na avaliação imuno-histoquímica, foi observada a prevalência de antígenos de CeMV em 11 (11/40; 27,5%) animais. A maioria dos animais apresentaram imunomarcação intracitoplasmática apenas no pulmão e um animal apresentou imunorreatividade em todos os órgãos avaliados. Todas as amostras foram negativas para CeMV na análise molecular usando a RT-PCR. A negatividade da análise molecular é multifatorial e provavelmente incluem-se (i) distribuição heterogênea do vírus nos órgãos, (ii) degradação do RNA devido à baixa preservação do tecido frequentemente observada em animais encalhados, ou degradação do RNA nas amostras por RNases e/ou mudanças térmicas, (iii) baixa carga viral, (iv) alvos diferentes na IHQ e na RT-PCR. Em conclusão, o diagnóstico de CeMV é desafiador em áreas em que episódios epidêmicos não foram registrados ainda e devido às alterações post-mortem. Entretanto, observamos uma prevalência de 27,5% de CeMV com predominância de alterações pulmonares associadas por meio de uma combinação de análise histopatológica e imuno-histoquímica. Esse vírus pode desempenhar um papel importante no encalhe de cetáceos, assim como, agir como um agente imunossupressor causando e/ou facilitando infecções secundárias. Os resultados aqui descritos ampliam o conhecimento sobre CeMV na nossa região e este é o primeiro estudo realizado sob condições naturais no Brasil.

There is growing evidence about the importance of aquatic mammals to ecosystems and the consequences of human activities. The changes in the ecosystem caused by human activities have impacts on biodiversity and countless consequences, including increased susceptibility to pathogens and emerging diseases. Among the emerging infectious diseases, cetacean morbidity, toxoplasmosis and brucellosis, in fact, represent a potential risk for the conservation and preservation of cetaceans. These diseases can trigger massive mortality, restrict the growth of individuals, increase the risk of extinction and cause loss of biodiversity. In addition, the frequent detection of new viral strains of cetacean morbillivirus (CeMV) raises concerns about the preservation of cetaceans worldwide. Therefore, the objective of the present study was to verify the prevalence and pathological findings associated with CeMV and other pathogens in stranded cetaceans on the coast of the State of Paraná under natural conditions and the possible relationship with anthropic and natural impacts. The study was carried out on the coast of Paraná and in the Estuarine Paranaguá Complex, comprising a total area of 618 km2. The database of the Santos Basin Beach Monitoring Program was consulted to verify the records of all stranded cetaceans between February 2016 to November 2018, from where all samples were obtained. As an inclusion criterion, only animals in good or moderate condition of post-mortem preservation and with sufficient samples for molecular, histopathological and immunohistochemical (IHC) analysis were evaluated. Samples of lung, central nervous system (CNS) and lymph nodes were immersed in 10% buffered formalin solution and routinely processed for histopathological and anti-CDV immunohistochemistry and anti-Toxoplasma gondii. An anti-CDV monoclonal antibody was used for CeMV screening due to the cross reaction between different strains of morbillivirus demonstrated by serological studies. Lung and CNS samples were frozen at -20º for subsequent reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR). Of the total of 325 autopsied cetacean records, 40 animals met all inclusion criteria. The species most observed was the Guiana dolphin (Sotalia guianensis, 30/40; 75%) and the most frequent anthropogenic interaction was bycatch (21/40; 52.5%). In histopathology, peribronchial or peribronchiolar lymphoplasmacytic inflammatory infiltrate and mild encephalitis with cuffs of up to two layers were observed as the main pathological findings associated with infection by CeMV. The overlapping of typical CeMV lesions by secondary agents, such as the nematode Halocercus brasiliensis, was observed in five (12.5%) animals. In the immunohistochemical evaluation, the prevalence of CeMV antigens was observed in 11 (11/40; 27.5%) animals. Most animals presented intracytoplasmic immunostaining only in the lung and one animal showed immunoreactivity in all organs evaluated. All samples were negative for CeMV in the molecular analysis using RT-PCR. The negativity of the molecular analysis is multifactorial and probably includes (i) heterogeneous distribution of the virus in the organs, (ii) degradation of the RNA due to the low tissue preservation frequently observed in stranded animals, or degradation of the RNA in the samples by RNases and / or thermal changes, (iii) low viral load, (iv) different targets in IHC and RT-PCR. In conclusion, the diagnosis of CeMV is challenging in areas where epidemic episodes have not been recorded yet and due to post-mortem changes. However, we observed a 27.5% prevalence of CeMV with a predominance of associated pulmonary changes through a combination of histopathological and immunohistochemical analysis. This virus can play an important role in stranding cetaceans, as well as acting as an immunosuppressive agent causing and / or facilitating secondary infections. The results described here expand the knowledge about CeMV in our region and this is the first study carried out under natural conditions in Brazil.

TREMATODIASE RENAL EM Puffinus puffinus NO LITORAL DO ESTADO DO PARANÁ

Puffinus puffinus, conhecido como pardela-sombria, pertence a ordem Procellariiformes. Estas aves marinhas mantêm sítios de reprodução na Europa e migram para o Atlântico Sul entre os meses de setembro e fevereiro. Estudos sobre a fauna parasitária destes animais também podem fornecer informações sobre a distribuição e o estoque populacional dos hospedeiros e os impactos sobre a saúde dos oceanos. Objetivou-se com este trabalho identificar por métodos morfológicos e moleculares os trematódeos renais de Puffinus puffinus encalhados no litoral do Estado do Paraná e avaliar a associação entre a presença destes parasitos com as alterações renais e sistêmicas e a ocorrência de interação antrópica. A coleta dos animais, dos digenéticos e as autópsias foram realizadas no período de setembro de 2015 a dezembro de 2017 pela equipe do Projeto de Monitoramento de Praias, do Centro de Estudo do Mar, Universidade Federal do Paraná, como condicionante pela exploração de petróleo e gás do pré-sal na Bacia de Santos. Durante a autópsia foram coletadas informações como sexo, idade, condição corporal e interação antrópica. Fragmentos de órgãos foram colhidos e fixados em solução formalina tamponada a 10% para posterior processamento histológico. Determinou-se um escore de lesão no rim que utilizou os seguintes parâmetros: hiperplasia do epitélio tubular, degeneração e necrose do epitélio tubular e infiltrado inflamatório. Para avaliar o índice de saúde, utilizou-se também quatro parâmetros: condição corporal e lesões tegumentares, sistêmicas e organizadas. Os parasitos foram caraterizados por técnicas histológicas e moleculares (reação em cadeia da polimerase e sequenciamento) e por microscopia eletrônica de varredura. Foram encontrados 341 P. puffinus, com maior ocorrência durante o mês de novembro. Destes, 85 foram submetidos às avaliações macro e microscópicas. Deste total, 71 (84%) apresentaram digenéticos renais. Em 78 animais foi possível determinar o sexo (44 fêmeas e 34 machos), sendo a maioria juvenis. Interação antrópica foi observada somente em aves parasitadas (17/71), sendo a presença de óleo a principal interação (6/17). As alterações renais mais frequentes nos animais parasitados foram nefrite (53/71) e necrose tubular (17/71). Condição corporal ruim foi observada na maioria das aves parasitadas (46/71) e não parasitadas (12/14). As principais lesões sistêmicas observadas em aves parasitadas e não parasitadas foram necrose cardíaca e muscular, congestão e hemorragia pulmonar. A presença dos digenéticos não teve correlação com o sexo, a maturidade sexual, o escore de lesão renal e o índice de saúde. No entanto, verificou-se correlação significativa entre interação antrópica e o parasitismo renal. A partir dos resultados morfológicos e moleculares foi possível identificar o renicolídeo Renicola sloanei pela primeira vez em P. puffinus. Além disso, os resultados moleculares também sugerem que este digenético pode ser a forma adulta de Cercaria pythionike. Os achados histopatológicos e a análise estatística corroboram o fato do parasitismo por R. sloanei acarretar lesões renais não letais, ou seja, que não estão associadas ao encalhe e óbito de P. puffinus. Portanto, a mortalidade destes animais pode estar associada ao excessivo esforço energético e muscular durante o período migratório, observados pela baixa condição corporal e lesões cardíaca e muscular.

