Gestational follow-up in ewes - placentome size and fecal progesterone metabolite levels

Background: Transabdominal ultrasonography in sheep allows real-time diagnosis and monitoring of pregnancy as well as measurement of the size of placentomes, which are structures that connect the fetal and maternal portions, that increase as pregnancy progresses. Progesterone is involved in the maintenance of gestation, with high levels noted during pregnancy. In this context, it is hypothesized that measurements of placentome and progesterone could help in monitoring pregnancy in sheep. Therefore, the main objectives of this study included evaluating whether placentome size and fecal progesterone levels are associated with gestational age in ewes and whether measurement of the placentome and progesterone could be used as an estimate of gestational age. Materials, Methods & Results: A total of 63 pregnant adult (between 2 and 5 years of age) Santa Inês ewes were monitored in the city of Boa Vista, Roraima. All ewes were kept in the paddock with Panicum maximun cv. tanzania, mineral salt, and water ad libitum, supplemented with 200 g/animal/day of soybean residue. Ewes were subjected to ultrasonography every 21 days from day 42 of pregancy until term to monitor pregnancy. Ultrasonography was performed using a linear probe to measure the placentome, including length × width in centimeters. Also every 21 days, fecal samples were collected for measurement of progesterone level. Feces were collected directly from the rectal ampulla, stored individually in plastic bags, and frozen at -20ºC until processing. In the laboratory, these feces samples were freeze-dried and subjected to hormonal extraction with 80% methanol. Then, the levels of fecal progesterone metabolites were measured by enzyme immunoassay. Data was tabulated and submitted to statistical analyses, including descriptive stastistic, correlation, KruskalWallis test and Tukey's test. The levels of fecal progesterone metabolites increased significantly between the 3rd and 4th months of pregnancy, with a decrease close to delivery. Placentome size increased significantly between the 2nd and 3rd months of pregnancy. Placentome measurements did not correlate with progesterone levels and showed a weak correlation with gestational age. Therefore, we concluded that the measurements of placentome size and a single evaluation of fecal progesterone metabolites were not considered efficient methods for estimating gestational age. Discussion: Measurement of progesterone level in fecal samples is a non-invasive hormone monitoring method that provides values like that of blood levels and is less stressful for the animals at the time of sample collection. The wide physiological variation makes it difficult or even useless to use fecal progesterone, when is measured only once per animal, as an indicator of the presence of pregnancy. Despite this limitation, serial sampling is useful for monitoring of hormones during the pregnancy period and is an important tool for research purposes. Placentome size measurements correlated weakly with gestational age and did not correlate with progesterone level. Thus, the presence of placentomes is indicative of the presence of pregnancy but was considered inefficient for determining gestational age in sheep.

Low invasive estrous synchronization protocol for wild animals: an example with melengestrol acetate in brown brocket deer (Mazama gouazoubira)

Deer are sensitive to stressful stimuli by handling and their reproductive physiology could be altered by these procedures, making it necessary to develop less invasive protocols for ART. Melengestrol acetate (MGA), a synthetic progestin administered orally, appears as an alternative for estrous synchronization protocols (ESP), such as reported in cattle. Firstly, we compared two MGA doses (0.5 and 1.0 mg/day/animal), which would have suppression effect in estrous behavior (EB). Eight females were randomly and equally distributed in Group 1 (G1) and Group 2 (G2), which received 0.5 and 1.0 mg/day/animal respectively for 15 days (D1 to D15). Two cloprostenol (CP) applications were performed on D0 and D11. Estrus detection (ED) was performed every day. All females from G1 displayed estrus during treatment period, whereas all females from G2 displayed estrus after treatment, suggesting a suppressive effect of 1.0 mg in the EB. Once the suppressive MGA dose (1.0 mg) was defined, we used this dose for assessing ESP. The same eight females received 1.0 mg/animal for eight days (D-8 to D-1), followed by 0.25 mg of estradiol benzoate on D-8 and 265 g of CP on D0. Feces for fecal progesterone metabolites (FPM) measurement were collected from D0 until seven days after the last day of estrus. Seven females displayed estrus between 12 and 72 h after CP application, which was followed by a significant increase in FPM levels (except female MG6), suggesting the formation of corpus luteum. After ED, females were placed with a fertile male to assess the fertility of the protocol. Pregnancy was confirmed by ultrasound 30 days after mating in 3/6 individuals. Although the low effectiveness of MGA protocol, it should be considered as a promising alternative in deer ESP since this protocol has less stressful effect on the animal during reproductive management when compared to other ESP.

Low invasive estrous synchronization protocol for wild animals: an example with melengestrol acetate in brown brocket deer (Mazama gouazoubira)

Deer are sensitive to stressful stimuli by handling and their reproductive physiology could be altered by these procedures, making it necessary to develop less invasive protocols for ART. Melengestrol acetate (MGA), a synthetic progestin administered orally, appears as an alternative for estrous synchronization protocols (ESP), such as reported in cattle. Firstly, we compared two MGA doses (0.5 and 1.0 mg/day/animal), which would have suppression effect in estrous behavior (EB). Eight females were randomly and equally distributed in Group 1 (G1) and Group 2 (G2), which received 0.5 and 1.0 mg/day/animal respectively for 15 days (D1 to D15). Two cloprostenol (CP) applications were performed on D0 and D11. Estrus detection (ED) was performed every day. All females from G1 displayed estrus during treatment period, whereas all females from G2 displayed estrus after treatment, suggesting a suppressive effect of 1.0 mg in the EB. Once the suppressive MGA dose (1.0 mg) was defined, we used this dose for assessing ESP. The same eight females received 1.0 mg/animal for eight days (D-8 to D-1), followed by 0.25 mg of estradiol benzoate on D-8 and 265 g of CP on D0. Feces for fecal progesterone metabolites (FPM) measurement were collected from D0 until seven days after the last day of estrus. Seven females displayed estrus between 12 and 72 h after CP application, which was followed by a significant increase in FPM levels (except female MG6), suggesting the formation of corpus luteum. After ED, females were placed with a fertile male to assess the fertility of the protocol. Pregnancy was confirmed by ultrasound 30 days after mating in 3/6 individuals. Although the low effectiveness of MGA protocol, it should be considered as a promising alternative in deer ESP since this protocol has less stressful effect on the animal during reproductive management when compared to other ESP.(AU)

Monitoring of progesterone and estrone fecal metabolites throughout gestation in ewes / Avaliação dos metabólitos fecais de progesterona e estrona em ovelhas durante a gestação

The aim of this study was to monitor the progesterone and fecal estrone metabolites throughout gestation in ewes correlating with the serum levels of these steroid hormones. Therefore, fecal and serum samples were collected from 5 weeks before mating and gestation until two weeks postparturition. Serum levels of progesterone and estrone and their fecal metabolites were measured by enzyme immunoassay. Serum and fecal hormonal patterns showed a significant correlation for both hormones (R = 0.8572, P < 0.001 for progesterone and R = 0.5893, P < 0.001 for estrone). The fecal progesterone metabolite levels showed significant increasing values among the three thirds of pregnancies, consistent with the serum levels and with the literature. Additionally, the prepartum peak of estrone in the fecal matrix was identified but without observation in the serum matrix due to the blood collection interval used. Therefore, this study demonstrated the viability of progesterone and estrone monitoring throughout gestation using fecal samples, making noninvasive longitudinal endocrine monitoring throughout gestation possible in this species.

