Resumo

Gomphrena celosioides, popularly known as perpétua, perpétua brava, bachelor´s button and prostate globe amarahth, is used for the treatment of urinary tract disorders, kidney stones, for skin diseases, infectious diseases, gastrointestinal and respiratory conditions. Rich in phenolic acids and flavonoids, this plant has therefore a potential for use in cancer prevention. Given the above, the present research aimed to evaluate the carcinogenic effect of the ethanolic extract of G. celosioides (EEGc) in an alternative model of Drosophila melanogaster and the genotoxic and antigenotoxic effects in Swiss mice. The larval survival test and the detection of epithelial tumor clones were performed in D. melanogaster. The tested EEGc concentrations were 0.96, 1.92, 3.85 and 7.70 mg/mL. In Swiss mice, the genotoxicity and antigenotoxicity of doses of 100, 1,000 and 2,000 mg/Kg were evaluated. The results showed that EEGc at a concentration of 7.70 mg/mL reduced (p<0.05) larval survival. However, EEGc was not carcinogenic, and the lowest concentration (0.96 mg/mL) prevented (p<0.05) the basal occurrence of epithelial tumors. In mice, EEGc at the highest dose (2,000mg/Kg) increased the frequency of genomic lesions (p<0.05). Yet, none of the doses caused chromosomal lesions (p>0.05). When associated with cyclophosphamide, EEGc was antigenotoxic (p<0.05). The percentages of reduction of genomic damage ranged from 33.39 to 63.23% and of chromosomal damage from 20.00 to 77.19%. In view of the above, it is suggested that EEGc is not carcinogenic, has an antigenotoxic effect and chemopreventive properties.

Gomphrena celosioides, conhecida popularmente por perpétua, perpétua brava, bachelor´s button e prostate globe amarahth, é utilizada na medicina popular para o tratamento de distúrbios do trato urinário e pedra nos rins e para doenças de pele, infecciosas, gastrointestinais e respiratórias. Essa planta é rica em ácidos fenólicos e flavonóides e, portanto, tem potencial para uso na prevenção de câncer. Frente ao exposto, a presente pesquisa teve por objetivo avaliar o efeito carcinogênico do extrato etanólico de G. celosioides (EEGc) em modelo alternativo de Drosophila melanogaster e os efeitos genotóxicos e antigenotóxicos em camundongos Swiss. Em D. melanogaster foi realizado o teste de sobrevivência larval e para a detecção de clones de tumores epiteliais. As concentrações testadas do EEGc foram de 0,96, 1,92, 3,85 e 7,70 mg/mL. Em camundongos Swiss avaliou-se a genotoxicidade e antigenotoxicidade das doses de 100, 1.000 e 2.000 mg/Kg. Os resultados demonstraram que o EEGc na concentração de 7,70 mg/mL reduziu (p<0,05) a sobrevivência larval. No entanto, o EEGc não é carcinogênico e a menor concentração (0,96 mg/mL) preveniu (p<0,05) a ocorrência basal de tumores epiteliais. Nos camundongos o EEGc na maior dose (2.000mg/Kg) aumentou a frequência de lesões genômicas (p<0,05). Porém, nenhuma das doses causou lesões cromossômicas (p>0,05). Quando associado à ciclofosfamida o EEGc foi antigenotóxico (p<0,05). As porcentagens de redução de danos genômicos variaram de 33,39 a 63,23% e de danos cromossômicos de 20,00 a 77,19%. Frente ao exposto, sugere-se que o EEGc não é carcinogênico, tem efeito antigenotóxico e propriedade quimiopreventiva.

Resumo

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito do extrato de Annona muricata no útero de camundongos fêmeas por meio de análises macro e microscópicas. Vinte camundongos fêmeas foram aleatoriamente distribuídas em quatro grupos: controle (solução salina), ciclofosfamida e extrato de folhas de graviola em duas concentrações diferentes (50 e 100mg/kg). Após sete dias de experimento, as fêmeas foram eutanasiadas e seus úteros coletados e submetidos a análise macroscópica, seguida de processamento histológico para análises morfológicas e morfométricas das camadas do útero e das glândulas endometriais. As características macroscópicas do útero foram mantidas em todos os grupos avaliados. Microscopicamente, não foram identificadas alterações patológicas nas células uterinas. No entanto, houve um aumento significativo na camada do miométrio após o tratamento com ciclofosfamida (p<0,05). O diâmetro interno das glândulas endometriais foi significativamente menor em ambos os grupos tratados com extrato de A. muricata quando comparados ao grupo controle (p<0,05), enquanto o diâmetro total das glândulas foi significativamente menor somente na maior concentração de extrato de A. muricata quando comparado ao grupo controle (p<0,05). A administração do extrato de folhas de A. muricata não causou alterações morfológicas ao útero. Desta forma, o extrato não apresentou toxicidade uterina nas condições avaliadas.

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito do extrato de Annona muricata no útero de camundongos fêmeas por meio de análises macro e microscópicas. Vinte camundongos fêmeas foram aleatoriamente distribuídas em quatro grupos: controle (solução salina), ciclofosfamida e extrato de folhas de graviola em duas concentrações diferentes (50 e 100mg/kg). Após sete dias de experimento, as fêmeas foram eutanasiadas e seus úteros coletados e submetidos a análise macroscópica, seguida de processamento histológico para análises morfológicas e morfométricas das camadas do útero e das glândulas endometriais. As características macroscópicas do útero foram mantidas em todos os grupos avaliados. Microscopicamente, não foram identificadas alterações patológicas nas células uterinas. No entanto, houve um aumento significativo na camada do miométrio após o tratamento com ciclofosfamida (p<0,05). O diâmetro interno das glândulas endometriais foi significativamente menor em ambos os grupos tratados com extrato de A. muricata quando comparados ao grupo controle (p<0,05), enquanto o diâmetro total das glândulas foi significativamente menor somente na maior concentração de extrato de A. muricata quando comparado ao grupo controle (p<0,05). A administração do extrato de folhas de A. muricata não causou alterações morfológicas ao útero. Desta forma, o extrato não apresentou toxicidade uterina nas condições avaliadas.

