Cecocolic intussusception and cecal torsion in cattle / Intussuscepção cecocólica e torção de ceco em bovinos

This work aims to describe the clinical, laboratory, and anatomopathological findings of two bovines, one affected by cecocolic intussusception, and the other by dilation with cecal torsion. The clinical examination demonstrated metallic resonance from the right flank, ruminal and intestinal hypomotility, and abdominal distension, in addition to alterations in feces characteristics. Was observed in the two animals leukocytosis by neutrophilia with regenerative shift to the left, and hyperfibrinogenemia. The analysis of ruminal fluid revealed impairment of the microbiota and an increase in chloride levels. The laparoscopic examination performed on one of the animals showed dilation of the colon, the cecum with hyperemia and serous edema, with a dividing halo between affected and unaffected portions, in addition to reddish peritoneal fluid. In the laparotomy, an enlarged cecum was found, with gaseous and liquid contents, swollen and turgid colon, and peritonitis. In addition to the findings observed during surgery, the anatomopathological examination demonstrated, in bovine 01, intestinal intussusception in the region of the cecocolic valve, and, in bovine 02, twisting of the loop at the ileocecocolic junction. Despite the low occurrence of digestive system disorders in cattle, cecal torsion and intussusception represent serious intestinal clinical conditions. These reports take the attention to the importance of a multidisciplinary approach to provide a correct diagnosis of intestinal diseases.

O objetivo deste trabalho foi descrever os achados clínicos, laboratoriais e anatomopatológicos de dois bovinos, um acometido por intussuscepção cecocólica e o outro por dilatação com torção de ceco. O diagnóstico de ambos os casos foi base-ado nos achados clínicos, laboratoriais, videolaparoscópicos, cirúrgicos e anatomopatológicos. No exame clínico evidenciou-se ressonância metálica no flanco direito, hipomotilidade ruminal e intestinal, distensão abdominal, além de alteração nas carac-terísticas das fezes. Observou-se nos dois animais leucocitose por neutrofilia com desvio para esquerda regenerativo e hiperfi-brinogenia. A análise do fluido ruminal revelou comprometimento da microbiota e elevação nos teores de cloretos. O exame videolaparoscópico, realizado no bovino dois (02), evidenciou dilatação do cólon, ceco com hiperemia e edema de serosa com halo divisório entre porção acometida e não acometida, além de líquido peritoneal de coloração avermelhada. Na laparotomia constatou-se ceco dilatado por conteúdo gasoso e líquido, cólon edemaciado e túrgido e, peritonite. No exame anatomopato-lógico, constatou-se, no bovino um (01), intussuscepção intestinal na região de válvula ceco-cólica e, no bovino (02) torção de alça na junção ileocecocólica. Apesar da baixa ocorrência, a torção de ceco e a intussuscepção acarretam condição intestinal grave e devem ser inseridas na lista de diagnósticos diferenciais das enfermidades digestivas de bovinos. Estes relatos chamam a atenção para a importância da abordagem multidisciplinar no diagnóstico das enfermidades intestinais.

Cecocolic intussusception and cecal torsion in cattle / Intussuscepção cecocólica e torção de ceco em bovinos

This work aims to describe the clinical, laboratory, and anatomopathological findings of two bovines, one affected by cecocolic intussusception, and the other by dilation with cecal torsion. The clinical examination demonstrated metallic resonance from the right flank, ruminal and intestinal hypomotility, and abdominal distension, in addition to alterations in feces characteristics. Was observed in the two animals leukocytosis by neutrophilia with regenerative shift to the left, and hyperfibrinogenemia. The analysis of ruminal fluid revealed impairment of the microbiota and an increase in chloride levels. The laparoscopic examination performed on one of the animals showed dilation of the colon, the cecum with hyperemia and serous edema, with a dividing halo between affected and unaffected portions, in addition to reddish peritoneal fluid. In the laparotomy, an enlarged cecum was found, with gaseous and liquid contents, swollen and turgid colon, and peritonitis. In addition to the findings observed during surgery, the anatomopathological examination demonstrated, in bovine 01, intestinal intussusception in the region of the cecocolic valve, and, in bovine 02, twisting of the loop at the ileocecocolic junction. Despite the low occurrence of digestive system disorders in cattle, cecal torsion and intussusception represent serious intestinal clinical conditions. These reports take the attention to the importance of a multidisciplinary approach to provide a correct diagnosis of intestinal diseases.(AU)

