Recurrence of hepatitis C virus after treatment with pegylated interferon and direct acting antivirals in Punjab Pakistan / Recorrência do vírus da hepatite C após tratamento com interferon peguilado e antivirais de ação direta em Punjab, Paquistão

Although increased response rates concomitant in hepatitis C virus but relapse after treatment is threatened. Therefore, it is terrible requirement to evaluate the response of Pegylated interferon and direct acting antivirals in Punjab Pakistan. The study was conducted to find the rate of recurrence of HCV infection after treatment with Pegylated Interferon and Direct Acting Antivirals in Punjab Pakistan. This study was conducted at Department of Pathology, Nawaz Sharif Medical College Gujrat, while treatment effects monitored in different Government and Private Hospitals of Punjab, Pakistan. Total 973 patients who administered the recommended dose and divided in two groups (i) Interferon based therapy (ii) direct acting antivirals (DAAs).Other parameters like ALT and viral load studied. The rate of recurrence was higher in female infected with genotype 2b and in male with mixed genotype 3a/2b after six month of antiviral therapy. Genotype 3a showed significant response to therapy after three month. 32 among 374 (8.5%) were positive after 24 weeks of treatment with interferon, 29 (7.7%) patients have same genotype while 3 patients were re-infected with different HCV strains. With DAAs, only 27 (4.8%) patients were positive among 558 after 2 weeks and one patient re-infected with different genotype. Early and sustained virological response noted in DAAs. ALT and viral load decreased faster with DAAs that not achieved after 4 weeks with pegylated interferon. Sustained virological response appears in DAAs and recurrence rate is high in interferon therapy compared to DAAs. Therefore, reinfection has implications for correct treatment efficiency and to select strategies for retreatment cases.

Embora aumentem as taxas de resposta concomitantes no vírus da hepatite C (HCV), há risco de recidiva após o tratamento. Portanto, é um requisito terrível avaliar a resposta do interferon peguilado e antivirais de ação direta em Punjab, Paquistão. O estudo foi conduzido para encontrar a taxa de recorrência da infecção por HCV após o tratamento com interferon peguilado e antivirais de ação direta em Punjab, Paquistão. Este estudo foi conduzido no Departamento de Patologia Nawaz Sharif Medical College Gujrat, enquanto os efeitos do tratamento foram monitorados em diferentes hospitais públicos e privados de Punjab, Paquistão. Total de 973 pacientes que administraram a dose recomendada foram divididos em dois grupos: (i) Terapia baseada em interferon, (ii) antivirais de ação direta (DAAs). Outros parâmetros como ALT e carga viral foram estudados. A taxa de recorrência foi maior em mulheres infectadas com o genótipo 2b e em homens com genótipo misto 3a / 2b após seis meses de terapia antiviral. O genótipo 3a mostrou resposta significativa à terapia após três meses. 32 entre 374 (8,5%) foram positivos após 24 semanas de tratamento com interferon, 29 (7,7%) pacientes têm o mesmo genótipo, enquanto 3 pacientes foram reinfectados com diferentes cepas de HCV. Com DAAs, apenas 27 (4,8%) pacientes foram positivos entre 558 após duas semanas e um paciente reinfectado com genótipo diferente. Resposta virológica precoce e sustentada observada em DAAs. ALT e carga viral diminuíram mais rapidamente com DAAs, que não alcançou após 4 semanas com interferon peguilado. A resposta virológica sustentada aparece em DAAs, e a taxa de recorrência é alta na terapia com interferon em comparação com DAAs. Portanto, a reinfecção tem implicações para a eficiência do tratamento correto e para selecionar estratégias para casos de retratamento.

Recurrence of hepatitis C virus after treatment with pegylated interferon and direct acting antivirals in Punjab Pakistan / Recorrência do vírus da hepatite C após tratamento com interferon peguilado e antivirais de ação direta em Punjab, Paquistão

Although increased response rates concomitant in hepatitis C virus but relapse after treatment is threatened. Therefore, it is terrible requirement to evaluate the response of Pegylated interferon and direct acting antivirals in Punjab Pakistan. The study was conducted to find the rate of recurrence of HCV infection after treatment with Pegylated Interferon and Direct Acting Antivirals in Punjab Pakistan. This study was conducted at Department of Pathology, Nawaz Sharif Medical College Gujrat, while treatment effects monitored in different Government and Private Hospitals of Punjab, Pakistan. Total 973 patients who administered the recommended dose and divided in two groups (i) Interferon based therapy (ii) direct acting antivirals (DAAs).Other parameters like ALT and viral load studied. The rate of recurrence was higher in female infected with genotype 2b and in male with mixed genotype 3a/2b after six month of antiviral therapy. Genotype 3a showed significant response to therapy after three month. 32 among 374 (8.5%) were positive after 24 weeks of treatment with interferon, 29 (7.7%) patients have same genotype while 3 patients were re-infected with different HCV strains. With DAAs, only 27 (4.8%) patients were positive among 558 after 2 weeks and one patient re-infected with different genotype. Early and sustained virological response noted in DAAs. ALT and viral load decreased faster with DAAs that not achieved after 4 weeks with pegylated interferon. Sustained virological response appears in DAAs and recurrence rate is high in interferon therapy compared to DAAs. Therefore, reinfection has implications for correct treatment efficiency and to select strategies for retreatment cases.(AU)

Embora aumentem as taxas de resposta concomitantes no vírus da hepatite C (HCV), há risco de recidiva após o tratamento. Portanto, é um requisito terrível avaliar a resposta do interferon peguilado e antivirais de ação direta em Punjab, Paquistão. O estudo foi conduzido para encontrar a taxa de recorrência da infecção por HCV após o tratamento com interferon peguilado e antivirais de ação direta em Punjab, Paquistão. Este estudo foi conduzido no Departamento de Patologia Nawaz Sharif Medical College Gujrat, enquanto os efeitos do tratamento foram monitorados em diferentes hospitais públicos e privados de Punjab, Paquistão. Total de 973 pacientes que administraram a dose recomendada foram divididos em dois grupos: (i) Terapia baseada em interferon, (ii) antivirais de ação direta (DAAs). Outros parâmetros como ALT e carga viral foram estudados. A taxa de recorrência foi maior em mulheres infectadas com o genótipo 2b e em homens com genótipo misto 3a / 2b após seis meses de terapia antiviral. O genótipo 3a mostrou resposta significativa à terapia após três meses. 32 entre 374 (8,5%) foram positivos após 24 semanas de tratamento com interferon, 29 (7,7%) pacientes têm o mesmo genótipo, enquanto 3 pacientes foram reinfectados com diferentes cepas de HCV. Com DAAs, apenas 27 (4,8%) pacientes foram positivos entre 558 após duas semanas e um paciente reinfectado com genótipo diferente. Resposta virológica precoce e sustentada observada em DAAs. ALT e carga viral diminuíram mais rapidamente com DAAs, que não alcançou após 4 semanas com interferon peguilado. A resposta virológica sustentada aparece em DAAs, e a taxa de recorrência é alta na terapia com interferon em comparação com DAAs. Portanto, a reinfecção tem implicações para a eficiência do tratamento correto e para selecionar estratégias para casos de retratamento.(AU)

The use of Artificial Intelligence in predicting Respiratory Syncytial Virus-inhibiting flavonoids / O uso da Inteligência Artificial na predição de flavonoides inibidores do Vírus Sincicial Respiratório

Human Respiratory Syncytial Virus (hRSV) infection results in death and hospitalization of thousands of people worldwide each year. Unfortunately, there are no vaccines or specific treatments for hRSV infections. Screening hundreds or even thousands of promising molecules is a challenge for science. We integrated biological, structural, and physicochemical properties to train and to apply the concept of artificial intelligence (AI) able to predict flavonoids with potential anti-hRSV activity. During the training and simulation steps, the AI produced results with hit rates of more than 83%. The better AIs were able to predict active or inactive flavonoids against hRSV. In the future, in vitro and/or in vivo evaluations of these flavonoids may accelerate trials for new anti-RSV drugs, reduce hospitalizations, deaths, and morbidity caused by this infection worldwide, and be used as input in these networks to determine which parameter is more important for their decision.