Resumo

Background: Mediastinal lymphoma occurs at a high incidence in cats positive for feline leukemia virus (FeLV). It is a malignant lymphocytic neoplasm that may trigger clinical signs such as dyspnea, apathy, regurgitation, and weight loss. The objective of this work is to report a case of mediastinal lymphoma associated with FeLV in a cat, and describe the clinical, pathological, diagnostic, and therapeutic aspects that can help the diagnosis and treatment of this disease. Case: A 3-year-old male neutered cat weighing 4.6 kg, positive for FeLV, and with a history of dyspnea and hyporexia was referred to a private veterinary clinic in the city of Caxias do Sul, RS, Brazil. The only alteration found at the clinical examination was a muffled sound during lung auscultation. Radiographs of the thorax revealed the presence of pleural effusion; after drainage of the fluid, a mass located in the mediastinal area became radiographically observable. An analysis of the effusion fluid showed high cellularity characterized by a markedly pleomorphic population of individual round cells consistent with lymphocytes. Small lymphocytes with a high nucleus:cytoplasm ratio, round nucleus, condensed chromatin, and inconspicuous nucleoli were observed, along with medium and large lymphocytes. The medium and large lymphocytes were characterized by a variably increased nucleus:cytoplasm ratio and a scant to moderate cytoplasm exhibiting moderate to intense basophilia and, occasionally, vacuoles. The nuclei were round, idented, or irregular; most of them were located eccentrically and contained coarse to finely granular chromatin. Nucleoli varied from single to multiple, round to angular, and central to peripheral and prominent. Macronucleoli and marked anisonucleosis were also observed, as well as binucleated cells and rare multinucleated cells. The conclusion was that it was a case of neoplastic effusion caused by a lymphoma. After an appointment with an oncologist, a chemotherapy protocol was established. The treatment of choice was CHOP, a combination of cyclophosphamide (20 mg/kg orally), doxorubicin (1 mg/kg intravenously), vincristine (0.5 mg/m2 intravenously), and prednisolone with a regressive dose starting at 2 mg/kg. The patient underwent 4 rounds of chemotherapy, and received a maintenance treatment thereafter. The patient's condition remained stable for 390 days without relevant clinical or hematological alterations. Discussion: The diagnosis of mediastinal lymphoma was established by associating clinical finings, laboratory exams, and radiographic findings. Exams of utmost importance to reach this diagnosis were the thoracic radiography, which revealed the presence of a mass in the thorax, and the cytopathological analysis of the effusion fluid, as round cell neoplasms are easily dissociated. Young cats are the group most affected by FeLV, and mediastinal lymphoma is considered the most prevalent type of lymphoma in this species. The most common clinical sign is dyspnea; however, other signs such as apathy, weight loss, regurgitation (due to pressure on the esophagus), and Horner's syndrome (owing to pressure on the thoracic sympathetic innervation) may also occur. This disease is treated with chemotherapy, with CHOP frequently used as the chemotherapeutic protocol. The good therapeutic response for a longer time than the average estimated by studies on the prognostic of this disease indicates that a correct diagnosis along with an assertive approach and the cooperation of the tutor are essential in cases of mediastinal lymphoma.

Resumo

This study aimed to evaluate the serum concentration of vitamin D (25-Hydroxyvitamin D) and acute phase proteins (APPs; alpha-1 acid glycoprotein, haptoglobin, transferrin, ceruloplasmin, albumin, IgA, IgG and alpha-1 - antitrypsin) as potential biomarkers for prognostic and therapy response in dogs with multicentric lymphoma submitted to the CHOP (Cyclophosphamide, Doxorubicin, Vincristine and Prednisone) chemotherapy protocol. Thirteen dogs with multicentric lymphoma classified as high grade by cytology were included in the treatment group (GL), while ten healthy dogs were included in the control group (GC). Serum was collected in the weeks T0, T5 and T10 of CHOP chemotherapy protocol, for the GL group, and in a single collection, for the GC group. All the collected samples were evaluated for the APPs and vitamin D concentrations through electrophoresis and chemiluminescence methods, respectively. Diagnostic and staging tests were performed for all the dogs in the GL group, and included cytopathology, histopathology and immunohistochemistry of the affected lymph node. Of these dogs, 9 achieved a complete response and 4 a partial response to the treatment. Data analysis was performed with the R software. The results demonstrated that serum concentrations of IgA, haptoglobin and α1-acid glycoprotein were significantly different between the groups and also between the different chemotherapy times analyzed (p<0.05), indicating that these proteins can be considered as sensitive biomarkers for lymphoma in dogs. Furthermore, the α1-acid glycoprotein showed prognostic value for the disease, with 63% specificity. However, vitamin D concentration was not correlated with prognosis of the dogs with lymphoma.

Objetivou-se caracterizar a concentração sérica da vitamina D e das PFAs (Proteínas de Fase Aguda) (alfa-1 glicoproteína ácida, haptoglobina, transferrina, ceruloplasmina, albumina, IgA, IgG e alfa-1 ­ antitripsina) em cães com linfoma multicêntrico, submetidos ao tratamento quimioterápico com protocolo CHOP (Ciclofosfamida, Doxorrubicina, Vincristina e Prednisona), determinando o valor prognóstico desses marcadores para a doença. Foram avaliadas as concentrações séricas das PFAs, através do método da eletroforese e as concentrações da vitamina D, através da quimioluminescência em dois grupos experimentais, um grupo de 13 cães com linfoma multicêntrico classificados como alto grau pela citologia (GL) durante as semanas T0, T5 e T10 do tratamento com protocolo quimioterápico antineoplásico e em um grupo de 10 animais saudáveis para compor o grupo controle (GC), em coleta única. Para isso, foi realizado o diagnóstico, estadiamento e avaliação de resposta terapêutica dos 13 pacientes com linfoma multicêntrico através de técnicas de citopatologia, histopatologia, imuno-histoquímica do linfonodo periférico acometido. Foi observado que 9 pacientes tiveram resposta completa e 4 pacientes tiveram resposta parcial ao tratamento. Os dados foram analisados através do software R. Os resultados indicam que as diferenças entre as variáveis IgA, haptoglobina e α1-glicoproteína ácida foram significativas entre os grupos, e entre os diferentes momentos da quimioterapia (p< 0,05), indicando que podem ser marcadores sensíveis ao linfoma em cães. A α1-glicoproteína ácida apresentou valor prognóstico para o linfoma, com 63% de especificidade. Porém a vitamina D não apresentou valor prognóstico para o linfoma multicêntrico em cães.

Resumo

The occurrence of neoplasms in birds is still unknown, with the literature based mainly on scarce reports, in this context, data about epidemiology in specific species are almost nonexistent. Sarcomas are malignant mesenchymal origin neoplasms, which can develop from different tissues, such as adipose, cartilage, bone, among others. The occurrence of sarcomas in birds has been previously described, with different therapeutic approaches. The present report describes the clinical approach in a blue-fronted amazon (Amazona aestiva) diagnosed with a soft tissue sarcoma in the dorsal cervical region, with surgical excision associated with a metronomic chemotherapy protocol as an adjuvant. The therapeutic combination proved to be effective in controlling the disease, guaranteeing important survival, with clinical absence of side effects.

A ocorrência das neoplasias em aves ainda é desconhecida, com a literatura se baseando principalmente em relatos escassos, nesse contexto, dados acerca de epidemiologia em espécies específicas são quase inexistentes. Os sarcomas são neo-plasias malignas de origem mesenquimal, podendo se desenvolver a partir de tecidos diversos, como adiposo, cartilaginoso, ósseo, dentre outros. A ocorrência de sarcomas em aves já foi previamente descrita, com diferentes abordagens terapêuticas. O presente relato descreve a abordagem clínica em um papagaio-verdadeiro (Amazona aestiva) diagnosticado com um sarcoma de tecidos moles em região cervical dorsal, sendo realizada a exérese cirúrgica associada a protocolo quimioterápico metronô-mico em caráter adjuvante. A combinação terapêutica se mostrou eficaz no controle da doença, garantindo sobrevida impor-tante, na ausência clínica de efeitos colaterais.