O objetivo deste trabalho foi descrever os achados clínicos, laboratoriais e anatomopatológicos de dois bovinos, um acometido por intussuscepção cecocólica e o outro por dilatação com torção de ceco. O diagnóstico de ambos os casos foi base-ado nos achados clínicos, laboratoriais, videolaparoscópicos, cirúrgicos e anatomopatológicos. No exame clínico evidenciou-se ressonância metálica no flanco direito, hipomotilidade ruminal e intestinal, distensão abdominal, além de alteração nas carac-terísticas das fezes. Observou-se nos dois animais leucocitose por neutrofilia com desvio para esquerda regenerativo e hiperfi-brinogenia. A análise do fluido ruminal revelou comprometimento da microbiota e elevação nos teores de cloretos. O exame videolaparoscópico, realizado no bovino dois (02), evidenciou dilatação do cólon, ceco com hiperemia e edema de serosa com halo divisório entre porção acometida e não acometida, além de líquido peritoneal de coloração avermelhada. Na laparotomia constatou-se ceco dilatado por conteúdo gasoso e líquido, cólon edemaciado e túrgido e, peritonite. No exame anatomopato-lógico, constatou-se, no bovino um (01), intussuscepção intestinal na região de válvula ceco-cólica e, no bovino (02) torção de alça na junção ileocecocólica. Apesar da baixa ocorrência, a torção de ceco e a intussuscepção acarretam condição intestinal grave e devem ser inseridas na lista de diagnósticos diferenciais das enfermidades digestivas de bovinos. Estes relatos chamam a atenção para a importância da abordagem multidisciplinar no diagnóstico das enfermidades intestinais.(AU)

Peritoneal fluid collection in healthy cattle and evaluation of changes in cell morphology during storage in refrigerated and non-refrigerated samples

ABSTRACT: This study aimed to evaluate the appropriate sites of abdominocentesis for peritoneal fluid collection in cattle and to investigate the time of cell viability in vitro, comparing three methods of sample conservation. Twenty-one healthy cattle (19 females and 2 males) were subjected to a laparocentesis procedure to obtain peritoneal fluid, with punctures in three defined sites: left cranial, right cranial, and right caudal. The total peritoneal fluid collected was divided into three aliquots and maintained under three preservation conditions: room temperature (26°C), refrigeration (4°C), and room temperature (26°C) with the addition of 1L of 10% formaldehyde per 1mL of peritoneal fluid. The peritoneal fluid analysis performed immediately after collection consisted of: physical examination (color, appearance, volume, and specific gravity), biochemical measures (pH, total protein, fibrinogen, creatinine, and glucose), and cellularity (total and differential counts). The determination of proteins and the examination of cells were repeated in each separate aliquot at two, four, six, and eight hours after harvest. Data were analyzed through repeated measures ANOVA or Friedman test. The harvest was productive in 67% of cattle. The left cranial and the right cranial puncture sites were the most appropriate. Peritoneal fluid analyzed after collection, the total protein concentration ranged from 1.4 to 3.6g/dL, and number of leukocytes ranged from 54 to 1,322 cells/L; 60 to 95% of leukocytes were lymphocytes. The protein concentration decreased, but the absolute values of leukocytes, lymphocytes, and segmented neutrophils did not change up to eight hours after collection, independent of the maintenance method. Cell lysis was delayed by cooling, and the addition of formaldehyde did not help preserve the integrity of cellular morphology. Laparocentesis is a safe and secure procedure in cattle and maybe more productive when performed in specific sites on the left or right sides of the cranial abdominal wall. Peritoneal fluid samples may be analyzed with reliable results for up to eight hours after collection when kept refrigerated and for up to six hours when kept at room temperature.

