Molecular characterization of Corynebacterium pseudotuberculosis, C. silvaticum, and C. auriscanis by ERIC-PCR / Caracterização molecular de Corynebacterium pseudotuberculosis, C. silvaticum e C. auriscanis pelo ERIC-PCR

The aims of the present study were (i) to genotype Corynebacterium pseudotuberculosis, C. silvaticum, and C. auriscanis strains using enterobacterial repetitive intergenic consensus (ERIC-PCR), and (ii) to analyze the epidemiological relationships among isolates according to biovar (Equi and Ovis), species, host, and geographical origin of the C. pseudotuberculosis strains. Sixty-eight C. pseudotuberculosis, nine C. silvaticum, and one C. auriscanis, C. pseudotuberculosis ATCC® 19410™ strain and the attenuated C. pseudotuberculosis 1002 vaccinal strain were fingerprinted by ERIC 1+2-PCR. Field strains were isolated from various hosts (cattle, buffaloes, sheep, goats, horses, dogs, and pigs) in six countries (Mexico, Portugal, Brazil, Equatorial Guinea, Egypt, and Israel). High genetic diversity was found among the studied Corynebacterium spp. isolates, clustering in 24 genotypes with a Hunter & Gaston diversity index (HGDI) of 0.937. The minimal spanning tree of Corynebacterium spp. revealed three clonal complexes, each associated with one bacterial species. Twenty-two genotypes were observed among C. pseudotuberculosis isolates, with an HGDI of 0.934. Three major clonal complexes were formed at the minimal spanning tree, grouped around the geographic origin of C. pseudotuberculosis isolates. These results reinforce the high typeability, epidemiological concordance, and discriminatory power of ERIC-PCR as a consistent genotyping method for C. pseudotuberculosis, which could be useful as an epidemiological tool to control caseous lymphadenitis. Moreover, our results also indicate the potential of ERIC 1+2-PCR for the genotyping of other species of Corynebacterium other than C. pseudotuberculosis.

Os objetivos do presente estudo foram (i) genotipar amostras de Corynebacterium pseudotuberculosis, C. silvaticum e C. auriscanis usando Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus (ERIC-PCR), bem como (ii) analisar as relações epidemiológicas entre os isolados de acordo com biovar (Equi e Ovis), espécie, hospedeiro e origem geográfica das amostras de C. pseudotuberculosis. Sessenta e oito isolados de C. pseudotuberculosis, nove C. silvaticum, um C. auriscanis, C. pseudotuberculosis ATCC® 19410 ™ e a amostra vacinal atenuada C. pseudotuberculosis 1002 foram tipificadas por ERIC 1 + 2-PCR. As amostras de campo foram isoladas de diferentes hospedeiros (bovinos, búfalos, ovinos, caprinos, equinos, cães e suínos) em seis países (México, Portugal, Brasil, Guiné Equatorial, Egito e Israel). Uma alta diversidade genética foi observada entre os isolados de Corynebacterium spp., agrupados em vinte e quatro genótipos com um índice de diversidade Hunter & Gaston (HGDI) de 0,937. A análise da minimal spanning tree (MST) de Corynebacterium spp. revelou três complexos clonais, cada um associado a uma espécie bacteriana. Vinte e dois genótipos foram observados entre isolados de C. pseudotuberculosis, com um HGDI de 0,934. Na análise da MST, três grandes complexos clonais foram formados, agrupando-se em torno da origem geográfica dos isolados de C. pseudotuberculosis. Esses resultados reforçam a alta tipabilidade, concordância epidemiológica e poder discriminatório do ERIC-PCR como método consistente de genotipagem para C. pseudotuberculosis, podendo ser útil como ferramenta epidemiológica no controle da linfadenite caseosa. Além disso, os resultados também indicam o grande potencial de ERIC 1 + 2-PCR para genotipagem de espécies do gênero Corynebacterium além de C. pseudotuberculosis.

Linfadenite caseosa intestinal em ovino / Intestinal caseous lymphadenitis in sheep

Background: Caseous Lymphadenitis (CL) is a chronic infectious disease caused by the bacterium Corynebacteriumpseudotuberculosis, which is considered the main agent responsible for abscess lesions. In the visceral form it can affect theinternal organs of sheep and goats, which could negatively affect animal health and cause large economic losses for producers.Case: This study aims to report a case of intestinal CL in sheep, with suspected diagnosis during physical examinationand identification during the performance of the oophorectomy procedure, adopted as a management approach. It is amixed breed sheep, aged over 5 years; weight 28 kg; emaciated on physical examination; with pale pink and moist eyelidmucosa; heart and respiratory rate: 81 beats/min and 22 movements/min, respectively; body temperature 39.2°C; ruminalmovements at 1 movement/min; without identification of lymphadenomegaly on palpation, however, it was observed thatthe right submandibular lymph node presented tissue retraction compatible with the healing process. For the surgical procedure, an 18-h fast was used and pre-anesthetic medication with 2% xylazine (0.1 mg/kg), 10% ketamine (5 mg/kg) and50 mg/mL tramadol (2 mg/kg) administrated intramuscularly. The animal was placed in the left lateral decubitus position,then was performed trichotomy and epidural administration of 2% lidocaine (4 mg/kg) and maintenance with propofol10 mg/mL intravenous dose-effect and oxygen mask 3 L/min, antibiotic prophylaxis was performed with 10% enrofloxacin(2.5 mg/kg). Flank oophorectomy was performed according to the classic technique and during...

Linfadenite caseosa intestinal em ovino / Intestinal caseous lymphadenitis in sheep

Background: Caseous Lymphadenitis (CL) is a chronic infectious disease caused by the bacterium Corynebacteriumpseudotuberculosis, which is considered the main agent responsible for abscess lesions. In the visceral form it can affect theinternal organs of sheep and goats, which could negatively affect animal health and cause large economic losses for producers.Case: This study aims to report a case of intestinal CL in sheep, with suspected diagnosis during physical examinationand identification during the performance of the oophorectomy procedure, adopted as a management approach. It is amixed breed sheep, aged over 5 years; weight 28 kg; emaciated on physical examination; with pale pink and moist eyelidmucosa; heart and respiratory rate: 81 beats/min and 22 movements/min, respectively; body temperature 39.2°C; ruminalmovements at 1 movement/min; without identification of lymphadenomegaly on palpation, however, it was observed thatthe right submandibular lymph node presented tissue retraction compatible with the healing process. For the surgical procedure, an 18-h fast was used and pre-anesthetic medication with 2% xylazine (0.1 mg/kg), 10% ketamine (5 mg/kg) and50 mg/mL tramadol (2 mg/kg) administrated intramuscularly. The animal was placed in the left lateral decubitus position,then was performed trichotomy and epidural administration of 2% lidocaine (4 mg/kg) and maintenance with propofol10 mg/mL intravenous dose-effect and oxygen mask 3 L/min, antibiotic prophylaxis was performed with 10% enrofloxacin(2.5 mg/kg). Flank oophorectomy was performed according to the classic technique and during...(AU)

Clinical-epidemiological study of caseous lymphadenitis in goats in the state of Pernambuco / Estudo clínico-epidemiológico da linfadenite caseosa em caprinos no estado de Pernambuco

Caseous lymphadenitis (CL), a contagious infectious disease caused by Corynebacterium pseudotuberculosis, stands out with great economic relevance for goat breeding in the country because it is one of the main causes of carcass condemnation and intense depreciation of the leather of small ruminants. The objective was to carry out a descriptive study of the clinical and epidemiological aspects of CL in goats in the state of Pernambuco and also to evaluate the detection of C. pseudotuberculosis in milk, blood, and stool samples by real-time PCR. Six hundred and forty-three goats were evaluated, of which 76 (11.8%) presented clinical signs suggestive of CL. And 88.9% (24/27) of the breeding was considered focus. Among symptomatic animals, 25 were selected and submitted to the collection of abscess content for bacteriological isolation. Milk, blood, and stool samples were analyzed for PLD gene detection by real-time polymerase chain reaction (PCR). Out of the 25 samples of abscess content, 72% (18/25) were positive. The PLD gene was detected in the frequencies of 8% (2/25) and 4% (1/25) in milk and blood samples, respectively. Caseous lymphadenitis is possibly widespread in the dairy herds of goats in the state of Pernambuco, especially in adult animals, with a higher occurrence of submandibular lymph node abscesses. The preliminary detection of C. pseudotuberculosis by mammary and(AU)

