Advances in reproduction of the lebranche mullet Mugil liza: maturation and spawning of F1 breeders in captivity / Avanços na reprodução da tainha Mugil liza: maturação e desova de reprodutores F1 em cativeiro

This study aimed to evaluate the reproductive response of mullets born in captivity (F1) using hormonal induction. Therefore, it was described maturation and induced spawning of mullet (Mugil liza) breeders born in captivity (F1). F1 males presented viable sperm at 11 months of age, with length of 25.7 ± 0.4 cm and weight of 205.7 ± 11.5 g. In contrast, at three years of age F1 females could be reproduced, with length of 47.4 ± 1.4 cm and weight of 1263.0 ± 64.6 g. Ten spawnings were conducted, and the average diameter of the oocytes at the time of hormonal induction, fertilization rate, total and relative fertility and hatching rate were recorded. Spawning was attained through hormonal induction in females with oocyte diameter greater than 600 µm and in males that released semen with abdominal massage. During this reproductive period, induced females produced a second group of mature oocytes so another hormonal induction was performed. The present study describes the induction of mullet breeders born in captivity and the possibility of females to be induced more than once during the same reproductive period.

O objetivo do estudo foi avaliar a resposta reprodutiva de tainhas nascidas em cativeiro (F1) através da utilização de indução hormonal. O trabalho descreve a maturação e desovas induzidas de reprodutores de tainha (Mugil liza) nascidos em cativeiro (F1), sendo o primeiro relato da reprodução de F1 da espécie. Os machos F1 apresentaram espermatozoides viáveis aos 11 meses de idade, com comprimento de 25,7 ± 0,4 cm e peso de 205,7 ± 11,5 g. Enquanto as fêmeas F1 estavam aptas para reprodução aos três anos de idade, com comprimento de 47,4 ± 1,4 cm e peso de 1263,0 ± 64,6 g. A realização das desovas ocorreu mediante indução hormonal, utilizando fêmeas com diâmetro de ovócito maior de 600 µm e machos que liberavam sêmen quando submetidos à massagem abdominal. Foram realizadas 10 desovas, e registrados o diâmetro médio dos ovócitos no momento da indução hormonal, a taxa de fertilização, a fecundidade total e relativa e a taxa de eclosão. Além disso, foi verificado que no mesmo período reprodutivo as fêmeas induzidas a reprodução maturaram um segundo grupo de ovócitos, que atingiram o tamanho recomendado para a indução hormonal, possibilitando uma segunda indução. O presente estudo descreve a indução de reprodutores de tainhas nascidos em cativeiro e a possibilidade de uma mesma fêmea ser induzida mais de uma vez no mesmo período reprodutivo.

Advances in reproduction of the lebranche mullet Mugil liza: maturation and spawning of F1 breeders in captivity / Avanços na reprodução da tainha Mugil liza: maturação e desova de reprodutores F1 em cativeiro

This study aimed to evaluate the reproductive response of mullets born in captivity (F1) using hormonal induction. Therefore, it was described maturation and induced spawning of mullet (Mugil liza) breeders born in captivity (F1). F1 males presented viable sperm at 11 months of age, with length of 25.7 ± 0.4 cm and weight of 205.7 ± 11.5 g. In contrast, at three years of age F1 females could be reproduced, with length of 47.4 ± 1.4 cm and weight of 1263.0 ± 64.6 g. Ten spawnings were conducted, and the average diameter of the oocytes at the time of hormonal induction, fertilization rate, total and relative fertility and hatching rate were recorded. Spawning was attained through hormonal induction in females with oocyte diameter greater than 600 µm and in males that released semen with abdominal massage. During this reproductive period, induced females produced a second group of mature oocytes so another hormonal induction was performed. The present study describes the induction of mullet breeders born in captivity and the possibility of females to be induced more than once during the same reproductive period.(AU)

O objetivo do estudo foi avaliar a resposta reprodutiva de tainhas nascidas em cativeiro (F1) através da utilização de indução hormonal. O trabalho descreve a maturação e desovas induzidas de reprodutores de tainha (Mugil liza) nascidos em cativeiro (F1), sendo o primeiro relato da reprodução de F1 da espécie. Os machos F1 apresentaram espermatozoides viáveis aos 11 meses de idade, com comprimento de 25,7 ± 0,4 cm e peso de 205,7 ± 11,5 g. Enquanto as fêmeas F1 estavam aptas para reprodução aos três anos de idade, com comprimento de 47,4 ± 1,4 cm e peso de 1263,0 ± 64,6 g. A realização das desovas ocorreu mediante indução hormonal, utilizando fêmeas com diâmetro de ovócito maior de 600 µm e machos que liberavam sêmen quando submetidos à massagem abdominal. Foram realizadas 10 desovas, e registrados o diâmetro médio dos ovócitos no momento da indução hormonal, a taxa de fertilização, a fecundidade total e relativa e a taxa de eclosão. Além disso, foi verificado que no mesmo período reprodutivo as fêmeas induzidas a reprodução maturaram um segundo grupo de ovócitos, que atingiram o tamanho recomendado para a indução hormonal, possibilitando uma segunda indução. O presente estudo descreve a indução de reprodutores de tainhas nascidos em cativeiro e a possibilidade de uma mesma fêmea ser induzida mais de uma vez no mesmo período reprodutivo.(AU)

Maturation, spawning and larviculture of the mullet Mugil liza under laboratory conditions / Maturação, desova e larvicultura da tainha Mugil liza em laboratório

The technical feasibility for the sustainable production of a species depends mainly on the control of reproduction in captivity and the availability of juveniles. Studies were performed with the mullet Mugil liza in the 1980s, however this species was never produced commercially. With the development of aquaculture, the increasing demand for animal protein and the commercial value of the mullet roe, it was necessary to rear this species in the laboratory to produce juveniles in pilot scale. The broodstock, 4 females and 10 males, were kept in an indoor 12 m³ tank. Hormonal inductions were performed with the hormones pituitary extract of carp (PEC) and luteinizing hormone-releasing hormone analog (LHRHa); spawnings occurred between 54-57 h after the hormonal induction. Embryonated eggs of mullets were pelagic and translucent, with an average diameter of 846.29 ± 14.34 µm. The larvae hatched approximately 48 h after spawning with 2.95 ± 0.12 mm. The survival in the larviculture was estimated at 18.75%. Therefore, this study presents the technical methods for the capture, transport, acclimatization, maturation, induced spawning and hatchery of the mullet M. liza in the laboratory.(AU)

A viabilidade técnica para a produção sustentável de uma espécie depende principalmente do controle da reprodução em cativeiro e da disponibilidade de juvenis. Estudos foram realizados com a tainha Mugil liza nos anos 80, entretanto, essa espécie não chegou a ser produzida comercialmente. Com o desenvolvimento da aquicultura, com a crescente demanda por proteína animal, além do valor comercial agregado nas gônadas dessa espécie, surgiu à necessidade de tentar produzi-la em laboratório, desta vez com o objetivo de produzir juvenis em escala-piloto. Os reprodutores, 4 fêmeas e 10 machos, foram mantidos em tanque de 12 m³. As induções hormonais foram realizadas com os hormônios extrato bruto de hipófise de carpa (EBHC) e um análogo do hormônio liberador do hormônio luteinizante (LHRHa); as desovas ocorreram 54-57 h depois da indução hormonal. Os ovos embrionados das tainhas são pelágicos e translúcidos, com um diâmetro médio de 846.29 ± 14.34 µm. As larvas eclodiram aproximadamente 48h após a desova com 2.95 ± 0.12 mm. A sobrevivência desde a estocagem dos ovos até a despesca dos juvenis foi estimada em 18,75%. Sendo assim, este estudo apresenta os métodos técnicos para a captura, transporte, aclimatação, maturação, desova induzida e larvicultura da tainha M. liza em laboratório.(AU)

Maturation, spawning and larviculture of the mullet Mugil liza under laboratory conditions / Maturação, desova e larvicultura da tainha Mugil liza em laboratório

The technical feasibility for the sustainable production of a species depends mainly on the control of reproduction in captivity and the availability of juveniles. Studies were performed with the mullet Mugil liza in the 1980s, however this species was never produced commercially. With the development of aquaculture, the increasing demand for animal protein and the commercial value of the mullet roe, it was necessary to rear this species in the laboratory to produce juveniles in pilot scale. The broodstock, 4 females and 10 males, were kept in an indoor 12 m³ tank. Hormonal inductions were performed with the hormones pituitary extract of carp (PEC) and luteinizing hormone-releasing hormone analog (LHRHa); spawnings occurred between 54-57 h after the hormonal induction. Embryonated eggs of mullets were pelagic and translucent, with an average diameter of 846.29 ± 14.34 µm. The larvae hatched approximately 48 h after spawning with 2.95 ± 0.12 mm. The survival in the larviculture was estimated at 18.75%. Therefore, this study presents the technical methods for the capture, transport, acclimatization, maturation, induced spawning and hatchery of the mullet M. liza in the laboratory.

