Influence of thawing temperature on sperm motility, structure, and metabolism of frozen bovine semen / Influência da temperatura de descongelamento na motilidade, estrutura e metabolismo do sêmen bovino congelado

ABSTRACT: The heating rate used during semen thawing plays an important role in reducing structural and functional damage to spermatozoa. In this study, we evaluated the influence of thawing temperature on semen quality, reactive oxygen species (ROS) production, and mitochondrial activity of cryopreserved bovine semen. A total of 195 straws of 0.5 mL from five Holstein Friesian bulls were used (39 straws per bull). Samples underwent 8 to 22 years of storage; they were processed under a standard protocol with tris-egg yolk and stored in liquid nitrogen. Samples were thawed for 30 seconds in a water bath at T1: 36 °C, T2: 38 °C or T3: 40 °C. Sperm motility and kinematics, morphology, structural membrane integrity (SMI), functional membrane integrity (FMI), acrosome integrity (AI), ROS, and mitochondrial membrane potential (ΔΨM) of post-thawing bovine sperm were evaluated. Generalized linear models were fitted to the data. Each model included the effects of bull, storage time, and treatment. The Shapiro-Wilk test was used to assess data normality, and means were compared using the Tukey test. T2 and T3 showed better results for sperm motility and kinematic parameters, SMI (%) (T1 41.9 ± 2.3; T2 45.7 ± 1.9; T3 47.4 ± 2.8), ROS (RFU/min) (T1 0.026 ± 0.007; T2 0.032 ± 0.001; T3 0.031 ± 0.001) and high-ΔΨM (RFU x 103) (67.1± 0,4; 71.3 ± 0.4; 74.2 ± 0.4) (P < 0.05). However, T1 had higher FMI (39.3 ± 2.3) than T2 (34.0 ± 1.9) (P < 0.05), though not significantly (P > 0.05) different from T3 (38.4 ± 2.2). Thawing temperatures of 38 °C and 40 °C increases motility, kinetics, membrane integrity, mitochondrial activity and ROS of cryopreserved bovine semen, compared with more conventional thawing at 36 °C.

RESUMO: A taxa de aquecimento usada durante o descongelamento do sêmen desempenha um papel importante na redução dos danos estruturais e funcionais nos espermatozóides. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a influência da temperatura de descongelamento na qualidade do sêmen, produção de espécies reativas de oxigênio (ROS) e atividade mitocondrial do sêmen bovino criopreservado. Foram utilizados 195 palhetas de 0,5 mL de cinco touros Holstein Friesian (39 palhetas por touro). As amostras passaram por oito a 22 anos de armazenamento e foram processadas sob protocolo padrão com Tris-gema de ovo e armazenadas em nitrogênio líquido. As temperaturas de descongelamento foram T1: 36 °C, T2: 38 °C, T3: 40 °C, cada uma por 30 segundos em banho-maria. Pós-descongelamento, a motilidade e cinética dos espermatozoides, morfologia, integridade estrutural da membrana (SMI), integridade funcional da membrana (FMI), integridade acrossomal (AI), ROS e potencial de membrana mitocondrial (ΔΨM) foram avaliados. Modelos lineares generalizados foram ajustados. Cada modelo incluiu os efeitos de touro, tempo de armazenamento e tratamento. A normalidade dos dados foi avaliada pelo teste de Shapiro-Wilk e as médias comparadas pelo teste de Tukey. T2 e T3 apresentaram resultados mais elevados para a maioria dos parâmetros de motilidade e cinemática espermática, SMI (%) (T1 41,9 ± 2,3; T2 45,7 ± 1,9; T3 47,4 ± 2,8), ROS (RFU/min) (T1 0,026 ± 0,007; T2 0,032 ± 0,001; T3 0,031 ± 0,001) e alto ΔΨM (RFU x 103) (67,1 ± 0,4; 71,3 ± 0,4; 74,2 ± 0,4) (P < 0,05). No entanto, T1 apresentou maior FMI (%) (39,3 ± 2,3) em comparação a T2 (34,0 ± 1,9) (P < 0,05), mas não foi diferente do T3 (38,4 ± 2,2) (P > 0,05). Conclui-se que as temperaturas de descongelamento de 38 °C e 40 °C produzem um aumento na motilidade, cinética, integridade de membrana, atividade mitocondrial e ROS do sêmen bovino criopreservado, em comparação com o uso mais convencional de uma temperatura de descongelamento de 36 °C.

Canine sperm vitrification with nonpermeable cryoprotectants and coconut water extender

This study was aimed to assess the efficiency of coconut water extender with addition of soy lecithin and sucrose as nonpermeable cryoprotectants for canine semen vitrification, using a simple method that yields a high survival rate of spermatozoa for clinical use. Twelve ejaculates from 12 adult normozoospermic dogs were collected separately by digital manipulation and only the second semen fraction was used in this study. After evaluation of volume, concentration, viability, total and progressive motility, velocity parameters and morphology, semen was diluted with a coconut water extender (50% (v/v(volume per volume)) coconut water, 25% (v/v) distilled water and 25% (v/v) 5% anhydrous monosodium citrate solution) with addition of soy lecithin and fructose at 1% and 0.25M sucrose until final concentration of 100x106 spermatozoa/ml. After equilibration at 5ºC for 60 minutes, semen was vitrified by "direct dropping method" into liquid nitrogen in spheres with a volume of 30 µl. After a week of storage the spheres were devitrified as three of them were dropped into 0.5 mL of CaniPlus AI medium (Minitüb, Germany), which was previously warmed in a water bath at 42ºC for 2 minutes and evaluated about the above mentioned parameters. It was found that vitrification resulted in a lower percentage of viable sperms, normal morphology, total and progressive motilities (p0.05) compared to fresh semen samples. In conclusion, our results demonstrate that vitrification with coconut water extender with addition of 1% soy lecithin and 0.25M sucrose as cryoprotectants, has an excellent potential for routine canine sperm cryopreservation.(AU)

Influence of thawing temperature on sperm motility, structure, and metabolism of frozen bovine semen / Influência da temperatura de descongelamento na motilidade, estrutura e metabolismo do sêmen bovino congelado

The heating rate used during semen thawing plays an important role in reducing structural and functional damage to spermatozoa. In this study, we evaluated the influence of thawing temperature on semen quality, reactive oxygen species (ROS) production, and mitochondrial activity of cryopreserved bovine semen. A total of 195 straws of 0.5 mL from five Holstein Friesian bulls were used (39 straws per bull). Samples underwent 8 to 22 years of storage; they were processed under a standard protocol with tris-egg yolk and stored in liquid nitrogen. Samples were thawed for 30 seconds in a water bath at T1: 36 °C, T2: 38 °C or T3: 40 °C. Sperm motility and kinematics, morphology, structural membrane integrity (SMI), functional membrane integrity (FMI), acrosome integrity (AI), ROS, and mitochondrial membrane potential (ΔΨM) of post-thawing bovine sperm were evaluated. Generalized linear models were fitted to the data. Each model included the effects of bull, storage time, and treatment. The Shapiro-Wilk test was used to assess data normality, and means were compared using the Tukey test. T2 and T3 showed better results for sperm motility and kinematic parameters, SMI (%) (T1 41.9 ± 2.3; T2 45.7 ± 1.9; T3 47.4 ± 2.8), ROS (RFU/min) (T1 0.026 ± 0.007; T2 0.032 ± 0.001; T3 0.031 ± 0.001) and high-ΔΨM (RFU x 103) (67.1± 0,4; 71.3 ± 0.4; 74.2 ± 0.4) (P < 0.05). However, T1 had higher FMI (39.3 ± 2.3) than T2 (34.0 ± 1.9) (P < 0.05), though not significantly (P > 0.05) different from T3 (38.4 ± 2.2). Thawing temperatures of 38 °C and 40 °C increases motility, kinetics, membrane integrity, mitochondrial activity and ROS of cryopreserved bovine semen, compared with more conventional thawing at 36 °C.

