Occurrence of Salmonella spp. in fecal samples from foals with and without diarrhea in the state of São Paulo: microbiological diagnosis, antimicrobial susceptibility profile, and molecular detection / Ocorrência de Salmonella spp. em amostras fecais de potros com e sem diarreia no estado de São Paulo: diagnóstico microbiológico, perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos e detecção molecular

ABSTRACT: The present study investigated Salmonella spp. in the feces of 200 foals up to one year of age (100 with clinical signs of diarrhea and 100 without clinical signs of diarrhea). Bacteriological culture, serotyping, antimicrobial susceptibility, and real-time PCR (qPCR SYBR® Green or a TaqMan®) for detecting the invA gene (with and without a selective pre-enrichment step in tetrathionate broth) were performed. Bacterial culture revealed 15% (n=30) of positive animals (21 animals with diarrhea and nine without diarrhea). Among the 30 isolates, 13 different serovars were identified: S. Infantis, S. Minnesota, S. I.4,5,12:i:-; S. Anatum, S. Cerro, S. Oranienburg, S. Braenderup, S. Give, S. Newport, S. IIIb 61:c:z35, S. 109:-:1.5, S. I.4.12:d:-, S. I.6.8:-:-. Multidrug resistance was found in 43.33% (n=13) of the isolates, with one isolate obtained from animals without diarrhea and 12 isolates from animals with diarrhea. All qPCR techniques used in the study classified more samples as positive for Salmonella spp. than the bacterial culture of feces. In addition, all qPCR techniques detected more positive animals in the diarrhea group than in the diarrhea-free group. The results confirm the utility of the qPCR method without the pre-enrichment step in tetrathionate as a rapid test for Salmonella spp. in carrier animals. In animals with clinical signs of diarrhea, it can be combined with bacterial culture (antimicrobial susceptibility testing and serotyping). The isolation of Salmonella spp. in nine animals without diarrhea confirms the importance of asymptomatic carrier animals in the epidemiology of the disease. The multidrug resistance observed highlights the importance of rational antimicrobial use in horses and adopting biosecurity protocols that are efficacious in controlling the spread of infections between animals and zoonotic transmission in farms.

RESUMO: O presente estudo investigou a ocorrência de Salmonella spp. em fezes de 200 potros com até um ano de idade (100 com sinais clínicos de diarreia e 100 sem sinais clínicos de diarreia), utilizando as técnicas de cultivo bacteriológico e PCR em tempo real (qPCR) pelos métodos de corante fluorescente (SYBR® Green) e sonda específica (Taqman®) para a detecção do gene invA com e sem etapa de pré-enriquecimento seletivo em caldo de tetrationato. O cultivo bacteriológico revelou 15% (n=30) de animais positivos (21 animais com diarreia e nove animais sem diarreia). Dentre esses 30 isolados, 13 sorovares diferentes foram identificados: S. Infantis, S. Minnesota, S. I.4,5,12:i:-; S. Anatum, S. Cerro, S. Oranienburg, S. Braenderup, S. Give, S. Newport, S. IIIb 61:c:z35, S. 109:-:1.5, S. I.4.12:d:-, S. I.6.8:-:-. Multirresistência foi constatada em 43,33% (n=13) dos isolados, sendo um isolado obtido de animal sem diarreia e 12 isolados de animais com diarreia. Todas as técnicas de qPCR empregadas no estudo apresentaram maior número de amostras classificadas como positivas para Salmonella spp. comparadas ao cultivo bacteriológico de fezes. Adicionalmente, em todas as técnicas de qPCR houve maior número de animais detectados como positivos no grupo de animais com diarreia em relação aos animais sem diarreia. Os resultados confirmaram a utilidade do método qPCR sem a etapa de pré-enriquecimento em tetrationato, como um teste rápido para detecção de Salmonella spp. em animais portadores ou em animais com sinais clínicos de diarreia. O cultivo bacteriológico deve ser associado para a realização do teste de sensibilidade aos antimicrobianos e sorotipificação. O isolamento de Salmonella spp. em nove animais sem diarreia, confirma a importância dos animais portadores assintomáticos na epidemiologia da doença. A multirresistência observada evidencia a importância do uso racional de antimicrobianos em equinos e a importância da adoção de protocolos de biossegurança que sejam eficazes para controlar a disseminação de infecções entre animais e a transmissão zoonótica nas fazendas.

Eficiência de diferentes protocolos para isolamento de Campylobacter jejuni de carne de frango / Efficiency of different protocols for Campylobacter jejuni isolation from poultry meat

Campylobacter jejuni é o principal causador de gastroenterite bacteriana aguda e a carne de frango é um importante veículo do agente. Entretanto, as metodologias convencionais de isolamento de Campylobacter muitas vezes não são eficientes, podendo levar a resultados errôneos. Sendo assim, este trabalho teve como objetivo avaliar diferentes métodos utilizados na detecção de C. jejuni em produtos de frango. Carne moída experimentalmente contaminada com três diferentes diluições do microrganismo foi analisada com diferentes protocolos para isolamento de C. jejuni. Foram feitas semeaduras diretamente nos ágares mCCDA, Columbia e ágar sangue, e após pré-enriquecimento nos caldos Bolton ou Brucella. As colônias características de Campylobacter foram identificadas e os resultados comparados a fim de avaliar qual o método foi mais eficaz. Os únicos protocolos em que foi possível recuperar o microrganismo de todos os testes foram aqueles em que foi utilizado o ágar mCCDA associado com o Caldo Bolton ou com o Caldo Brucella. Estes foram também os únicos protocolos que permitiram a recuperação de C. jejuni 24 horas após a contaminação experimental com inóculo igual a 100 UFC/25 g. Entretanto, o ágar mCCDA sem o uso de pré-enriquecimento apresentou desempenho insatisfatório, inferior ao dos demais protocolos. Conclui-se que ágar mCCDA com pré-enriquecimento em caldo Brucella ou em caldo Bolton foram mais eficientes para o isolamento de C. jejuni que os demais protocolos.

Campylobacter jejuni is the main cause of acute bacterial gastroenteritis, and poultry meat is an important agent vehicle. However, the conventional methods for Campylobacter isolation are often not effective and may lead to erroneous results. Thus, this study aimed to evaluate different methods to C. jejuni detection in poultry products. Ground chicken experimentally contaminated with three different dilutions of the microorganism was analyzed with different protocols to C. jejuni isolation: Seeding directly in agars mCCDA, Columbia and blood agar, and after pre-enrichment in Bolton or Brucella broth. The Campylobacter characteristic colonies were identified and compared in order to assess which method was the most effective. The only protocols in which it was possible to recover the microorganism from all the tests were those using the mCCDA agar associated with the Bolton broth or the Brucella broth. These were also the only protocols that allowed the recovery of C. jejuni 24 hours after the experimental contamination with inoculum equal to 100 CFU/25 g. However, the mCCDA agar without the use of pre-enrichment presented an unsatisfactory performance, lower than the other protocols. It is concluded that mCCDA agar with Brucella broth or with Bolton broth pre-enrichment was more efficient for the C. jejuni isolation than the other protocols.

