Resumo

Neste estudo, as principais variáveis do teste de antagonismo Spot-on-the-Lawn, como concentrações de Salmonella Heidelberg e Lactobacillus salivarius ATCC 11742 e volumes de meio foram investigadas, sendo ao final proposto um modelo de padronização, visando à diminuição de variações individuais e à replicabilidade do teste. Três concentrações de cada bactéria foram preparadas (concentrada, intermediária e diluída), além de três volumes de caldo Brain Heart Infusion (10, 15 e 20mL). O teste de antagonismo foi realizado, sob todas as variações, entre concentrações bacterianas e volumes de meio, resultando em 27 unidades experimentais diferentes e nove halos de inibição por unidade. As comparações permitem concluir que o uso de valores extremos para as concentrações de ambas as bactérias e os volumes de meio leva à super ou subestimação dos halos de inibição. Assim, o ideal é a utilização de concentrações bacterianas e de volumes de meio similares e intermediárias.

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Abstract In the current context of emerging drug-resistant fungal pathogens such as Candida albicans and Candida parapsilosis, discovery of new antifungal agents is an urgent matter. This research aimed to evaluate the antifungal potential of 2-chloro-N-phenylacetamide against fluconazole-resistant clinical strains of C. albicans and C. parapsilosis. The antifungal activity of 2-chloro-N-phenylacetamide was evaluated in vitro by the determination of the minimum inhibitory concentration (MIC), minimum fungicidal concentration (MFC), inhibition of biofilm formation and its rupture, sorbitol and ergosterol assays, and association between this molecule and common antifungal drugs, amphotericin B and fluconazole. The test product inhibited all strains of C. albicans and C. parapsilosis, with a MIC ranging from 128 to 256 µg.mL-1, and a MFC of 512-1,024 µg.mL-1. It also inhibited up to 92% of biofilm formation and rupture of up to 87% of preformed biofilm. 2-chloro-N-phenylacetamide did not promote antifungal activity through binding to cellular membrane ergosterol nor it damages the fungal cell wall. Antagonism was observed when combining this substance with amphotericin B and fluconazole. The substance exhibited significant antifungal activity by inhibiting both planktonic cells and biofilm of fluconazole-resistant strains. Its combination with other antifungals should be avoided and its mechanism of action remains to be established.

Resumo No atual contexto de patógenos fúngicos resistentes emergentes tais como Candida albicans e Candida parapsilosis, a descoberta de novos agentes antifúngicos é uma questão urgente. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar o potencial antifúngico da 2-cloro-N-fenilacetamida contra cepas clínicas de C. albicans e C. parapsilosis resistentes a fluconazol. A atividade antifúngica da substância foi avaliada in vitro através da determinação da concentração inibitória mínima (CIM), concentração fungicida mínima (CFM), ruptura e inibição da formação de biofilme, ensaios de sorbitol e ergosterol, e associação entre esta molécula e antifúngicos comuns, anfotericina B e fluconazol. O produto teste inibiu todas as cepas de C. albicans e C. parapsilosis, com uma CIM variando de 128 a 256 µg.mL-1, e uma CFM de 512-1,024 µg.mL-1. Também inibiu até 92% da formação de biofilme e causou a ruptura de até 87% de biofilme pré-formado. A 2-cloro-N-fenilacetamida não promoveu atividade antifúngica pela ligação ao ergosterol da membrana celular fúngica, tampouco danificou a parede celular. Antagonismo foi observado ao combinar esta substância com anfotericina B e fluconazol. A substância exibiu atividade antifúngica significativa ao inibir tanto as células planctônicas quanto o biofilme das cepas resistentes ao fluconazol. Sua combinação com outros antifúngicos deve ser evitada e seu mecanismo de ação deve ser estabelecido.

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In the current context of emerging drug-resistant fungal pathogens such as Candida albicans and Candida parapsilosis, discovery of new antifungal agents is an urgent matter. This research aimed to evaluate the antifungal potential of 2-chloro-N-phenylacetamide against fluconazole-resistant clinical strains of C. albicans and C. parapsilosis. The antifungal activity of 2-chloro-N-phenylacetamide was evaluated in vitro by the determination of the minimum inhibitory concentration (MIC), minimum fungicidal concentration (MFC), inhibition of biofilm formation and its rupture, sorbitol and ergosterol assays, and association between this molecule and common antifungal drugs, amphotericin B and fluconazole. The test product inhibited all strains of C. albicans and C. parapsilosis, with a MIC ranging from 128 to 256 µg.mL-1, and a MFC of 512-1,024 µg.mL-1. It also inhibited up to 92% of biofilm formation and rupture of up to 87% of preformed biofilm. 2-chloro-N-phenylacetamide did not promote antifungal activity through binding to cellular membrane ergosterol nor it damages the fungal cell wall. Antagonism was observed when combining this substance with amphotericin B and fluconazole. The substance exhibited significant antifungal activity by inhibiting both planktonic cells and biofilm of fluconazole-resistant strains. Its combination with other antifungals should be avoided and its mechanism of action remains to be established.

No atual contexto de patógenos fúngicos resistentes emergentes tais como Candida albicans e Candida parapsilosis, a descoberta de novos agentes antifúngicos é uma questão urgente. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar o potencial antifúngico da 2-cloro-N-fenilacetamida contra cepas clínicas de C. albicans e C. parapsilosis resistentes a fluconazol. A atividade antifúngica da substância foi avaliada in vitro através da determinação da concentração inibitória mínima (CIM), concentração fungicida mínima (CFM), ruptura e inibição da formação de biofilme, ensaios de sorbitol e ergosterol, e associação entre esta molécula e antifúngicos comuns, anfotericina B e fluconazol. O produto teste inibiu todas as cepas de C. albicans e C. parapsilosis, com uma CIM variando de 128 a 256 µg.mL-1, e uma CFM de 512-1,024 µg.mL-1. Também inibiu até 92% da formação de biofilme e causou a ruptura de até 87% de biofilme pré-formado. A 2-cloro-N-fenilacetamida não promoveu atividade antifúngica pela ligação ao ergosterol da membrana celular fúngica, tampouco danificou a parede celular. Antagonismo foi observado ao combinar esta substância com anfotericina B e fluconazol. A substância exibiu atividade antifúngica significativa ao inibir tanto as células planctônicas quanto o biofilme das cepas resistentes ao fluconazol. Sua combinação com outros antifúngicos deve ser evitada e seu mecanismo de ação deve ser estabelecido.