A taxa de aquecimento usada durante o descongelamento do sêmen desempenha um papel importante na redução dos danos estruturais e funcionais nos espermatozóides. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a influência da temperatura de descongelamento na qualidade do sêmen, produção de espécies reativas de oxigênio (ROS) e atividade mitocondrial do sêmen bovino criopreservado. Foram utilizados 195 palhetas de 0,5 mL de cinco touros Holstein Friesian (39 palhetas por touro). As amostras passaram por oito a 22 anos de armazenamento e foram processadas sob protocolo padrão com Tris-gema de ovo e armazenadas em nitrogênio líquido. As temperaturas de descongelamento foram T1: 36 °C, T2: 38 °C, T3: 40 °C, cada uma por 30 segundos em banho-maria. Pós-descongelamento, a motilidade e cinética dos espermatozoides, morfologia, integridade estrutural da membrana (SMI), integridade funcional da membrana (FMI), integridade acrossomal (AI), ROS e potencial de membrana mitocondrial (ΔΨM) foram avaliados. Modelos lineares generalizados foram ajustados. Cada modelo incluiu os efeitos de touro, tempo de armazenamento e tratamento. A normalidade dos dados foi avaliada pelo teste de Shapiro-Wilk e as médias comparadas pelo teste de Tukey. T2 e T3 apresentaram resultados mais elevados para a maioria dos parâmetros de motilidade e cinemática espermática, SMI (%) (T1 41,9 ± 2,3; T2 45,7 ± 1,9; T3 47,4 ± 2,8), ROS (RFU/min) (T1 0,026 ± 0,007; T2 0,032 ± 0,001; T3 0,031 ± 0,001) e alto ΔΨM (RFU x 103) (67,1 ± 0,4; 71,3 ± 0,4; 74,2 ± 0,4) (P < 0,05). No entanto, T1 apresentou maior FMI (%) (39,3 ± 2,3) em comparação a T2 (34,0 ± 1,9) (P < 0,05), mas não foi diferente do T3 (38,4 ± 2,2) (P > 0,05). Conclui-se que as temperaturas de descongelamento de 38 °C e 40 °C produzem um aumento na motilidade, cinética, integridade de membrana, atividade mitocondrial e ROS do sêmen bovino criopreservado, em comparação com o uso mais convencional de uma temperatura de descongelamento de 36 °C.

Effect of clarification on some characteristics of pomegranate juice processed by two different methods during storagein Ali Ahmed / Efeito daclarificação sobre algumas características do suco de romã processado por dois métodos diferentes durante o armazenamento

This study aimed to assess the effectiveness of two clarifying procedures and their effects on some properties in thermally or microwave-pasteurized pomegranate juices. The experiment consisted in combining pectinase and protease as well as chitosan and gelatin once they were being storedin the refrigerator. The experiment consisted in three parts, being the first one a fresh juice without any clarification treatment, whereas, the second one was the fresh juice treated with clarifying agent consisted of pectinaseand protease mixture ratio (2:1) at 0.75 v/v,and 50°C for 20 min. Finally, the third one was fresh juice treated with chitosan and gelatin mixture at 0.4 and 0.8) g/L, respectively, at 50°C for (20) min. The pasteurization of all three experiments was done by using two techniques, i.e., one with thermal water bath at 85°C for twomin and the microwave at 400 Watts for twomin. All pomegranate juice bottles were stored at 4°C for threemonths. The results showed a significant effect of the clarificationmethod variable on the properties studied, especially turbidity, polyphenol and anthocyanin values. Moreover, the juice clarified with the enzymatic clarification method had better characteristics than the traditional ones during storage, what has therefore a better commercial appeal. The area of significance was founded with the use of traditional clarification with concentration at (0.4 and 0.8) g/l, and microwave pasteurization with 400 watts and zero month of storage at 4°C, respectively, which is provided a minimum turbidity value.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar a efetividade de dois procedimentos esclarecedores e seus efeitos sobre algumas propriedades em sucos de romã termicamente ou pasteurizados por micro-ondas. O experimento consistiu em combinar pectinase e protease, bem como quitosana e gelatina, uma vez que estavam sendo armazenadas na geladeira. O experimento consistiu em três partes, sendo a primeira um suco fresco sem qualquer tratamento de clarificação, enquanto a segunda foi o suco fresco tratado com agente clarificante consistiu na proporção de mistura de pectinase e protease (2:1) a 0,75 v/v, e 50°C por 20 min. Finalmente, o terceiro foi suco fresco tratado com mistura de quitosana e gelatina a 0,4 e 0,8) g/L, respectivamente, a 50°C por (20) min. A pasteurização dos três experimentos foi realizada utilizando-se duas técnicas, ou seja, uma com banho de água termal a 85°C por doismin e a micro-ondas a 400 Watts por doismin. Todas as garrafasde suco de romã foram armazenadas a 4°C por trêsmeses. Os resultados mostraram um efeito significativo da variável método de clarificação sobre as propriedades estudadas, especialmente os valores de turbidez, polifenóis e antocianinas. Além disso, o suco clarificado com o método de clarificação enzimática apresentou melhores características do que os tradicionais durante o armazenamento, o que tem, portanto, um melhor apelo comercial. A área de significância foi fundada com o uso de clarificação tradicional com concentração a (0,4 e 0,8) g/l, e pasteurização por micro-ondas com 400 watts e zero mês de armazenamento a 4°C, respectivamente, o que proporciona um valor mínimo de turbidez.(AU)

New treatments to disinfect vine cuttings with Phaeomoniella chlamydospora and the reason for the control

Petri disease is a problem for vineyard caused mainly by the fungus Phaeomoniella chlamydospora. Contaminated seedlings are source of inoculum for the disease. Treatment to disinfect vine rootstock cuttings for seedling production is hot water treatment (HWT) by 50 °C for 30 min, but the efficiency is contested. To improve its efficacy, the study aimed to assess the combination of the following methods and the reason for the control: i) exposition of the fungus to five different temperatures in HWT bath for 30 min; ii and iii) exposition of the fungus and also plants infected with P. chlamydospora to different disinfection treatments (biofumigation = soil + cabbage at 40 °C; temperatures of 40 and 23 °C, all in microcosm), in different periods (7, 14 and 21 days), with and without additional HWT (51 °C for 30 min). The results showed that HWT with high temperatures (55­70 °C) for 30 min inactivated the fungus. Biofumigation technique at 40 °C and the temperature solely of 40 °C applied for up to 21 days and combined with HWT (51 °C for 30 min) inhibited mycelial growth and inactivated the fungus in vine plant tissues without compromising the rooting.

Albendazole is effective for controlling monogenean parasites of the gills of Piaractus brachypomus (Serrasalmidae) and Megaleporinus macrocephalus (Anostomidae) / Albendazol é eficaz no controle de parasitos monogenéticos das brânquias de Piaractus brachypomus (Serrasalmidae) e Megaleporinus macrocephalus (Anostomidae)

Monogenean infestations can cause high mortality in farmed fish and therefore significant economic losses. The present study investigated the efficacy of albendazole in therapeutic baths against monogeneans of Piaractus brachypomus Cuvier, 1818 and Megaleporinus macrocephalus (Garavello & Britski, 1988). For both fish, a 24 hours therapeutic bath with albendazole concentrations of 150, 300 and 500 mg/L were tested against monogeneans from the gills. The baths had an efficacy from 61.4 ± 32.9 (95%CI=64.5) against monogeneans of P. brachypomus, and from 95.4 ± 5.6 (95%CI=10.9) against monogeneans of M. macrocephalus. In P. brachypomus, the hepatosomatic index (HSI) in fish exposed to 150 mg/L of albendazole was higher than in fish exposed to 300 mg/L. The splenosomatic index (SSI) values in fish exposed to 150 mg/L of albendazole were lower than in fish exposed to 300 mg/L. In M. macrocephalus, the HSI and SSI values decreased in treatments with 150, 300 and 500 mg/L of albendazole to control and treat infestations by monogeneans. For M. macrocephalus, 150 mg/L of albendazole can be used to control and treat infestations by monogeneans, while for P. brachypomus 500 mg/L of albendazole can be used in a 24 hours bath.(AU)