Eficiência de diferentes protocolos para isolamento de Campylobacter jejuni de carne de frango / Efficiency of different protocols for Campylobacter jejuni isolation from poultry meat

Campylobacter jejuni é o principal causador de gastroenterite bacteriana aguda e a carne de frango é um importante veículo do agente. Entretanto, as metodologias convencionais de isolamento de Campylobacter muitas vezes não são eficientes, podendo levar a resultados errôneos. Sendo assim, este trabalho teve como objetivo avaliar diferentes métodos utilizados na detecção de C. jejuni em produtos de frango. Carne moída experimentalmente contaminada com três diferentes diluições do microrganismo foi analisada com diferentes protocolos para isolamento de C. jejuni. Foram feitas semeaduras diretamente nos ágares mCCDA, Columbia e ágar sangue, e após pré-enriquecimento nos caldos Bolton ou Brucella. As colônias características de Campylobacter foram identificadas e os resultados comparados a fim de avaliar qual o método foi mais eficaz. Os únicos protocolos em que foi possível recuperar o microrganismo de todos os testes foram aqueles em que foi utilizado o ágar mCCDA associado com o Caldo Bolton ou com o Caldo Brucella. Estes foram também os únicos protocolos que permitiram a recuperação de C. jejuni 24 horas após a contaminação experimental com inóculo igual a 100 UFC/25 g. Entretanto, o ágar mCCDA sem o uso de pré-enriquecimento apresentou desempenho insatisfatório, inferior ao dos demais protocolos. Conclui-se que ágar mCCDA com pré-enriquecimento em caldo Brucella ou em caldo Bolton foram mais eficientes para o isolamento de C. jejuni que os demais protocolos.(AU)

Campylobacter jejuni is the main cause of acute bacterial gastroenteritis, and poultry meat is an important agent vehicle. However, the conventional methods for Campylobacter isolation are often not effective and may lead to erroneous results. Thus, this study aimed to evaluate different methods to C. jejuni detection in poultry products. Ground chicken experimentally contaminated with three different dilutions of the microorganism was analyzed with different protocols to C. jejuni isolation: Seeding directly in agars mCCDA, Columbia and blood agar, and after pre-enrichment in Bolton or Brucella broth. The Campylobacter characteristic colonies were identified and compared in order to assess which method was the most effective. The only protocols in which it was possible to recover the microorganism from all the tests were those using the mCCDA agar associated with the Bolton broth or the Brucella broth. These were also the only protocols that allowed the recovery of C. jejuni 24 hours after the experimental contamination with inoculum equal to 100 CFU/25 g. However, the mCCDA agar without the use of pre-enrichment presented an unsatisfactory performance, lower than the other protocols. It is concluded that mCCDA agar with Brucella broth or with Bolton broth pre-enrichment was more efficient for the C. jejuni isolation than the other protocols.(AU)

The urban and rural capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) as reservoir of Salmonella in the western Amazon, Brazil / As capivaras urbanas e rurais (Hydrochoerus hydrochaeris) como reservatório de Salmonella no oeste da Amazônia, Brasil

The capybara (Hydrochoerus hydrochaeris) is the largest rodent in the world. In the state of Acre, Brazil, populations of capybaras have been increasing significantly. The role of capybaras in the transmission of certain bacterial zoonotic infections is not well understood, including bacteria of the genus Salmonella. Salmonella spp. generally cause enteritis or septicemia in mammals, however many mammalian species can carry the bacteria asymptomatically and shed it in their feces. To better understand the possible role of capybaras as reservoirs of Salmonella spp., we conducted a study of Salmonella within fecal samples from capybara in Acre. In a convenience sample, 54 capybaras from two urban and two rural areas of Acre were captured and kept for three to four days for sampling. None of the animals were symptomatic of any intestinal illness. Three separate fecal samples were collected from each animal, during their stays in captivity. Each sample was cultured for the presence of Salmonella spp. at the bacteriology laboratory of the Veterinary College of the Federal University of Acre. Samples were seeded in tetrationate pre-enrichment broth and in pre-enrichment broth peptone. After a 24 hour of incubation all samples were streaked on MacConkey Agar (MC) and Salmonella-Shigella Agar (SS). Suggestive colonies were submitted to biochemical analysis. Salmonella compatible colonies according to biochemical profile were submitted to serotyping (Sorokit for Salmonella - Probac do Brasil). In addition, the first sample from each of the 54 capybara was tested for Salmonella spp. using PCR targeting gene hilA. Eight (5%) of the 162 samples examined by bacterial culture were positive for Salmonella spp., while four (7%) of the 54 examined by PCR were positive. From the eight positive animals on culture, five were from urban area and three from rural area. On PCR, only one positive animal was from urban area and four were from rural area. Overall, by either test, one of the 54 animals was positive. All samples were collected in free - living animals with no apparent clinical signs of salmonellosis, indicating the potential of capybara as reservoir on this ecosystem.(AU)

A capivara (Hydrochoerus hydrochaeris) é o maior roedor do mundo. No estado do Acre, Brasil, as populações de capivaras têm aumentado significativamente. O papel das capivaras na transmissão de certas infecções zoonóticas bacterianas não é bem compreendido, incluindo as bactérias do gênero Salmonella. Salmonella spp. geralmente causam enterite ou septicemia em mamíferos, porém muitas espécies de mamíferos podem carregar a bactéria de forma assintomática e eliminá-la em suas fezes. Para entender melhor o possível papel das capivaras como reservatórios de Salmonellaspp., realizamos um estudo para identificação de Salmonella spp. em amostras fecais de capivaras no Acre. Em uma amostra de conveniência, 54 capivaras de duas áreas urbanas e duas áreas rurais do Acre foram capturadas e mantidas por três a quatro dias para amostragem. Nenhum dos animais era sintomático de qualquer doença intestinal. Três amostras fecais foram coletadas de cada animal, durante sua permanência em cativeiro. Cada amostra foi cultivada para a presença de Salmonella spp. no Laboratório de Bacteriologia Veterinária da Universidade Federal do Acre. As amostras foram semeadas em caldo de pré-enriquecimento tetrationato e em peptona de caldo de pré-enriquecimento. Após 24 horas de incubação, todas as amostras foram semeadas em ágar MacConkey (MC) e ágar Salmonella-Shigella (SS). Colônias sugestivas foram submetidas a análises bioquímicas. Colônias compatíveis com Salmonella de acordo com o perfil bioquímico foram submetidas à sorotipagem (Sorokit para Salmonella - Probac do Brasil). Além disso, a primeira amostra de cada uma das 54 capivaras foi testada para Salmonella spp. usando PCR, visando gene hilA. Oito (5%) das 162 amostras examinadas por cultura bacteriana foram positivas para Salmonella spp. Enquanto quatro (7%) das 54 examinadas pela PCR foram positivas. Dos oito animais positivos em cultura, cinco eram de área urbana e três de área rural. Na PCR, apenas um animal positivo era de área urbana e quatro de área rural. Considerando o diagnóstico conjunto por ambos os testes, PCR e cultura, um animal foi considerado positivo. Todas as amostras foram coletadas em animais livres, sem sinais clínicos aparentes de salmonelose, indicando o potencial da capivara como reservatório nesse ecossistema.(AU)