Resumo

The present study tested a comet assay that was modified for compatibility with Giemsa staining to assess the drug genotoxicity in the peripheral blood of rats. We analysed the peripheral blood of 16 female Wistar rats (N=8 rats/group) from a control group and from a group that was treated with an intraperitoneal injection of 50mg cyclophosphamide/kg. The comet assay was carried out with modifications of the blood volume and immersion time in the lysing solution and different combinations of electrophoresis conditions (running time, voltage and current), to Giemsa staining. The lysing time and electrophoresis conditions allowed for the expression of all classes of DNA damage during the electrophoresis run, and the comets were efficiently stained with Giemsa. The technique showed high reproducibility for the DNA classes. The results demonstrate that the modified comet assay with Giemsa staining can be standardized for routine laboratory procedures using a 20µL blood sample, 3h and 30min immersions in the lysing solution and electrophoresis runs with 23 to 25 V and 310 and 360mA of electrical current. The modified comet assay with Giemsa staining that was described in the present study was standardized to be applied in the laboratory routine.(AU)

O presente estudo testou um ensaio cometa modificado para a coloração de Giemsa para avaliar a genotoxicidade de fármacos no sangue periférico de ratos. Analisou-se o sangue periférico de 16 ratas Wistar (n=8 ratas/grupo) de um grupo controle e de um grupo que foi tratado com uma injeção intraperitoneal de 50mg/kg pv. de ciclofosfamida. O ensaio cometa foi realizado com modificações do volume sanguíneo e do tempo de imersão na solução de lise, bem como com diferentes combinações de condições de eletroforese (tempo de corrida, tensão e corrente), para coloração de Giemsa. O tempo de lise e as condições de eletroforese permitiram a expressão de todas as classes de danos no DNA durante a corrida de eletroforese, e os cometas foram eficientemente corados com Giemsa. A técnica mostrou alta reprodutibilidade para as classes de DNA. Os resultados demonstram que o ensaio cometa modificado com coloração de Giemsa foi padronizado para procedimentos laboratoriais de rotina usando-se uma amostra de sangue de 20µL, 3h30min de imersão na solução de lise e eletroforese com 23 a 25 V e 310 e 360mA. O ensaio cometa modificado com coloração de Giemsa descrito foi padronizado para ser aplicado na rotina laboratorial.(AU)

Resumo

The objective of this study was to investigate the effects of the method and dose of cyclophosphamide (CPA) administration on cashmere shedding. Thirty-two castrated Liaoning cashmere goats were randomly allotted to four groups, with eight replicates in each group. Goats in the four groups were injected intravenously or intramuscularly with CPA at doses of 20 or 25 mg kg−1 body weight (BW), respectively. Feed intake and BW were recorded, and erythrocyte count, hemoglobin content, and cashmere weight were determined. It was found that the CPA administration method had no significant effect on feed intake or BW of cashmere goats. Cyclophosphamide injection can significantly decrease the erythrocyte count and hemoglobin content of cashmere goats, but the effects are dependent on injection method and CPA dose. The injection method and dose did not significantly influence cashmere weight, but the method had significant effects on time to initiate shedding and regrown hair length. Regrown hair was longest by intramuscular injection with 20 mg kg−1 BW, which also caused the least erythema on the epidermis during the days after shedding. The results indicate that the CPA administration method can significantly influence cashmere shedding. Intramuscular injection of CPA at a dose of 20 mg kg−1 BW was found to be relatively beneficial for hair removal and regrowth in cashmere goats.(AU)

Resumo

A leucemia linfoblástica aguda (LLA) é uma enfermidade de origem linfóide e consiste na proliferação de células neoplásicas na medula óssea. O objetivo desse trabalho é relatar o caso de um cão macho, sem raça definida, de apenas um ano de idade, atendido no Hospital Universitário de Medicina Veterinária Prof. Firmino Mársico Filho (HUVET) da Universidade Federal Fluminense (UFF) com queixa principal de inapetência e diarreia há três dias e que foi diagnosticado com essa neoplasia por meio da sintomatologia clínica, resultados do hemograma e do mielograma. O paciente apresentava valores exacerbados de linfócitos (553.094 células/µL), além de anemia, trombocitopenia, hipoalbuminemia e elevação da atividade das enzimas fosfatase alcalina e ALT. Foram observadas manchas de Gümprecht, linfócitos atípicos apresentando anisocitose, anisocariose, intensa basofilia citoplasmática e monócitos ativados. O mielograma apresentou também um aumento de linfócitos e contagem de linfoblastos superior a 30% na medula, confirmando o diagnóstico de leucemia linfoblástica aguda. Ademais, posteriormente, foi realizado exame de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) para rearranjos de receptores de antígenos e foi detectado clonalidade para linfócitos T. O animal foi submetido à quimioterapia (protocolo com ciclofosfamida, vincristina e prednisona), mas não resistiu à gravidade do quadro, vindo a óbito após a primeira sessão, pouco tempo após o diagnóstico.

Acute lymphoblastic leukemia (LLA) is a disease with a lymphoid origin and consists of the proliferation of neoplastic cells in the bone marrow. The aim of this study was to report the case of only one year old mixed breed male dog, attended at the University Hospital of Veterinary Medicine Prof. Firmino Mársico Filho (HUVET) from Universidade Federal Fluminense (UFF), with major complaint of inappetence and diarrhea three days ago and which was diagnosed with this neoplasm through clinical symptoms, complete blood count and myelogram results. The patient had increased values of lymphocytes (553,094 cells/μL), in addition to anemia, thrombocytopenia, hypoalbuminemia and elevated alkaline phosphatase and ALT activities. Gümprecht shadows, atypical lymphocytes presenting anisocytosis, anisocariosis, and severe cytoplasmic basophilia and activated monocytes were observed. Myelogram also showed an increase in lymphocytes and a lymphoblastic count greater than 30% in the marrow, confirming the diagnosis of LLA. In addition, polymerase chain reaction (PCR) for antigen receptor rearrangements was performed and clonality for T lymphocytes was detected. The animal underwent chemotherapy (protocol with cyclophosphamide, vincristine and prednisone), but did not withstand the severity of the disease, coming to death after the first session, shortly after diagnosis.

Resumo

A leucemia linfoblástica aguda (LLA) é uma enfermidade de origem linfóide e consiste na proliferação de células neoplásicas na medula óssea. O objetivo desse trabalho é relatar o caso de um cão macho, sem raça definida, de apenas um ano de idade, atendido no Hospital Universitário de Medicina Veterinária Prof. Firmino Mársico Filho (HUVET) da Universidade Federal Fluminense (UFF) com queixa principal de inapetência e diarreia há três dias e que foi diagnosticado com essa neoplasia por meio da sintomatologia clínica, resultados do hemograma e do mielograma. O paciente apresentava valores exacerbados de linfócitos (553.094 células/µL), além de anemia, trombocitopenia, hipoalbuminemia e elevação da atividade das enzimas fosfatase alcalina e ALT. Foram observadas manchas de Gümprecht, linfócitos atípicos apresentando anisocitose, anisocariose, intensa basofilia citoplasmática e monócitos ativados. O mielograma apresentou também um aumento de linfócitos e contagem de linfoblastos superior a 30% na medula, confirmando o diagnóstico de leucemia linfoblástica aguda. Ademais, posteriormente, foi realizado exame de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) para rearranjos de receptores de antígenos e foi detectado clonalidade para linfócitos T. O animal foi submetido à quimioterapia (protocolo com ciclofosfamida, vincristina e prednisona) mas não resistiu à gravidade do quadro, vindo a óbito após a primeira sessão, pouco tempo após o diagnóstico.