A linfadenite caseosa (LC), doença infectocontagiosa ocasionada pelo Corynebacterium pseudotuberculosis, se destaca com grande relevância econômica para a caprinocultura no país por ser umas das principais causas de condenação de carcaças e intensa depreciação do couro de pequenos ruminantes. Objetivou-se realizar um estudo descritivo dos aspectos clínico-epidemiológicos da LC em caprinos no estado de Pernambuco e, adicionalmente, avaliar a detecção do C. pseudotuberculosis em amostras de leite, sangue e fezes por PCR em tempo real. Foram avaliados 643 caprinos, dos quais 76 (11,8%) apresentaram sinais clínicos sugestivos de LC. E 88,9% (24/27) das propriedades foram consideradas foco. Dentre os animais sintomáticos, 25 foram selecionados e submetidos à colheita de conteúdo de abscesso para isolamento bacteriológico. Amostras de leite, sangue e fezes foram analisadas para detecção do gene PLD pela reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. Das 25 amostras de conteúdo de abscesso, 72% (18/25) resultaram positivas. O gene PLD foi detectado nas frequências de 8% (2/25) e 4% (1/25) em amostras de leite e sangue, respectivamente. A linfadenite caseosa possivelmente encontra-se disseminada nos rebanhos leiteiros de caprinos do estado de Pernambuco, sobretudo em animais adultos, com maior ocorrência de abscessos em linfonodos submandibulares. A detecção preliminar do C. pseud(AU)

Clinical-epidemiological study of caseous lymphadenitis in goats in the state of Pernambuco / Estudo clínico-epidemiológico da linfadenite caseosa em caprinos no estado de Pernambuco

Caseous lymphadenitis (CL), a contagious infectious disease caused by Corynebacterium pseudotuberculosis, stands out with great economic relevance for goat breeding in the country because it is one of the main causes of carcass condemnation and intense depreciation of the leather of small ruminants. The objective was to carry out a descriptive study of the clinical and epidemiological aspects of CL in goats in the state of Pernambuco and also to evaluate the detection of C. pseudotuberculosis in milk, blood, and stool samples by real-time PCR. Six hundred and forty-three goats were evaluated, of which 76 (11.8%) presented clinical signs suggestive of CL. And 88.9% (24/27) of the breeding was considered focus. Among symptomatic animals, 25 were selected and submitted to the collection of abscess content for bacteriological isolation. Milk, blood, and stool samples were analyzed for PLD gene detection by real-time polymerase chain reaction (PCR). Out of the 25 samples of abscess content, 72% (18/25) were positive. The PLD gene was detected in the frequencies of 8% (2/25) and 4% (1/25) in milk and blood samples, respectively. Caseous lymphadenitis is possibly widespread in the dairy herds of goats in the state of Pernambuco, especially in adult animals, with a higher occurrence of submandibular lymph node abscesses. The preliminary detection of C. pseudotuberculosis by mammary and

A linfadenite caseosa (LC), doença infectocontagiosa ocasionada pelo Corynebacterium pseudotuberculosis, se destaca com grande relevância econômica para a caprinocultura no país por ser umas das principais causas de condenação de carcaças e intensa depreciação do couro de pequenos ruminantes. Objetivou-se realizar um estudo descritivo dos aspectos clínico-epidemiológicos da LC em caprinos no estado de Pernambuco e, adicionalmente, avaliar a detecção do C. pseudotuberculosis em amostras de leite, sangue e fezes por PCR em tempo real. Foram avaliados 643 caprinos, dos quais 76 (11,8%) apresentaram sinais clínicos sugestivos de LC. E 88,9% (24/27) das propriedades foram consideradas foco. Dentre os animais sintomáticos, 25 foram selecionados e submetidos à colheita de conteúdo de abscesso para isolamento bacteriológico. Amostras de leite, sangue e fezes foram analisadas para detecção do gene PLD pela reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. Das 25 amostras de conteúdo de abscesso, 72% (18/25) resultaram positivas. O gene PLD foi detectado nas frequências de 8% (2/25) e 4% (1/25) em amostras de leite e sangue, respectivamente. A linfadenite caseosa possivelmente encontra-se disseminada nos rebanhos leiteiros de caprinos do estado de Pernambuco, sobretudo em animais adultos, com maior ocorrência de abscessos em linfonodos submandibulares. A detecção preliminar do C. pseud

Assessment of caseous lymphadenitis in goats in a slaughterhouse in the Brazilian semi-arid region and estimates of economic losses due to carcass condemnation / Avaliação da linfadenite caseosa em caprinos em um abatedouro na região do semiárido brasileiro e estimativas de perdas econômicas por condenação de carcaças

Caseous lymphadenitis (CLA) caused by the pathogenic bacterium, Corynebacterium pseudotuberculosis, results in economic loss in goat farming. Its prevalence in Brazilian herds varies from 5 to 50%, generating expenses with treatment, loss in production, carcass and organ condemnation, and reduced price of the hide. This study aimed to describe the distribution of lesions and quantify the loss associated with CLA in goat breeding due to condemnation in a slaughterhouse located in a semiarid region. The study was conducted at the municipal slaughterhouse of the city of Patos, State of Paraíba, Northeastern Brazil, where goats from this intermediate geographical region are slaughtered. In 2017, 3,662 animals were slaughtered, an average of 305 per month. During the study period, from March to August 2017, 304 goats of both sexes and different ages of undefined breed were assessed. In the ante-mortem examination, inspection and palpation of the superficial lymph nodes was done; in the post-mortem examination, organ and viscera were assessed. The caseous material collected was sent for microbiological analysis. Of the 304 individuals, 227 [74.67% (95% CI: 69.50-79.23)] did not have any lesions, while 77 [25.33% (95% CI: 20.77-30.50)] showed abscesses suggestive of CLA, which was confirmed in 65 goats [84.41% (95% CI: 76.30-92.50)]. Sex (P = 0.044) and age (P = 0.002) were associated with infection. While the sex of the animals affected carcass and viscera weights and carcass yield, their age affected live weight, carcass, organ, and viscera weights; conversely, the incidence of CLA did not affect these variables. The average price in Real (R$) of a kilogram (kg) of goat meat cuts and “offal” was used to calculate the economic loss. Considering the average carcass weight (11,485 kg), organ weight (1,085 kg), and viscera weight (2,013 kg), 4,433.232 kg of meat was produced, resulting in R$ 72,945.43. The condemnations resulted in the loss of 269.894 kg, which is equivalent to R$ 4,540.33. CLA is responsible for a negative impact of 6.09% on production. Implementing control measures for this disease is important to increase the financial return in goat farming.

Linfadenite Caseosa (LC) causada pela bactéria patogênica Corynebacterium pseudotuberculosis resulta em perda econômica na caprinocultura. No rebanho brasileiro sua prevalência varia de 5 a 50%, gerando gastos com tratamento, queda de produção, condenação de carcaça e órgãos, e desvalorização da pele. O objetivo deste trabalho foi quantificar a perda associada à LC na caprinocultura de corte por condenação em abatedouro do semiárido, bem como caracterizar a distribuição das lesões. O trabalho foi realizado no Abatedouro Municipal da cidade de Patos, Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil, onde ocorre abate de caprinos provenientes desta região geográfica intermediária. No ano de 2017 foram abatidos 3.662 animais, uma média de 305 por mês. Durante o período de estudo, março a agosto do mesmo ano, avaliou-se 304 caprinos sem padrão racial definido, ambos os sexos e idades diversas. No exame ante mortem foram submetidos à inspeção e palpação de linfonodos superficiais; post mortem, órgãos e vísceras. O material caseoso coletado foi submetido à análise microbiológica para diagnóstico. Dos 304 indivíduos, 227 [74,67% (IC 95%: 69,50-79,23)] não apresentaram qualquer lesão, enquanto 77 [25,33% (IC 95%: 20,77-30,50)] evidenciaram abscessos sugestivos de LC, com confirmação em 65 [84,41% (IC 95%: 76,30-92,50)]. Constatou-se associação de sexo (P = 0,044) e idade (P = 0,002) à infecção. Foi verificado efeito do sexo dos animais nas variáveis peso de carcaça, peso de vísceras e rendimento de carcaça, bem como houve efeito da idade nas variáveis peso vivo, peso de carcaça, peso de órgãos e peso de vísceras; no entanto, não houve efeito da ocorrência de LC nessas variáveis. Para cálculo de perda econômica adotou-se o preço médio em Real (R$) do quilograma (kg) dos cortes de carne caprina, e “miúdos”. Considerando o peso médio de carcaça (11,485 kg), órgãos (1,085 kg) e vísceras (2,013 kg), houve produção de 4.433,232 kg, resultando em R$ 72.945,43. As condenações subtraíram 269,894 kg, equivalente a R$ 4.540,33. Atribui-se à LC um impacto negativo de 6,09% na produção. Implementar medidas de controle para essa doença é importante para que se amplie o retorno financeiro à atividade.