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There are over 250 types of foodborne diseases, the majority of which are infections caused by bacteria. Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, and Staphylococcus saprophyticus are considered contaminants of meat products. The use of natural products as antimicrobials to combat these diseases can be an effective and economical approach. This study proposes to assess the antibacterial, modulatory, and anti-adherent activity of the essential oil of Origanum vulgare against strains of Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, and Staphylococcus saprophyticus isolated from meat products. The assay was conducted in duplicate. The minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum bactericidal concentration (MBC) were determined using the broth microdilution technique. MIC represents the lowest concentration of the product capable of inhibiting the growth of the bacterial strain, whereas MBC represents the lowest concentration capable of inhibiting total growth. The study of association of the product with antimicrobials was undertaken by disk diffusion using ampicillin, gentamicin, ceftazidime, and ciprofloxacin, resulting in synergistic, antagonistic, or indifferent effects. Anti-adherent activity was determined in the presence of sucrose, as the lowest concentration of the agent in contact with sucrose that prevented adherence to the glass tube. Oregano oil exhibited strong inhibitory and bactericidal activity against Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, and Staphylococcus saprophyticus, with MIC values ranging from 32 to 512 µg mL-1 and MBC values ranging from 128 to 512 µg mL-1. Origanum vulgare oil showed varied interactions when associated with antimicrobials, with modulations for synergism (37.5%), indifference (50%), and antagonism (12.5%). Regarding anti-adherent activity, the test product effectively inhibited the adherence of P. aeruginosa bacterial strains in the presence of sucrose (1:8) but had no effect against K. pneumoniae or S. saprophyticus. Therefore, oregano oil proves to be an antibacterial and modulating agent against different bacteria isolated from meat products. Additionally, it displays anti-adherent properties against P. aeruginosa, making it a natural product that could serve as an interesting alternative in efforts to combat foodborne diseases.(AU)

Existem mais de 250 tipos de doenças transmitidas por alimentos e a maioria são infecções causadas por bactérias, sendo Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus saprophyticus, consideradas contaminantes de produtos cárneos. A utilização de produtos naturais como antimicrobianos para combater essas doenças, pode ser uma abordagem eficaz e econômica. O objetivo da presente pesquisa foi verificar a atividade antibacteriana, moduladora e antiaderente do óleo essencial de Origanum vulgare frente às cepas de Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus saprophyticus isoladas de produtos cárneos. O ensaio foi realizado em duplicata. A Concentração Inibitória Mínima (CIM) e a Concentração Bactericida Mínima (CBM) foram determinadas através da técnica de microdiluição em caldo, sendo a CIM dada pela menor concentração do produto capaz de inibir o crescimento da cepa bacteriana, e a CBM pela menor concentração capaz de inibir o crescimento total. O estudo de associação do produto com os antimicrobianos foi realizado por difusão em disco utilizando ampicilina, gentamicina, ceftadizima e ciprofloxacino, tendo como resultado o efeito sinérgico, antagônico ou indiferente. A atividade antiaderente foi determinada na presença de sacarose, sendo determinada pela menor concentração do agente em contato com sacarose que impediu a aderência ao tubo de vidro. O óleo de orégano mostrou uma forte atividade inibitória e bactericida contra Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus saprophyticus, com os valores de CIM variando entre 32 a 512 µg mL-1, e de CBM entre 128 a 512 µg mL-1. O óleo de O. vulgare apresentou interações variadas na associação com os antimicrobianos, com modulações para sinergismo (37,5%), indiferença (50%) e antagonismo (12,5%). Em relação a atividade antiaderente, o produto teste foi eficaz na inibição a aderência das cepas bacterianas de P. aeruginosa, na presença de sacarose (1:8), porém não houve efeito frente a K. pneumoniae e a S. saprophyticus. Portanto, o óleo de orégano apresenta-se como agente antibacteriano e modulador frente a diferentes bactérias isoladas de produtos cárneos, além de ser antiaderente frente a P. aeruginosa, sendo um produto natural que pode representar uma alternativa interessante nos esforços para combater doenças transmitidas por alimentos.(AU)

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The experiment was conducted at the Department of Plant Pathology, Bangladesh Agricultural University, Mymensingh to identify T. asperellum in a countrywide screening program and to evaluate its antagonistic effect against several soil borne pathogens. Samples were collected from the rhizosphere soil of 49 different crops in 107 different locations in Bangladesh, especially, considering the several isolates of T. asperellum for purification. Based on morphological and physiological features, fifteen isolates were selected. Of these, the isolates of TR27 and TR45 were grown and sporulated at 40 °C except all the isolates with 35 °C, and particularly, showing a decrease of mycelial growth across all the isolates for increasing pH. Meanwhile, T. asperellum showed significant antagonistic effects against Fusarium oxysporum, Sclerotium rolfsii and Pythium aphanidermatum, resulting in reducing foot and root rot, collar rot and damping off diseases, respectively. Four isolates were selected for molecular characterization among 15 isolates in terms of higher mycelial growth and spore density in-vitro condition, isolates of (TR27) Sadar, Moulvibazar (Rice), (TR45) Sadar, Mymensingh (Sweet gourd), (TR70) Chapra, Chapai Nawabganj (Sesame) and (TR85) Nayanpur, Lalmonirhat (Maize) were studied at ITS and TEF region. Isolates of TR45, TR70 and TR85 were observed with 98% homology, and TR27 exhibited 88% in their respective closest isolates at ITS sequences. Isolates of TR27 and TR85 also exerted their respective nearest homology (96%), while TR45 showed 99%, and 93% homology with TR70 in TEF sequences. Isolates TR45, TR70 and TR85 were evidently determined as T. asperellum of 100% bootstrap value, and TR27 isolate was also recognized with 72% bootstrap value in the phylogenetic tree. However, complementary effects of significant superior homology and the greatest bootstrap value in the identification of T. asperellum were found as noteworthy. In the phylogenetic analysis, magnificent differentiation among the Trichoderma isolates within and among the groups of closely related species was observed in Tef1 region than reflecting maximum variability in the isolates of rDNA at ITS region, whereas demonstrating a higher transversion ratio and evolutionary divergence.

A experiência foi conduzida no Departamento de Fitopatologia da Universidade Agrícola de Bangladesh, Mymensingh, para identificar Trichoderma asperellum em um programa de rastreio em nível nacional e para avaliar o seu efeito antagônico contra vários agentes patogénicos transmitidos pelo solo. Amostras foram coletadas do solo da rizosfera de 49 culturas diferentes em 107 locais diferentes em Bangladesh, especialmente considerando os diversos isolados de T. asperellum para purificação. Com base nas características morfológicas e fisiológicas, foram selecionados quinze isolados. Destes, os isolados de TR27 e TR45 foram cultivados e esporulados a 40 °C, exceto todos os isolados com 35 °C, e particularmente mostrando uma diminuição do crescimento micelial em todos os isolados para o aumento do pH. Enquanto isso, T. asperellum apresentou efeitos antagônicos significativos contra Fusarium oxysporum, Sclerotium rolfsii e Pythium aphanidermatum, resultando na redução da podridão do pé e da raiz, podridão do colo e doenças de amortecimento, respectivamente. Quatro isolados foram selecionados para caracterização molecular entre 15 isolados em termos de maior crescimento micelial e densidade de esporos em condições in vitro, isolados de (TR27) Sadar, Moulvibazar (arroz), (TR45) Sadar, Mymensingh (cabaça doce), (TR70) Chapra, Chapai Nawabganj (gergelim) e (TR85) Nayanpur, Lalmonirhat (milho) foram estudados na região ITS e TEF. Isolados de TR45, TR70 e TR85 foram observados com 98% de homologia, e TR27 exibiu 88% em seus respectivos isolados mais próximos nas sequências ITS. Os isolados de TR27 e TR85 também exerceram sua respectiva homologia mais próxima (96%), enquanto TR45 apresentou 99% e 93% de homologia com TR70 em sequências de TEF. Os isolados TR45, TR70 e TR85 foram evidentemente determinados como T. asperellum com 100% de valor de bootstrap, e o isolado TR27 também foi reconhecido com 72% de valor de bootstrap na árvore filogenética. Entretanto, efeitos complementares de homologia superior significativa e maior valor de bootstrap na identificação de T. asperellum foram considerados dignos de nota. Na análise filogenética, foi observada uma diferenciação magnífica entre os isolados de Trichoderma dentro e entre os grupos de espécies intimamente relacionadas na região Tef1, refletindo a variabilidade máxima nos isolados de rDNA na região ITS, ao mesmo tempo que demonstrava uma maior taxa de transversão e divergência evolutiva.