A viabilidade técnica para a produção sustentável de uma espécie depende principalmente do controle da reprodução em cativeiro e da disponibilidade de juvenis. Estudos foram realizados com a tainha Mugil liza nos anos 80, entretanto, essa espécie não chegou a ser produzida comercialmente. Com o desenvolvimento da aquicultura, com a crescente demanda por proteína animal, além do valor comercial agregado nas gônadas dessa espécie, surgiu à necessidade de tentar produzi-la em laboratório, desta vez com o objetivo de produzir juvenis em escala-piloto. Os reprodutores, 4 fêmeas e 10 machos, foram mantidos em tanque de 12 m³. As induções hormonais foram realizadas com os hormônios extrato bruto de hipófise de carpa (EBHC) e um análogo do hormônio liberador do hormônio luteinizante (LHRHa); as desovas ocorreram 54-57 h depois da indução hormonal. Os ovos embrionados das tainhas são pelágicos e translúcidos, com um diâmetro médio de 846.29 ± 14.34 µm. As larvas eclodiram aproximadamente 48h após a desova com 2.95 ± 0.12 mm. A sobrevivência desde a estocagem dos ovos até a despesca dos juvenis foi estimada em 18,75%. Sendo assim, este estudo apresenta os métodos técnicos para a captura, transporte, aclimatação, maturação, desova induzida e larvicultura da tainha M. liza em laboratório.

Growth hormone on ovarian morphology of lambaris (Astyanax bimaculatus) after induced spawning / Hormônio de crescimento sobre a morfologia ovariana de lambaris (Astyanax bimaculatus) após desova induzida

Lambari, Astyanax bimaculatus, is an oviparous, multiple-spawning fish that is reproductively active throughout the year, which makes it promising for cultivation and research. This research histologically evaluates the ovaries of lambari that have undergone artificial spawning induced with pituitary extract (control group), and the effect of growth hormone at a dose of 2 mg/g body weight (treatment group) on the subsequent process of ovarian recovery. Ovaries of fish in both the control and treatments groups were collected at 120 hours after spawning and analyzed using optical microscopy to characterize the average quantities of: follicles in different stages of development, post-ovulatory follicles, follicular atresia and granulocytes. Quantity and morphology of early and advanced primary follicles did not differ between the treatment and control groups; an important and necessary factor for ovarian recovery for subsequent spawning. There was a greater amount of granulocytes in initial atresia in the group treated with growth hormone. These results demonstrated that the administration of growth hormone may potentiate the process of ovarian recovery after induced spawning.(AU)

O Lambari Astyanax bimaculatus é um peixe ovíparo de desova múltipla que é reprodutivamente ativo durante todo o ano, o que o torna promissor para cultivo e pesquisa. Este trabalho avalia histologicamente os ovários de lambaris submetidos à desova artificial, induzida pelo extrato hipofisário (grupo controle) e o efeito do hormônio de crescimento na concentração de 2 g/g de massa corporal (grupo tratamento) no subsequente processo de recuperação ovariana. Os ovários dos peixes dos grupos controle e tratamento foram coletados às 120 horas após a desova e analisados em microscopia óptica para caracterizar as quantidades médias de: folículos em diferentes estágios de desenvolvimento, folículos pós-ovulatórios, atresia folicular e granulócitos. A quantidade e a morfologia dos folículos primários iniciais e avançados não diferiram entre os grupos tratamento e controle; um fator importante e necessário para a recuperação dos ovários para posterior desova. Houve maior quantidade de granulócitos na atresia inicial no grupo tratado com hormônio de crescimento. Esses resultados demonstram que a administração do hormônio do crescimento pode potencializar o processo de recuperação ovariana após a desova induzida.(AU)

Adhesiveness neutralization in eggs of Pseudoplatystoma fasciatum (Teleostei: Siluriformes: Pimelodidae) / Neutralização da adesividade em ovos de Pseudoplatystoma fasciatum (Teleostei: Siluriformes: Pimelodidae)

The aim of this study was to remove the adhesiveness of Pseudoplatystoma fasciatum eggs using solutions of urea for 10, 30, 60 and 90 min (treatments T0-T3) or, in urea for 10 min and washed in tannin (T4). In the control group, eggs were kept in water. After two experiments, we observed that eggs of control group presented the best embryo viability rates, even maintaining egg adhesiveness, being better than the other treatments. The T4, had the worst embryo viability rates. We observed that embryos of the T4 treatment presented reduced growth and formed a separate group when analyzing morphological parameters (egg diameter, total egg area, embryo area and yolk sac area) by multivariate analysis. Concluding, the control group, free of chemicals, provided the best results and is considered the best alternative for the immediate conservation and aquaculture production of P. fasciatum.(AU)

O objetivo deste estudo foi neutralizar a adesividade de ovos de Pseudoplatystoma fasciatum a partir da utilização de soluções de ureia por 10, 30, 60 ou 90 min (tratamentos T0-T3) ou em ureia por 10 min e lavados em tanino (T4). No controle, os ovos foram mantidos apenas em água. Após dois experimentos realizados, no grupo controle foram observadas as melhores taxas de viabilidade embrionária, mesmo mantendo a adesividade dos ovos, sendo melhor que os demais tratamentos. No T4 foram verificadas as piores taxas de viabilidade embrionária. Foi observado que os embriões do tratamento T4 apresentaram crescimento reduzido e formaram um grupo separado após análise dos parâmetros morfológicos (diâmetro do ovo, área total do ovo, área do embrião e área do saco vitelínico) por análise multivariada. Concluiu-se que o grupo controle, livre de produtos químicos, proporcionou os melhores resultados, sendo considerado a melhor alternativa para a conservação imediata e produção aquícola de P. fasciatum.(AU)

Adhesiveness neutralization in eggs of Pseudoplatystoma fasciatum (Teleostei: Siluriformes: Pimelodidae) / Neutralização da adesividade em ovos de Pseudoplatystoma fasciatum (Teleostei: Siluriformes: Pimelodidae)

The aim of this study was to remove the adhesiveness of Pseudoplatystoma fasciatum eggs using solutions of urea for 10, 30, 60 and 90 min (treatments T0-T3) or, in urea for 10 min and washed in tannin (T4). In the control group, eggs were kept in water. After two experiments, we observed that eggs of control group presented the best embryo viability rates, even maintaining egg adhesiveness, being better than the other treatments. The T4, had the worst embryo viability rates. We observed that embryos of the T4 treatment presented reduced growth and formed a separate group when analyzing morphological parameters (egg diameter, total egg area, embryo area and yolk sac area) by multivariate analysis. Concluding, the control group, free of chemicals, provided the best results and is considered the best alternative for the immediate conservation and aquaculture production of P. fasciatum.

O objetivo deste estudo foi neutralizar a adesividade de ovos de Pseudoplatystoma fasciatum a partir da utilização de soluções de ureia por 10, 30, 60 ou 90 min (tratamentos T0-T3) ou em ureia por 10 min e lavados em tanino (T4). No controle, os ovos foram mantidos apenas em água. Após dois experimentos realizados, no grupo controle foram observadas as melhores taxas de viabilidade embrionária, mesmo mantendo a adesividade dos ovos, sendo melhor que os demais tratamentos. No T4 foram verificadas as piores taxas de viabilidade embrionária. Foi observado que os embriões do tratamento T4 apresentaram crescimento reduzido e formaram um grupo separado após análise dos parâmetros morfológicos (diâmetro do ovo, área total do ovo, área do embrião e área do saco vitelínico) por análise multivariada. Concluiu-se que o grupo controle, livre de produtos químicos, proporcionou os melhores resultados, sendo considerado a melhor alternativa para a conservação imediata e produção aquícola de P. fasciatum.