Assessment of caseous lymphadenitis in goats in a slaughterhouse in the Brazilian semi-arid region and estimates of economic losses due to carcass condemnation / Avaliação da linfadenite caseosa em caprinos em um abatedouro na região do semiárido brasileiro e estimativas de perdas econômicas por condenação de carcaças

Caseous lymphadenitis (CLA) caused by the pathogenic bacterium, Corynebacterium pseudotuberculosis, results in economic loss in goat farming. Its prevalence in Brazilian herds varies from 5 to 50%, generating expenses with treatment, loss in production, carcass and organ condemnation, and reduced price of the hide. This study aimed to describe the distribution of lesions and quantify the loss associated with CLA in goat breeding due to condemnation in a slaughterhouse located in a semiarid region. The study was conducted at the municipal slaughterhouse of the city of Patos, State of Paraíba, Northeastern Brazil, where goats from this intermediate geographical region are slaughtered. In 2017, 3,662 animals were slaughtered, an average of 305 per month. During the study period, from March to August 2017, 304 goats of both sexes and different ages of undefined breed were assessed. In the ante-mortem examination, inspection and palpation of the superficial lymph nodes was done; in the post-mortem examination, organ and viscera were assessed. The caseous material collected was sent for microbiological analysis. Of the 304 individuals, 227 [74.67% (95% CI: 69.50-79.23)] did not have any lesions, while 77 [25.33% (95% CI: 20.77-30.50)] showed abscesses suggestive of CLA, which was confirmed in 65 goats [84.41% (95% CI: 76.30-92.50)]. Sex (P = 0.044) and age (P = 0.002) were associated with infection. While the sex of the animals affected carcass and viscera weights and carcass yield, their age affected live weight, carcass, organ, and viscera weights; conversely, the incidence of CLA did not affect these variables. The average price in Real (R$) of a kilogram (kg) of goat meat cuts and “offal” was used to calculate the economic loss. Considering the average carcass weight (11,485 kg), organ weight (1,085 kg), and viscera weight (2,013 kg), 4,433.232 kg of meat was produced, resulting in R$ 72,945.43. The condemnations resulted in the loss of 269.894 kg, which is equivalent to R$ 4,540.33. CLA is responsible for a negative impact of 6.09% on production. Implementing control measures for this disease is important to increase the financial return in goat farming.(AU)

Linfadenite Caseosa (LC) causada pela bactéria patogênica Corynebacterium pseudotuberculosis resulta em perda econômica na caprinocultura. No rebanho brasileiro sua prevalência varia de 5 a 50%, gerando gastos com tratamento, queda de produção, condenação de carcaça e órgãos, e desvalorização da pele. O objetivo deste trabalho foi quantificar a perda associada à LC na caprinocultura de corte por condenação em abatedouro do semiárido, bem como caracterizar a distribuição das lesões. O trabalho foi realizado no Abatedouro Municipal da cidade de Patos, Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil, onde ocorre abate de caprinos provenientes desta região geográfica intermediária. No ano de 2017 foram abatidos 3.662 animais, uma média de 305 por mês. Durante o período de estudo, março a agosto do mesmo ano, avaliou-se 304 caprinos sem padrão racial definido, ambos os sexos e idades diversas. No exame ante mortem foram submetidos à inspeção e palpação de linfonodos superficiais; post mortem, órgãos e vísceras. O material caseoso coletado foi submetido à análise microbiológica para diagnóstico. Dos 304 indivíduos, 227 [74,67% (IC 95%: 69,50-79,23)] não apresentaram qualquer lesão, enquanto 77 [25,33% (IC 95%: 20,77-30,50)] evidenciaram abscessos sugestivos de LC, com confirmação em 65 [84,41% (IC 95%: 76,30-92,50)]. Constatou-se associação de sexo (P = 0,044) e idade (P = 0,002) à infecção. Foi verificado efeito do sexo dos animais nas variáveis peso de carcaça, peso de vísceras e rendimento de carcaça, bem como houve efeito da idade nas variáveis peso vivo, peso de carcaça, peso de órgãos e peso de vísceras; no entanto, não houve efeito da ocorrência de LC nessas variáveis. Para cálculo de perda econômica adotou-se o preço médio em Real (R$) do quilograma (kg) dos cortes de carne caprina, e “miúdos”. Considerando o peso médio de carcaça (11,485 kg), órgãos (1,085 kg) e vísceras (2,013 kg), houve produção de 4.433,232 kg, resultando em R$ 72.945,43. As condenações subtraíram 269,894 kg, equivalente a R$ 4.540,33. Atribui-se à LC um impacto negativo de 6,09% na produção. Implementar medidas de controle para essa doença é importante para que se amplie o retorno financeiro à atividade.(AU)

Assessment of the acid phosphatase CP01850 from Corynebacterium pseudotuberculosis in DNA and subunit vaccine formulations against caseous lymphadenitis / Avaliação da fosfatase ácida recombinante CP01850 de Corynebacterium pseudotuberculosis em formulações vacinais de subunidade e de DNA contra a linfadenite caseosa

The target cp1002_RS01850 from Corynebacterium pseudotuberculosis was used to construct a DNA and recombinant subunit vaccine against caseous lymphadenitis. Recombinant protein rCP01850 was expressed in Escherichia coli using pAE vector, and DNA vaccine was engineered with pTARGET vector. BALB/c mice were divided in five groups containing eight animals each, inoculated with: pTARGET/cp01850 as DNA vaccine (G1); rCP01850 plus Al (OH)3 as recombinant subunit vaccine (G2); pTARGET/cp01850 and a boost with rCP01850 plus Al (OH)3 (G3); pTARGET (G4); or Al (OH)3 (G5). Mice were inoculated and blood samples were collected on days 0, 21, and 42 for the analysis of total IgG, IgG1 and IgG2a by ELISA. In each group, five animals were challenged with Mic-6 C. pseudotuberculosis strain, and three were used for cytokine quantification by qPCR. Although no group has been protected by vaccines against lethal challenge, G2 showed an increase in the survival rate after challenge. Significantly higher levels of IL-4, IL-12, IFN-γ, total IgG, IgG1 and IgG2a were also detected for G2, evidencing a mixed Th1/Th2 immunological profile. In conclusion, despite no protection level provided by different vaccinal strategies using cp1002_RS01850 from C. pseudotuberculosis, G2 developed a Th1/Th2 immune response with an increase in survival rate.(AU)

O alvo cp1002_RS01850 de Corynebacterium pseudotuberculosis foi utilizado para construir uma vacina recombinante de subunidade e de DNA contra a linfadenite caseosa. A proteína recombinante rCP01850 foi expressa em Escherichia coli usando o vetor pAE, e a vacina de DNA foi construída com o vetor pTARGET. Camundongos BALB/c foram divididos em grupos de oito animais, inoculados com: pTARGET/cp01850 como vacina de DNA (G1); rCP01850 e Al (OH)3 como vacina recombinante de subunidade (G2); pTARGET/cp01850 e um boost com rCP01850 e Al (OH)3 (G3); pTARGET (G4); ou Al (OH)3 (G5). Os animais foram inoculados e amostras de sangue foram coletadas nos dias 0, 21, e 42 do experimento para a análise de IgG total, IgG1 e IgG2a por ELISA. De cada grupo, cinco animais foram desafiados com a cepa Mic-6 de C. pseudotuberculosis, e três foram usados para a quantificação de citocinas por qPCR. Apesar de nenhum grupo ter sido protegido pelas vacinas testadas contra o desafio letal, G2 apresentou taxa de sobrevida e níveis de IL-4, IL-12, IFN-γ, IgG total, IgG1 e IgG2a significativamente mais altos, evidenciando um perfil imunológico misto Th1/Th2. Conclui-se que apesar das diferentes estratégias vacinais utilizando cp1002_RS01850 de C. pseudotuberculosis não terem sido capazes de gerar proteção, G2 desenvolveu uma resposta Th1/Th2 e elevou a taxa de sobrevida.(AU)

Assessment of the acid phosphatase CP01850 from Corynebacterium pseudotuberculosis in DNA and subunit vaccine formulations against caseous lymphadenitis / Avaliação da fosfatase ácida recombinante CP01850 de Corynebacterium pseudotuberculosis em formulações vacinais de subunidade e de DNA contra a linfadenite caseosa

The target cp1002_RS01850 from Corynebacterium pseudotuberculosis was used to construct a DNA and recombinant subunit vaccine against caseous lymphadenitis. Recombinant protein rCP01850 was expressed in Escherichia coli using pAE vector, and DNA vaccine was engineered with pTARGET vector. BALB/c mice were divided in five groups containing eight animals each, inoculated with: pTARGET/cp01850 as DNA vaccine (G1); rCP01850 plus Al (OH)3 as recombinant subunit vaccine (G2); pTARGET/cp01850 and a boost with rCP01850 plus Al (OH)3 (G3); pTARGET (G4); or Al (OH)3 (G5). Mice were inoculated and blood samples were collected on days 0, 21, and 42 for the analysis of total IgG, IgG1 and IgG2a by ELISA. In each group, five animals were challenged with Mic-6 C. pseudotuberculosis strain, and three were used for cytokine quantification by qPCR. Although no group has been protected by vaccines against lethal challenge, G2 showed an increase in the survival rate after challenge. Significantly higher levels of IL-4, IL-12, IFN-γ, total IgG, IgG1 and IgG2a were also detected for G2, evidencing a mixed Th1/Th2 immunological profile. In conclusion, despite no protection level provided by different vaccinal strategies using cp1002_RS01850 from C. pseudotuberculosis, G2 developed a Th1/Th2 immune response with an increase in survival rate.(AU)