RESUMO: O estudo teve como objetivo avaliar os locais adequados de laparocentese para a colheita de fluido peritoneal de bovinos e estabelecer o tempo de viabilidade celular in vitro, comparando três métodos de conservação. Vinte e um bovinos hígidos (19 fêmeas e 2 machos) foram submetidos ao procedimento de laparocentese para obtenção de fluido peritoneal, com punção em três pontos definidos: cranial esquerdo, cranial direito e caudal direito. O volume total do líquido peritoneal foi dividido em três alíquotas mantidas sob três métodos de conservação: temperatura ambiente (26°C); refrigeração (4°C); e temperatura ambiente (26°C) com adição de 1L de formol 10% para cada 1mL de líquido peritonial. A análise do líquido peritoneal realizada imediatamente após sua obtenção consistiu em: exames físico (cor, aspecto, volume e densidade); bioquímicos (pH, proteína total, fibrinogênio, creatinina e glicose); e da celularidade (contagens total e diferencial). A determinação de proteínas e o exame da celularidade foram repetidos, em cada alíquota separada, as duas, quatro, seis e oito horas após a colheita. Análise de variâncias de medidas repetidas ou teste de Friedman foram empregados para avaliação ao longo do tempo. A colheita foi produtiva em 67% dos bovinos e os locais de punção craniais esquerdo e direito foram os mais adequados. A concentração de proteína total variou de 1,4 a 3,6g/dL e o número de leucócitos de 54 a 1.322 células/L, com predomínio de linfócitos (60 a 95% das células) no fluido peritoneal analisado logo após a colheita. A concentração de proteínas diminuiu, mas os valores absolutos de leucócitos, de linfócitos e de neutrófilos segmentados não se modificaram até oito horas após a colheita, independente do método de manutenção das amostras. A lise celular foi retardada pela refrigeração e a adição de formol não contribuiu para preservar a integridade da morfologia celular. A laparocentese é um procedimento seguro e de execução fácil em bovinos sendo mais produtiva quando realizada em locais específicos à esquerda ou à direita craniais da parede abdominal. Amostras de fluido peritoneal podem ser analisadas com resultados confiáveis quando mantidas refrigeradas por até oito horas após a colheita e quando mantidas à temperatura ambiente por até seis horas.

Peritoneal fluid collection in healthy cattle and evaluation of changes in cell morphology during storage in refrigerated and non-refrigerated samples / Colheita do fluido peritoneal de bovinos sadios e verificação das alterações na morfologia celular quando mantido refrigerado ou à temperatura ambiente

This study aimed to evaluate the appropriate sites of abdominocentesis for peritoneal fluid collection in cattle and to investigate the time of cell viability in vitro, comparing three methods of sample conservation. Twenty-one healthy cattle (19 females and 2 males) were subjected to a laparocentesis procedure to obtain peritoneal fluid, with punctures in three defined sites: left cranial, right cranial, and right caudal. The total peritoneal fluid collected was divided into three aliquots and maintained under three preservation conditions: room temperature (26°C), refrigeration (4°C), and room temperature (26°C) with the addition of 1µL of 10% formaldehyde per 1mL of peritoneal fluid. The peritoneal fluid analysis performed immediately after collection consisted of: physical examination (color, appearance, volume, and specific gravity), biochemical measures (pH, total protein, fibrinogen, creatinine, and glucose), and cellularity (total and differential counts). The determination of proteins and the examination of cells were repeated in each separate aliquot at two, four, six, and eight hours after harvest. Data were analyzed through repeated measures ANOVA or Friedman test. The harvest was productive in 67% of cattle. The left cranial and the right cranial puncture sites were the most appropriate. Peritoneal fluid analyzed after collection, the total protein concentration ranged from 1.4 to 3.6g/dL, and number of leukocytes ranged from 54 to 1,322 cells/µL; 60 to 95% of leukocytes were lymphocytes. The protein concentration decreased, but the absolute values of leukocytes, lymphocytes, and segmented neutrophils did not change up to eight hours after collection, independent of the maintenance method. Cell lysis was delayed by cooling, and the addition of formaldehyde did not help preserve the integrity of cellular morphology...(AU)