A infecção pelo Vírus Sincicial Respiratório Humano (hRSV) resulta na morte e hospitalização de milhares de pessoas em todo o mundo a cada ano. Infelizmente, não existem vacinas ou tratamentos específicos para tais infecções. A testagem de centenas, ou mesmo milhares, de moléculas promissoras é um desafio para a ciência. Neste trabalho, nós integramos propriedades biológicas, estruturais e físico-químicas para treinar e aplicar o conceito de inteligência artificial (IA) capaz de prever flavonoides com potencial atividade anti-hRSV. Durante as etapas de treinamento e simulação, a IA produziu resultados com taxas de acerto superiores a 83%, sendo capaz de prever flavonoides ativos ou inativos contra o hRSV. No futuro, avaliações in vitro e/ou in vivo desses flavonoides poderão acelerar os testes de novas drogas anti-RSV, reduzir hospitalizações, mortes e morbidade causadas por essa infecção. Além disso, a validação futura destes dados poderá determinar qual parâmetro tem maior peso na decisão da inteligência.

Recurrence of hepatitis C virus after treatment with pegylated interferon and direct acting antivirals in Punjab Pakistan

Abstract Although increased response rates concomitant in hepatitis C virus but relapse after treatment is threatened. Therefore, it is terrible requirement to evaluate the response of Pegylated interferon and direct acting antivirals in Punjab Pakistan. The study was conducted to find the rate of recurrence of HCV infection after treatment with Pegylated Interferon and Direct Acting Antivirals in Punjab Pakistan. This study was conducted at Department of Pathology, Nawaz Sharif Medical College Gujrat, while treatment effects monitored in different Government and Private Hospitals of Punjab, Pakistan. Total 973 patients who administered the recommended dose and divided in two groups (i) Interferon based therapy (ii) direct acting antivirals (DAAs).Other parameters like ALT and viral load studied. The rate of recurrence was higher in female infected with genotype 2b and in male with mixed genotype 3a/2b after six month of antiviral therapy. Genotype 3a showed significant response to therapy after three month. 32 among 374 (8.5%) were positive after 24 weeks of treatment with interferon, 29 (7.7%) patients have same genotype while 3 patients were re-infected with different HCV strains. With DAAs, only 27 (4.8%) patients were positive among 558 after 2 weeks and one patient re-infected with different genotype. Early and sustained virological response noted in DAAs. ALT and viral load decreased faster with DAAs that not achieved after 4 weeks with pegylated interferon. Sustained virological response appears in DAAs and recurrence rate is high in interferon therapy compared to DAAs. Therefore, reinfection has implications for correct treatment efficiency and to select strategies for retreatment cases.

RESUMO Embora aumentem as taxas de resposta concomitantes no vírus da hepatite C (HCV), há risco de recidiva após o tratamento. Portanto, é um requisito terrível avaliar a resposta do interferon peguilado e antivirais de ação direta em Punjab, Paquistão. O estudo foi conduzido para encontrar a taxa de recorrência da infecção por HCV após o tratamento com interferon peguilado e antivirais de ação direta em Punjab, Paquistão. Este estudo foi conduzido no Departamento de Patologia Nawaz Sharif Medical College Gujrat, enquanto os efeitos do tratamento foram monitorados em diferentes hospitais públicos e privados de Punjab, Paquistão. Total de 973 pacientes que administraram a dose recomendada foram divididos em dois grupos: (i) Terapia baseada em interferon, (ii) antivirais de ação direta (DAAs). Outros parâmetros como ALT e carga viral foram estudados. A taxa de recorrência foi maior em mulheres infectadas com o genótipo 2b e em homens com genótipo misto 3a / 2b após seis meses de terapia antiviral. O genótipo 3a mostrou resposta significativa à terapia após três meses. 32 entre 374 (8,5%) foram positivos após 24 semanas de tratamento com interferon, 29 (7,7%) pacientes têm o mesmo genótipo, enquanto 3 pacientes foram reinfectados com diferentes cepas de HCV. Com DAAs, apenas 27 (4,8%) pacientes foram positivos entre 558 após duas semanas e um paciente reinfectado com genótipo diferente. Resposta virológica precoce e sustentada observada em DAAs. ALT e carga viral diminuíram mais rapidamente com DAAs, que não alcançou após 4 semanas com interferon peguilado. A resposta virológica sustentada aparece em DAAs, e a taxa de recorrência é alta na terapia com interferon em comparação com DAAs. Portanto, a reinfecção tem implicações para a eficiência do tratamento correto e para selecionar estratégias para casos de retratamento.

Anti-herpes activity of the total alkaloid fraction from the branches of Fusaea longifolia (Annonaceae) / Atividade anti-herpes da fração total de alcaloides dos ramos da Fusaea longifolia (Annonaceae)

The herpes simplex virus type 1 (HSV-1) and type 2 (HSV-2) occur worldwide. Infections caused by these viruses have great public health importance due to the growing resistance to the first-choice drug, acyclovir, especially in immunosuppressed patients. Alkaloids derived from species of Annonaceae have been reported as antiviral agents against HSV and others viruses. Within this context, we evaluated the antiviral activity of the total alkaloid fraction (TAF) extracted from the branches of Fusaea longifolia (Aubl.) Saff. (Annonaceae), a species native to the Amazon region, against the HSV-1 and HSV-2 viruses. The antiviral activity was evaluated through the plate reduction assay and the mode of action was investigated by a set of other assays. The TAF was active against the HSV-2 strain 333 and against the HSV-1 strains KOS and 29R (acyclovir resistant), with selectivity index values (SI = 50% cytotoxic concentration/50% effective concentration) of 5, 4 and 3, respectively. In the preliminary study of the anti-HSV-2 mode of action, TAF showed viral inhibitory effects if added up to 12 h post-infection, had virucidal activity and did not present viral inhibition in pre-treatment. Our results showed that the TAF exhibited anti-HSV activity. Regarding HSV-2, TAF acted after the viral infection and had virucidal activity. A mass spectrometry analysis revealed the presence of nine alkaloids in the TAF that had previously been reported for Annonaceae, including liriodenine, lysicamine and isoboldine, which have been described as potential anti-HSV-1 agents.(AU)

Os vírus herpes simplex tipo 1 (HSV-1) e tipo 2 (HSV-2) têm ampla ocorrência global. As infecções causadas por esses vírus têm grande importância em saúde pública devido à crescente resistência ao fármaco de primeira linha, aciclovir, principalmente em pacientes imunossuprimidos. Alcaloides derivados de espécies de Annonaceae têm sido relatados como agentes antivirais contra o HSV e outros vírus. Neste contexto, nós avaliamos a atividade antiviral da fração alcaloide total (TAF) dos ramos de Fusaea longifolia (Aubl.) Saff. (Annonaceae), uma espécie nativa da região amazônica, contra os vírus HSV-1 e HSV-2. A atividade antiviral foi avaliada através do ensaio de redução em placa e o modo de ação foi investigado por um conjunto de ensaios. O TAF foi ativo contra a cepa HSV-2 333 e contra as cepas HSV-1 KOS e 29R (resistente ao aciclovir), com valores de índice de seletividade (IS = 50% concentração citotóxica/50% concentração efetiva) de 5, 4 e 3, respectivamente. No estudo preliminar do modo de ação da atividade anti-HSV-2, o TAF inibiu a replicação viral quando adicionados até 12 h pós-infecção, apresentou atividade virucida e não apresentou inibição viral no pré-tratamento. Nossos resultados mostraram que o TAF exibiu atividade anti-HSV. Em relação ao HSV-2, o TAF atuou após a infecção viral e apresentou atividade virucida. Uma análise do TAF por espectrometria de massas identificou a presença de nove alcaloides, incluindo liriodenina, lisicamina e isoboldina, que já foram descritos como potenciais agentes anti-HSV-1.(AU)