Puffinus puffinus, known as Manx shearwaters, belongs to the order Procellariiformes. These seabirds maintain breeding sites in Europe and migrate to the South Atlantic between September to February. Studies on the parasitic fauna of migratory seabirds can also provide information on the host population distribution and stock and the health impacts of the oceans. The aim of this work was to characterize the renal digeneans of Puffinus puffinus stranded on the coast of Paraná state by morphological and molecular methods and to evaluate the association between the presence of these parasites, the renal and systemic alterations and the occurrence of anthropic interaction. The sampling of animals, digeneans and autopsy were carried out from September 2015 to December 2017 through the Beach Monitoring Project, of the Centro de Estudos do Mar, Universidade Federal do Paraná, as a condition for the pre-salt exploration in the Santos Basin. During the autopsy, data concerning sex, age, body condition and anthropic interaction were collected. Tissues samples were fixed in 10% buffered formalin solution for histological analysis. A lesion score in the kidney was determined using the following parameters: tubular epithelium hyperplasia, tubular epithelium degeneration and necrosis, and inflammatory infiltrate. To evaluate the health status, four parameters were also used: body condition and, integumentary, systemic and organized lesions. The parasites were characterized by histological and molecular (polymerase chain reaction and sequencing), and scanning electron microscopy assays. In this study, 341 P. puffinus were stranded, with highest occurrence on November. From these, 85 were submitted to macro and microscopic evaluations. Digeneans in renal tissue were observed in 71 (84%) of these animals. In 78 animals it was possible to determine the sex (44 females and 34 males), most of them juveniles. Anthropic interaction was observed only in parasitized birds (17/71), with the presence of oil being the main interaction (6/17). The most frequent renal changes in the parasitized animals were nephritis (53/71) and tubular necrosis (17/71). Poor body condition was observed in most parasitized (46/71) and non-parasitized (12/14) birds. The main systemic lesions observed in parasitized and non-parasitized birds were cardiac and muscular necrosis, congestion and pulmonary hemorrhage. The presence of digeneans had no correlation with sex, sexual maturity, renal injury score, and health index. However, there was a significant correlation between anthropic interaction and renal parasitism. From the morphological and molecular results it was possible to identify Renicola sloanei for the first time in P. puffinus. In addition, molecular results also suggest that this parasite is the mature form of Cercaria pythionike. The histopathological findings and the statistical analysis corroborate the fact that parasitism by R. sloanei causes non-lethal renal lesions, and is not associated with the stranding and death of P. puffinus. Therefore, the mortality of these animals may be associated with excessive energetic and muscular efforts during the migratory period, observed by poor body condition and cardiac and muscle injury.

Strandings of the shortfin mako and the pelagic stingray on the coast of São Paulo state, Southeastern Brazil: report of cases / Encalhes de tubarões anequins e de raias-pretas no litoral do estado de São Paulo, Sudeste do Brasil: relato de casos

Strandings of oceanic-pelagic elasmobranchs in the southeastern Brazil are reported.Data comes from animals observed in the coast of São Paulo state, between 1999 and 2012. Nine individuals of two species were recorded: Pteroplatytrygon violacea(n = 5; mostly during the winter) and Isurus oxyrinchus(n = 4; two in the winter and two in the summer). For P. violaceathe strandings restricted to the austral winter suggest that the species follows the intrusion of high temperatures water masses recorded in southeastern Brazil during this season, bringing some individuals to shallow waters. For I. oxyrinchus is possible that individuals escaped from hooksof the commercial pelagic longline fishery and suffered injuries inthe esophagus and in the gastric wall, stranding due to difficulties in locomotion and feeding. As these stranded sharks were not necropsied and only two animals were observed during the austral summer, we cannot exclude other causes of beaching such diseases or the intrusion of cold water masses in the continental shelf during this season.(AU)

Encalhes de elasmobrânquios oceânico-pelágicos no sudeste do Brasil são apresentados. Os dados provêm de animais observados no litoral do estado de São Paulo, entre 1999 e 2012. Nove indivíduos de duas espécies foram registrados: Pteroplatytrygon violacea(n = 5; principalmente durante o inverno) e Isurus oxyrinchus(n = 4; dois no inverno e dois no verão). Para P. violaceaos encalhes restritos ao inverno austral sugerem que a espécie segue a intrusão de massas de água quente registradas no sudeste do Brasil durante esta época do ano, trazendo alguns indivíduos para águas rasas. Para I. oxyrinchusé possível que os indivíduos tenham se soltado de anzóis da pesca comercial de espinhel pelágico e sofrido injúrias no esôfago e na parede gástrica, encalhando devido a dificuldades de locomoção e alimentação. Como estes tubarões encalhados não foram necropsiados e apenas dois animais foram observados durante o verão austral, não podemos excluir outras causas de encalhe, como doenças ou a intrusão de massas de águas frias na plataforma continental durante essa temporada.(AU)

PARASITOS DIGENETICOS, COPÉPODO E ACANTHOCEPHALA DE Masturus lanceolatus (MOLIDAE) ENCALHADOS AO NORTE DO SUDOESTE ATLÂNTICO, BRASIL

Os peixes da família Molidae pertencem à ordem Tetraodontiformes, e estão distribuidos em todos os oceanos, evidentemente são os maiores peixes teleósteos do mundo e seu tamanho pode variar de 1,8 metros na horizontal a 2,4 metros na vertical, estes são classificados em quatro espécies Mola mola (Linnaeus, 1758), Ranzania laevis (Pennant, 1776), Masturus lanceolatus (Liénard, 1840) e Mola ramsayi (Giglioli, 1883). Além disso, os peixes são vertebrados aquáticos que apresentam os maiores índices de parasitismo, do mesmo modo são considerados excelentes hospedeiros de parasitos intermediários, paratênicos e definitivos. O presente estudo objetivou-se identificar a fauna parasitária da espécie Masturus lanceolatus (Molidae) proveniente de encalhes na costa do sudoeste Atlântico. Dentre os cinco exemplares de peixes que encalharam da família Molidae da espécie Masturus lanceolatus em praias do Rio Grande do Norte (Areia Branca, Diogo Lopes, Guamaré e Macau) e Ceará (Barreira) no período de 2009 a 2016. Através da necropsia e coleta da fauna parasitária realizadas pelo PCCB (Projeto Cetáceos da Costa Branca RN/CE) com autorização de captura, coleta e transporte de material biológico (ABIO) nº. 269/2013 do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Renovaveis (IBAMA). Os parasitos foram fixados em formol a 10% e conservados em alcool 70% em frascos com identificação e enviados para o Laboratório de Estudos em Imunologia e Animais Silvestres (LEIAS) e Laboratório de Sanidade Aquática (LASA) para classificação parasiária e identificação das espécies. Foram coletados 680 parasitos nos hospedeiros M. lanceolatus, e classificados em Digenea, Cestoda, Acanthocephala e Crustácea. Destes hospedeiros foram coletados 193 digenéticos, 12 larvas de digenéticos, 367 Cestoda, 104 cistos de larvas de Cestoides, 1 Acanthocephala e 3 Crustácea. Entretanto, da fauna parasitária encontrada foi identificada três espécies de digenéticos Accacladocoelium macrocotyle, Accacladocoelium nigroflavum, Dihemistephanus lydiae, uma espécie de Acanthocephala Rhadinorhynchus pristis e uma espécie de crustácea Caligus bonito. Este estudo corrabora com a literatura contribuindo com a identificação de novas espécies de parasitos no hospedeiro Masturus lanceolatus no mundo, algumas destas espécies de parasitos são notificados como primeira ocorrência no hospedeiro Masturus lanceolatus no Brasil. Em adição, a presente pesquisa aumenta o conhecimento sobre a ictioparasitologia em Masturus lanceolatus (Molidae) no mundo, aumentando as informações sobre estudos da fauna parasitológica no Brasil.