Acute lymphoblastic leukemia (LLA) is a disease with a lymphoid origin and consists of the proliferation of neoplastic cells in the bone marrow. The aim of this study was to report the case of only one year old mixed breed male dog, attended at the University Hospital of Veterinary Medicine Prof. Firmino Mársico Filho (HUVET) from Universidade Federal Fluminense (UFF), with major complaint of inappetence and diarrhea three days ago and which was diagnosed with this neoplasm through clinical symptoms, complete blood count and myelogram results. The patient had increased values of lymphocytes (553,094 cells/µL), in addition to anemia, thrombocytopenia, hypoalbuminemia and elevated alkaline phosphatase and ALT activities. Gümprecht shadows, atypical lymphocytes presenting anisocytosis, anisocariosis, and severe cytoplasmic basophilia and activated monocytes were observed. Myelogram also showed an increase in lymphocytes and a lymphoblastic count greater than 30% in the marrow, confirming the diagnosis of LLA. In addition, polymerase chain reaction (PCR) for antigen receptor rearrangements was performed and clonality for T lymphocytes was detected. The animal underwent chemotherapy (protocol with cyclophosphamide, vincristine and prednisone), but did not withstand the severity of the disease, coming to death after the first session, shorly after diagnosis.

Resumo

The canine mammary tumor is the neoplasia that most commonly affects intact female dogs (not spayed) in routine veterinary practice. Canine mammary tumor therapy is a challenge because only few effective treatments have been described for high-grade tumors in veterinary medicine. One such therapeutic option that slows down tumor growth is metronomic chemotherapy (MC), a therapeutic modality that acts by decreasing tumor angiogenesis. Quantification of intratumoral microvessel density (MVD) has been proposed as a means to evaluate the effectiveness of MC in human and canine tumors. In this study, MVD is proposed as a predictive factor for the effectiveness of MC in canine mammary tumors. Twenty female dogs with mammary carcinoma were equally distributed into a mastectomy group treated only with mastectomy, and a MC group treated with MC (cyclophosphamide and piroxicam) orally and daily for 28 days followed by mastectomy. Mammary tumors were classified and graded histologically. MVD was ascertained by CD31 immunostaining. The analysis showed statistically significant difference in MVD scores between groups, corroborating a quantitative reduction in tumor microvasculature in the group treated with MC. Our findings suggest that MVD may be an important predictive factor for the selection of female dogs with malignant mammary tumors that may benefit from MC.

O tumor mamário canino é a neoplasia que mais comumente acomete cadelas não castradas na rotina veterinária. A terapia para a neoplasia mamária canina é um desafio, com poucos tratamentos eficazes descritos em medicina veterinária, especialmente para as neoplasias de alto grau. Uma opção terapêutica que diminui o crescimento tumoral é a quimioterapia metronômica (QM). A QM é uma modalidade terapêutica que age pelo decréscimo da angiogênese tumoral. Para avaliação da eficácia da QM tem sido proposta a quantificação da densidade microvascular (DMV) em neoplasias caninas. Neste estudo foi proposta a mensuração da DMV como fator preditivo à utilização da QM em neoplasias mamárias caninas. Foram utilizadas 20 (vinte) cadelas com carcinomas mamários malignos sendo um grupo mastectomia, tratado somente por mastectomia, e um grupo QM, em que foi empregada a QM (ciclofosfamida e piroxicam) ambos oralmente e de uso diário por 28 dias seguida de mastectomia. As neoplasias mamárias foram histologicamente classificadas e graduadas. A DMV foi obtida por imunomarcação utilizando o anticorpo CD31. A análise estatística mostrou diferença na DMV entre os grupos, evidenciando redução quantitativa na microvasculatura tumoral no grupo tratado com quimioterapia metronômica. Com base neste resultado é possível afirmar que a DMV pode vir a ser um fator preditivo de importância para a seleção de cadelas portadoras de neoplasia mamária maligna que possam vir a se beneficiar da quimioterapia metronômica.

Resumo

Capirona decorticans (Rubiaceae) is popularly used to treat warts, wounds, mycoses and scabies, and is also a component of the Ayahuasca tea. Despite its popular use, the phytochemical and pharmacological research on this species is limited. Therefore, this work quantified phenolic compounds in the ethanolic extract (EE) and hydromethanolic fraction (FM) (406, 293 mgEAG g-1, respectively) from leaves of C. decorticans. We identified flavonoids by LC-MS/MS-MMR-ESI (apigenin, rutin, luteolin, miricetin, quercetin, quercetin-3--D-glucoside, quercetrin), and evaluated oxidative stress and mutagenic/antimutagenic effect of EE and FM through an in vivo experiment using Swiss mice and cyclophosphamide (CP) as an inducer of DNA damage and oxidative stress. Mice were pretreated for 15 consecutive days with EE or FM (250 mg kg-1) and then intraperitoneally injected with CP (25 mg kg-1). Carbonylated proteins, ascorbic acid, catalase and thiobarbituric acid-reactive substances were measured in hepatic and renal tissues. The mutagenic/antimutagenic effect was evaluated through the Micronucleus Test. Protein carbonylation in the liver of animals exposed to CP was reduced by FM. There was no significant effect on other markers of oxidative stress. The groups treated with the extracts showed a significant percentage reduction (EE = 96% and FM = 71%) in the frequency of micronucleated polychromatic erythrocytes induced by CP. EE showed mutagenicity when used alone. The EE and FM of C. decorticans leaves showed antioxidant potential equivalent to that observed in other species, did not cause oxidative stress, nor toxicity, and had a protective and antimutagenic effect, although the EE showed signs of mutagenicity.

Capirona decorticans (Rubiaceae) é popularmente usada para tratar verrugas, feridas, micoses e sarna, e como um componente do chá de Ayahuasca. Apesar do uso popular, são limitadas as pesquisas fitoquímicas e farmacológicas sobre a espécie. Portanto, este estudo quantificou compostos fenólicos no extrato etanólico (EE) e na fração hidrometanólica (FM) (406 e 293 mgEAG g-1, respectivamente) de folhas de C. decorticans. Identificamos flavonoides por LC-MS / MS-MMR-ESI (apigenina, rutina, luteolina, miricetina, quercetina, quercetina-3--D-glicosídeo, quercetrina), e avaliamos o estresse oxidativo e o efeito mutagênico/antimutagênico de EE e FM em um experimento in vivo utilizando camundongos Swiss e ciclofosfamida (CP) como um indutor de danos no DNA e estresse oxidativo. Os camundongos foram pré-tratados por 15 dias consecutivos com EE ou FM (250 mg kg-1) e injetados intraperitonealmente com CP (25 mg kg-1). Proteínas carboniladas, ácido ascórbico, catalase e substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico foram dosadas em tecidos hepáticos e renais. O efeito mutagênico/antimutagênico foi avaliado através do Teste de Micronúcleo. Houve carbonilação protéica no fígado de animais expostos à CP, que foi reduzida pela FM. Não houve efeito significativo sobre outros marcadores de estresse oxidativo. Os grupos tratados com os extratos apresentaram uma redução percentual significativa (EE = 96% e FM = 71%) na frequência de eritrócitos policromáticos micronucleados induzidos pela PC. O EE também apresentou mutagenicidade quando utilizado isoladamente. O EE e FM das folhas de C. decorticans apresentaram potencial antioxidante equivalente ao observado em outras espécies, não causaram estresse oxidativo, nem toxicidade, e tiveram efeito protetor e antimutagênico, embora a EE tenha apresentado mutagenicidade.