Phytochemical screening of Cordia glabrata (MART.) A.DC. extracts and its potential antioxidant, photoprotective, antimicrobial and antiviral activities / Triagem fitoquímica de extratos de Cordia glabrata (MART.) A.DC. e sua potencial atividade antioxidante, fotoprotetora, antimicrobiana e antiviral

Abstract Species of the genus Cordia have shown biological activities, such as anti-inflammatory, analgesic, antioxidant, antiviral, and antifungal activities. The species Cordia glabrata (MART) A.DC. Has no information concerning its phytochemical profile and possible biological activities. Thus, this study aimed to evaluate this profile in ethanolic extracts of young, adult and senescent leaves, as well as their antioxidant, photoprotective, antimicrobial, and virucidal potentials. Phytochemical analysis was performed by TLC (thin-layer chromatography) and showed the presence of flavonoids, tannins, and terpenes. The evaluation by UPLC-MS/MS (Ultra performance liquid chromatography - tandem mass spectrometer) evidenced the presence of caffeic (3.89 mgL-1), p-cumaric (6.13 mgL-1), and ferulic (0.58 mgL-1) acids, whilst, in GC/MS (Gas chromatography-mass spectrometry) analysis there was a greater amount of palmitic (51.17%), stearic (20.34%), linoleic (9.62%), and miristic (8.16%) fatty acids. The DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) and ABTS+ (2′-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)) radicals were used to verify the potential antioxidant activity, observing a better activity for the leaf extract in the adult phenological stage: 54.63 ± 1.06 µgmL-1 (DPPH) and 44.21 ± 1.69 mM (ABTS). The potential photoprotective activity of the extracts was determined by spectrophotometry and the in vitro values of SPF (Sun Protection Factor) in young and adult leaves (5.47 and 5.41, respectively) showed values close to the minimum SPF of 6.0 required by ANVISA (Brazilian Health Regulatory Agency). It was not observed an antimicrobial activity for Staphylococcus aureus with a minimum inhibitory concentration of 2000 μgmL-1, however the anti-herpetic assay against the Herpes simplex virus type 2 (HSV-2) showed a potent virucidal activity at the tested concentrations with CV50 value <0.195 μgmL-1 and a Selectivity Index (SI = CC50 / CV50) greater than 448. The results obtained in this study suggest that extracts of leaves of C. glabrata in their adult phenological stage have potential antioxidant, photoprotective and virucidal activity, considering in vitro test results.

Resumo Espécies do gênero Cordia apresentam atividades biológicas, como anti-inflamatória, analgésica, antioxidante, antiviral e antifúngica. Para a espécie Cordia glabrata (MART) A.DC., ainda não existem informações sobre seu perfil fitoquímico e possíveis atividades biológicas, deste modo, o presente estudo teve como objetivo avaliar este perfil em extratos etanólicos de folhas jovens, adultas e senescentes, bem como o potencial antioxidante, fotoprotetor, antimicrobiano e virucida. A análise fitoquímica foi realizada por CCD (Cromatografia em Camada Delgada), mostrando a presença de flavonóides, taninos e terpenos. Na avaliação por CLAE EM/EM (Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência acoplada a Espectrometria de Massas) foi evidenciado a presença dos ácidos caféico (3,89 mgL-1), p-cumárico (6,13 mgL-1) e ferúlico (0,58 mgL-1), paralelamente, na CG/EM (Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas) verificou-se maior quantidade dos ácidos graxos palmítico (51,17%), esteárico (20,34%), linoléico (9,62%) e mirístico (8,16%). Os radicais DPPH (2,2-Difenil-1-picrilhidrazil) e ABTS+ (2′-Azino-bis (ácido 3-etilbenzotiazolina-6-sulfônico)) foram utilizados para verificar o potencial antioxidante, observando-se uma atividade superior para o extrato da folha em sua fase fenológica adulta: 54,63 ± 1,06 µgmL-1 (DPPH) e 44,21 ± 1,69 mM (ABTS+). A potencial atividade fotoprotetora dos extratos foi determinada espectrofotometricamente e os valores in vitro de FPS (Fator de Proteção Solar) em folhas jovens e adultas (5,47 e 5,41 respectivamente) apresentaram valores próximos ao FPS mínimo de 6,0 exigido pela ANVISA (Agência Nacional de Vigilância Sanitária). Não foi observada atividade antimicrobiana para Staphylococcus aureus sendo a concentração inibitória mínima de 2000 μgmL-1, no entanto o ensaio anti-herpético contra o vírus Herpes simplex tipo 2 (HSV-2) mostrou uma potente atividade virucida nas concentrações testadas com um valor de CV50 <0,195 μgmL-1 e um Índice de Seletividade (IS = CC50 / CV50) maior que 448. Os resultados obtidos neste estudo sugerem que extratos de folhas de C. glabrata em seu estágio fenológico adulto apresentam potencial antioxidante, fotoprotetora e virucida, considerando os resultados de testes in vitro.

Evaluation of maternal antibodies against rabies in puppies and kittens in Mazandaran Province, Iran / [Avaliação de anticorpos maternos contra a raiva em filhotes de cachorro e gatos na província de Mazandaran, Irã]

Rabies is a critical zoonotic high-risk disease, which has emerged as an important public-health problem. There are limited investigations that explore maternally derived antibody (MDA) in puppies and kittens from around the world. Furthermore, there is no such research in any province of Iran. This study measured the serum level of MDA in 10 puppies and their vaccinated bitches (n=20), 10 puppies and their unvaccinated bitches (n=20), 10 kittens with vaccinated queens and 10 kittens with unvaccinated queens. Antibodies against rabies were measured using quantitative, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Our results showed that 90% (9 out of 10) of puppies from vaccinated bitches were positive for anti-rabies antibodies, while test results for all puppies from non-vaccinated bitches were negative (P=0.001). Moreover, puppies' titers were significantly higher in the vaccinated group than the non-vaccinated group (P=0.003). There was a similar condition between vaccinated and non-vaccinated bitches (P=0.008). Although kittens' titers were significantly higher in the vaccinated group than the non-vaccinated group (P=0.03), only 20 percent of the kittens with vaccinated queens showed positive results, while all kittens from non-vaccinated queens were negative for anti-rabies antibodies (P=0.137).

A raiva é uma doença zoonótica crítica de alto risco, que surgiu como um importante problema de saúde pública. Há investigações limitadas que exploram anticorpos derivados da maternidade (MDA) em filhotes e gatos de todo o mundo. Além disso, não existe tal pesquisa em nenhuma província do Irã. Este estudo mediu o nível sérico do MDA em 10 filhotes e suas cadelas vacinadas (n=20), 10 filhotes e suas cadelas não vacinadas (n=20), 10 filhotes com rainhas vacinadas e 10 filhotes com rainhas não vacinadas. Os anticorpos contra a raiva foram medidos usando o ensaio quantitativo de imunoabsorção enzimática (ELISA). Nossos resultados mostraram que 90% (9 em cada 10) dos filhotes de cadelas vacinadas foram positivos para anticorpos anti-rábicos, enquanto os resultados dos testes para todos os filhotes de cadelas não vacinadas foram negativos (P=0,001). Além disso, os títulos dos filhotes foram significativamente mais altos no grupo vacinado do que no grupo não vacinado (P=0,003). Havia uma condição similar entre cadelas vacinadas e não vacinadas (P=0,008). Embora os títulos dos filhotes fossem significativamente mais altos no grupo vacinado do que no grupo não vacinado (P=0,03), apenas 20% dos filhotes com rainhas vacinadas apresentaram resultados positivos, enquanto todos os filhotes de rainhas não vacinadas foram negativos para anticorpos anti-rábicos (P=0,137).

