Resumo
ABSTRACT: This study aimed to determine the erythrocyte phenotypes of the feline AB system and to check the presence of antigens other than those present in the feline AB system in domestic cats from Ilhéus-Itabuna microregion, Bahia, Brazil. Three-hundred feline blood samples were collected at the Veterinary Hospital of the Universidade Estadual de Santa Cruz (UESC) and in home visits to perform blood phenotyping using the tube-method testing. The reverse phenotyping was made between cats that tested phenotype B with blood samples of cats that tested phenotype A to confirm the blood phenotype B. The cross-tested among cats with phenotype A was made in order to verify the presence of different antigens of AB system in this blood phenotype. The results underwent macroscopic and microscopic analyses. Among the 300 animals tested, regarding breed, 290 were mixed-breed cats and among the remaining ten, five were Persians, four Siamese, and one Angora. 297 (99%) presented with phenotype A (including all the breeding cats) and three (1%) with phenotype B, and all this cats were mixed-breed cats. None (0%) of the cats showed the phenotype AB. All phenotype B bloods reacted to reverse phenotyping with phenotype A, confirming the phenotype B of these cats. All phenotype A bloods were compatible among each other, so no further erythrocyte antigens were detected through this test. The mother of one of the phenotype B cats was identified and had phenotype A, demonstrating phenotype A parents with phenotype B offspring. This finding indicates heterozygosis in the studied population. This data enable to conclude that the studied population presented different erythrocyte phenotypes, subsequently highlighting the importance of conducting phenotype analyses in these animals before performing blood transfusion to avoid serious hemolytic complications associated with incompatibility.
RESUMO: O objetivo deste estudo foi determinar a frequência dos fenótipos eritrocitários do sistema AB felino e verificar a presença de outros antígenos, não pertencentes ao sistema AB felino, em gatos domésticos das cidades de Ilhéus e Itabuna, Bahia, Brasil. Amostras de sangue de 300 gatos foram coletadas no Hospital Veterinário da Universidade Estadual de Santa Cruz (UESC) e em visitas domiciliares para realizar a fenotipagem sanguínea usando o método de tubo. A fenotipagem reversa foi realizada em gatos que testaram o fenótipo B com amostras que testaram o fenótipo A, para confirmação do fenótipo sanguíneo. O teste cruzado foi realizado entre gatos do fenótipo A, para pesquisar a presença de diferentes antígenos do sistema AB dentro desse fenótipo sanguíneo. Os resultados foram submetidos a análises macroscópicas e microscópicas. Dos 300 animais testados, 110 eram machos e 190 fêmeas, e suas idades variaram de cinco meses à 15 anos. Sobre as raças, 290 eram gatos sem raça definida e dos 10 restantes, cinco eram Persas, quatro eram Siameses e um Angorá. 297 (99%) apresentaram fenótipo A (incluindo todos os gatos de raça) e três (1%) tiveram fenótipo B, sendo todos esses gatos sem raça definida. Nenhum (0%) dos gatos apresentou fenótipo AB. Todos os sangues com fenótipo B reagiram na fenotipagem reversa com o fenótipo A, confirmando o fenótipo B desses gatos. Todos os sangues com fenótipo A foram compatíveis entre si, portanto nenhum antígeno eritrocitário adicional foi detectado através deste teste. A genitora de um dos gatos com fenótipo B, foi encontrada e a mesma possuía fenótipo A, demonstrando pais com fenótipo A e cria com fenótipo B. Esse achado indica heterozigose na população estudada. Esses dados levam à conclusão de que diferentes fenótipos eritrocitários estão presentes na população estudada e destacam a importância da realização de testes fenotípicos nesses animais antes dos procedimentos de transfusão, a fim de evitar complicações hemolíticas graves decorrentes do envolvimento de animais incompatíveis.
Resumo
This study aimed to determine the erythrocyte phenotypes of the feline AB system and to check the presence of antigens other than those present in the feline AB system in domestic cats from Ilhéus-Itabuna microregion, Bahia, Brazil. Three-hundred feline blood samples were collected at the Veterinary Hospital of the "Universidade Estadual de Santa Cruz" (UESC) and in home visits to perform blood phenotyping using the tube-method testing. The reverse phenotyping was made between cats that tested phenotype B with blood samples of cats that tested phenotype A to confirm the blood phenotype B. The cross-tested among cats with phenotype A was made in order to verify the presence of different antigens of AB system in this blood phenotype. The results underwent macroscopic and microscopic analyses. Among the 300 animals tested, regarding breed, 290 were mixed-breed cats and among the remaining ten, five were Persians, four Siamese, and one Angora. 297 (99%) presented with phenotype A (including all the breeding cats) and three (1%) with phenotype B, and all this cats were mixed-breed cats. None (0%) of the cats showed the phenotype AB. All phenotype B bloods reacted to reverse phenotyping with phenotype A, confirming the phenotype B of these cats. All phenotype A bloods were compatible among each other, so no further erythrocyte antigens were detected through this test. The mother of one of the phenotype B cats was identified and had phenotype A, demonstrating phenotype A parents with phenotype B offspring. This finding indicates heterozygosis in the studied population. This data enable to conclude that the studied population presented different erythrocyte phenotypes, subsequently highlighting the importance of conducting phenotype analyses in these animals before performing blood transfusion to avoid serious hemolytic complications associated with incompatibility.(AU)
O objetivo deste estudo foi determinar a frequência dos fenótipos eritrocitários do sistema AB felino e verificar a presença de outros antígenos, não pertencentes ao sistema AB felino, em gatos domésticos das cidades de Ilhéus e Itabuna, Bahia, Brasil. Amostras de sangue de 300 gatos foram coletadas no Hospital Veterinário da Universidade Estadual de Santa Cruz (UESC) e em visitas domiciliares para realizar a fenotipagem sanguínea usando o método de tubo. A fenotipagem reversa foi realizada em gatos que testaram o fenótipo B com amostras que testaram o fenótipo A, para confirmação do fenótipo sanguíneo. O teste cruzado foi realizado entre gatos do fenótipo A, para pesquisar a presença de diferentes antígenos do sistema AB dentro desse fenótipo sanguíneo. Os resultados foram submetidos a análises macroscópicas e microscópicas. Dos 300 animais testados, 110 eram machos e 190 fêmeas, e suas idades variaram de cinco meses à 15 anos. Sobre as raças, 290 eram gatos sem raça definida e dos 10 restantes, cinco eram Persas, quatro eram Siameses e um Angorá. 297 (99%) apresentaram fenótipo A (incluindo todos os gatos de raça) e três (1%) tiveram fenótipo B, sendo todos esses gatos sem raça definida. Nenhum (0%) dos gatos apresentou fenótipo AB. Todos os sangues com fenótipo B reagiram na fenotipagem reversa com o fenótipo A, confirmando o fenótipo B desses gatos. Todos os sangues com fenótipo A foram compatíveis entre si, portanto nenhum antígeno eritrocitário adicional foi detectado através deste teste. A genitora de um dos gatos com fenótipo B, foi encontrada e a mesma possuía fenótipo A, demonstrando pais com fenótipo A e cria com fenótipo B. Esse achado indica heterozigose na população estudada. Esses dados levam à conclusão de que diferentes fenótipos eritrocitários estão presentes na população estudada e destacam a importância da realização de testes fenotípicos nesses animais antes dos procedimentos de transfusão, a fim de evitar complicações hemolíticas graves decorrentes do envolvimento de animais incompatíveis.(AU)
Assuntos
Animais , Gatos , Fenótipo , Transfusão de Sangue , Eritrócitos , Isoanticorpos , Universidades , Gatos/sangueResumo