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O presente estudo avaliou o potencial probiótico in vitro de bactérias ácido-láticas (BAL) isoladas de queijo artesanal da Serra Geral (MG), com 14 e 21 dias de maturação, leite cru e pingo, utilizados em sua elaboração, e de bancadas de produção. As bactérias foram submetidas aos testes de antibiograma, à tolerância a ácido gástrico artificial e a sais biliares e ao antagonismo contra micro-organismos indicadores. Levilactobacillus brevis (Q521) e Lactococcus lactis (LLSG) apresentaram os melhores resultados e foram selecionados para a produção de leite fermentado. Apenas LLSG foi capaz de fermentar o leite. O produto apresentou qualidade microbiológica e físico-química adequada, exceto para os teores de proteína, segundo a legislação vigente para leites fermentados, demonstrando potencial tecnológico. A partir dos resultados apresentados, sugere-se que testes in vivo sejam realizados para que LLSG possa vir a ser utilizado como probiótico.

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The control of Dermanyssus gallinaein small productions of laying hens is carried out by using chemical methods. However, its indiscriminate use has generated resistance and environmental pollution problems. This problem has encouraged the use of natural substances to control mites. Thus, the objective of this work was to evaluate the acaricidal activity of the bioactivecitral (Ci), geraniol (Ge) and thymol (Thy) on D. gallinae under in vitro conditions using six concentrations (0.05, 1, 2, 3, 4 and 5g/mL). In addition, the interactions of the mixtures of the three bioactive were evaluated through binary (1:1) and tertiary (1:1:1) combinations. The interaction between of the combination of bioactive was performed by using CompuSyn software and calculating the combination index (CI). LC50, LC90, and LC99with 95% confidence limits were estimated by Probit analysis. The bioactive Ci, Ge and Thy showacaricidal activity on the poultry red mite. The combination of Ge:Thy and Ci:Ge showed very strong synergism with CI of 0.084 and 0.052, whereas Ci:Thy showed strong synergism with CI of 0.122 at a concentration of 0.05g/mL. Thetertiary combination in 1:1:1 showed a higher toxic effect and strong synergistic effects at low concentrations with 100% mortality at 1g/mL concentration with a CI of 0.147. The combination of natural bioactive could be an additional way to control D. gallinae without putting thewelfare of the birds at risk and would be an environmentally friendly measure.(AU)

O controle de Dermanyssus gallinaeem pequenas produções de poedeiras é realizado por métodos químicos.No entanto, seu uso indiscriminado tem gerado problemas de resistência e poluição ambiental. Este problema tem incentivado o uso de substâncias naturais para o controle de ácaros. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade acaricida dos bioativos citral (Ci), geraniol (Ge) e timol (Thy) sobre D. gallinaeem condições in vitro utilizando seis concentrações (0,05, 1, 2, 3, 4 e 5g/mL). Além disso, as interações das misturas dos três bioativos foram avaliadas por meio decombinações binárias (1:1) e terciárias (1:1:1). O sinergismo da combinação dos bioativos foi realizado utilizando o software CompuSyn e calculando o índice de combinação (CI). LC50, LC90e LC99com limites de confiança de 95% foram estimados por análise Probit. Os bioativos Ci, Ge e Thy apresentam atividade acaricida sobre o ácaro-vermelho-da-aves. A combinação de Ge:Thy e Ci:Ge apresentou sinergismo muito forte com CI de 0,084 e 0,052, enquanto Ci:Thy apresentou forte sinergismo com CI de 0,122 na concentração de 0,05g/mL. A combinação terciária em 1:1:1 apresentou maior efeito tóxico e fortes efeitos sinérgicos em baixas concentrações com 100% de mortalidade em concentração de 1g/mL com CI de 0,147. A combinação de bioativos naturais poderia ser uma forma adicional de controle deD. gallinaesem colocar em risco o bem-estar das aves e seria uma medida ecologicamente correta.(AU)

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Pantoea ananatis is the causal agent of maize white spot, a foliar disease responsible for significant maize yield reduction worldwide, especially in Brazil. In general, the maize foliar diseases control involves the adoption of resistant genotypes and pesticides application. However, the use of agrochemicals can significantly cause increase production costs, damage to human health and negative environmental impacts. In this sense, the use of biological control agents has been considered among the most promising eco-friendly technologies for sustainable agriculture. Actinobacteria, particularly of Streptomyces genus, has been widely recognized as agroindustrially important microorganism due to its potential in producing diverse range of secondary metabolites, including antibiotics and enzymes. Thus, the aim of this work is to characterize and to evaluate the potential of soil actinobacteria for P. ananatis control. We observed that 59 actinobacteria strains (85%) exhibited proteolytic or chitinolytic activity. Only the strains Streptomyces pseudovenezuelae ACSL 470, that also exhibited high proteolytic activity, S. novaecaesareae ACSL 432 and S. laculatispora ACP 35 demonstrated high or moderate antagonist activity in vitro against P. ananatis. Temporal analysis of metabolites produced by these strains growth in different liquid media indicated greater antibacterial activity at 72 h. In this condition, chromatographic and mass spectrometry analysis revealed that S. pseudovenezuelae ACSL 470 strain produced neomycin, an aminoglycoside antibiotic that displayed high bactericidal activity in vitro against P. ananatis. This is the first report of actinobacteria acting as potential microbial antagonists for P. ananatis control. Further studies are needed to determine the control efficacy of maize white spot disease by Streptomyces strains or their metabolites in greenhouse and field conditions.

Pantoea ananatis é o agente causal da mancha branca do milho, doença foliar responsável pela redução significativa da produtividade do milho em todo o mundo, especialmente no Brasil. Em geral, o controle de doenças foliares do milho envolve a adoção de genótipos resistentes e a aplicação de agrotóxicos. No entanto, o uso de agroquímicos pode causar aumento significativo dos custos de produção, danos à saúde humana e impactos ambientais negativos. Nesse sentido, o uso de agentes de controle biológico tem sido considerado uma das tecnologias ecologicamente corretas mais promissoras para a agricultura sustentável. Actinobactérias, particularmente do gênero Streptomyces, têm sido amplamente reconhecidas como microrganismos de importância agroindustrial devido ao seu potencial de produção de diversos metabólitos secundários, incluindo antibióticos e enzimas. Assim, o objetivo deste trabalho é caracterizar e avaliar o potencial de actinobactérias do solo para o controle de P. ananatis. Observamos que 59 cepas de actinobactérias (85%) apresentaram atividade proteolítica ou quitinolítica. Apenas as cepas Streptomyces pseudovenezuelae ACSL 470, que também exibiu alta atividade proteolítica, S. novaecaesareae ACSL 432 e S. laculatispora ACP 35 demonstraram alta ou moderada atividade antagonista in vitro contra P. ananatis. A análise temporal do crescimento dos metabólitos produzidos por essas cepas em diferentes meios líquidos indicou maior atividade antibacteriana em 72 h. Nesta condição, análises cromatográficas e de espectrometria de massa revelaram que a cepa S. pseudovenezuelae ACSL 470 produziu neomicina, um antibiótico aminoglicosídeo que apresentou alta atividade bactericida in vitro contra P. ananatis. Este é o primeiro relato de actinobactérias atuando como potenciais antagonistas microbianos para o controle de P. ananatis. Mais estudos são necessários para determinar a eficácia do controle da doença da mancha branca do milho por cepas de Streptomyces ou seus metabólitos em condições de casa de vegetação e campo.