RETORNO REPRODUTIVO DE FÊMEAS DE TAMBAQUI E QUALIDADE ESPERMÁTICA DE MACHOS ENDOGÂMICOS DE TILÁPIA-DO-NILO

O tambaqui é uma espécie reofílica, sendo que em seu ambiente natural precisa realizar piracema para que sua reprodução ocorra, enquanto na piscicultura para que a reprodução ocorra é necessário a utilização de indutores. A tilápia-do-Nilo possui vantagens reprodutivas quando relacionada a outras espécies de peixes, por apresentar maturação sexual precoce e capacidade de se reproduzir durante todo o ano em condições ambientais favoráveis. O objetivo do estudo foi avaliar a reprodução induzida de fêmeas de Colossoma macropomum no início do período reprodutivo e após 75 dias da primeira desova, e comparar as características espermáticas de diferentes grupos genéticos de tilápias-do-Nilo em três coletas com intervalo de 30 dias. Experimento 1: Foram utilizadas oito fêmeas com médias de peso de 6,7 kg e quatro anos de idade. Foi realizada uma indução hormonal no início do período reprodutivo (outubro) e outra após 75 dias da primeira desova (dezembro), sendo avaliados as características reprodutivas das fêmeas nestes dois momentos. Das oito fêmeas que desovaram na primeira indução reprodutiva, três fêmeas (37,5%) desovaram novamente após 75 dias. Todas as características avaliadas foram semelhantes nas duas desovas, exceto a taxa de fertilização que foi menor (P<0,05) na segunda desova. A maioria das fêmeas (66,7%) que desovaram novamente (2ª vez) após 75 dias apresentaram valores superiores à primeira indução hormonal para todas as características avaliadas, exceto para taxa de fertilização. Concluímos que é possível obter retorno reprodutivo de fêmeas de C. macropomum após 75 dias da primeira desova induzida. Experimento 2: Foram utilizados 30 exemplares de tilápia-do-Nilo (500 g), divididos em três grupos, sendo: (i) grupo com 10 peixes endogâmicos (AquaAmérica irmãos completos, consanguinidade de 25% dos pais); (ii) grupo com 10 peixes não endogâmicos (AquaAmérica sem ancestrais comuns até a terceira geração), com consanguinidade no máximo igual a 2%, sem nenhum bisavô comum dos pais; (iii) grupo com 10 peixes heterose (AquaAmérica X GIFT) cruzamento dos pais. Foram avaliadas as características seminais pelo sistema computadorizado (Sperm Class Analyzer), integridade de membrana e atividade mitocondrial. Não houve diferença significativa entre as características espermática entre os grupos genéticos nas diferentes coletas, exceto para a frequência de batimento cruzado (BCF) na primeira coleta. Na comparação de das coletas de cada grupo genético, apenas BCF no grupo AquaAmérica endogâmico diferiu significativamente (P<0,05), com maior valor na coleta 3 (7,7 Hz) em relação a coleta 2 (6,86 Hz). Com relação a integridade da membrana e atividade mitocondrial, apenas a porcentagem de membrana plasmática lesada com alto potencial mitocondrial no grupo genético AquaAmérica endogâmica foi menor (P<0,05) na coleta 2 (0,29%) em relação as coletas 1 (8,34%) e 3 (8,72%); a membrana plasmática integra com alto potencial mitocondrial no grupo AquaAmérica não endogâmica que foi maior (P<0,05) na coleta 2 (27,1%) em relação a coleta 1 (2,97) e 3 (1,72) e no grupo AquaAmérica x GIFT que foi maior (P<0,05) na coleta 2 (68,02%) em relação as coletas 1 (6,19%) e 3 (5,79%). Conclui-se que a variedade AquaAmérica não endogâmica apresenta melhores valores para a variável BCF na primeira coleta, variável que apresenta comportamento distinto entre o grau de endogamia da variedade AquaAmérica ao logo das coletas, inclusive com grande contraste entre a integridade da membrana e atividade mitocondrial entre as coletas.

The tambaqui is a rheophilic species that must perform the piracema (swimming upstream to lay eggs) to reproduce, when in its natural environment. In fish farming, however, inducers must be used for its reproduction to occur. Compared to other fish species, Nile tilapia has reproductive advantages provided by its early sexual maturation and ability to reproduce throughout the year in favorable environmental conditions. The objective of this study was to examine the induced reproduction of Colossoma macropomum females at the beginning of the reproductive period and 75 days after the first spawning, as well as to compare the sperm characteristics of different genetic groups of Nile tilapia in three collections spaced 30 days apart. Experiment 1: eight 4-year-old females with an average weight of 6.7 kg underwent hormonal induction at the beginning of the reproductive period (October) and again 75 days after the first spawning (December). Reproductive traits of the females were evaluated on these two occasions. Of the eight females that spawned in the first reproductive induction, three (37.5%) spawned again after 75 days. All evaluated traits were similar in both spawns, except fertilization rate, which was lower (P<0.05) in the second spawn. Most females (66.7%) that spawned again (2nd time) after 75 days showed higher values than in the first hormonal induction for all evaluated traits, except fertilization rate. We concluded that return to reproduction in C. macropomum females can be achieved 75 days after the first induced spawning. Experiment 2: thirty specimens of Nile tilapia (500 g) were divided into three groups: (i) 10 inbred fish (AquaAmérica full-sibs, 25% inbreeding from parents); (ii) 10 non-inbred fish (AquaAmérica with no common ancestors up to the third generation, with inbreeding of at most 2%, without any common great-grandparent between parents); and (iii) 10 heterozygous fish (AquaAmérica × GIFT parents). Semen characteristics were evaluated in a computerized system (Sperm Class Analyzer) and membrane integrity and mitochondrial activity were analyzed. There was no significant difference in sperm characteristics between the genetic groups in the different collections, except for beat-cross frequency (BCF) in the first collection. When the collections of each genetic group were compared, only BCF in the inbred AquaAmérica group differed significantly (P<0.05), with a higher value observed in collection 3 (7.7 Hz) than in collection 2 (6.86 Hz). As regards membrane integrity and mitochondrial activity, only the percentage of damaged plasma membrane with high mitochondrial potential in the inbred AquaAmérica genetic group was lower (P<0.05) in collection 2 (0.29%) than in collections 1 (8.34%) and 3 (8.72%). Likewise, intact plasma membrane with high mitochondrial potential in the non-inbred AquaAmérica group was higher (P<0.05) in collection 2 (27.1%) than collections 1 (2.97) and 3 (1.72), whereas in the AquaAmérica × GIFT group, it was higher (P<0.05) in collection 2 (68.02%) than collections 1 (6.19%) and 3 (5.79%). In conclusion, BCF values in the non-inbred AquaAmérica variety are better in the first collection. This variable behaves differently according to the degree of inbreeding in the AquaAmérica variety throughout collections, with a marked contrast between membrane integrity and mitochondrial activity between collections.

Selection of pacu females to hormonal induction: effect of age and of evaluation methods / Seleção de fêmeas de pacu para indução hormonal: efeito da idade e dos métodos de avaliação

In this study, we investigated the reproductive cycle and spawning season of old (OFs) and young (YFs) P. mesopotamicus females, aiming to improve the process of selection of suitable fish for induced spawning. We also evaluated the accuracy of using external body characteristics in selecting suitable females. To that, 60 OFs and 60 YFs (10 and four years old, respectively) were submitted to seven samplings during two reproductive cycles. In each sampling, females (five to 10 per treatment) were randomly chosen to evaluation of plasma concentrations of gonadal steroids and ovary composition (biopsies and stereology). Females were also submitted to an external evaluation concerning the length of abdominal thickness, the degree of the abdominal rigidity and the aspect of urogenital papilla. In spite of OFs have shown reduced concentrations of 17α- hydroxyprogesterone during the spawning season, we observed that OFs and YFs kept in captivity had similar reproductive cycles and spawning seasons (in December for both groups). We do not recommend the exclusive use of external evaluation for selecting breeders to spawning induction due to a great inaccuracy of data and lack of association with histology and ovarian biopsy, which are more accurate and reliable.(AU)