O estudo teve como objetivo avaliar os locais adequados de laparocentese para a colheita de fluido peritoneal de bovinos e estabelecer o tempo de viabilidade celular in vitro, comparando três métodos de conservação. Vinte e um bovinos hígidos (19 fêmeas e 2 machos) foram submetidos ao procedimento de laparocentese para obtenção de fluido peritoneal, com punção em três pontos definidos: cranial esquerdo, cranial direito e caudal direito. O volume total do líquido peritoneal foi dividido em três alíquotas mantidas sob três métodos de conservação: temperatura ambiente (26°C); refrigeração (4°C); e temperatura ambiente (26°C) com adição de 1µL de formol 10% para cada 1mL de líquido peritonial. A análise do líquido peritoneal realizada imediatamente após sua obtenção consistiu em: exames físico (cor, aspecto, volume e densidade); bioquímicos (pH, proteína total, fibrinogênio, creatinina e glicose); e da celularidade (contagens total e diferencial). A determinação de proteínas e o exame da celularidade foram repetidos, em cada alíquota separada, as duas, quatro, seis e oito horas após a colheita. Análise de variâncias de medidas repetidas ou teste de Friedman foram empregados para avaliação ao longo do tempo. A colheita foi produtiva em 67% dos bovinos e os locais de punção craniais esquerdo e direito foram os mais adequados. A concentração de proteína total variou de 1,4 a 3,6g/dL e o número de leucócitos de 54 a 1.322 células/µL, com predomínio de linfócitos (60 a 95% das células) no fluido peritoneal analisado logo após a colheita. A concentração de proteínas diminuiu, mas os valores absolutos de leucócitos, de linfócitos e de neutrófilos segmentados não se modificaram até oito horas após a colheita, independente do método de manutenção das amostras. A lise celular foi retardada pela refrigeração e a adição de formol não contribuiu para preservar a integridade da morfologia celular...(AU)

Peritoneal fluid collection in healthy cattle and evaluation of changes in cell morphology during storage in refrigerated and non-refrigerated samples / Colheita do fluido peritoneal de bovinos sadios e verificação das alterações na morfologia celular quando mantido refrigerado ou à temperatura ambiente

This study aimed to evaluate the appropriate sites of abdominocentesis for peritoneal fluid collection in cattle and to investigate the time of cell viability in vitro, comparing three methods of sample conservation. Twenty-one healthy cattle (19 females and 2 males) were subjected to a laparocentesis procedure to obtain peritoneal fluid, with punctures in three defined sites: left cranial, right cranial, and right caudal. The total peritoneal fluid collected was divided into three aliquots and maintained under three preservation conditions: room temperature (26°C), refrigeration (4°C), and room temperature (26°C) with the addition of 1µL of 10% formaldehyde per 1mL of peritoneal fluid. The peritoneal fluid analysis performed immediately after collection consisted of: physical examination (color, appearance, volume, and specific gravity), biochemical measures (pH, total protein, fibrinogen, creatinine, and glucose), and cellularity (total and differential counts). The determination of proteins and the examination of cells were repeated in each separate aliquot at two, four, six, and eight hours after harvest. Data were analyzed through repeated measures ANOVA or Friedman test. The harvest was productive in 67% of cattle. The left cranial and the right cranial puncture sites were the most appropriate. Peritoneal fluid analyzed after collection, the total protein concentration ranged from 1.4 to 3.6g/dL, and number of leukocytes ranged from 54 to 1,322 cells/µL; 60 to 95% of leukocytes were lymphocytes. The protein concentration decreased, but the absolute values of leukocytes, lymphocytes, and segmented neutrophils did not change up to eight hours after collection, independent of the maintenance method. Cell lysis was delayed by cooling, and the addition of formaldehyde did not help preserve the integrity of cellular morphology. Laparocentesis is a safe and secure procedure in cattle and maybe more productive when performed in specific sites on the left or right sides of the cranial abdominal wall. Peritoneal fluid samples may be analyzed with reliable results for up to eight hours after collection when kept refrigerated and for up to six hours when kept at room temperature.(AU)