O objetivo deste estudo foi monitorar os níveis de metabólitos fecais de progesterona e estrona ao longo da gestação em ovelhas, correlacionando-os com os níveis séricos desses hormônios esteroides. Assim, amostras de fezes e sangue foram colhidas de cinco ovelhas no período pré-cobertura e durante a gestação, até duas semanas após o parto. Os níveis séricos de progesterona e estrona e de seus metabólitos fecais foram mensurados por enzimaimunoensaio. Os perfis hormonais séricos e fecais apresentaram correlação positiva significativa para os dois hormônios (R = 0,8572, P < 0,001 para progesterona e R = 0,5893, P < 0,001 para estrona). Os níveis de metabólitos fecais de progesterona apresentaram valores significativamente crescente entre os terços da gestação, corroborando com os níveis séricos e com os relatos da literatura. Adicionalmente, foi possível evidenciar o pico pré-parto de estrona na matriz fecal, porém sem registro na matriz sérica, provavelmente devido ao intervalo de coletas aplicado. Deste modo, este estudo demonstrou a viabilidade do monitoramento dos níveis de progesterona e estrona durante a gestação em ovinos utilizando amostras fecais, possibilitando monitoramento endócrino longitudinal não invasivo durante a gestação nessa espécie.

Monitoring of progesterone and estrone fecal metabolites throughout gestation in ewes / Avaliação dos metabólitos fecais de progesterona e estrona em ovelhas durante a gestação

The aim of this study was to monitor the progesterone and fecal estrone metabolites throughout gestation in ewes correlating with the serum levels of these steroid hormones. Therefore, fecal and serum samples were collected from 5 weeks before mating and gestation until two weeks postparturition. Serum levels of progesterone and estrone and their fecal metabolites were measured by enzyme immunoassay. Serum and fecal hormonal patterns showed a significant correlation for both hormones (R = 0.8572, P < 0.001 for progesterone and R = 0.5893, P < 0.001 for estrone). The fecal progesterone metabolite levels showed significant increasing values among the three thirds of pregnancies, consistent with the serum levels and with the literature. Additionally, the prepartum peak of estrone in the fecal matrix was identified but without observation in the serum matrix due to the blood collection interval used. Therefore, this study demonstrated the viability of progesterone and estrone monitoring throughout gestation using fecal samples, making noninvasive longitudinal endocrine monitoring throughout gestation possible in this species.(AU)

O objetivo deste estudo foi monitorar os níveis de metabólitos fecais de progesterona e estrona ao longo da gestação em ovelhas, correlacionando-os com os níveis séricos desses hormônios esteroides. Assim, amostras de fezes e sangue foram colhidas de cinco ovelhas no período pré-cobertura e durante a gestação, até duas semanas após o parto. Os níveis séricos de progesterona e estrona e de seus metabólitos fecais foram mensurados por enzimaimunoensaio. Os perfis hormonais séricos e fecais apresentaram correlação positiva significativa para os dois hormônios (R = 0,8572, P < 0,001 para progesterona e R = 0,5893, P < 0,001 para estrona). Os níveis de metabólitos fecais de progesterona apresentaram valores significativamente crescente entre os terços da gestação, corroborando com os níveis séricos e com os relatos da literatura. Adicionalmente, foi possível evidenciar o pico pré-parto de estrona na matriz fecal, porém sem registro na matriz sérica, provavelmente devido ao intervalo de coletas aplicado. Deste modo, este estudo demonstrou a viabilidade do monitoramento dos níveis de progesterona e estrona durante a gestação em ovinos utilizando amostras fecais, possibilitando monitoramento endócrino longitudinal não invasivo durante a gestação nessa espécie.(AU)

Estradiol and progesterone fecal metabolites analysis in crab-eating-fox (Cerdocyoun thous) / Análise de metabólitos fecais de estradiol e progesterona em cachorro-do-mato (Cerdocyoun thous)

In this study, four crab-eating fox females (Cerdocyon thous) maintained at the Federal University of Mato Grosso Zoo, Cuiabá, Brazil, were investigated for 12 months, using feces measurement of estradiol and progesterone concentrations. Fecal collections were performed three times a week for hormone extraction. Two methods of analysis, Elisa (EIA) and Radioimmunoassay (RIA), were used in the measurement of progesterone (P4) and estradiol (E2) metabolites. The aim of this study was to compare and validate two different methods of hormone measurement for C. thous. There were no differences regarding the method used. The Radioimmunoassay technique proved to be more sensitive, however, both showed similar results.(AU)

Neste estudo, quatro fêmeas de cachorros-do-mato (Cerdocyon thous) mantidas no Zoológico da Universidade Federal de Mato Grosso, Cuiabá, MT, Brasil, foram investigadas pelo período de 12 meses, mediante a mensuração de concentrações de estradiol e progesterona em fezes. Coletas de fezes foram realizadas três vezes por semana para posterior extração hormonal. Dois métodos de análise de metabólitos fecais, elisaimunoensaio (EIA) e radioimunoensaio (RIA), foram utilizados na mensuração dos metabólitos de progesterona (P4) e estradiol (E2). O objetivo deste estudo foi comparar e validar dois diferentes métodos de mensuração hormonal para C. thous. Não houve diferença significativa com relação ao método empregado. A técnica de radioimunoensaio demonstrou ser mais sensível, no entanto ambas apresentaram resultados semelhantes.(AU)

Estradiol and progesterone fecal metabolites analysis in crab-eating-fox (Cerdocyoun thous) / Análise de metabólitos fecais de estradiol e progesterona em cachorro-do-mato (Cerdocyoun thous)

In this study, four crab-eating fox females (Cerdocyon thous) maintained at the Federal University of Mato Grosso Zoo, Cuiabá, Brazil, were investigated for 12 months, using feces measurement of estradiol and progesterone concentrations. Fecal collections were performed three times a week for hormone extraction. Two methods of analysis, Elisa (EIA) and Radioimmunoassay (RIA), were used in the measurement of progesterone (P4) and estradiol (E2) metabolites. The aim of this study was to compare and validate two different methods of hormone measurement for C. thous. There were no differences regarding the method used. The Radioimmunoassay technique proved to be more sensitive, however, both showed similar results.(AU)

Neste estudo, quatro fêmeas de cachorros-do-mato (Cerdocyon thous) mantidas no Zoológico da Universidade Federal de Mato Grosso, Cuiabá, MT, Brasil, foram investigadas pelo período de 12 meses, mediante a mensuração de concentrações de estradiol e progesterona em fezes. Coletas de fezes foram realizadas três vezes por semana para posterior extração hormonal. Dois métodos de análise de metabólitos fecais, elisaimunoensaio (EIA) e radioimunoensaio (RIA), foram utilizados na mensuração dos metabólitos de progesterona (P4) e estradiol (E2). O objetivo deste estudo foi comparar e validar dois diferentes métodos de mensuração hormonal para C. thous. Não houve diferença significativa com relação ao método empregado. A técnica de radioimunoensaio demonstrou ser mais sensível, no entanto ambas apresentaram resultados semelhantes.(AU)

Concentração dos metabólitos de estradiol e progesterona fecais no cachorro-do-matovinagre (Speothos venaticus) (Lund, 1842) pelos métodos de radioimunoensaio e quimioluminescência / Estradiol and progesterone fecal metabolites concentration of bush dog (Speothos venaticus) (Lund, 1842) by radioimmunoassay and chemiluminescence methods