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This study aimed to evaluate methods for studying the in vitro antimicrobial activity of lactic acid bacteria (LAB) against Brucella abortus and to evaluate the antagonistic effect of LAB on the viability of this pathogen. A total of 18 LAB strains (Lactobacillus plantarum, n = 11; Pediococcus acidilactici, n = 1; Lactobacillus rhamnosus, n = 4; and Lactobacillus brevis,n = 2), isolated from Minas artisanal cheeses produced in three regions (Canastra, Campos das Vertentes, and Araxá) of Minas Gerais State, Brazil, were tested for their antimicrobial activity against B. abortus using three methods: spot-on-lawn, agar well diffusion assay, and antagonistic activity of the culture supernatants. None of the tested LAB strains could inhibit B. abortus in the spot-on-lawn and agar-well diffusion assays. The supernatants produced by LAB had an acidic pH, with intensity depending on bacterial growth and strain, and could inhibit the growth of B. abortus. In contrast, pH-neutralized (pH 7.0) LAB supernatants did not suppress the growth of B. abortus. The results showed that the best technique to study the in vitro antagonism of LAB against B. abortus was the antagonistic activity of culture supernatants. The growth of B. abortus may have been inhibited by acid production.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar métodos de estudo in vitro da atividade antimicrobiana de bactérias lácticas contra Brucella abortus e avaliar o efeito antagônico das mesmas sobre a viabilidade deste patógeno. Um total de 18 amostras de bactérias lácteas (Lactobacillus plantarum, n = 11; Pediococcus acidilactici, n = 1; Lactobacillus rhamnosus, n = 4; e Lactobacillus brevis, n = 2), isoladas de exemplares de Queijo Minas Artesanal produzidos em três regiões (Canastra, Campos das Vertentes e Araxá) do estado de Minas Gerais, Brasil, foram testados quanto à sua atividade antimicrobiana contra B. abortus usando três métodos: spot-on-lawn, ensaio de difusão em poço e atividade antagonista de sobrenadante de cultura. Nenhuma das cepas testadas foi capaz de inibir B. abortus nos ensaios spot-on-lawm e de difusão em poço. Os sobrenadantes produzidos pelas bactérias lácteas apresentaram pH ácido, com intensidade dependente do crescimento bacteriano e da amostra, podendo inibir o crescimento de B. abortus. Em contraste, os sobrenadantes com pH neutralizado (pH 7,0) não inibiram o crescimento de B. abortus. Os resultados mostraram que a melhor técnica para estudar o antagonismo in vitro de bactérias lácteas contra B. abortus foi a atividade antagonista de sobrenadante de cultura. O crescimento de B. abortus pode ter sido inibido pela produção de ácido.(AU)

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The in vitro antagonistic activity of Bacillus velezensis LABIM40 (strain CMRP 4489) was assessed against Alternaria linariae, Botryotinia squamosa, Colletotrichum lindemuthianum, Gibberella zeae, and Rhizoctonia solani. An experiment was conducted using treated seeds under growth chamber conditions to determine the impact of various LABIM40 formulations on tomato seedling growth and the biocontrol of damping-off caused by R. solani. The treatments included the use of LABIM40 cell suspension, LABIM40 cell-free supernatant (CFS), 10 times concentrated CFS (10× CFS), commercial products based on Bacillus amyloliquefaciens (CP_1) and Bacillus subtilis (CP_2), and water. The effects of these products were assessed on tomato seedlings grown in sterile substrate or substrate inoculated with R. solani. In a dual culture test, B. velezensis LABIM40 inhibited the mycelial growth of the aforementioned fungal pathogens by 46.6%, 67.4%, 64.7%, 49.0%, and 54.4%, respectively. The minimum inhibitory concentration against each fungus was determined using varying concentrations of CFS in potato dextrose agar medium, followed by a regression analysis of mycelial growth inhibition. Except for A. linariae, the logarithmic model provided the best fit in all cases. Tomato seedlings from seeds treated with 10× CFS in inoculated substrate exhibited a survival rate 57% higher than that exhibited by the control treatment. However, no growth promotion was observed in tomato plants from seeds treated with LABIM40 cells or its CFS metabolites. In summary, these findings highlight the antagonistic activity of B. velezensis LABIM40 against A. linariae, B. squamosa, C. lindemuthianum, G. zeae, and R. solani, as demonstrated by dual culture and CFS diffusion tests. This suggests its potential as a biocontrol agent for damping-off in tomatoes.(AU)

O antagonismo do Bacillus velezensis LABIM40 (cepa CMRP 4489) foi avaliado in vitro contra Alternaria linariae, Botryotinia squamosa, Colletotrichum lindemuthianum, Gibberella zeae e Rhizoctonia solani. Com o objetivo de avaliar o efeito de diferentes formulações de LABIM40 no crescimento de mudas de tomateiro e no biocontrole do tombamento causado por R. solani, foi conduzido um experimento com sementes tratadas em condições de câmara de crescimento. Os tratamentos foram suspensão de células de LABIM40, LABIM40 SLC, SLC 10 vezes concentrado (10xSLC), produtos comerciais à base de Bacillus amyloliquefaciens (PC_1) e Bacillus subtilis (PC_2) e água. Os efeitos do produto foram avaliados em mudas de tomate cultivadas em substrato estéril e em substrato inoculado com R. solani. No teste de cultura dupla, B. velezensis LABIM40 inibiu em 46,6, 67,4, 64,7, 49,0 e 54,4% o crescimento micelial desses fungos fitopatogênicos, respectivamente. A concentração inibitória mínima para cada fungo foi determinada por diferentes concentrações de sobrenadante livre de células (SLC) em meio de batata dextrose ágar (PDA), seguido de análise de regressão da inibição do crescimento micelial. Com exceção de A. linariae, em todos os casos o modelo com melhor ajuste foi o logarítmico. A sobrevivência de mudas de tomate de sementes tratadas com 10xSLC em substrato inoculado foi 57% maior do que o tratamento controle. Não foi observada promoção de crescimento em plantas de tomate oriundas de sementes tratadas com células de LABIM40 ou metabólitos de seu SLC. Coletivamente, esses resultados destacam a atividade antagonista de B. velezensis LABIM40 contra A. linariae, B. squamosa, C. lindemuthianum, G. zeae e R. solani verificada por cultura dupla e testes de difusão de sobrenadante livre de células e seu potencial como agente de biocontrole do tombamento do tomateiro.(AU)

