Chemical composition and biological activities of essential oil from flowers of Psidium guajava (Myrtaceae) / Composição química e atividades biológicas do óleo essencial das flores de Psidium guajava (Myrtaceae)

Xylella fastidiosa is a plant-pathogenic bacterium that lives inside host xylem vessels, where it forms biofilm which is believed to be responsible for disrupting the passage of water and nutrients. Pectobacterium carotovorum is a Gram-negative plant-specific bacterium that causes not only soft rot in various plant hosts, but also blackleg in potato by plant cell wall degradation. Chagas disease, which is caused by Trypanosoma cruzi, has been commonly treated with nifurtimox and benzonidazole, two drugs that cause several side effects. As a result, the use of natural products for treating bacterial and neglected diseases has increased in recent years and plants have become a promising alternative to developing new medicines. Therefore, this study aimed to determine, for the first time, the chemical composition of essential oil from Psidium guajava flowers (PG-EO) and to evaluate its in vitro anti-Xylella fastidiosa, anti-Pectobacterium carotovorum, anti-Trypanosoma cruzi and cytotoxic activities. PG-EO was obtained by hydrodistillation in a Clevenger apparatus while its chemical composition was determined by gas chromatography-flame ionization detection (GC-FID) and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Major compounds identified in PG-EO were alpha-cadinol (37.8%), beta-caryophyllene (12.2%), nerolidol (9.1%), alpha-selinene (8.8%), beta-selinene (7.4%) and caryophyllene oxide (7.2%). Results showed that the PG-EO had strong trypanocidal activity against the trypomastigote forms of Trypanosoma cruzi (IC50 = 14.6 ug/mL), promising antibacterial activity against X. fastidiosa (MIC = 12.5 ug/mL) and P. carotovorum (MIC = 62.5 ug/mL), and moderate cytotoxicity against LLCMK2 adherent epithelial cells in the concentration range (CC50 = 250.5 ug/mL). In short, the PG-EO can be considered a new source of bioactive compounds for the development of pesticides and trypanocide drugs.(AU)

Xylella fastidiosa é uma bactéria patogênica que vive dentro dos vasos do xilema hospedeiro, onde forma um biofilme responsável por interromper a passagem de água e nutrientes. Pectobacterium carotovorum é uma bactéria Gram-negativa que causa não só podridão macia em várias plantas hospedeiras, mas também canela-preta na batata por degradação da parede celular da planta. A doença de Chagas, causada pelo Trypanosoma cruzi, é comumente tratada com nifurtimox e benzonidazol, duas drogas que causam vários efeitos colaterais. Como resultado, o uso de produtos naturais para o tratamento de doenças bacterianas e negligenciadas aumentou nos últimos anos e as plantas continuam sendo uma alternativa promissora para o desenvolvimento de novos medicamentos. Portanto, este estudo teve como objetivo determinar, pela primeira vez, a composição química do óleo essencial de flores de Psidium guajava (PG-EO) e avaliar suas propriedades anti-Xylella fastidiosa, anti-Pectobacterium carotovorum, anti-Trypanosoma cruzi e citotóxica in vitro. PG-EO foi obtido por hidrodestilação em um aparelho Clevenger, enquanto sua composição química foi determinada por cromatografia em fase gasosa com detecção por ionização por chama (CG-DIC) e por cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massa (CG-EM). Os principais compostos identificados no PG-EO foram alfa-cadinol (37,8%), beta-cariofileno (12,2%), nerolidol (9,1%), alfa-selineno (8,8%), beta-selineno (7,4%) e óxido de cariofileno (7,2%). Os resultados mostraram que o PG-EO apresentou forte atividade tripanocida contra as formas tripomastigotas de T. cruzi (CI50 = 14,6 ug/mL), promissora atividade antibacteriana contra X. fastidiosa (MIC = 12,5 ug/mL) e P. carotovorum (MIC = 62,5 ug/mL) e citotoxicidade moderada contra células epiteliais aderentes (LLCMK2) na faixa de concentração (CC50 = 250,5 ug/mL). Em suma, o PG-EO pode ser considerado uma nova fonte de compostos bioativos para o desenvolvimento de pesticidas e drogas tripanocidas.(AU)

Detection of Trypanosoma vivax in tissues of experimentally infected goats: what is the role of adipose tissue in the life cycle of this protozoon? / Detecção de Trypanosoma vivax em tecidos de caprinos experimentalmente infectados: qual é o papel do tecido adiposo no ciclo de vida desse protozoário?

Abstract Trypanosomiasis, caused by Trypanosoma vivax, is responsible for great economic losses among livestock in Africa and South America. During the life cycle of these parasites, they may present different morphological, metabolic and physiological characteristics depending on the interactions that are encountered at each point of their life cycle. Although T. vivax is frequently reported in the circulation of its mammalian hosts, it has the ability to migrate to the tissues of these individuals. However, this characteristic is poorly understood. In this context, we aimed to investigate the presence of T. vivax and the changes caused in different tissues of experimentally infected goats. Despite the animals were not perfused before tissues collection, using different approaches, we demonstrated its presence in different samples, including in the adipose tissue and skin of infected animals. In addition, a mononuclear inflammatory reaction, mostly characterized by an infiltrate of lymphocytes, plasma cells and macrophages were observed. The results highlight the possibility that, like other trypanosomatids, T. vivax may use these tissues during its life cycle. Future studies aiming to elucidate the length of time for which T. vivax remains active in these sites, and whether it uses these sites as a refuge from trypanocidal drugs, and whether it is capable of recolonizing the blood circulation, are much needed.

Resumo A tripanossomíase, causada por Trypanosoma vivax, é responsável por grandes perdas econômicas na bovinocultura da África e da América do Sul. Durante seu ciclo de vida, o parasita pode apresentar diferentes características morfológicas, metabólicas e fisiológicas em função das interações que ele encontra em cada ponto do seu ciclo. Embora o T. vivax seja reportado, frequentemente, na circulação dos seus hospedeiros mamíferos, o protozoário tem a capacidade de migrar para os tecidos desses indivíduos. Entretanto, essa característica é pobremente conhecida. Neste contexto, o objetivo foi verificar a presença, assim como as alterações causadas pelo T. vivax nos diferentes tecidos de caprinos experimentalmente infectados. Apesar dos animais não terem sido perfundidos antes da coleta dos tecidos, utilizando-se diferentes abordagens, foi evidenciada a presença do T. vivax em diferentes amostras teciduais, incluindo no tecido adiposo e pele dos animais infectados. Além disso, foi observada reação inflamatória mononuclear, caracterizada majoritariamente por infiltrado de linfócitos, plasmócitos e macrófagos. Os resultados evidenciam a possibilidade de que, assim como outros tripanossomatídeos, T. vivax pode usar esses tecidos durante o seu ciclo de vida. São necessários futuros estudos, objetivando elucidar o período em que o T. vivax permanece ativo nesses sítios, se ele utiliza esses locais como refúgio das drogas tripanocidas, e se ele é capaz de recolonizar a circulação sanguínea.