The urban and rural capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) as reservoir of Salmonella in the western Amazon, Brazil / As capivaras urbanas e rurais (Hydrochoerus hydrochaeris) como reservatório de Salmonella no oeste da Amazônia, Brasil

The capybara (Hydrochoerus hydrochaeris) is the largest rodent in the world. In the state of Acre, Brazil, populations of capybaras have been increasing significantly. The role of capybaras in the transmission of certain bacterial zoonotic infections is not well understood, including bacteria of the genus Salmonella. Salmonella spp. generally cause enteritis or septicemia in mammals, however many mammalian species can carry the bacteria asymptomatically and shed it in their feces. To better understand the possible role of capybaras as reservoirs of Salmonella spp., we conducted a study of Salmonella within fecal samples from capybara in Acre. In a convenience sample, 54 capybaras from two urban and two rural areas of Acre were captured and kept for three to four days for sampling. None of the animals were symptomatic of any intestinal illness. Three separate fecal samples were collected from each animal, during their stays in captivity. Each sample was cultured for the presence of Salmonella spp. at the bacteriology laboratory of the Veterinary College of the Federal University of Acre. Samples were seeded in tetrationate pre-enrichment broth and in pre-enrichment broth peptone. After a 24 hour of incubation all samples were streaked on MacConkey Agar (MC) and Salmonella-Shigella Agar (SS). Suggestive colonies were submitted to biochemical analysis. Salmonella compatible colonies according to biochemical profile were submitted to serotyping (Sorokit for Salmonella - Probac do Brasil). In addition, the first sample from each of the 54 capybara was tested for Salmonella spp. using PCR targeting gene hilA. Eight (5%) of the 162 samples examined by bacterial culture were positive for Salmonella spp., while four (7%) of the 54 examined by PCR were positive. From the eight positive animals on culture, five were from urban area and three from rural area. On PCR, only one positive animal was from urban area and four were from rural area. Overall, by either test, one of the 54 animals was positive. All samples were collected in free - living animals with no apparent clinical signs of salmonellosis, indicating the potential of capybara as reservoir on this ecosystem.(AU)

A capivara (Hydrochoerus hydrochaeris) é o maior roedor do mundo. No estado do Acre, Brasil, as populações de capivaras têm aumentado significativamente. O papel das capivaras na transmissão de certas infecções zoonóticas bacterianas não é bem compreendido, incluindo as bactérias do gênero Salmonella. Salmonella spp. geralmente causam enterite ou septicemia em mamíferos, porém muitas espécies de mamíferos podem carregar a bactéria de forma assintomática e eliminá-la em suas fezes. Para entender melhor o possível papel das capivaras como reservatórios de Salmonellaspp., realizamos um estudo para identificação de Salmonella spp. em amostras fecais de capivaras no Acre. Em uma amostra de conveniência, 54 capivaras de duas áreas urbanas e duas áreas rurais do Acre foram capturadas e mantidas por três a quatro dias para amostragem. Nenhum dos animais era sintomático de qualquer doença intestinal. Três amostras fecais foram coletadas de cada animal, durante sua permanência em cativeiro. Cada amostra foi cultivada para a presença de Salmonella spp. no Laboratório de Bacteriologia Veterinária da Universidade Federal do Acre. As amostras foram semeadas em caldo de pré-enriquecimento tetrationato e em peptona de caldo de pré-enriquecimento. Após 24 horas de incubação, todas as amostras foram semeadas em ágar MacConkey (MC) e ágar Salmonella-Shigella (SS). Colônias sugestivas foram submetidas a análises bioquímicas. Colônias compatíveis com Salmonella de acordo com o perfil bioquímico foram submetidas à sorotipagem (Sorokit para Salmonella - Probac do Brasil). Além disso, a primeira amostra de cada uma das 54 capivaras foi testada para Salmonella spp. usando PCR, visando gene hilA. Oito (5%) das 162 amostras examinadas por cultura bacteriana foram positivas para Salmonella spp. Enquanto quatro (7%) das 54 examinadas pela PCR foram positivas. Dos oito animais positivos em cultura, cinco eram de área urbana e três de área rural. Na PCR, apenas um animal positivo era de área urbana e quatro de área rural. Considerando o diagnóstico conjunto por ambos os testes, PCR e cultura, um animal foi considerado positivo. Todas as amostras foram coletadas em animais livres, sem sinais clínicos aparentes de salmonelose, indicando o potencial da capivara como reservatório nesse ecossistema.(AU)

Virulence factors and antimicrobial resistance profile of Escherichia coli isolated from nursery piglets and drinking water

Background: One of the most frequent health problems in the swine industry is the post-weaning diarrhea in nursery pigs, which leads to significant losses due to weight loss, dehydration, cost of medication and mortality. Escherichia coli (E. coli) is one of the main bacterial agents of the post-weaning diarrhea. To investigate the possibility of enterotoxigenic E. coli (ETEC) transmission through drinking water to nursery piglets, the objective of this study was to isolate, characterize by virulence factors, and compare the antimicrobial resistance profiles of E. coli from drinking water samples in nurseries and from rectal swabs of their piglets presenting post-weaning colibacillosis.Materials, Methods & Results: Fifteen rectal swabs from diarrheic piglets in their first three weeks after weaning and one water sample were collected from each of ten nurseries located in Rio Grande do Sul State, south of Brazil. After enrichment with a commercial broth medium, water samples were cultured in blood agar, as well as the rectal swab samples, and the characteristic colonies were identified by standard biochemical analysis. Following isolation and identification of E. coli, the colonies from water samples and their corresponding piglets’ samples were characterized by multiplex PCR in order to determine specific ETEC fimbria and toxin genes. Finally, all E. coli isolates were submitted to antimicrobial susceptibility testing. Virulence factors and antimicrobial sensitivity could then be compared between water and piglets’ samples. The difference in the antimicrobial resistance frequency for each of the sample groups were compared using the multi comparison test. E. coli was isolated in four out of the ten water samples, although none of the water samples presented ETEC virulence factors.[...]