Resumo

Abstract Purpose: To evaluate the impact of systemic cyclophosphamide treatment on the rat uterus and investigate the potential therapeutic effects of natural antioxidant preparations curcumin and capsaicin against cyclophosphamide side effects. Methods: A 40 healthy adult female Wistar albino rats were used in this study. Rats were randomly divided into four groups to determine the effects of curcumin and capsaicin against Cyclophosphamide side effects on the uterus (n=10 in each group); Group 1 was the control group (sham-operated), Group 2 was the cyclophosphamide group, Group 3 was the cyclophosphamide + curcumin (100mg/kg) group, and Group 4 was the cyclophosphamide + capsaicin (0.5 mg/kg) group. Results: Increased tissue oxidative stress and histological damage in the rat uterus were demonstrated due to the treatment of systemic cyclophosphamide chemotherapy alone. The level of tissue oxidant and antioxidant markers and histopathological changes were improved by the treatment of curcumin and capsaicin. Conclusion: Cytotoxic effects of natural alkylating chemotherapeutic agents like cyclophosphamide on the uterus can be prevented by curcumin and capsaicin.

Resumo

Background: Thymomas are epithelial neoplasms of the thymus, although lymphocyte infiltration is common. Histological features are not sufficient to define its biological behaviour, which is dependent of clinical criteria of invasiveness and resectability. Myasthenia gravis may happen as a paraneoplastic syndrome in up to 47% of canine thymomas. This article aims at reporting a case of thymoma associated with myasthenia gravis in a dog, emphasizing the morphological, phenotypical and therapeutical aspects.Case: A 7-year-old, male Labrador, was presented with a history of acute dyspnea and exercise intolerance. The physical examination revealed a “red-brick” mucousa, tachycardia and cardiac and pulmonar hypofonese. Chest radiographs revealed an area of increased radiopacity in the cranial mediastinum without a plane of separation to the heart. The eccodopplercardiogram exam identified a poorly delimited mass adjacent to the base of the heart, measuring 9.5x6.8cm. Computed tomography demonstrated it as an expansive neoformation (9.5x6.5x7.8cm). Mass was removed through intercostal thoracotomy and the removed tissue was submitted to histopathology with a diagnosis compatible with type AB thymoma (mixed). Immunohistochemistry was positive for AE1/AE3 citokeratin in 90% of epithelial cells, confirming tumour origin. Tumour infiltrating lymphocytes were positive for CD79a (70%) and CD3 (20%). The proliferation index (Ki-67 imunolabeling) was 60%. About 45 days after surgery the patient was presented with generalized muscle weakness and regurgitation, with confirmed megaesophagus on chest X-ray. Treatment with pyridostigmine was initiated because of suspected myasthenia gravis, and complete remission of the neurological signs occurred within a month. A chemotherapeutic protocol with carboplatin was then instituted. After four sessions, a new thoracic radiograph revealed tumour recurrence in the cranial mediastinum.[...]

Resumo

Background: Leptospirosis is probably the most widespread and prevalent zoonosis in the world, being classified as an emerging infectious disease for humans and dogs. Sporadically, dogs may present with cough and dyspnea, indicative of pulmonary involvement, associated with interstitial pneumonia and pulmonary hemorrhage with alveolar consolidation. Such changes stem from pulmonary haemorrhagic syndrome, which has emerged as a fatal complication, being documented in some areas in Europe and little described in North America. In this sense, the present study aims to report pulmonary hemorrhagic syndrome in a dog with leptospirosis.Case: A dog with no defined breed, aged 45 days, weighing 2.2 kg, with a history of apathy, anorexia, jaundice, hematochezia and vocalisation with a two day evolution was seen. Physical examination revealed a rectal temperature of 37.2°C, icteric mucosa, capillary filling time of two seconds, respiratory rate of 80 movements per minute and heart rate of 140 beats per minute, dehydration rate estimated at 8%, prostration, adequate body score, normal cardiac sounds and clean lung fields, in addition to petechiae in the abdominal region, whose palpation evidenced the presence of fluid in intestinal loops. The blood sample sent to the macroscopic serum agglutination was reagent for the serovar Icterohaemorragiae, titration of 200. Blood count revealed leukocytosis due to neutrophilia, with left-sided deviation, eosinopenia, presence of rare hypersegmentated neutrophils, rare toxic neutrophils, mild cytoplasmic basophilia and rare reactive lymphocytes. Platelet estimation demonstrated thrombocytopenia. No haemoparasites were seen. Regarding the biochemical evaluation, there were changes in liver enzymes and markers of renal failure. Fluid therapy was used with 0.9% NaCl solution, 5 mg/ kg doxycycline intravenously every 12 h and nasogastric probe for administration of nutritional support...

Resumo

A quimioterapia é um dos tratamentos mais indicados para cães com neoplasias malignas. Neste estudo objetivou-se avaliar os efeitos causados pelo uso da quimioterapia em cães com tumor de mama, tratados com ciclofosfamida e carboplatina, mastocitoma tratados com vimblastina associada à prednisona e tumor venéro tansmissível (TVT) tratados com sulfato de vincristina por meio da avaliação do perfil hematológico, bioquímico sérico e urinário. Foram selecionados 20 cães, quatro com tumor de mama, nove com mastocitoma e sete com TVT. A colheita de material sanguíneo e urina foi realizados antes das sessões de quimioterapia. No grupo tumor de mama, as cadelas não apresentaram alterações hematológicas importantes, as alterações observadas foram nas enzimas ALT e AST indicando leve hepatotoxicidade, a GGT teve elevação causada pelo próprio tumor. Na função renal a creatinina, esteve aumentada até o final do tratamento, a GGT urinária também aumentou, com proteinúria na ultima sessão, acusando lesão renal tubular. No grupo mastocitoma, as enzimas ALT, AST, ALP e GGT sérica, albumina e globulinas aumentaram, indicando injúria hepática. A GGT urinária aumentou em todos os periódos, tendo proteinúria na terceira sessão, indicando lesão renal. Nos cães com TVT houve aumento nas enzimas ALT e GGT sérica em todas as sessões, indicando dano hepático. A GGT urinária aumentou na primeira e terceira sessão, a proteinúra esteve presente somente nas duas primeiras sessões. Desta forma, neste estudo as alterações mais presentes foram, hepática e renal e as enzimas GGT sérica e a GGT urinária foram importantes biomarcadores de lesão tecidual precoce em diferentes neoplasias.

Chemotherapy is one of the most indicated treatments for dogs with malignant neoplasms. This study aimed to evaluate the effects caused by the use of chemotherapy in dogs with breast tumors treated with cyclophosphamide and carboplatin, mast cell tumors treated with vinblastine associated with prednisone and veneral transmissible tumour (TVT) treated with vincristine sulfate through hematological profile, serum biochemistry and urinary profile. Twenty dogs were selected, four with breast tumor, nine with mastocytoma and seven with TVT. The collection of blood and urine material was performed before the chemotherapy sessions. In the breast tumor group, the bitches did not present important hematological changes, the changes observed were in the ALT and GGT enzymes, indicating hepatotoxicity. In renal function, creatinine was increased until the end of treatment, urinary GGT also increased, with proteinuria being observed in the last session, accusing renal tubular injury. In the mast cell tumor group, serum ALT, AST, ALP and GGT enzymes, albumin and lobulin increased, indicating possible liver damage. Urinary GGT increased in all periods, with proteinuria in the third session, also indicating kidney damage. In dogs with TVT, there was an increase in serum ALT and GGT enzymes in all sessions, indicating liver damage. Urinary GGT increased in the first and third sessions, proteinuria was present only in the first two sessions. Thus, in this study, the most frequent changes were liver and kidney, and serum GGT enzymes and urinary GGT were important biomarkers of early tissue injury in different neoplasms.