Os peixes da família Molidae pertencem à ordem Tetraodontiformes, e estão distribuídos em todos os oceanos, evidentemente são os mais importantes que os peixes do mundo e têm a variação de 1,8 metros na horizontal a 2,4 metros na vertical, estes são classificados em quatro espécies Mola mola (Linnaeus, 1758), Ranzania laevis (Galhardete, 1776), Masturus lanceolatus (Liénard, 1840) e Mola ramsayi (Giglioli, 1883). Além disso, os peixes são vertebrados que apresentam maiores índices de parasitismo, do mesmo modo são mais intensos hospedeiros de parasitos intermediários, paratênicos e definitivos. O presente estudo objetivou identificar uma fauna parasitária da espécie Masturus lanceolatus (Molidae), proveniente da costa do sudoeste do Atlântico. Dentre os cinco exemplares de peixes que encaminhem a família Molusco lanceolatus em praias do Rio Grande do Norte (Areia Branca, Diogo Lopes, Guamaré e Macau) e Ceará (Barreira) no período de 2009 a 2016. Através da necropsia e coleta da fauna parasitária pelo PCCB (Projeto Cetáceos da Costa Branca - RN / CE) com a obtenção da captura, coleta e transporte de material biológico (ABIO) nº. 269/2013 do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Renováveis (IBAMA). Os parasitos foram fixados em formol a 10% e conservados em álcool 70% em frascos com identificação e remessa para o Laboratório de Estudos em Imunologia e Animais Silvestres (LEIAS) e Laboratório de Sanidade Aquática (LASA) para identificação e identificação das espécies. Foram coletados 680 parasitos nos hospedeiros M. lanceolatus, e classificados em Digenea, Cestoda, Acanthocephala e Crustácea. Destes hospedeiros foram coletados por 193 digenéticos, 12 larvas de digenéticos, 367 Cestoda, 104 cistos de larvas de Cestoides, 1 Acanthocephala e 3 Crustácea. Entretanto, a fauna foi associada a um macrófilo de Acacladocoelium, Accacladocoelium nigroflavum, Dihemistephanus lydiae, uma espécie de Acanthocephala Rhadinorhynchus pristis e uma espécie de crustácea Caligus bonito. Este estudo é uma publicação bibliográfica que contribui com novas espécies de parasitos no hospedeiro Masturus lanceolatus no mundo, algumas espécies de espécies de parasitas são notáveis como primeira ocorrência no hospedeiro Masturus lanceolatus no Brasil. Em adição, um presente estudo tem o poder de esclarecer sobre a fauna parasitológica no mundo.

Pesquisa de coccídios da família Sarcocystidae em pinguins-de-magalhães (Spheniscus magellanicus) encalhados na costa brasileira

O gênero Sarcocystis é constituído por várias espécies que se diferenciam pelas características morfológicas, biológicas e moleculares. Foram relatadas mais de 196 espécies encontradas em mamíferos, aves e répteis e somente 26 dessas espécies possuem o ciclo completo conhecido. Toxoplasma gondii é um parasito intracelular obrigatório, com distribuição geográfica cosmopolita, capaz de infectar uma ampla variedade de mamíferos e aves, inclusive o homem, caracterizando seu potencial zoonótico. Nas últimas décadas, a quantidade de pinguins vindos da Patagônia argentina e chilena, região de nascimento dessas aves, para o litoral brasileiro, onde muitos encalham e são resgatados, tem aumentado significativamente. Pouco se sabe sobre as doenças causadas por protozoários nessas aves. O presente estudo teve como objetivo conhecer aspectos epidemiológicos da infecção por coccídios da família Sarcocystidae em pinguins-de-magalhães (Spheniscus magellanicus), através de análises moleculares e sorológicas. Foram realizadas duas campanhas, uma em 2014 e outra em 2015, com a finalidade de obter amostras de sangue e tecidos dos pinguins que vieram a óbito durante reabilitação no Instituto de Pesquisa e Reabilitação de Animais Marinhos (IPRAM) localizada em Cariacica, Espírito Santo. Foram colhidas 514 amostras de tecidos (músculo=342, coração=86, cérebro=86) de 310 indivíduos. Dos tecidos de 54 pinguins foi realizado o bioensaio em camundongos para o isolamento de T. gondii, mas nenhum isolado foi obtido. Amostras de 310 indivíduos tiveram o DNA extraído para a pesquisa de coccídios da família Sarcocystidae utilizando-se os marcadores 18S rDNA, espaçador interno transcrito 1 (ITS1), codificador de proteínas de superfície (SAG)2, SAG3 e SAG4, subunidade beta da RNA polimerase (RPOB) e citocromo B (CytB). Destas, 16 (3.0%) amostras de músculo peitoral foram positivas para o gênero Sarcocystis spp., quando analisadas pelo marcador 18S, e todas com resultados idênticos. Com o ITS1, RPOB e Ctv. foram confirmadas as espécies de Sarcocystis em 12 amostras, todas idênticas a S. falcatula-like. Com os marcadores SAGs foi possível observar que as sequências não tinham variabilidade genética. Das 145 amostras de soro avaliadas para a presença de anticorpos anti-T. gondii, pelo Teste de Aglutinação Modificado (MAT 20), 18 aves foram positivas com títulos de: 20 (7 aves), 40 (9 aves) e 80 (2 aves). Este é o primeiro relato de S. falcatula-like e de anticorpos anti - T. gondii em pinguins-de-magalhães de vida livre.

The genus Sarcocystis is composed of several species that are differentiated by the morphological, biological and molecular characteristics. More than 196 species found in mammals, birds and reptiles have been reported, and only 26 of these species have the complete known cycle. Toxoplasma gondii is an obligate intracellular parasite with cosmopolitan geographic distribution, capable of infecting a wide variety of mammals and birds, including man, characterizing its zoonotic potential. In recent decades, the number of penguins that have come from Argentine and Chilean Patagonia, the region of birth of these birds, to the Brazilian coast, where many of them are stranded and rescued, has increased significantly. Little is known about the diseases caused by protozoa in these birds. The present study had as objective to study epidemiological aspects of coccidia infection of the family Sarcocystidae in Magellanic Penguins (Spheniscus magellanicus), through molecular and serological analyzes. Two campaigns were carried out, one in 2014 and another in 2015, in order to obtain blood and tissue samples from penguins who died during rehabilitation at the Institute of Research and Rehabilitation of Marine Animals (IPRAM) in the municipality of Cariacica, Espírito Santo. Tissue samples (total = 514: muscle = 342, heart = 86, brain = 86) were collected from 310 birds. From the tissues of 54 penguins the mouse bioassay was performed for the isolation of T. gondii, but no isolates were obtained. Samples of 310 individuals had DNA extracted for coccidia from the Sarcocystidae family using the 18S rDNA, Transcribed internal spacer 1(ITS1), surface protein encoder (SAG)2, SAG3, SAG4, beta subunit of RNA polymerase (RPOB) and citocrome B (CytB) markers. Of these, 16 (3.0%) samples, of pectoral muscle, were positive and all were identical to Sarcocystis spp. when analyzed by the 18S marker. With ITS1, RPOB and CytB the Sarcocystis species were confirmed in 12 samples, all identical to S. falcatula-like. With the SAGs it was possible to observe that the sequences had no genetic variability. Of the 145 serum samples evaluated for the presence of anti-T. gondii antibodies by Modified Agglutination Test (MAT 20), 18 were positive with titers of: 20 (7 birds), 40 (9 birds) and 80 (2 birds). This is the first report of S. falcatula-like and the presence of antibodies to T. gondii in free-living magellanic penguins.

Alterações anatomopatológicas em lobos-marinhos (Otariidae) encontrados na costa do Brasil

Diversas doenças emergentes, lesões e agentes infecciosos em mamíferos marinhos foram identificados pela primeira vez em animais encalhados. No Brasil, é comum a ocorrência de encalhes de lobos marinhos que se encontram debilitados e/ou enfermos. Devido à falta de estudos recentes que descrevam as principais causas de morte e alterações histopatológicas nos animais encalhados, o presente trabalho visa contribuir para a patologia comparada e, indiretamente, para a conservação de pinípedes por meio da investigação das principais lesões, enfermidades e causas de morte que acometem estas espécies no sul do Brasil. Para esse estudo, foram analisadas amostras de tecidos de 50 indivíduos de duas espécies de lobos marinhos: lobo-marinho-sul-americano (Arctocephalus australis) e lobo-marinho-subantártico (Artocephalus tropicalis), que foram encontrados ao longo da costa brasileira, incluindo cadáveres e animais recebidos vivos e que vieram a óbito em centros de reabilitação no Brasil. Essas amostras estão armazenadas no Banco de Tecido de Mamíferos Marinhos e foram avaliadas, identificadas e processadas no Laboratório de Histologia do VPT/FMVZ. Os achados histopatológicos que tiveram ocorrência superior ou igual a 30% foram: pneumonia (90%; 44/49), hiperplasia linfoide em linfonodo (59%; 19/32), congestão hepática (55%; 27/49), hiperplasia linfoide esplênica (55%; 24/44), edema pulmonar (53%; 26/49), enterite em intestino delgado (51%; 18/35), traqueíte (45%; 14/31), hepatite (43%; 21/49), enterite em intestino grosso (42%; 13/31), congestão pulmonar (33%; 16/49), expansão folicular em linfonodo (31%; 10/32) e glomerulonefrite membranosa (30%; 14/47). Dois casos de interesse especial foram reportados; um indíviduo de A. australis com possível causa de morte associada a meningoencefalite causada por protozoário da família Sarcocystidae e um indíviduo de A. tropicalis em que foi observado linfoma. Em uma análise geral, o principal sistema acometido foi o respiratório com 34% (17/50) dos casos, seguido por processos infecciosos, registrados em 28% (14/50) dos casos, sendo que infecções parasitárias por parafilaroides representaram 30,7% (4/13) das causas de morte de A. tropicalis. Dentre os infecciosos, a septicemia representou 42% (6/14) dos casos e foi reportada com maior frequência em A. australis. As outras causas de morte também observadas foram: nutricional (caquexia) 10% (5/50), indeterminada 10% (5/50), digestivo (enterite e hepatite) 6%(3/50), circulatório (choque) 6% (3/50), metabólico (estresse) 4% (2/50) e neoplasia (linfoma), observada em um único caso. Acreditamos que a análise dos dados obtidos no presente trabalho poderá fornecer um panorama sobre as doenças que indivíduos dessas espécies em vida livre possam apresentar em situações de encalhe e durante a reabilitação. Quantificar e entender as causas de encalhe de pinípedes irá fornecer importantes dados aos centros de reabilitação, que por sua vez, poderão utilizar essas informações para planejar cuidados veterinários adequados.