Neste estudo, investigamos o ciclo reprodutivo e a época de desova de fêmeas “velhas” (FVs) e fêmeas “jovens” (FJs) de P. mesopotamicus, visando melhorar o processo de seleção de peixes para a indução hormonal. Avaliamos também a acurácia do uso de características corporais externas para a seleção de fêmeas para indução hormonal. Para isso, 60 FVs e 60 FJs (10 e quatro anos, respectivamente) foram submetidas a sete amostragens durante dois ciclos reprodutivos. Em cada amostra, as fêmeas (cinco a 10 por tratamento) foram capturadas para avaliação das concentrações plasmáticas de esteroides gonadais e composição dos ovários (biópsias e estereologia). As fêmeas foram também submetidas à uma avaliação externa relativa à espessura abdominal, o grau de rigidez abdominal e o aspecto da papila urogenital. Exceto pela ocorrência de concentrações reduzidas de 17α-hidroxiprogesterona nas FVs, durante a época de desova, observamos que FVs e FJs, mantidas em cativeiro, apresentam ciclos reprodutivos e épocas de desova similares (em dezembro para ambos os grupos). Não recomendamos o uso exclusivo da avaliação externa para a seleção de reprodutores para indução a desova, devido a uma imprecisão dos dados e falta de associação destes com a histologia e biópsia de ovário, os quais são mais precisos e confiáveis.(AU)

Selection of pacu females to hormonal induction: effect of age and of evaluation methods / Seleção de fêmeas de pacu para indução hormonal: efeito da idade e dos métodos de avaliação

In this study, we investigated the reproductive cycle and spawning season of old (OFs) and young (YFs) P. mesopotamicus females, aiming to improve the process of selection of suitable fish for induced spawning. We also evaluated the accuracy of using external body characteristics in selecting suitable females. To that, 60 OFs and 60 YFs (10 and four years old, respectively) were submitted to seven samplings during two reproductive cycles. In each sampling, females (five to 10 per treatment) were randomly chosen to evaluation of plasma concentrations of gonadal steroids and ovary composition (biopsies and stereology). Females were also submitted to an external evaluation concerning the length of abdominal thickness, the degree of the abdominal rigidity and the aspect of urogenital papilla. In spite of OFs have shown reduced concentrations of 17α- hydroxyprogesterone during the spawning season, we observed that OFs and YFs kept in captivity had similar reproductive cycles and spawning seasons (in December for both groups). We do not recommend the exclusive use of external evaluation for selecting breeders to spawning induction due to a great inaccuracy of data and lack of association with histology and ovarian biopsy, which are more accurate and reliable.

Neste estudo, investigamos o ciclo reprodutivo e a época de desova de fêmeas “velhas” (FVs) e fêmeas “jovens” (FJs) de P. mesopotamicus, visando melhorar o processo de seleção de peixes para a indução hormonal. Avaliamos também a acurácia do uso de características corporais externas para a seleção de fêmeas para indução hormonal. Para isso, 60 FVs e 60 FJs (10 e quatro anos, respectivamente) foram submetidas a sete amostragens durante dois ciclos reprodutivos. Em cada amostra, as fêmeas (cinco a 10 por tratamento) foram capturadas para avaliação das concentrações plasmáticas de esteroides gonadais e composição dos ovários (biópsias e estereologia). As fêmeas foram também submetidas à uma avaliação externa relativa à espessura abdominal, o grau de rigidez abdominal e o aspecto da papila urogenital. Exceto pela ocorrência de concentrações reduzidas de 17α-hidroxiprogesterona nas FVs, durante a época de desova, observamos que FVs e FJs, mantidas em cativeiro, apresentam ciclos reprodutivos e épocas de desova similares (em dezembro para ambos os grupos). Não recomendamos o uso exclusivo da avaliação externa para a seleção de reprodutores para indução a desova, devido a uma imprecisão dos dados e falta de associação destes com a histologia e biópsia de ovário, os quais são mais precisos e confiáveis.

Influência do horário de aplicação e da variedade genética em fêmeas de tilápias Oreochromis niloticus submetidas à indução hormonal com hCG / Influence of application time and genetic variability in tilapias Oreochromis niloticus submitted to hormonal induction with hCG

Objetivou-se com este trabalho avaliar a influência do horário de aplicação e da variedade genética de fêmeas submetidas à indução com hCG. O experimento foi realizado nos meses de julho e agosto de 2012. Utilizou-se delineamento inteiramente ao acaso, com esquema fatorial 2x4x2 (duas variedades, quatro horários de aplicação, com e sem hCG), sendo quatro repetições para os tratamentos controle e seis para induzidos com hCG. Foram utilizadas 40 fêmeas das variedades GIFT e UFLA, microchipadas, alojadas em um sistema com recirculação de água. Foram utilizados quatro horários de aplicação: seis; 12; 18 e 24 horas. A dosagem de hCG foi de 5UI/grama de peso de peixe, dividida em duas aplicações. A extrusão dos ovócitos foi realizada 720 horas-graus após a última aplicação, sendo observado o número de animais de cada tratamento que apresentaram desova. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância, e as médias comparadas pelo teste SNK a 5% de significância. A indução com hCG proporcionou melhores (P<0,05) resultados paras as variáveis: índice de desova (ID), fecundidade absoluta relativa ao comprimento (FARC) e peso de desova (PD), independentemente da variedade utilizada. A variedade UFLA não foi influenciada pelo horário de aplicação (P>0,05). Já a GIFT apresentou maior ID (P<0,05) quando a indução hormonal foi realizada às 24h em relação à aplicação realizada às 18h. O diâmetro do ovócito da variedade UFLA é maior do que o da GIFT (P<0,05). Ao se observar o grupo controle, verificou-se que a variedade UFLA apresentou maior porcentagem de ovócitos com posição periférica de vesícula germinativa (P<0,05) em relação à GIFT. A indução hormonal com hCG foi influenciada pela variedade e pelo horário de aplicação.(AU)

The aim of this work was to evaluate the influence of the application time and genetic variability of females submitted to hormonal induction with hCG. The experiment was performed in the months of July and August 2012. We used a completely randomized design, with a 2x4x2 (two varieties, four application times, with or without hCG) factorial scheme, with four replicates for the control treatments and six replicated for those with hCG induction. Forty females of the GIFT and UFLA varieties, with microchips, were housed in a water recirculation system. Four application times were used: 6; 12; 18 and 24 hours. The hCG dosage was 5UI/gram of fish, divided into two applications. Oocyte extrusion was performed 720 hours after the last application, observing the number of animals in each treatment which presented spawning. The obtained data were submitted to variance analysis and the means compared by the SNK test at 5% significance. The induction with hCG provided better (P<0.05) results for the variables: spawning index (SI), absolute fecundity relative to length (AFRL) and spawning weight (SW), regardless of the variety used. The UFLA variety was not influenced by the time of application (P>0.05), while GIFT presented higher SI (P<0.05) when the hormonal induction was performed at 24 h in relation to the application performed at 18 h. The diameter of the oocytes of the UFLA variety was larger than that of the GIFT variety (P<0.05). Observing the control group, the UFLA variety presented a higher percentage of oocytes with peripheral position of the germinal vesicle (P<0.05) in relation to GIFT. The hormonal induction with hCG was influenced by the variety and the time of application.(AU)

Indução à maturação final e ovulação de lambari (Astyanax altiparanae) com análogos do hormônio liberador de gonadotropinas (GnRH)