Resumo

Microsporídios causam infecções oportunistas em indivíduos imunossuprimidos. Nos mamíferos, os esporos desses fungos são eliminados pelas fezes, urina ou secreções respiratórias e contaminam a água e alimentos. A via de infecção oral é a mais comum, embora experimentalmente, as vias intraperitoneal e intravenosa, determinem infecção e disseminação. A infecção pelas vias respiratórias ainda não foi demonstrada, embora seja admitida. Nesse contexto, o objetivo desse estudo foi demonstrar a infecção pelo microsporídio Encephalitozoon cuniculi pela via orofaríngea como modelo de pneumonia oportunista, aplicável para o estudo das pneumonias oportunistas de forma geral, assim como para comprovar a transmissão pela via respiratória para ampliar o melhor entendimento da epidemiologia dessas zoonoses. Camundongos C57BL machos ou fêmeas, livres de patógenos específicos - SPF, com até 12 semanas de idade, imunossuprimidos com ciclofosfamida (Cy), foram inoculados com 1x107 esporos da via orofaríngea de E. cuniculi, constituindo os grupos: Infectado, Cy-Infectado, Não-Infectado, Cy-Não-Infectado, Sham, Cy-Sham. Após 14 dias da infecção, os pulmões foram coletados para análise histopatológica, fenotipagem de células inflamatórias pulmonares por citometria de fluxo, mensuração da carga fúngica pela qPCR, dosagem de citocinas Th1, Th2 e Th17 no soro. Os animais infectados apresentaram pneumonia intersticial caracterizada por infiltração linfoplasmocítica em paredes alveoloares. Entretanto, a carga fúngica e a extensão do infiltrado inflamatório foram menores no grupo Cy-Infect, com predominância da população de linfócitos T CD8+ nos pulmões. No grupo infectado não tratado com Cy houve aumento da população de macrófagos alveolares (F4/80+CD11b-SiglecF+), maior carga fúngica e infiltrado inflamatório nos pulmões, caracterizando pneumonia por cephalitozoon mais pronunciada em comparação aos animais imunossuprimidos. Foi observado perfil de citocinas Th1 nos grupos infectados, aumento do perfil Th17 nos Cy-Infectados. Juntos os resultados permitem concluir que infecção pela via orofaríngea promoveu pneumonia por E. cuniculi em camundongos tratados ou não com ciclofosfamida, com mais gravidade em camundongos não imunossuprimidos, estabelecendo-se como modelo de pneumonia intersticial por via orofaríngea.

Microsporidia cause opportunistic infections in immunosuppressed individuals. In mammals, the spores of these fungi are shed in feces, urine or respiratory secretions and contaminate water and food. The oral route is the most common, although experimentally, the intraperitoneal and intravenous routes determine spread infection. Respiratory tract infection has not yet been demonstrated, although it is considered. The objective of this study was to demonstrate the infection by the microsporidian Encephalitozoon cuniculi via the oropharyngeal route as a model of opportunistic pneumonia, applicable as for the study of opportunistic pneumonias in general, as well as to prove transmission by the respiratory route to expand the better understanding. the epidemiology of these zoonoses. C57BL male or female mice, free of specific pathogens - SPF, up to 12 weeks of age, immunosuppressed with cyclophosphamide (Cy), were inoculated with 1x107 spores from the oropharyngeal pathway of E. cuniculi, constituting the groups: Infected, Cy-Infected, Non-Infected, Cy-Not-Infected, Sham, Cy-Sham. After 14 days of infection, the lungs were collected for histopathological analysis, phenotyping of lung inflammatory cells by flow cytometry, measurement of fungal load by qPCR, measurement of Th1, Th2 and Th17 cytokines in serum. The infected animals presented interstitial pneumonia characterized by perialveolar inflammatory infiltrative lesions with a predominance of lymphocytes and plasma cells. However, the fungal load and the extent of the inflammatory infiltrate were lower in the Cy-Infect group, with a predominance of the CD8+ T lymphocyte population in the lungs. In the infected group not treated with Cy, there was an increase in the population of alveolar macrophages (F4/80+CD11b-SiglecF+), higher fungal load and inflammatory infiltrate in the lungs, characterizing more pronounced Encephalitozoon pneumonia compared to immunosuppressed animals. Th1 cytokine profile was observed in infected groups, increase in Th17 profile in Cy-Infected. Together, the results allow us to conclude that oropharyngeal infection promoted pneumonia by E. cuniculi in mice treated or not with cyclophosphamide, with more severity in non-immunosuppressed mice, establishing itself as a model of interstitial pneumonia by aspiration.

Resumo

A ultrassonografia é uma técnica não invasiva, considerada de escolha entre os exames de 8 imagem para avaliação renal, fornecendo informações sobre a arquitetura, perfusão e rigidez 9 do órgão, no entanto, estudos correlacionando a ultrassonografia renal com o exame 10 histopatológico são escassos na literatura científica. Assim, o presente estudo teve como 11 objetivo avaliar a aplicabilidade da ultrassonografia modo B, Doppler e elastografia de 12 deformação como ferramentas complementares para o diagnóstico precoce de lesão renal 13 aguda em ratos induzidos experimentalmente com ciclofosfamida. Para isso, foram utilizados 14 21 ratos (Rattus novergicus), distribuídos aleatoriamente em dois grupos experimentais 15 designados de grupo ciclofosfamida (GC, n=12, submetidos à administração de 150 mg/kg do 16 quimioterápico, via intraperitoneal, dose única) e grupo salina (GS, n=9, administrado 150 17 ml/kg de solução de cloreto de sódio a 0,9%, via intraperitoneal, dose única). O experimento 18 foi conduzido de forma prospectiva, aleatória e cega. No exame ultrassonográfico modo B 19 avaliou-se os rins quanto à ecotextura, ecogenicidade, relação cortico-medular, comprimento 20 do rim/diâmetro da aorta, tamanho e superfície; pelo Doppler avaliaram-se a integridade 21 vascular, índice de resistividade e padrão do fluxo sanguíneo renal e, pela elastografia, a 22 deformidade tecidual, atribuindo-se escores e medidas, em diferentes momentos (24, 48 e 72 23 horas). Além disso, foram coletadas amostras de sangue para dosagens de ureia (mg/dL), 24 creatinina (mg/dL) e SDMA (ug/dL), bem como de fragmentos renais para análise histológica 25 quanto à presença ou ausência de dilatação tubular, adelgaçamento do epitélio tubular, 26 cilindrúria, eosinofilia citoplasmática, tumefação celular, perda das microvilosidades dos 27 túbulos contorcidos proximais, desprendimento das células epiteliais tubulares para o lúmen, 28 enrugamento e ruptura da membrana basal tubular, picnose, cariorrexis, cariólise, mitose, 29 binucleação, edema intersticial, inflamação intersticial, congestão e fibrose. Ademais, 30 classificaram-se os diferentes graus de injúria tubular aguda em escores, de acordo com a 31 gravidade e distribuição das alterações.Para todas as variáveis investigadas, os grupos e as 32 alterações de tempo-resposta foram comparados empregando-se modelo linear generalizado 33 com efeito aleatório com distribuição multinomial e função de ligação logito cumulativo. Os 34 resultados da ultrassonografia modo B indiciaram que a relação cortico-medular do GC foi 35 estatisticamente maior, nos momentos 24 e 72 horas, quando comparados aos mesmos 36 períodos do GS; além disso, a largura renal do GC também demonstrou aumento estatístico 37 comparativamente ao GS no momento 48 horas. Quanto aos exames bioquímicos, observou38 se que os níveis de creatinina foram estatisticamente menores no GC no momento 72 horas. 39 Não houve diferença estatística nas demais variáveis ultrassonográficas e bioquímicas.