Many emerging diseases, injuries and infectious agents in marine mammals have been identified for the first time in stranded animals. Stranding of fur seals that are weak and/or debilitated is common in Brazil. Due to lack of recent studies describing the main causes of death and histopathological changes in stranded animals, this paper aims to contribute to the comparative pathology and indirectly, for the conservation of pinnipeds, by investigating major injuries, illnesses and causes of death that affect these animals in southern Brazil. For this study, we analyzed tissue samples from 50 individuals from two species of sea lions: South American fur seal (Arctocephalus australis) and Sub-Antarctic fur seal (Artocephalus tropicalis), which were found along the Brazilian coast, including carcasses and animals that died in rehabilitation centers in Brazil. These samples are stored in the Marine Mammal Tissue Bank and were evaluated, identified and processed in the Laboratory of Histology (VPT/FMVZ). Histopathological findings that had occurrence equal to 30 % or higher were: pneumonia (90%; 44/49), lymphoid hyperplasia in lymph node (59%; 19/32), hepatic congestion (55%; 27/49), splenic lymphoid hyperplasia (55%; 24/44), pulmonary edema (53%; 26/49), small intestine enteritis (51%; 18/35), tracheitis (45%; 14/31), hepatitis (43%; 21/4 9), large intestine enteritis (42%; 13/31), pulmonary congestion (33%; 16/49), follicular expansion in lymph node (31%; 10/32) and membranous glomerulonephritis (30%; 14/47). Two cases of special interest were reported; one individual of A. australis, with cause of death possibly associated with meningoencephalitis caused by protozoa of Sarcocystidae family, and one individual of A. tropicalis, where lymphoma was observed. In an overview, the main affected system was respiratory with 34% (17/50) of the cases, followed by infectious processes, recorded in 28% (14/50) of the cases, in which Parafilaroides parasitic infections accounted for 30.7% (4/13) of the causes of death for A. tropicalis. Among the infectious process, septicemia accounted for 42% (6/14) of the cases and was more frequently reported in A. australis. Other causes of death that were also observed were: Nutritional (cachexia) 10% (5/50), undetermined 10% (5/50), digestive (enteritis and hepatitis) 6% (3/50), circulatory (shock) 6% (3/50), metabolic (stress) 4% (2/50) and neoplasia (lymphoma), observed in a single case. We believe that the analysis of the data obtained in this study may provide an overview of the diseases that wild individuals of these species can present in stranding situations and during rehabilitation. Quantifying and understanding the causes of strandings in pinnipeds, will provide important data for rehabilitation centers, which in turn may use this information to plan appropriate veterinary care.

Pesquisa de Toxoplasma gondii em mamíferos marinhos do Brasil

A toxoplasmose é causada pelo protozoário coccídio Toxoplasma gondii e consiste em um dos processos parasitários mais comuns entre os animais endotérmicos. A presença desse protozoário em cetáceos pode estar associada à exposição dos animais aos oocistos de T. gondii eliminados pelas fezes de felídeos e/ou contato com solo contaminado com o parasita, que tenham comprometido a água do mar a partir de drenagens fluviais e fluentes ou ainda pelo escoamento de água de navios. O objetivo desse trabalho foi investigar a ocorrência de T. gondii em cetáceos encalhados, ou provenientes de captura acidental, ou que vieram a óbito durante o processo de reabilitação ou cativeiro, ao longo da costa brasileira, valendo-se para tanto de avaliações histopatológicas e de técnicas imuno-histoquímicas (IHQ). Os principais órgãos examinados foram fígado, pulmão, linfonodos, baço e cérebro. Esse estudo avaliou tecidos de 186 exemplares de 21 espécies diferentes de cetáceos da costa brasileira entre 1988 e 2014, cujas amostras foram encaminhadas e encontram-se depositadas no Banco de Tecidos de Mamíferos Marinhos, do Laboratório de Patologia Comparada dos Animais Selvagens (LAPCOM) do Departamento de Patologia, FMVZ-USP. Dos mamíferos marinhos analisados, a ocorrência de T. gondii foi confirmada em 1,1% (2/186), justificada pela presença de pelo menos um cisto em pulmão e/ou fígado. Os animais positivos pertenciam a duas espécies diferentes, provenientes do sudeste do Brasil; um golfinho nariz-de-garrafa (Tursiops truncatus) encalhado vivo no Rio de Janeiro - RJ, e uma orca (Orcinus orca) proveniente de cativeiro. As principais observações histopatológicas encontradas foram hepatite necrotizante, broncopneumonia fibrinosa supurativa com presença de cistos compatíveis com T. gondii, pneumonia broncointersticial fibrinosa com carneificação, glomérulonefrite membranosa e linfadenite necrótica. Devido à severidade das lesões suspeita-se que esse protozoário teve um importante papel no encalhe/óbito desses dois indivíduos. Esse estudo acrescentou duas novas espécies de cetáceos àquelas já reportadas como suscetíveis à infecção pelo protozoário, mas nunca antes descritos no Brasil. Os resultados ratificaram a ocorrência da infecção por T. gondii em cetáceos da costa brasileira e a sua importância em mamíferos marinhos em cativeiro e de vida livre

Toxoplasmosis is caused by the coccidian Toxoplasma gondii - phylum Apicomplexa, which is one of the most common parasites affecting endothermic animals. The presence of T. gondii in cetaceans may be associated with feline feces and/or soil contaminated with the parasite, which may reach water bodies through run-off. This study investigated the occurrence of T. gondii in cetaceans along the Brazilian coast. Tissue samples of 186 individuals stranded along the Brazilian coast between 1988 and 2014, belonging to 21 species of cetaceans and currently part of the Marine Mammal Tissue Bank of the Laboratory of Comparative Pathology, Pathology Department, School of Veterinary Medicine and Animal Sciences, University of São Paulo. Immunohistochemistry (IHC) for T. gondii was performed using formalin-fixed, paraffin embedded tissue sections of liver, lung, lymph nodes, spleen and brain. Infected tissues of a Guiana dolphin (Sotalia guianensis) were used as positive controls. A total of 1.1 % (2/186) of the animals evaluated were positive, which was justified by the presence of least one cyst in one of the evaluated organs/tissues. These specimens belong to two different species of cetaceans: Killer whale (Orcinus orca) and bottlenose dolphin (Tursiops truncatus), both from southeastern Brazil. One individual stranded alive in Rio de Janeiro (T. truncatus); and one was kept in captivity (O. orca) in São Paulo state. The most noteworthy lesions observed through microscopy included necrotizing hepatitis, fibrinous suppurative bronchopneumonia with cysts compatible with T. gondii, bronchointersticial fibrinous pneumonia, membranous glomerulonephritis and necrotizing lymphadenitis. Due to the severity of lesions protozoan was suspected to have an important role in the stranding/death of the two wild individuals. This study added two new species of cetaceans to those already reported as susceptible to infection by T. gondii, never before described in Brazil. These results confirm the occurrence of T. gondii infection in cetaceans from the Brazilian coast and the importance of this parasite to marine mammals kept in captivity and free ranging dolphins

AVALIAÇÃO DO ESTADO DE SAÚDE DE PINGUINS-DE-MAGALHÃES (SPHENISCUS MAGELLANICUS FORSTER 1781) ENCALHADOS NO ESPÍRITO SANTO E NO RIO DE JANEIRO ENTRE 2012 E 2013