O estudo teve como objetivo avaliar os locais adequados de laparocentese para a colheita de fluido peritoneal de bovinos e estabelecer o tempo de viabilidade celular in vitro, comparando três métodos de conservação. Vinte e um bovinos hígidos (19 fêmeas e 2 machos) foram submetidos ao procedimento de laparocentese para obtenção de fluido peritoneal, com punção em três pontos definidos: cranial esquerdo, cranial direito e caudal direito. O volume total do líquido peritoneal foi dividido em três alíquotas mantidas sob três métodos de conservação: temperatura ambiente (26°C); refrigeração (4°C); e temperatura ambiente (26°C) com adição de 1µL de formol 10% para cada 1mL de líquido peritonial. A análise do líquido peritoneal realizada imediatamente após sua obtenção consistiu em: exames físico (cor, aspecto, volume e densidade); bioquímicos (pH, proteína total, fibrinogênio, creatinina e glicose); e da celularidade (contagens total e diferencial). A determinação de proteínas e o exame da celularidade foram repetidos, em cada alíquota separada, as duas, quatro, seis e oito horas após a colheita. Análise de variâncias de medidas repetidas ou teste de Friedman foram empregados para avaliação ao longo do tempo. A colheita foi produtiva em 67% dos bovinos e os locais de punção craniais esquerdo e direito foram os mais adequados. A concentração de proteína total variou de 1,4 a 3,6g/dL e o número de leucócitos de 54 a 1.322 células/µL, com predomínio de linfócitos (60 a 95% das células) no fluido peritoneal analisado logo após a colheita. A concentração de proteínas diminuiu, mas os valores absolutos de leucócitos, de linfócitos e de neutrófilos segmentados não se modificaram até oito horas após a colheita, independente do método de manutenção das amostras. A lise celular foi retardada pela refrigeração e a adição de formol não contribuiu para preservar a integridade da morfologia celular. A laparocentese é um procedimento seguro e de execução fácil em bovinos sendo mais produtiva quando realizada em locais específicos à esquerda ou à direita craniais da parede abdominal. Amostras de fluido peritoneal podem ser analisadas com resultados confiáveis quando mantidas refrigeradas por até oito horas após a colheita e quando mantidas à temperatura ambiente por até seis horas.(AU)

Peritonite encapsulante esclerosante em cão (Canis familiaris): relato de caso / Sclerosing encapsulating peritonitis in dog (Canis familiaris): case report

Um cão SRD, com cinco anos e histórico de ascite de evolução lenta com estruturas palpáveis foi submetido a exames clínicos, os quais foram inconclusivos. A laparotomia exploratória revelou que a cavidade abdominal estava repleta de líquido serossanguinolento e de múltiplos nódulos de diferentes tamanhos, com superfície irregular, aderidos aos peritônios visceral e parietal, sugestivos de neoplasia maligna. A eutanásia, seguida da necropsia para a coleta de amostras para o diagnóstico histopatológico, foi indicada. O exame anatomopatológico revelou nódulos sésseis e resistentes ao corte, constituídos de tecido conjuntivo fibroso e trabéculas ósseas em arranjo de osso esponjoso e osteoclastos em atividade. O diagnóstico definitivo foi peritonite encapsulante esclerosante.(AU)

A 5-year-old dog with chronic ascites was submitted to several clinical exams, which were inconclusive. Laparotomy revealed abdominal serosanguinous fluid and multiple nodules of several sizes with irregular surface, with visceral and parietal adhesion to the peritoneum, resembling malignant neoplasia. Euthanasia followed by necropsy and collection of samples to histopathological diagnosis was performed. Pathological exam revealed sessile nodules resistant to cut and the microscopy evaluation showed fibrous connective tissue and trabecular bone with sponge bone arrangement associated with active osteoclasts. The definitive diagnosis was sclerosing encapsulating peritonitis.(AU)

Peritonite encapsulante esclerosante em cão (Canis familiaris): relato de caso / Sclerosing encapsulating peritonitis in dog (Canis familiaris): case report