Infestações por monogenéticos podem causar alta mortalidade entre os peixes cultivados e, portanto, perdas econômicas significativas. O presente estudo investigou a eficácia do albendazol em banhos terapêuticos contra monogenéticos de Piaractus brachypomus Cuvier, 1818 e Megaleporinus macrocephalus (Garavello & Britski, 1988). Para ambos os peixes, um banho terapêutico de 24 horas com concentrações de albendazol de 150, 300 e 500 mg/L, foi testado contra monogenéticos nas brânquias. Os banhos tiveram eficácia 61,4 ± 32,9 (IC95%=64,5) contra monogenéticos de P. brachypomus, e de 95,4 ± 5.6 (IC95%=10.9) contra monogenéticos de M. macrocephalus. Em P. brachypomus, o índice hepatossomático (IHS) em peixes expostos a 150 mg/L de albendazol foi maior do que em peixes expostos a 300 mg/L. Os valores do índice esplenossomático (IES) em peixes expostos a 150 mg/L de albendazol foram menores do que em peixes expostos a 300 mg/L. Em M. macrocephalus, os valores de IHS e IES diminuíram nos tratamentos com 150, 300 e 500 mg/L de albendazol, para controlar e tratar infestações por monogenéticos. Para M. macrocephalus, 150 mg/L de albendazol pode ser usado para controlar e tratar infestações por monogenéticos, enquanto para P. brachypomus, 500 mg/L de albendazol pode ser usado em um banho de 24 horas.(AU)

Supplementation of cryodiluent medium with sulfated polysaccharides from green seaweeds in the freezing of Colossoma macropomum semen / Suplementação do meio criodiluidor com polissacarídeos sulfatados de macroalgas verdes na congelação do sêmen de Colossoma macropomum

This study proposes to investigate the addition of sulfated polysaccharides (SP) extracted from two species of green seaweeds, Ulva lactuca and Caulerpa racemosa, to Colossoma macropomum semen cryodiluent medium. Four concentrations of SP (1.0, 2.0, 3.0, or 4.0 mg mL-1) of each seaweed were evaluated. Semen was collected during the month of September in Fortaleza - CE, Brazil. Fresh semen samples were analyzed for the parameters of total sperm motility, curvilinear velocity (VCL), straight line velocity (VSL), average path velocity (VAP), sperm morphology, membrane integrity, and DNA integrity. Then, the samples were cryopreserved in freezing medium containing 10% dimethyl sulfoxide (DMSO) + 5% glucose, which was supplemented with different concentrations of SP. An unsupplemented treatment was used as control. After 15 days, they were thawed in a water bath at 45 ºC for eight seconds and the same analyses of fresh semen were performed. Statistical analysis revealed that there were no significant differences (p > 0.05) between the different tested concentrations of SP for any of the evaluated parameters. Compared with the control, there was no difference in concentrations (p > 0.05) for total motility; however, for VCL, VSL, and VAP, the U. lactuca concentrations of 3.0 and 4.0 mg mL-1 were detrimental (p < 0.05). The same was observed with 4.0 mg mL-1 of C. racemosa for VSL and VAP. In terms of morphology, 1.0 and 4.0 mg mL-1 of C. racemosa reduced normal sperm (p < 0.05), whereas for the other concentrations there was no difference (p > 0.05). All concentrations of both seaweeds maintained plasma membrane integrity (p > 0.05). As for DNA integrity, only 4.0 mg mL-1 of U. lactuca produced lower results than the control (p < 0.05), whereas the other concentrations maintained the number of spermatozoa with intact DNA (p > 0.05). Based on the results, higher concentrations of SP are harmful to tambaqui sperm in the freezing medium, whereas lower concentrations maintain sperm parameters. Further research is warranted to better investigate the antioxidant potential of these polymers in cryodiluent medium for C. macropomum as well as other fish species.

O estudo teve como objetivo avaliar a adição de polissacarídeos sulfatados (PS) extraídos de duas espécies de macroalgas verdes, Ulva lactuca e Caulerpa racemosa, no meio criodiluidor do sêmen de Colossoma macropomum. Para isso, foram avaliadas quatro concentrações de PS (1,0; 2,0; 3,0 ou 4,0 mg mL-1), de cada macroalga. A coleta de sêmen foi realizada durante o mês de setembro, em Fortaleza, Ceará, Brasil. As amostras de sêmen fresco foram analisadas quanto aos parâmetros de motilidade total dos espermatozoides, velocidade curvilinear (VCL), velocidade em linha reta (VSL), velocidade média do trajeto (VAP), morfologia espermática, integridade de membrana e integridade de DNA. Em seguida, foram criopreservadas em meio de congelação contendo dimetilsulfóxido (DMSO) 10% + glicose 5%, e suplementadas com as diferentes concentrações de PS, tendo ainda um tratamento não suplementado como controle. Após 15 dias, foram descongeladas em banho-maria a 45 ºC por oito segundos, e as mesmas análises do sêmen fresco foram realizadas. Através da análise estatística, os resultados mostraram que não houveram diferenças significativas (p > 0,05) entre as diferentes concentrações de PS testadas para nenhum dos parâmetros avaliados. Já em relação ao controle, não houve diferença nas concentrações (p > 0,05) para a motilidade total, no entanto, para VCL, VSL e VAP, as concentrações de 3,0 e 4,0 mg mL-1 de U. lactuca foram prejudiciais (p < 0,05). O mesmo foi observado em 4,0 mg mL-1 de C. racemosa para VSL e VAP. Para a morfologia, 1,0 e 4,0 mg mL-1 de C. racemosa reduziram os espermatozoides normais (p < 0,05), enquanto para as demais concentrações não houve diferença (p > 0,05). Para todas as concentrações de ambas as macroalgas, a integridade de membrana plasmática foi mantida (p > 0,05). Quanto à integridade do DNA, apenas 4,0 mg mL-1 de U. lactuca foi inferior ao controle (p < 0,05), enquanto as demais concentrações mantiveram o número de espermatozoides com DNA íntegro (p > 0,05). De acordo com os resultados obtidos, concentrações mais elevadas de PS são prejudiciais aos espermatozoides de tambaqui no meio de congelação, enquanto concentrações mais baixas mantiveram parâmetros espermáticos. Estudos posteriores são indicados para melhor avaliar o potencial antioxidante destes polímeros no meio criodiluidor do sêmen de C. macropomum, bem como de outras espécies de peixes.

Eficácia do caldo de fumo (Nicotiana tabacum) no controle do Menacanthus stramineus (phthiraptera: menoponidae) em galinhas poedeiras no município de salinas, Minas Gerais / Efficacy of tobacco broth (Nicotiana tabacum) in the control of Menacanthus stramineus (phthiraptera: menoponidae) in laying hens in the municipality of salinas, Minas Gerais / Eficacia del caldo ahumado (Nicotiana tabacum) en el control de Menacanthus stramineus (phthiraptera: menoponidae) en gallinas ponedoras del municipio de salinas, Minas Gerais