Pinguins-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus) são aves marinhas nativas do sul da América do Sul, nidificando na Argentina, Chile e Ilhas Malvinas/Falkland. Durante o inverno, estas aves nadam ao longo da plataforma continental em busca de alimento, atingindo o litoral brasileiro. O presente estudo investigou o estado de saúde de pinguins-de-Magalhães recebidos pelo Instituto de Pesquisa e Reabilitação de Animais Marinhos (IPRAM), buscando identificar características e padrões que possam ajudar a entender os mecanismos ecológicos que levam ao encalhe destas aves em praias brasileiras. Foram estudados 494 indivíduos resgatados desde o extremo norte do Espírito Santo (Conceição da Barra) ao centro do estado do Rio de Janeiro (Saquarema) nos anos de 2012 e 2013. O litoral estudado foi dividido em quatro regiões: Norte (Conceição da Barra a Aracruz), Grande Vitória (Fundão a Guarapari), Centro (Anchieta a Macaé) e Lagos (Rio das Ostras a Maricá). Dez indivíduos deram entrada com plumagem característica de adultos, enquanto que todos os demais apresentavam padrão de plumagem típico de juvenis com idade inferior a um ano. Apenas sete pinguins deram entrada com contaminação por óleo em sua plumagem (1,4%), sendo quatro em 2012 e três em 2013. Os animais foram resgatados nos meses de junho a março, com a maioria sendo resgatada de julho a novembro. A distribuição do número de animais resgatados em cada região não foi homogênea, sendo que os animais da região dos Lagos tiveram uma tendência a serem resgatados mais tardiamente na temporada, de setembro a novembro, enquanto que os animais das demais regiões foram resgatados predominantemente de julho a setembro. A condição corporal à admissão foi registrada para 479 indivíduos, sendo que a maior parte dos animais estava em pobre condição corpórea no momento da admissão ao centro. Foi constatado um padrão latitudinal para condição corporal, massa corpórea, comportamento, coloração da mucosa oral e temperatura corporal, sendo que os animais originários das regiões dos Lagos e Centro apresentavam parâmetros indicativos de uma melhor condição de saúde do que os animais resgatados nas regiões da Grande Vitória e Norte. Este padrão pode ser explicado em parte pelo maior intervalo entre o resgate na região dos Lagos e o exame de admissão no IPRAM, sendo possível que apenas os pinguins com melhores parâmetros vitais sobrevivam o suficiente para serem entregues ao IPRAM. Além disso, é provável que a ressurgência de Cabo Frio na região dos Lagos produza condições oceanográficas favoráveis para alimentação da espécie, favorecendo uma melhor condição de saúde. De modo geral, os resultados deste estudo corroboram a interpretação de que o encalhe da maior parte dos pinguins no litoral sudeste do Brasil é consequência de um quadro de debilitação e deficiência nutricional que, por sua vez, deriva de uma dificuldade em obter alimento em quantidade e qualidade energética suficientes.

Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) are seabirds native to southern South America, nesting along the coast of Argentina, Chile and the Falkland/Malvinas Islands. During winter, these penguins swim along the South American continental shelf seeking for prey, reaching the coast of Brazil. This study examines health and rehabilitation records of Magellanic penguins received at the Institute of Research and Rehabilitation of Marine Animals (IPRAM), aiming to identify characteristics and patterns in individual parameters that may contribute to our understanding of the ecological mechanisms underlying their stranding on the Brazilian coast. The records of 494 Magellanic penguins rescued in 2012 and 2013 from the North of Espírito Santo state (Conceição da Barra) to the center of Rio de Janeiro state (Saquarema) were examined. The study area was divided into four regions: North (Conceição da Barra a Aracruz), Greater Vitória (Fundão a Guarapari), Center (Anchieta a Macaé) and Lagos (Rio das Ostras a Maricá). Only ten penguins were admitted with adult feathering, all others presented juvenile plumage. Only seven penguins were oiled upon admission (1.4%), four in 2012 and three in 2013. Penguins were rescued from June to March, but the vast majority was rescued between July and November. The number of animals rescued in each region was not homogeneous throughout the wintering season, as penguins rescued at the Lagos region had a tendency to be rescued later in the season, from September to November, whereas the penguins from the remaining regions were more frequently rescued from July to September. Most penguins were in poor body condition at the time of admission to the center, showing signs of hypothermia, prostration and pale oral mucosa. A latitudinal pattern was identified in the body condition, body mass, behavioral score, oral mucosa color and body temperature of the studied penguins, with individuduals rescured from the Lagos region and Center had better health parameters than individuals rescued from the Greater Vitória and North regions. This finding may be partly explained by the longer interval that usually occurred between the rescue at the Lagos Region and the admission at IPRAM, since it is possible that only the penguins with better vital parameters survived long enough to be delivered to IPRAM. Furthermore, it is likely that the Cabo Frio upwelling at the Lagos region leads to favorable oceanographic conditions that result in greater prey availability for penguins, contributing to their better health status. In conclusion, the results of this study corroborate the interpretation that the stranding of Magellanic penguins in the southeast coast of Brazil is largely the result of a debilitated health state and subnutrition that, in turn, is the result of a difficulty in obtaining prey in quantity and quality sufficient to supply their energetic demands.

Caracterização de aspectos reprodutivos em tartarugas marinhas da Bacia Potiguar RN/CE.

Existem no mundo apenas sete espécies de tartarugas marinhas. Dentre essas, há registros de ocorrência de cinco espécies no litoral do Brasil: Dermochelys coriacea, Chelonia mydas, Caretta caretta, Eretmochelys imbricata e Lepidochelys olivacea. De acordo com a Lista Vermelha da União Internacional para a Conservação da Natureza, todas as espécies de tartarugas marinhas existentes no Brasil se encontram ameaçadas de extinção. A maioria dos trabalhos relacionados a proporção sexual desses répteis indicam um desequilíbrio populacional, havendo um número excessivo de fêmeas. Assim, pesquisas sobre a biologia reprodutiva desses animais são extremamente necessárias e importantes para conservação de gerações futuras dessas espécies. Este trabalho tem como objetivo estudar diferentes aspectos morfohistológicos das gônadas de machos e fêmeas de tartarugas marinhas na Bacia Potiguar. Foram avaliados animais vivos e mortos, provenientes de encalhes entre as praias de Icapuí/CE e Caiçara do Norte/RN, totalizando aproximadamente 300 km. Os animais encalhados mortos ou que vieram a óbito na Base de Reabilitação do Projeto Cetáceos da Costa Branca-UERN foram necropsiados por uma equipe veterinária. As gônadas foram coletadas e fixadas em formol a 10%, e posteriormente submetidas a preparação histológica, através das técnicas de Hematoxilina-Eosina, sendo analisadas em microscópio óptico. No período de janeiro de 2011 a dezembro de 2015 foram registrados 3.960 encalhes de tartarugas marinhas na área estudada. A amostra apresentou proporção sexual de 3:1, com predomínio de fêmeas. Oitenta e cinco por cento dos animais registrados foram classificados como pertencentes a fase de desenvolvimento "juvenil". Foram analisadas microscopicamente 86 amostras de tecido gonadal, sendo 58 de fêmeas e 28 de machos, das espécies Chelonia mydas, Eretmochelys imbricata e Caretta caretta. Foi possível estabelecer três estágios de maturação gonadal: pré pubescente, pubescente e maduro. O predomínio das gônadas analisadas foi de indivíduos pré pubescentes, com fêmeas apresentando ovócitos homogêneos e machos com túbulos seminíferos de pequeno diâmetro com ausência de espermatozoides. Os espécimes pré pubescentes fêmeas apresentaram comprimento curvilíneo da carapaça (CCC) médio de 37,07 cm e os machos 38,68 cm; Pubescentes fêmeas 77,04 cm e machos 89,92 cm, Fêmeas maduras com 101,35 cm e um indivíduo macho maduro com 105 cm. Pesquisas sobre aspectos histológicos relacionados ao desenvolvimento ovariano e testicular de tartarugas marinhas são escassas, mas, os resultados obtidos estão em concordância com o que já foi descrito. Considera-se a necessidade de continuidade de trabalhos como esse, associando os dados morfológicos e biométricos às análises histológicas para o melhor entendimento sobre a maturação sexual das tartarugas marinhas e implementação de propostas de conservação para essas espécies.