Chemical composition and biological activities of essential oil from flowers of Psidium guajava (Myrtaceae)

Abstract Xylella fastidiosa is a plant-pathogenic bacterium that lives inside host xylem vessels, where it forms biofilm which is believed to be responsible for disrupting the passage of water and nutrients. Pectobacterium carotovorum is a Gram-negative plant-specific bacterium that causes not only soft rot in various plant hosts, but also blackleg in potato by plant cell wall degradation. Chagas disease, which is caused by Trypanosoma cruzi, has been commonly treated with nifurtimox and benzonidazole, two drugs that cause several side effects. As a result, the use of natural products for treating bacterial and neglected diseases has increased in recent years and plants have become a promising alternative to developing new medicines. Therefore, this study aimed to determine, for the first time, the chemical composition of essential oil from Psidium guajava flowers (PG-EO) and to evaluate its in vitro anti-Xylella fastidiosa, anti-Pectobacterium carotovorum, anti-Trypanosoma cruzi and cytotoxic activities. PG-EO was obtained by hydrodistillation in a Clevenger apparatus while its chemical composition was determined by gas chromatography-flame ionization detection (GC-FID) and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Major compounds identified in PG-EO were -cadinol (37.8%), -caryophyllene (12.2%), nerolidol (9.1%), -selinene (8.8%), -selinene (7.4%) and caryophyllene oxide (7.2%). Results showed that the PG-EO had strong trypanocidal activity against the trypomastigote forms of Trypanosoma cruzi (IC50 = 14.6 g/mL), promising antibacterial activity against X. fastidiosa (MIC = 12.5 g/mL) and P. carotovorum (MIC = 62.5 g/mL), and moderate cytotoxicity against LLCMK2 adherent epithelial cells in the concentration range (CC50 = 250.5 g/mL). In short, the PG-EO can be considered a new source of bioactive compounds for the development of pesticides and trypanocide drugs.

Resumo Xylella fastidiosa é uma bactéria patogênica que vive dentro dos vasos do xilema hospedeiro, onde forma um biofilme responsável por interromper a passagem de água e nutrientes. Pectobacterium carotovorum é uma bactéria Gram-negativa que causa não só podridão macia em várias plantas hospedeiras, mas também canela-preta na batata por degradação da parede celular da planta. A doença de Chagas, causada pelo Trypanosoma cruzi, é comumente tratada com nifurtimox e benzonidazol, duas drogas que causam vários efeitos colaterais. Como resultado, o uso de produtos naturais para o tratamento de doenças bacterianas e negligenciadas aumentou nos últimos anos e as plantas continuam sendo uma alternativa promissora para o desenvolvimento de novos medicamentos. Portanto, este estudo teve como objetivo determinar, pela primeira vez, a composição química do óleo essencial de flores de Psidium guajava (PG-EO) e avaliar suas propriedades anti-Xylella fastidiosa, anti-Pectobacterium carotovorum, anti-Trypanosoma cruzi e citotóxica in vitro. PG-EO foi obtido por hidrodestilação em um aparelho Clevenger, enquanto sua composição química foi determinada por cromatografia em fase gasosa com detecção por ionização por chama (CG-DIC) e por cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massa (CG-EM). Os principais compostos identificados no PG-EO foram -cadinol (37,8%), -cariofileno (12,2%), nerolidol (9,1%), -selineno (8,8%), -selineno (7,4%) e óxido de cariofileno (7,2%). Os resultados mostraram que o PG-EO apresentou forte atividade tripanocida contra as formas tripomastigotas de T. cruzi (CI50 = 14,6 g/mL), promissora atividade antibacteriana contra X. fastidiosa (MIC = 12,5 g/mL) e P. carotovorum (MIC = 62,5 g/mL) e citotoxicidade moderada contra células epiteliais aderentes (LLCMK2) na faixa de concentração (CC50 = 250,5 g/mL). Em suma, o PG-EO pode ser considerado uma nova fonte de compostos bioativos para o desenvolvimento de pesticidas e drogas tripanocidas.

Clinical and therapeutic aspects of an outbreak of canine trypanosomiasis / Aspectos clínicos e terapêuticos de um surto de tripanossomíase canina

Trypanosomiasis caused by Trypanosoma evansi can seriously affect both domestic and wild animals. This article reports on an outbreak of canine trypanosomiasis on a farm in the Pantanal region of Brazil. The farm had 38 dogs, 20 of which died before receiving veterinary care. The remaining 18 dogs were underwent anamnesisn, clinical examination, hematological and biochemical evaluations. Blood smears and PCR analysis were performed for the diagnosis. The treatment protocols used according to the clinical recovery or parasitological cure of the dogs, using diminazene diaceturate, isometamidium chloride or quinapyramine sulfate. Post-treatment parasitological evaluation was performed by the microhematocrit technique. 7/18 dogs were PCR positive for T. evansi (confirmed by sequencing). There was clinical findings, which were consistent with both the acute and chronic stages of the disease in dogs. The infected dogs all exhibited at least one clinical sign of the disease. The hematological findings were compatible with trypanosomiasis, highlighting the hypochromic microcytic anemia as the main outcome. No treatment protocol was fully effective and the prolonged use of diminazene diaceturate caused the death of an animal. The trypanosomiasis can cause high rates of morbidity and mortality in dogs and difficulty in establishment an effective and safe therapeutic protocol.(AU)