Virulence factors and antimicrobial resistance profile of Escherichia coli isolated from nursery piglets and drinking water

Background: One of the most frequent health problems in the swine industry is the post-weaning diarrhea in nursery pigs, which leads to significant losses due to weight loss, dehydration, cost of medication and mortality. Escherichia coli (E. coli) is one of the main bacterial agents of the post-weaning diarrhea. To investigate the possibility of enterotoxigenic E. coli (ETEC) transmission through drinking water to nursery piglets, the objective of this study was to isolate, characterize by virulence factors, and compare the antimicrobial resistance profiles of E. coli from drinking water samples in nurseries and from rectal swabs of their piglets presenting post-weaning colibacillosis.Materials, Methods & Results: Fifteen rectal swabs from diarrheic piglets in their first three weeks after weaning and one water sample were collected from each of ten nurseries located in Rio Grande do Sul State, south of Brazil. After enrichment with a commercial broth medium, water samples were cultured in blood agar, as well as the rectal swab samples, and the characteristic colonies were identified by standard biochemical analysis. Following isolation and identification of E. coli, the colonies from water samples and their corresponding piglets samples were characterized by multiplex PCR in order to determine specific ETEC fimbria and toxin genes. Finally, all E. coli isolates were submitted to antimicrobial susceptibility testing. Virulence factors and antimicrobial sensitivity could then be compared between water and piglets samples. The difference in the antimicrobial resistance frequency for each of the sample groups were compared using the multi comparison test. E. coli was isolated in four out of the ten water samples, although none of the water samples presented ETEC virulence factors.[...](AU)

Identificação de Staphylococcus epidermidis em formigas (Hymenoptera: Formicidae) coletadas em uma área de alimentação no município de Guarulhos, São Paulo / Identification of Staphylococcus epidermidis on ants (Hymenoptera: Formicidae) collected in a food court in the city of Guarulhos, São Paulo

Out of the urbanization process, there was an increase in the spread of diseases carried by arthropods, and the most common are the ants. Their presence is related to its size, ease of locomotion and form of social life. Therefore, they can act as mechanical vectors of obligatory endosymbiont bacteria and pathogen ones as food contamination, and contamination of hospital environment. The purposes of this article was to isolate and identify contaminating bacteria of the genera Escherichia sp., Staphylococcus sp. and Salmonella sp. on ants workers circulating around a diner of high movement of people. Ant tracks were collected in the afternoon, sampled at four points to around the patio of the cafe. After the collection, the bacteria were identified, by growing in culture medium for enrichment and Tryptic Soy Broth - specific means. Of the four collected points around the diner, two of them showed growth of Staphylococcus epidermidis. This study identified the presence S. epidermidis on ants workers vectors in a cafeteria located in an area of great movement of persons indicating that the ants can be vectors of contamination in food trade.

Com o processo de urbanização, ocorreu aumento da disseminação de doenças veiculadas por artrópodes, sendo os mais comuns as formigas. A presença delas é mais frequente pelo seu tamanho, por sua facilidade de locomoção e por sua forma de vida social. Assim, podem atuar como vetores mecânicos de bactérias endossimbiontes e patogênicas, ocasionando contaminação em alimentos e no ambiente hospitalar. Os objetivos deste artigo foram isolar e identificar bactérias contaminantes dos gêneros Escherichia sp., Staphylococcus sp. e Salmonella sp. em formigas operárias circulantes no entorno de uma lanchonete de intenso fluxo de pessoas. Foram coletados rastros de formigas no período vespertino, amostradas em quatro pontos do pátio no entorno da lanchonete. Após a coleta, as bactérias foram identificadas por cultivo em meio de cultura Caldo Triptona de Soja para enriquecimento e meios específicos. Dos quatro pontos coletados no entorno da lanchonete, dois apresentaram crescimento de Staphylococcus epidermidis. Este estudo identificou a presença de S. epidermidis em formigas operárias em uma lanchonete localizada em uma área de grande circulação de pessoas, indicando que elas podem ser vetores de contaminação em estabelecimentos de comércio de alimentos.

Identificação de Staphylococcus epidermidis em formigas (Hymenoptera: Formicidae) coletadas em uma área de alimentação no município de Guarulhos, São Paulo / Identification of Staphylococcus epidermidis on ants (Hymenoptera: Formicidae) collected in a food court in the city of Guarulhos, São Paulo

Com o processo de urbanização, ocorreu aumento da disseminação de doenças veiculadas por artrópodes, sendo os mais comuns as formigas. A presença delas é mais frequente pelo seu tamanho, por sua facilidade de locomoção e por sua forma de vida social. Assim, podem atuar como vetores mecânicos de bactérias endossimbiontes e patogênicas, ocasionando contaminação em alimentos e no ambiente hospitalar. Os objetivos deste artigo foram isolar e identificar bactérias contaminantes dos gêneros Escherichia sp., Staphylococcus sp. e Salmonella sp. em formigas operárias circulantes no entorno de uma lanchonete de intenso fluxo de pessoas. Foram coletados rastros de formigas no período vespertino, amostradas em quatro pontos do pátio no entorno da lanchonete. Após a coleta, as bactérias foram identificadas por cultivo em meio de cultura Caldo Triptona de Soja para enriquecimento e meios específicos. Dos quatro pontos coletados no entorno da lanchonete, dois apresentaram crescimento de Staphylococcus epidermidis. Este estudo identificou a presença de S. epidermidis em formigas operárias em uma lanchonete localizada em uma área de grande circulação de pessoas, indicando que elas podem ser vetores de contaminação em estabelecimentos de comércio de alimentos.(AU)

Out of the urbanization process, there was an increase in the spread of diseases carried by arthropods, and the most common are the ants. Their presence is related to its size, ease of locomotion and form of social life. Therefore, they can act as mechanical vectors of obligatory endosymbiont bacteria and pathogen ones as food contamination, and contamination of hospital environment. The purposes of this article was to isolate and identify contaminating bacteria of the genera Escherichia sp., Staphylococcus sp. and Salmonella sp. on ants workers circulating around a diner of high movement of people. Ant tracks were collected in the afternoon, sampled at four points to around the patio of the cafe. After the collection, the bacteria were identified, by growing in culture medium for enrichment and Tryptic Soy Broth - specific means. Of the four collected points around the diner, two of them showed growth of Staphylococcus epidermidis. This study identified the presence S. epidermidis on ants workers vectors in a cafeteria located in an area of great movement of persons indicating that the ants can be vectors of contamination in food trade.(AU)

Identificação de Staphylococcus epidermidis em formigas (Hymenoptera: Formicidae) coletadas em uma área de alimentação no município de Guarulhos, São Paulo / Identification of Staphylococcus epidermidis on ants (Hymenoptera: Formicidae) collected in a food court in the city of Guarulhos, São Paulo

Out of the urbanization process, there was an increase in the spread of diseases carried by arthropods, and the most common are the ants. Their presence is related to its size, ease of locomotion and form of social life. Therefore, they can act as mechanical vectors of obligatory endosymbiont bacteria and pathogen ones as food contamination, and contamination of hospital environment. The purposes of this article was to isolate and identify contaminating bacteria of the genera Escherichia sp., Staphylococcus sp. and Salmonella sp. on ants workers circulating around a diner of high movement of people. Ant tracks were collected in the afternoon, sampled at four points to around the patio of the cafe. After the collection, the bacteria were identified, by growing in culture medium for enrichment and Tryptic Soy Broth - specific means. Of the four collected points around the diner, two of them showed growth of Staphylococcus epidermidis. This study identified the presence S. epidermidis on ants workers vectors in a cafeteria located in an area of great movement of persons indicating that the ants can be vectors of contamination in food trade.(AU)