Este trabalho objetivou comparar dois métodos de dosagem hormonal (quimioluminescência eradioimunoensaio) em extratos fecais liofilizados em cachorro-do-mato-vinagre (Speothos venaticus) paraverificar qual fornece maior acurácia quanto aos resultados. Foram utilizadas 166 amostras fecais de duas fêmeas(fêmea A, n = 80 e fêmea B, n = 86) oriundas do Zoológico de Ilha Solteira/SP, coletadas no período de março adezembro de 2005. As amostras foram liofilizadas, e extraíram-se os metabólitos hormonais fecais. Asconcentrações de estradiol e progesterona foram dosadas utilizando-se kits específicos para dosagem hormonalem humanos. Os resultados de ambos os métodos foram comparados (testes estatísticos). De acordo com ostestes de Pearson e de Tukey, os métodos tiveram resultados compatíveis (P > 0,05). Não houve diferençasignificativa entre os métodos, mostrando que o monitoramento não invasivo de hormônios em extrato fecalcontribuiu na determinação da concentração dos metabólitos de cada fêmea deste estudo. Este revela aadequação e a similaridade entre os métodos de quimioluminescência e radioimunoensaio para a quantificaçãodos metabólitos fecais de estradiol e de progesterona na espécie Speothos venaticus.(AU)

The objective of this study was to compare two methods of hormone concentration assessment(chemiluminescence and radioimmunoassay) in lyophilized fecal extracts from bush dogs (Speothos venaticus) toverify which gives more accurate in results. One hundred and sixty-six fecal samples from two females (femaleA, n = 80 and female B, n = 86) at Ilha Solteira Zoo SP, were collected from March through December 2005.Samples were lyophilized before fecal metabolite hormonal extraction. Estradiol and progesteroneconcentrations were assessed using commercially available kits for human hormone analyses. Both methodsresults were compared by (test statistics). According to Pearson and Tukey tests, the methods had comparableresults (P > 0,05). There was no significant difference between methods, showing the non-invasive monitoring offecal metabolite hormonal contribued to the determination of metabolites concentrations for each female in thisstudy. It demonstrates the suitability and similarity of chemiluminescence and radioimmunoassay forquantification of estradiol and progesterone fecal metabolites in Speothos venaticus species.(AU)

Concentração dos metabólitos de estradiol e progesterona fecais no cachorro-do-matovinagre (Speothos venaticus) (Lund, 1842) pelos métodos de radioimunoensaio e quimioluminescência / Estradiol and progesterone fecal metabolites concentration of bush dog (Speothos venaticus) (Lund, 1842) by radioimmunoassay and chemiluminescence methods

Este trabalho objetivou comparar dois métodos de dosagem hormonal (quimioluminescência eradioimunoensaio) em extratos fecais liofilizados em cachorro-do-mato-vinagre (Speothos venaticus) paraverificar qual fornece maior acurácia quanto aos resultados. Foram utilizadas 166 amostras fecais de duas fêmeas(fêmea A, n = 80 e fêmea B, n = 86) oriundas do Zoológico de Ilha Solteira/SP, coletadas no período de março adezembro de 2005. As amostras foram liofilizadas, e extraíram-se os metabólitos hormonais fecais. Asconcentrações de estradiol e progesterona foram dosadas utilizando-se kits específicos para dosagem hormonalem humanos. Os resultados de ambos os métodos foram comparados (testes estatísticos). De acordo com ostestes de Pearson e de Tukey, os métodos tiveram resultados compatíveis (P > 0,05). Não houve diferençasignificativa entre os métodos, mostrando que o monitoramento não invasivo de hormônios em extrato fecalcontribuiu na determinação da concentração dos metabólitos de cada fêmea deste estudo. Este revela aadequação e a similaridade entre os métodos de quimioluminescência e radioimunoensaio para a quantificaçãodos metabólitos fecais de estradiol e de progesterona na espécie Speothos venaticus.

The objective of this study was to compare two methods of hormone concentration assessment(chemiluminescence and radioimmunoassay) in lyophilized fecal extracts from bush dogs (Speothos venaticus) toverify which gives more accurate in results. One hundred and sixty-six fecal samples from two females (femaleA, n = 80 and female B, n = 86) at Ilha Solteira Zoo – SP, were collected from March through December 2005.Samples were lyophilized before fecal metabolite hormonal extraction. Estradiol and progesteroneconcentrations were assessed using commercially available kits for human hormone analyses. Both methodsresults were compared by (test statistics). According to Pearson and Tukey tests, the methods had comparableresults (P > 0,05). There was no significant difference between methods, showing the non-invasive monitoring offecal metabolite hormonal contribued to the determination of metabolites concentrations for each female in thisstudy. It demonstrates the suitability and similarity of chemiluminescence and radioimmunoassay forquantification of estradiol and progesterone fecal metabolites in Speothos venaticus species.

METABÓLITOS FECAIS DE CORTISOL, ESTRÓGENO E PROGESTERONA EM FÊMEAS DE SAUIM (SAGUINUS URSULUS, PRIMATE, CALLITRICHIDAE)

Os estudos ligados à área da reprodução de primatas não humanos são fundamentais para a manutenção da biodiversidade e para a conservação de espécies ameaçadas de extinção. O Sauim (Saguinus ursulus) é um primata neotropical que pode estar vulnerável devido à grande perda de habitat e pressão antrópica em sua área de abrangência geográfica, pouco se sabe sobre a reprodução desses primatas em cativeiro, provavelmente devido ao fato de que as informações sobre sua fisiologia reprodutiva são extremamente limitadas. Por isso, são necessários aprimorar o manejo reprodutivo e aumentar a reprodução em cativeiro dessa espécie. Utilizamos essa abordagem para fornecer os primeiros dados sobre a sub-infertilidade com base nas informações endócrinas dessa espécie em cativeiro. Coletamos amostras fecais de fêmeas de sauim durante trinta dias consecutivos, totalizando 161 amostras. Os resultados deste estudo fornecem uma caracterização da endocrinologia reprodutiva e confirmam que o monitoramento do hormônio fecal é uma maneira eficaz de monitorar fêmeas para determinar possíveis falhas reprodutivas. Apesar do pequeno tamanho da amostra, o estudo demonstra a validade geral das medições do metabólito fecal do hormônio sexual para monitoramento reprodutivo em sauim, portanto, os métodos descritos aqui podem ajudar a melhorar o manejo reprodutivo das espécies em cativeiro.

Studies related to the reproduction of non-human primates are essential for the maintenance of biodiversity and for the conservation of endangered species. Black-handed Tamarin (Saguinus ursulus) is a neotropical primate vulnerable due to great habitat loss and the anthropic pressure in its geographic distribution area. Little is known about the reproduction of these primates in captivity, probably due to the fact that information on its reproductive biology is extremely limited, Therefore, it is necessary to improve the reproductive management and increase the reproduction in captivity of this species. Here we validated the measurements of fecal metabolites of cortisol, estrogen and progesterone in order to characterize ovarian activity. We used this approach to provide the first data on the sub-infertility based on endocrine information from this species in captivity. We collected fecal samples from female Tamarins for thirty consecutive days, totalizing 161 samples. Our results provide a characterization of these monkeys reproductive endocrinology, and confirm that monitoring of fecal hormone is an effective way to monitor females to determine possible reproductive failures. Despite the small sample size, our study shows the general validity of measurements of the fecal metabolite of the sex hormone for reproductive monitoring in Tamarins. Thus, the methods described here can help improve the reproductive management of species in captivity.