This study aimed to determine the erythrocyte phenotypes of the feline AB system and to check the presence of antigens other than those present in the feline AB system in domestic cats from Ilhéus-Itabuna microregion, Bahia, Brazil. Three-hundred feline blood samples were collected at the Veterinary Hospital of the "Universidade Estadual de Santa Cruz" (UESC) and in home visits to perform blood phenotyping using the tube-method testing. The reverse phenotyping was made between cats that tested phenotype B with blood samples of cats that tested phenotype A to confirm the blood phenotype B. The cross-tested among cats with phenotype A was made in order to verify the presence of different antigens of AB system in this blood phenotype. The results underwent macroscopic and microscopic analyses. Among the 300 animals tested, regarding breed, 290 were mixed-breed cats and among the remaining ten, five were Persians, four Siamese, and one Angora. 297 (99%) presented with phenotype A (including all the breeding cats) and three (1%) with phenotype B, and all this cats were mixed-breed cats. None (0%) of the cats showed the phenotype AB. All phenotype B bloods reacted to reverse phenotyping with phenotype A, confirming the phenotype B of these cats. All phenotype A bloods were compatible among each other, so no further erythrocyte antigens were detected through this test. The mother of one of the phenotype B cats was identified and had phenotype A, demonstrating phenotype A parents with phenotype B offspring. This finding indicates heterozygosis in the studied population. This data enable to conclude that the studied population presented different erythrocyte phenotypes, subsequently highlighting the importance of conducting phenotype analyses in these animals before performing blood transfusion to avoid serious hemolytic complications associated with incompatibility.(AU)
O objetivo deste estudo foi determinar a frequência dos fenótipos eritrocitários do sistema AB felino e verificar a presença de outros antígenos, não pertencentes ao sistema AB felino, em gatos domésticos das cidades de Ilhéus e Itabuna, Bahia, Brasil. Amostras de sangue de 300 gatos foram coletadas no Hospital Veterinário da Universidade Estadual de Santa Cruz (UESC) e em visitas domiciliares para realizar a fenotipagem sanguínea usando o método de tubo. A fenotipagem reversa foi realizada em gatos que testaram o fenótipo B com amostras que testaram o fenótipo A, para confirmação do fenótipo sanguíneo. O teste cruzado foi realizado entre gatos do fenótipo A, para pesquisar a presença de diferentes antígenos do sistema AB dentro desse fenótipo sanguíneo. Os resultados foram submetidos a análises macroscópicas e microscópicas. Dos 300 animais testados, 110 eram machos e 190 fêmeas, e suas idades variaram de cinco meses à 15 anos. Sobre as raças, 290 eram gatos sem raça definida e dos 10 restantes, cinco eram Persas, quatro eram Siameses e um Angorá. 297 (99%) apresentaram fenótipo A (incluindo todos os gatos de raça) e três (1%) tiveram fenótipo B, sendo todos esses gatos sem raça definida. Nenhum (0%) dos gatos apresentou fenótipo AB. Todos os sangues com fenótipo B reagiram na fenotipagem reversa com o fenótipo A, confirmando o fenótipo B desses gatos. Todos os sangues com fenótipo A foram compatíveis entre si, portanto nenhum antígeno eritrocitário adicional foi detectado através deste teste. A genitora de um dos gatos com fenótipo B, foi encontrada e a mesma possuía fenótipo A, demonstrando pais com fenótipo A e cria com fenótipo B. Esse achado indica heterozigose na população estudada. Esses dados levam à conclusão de que diferentes fenótipos eritrocitários estão presentes na população estudada e destacam a importância da realização de testes fenotípicos nesses animais antes dos procedimentos de transfusão, a fim de evitar complicações hemolíticas graves decorrentes do envolvimento de animais incompatíveis.(AU)
Assuntos
Animais , Gatos , Fenótipo , Transfusão de Sangue , Eritrócitos , Isoanticorpos , Universidades , Gatos/sangueResumo
This study aimed to assess Dog Erythrocyte Antigen (DEA) 1.1 in donor dogs at the Federal University of Mato Grosso, Cuiabá, Brazil, and review the relevant literature. The blood (60 samples; 1.5 mL volume, each) was collected in separate vacutainer tubes containing ethylenediaminetetraacetic acid and submitted for complete blood count; in addition, the samples were typed by RapidVet® based on agglutination due to specific interaction between DEA 1 antigen at the membrane surface of the erythrocyte and lyophilised murine monoclonal antibody on the test card. DEA1.1 positivity was observed in 81.6% (49 of 60) of test samples, while negative results were obtained in the remaining 18.3% (11 of 60). DEA 1.1 positive samples were comprised of 42.8% of purebred dogs and 38.3% of mixed breed dogs. With regard to sex in the DEA 1.1 positive group, 48.3% were male dogs and 33.3% were female dogs. The blood donor canine population showed high prevalence of DEA 1.1, which confirms that blood typing should be performed prior to blood transfusion in previously sensitised dogs.
O objetivo deste trabalho foi avaliar a ocorrência do antígeno eritrocitário DEA (Dog Erythrocyte Antigen) 1.1 nos cães doadores de sangue no Hospital Veterinário Universitário em Cuiabá, Mato Grosso, Brazil. O sangue (60 amostras; 1,5mL cada) Foram coletadas amostras de sangue de 60 cães em tubo a vácuo contendo ácido etilenodiamino tetra-acético (EDTA) para realização de hemograma; adicionalmente, foi realizada tipagem sanguínea com o kit RapidVet®, que baseia-se na aglutinação devido à interação entre os antígenos DEA 1 do antígeno eritrocitário com os anticorpos monoclonais presentes no cartão. Das amostras testadas, 81,6% (49 de 60) apresentaram positividade para DEA 1.1, enquanto que apenas 18,3%(11 de 60) foram negativas. Os cães com raça definida representaram 42,8% das amostras DEA 1.1, já os cães mestiços representaram 38,3%. Em relação ao sexo dos cães DEA 1.1, foi observada prevalência de 48,3% em machos e 33,3% em fêmeas. Este trabalho demonstrou a alta prevalência do grupo DEA 1.1 na população de cães doadores de sangue, o que ratifica a importância da tipagem sanguínea anteriormente à transfusão sanguínea em cães previamente sensibilizados.
Assuntos
Animais , Cães , Antígenos , Contagem de Células Sanguíneas/veterinária , Contagem de Eritrócitos/veterinária , Doadores de Sangue , Doenças do Cão , Tipagem e Reações Cruzadas Sanguíneas/veterinária , Transfusão de Sangue/veterináriaResumo
This study aimed to assess Dog Erythrocyte Antigen (DEA) 1.1 in donor dogs at the Federal University of Mato Grosso, Cuiabá, Brazil, and review the relevant literature. The blood (60 samples; 1.5 mL volume, each) was collected in separate vacutainer tubes containing ethylenediaminetetraacetic acid and submitted for complete blood count; in addition, the samples were typed by RapidVet® based on agglutination due to specific interaction between DEA 1 antigen at the membrane surface of the erythrocyte and lyophilised murine monoclonal antibody on the test card. DEA1.1 positivity was observed in 81.6% (49 of 60) of test samples, while negative results were obtained in the remaining 18.3% (11 of 60). DEA 1.1 positive samples were comprised of 42.8% of purebred dogs and 38.3% of mixed breed dogs. With regard to sex in the DEA 1.1 positive group, 48.3% were male dogs and 33.3% were female dogs. The blood donor canine population showed high prevalence of DEA 1.1, which confirms that blood typing should be performed prior to blood transfusion in previously sensitised dogs.(AU)
O objetivo deste trabalho foi avaliar a ocorrência do antígeno eritrocitário DEA (Dog Erythrocyte Antigen) 1.1 nos cães doadores de sangue no Hospital Veterinário Universitário em Cuiabá, Mato Grosso, Brazil. O sangue (60 amostras; 1,5mL cada) Foram coletadas amostras de sangue de 60 cães em tubo a vácuo contendo ácido etilenodiamino tetra-acético (EDTA) para realização de hemograma; adicionalmente, foi realizada tipagem sanguínea com o kit RapidVet®, que baseia-se na aglutinação devido à interação entre os antígenos DEA 1 do antígeno eritrocitário com os anticorpos monoclonais presentes no cartão. Das amostras testadas, 81,6% (49 de 60) apresentaram positividade para DEA 1.1, enquanto que apenas 18,3%(11 de 60) foram negativas. Os cães com raça definida representaram 42,8% das amostras DEA 1.1, já os cães mestiços representaram 38,3%. Em relação ao sexo dos cães DEA 1.1, foi observada prevalência de 48,3% em machos e 33,3% em fêmeas. Este trabalho demonstrou a alta prevalência do grupo DEA 1.1 na população de cães doadores de sangue, o que ratifica a importância da tipagem sanguínea anteriormente à transfusão sanguínea em cães previamente sensibilizados.(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Antígenos , Doadores de Sangue , Contagem de Eritrócitos/veterinária , Contagem de Células Sanguíneas/veterinária , Transfusão de Sangue/veterinária , Tipagem e Reações Cruzadas Sanguíneas/veterinária , Doenças do CãoResumo
A imunohematologia veterinária vem ganhando interesse nos últimos anos devido a maior acessibilidade a tecnologias de detecção de antígenos e anticorpos, interesse dos donos e médicos veterinários em buscar uma melhor qualidade de vida para os animais e as necessidades de transfusões com o menor índice possível de reações indesejadas. Os cães possuem antígenos presentes na membrana de suas células vermelhas, podendo causar reações durante e após transfusões. Diferentemente de humanos e felinos, cães não possuem anticorpos naturais para os principais antígenos, a priori podendo ser transfundidos com qualquer tipo sanguíneo sem consequências posteriores, porém, se submetidos a uma segunda transfusão, sendo essa de um tipo sanguíneo incompatível e previamente sensibilizados, as chances de ocorrer reações transfusionais graves aumentam drasticamente, ocasionando danos ao animal, podendo levá-lo à morte. Por conta desses riscos se faz necessário uma maior atenção aos tipos sanguíneos desses animais onde 8 sistemas são reconhecidos internacionalmente classificados como sistema DEA, sendo eles DEA 1 e seus subtipos (DEA 1.1; DEA1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 e DEA 8, e recentemente um novo sistema denominado Dal. Não há disponível ainda soros para os sistemas DEA 6 e DEA 8, tornando a pesquisa sobre esses antígenos dificultosa.(AU)