Com o processo de urbanização, ocorreu aumento da disseminação de doenças veiculadas por artrópodes, sendo os mais comuns as formigas. A presença delas é mais frequente pelo seu tamanho, por sua facilidade de locomoção e por sua forma de vida social. Assim, podem atuar como vetores mecânicos de bactérias endossimbiontes e patogênicas, ocasionando contaminação em alimentos e no ambiente hospitalar. Os objetivos deste artigo foram isolar e identificar bactérias contaminantes dos gêneros Escherichia sp., Staphylococcus sp. e Salmonella sp. em formigas operárias circulantes no entorno de uma lanchonete de intenso fluxo de pessoas. Foram coletados rastros de formigas no período vespertino, amostradas em quatro pontos do pátio no entorno da lanchonete. Após a coleta, as bactérias foram identificadas por cultivo em meio de cultura Caldo Triptona de Soja para enriquecimento e meios específicos. Dos quatro pontos coletados no entorno da lanchonete, dois apresentaram crescimento de Staphylococcus epidermidis. Este estudo identificou a presença de S. epidermidis em formigas operárias em uma lanchonete localizada em uma área de grande circulação de pessoas, indicando que elas podem ser vetores de contaminação em estabelecimentos de comércio de alimentos.(AU)

Isolation and genotyping of Clostridium perfringens and Clostridium difficile in Capuchin Monkeys (Sapajus spp) / Isolamento e genotipagem de Clostridium perfringens and Clostridium difficile em macacos-prego (Sapajus spp)

The importance of Clostridium perfringens and C. difficile for most wild animal species remains unclear. This study aimed to isolate and genotype C. perfringens and C. difficile in stool samples from free-living and captive capuchin monkeys (Sapajus flavius and Sapajus libidinosus) in Brazil. Ten free-living S. flavius and 14 captive S. libidinosus were sampled for this study. To isolate C. difficile, stool samples were inoculated on plates containing cycloserine-cefoxitin fructose agar supplemented with horse blood and sodium taurocholate. Two different protocols for C. perfringens isolation were tested: direct plating onto selective agar and enrichment in brain heart infusion (BHI) broth followed by plating onto selective agar. C. difficile was not detected in the present study. The results were identical for both protocols tested for isolation of C. perfringens. Four samples (16.7%) were positive for C. perfringens type A, including one sample from a free-living animal (4.2%) and three from captive animals (12.5%), meaning there was no significant difference between these two groups. C. perfringens isolates were negative for all additional virulence factors evaluated, including enterotoxin encoding-gene (cpe) and beta-2 encoding-gene (cpb2). These results suggested that C. perfringens type A is found in the microbiota of capuchin monkeys, although it is less frequent than previously reported in domestic animals.

A importância de Clostridium perfringens e C. difficile para a maioria das espécies silvestres ainda não está clara. O objetivo do presente estudo foi isolar e genotipar C. perfringens e C. difficile em amostras de fezes de macacos-prego (Sapajus flavius e Sapajus libidinosus) de vida livre e criados em cativeiros no Brasil. Dez S. flavius de vida livre e 14 S. libidinosus de cativeiro foram incluídos no presente estudo. Para isolamento de C. difficile, as amostras de fezes foram inoculadas em agar cicloserina-cefoxitina frutose, suplementado com sangue e taurocolato de sódico. Para isolamento de C. perfringens, foram testados dois protocolos: plaqueamento direto em ágar seletivo e enriquecimento em caldo seguido de plaqueamento em ágar seletivo. C difficile não foi detectado no presente estudo. Os resultados foram idênticos para ambos os protocolos testados para isolamento de C. perfringens, resultando em quatro animais (16,7%) positivos para C. perfringens tipo A. Destes, uma amostra era de um animal de vida livre (4,2%) e três de animais de cativeiro (12,5%), não havendo diferença entre esses dois grupos. Os isolados de C. perfringens foram negativos para todos os fatores de virulência adicionais avaliados, incluindo o gene codificador de enterotoxina (cpe) e o gene codificador beta-2 (cpb2). O presente estudo sugere C. perfringens tipo A como parte da microbiota de macacos-prego, embora esse agente seja menos frequente como comensal, do que relatado anteriormente, em animais domésticos.

Isolation and genotyping of Clostridium perfringens and Clostridium difficile in Capuchin Monkeys (Sapajus spp) / Isolamento e genotipagem de Clostridium perfringens and Clostridium difficile em macacos-prego (Sapajus spp)

The importance of Clostridium perfringens and C. difficile for most wild animal species remains unclear. This study aimed to isolate and genotype C. perfringens and C. difficile in stool samples from free-living and captive capuchin monkeys (Sapajus flavius and Sapajus libidinosus) in Brazil. Ten free-living S. flavius and 14 captive S. libidinosus were sampled for this study. To isolate C. difficile, stool samples were inoculated on plates containing cycloserine-cefoxitin fructose agar supplemented with horse blood and sodium taurocholate. Two different protocols for C. perfringens isolation were tested: direct plating onto selective agar and enrichment in brain heart infusion (BHI) broth followed by plating onto selective agar. C. difficile was not detected in the present study. The results were identical for both protocols tested for isolation of C. perfringens. Four samples (16.7%) were positive for C. perfringens type A, including one sample from a free-living animal (4.2%) and three from captive animals (12.5%), meaning there was no significant difference between these two groups. C. perfringens isolates were negative for all additional virulence factors evaluated, including enterotoxin encoding-gene (cpe) and beta-2 encoding-gene (cpb2). These results suggested that C. perfringens type A is found in the microbiota of capuchin monkeys, although it is less frequent than previously reported in domestic animals.(AU)

A importância de Clostridium perfringens e C. difficile para a maioria das espécies silvestres ainda não está clara. O objetivo do presente estudo foi isolar e genotipar C. perfringens e C. difficile em amostras de fezes de macacos-prego (Sapajus flavius e Sapajus libidinosus) de vida livre e criados em cativeiros no Brasil. Dez S. flavius de vida livre e 14 S. libidinosus de cativeiro foram incluídos no presente estudo. Para isolamento de C. difficile, as amostras de fezes foram inoculadas em agar cicloserina-cefoxitina frutose, suplementado com sangue e taurocolato de sódico. Para isolamento de C. perfringens, foram testados dois protocolos: plaqueamento direto em ágar seletivo e enriquecimento em caldo seguido de plaqueamento em ágar seletivo. C difficile não foi detectado no presente estudo. Os resultados foram idênticos para ambos os protocolos testados para isolamento de C. perfringens, resultando em quatro animais (16,7%) positivos para C. perfringens tipo A. Destes, uma amostra era de um animal de vida livre (4,2%) e três de animais de cativeiro (12,5%), não havendo diferença entre esses dois grupos. Os isolados de C. perfringens foram negativos para todos os fatores de virulência adicionais avaliados, incluindo o gene codificador de enterotoxina (cpe) e o gene codificador beta-2 (cpb2). O presente estudo sugere C. perfringens tipo A como parte da microbiota de macacos-prego, embora esse agente seja menos frequente como comensal, do que relatado anteriormente, em animais domésticos.(AU)