Estudo endócrino reprodutivo e do comportamento sócio-sexual de sagui-de-tufo-preto (Callithrix penicillata) mantido em cativeiro / Reproductive endocrine and socio-sexual behavior study of black-tufted-marmoset (Callithrix penicillata) kept in captivity

A comunicação do estado reprodutivo nos primatas da família Callithrichidae, depende principalmente dos comportamentos sócio-sexuais como um sistema de sinalização primário, uma vez que nestas espécies a ovulação não é percebida pelos machos. Neste trabalho, os padrões de comportamentos sócio-sexuais foram analisados em conjunto com as concentrações de metabólitos fecais dos esteróides sexuais progesterona (MFP), estradiol (MFE) e testosterona (MFT) em casais cativos de Sagüi-de-tufos-pretos (Callithrix penicillata), nas diferentes fases do ciclo ovariano. O grupo estudado era composto por quarto casais adultos, mantidos no Centro de Reabilitação de Animais Selvagens da prefeitura de São Paulo. Os padrões comportamentais foram registrados pelo método de amostragem focal por intervalo de tempo a cada 30 segundos, cinco vezes por semana, totalizando 14.400 registros por animal. A mensuração das concentrações de metabólitos fecais dos esteroides sexuais foram realizados pelo método de enzima imunoensaio (EIE). Os resultados obtidos dessas concentrações possibilitaram a determinação endócrina das fases do ciclo ovariano (folicular e luteal) e de suas respectivas durações, assim como a determinação da fase periovulatória. Foram caracterizados 31 ciclos ovarianos completos, com duração de 24,3±4,1 dias (média ±DP), sendo que a fase folicular compreendeu 13,04±4,8dias e a fase lútea 11,2±4,2 dias. Os comportamentos sócio-sexuais (marcação por cheiro, cheirar genitália, catação e apresentação sexual) e a variável "proximidade" mostraram-se significativamente mais prevalentes na fase periovulatória do que nas demais fases do ciclo. Não houve alteração das concentrações de MFT dos machos ao longo de todo o período estudado. A análise conjunta das concentrações de metabólitos fecais de esteróides sexuais e dos comportamentos sócio-sexuais possibilitou um melhor entendimento das relações endócrino-comportamentais e reprodutivas de C. penicillata. .(AU)

The communication of the female reproductive status in Callithrichidae relies mainly on the socio-sexual behavior, as generally the ovulation is concealed in this primate family by a primary signaling system. In this study the socio-sexual behavior patterns was analyzed in association with the concentration of fecal metabolites of sex steroid hormones progesterone (MFP), estradiol (MFE) and testosterone (MFT) in captive couples of Black-Tufted-Marmoset (Callithrix penicillata), during the different phases of the ovarian cycle. The studied group was composed of four adult couples kept in the São Paulo City Wild Animals Rehabilitation Center. The behavioral patterns were record by focal samplings, with 30 seconds intervals for each observation, five days a week, totalizing 14.400 registers per animal. The measurement of fecal metabolites of progesterone (MFP), estradiol (MFE) and testosterone (MFT) proceeded by enzyme immune assay (EIA). The results allowed to determine the duration of the ovarian cycle and to characterize three different phases (follicular, periovulatory and luteal). It was possible to determine 31 complete cycles that lasted 24.3±4.1 days (Mean ± SD). The follicular and luteal phases lasted 13.04±4.8 and the luteal phase 11.2±4.2 days. The behavioral patterns (scent marking, sniff genitals, grooming and sexual presentation) were more prevalent in the periovulatory phase as the behavioral variable "proximity" as well. There were no variations in the concentration of MFT in the males during the period studied. The associated analyses of the fecal metabolite of sex steroids and the socio-sexual behaviors led to a better understanding of the factors involved in the reproduction of C. penicillata.(AU)

Dosagem de metabólitos de glucocorticoides e progesterona em fezes de papagaio-verdadeiro (Amazona aestiva)

The objectives of the present study were to evaluate fecal concentrations of metabolites of glucocorticoids, measured by enzyme immunoassay with a cortisol antibody and by radioimmunoassay with a corticosterone antibody, and progesterone by radioimmunoassay with a progesterone antibody in blue-fronted parrot (Amazona aestiva) after ACTH challenge.The adrenal stimulation with ACTH (25 UI/animal) resulted in an increase of fecal glucocorticoids metabolites concentration, but it did not affect the concentrations of fecal progesterone metabolites. Although there were no synchronized peaks of glucocorticoid metabolites excretion measured by enzyme immunoassay and radioimmunoassay, there were two peaks of excretion, one at 2-4 hours and other at 8-10 hours. Despite the occurrence of peaks, the analysis of fecal glucocorticoids metabolites and progesterone metabolites showed no effect of group (control and treatment), moment (hours of sampling) and sex.

Os objetivos do presente trabalho foram avaliar as concentrações fecais de metabólitos de glicocorticoides, mensurados por enzimaimunoensaio, empregando-se anticorpos contra cortisol, e por radioimunoensaio, empregando-se anticorpo contra corticosterona, e dos metabólitos da progesterona, mensurados por raioimunoensaio empregando-se anticorpo contra progesterona, em papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva) após desafio com ACTH. A estimulação da adrenal com 25 UI/animal de ACTH resultou na elevação das concentrações de metabólitos de glicocorticoides, mas não modificou a dos metabólitos da progesterona fecal em papagaio-verdadeiro. Embora não tenha sido observada a sincronização dos picos de excreção fecal dos metabólitos de glicocorticoides mensurados por enzimaimunoensaio e radioimunoensaio, houve dois picos de excreção, um entre 2 e 4 horas e outro entre 8 e 10 horas. Apesar dos picos, não foram detectados efeitos de Grupos (Tratamento x Controle), momento (horas de coleta) ou sexo (macho x fêmea) nos resultados observados nas concentrações fecais de metabólitos de glicocorticoides e de progesterona, com os métodos empregados.

Dosagem de metabólitos de glucocorticoides e progesterona em fezes de papagaio-verdadeiro (Amazona aestiva) / Measurement of glucocorticoid and progesterone metabolites in feces of blue fronted parrot (Amazona aestiva)

The objectives of the present study were to evaluate fecal concentrations of metabolites of glucocorticoids, measured by enzyme immunoassay with a cortisol antibody and by radioimmunoassay with a corticosterone antibody, and progesterone by radioimmunoassay with a progesterone antibody in blue-fronted parrot (Amazona aestiva) after ACTH challenge. The adrenal stimulation with ACTH (25 UI/animal) resulted in an increase of fecal glucocorticoids metabolites concentration, but it did not affect the concentrations of fecal progesterone metabolites. Although there were no synchronized peaks of glucocorticoid metabolites excretion measured by enzyme immunoassay and radioimmunoassay, there were two peaks of excretion, one at 2-4 hours and other at 8-10 hours. Despite the occurrence of peaks, the analysis of fecal glucocorticoids metabolites and progesterone metabolites showed no effect of group (control and treatment), moment (hours of sampling) and sex.