Em granjas de postura, infestações por ectoparasitas são um problema que gera gastos e diminui a produção dos animais, pelo aumento do estresse. O piolho Menacanthus stramineus é apontado como um dos principais parasitas na avicultura comercial. Há um interesse crescente no uso de abordagens de controle de parasitos na produção de aves minimizando o uso de pesticidas sintéticos tradicionais. Objetivou-se avaliar a eficácia do caldo de fumo (Nicotiana tabacum) no controle do Menacanthus stramineus (Phthiraptera: Menoponidae) em galinhas poedeiras no município de Salinas, Minas Gerais. Para isso, 30 galinhas poedeiras naturalmente infestadas por piolhos, oriundas dos Setor de Zootecnia I do Instituto Federal do Norte de Minas Gerais - Campus Salinas (IFNMG), foram selecionadas aleatoriamente e divididas em três grupos, mantidos em galpões distintos e separados: Grupo I- Tratado com caldo de fumo, conforme Sagrilo e colaboradores (2007); Grupo II- Tratado com Colosso Pulverização®, diluídos 11ml em nove litros; Grupo III- Controle, tratado com água, sendo todos os grupos submetidos ao tratamento por imersão em balde com nove litros de solução. Espécimes de piolhos foram coletados manualmente através de inspeção visual, juntamente com penas contendo ovos em sua base e encaminhados ao Laboratório de Parasitologia Veterinária (LPV) do IFNMG, para realização do diagnóstico parasitológico através de chaves de identificação. Os espécimes foram clarificados em hidróxido de potássio a 10% e observados em microscopia óptica nas objetivas de 4x e 10x. Os ovos foram observados em microscópio estereoscópico, no aumento de 4x. Todas as galinhas foram diagnosticadas com infestação por ovos e adultos de M. stramineus. Para o banho de imersão, as aves foram seguradas pelo pescoço e pelas asas, mergulhando todo seu corpo em balde plástico. Sete dias após a realização dos tratamentos, as aves foram novamente examinadas em uma inspeção visual pelos mesmos examinadores. O Grupo I não apresentou ovos e nem adultos de M. stramineus em nenhuma ave, revelando 100% de eficácia. O Grupo II não apresentou adultos, mas foram observados ovos aderidos à base das penas, friáveis ao toque, em nove aves. Posteriormente, verificou-se que se tratava de cascas de ovos vazias. E, o Grupo III estava ainda intensamente parasitado por ovos e adultos de M. stramineus. Conclui-se que o caldo de fumo (Nicotiana tabacum) preparado conforme descrito na metodologia do presente trabalho, é eficaz no controle do piolho Menacanthus stramineus (Phthiraptera: Menoponidae) em galinhas poedeiras no município de Salinas, Minas Gerais.(AU)

In laying hens barns, ectoparasite infestations are a problem that generates expenses and decreases animal production due to increased stress. The Menacanthus stramineus louse is considered one of the main parasites in commercial poultry. There is growing interest in the use of parasite control approaches in poultry production while minimizing the use of traditional synthetic pesticides. The objective of this study was to evaluate the efficacy of tobacco broth (Nicotiana tabacum) in controlling Menacanthus stramineus (Phthiraptera: Menoponidae) in laying hens in the municipality of Salinas, Minas Gerais. Thus, 30 laying hens naturally infested with lice, housed at the Zootechnics Sector I at the Federal Institute of Northern Minas Gerais ­ Campus Salinas (FINMG) were randomly selected and divided into three groups, which were kept in different and separated barns: Group I- Treated with tobacco broth, according to Sagrilo et al (2007); Group II- Treated with Colosso Pulverização®, diluted 11ml in nine liters; Group III- Control, treated with water. All groups were elaborated for treatment by immersion in a bucket with nine liters of solution. Lice specimens were manually collected through visual inspection including feathers containing eggs at their base and then sent to the Veterinary Parasitology Laboratory (VPL) at the FINMG for parasitological diagnosis by using identification keys. The specimens were clarified in potassium hydroxide 10% and observed under optical microscopy at 4x and 10x objectives. The eggs were observed under a stereoscopic microscope at 4x magnification. All chickens were diagnosed with infestation of adult and egg stages of M. stramineus. For the immersion bath, the animals were held by the neck and wings, dipping their entire bodies in a plastic bucket. Seven days after the treatments were carried out they were again examined in a visual inspection by the same examiners. Group I did not show any eggs or adults of M. stramineus, which presented efficacy of 100%. Group II did not have adults, but friable eggs when touched adhered to the base of the feathers were observed in nine animals. Later on, it was found that they were empty egg shells. And, Group III was still intensely parasitized by eggs and adults stages of M. stramineus. It is concluded that tabocco broth (Nicotiana tabacum) prepared as described in the methodology of the present study is effective in controlling the lice Menacanthus stramineus (Phthiraptera: Menoponidae) in laying hens in the municipality of Salinas, Minas Gerais.(AU)

En las gallinas ponedoras, las infestaciones de ectoparásitos son un problema que genera gastos y disminuye la producción animal, debido al aumento del estrés. El piojo Menacanthus stramineus se considera uno de los principales parásitos de las aves comerciales. Existe un interés creciente en el uso de enfoques de control de parásitos en la producción avícola mientras se minimiza el uso de pesticidas sintéticos tradicionales. El objetivo fue evaluar la eficacia del caldo de tabaco (Nicotiana tabacum) en el control de Menacanthus stramineus (Phthiraptera: Menoponidae) en gallinas ponedoras del municipio de Salinas, Minas Gerais. Para ello, 30 gallinas ponedoras naturalmente infestadas de piojos, del Sector I de Zootecnia del Instituto Federal del Norte de Minas Gerais - Campus Salinas (IFNMG), fueron seleccionadas al azar y divididas en tres grupos, mantenidos en galpones separados y separados: Grupo I - Tratado con caldo de humo, según Sagrilo et al. (2007); Grupo II- Tratado con Colosso Pulverização®, diluido 11ml en nueve litros; Grupo III- Control, tratado con agua, con todos los grupos sometidos a tratamiento por inmersión en un balde con nueve litros de solución. Las muestras de piojos se recolectaron manualmente mediante inspección visual, junto con plumas que contenían huevos en su base y se enviaron al Laboratorio de Parasitología Veterinaria (LPV) del IFNMG, para el diagnóstico parasitológico mediante claves de identificación. Las muestras se clarificaron en hidróxido de potasio al 10% y se observaron bajo microscopía óptica en objetivos 4x y 10x. Los huevos se observaron bajo un microscopio estereoscópico, con un aumento de 4x. Todos los pollos fueron diagnosticados con huevos de M. stramineus e infestación de adultos. Para el baño de inmersión, se sujetó a las aves por el cuello y las alas, sumergiendo todo su cuerpo en un balde de plástico. Siete días después de que se llevaron a cabo los tratamientos, las aves fueron examinadas de nuevo en una inspección visual por los mismos examinadores. El grupo I no presentó huevos ni adultos de M. stramineus en ninguna ave, mostrando una efectividad del 100%. El grupo II no presentó adultos, pero se observaron huevos adheridos a la base de las plumas, friables al tacto, en nueve aves. Posteriormente, se encontró que se trataba de cáscaras de huevo vacías. Y, el Grupo III todavía estaba intensamente parasitado por huevos y adultos de M. stramineus. Se concluye que el caldo de tabaco (Nicotiana tabacum) elaborado según lo descrito en la metodología del presente trabajo, es efectivo en el control de los piojos Menacanthus stramineus (Phthiraptera: Menoponidae) en gallinas ponedoras del municipio de Salinas, Minas Gerais.(AU)

Uso de placa aquecedora visando a incubação do espermatozoide ovino após criopreservação / Use of heating plate aiming at the ovine sperm incubation after cryopreservation

Objetivou-se avaliar a utilização da placa aquecedora, em substituição ao banho-maria, no teste de termorresistência (TTR) de espermatozoides de carneiros após a criopreservação. Foram coletados 10 ejaculados de três carneiros adultos (n=30), por meio de vagina artificial para ovinos. Em seguida, foram diluídos em TrisGema de ovo, a uma concentração final de 200 x106 sptz/mL, e submetidos á curva de resfriamento, para posterior criopreservação em palhetas em nitrogênio líquido. Após descongelação, as amostras foram analisadas quanto à integridade de membrana, de acrossoma e atividade mitocondrial. O sêmen então foi dividido em dois tubos e submetido ao TTR, um em banho-maria e outro em placa aquecedora, e, ainda, avaliado a cada 30 minutos, do tempo zero (pós-descongelação) até 90 minutos de incubação, a 37 °C, quanto à motilidade espermática e à motilidade progressiva. As variáveis foram submetidas à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. Após o processo de congelação/descongelação, os espermatozoides apresentaram baixo percentual de integridade de membrana e elevado percentual de atividade mitocondrial e integridade do acrossoma. Não foi observada diferença na motilidade espermática nem na motilidade progressiva ao longo do TTR, quando comparados os espermatozoides que foram incubados em banho-maria aos incubados em placa aquecedora durante o período de 90 minutos. A placa aquecedora pode ser utilizada como meio de incubação dos espermatozoides de carneiros em substituição ao banho-maria.