Veterinary immunohematology is gaining interest in recent years due to greater accessibility to antigen and antibody detection technologies, the interests of pet owners and veterinarians in seeking a better quality of life for animals, and requirement of transfusions with the lowest possible rate of collateral reactions. Dogs have antigens present in the membrane of their red blood cells that can cause reactions during and after transfusions. Unlike humans and cats, dogs do not have natural antibodies to the key antigens, and a priori they can be transfused with any type of blood without any further consequences. However, if they are ever subjected to a second transfusion, if using incompatible blood types and being previously sensitized, the likelihood of having serious transfusion reactions drastically increase, causing damage to the animal, which may even lead it to death. Due to those risks, greater attention is required to the blood type of those animals, which present 8 systems, internationally recognized and classified as the DEA system, namely DEA 1 and its subtypes (DEA 1.1; DEA 1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 and DEA 8, and recently a new system referred to as Dal. No serum is yet available for DEA 6 and DEA 8 systems, hindering the research on those antigens.(AU)
La inmunohematología veterinaria ha ganado atención en los últimos años debido mayor accesibilidad a tecnologías de detección de antígenos y anticuerpos, interés de dueños y médicos veterinarios en buscar mejor calidad de vida para los animales y las necesidades de transfusiones con menor índice posible de reacciones indeseadas. Los perros poseen antígenos presentes en la membrana de sus células rojas, pudiendo causar reacciones durante y después de transfusiones. Diferentemente de humanos y felinos, perros no tienen anticuerpos naturales para los principales antígenos, a priori, pudiendo ser transfundidos con cualquier tipo de sangre sin consecuencias posteriores, todavía, si sometidos a una segunda transfusión, siendo esa de un tipo sanguíneo incompatible y previamente sensibilizados, la posibilidad de ocurrir reacciones transfusional grave aumenta drásticamente, ocasionando daños al animal, pudiendo llevarlo a la muerte. Por esos riesgos se hace necesario más atención a los tipos sanguíneos de esos animales, donde 8 sistemas son reconocidos internacionalmente y clasificados como sistema DEA, siendo ellos DEA 1 y sus subtipos (DEA 1.1; DEA 1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 y DEA 8, y recién un nuevo sistema denominado Dal. No hay aún disponible sueros para los sistemas DEA 6 y DEA 8, haciendo dificultosa la investigación sobre esos antígenos.(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Antígenos de Histocompatibilidade Classe II/sangue , Cães/imunologia , Cães/sangue , Índices de EritrócitosResumo
A imunohematologia veterinária vem ganhando interesse nos últimos anos devido a maior acessibilidade a tecnologias de detecção de antígenos e anticorpos, interesse dos donos e médicos veterinários em buscar uma melhor qualidade de vida para os animais e as necessidades de transfusões com o menor índice possível de reações indesejadas. Os cães possuem antígenos presentes na membrana de suas células vermelhas, podendo causar reações durante e após transfusões. Diferentemente de humanos e felinos, cães não possuem anticorpos naturais para os principais antígenos, a priori podendo ser transfundidos com qualquer tipo sanguíneo sem consequências posteriores, porém, se submetidos a uma segunda transfusão, sendo essa de um tipo sanguíneo incompatível e previamente sensibilizados, as chances de ocorrer reações transfusionais graves aumentam drasticamente, ocasionando danos ao animal, podendo levá-lo à morte. Por conta desses riscos se faz necessário uma maior atenção aos tipos sanguíneos desses animais onde 8 sistemas são reconhecidos internacionalmente classificados como sistema DEA, sendo eles DEA 1 e seus subtipos (DEA 1.1; DEA1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 e DEA 8, e recentemente um novo sistema denominado Dal. Não há disponível ainda soros para os sistemas DEA 6 e DEA 8, tornando a pesquisa sobre esses antígenos dificultosa.(AU)
Veterinary immunohematology is gaining interest in recent years due to greater accessibility to antigen and antibody detection technologies, the interests of pet owners and veterinarians in seeking a better quality of life for animals, and requirement of transfusions with the lowest possible rate of collateral reactions. Dogs have antigens present in the membrane of their red blood cells that can cause reactions during and after transfusions. Unlike humans and cats, dogs do not have natural antibodies to the key antigens, and a priori they can be transfused with any type of blood without any further consequences. However, if they are ever subjected to a second transfusion, if using incompatible blood types and being previously sensitized, the likelihood of having serious transfusion reactions drastically increase, causing damage to the animal, which may even lead it to death. Due to those risks, greater attention is required to the blood type of those animals, which present 8 systems, internationally recognized and classified as the DEA system, namely DEA 1 and its subtypes (DEA 1.1; DEA 1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 and DEA 8, and recently a new system referred to as Dal. No serum is yet available for DEA 6 and DEA 8 systems, hindering the research on those antigens.(AU)
La inmunohematología veterinaria ha ganado atención en los últimos años debido mayor accesibilidad a tecnologías de detección de antígenos y anticuerpos, interés de dueños y médicos veterinarios en buscar mejor calidad de vida para los animales y las necesidades de transfusiones con menor índice posible de reacciones indeseadas. Los perros poseen antígenos presentes en la membrana de sus células rojas, pudiendo causar reacciones durante y después de transfusiones. Diferentemente de humanos y felinos, perros no tienen anticuerpos naturales para los principales antígenos, a priori, pudiendo ser transfundidos con cualquier tipo de sangre sin consecuencias posteriores, todavía, si sometidos a una segunda transfusión, siendo esa de un tipo sanguíneo incompatible y previamente sensibilizados, la posibilidad de ocurrir reacciones transfusional grave aumenta drásticamente, ocasionando daños al animal, pudiendo llevarlo a la muerte. Por esos riesgos se hace necesario más atención a los tipos sanguíneos de esos animales, donde 8 sistemas son reconocidos internacionalmente y clasificados como sistema DEA, siendo ellos DEA 1 y sus subtipos (DEA 1.1; DEA 1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 y DEA 8, y recién un nuevo sistema denominado Dal. No hay aún disponible sueros para los sistemas DEA 6 y DEA 8, haciendo dificultosa la investigación sobre esos antígenos.(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Cães/sangue , Cães/imunologia , Antígenos de Histocompatibilidade Classe II/sangue , Índices de EritrócitosResumo
In domestic cats, blood group AB consists of three blood types A, B and AB. A preliminary identification by typing technique is essential to minimize the occurrence of transfusion reactions and neonatal isoerythrolysis. Therefore, the aim of this study was to determine the frequency of blood types and estimate the probability of random transfusion reactions in domestic cats from Pará state, Brazil. Two-hundred thirty five animals were examined in Belém and Castanhal municipalities. Blood samples were collected by puncture of the cephalic or jugular vein, stored in EDTA tubes and refrigerated until analysis. The hemagglutination and reverse typing techniques were used to confirm the blood types of cats. Type A is the most frequently detected (98.3%), followed by type AB (1.28%) and B (0.42%). Likelihood of adverse reactions in random transfusion was 2.09%, with 1.67% mild to moderate and 0.42% potentially fatal. The results showed a higher frequency of A blood type and that the frequency of AB type was higher than B type. In conclusion, to know the frequency of the blood types according to geographic region minimizes the risk of transfusion reactions.