A presente tese foi dividida em três capítulos, no primeiro é apresentada uma revisão bibliográfica dos temas relacionados à tese, os outros dois capítulos são manuscritos gerados a partir dos experimentos realizados durante o doutorado. No manuscrito I (capítulo II) avaliamos o desempenho reprodutivo de fêmeas de lambari (Astyanax altiparanae) usando diferentes protocolos de reprodução em cativeiro, como a administração de análogo do hormônio liberador de gonadotrofina de salmão (sGnRHa) e extrato de pituitária de carpa (CPE), bem como sem o uso de terapia hormonal. Foram realizados dois experimentos consecutivos com machos e fêmeas maduros de lambari (seis meses de idade) usando dose única (Exp. 1) ou fracionada (10% + 90% - intervalo de 12h) (Exp. 2). No Exp. 1, seis doses de sGnRHa (variando de 1 a 160 g kg -1 ) foram aplicadas em três repetições (cinco fêmeas e 10 machos cada); no Exp. 2, três doses de sGnRHa (10, 100 e 1000 g kg -1 ) foram aplicadas em quatro repetições (cinco fêmeas e 10 machos cada). Em ambos os experimentos, 6 mg de CPE kg -1 e solução salina foram usados como controles positivo e negativo, respectivamente. A quantificação de 17-20-dihidroxi-4- pregnen-3-ona (17,20-P) e níveis plasmáticos de prostaglandina F2 e avaliações histológicas ovarianas foram introduzidas no Exp. 2 separando fêmeas desovadas e não desovadas. Usando uma única dose, a taxa de desova foi baixa e semelhante entre todos os grupos (de 0 a 20%). Usando doses fracionadas, a taxa de desova de CPE (60%) foi maior do que todos os outros grupos (de 10 a 25%), com exceção da dose mais alta de sGnRHa (40%). A desova e elevação dos níveis de 17,20-P ocorreram em algumas fêmeas do controle negativo (Exp. 2). Portanto, a terapia com doses fracionadas de CPE melhorou a ovulação de lambari, mas não foi condicional para a obtenção da ovulação. Apenas as fêmeas não desovadas induzidas com doses fracionadas de CPE, mas não com sGnRHa e nem no controle negativo, atingiram a maturação final. Além disso, a desova nos grupos com sGnRHa ocorreu em uma extensão semelhante à do controle negativo e os grupos tratados com sGnRHa não mostraram qualquer resposta dose-dependente considerando todas variáveis avaliadas. Portanto, é possível que a desova nos grupos sGnRHa se deva apenas ao agrupamento de peixes, semelhante ao controle negativo. Em conclusão, a dose fracionada de CPE foi o único tratamento que provocou maturação final em todas as fêmeas tratadas e um aumento significativo no desempenho reprodutivo em comparação com todos os outros tratamentos. No manuscrito II (capítulo III) avaliamos o efeito do análogo do hormônio liberador do hormônio luteinizante (LHRHa) com e sem domperidona no desempenho reprodutivo de lambari e na liberação de 17,20-P e PGF 2 , bem como avaliação histológica das estruturas ovarianas em dois experimentos independentes e consecutivos. No primeiro experimento cinco doses de LHRHa (20, 60, 180, 540 e 1620 g kg -1 ) foram testadas com três repetições cada, enquanto no segundo experimento a dose de 180 g kg -1 foi testada em combinação com 20 mg kg -1 de domperidona (D) com quatro repetições. Em ambos os experimentos utilizamos solução salina 0,9% como controle negativo e 6 mg de CPE kg -1 como controle positivo e as fêmeas de todos os grupos receberam duas injeções (10% + 90% - intervalo de 12h). As doses testadas de LHRHa não apresentram resultados superiores aos do controle negativo. Associando o LHRHa com D não foram obtidos resultados superiores ao LHRHa sem associação, sugerindo que a dopamina parece não apresentar um papel no controle neuroendócrino da reprodução dessa espécie ou que este antidopaminérgico não é o mais indicado para o lambari. O grupo tratado com CPE foi o único com melhor desempenho que o controle negativo, indicando que o CPE foi a melhor terapia hormonal para induzir a desova em lambari (entre os testados por nós). Houve uma diminuição nas taxas de fertilização e eclosão que coincidiram com as duas doses mais altas de LHRH (540 e 1620 g kg -1 ), sugerindo que essas doses podem ter causado uma superestimulação da hipófise na produção de LH, a qual pode ter afetado a qualidade dos ovos.

The present thesis was divided into three chapters, in the first one a review of the themes related to the thesis is presented, the other two chapters are manuscripts prepared from the experiments carried out during the doctorate. In the manuscript I (chapter II) we evaluated lambari (Astyanax altiparanae) reproductive performance using different protocols of reproduction in captivity, such as the administration of analogue of salmon gonadotropin- releasing hormone (sGnRHa) and carp pituitary extract (CPE) as well as without the use of hormonal therapy. We performed two consecutive experiments with mature lambari males and females (six months old) using single (Exp. 1) or fractioned doses (10% + 90% - 12h interval) (Exp. 2). In Exp. 1, six sGnRHa doses (ranging from 1 to 160 g kg -1 ) were applied in three replicates (five females and 10 males each); in Exp. 2, three sGnRHa doses (10, 100 and 1000 g kg -1 ) were applied in four replicates (five females and 10 males each). In both experiments 6 mg of CPE kg -1 and saline solution were used as positive and negative controls, respectively. Quantification of 17-20-dihydroxy-4-pregnen-3-one (17,20-P) and prostaglandin F 2 plasma levels and ovarian histological evaluations were introduced in Exp. 2 via the separation of spawned and unspawned females. Using a single dose, the spawning rate was low and similar between all groups (from 0 to 20%). Using fractioned doses, the spawning rate of CPE (60%) was higher than all other groups (from 10 to 25%), with the exception of the highest sGnRHa dose (40%). Spawning and elevation of 17,20-P levels occurred in some females of the negative control (Exp. 2). Therefore, only CPE fractioned doses therapy improved lambari ovulation but were not conditional for obtaining ovulation. Only unspawned females treated with fractioned CPE doses, but neither sGnRHa nor negative control, attained final oocyte maturation.In addition, spawning in sGnRHa groups occurred in a similar extent as in negative control and sGnRHa-treated groups did not show any dose dependent response considering all variables measured. Therefore, it was possible that spawning in sGnRHa groups were just due to grouping of fish, similar to negative control. In conclusion, the fractioned dose of CPE was the only treatment that provoked final oocyte maturation in all treated females and a significant enhance in reproductive performance comparing to all other treatments. In the manuscript II (chapter III) we evaluated the effect of luteinizing hormone-releasing hormone ethylamide analogue (LHRHa) with and without domperidone on reproductive performance of lambari and the quantification of plasma levels of 17,20-P and PGF 2 , as well as histological evaluation of ovarian structures in two independent and consecutive experiments. In the first, five doses of LHRHa (20, 60, 180, 540 and 1620 g kg -1 ) were tested with three replicates each, while in the second the dose of 180 g kg -1 was tested in combination with 20 mg kg -1 domperidone (D) with four replicates. In both experiments, we used 0.9% saline as a negative control and 6 mg CPE kg -1 as a positive control and the females of all groups received two injections (10%; and 90% after 12 h). The doses we tested of LHRHa did not show results superior to those of the negative control. When associating LHRHa with D, we did not obtain results superior to LHRHa without association, suggesting that dopamine does not seem to play a role in the neuroendocrine control of the reproduction of this species or that this antidopaminergic is not the most suitable for lambari. The group treated with CPE was the only one with better performance than the negative control, indicating that CPE was the best hormonal therapy to induce spawning in lambari (among those tested by us). There was a decrease in fertilization and hatching rates that coincided with the two highest doses of LHRH (540 and 1620 g kg -1 ), suggesting that these doses may have caused an overstimulation of the pituitary in the production of LH, which may have affected egg quality.

Alternativas para a reproducao induzida, larvicultura e alevinagem do matrinxa, Brycon amazonicus (Spix e Agassiz, 1829)

O matrinxã (Brycon amazonicus) é uma espécie nativa de grande importância para a pesca e a piscicultura na região amazônica. Por ser uma espécie que vem sendo cultivada a apenas algumas décadas há carência de estudos quanto a utilização de: hormônios sintéticos para a indução a desova, larvicultura e alevinagem. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi: avaliar o uso de tecnologias alternativas para a reprodução induzida, incubação, larvicultura e alevinagem de matrinxã. Os experimentos de reprodução, incubação e alevinagem foram conduzidos no Centro de Treinamento e Tecnologia de Produção de Alevinos de Humaitá, Amazonas, já o experimento de larvicultura foi realizado em uma propriedade particular localizada na zona rural do referido município. O primeiro experimento avaliou fêmeas induzidas com o hormônio sintético Ovidrel® e sua combinação com a hipófise de carpa nos principais índices reprodutivos: peso dos óocitos, taxa de fertilização, taxa de eclosão e produção de pós-larvas; já para os machos avaliou-se a viabilidade da espermiação e o volume produzido de sêmen. As fêmeas tratadas exclusivamente com o hormônio sintético não desovaram, só foi possível realizar a extrusão no grupo que recebeu o extrato de hipófise de carpa e no que recebeu a mistura de hormônio sintético com hipófise. No entanto, para os machos o hormônio sintético possibilitou a espermiação. O segundo experimento comparou o sistema de incubação com fluxo direto de água com o sistema de recirculação não sendo observado diferenças significativas nos índices avaliados, porém o volume de água foi significativamente menor no sistema de recirculação quando comparado ao sistema tradicional. No terceiro experimento avaliou-se a viabilidade do fornecimento de artêmia na larvicultura de matrinxã, comparando com o plâncton selvagem oriundo de um viveiro previamente fertilizado e com larvas de tambaqui como forrageirais. O grupo que apresentou maior crescimento foi o que consumiu plâncton, no entanto a maior taxa de sobrevivência foi observada no que recebeu as larvas forrageiras. O quarto experimento avaliou o desempenho zootécnico dos alevinos de matrinxã alimentados com soja, soja fermentada com probiótico e ração fermentada com probiótico, sendo a ração o grupo controle. Observou-se que o melhor desempenho zootécnico foi obtido com a ração fermentada, no entanto, não diferindo estatisticamente da ração. Conclui-se que é possível realizar a desova de matrinxã quando se utiliza o hormônio sintético como dose preparatória e a hipófise como decissiva para a indução das fêmeas, no entanto o hormônio sintético apresenta melhores resultados para os machos. A incubação de ovos em sistema de recirculação não afeta a produção de larvas, além de ser ambientalmente mais correta uma vez que utiliza um volume significativamente menor de água. A utilização da mistura de artêmia com plâncton pode vir a substituir a utilização de larvas de peixes forrageiros. Quanto a alevinagem de matrinxã os melhores resultados zootecnicos e o menor custo de alimentação foram obtidos quando os animais foram arraçoados com ração fermentada e ração.