Os objetivos do presente trabalho foram avaliar as concentrações fecais de metabólitos de glicocorticoides, mensurados por enzimaimunoensaio, empregando-se anticorpos contra cortisol, e por radioimunoensaio, empregando-se anticorpo contra corticosterona, e dos metabólitos da progesterona, mensurados por raioimunoensaio empregando-se anticorpo contra progesterona, em papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva) após desafio com ACTH. A estimulação da adrenal com 25 UI/animal de ACTH resultou na elevação das concentrações de metabólitos de glicocorticoides, mas não modificou a dos metabólitos da progesterona fecal em papagaio-verdadeiro. Embora não tenha sido observada a sincronização dos picos de excreção fecal dos metabólitos de glicocorticoides mensurados por enzimaimunoensaio e radioimunoensaio, houve dois picos de excreção, um entre 2 e 4 horas e outro entre 8 e 10 horas. Apesar dos picos, não foram detectados efeitos de Grupos (Tratamento x Controle), momento (horas de coleta) ou sexo (macho x fêmea) nos resultados observados nas concentrações fecais de metabólitos de glicocorticoides e de progesterona, com os métodos empregados.

Dosagem de metabólitos de glucocorticoides e progesterona em fezes de papagaio-verdadeiro (Amazona aestiva) / Measurement of glucocorticoid and progesterone metabolites in feces of blue fronted parrot (Amazona aestiva)

The objectives of the present study were to evaluate fecal concentrations of metabolites of glucocorticoids, measured by enzyme immunoassay with a cortisol antibody and by radioimmunoassay with a corticosterone antibody, and progesterone by radioimmunoassay with a progesterone antibody in blue-fronted parrot (Amazona aestiva) after ACTH challenge. The adrenal stimulation with ACTH (25 UI/animal) resulted in an increase of fecal glucocorticoids metabolites concentration, but it did not affect the concentrations of fecal progesterone metabolites. Although there were no synchronized peaks of glucocorticoid metabolites excretion measured by enzyme immunoassay and radioimmunoassay, there were two peaks of excretion, one at 2-4 hours and other at 8-10 hours. Despite the occurrence of peaks, the analysis of fecal glucocorticoids metabolites and progesterone metabolites showed no effect of group (control and treatment), moment (hours of sampling) and sex. (AU)

Os objetivos do presente trabalho foram avaliar as concentrações fecais de metabólitos de glicocorticoides, mensurados por enzimaimunoensaio, empregando-se anticorpos contra cortisol, e por radioimunoensaio, empregando-se anticorpo contra corticosterona, e dos metabólitos da progesterona, mensurados por raioimunoensaio empregando-se anticorpo contra progesterona, em papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva) após desafio com ACTH. A estimulação da adrenal com 25 UI/animal de ACTH resultou na elevação das concentrações de metabólitos de glicocorticoides, mas não modificou a dos metabólitos da progesterona fecal em papagaio-verdadeiro. Embora não tenha sido observada a sincronização dos picos de excreção fecal dos metabólitos de glicocorticoides mensurados por enzimaimunoensaio e radioimunoensaio, houve dois picos de excreção, um entre 2 e 4 horas e outro entre 8 e 10 horas. Apesar dos picos, não foram detectados efeitos de Grupos (Tratamento x Controle), momento (horas de coleta) ou sexo (macho x fêmea) nos resultados observados nas concentrações fecais de metabólitos de glicocorticoides e de progesterona, com os métodos empregados.(AU)

Cortisol profile and glucocorticoid signaling pathways in canine corpus luteum

Glicocorticoides (GCs) modulam a reprodução, interferindo na produção de hormônios gonadais, estradiol (E2) e progesterona (P4). Concomitantemente, E2 e P4 também influenciam a liberação de cortisol. Além disso, em altas concentrações os GCs interferem na via de sinalização da insulina prejudicando o funcionamento dos órgãos, incluindo os do sistema reprodutivo bem como a produção de P4 pelo corpo lúteo (CL). O CL utiliza glicose para manter sua atividade, e o cortisol interfere na via de sinalização da glicose em diversos tecidos, porém ainda não existem estudos quanto à sua atividade no CL canino, tampouco quanto à presença de genes relacionados à via de sinalização dos GCs neste órgão. Os objetivos deste estudo foram caracterizar a expressão dos genes relacionados à via de sinalização dos GCs e da insulina em CL de cadelas cíclicas e identificar expressão diferencial destes genes entre os dias 20 e 60 do diestro, que correspondem à fase final de crescimento do CL e à fase de regressão luteínica, respectivamente. Ainda, avaliar as concentrações basais de cortisol salivar (CS) e metabólitos fecais de glicocorticoides (MGFs) em diferentes dias do diestro (10, 20, 30, 40, 50 e 60) de cadelas cíclicas, comparando com os níveis de E2 e P4 já publicados; correlacionar os valores obtidos nas duas técnicas; e estabelecer um intervalo de valores basais de CS e MFGs para o diestro. Para esta pesquisa foram selecionadas 28 cadelas cíclicas saudáveis; foi realizado o sequenciamento de nova geração (RNA-Seq) dos CLs coletados de 18 animais em dias específicos do diestro (dia 10, 20, 30, 40, 50 e 60 pós-ovulação); das outras 10 cadelas foram coletadas amostras de fezes e saliva, durante todo o diestro, e realizada mensuração da concentração de MFGs e CS. Nos resultados de RNA-Seq foi identificada a expressão dos genes NR3C1, HSD11B1, HSD11B2, SLC2A4, INSR e IRS1. Os genes NR3C1 (p>0,3; FDR>0,6) e SLC2A4 (p>0,02; FDR>0,1) não apresentaram expressão diferencial no diestro. Os genes HSD11B1 (p=0,0001; FDR=0,0021), HSD11B2 (p=0,013; FDR=0,06), INSR (p=0,002; FDR=0,01) mostraram maior expressão no dia 20 do diestro, quando comparado ao dia 60. O gene IRS1 (p=0,0006; FDR= 0,006) estava mais expresso no dia 60 do diestro em relação do dia 20. As dosagens hormonais demonstraram que no dia 10 do diestro (CS=0,0656 ± 0,0237µg/dL e MGFs=110,41 ± 46,51pg/ng) as duas mensurações apresentaram concentrações menores que nos demais dias do diestro (CS=0,1027 ± 0,0496µg/dL e MFGs=220,22 ± 183,74pg/ng). A concentração média de CS=0,0972µg/dL (0,011-0,246µg/dL) e MFGs=189,875pg/ng (9pg/ng-1067,2pg/ng) foi definida para o diestro canino. Estes resultados sugerem que o CL canino também é influenciado pelo cortisol circulante da mesma forma que outros tecidos já estudados, podendo interferir na via de sinalização da insulina e, consequentemente, prejudicar seu funcionamento e o sucesso reprodutivo. Além disso, em relação aos resultados das dosagens hormonais, os níveis baixos de CS e MFGs no dia 10 do diestro corroboram com os achados em literatura e com a queda de E2 neste mesmo período, o que sugere uma associação entre a produção de ambos os hormônios.