O alvo cp1002_RS01850 de Corynebacterium pseudotuberculosis foi utilizado para construir uma vacina recombinante de subunidade e de DNA contra a linfadenite caseosa. A proteína recombinante rCP01850 foi expressa em Escherichia coli usando o vetor pAE, e a vacina de DNA foi construída com o vetor pTARGET. Camundongos BALB/c foram divididos em grupos de oito animais, inoculados com: pTARGET/cp01850 como vacina de DNA (G1); rCP01850 e Al (OH)3 como vacina recombinante de subunidade (G2); pTARGET/cp01850 e um boost com rCP01850 e Al (OH)3 (G3); pTARGET (G4); ou Al (OH)3 (G5). Os animais foram inoculados e amostras de sangue foram coletadas nos dias 0, 21, e 42 do experimento para a análise de IgG total, IgG1 e IgG2a por ELISA. De cada grupo, cinco animais foram desafiados com a cepa Mic-6 de C. pseudotuberculosis, e três foram usados para a quantificação de citocinas por qPCR. Apesar de nenhum grupo ter sido protegido pelas vacinas testadas contra o desafio letal, G2 apresentou taxa de sobrevida e níveis de IL-4, IL-12, IFN-γ, IgG total, IgG1 e IgG2a significativamente mais altos, evidenciando um perfil imunológico misto Th1/Th2. Conclui-se que apesar das diferentes estratégias vacinais utilizando cp1002_RS01850 de C. pseudotuberculosis não terem sido capazes de gerar proteção, G2 desenvolveu uma resposta Th1/Th2 e elevou a taxa de sobrevida.(AU)

Prevalência da linfadenite caseosa em ovinos e caprinos de municípios do estado do Amazonas e sensibilidade in vitro de Corynebacterium pseudotuberculosis aos antimicrobianos / Prevalence of caseous lymphadenitis in sheep and goats of the Amazon state municipality and in vitro susceptibility pattern of Corynebacterium pseudotuberculosis to antimicrobials / Prevalencia de linfadenitis caseosa en ovinos y caprinos del municipio del estado de Amazona y en la susceptibilidad in vitrode la Corynebacterium pseudotuberculosis a antimicrobianos

A linfadenite caseosa (LC) é uma enfermidade que acomete pequenos ruminantes, caracterizada clinicamente por lesões abscedantes em linfonodos, pele e órgãos, causada principalmente pela bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis. O presente estudo investigou a prevalência da LC em criatórios de pequenos ruminantes do estado do Amazonas, bem como a sensibilidade microbiana in vitro de C. pseudotuberculosis aos antimicrobianos. Foi realizado exame clínico em 1.280 animais, dos quais 4,53% (58/1.280) dos animais apresentavam abscessos e/ou cicatrizes na pele e/ou linfonodos. No perfil de sensibilidade in vitro aos antimicrobianos, 100% dos isolados de C. pseudotuberculosis obtidos de ovinos foram sensíveis à ampicilina (8/8), amoxicilina/ácido clavulânico (8/8), cefotaxima (8/8), ciprofloxacina (8/8), norfloxacino (8/8), sulfazotrim e tetraciclina (8/8). Nos isolados de C. pseudotuberculosis obtidos de caprinos, verificou-se 100% de sensibilidade in vitro diante da amoxicilina/ácido clavulânico (5/5), cefotaxima (5/5), ciprofloxacina (5/5) e norfloxacino (5/5). Ratifica-se a importância do primeiro isolamento do agente em pequenos ruminantes no estado, bem como o primeiro estudo epidemiológico na Região Norte, constatando que a enfermidade possui baixa prevalência em ovinos e caprinos no Amazonas.

Caseous lymphadenitis (CL) is a disease that affects small ruminants, clinically characterized by abscessing lesions in lymph nodes, skin and organs, caused mainly by the bacterium Corynebacterium pseudotuberculosis. The present study investigated the prevalence of CS in small ruminant farms in the state of Amazonas, as well as the in vitro microbial sensitivity of C. pseudotuberculosis to antimicrobials. A clinical examination was carried out on 1,280 animals evaluated, of which 4.53% (58 / 1,280) of the animals had abscesses and / or scars on the skin and / or lymph nodes. In the in vitro sensitivity profile to antimicrobials, 100% of C. pseudotuberculosis isolates obtained from sheep were sensitive to ampicillin (8/8), amoxicillin / clavulanic acid (8/8),cefotaxime (8/8), ciprofloxacin (8 / 8), norfloxacin (8/8), sulfazotrim and tetracycline (8/8). In isolates of C. pseudotuberculosis obtained from goats, there was 100% sensitivity in vitro to amoxicillin / clavulanic acid (5/5), cefotaxime (5/5), ciprofloxacin (5/5) and norfloxacin (5/5). The importance of the first isolation of the agent in small ruminants in the state is ratified, as well as the first epidemiological study in the North Region, confirming that the disease has a low prevalence in sheep and goats in Amazonas.

La linfadenitis caseosa (LC) es una enfermedad que afecta a pequeños rumiantes, caracterizada clínicamente por lesiones de absceso en los ganglios linfáticos, la piely los órganos, causada principalmente por la bacteria Corynebacterium pseudotuberculosis. El presente estudio investigó la prevalencia de LC en pequeñas granjas de rumiantes en el estado de Amazona, así como la sensibilidad microbiana in vitro de C. pseudotuberculosis a los antimicrobianos. Se realizó un examen clínico en 1.280 animales evaluados, de los cuales 4.53% (58 / 1,280) de los animales tenían abscesos y / o cicatrices en la piel y / o ganglios linfáticos. En el perfil de sensibilidad in vitro a los antimicrobianos, el 100% de los aislados de C. pseudotuberculosis obtenidos de ovejas eran sensibles a ampicilina (8/8), amoxicilina / ácido clavulánico (8/8), cefotaxima (8/8), ciprofloxacina (8 / 8), norfloxacino (8/8), sulfazotrim y tetraciclina(8/8). En los aislados de C. pseudotuberculosis obtenidos de cabras, 100% de sensibilidad in vitro a amoxicilina / ácido clavulánico (5/5), cefotaxima (5/5), ciprofloxacina (5/5) y norfloxacino (5/5). Se ratifica la importancia del primer aislamiento del agente en pequeños rumiantes en el estado, así como el primer estudio epidemiológico en la Región Norte, lo que confirma que la enfermedad tiene una baja prevalencia en ovejas y cabras en Amazona.

Prevalência da linfadenite caseosa em ovinos e caprinos de municípios do estado do Amazonas e sensibilidade in vitro de Corynebacterium pseudotuberculosis aos antimicrobianos / Prevalence of caseous lymphadenitis in sheep and goats of the Amazon state municipality and in vitro susceptibility pattern of Corynebacterium pseudotuberculosis to antimicrobials / Prevalencia de linfadenitis caseosa en ovinos y caprinos del municipio del estado de Amazona y en la susceptibilidad in vitrode la Corynebacterium pseudotuberculosis a antimicrobianos

A linfadenite caseosa (LC) é uma enfermidade que acomete pequenos ruminantes, caracterizada clinicamente por lesões abscedantes em linfonodos, pele e órgãos, causada principalmente pela bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis. O presente estudo investigou a prevalência da LC em criatórios de pequenos ruminantes do estado do Amazonas, bem como a sensibilidade microbiana in vitro de C. pseudotuberculosis aos antimicrobianos. Foi realizado exame clínico em 1.280 animais, dos quais 4,53% (58/1.280) dos animais apresentavam abscessos e/ou cicatrizes na pele e/ou linfonodos. No perfil de sensibilidade in vitro aos antimicrobianos, 100% dos isolados de C. pseudotuberculosis obtidos de ovinos foram sensíveis à ampicilina (8/8), amoxicilina/ácido clavulânico (8/8), cefotaxima (8/8), ciprofloxacina (8/8), norfloxacino (8/8), sulfazotrim e tetraciclina (8/8). Nos isolados de C. pseudotuberculosis obtidos de caprinos, verificou-se 100% de sensibilidade in vitro diante da amoxicilina/ácido clavulânico (5/5), cefotaxima (5/5), ciprofloxacina (5/5) e norfloxacino (5/5). Ratifica-se a importância do primeiro isolamento do agente em pequenos ruminantes no estado, bem como o primeiro estudo epidemiológico na Região Norte, constatando que a enfermidade possui baixa prevalência em ovinos e caprinos no Amazonas.(AU)