A tripanossomíase causada por Trypanosoma evansi pode acometer gravemente os animais domésticos e selvagens. Este artigo relata um surto de tripanossomíase canina em uma fazenda na região do Pantanal, Brasil. Na fazenda havia 38 cães, 20 dos quais morreram antes de receber cuidados veterinários. Os 18 cães restantes foram submetidos a anamnese, exame clínico, avaliação hematológica e bioquímica. Esfregaços de sangue e análise da PCR foram realizados para o diagnóstico. Os protocolos de tratamento foram utilizados de acordo com a recuperação clínica ou cura parasitológica dos cães, utilizando diaceturato de diminazeno, cloreto de isometamídio ou sulfato de quinapiramina. A avaliação parasitológica pós-tratamento foi realizada pela técnica de microhematócrito. 7/18 cães foram PCR positivos para T. evansi (confirmado por sequenciamento). Os achados clínicos encontrados, foram consistentes com os estágios agudo e crônico da doença em cães. Todos os cães infectados exibiram pelo menos um sinal clínico da doença. Os achados hematológicos foram compatíveis com a tripanossomíase, destacando a anemia microcítica hipocrômica como principal consequência. Nenhum protocolo de tratamento foi totalmente eficaz e o uso prolongado de diaceturato de diminazeno causou a morte de um animal. A tripanossomíase pode causar altas taxas de morbidade e mortalidade em cães e dificultar o estabelecimento de um protocolo terapêutico eficaz e seguro.(AU)

Aspectos clínicos, epidemiológicos e diagnóstico da infecção por Trypanosoma vivax em rebanho bovino no estado do Maranhão

ABSTRACT: The objective of this study was to investigate the occurrence of trypanosomiasis in a dairy farm in municipality of Timon, State of Maranhão, Brazil. The owner reported abortus, births of weak calves, and mortality of adult animals with progressive weight loss. Visits to the property were carried out to obtain the history, realize animal examination and blood collection for the Woo test, hemograms, serological tests for trypanosomiasis, leptospirosis, and neosporosis and PCR for molecular diagnosis of Trypanosoma vivax. The identification of animals with low values in the hematocrit was the main hematological alteration identified in the herd. Two animals were positive in the Woo test and trypanosomes were visualized in blood smears, confirmed by molecular diagnosis as T. vivax. It was identified that 95.23% (40/42) of the animals with low hematocrit were serologically positive for T. vivax. The conditions identified in the property as an environment propitious to mechanical vectors, the presence of wild animals and the introduction of animals from states where trypanosomiasis outbreaks had already been reported were probably associated with the introduction and dissemination of the agent in the herd. The high number of serologically positive animals for trypanosomiasis 82.51% (151/183) shows that almost all the herd had contact with the agent. The rapid establishment of control measures, including the use of trypanocidal drugs, contributed to the control of the outbreak. The study allowed confirming the occurrence of another outbreak of trypanosomiasis in Brazil. The clinical diagnosis of the disease was difficult by the similarity of the clinical signs of trypanosomiasis with other diseases and the possibility of association of two or more diseases in the same patient, which emphasizes the importance of establishing adequate diagnostic measures as a way to avoid the dissemination of the disease and to minimize the economic losses of the producers.

RESUMO: O objetivo desse estudo foi investigar a ocorrência de tripanossomose em uma propriedade leiteira no município de Timon no estado do Maranhão, Brasil. O proprietário relatava histórico de abortos, nascimentos de crias fracas e mortalidade de animais adultos com perda progressiva de peso. Foram realizadas visitas à propriedade para obtenção do histórico, exame dos animais e coleta de sangue para realização do teste de Woo, hemogramas, testes sorológicos para pesquisa de anticorpos contra tripanossomose, leptospirose, e neosporose e PCR para diagnóstico molecular de Trypanosoma vivax. A identificação de animais com baixos valores no hematócrito foi a principal alteração hematológica identificada no rebanho. Dois animais foram positivos no teste de Woo, sendo visualizados tripanossomas em esfregaços sanguíneos, confirmados por meio de diagnóstico molecular como sendo T. vivax. Identificou-se que 95,23% (40/42) dos animais com hematócrito baixo foram sorologicamente positivos para T. vivax. As condições identificadas na propriedade, como ambiente propício aos vetores mecânicos, a presença de animais silvestres e a introdução de animais de estados onde já haviam sido registrados surtos de tripanossomose provavelmente estiveram associadas à introdução e disseminação do agente no rebanho. O elevado número de animais sorologicamente positivos para tripanossomose 82,51% (151/183) demonstra que praticamente todo o rebanho teve contato com o agente. O rápido estabelecimento das medidas de controle, entre elas a utilização das drogas tripanocidas, contribuiu para o controle do surto. O estudo permitiu comprovar a ocorrência de mais um surto de tripanossomíase tripanossomose no Brasil. O diagnóstico clínico da enfermidade foi dificultado pela semelhança dos sinais clínicos com outras enfermidades e pela possibilidade da associação de duas ou mais doenças no mesmo paciente, o que ressalta a importância do estabelecimento de medidas diagnósticas adequadas como forma de evitar a disseminação da enfermidade e minimizar as perdas econômicas dos produtores.

Aspectos clínicos, epidemiológicos e diagnóstico da infecção por Trypanosoma vivax em rebanho bovino no estado do Maranhão / Clinical and epidemiological aspects and diagnosis of Trypanosoma vivax infection in a cattle herd, state of Maranhão, Brazil

O objetivo desse estudo foi investigar a ocorrência de tripanossomose em uma propriedade leiteira no município de Timon no estado do Maranhão, Brasil. O proprietário relatava histórico de abortos, nascimentos de crias fracas e mortalidade de animais adultos com perda progressiva de peso. Foram realizadas visitas à propriedade para obtenção do histórico, exame dos animais e coleta de sangue para realização do teste de Woo, hemogramas, testes sorológicos para pesquisa de anticorpos contra tripanossomose, leptospirose, e neosporose e PCR para diagnóstico molecular de Trypanosoma vivax. A identificação de animais com baixos valores no hematócrito foi a principal alteração hematológica identificada no rebanho. Dois animais foram positivos no teste de Woo, sendo visualizados tripanossomas em esfregaços sanguíneos, confirmados por meio de diagnóstico molecular como sendo T. vivax. Identificou-se que 95,23% (40/42) dos animais com hematócrito baixo foram sorologicamente positivos para T. vivax. As condições identificadas na propriedade, como ambiente propício aos vetores mecânicos, a presença de animais silvestres e a introdução de animais de estados onde já haviam sido registrados surtos de tripanossomose provavelmente estiveram associadas à introdução e disseminação do agente no rebanho. O elevado número de animais sorologicamente positivos para tripanossomose 82,51% (151/183) demonstra que praticamente todo o rebanho teve contato com o agente. O rápido estabelecimento das medidas de controle, entre elas a utilização das drogas tripanocidas, contribuiu para o controle do surto. O estudo permitiu comprovar a ocorrência de mais um surto de tripanossomíase tripanossomose no Brasil. O diagnóstico clínico da enfermidade foi dificultado pela semelhança dos sinais clínicos com outras enfermidades e pela possibilidade da associação de duas ou mais doenças no mesmo paciente, o que ressalta a importância do estabelecimento de medidas diagnósticas...(AU)