Among the seven species of sea turtles, five occurs on the Brazilian coast: Dermochelys coriacea, Chelonia mydas, Caretta caretta, Eretmochelys imbricata e Lepidochelys olivacea. According to the Red List of the IUCN, all species of sea turtles in Brazil are endangered. The majority of works related that the sexual proportion of these animals indicate a population imbalance, having a number excessive of females. Thus, studies of reproductive biology of sea turtles are extremely necessary and important for the conservation of these species for future generations. This work aims to study different morphohistological aspects of male and female's gonads of sea turtle in Potiguar Basin. For this, were evaluated dead and living animals, from strandings between the beaches of Icapuí/CE and Caiçara do Norte/RN, totaling approximately 300 km. The dead animals were necropsied. During the procedure, the gonads were collected and fixed in formalin 10%, then submitted to histological process, through the techniques of hematoxylin-eosin, according Tolosa (2005), being analyzed in an optical microscope. Between January 2011 and December 2015 were recorded 3.960 stranding of sea turtles in the study area. The sample showed sex ratio of 3:1, with a predominance of females. . Eighty-five percent of the animals were classified juvenile. 86 samples of gonadal tissue wereanalized microscopically, being 58 females and 28 males, of Chelonia mydas, Eretmochelys imbricata e Caretta caretta. It was possible to establish three stages of maturation: pre-pubertal, pubertal and mature. The predominance was of pre-pubertal individuals, females presenting homogeneous oocytes and males with seminiferous tubules with a small diameter with absence of sperm. The pre-pubertal females specimens exhibit an average of 37,07 cm (CCC) and the males 38,68 cm (CCC); Pubertal females with an average of 77,04 cm and males 89,92 cm; mature females with 101,9 cm (CCC) and a single mature male with 105 cm. Researches on histological aspects related to ovarian and testicular development of sea turtles are scarce, but, the obtained results are in agreement with what has already been described. Researches like this, associating morphological and biometric data to histological analyzes, are necessary for the best knowledge about sexual maturity of these animals and implementation of conservation proposals for these species.

AVALIAÇÃO HISTOPATOLÓGICA DE MAMÍFEROS MARINHOS ENCALHADOS NO LITORAL DO NORDESTE BRASILEIRO

O estudo anatomopatológico das carcaças dos mamíferos marinhos é uma ferramenta importante para conhecer a morfofisiologia natural, bem como as alterações morfológicas associadas com algumas doenças e, desta forma, evidenciar os possíveis impactos antropogênicos. O presente trabalho teve como intuito realizar estudos sobre histopatologia dos órgãos de cetáceos e sirênios. Para isso, foram utilizadas amostras pertencentes ao acervo biológico do Projeto Cetáceos da Costa Branca (PCCB), da Associação de Pesquisa e Preservação de Ecossistemas Aquáticos (AQUASIS) e do Centro de Mamíferos Aquáticos (CMA). Os fragmentos teciduais foram submetidos ao método convencional de preparação de lâminas histológicas. As peças passaram pelos processos de desidratação e diafanização, banho em parafina líquida, inclusão em bloco, e posterior corte em micrótomo rotativo. Os cortes, de quatro a cinco micra de espessura, foram colocados em lâminas lapidadas e submetidos ao método de coloração Hematoxilina-eosina (H.E.), sendo então montados utilizando-se lamínula e resina sintética. Considerando que os animais em estudo pertencem a diferentes espécies, faixas etárias e sexo, foi realizada uma análise descritiva geral dos aspectos patológicos encontrados em cada caso. De um total de 237 amostras pertencentes a 66 indivíduos da ordem Cetacea (n=28) e Sirenia (n=38), 34,17% (n=81) apresentaram alterações microscópicas, 54,85% (n=130) estavam normais e 10,97% (n=26) se encontravam autolisadas. Dentre as alterações microscópicas evidentes foi diagnosticado no sistema bucal 50% de estomatite (n=1), o coração apresentou 6,66% de fibrose intersticial (n=2), 10% de hemorragia (n=3) e 6,66% de miocardite (n=2). Os pulmões mostraram em 19% das análises edema pulmonar (n=11), 10% de congestão vascular (n=6), 13% de hemorragia (n=8), 3% de enfisema (n=2), 7% hemossiderose (n=4), 3% pneumonia intersticial (n=2), 2% de pneumonia eosinofílica (n=1), 2% de granuloma parasitário (n=1), 2% de cisto parasitário (n=1), 2% de traqueíte (n=1). No estômago foi visualizado em um sirênio áreas extensas de hemorragia (16,66%; n=1) e no intestino foi detectado hiperplasia nodular linfóide (7%; n=2), enterite (4%; n=1), congestão dos vasos (4%; n=1) e degeneração vacuolar (4%; n=1). Os fígados analisados mostraram 23% de degeneração vacuolar (n=5), 9% de necrose hepatocelular (n=2), 9% de depósito moderado de grânulos de melanina (n=2), 4,54% de hepatite crônica (n=1), 9% de fibrose periportal (n=2), 4,54% de abscesso (n=1), 4,54% de congestão (n=1), 4,54% de bilestase (n=1), e 4,54% de proliferação dos ductos biliares (n=1). Nos baços foi possível constatar 20% de rarefação de polpa branca (n=2), 10% de rarefação de polpa branca e vermelha (n=1), e 30% de deposição moderada de grânulos de melanina (n=3). No pâncreas foi observado uma rarefação das células centroacinosas em 50% (n=1) das amostras. Nos rins foi encontrado 14% de nefrose tubular tóxica (n=4), 7% de hemorragia multifocal (n=2), 14% de congestão vascular (n=4), 3,44% de presença de bactérias (n=1), 3,44% de glomerulonefrite proliferativa (n=1), 3,44% de microabscessos (n=1), 3,44% de edema severo (n=1), 3,44% de cistos renais (n=1) e 3,44% de nefrite intersticial crônica (n=1). Nos úteros avaliados foi observado 25% de calcificação distrófica focal (n=1) e 25% de metrite (n=1). Nos linfonodos foram observados alterações sugestivas de imunossupressão (25%; n=1), hemorragia (25%; n=1), e melanose (50%; n=2). Outros achados incluíram rarefação das células da adrenal (50%, n=1), poucos espermatozoides no lúmen (14,28%; n=2) ou presença apenas de espermatogônias nos túbulos seminíferos (21,42%; n=3), e 25% de hiperplasia focal da bexiga (n=1). Apesar das alterações presentes em diversos sistemas, as patologias pulmonares foram superiores as demais tanto em órgãos de cetáceos como em sirênios encalhados no litoral do nordeste brasileiro.

Pathological examination of marine mammals carcasses is an important tool to understand the natural morphophysiology as well as the morphological changes associated with some diseases and thus highlight the potential anthropogenic impacts. This work had as aim conduct studies on histopathology of the organs of the dead stranded cetaceans and Sirenia in the Brazilian northeast coast, or that died during the rehabilitation process in Specialized Centers of the Region. For this, samples were taken belonging to the biological collection of Projeto Cetáceos da Costa Branca (PCCB), Associação de Pesquisa e Preservação de Ecossistemas Aquáticos (AQUASIS) and from Centro de Mamíferos Aquáticos (CMA). The tissue samples were submitted to the conventional method of preparing histological slides. Whereas the studied animals belong to different species, age and sex, a general descriptive analysis of the pathological aspects found in each case was carried out. From a total of 237 samples belonging to 66 individuals of the Cetacea order (n = 28) and Sirenia (n = 38), 34,17% (n = 81) exhibited microscopic changes, 54,85% (n = 130) were normal and 10,97% (n = 26) were autolysed. Among the obvious microscopic changes was diagnosed 50% of stomatitis in the oral system (n = 1), the heart showed 6.66% of interstitial fibrosis (n = 2), 10% of haemorrhage (n = 3) and 6.66% myocarditis (n = 2). The lungs showed pulmonary edema in 19% of the analyzes (n = 11), 10% of vascular congestion% (n = 6), 13% of haemorrhage (n = 8), 3% of emphysema (n = 2), 7% full of hemosiderin (n = 4), 3% of interstitial pneumonia (n = 2), 2% of eosinophilic pneumonia (n = 1), 2% of parasitic granuloma (n = 1), 2% of parasitic cyst (n = 1), 2% of traqueíte (n = 1). In the stomach was visualized a hemorrhage (16.66%; n = 1) and in the gut was detected nodular lymphoid hyperplasia (7%; n = 2), enteritis (4%; n = 1), blood vessels congestion (4%; n = 1) and vacuolar degeneration (4%; n = 1). The livers analysis showed 23% of vacuolar degeneration (n = 5), 9% of hepatocellular necrosis (n = 2), 9% moderate deposit of melanin granules (n = 2), 4.54 % of chronic hepatitis (n = 1), 9% of periportal fibrosis (n = 2), 4.54% of abscess (n = 1), 4.54% of congestion (n = 1), 4.54 % of bilestase (n = 1), and 4.54% proliferation of the bile ducts (n = 1). It was possible to observe in the spleen 20% white pulp rarefaction (n = 2), 10% white and red pulp rarefaction (n = 1), and 30% moderate deposition of melanin granules (n = 3). In the pancreas was observed a 50% of centroacinosas cells rarefaction (n = 1). In the kidneys was found 14% of toxix tube nephrosis (n = 4), 7% of multifocal hemorrhaging (n = 2), 14% of vascular congestion (n = 4), 3.44% presence of bacteria (n = 1), 3.44% of proliferative glomerulonephritis (n = 1), 3.44% of micro abscesses (n = 1), 3.44% of severe edema (n = 1), 3.44% of renal cysts (n = 1) and 3.44% of chronic interstitial nephritis (n = 1). In the uteri evaluated were observed 25% of a focal dystrophic calcification (n = 1) and 25% of metritis (n = 1). In the lymph nodes were observed suggestive abnormalities of immunosuppression (25%; n = 1), bleeding (25%; n = 1) and melanose (50%; n = 2). Other findings include rarefaction of the adrenal cells (50%, n = 1), fewer sperm cells into the lumen (14,28%; n = 2) or presence of only spermatogonia in the seminiferous tubules (21,42%; n = 3), and 25% focal hyperplasia of the bladder (n = 1). Despite the changes present in many systems, lung diseases were higher in cetaceans bodies and sirenians stranded on the Brazilian northeast coast.