Em felinos domésticos, o grupo sanguíneo AB é constituído por três tipos de sangue A, B e AB. A identificação prévia, por meio da técnica de tipagem, é essencial para minimizar a ocorrência de reações transfusionais e isoeritrólise neonatal. Este estudo teve por objetivos determinar a frequência dos tipos sanguíneos e estimar a probabilidade de ocorrência de reações transfusionais aleatórias em gatos domésticos oriundos do estado do Pará, Brasil. Foram utilizados 235 animais domiciliados nos municípios de Belém e Castanhal. As amostras de sangue foram coletadas por punção da veia cefálica ou jugular, armazenadas em tubos com EDTA e refrigeradas até as análises. As técnicas de hemaglutinação e tipagem reversa foram utilizadas para confirmar os tipos sanguíneos dos felinos. O tipo A foi ao mais detectado (98,3%), seguido pelo tipo AB (1,28%) e B (0,42%). A probabilidade de ocorrência de reações adversas em transfusões aleatórias foi de 2,09%, sendo 1,67% leves a moderadas e 0,42% potencialmente fatais. Os resultados encontrados demonstram que na população de felinos estudada há uma maior frequência de gatos do tipo A e que a frequência do tipo AB foi maior que o tipo B. Em conclusão, conhecer a frequência dos tipos sanguíneos de acordo com a região geográfica minimiza o risco de reações transfusionais.
Assuntos
Animais , Gatos , Antígenos de Grupos Sanguíneos/análise , Isoanticorpos/análise , Reação Transfusional/prevenção & controle , Testes de Hemaglutinação/veterinária , Tipagem e Reações Cruzadas Sanguíneas/veterináriaResumo
In domestic cats, blood group AB consists of three blood types A, B and AB. A preliminary identification by typing technique is essential to minimize the occurrence of transfusion reactions and neonatal isoerythrolysis. Therefore, the aim of this study was to determine the frequency of blood types and estimate the probability of random transfusion reactions in domestic cats from Pará state, Brazil. Two-hundred thirty five animals were examined in Belém and Castanhal municipalities. Blood samples were collected by puncture of the cephalic or jugular vein, stored in EDTA tubes and refrigerated until analysis. The hemagglutination and reverse typing techniques were used to confirm the blood types of cats. Type A is the most frequently detected (98.3%), followed by type AB (1.28%) and B (0.42%). Likelihood of adverse reactions in random transfusion was 2.09%, with 1.67% mild to moderate and 0.42% potentially fatal. The results showed a higher frequency of A blood type and that the frequency of AB type was higher than B type. In conclusion, to know the frequency of the blood types according to geographic region minimizes the risk of transfusion reactions.(AU)
Em felinos domésticos, o grupo sanguíneo AB é constituído por três tipos de sangue A, B e AB. A identificação prévia, por meio da técnica de tipagem, é essencial para minimizar a ocorrência de reações transfusionais e isoeritrólise neonatal. Este estudo teve por objetivos determinar a frequência dos tipos sanguíneos e estimar a probabilidade de ocorrência de reações transfusionais aleatórias em gatos domésticos oriundos do estado do Pará, Brasil. Foram utilizados 235 animais domiciliados nos municípios de Belém e Castanhal. As amostras de sangue foram coletadas por punção da veia cefálica ou jugular, armazenadas em tubos com EDTA e refrigeradas até as análises. As técnicas de hemaglutinação e tipagem reversa foram utilizadas para confirmar os tipos sanguíneos dos felinos. O tipo A foi ao mais detectado (98,3%), seguido pelo tipo AB (1,28%) e B (0,42%). A probabilidade de ocorrência de reações adversas em transfusões aleatórias foi de 2,09%, sendo 1,67% leves a moderadas e 0,42% potencialmente fatais. Os resultados encontrados demonstram que na população de felinos estudada há uma maior frequência de gatos do tipo A e que a frequência do tipo AB foi maior que o tipo B. Em conclusão, conhecer a frequência dos tipos sanguíneos de acordo com a região geográfica minimiza o risco de reações transfusionais.(AU)
Assuntos
Animais , Gatos , Antígenos de Grupos Sanguíneos/análise , Isoanticorpos/análise , Tipagem e Reações Cruzadas Sanguíneas/veterinária , Testes de Hemaglutinação/veterinária , Reação Transfusional/prevenção & controleResumo
A anemia hemolítica imunomediada (AHIM) é um dos tipos de anemia mais comumente diagnosticada em pequenos animais. A de origem secundária é mais prevalente em cães, a qual pode ser desencadeada por processos que culminam em resposta imunológica contra antígenos nãopróprios opsonisados à membrana eritrocitária. Logo, a destruição dessas células ocorre devido uma reação de hipersensibilidade do tipo II, em que os anticorpos antieritrocitários atuam contra hemácias que possuem antígenos ligados à sua superfície. Algumas raças possuem predisposição para este tipo de anemia, além de estudos terem demonstrado predileção para sexo e idade. Para diagnóstico laboratorial, são levados em consideração a presença de esferócitos e autoaglutinação em solução salina, juntamente com o histórico clínico do animal, embora a negatividade desses testes não exclua a origem hemolítica da anemia. Uma das características deste tipo de anemia é a regeneração medular, marcada por presença de reticulócitos circulantes, apesar de uma grande parcela não apresentar regeneração no momento do diagnóstico. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o comportamento hematológico de cães com AHIM secundária classificados como responsivos e não responsivos à anemia por meio da citometria de fluxo. Foi observado que 53,3% dos animais eram machos, enquanto 46,6% eram fêmeas, com a porcentagem de 6,25% e 21,4% abaixo de um ano de idade, respectivamente. A maior porcentagem (66,6%) dos cães foi de animais com idade igual ou maior a oito anos de idade. Quanto a responsividade medular, 73,3% dos animais tiveram anemia não regenerativa no momento do diagnóstico, sendo apenas 26,6% responsivos, os quais apresentaram menores resultados quanto aos valores de neutrófilos segmentados, bastonetes, eritroblastos e bilirrubina total, assim como menores índices de VCM e HCM, obtendo resultados superiores apenas nos valores de eritrócitos. Conclui-se que há possibilidade de diagnóstico deste tipo de anemia com testes laboratoriais aplicáveis na rotina e de baixo custo e que há diferença na avaliação laboratorial de animais com AHIM secundária responsiva e não responsiva, fazendo com que a investigação e determinação da não responsividade da anemia seja de extrema importância para melhor diagnóstico e tratamento do paciente.
Immune-mediated hemolytic anemia (IMHA) is one of the most commonly diagnosed types of anemia in small animals. A of secondary origin is more prevalent in dogs, which can be triggered by processes that culminate in immune response against opsonized antigens to the erythrocyte membrane. Therefore, the destruction of these cells occurs due to a type II hypersensitivity reaction, in which anti-erythrocyte antibodies act against erythrocytes that have antigens attached to their surface. Some breeds are predisposed to this type of anemia, in addition to studies showing a predilection for sex and age. For laboratory diagnosis, the presence of spherocytes and autoagglutination in saline together with the animal's clinical history are considered, although the negativity of these tests does not exclude the hemolytic origin of the anemia. One of the characteristics of this type of anemia is the medullary regeneration, marked by the presence of circulating reticulocytes, although a large portion does not present regeneration at the time of diagnosis. Thus, the objective of this study was to evaluate the hematological behavior of dogs with secondary AHIM classified as responsive and not responsive to anemia by means of flow cytometry. It was observed that 53.3% of the animals were male, while 46.6% were females, with a percentage of 6.25% and 21.4% under one year of age, respectively. The highest percentage (66.6%) of the dogs was from animals aged 8 years or more. As for spinal cord responsiveness, 73.3% of the animals had non-regenerative anemia at the time of diagnosis, and only 26.6% were responsive, which presented lower results regarding the values of segmented neutrophils, rods, erythroblasts and total bilirubin, as well as lower VCM and HCM indexes, obtaining superior results only in erythrocyte values. It is concluded that it is possible to diagnose this type of anemia with routine and low-cost laboratory tests and that there is a difference in the laboratory evaluation of animals with secondary non-responsive AHIM, causing the investigation and determination of non-responsiveness anemia is of utmost importance for better diagnosis and treatment of the patient.