Glucocorticoids (GCs) modulate reproduction by interfering in the gonadal hormones production, estradiol (E2) and progesterone (P4). Likewise, E2 and P4 influence release of cortisol. Furthermore, high concentrations of GCs may harm the functioning of organs, including reproductive organs and progesterone (P4) production by the corpus luteum (CL). CL utilizes glucose to maintain its own activity and cortisol interferes with the glucose signaling pathway in several tissues. Studies characterizing cortisol activity and expression of genes related to GC signaling pathways in canine CL are still scarce. The aims of this study were to characterize the expression of genes related to GCs and insulin signaling pathways in cyclic canine CL and to identify differential expression of these genes between day 20 and day 60 of diestrus which correspond, respectively to luteal final growth and regression phases. Moreover to evaluate the basal concentrations of salivary cortisol (SC) and fecal glucocorticoid metabolites (FGMs) on different days of diestrus (10, 20, 30, 40, 50 e 60) in cyclic bitches, moreover to compare E2 and P4 levels already published. As well as to correlate the values of SC and FGMs, and also to establish an interval of basal concentrations of SC and FGMs for diestrus. For this research 28 healthy cyclic bitches were selected; RNA-Seq of the corpora lutea from 18 animals on specific days of diestrus (day 10, 20, 30, 40, 50, 60) was made. Saliva and fecal samples were collected from the other 10 bitches during diestrus phase. Enzyme immunoassay was made to measure the concentrations of SC and FGMs. The RNA-Seq results identified the expression of the genes NR3C1, HSD11B1, HSD11B2, SLC2A4, INSR e IRS1. No difference on the expression of NR3C1 (p>0,3; FDR>0,6) and SLC2A4 (p>0,02; FDR>0,1) was observed during diestrus. Nevertheless HSD11B1 (p=0,0001; FDR=0,0021), HSD11B2 (p=0,013; FDR=0,06), INSR (p=0,002; FDR=0,01) showed a higher expression on day 20 of diestrus and the gene IRS1 (p=0,0006; FDR= 0,006) presented higher expression on day 60 of diestrus. Results related to hormonal evatuations showed lower SC and FGMs concentrations on day 10th (SC=0,0656 ± 0,0237µg/dL and FGMs=110,41 ± 46,51pg/ng) than on the other days of diestrus (SC=0,1027 ± 0,0496 µg/dL e FGMs=220,22 ± 183,74 pg/ng). Average concentrations of SC=0,0972µg/dL (0,011-0,246µg/dL) and FGMs=189,875pg/ng (9pg/ng-1067,2pg/ng) were defined for canine diestrus. These data suggest that canine CL is influenced by cortisol similarly to other tissues in which cortisol may interfere in the insulin signaling pathway and, consequently, its function. Besides that, lower levels of SC and FGMs on day 10th of the diestrus corroborate with the literature data and with the decrease in E2 production at the same period. This data suggest that the production of both hormones are associated.

Performance, metabolic and hormonal responses on peripartum of grazing beef cattle supplemented on pre-partum

Nutritional status at calving is the main factor affecting time to pregnancy. Metabolic parameters that relate nutritional status to physiological processes within grazing animals, mainly Zebu, are not fully understood. This study evaluated the effects of 60-day pre-partum energetic-protein supplementation on performance, metabolic and hormonal responses on peripartum of grazing beef cattle. Thirty-eight Nellore multiparous cows averaging 230 ± 10 days of gestation were used. Two treatments were evaluated: control, without supplementation and daily supplementation (30% of CP) with 1.5 kg during the 60 days before expected calving. The experiment was carried out according to completely randomized design. It was calculated the average daily gain pre-calving and post-calving. The calves were weighted at 45 and 90 days. Body condition scores (BCS) were also recorded at the beginning of the experiment, at calving and 45 days post-partum. Every 30 days grass samples were collected by hand plucked sampling and collected cutting at ground level. To evaluate intake and digestibility, a trial was performed at 45 days before the estimated date of parturition. It was used titanium dioxide (TiO2) to estimate the fecal excretion of animals and indigestible neutral detergent fiber (iNDF) to estimate the pasture dry matter intake (DMI). It was assumed that the supplement consumption will be equal to the quantity offered per animal/day. At last day of the trial, spot urine samples were collected 4 hours before and after the supplement offer. At the 30 and 45 days post-calving, were performed milking to estimate the milk production. Taking calving day as day 0, blood samples were collected before supplementation on days -30, 0, 15, 30, 45 by jugular vein puncture, using vacuum tubes to quantity glucose, blood nitrogen urea (BUN), total protein, albumin, triglycerides, total cholesterol, high density lipoprotein (HDL), non-esterified fatty acid (NEFA), beta-hydroxybutyrate (HB), insulin, insulin-like growth factor (IGF-1), total triiodothyronine (T3), total thyroxine (T4) and progesterone (P4) contents. It was calculated the pregnancy rate and number of days from calving to conception. ADG was higher at pre-partum (P<0.10) for supplemented cows but did no differ at post-partum period (P>0.10). Supplementation did not affect (P>0.10) BCS and calves BW at calving, and at 45 and 90 days. There was no effect of supplementation on milk yield and composition (P>0.10). There were no differences (P>0.10) with regard forage intake and neutral detergent fiber digestibility. The intake and digestibility of CP and OM increased (P<0.10) with supplementation. Supplementation had no effect (P>0.10) regards serum concentration of metabolites and hormones. Concentration of these variables changed significantly (P<0.10) along the days relative to calving. There was no difference on pregnancy rate and, days from calving to conception among treatments (P>0.10). Under these circumstances, providing 1.5 kg of energetic-protein supplement during the last 60 days of gestation do not improve performance, metabolic and hormonal responses in grazing Nellore cows.

O status nutricional no parto é o principal fator que afeta o tempo do parto até a concepção. Os parâmetros metabólicos que relacionam o status nutricional com processos fisiológicos em animais em pastejo, principalmente zebuínos, não estão totalmente compreendidos. Este estudo avaliou os efeitos da suplementação energético-proteica 60 dias pré-parto sobre o desempenho, as respostas metabólicas e hormonais no periparto de vacas de corte em pastejo. Trinta e oito vacas Nelore multíparas com média de 230 ± 10 dias de gestação foram utilizadas. Foram avaliados dois tratamentos: controle, sem suplementação e suplementação diária (30% de CP) com 1,5 kg durante os 60 dias antes da data do parto esperado. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado. Foi calculado o ganho médio diário no pré e pós-parto. Os bezerros foram pesados aos 45 e 90 dias. Os escores de condição corporal (ECC) também foram registrados no início do experimento, no parto e 45 dias pós-parto. A cada 30 dias foram coletadas forragem por simulação manual e corte ao nível do solo. Para avaliar o consumo e digestibilidade, um ensaio foi realizado aos 45 dias antes da data estimada de parto. Foi utilizado dióxido de titânio (TiO2) para estimar a excreção fecal e fibra indigestível em detergente neutro (FDNi) para estimar a ingestão de matéria seca de pasto. Assumiu-se que o consumo de suplemento foi igual à quantidade oferecida por animal/dia. No último dia do ensaio, amostras de urina foram coletadas 4 horas antes e após a oferta de suplemento. Nos 30 e 45 dias pós-parto, foi realizado ordenha para estimar a produção de leite. Tendo o parto como dia 0, amostras de sangue foram coletadas antes da suplementação nos dias -30, 0, 15, 30, 45 por punção da veia jugular, utilizando tubos de vácuo para quantificar os teores de glicose, nitrogênio ureico, proteína total, albumina, triglicerídeos, colesterol total, lipoproteína alta densidade (HDL), ácido graxo não-esterificado (AGNE), beta-hidroxibutirato (HB), insulina, factor de crescimento semelhante à insulina (IGF-1), triiodotironina total (T3), tiroxina total (T4) e progesterona (P4). Foi calculada a taxa de prenhez e o número de dias do parto até a concepção. O GMD foi maior pré-parto (P<0.10) para os animais suplementados, porém no pós-parto não diferiu (P>0.10). A suplementação não afetou (P>0,10) ECC e PC dos bezerros ao nascimento, e os 45 e 90 dias. Não houve efeito da suplementação sobre a produção e a composição do leite (P> 0,10). Não houve diferenças (P> 0,10) em relação à ingestão de forragem e digestibilidade de fibra em detergente neutro. A ingestão e digestibilidade de proteína bruta e matéria orgânica aumentaram (P <0,10) com suplementação. A suplementação não teve efeito (P> 0,10) em relação à concentração sérica de metabolitos e hormônios. A concentração dessas variáveis mudou significativamente (P <0,10) ao longo dos dias em relação ao parto. Não houve diferença na taxa de prenhez e dias do parto até a concepção entre tratamentos (P>0.10). Nestas condições, fornecer 1,5 kg de suplemento de proteína energética durante os últimos 60 dias de gestação não melhora o desempenho, respostas metabólicas e hormonais nas vacas Nelore em pastejo.