Caseous lymphadenitis (CL) is a disease that affects small ruminants, clinically characterized by abscessing lesions in lymph nodes, skin and organs, caused mainly by the bacterium Corynebacterium pseudotuberculosis. The present study investigated the prevalence of CS in small ruminant farms in the state of Amazonas, as well as the in vitro microbial sensitivity of C. pseudotuberculosis to antimicrobials. A clinical examination was carried out on 1,280 animals evaluated, of which 4.53% (58 / 1,280) of the animals had abscesses and / or scars on the skin and / or lymph nodes. In the in vitro sensitivity profile to antimicrobials, 100% of C. pseudotuberculosis isolates obtained from sheep were sensitive to ampicillin (8/8), amoxicillin / clavulanic acid (8/8),cefotaxime (8/8), ciprofloxacin (8 / 8), norfloxacin (8/8), sulfazotrim and tetracycline (8/8). In isolates of C. pseudotuberculosis obtained from goats, there was 100% sensitivity in vitro to amoxicillin / clavulanic acid (5/5), cefotaxime (5/5), ciprofloxacin (5/5) and norfloxacin (5/5). The importance of the first isolation of the agent in small ruminants in the state is ratified, as well as the first epidemiological study in the North Region, confirming that the disease has a low prevalence in sheep and goats in Amazonas.(AU)

La linfadenitis caseosa (LC) es una enfermedad que afecta a pequeños rumiantes, caracterizada clínicamente por lesiones de absceso en los ganglios linfáticos, la piely los órganos, causada principalmente por la bacteria Corynebacterium pseudotuberculosis. El presente estudio investigó la prevalencia de LC en pequeñas granjas de rumiantes en el estado de Amazona, así como la sensibilidad microbiana in vitro de C. pseudotuberculosis a los antimicrobianos. Se realizó un examen clínico en 1.280 animales evaluados, de los cuales 4.53% (58 / 1,280) de los animales tenían abscesos y / o cicatrices en la piel y / o ganglios linfáticos. En el perfil de sensibilidad in vitro a los antimicrobianos, el 100% de los aislados de C. pseudotuberculosis obtenidos de ovejas eran sensibles a ampicilina (8/8), amoxicilina / ácido clavulánico (8/8), cefotaxima (8/8), ciprofloxacina (8 / 8), norfloxacino (8/8), sulfazotrim y tetraciclina(8/8). En los aislados de C. pseudotuberculosis obtenidos de cabras, 100% de sensibilidad in vitro a amoxicilina / ácido clavulánico (5/5), cefotaxima (5/5), ciprofloxacina (5/5) y norfloxacino (5/5). Se ratifica la importancia del primer aislamiento del agente en pequeños rumiantes en el estado, así como el primer estudio epidemiológico en la Región Norte, lo que confirma que la enfermedad tiene una baja prevalencia en ovejas y cabras en Amazona.(AU)

Seroprevalence of Brucella ovis-epididymitis, smooth-Brucella, leptospirosis, toxoplasmosis, and Maedi-Visna in sheep slaughtered in Minas Gerais State, Brazil / Soroprevalência de Brucella ovis, Brucella lisa, leptospirose, toxoplasmose e Maedi-Visna em ovinos abatidos em Minas Gerais, Brasil

The present study aimed to estimate the prevalence of antibodies against Brucella ovis-epididymitis, smooth-Brucella, leptospirosis, toxoplasmosis and Maedi-visna in sheep slaughtered in Minas Gerais, Brazil and to study their simultaneous occurrence, including caseous lymphadenitis, at sheep and flock levels. The study was conducted at a sheep slaughterhouse with Federal Inspection Service. Sera from 594 animals from 21 flocks were collected, in 2007. The agar gel immunodiffusion (AGID) was employed to detect anti-B. ovis and anti-Maedi Visna antibodies, whereas Rose Bengal (RB) and the 2-mercaptoethanol test (2ME) were used to test anti-smooth Brucella antibodies. For the detection of anti-Leptospira antibodies, sera were examined by microscopic agglutination test (MAT), while for the detection of IgG antibodies to Toxoplasma gondii ELISA was used. Prevalence of antibodies against smooth Brucella, B. ovis-epididimitis, Leptospira spp., toxoplasmosis and Maedi-Visna found in sheep from Minas Gerais was 0.00%, 24.04%, 25.96%, 10.46% and 3.08%, respectively; whereas the seroprevalence in flocks was 0.00%, 80.95%, 90.48%, 71.43% and 23.81%, respectively. Moreover, when data on antibodies anti-Corynebacterium pseudotuberculosis, previously obtained, were included, about 60% of the flocks showed animals that were exposed to four or more of the studied agents. However, only 25.47% o

O presente estudo teve como objetivo estimar a prevalência de anticorpos contra Brucella ovis (epididimite ovina), Brucella lisa, leptospirose, toxoplasmose e Maedi-visna em ovinos abatidos em Minas Gerais, Brasil, e estudar sua ocorrência simultânea, incluindo linfadenite caseosa, nos ovinos e nos rebanhos. O estudo foi realizado em um abatedouro de ovinos com Serviço de Inspeção Federal. Soros de 594 animais de 21 rebanhos foram coletados, em 2007. A imunodifusão em gel de ágar (IDGA) foi empregada para detectar anticorpos anti-B. ovis e anticorpos anti-Maedi Visna, enquanto o teste do antígeno acidificado tamponado (AAT) e o teste de 2-mercaptoetanol (2ME) foram utilizados para testar anticorpos anti-Brucella lisa. Para a detecção de anticorpos anti-Leptospira, os soros foram examinados pelo teste de aglutinação microscópica (MAT), enquanto que para a detecção de anticorpos IgG para Toxoplasma gondii, foi usado o ELISA. A prevalência de anticorpos anti-Brucella lisa, B. ovis, Leptospira spp., toxoplasmose e Maedi-Visna encontrados em ovinos de Minas Gerais foi de 0,00%, 24,04%, 25,96%, 10,46% e 3,08%, respectivamente; enquanto a soroprevalência em rebanhos foi de 0,00%, 80,95%, 90,48%, 71,43% e 23,81%, respectivamente. Além disso, quando dados de anticorpos anti-Corynebacterium pseudotuberculosis, previamente obtidos, foram incluídos, cerca de 60% dos rebanhos apresentaram a

Seroprevalence of Brucella ovis-epididymitis, smooth-Brucella, leptospirosis, toxoplasmosis, and Maedi-Visna in sheep slaughtered in Minas Gerais State, Brazil / Soroprevalência de Brucella ovis, Brucella lisa, leptospirose, toxoplasmose e Maedi-Visna em ovinos abatidos em Minas Gerais, Brasil

The present study aimed to estimate the prevalence of antibodies against Brucella ovis-epididymitis, smooth-Brucella, leptospirosis, toxoplasmosis and Maedi-visna in sheep slaughtered in Minas Gerais, Brazil and to study their simultaneous occurrence, including caseous lymphadenitis, at sheep and flock levels. The study was conducted at a sheep slaughterhouse with Federal Inspection Service. Sera from 594 animals from 21 flocks were collected, in 2007. The agar gel immunodiffusion (AGID) was employed to detect anti-B. ovis and anti-Maedi Visna antibodies, whereas Rose Bengal (RB) and the 2-mercaptoethanol test (2ME) were used to test anti-smooth Brucella antibodies. For the detection of anti-Leptospiraantibodies, sera were examined by microscopic agglutination test (MAT), while for the detection of IgG antibodies to Toxoplasma gondii ELISA was used. Prevalence of antibodies against smooth Brucella, B. ovis-epididimitis, Leptospiraspp., toxoplasmosis and Maedi-Visna found in sheep from Minas Gerais was 0.00%, 24.04%, 25.96%, 10.46% and 3.08%, respectively; whereas the seroprevalence in flocks was 0.00%, 80.95%, 90.48%, 71.43% and 23.81%, respectively. Moreover, when data on antibodies anti-Corynebacterium pseudotuberculosis, previously obtained, were included, about 60% of the flocks showed animals that were exposed to four or more of the studied agents. However, only 25.47% of the sheep exhibited simultaneously antibodies against more than one pathogen. Thus, data from the present study on sheep slaughtered in Minas Gerais, Brazil, showed no antibodies to smooth-Brucella and a low frequency of antibodies anti-Maedi Visna lentivirus, and a high and widespread seroprevalence of B. ovis, Leptospira spp., and T. gondii among animals and flocks.(AU)