Resumo
Objetivou-se determinar a frequência dos sorotipos sanguíneos e do antígeno Mik em gatos domésticos das cidades de Ilhéus e Itabuna, Bahia- Brasil. Amostras sanguíneas de 236 felinos foram coletadas no Hospital Veterinário da Universidade Estadual de Santa Cruz UESC e em visitas domiciliares para a realização de tipagem sanguínea por método de tubo, considerado padrão ouro para realização desse teste. Foi realizada tipagem reversa nos animais B com animais do sorotipo A para confirmação do tipo sanguíneo. O teste cruzado foi realizado entre animais tipo A em busca de antígenos diferentes do sistema AB felino como o antígeno Mik. Os resultados foram analisados macro e microscopicamente. Dos 236 animais tipados, 233 (98.72%) apresentaram sangue tipo A, três (1.28%) apresentaram sangue tipo B e nenhum animal (0%) possuiu tipo sanguíneo AB, que corroboram com diversos estudos pelo mundo indicando a predominância de sorotipo sanguíneo A em gatos sem raça definida. Todos os animais de tipo B reagiram à tipagem reversa com sorotipo A confirmando seu tipo sanguíneo. Todos os animais A foram compatíveis entre si, descartando a presença de outros antígenos eritrocitários nas amostras analisadas. A frequência de risco de crises hemolíticas por transfusões foi equivalente a 1,26%. Diante desses dados, conclui-se, portanto, que diferentes sorotipos sanguíneos estão presentes na população estudada, e que existe real importância de realização de tipagem nesses animais antes de procedimentos transfusionais, a fim de evitar complicações hemolíticas graves entre animais incompatíveis.
The objective was to determine the frequency of blood serotypes and Mik antigen in domestic cats from the cities of Ilhéus e Itabuna, Bahia Brazil. Blood sample were collected from 236 felines at the Veterinary Hospital of The State University of Santa Cruz UESC and at home visits for the accomplishing of blood typing by tube method, considering gold standard for the execution. Reverse typing was conducted on B animals with animals of serotype A to confirm blood type. Cross test was made between type A animals in seek of different antigens of feline AB system with Mik antigen. Results were analyzed macroscopically and microscopically. From 236 typed animals, 233 (98.72%) exhibited type A blood, three (1.28%) exhibited type B blood and none of the animals (0%) had an AB blood type, which corroborate with several worldwide studies indicating predominance of A blood serotype in random-bred cats. All type B animals reacted to reverse typing with A serotype confirming their blood type. All A animals were compatible between them, discarding the presence of other erythrocyte antigens on analyzed samples. Risk frequency of hemolytic crises by transfusions were equal to 1,26%. These results support that different blood serotypes are present on the studied population and that there is a real importance on typing these animals before transfusion procedures, in order to avoid serious hemolytic complications between mismatch animals.
Resumo
O presente trabalho estudou a frequência dos grupos sanguíneos identificados como antígenos eritrocitários caninos (AEC) 1, 1.1 e 7 em cães da região metropolitana da cidade de São Paulo-SP, Brasil, e calculou o risco de administração de sangue incompatível tanto em uma primeira quanto em uma segunda transfusão. Para tanto, 300 cães não aparentados foram divididos igualmente em seis grupos de acordo com as raças: Pastor Alemão (PA); Rottweiler (R); Poodle (P); Cocker Spaniel Inglês (CS); raças definidas diversas (RDD) e mestiços (M). Foi avaliada a relação entre a frequência dos AEC e os grupos raciais. A frequência geral de AEC 1 na população foi de 71% (AEC 1.1 53,35%) e houve variações de acordo com as raças: PA- 32% (AEC 1.1 20%), R- 98% (1.1 80%), P- 76% (1.1 54%), CS- 84% (1.1 50%), RDD- 62% (1.1 56%) e M- 74% (1.1 60%). A frequência geral de AEC 7 foi de 39,33% e não houve diferenças significativas entre as raças. O risco de um cão negativo para o AEC 1 receber sangue positivo foi de 0,6 a 66,6% em uma primeira transfusão e de 0,21 a 65,3% do mesmo cão receber sangue incompatível em uma segunda transfusão. O risco quanto ao AEC 7 foi de 23,86% na primeira transfusão e 9,4% numa segunda transfusão. Este trabalho concluiu que houve variação na frequência de AEC1 e AEC 1.1, mas não quanto ao AEC 7 entre raças. Esta variação na porcentagem de animais positivos quanto ao AEC 1 se refletiu na grande variação no risco de uso de sangue incompatível. Portanto, conhecer a frequência dos AEC na população tem impacto direto no manejo entre cães doadores e receptores, mas a utilização conjunta de teste de tipagem sanguínea e reação cruzada reduz a possibilidade de transfusão de sangue incompatível.(AU)
It was investigated the frequency of blood groups identified as Dog Erythrocyte Antigens (DEA) 1, 1.1 and 7 dogs in the metropolitan region of São Paulo-SP, Brazil, and calculated the risk of administering incompatible blood in both first and second transfusion. For both, 300 unrelated dogs were equally divided into six groups according to the breeds: German Shepherd (GS), Rottweiler (R) Poodle (P), Cocker Spaniel (CS); defined several races (DSR), mongrel dogs (M). It was evaluated the relationship between the frequency of AEC and racial groups. The overall frequency of DEA 1 in population was 71% (DEA 1.1 53.35%) and there were variations according to the breeds: GS- 32% (DEA 1.1 20%), R 98% (1.1 80%) P 76% (1.1 54%), CS-84% (1.1 50%), DSR- 62% (1.1 56%) and M 74% (1.1 60%). The overall frequency of BCE 7 was 39.33%, and there were no significant differences between the breeds. The risk of a dog negative DEA receiving 1 positive blood was 0.6 to 66.6% in the first transfusion and 0.21 to 65.3% from the same animal dog receiving incompatible blood transfusion in a second. The risk of the DEA 7 was 23.86% in the first transfusion and 9.4% in a second transfusion. This study concluded that there was variation in the frequency of DEA 1 and 1.1, but not on the DEA 7 between races. This variation in the percentage of positive animals to DEA 1 was reflected in the large variation in the risk of use of incompatible blood. Therefore, knowing the frequency of the DEA in the population has a direct impact on handling dogs between donors and recipients, but the joint use of testing blood typing and cross-reactivity reduces the possibility of incompatible blood transfusion.(AU)
Assuntos
Animais , Policitemia , Cães/classificação , Transfusão de Sangue/métodosResumo
Objetivou-se com este estudo determinar a frequência de antígenos eritrocitários do sistema AB em felinos domésticos da Paraíba, Brasil. Foram selecionados aleatoriamente 178 gatos, clinicamente saudáveis, sem pré-requisitos quanto a sexo ou raça, com peso corporal acima de 1,5 kg e faixa etária acima de um ano de idade, abordados no ato da consulta ambulatorial em clínicas médicas de pequenos animais distribuídas entre três cidades da Paraíba (João Pessoa, Campina Grande e Patos). A determinação dos tipos sanguíneos foi realizada através do teste de hemaglutinação em tubo de ensaio e, a tipagem reversa foi realizada para as amostras tipos B e AB para confirmação e evidenciação de aloanticorpos naturais. Neste estudo a frequência relativa de antígenos eritrocitários A, B e AB em sua totalidade para felinos sem raça foram 98,1%, 1,21% e 0,69%, respectivamente. Todos os felinos com definição racial foram do tipo sanguíneo A. Diante destes, a probabilidade de ocorrência de reações transfusionais aleatórias obtidas foi de 2,78%, sendo cerca 40% (1,11%) potencialmente fatais. Desta forma, dado o conhecimento da frequência dos diferentes tipos sanguíneos em felinos, de uma determinada região, conclui-se que a tipagem sanguínea e o teste de compatibilidade, são importantes ferramentas que permitem ao médico veterinário tomar medidas preventivas que minimizem riscos de ocorrência de reações transfusionais e isoeletrólise neonatal e, estabelece pré-requisitos a respeito dos riscos de procedimentos hemoterápicos em felinos que circunstancialmente necessitem serem conduzidos de forma aleatória.(AU)