The objective of this study was to investigate the occurrence of trypanosomiasis in a dairy farm in municipality of Timon, State of Maranhão, Brazil. The owner reported abortus, births of weak calves, and mortality of adult animals with progressive weight loss. Visits to the property were carried out to obtain the history, realize animal examination and blood collection for the Woo test, hemograms, serological tests for trypanosomiasis, leptospirosis, and neosporosis and PCR for molecular diagnosis of Trypanosoma vivax. The identification of animals with low values in the hematocrit was the main hematological alteration identified in the herd. Two animals were positive in the Woo test and trypanosomes were visualized in blood smears, confirmed by molecular diagnosis as T. vivax. It was identified that 95.23% (40/42) of the animals with low hematocrit were serologically positive for T. vivax. The conditions identified in the property as an environment propitious to mechanical vectors, the presence of wild animals and the introduction of animals from states where trypanosomiasis outbreaks had already been reported were probably associated with the introduction and dissemination of the agent in the herd. The high number of serologically positive animals for trypanosomiasis 82.51% (151/183) shows that almost all the herd had contact with the agent. The rapid establishment of control measures, including the use of trypanocidal drugs, contributed to the control of the outbreak. The study allowed confirming the occurrence of another outbreak of trypanosomiasis in Brazil. The clinical diagnosis of the disease was difficult by the similarity of the clinical signs of trypanosomiasis with other diseases and the possibility of association of two or more diseases in the same patient, which emphasizes the importance of establishing adequate diagnostic measures as a way to avoid the dissemination of the disease and to minimize the economic losses of the producers.(AU)

Aspectos clínicos, epidemiológicos e diagnóstico da infecção por Trypanosoma vivax em rebanho bovino no estado do Maranhão / Clinical and epidemiological aspects and diagnosis of Trypanosoma vivax infection in a cattle herd, state of Maranhão, Brazil

O objetivo desse estudo foi investigar a ocorrência de tripanossomose em uma propriedade leiteira no município de Timon no estado do Maranhão, Brasil. O proprietário relatava histórico de abortos, nascimentos de crias fracas e mortalidade de animais adultos com perda progressiva de peso. Foram realizadas visitas à propriedade para obtenção do histórico, exame dos animais e coleta de sangue para realização do teste de Woo, hemogramas, testes sorológicos para pesquisa de anticorpos contra tripanossomose, leptospirose, e neosporose e PCR para diagnóstico molecular de Trypanosoma vivax. A identificação de animais com baixos valores no hematócrito foi a principal alteração hematológica identificada no rebanho. Dois animais foram positivos no teste de Woo, sendo visualizados tripanossomas em esfregaços sanguíneos, confirmados por meio de diagnóstico molecular como sendo T. vivax. Identificou-se que 95,23% (40/42) dos animais com hematócrito baixo foram sorologicamente positivos para T. vivax. As condições identificadas na propriedade, como ambiente propício aos vetores mecânicos, a presença de animais silvestres e a introdução de animais de estados onde já haviam sido registrados surtos de tripanossomose provavelmente estiveram associadas à introdução e disseminação do agente no rebanho. O elevado número de animais sorologicamente positivos para tripanossomose 82,51% (151/183) demonstra que praticamente todo o rebanho teve contato com o agente. O rápido estabelecimento das medidas de controle, entre elas a utilização das drogas tripanocidas, contribuiu para o controle do surto. O estudo permitiu comprovar a ocorrência de mais um surto de tripanossomíase tripanossomose no Brasil. O diagnóstico clínico da enfermidade foi dificultado pela semelhança dos sinais clínicos com outras enfermidades e pela possibilidade da associação de duas ou mais doenças no mesmo paciente, o que ressalta a importância do estabelecimento de medidas diagnósticas adequadas como forma de evitar a disseminação da enfermidade e minimizar as perdas econômicas dos produtores.(AU)

The objective of this study was to investigate the occurrence of trypanosomiasis in a dairy farm in municipality of Timon, State of Maranhão, Brazil. The owner reported abortus, births of weak calves, and mortality of adult animals with progressive weight loss. Visits to the property were carried out to obtain the history, realize animal examination and blood collection for the Woo test, hemograms, serological tests for trypanosomiasis, leptospirosis, and neosporosis and PCR for molecular diagnosis of Trypanosoma vivax. The identification of animals with low values in the hematocrit was the main hematological alteration identified in the herd. Two animals were positive in the Woo test and trypanosomes were visualized in blood smears, confirmed by molecular diagnosis as T. vivax. It was identified that 95.23% (40/42) of the animals with low hematocrit were serologically positive for T. vivax. The conditions identified in the property as an environment propitious to mechanical vectors, the presence of wild animals and the introduction of animals from states where trypanosomiasis outbreaks had already been reported were probably associated with the introduction and dissemination of the agent in the herd. The high number of serologically positive animals for trypanosomiasis 82.51% (151/183) shows that almost all the herd had contact with the agent. The rapid establishment of control measures, including the use of trypanocidal drugs, contributed to the control of the outbreak. The study allowed confirming the occurrence of another outbreak of trypanosomiasis in Brazil. The clinical diagnosis of the disease was difficult by the similarity of the clinical signs of trypanosomiasis with other diseases and the possibility of association of two or more diseases in the same patient, which emphasizes the importance of establishing adequate diagnostic measures as a way to avoid the dissemination of the disease and to minimize the economic losses of the producers.(AU)

Chemical composition and biological activities of essential oil from flowers of Psidium guajava (Myrtaceae)

Abstract Xylella fastidiosa is a plant-pathogenic bacterium that lives inside host xylem vessels, where it forms biofilm which is believed to be responsible for disrupting the passage of water and nutrients. Pectobacterium carotovorum is a Gram-negative plant-specific bacterium that causes not only soft rot in various plant hosts, but also blackleg in potato by plant cell wall degradation. Chagas disease, which is caused by Trypanosoma cruzi, has been commonly treated with nifurtimox and benzonidazole, two drugs that cause several side effects. As a result, the use of natural products for treating bacterial and neglected diseases has increased in recent years and plants have become a promising alternative to developing new medicines. Therefore, this study aimed to determine, for the first time, the chemical composition of essential oil from Psidium guajava flowers (PG-EO) and to evaluate its in vitro anti-Xylella fastidiosa, anti-Pectobacterium carotovorum, anti-Trypanosoma cruzi and cytotoxic activities. PG-EO was obtained by hydrodistillation in a Clevenger apparatus while its chemical composition was determined by gas chromatography-flame ionization detection (GC-FID) and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Major compounds identified in PG-EO were -cadinol (37.8%), -caryophyllene (12.2%), nerolidol (9.1%), -selinene (8.8%), -selinene (7.4%) and caryophyllene oxide (7.2%). Results showed that the PG-EO had strong trypanocidal activity against the trypomastigote forms of Trypanosoma cruzi (IC50 = 14.6 g/mL), promising antibacterial activity against X. fastidiosa (MIC = 12.5 g/mL) and P. carotovorum (MIC = 62.5 g/mL), and moderate cytotoxicity against LLCMK2 adherent epithelial cells in the concentration range (CC50 = 250.5 g/mL). In short, the PG-EO can be considered a new source of bioactive compounds for the development of pesticides and trypanocide drugs.