The objective was to evaluate the use of the hot plate to replace the water bath in the thermo resistance test of ovine sperm after cryopreservation. Ten ejaculates were also collected from three adult sheep (n=30), by means of artificial sheep vagina. The collected samples were diluted in Tris-Egg Yolk, at a final concentration of 200 x106 sptz/mL and subjected to a cooling curve for subsequent cryopreservation in liquid nitrogen straws. Immediately after thawing, the samples were analyzed for membrane and acrosome integrity, and mitochondrial activity. The semen was then divided into two tubes and submitted to TTR, one in a water bath and the other in a hot plate, and evaluated every 30 minutes, from time zero (post-thaw) until 90 minutes of incubation at 37 °C, for sperm motility and progressive motility. The variables were subjected to analysis of variance and the means were compared using the Tukey test at 5% probability. After the freeze/thawing process, sperm showed a low percentage of membrane integrity, high percentage of mitochondrial activity, in addition to maintaining the integrity of acrossome. No difference was observed in sperm motility nor progressive motility, along the TTR, when comparing the sperm that were incubated in a water bath in relation to those incubated in a hot plate during the period of 90 minutes. The heating plate can be used as a means of incubating sheep sperm in replacement of the water bath.

Antiparasitic effect of Mentha × villosa hydrolate against monogenean parasites of the Nile tilapia / Efeito antiparasitário do hidrolato de Mentha × villosa contra parasitas monogenéticos para Tilápia-do-nilo

ABSTRACT: This paper o evaluated different concentrations and exposure times of Mentha × villosa hydrolate for the control of monogeneans in Nile tilapia (Oreochromis niloticus). Mentha × villosa leaves (150 g) were homogenized and the hydrolate was obtained by hydrodistillation for 4 h in a Clevenger apparatus. Fifty tilapia were then divided into ten groups (five fish each) and subjected to therapeutic baths for 15 minutes in five different hydrolate concentrations (0, 10, 20, 40, and 80 ml.L-1;× 2 replicates). After a suitable hydrolate concentration was identified, another 50 tilapia were divided into ten groups (five fish each) and subjected to therapeutic baths at the identified hydrolate concentration for five different durations (0, 15, 30, 45, and 60 minutes;× 2 replicates). In both steps, the mucus and gills were analyzed to determine parasitological indices. The hydrolate concentration of 20 ml.L-1 showed an efficacy of 59.9% and the biggest decrease in pathogen prevalence, average abundance, and average infection compared to the control and the lowest concentration (10 ml.L-1). For duration, the best antiparasitic effects were achieved with the 60-minute therapeutic bath, as it resulted in 89.28% antiparasitic efficacy. Therefore, it was concluded that therapeutic baths of M. × villosa hydrolate at a concentration of 20 ml.L-1 for 60 minutes have satisfactory antiparasitic effects and could be used to control monogenetic infestations in the gills and mucus of Nile tilapia (O. niloticus).

RESUMO: Este trabalho teve como objetivo avaliar diferentes concentrações e tempos de exposição do hidrolato de Mentha × villosa para o controle de monogenéticos em Tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus). Folhas de Mentha × villosa (150 g) foram homogeneizadas e o hidrolato foi obtido por hidrodestilação por 4 h em aparelho de Clevenger. Em seguida, 50 tilápias foram divididas em dez grupos (cinco peixes cada) e submetidas a banhos terapêuticos por 15 minutos em cinco diferentes concentrações de hidrolato (0, 10, 20, 40 e 80 ml.L-1; × 2 repetições). Após a identificação de uma concentração de hidrolato adequada, outras 50 tilápias foram divididas em dez grupos (cinco peixes cada) e submetidas a banhos terapêuticos na concentração de hidrolato identificada por cinco durações diferentes (0, 15, 30, 45 e 60 minutos; × 2 repetições). Em ambas as etapas, o muco e as guelras foram analisados para determinar os índices parasitológicos. A concentração de hidrolato de 20 ml.L-1 apresentou eficácia de 59,9% e a maior redução na prevalência do patógeno, abundância média e infecção média em relação ao controle e a menor concentração (10 ml.L-1). Para a duração, os melhores efeitos antiparasitários foram alcançados com o banho terapêutico de 60 minutos, uma vez que resultou em 89,28% de eficácia antiparasitária. Portanto, concluiu-se que banhos terapêuticos de hidrolato de M. × villosa na concentração de 20 ml.L-1 por 60 minutos têm efeitos antiparasitários satisfatórios e podem ser usados para controlar infestações monogenéticas nas brânquias e muco da Tilápia-do-nilo (O. niloticus).

Methodology of the tetrazolium test for identifying viable seeds of orchids of the genus Cattleya native to the Brazilian Cerrado / Metodologia do teste de tetrazólio para identificação de sementes viáveis de orquídeas do gênero Cattleya nativas do Cerrado brasileiro

Orchids need measures for conservation of their species, among them the creation of seed banks. This study analyzes suitable methodologies to identify the viability of Cattleya seeds through the tetrazolium test. Seeds of Cattleya nobilior Rchb. and Cattleya walkeriana Gardn. were submitted to three preconditioning: no soaking (control); sucrose (10%); or distilled water. After 24 hours, they were submitted to tetrazolium solution with three types of conditioning: oven (40 °C); water bath (40 °C); or room temperature. Subsequently, the percentage of viable seeds (VS) was calculated and in vitro sowing was carried out. Germination percentage (G) was determined after 45 days. A completely randomized design was used for each species studied, with treatments arranged in a 3x3 factorial scheme (three preconditioning and three conditioning), with eight replicates of one tube each. The experiment was performed in duplicate. The highest viability values found in the tetrazolium test were close to those of germination (C. nobilior: VS = 88% e G = 97%; C. walkeriana: VS = 88% e G = 95%) for Cattleya species native to the Cerrado. The conditioning at ambient temperature had a greater effect on seed visualization for both species studied, suggesting that the tetrazolium test should be performed at this conditioning temperature.(AU)

As orquídeas necessitam de medidas para a conservação de suas espécies, entre essas a criação de bancos de sementes. Objetivou-se identificar metodologia adequada para a identificação da viabilidade de sementes de Cattleya por meio do teste de tetrazólio. Sementes de Cattleya nobilior Rchb. e Cattleya walkeriana Gardn. foram submetidas a três pré-condicionamentos: sem embebição (controle); sacarose (10%) ou água destilada. Decorridas 24 horas, foram submetidas à solução de tetrazólio, com três tipos de condicionamento: estufa (40 °C), banho maria (40 °C) ou temperatura ambiente. Após esse período foi calculada a porcentagem de sementes viáveis (SV). Foi realizada a semeadura in vitro e, após 45 dias, determinada a porcentagem de germinação (G). Para cada espécie estudada, foi utilizado o delineamento inteiramente casualizado e os tratamentos foram arranjados em esquema fatorial 3x3 (três précondicionamentos e três condicionamentos) com oito repetições de um tubo de ensaio cada, sendo o experimento realizado em duplicata. Os maiores valores de viabilidade encontrados no teste de tetrazólio foram próximos aos de germinação (C. nobilior: SV = 88% e G = 97%; C. walkeriana: SV = 88% e G = 95%) para essas espécies de Cattleya nativas do Cerrado. Para as duas espécies estudadas, o condicionamento em temperatura ambiente apresentou melhor visualização das sementes, sugerindo que o teste de tetrazólio deve ser realizado nesta temperatura de condicionamento.(AU)

Active Surveillance and Risk Assessment of Avian Influenza Virus Subtype H9 from Non-Vaccinated Commercial Broilers of Pakistan