Ultrasonography is a non-invasive technique, considered of choice among imaging tests for 8 renal evaluation, providing information on the architecture, perfusion and rigidity of the 9 organ, however, studies correlating renal ultrasound with histopathological examination are 10 scarce in the scientific literature. Thus, the present study aimed to evaluate the applicability of 11 B-mode ultrasonography, Doppler and strain elastography as complementary tools for the 12 early diagnosis of acute kidney injury in rats experimentally induced with cyclophosphamide. 13 For this, 21 rats (Rattus novergicus) were used, randomly divided into two experimental 14 groups designated as cyclophosphamide group (GC, n=12, submitted to the administration of 15 150 mg/kg of chemotherapy, intraperitoneal route, single dose) and saline group (GS, n=9, 16 administered 150 ml/kg of 0.9% sodium chloride solution, intraperitoneally, single dose). The 17 experiment was prospective, randomized and blinded. In the B-mode ultrasound examination, 18 the kidneys were evaluated for echotexture, echogenicity, cortico-medullary relationship, 19 kidney length/aorta diameter, size and surface; by Doppler, vascular integrity, resistivity 20 index and pattern of renal blood flow were evaluated and, by elastography, tissue deformity, 21 assigning scores and measurements at different times (24, 48 and 72 hours). In addition, blood 22 samples were collected for urea (mg/dL), creatinine (mg/dL) and SDMA (ug/dL) 23 measurements, as well as kidney fragments for histological analysis for the presence or 24 absence of tubular dilatation, thinning of tubular epithelium, cylindruria, cytoplasmic 25 eosinophilia, cellular swelling, loss of proximal convoluted tubule microvilli, shedding of 26 tubular epithelial cells into the lumen, wrinkling and rupture of the tubular basement 27 membrane, pyknosis, karyorrhexis, karyolysis, mitosis, binucleation, interstitial edema, 28 interstitial inflammation, congestion and fibrosis. Furthermore, the different degrees of acute 29 tubular injury were classified into scores, according to the severity and distribution of the 30 alterations. For all investigated variables, groups and time-response changes were compared 31 using a generalized linear model with random effect with multinomial distribution and 32 cumulative logit link function. The results of B-mode ultrasonography indicated that the 33 cortico-medullary relationship in the CG was statistically higher at 24 and 72 hours, when 34 compared to the same periods in the SG; in addition, the renal width of the CG also showed a 35 statistical increase compared to the SG at 48 hours. As for the biochemical tests, it was 36 observed that creatinine levels were statistically lower in the CG at 72 hours. There was no 37 statistical difference in the other ultrasound and biochemical variables.

Resumo

The aim of this report was to describe the clinical findings and therapeutic management of a case of papillary adenocarcinoma of the descending colon in a Beagle. The patient presented soft stools, haematochezia, tenesmus, and dyschezia. Clinical examination revealed alterations on the ultrasonographic features of the descending colon suggestive of colitis and neoplasia. Following local mass resection, histopathology analysis revealed mild lymphoplasmocytic enteritis and papillary adenocarcinoma of the colon. Enterectomy for tumoral resection and biopsy of locoregional lymph nodes were carried out. Subsequent to the surgical procedure, it was possible to confirm the previous diagnosis and the tumor was classified as intestinal intraluminal papillary adenocarcinoma, with incomplete surgical margins. Adjuvant chemotherapy was performed using carboplatin, cyclophosphamide, and piroxicam, leading to remission of clinical signs and absence of any clinical or imaging alterations compatible with the patient's previous clinical condition.(AU)

O objetivo desse relato de caso foi descrever os achados clínicos e manejo terapêutico de um caso de adenocarcinoma papilífero do cólon descendente em um Beagle. O paciente apresentou fezes amolecidas, hematoquesia, tenesmo e disquesia. Exame clínico revelou alteração de achados ultrassonográficos do cólon descendente sugerindo colite e neoplasia. Após ressecção de massa local, análise histopatológica revelou enterite linfmoplasmocito leve e adenocarcinoma papilar do cólon. Enterectomia para ressecção tumoral e biopsia das lesões locais e tumores linfonodais foram realizadas. Após procedimento cirúrgico foi possível confirmar o diagnóstico prévio e o tumor foi classificado como adenocarcinoma papilar intraluminal intestinal, com margens cirúrgicas incompletas. Quimioterapia adjuvante foi realizada utilizando carboplatina, ciclofosfamida e piroxano, levando a remissão de sinais clínicos e ausência de alterações de imagem compatíveis com situação clínica prévia do paciente.(AU)

Resumo

Encephalitozoon cuniculi são patógenos intracelulares obrigatórios, que infectam grande número de mamíferos, reconhecidos como agentes oportunistas em pessoas com AIDS e imunossuprimidas. As células NKT constituem uma subpopulação de linfócitos T com grande capacidade imunorreguladora, pela secreção rápida de diversas citocinas pró e anti-inflamatórias, com seletividade por antígenos lipídicos apresentados pela molécula CD1d. Os macrófagos apresentam moléculas CD1d e fagocitam de forma eficiente os microsporídios. O objetivo desse trabalho foi investigar a participação das células NKT na infecção por E. cuniculi, tanto in vitro, após contato com macrófagos infectados, quanto in vivo, em animais infectados. Macrófagos infectados por E. cuniculi, foram cocultivados com esplenócitos totais de animais Wildtype (WT) ou deficientes em células NKT (CD1d-/- e J18-/-). Em camundongos infectados por E. cuniculi, tratados com GalCer e/ou imunossuprimidos com ciclofosfamida (Cy), foram mensuradas citocinas no soro e analisados os achados histopatológicos. Macrófagos infectados tiveram maior atividade microbicida quando cocultivados com esplenócitos derivados de camundongos WT, se comparados com macrófagos infectados cocultivados com esplenócitos derivados de camundongos J18-/-. O mesmo foi observado em culturas de macrófagos CD1d-/-, propiciando maior atividade microbicida dos macrófagos de medula frente à microsporidiose. Os animais tratados com -Galcer, 24 horas após infecção, tiveram níveis altos de IFN-. Após 7 dias, o mesmo grupo de animais apresentou predomínio de granulócitos, com aparentes perfis de resolução do processo infeccioso. Os animais tratados com -Galcer e Cy tiveram concentrações das citocinas pró-inflamatórias IFN-, TNF e MCP-1 aumentadas em relação aos demais grupos, como também esplenomegalia com alterações do tecido esplênico, induzindo desarranjo tecidual. Os resultados indicam que as células NKT restritas a CD1d são importantes para a imunidade antifúngica, pois a resposta celular por iNKT montada contra E. cuniculi pode ser exacerbada com uso de Galcer.