The objective of this study was to determine the frequency of the AB blood group antigens system in domestic cats of Paraíba, Brazil. We randomly selected 178 cats which were clinically healthy, with no prerequisites in terms of gender or race, weighing above 1.5 kg, and were over one year of age. These cats were randomly selected when they entered the small animal clinic facilities in the cities of João Pessoa, Campina Grande and Patos. The determination of blood types was made using the hemagglutination test tube, and the reverse typing was performed for samples B and AB types and for confirmation of alloantibodies natural disclosure. In this study the relative frequency of A, B and AB blood group antigens in cats without a determined breed was 98.1%, 1.21% and 0.69% respectively. All cats with breed definition were blood type A. The likelihood of random transfusion reactions was 2.78%, approximately 40% (1.11%) potentially fatal. Thus, given knowledge of the frequency of different blood types in cats, from a given region, it is concluded that blood typing and compatibility test are important tools that enable the veterinarian to take preventative measures to minimize risks of isoelectrolisys reactions and neonatal transfusion, and establishes prerequisites about the risks of hemotherapic procedures in cats that require circumstantially to be conducted randomly.(AU)
Assuntos
Animais , Antígenos/administração & dosagem , Antígenos/análise , Eritrócitos/química , Gatos , Tipagem e Reações Cruzadas Sanguíneas/métodos , Tipagem e Reações Cruzadas Sanguíneas , Tipagem e Reações Cruzadas Sanguíneas/veterináriaResumo
Pesquisaram-se 28 antígenos eritrocitários pertencentes aos sistemas de grupos sanguíneos humanos ABO, H, Rh, Kell, Duffy, Kidd, Lewis, P, MNS, Lutheran e Diego, nos eritrócitos de 9 macacos-prego (Sapajus sp) e 10 macacos bugios (Alouatta sp).A maioria dos antígenos humanos pesquisados não foi observada nos 2gêneros de macacos, correspondendo a 19/28 antígenos negativos nos Sapajus sp, e 20/28 antígenos negativos nos Alouatta sp. A fenotipagem eritrocitária foi bastante semelhante em cada grupo de animais, sendo que 5 macacos-prego diferiram dos outros 4 apenas no sistema ABO, e 3 macacos bugios diferiram dos demais 7somente no sistema MNS.Houve diferenças antigênicas entre os gêneros em apenas4 sistemas de grupos pesquisados (P, ABO, Rh, MNS). Constataram-se, nos animais, alguns antígenos eritrocitários com frequências semelhantes e outros com frequências opostas às observadas em humanos ou etnias humanas. Em comparação com estudos prévios envolvendo macacos-prego e macacos bugios, observou-se concordância quanto à presença ou ausência de alguns antígenos eritrocitários, e discordância em relação a outros. Que seja do nosso conhecimento, o presente estudo é o mais completo já realizado quanto ao número de antígenos eritrocitários pesquisados em macacos do Novo Mundo, especialmente em macacos brasileiros.
The aim of this study was to evaluate the presence of 28 erythrocyte antigens of 11 human blood groups systems (ABO, H, Rh, Kell, Duffy, Kidd, Lewis, P, MNS, Lutheran and Diego) on erythrocytes of 9 nail monkeys (Sapajus sp) and 10 howler monkeys (Alouatta sp). Most of the human erythrocyte antigens were not observed in the 2 genera of monkeys, corresponding to 19/28 negative antigens in Sapajus sp, and 20/28 negative antigens in Alouatta sp. Erythrocyte phenotyping was very similar in each group, being that 5 nail monkeys differed from the other 4 only for the ABO system, and 3 howler monkeys differed from the other 7 only for the MNS system. Antigenic differences between the 2 genera were observed only for 4 blood groups systems (P, ABO, Rh, MNS). This study revealed that some monkey erythrocyte antigens were similar in frequency, and others were in opposite frequency from those observed in human or human ethnicities. When this study is compared with previous similar studies some concordance and some disagreement of findings are found, but as far as we known our study is the most complete in relation to the number of investigated erythrocyte antigens in New World monkeys, specially in the Brazilian ones.
Resumo
Babesiosis is one of the most important diseases affecting livestock agriculture worldwide. Animals from the subspecies Bos taurus indicus are more resistant to babesiosis than those from Bos taurus taurus. The genera Babesia and Plasmodium are Apicomplexa hemoparasites and share features such as invasion of red blood cells (RBC). The glycoprotein Duffy is the only human erythrocyte receptor for Pasmodium vivax and a mutation which abolishes expression of this glycoprotein on erythrocyte surfaces is responsible for making the majority of people originating from the indigenous populations of West Africa resistant to P. vivax. The current work detected and quantified the Duffy antigen on Bos taurus indicus and Bos taurus taurus erythrocyte surfaces using a polyclonal antibody in order to investigate if differences in susceptibility to Babesia are due to different levels of Duffy antigen expression on the RBCs of these animals, as is known to be the case in human beings for interactions of Plasmodium vivax-Duffy antigen. ELISA tests showed that the antibody that was raised against Duffy antigens detected the presence of Duffy antigen in both subspecies and that the amount of this antigen on those erythrocyte membranes was similar. These results indicate that the greater resistance of B. taurus indicus to babesiosis cannot be explained by the absence or lower expression of Duffy antigen on RBC surfaces.(AU)
As doenças infecciosas e parasitárias causam perdas importantes em vários setores da produção da pecuária mundial. Estima-se que mais de 600 milhões de bovinos de países tropicais e subtropicais estejam expostos à infecção por Babesia sp. gerando grande prejuízo econômico. Os gêneros Babesia e Plasmodium são hemoparasitas pertencentes ao filo Apicomplexa e apresentam características comuns no processo de invasão eritrocitária. A babesiose bovina causada por Babesia bigemina e Babesia bovis apresenta sinais clínicos similares a malária humana causada por Plasmodium vivax e Plasmodium falciparum. A glicoproteína Duffy é a única receptora para o P. vivax em humanos. A maioria dos indivíduos negros africanos é resistente a este parasita devido a uma mutação que provoca a ausência de expressão desta glicoproteína na superfície das hemácias. Tendo em vista este fato, e que animais da subespécie Bos taurus taurus são mais susceptíveis à babesiose quando comparados à animais Bos taurus indicus, objetivou-se neste trabalho a detecção e quantificação do antígeno Duffy na superfície dos eritrócitos de bovinos empregando para tal, anticorpo policlonal que permitisse investigar se as diferenças na susceptibilidade são devido a diferentes níveis de expressão do antígeno Duffy nas hemácias. Ensaios de ELISA mostraram que o anticorpo produzido foi capaz de reconhecer o antígeno Duffy presente nas hemácias bovinas e a análise quantitativa não demonstrou diferença significativa na presença do mesmo. Estes resultados sugerem que a resistência maior dos zebuínos à babesiose não se deve à ausência de expressão, ou à presença em menor quantidade do antígeno Duffy na superfície de suas hemácias.(AU)
Assuntos
Bovinos/parasitologia , Babesiose/veterinária , Glicoproteínas/isolamento & purificação , Eritrócitos/fisiologia , Antígenos , Anticorpos/isolamento & purificaçãoResumo
A theileriose, doença endêmica no Brasil, é uma piroplasmose causada pelo protozoário intraeritrocitário, Theileria equi. Provoca perdas associadas tanto a fatores clínicos como a restrição ao trânsito de animais soropositivos. A transmissão de T. equi ocorre principalmente no repasto do carrapato, o qual inocula suas formas infectantes (esporozoítos) nos equídeos, que são os hospedeiros vertebrados. O diagnóstico e a prevenção desta enfermidade se fazem necessários em áreas endêmicas e não endêmicas devido à disseminação dos vetores e do protozoário e de sua alta prevalência. Diferentes plataformas de ELISAs têm sido desenvolvidas com a utilização de antígenos recombinantes. A proteína de superfície de merozoíto EMA-2 é liberada no citoplasma e na membrana do eritrócito, sugerindo ser um dos primeiros antígenos reconhecidos pelo sistema imune. O objetivo desse estudo foi avaliar a proteína EMA-2 de Theileria equi, expressa em Pichia pastoris, como imunobiológico. Após expressão da glicoproteína EMA-2 foi desenvolvido um ELISA indireto. O ELISA demonstrou sensibilidade de 90,9% e especificidade de 83,3% quando comparado ao kit comercial de cELISA. A proteína também demonstrou imunogenicidade ao testarmos soros de camundongos imunizados com EMA-2 recombinante, por imunofluorescência. Sendo a proteína EMA-2 antigênica e imunogênica, poderá ser usada, além dos testes de diagnóstico, como antígeno para o desenvolvimento de vacinas de subunidade.