First record of antibodies to the bluetongue virus in ewe (Ovis aries) in the state of Amazonas, Brazil / Primeiro registro de anticorpos para o vírus da língua azul em ovino (Ovis aries) no estado do Amazonas, Brasil

The objective of this work was to describe the first record of antibodies to the Bluetongue Virus (BTV) in ewe, in the state of Amazonas. The ewe, which was in twin pregnancy, gave birth on May 9, 2015, but a lamb died hours after delivery. Veterinary service was then requested by the owner, where emaciation, loss of wool, pyrexia, apathy, dyspnea, mucoid nasal secretion, facial, lingual and submandibular edema were observed. There was a visit by the Agricultural Defense Agency of the State of Amazonas to the property and blood samples were collected from the animal. The whole blood and serum were sent to the National Agricultural Laboratory, where it was possible to detect the presence of specific antibodies to BTV, through the Agar Gel Double Immunodiffusion. The ewe was submitted to a new blood collection, following the same protocols and the samples were sent to the Biological Institute of São Paulo, confirmed diagnosis. The animal in a serious clinical condition, could not resist and died in July 2015. The occurrence of an allochthonous case, in an area where vector insects occur, can trigger an endemic process in the Amazon region. With this, the epidemiological control of these occurrences is necessary, in order to avoid the spread of the disease in the country.

O objetivo do trabalho foi descrever o primeiro registro de anticorpos para o Vírus da Língua Azul (VLA) em ovino, no estado do Amazonas. A ovelha, que se encontrava em gestação gemelar, pariu no dia 9 de maio de 2015, porém um cordeiro faleceu horas após o parto. Foi então solicitado serviço veterinário por parte do proprietário, onde foi observado emaciação, perda de lã, pirexia, apatia, dispneia, secreção nasal mucoide, edema facial, lingual e submandibular. Houve visita da Agência de Defesa Agropecuária do Estado do Amazonas na propriedade e coletadas amostras de sangue do animal. O sangue total e soro foram enviados ao Laboratório Nacional Agropecuário, no qual foi possível detectar a presença de anticorpos específicos para VLA, através do teste de Imunodifusão Dupla em Gel de Ágar. A ovelha foi submetida a uma nova coleta de sangue, seguindo os mesmos protocolos e as amostras foram enviadas ao Instituto Biológico de São Paulo, confirmando diagnóstico. O animal em estado clínico grave, não resistiu e veio a óbito em julho de 2015. A ocorrência de um caso alóctone, em uma área de ocorrência de insetos vetores, pode desencadear um processo de endemia na região amazônica. Com isso, o controle epidemiológico destas ocorrências, se fazem necessários, afim de se evitar a disseminação da doença no país.

Virucidal activity of oriental hornet Vespa orientalis venom against hepatitis C virus

Background Hepatitis C virus (HCV) infection is a major worldwide health problem that can cause liver fibrosis and hepatocellular carcinoma (HCC). The clinical treatment of HCV infection mainly relies on the use of direct-acting antivirals (DAAs) that are usually expensive and have side effects. Therefore, achieving the discovery of more successful agents is always urgent. In this context, antiviral compounds that inhibit viral infections and disease progression with important therapeutic activities have been identified in animal venoms including arthropod toxins. This indicates that arthropod venoms represent a good natural source of promising candidates for new antivirals. Methods The antiviral activity of the wasp venom (WV), isolated from the Oriental hornet (Vespa orientalis), was assessed using cell culture technique with human hepatocellular carcinoma-derived cell line (Huh7it-1) and the recombinant strain of HCV genotype 2a (JFH1). Results The results revealed that WV inhibited HCV infectivity with 50% inhibitory concentration (IC50) of 10 ng/mL, while the 50% cytotoxic concentration (CC50) was 11,000 ng/mL. Time of addition experiment showed that the WV blocked HCV attachment/entry to the cells probably through virucidal effect. On the other hand, the venom showed no inhibitory effect on HCV replication. Conclusion WV can inhibit the entry stage of HCV infection at non-cytotoxic concentrations. Therefore, it could be considered a potential candidate for characterization of natural anti-HCV agents targeting the entry step.(AU)

Fatores associados à infecção pelo vírus da estomatite vesicular em equídeos no estado do Rio Grande do Norte, Brasil / Factors associated with infection by the vesicular stomatitis virus in equines in the state of Rio Grande do Norte, Brazil

Objetivou-se investigar a presença do Vírus da Estomatite Vesicular (VEV) e seus fatores de risco para ocorrência e disseminação da enfermidade em equídeos das mesorregiões Leste e Oeste Potiguar do estado do Rio Grande do Norte, Brasil. Foram analisadas pela técnica de virusneutralização, 809 amostras sanguíneas de equídeos provenientes de noventa propriedades de dezesseis municípios Potiguares durante os meses de julho de 2018 a fevereiro de 2019. Os fatores de riscos associados ao VEV foram avaliados por meio de questionário epidemiológico e os dados submetidos a análise estatística no programa IBM SPSS Statistics versão 21.0 com nível de confiança de 95%. Posteriormente, todas as variáveis estatisticamente significantes foram submetidas a análise de regressão de Poisson. A soroprevalência de anticorpos anti-VEV foi 24,6% (199/809), sendo 3,2% (13/402) de soropositivos na mesorregião Leste e 45,7% (186/407) na do Oeste Potiguar. Com relação aos sorotipos, observou-se uma prevalência de 3,8% (31/809) e 24,5% (198/809) para Indiana 2 e 3 respectivamente, com 15,1% (30/198) de coinfecção. Equídeos criados na mesorregião Oeste, em propriedades que não realizam quarentena e onde os animais enfermos são mantidos no rebanho, foram consideradas fatores predisponentes a infecção pelo VEV. Esses resultados demonstram a circulação do VEV em equídeos no Rio Grande do Norte, com destaque ao Oeste Potiguar, e sendo necessário a aplicação de medidas sanitárias que impeçam introdução e disseminação do vírus ente as espécies susceptíveis, principalmente em condições climáticas favoráveis para a sua manutenção, no ambiente de criação e pastagens.

This study aimed to investigate the presence of Vesicular stomatitis virus (VSV) and risk factors for its occurrence and dissemination in equines from the Eastern and Western mesoregions of the state of Rio Grande do Norte, Brazil. Blood samples were analyzed, by Serum Virus Neutralization Assay, from 809 animals belonging to 90 properties distributed in sixteen municipalities from July 2018 to February 2019. Risk factors were assessed using an epidemiological questionnaire. Data were submitted to statistical analysis using the software IBM SPSS Statistics, version 21.0 with a 95% confidence level. Also, all statistically significant variables were subjected to Poisson regression analysis. The occurrence of anti-VSV antibodies was 24.6% (199/809) with 3.2% (13/402) and 45.7% (186/407) of seropositivity in the Western and Eastern mesoregion, respectively. Regarding serotypes, there were an occurrence of 3.8% (31/809) and 24.5% (198/809) for Indiana 2 and 3, respectively, and 15.1% (30/198) of co-infection for both. Equines kept of the Western mesoregion, on properties that do not quarantine, and where sick animals are kept in the herd, were considered risk factors for LVV infection. These results demonstrate the presence of VSV in equines in Rio Grande do Norte, with emphasis on Oeste Potiguar, and that sanitary measures must be adopted to prevent the introduction and viral spreading among susceptible species, especially due to favorable climatic conditions for the maintenance of VSV in the breeding and pasture environment.