A cross-sectional study was conducted to investigate seroprevalence and virus prevalence of the H9 subtype of avian influenza virus in non-vaccinated broiler farms of dense poultry-populated districts, Lahore and Sheikhupura of Punjab-Pakistan. A convenient sampling method was adopted for collection of blood (n=500) and oropharyngeal swab (n=500) samples from 25 broiler farms of each district for hemagglutination inhibition assay and RT-PCR test, respectively. Proportional estimates were calculated using R software and overall seroprevalence of H9 was estimated at 36.3% (95% CI 33.3-39), with no significant difference (p>0.05) between Lahore (37.2 %, 95% CI=31.2-39.59) and Sheikhupura (35.4%, 95% CI= 29.64-39.76). RT-PCR identified 2% (4/200) pool level viral prevalence. None of the farms from Lahore districts were RT-PCR positive for H9. Simple logistic regression followed by multivariable analysis, identified the presence of foot bath/dipping area at the entrance (OR=0.7, 95% CI=0.52-0.93) and availability of rubber shoes for visitors (OR=0.36, 95% CI 0.26-0.48) as protective factors. History of respiratory signs (OR=1.51, 95%=CI 1.12-2.04), history of sudden death in past flocks (OR=3.26, 95% CI=2.41-4.41), and birds previously infected with avian influenza virus (OR=1.33, 95% CI=1-1.76) were significant risk factors. Negligence in preventive measures at farms level was associated with the spread of H9 infection between the farms. To control future outbreaks, biosecurity and continuous monitoring of non-vaccinated flocks are suggested.(AU)

Antiparasitic effect of Mentha × villosa hydrolate against monogenean parasites of the Nile tilapia / Efeito antiparasitário do hidrolato de Mentha × villosa contra parasitas monogenéticos para Tilápia-do-nilo

This paper o evaluated different concentrations and exposure times of Mentha × villosa hydrolate for the control of monogeneans in Nile tilapia (Oreochromis niloticus). Mentha × villosa leaves (150 g) were homogenized and the hydrolate was obtained by hydrodistillation for 4 h in a Clevenger apparatus. Fifty tilapia were then divided into ten groups (five fish each) and subjected to therapeutic baths for 15 minutes in five different hydrolate concentrations (0, 10, 20, 40, and 80 ml.L-¹;× 2 replicates). After a suitable hydrolate concentration was identified, another 50 tilapia were divided into ten groups (five fish each) and subjected to therapeutic baths at the identified hydrolate concentration for five different durations (0, 15, 30, 45, and 60 minutes;× 2 replicates). In both steps, the mucus and gills were analyzed to determine parasitological indices. The hydrolate concentration of 20 ml.L-¹ showed an efficacy of 59.9% and the biggest decrease in pathogen prevalence, average abundance, and average infection compared to the control and the lowest concentration (10 ml.L-¹). For duration, the best antiparasitic effects were achieved with the 60-minute therapeutic bath, as it resulted in 89.28% antiparasitic efficacy. Therefore, it was concluded that therapeutic baths of M. × villosa hydrolate at a concentration of 20 ml.L-¹ for 60 minutes have satisfactory antiparasitic effects and could be used to control monogenetic infestations in the gills and mucus of Nile tilapia (O. niloticus).

Este trabalho teve como objetivo avaliar diferentes concentrações e tempos de exposição do hidrolato de Mentha × villosa para o controle de monogenéticos em Tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus). Folhas de Mentha × villosa (150 g) foram homogeneizadas e o hidrolato foi obtido por hidrodestilação por 4 h em aparelho de Clevenger. Em seguida, 50 tilápias foram divididas em dez grupos (cinco peixes cada) e submetidas a banhos terapêuticos por 15 minutos em cinco diferentes concentrações de hidrolato (0, 10, 20, 40 e 80 ml.L-¹; × 2 repetições). Após a identificação de uma concentração de hidrolato adequada, outras 50 tilápias foram divididas em dez grupos (cinco peixes cada) e submetidas a banhos terapêuticos na concentração de hidrolato identificada por cinco durações diferentes (0, 15, 30, 45 e 60 minutos; × 2 repetições). Em ambas as etapas, o muco e as guelras foram analisados para determinar os índices parasitológicos. A concentração de hidrolato de 20 ml.L-¹ apresentou eficácia de 59,9% e a maior redução na prevalência do patógeno, abundância média e infecção média em relação ao controle e a menor concentração (10 ml.L-¹). Para a duração, os melhores efeitos antiparasitários foram alcançados com o banho terapêutico de 60 minutos, uma vez que resultou em 89,28% de eficácia antiparasitária. Portanto, concluiu-se que banhos terapêuticos de hidrolato de M. × villosa na concentração de 20 ml.L-¹ por 60 minutos têm efeitos antiparasitários satisfatórios e podem ser usados para controlar infestações monogenéticas nas brânquias e muco da Tilápia-do-nilo (O. niloticus).

Antiparasitic effect of Mentha × villosa hydrolate against monogenean parasites of the Nile tilapia / Efeito antiparasitário do hidrolato de Mentha × villosa contra parasitas monogenéticos para Tilápia-do-nilo

This paper o evaluated different concentrations and exposure times of Mentha × villosa hydrolate for the control of monogeneans in Nile tilapia (Oreochromis niloticus). Mentha × villosa leaves (150 g) were homogenized and the hydrolate was obtained by hydrodistillation for 4 h in a Clevenger apparatus. Fifty tilapia were then divided into ten groups (five fish each) and subjected to therapeutic baths for 15 minutes in five different hydrolate concentrations (0, 10, 20, 40, and 80 ml.L-¹;× 2 replicates). After a suitable hydrolate concentration was identified, another 50 tilapia were divided into ten groups (five fish each) and subjected to therapeutic baths at the identified hydrolate concentration for five different durations (0, 15, 30, 45, and 60 minutes;× 2 replicates). In both steps, the mucus and gills were analyzed to determine parasitological indices. The hydrolate concentration of 20 ml.L-¹ showed an efficacy of 59.9% and the biggest decrease in pathogen prevalence, average abundance, and average infection compared to the control and the lowest concentration (10 ml.L-¹). For duration, the best antiparasitic effects were achieved with the 60-minute therapeutic bath, as it resulted in 89.28% antiparasitic efficacy. Therefore, it was concluded that therapeutic baths of M. × villosa hydrolate at a concentration of 20 ml.L-¹ for 60 minutes have satisfactory antiparasitic effects and could be used to control monogenetic infestations in the gills and mucus of Nile tilapia (O. niloticus).(AU)

Este trabalho teve como objetivo avaliar diferentes concentrações e tempos de exposição do hidrolato de Mentha × villosa para o controle de monogenéticos em Tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus). Folhas de Mentha × villosa (150 g) foram homogeneizadas e o hidrolato foi obtido por hidrodestilação por 4 h em aparelho de Clevenger. Em seguida, 50 tilápias foram divididas em dez grupos (cinco peixes cada) e submetidas a banhos terapêuticos por 15 minutos em cinco diferentes concentrações de hidrolato (0, 10, 20, 40 e 80 ml.L-¹; × 2 repetições). Após a identificação de uma concentração de hidrolato adequada, outras 50 tilápias foram divididas em dez grupos (cinco peixes cada) e submetidas a banhos terapêuticos na concentração de hidrolato identificada por cinco durações diferentes (0, 15, 30, 45 e 60 minutos; × 2 repetições). Em ambas as etapas, o muco e as guelras foram analisados para determinar os índices parasitológicos. A concentração de hidrolato de 20 ml.L-¹ apresentou eficácia de 59,9% e a maior redução na prevalência do patógeno, abundância média e infecção média em relação ao controle e a menor concentração (10 ml.L-¹). Para a duração, os melhores efeitos antiparasitários foram alcançados com o banho terapêutico de 60 minutos, uma vez que resultou em 89,28% de eficácia antiparasitária. Portanto, concluiu-se que banhos terapêuticos de hidrolato de M. × villosa na concentração de 20 ml.L-¹ por 60 minutos têm efeitos antiparasitários satisfatórios e podem ser usados para controlar infestações monogenéticas nas brânquias e muco da Tilápia-do-nilo (O. niloticus).(AU)