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Rice production is affected by important pathogens such as Magnaporthe oryzae, Cochliobolus miyabeanus, Monographella albescens and Sarocladium oryzae, and orchid mycorrhizal fungi can contribute to the biocontrol of these diseases. The aim of this study was to characterize the antagonism mechanisms of W. circinata against rice pathogens. The indoleacetic acid (IAA) and lytic enzymes of W. circinata were quantified. The effectiveness of the bioagent and its metabolites was assessed in vitro. Antagonism in vivo against rice blast was also investigated. Waitea circinata produced IAA (2.3 µg ml¹), cellulase and polyphenol oxidase in a qualitative test. Glucanase, chitinase and protease were also produced in culture with cell walls and in co-culture with pathogens to explain antibiosis. W. circinata acts on direct antagonism by antibiosis and volatile metabolites. Mycelial suspension reduced M. oryzae conidial germination, appressorium formation, and rice blast by 61, 82 and 84%, respectively. W. circinata, a unique bioagent, controls four rice pathogens from mechanisms of parasitism and antibiosis. The results could contribute to new formulations containing this fungus, enzymes as well as its volatile metabolites.

A produção de arroz é afetada por patógenos importantes como Magnaporthe oryzae, Cochliobolus miyabeanus, Monographella albescens e Sarocladium oryzae, e fungos micorrízicos de orquídeas podem contribuir para o biocontrole dessas doenças. O objetivo deste estudo foi caracterizar os mecanismos de antagonismo de W. circinata contra patógenos do arroz. O ácido indolacético (AIA) e as enzimas líticas de W. circinata foram quantificadas. A eficácia do bioagente e seus metabólitos foi avaliada in vitro. O antagonismo in vivo contra a brusone do arroz também foi investigado. Waitea circinata produziu AIA (2,3 µg ml¹), celulase e polifenol oxidase em teste qualitativo. Glucanase, quitinase e protease também foram produzidas em cultura com paredes celulares e em co-cultura com patógenos para explicar a antibiose. W. circinata atua no antagonismo direto por antibiose e metabólitos voláteis. A suspensão micelial reduziu a germinação de conídios de M. oryzae, a formação de apressórios e a brusone do arroz em 61, 82 e 84%, respectivamente. W. circinata, um bioagente único, controla quatro patógenos do arroz a partir de mecanismos de parasitismo e antibiose. Os resultados podem contribuir para novas formulações contendo este fungo, enzimas, bem como seus metabólitos voláteis.

Resumo

Os antimicrobianos são amplamente utilizados na medicina veterinária, portanto são necessários critérios na hora da prescrição desses fármacos a fim de evitar a resistência bacteriana que se tornou uma grande preocupação tanto para a saúde humana quanto para a medicina veterinária, devido ao seu uso indiscriminado. Uma técnica muito utilizada na rotina, são as associações entre antimicrobianos, que combinam o mecanismo de ação de cada fármaco para se obter os efeitos desejados, acarretando nas interações medicamentosas. Porém, se utilizado de forma incorreta, essas interações podem ser prejudiciais para a saúde dos pacientes. O objetivo desse estudo foi analisar prontuários de pacientes caninos e felinos hospitalizados afim de avaliar os critérios de seleção para o uso de antimicrobianos e suas associações. Foram analisados 112 prontuários, sendo eles 24 felinos e 88 caninos atendidos e hospitalizados no Hospital Veterinário "Prof. Ricardo Alexandre Rippler" da Universidade Vila Velha-UVV. O estudo demonstrou que o metronidazol foi o antimicrobiano mais utilizado em cães e a amoxicilina com clavulanato de potássio foi o mais utilizado nos felinos, além disso, a amoxicilina com clavulanato de potássio e metronidazol foi a associação mais observada em cães e gatos. A maior parte dos pacientes fizeram uso dos antibióticos de forma empírica, o que pode contribuir para a resistência microbiana. Além disso, foram encontradas algumas interações entre antimicrobianos de efeitos antagônicos, porém a maioria das associações foram realizadas de forma correta provocando efeito sinérgico no organismo dos pacientes. Conclui-se que o conhecimento sobre a utilização dos antimicrobianos na rotina da internação de cães e gatos é importante e com base nesses conhecimentos podemos aplicar medidas para atenuar a resistência aos antimicrobianos.

Antimicrobials are widely used in veterinary medicine, so criteria are needed when prescribing these drugs in order to avoid bacterial resistance, which has become a major concern for both human health and veterinary medicine, due to its indiscriminate use. A technique widely used in routine is the association between antimicrobials, which combine the mechanism of action of each drug to obtain the desired effects, resulting in drug interactions. However, if used incorrectly, these interactions can be harmful to the health of patients. The aim of this study was to analyze the medical records of hospitalized canine and feline patients in order to assess the selection criteria for the use of antimicrobials and their associations. 112 medical records were analyzed, of which 24 were cats and 88 canines treated and hospitalized at the "Prof. Ricardo Alexandre Rippler" from Universidade Vila Velha-UVV. The study showed that metronidazole was the most used antimicrobial in dogs and amoxicillin with potassium clavulanate was the most used in felines. Furthermore, amoxicillin with potassium clavolanate and metronidazole was the most observed association in dogs and cats. Most patients used antibiotics empirically, which may contribute to microbial resistance. In addition, some interactions were found between antimicrobials with antagonistic effects, but most associations were correctly performed, causing a synergistic effect in the patients' bodies. It is concluded that knowledge about the use of antimicrobials in the routine hospitalization of dogs and cats is important and based on this knowledge we can apply measures to mitigate antimicrobial resistance.

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This study aimed to isolate and select in vitro bacteria with probiotic potential for the Amazon ornamental fish Nannostomus beckfordi. For isolate, twelve fish underwent surgery procedure to remove their intestinal tract, macerate and then inoculate in the plate petri containing de Man Rugosa Sharped Agar (MRS). After bacterial growth (48 hours at 35ºC), selected strains were inoculated in MRS broth and submitted to resistance test with NaCl (0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 and 3.0%), pH (4, 5, 6, 8 and 9) and bile salts (5% w/v). Inhibition test against pathogenic bacteria Aeromonas hydrophila, Pseudomonas aeroginosa, Streptococcus agalactiae and Aeromonas Jandaei was also performed. Within the isolated strains group (23 strains), only six (S1, S2, S3, S4, S5 and S6) showed probiotic potential. Strains S1 and S6 showed the greater resistance for NaCl (0.5% and 1%) and pH (5 and 6), but only S1 obtained better results to resist the bile salts. Even against pathogenic bacteria, the S1 showed the best results with inhibition halos greater than 9 mm. In the end, this bacterial strain (S1) was identified as Enterococcus faecium 11037CHB. Thus, this is the first report regarding isolated autochthonous bacterium E. faecium with probiotic potential of N. beckfordi.