Diagnosis and treatment of HEp-2 cells contaminated with mycoplasma / Diagnóstico e tratamento de células HEp-2 contaminadas por micoplasma

Contamination of primary and cell cultures by mycoplasmas is one of the main economic and biological pitfalls in basic research, diagnosis and manufacture of biotechnological products. It is a common issue which may be difficult to conduct surveillance on. Mycoplasma presence may affect several physiological parameters of the cell, besides being considered an important source of inaccurate and/or non-reproducible scientific results. Each cell type presents characteristical symptoms, mainly morphological, that indicate a contamination by mycoplasma. HEp-2 cells originate from carcinoma of the larynx and are, therefore, part of the respiratory tract, which is one of mycoplasma habitats. Despite the importance these cells in several biological research (evaluation of cell proliferation and migration, apoptosis, antiviral and antitumor compounds), the alterations induced by mycoplasma contamination in HEp-2 cells have not yet been described. Here, we describe the progressive morphological alterations in culture of HEp-2 cells infected with mycoplasma, as well as the-diagnosis of the infection and its treatment. Mycoplasma contamination described within this work led to cytoplasm elongation, cell-to-cell spacing, thin plasma membrane projections, cytoplasmic vacuoles, fusion with neighboring cells, and, finally, cell death. Contamination was detected by fluorescence imaging (DAPI) and PCR reactions. The cultures were treated with BM-Cyclin antibiotic to eliminate contamination. The data presented here will be of relevance to researchers whose investigations involve cell culture, especially respiratory and HEp-2 cells.(AU)

A contaminação de culturas primárias e celulares por micoplasmas é uma das principais armadilhas econômicas e biológicas da pesquisa básica, diagnóstico e fabricação de produtos biotecnológicos. Trata-se de uma contaminação rotineira, mas de difícil acompanhamento. A presença de micoplasma pode afetar vários parâmetros fisiológicos da célula, além de ser considerada uma importante fonte de resultados científicos imprecisos e/ou não reprodutíveis. Cada tipo de célula apresenta sintomas característicos, principalmente morfológicos, que indicam uma contaminação por micoplasma. As células HEp-2 são originárias do carcinoma da laringe e, portanto, fazem parte do trato respiratório, um dos habitats do micoplasma. Apesar da importância destas células em diversas pesquisas biológicas (avaliação da proliferação e migração celular, apoptose, compostos antivirais e antitumorais), as alterações decorrentes da contaminação por micoplasma nestas células ainda não foi descrita. Aqui, descrevemos as alterações morfológicas progressivas na cultura de células HEp-2 infectadas por micoplasma, bem como o diagnóstico da infecção e seu tratamento. A contaminação por micoplasma descrita neste trabalho resultou em alongamento citoplasmático, espaçamento entre células, projeções delgadas da membrana plasmática, vacúolos citoplasmáticos, fusão de células vizinhas e, finalmente, morte celular. A contaminação foi detectada por imagens de fluorescência (DAPI) e reações de PCR. As culturas foram tratadas com antibiótico BM-Cyclin para eliminar a contaminação. Os dados aqui apresentados serão de relevância para pesquisadores cujas investigações envolvem cultura celular, principalmente células respiratórias e HEp-2.(AU)

Properties, bioactive potential and extraction processes of glycosaminoglycans: an overview / Propriedades, potencial bioativo e processos de extração de glicosaminoglicanos: uma visão geral

Glycosaminoglycans (GAGs) are long-chain polysaccharides that are divided into sulphates and non-sulphates, these being chondroitin sulphate, heparan sulphate, dermatan sulphate, heparin sulphate and the only non-sulphate in the group is hyaluronic acid. GAGs are obtained from animal tissue and by an expensive low-yield extraction process; however, they are highly commercially valued polysaccharides and exploited in the biomedical market. Their disaccharidic composition, chain length and sulfation pattern present great variability depending on the species and extraction factors. GAGs possess immunomodulatory, antioxidant, antiviral, anti-inflammatory, neuroprotective, antiproliferative and anticoagulant properties, functioning as therapeutic agents modulating an array of biological processes. This report presents the general aspects of each GAG, source and extraction process, in addition to the characteristics that give them the most varied therapeutic properties and pharmacological applications.(AU)

Os glicosaminoglicanos (GAGs) são polissacarídeos de cadeias longas que se dividem em sulfatados e não sulfatados, sendo estes, sulfato de condroitina, sulfato de heparana, sulfato de dermatana, sulfato de heparina e o único não sulfatado do grupo que é o ácido hialurônico. Os GAGs são encontrados em todo tecido animal, são extraídos por um processo de alto custo e baixo rendimento, no entanto, o material obtido é valorizado comercialmente e amplamente explorado no mercado biomédico. Sua composição dissacarídica, comprimento da cadeia e padrão de sulfatação apresentam grande variabilidade dependendo das espécies e fatores de extração. Os GAGs possuem propriedades imunomoduladoras, antioxidantes, antivirais, anti-inflamatórias, neuroprotetoras, antiproliferativas e anticoagulantes, além de farmacológicas, funcionando como agentes terapêuticos moduladores de uma série de processos biológicos. Este relatório apresenta os aspectos gerais de cada GAG, fonte e processo de extração, além das características que lhes conferem as mais variadas propriedades terapêuticas e aplicações farmacológicas.(AU)

Fighting COVID-19

Abstract The current COVID-19 pandemic caused by the novel coronavirus (SARS-CoV2) poses a threat to global health owing to its high rate of spread and severe forms of respiratory infection. The lack of vaccines and antivirals prevents clinical strategies against the disease, creating an emerging need for the development of safe and effective treatments. Strategies for vaccine development include complete vaccines against viruses, subunits, and nucleic acids, but are still in their early stages. Studies carried out to date on possible SARS-CoV2 drug targets highlight glycoprotein S, Mpro (main protease or protease type 3C), and a member of the transmembrane serine protease II families (TMPRSS2). However, due to the pandemic state, priority is given to marketed drugs. These include chloroquine (CQ), hydroxychloroquine (HCQ), nitazoxanide, remdesivir, Lopinavir/ritonavir (LPV / r), in addition to treatment with convalescent plasma. But, therapeutic specific effects against SARS-CoV2 have not yet been verified. Most of the information obtained about treatment is based on preliminary and limited studies. We conclude that, at this time of emergency, the search for new therapies is more urgent due to the need to save lives. Thus, we point out as interesting targets for future more specific research: glycoprotein S, Mpro, and TMPRSS2.

Resumo A pandemia de COVID-19 causada pelo novo Coronavírus (SARS-CoV2) representa uma ameaça à saúde global devido à alta taxa de disseminação e formas graves de infecção respiratória. A falta de vacinas e antivirais específicos dificultam as estratégias clínicas de controle da doença, criando a necessidade urgente do desenvolvimento de tratamentos seguros e eficazes. Com relação as estratégias para o desenvolvimento de vacinas, incluem-se: aquelas com o vírus completo, subunidades e ácidos nucléicos, mas estas ainda estão em estágios iniciais. Já sobre os estudos realizados até o momento buscando novos alvos terapêuticos contra o SARS-CoV2, destacam a glicoproteína S; Mpro (principal protease ou protease tipo 3C) e um membro da família transmembrana serina protease II (TMPRSS2). No entanto, devido ao estado pandêmico, tem sido dada prioridade aos medicamentos comercializados. Estes incluem a cloroquina (CQ); hidroxicloroquina (HCQ); nitazoxanida; remdesivir; Lopinavir / ritonavir (LPV/r); além do tratamento com plasma de pacientes curados. Porém, ainda não há uma estratégia terapêutica contra o SARS-CoV2 totalmente eficaz, e a maioria das informações obtidas sobre o tratamento é baseada em estudos preliminares e limitados. Concluímos então que, neste momento de emergência, a busca por novas terapias é algo urgente devido à necessidade de salvar vidas. Assim finalizamos sugerindo como alvos interessantes para futuras pesquisas específicas: a glicoproteína S, Mpro e o TMPRSS2.