Resumo Xylella fastidiosa é uma bactéria patogênica que vive dentro dos vasos do xilema hospedeiro, onde forma um biofilme responsável por interromper a passagem de água e nutrientes. Pectobacterium carotovorum é uma bactéria Gram-negativa que causa não só podridão macia em várias plantas hospedeiras, mas também canela-preta na batata por degradação da parede celular da planta. A doença de Chagas, causada pelo Trypanosoma cruzi, é comumente tratada com nifurtimox e benzonidazol, duas drogas que causam vários efeitos colaterais. Como resultado, o uso de produtos naturais para o tratamento de doenças bacterianas e negligenciadas aumentou nos últimos anos e as plantas continuam sendo uma alternativa promissora para o desenvolvimento de novos medicamentos. Portanto, este estudo teve como objetivo determinar, pela primeira vez, a composição química do óleo essencial de flores de Psidium guajava (PG-EO) e avaliar suas propriedades anti-Xylella fastidiosa, anti-Pectobacterium carotovorum, anti-Trypanosoma cruzi e citotóxica in vitro. PG-EO foi obtido por hidrodestilação em um aparelho Clevenger, enquanto sua composição química foi determinada por cromatografia em fase gasosa com detecção por ionização por chama (CG-DIC) e por cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massa (CG-EM). Os principais compostos identificados no PG-EO foram -cadinol (37,8%), -cariofileno (12,2%), nerolidol (9,1%), -selineno (8,8%), -selineno (7,4%) e óxido de cariofileno (7,2%). Os resultados mostraram que o PG-EO apresentou forte atividade tripanocida contra as formas tripomastigotas de T. cruzi (CI50 = 14,6 g/mL), promissora atividade antibacteriana contra X. fastidiosa (MIC = 12,5 g/mL) e P. carotovorum (MIC = 62,5 g/mL) e citotoxicidade moderada contra células epiteliais aderentes (LLCMK2) na faixa de concentração (CC50 = 250,5 g/mL). Em suma, o PG-EO pode ser considerado uma nova fonte de compostos bioativos para o desenvolvimento de pesticidas e drogas tripanocidas.

Oleanonic acid from Lippia lupulina (Verbenaceae) shows strong in vitro antileishmanial and antitrypanosomal activity / Ácido oleanônico isolado de Lippia lupulina (Verbenaceae) apresenta potentes atividades leishmanicida e tripanocida

Leishmaniasis and Chagas disease affect millions of people in tropical and subtropical regions. Drugs used currently to treat such diseases often present undesirable side effects and low efficiency. The aim of this work was to identify extracts and isolated compounds from the genus Lippia with leishmanicidal and trypanocidal activity. Fifteen extracts from different plant parts of Lippia species with partially known chemical compositions, four partition fractions, six compounds and a mixture of four interconverting flavanones previously isolated from Lippia salviaefolia and Lippia lupulina were assayed in vitro towards epimastigote forms of Trypanosoma cruzi and promastigote forms of Leishmania amazonensis. The root extract of L. lupulina had potent activity against T. cruzi and L. amazonensis (IC50 of 20.0 and 54.5 µg mL-1, respectively). The triterpenoid oleanonic acid showed the strongest activity against these protozoans (IC50 of 18.5 and 29.9 µM, respectively). Our results indicate that Lippia plants and their derivatives deserve further investigation in the search for new antiprotozoal drugs, particularly for the treatment of leishmaniasis and Chagas disease.(AU)

Leishmaniose e doença de Chagas afetam milhões de pessoas em regiões tropicais e subtropicais. As drogas atualmente usadas para tratar estas doenças frequentemente apresentam efeitos colaterais indesejáveis e baixa eficiência. Este trabalho teve como objetivo encontrar extratos, frações e compostos isolados de espécies do gênero Lippia com atividades leishmanicida e tripanocida. Quinze extratos de diferentes partes de plantas do gênero Lippia, com composições químicas parcialmente conhecidas, quatro frações de partição, seis substâncias e uma mistura de quatro flavanonas interconversíveis isolados de Lippia salviaefolia e Lippia lupulina foram testados, in vitro, frente a formas epimastigotas de Trypanosoma cruzi e promastigotas de Leishmania amazonensis. O extrato etanólico das raízes de L. lupulina apresentou atividade potente contra T. cruzi e L. amazonensis (IC50 de 20,0 e 54,5 µg mL-1, respectivamente), enquanto que o ácido oleanônico mostrou as atividades mais fortes contra estes protozoários, com IC50 de 18,5 e 29,9 µM, respectivamente. Estes resultados indicam que espécies do gênero Lippia e seus derivados merecem investigações adicionais na busca por novas terapias antiprotozoárias, especialmente para o tratamento de leishmaniose e doença de Chagas.(AU)

Oleanonic acid from Lippia lupulina (Verbenaceae) shows strong in vitro antileishmanial and antitrypanosomal activity / Ácido oleanônico isolado de Lippia lupulina (Verbenaceae) apresenta potentes atividades leishmanicida e tripanocida

Leishmaniasis and Chagas disease affect millions of people in tropical and subtropical regions. Drugs used currently to treat such diseases often present undesirable side effects and low efficiency. The aim of this work was to identify extracts and isolated compounds from the genus Lippia with leishmanicidal and trypanocidal activity. Fifteen extracts from different plant parts of Lippia species with partially known chemical compositions, four partition fractions, six compounds and a mixture of four interconverting flavanones previously isolated from Lippia salviaefolia and Lippia lupulina were assayed in vitro towards epimastigote forms of Trypanosoma cruzi and promastigote forms of Leishmania amazonensis. The root extract of L. lupulina had potent activity against T. cruzi and L. amazonensis (IC50 of 20.0 and 54.5 µg mL-1, respectively). The triterpenoid oleanonic acid showed the strongest activity against these protozoans (IC50 of 18.5 and 29.9 µM, respectively). Our results indicate that Lippia plants and their derivatives deserve further investigation in the search for new antiprotozoal drugs, particularly for the treatment of leishmaniasis and Chagas disease.