Theileriosis, endemic disease in Brazil, is a piroplasmosis caused by intraerythrocytic protozoan, Theileria equi. Causes losses associated with both clinical factors and restriction on the movement of positive animals. Transmission of T. equi occurs mainly during tick feeding which inoculates their infective forms (sporozoites) in horses, which are the vertebrate hosts. The diagnosis and prevention of this disease is needed in endemic and non endemic areas due to the presence of vectors and protozoa. Different ELISAs platforms have been developed using recombinant antigens. EMA-2 is released into the cytoplasm and erythrocyte membrane, suggesting that one of the first antigens recognized by the immune system. The aim of this study was to evaluate the EMA-2 protein of Theileria equi, expressed in Pichia pastoris, as immunobiological. After expression of EMA-2 glycoprotein, an indirect ELISA was developed. The ELISA demonstrated sensitivity of 90.9% and specificity of 83.3% when compared to the commercial kit cELISA. The protein also showed immunogenicity when test the sera of immunized mice with recombinant EMA-2 by immunofluorescence. As the EMA-2 protein antigenic and immunogenic, it may be used diagnostic tests as well as a promising antigen for the development of subunit vaccines.
Resumo
Embora faltem evidências diretas da relação causal entre a vacinação recente e o desenvolvimento da anemia hemolítica imunomediada (AHIM) em cães, pode ser identificada uma associação temporal entre elas. Constituem-se em objetivos deste trabalho avaliar: a presença de imunoglobulinas (IgG e IgM) e complemento (C3>) na superfície eritrocitária e o potencial do estímulo mitogênico de membranas eritrocitárias autólogas sobre os linfócitos periféricos de cães nos momentos pré-vacinal (imediatamente antes da vacinação com vacinas polivalente e antirrábica) e pós-vacinal (28 a 38 dias após a imunização). Vinte e um cães adultos e hígidos, machos e fêmeas, foram submetidos à anamnese, exame físico e avaliações laboratoriais nos dois momentos do estudo. O teste da antiglobulina direta (n=15) foi realizado com o reagente de Coombs polivalente, nas diluições de 1:2 a 1:8. A detecção de imunoglobulinas (IgG, IgM) e complemento (C3) na superfície de eritrócitos por citometria de fluxo (n=21) foi realizada utilizando anticorpos anti-IgG de cão produzido em ovelha cadeia pesada, anti-IgM produzido em cabra e anti-C3 de cão produzido em cabra, todos conjugados com fluoresceína de isotiocianato (FITC). As células mononucleares do sangue periférico foram isoladas por gradiende, marcadas com CFSE e estimuladas com Concanavalina A (ConA) e com membranas eritrocitárias autólogas em duas concentrações (ME1 e ME2). Foi utilizado o Índice de Proliferação (IP) como indicador da proliferação celular, obtido pela divisão das intensidades de fluorescência obtidas por citometria de fluxo das amostras basal e estimulada. As comparações das variáveis \"hemácias marcadas com anti-Ig/C3\" e \"IP de linfócitos\" foram realizadas utilizando-se o t-Student para amostras pareadas. As comparações dos IP de linfócitos frente aos diferentes antígenos (Con A, ME1 e ME2) foram realizadas por meio da ANOVA com medidas repetidas. Quando houve diferença significante entre os índices, foram realizadas comparações múltiplas (teste de Bonferroni). Foi considerado um nível de significância de 5%. Observou-se que os cães se encontravam em boas condições de saúde, nos dois momentos do estudo, com as variáveis hematológicas e bioquímicas mantidas próximas entre si e resultado do teste da antiglobulina direta negativo (n=21). A porcentagem de hemácias marcadas com IgG e IgM nos momentos pré-vacinal (1,06±0,49% e 1,42±1,59%) e pós-vacinal (0,83±0,56% e 1,35±1,71%) não foi alterada, com p=0,261 e p=0,699, respectivamente. A porcentagem de hemácias com C3 na superfície no momento pós-vacinação (0,40±0,38%) foi, em média, menor do que no momento pré-vacinação (0,71±0,33%), com p=0,019. Os índices de proliferação obtidos com a ConA, ME1 e ME2 no momento pré-vacinal (2,15±0,83; 1,03±0,07; 1,05±0,11) e pós- vacinal (2,13±0,58; 1,02±0,05; 1,02±0,05) não se modificaram, com p=0,935; p=0,845 e p=0,222, respectivamente. Em ambos os momentos, os índices de proliferação celular observados com o uso de ConA foram, em media, maiores do que os índices com ME1 e ME2 (p<0,001). A baixa porcentagem de hemácias com IgG, IgM ou C3 na superfície e a ausência de resposta proliferativa dos linfócitos quando estimulados com membranas eritrocitárias, indicam que, neste experimento, não houve nenhuma evidência de que o estímulo vacinal pudesse estar relacionado ao desenvolvimento da AHIM
Despite the lack of evidence regarding a causal link between recent vaccination and development of immune mediated hemolytic anemia (IMHA) in dogs, a temporal association between them has been identified in some cases. The aim of this study was to evaluate: the presence of immunoglobulins (IgG and IgM) and complement (C3) on the surface of red blood cells and the potential for mitogenic stimulation of peripheral lymphocytes against autologous red blood cell membranes on dogs at pre-vaccination (immediately prior to vaccination with polyvalent and anti-rabies vaccines) and post-vaccination (after 28 and 38 days after vaccination). Twenty-one healthy adult dogs (both males and females) were subjected to physical examination and complementary laboratory exams in the aforementioned two instances of the study (i.e. pre-vaccination and post-vaccination). Direct antiglobulin test (n=15) was performed using the polyvalent Coombs reagent in 1:2 to 1:8 dilutions. Immunoglobulins (IgG, IgM) detection and identification of complement (C3) on the surface of red blood cells were done by flow cytometry (n=21) using antibodies anti-dog IgG heavy chain produced in sheep, anti-dog IgM produced in goat and anti-dog C3 produced in goat - all in conjunction with fluorescein isothiocyanate (FITC). The peripheral blood mononuclear cells were isolated by gradient, labeled with CFSE and stimulated with concanavalin A (Con A) and autologous erythrocyte membranes in two concentrations (EM1 and EM2). The Proliferation Index (PI), used as an indicator of cell proliferation, was obtained by dividing the fluorescence intensities of basal and stimulated samples, both obtained by flow cytometry. A comparison was made between the variables \"labeled red blood cells with anti-Ig/C3\" and \"PI lymphocyte\" using the paired Student\'s t-test. Comparisons of PI lymphocytes to different antigens (Con A, EM1 and EM2) were performed using ANOVA of repeated measures. Whenever significant differences between the indices were found, multiple comparisons (Bonferroni test) were then performed. A 5% significance level was considered. At the two instances of the study, dogs were presented in good health status with both hematological and biochemical variables kept close together and negative results for direct antiglobulin test (n=21). The percentage of red blood cells labeled with IgG and IgM in the pre-vaccination (1.06±0.49% and 1.42±1.59%) and post-vaccination (0.83±0.56% and 1.35±1.71%) were kept similar, with p=0.261 and p=0.699, respectively. The percentage of erythrocytes with C3 on the surface at the time post-vaccination (0.40±0.38%) was on average lower than in the pre-vaccination (0.71±0.33%), p=0.019. The proliferation index obtained with ConA, ME1 and ME2 in the pre-vaccination (2.15±0.83, 1.03±0.07, 1.05±0.11) and post-vaccination (2.13±0.58, 1.02±0.05, 1.02±0.05) did not differ significantly, with p=0.935, p=0.845 and p=0.222, respectively. In both instances, rates of cell proliferation observed with the use of ConA were, on average, higher than the rates with ME1 and ME2 (p<0.001). The low percentage of erythrocytes with IgG, IgM or C3 on the surface and the absence of lymphocyte proliferative response when stimulated with erythrocyte membranes, indicate that, at least in this experiment, there is no evidence of any association between vaccine stimulation and development of IMHA in dogs
Resumo