Diagnosis and treatment of HEp-2 cells contaminated with mycoplasma

Abstract Contamination of primary and cell cultures by mycoplasmas is one of the main economic and biological pitfalls in basic research, diagnosis and manufacture of biotechnological products. It is a common issue which may be difficult to conduct surveillance on. Mycoplasma presence may affect several physiological parameters of the cell, besides being considered an important source of inaccurate and/or non-reproducible scientific results. Each cell type presents characteristical symptoms, mainly morphological, that indicate a contamination by mycoplasma. HEp-2 cells originate from carcinoma of the larynx and are, therefore, part of the respiratory tract, which is one of mycoplasma habitats. Despite the importance these cells in several biological research (evaluation of cell proliferation and migration, apoptosis, antiviral and antitumor compounds), the alterations induced by mycoplasma contamination in HEp-2 cells have not yet been described. Here, we describe the progressive morphological alterations in culture of HEp-2 cells infected with mycoplasma, as well as the-diagnosis of the infection and its treatment. Mycoplasma contamination described within this work led to cytoplasm elongation, cell-to-cell spacing, thin plasma membrane projections, cytoplasmic vacuoles, fusion with neighboring cells, and, finally, cell death. Contamination was detected by fluorescence imaging (DAPI) and PCR reactions. The cultures were treated with BM-Cyclin antibiotic to eliminate contamination. The data presented here will be of relevance to researchers whose investigations involve cell culture, especially respiratory and HEp-2 cells.

Resumo A contaminação de culturas primárias e celulares por micoplasmas é uma das principais armadilhas econômicas e biológicas da pesquisa básica, diagnóstico e fabricação de produtos biotecnológicos. Trata-se de uma contaminação rotineira, mas de difícil acompanhamento. A presença de micoplasma pode afetar vários parâmetros fisiológicos da célula, além de ser considerada uma importante fonte de resultados científicos imprecisos e/ou não reprodutíveis. Cada tipo de célula apresenta sintomas característicos, principalmente morfológicos, que indicam uma contaminação por micoplasma. As células HEp-2 são originárias do carcinoma da laringe e, portanto, fazem parte do trato respiratório, um dos habitats do micoplasma. Apesar da importância destas células em diversas pesquisas biológicas (avaliação da proliferação e migração celular, apoptose, compostos antivirais e antitumorais), as alterações decorrentes da contaminação por micoplasma nestas células ainda não foi descrita. Aqui, descrevemos as alterações morfológicas progressivas na cultura de células HEp-2 infectadas por micoplasma, bem como o diagnóstico da infecção e seu tratamento. A contaminação por micoplasma descrita neste trabalho resultou em alongamento citoplasmático, espaçamento entre células, projeções delgadas da membrana plasmática, vacúolos citoplasmáticos, fusão de células vizinhas e, finalmente, morte celular. A contaminação foi detectada por imagens de fluorescência (DAPI) e reações de PCR. As culturas foram tratadas com antibiótico BM-Cyclin para eliminar a contaminação. Os dados aqui apresentados serão de relevância para pesquisadores cujas investigações envolvem cultura celular, principalmente células respiratórias e HEp-2.

Study of metalloproteinases in the blood of goats experimentally infected with caprine encephalitis arthritis virus / Estudo de metaloproteinases no sangue de caprinos experimentalmente infectados pelo vírus da artrite encefalite caprina

Caprine arthritis encephalitis is a lentiviral disease that leads to considerable losses in goat farming. In the acute phase of viral infection, though antiviral antibodies are produced by the host's immune system, they are not sufficient to be detected by serological tests. Acute infections begin with an incubation period, during which the viral genome replicates and host innate responses are initiated. Matrix metalloproteinases (MMPs) are enzymes that play an important role in the physiological and pathological processes of tissue remodeling. The present study aimed to evaluate the expression of MMPs and their activity in the blood serum of male goats experimentally infected with caprine arthritis encephalitis virus (CAEV). Five dairy male goats, aged 3-4 years, were intravenously inoculated with CAEV Cork strain (titer: 105-6 TCID50/mL) after being tested negative for CAEV thrice at consecutive intervals of 30 days using western blot analysis and nested-PCR. The study included three stages: S1 or pre-infection stage; S2 or seroconversion stage, corresponding to the occurrence of first seroconversion; and S3 or post-seroconversion stage, corresponding to 23 weeks after seroconversion. Zymography was performed for the samples using gelatin zymography gels (12.5%), which were subjected to electrophoresis at 170V, 1A, and 300W for 50-70 min. The density of MMP-2 was found to be lower at S1 (1456.20 pixels) than that at S2 and S3 (1943.80 and 2104.40 pixels, respectively) (P < 0.05); and the density of MMP-9 was found to be lower at S3 (133.60 pixels) than that at S1 and S2 (359.60 and 370.60 pixels, respectively). The density of proMMP-2 was low at S1 and S3 (130.45 and 145.20 pixels, respectively). On the other hand, the density of proMMP-9 was statistically different between S1 and S3 (89.22 vs. 415.60 pixels). Both proMMP-2 and proMMP-9 were absent at S2. Thus, MMP-2 and MMP9 exhibited opposite behaviors depending on the stage [...].

A encefalite por artrite caprina é uma doença lentiviral que leva a perdas consideráveis na criação de caprinos. Na fase aguda da infecção viral, embora os anticorpos antivirais sejam produzidos pelo sistema imunológico do hospedeiro, eles não são suficientes para serem detectados por testes sorológicos. As infecções agudas começam com um período de incubação, durante o qual o genoma viral se replica e as respostas inatas do hospedeiro são iniciadas. As metaloproteinases da matriz (MMPs) são enzimas que desempenham um papel importante nos processos fisiológicos e patológicos da remodelação tecidual. O presente estudo teve como objetivo avaliar a expressão de MMPs e sua atividade no soro sanguíneo de reprodutores caprinos infectados experimentalmente pelo vírus da encefalite por artrite caprina(CAEV). Cinco machos caprinos, com idades entre 3-4 anos, foram inoculadas por via intravenosa com a cepa de CAEV Cork (título: 105-6 TCID50/mL) após serem testados negativamente para CAEV três vezes em intervalos consecutivos de 30 dias usando a análise de western blot e nested-PCR. O estudo incluiu três etapas: estágio S1 ou pré-infecção; S2 ou estágio de soroconversão, correspondente à ocorrência de primeira soroconversão; e S3 ou pós-soroconversão, correspondendo a 23 semanas após a soroconversão. A zimografia foi realizada para as amostras utilizando gel de gelatina (12,5%), que foram submetidos à eletroforese em 170V, 1A e 300W por 50-70 min. Verificou-se que a densidade de MMP-2era menor em S1 (1456,20 pixels) do que em S2 e S3 (1943,80 e 2104,40 pixels, respectivamente) (P <0,05); e a densidade de MMP-9 foi menor em S3 (133,60 pixels) do que em S1 e S2 (359,60 e 370,60 pixels, respectivamente). A densidade do proMMP-2 era baixa em S1 e S3 (130,45 e 145,20 pixels, respectivamente). Por outro lado, a densidade do proMMP-9 foi estatisticamente diferente entre S1 e S3(89,22 vs. 415,60 pixels). ProMMP-2 e proMMP-9 estavam ausentes no S2. Assim, MMP-2 e [...].