O objetivo deste estudo foi isolar e selecionar in vitro bactérias com potencial probiótico do peixe ornamental Amazônico Nannostomus beckfordi. Para o isolamento, retirou-se o intestino de 12 espécimes, que foram macerados, homogeneizados e semeados em placa de petri contento Ágar Man Rogosa e Sharpe (MRS). Posteriormente ao crescimento bacteriano (48 horas a 35ºC), as cepas selecionadas foram mantidas em caldo MRS e submetidas a testes de resistência a NaCl (0,5, 1,0, 1,5, 2,0 e 2,5 e 3,0%), pH (4, 5, 6, 8 e 9) e sais biliares (5% p/v). O antagonismo foi realizado frente as bactérias patogênicas Aeromonas hydrophila, Pseudomonas aeroginosa, Streptococcus agalactiae e Aeromonas jandaei. Das cepas isoladas (23 cepas), apenas seis (C1, C2, C3, C4, C5 e C6) apresentaram potencial probiótico. As cepas C1 e C6 tiveram maior resistência (p<0,05) para o NaCl (0,5 e 1%) e pH (5 a 6), na presença de sais biliares somente a C1 teve a melhor resistência de crescimento. Para o antagonismo frente as bactérias patogênicas, a C1 apresentou halo de inibição maior que 9 mm. Sendo esta cepa bactéria (C1) identificada como Enterococcus faecium 11037 CHB. Portanto, este é o primeiro relato do isolamento da bactéria autóctone E. faecium em N. beckfordi com potencial probiótico.

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The mycotoxigenic fungus Fusarium verticillioides is the primary maize pathogen and causes the maize stalk and ear rot diseases with significant economic losses. Furthermore, the excessive use of fungicides to control F. verticillioides constitutes threats to the environment and human health. Thus, sustainable alternatives such as biological control are needed to minimize the hazards associated with the current method. Although much is known about the vulnerability of the maize silks as a gateway for several fungal pathogens invading the developing grains, studies on the chemical properties of silk extracts and their resident microbiota are scarce. This study isolated and characterized bacteria and fungi that colonize the maize stigma to assess new potential biocontrol agents. The samples were collected from maize fields in the Brazilian localities of Sete Lagoas-MG, Sidrolândia-MS, Sertaneja-PR, and Goiânia-GO. One hundred sixty-seven microorganisms were isolated, 46% endophytic and 54% epiphytic. First, the antagonist activity was evaluated by the agar disc diffusion method performed in triplicate, and 83% of the isolates showed antagonist activity against F. verticillioides. Then, the 42 most efficient isolates were identified based on the partial sequencing of the bacterial 16S rRNA gene and fungi ITS region. The bacteria belong to the genera Bacillus (57.1%), Burkholderia (23.8%), Achromobacter (7.1%), Pseudomonas (2.4%), and Serratia (2.4%), while the fungi are Penicillium (2.4%), Candida (2.4), and Aspergillus (2.4%). The results showed that microorganisms from maize stigma might represent new promising agents for F. verticillioides control.

O fungo micotoxigênico Fusarium verticillioides é o principal patógeno do milho e causa doenças do colmo e da podridão da espiga com perdas econômicas significativas. Além disso, o uso excessivo de fungicidas no controle de F. verticillioides constitui uma ameaça ao meio ambiente e à saúde humana. Assim, alternativas sustentáveis, como o controle biológico, são necessárias para minimizar os riscos associados ao método atual. Este estudo isolou e caracterizou bactérias e fungos que colonizam o estigma do milho para avaliar novos agentes de biocontrole em potencial. As amostras foram coletadas em campos de milho nas localidades brasileiras de Sete Lagoas-MG, Sidrolândia-MS, Sertaneja-PR e Goiânia-GO. Cento e sessenta e sete microrganismos foram isolados, 46% endofíticos e 54% epifíticos. O teste de antagonismo empregando a técnica de disco de difusão em meio sólido, mostrou que 83% dos isolados apresentaram atividade antagonista contra F. verticillioides. Em seguida, 42 isolados mais eficientes foram identificados a partir do sequenciamento parcial do gene 16S rRNA bacteriano e da região ITS de fungos. Os isolados bacterianos pertencem ao gênero Bacillus (57,1%), Burkholderia (23,8%), Achromobacter (7,1%), Pseudomonas (2,4%) e Serratia (2,4%), enquanto os fungos são Penicillium (2,4%), Candida (2.4), e Aspergillus (2,4%). Os resultados mostraram que microrganismos do estigma do milho podem representar novos agentes promissores para o controle de F. verticillioides.

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Plant growth-promoting bacteria (PGPB) are known to establish positive relationships with plants. They act in favoring plant nutrition, production of phytohormones, control of pathogens and enhancement of stress tolerance. Thus, this study aimed to isolate bacteria from soil, rhizosphere, and root endosphere from sugarcane cultivated in the Southeastern of Brazil, to prospect strains with potential for plant growth promotion. The samples were plated in Nutrient Agar medium, and the morphologically distinct colonies were isolated and analyzed about indoleacetic acid production, phosphate solubilization and the growth control of the phytopathogenic fungus Fusarium verticillioides. A total of 219 isolates were obtained, of which 86 from soil, 67 from rhizosphere and 66 from sugarcane root endosphere. The strains that presented more than one mechanism of plant growth promotion were identified by the sequencing of 16S gene. Most species belonged to the genus Bacillus, which has strains already used in various biological products for the control of diseases in agriculture. Some Bacillus species isolated in our study have never been isolated from sugarcane, and others have been studied for the first time as plant growth promoters. The isolated strains constitute an important microbial bank to be explored to compose innovative products for agriculture.(AU)

Bactérias promotoras de crescimento de plantas são conhecidas por estabelecer relações positivas com as plantas. Atuam no favorecimento da nutrição das plantas, produção de fitohormônios, controle de patógenos e aumento da tolerância ao estresse. Desta forma, este estudo teve como objetivo isolar bactérias do solo, rizosfera e endosfera radicular de cana-de-açúcar, cultivada na região Sudeste do Brasil, para prospectar cepas com potencial para promoção de crescimento vegetal. As amostras foram semeadas em meio Ágar Nutriente, e as colônias morfologicamente distintas foram isoladas e analisadas quanto à produção de ácido indolacético, solubilização de fosfato e controle de crescimento do fungo fitopatogênico Fusarium verticillioides. Foram obtidos 219 isolados, sendo 86 do solo, 67 da rizosfera e 66 da endosfera da raiz da cana-de-açúcar. As cepas que apresentaram mais de um mecanismo de promoção do crescimento vegetal foram identificadas pelo sequenciamento do gene 16S. A maioria das espécies pertence ao gênero Bacillus, que possui linhagens utilizadas em diversos produtos biológicos para o controle de doenças na agricultura. Algumas espécies de Bacillus nunca foram isoladas da cana-deaçúcar e outras foram estudadas pela primeira vez como promotoras de crescimento de plantas. As cepas isoladas constituem um importante banco microbiano a ser explorado para a composição de produtos inovadores para a agricultura.(AU)