Fontes de contaminação de Yersinia enterocolitica durante a produção de leite / Contamination sources of Yersinia enterocolitica during milk production

Objetivou-se determinar as possíveis fontes de contaminação de Yersinia enterocolitica em diferentes pontos do processo de ordenha de vacas leiteiras em oito propriedades da região de Pelotas, RS, ao longo de um ano. Foram analisadas amostras de leite cru de conjunto logo após a ordenha, água de estábulo leiteiro, mão de ordenhador, balde de recolhimento do leite e insuflador de teteiras. As amostras de leite cru e água foram coletadas em frascos estéreis, e as amostras de mão, balde e teteiras com zaragatoas estéreis. As amostras de leite cru foram submetidas a um pré-enriquecimento em água peptonada, sendo posteriormente incubadas em caldo PSTA, adicionado de ampicilina. As amostras de água foram filtradas em membrana de éster de celulose e incubadas em caldo TSB. As amostras de leite após incubação em PSTA, as membranas utilizadas na filtragem da água incubadas em TSB, bem como o material de mãos, balde e teteiras coletadas nas zaragatoas, foram semeados em ágar MacConkey e incubados para a obtenção de colônias. Colônias características foram analisadas por meio de duplex PCR para confirmação da espécie. Os perfis moleculares dos isolados de Y. enterocolitica foram comparados utilizando-se a técnica de rep-PCR. Y. enterocolitica foi isolada de 9,37% das amostras de leite, 6,25% das amostras de água e 12,5% das amostras de mão. Não houve similaridade no perfil de bandas dos isolados encontrados, entretanto foi identificada a presença de cepas diferentes na mesma amostra, demonstrando uma variedade grande de cepas distribuídas no ambiente. A presença de Y. enterocolitica em leite cru no Brasil é preocupante, já que uma quantidade considerável do produto ainda é comercializada de forma clandestina, expondo o consumidor ao risco de infecção pela bactéria, ao consumi-lo sem tratamento térmico adequado.(AU)

This work was performed in order to determine the possible Yersinia enterocolitica contamination sources at different points of the dairy cows milking process in eight properties of Pelotas, RS, in a year. Raw milk samples were analyzed immediately after milking, as well as water from milking parlor, milkers' hands, milk collection bucket, and inflator liners. The samples of raw milk and water were collected in sterile bottles and hand samples, and sterile swabs were used for the buckets and liners. The raw milk samples were subjected to a pre-enrichment peptone water buffered and subsequently incubated in PSTA broth with added ampicillin. Water samples were filtered through cellulose ester membrane and incubated in TSB medium. The milk samples after incubation in PSTA, the membranes used in water filtration were incubated in TSB and the material of the hands material, bucket and liners collected in the swabs were plated on MacConkey agar to obtain colonies. Characteristics of colonies were analyzed by duplex PCR to confirm the species. The molecular profiles of Y. enterocolitica isolates were compared using rep-PCR. Y. enterocolitica was isolated from 9,37% of milk samples, 6,25% of water samples and 12,5% of hand samples. There weren't similarities in the band profile of the isolates found; however, the presence of different strains was found in the same sample, demonstrating a variety of strains distributed in the environment. The presence of Y. enterocolitica in raw milk in Brazil is dangerous, considering that the product is sold clandestinely, exposing consumers to the risk of infection by the bacterium, when consuming it without proper heat treatment.(AU)

Fontes de contaminação de Yersinia enterocolitica durante a produção de leite / Contamination sources of Yersinia enterocolitica during milk production

Objetivou-se determinar as possíveis fontes de contaminação de Yersinia enterocolitica em diferentes pontos do processo de ordenha de vacas leiteiras em oito propriedades da região de Pelotas, RS, ao longo de um ano. Foram analisadas amostras de leite cru de conjunto logo após a ordenha, água de estábulo leiteiro, mão de ordenhador, balde de recolhimento do leite e insuflador de teteiras. As amostras de leite cru e água foram coletadas em frascos estéreis, e as amostras de mão, balde e teteiras com zaragatoas estéreis. As amostras de leite cru foram submetidas a um pré-enriquecimento em água peptonada, sendo posteriormente incubadas em caldo PSTA, adicionado de ampicilina. As amostras de água foram filtradas em membrana de éster de celulose e incubadas em caldo TSB. As amostras de leite após incubação em PSTA, as membranas utilizadas na filtragem da água incubadas em TSB, bem como o material de mãos, balde e teteiras coletadas nas zaragatoas, foram semeados em ágar MacConkey e incubados para a obtenção de colônias. Colônias características foram analisadas por meio de duplex PCR para confirmação da espécie. Os perfis moleculares dos isolados de Y. enterocolitica foram comparados utilizando-se a técnica de rep-PCR. Y. enterocolitica foi isolada de 9,37% das amostras de leite, 6,25% das amostras de água e 12,5% das amostras de mão. Não houve similaridade no perfil de bandas dos isolados encontrados, entretanto foi identificada a presença de cepas diferentes na mesma amostra, demonstrando uma variedade grande de cepas distribuídas no ambiente. A presença de Y. enterocolitica em leite cru no Brasil é preocupante, já que uma quantidade considerável do produto ainda é comercializada de forma clandestina, expondo o consumidor ao risco de infecção pela bactéria, ao consumi-lo sem tratamento térmico adequado.(AU)

This work was performed in order to determine the possible Yersinia enterocolitica contamination sources at different points of the dairy cows milking process in eight properties of Pelotas, RS, in a year. Raw milk samples were analyzed immediately after milking, as well as water from milking parlor, milkers' hands, milk collection bucket, and inflator liners. The samples of raw milk and water were collected in sterile bottles and hand samples, and sterile swabs were used for the buckets and liners. The raw milk samples were subjected to a pre-enrichment peptone water buffered and subsequently incubated in PSTA broth with added ampicillin. Water samples were filtered through cellulose ester membrane and incubated in TSB medium. The milk samples after incubation in PSTA, the membranes used in water filtration were incubated in TSB and the material of the hands material, bucket and liners collected in the swabs were plated on MacConkey agar to obtain colonies. Characteristics of colonies were analyzed by duplex PCR to confirm the species. The molecular profiles of Y. enterocolitica isolates were compared using rep-PCR. Y. enterocolitica was isolated from 9,37% of milk samples, 6,25% of water samples and 12,5% of hand samples. There weren't similarities in the band profile of the isolates found; however, the presence of different strains was found in the same sample, demonstrating a variety of strains distributed in the environment. The presence of Y. enterocolitica in raw milk in Brazil is dangerous, considering that the product is sold clandestinely, exposing consumers to the risk of infection by the bacterium, when consuming it without proper heat treatment.(AU)