Leishmaniose e doença de Chagas afetam milhões de pessoas em regiões tropicais e subtropicais. As drogas atualmente usadas para tratar estas doenças frequentemente apresentam efeitos colaterais indesejáveis e baixa eficiência. Este trabalho teve como objetivo encontrar extratos, frações e compostos isolados de espécies do gênero Lippia com atividades leishmanicida e tripanocida. Quinze extratos de diferentes partes de plantas do gênero Lippia, com composições químicas parcialmente conhecidas, quatro frações de partição, seis substâncias e uma mistura de quatro flavanonas interconversíveis isolados de Lippia salviaefolia e Lippia lupulina foram testados, in vitro, frente a formas epimastigotas de Trypanosoma cruzi e promastigotas de Leishmania amazonensis. O extrato etanólico das raízes de L. lupulina apresentou atividade potente contra T. cruzi e L. amazonensis (IC50 de 20,0 e 54,5 µg mL-1, respectivamente), enquanto que o ácido oleanônico mostrou as atividades mais fortes contra estes protozoários, com IC50 de 18,5 e 29,9 µM, respectivamente. Estes resultados indicam que espécies do gênero Lippia e seus derivados merecem investigações adicionais na busca por novas terapias antiprotozoárias, especialmente para o tratamento de leishmaniose e doença de Chagas.

TRIAGEM E IDENTIFICAÇÃO DE COMPOSTOS PRESENTES NO PATHOGEN BOX® COM ATIVIDADE ANTI-Trypanosoma evansi

CANEVER, M. F. Triagem e Identificação de Compostos Presentes no Pathogen Box® com Atividade Anti-Trypanosoma evansi. 2018. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) - Universidade do Estado de Santa Catarina, Lages, 2018. O parasita Trypanosoma evansi, agente etiológico da surra, possui distribuição cosmopolita e apesar de ser descrito inicialmente como causador da doença em equinos, já existem relatos da infecção em inúmeras espécies domésticas e selvagens (cães, camelos, bovinos, caprinos, capivara, morcegos hematófagos, entre outros). Atualmente o tratamento e profilaxia da doença causada por T. evansi são baseados na administração de fármacos como suramina, aceturato de diminazeno, melarsomina e isometamidium. As principais limitações encontradas no uso desses fármacos estão associadas à toxicidade em algumas espécies, e relatos de cepas resistentes ao tratamento. Com o intuito de encontrar novas alternativas para tratamento de doenças negligenciadas, a Medicines for Malaria Venture desenvolveu o Pathogen Box® - um conjunto de placas contendo quatrocentos compostos distribuídos individualmente em poços. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade anti-T. evansi de compostos presentes no Pathogen Box® e identificar moléculas que poderão ser utilizadas futuramente no desenvolvimento de novos fármacos para tratamento e profilaxia da surra. Dentre os quatrocentos compostos analisados, sete (pentamidina, MMV688410, MMV687273, MMV022478, MMV688763, MMV676602 e auranofina) apresentaram atividade potencial contra T. evansi reduzindo o número de células em cultivo, sendo que dois desses (pentamidina e MMV688410) também induziram potencialmente a ocorrência de morte por necrose celular. Outros vinte e quadro compostos apresentaram ação intermediária contra T. evansi, dentre os quais, cinco são fármacos já disponíveis no mercado para tratamento de outras afecções. Utilizando dados de citoxicidade celular disponíveis na literatura e no material de apoio do Pathogen Box®, foi possível indicar o composto MMV688410 como o mais promissor para posteriores estudos de novas drogas tripanocidas. O composto MMV688410 provavelmente inibe a triapanotiona redutase, fato que explica sua baixa citotoxidade, uma vez que esse alvo é exclusivo de tripanossomatídeos, além disso induziu tanto a redução do número de parasitas em cultivo como a morte dos parasitas por necrose celular. Os resultados obtidos neste trabalho fornecem dados promissores para o estudo de novas drogas tripanocidas. Mais pesquisas são necessárias para melhor determinar a ação dos compostos encontrados contra T. evansi.

CANEVER, M. F. Screening and Identification of Compounds Present in Pathogen Box® with anti-Trypanosoma evansi Activity. 2018. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) - Universidade do Estado de Santa Catarina, Lages, 2018. The parasite Trypanosoma evansi, an etiological agent of surra, has a cosmopolitan distribution and although it is initially described as causing the disease in horses, there are reports of infection in innumerable domestic and wild species (dogs, camels, cattle, caprines, capybara, bats, among others). Currently the treatment and prophylaxis of the disease caused by T. evansi are based on the administration of drugs such as suramin, diminazene aceturate, melarsomine and isometamidium. The main limitations in the use of these drugs are associated with toxicity in some species, and reports of treatment resistant strains. In order to find new alternatives for treatment of neglected diseases, Medicines for Malaria Venture developed the Pathogen Box® - a set of plates containing four hundred compounds distributed individually in wells. The objective of this work was to evaluate the anti-T. evansi activity of compounds present in the Pathogen Box® and to identify molecules that could be used in the future in the development of new drugs for treatment and prophylaxis of surra. Among the four hundred compounds analyzed, seven (pentamidine, MMV688410, MMV687273, MMV022478, MMV688763, MMV676602 and auranofin) showed potential activity against T. evansi, reducing the number of cells in culture, two of which (pentamidine and MMV688410) also potentially induced occurrence of death by cellular necrosis. Twenty other compounds showed intermediate action against T. evansi, of which five are drugs already available in the market for treatment of other conditions. Using cell cytotoxicity data available in the literature and in Pathogen Box® support material, it was possible to indicate compound MMV688410 as the most promising for further studies of novel trypanocidal drugs. The compound MMV688410 probably inhibits triapanoethione reductase, which explains its low cytotoxicity, since this target is unique to trypanosomatids, in addition it induced both the reduction of the number of parasites in culture and the death of the parasites by cellular necrosis. The results obtained in this work provide promising data for the development of new trypanocidal drugs, but more studies are needed to better determine the action of the compounds found against T. evansi.