Caracterização da atividade ovariana no Urso-de-óculos (Tremarctos ornatus Cuvier, 1825) mediante análise de metabólitos fecais de esteróides sexuais / Characterization of ovarian activity in Spectacled bear (Tremarctos ornatus Cuvier, 1825) by analysis of fecal metabolites of sex steroids

O Urso-de-óculos (Tremarctos ornatus), único urso endêmico da América do Sul, é uma espécie severamente ameaçada devido à perda do seu hábitat e à caça. É importante do ponto de vista da conservação pela função que cumpre no ecossistema onde habita e pela sua relação com a cultura Andina. Por estas razões, torna-se necessária a aplicação de alternativas de conservação a espécie. Uma ferramenta alternativa de conservação é a reprodução assistida, porém, existe pouco conhecimento da reprodução desta espécie. A pouca informação sobre os padrões reprodutivos diminui a possibilidade de se estabelecer programas de reprodução bem sucedidos e torna-se mais difícil a criação de planos de conservação. O objetivo deste estudo foi caracterizar o ciclo ovariano na fêmea do Urso-de-óculos. Para tanto foi realizada a monitoração endócrina por meio da extração e dosagem de metabólitos fecais dos esteróides sexuais: estradiol e progesterona. O estudo foi realizado com amostras colhidas de seis fêmeas de T. ornatus mantidas em cativeiro em dois zoológicos da cidade de Lima, Peru, pelo período de treze meses, desde Fevereiro de 2010 até Abril de 2011. As extrações dos metabólitos fecais foram feitas no Laboratorio de Reproducción Animal, FMVUNMSM, em Lima, Peru; e foram quantificados por enzimaimunoensaio (EIE), no Instituto de Bioquímica Médica, Veterinärmedizinische Universität Wien-Áustria. Os resultados indicam que é possível descrever e monitorar a endocrinologia do ciclo ovariano em T. ornatus de forma não-invasiva através do uso de metabólitos fecais de esteroides sexuais; demonstrando que o Urso-de-óculos em cativeiro é uma espécie que conta com uma reprodução não sazonal, com fase folicular e lútea durando em média 08 e 22 dias, respectivamente. Nestas condições, apresenta em média, de três a quatro fases de atividade ovarianas por ano. Os resultados encontrados ajudarão a compreender o ciclo ovariano nos Ursos-de-óculos e facilitar o desenvolvimento de programas de reprodução assistida na espécie

Spectacled bear (Tremarctos ornatus) is the only bear species that inhabits South America. It is an endangered species due to habitat loss and hunting. For the conservation point of view it is an important species for the ecosystem maintenance and also for their relationship with the Andean culture. For these reasons it is necessary to apply conservation alternatives for this species. Assisted reproduction is an alternative conservation tool; however, there is a lack of knowledge of the Spectacled bear reproduction. Little information about the reproductive parameters diminishes the possibility to establish a successful breeding program and make difficult the implementation of conservation plans for the species. The aim of this study was to characterize the ovarian cycle in the female Spectacled bear with noninvasive techniques for monitoring fecal metabolites of reproductive hormones (estradiol and progesterone). The study was carried out with samples collected by a 13-month period (Feb/10 to April/11), from six captive females T. ornatus kept in two zoological institutions in Lima, Peru. The metabolites extraction was carried out at Laboratory of Animal Reproduction, FMV-UNMSM, in Lima-Peru, and the hormonal analysis was performed in the Institute of Medical Biochemistry, Veterinärmedizinische Universität Wien-Austria. The results show us that it is possible to describe and realize a non-invasive monitoring of ovarian cycles in T. ornatus, with the use of fecal metabolites of sex steroids; and demonstrates that in captive conditions Spectacled bear is a non-seasonal reproduction species, with follicular and luteal phases lasting on average 8 and 22 days, respectively, whereas in captivity has on average three to four stages of ovarian activity per year. These results will help to understand the ovarian cycle in Spectacled Bear and facilitate the development of programs of assisted reproduction in the species

Estudo endócrino-comportamental reprodutivo do sagui-de-tufo-preto (Callithrix penicillata) / Endocrine profile and reproductive behavior in black tufted marmoset (Callithrix penicillata)

A possibilidade de obtenção de informações relevantes através domonitoramento hormonal não-invasivo foram fatores determinantes para o delineamento deste projeto, que possibilitou um estudo detalhado dos aspectos comportamentais, reprodutivos e endócrinos do sagüi-detufo-preto (Callithrix penicillata), mantido em cativeiro. Utilizamos6 casais desagüi-de-tufopreto (Callithrix penicillata) mantidos cativos e em pares no Centro de Reabilitação de Animais Silvestres - CRAS, São Paulo. Todos os animais tiveram seus comportamentos sócio-sexuais registrados pelo método de amostragem focal por intervalo de tempo com registros a cada 30 segundos em sessões de 30 minutos, totalizando 60 horas para cada animal. Foram coletadas amostras fecais matinais, seis vezes por semana durante 6 meses, a fim de serem extraídos e dosados os metabólitos fecais de estradiol, progesterona e testosterona pelo método de enzimaimunoensaio (EIE). O objetivo deste trabalho foi descrever e analisar os comportamentos sócio-sexuais e suas respectivas associações com as concentrações de metabólitos fecais de esteróides sexuais em machos e fêmeas de sagui-detufo- preto (Callithrix penicillata), nas diferentes fases do ciclo ovariano.Os resultados mostraram a duração do ciclo ovariano de 24,3 ± 4,1 dias e as maiores concentrações de metabólitos fecais de estradiol e testosterona das fêmeas na fase lútea. A ocorrência dos comportamentos sócio-sexuais se mostrou mais frequente na fase peri-ovulatória do que nas fases folicular e lútea. Não houve diferença significativa destes comportamentos entre as fases folicular e lútea. Os metabólitos fecais de testosterona dos machos não apresentou diferença significativa entre as fases do ciclo ovariano das fêmeas.