Detection of bluetongue virus antibodies in sheep from Paraná, Brazil / Detecção de anticorpos para o vírus da língua azul em ovinos do estado do Paraná, Brasil

Bluetongue (BT) is an infectious and non-contagious disease caused by bluetongue virus (BTV) belonging to the genus Orbivirus. It is transmitted by a hematophagous vector, Culicoides sp., to ruminants, particularly to sheep, which are most susceptible to this disease. The main serological tests are agar gel immunodiffusion (AGID), which is recommended by the World Organization for Animal Health (OIE), and the competitive enzyme-linked immunosorbent assay (cELISA), which has the advantage of no cross-reaction with other orbiviruses. The aim was to compare the results of these two tests by conducting them on sera collected from sheep in the state of Paraná, Brazil. From March to October 2017, serum samples were collected from 270 sheep from 10 farms in six mesoregions of Paraná. The samples were subjected to AGID and cELISA to detect antibodies against BTV. Based on the test results, we classified the sheep as low, moderate, and high occurrence. The results demonstrated that 64.81% (175/270) of the sheep were seropositive through the cELISA test, showing a high occurrence, and 41.11% (111/270) were seropositive through the AGID test, indicating a moderate occurrence. The concordance between the tests was moderate (0.51) as determined by the Kappa coefficient. Among the studied farms, 90% (9/10) presented at least one seropositive sheep, and the number of animals tested positive by the cELISA test was higher than those by the AGID test. Favorable climate, which favors the presence and multiplication of the culicoid vector and the occurrence of infection, was the biggest predominant factor responsible for the obtained results. The low occurrence in farms with milder climate suggest that the presence of antibodies also occurs due to the low pathogenicity of circulating serotypes in the different mesoregions studied. It is concluded that BTV infection is present in the sheep herds in Paraná, and the occurrence...

A língua azul (LA) é uma enfermidade infecciosa e não contagiosa causada por um vírus (VLA) do gênero Orbivirus, transmitida por vetores hematófagos Culicoides sp., aos ruminantes sobretudo aos ovinos, espécie mais susceptível. Os principais testes sorológicos utilizados são a Imunodifusão em Gél de Ágar (IDGA), preconizada pela OIE, e o teste Imunoensaio Enzimático Competitivo (ELISAc), sendo que este tem como vantagem não ocorrer reação cruzada contra outros orbivírus. O objetivo do trabalho foi detectar a presença de anticorpos contra o VLA em ovinos no estado do Paraná através dos testes diagnósticos IDGA e ELISAc. Durante os meses de março a outubro de 2017, colheu-se sangue de 270 ovinos, em 10 propriedades localizadas em seis mesorregiões paranaenses. As amostras foram submetidas aos testes de IDGA e ELISAc para detecção de anticorpos contra o VLA. Baseado nos resultados classificaram-se os rebanhos como baixa, moderada ou elevada ocorrência. Os resultados demonstraram elevada ocorrência através do teste de ELISAc, que apresentou 64,81% (175/270) de ovinos positivos, e moderada ocorrência através do IDGA, com 41,11% (111/270) de ovinos soropositivos. A concordância obtida entre os testes foi moderada (0,51) através do coeficiente Kappa. O número de ovinos reagentes no exame de ELISAc foi maior que o teste de IDGA em todas as propriedades positivas, demonstrando ser superior. O clima propício foi um dos fatores favoráveis para as ocorrências observadas, pois favorece a presença e multiplicação do vetor Culicoide e a ocorrência da infecção. A baixa ocorrência nas propriedades com clima mais ameno sugere que a presença de anticorpos provavelmente ocorra também pela baixa patogenicidade dos sorotipos circulantes nas diferentes mesorregiões estudadas. Conclui-se que há infecção de VLA no rebanho ovino paranaense, e a detecção de anticorpos para o VLA foi moderada, através do teste de IDGA, e elevada, através do teste ELISAc.

Occurrence of antibodies against Herpesvirus and Arteritis Virus in equines from the state of Rio Grande do Norte, Brazil

Background: Equine Herpesvirus type 1 (EHV-1) and Equine Arteritis Virus (EAV) have a high capacity for dissemination, causing losses in horse breeding due to reproductive, respiratory and neurological problems. In the State of Rio Grande do Norte there is only one survey, in the municipality of Mossoró, about these diseases. The purpose of this study was therefore to determine the prevalence and assess the risk factors associated with EHV-1 and EAV infections in unvaccinated horses raised in the mesoregions of East and West Potiguar in the State of Rio Grande do Norte, Brazil. Materials, Methods & Results: Between August 2018 and February 2019, blood samples were collected from equines on farms located in sixteen municipalities in the mesoregions of East and West Potiguar for the serological diagnosis of EAV (809 samples from 90 farms) and of EHV (778 samples from 88 farms), being that, only municipalities that had at least five hundred equines were included in the study. An investigative epidemiological questionnaire was applied to each property visited, containing questions related to the breeder, property, animal and the sanitary, reproductive and nutritional management. A logistic regression was performed to assess the risk factors associated with EVH, considering the serological test (positive or negative) as the dependent variable. EAV and EVH antibodies were detected through the serum virus neutralization assay. No evidence was found of EAV [0% (0/809)], but EHV showed a prevalence rate of 32% (249/778), with 80.6% (71/88) of the farms having at least one animal that tested positive, and EHV was present in all the municipalities covered in this study. The risk factors identified were: animals raised in East Potiguar (OR = 1.36, CI 95%: 1.01-1.85, P = 0.041), extensive livestock farming system (OR = 1.79, CI 95%: 1.10-2.91, P = 0.041), working animals (OR = 3.63, IC 95%: 1.91-6.91, P =...

Fighting COVID-19 / Combatendo a COVID-19

The current COVID-19 pandemic caused by the novel coronavirus (SARS-CoV2) poses a threat to global health owing to its high rate of spread and severe forms of respiratory infection. The lack of vaccines and antivirals prevents clinical strategies against the disease, creating an emerging need for the development of safe and effective treatments. Strategies for vaccine development include complete vaccines against viruses, subunits, and nucleic acids, but are still in their early stages. Studies carried out to date on possible SARS-CoV2 drug targets highlight glycoprotein S, Mpro (main protease or protease type 3C), and a member of the transmembrane serine protease II families (TMPRSS2). However, due to the pandemic state, priority is given to marketed drugs. These include chloroquine (CQ), hydroxychloroquine (HCQ), nitazoxanide, remdesivir, Lopinavir/ritonavir (LPV / r), in addition to treatment with convalescent plasma. But, therapeutic specific effects against SARS-CoV2 have not yet been verified. Most of the information obtained about treatment is based on preliminary and limited studies. We conclude that, at this time of emergency, the search for new therapies is more urgent due to the need to save lives. Thus, we point out as interesting targets for future more specific research: glycoprotein S, Mpro, and TMPRSS2.(AU)

A pandemia de COVID-19 causada pelo novo Coronavírus (SARS-CoV2) representa uma ameaça à saúde global devido à alta taxa de disseminação e formas graves de infecção respiratória. A falta de vacinas e antivirais específicos dificultam as estratégias clínicas de controle da doença, criando a necessidade urgente do desenvolvimento de tratamentos seguros e eficazes. Com relação as estratégias para o desenvolvimento de vacinas, incluem-se: aquelas com o vírus completo, subunidades e ácidos nucléicos, mas estas ainda estão em estágios iniciais. Já sobre os estudos realizados até o momento buscando novos alvos terapêuticos contra o SARS-CoV2, destacam a glicoproteína S; Mpro (principal protease ou protease tipo 3C) e um membro da família transmembrana serina protease II (TMPRSS2). No entanto, devido ao estado pandêmico, tem sido dada prioridade aos medicamentos comercializados. Estes incluem a cloroquina (CQ); hidroxicloroquina (HCQ); nitazoxanida; remdesivir; Lopinavir / ritonavir (LPV/r); além do tratamento com plasma de pacientes curados. Porém, ainda não há uma estratégia terapêutica contra o SARS-CoV2 totalmente eficaz, e a maioria das informações obtidas sobre o tratamento é baseada em estudos preliminares e limitados. Concluímos então que, neste momento de emergência, a busca por novas terapias é algo urgente devido à necessidade de salvar vidas. Assim finalizamos sugerindo como alvos interessantes para futuras pesquisas específicas: a glicoproteína S, Mpro e o TMPRSS2.(AU)

Study of metalloproteinases in the blood of goats experimentally infected with caprine encephalitis arthritis virus / Estudo de metaloproteinases no sangue de caprinos experimentalmente infectados pelo vírus da artrite encefalite caprina