Encephalitozoon cuniculi are obligate intracellular pathogens that infect a large number of mammals, recognized as opportunistic agents in people with AIDS and immunosuppressed individuals. NKT cells constitute a subpopulation of T lymphocytes with great immunoregulatory capacity by the rapid secretion of several pro and anti-inflammatory cytokines, with selectivity for lipid antigens presented by the CD1d molecule. Macrophages present CD1d molecules and efficiently phagocytose microsporidia. The objective of this work was to investigate the participation of NKT cells in E. cuniculi infection, both in vitro, after contact with infected macrophages, and in vivo, in experimentally infected animals. Macrophages infected by E. cuniculi were co-cultured with total splenocytes from wildtype (WT) or NKT cell-deficient (CD1d-/- and J18-/-) animals. In mice infected with E. cuniculi, and treated with GalCer and/or immunosuppressed with cyclophosphamide (Cy), serum cytokines were measured and histopathological findings were analyzed. Infected macrophages had higher microbicidal activity when co-cultured with splenocytes derived from WT mice, compared to infected macrophages co-cultured with splenocytes derived from J18-/- mice. The same was observed in cultures of CD1d-/- macrophages, which provided greater microbicidal activity of bone marrow macrophages against microsporidiosis. Animals treated with -Galcer, 24 hours after infection, had high levels of IFN-. After 7 days, the same group of animals showed a predominance of granulocytes, with apparent profiles of resolution of the infectious process. The animals treated with -Galcer and Cy had increased concentrations of the pro-inflammatory cytokines IFN-, TNF and MCP-1 in relation to the other groups, as well as splenomegaly with alterations in the splenic tissue, inducing tissue disarrangement. The results indicate that CD1d-restricted NKT cells are important for antifungal immunity, as the cellular response by iNKT mounted against E. cuniculi can be exacerbated with the use of Galcer.

Resumo

Genotoxicidade associada à exposição crônica a herbicida a base de glifosato em ratos Apesar dos estudos realizados pela indústria sugerirem que o glifosato é pouco tóxico para as espécies não alvo, os estudos realizados com este herbicida colocam em dúvida sua segurança para a saúde de outras espécies. O objetivo deste estudo foi avaliar a genotoxicidade da exposição crônica por via oral e inalatória ao herbicida glifosato em ratos. Para a realização dos experimentos, forma utilizados 88 ratos Wistar albinos, machos, adultos, divididos em nove grupos: CI - Grupo Controle Inalatório: animais expostos à nebulização com água destilada (n=10); CO - Grupo Controle Oral: ração nebulizada com água destilada (n=10); BI - Grupo de Baixa Concentração Inalatório: animais expostos a nebulização ao herbicida com 2,99 x 10-3 gramas de ingrediente ativo por hectare (g.i.a/ha) (n=10); BO - Grupo de Baixa Concentração Oral: ração nebulizada com o herbicida na concentração de 2,99 x 10-3 g.i.a/ha (n=10); MI - Grupo de Média Concentração Inalatório: animais expostos a nebulização ao herbicida com 4,99 x 10-3 g.i.a/ha (n=10); MO - Grupo de Média Concentração Oral: ração nebulizada com o herbicida na concentração de 4,99 x 10-3 g.i.a/ha (n=10); AI - Grupo de Alta Concentração Inalatório: animais expostos a nebulização ao herbicida com 7,48 x 10-3 g.i.a/ha (n=10); AO - Grupo de Alta Concentração: ração nebulizada com o herbicida na concentração de 7,48 x 10-3 g.i.a/ha (n=10); controle positivo (CP) (n=8), cujos animais receberam ciclofosfamida em dose única no primeiro dia do experimento e foram eutanasiados 24 horas após. Foram coletadas células da medula óssea para o teste do micronúcleo e para o ensaio do cometa. Os demais animais foram eutanasiados 6 meses após o início do experimento. A mediana de micronúcleos nos grupos controles inalatório e oral foi de 0, no grupo BI de 4,5, no BO de 1,5, no MI de 5, no MO de 1, no AI de 5, no AO de 3, e no grupo controle positivo de 9. Houve diferença entre os grupos estudados (p< 0,0001). Em relação à via de exposição, os animais expostos por via inalatória apresentaram maior número de micronúcleos do que os expostos por via oral (p< 0,0001). Ao ensaio do cometa, enquanto os grupos controle apresentaram maior número de células com classe de dano 0, os animais expostos ao GBH apresentaram maior número de células com classe de dano 4, principalmente aqueles expostos a altas concentrações (p<0,05). Concluímos que exposição inalatória ao GBH acarreta em maior formação de micronúcleos, e as exposições a maiores concentrações apresentam um maior dano em célula única, evidenciado pelo ensaio do cometa.

Genotoxicity associated with chronic exposure to glyphosate-based herbicide in rats Although studies carried out by the industry suggest that glyphosate is not very toxic to non-target species, studies carried out with this herbicide cast doubt on its safety for the health of other species. The aim of this study was to evaluate the genotoxicity of chronic oral and inhalation exposure to the herbicide glyphosate in rats. For the accomplishment of the experiments, 88 male, adult, albino Wistar rats were used, divided into nine groups: CI - Inhalation Control Group: animals exposed to nebulization with distilled water (n=10); CO - Oral Control Group: nebulized diet with distilled water (n=10); BI - Low Inhalation Concentration Group: animals exposed to nebulization to the herbicide with 2.99 x 10-3 grams of active ingredient per hectare (g.i.a/ha) (n=10); BO - Low Oral Concentration Group: nebulized feed with the herbicide at a concentration of 2.99 x 10-3 g.i.a/ha (n=10); MI - Medium Inhalation Concentration Group: animals exposed to nebulization to the herbicide with 4.99 x 10-3 g.i.a/ha (n=10); OM - Medium Oral Concentration Group: feed sprayed with the herbicide at a concentration of 4.99 x 10-3 g.i.a/ha (n=10); AI - High Inhalation Concentration Group: animals exposed to nebulization to the herbicide with 7.48 x 10-3 g.i.a/ha (n=10); AO - High Concentration Group: ration sprayed with the herbicide at a concentration of 7.48 x 10-3 g.i.a/ha (n=10); positive control (PC) (n=8), whose animals received cyclophosphamide in a single dose on the first day of the experiment and were euthanized 24 hours later. Bone marrow cells were collected for the micronucleus test and for the comet assay. The remaining animals were euthanized 6 months after the beginning of the experiment. The median of micronuclei in the inhaled and oral control groups was 0, in the BI group 4.5, in the BO of 1.5, in the MI of 5, in the MO of 1, in the AI of 5, in the AO of 3, and in the positive control group of 9. There was a difference between the studied groups (p< 0.0001). Regarding the route of exposure, the animals exposed by inhalation had a higher number of micronuclei than those exposed orally (p< 0.0001). In the comet assay, while the control groups had a higher number of cells with damage class 0, the animals exposed to GBH had a greater number of cells with damage class 4, especially those exposed to high concentrations (p<0.05). We conclude that inhalation exposure to GBH leads to greater micronucleus formation, and exposures to higher concentrations present greater DNA damage at the single-cell level, evidenced by the comet assay.