Pesquisa, identificação e perfil de suscetibilidade antimicrobiana de Cronobacter spp. em produtos destinados à alimentação infantil / Detection, identification and antimicrobial susceptibility profile of Cronobacter spp. in products for infant feeding

Cronobacter spp. emergiu como perigo microbiológico em fórmulas infantis desidratadas (FID), responsável por infecções graves em neonatos. Contudo, muitos pacientes não ingeriram FID, o que indica que outros alimentos podem atuar como veículo do patógeno. Os objetivos deste estudo foram pesquisar Cronobacter spp. em alimentos infantis, identificar as espécies e avaliar o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das cepas isoladas. Foram analisadas 47 amostras pré-cozidas de cereais à base de grãos, amidos de milho e farinhas lácteas. A pesquisa foi realizada com pré-enriquecimento em água peptonada tamponada, enriquecimento seletivo no Cronobacter Screening Broth, isolamento por meio de Enterobacter sakazakii Isolation Agar e identificação no Vitek 2.0. A identificação das espécies foi realizada por reação em cadeia pela polimerase com alvo nos genes rpoB e cgcA. O antibiograma foi realizado pelo método de difusão em ágar (Kirby-Bauer). Cronobacter spp. foi identificada em 11 amostras (23,4 %). Oito cepas foram identificadas como C. sakazakii (72,7 %), duas como C. malonaticus (18,2 %) e uma como C. dublinensis (9,1 %). Apenas uma cepa de C. malonaticus apresentou resistência intermediária a ciprofloxacina. Os produtos destinados à alimentação infantil avaliados podem apresentar risco, no caso destes alimentos serem ingeridos por pacientes pertencentes ao grupo de risco, como neonatos e idosos.

Cronobacter spp. emerged as a microbiological hazard in powdered infant formulas (PIF) causing severe infections in newborns. However, among these patients many of them had not ingested PIF indicating that other foods categories might be as the pathogen vehicle. This study aimed at investigating Cronobacter spp. in infant foods, identifying the species and evaluating the antimicrobial susceptibility profile of the isolated strains. Forty-seven samples of precooked grain-based cereals, corn starch and milk flours were analyzed. The microbiological analysis was performed with pre-enrichment in buffered peptone water, followed by selective-enrichment in Cronobacter Screening Broth, isolation in Enterobacter sakazakii Isolation Agar and identification in Vitek 2.0. The identification of species was performed by polymerase chain reaction targeting rpoB and cgaA genes. The antibiogram was carried out using the agar diffusion method (Kirby-Bauer). Cronobacter spp. was identified in 11 samples (23.4 %). Eight strains were identified as C. sakazakii (72.7 %), two as C. malonaticus (18.2 %) and one as C. dublinensis (9.1 %). Only one C. malonaticus strain showed an intermediate resistance to ciprofloxacin. The evaluated samples produced for infant feeding might cause hazard when ingested by patients belonging to the risk group as newborns and elderly.

Pesquisa, identificação e perfil de suscetibilidade antimicrobiana de Cronobacter spp. em produtos destinados à alimentação infantil / Detection, identification and antimicrobial susceptibility profile of Cronobacter spp. in products for infant feeding

Cronobacter spp. emergiu como perigo microbiológico em fórmulas infantis desidratadas (FID), responsável por infecções graves em neonatos. Contudo, muitos pacientes não ingeriram FID, o que indica que outros alimentos podem atuar como veículo do patógeno. Os objetivos deste estudo foram pesquisar Cronobacter spp. em alimentos infantis, identificar as espécies e avaliar o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das cepas isoladas. Foram analisadas 47 amostras pré-cozidas de cereais à base de grãos, amidos de milho e farinhas lácteas. A pesquisa foi realizada com pré-enriquecimento em água peptonada tamponada, enriquecimento seletivo no Cronobacter Screening Broth, isolamento por meio de Enterobacter sakazakii Isolation Agar e identificação no Vitek 2.0. A identificação das espécies foi realizada por reação em cadeia pela polimerase com alvo nos genes rpoB e cgcA. O antibiograma foi realizado pelo método de difusão em ágar (Kirby-Bauer). Cronobacter spp. foi identificada em 11 amostras (23,4 %). Oito cepas foram identificadas como C. sakazakii (72,7 %), duas como C. malonaticus (18,2 %) e uma como C. dublinensis (9,1 %). Apenas uma cepa de C. malonaticus apresentou resistência intermediária a ciprofloxacina. Os produtos destinados à alimentação infantil avaliados podem apresentar risco, no caso destes alimentos serem ingeridos por pacientes pertencentes ao grupo de risco, como neonatos e idosos.(AU)

Cronobacter spp. emerged as a microbiological hazard in powdered infant formulas (PIF) causing severe infections in newborns. However, among these patients many of them had not ingested PIF indicating that other foods categories might be as the pathogen vehicle. This study aimed at investigating Cronobacter spp. in infant foods, identifying the species and evaluating the antimicrobial susceptibility profile of the isolated strains. Forty-seven samples of precooked grain-based cereals, corn starch and milk flours were analyzed. The microbiological analysis was performed with pre-enrichment in buffered peptone water, followed by selective-enrichment in Cronobacter Screening Broth, isolation in Enterobacter sakazakii Isolation Agar and identification in Vitek 2.0. The identification of species was performed by polymerase chain reaction targeting rpoB and cgaA genes. The antibiogram was carried out using the agar diffusion method (Kirby-Bauer). Cronobacter spp. was identified in 11 samples (23.4 %). Eight strains were identified as C. sakazakii (72.7 %), two as C. malonaticus (18.2 %) and one as C. dublinensis (9.1 %). Only one C. malonaticus strain showed an intermediate resistance to ciprofloxacin. The evaluated samples produced for infant feeding might cause hazard when ingested by patients belonging to the risk group as newborns and elderly.(AU)

Identificação de Cronobacter spp. em queijos e perfil de suscetibilidade antimicrobiana / Identification of Cronobacter spp. in cheeses and the antimicrobial susceptibility profile

Cronobacter spp. é um patógeno oportunista que pode causar infecções em indivíduos de qualquer idade, cuja incidência é maior em neonatos, pacientes imunocomprometidos e idosos. Neste estudo Cronobacter spp. foi pesquisado em 90 amostras de queijos (30 do tipo Minas Frescal, 30 do tipo Prato e 30 do tipo Prato fatiado). As espécies isoladas foram identificadas, e foi avaliado o perfil de suscetibilidade a antimicrobianos. A pesquisa foi realizada utilizando-se pré-enriquecimento em água peptonada tamponada, enriquecimento seletivo no caldo lauril sulfato triptose contendo vancomicina, isolamento no meio Enterobacter sakazakii Isolation Agar e identificação no Vitek 2.0. As espécies foram identificadas por meio de múltipla PCR com alvo no gene cgcA. O antibiograma foi realizado pela técnica de difusão em ágar (KirbyBauer). Cronobacter spp. foi isolada em uma (1,1 %) amostra de queijo tipo Minas Frescal, identificada como C. sakazakii que apresentou sensibilidade a todos os antimicrobianos testados. Cronobacter spp. pode não representar risco à saúde dos indivíduos pelo consumo de queijos produzidos com leite pasteurizado. Entretanto, a presença de Cronobacter spp. em uma amostra de queijo demonstra falhas na produção, o que reforça a necessidade de maior adesão às Boas Práticas de Fabricação.