A expressão de antígenos eritrocitários do sistema ABO em plaquetas humanas pode causar baixo incremento plaquetário pós-transfusional e refratariedade no receptor. Na Medicina Veterinária, o antígeno eritrocitário canino (DEA) 1.1 causa as reações transfusionais hemolíticas mais importantes clinicamente, e se presente nas plaquetas caninas pode estar envolvido em reações imunológicas levando à baixa sobrevida das plaquetas transfundidas ou aloimunização do paciente receptor. O objetivo deste estudo foi investigar a presença do DEA 1.1 em plaquetas de cão. Para tanto, plaquetas de 110 cães DEA 1.1 positivos e 62 cães DEA 1.1 negativos foram incubadas com soro policlonal anti-DEA 1.1, e então com o anticorpo policlonal anti-IgG canina marcado com FITC, e posteriormente avaliadas pelo método de citometria de fluxo. As hemácias de todos os cães foram testadas da mesma forma, a fim de demonstrar a eficácia da técnica de citometria de fluxo para detecção deste antígeno. Além disso, todas as amostras foram tipadas para o DEA 1.1 pelo teste convencional da aglutinação em tubo, para confirmação dos resultados obtidos pela citometria de fluxo em hemácias. Os resultados demonstraram que o DEA 1.1 não está presente nas plaquetas caninas e que parece não haver a necessidade de transfusão de plaquetas compatíveis para este tipo sanguíneo em cães. Foi observado ainda, que a citometria de fluxo é um teste mais sensível e acurado para a tipagem sanguínea do DEA 1.1 do que o teste de aglutinação em tubo
The expression of erythrocyte antigens, from the ABO system, by human platelets can cause post-transfusional low platelet increment and refractoriness on the receptor. In Veterinary Medicine, the dog erythrocyte antigen (DEA) 1.1 causes the most clinically important hemolytic transfusion reactions, and if present on canine platelets may be the cause of immunologic platelet transfusion reactions, leading to short survival of the transfused platelets or alloimmunization of the recipient. The purpose of this study was to investigate the presence of the DEA 1.1 antigen in canine platelets. For that, platelets from 110 DEA 1.1 positive dogs and 62 DEA 1.1 negative dogs were incubated with anti-DEA 1.1 polyclonal sera, and then with anti-canine IgG FITC-labeled polyclonal antibody, to be evaluated by flow cytometry. All canine erythrocytes were tested the same way, to demonstrate the efficacy of the flow cytometric technique to detect this antigen. Moreover, all samples were typed for DEA 1.1 by the gold-standard tube typing test, to confirm the results obtained to the red cells by flow cytometry. The results showed that the DEA 1.1 antigen is not present on canine platelets, and that it seems to not be necessary the transfusion of DEA 1.1 compatible platelets in dogs. Further observation also showed that the flow cytometric test is more sensitive and accurate than the tube typing test for the detection of DEA 1.1 antigen
Resumo
A transfusão de sangue é uma medida terapêutica muito difundida na prática veterinária devido ao alto número de pacientes que apresentam anemia e perdas sangüíneas agudas no momento da consulta. Felizmente, devido às características dos sistemas de grupos sangüíneos nessa espécie, as reações transfusionais fatais, causadas por incompatibilidade sanguínea, não são freqüentes. Os anticorpos de ocorrência natural podem ser encontrados em cães submetidos à uma primeira transfusão, podendo provocar reações transfusionais tardias caracterizadas pelo seqüestro e destruição das hemácias no período de 72 horas. Embora não provoquem reações fatais, sua presença neutraliza o benefício terapêutico da transfusão e prejudica a recuperação clínica do paciente. O presente estudo teve como objetivo verificar a ocorrência de anticorpos naturais em cães nunca submetidos a transfusões sanguíneas, no município de Fernandópolis, Estado de São Paulo. O teste de reação cruzada foi realizado à temperatura ambiente e á 37ºC, utilizando-se amostras de sangue provenientes de 100 cães triados junto ao ambulatório de clínica do Hospital Veterinário Domingos Alves. Encontrou-se reações positivas em 10 (10%) dentre os 100 (100%) testes realizados. Este resultado indica que, na população de cães estudada, 10% dos cães possuem anticorpos naturais capazes de provocar incompatibilidade sanguínea entre o doador de sangue e o receptor, em uma primeira transfusão de sangue e, consequentemente, uma reação transfusional. Sendo assim, o teste de reação cruzada, por sua simplicidade e baixo custo, deve ser instituído como rotina para a seleção de doadores e receptores adequados, previamente a todas as transfusões de sangue(AU)
Blood transfusion is a disseminated therapy in veterinary medicine, as far as there are a great number of patients presenting anemia and acute blood loss at the moment of the first appointment and, therefore, needing a blood transfusion. Fortunately, due the blood group system properties in this species, fatal transfusion reactions are not usual. Naturally occurrence antibodies may be found in the first transfused dogs, causing delayed transfusion reactions characterized for splenic capture and destruction of erythrocytes, over a 72 hour period. Even though they dont elicit fatal reactions, their presence might neutralize the benefits of blood transfusion and retard recovery of the patient. The goal of this study was to verify the occurrence of natural antibodies in dogs reared in Fernandopolis, state of Sao Paulo. Crossmatching test was performed under 22 and 37%ºC, using blood samples from 100 dogs, referred to the Veterinary Hospital of Unicastelo, Fernandopolis/SP, Brazil. Positive reactions were found in 10 (10%) out of 100 (100%) reactions. This result might indicate there is a 10% probability of naturally occurrence antibodies in the studied canine population, and they could be responsible for blood incompatibility between blood donor and recipient, in the very first transfusion. Therefore, crossmatching test should be routinely performed before every blood transfusion, for adequate selection of donors and recipients(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Antígenos , Cães , Transfusão de Eritrócitos , Transfusão de Eritrócitos/veterináriaResumo
A transfusão de sangue é uma medida terapêutica muito difundida na prática veterinária devido ao alto número de pacientes que apresentam anemia e perdas sangüíneas agudas no momento da consulta. Felizmente, devido às características dos sistemas de grupos sangüíneos nessa espécie, as reações transfusionais fatais, causadas por incompatibilidade sanguínea, não são freqüentes. Os anticorpos de ocorrência natural podem ser encontrados em cães submetidos à uma primeira transfusão, podendo provocar reações transfusionais tardias caracterizadas pelo seqüestro e destruição das hemácias no período de 72 horas. Embora não provoquem reações fatais, sua presença neutraliza o benefício terapêutico da transfusão e prejudica a recuperação clínica do paciente. O presente estudo teve como objetivo verificar a ocorrência de anticorpos naturais em cães nunca submetidos a transfusões sanguíneas, no município de Fernandópolis, Estado de São Paulo. O teste de reação cruzada foi realizado à temperatura ambiente e á 37ºC, utilizando-se amostras de sangue provenientes de 100 cães triados junto ao ambulatório de clínica do Hospital Veterinário Domingos Alves. Encontrou-se reações positivas em 10 (10%) dentre os 100 (100%) testes realizados. Este resultado indica que, na população de cães estudada, 10% dos cães possuem anticorpos naturais capazes de provocar incompatibilidade sanguínea entre o doador de sangue e o receptor, em uma primeira transfusão de sangue e, consequentemente, uma reação transfusional. Sendo assim, o teste de reação cruzada, por sua simplicidade e baixo custo, deve ser instituído como rotina para a seleção de doadores e receptores adequados, previamente a todas as transfusões de sangue
Blood transfusion is a disseminated therapy in veterinary medicine, as far as there are a great number of patients presenting anemia and acute blood loss at the moment of the first appointment and, therefore, needing a blood transfusion. Fortunately, due the blood group system properties in this species, fatal transfusion reactions are not usual. Naturally occurrence antibodies may be found in the first transfused dogs, causing delayed transfusion reactions characterized for splenic capture and destruction of erythrocytes, over a 72 hour period. Even though they dont elicit fatal reactions, their presence might neutralize the benefits of blood transfusion and retard recovery of the patient. The goal of this study was to verify the occurrence of natural antibodies in dogs reared in Fernandopolis, state of Sao Paulo. Crossmatching test was performed under 22 and 37%ºC, using blood samples from 100 dogs, referred to the Veterinary Hospital of Unicastelo, Fernandopolis/SP, Brazil. Positive reactions were found in 10 (10%) out of 100 (100%) reactions. This result might indicate there is a 10% probability of naturally occurrence antibodies in the studied canine population, and they could be responsible for blood incompatibility between blood donor and recipient, in the very first transfusion. Therefore, crossmatching test should be routinely performed before every blood transfusion, for adequate selection of donors and recipients