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The infestation of difficult-to-control weeds in a crop has direct negative effects on growth and development as they compete for water, light, and nutrients, in addition to hindering the harvest, and in the specific case of sugarcane they can reduce the longevity of the field. Normally, formulated mixture of herbicides, applied in pre-emergence conditions, is used to achieve a greater weed spectrum, longer residual effect, and lower costs. However, a mixture of two molecules can cause diverse effects, such as antagonism, synergism, or additives effects; therefore, it is important to know the interaction involved in each mixture used. In this way, this work has been developed to assess possible interactions of the association of the herbicides flumioxazin and pyroxasulfone applied in pre-emergence conditions, as well as assessing the effectiveness of the mixture control in Guinea grass (Panicum maximum). The study was conducted in greenhouse conditions in 5 L plastic pots, and the treatments consisted of a 4 x 4 factorial design: four flumioxazin doses (0, 50, 100, and 200 g ha-1) and four pyroxasulfone doses (0, 50, 100, and 200 g ha-1). The experimental design was the randomized block, with percentage control and residual dry mass evaluations at 35 days after application (DAA). The interaction data were analyzed using the Colby's model, and the control effectiveness data were analyzed using the F-test, followed by Tukey test, when significant. The effectiveness of the association between the herbicides flumioxazin and pyroxasulfone on Guinea grass was proven when applied in pre-emergence conditions with averages above 90% of control. The interaction between the herbicides flumioxazin and pyroxasulfone has been considered additive by Colby's model.(AU)

A infestação de plantas daninhas de difícil controle em uma cultura exerce efeitos negativos diretos no seu crescimento e desenvolvimento, competindo por água, luz e nutrientes, além de dificultar a colheita e, no caso específico da cana-de-açúcar, pode reduzir a longevidade do canavial. Normalmente, a mistura formulada de herbicidas em condições de pré-emergência é utilizada na cultura de cana-de-açúcar, para se alcançar maior espectro de ação, longo efeito residual e redução de custos. No entanto, uma mistura de duas moléculas pode resultar em efeitos sinérgicos, antagônicos ou aditivos, portanto, é importante conhecer a interação envolvida em cada mistura utilizada. Desta forma, este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar possíveis interações da associação dos herbicidas flumioxazin e pyroxasulfone aplicados em condições de pré-emergência, bem como avaliar a eficácia de controle da mistura em capim-colonião (Panicum maximum). O experimento foi realizado em condição de casa-de-vegetação em vasos plásticos com capacidade de 5 L, e os tratamentos constaram de esquema fatorial 4 x 4, quatro doses do herbicida flumioxazin (0, 50, 100 e 200 g ha-1) e quatro doses do herbicida pyroxasulfone (0, 50, 100 e 200 g ha-1). Adotou-se o esquema experimental de blocos ao acaso, com avaliações percentuais de controle, e massa seca residual aos 35 dias após a aplicação (DAA). Os dados da interação foram analisados utilizando-se o modelo de Colby, e os dados de eficácia de controle foram analisados por meio do teste F e do teste de Tukey. A eficácia da associação entre os herbicidas flumioxazin e pyroxasulfone sobre o capim-colonião foi comprovada na aplicação em condições de pré-emergência, com médias acima de 90% de controle. A interação dos herbicidas flumioxazin e pyroxasulfone foi considerada aditiva pelo modelo de Colby.(AU)

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Green synthesis of silver nanoparticles (AgNPs) is an ecofriendly, cost-effective and promising approach for discovery of novel therapeutics. The aim of the current work was to biogenic synthesize, characterize AgNPs using seed extracts of three economically important varieties of date palm (Iklas, Irziz and Shishi), and assess their anti-pathogenic bacterial activities. AgNPs were synthesised then characterised using electron microscopy and Fourier transform infrared analyses. The bactericidal activities of AgNPs against five different bacterial pathogens, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, methicillin-resistant Staphylococcus aureus and Streptococcus pneumoniae, were determined in vitro. In particular, changes in membrane integrity of virulent bacterial strains in response to AgNPs were investigated. Results of lactate dehydrogenase, alkaline phosphatase activity assays, and measurement of membrane potential revealed that the cytotoxic effects of the AgNPs were mainly centred on the plasma membrane of bacterial cells, leading to loss of its integrity and eventually cell death. In conclusion, green synthesis of AgNPs is an efficient, cost-effective and promising strategy to combat virulent antibiotic-resistant strains.

A síntese verde de nanopartículas de prata (AgNPs) é uma abordagem ecologicamente correta, econômica e promissora para a descoberta de novas terapêuticas. O objetivo do presente trabalho foi sintetizar biogênica, caracterizar AgNPs usando extratos de sementes de três variedades economicamente importantes de tamareira (Iklas, Irziz e Shishi) e avaliar suas atividades bacterianas antipatogênicas. AgNPs foram sintetizados e caracterizados usando microscopia eletrônica e análise de infravermelho por transformada de Fourier. As atividades bactericidas de AgNPs contra cinco diferentes patógenos bacterianos, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus resistente à meticilina e Streptococcus pneumoniae, foram determinadas in vitro. Em particular, foram investigadas alterações na integridade da membrana de cepas bacterianas virulentas em resposta a AgNPs. Os resultados da lactato desidrogenase, dos ensaios da atividade da fosfatase alcalina e da medição do potencial de membrana revelaram que os efeitos citotóxicos dos AgNPs estavam principalmente centrados na membrana plasmática das células bacterianas, levando à perda de sua integridade e, eventualmente, à morte celular. A síntese verde de AgNPs é uma estratégia eficiente, econômica e promissora para combater cepas virulentas resistentes a antibióticos.

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The application of herbicide tank mixtures is a common practice in agricultural settings, especially for controlling weed communities with mono and eudicotyledons species occurring simultaneously. Therefore, thisstudy was carried out with the objective of evaluating the effectiveness and interaction of dicamba-haloxyfop tank mixtures used to control four weed species. For this, four different experiments were conducted, each with one of the plant species, namely: sourgrass (Digitaria insularis), horseweed (Conyza spp.), morning glory (Ipomoea triloba) and goosegrass (Eleusine indica). In each experiment, the experimental design consisted of completely randomized blocks, in a 4x4 factorial scheme of treatments, totaling 16 treatments with five replications, i.e., 80 plots of each species. Four doses of the herbicide dicamba (480, 240, 120 and 0 g ha-1) and four doses of the herbicide haloxyfop (60, 30, 15 and 0 g ha-1) were adopted. Percentage control was evaluated at 14 and 28 days after application (DAA) and mass of dry matter was evaluated at 28 DAA. Antagonistic, additive and synergistic effects were observed for dicamba-haloxyfop tank mixtures, with a greater preponderance of additive effects. Considering all four plant species, in different doses and dates of evaluation, 72 dicamba-haloxyfop interactions were evaluated, in which 50 were considered additives.