Cronobacter spp. is an opportunistic pathogen that may cause infections in individuals of any age, and the highest incidence occurs in neonates, immunocompromised patients and elderly persons. This study investigated Cronobacter spp. occurrence in 90 cheese samples (30 “Minas Frescal” type cheeses, 30 “Prato” type and 30 sliced “Prato” type). The isolated species were identified and the antimicrobial susceptibility profile of the isolated strains was evaluated. The microbiological assay was performed with pre-enrichment in buffered peptone water, and selective-enrichment in modified lauryl sulphate tryptose broth containing vancomycin. Isolation and identification were done in Enterobacter sakazakii Isolation Agar and in Vitek 2.0, respectively. The species identification was performed by multiple PCR targeting cgaA gene. Antibiogram was done using agar diffusion method (Kirby-Bauer). Cronobacter spp. was isolated from one (1.1 %) sample of “Minas Frescal” type cheese, identified as C. sakazakii which was sensitive to all of tested antimicrobials. Cronobacter spp. does not represent a risk to the individuals health by consuming cheeses made from pasteurized milk. However, the presence of Cronobacter spp. in one sample of analyzed cheese indicates failures in their production, reinforcing the need for following the Good Manufacturing Practices.

Identificação de Cronobacter spp. em queijos e perfil de suscetibilidade antimicrobiana / Identification of Cronobacter spp. in cheeses and the antimicrobial susceptibility profile

Cronobacter spp. é um patógeno oportunista que pode causar infecções em indivíduos de qualquer idade, cuja incidência é maior em neonatos, pacientes imunocomprometidos e idosos. Neste estudo Cronobacter spp. foi pesquisado em 90 amostras de queijos (30 do tipo Minas Frescal, 30 do tipo Prato e 30 do tipo Prato fatiado). As espécies isoladas foram identificadas, e foi avaliado o perfil de suscetibilidade a antimicrobianos. A pesquisa foi realizada utilizando-se pré-enriquecimento em água peptonada tamponada, enriquecimento seletivo no caldo lauril sulfato triptose contendo vancomicina, isolamento no meio Enterobacter sakazakii Isolation Agar e identificação no Vitek 2.0. As espécies foram identificadas por meio de múltipla PCR com alvo no gene cgcA. O antibiograma foi realizado pela técnica de difusão em ágar (KirbyBauer). Cronobacter spp. foi isolada em uma (1,1 %) amostra de queijo tipo Minas Frescal, identificada como C. sakazakii que apresentou sensibilidade a todos os antimicrobianos testados. Cronobacter spp. pode não representar risco à saúde dos indivíduos pelo consumo de queijos produzidos com leite pasteurizado. Entretanto, a presença de Cronobacter spp. em uma amostra de queijo demonstra falhas na produção, o que reforça a necessidade de maior adesão às Boas Práticas de Fabricação.(AU)

Cronobacter spp. is an opportunistic pathogen that may cause infections in individuals of any age, and the highest incidence occurs in neonates, immunocompromised patients and elderly persons. This study investigated Cronobacter spp. occurrence in 90 cheese samples (30 “Minas Frescal” type cheeses, 30 “Prato” type and 30 sliced “Prato” type). The isolated species were identified and the antimicrobial susceptibility profile of the isolated strains was evaluated. The microbiological assay was performed with pre-enrichment in buffered peptone water, and selective-enrichment in modified lauryl sulphate tryptose broth containing vancomycin. Isolation and identification were done in Enterobacter sakazakii Isolation Agar and in Vitek 2.0, respectively. The species identification was performed by multiple PCR targeting cgaA gene. Antibiogram was done using agar diffusion method (Kirby-Bauer). Cronobacter spp. was isolated from one (1.1 %) sample of “Minas Frescal” type cheese, identified as C. sakazakii which was sensitive to all of tested antimicrobials. Cronobacter spp. does not represent a risk to the individuals health by consuming cheeses made from pasteurized milk. However, the presence of Cronobacter spp. in one sample of analyzed cheese indicates failures in their production, reinforcing the need for following the Good Manufacturing Practices.(AU)

Isolation and antimicrobial resistance of Escherichia coli and Salmonella enterica subsp. enterica (O: 6, 8) in broiler chickens

Background: The third largest poultry flock in Northeast Brazil is located in Ceará State. Some pathogens are commonly disseminated in broiler chicken flocks, such as the bacteria from the Enterobacteriaceae family. Among these, some strains of Escherichia coli are frequently associated with different pathological manifestations in domestic animals, while bacteria from the genus Salmonella are considered the most frequent enteric pathogens reported causing foodborne infections in humans. Therefore, this study aimed to evaluate the prevalence and antimicrobial resistance of Salmonella sp. and Escherichia coli strains isolated from broiler chickens in the Metropolitan Region of Fortaleza city, Brazil. Materials, Methods & Results: Samples were collected from July-2014 to March-2015 in ten broiler chicken farms located in the Metropolitan Region of Fortaleza city, Brazil, with birds in pre-slaughter age. From each farm, 100 individual cloacal swabs were randomly collected from broilers independent of clinical status. Distinct methodologies were used in order to provide optimal isolation conditions for both the bacterial species. For Escherichia coli, the methodology consisted in enrichment with BHI broth, plating in EMB agar and biochemical identification, after which some isolates were maintained in nutrient agar for antimicrobial resistance evaluation. For the isolation of [...](AU)

Isolation and antimicrobial resistance of Escherichia coli and Salmonella enterica subsp. enterica (O: 6, 8) in broiler chickens

Background: The third largest poultry flock in Northeast Brazil is located in Ceará State. Some pathogens are commonly disseminated in broiler chicken flocks, such as the bacteria from the Enterobacteriaceae family. Among these, some strains of Escherichia coli are frequently associated with different pathological manifestations in domestic animals, while bacteria from the genus Salmonella are considered the most frequent enteric pathogens reported causing foodborne infections in humans. Therefore, this study aimed to evaluate the prevalence and antimicrobial resistance of Salmonella sp. and Escherichia coli strains isolated from broiler chickens in the Metropolitan Region of Fortaleza city, Brazil. Materials, Methods & Results: Samples were collected from July-2014 to March-2015 in ten broiler chicken farms located in the Metropolitan Region of Fortaleza city, Brazil, with birds in pre-slaughter age. From each farm, 100 individual cloacal swabs were randomly collected from broilers independent of clinical status. Distinct methodologies were used in order to provide optimal isolation conditions for both the bacterial species. For Escherichia coli, the methodology consisted in enrichment with BHI broth, plating in EMB agar and biochemical identification, after which some isolates were maintained in nutrient agar for antimicrobial resistance evaluation. For the isolation of [...]