The matrinxã (Brycon amazonicus) is a native species of great importance for fishing and fish farming in the Amazon region. Because it is a species that has been cultivated for only a few decades, there is a lack of studies on the use of: synthetic hormones to induce the reproduction, larviculture and fingerling farming. Thus, the aim of this work was: to evaluate the use of alternative technologies for induced reproduction, incubation, larviculture and fingerling culture. The experiments were carried out at the Centro de Treinamento e Tecnologia de Produção de Alevinos de Humaitá, Amazonas, except for the larviculture that was carried out on a private property located in the rural area of the municipality. The first experiment evaluated females induced with the synthetic hormone Ovidrel® and its combination with carp pituitary gland in the main reproductive indices: oocyte weight, fertilization rate, hatching rate and post-larvae production; for males tested the viability of sperm production and the volume of semen produced. The females treated exclusively with the synthetic hormone did not spawn, it was only possible to perform the extrusion in the group that received the extract of the pituitary gland and in the group that received the mixture of synthetic hormone with the pituitary gland. However, for males the synthetic hormone made sperm production possible. The second experiment compared the incubation system with direct water flow with the recirculation system, with no significant differences in the evaluated indexes, however, the volume of water was significantly lower in the recirculation system when compared to the traditional system. In the third experiment, the viability of supplying brine shrimp to matrinxã larviculture was evaluated, comparing it with wild plankton from a previously fertilized nursery and with tambaqui larvae as forage. The group that showed the highest growth was the one that consumed plankton, however the highest survival rate was observed in the one that received the forage larvae. The fourth experiment evaluated the zootechnical performance of matrinxã fry fed with soybeans, soybeans fermented with probiotics and ration fermented with probiotics, with the ration being the control group. It was observed that the best zootechnical performance was obtained with the fermented ration, however, it did not differ statistically from the ration. It's possible conclude that the synthetic hormone can promote spawn in matrinxã when using as a preparatory dose and the pituitary gland as decisive for the induction of females, however the synthetic hormone shows better results for males. The incubation of eggs in a recirculation system does not affect the production of larvae, in addition to being more environmentally friendly since it uses a significantly smaller volume of water. The use of a mixture of brine shrimp and plankton may come to replace the use of foraging fish larvae. Regarding fingerling culture matrinxã, the best zootechnical results and the lowest cost of feeding were obtained when the animals were fed with fermented ration and ration.

Indutores hormonais na reprodução artificial de curimba (Prochilodus lineatus) / Inducing hormone in artificial reproduction curimba (Prochilodus lineatus)

Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes indutores hormonais na reproduçãoartificial de fêmeas e machos de curimba Prochilodus lineatus. Os machos (n = 30) e as fêmeas (n = 30)receberam duas aplicações de hormônio intramuscular. Os tratamentos foram: EBHC extrato bruto de hipófisede carpa (0,5 e 5,0 mg/kg), G gonadorelina (60 e 60 µg/kg) e A acetato de buserelina (0,25 e 0,5 mL/kg).Realizou-se coleta de sangue antes da aplicação hormonal e após a desova para se verificarem as concentraçõeshormonais de LH, FSH, estradiol e progesterona. A avaliação da eficácia dos tratamentos foi realizadaconsiderando-se, nos machos, o volume seminal, a taxa da motilidade espermática, a morfologia e aconcentração espermática. Nas fêmeas, foi verificado o percentual de desova, o peso da desova (g), o diâmetrodos ovócitos (µm) e a taxa de fertilização (%). Nos parâmetros analisados para as fêmeas, não foi observadadiferença significativa (P > 0,05) nas variáveis: peso de desova e diâmetro de ovócitos. Foi observada taxa defertilização somente para os tratamentos EBHC e G, sem haver distinção (P > 0,05) entre eles. As fêmeas e osmachos de curimba não apresentaram diferença (P > 0,05) nas concentrações plasmáticas de LH, FSH e estradiolantes e após a aplicação hormonal. Em fêmeas, a concentração de progesterona foi maior (P < 0,05) antes daaplicação hormonal. A gonadorelina, nas condições aplicadas, pode ser utilizada como um hormônio alternativoà utilização do extrato bruto de hipófise de carpa na reprodução induzida de curimba.(AU)

This study aimed to evaluate the effect of different hormonal inducers on artificial breeding of femalesand males of curimba Prochilodus lineatus. Males (n = 30) and females (n = 30) received two intramuscularhormone applications. The treatments were: CCPE - crude carp pituitary extract (0.5 and 5.0 mg/kg), G -gonadorelin (60 and 60 µg/kg) and A - busserelina acetate (0.25 and 0.5 ml/kg). We conducted blood samplingbefore hormonal application and after spawning to check the hormone levels of LH, FSH, estradiol andprogesterone. The efficacy of treatments was performed considering, in males, the seminal volume, the rate ofsperm motility, morphology and sperm concentration. In females, it was found the percentage of spawning,spawning weight (g), oocyte diameter (µm) and fertilization rate (%). Spawning weight and diameter of oocytesno presented significant difference (P > 0.05). Fertilization rate was observed only for CCPE and G treatmentsdid not differ (P > 0.05) between them. Females and males curimba are not different (P > 0.05) in plasma levelsof LH, FSH and estradiol before and after hormone application. In females progesterone concentration washigher (P < 0.05) before application of hormone. The gonadorelin, under the conditions applied can be used asan alternative to hormone use crude carp pituitary extract on induced curimba reproduction.(AU)

Indutores hormonais na reprodução artificial de curimba (Prochilodus lineatus) / Inducing hormone in artificial reproduction curimba (Prochilodus lineatus)

Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes indutores hormonais na reproduçãoartificial de fêmeas e machos de curimba Prochilodus lineatus. Os machos (n = 30) e as fêmeas (n = 30)receberam duas aplicações de hormônio intramuscular. Os tratamentos foram: EBHC – extrato bruto de hipófisede carpa (0,5 e 5,0 mg/kg), G – gonadorelina (60 e 60 µg/kg) e A – acetato de buserelina (0,25 e 0,5 mL/kg).Realizou-se coleta de sangue antes da aplicação hormonal e após a desova para se verificarem as concentraçõeshormonais de LH, FSH, estradiol e progesterona. A avaliação da eficácia dos tratamentos foi realizadaconsiderando-se, nos machos, o volume seminal, a taxa da motilidade espermática, a morfologia e aconcentração espermática. Nas fêmeas, foi verificado o percentual de desova, o peso da desova (g), o diâmetrodos ovócitos (µm) e a taxa de fertilização (%). Nos parâmetros analisados para as fêmeas, não foi observadadiferença significativa (P > 0,05) nas variáveis: peso de desova e diâmetro de ovócitos. Foi observada taxa defertilização somente para os tratamentos EBHC e G, sem haver distinção (P > 0,05) entre eles. As fêmeas e osmachos de curimba não apresentaram diferença (P > 0,05) nas concentrações plasmáticas de LH, FSH e estradiolantes e após a aplicação hormonal. Em fêmeas, a concentração de progesterona foi maior (P < 0,05) antes daaplicação hormonal. A gonadorelina, nas condições aplicadas, pode ser utilizada como um hormônio alternativoà utilização do extrato bruto de hipófise de carpa na reprodução induzida de curimba.