A aplicação de misturas de herbicidas é uma prática recorrente no ambiente agrícola, sobretudo para controle de comunidades mistas de plantas daninhas, quando há ocorrência simultânea de espécies mono e eudicotiledôneas. Assim sendo, este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar a eficácia e a interação de misturas dos herbicidas haloxyfop (graminicida) e dicamba (latifolicida) para controle de quatro espécies de plantas daninhas.  Para tanto, quatro experimentos distintos foram realizados, cada um com uma espécie vegetal, a saber: capim-amargoso (Digitaria insularis), buva (Conyza spp.), corda-de-viola (Ipomoea triloba) e capim-pé-de-galinha (Eleusine indica). Em cada experimento, foi adotado modelo experimental de blocos ao acaso, no esquema fatorial 4x4, totalizando 16 tratamentos e cinco repetições, ou seja, 80 parcelas de cada espécie. Foram utilizadas quatro doses do herbicida dicamba (480, 240, 120 e 0 g ha-1) e quatro doses do herbicida haloxyfop (60, 30, 15 e 0 g ha-1). Foi avaliado o controle percentual das parcelas aos 14 e 28 dias após aplicação (DAA) e massa seca residual aos 28 DAA. Foram observados efeitos antagônicos, aditivos e sinérgicos para misturas entre dicamba e haloxyfop, com maior preponderância de efeitos aditivos. Considerando-se todas as quatro espécies vegetais, em diferentes doses e datas de avaliação, foram avaliadas 72 misturas

Resumo

ABSTRACT: This study aimed to evaluate the antagonistic effect of the mixture ofacetyl coenzyme-A carboxylase (ACCase) enzyme inhibiting herbicides and auxin herbicides in Lolium multiflorum and to determine mechanisms to mitigate this possible effect. The first experiments were conducted by associating the herbicide clethodim (108 g a.i. ha−1), quizalofop-p-ethyl (54 g a.i. ha−1), and clethodim + quizalofop-p-ethyl (108+54 g a.i. ha−1) with 2,4-D (1005 g a.e. ha−1) or triclopyr (720 g a.e. ha−1), in addition to the sole application of the respective graminicides. Another experiment included clethodim (54; 81; 108; 162; 216 g a.i. ha−1), quizalofop-p-ethyl (27; 40.5; 54; 81; 108 g a.i. ha−1), and clethodim + quizalofop-p-ethyl (54+27; 81+40.5; 108+54; 162+81; 216+108 g a.i. ha−1) mixed with 2,4-D (1005 g a.e. ha−1), or triclopyr (720 g a.e. ha−1), in addition to the control treatments without herbicide application. In the second experiment, herbicides clethodim (108 g a.i. ha−1), quizalofop-p-ethyl (54 g a.i. ha−1), and clethodim + quizalofop-p-ethyl (108+54 g a.i. ha−1) in combination with the herbicides 2,4-D (1005 g a.e. ha−1) or triclopyr (720 g a.e. ha−1)had malathion (1000 g a.i. ha−1) or glyphosate (720 g a.e. ha−1) mixed, in addition to the sole applications of the graminicides. The herbicide clethodim + quizalofop-p-ethyl did not present an antagonistic interaction with the auxin herbicides, and obtained 85% weed control. To obtain control similar to the sole application of this graminicide, the dose of the herbicide clethodim needs to be increased by 20%. However, the mixture of the herbicide quizalofop-p-ethyl with 2,4-D and triclopyr affects the ryegrass control. The use of strategies that increase the absorption of ACCase herbicides or the inhibition of P450 enzymes are ways to mitigate the antagonistic effect caused by the association of the two auxin herbicides.

RESUMO: O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito antagônico da mistura de herbicidas inibidores da enzima ACCase e herbicidas auxínicos em Lolium multiflorum e determinar mecanismos de mitigação deste possível efeito. No primeiro momento foram conduzidos experimentos associando o herbicida clethodim (108 g i.a. ha-1), quizalofop-p-ethyl (54 g i.a. ha-1) e clethodim + quizalofop-p-ethyl (108 + 54 g i.a. ha-1) com 2,4-D (1005 g e.a. ha-1) ou triclopyr (720 g e.a. ha-1), além da aplicação isolada dos respectivos graminicidas. Outro experimento contou com clethodim (54; 81; 108; 162; 216 g i.a ha-1), quizalofop-p-ethyl (27; 40,50; 54; 81; 108 g i.a ha-1) e clethodim + quizalofop-p-ethyl (54 + 27; 81 + 40,50; 108 +54; 162 +81; 216 + 108 g i.a ha-1) em mistura com 2,4-D (1005 g e.a ha-1) ou triclopyr (720 g e.a. ha-1), além das testemunhas sem aplicação herbicida. No segundo momento os herbicidas clethodim (108 g i.a. ha-1), quizalofop-p-ethyl (54 g i.a. ha-1) e clethodim + quizalofop-p-ethyl (108 + 54 g i.a. ha-1) em associação com os herbicidas 2,4-D (1005 g e.a ha-1) ou triclopyr (720 g e.a. ha-1), contaram com adição de malathion (1000 g i.a. ha-1) ou glyphosate (720 g e.a. ha-1), além das aplicações isoladas dos graminicidas. O herbicida clethodim + quizalofop-p-ethyl não apresentou interação antagônica com os herbicidas auxínicos, obtendo controle de 85%. Já para o herbicida clethodim é necessário o aumento de dose em 20 % é capaz de obter controle similar a aplicação isolada deste graminicida. Porém para o herbicida quizalofop-p-ethyl a mistura com os herbicidas 2,4-D e triclopyr repercute na diminuição do controle do azevém. O uso de estratégias que aumente a absorção do herbicida inibidor de ACCase ou a inibição das enzimas P450 são formas de mitigar o efeito antagônico causado pela associação destes dois tipos de herbicidas.

Resumo

ABSTRACT: In the search for improved yields, seed treatment by microbiolization has been used as an alternative to chemical treatment. The objective was to verify the physiological and sanitary quality of creole bean seeds, var. Chumbinho, after microbiolization with doses of a commercial product (c.p.) with Trichoderma harzianum (strain ESALQ-1306). The treatments were: T1) 100 mL c.p./100 kg seeds; T2) 150 mL c.p.; T3) 200 mL c.p.; T4) 200 mL of chemical treatment (c.p., 250 g L-1 fipronil + 25 g L-1 pyraclostrobin + 225 g L-1 thiophanate-methyl); and T5) control (without coating of seeds). The tests were: sanitary test (blotter test); germination and first count; accelerated aging, cold germination without soil, speed of germination rate (SGR), seedling shoot and root lengths, and emergence of seedlings in a greenhouse. T. harzianum controlled Aspergillus spp., Penicillium spp. and Fusarium oxysporum. With 100 mL c.p. of T. harzianum dose had better results for the germination and vigor, and this dose it is an alternative to chemical treatment in creole bean seeds.

RESUMO: Na busca por melhores rendimentos, o tratamento de sementes por microbiolização tem sido utilizado como alternativa ao tratamento químico. Objetivou-se verificar a qualidade fisiológica e sanitária de sementes de feijão crioulo, var. Chumbinho, após microbiolização com doses de um produto comercial (p.c.) com Trichoderma harzianum (cepa ESALQ-1306). Os tratamentos foram: T1) 100 mL p.c./100 kg de sementes; T2) 150 mL p.c.; T3) 200 mL p.c.; T4) 200 mL tratamento químico (p.c., 250 g L-1 fipronil + 25 g L-1 piraclostrobina + 225 g L-1 tiofanato metílico); e T5) controle (sem revestimento de sementes). Os testes foram: sanidade (blotter test), germinação, primeira contagem, envelhecimento acelerado, teste de frio sem solo, índice de velocidade de germinação (IVG), comprimento de parte aérea e de raiz das plântulas e emergência em casa de vegetação. T. harzianum controlou Aspergillus spp., Penicillium spp. e Fusarium oxysporum. A dose 100 mL de p.c. teve melhores resultados para germinação e vigor, sendo que essa dose é uma alternativa ao tratamento químico em sementes de feijão crioulo.