O presente estudo teve como objetivo estimar a prevalência de anticorpos contra Brucella ovis (epididimite ovina), Brucellalisa, leptospirose, toxoplasmose e Maedi-visna em ovinos abatidos em Minas Gerais, Brasil, e estudar sua ocorrência simultânea, incluindo linfadenite caseosa, nos ovinos e nos rebanhos. O estudo foi realizado em um abatedouro de ovinos com Serviço de Inspeção Federal. Soros de 594 animais de 21 rebanhos foram coletados, em 2007. A imunodifusão em gel de ágar (IDGA) foi empregada para detectar anticorpos anti-B. ovis e anticorpos anti-Maedi Visna, enquanto o teste do antígeno acidificado tamponado (AAT) e o teste de 2-mercaptoetanol (2ME) foram utilizados para testar anticorpos anti-Brucella lisa. Para a detecção de anticorpos anti-Leptospira, os soros foram examinados pelo teste de aglutinação microscópica (MAT), enquanto que para a detecção de anticorpos IgG para Toxoplasma gondii, foi usado o ELISA. A prevalência de anticorpos anti-Brucella lisa, B. ovis, Leptospira spp., toxoplasmose e Maedi-Visna encontrados em ovinos de Minas Gerais foi de 0,00%, 24,04%, 25,96%, 10,46% e 3,08%, respectivamente; enquanto a soroprevalência em rebanhos foi de 0,00%, 80,95%, 90,48%, 71,43% e 23,81%, respectivamente. Além disso, quando dados de anticorpos anti-Corynebacterium pseudotuberculosis, previamente obtidos, foram incluídos, cerca de 60% dos rebanhos apresentaram animais expostos a quatro ou mais dos agentes estudados. No entanto, apenas 25,47% dos ovinos exibiram simultaneamente anticorpos contra mais de um patógeno. Assim, os dados do presente estudo sobre ovinos abatidos em Minas Gerais, Brasil, mostram que ausência de anticorpos anti-Brucella lisa e baixa frequência de anticorpos anti-Maedi Visna, e uma soroprevalência alta e generalizada de B. ovis, Leptospira spp. e T. gondii entre animais e rebanhos.(AU)

Seroprevalence of Brucella ovis-epididymitis, smooth-Brucella, leptospirosis, toxoplasmosis, and Maedi-Visna in sheep slaughtered in Minas Gerais State, Brazil / Soroprevalência de Brucella ovis, Brucella lisa, leptospirose, toxoplasmose e Maedi-Visna em ovinos abatidos em Minas Gerais, Brasil

The present study aimed to estimate the prevalence of antibodies against Brucella ovis-epididymitis, smooth-Brucella, leptospirosis, toxoplasmosis and Maedi-visna in sheep slaughtered in Minas Gerais, Brazil and to study their simultaneous occurrence, including caseous lymphadenitis, at sheep and flock levels. The study was conducted at a sheep slaughterhouse with Federal Inspection Service. Sera from 594 animals from 21 flocks were collected, in 2007. The agar gel immunodiffusion (AGID) was employed to detect anti-B. ovis and anti-Maedi Visna antibodies, whereas Rose Bengal (RB) and the 2-mercaptoethanol test (2ME) were used to test anti-smooth Brucella antibodies. For the detection of anti-Leptospiraantibodies, sera were examined by microscopic agglutination test (MAT), while for the detection of IgG antibodies to Toxoplasma gondii ELISA was used. Prevalence of antibodies against smooth Brucella, B. ovis-epididimitis, Leptospiraspp., toxoplasmosis and Maedi-Visna found in sheep from Minas Gerais was 0.00%, 24.04%, 25.96%, 10.46% and 3.08%, respectively; whereas the seroprevalence in flocks was 0.00%, 80.95%, 90.48%, 71.43% and 23.81%, respectively. Moreover, when data on antibodies anti-Corynebacterium pseudotuberculosis, previously obtained, were included, about 60% of the flocks showed animals that were exposed to four or more of the studied agents. However, only 25.47% of the sheep exhibited simultaneously antibodies against more than one pathogen. Thus, data from the present study on sheep slaughtered in Minas Gerais, Brazil, showed no antibodies to smooth-Brucella and a low frequency of antibodies anti-Maedi Visna lentivirus, and a high and widespread seroprevalence of B. ovis, Leptospira spp., and T. gondii among animals and flocks.(AU)

O presente estudo teve como objetivo estimar a prevalência de anticorpos contra Brucella ovis (epididimite ovina), Brucellalisa, leptospirose, toxoplasmose e Maedi-visna em ovinos abatidos em Minas Gerais, Brasil, e estudar sua ocorrência simultânea, incluindo linfadenite caseosa, nos ovinos e nos rebanhos. O estudo foi realizado em um abatedouro de ovinos com Serviço de Inspeção Federal. Soros de 594 animais de 21 rebanhos foram coletados, em 2007. A imunodifusão em gel de ágar (IDGA) foi empregada para detectar anticorpos anti-B. ovis e anticorpos anti-Maedi Visna, enquanto o teste do antígeno acidificado tamponado (AAT) e o teste de 2-mercaptoetanol (2ME) foram utilizados para testar anticorpos anti-Brucella lisa. Para a detecção de anticorpos anti-Leptospira, os soros foram examinados pelo teste de aglutinação microscópica (MAT), enquanto que para a detecção de anticorpos IgG para Toxoplasma gondii, foi usado o ELISA. A prevalência de anticorpos anti-Brucella lisa, B. ovis, Leptospira spp., toxoplasmose e Maedi-Visna encontrados em ovinos de Minas Gerais foi de 0,00%, 24,04%, 25,96%, 10,46% e 3,08%, respectivamente; enquanto a soroprevalência em rebanhos foi de 0,00%, 80,95%, 90,48%, 71,43% e 23,81%, respectivamente. Além disso, quando dados de anticorpos anti-Corynebacterium pseudotuberculosis, previamente obtidos, foram incluídos, cerca de 60% dos rebanhos apresentaram animais expostos a quatro ou mais dos agentes estudados. No entanto, apenas 25,47% dos ovinos exibiram simultaneamente anticorpos contra mais de um patógeno. Assim, os dados do presente estudo sobre ovinos abatidos em Minas Gerais, Brasil, mostram que ausência de anticorpos anti-Brucella lisa e baixa frequência de anticorpos anti-Maedi Visna, e uma soroprevalência alta e generalizada de B. ovis, Leptospira spp. e T. gondii entre animais e rebanhos.(AU)

Characterization of caseous lymphadenitis in caprine animals slaughtered in a semi-arid region of Brazil / Caracterização da linfadenite caseosa em caprinos abatidos no semiárido brasileiro

In the Northeast of Brazil, goat breeding plays an important socioeconomic and strategic role in coexistence within the semi-arid region. The rural nature of the species and adaptations that are appropriate for the climate are some of the characteristics that favor the Northeast as the largest national producer of goats (93% of the national herd). In spite of this, sanitary deficiencies facilitate the appearance and diffusion of pathogenic agents that compromise the productivity, e.g., Corynebacterium pseudotuberculosis, which are widespread in the national herd and cause damages in the industry. The objective of this study was to characterize caseous lymphadenitis (CL) in lamb cuttings at semi-arid abattoirs. The research was carried out between March and August 2017 at the Municipal Abattoir of Patos, State of Paraíba, Brazil, where the caprines from this region are slaughtered. We studied 304 animals with no defined racial pattern, of both the sexes, characterized according to their age group as evidenced by their teeth, submitted to ante- and post-mortem examinations with microbiological confirmation. Cheek material was processed for diagnostic confirmation, using the techniques of isolation and microbiological identification (gold standard). The bacteriological examination confirmed the presence of the agent in 21.38% of the animals, in which 13.16% were females and 8.22% were males. Of those affected, 11.51% had the clinical form of the disease, while 9.87% had the subclinical form and 1.31% had both the clinical form as well as the internal impairment. The precrural (25.71%), mammary (11.43%), and prescapular (11.43%) lymph nodes were the most affected. Internally, the most affected were the liver (63.33%), lung (13.33%), and medium mediastinal lymph nodes (10%).[...](AU)

No Nordeste do Brasil a caprinocultura desempenha importante função socioeconômica e estratégica na convivência em região semiárida. A boa adaptação ao clima somado a rusticidade da espécie são algumas das caraterísticas que favorecem o Nordeste como maior produtor nacional (93% do efetivo). Apesar dessa condição, deficiências sanitárias proporcionam surgimento e difusão de agentes patogênicos que comprometem a produtividade, destacando-se o Corynebacterium pseudotuberculosis, difundido no rebanho nacional e que gera prejuízos à atividade. O objetivo deste estudo foi caracterizar a Linfadenite Caseosa (LC) na caprinocultura de corte em abatedouro do semiárido. Desenvolveu-se a pesquisa entre março e agosto 2017 no Abatedouro Municipal de Patos, Estado da Paraíba, Brasil, onde ocorre abate de caprídeos provenientes desta região geográfica intermediária. Foram estudados 304 animais sem padrão racial definido, ambos os sexos, caracterizados conforme faixa etária evidenciada pelos dentes, submetidos a exames ante e post mortem com confirmação microbiológica. Processou-se material caseoso dos doentes; para confirmação de diagnóstico se empregou a técnica de isolamento e identificação microbiológica (padrão ouro). O exame bacteriológico confirmou presença do agente em 21.38% dos animais. As fêmeas representaram 13.16% dos doentes, enquanto os machos, 8.22%. Dos acometidos, 11.51% apresentaram a forma clínica, enquanto 9.87% a subclínica; 1.31% tiveram simultaneamente forma clínica e comprometimento interno. Os linfonodos pré-crurais 25.71%, mamários 11.43% e pré-escapulares 11.43% foram mais afetados; internamente, fígado 63.33%, pulmão 13.33% e linfonodo do mediastino médio 10%.[...](AU)