This study aimed to evaluate the effect of different hormonal inducers on artificial breeding of femalesand males of curimba Prochilodus lineatus. Males (n = 30) and females (n = 30) received two intramuscularhormone applications. The treatments were: CCPE - crude carp pituitary extract (0.5 and 5.0 mg/kg), G -gonadorelin (60 and 60 µg/kg) and A - busserelina acetate (0.25 and 0.5 ml/kg). We conducted blood samplingbefore hormonal application and after spawning to check the hormone levels of LH, FSH, estradiol andprogesterone. The efficacy of treatments was performed considering, in males, the seminal volume, the rate ofsperm motility, morphology and sperm concentration. In females, it was found the percentage of spawning,spawning weight (g), oocyte diameter (µm) and fertilization rate (%). Spawning weight and diameter of oocytesno presented significant difference (P > 0.05). Fertilization rate was observed only for CCPE and G treatmentsdid not differ (P > 0.05) between them. Females and males curimba are not different (P > 0.05) in plasma levelsof LH, FSH and estradiol before and after hormone application. In females progesterone concentration washigher (P < 0.05) before application of hormone. The gonadorelin, under the conditions applied can be used asan alternative to hormone use crude carp pituitary extract on induced curimba reproduction.

EFEITO DA PROPORÇÃO SEXUAL E DA DENSIDADE DE ESTOCAGEM SOBRE O DESEMPENHO REPRODUTIVO DO LAMBARI Astyanax altiparanae(Characiformes: Characidae) EM SISTEMA SEMI-NATURAL

Nosso objetivo foi avaliar o efeito das diferentesdensidades de estocagem e proporções sexuais sobre o desempenho reprodutivo da espécie Astyanax altiparanaeem sistema semi-natural. Foram realizados dois experimentos distintos, para o primeiro objetivo testamos quatro densidades de estocagem (3; 6; 12; 24 indivíduos) com quatro réplicas, mantendo sempre a proporção sexual de dois machos para uma fêmea. Quando o efeito da proporção sexual foi avaliado, utilizamos cinco proporções diferentes (1:1; 2:1; 3:1; 1;2; 1:3; macho: fêmea) e dois controles com três repetições, respeitando a densidade de 12 indivíduosem cada unidade experimental. Em ambos os experimentos os tratamentos foramcomparados pelo desempenho reprodutivo por meio de variáveiscomo: a sobrevivência dos reprodutores,aproporção de réplicas com desovas, o volume de desova,percentual médio de fêmeas desovadas por réplica,taxas de fertilidade eeclosão,número de embriões obtidos por tratamento, histologia dos ovários e concentrações plasmáticas dos esteroides sexuais. A densidade não influenciou de forma negativa no desempenho reprodutivo da espécie, sendo observados os melhores desempenhos para as variáveis: volume médio de desova considerando apenas as réplicas onde houve desova131,50±33,17ml e no número médio de embriões viáveis 73819,2±20462,1, nas unidades com maior densidade (24) animais. Notamos desempenhos muito semelhantes quando as diferentes proporções foram testadas, sendo a variável volume relativo de desovana qual a proporção de (3 machos: 1 fêmea) se mostrou mais eficiente que as demais 1,41±0,84ml/g. Sugerimos a utilização da densidade de 24 animais e a proporção de (3 machos: 1 fêmea) visando maior produtividade em um curto período de tempo e trabalho aliada a um menor consumo de hormônio, respeitando as condições aqui propostas.

Our objective was to evaluate the effect of different storage densitiesand sexual proportions on the reproductive performance of the species Astyanax altiparanaein a semi-natural system. Two different experiments were carried out. For the first objective, we tested four stocking densities (3; 6; 12; 24 individuals) with four replicates, always maintaining the sex ratio of two males to one female. When the sex ratio effect was evaluated, we used five different ratios (1: 1, 2: 1, 3: 1, 1, 2, 1: 3, male: female) and two controls with three replicates, respecting the density of12 individuals in each experimental unit. In both experiments the treatments were compared by reproductive performance using variables such as: reproductive survival, proportion of replicates with spawning, spawning volume, mean percentage of spawned females per replicate, fertility and hatching rates, number treatment embryos, ovarian histology, and plasma steroid plasma concentrations. The density did not negatively influence the reproductive performance of the species, with the best performances for thevariables: average spawning volume considering only spawning replicates of 131.50 ± 33.17 ml and the average number of viable embryos 73819.2 ± 20462.1, in the units with higher density (24) animals. We observed very similar performances when the different proportions were tested, being the relative variable spawning volume in which the proportion of (3 males: 1 female) was more efficient than the other 1.41 ± 0.84 ml / g. We suggest the use of the density of 24 animals and the proportion of (3 males: 1 female) aiming for a greater production in a short period of time and work combined witha lower consumption of hormone, respecting the conditions proposed here.

Terapias hormonais aplicadas à reprodução de Astyanax altiparanae (Characiformes: Characidae) em cativeiro, fora da estação reprodutiva

O lambari-do-rabo-amarelo (Astyanax altiparanae) na natureza, reproduz durante a primavera-verão, mas as fêmeas permanecem vitelogênicas ao longo de todo ano, incluindo o período de inverno, quando a desova não ocorre. O presente estudo investigou a influência da modulação da temperatura no eixo hipotálamo-hipófise-gônadas do lambari, fora da estação reprodutiva, bem como os efeitos de diferentes terapias com análogo do hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRHa). Foram conduzidos dois experimentos, um com múltiplas injeções de GnRHa e outro com implantes de GnRHa, em duas doses e duas temperaturas da água, sendo uma correspondente ao inverno e outra ao verão. No final do período experimental, as fêmeas das condições experimentais diferentes foram induzidas a desovar utilizando gonadotrofina coriônica humana (hCG). A análise dos dois experimentos em conjunto, demonstra que independente da forma de administração, a suplementação de fêmeas de A. altiparanae com GnRHa fora do período reprodutivo desencadeia alterações no eixo hipófise-gônadas, dependentes da temperatura de exposição, que aumenta a viabilidade na produção de larvas desta espécie. As injeções repetidas desencadearam uma resposta mais evidente na hipófise de animais em baixas temperaturas. Os dados dos índices de desempenho na reprodução induzida mostraram que a administração de GnRHa na forma de injeções também foi mais eficiente na produção de larvas, quando mantidos em temperaturas mais elevadas, enquanto o GnRHa na forma de implante resultou em maior produção estimada de larvas em temperaturas mais baixas

The lambari-do-rabo-amarelo (Astyanax altiparanae) in the wild reproduce during spring and summer, but females remain vitellogenic throughout the year, including the winter period, when spawning does not occur. The present study investigated the influence of temperature modulation on the hypothalamic-pituitary-gonad axis of the lambari in non-breeding season, as well as the effects of different therapies with gonadotropin releasing hormone analog (GnRHa). Two experiments were conducted, one with multiple injections of GnRHa and the other with GnRHa implants, in two doses and two water temperatures, one corresponding to winter and another of summer. At the end of the experimental period, females from different experimental conditions were induced to spawn using human chorionic gonadotrophin (hCG). The analysis of the two experiments shows that regardless of the administration form, the supplementation of GnRHa in A. altiparanae females, in non-breeding period, triggers alterations in the pituitary-gonadal axis, depending on the exposure temperature, increasing the viability in the production of larvae of this species. Repeated injections elicited a more evident response in the pituitary gland at low temperatures. The performance data on induced reproduction showed that the administration of GnRHa in the form of injections was more efficient in larvae production, when kept at higher temperatures, while GnRHa implants resulted in higher estimated larval production at lower temperatures.