Caprine arthritis encephalitis is a lentiviral disease that leads to considerable losses in goat farming. In the acute phase of viral infection, though antiviral antibodies are produced by the host's immune system, they are not sufficient to be detected by serological tests. Acute infections begin with an incubation period, during which the viral genome replicates and host innate responses are initiated. Matrix metalloproteinases (MMPs) are enzymes that play an important role in the physiological and pathological processes of tissue remodeling. The present study aimed to evaluate the expression of MMPs and their activity in the blood serum of male goats experimentally infected with caprine arthritis encephalitis virus (CAEV). Five dairy male goats, aged 3-4 years, were intravenously inoculated with CAEV Cork strain (titer: 105-6 TCID50/mL) after being tested negative for CAEV thrice at consecutive intervals of 30 days using western blot analysis and nested-PCR. The study included three stages: S1 or pre-infection stage; S2 or seroconversion stage, corresponding to the occurrence of first seroconversion; and S3 or post-seroconversion stage, corresponding to 23 weeks after seroconversion. Zymography was performed for the samples using gelatin zymography gels (12.5%), which were subjected to electrophoresis at 170V, 1A, and 300W for 50-70 min. The density of MMP-2 was found to be lower at S1 (1456.20 pixels) than that at S2 and S3 (1943.80 and 2104.40 pixels, respectively) (P < 0.05); and the density of MMP-9 was found to be lower at S3 (133.60 pixels) than that at S1 and S2 (359.60 and 370.60 pixels, respectively). The density of proMMP-2 was low at S1 and S3 (130.45 and 145.20 pixels, respectively). On the other hand, the density of proMMP-9 was statistically different between S1 and S3 (89.22 vs. 415.60 pixels). Both proMMP-2 and proMMP-9 were absent at S2. Thus, MMP-2 and MMP9 exhibited opposite behaviors depending on the stage [...].(AU)

A encefalite por artrite caprina é uma doença lentiviral que leva a perdas consideráveis na criação de caprinos. Na fase aguda da infecção viral, embora os anticorpos antivirais sejam produzidos pelo sistema imunológico do hospedeiro, eles não são suficientes para serem detectados por testes sorológicos. As infecções agudas começam com um período de incubação, durante o qual o genoma viral se replica e as respostas inatas do hospedeiro são iniciadas. As metaloproteinases da matriz (MMPs) são enzimas que desempenham um papel importante nos processos fisiológicos e patológicos da remodelação tecidual. O presente estudo teve como objetivo avaliar a expressão de MMPs e sua atividade no soro sanguíneo de reprodutores caprinos infectados experimentalmente pelo vírus da encefalite por artrite caprina(CAEV). Cinco machos caprinos, com idades entre 3-4 anos, foram inoculadas por via intravenosa com a cepa de CAEV Cork (título: 105-6 TCID50/mL) após serem testados negativamente para CAEV três vezes em intervalos consecutivos de 30 dias usando a análise de western blot e nested-PCR. O estudo incluiu três etapas: estágio S1 ou pré-infecção; S2 ou estágio de soroconversão, correspondente à ocorrência de primeira soroconversão; e S3 ou pós-soroconversão, correspondendo a 23 semanas após a soroconversão. A zimografia foi realizada para as amostras utilizando gel de gelatina (12,5%), que foram submetidos à eletroforese em 170V, 1A e 300W por 50-70 min. Verificou-se que a densidade de MMP-2era menor em S1 (1456,20 pixels) do que em S2 e S3 (1943,80 e 2104,40 pixels, respectivamente) (P <0,05); e a densidade de MMP-9 foi menor em S3 (133,60 pixels) do que em S1 e S2 (359,60 e 370,60 pixels, respectivamente). A densidade do proMMP-2 era baixa em S1 e S3 (130,45 e 145,20 pixels, respectivamente). Por outro lado, a densidade do proMMP-9 foi estatisticamente diferente entre S1 e S3(89,22 vs. 415,60 pixels). ProMMP-2 e proMMP-9 estavam ausentes no S2. Assim, MMP-2 e [...].(AU)

Detection of bluetongue virus antibodies in sheep from Paraná, Brazil / Detecção de anticorpos para o vírus da língua azul em ovinos do estado do Paraná, Brasil

Bluetongue (BT) is an infectious and non-contagious disease caused by bluetongue virus (BTV) belonging to the genus Orbivirus. It is transmitted by a hematophagous vector, Culicoides sp., to ruminants, particularly to sheep, which are most susceptible to this disease. The main serological tests are agar gel immunodiffusion (AGID), which is recommended by the World Organization for Animal Health (OIE), and the competitive enzyme-linked immunosorbent assay (cELISA), which has the advantage of no cross-reaction with other orbiviruses. The aim was to compare the results of these two tests by conducting them on sera collected from sheep in the state of Paraná, Brazil. From March to October 2017, serum samples were collected from 270 sheep from 10 farms in six mesoregions of Paraná. The samples were subjected to AGID and cELISA to detect antibodies against BTV. Based on the test results, we classified the sheep as low, moderate, and high occurrence. The results demonstrated that 64.81% (175/270) of the sheep were seropositive through the cELISA test, showing a high occurrence, and 41.11% (111/270) were seropositive through the AGID test, indicating a moderate occurrence. The concordance between the tests was moderate (0.51) as determined by the Kappa coefficient. Among the studied farms, 90% (9/10) presented at least one seropositive sheep, and the number of animals tested positive by the cELISA test was higher than those by the AGID test. Favorable climate, which favors the presence and multiplication of the culicoid vector and the occurrence of infection, was the biggest predominant factor responsible for the obtained results. The low occurrence in farms with milder climate suggest that the presence of antibodies also occurs due to the low pathogenicity of circulating serotypes in the different mesoregions studied. It is concluded that BTV infection is present in the sheep herds in Paraná, and the occurrence...(AU)

A língua azul (LA) é uma enfermidade infecciosa e não contagiosa causada por um vírus (VLA) do gênero Orbivirus, transmitida por vetores hematófagos Culicoides sp., aos ruminantes sobretudo aos ovinos, espécie mais susceptível. Os principais testes sorológicos utilizados são a Imunodifusão em Gél de Ágar (IDGA), preconizada pela OIE, e o teste Imunoensaio Enzimático Competitivo (ELISAc), sendo que este tem como vantagem não ocorrer reação cruzada contra outros orbivírus. O objetivo do trabalho foi detectar a presença de anticorpos contra o VLA em ovinos no estado do Paraná através dos testes diagnósticos IDGA e ELISAc. Durante os meses de março a outubro de 2017, colheu-se sangue de 270 ovinos, em 10 propriedades localizadas em seis mesorregiões paranaenses. As amostras foram submetidas aos testes de IDGA e ELISAc para detecção de anticorpos contra o VLA. Baseado nos resultados classificaram-se os rebanhos como baixa, moderada ou elevada ocorrência. Os resultados demonstraram elevada ocorrência através do teste de ELISAc, que apresentou 64,81% (175/270) de ovinos positivos, e moderada ocorrência através do IDGA, com 41,11% (111/270) de ovinos soropositivos. A concordância obtida entre os testes foi moderada (0,51) através do coeficiente Kappa. O número de ovinos reagentes no exame de ELISAc foi maior que o teste de IDGA em todas as propriedades positivas, demonstrando ser superior. O clima propício foi um dos fatores favoráveis para as ocorrências observadas, pois favorece a presença e multiplicação do vetor Culicoide e a ocorrência da infecção. A baixa ocorrência nas propriedades com clima mais ameno sugere que a presença de anticorpos provavelmente ocorra também pela baixa patogenicidade dos sorotipos circulantes nas diferentes mesorregiões estudadas. Conclui-se que há infecção de VLA no rebanho ovino paranaense, e a detecção de anticorpos para o VLA foi moderada, através do teste de IDGA, e elevada, através do teste ELISAc.(AU)