Active Surveillance and Risk Assessment of Avian Influenza Virus Subtype H9 from Non-Vaccinated Commercial Broilers of Pakistan

A cross-sectional study was conducted to investigate seroprevalence and virus prevalence of the H9 subtype of avian influenza virus in non-vaccinated broiler farms of dense poultry-populated districts, Lahore and Sheikhupura of Punjab-Pakistan. A convenient sampling method was adopted for collection of blood (n=500) and oropharyngeal swab (n=500) samples from 25 broiler farms of each district for hemagglutination inhibition assay and RT-PCR test, respectively. Proportional estimates were calculated using R software and overall seroprevalence of H9 was estimated at 36.3% (95% CI 33.3-39), with no significant difference (p>0.05) between Lahore (37.2 %, 95% CI=31.2-39.59) and Sheikhupura (35.4%, 95% CI= 29.64-39.76). RT-PCR identified 2% (4/200) pool level viral prevalence. None of the farms from Lahore districts were RT-PCR positive for H9. Simple logistic regression followed by multivariable analysis, identified the presence of foot bath/dipping area at the entrance (OR=0.7, 95% CI=0.52-0.93) and availability of rubber shoes for visitors (OR=0.36, 95% CI 0.26-0.48) as protective factors. History of respiratory signs (OR=1.51, 95%=CI 1.12-2.04), history of sudden death in past flocks (OR=3.26, 95% CI=2.41-4.41), and birds previously infected with avian influenza virus (OR=1.33, 95% CI=1-1.76) were significant risk factors. Negligence in preventive measures at farms level was associated with the spread of H9 infection between the farms. To control future outbreaks, biosecurity and continuous monitoring of non-vaccinated flocks are suggested.

Adição de colesterol carregado com ciclodextrina ao sêmen ovino na criopreservação / Addition of cholesterol loaded with cyclodextrin to sheep semen in cryopreservation

Objetivou-se avaliar o efeito da adição de diferentes concentrações do colesterol carregado por ciclodextrina (CCC) sobre os espermatozoides congelados de ovinos. Foram coletados dois ejaculados de 10 carneiros (n=20) e diluídos em Tris-Gema de ovo até a concentração final de 200 x106 sptz/mL e mantidos em banho maria a 32 °C. O CCC foi adicionado: controle (0,0mg), 1,5mg, 3,0mg e 6,0mg de CCC/120 x106 sptz/mL. Após adição, o sêmen foi resfriado a 5 °C por duas horas, após esse período, envasado em palhetas de 0,5mL e então acondicionado sob vapor de nitrogênio líquido (N2L), a 8 cm da lâmina líquida/15 minutos e depois imersos no N2L. As amostras foram analisadas quanto à motilidade espermática, integridade da membrana plasmática e da membrana acrossomal, atividade mitocondrial e teste de ligação. As variáveis foram submetidas à análise de variância e médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. O maior percentual de integridade da membrana plasmática, acrossomal e a maior atividade mitocondrial foram obtidos utilizando 6,0mg de CCC. A adição de3,0mg de CCC manteve o percentual de motilidade espermática após a criopreservação, quando comparado aos demais tratamentos e controle. A adição de 1,5 e 3,0mg de CCC mantiveram o percentual de viabilidade espermática após a criopreservação acima de 65%. O número de espermatozoides com capacidade de ligação a membrana perivitelina da gema de ovo foi maior (p<0,05) no tratamento com 3,0mg de CCC. Concluiu se que a adição de CCC ao sêmen diluído, nas concentrações avaliadas, melhora a qualidade espermática após descongelação.

The objective was to evaluate the effect of adding different concentrations of cholesterol carried by cyclodextrin (CCC) on frozen ovine sperm. Two ejaculates were collected from 10 rams (n=20) and diluted in Tris-Yolk until the final concentration of 200 x 106 sptz/mL was reached and kept in a water bath at 32 °C. The CCC was added: control (0,0mg), 1.5mg, 3.0mg, and 6.0mg of CCC/120 x 106 sptz/mL. After the addition, the semen was cooled at 5 °C for two hours, after that period, filled in 0.5 mL straws, and then conditioned under liquid nitrogen vapor (N2L), at 8 cm of the liquid/15 minutes, and then immersed in N2L. The samples were analyzed for sperm motility, plasma membrane and acrosomal membrane integrity, mitochondrial activity, and binding test. The variables were subjected to analysis of variance and means compared by Tukey's test at 5% probability. The highest percentage of plasma membrane integrity and the highest mitochondrial activity were obtained using 6.0mg of CCC. The addition of 3.0mg of CCC maintained the percentage of sperm motility after cryopreservation, when compared to other treatments and control. The addition of 1.5 and 3.0mg of CCC maintained the percentage of sperm viability after cryopreservation, above 65%. The count of sperm with ability to bind to the egg yolk perivitelline membrane was higher (p<0.05) with 3.0mg of CCC. It is concluded that the addition of CCC to the diluted semen, in the evaluated concentrations, improves the sperm quality after thawing.

Adição de colesterol carregado com ciclodextrina ao sêmen ovino na criopreservação / Addition of cholesterol loaded with cyclodextrin to sheep semen in cryopreservation

Objetivou-se avaliar o efeito da adição de diferentes concentrações do colesterol carregado por ciclodextrina (CCC) sobre os espermatozoides congelados de ovinos. Foram coletados dois ejaculados de 10 carneiros (n=20) e diluídos em Tris-Gema de ovo até a concentração final de 200 x106 sptz/mL e mantidos em banho maria a 32 °C. O CCC foi adicionado: controle (0,0mg), 1,5mg, 3,0mg e 6,0mg de CCC/120 x106 sptz/mL. Após adição, o sêmen foi resfriado a 5 °C por duas horas, após esse período, envasado em palhetas de 0,5mL e então acondicionado sob vapor de nitrogênio líquido (N2L), a 8 cm da lâmina líquida/15 minutos e depois imersos no N2L. As amostras foram analisadas quanto à motilidade espermática, integridade da membrana plasmática e da membrana acrossomal, atividade mitocondrial e teste de ligação. As variáveis foram submetidas à análise de variância e médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. O maior percentual de integridade da membrana plasmática, acrossomal e a maior atividade mitocondrial foram obtidos utilizando 6,0mg de CCC. A adição de3,0mg de CCC manteve o percentual de motilidade espermática após a criopreservação, quando comparado aos demais tratamentos e controle. A adição de 1,5 e 3,0mg de CCC mantiveram o percentual de viabilidade espermática após a criopreservação acima de 65%. O número de espermatozoides com capacidade de ligação a membrana perivitelina da gema de ovo foi maior (p<0,05) no tratamento com 3,0mg de CCC. Concluiu se que a adição de CCC ao sêmen diluído, nas concentrações avaliadas, melhora a qualidade espermática após descongelação.(AU)

The objective was to evaluate the effect of adding different concentrations of cholesterol carried by cyclodextrin (CCC) on frozen ovine sperm. Two ejaculates were collected from 10 rams (n=20) and diluted in Tris-Yolk until the final concentration of 200 x 106 sptz/mL was reached and kept in a water bath at 32 °C. The CCC was added: control (0,0mg), 1.5mg, 3.0mg, and 6.0mg of CCC/120 x 106 sptz/mL. After the addition, the semen was cooled at 5 °C for two hours, after that period, filled in 0.5 mL straws, and then conditioned under liquid nitrogen vapor (N2L), at 8 cm of the liquid/15 minutes, and then immersed in N2L. The samples were analyzed for sperm motility, plasma membrane and acrosomal membrane integrity, mitochondrial activity, and binding test. The variables were subjected to analysis of variance and means compared by Tukey's test at 5% probability. The highest percentage of plasma membrane integrity and the highest mitochondrial activity were obtained using 6.0mg of CCC. The addition of 3.0mg of CCC maintained the percentage of sperm motility after cryopreservation, when compared to other treatments and control. The addition of 1.5 and 3.0mg of CCC maintained the percentage of sperm viability after cryopreservation, above 65%. The count of sperm with ability to bind to the egg yolk perivitelline membrane was higher (p<0.05) with 3.0mg of CCC. It is concluded that the addition of CCC to the diluted semen, in the evaluated concentrations, improves the sperm quality after thawing.(AU)

Esponjas de banho: promovem limpeza ou podem ser reservatório e veículo de transmissão de microrganismos? / Bath sponges: promote cleaning or can be reservoirs and vehicles in the transmission of microorganisms?