ESTERÓIDES SEXUAIS EM PIRACANJUBA (Brycon orbignyanus)

O objetivo, deste estudo foi investigar o comportamento dos hormônios esteróides 17-Estradiol (E2), 17-hidroxiprogesterona (17-OHP), Testosterona (T) e 11-Ketotestosterona (11-KT), em piracanjuba Brycon orbignyanus de diferentes sexos e idades, na estação reprodutiva, e nas fêmeas submetidas à reprodução induzida. Os animais utilizados no trabalho, eram criados em piscicultura comercial, mantidos em 3 viveiros, separados por lotes de diferentes idades. A coleta dos animais, consistiu de quatro machos e cinco fêmeas (48 meses), identificados através do dimorfismo sexual da espécie, e as demais idades, (12 e 24 meses), coletaram-se, 20 peixes de cada idade, para identificação do sexo através de histologia. Já o experimento de caracterização dos esteróides sexuais na reprodução induzida, foram coletadas cinco fêmeas, selecionadas através das características com: abdome abaulado, papila urogenital, saliente e avermelhada. Após captura, os peixes foram transportados ao laboratório, onde houve coleta de sangue, para quantificação do perfil plasmático de E2, 17-OHP, T e 11-KT. Posteriormente, os animais foram abatidos e suas gônadas coletadas e fixadas, a fim de que fosse realizada análise histológica para identificação do sexo. Na reprodução induzida, foi coletado sangue em dois momentos: pré-indução (PI) e pós-extrusão (PE). O nível plasmático de E2 nos machos de 12 meses destaca sua ação no processo de proliferação e renovação das espermatogônia observado em machos imaturos. Nas fêmeas o E2 apresentou os maiores níveis (P<0,05) nos animais de 48 meses, confirmando assim, sua principal função na estimulação do processo de vitelogênese, e maturação final do oócito. Quanto aos andrógenos T e 11-KT, os maiores níveis (p<0,05) foram observados nos peixes adultos (48 meses), permitindo afirmar que estes atuam como feedback negativo, do FSH e feedback positivo do LH, fundamental no processo de maturação final e liberação dos gametas, além de regular o comportamento reprodutivo. O resultado da 17-OHP, sugere que, nas idades estudadas, é indispensável por participar como precursor dos principais esteróides (T, E2 e 11-KT), além da 17,20 dihydroxy-4-pregnen-3-one (17,20-DHP), essencial no estágio final de maturação, e desova na reprodução induzida.

The objective of this study was to investigate the physiological behavior of steroid hormones 17-Estradiol (E2), 17-hydroxyprogesterone (17-OHP), testosterone (T) and 11-Ketotestosterone (11-KT) in Brycon orbignyanus with different sex and ages on the reproductive season and in females submitted to induced reproduction. The animals used in the study were kept in three ponds on a commercial fish farming, separated by lots with different ages. The sampling of animals consisted of the collection of four males and five females (48 months) identified by the sexual dimorphism of the specie. In the other groups (12 and 24 months), 20 fish of each age were collected for identification of sex through histology. In the experiment with characterization of the sexual steroids in the induced reproduction, were collected five females selected through the following characteristics: bulging abdomen and prominent reddish genital papilla. After capture, the fish were transported to the laboratory, where blood was collected for quantification of the plasma profile of E2, 17-OHP, T and 11-KT. Subsequently, the animals were slaughtered and their gonads were collected and fixed for histological analysis. In the induced females, blood was collected at two moments: pre-induction (PI) and post-extrusion (PE). The plasma profile of E2 is fundamental in immature males, highlighting its action in the process of proliferation and renewal of spermatogonia, observed in males of 12 months. In females E2 presented the highest levels (P <0.05) in animals at 48 months, thus confirming its main function in the stimulation of the vitellogenesis process and final oocyte maturation. The highest levels (p <0.05) of T and 11-KT androgens were observed in adult fish (48 months), allowing to affirm that they are acting as FSH negative feedback and LH positive feedback, fundamental in the final maturation and release of the gametes, besides regulating the reproductive behavior of the fish. The results of 17-OHP suggest this hormon is fundamental in the studied ages because it is a precursor of the main steroids (T, E2 and 11-KT) and 17, 20-dihydroxy-4-pregnen-3-one (17, 20-DHP), essential in the final stage of maturation and spawning in induced reproduction.

Early ontogeny of Clarias gariepinus (Siluriformes, Clariidae) and aspects of its invasion potential in natural freshwater environments / Ontogenia inicial de Clarias gariepinus (Siluriformes, Clariidae) e aspectos de seu potencial de invasão em ambientes de água doce natural

This study aimed to describe the early development of Clarias gariepinus, a species that has been introduced into various watersheds worldwide, in order to help the identification of its eggs, larvae and juveniles in natural environments. The material used was obtained via induced spawning during 1999. After spawning, the periodicity of sampling varied according to ontogenic development. We analyzed 12 eggs, 146 larvae and 6 juveniles. Newly fertilized eggs are spherical, with a double membrane, the density of which varies. Initially the larvae have little pigmentation but this intensifies during development. They have four pairs of well-developed barbels, an elongated body, long dorsal and anal fins, no adipose fin and vesicles surrounding the finfold and barbels. The sequence of formation of the fins is: caudal, dorsal, anal, pectoral and pelvic. Growth pattern analysis revealed that metamorphosis usually occurs during the flexion stage. The reproductive performance of the species and its rapid early development favor aquaculture; however, they may also favor its invasion of natural environments, representing a threat for native populations.(AU)

Este trabalho teve como objetivo descrever o desenvolvimento inicial de Clarias gariepinus, uma espécie introduzida em várias bacias hidrográficas do mundo, a fim de auxiliar na identificação de seus ovos, larvas e juvenis em ambientes naturais. O material utilizado foi obtido por meio de desova induzida durante o ano de 1999. Após a desova, a periodicidade na obtenção das amostras variou de acordo com o desenvolvimento ontogênico. Foram analisados 12 ovos e 146 larvas e 6 juvenis. Os ovos recém-fecundados apresentam forma esférica, com membrana dupla, sendo que sua densidade difere ao longo da membrana. As larvas possuem inicialmente pigmentação escassa, que se intensifica ao longo do desenvolvimento; quatro pares de barbilhões bem desenvolvidos; corpo alongado; nadadeiras dorsal e anal longas; ausência de nadadeira adiposa e presença de vesículas circundando a membrana embrionária e os barbilhões. A sequência de formação das nadadeiras é: caudal, dorsal, anal, peitoral e pélvica. A análise do padrão de crescimento revelou que a maior parte da metamorfose ocorre no estágio de flexão. O desempenho reprodutivo da espécie e seu rápido desenvolvimento inicial se enquadram positivamente à aquicultura, porém, podem ser altamente favoráveis à invasão de ambientes naturais, representando um risco para as populações nativas.(AU)

Induced spawning and reproductive variables of the catfish Lophiosilurus alexandri Steindachner, 1876 (Siluriformes: Pseudopimelodidae)

Lophiosilurus alexandri is an endemic fish from the São Francisco River basin, Brazil. The aim of this study was to induce L. alexandri to spawn and to obtain data on several reproductive variables for this species. For induced spawning, adults were submitted to Cyprinus carpio pituitary homogenate (CPH). Nine of the 12 females (75%) responded positively to the treatment. The stripping of oocytes was performed 8.4 h after the second dose of CPH with the water temperature maintained at 26ºC. The number of stripped oocytes per gram of ova was 74 ± 5 oocytes g-1, and the mean oocyte diameter was 3.1 ± 0.2 and 3.6 ± 0.2 mm, before and after hydration, respectively. The oocytes were opaque, yellowish, demersal, highly adhesive, and covered by a gelatinous coat. The total fecundity was 4,534 ± 671 oocytes, and the fertilization rate was 59%. The initial and final fertilities were 2,631 ± 740 and 1,542 ± 416 embryos, respectively. Larval hatching occurred up to 56 h after fertilization, and the larvae had a total length of 8.4 ± 0.1 mm. This work provides important biological information for L. alexandri that can be used for management and conservation of this species.(AU)

Lophiosilurus alexandri é um peixe endêmico da bacia do rio São Francisco, Brasil. O objetivo do trabalho foi induzir L. alexandri à desova e obter dados sobre várias variáveis reprodutivas para esta espécie. Para desova induzida, adultos foram submetidos ao homogeneizado de hipófise de Cyprinus carpio (HHC). Nove das 12 fêmeas (75%) responderam positivamente ao tratamento. A extrusão dos ovócitos aconteceu 8,4 h após a segunda dose de HHC com a temperatura da água mantida a 26ºC. O número de ovócitos liberados por grama de ova foi de 74 ± 5 ovócitos g-1 e a média do diâmetro ovocitário foi de 3,1 ± 0,2 e 3,6 ± 0,2 mm, antes e depois da hidratação, respectivamente. Os ovócitos foram opacos, amarelo-castanho, demersais, altamente adesivos e revestidos por capa gelatinosa. A fecundidade total apresentou 4.534 ± 671 ovócitos e a taxa de fertilização foi de 59%. As fertilidades inicial e final foram de 2.631 ± 740 e 1.542 ± 416 embriões, respectivamente. A eclosão das larvas aconteceu até 56 h após a fertilização e as larvas tiveram comprimento total de 8,4 ± 0,1 mm. Este trabalho fornece informações biológicas importantes para L. alexandri, que podem ser utilizadas para o manejo e conservação desta espécie.(AU)