UTILIZAÇÃO DA LAMP PARA DIAGNÓSTICO E AVALIAÇÃO DA EFICÁCIA TERAPÊUTICA DO CLORIDRATO DE ISOMETAMIDIUM EM BOVINOS NATURALMENTE INFECTADOS COM Trypanosoma vivax

Tripanossomíases são doenças causadas por agentes do gênero Trypanosoma, que infectam humanos, animais domésticos e silvestres nos continentes Africano, Asiático, Américas do Sul e Central. Os sinais clínicos da enfermidade, como anemia e emagrecimento, são genéricos e também devido à presença de intervalos aparasitêmicos, o diagnóstico da doença torna-se desafiador. Quimioterápicos como aceturato de diminazeno (AD) e cloridrato de isometamidium (ISM) estão disponíveis para o tratamento da doença no Brasil, muito embora existam relatos e indícios de resistência aos princípios. Este trabalho teve como objetivo utilizar a amplificação circular isotérmica do DNA (LAMP) no diagnóstico e avaliar a cura parasitológica de bovinos naturalmente infectados por Trypanosoma vivax após o tratamento com ISM. Foram utilizados 30 bovinos naturalmente infectados com T. vivax, que foram tratados com duas aplicações de ISM, na dosagem de 1,0 mg/Kg por via intramuscular profunda nos dias 0 e 150. Amostras de sangue e soro colhidas nos 0, 7, 15, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210 e 240 dias após o tratamento, foram submetidas ao diagnóstico de T. vivax pelas técnicas da reação em cadeia da polimerase (PCR) objetivando o gene alvo CatL-Like, LAMP visando o gene alvo DNA satélite e ensaio de imunoabsorção enzimático (ELISA) com antígeno bruto solúvel de T. vivax. Também, foi realizada uma PCR adicional para diagnóstico de infecção por T. theileri direcionado ao gene CATL. Houve persistência na detecção de DNA de T. vivax na PCR e LAMP bem como detecção contínua de anticorpos anti-T. vivax pelo método de ELISA após o tratamento instituído, sugerindo a presença de resistência do parasita ao ISM. Todas as amostras testadas para o diagnóstico de T. theileri pela PCR foram negativas.A LAMP se mostrou de grande utilidade no diagnóstico de animais naturalmente infectados, porém a combinação dos testes LAMP e ELISA podem evitar falsos diagnósticos, contribuindo para um melhor controle da doença. Os dados indicam que a PCR não é indicada para diagnóstico de T. vivax em animais apresentando baixa parasitemia, sendo, portanto não recomendada para promover o acompanhamento de animais após o tratamento com drogas tripanocidas.

Trypanosomiasis is disease caused by agents of the Trypanosoma genus, which infect humans, domestic and wild animals on the African, Asian, South and Central Americans continents. The clinical signs of the disease, such as anemia and weight loss, are generic and also due to the presence of parasitic intervals, the diagnosis of the disease becomes challenging. Chemotherapics such as diminazineaceturate(AD) and isomethemidumhydrochloride (ISM) are available for the treatment of the disease in Brazil, although there are reports and indications of resistance to the principles. This work aimed to use loop-mediated isothermal amplification (LAMP) in the diagnosis and to evaluate the parasitological cure of cattle naturally infected by Trypanosomavivax after treatment with ISM. Thirty bovines naturally infected with T. vivax were treated with two ISM applications at a dose of 1.0 mg / kg intramuscularly on days 0 and 150. Blood and serum samples were collected on 0, 7, 15, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210 and 240 days after treatment and were submitted to T. vivax diagnosis by polymerase chain reaction (PCR) targeting the CatL-Like, LAMP targeting the satellite DNA geneand enzyme immunoabsorption assay (ELISA) with soluble T. vivax antigen. Also, an additional PCR for diagnosis of T. theileri infection directed to the CATL gene was performed. There was persistence in the detection of T. vivax DNA in PCR and LAMP as well as continuous detection of anti-T. vivax antibodies by the ELISA method after the treatment, suggesting the presence of resistance of the parasite to the ISM.All samples tested for the diagnosis of T. theileri by PCR were negative. LAMP proved to be very useful in the diagnosis of naturally infected animals, but the combination of the LAMP and ELISA tests can avoid false diagnoses, contributing to a better control of the disease. The data indicate that PCR is not indicated for diagnosis in animals with low parasitemia, therefore is not recommended to promote the follow-up of animals after treatment with trypanocidal drugs.

ASPECTOS CLÍNICO-EPIDEMIOLÓGICOS, DIAGNÓSTICO E CONTROLE DA INFECÇÃO POR Trypanosoma vivax EM REBANHO BOVINO NO ESTADO DO MARANHÃO

O objetivo desse estudo foi investigar a ocorrência de tripanossomíase em uma propriedade leiteira no município de Timon no estado do Maranhão, Brasil. O proprietário relatava histórico de abortos, nascimentos de crias fracas e mortalidade de animais adultos com perda progressiva de peso. Foram realizadas visitas à propriedade para obtenção do histórico, exame dos animais e coleta de sangue para realização do teste de Woo, hemogramas, testes sorológicos para pesquisa de anticorpos contra tripanossomíase, leptospirose, e neosporose e PCR para diagnóstico molecular de Trypanosoma vivax. A identificação de animais com baixos valores no hematócrito foi a principal alteração hematológica identificada no rebanho. Dois animais foram positivos no teste de Woo, sendo visualizados tripanossomas em esfregaços sanguíneos, confirmados por meio de diagnóstico molecular como sendo T. vivax. Identificou-se que 95,23% (40/42) dos animais com hematócrito baixo foram sorologicamente positivos para T. vivax. As condições identificadas na propriedade, como ambiente propício aos vetores mecânicos, a presença de animais silvestres e a introdução de animais de estados onde já haviam sido registrados surtos de tripanossomíase provavelmente estiveram associadas à introdução e disseminação do agente no rebanho. O elevado número de animais sorologicamente positivos para tripanossomíase 82,51% (151/183) demonstra que praticamente todo o rebanho teve contato com o agente. O rápido estabelecimento das medidas de controle, entre elas a utilização das drogas tripanocidas, contribuiu para o controle do surto. O estudo permitiu comprovar a ocorrência do primeiro surto de tripanossomíase no Maranhão, Brasil. O diagnóstico clínico da enfermidade foi dificultado pela semelhança dos sinais clínicos com outras enfermidades e pela possibilidade da associação de duas ou mais doenças no mesmo paciente, o que ressalta a importância do estabelecimento de medidas diagnósticas adequadas como forma de evitar a disseminação da enfermidade e minimizar as perdas econômicas dos produtores.