As esponjas de banho podem carrear contaminação, pois sua estrutura favorece a multiplicação microbiana. Desse modo, o objetivo deste trabalho foi verificar a eficiência de dois métodos de desinfecção para diminuir a quantidade de microrganismos de importância clínica nas esponjas de banho. Foram analisadas 30 esponjas de banho (15 vegetais e 15 sintéticas) que foram cortadas em três partes iguais. Uma delas serviu como controle. As demais partes foram submetidas à desinfecção por fervura durante cinco minutos e à imersão em hipoclorito de sódio 200 ppm. Os resultados demonstraram média de contaminação de bactérias heterotróficas de 4,1 LogUFC/mL e 4,7 LogUFC/mL, para as vegetais e sintéticas, respectivamente. A maioria (80%) das esponjas (10 sintéticas e 14 vegetais) apresentou contaminação por microrganismos de importância clínica. Os métodos de desinfecção reduziram as contagens de bactérias heterotróficas em 3,3 LogUFC/mL com fervura durante cinco minutos e 1,8 LogUFC/mL com desinfecção em hipoclorito de sódio 200 ppm. Conclui-se, portanto, que as esponjas de banho possuem contaminação microbiológica de importância clínica e que a fervura por cinco minutos é um método de fácil execução, baixo custo e capaz de controlar a quantidade de bactérias nas esponjas utilizadas para banho, reduzindo a disseminação de doenças.

Bath sponges can carry contamination, because their structure favors microbial multiplication. Thus, the objective of this work was to verify the efficiency of two disinfection methods to decrease the number of microorganisms of clinical importance in bath sponges. Thirty bath sponges (15 loofah and 15 synthetic) were analyzed and cut in three equal parts. One served as control. The other parts were boiled disinfected for five minutes and immersed in 200 ppm sodium hypochlorite. The results showed a mean contamination of heterotrophic bacteria of 4.1 LogUFC/mL and 4.7 LogUFC/mL, for plants and synthetic, respectively. The majority (80%) of the sponges (10 synthetic and 14 loofah) presented contamination by microorganisms of clinical importance. Disinfection methods reduced the counts of heterotrophic bacteria by 3.3 LogUFC/mL with boiling for five minutes and 1.8 LogUFC/mL with disinfection with 200 ppm sodium hypochlorite. It is concluded, therefore, that bath sponges present microbiological contamination of clinical importance and that boiling for five minutes is an easily executed low-cost method that is able to control the amount of bacteria in sponges used for bathing, reducing the risk of dissemination of disease.

Esponjas de banho: promovem limpeza ou podem ser reservatório e veículo de transmissão de microrganismos? / Bath sponges: promote cleaning or can be reservoirs and vehicles in the transmission of microorganisms?

As esponjas de banho podem carrear contaminação, pois sua estrutura favorece a multiplicação microbiana. Desse modo, o objetivo deste trabalho foi verificar a eficiência de dois métodos de desinfecção para diminuir a quantidade de microrganismos de importância clínica nas esponjas de banho. Foram analisadas 30 esponjas de banho (15 vegetais e 15 sintéticas) que foram cortadas em três partes iguais. Uma delas serviu como controle. As demais partes foram submetidas à desinfecção por fervura durante cinco minutos e à imersão em hipoclorito de sódio 200 ppm. Os resultados demonstraram média de contaminação de bactérias heterotróficas de 4,1 LogUFC/mL e 4,7 LogUFC/mL, para as vegetais e sintéticas, respectivamente. A maioria (80%) das esponjas (10 sintéticas e 14 vegetais) apresentou contaminação por microrganismos de importância clínica. Os métodos de desinfecção reduziram as contagens de bactérias heterotróficas em 3,3 LogUFC/mL com fervura durante cinco minutos e 1,8 LogUFC/mL com desinfecção em hipoclorito de sódio 200 ppm. Conclui-se, portanto, que as esponjas de banho possuem contaminação microbiológica de importância clínica e que a fervura por cinco minutos é um método de fácil execução, baixo custo e capaz de controlar a quantidade de bactérias nas esponjas utilizadas para banho, reduzindo a disseminação de doenças.(AU)

Bath sponges can carry contamination, because their structure favors microbial multiplication. Thus, the objective of this work was to verify the efficiency of two disinfection methods to decrease the number of microorganisms of clinical importance in bath sponges. Thirty bath sponges (15 loofah and 15 synthetic) were analyzed and cut in three equal parts. One served as control. The other parts were boiled disinfected for five minutes and immersed in 200 ppm sodium hypochlorite. The results showed a mean contamination of heterotrophic bacteria of 4.1 LogUFC/mL and 4.7 LogUFC/mL, for plants and synthetic, respectively. The majority (80%) of the sponges (10 synthetic and 14 loofah) presented contamination by microorganisms of clinical importance. Disinfection methods reduced the counts of heterotrophic bacteria by 3.3 LogUFC/mL with boiling for five minutes and 1.8 LogUFC/mL with disinfection with 200 ppm sodium hypochlorite. It is concluded, therefore, that bath sponges present microbiological contamination of clinical importance and that boiling for five minutes is an easily executed low-cost method that is able to control the amount of bacteria in sponges used for bathing, reducing the risk of dissemination of disease.(AU)

Effect of different chemical compounds and ultrasound bath on the sanitization of minimally processed carrots / Efeito de diferentes componentes químicos e banho de ultrassom na sanitização de cenouras minimamente processadas

The objective of this study was to evaluate the effect of the use of different chemical compounds combined with ultrasound bath on the sanitization of minimally processed carrots. The sanitizers sodium hypochlorite, peracetic acid, and sodium dichloroisocyanurate were investigated, all of them associated with the ultrasound bath, and the aerobic mesophiles and E. coli counts were evaluated. Sodium hypochlorite associated with ultrasound reduced the population of aerobic mesophiles and E. coli by 0.23 and 1.88 log cycles, respectively. For sodium dichloroisocyanurate associated with ultrasound, the reduction was 3.06 and 2.76 log cycles, while for the association with peracetic acid, this reduction was 2.72 and 2.35 log cycles. Thus, the effect of the ultrasound bath and sodium dichloroisocyanurate increased the decontamination efficiency of the minimally processed carrots. In addition, there is analternative to the use of sodium hypochlorite, once they are not involved in reactions with organic compounds and the formation of trihalomethanes, which are harmful to health.

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do uso de diferentes compostos químicos combinados ao ultrassom na sanitização de cenouras minimamente processadas. Foram investigados os sanitizantes hipoclorito de sódio, ácido peracético e dicloroisocianurato de sódio, todos associados à técnica de banho de ultrassom, e foram avaliadas as contagens de mesófilos aeróbios e E. coli. O hipoclorito de sódio associado ao ultrassom reduziu em 0,23 e 1,88 ciclos log a população de mesófilos aeróbios e E. coli, respectivamente. Para o dicloroisocianurato de sódio associado ao ultrassom a redução foi de3,06 e 2,76 ciclos log, enquanto que para a associação com o ácido peracético essa redução foi de 2,72e 2,35 ciclos log. Assim, o tratamento composto pela técnica de ultrassom e o dicloroisocianurato de sódio aumentou a eficiência de descontaminação das cenouras minimamente processadas. Além disso, considera-se uma alternativa ao uso do hipoclorito de sódio, uma vez que não estão envolvidos em reações com compostos orgânicos e na formação de trihalometanos, prejudiciais à saúde.