Characterization of caseous lymphadenitis in caprine animals slaughtered in a semi-arid region of Brazil / Caracterização da linfadenite caseosa em caprinos abatidos no semiárido brasileiro

In the Northeast of Brazil, goat breeding plays an important socioeconomic and strategic role in coexistence within the semi-arid region. The rural nature of the species and adaptations that are appropriate for the climate are some of the characteristics that favor the Northeast as the largest national producer of goats (93% of the national herd). In spite of this, sanitary deficiencies facilitate the appearance and diffusion of pathogenic agents that compromise the productivity, e.g., Corynebacterium pseudotuberculosis, which are widespread in the national herd and cause damages in the industry. The objective of this study was to characterize caseous lymphadenitis (CL) in lamb cuttings at semi-arid abattoirs. The research was carried out between March and August 2017 at the Municipal Abattoir of Patos, State of Paraíba, Brazil, where the caprines from this region are slaughtered. We studied 304 animals with no defined racial pattern, of both the sexes, characterized according to their age group as evidenced by their teeth, submitted to ante- and post-mortem examinations with microbiological confirmation. Cheek material was processed for diagnostic confirmation, using the techniques of isolation and microbiological identification (gold standard). The bacteriological examination confirmed the presence of the agent in 21.38% of the animals, in which 13.16% were females and 8.22% were males. Of those affected, 11.51% had the clinical form of the disease, while 9.87% had the subclinical form and 1.31% had both the clinical form as well as the internal impairment. The precrural (25.71%), mammary (11.43%), and prescapular (11.43%) lymph nodes were the most affected. Internally, the most affected were the liver (63.33%), lung (13.33%), and medium mediastinal lymph nodes (10%).[...]

No Nordeste do Brasil a caprinocultura desempenha importante função socioeconômica e estratégica na convivência em região semiárida. A boa adaptação ao clima somado a rusticidade da espécie são algumas das caraterísticas que favorecem o Nordeste como maior produtor nacional (93% do efetivo). Apesar dessa condição, deficiências sanitárias proporcionam surgimento e difusão de agentes patogênicos que comprometem a produtividade, destacando-se o Corynebacterium pseudotuberculosis, difundido no rebanho nacional e que gera prejuízos à atividade. O objetivo deste estudo foi caracterizar a Linfadenite Caseosa (LC) na caprinocultura de corte em abatedouro do semiárido. Desenvolveu-se a pesquisa entre março e agosto 2017 no Abatedouro Municipal de Patos, Estado da Paraíba, Brasil, onde ocorre abate de caprídeos provenientes desta região geográfica intermediária. Foram estudados 304 animais sem padrão racial definido, ambos os sexos, caracterizados conforme faixa etária evidenciada pelos dentes, submetidos a exames ante e post mortem com confirmação microbiológica. Processou-se material caseoso dos doentes; para confirmação de diagnóstico se empregou a técnica de isolamento e identificação microbiológica (padrão ouro). O exame bacteriológico confirmou presença do agente em 21.38% dos animais. As fêmeas representaram 13.16% dos doentes, enquanto os machos, 8.22%. Dos acometidos, 11.51% apresentaram a forma clínica, enquanto 9.87% a subclínica; 1.31% tiveram simultaneamente forma clínica e comprometimento interno. Os linfonodos pré-crurais 25.71%, mamários 11.43% e pré-escapulares 11.43% foram mais afetados; internamente, fígado 63.33%, pulmão 13.33% e linfonodo do mediastino médio 10%.[...]

Resistance of Corynebacterium pseudotuberculosis in the Brazilian semiarid environment / Resistência de Corynebacterium pesudotuberculosis no ambiente do semiárido brasileiro

The semiarid northeast of Brazil contains a unique biome known as caatinga, with a maximum temperature of 40 ºC and a relativity humidity of 56%. The caatinga is characterized by a variety of plants, including Cereus jamacaru Dc (mandacaru), Poincianella microphylla Mart. ex G. Don (catingueira), Pilosocereus gounellei FAC Weber (xique-xique) and Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir (jurema preta). Sheep and goat industries are economically strong in that region, despite the fact that caseous lymphadenitis is highly prevalent. The aim of the present study was to assess the survival and biofilm production of Corynebacterium pseudotuberculosis isolates in the environment and under controlled temperatures (28°C, 37°C and 42°C) under different surfaces (plants, soil, wood, wire and thorns). In addition, we investigated the effects of applying the disinfectants chlorhexidine, hypochlorite and quaternary ammonia in soil, tiles, wood and vegetation cover. Four strains of C. pseudotuberculosis were selected (two from goats and two from sheep) for inoculation according to their in vitro biofilm production. Adherence to microplates was used to assess the biofilm-forming ability of the bacteria. Lower survival rates were observed when isolates of C. pseudotuberculosis were subjected to a temperature of 42°C. In terms of caatinga biome plants, contamination of jurema-preta plants resulted in the lowest survival rates. The disinfectant quaternary ammonia promoted a lower inoculum survival in all surfaces. The disinfectants and the higher temperature contributed to the reduction of biofilm production in isolates of C. pseudotuberculosis. knowledge of these patterns is important for the establishment of disease control measures, given the questionable efficacy of the treatment and the immuno-prophylaxis of caseous lymphadenitis.(AU)

O semiárido nordestino do Brasil possui um bioma exclusivo, a caatinga, que apresenta temperatura máxima de 40oC e uma umidade relativa do ar de 56%. A caatinga é caracterizada por uma diversidade de plantas, entre elas Cereus jamacaru DC. (mandacaru), Poincianella microphylla Mart ex G. Don (catingueira), Pilosocereus gounellei F.A.C. Weber (xique-xique) e Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir (jurema preta). A produção de ovinos e caprinos está em franca expansão, porém a linfadenite caseosa é uma enfermidade de alta prevalência na região. Objetiva-se com o presente estudo, verificar a sobrevivência e produção de biofilme em isolados de Corynebacterium pseudotuberculosis em temperaturas de 28oC, 37oC e 42oC, quando inoculado em superfícies de solo, madeira, arame e espinho e em plantas nas condições ambientais da caatinga. Além disto, foi verificado o efeito da aplicação dos desinfetantes clorexidine, hipoclorito e amônia quaternária sobre o solo, piso (lajota), madeira e vegetação de cobertura do solo. Foram selecionadas quatro amostras de C. pseudotuberculosis (dois caprinos e dois ovinos) para inoculação de acordo com a sua produção in vitro de biofilme. A adesão a microplacas foi utilizado para avaliar a capacidade de formação de biofilme das bactérias. As menores taxas de sobrevivência foram observadas quando isolados de C. pseudotuberculosis foram submetidos a uma temperatura de 42°C. Com relação as plantas do bioma caatinga, a contaminação na planta jurema-preta apresentou menores índices de sobrevivência. O desinfetante amônia quartenária promoveu uma menor sobrevivência do inóculo em todas as superfícies. Os desinfetantes e temperatura contribuíram para a redução na produção de biofilme nos isolados de Corynebacterium pseudotuberculosis. O conhecimento destes padrões é importante para o estabelecimento de medidas de controle da enfermidade, dada a eficiência questionável do tratamento e imunoprofilaxia da linfadenite caseosa.(AU)

Seroprevalence of caseous lymphadenitis in goats sold in an animal fair in the northeastern semi-arid region of Brazil / Soroprevalência da linfadenite caseosa em caprinos comercializados em feira de animais no Semiárido nordestino

Goat farming in the northeastern regions of Brazil plays an important role in the socio-economic functions of the country. However, high rates of morbidity and mortality occur in the animals, caused primarily by infectious diseases like caseous lymphadenitis, which is widespread in goat herds; this causes serious economic losses to the farming business. Although events such as animal fairs are common in the region, wherein most of the goats and sheep are sold, the risk of disease transmission remains, since the health condition of the animal is unknown. The aim of this study was to determine the frequency of anti-Corynebacterium pseudotuberculosis antibodies present in the goats sold at the animal fair of Tabira - PE, Northeastern semi-arid. Serum samples from 233 goats were collected from the period of November 2014 to June 2015. The diagnosis of infection by C. pseudotuberculosis was made using the indirect ELISA technique. The number of goats seropositive for C. pseudotuberculosis was identified as 87 (37.34%; 95% CI = 31.38 - 43.71%). Of the nine flocks evaluated, five (55.55%) were positive. Thus, it is suggested that infection by C. pseudotuberculosis is widespread in the goats sold at the animal fairs in the semi-arid Northeastern, reinforcing the need for disease diagnosis in goat herds in the region for the possible implementation of disease control programs.(AU)