The possibility of attaining relevant information through a non-invasive hormonal monitoring allow the detailed study of behavioral, reproductive and endocrine profile of captive black tufted marmoset (Callithrix penicillata). Six couples of captive black tufted marmoset (Callithrix penicillata) were housed at the Centro de Reabilitação de Animais Silvestres - CRAS, São Paulo. Socio-sexual behaviors of all animals were registered using the method of focal interval sampling with observations performed each 30 seconds in 30 minutes sessions, in a total of 60 hours per animal. Fecal samples were collected during the morning, six times a week, for 6 months, in order to extract and measure fecal metabolites of estradiol, progesterone and testosterone by enzyme immunoassay (EIE). The objective of the present study was to describe and analyze the socio-sexual behaviors and correlate them with the fecal concentrations of sexual steroids metabolites in paired male and female black tufted marmoset (Callithrix penicillata) in different moments of the ovarian cycle. Results demonstrated that helengthofovariancycleis24. ± 4.1 days. Also, higher concentrations of fecal metabolites of estradiol and testosterone in females are observed during the luteal phase.The occurrence of socio-sexual behaviors were more frequent during the periovulatory phase when compared to the follicular and luteal phases. No differences were found when comparing the follicular and luteal phases. In the males, fecal metabolites of testosterone were similar throughout the ovarian cycles of the respective females.

Estudo endócrino-comportamental reprodutivo do sagui-de-tufo-preto (Callithrix penicillata) / Endocrine profile and reproductive behavior in black tufted marmoset (Callithrix penicillata)

A possibilidade de obtenção de informações relevantes através domonitoramento hormonal não-invasivo foram fatores determinantes para o delineamento deste projeto, que possibilitou um estudo detalhado dos aspectos comportamentais, reprodutivos e endócrinos do sagüi-detufo-preto (Callithrix penicillata), mantido em cativeiro. Utilizamos6 casais desagüi-de-tufopreto (Callithrix penicillata) mantidos cativos e em pares no Centro de Reabilitação de Animais Silvestres - CRAS, São Paulo. Todos os animais tiveram seus comportamentos sócio-sexuais registrados pelo método de amostragem focal por intervalo de tempo com registros a cada 30 segundos em sessões de 30 minutos, totalizando 60 horas para cada animal. Foram coletadas amostras fecais matinais, seis vezes por semana durante 6 meses, a fim de serem extraídos e dosados os metabólitos fecais de estradiol, progesterona e testosterona pelo método de enzimaimunoensaio (EIE). O objetivo deste trabalho foi descrever e analisar os comportamentos sócio-sexuais e suas respectivas associações com as concentrações de metabólitos fecais de esteróides sexuais em machos e fêmeas de sagui-detufo- preto (Callithrix penicillata), nas diferentes fases do ciclo ovariano.Os resultados mostraram a duração do ciclo ovariano de 24,3 ± 4,1 dias e as maiores concentrações de metabólitos fecais de estradiol e testosterona das fêmeas na fase lútea. A ocorrência dos comportamentos sócio-sexuais se mostrou mais frequente na fase peri-ovulatória do que nas fases folicular e lútea. Não houve diferença significativa destes comportamentos entre as fases folicular e lútea. Os metabólitos fecais de testosterona dos machos não apresentou diferença significativa entre as fases do ciclo ovariano das fêmeas. (AU)

The possibility of attaining relevant information through a non-invasive hormonal monitoring allow the detailed study of behavioral, reproductive and endocrine profile of captive black tufted marmoset (Callithrix penicillata). Six couples of captive black tufted marmoset (Callithrix penicillata) were housed at the Centro de Reabilitação de Animais Silvestres - CRAS, São Paulo. Socio-sexual behaviors of all animals were registered using the method of focal interval sampling with observations performed each 30 seconds in 30 minutes sessions, in a total of 60 hours per animal. Fecal samples were collected during the morning, six times a week, for 6 months, in order to extract and measure fecal metabolites of estradiol, progesterone and testosterone by enzyme immunoassay (EIE). The objective of the present study was to describe and analyze the socio-sexual behaviors and correlate them with the fecal concentrations of sexual steroids metabolites in paired male and female black tufted marmoset (Callithrix penicillata) in different moments of the ovarian cycle. Results demonstrated that helengthofovariancycleis24. ± 4.1 days. Also, higher concentrations of fecal metabolites of estradiol and testosterone in females are observed during the luteal phase.The occurrence of socio-sexual behaviors were more frequent during the periovulatory phase when compared to the follicular and luteal phases. No differences were found when comparing the follicular and luteal phases. In the males, fecal metabolites of testosterone were similar throughout the ovarian cycles of the respective females. (AU)

Presença de isolamento pós-zigótico entre diferentes citótipos de Mazama americana : avaliação de fêmeas

O veado mateiro, Mazama americana, apresenta populações cariotipicamente diferentes (citótipos) em diferentes regiões brasileiras. Estes citótipos apresentam uma diferenciação cariotípica que originou duas linhagens evolutivas A e B. Estas linhagens apresentam uma distância genética entre elas, maior que em relação a outras espécies de Mazama. A existência de mecanismo de isolamento reprodutivo pós-zigótico, devido a distância cariotípica das linhagens, comprovaria a existência de pelo menos duas espécies dentro do que hoje denomina-se Mazama americana. Para tal foram realizados cruzamentos inter e intracitótipos obtendo prole F1 híbrida (n=6) e pura (n=3). As fêmeas F1 foram analisadas quanto aos seus parâmetros reprodutivos por meio da dosagem de metabólitos fecais de progesterona, histologia de ovário e produção de embriões in vitro. As fêmeas puras apresentaram parâmetros similares aos já descritos para fêmeas de M. americana, porém os parâmetros das fêmeas híbridas apresentaram-se distintos das puras. Duas híbridas apresentaram esterilidade com ausência de células germinativas, resposta negativa ao protocolo de superovulação e ausência de foliculos para aspiração e posterior produção de embriões in vitro. As outras híbridas apresentaram subfertilidade. Uma vez encontrado o isolamento reprodutivo entre as linhagens A e B, foi possível identificar ao menos duas espécies dentro de Mazama americana. Sugerimos que os citótipos podem ser divididos em subespécies das linhagens, porém outros estudos devem ser realizados para que esta hipótese seja comprovada

The red brocket deer, Mazama americana, shows populations that are karyotipically different (cytotypes) distinct regions in Brasil. These karyotype differentiation led to two evolutionary lineages A and B. These lineages have a genetic distance between them greater than for other species of Mazama. Once to these differences culminate in a division of the taxon, need to require a study of reproductive isolation among lineages. For these, crossings were performed within and between cytotypes obtaining F1 hybrid (n = 6) and pure (n = 3) offspring. The F1 females were analyzed as to their reproductive parameters. It was possible to infer the reproductive capacity of these through the measurement of fecal progesterone metabolites, histology of ovary and embryo production in vitro. The pure females showed parameters similar to those described for females of M. American, but the parameters of the hybrid females were lower than those of the pure. Two hybrid presented sterility with absence of germ cells, negative response to the superovulation protocol, and absence of follicles for aspiration and subsequent production of embryos. The other hybrids showed subfertility. Once found the reproductive isolation between strains A and B, it was possible to identify at least two species within Mazama americana. We suggest that these cytotypes can be divided into subspecies strains, but other studies must be conducted so that this hypothesis is verified