In the state of Maranhão, breeding cattle is important in the region's economy and is growing, but in properties in the municipality of Timon there are reports that some animals present clinical signs suggestive of trypanosomiasis. The objective of this study was to investigate the occurrence of trypanosomiasis in a dairy farm in this municipality Of Timon, state of Maranhão. The owner reported abortus, births of weak calves, and mortality of adult animals with progressive weight loss. Visits to the property were carried out to obtain the history, realize animal examination and blood collection for the Woo test, hemograms, serological tests for trypanosomiasis, leptospirosis, and neosporosis and PCR for molecular diagnosis of T. vivax. The identification of animals with low values in the hematocrit was the main hematological alteration identified in the herd. Two animals were positive in the Woo test, and trypanosomes were visualized in blood smears, confirmed by molecular diagnosis as T. vivax. It was identified that 95.23% (40/42) of the animals with low hematocrit were serologically positive for T. vivax. The conditions identified in the property as an environment propitious to mechanical vectors, the presence of wild animals and the introduction of animals from states where trypanosomiasis outbreaks had already been reported were probably associated with the introduction and dissemination of the agent in the herd. The occurrence of abortions without the manifestation of other clinical signs of trypanosomiasis suggests that these could also be associated with other diseases, such as leptospirosis, since high titers were identified in the animals tested. The high number of serologically positive animals for trypanosomiasis 82.51% (151/183) shows that almost all the herd had contact with the agent. The good nutritional status of the animals and the adoption in the herd of adequate sanitary measures probably ensured an efficient immune response at the time of initial contact of the animals with the agent, avoiding high rates of morbidity and mortality. The rapid establishment of control measures, including the use of trypanocidal drugs, contributed to the control of the outbreak. No more deaths and significant improvement was observed in the animals with symptoms of the disease. Despite the difficulty in accounting for the damages resulting from the diseases, it was observed that these were very expressive. The study allowed verifying the occurrence of the first outbreak of Trypanosoma vivax in the state of Maranhão, Brazil. The environmental condition identified in the property, associated with the intensification of animal husbandry practices, favored the occurrence of the trypanosomiasis and caused serious productive losses. The clinical diagnosis of the disease was difficult by the similarity of the clinical signs of trypanosomiasis with other diseases and the possibility of association of two or more diseases in the same patient, which emphasizes the importance of establishing adequate diagnostic measures as a way to avoid the dissemination of the disease and to minimize the economic losses of the producers.

CLONAGEM DO GENE DA PROTEÍNA DE CHOQUE TÉRMICO DE 70 kDa (HSP70) DE Trypanosoma evansi

BOAVENTURA, Bruna Larissa. CLONAGEM DO GENE DA PROTEÍNA DE CHOQUE TÉRMICO DE 70 kDa (HSP70) de Trypanosoma evansi.66f. Tripanossomoses são doenças causadas por protozoários pertencentes ao gênero Trypanosoma que podem infectar uma ampla gama de animais, inclusiveo homem. OTrypanosoma evansi é um hemoparasito que acomete várias espécies de animais, principalmente equinos, sendo responsável pela enfermidade conhecida como tripanossomose equina, tendo relato também de sua ocorrência em humanos,sendo, por tanto uma zoonose. Possui ampla distribuição geográfica, e é importante causa de prejuízos econômicos em criações de equinos. O controle do agente é feito por meio da utilização de tripanocidas, porém, ao longo dos anos têm sido descritas cepas resistentes às drogas atualmente disponíveis. As proteínas de choque térmico da família HSP 70 são componentes centrais da rede celular, auxiliando em diversas funções como dobramento de proteínas e se destacando como importantes alvos para terapias gênicas e biomarcadores por serem proteínas altamente conservadas em diversos parasitos. A realização deste trabalho teve como objetivo clonar o gene codificante para a proteína HSP70 de T. evansi (TEHSP70) e realizar estudos in silico com a proteína TEHSP70. A clonagem do gene TEHSP70 em pGEM- T easy®, foi bem sucedida e a partir do seu sequenciamento obteve-se a sequencia de nucleotídeos que, traduzida, forneceu a sequencia primária da proteína alvo TEHSP70. A sequência de TEHSP70 foi comparada com de ortólogos de genes de Trypanosomas disponíveis em banco de dados públicos e os resultados mostraram que TEHSP70 possui alta similaridade filogenética com as espécies de Trypanosomas de maior ocorrência. A análise de bioinformática realizada na HSP70 e sua co-chaperona HSP40 demonstrou que a região C-terminal da HSP70 pode atuar como um potente alvo para interrupção do ciclo biológico do parasito.O estudo de proteínas funcionais, envolvidas no metabolismo do parasito, pode servir de base para o desenvolvimento de novas drogas.

BOAVENTURA, Bruna Larissa. CLONING OF HEAT SHOCK PROTEIN HSP70 GENE IN Trypanosoma evansi. 2016. 66p. Trypanosomes are diseases caused by protozoa belonging to the genus Trypanosoma that can infect a wide range of animals, including man.Trypanosoma evansi is a hemoparasite that affects several species of animals, mainly equines, being responsible for the disease known as equine trypanosomiasis, and also reports of its occurrence in humans, being, therefore, a zoonosis.It has a wide geographical distribution, and is an important cause of economic losses in equine breeding. Control of the agent is done through the use oftrypanocides, however, over the years, resistant strains of drugs currently available have been described.The heat shock proteins of the HSP 70 family are central components of the cellular network, assisting in several functions such as protein folding and stand out as important targets for gene therapies and biomarkers because they are proteins highly conserved in several parasites.The objective of this work was to clone the gene coding for the HSP70 protein of T. evansi (TEHSP70) and to perform in silico studies with the TEHSP70 protein.Cloning of the TEHSP70 gene in pGEM-T easy® was successful and from its sequencing the nucleotide sequence was obtained which translated gave the primary sequence of the target protein TEHSP70. The sequence of TEHSP70 was compared with that of orthologs of Trypanosome genes available in public database and the results showed that TEHSP70 has high phylogenetic similarity with the most frequent species of Trypanosomes.The bioinformatics analysis performed on HSP70 and its HSP40 co-chaperone demonstrated that the C-terminal region of HSP70 may act as a potent target for disruption of the parasite's life cycle.The study of functional proteins, involved in the metabolism of the parasite, can serve as the basis for the development of new drugs.