A caprinocultura se destaca na região Nordeste do Brasil por desempenhar importante função socioeconômica. Contudo altas taxas de morbidade e mortalidade ocorrem nas propriedades causadas principalmente por doenças infecciosas, destacando-se a linfadenite caseosa, que se encontra amplamente difundida nos rebanhos caprinos, acarretando sérios prejuízos econômicos à atividade. Eventos do tipo feira de animais são comuns na região, onde é comercializada grande parte da produção de caprinos e ovinos, porém existe um risco de transmissão de doenças nesses locais quando a condição sanitáriados animais é desconhecida. O objetivo desse estudo foi determinar a frequência de anticorpos anti-Corynebacterium pseudotuberculosis em caprinos comercializados na feira de animais do município de Tabira-PE, Semiárido nordestino. Foram coletadas amostras de soro de 233 caprinos no período de novembro de 2014 a junho de 2015. O diagnóstico da infecção por C. pseudotuberculosis foi realizado pela técnica de ELISA-indireto. Foram identificados 87 (37,34%; IC 95% = 31,38 - 43,71%) caprinos soropositivos para C. pseudotuberculosis. Dos nove rebanhos avaliados, cinco (55,55%) resultaram positivos. Sugere-se que a infecção por C. pseudotuberculosis encontra-se disseminada nos caprinos comercializados em feiras de animais do Semiárido nordestino, reforçando a necessidade do diagnóstico da enfermidade em rebanhos caprinos da região para possível implementação de programas de controle da doença.(AU)

Resistance of Corynebacterium pseudotuberculosis in the Brazilian semiarid environment / Resistência de Corynebacterium pesudotuberculosis no ambiente do semiárido brasileiro

The semiarid northeast of Brazil contains a unique biome known as caatinga, with a maximum temperature of 40 ºC and a relativity humidity of 56%. The caatinga is characterized by a variety of plants, including Cereus jamacaru Dc (mandacaru), Poincianella microphylla Mart. ex G. Don (catingueira), Pilosocereus gounellei FAC Weber (xique-xique) and Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir (jurema preta). Sheep and goat industries are economically strong in that region, despite the fact that caseous lymphadenitis is highly prevalent. The aim of the present study was to assess the survival and biofilm production of Corynebacterium pseudotuberculosis isolates in the environment and under controlled temperatures (28°C, 37°C and 42°C) under different surfaces (plants, soil, wood, wire and thorns). In addition, we investigated the effects of applying the disinfectants chlorhexidine, hypochlorite and quaternary ammonia in soil, tiles, wood and vegetation cover. Four strains of C. pseudotuberculosis were selected (two from goats and two from sheep) for inoculation according to their in vitro biofilm production. Adherence to microplates was used to assess the biofilm-forming ability of the bacteria. Lower survival rates were observed when isolates of C. pseudotuberculosis were subjected to a temperature of 42°C. In terms of caatinga biome plants, contamination of jurema-preta plants resulted in the lowest survival rates. The disinfectant quaternary ammonia promoted a lower inoculum survival in all surfaces. The disinfectants and the higher temperature contributed to the reduction of biofilm production in isolates of C. pseudotuberculosis. knowledge of these patterns is important for the establishment of disease control measures, given the questionable efficacy of the treatment and the immuno-prophylaxis of caseous lymphadenitis.(AU)

O semiárido nordestino do Brasil possui um bioma exclusivo, a caatinga, que apresenta temperatura máxima de 40oC e uma umidade relativa do ar de 56%. A caatinga é caracterizada por uma diversidade de plantas, entre elas Cereus jamacaru DC. (mandacaru), Poincianella microphylla Mart ex G. Don (catingueira), Pilosocereus gounellei F.A.C. Weber (xique-xique) e Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir (jurema preta). A produção de ovinos e caprinos está em franca expansão, porém a linfadenite caseosa é uma enfermidade de alta prevalência na região. Objetiva-se com o presente estudo, verificar a sobrevivência e produção de biofilme em isolados de Corynebacterium pseudotuberculosis em temperaturas de 28oC, 37oC e 42oC, quando inoculado em superfícies de solo, madeira, arame e espinho e em plantas nas condições ambientais da caatinga. Além disto, foi verificado o efeito da aplicação dos desinfetantes clorexidine, hipoclorito e amônia quaternária sobre o solo, piso (lajota), madeira e vegetação de cobertura do solo. Foram selecionadas quatro amostras de C. pseudotuberculosis (dois caprinos e dois ovinos) para inoculação de acordo com a sua produção in vitro de biofilme. A adesão a microplacas foi utilizado para avaliar a capacidade de formação de biofilme das bactérias. As menores taxas de sobrevivência foram observadas quando isolados de C. pseudotuberculosis foram submetidos a uma temperatura de 42°C. Com relação as plantas do bioma caatinga, a contaminação na planta jurema-preta apresentou menores índices de sobrevivência. O desinfetante amônia quartenária promoveu uma menor sobrevivência do inóculo em todas as superfícies. Os desinfetantes e temperatura contribuíram para a redução na produção de biofilme nos isolados de Corynebacterium pseudotuberculosis. O conhecimento destes padrões é importante para o estabelecimento de medidas de controle da enfermidade, dada a eficiência questionável do tratamento e imunoprofilaxia da linfadenite caseosa.(AU)

Resistance of Corynebacterium pseudotuberculosis in the Brazilian semiarid environment

ABSTRACT: The semiarid northeast of Brazil contains a unique biome known as caatinga, with a maximum temperature of 40 ºC and a relativity humidity of 56%. The caatinga is characterized by a variety of plants, including Cereus jamacaru Dc (mandacaru), Poincianella microphylla Mart. ex G. Don (catingueira), Pilosocereus gounellei FAC Weber (xique-xique) and Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir (jurema preta). Sheep and goat industries are economically strong in that region, despite the fact that caseous lymphadenitis is highly prevalent. The aim of the present study was to assess the survival and biofilm production of Corynebacterium pseudotuberculosis isolates in the environment and under controlled temperatures (28°C, 37°C and 42°C) under different surfaces (plants, soil, wood, wire and thorns). In addition, we investigated the effects of applying the disinfectants chlorhexidine, hypochlorite and quaternary ammonia in soil, tiles, wood and vegetation cover. Four strains of C. pseudotuberculosis were selected (two from goats and two from sheep) for inoculation according to their in vitro biofilm production. Adherence to microplates was used to assess the biofilm-forming ability of the bacteria. Lower survival rates were observed when isolates of C. pseudotuberculosis were subjected to a temperature of 42°C. In terms of caatinga biome plants, contamination of jurema-preta plants resulted in the lowest survival rates. The disinfectant quaternary ammonia promoted a lower inoculum survival in all surfaces. The disinfectants and the higher temperature contributed to the reduction of biofilm production in isolates of C. pseudotuberculosis. knowledge of these patterns is important for the establishment of disease control measures, given the questionable efficacy of the treatment and the immuno-prophylaxis of caseous lymphadenitis.

RESUMO: O semiárido nordestino do Brasil possui um bioma exclusivo, a caatinga, que apresenta temperatura máxima de 40oC e uma umidade relativa do ar de 56%. A caatinga é caracterizada por uma diversidade de plantas, entre elas Cereus jamacaru DC. (mandacaru), Poincianella microphylla Mart ex G. Don (catingueira), Pilosocereus gounellei F.A.C. Weber (xique-xique) e Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir (jurema preta). A produção de ovinos e caprinos está em franca expansão, porém a linfadenite caseosa é uma enfermidade de alta prevalência na região. Objetiva-se com o presente estudo, verificar a sobrevivência e produção de biofilme em isolados de Corynebacterium pseudotuberculosis em temperaturas de 28oC, 37oC e 42oC, quando inoculado em superfícies de solo, madeira, arame e espinho e em plantas nas condições ambientais da caatinga. Além disto, foi verificado o efeito da aplicação dos desinfetantes clorexidine, hipoclorito e amônia quaternária sobre o solo, piso (lajota), madeira e vegetação de cobertura do solo. Foram selecionadas quatro amostras de C. pseudotuberculosis (dois caprinos e dois ovinos) para inoculação de acordo com a sua produção in vitro de biofilme. A adesão a microplacas foi utilizado para avaliar a capacidade de formação de biofilme das bactérias. As menores taxas de sobrevivência foram observadas quando isolados de C. pseudotuberculosis foram submetidos a uma temperatura de 42°C. Com relação as plantas do bioma caatinga, a contaminação na planta jurema-preta apresentou menores índices de sobrevivência. O desinfetante amônia quartenária promoveu uma menor sobrevivência do inóculo em todas as superfícies. Os desinfetantes e temperatura contribuíram para a redução na produção de biofilme nos isolados de Corynebacterium pseudotuberculosis. O conhecimento destes padrões é importante para o estabelecimento de medidas de controle da enfermidade, dada a eficiência questionável do tratamento e imunoprofilaxia da linfadenite caseosa.