Plesiomonasshigelloides and Aeromonadaceae family pathogens isolated from marine mammals of Southern and Southeastern Brazilian coast

The aquatic environment is the habitat of many microorganisms, including Plesiomonasshigelloides and Aeromonas species which are pathogenic to human and animals. In the present investigation, we evaluated the occurrence of these pathogens from marine mammals beached or accidentally captured by fishing net in southeastern (RJ) and southern (RS) coastal Brazilian regions. A total of 198 swabs from 27 specimens of marine mammals, including 11 different species, were collected by DEENSP and GEMARS-CECLIMAR/UFRGS Institutes and sent to LRNCEB/IOC/FIOCRUZ. The samples were enriched in Alkaline Peptone Water (APW) added with 1% of sodium chloride (NaCl), APW plus 3% NaCl and incubated at 37ºC for 18-24 hours. Following, samples were streaked onto Pseudomonas-Aeromonas Selective Agar Base (GSP Agar) and suspected colonies were biochemically characterized. The results revealed 114 strains, including ten Aeromonas species and P.shigelloides. The main pathogens isolated were A.veronii biogroup veronii (19.3%), A. caviae (12.3%), A. hydrophila (9.6%) and P.shigelloides (7%). The pathogens were isolated in both coastal and offshore marine mammals. These data point the importance of epidemiological surveillance and microbiological monitoring and reinforce the need to implement environmental protection programs, especially related to endangered cetacean species.

O ambiente aquático é o habitat de vários microrganismos, incluindo Plesiomonasshigelloides e espécies de Aeromonas, os quais são patogênicos para o homem e os animais. Na presente investigação, foi avaliada a ocorrência destes patógenos a partir de swabs coletados de mamíferos marinhos encalhados ou capturados acidentalmente em redes de pesca nas regiões costeiras do sudeste (RJ) e sul (RS) do Brasil. O total de 198 swabs de 27 espécimes de mamíferos marinhos, incluindo 11 espécies distintas, foi coletado por profissionais dos institutos DEENSP, GEMARS-CECLIMAR/UFRGS e enviado ao LRNCEB/IOC/FIOCRUZ. Em seguida, as amostras foram submetidas a enriquecimento em Água Peptonada Alcalina (APA) adicionada de 1% de cloreto de sódio (NaCl) e APA com 3% de NaCl (37ºC/18-24 h). Posteriormente, as amostras foram semeadas em meio Agar Seletivo para Pseudomonas-Aeromonas (Agar GSP) e as colônias suspeitas submetidas à caracterização bioquímica. Um total de 114 cepas foram identificadas, incluindo dez espécies de Aeromonas e P.shigelloides. Os principais patógenos isolados foram A.veronii biogrupo veronii (19,3%), A. caviae (12,2%), A. hydrophila (9,6%) e Plesiomonasshigelloides (7%). Os patógenos foram encontrados tanto em espécies de mamíferos marinhos costeiros como oceânicos. Esses dados apontam para a importância da vigilância epidemiológica e monitoramento microbiológico, além de reforçar a necessidade de implantação de programas de proteção ambiental, particularmente relacionados aos mamíferos marinhos ameaçados de extinção.

Patologia comparada das hepatopatias e nefropatias em cetáceos do Brasil / Comparative Pathology of Hepatopaties and Nefropaties in Cetaceans from Brazil

Nos mamíferos, o fígado e o rim são órgãos fundamentais para uma adequada homeostase. Nos cetáceos, são de especial importância frente aos desafios da vida no ambiente marinho. O presente estudo teve como objetivo investigar as principais lesões hepáticas e renais de cetáceos do Brasil, utilizando-se amostras mantidas junto ao Banco de Tecidos de Mamíferos Marinhos (BTMM), Laboratório de Patologia Comparada de Animais Selvagens. Para a caracterização das lesões foram utilizadas técnicas anatomopatológicas, imuno-histoquímicas e ultraestrutural. Foram estudados 197 cetáceos de 18 espécies, encontrados mortos em decorrência de captura incidental em apetrecho de pesca, encalhe ou após tentativas de reabilitação. A principal espécie amostrada foi toninha (Pontoporia blainvillei) com 65,9% (130/197) dos casos. Quanto à distribuição geográfica as amostras provieram principalmente do estado de São Paulo (41,6%, 82/197), seguido do Rio Grande do Sul (36,5%, 72/192) e Ceará (11,7%, 23/197). Entre as principais lesões hepáticas diagnosticadas, as inclusões hialinas citoplasmáticas (IHC) apresentaram maior frequência (46,3%, 88/190), seguidas pelas hepatites portais linfoplasmocíticas crônicas observadas em 36,5% (69/190), esteatose, em 14,2% (27/190), hepatite necrótica, em 4,7% (9/190), e colangiohepatite parasitária, em 2,6% (5/190) dos casos. A ocorrência de IHC foi mais frequente em animais capturados do que encalhados. Entre as principais lesões renais diagnosticadas, a glomerulonefrite membranosa apresentou maior frequência (14,5%, 28/192). Foram observadas também glomerulonefrine membranoproliferativa, em 10,4% (20/192), nefrite intersticial, em 10,9% (21/192), cistos simples, em 4,16% (8/192), doença glomerulocística primária, em 4,6% (9/192), doença glomerulocística secundária (DGCS), em 8,3% (16/192), e doença renal policística e adenoma tubular, com 0,5% (1/192) de ocorrência cada. A incidência de DGCS apresentou diferença entre as espécies, sendo menos frequente em toninhas do que nos demais cetáceos. Um boto-cinza (Sotalia guianensis) morto em decorrência de captura incidental na baia de Paranaguá, Paraná, foi diagnosticado com toxoplasmose e devido à sua importância, fragmentos de todos seus órgãos, disponíveis no BTMM, foram avaliados. O presente estudo reflete a relevância em manter o BTMM, o qual consiste em uma fonte de informação ímpar, que possibilita a realização de estudos retroativos em tecidos de cetáceos e outras espécies de mamíferos aquáticos. O presente trabalho traz contribuições sobre as enfermidades em cetáceos, e aborda de maneira sistemática as lesões hepáticas e renais nestas espécies. Futuros estudos são necessários para elucidar aspectos sobre o impacto das lesões renais e hepáticas e sua relação com as condições mórbidas dos cetáceos, bem como para avaliar o impacto da toxoplasmose, nos cetáceos e outros mamíferos marinhos brasileiros

In mammals, the main organs for an adequate homeostase are the liver and the kidney. These organs in Cetaceans have especial importance because of the challenges of life in a marine environment. This study had as main objective find the principal hepatic and renal lesions in Cetaceans from Brazil. Samples from the Marine Mammal Tissue Bank (BTMM) of the Laboratory of Comparative Pathology of Wild Animals were used. Anatomopathological, immunohistochemical and ultrastructural studies were performed. A total of 197 cetaceans belonging to 18 species were studied. They were found dead because of incidental capture or after attempts of rehabilitation for the stranded ones. Franciscana (Pontoporia blainvillei) was the principal specie sampled with a 65,9% (130/197) of the cases. Related to geographic distribution, samples were more frequent in São Paulo state (41,6%, 82/197), then Rio Grande do Sul (36,5%, 72/192) and Ceará (11,7%, 23/197). The hepatic lesions found include: hyaline cytoplasmatic inclusions (IHC) (46,3%, 88/190), lymphoplasmacytic chronic portal hepatitis (36,5%, 69/190), steatosis (14,2%, 27/190), necrotic hepatitis (4,7%, 9/190) and parasitic colangiohepatitis (2,6% , 5/190). The occurrences of IHC were more frequent in captured animals than stranded. The main kidney lesion found was the membranous glomerulonephritis (14,5%, 28/192). Additionally, there were observed membranoproliferative glomerulonephritis (10,4%, 20/192), intersticial nephritis (10,9%, 21/192), simple cysts 4,16% (8/192), glomerulocystic primary disease (4,6%, 9/192), glomerulocystic secondary disease (DGCS) (8,3% ,16/192) and polycystic kidney disease and tubular adenome (0,5%, 1/192). The incidence of DGCS differ among species, in Fransiscanas it was less frequent than in other cetaceans. A Guiana Dolphin (Sotalia guianensis) dead by incidental capture in the bay of Paranaguá, Paraná, was diagnosed with toxoplasmosis and because of its importance, fragments of all its organs available on BTMM, were evaluated. This study reflects the relevance to maintain the BTMM as an important primary source of information, enabling the realization of future reprospective studies in tissues of whales and other species of aquatic mammals. Furthermore, this study presents contributions on cetacean diseases and addresses in a systematic way lesions in the liver and kidney in these species. Future studies are necessary to elucidate aspects of the impact of renal and hepatic lesions and their relation to the morbid conditions of cetaceans, as well as to evaluate the impact of toxoplasmosis in cetaceans and other marine mammals in Brazil

Strandings of the shortfin mako and the pelagic stingray on the coast of São Paulo state, southeastern Brazil: report of cases / Encalhes de tubarões anequins e de raias-pretas no litoral do estado de São Paulo, sudeste do Brasil: relato de casos

Strandings of oceanic-pelagic elasmobranchs in the southeastern Brazil are reported. Data comes from animals observed in the coast of São Paulo state, between 1999 and 2012. Nine individuals of two species were recorded: Pteroplatytrygon violacea (n = 5; mostly during the winter) and Isurus oxyrinchus (n = 4; two in the winter and two in the summer). For P. violacea the strandings restricted to the austral winter suggest that the species follows the intrusion of high temperatures water masses recorded in southeastern Brazil during this season, bringing some individuals to shallow waters. For I. oxyrinchus is possible that individuals escaped from hooks of the commercial pelagic longline fishery and suffered injuries in the esophagus and in the gastric wall, stranding due to difficulties in locomotion and feeding. As these stranded sharks were not necropsied and only two animals were observed during the austral summer, we cannot exclude other causes of beaching such diseases or the intrusion of cold water masses in the continental shelf during this season.

Encalhes de elasmobrânquios oceânico-pelágicos no sudeste do Brasil são apresentados. Os dados provêm de animais observados no litoral do estado de São Paulo, entre 1999 e 2012. Nove indivíduos de duas espécies foram registrados: Pteroplatytrygon violacea (n = 5; principalmente durante o inverno) e Isurus oxyrinchus (n = 4; dois no inverno e dois no verão). Para P. violacea os encalhes restritos ao inverno austral sugerem que a espécie segue a intrusão de massas de água quente registradas no sudeste do Brasil durante esta época do ano, trazendo alguns indivíduos para águas rasas. Para I. oxyrinchus é possível que os indivíduos tenham se soltado de anzóis da pesca comercial de espinhel pelágico e sofrido injúrias no esôfago e na parede gástrica, encalhando devido a dificuldades de locomoção e alimentação. Como estes tubarões encalhados não foram necropsiados e apenas dois animais foram observados durante o verão austral, não podemos excluir outras causas de encalhe, como doenças ou a intrusão de massas de águas frias na plataforma continental durante essa temporada.

Patologia comparada de cetáceos e pinípedes / Comparative pathology of cetaceans and pinnipeds

O conhecimento das causas de morbidade e mortalidade dos mamíferos aquáticos pertencentes à ordem Cetacea e subordem Pinnipedia no Brasil é escasso. Este trabalho teve por objetivo caracterizar as principais causas que contribuem para a morte destes animais, incluindo dentre outras as enfermidades infecciosas, parasitárias, traumáticas, metabólicas e nutricionais. Foram analisadas amostras provenientes de necropsias de 110 indivíduos oriundos de encalhes naturais e capturas acidentais em redes de pesca ocorridos na costa sul e sudeste do Brasil. Ocasionalmente, amostras de cetáceos e pinípedes provenientes de centros de reabilitação, zoológicos, aquários e oceanários também foram analisadas. As amostras consistiram de fragmentos de 1 a 2 cm3 dos órgãos principais acondicionados em formalina a 10%. As afecções foram diagnosticadas através de exames anatomopatológicos, associados, quando possível a resultados microbiológicos e parasitológicos. Dos diagnósticos finais elucidados para os cetáceos 88,6% (70/79) tiveram a morte relacionada com o sistema respiratório, 3,8% (3/79) de origem metabólica, 2,5% (2/79) de etiologia infecciosa, 1,3% (1/79) com origem traumática antropogênica e em 3,8% (3/79) foi indeterminada. Nos pinípedes as causas de morte também estiveram relacionadas principalmente com o trato respiratório (48,5% - 15/31). A morte decorrente de outras causas incluiu: 29,1% (9/31) de causas metabólicas; 3,2% (1/31) nutricional; 3,2% (1/31) digestivo; 3,2% (1/31) urinário; 3,2% (1/31) físico; 3,2% (1/31) síndrome, colapso; 3,2% (1/31) vandalismo; 3,2% (1/31) indeterminado. A análise parasitológica foi realizada em 15,4% (17/110) dos casos e a bacteriologia em 10,9% (12/110) dos casos. As interpretações anatomopatológicas foram associadas aos demais resultados, quando presentes, e então analisados conforme informações recentes de literatura relativas ao assunto. As amostras utilizadas na realização deste projeto complementam o banco de tecidos de animais selvagens mantido pelo Laboratório de Patologia Comparada de Animais Selvagens da FMVZ, formando dessa forma o primeiro acervo de tecidos de mamíferos marinhos disponível no Brasil. Os resultados alcançados neste estudo reforçam a necessidade da abordagem multidisciplinar dos animais encalhados e também dos capturados acidentalmente em redes de pesca, buscando informações que possam colaborar para uma maior compreensão dos processos patológicos que os acometem e os predispõe à morte

The known causes of morbidity and mortality of aquatic mammals belonging to the Order Cetacea and Suborder Pinnipedia in Brazil is limited. The aim of this work was to characterize the main processes that contribute to or cause the death of these animals, and included investigating infectious, parasitic, traumatic, metabolic and nutritional diseases. Samples coming from 110 fresh animals were analyzed, including individuals from strandings and incidentally caught in fishing nets along the south and southeastern coasts of Brazil. Circumstantially, carcasses coming from zoological collections, aquariums and rehabilitation centers were also included. The samples consisted of fragments of 1-2 cm3 taken of the main organs and fixed in 10% formalin. All the tissues have been processed according to routine histological procedures and analyzed under light microscopy. Diseases were diagnosed through anatomopathologic examinations, associated, whenever possible, with microbiologic and parasitologic results and then compared to related bibliography. Final results, mentioning the cause of the death, included: cetaceans: 88,6% (70/79) had lesions associated with the respiratory tract; 3,8% (3/79) of metabolic origin, 2,5% (2/79) of infectious etiology, 1,3% (1/79) were human related injuries, and 3,8% (3/79) of the cases were undetermined. For the pinnipeds the main cause of death was also related to the respiratory tract (48,5% - 15/31). The causes of death implicated in the other cases included: 29,1% (9/31) metabolical causes; 3,2% (1/31) nutritional origin; 3,2% (1/31) digestive causes; 3,2% (1/31) urinary tract; 3,2% (1/31) physical causes; 3,2% (1/31) syndrome; 3,2% (1/31) human related injuries; 3,2% (1/31) were undetermined. Parasitological analyses were performed in 15,4% (17/110) of the cases and bacteriology in 10,9% (12/110). The samples utilized in this project were stored to create a tissue bank for further studies. The results achieved in this work reinforce the need for a multidisciplinary view of stranded and by-caught animals, searching for information that can collaborate to better understand the pathologic processes affecting marine mammals and predisposing their death