Um cão SRD, com cinco anos e histórico de ascite de evolução lenta com estruturas palpáveis foi submetido a exames clínicos, os quais foram inconclusivos. A laparotomia exploratória revelou que a cavidade abdominal estava repleta de líquido serossanguinolento e de múltiplos nódulos de diferentes tamanhos, com superfície irregular, aderidos aos peritônios visceral e parietal, sugestivos de neoplasia maligna. A eutanásia, seguida da necropsia para a coleta de amostras para o diagnóstico histopatológico, foi indicada. O exame anatomopatológico revelou nódulos sésseis e resistentes ao corte, constituídos de tecido conjuntivo fibroso e trabéculas ósseas em arranjo de osso esponjoso e osteoclastos em atividade. O diagnóstico definitivo foi peritonite encapsulante esclerosante.(AU)

A 5-year-old dog with chronic ascites was submitted to several clinical exams, which were inconclusive. Laparotomy revealed abdominal serosanguinous fluid and multiple nodules of several sizes with irregular surface, with visceral and parietal adhesion to the peritoneum, resembling malignant neoplasia. Euthanasia followed by necropsy and collection of samples to histopathological diagnosis was performed. Pathological exam revealed sessile nodules resistant to cut and the microscopy evaluation showed fibrous connective tissue and trabecular bone with sponge bone arrangement associated with active osteoclasts. The definitive diagnosis was sclerosing encapsulating peritonitis.(AU)

Indigestão Vagal Incomum Em Caprino Associada A Abscesso Hepático Por Corynebacterium Pseudotuberculosis / Unusual Vagal Indigestion In Goat Associated With Liver Abscess By Corynebacterium Pseudotuberculosis / Indigestión Vagal Incomum En Caprino Asociados Al Absceso Del Hígado Por Corynebacterium Pseudotuberculosis

Relata-se indigestão vagal incomum em caprino, relacionada com a manifestação visceral da linfadenite caseosa, causada por Corynebacterium pseudotuberculosis. Inicialmente o animal apresentou timpanismo recidivante, seguido de diminuição do apetite, perda de peso, desidratação moderada, distensão abdominal e rúmen hipermotílico com movimentos fracos. Na laparoruminotomia exploratória observou-se aumento de volume do líquido peritoneal, aderências do retículo a órgãos adjacentes e aumento de volume e rigidez do fígado. Na necropsia, observou-se que a lesão hepática decorria de abscesso por C. pseudotuberculosis. Abscessos e aderências envolvendo a parede do retículo estão entre as principais causas de quadros de indigestão vagal em bovinos, o que sugere que, essas causas também estejam relacionadas com a indigestão na espécie caprina.(AU)

We report unusual vagal indigestion in goats, related to the visceral manifestation of caseous lymphadenitis, caused by Corynebacterium pseudotuberculosis. Initially, the animal presented recurrent bloat, followed by decreased appetite, weight loss, moderate dehydration, abdominal distention and hypermotile rumen with weak movements. In the exploratory laparoruminotomy, there was an increase in volume of the peritoneal fluid, adhesions of the reticulum to adjacent organs and increase of volume and stiffness of the liver. At necropsy, it was observed that the liver lesion was caused by C. pseudotuberculosis. Abscesses and adhesions involving the reticulum wall are among the main causes of vagal indigestion in bovines, suggesting that these causes are also related to indigestion in the goat species.(AU)

Se ha informado de la indigestión vagal incomun en las cabras, en relación con la manifestación visceral de la linfadenitis caseosa causada por Corynebacterium pseudotuberculosis. Inicialmente, el animal mostró hinchazón recurrente, seguido de disminución del apetito, pérdida de peso, deshidratación moderada, distensión abdominal y ruminal hipermotílico con movimientos débiles. En el laparoruminotomia exploratorio observado aumento del volumen de fluido peritoneal, la adhesión retícula a órganos adyacentes y la hinchazón y la rigidez del hígado. En la autopsia, se observó que el absceso lesión hepática se deriva de C. pseudotuberculosis. Abscesos y adherencias que involucran la pared del retículo se encuentran entre las principales causas de los marcos de la indigestión vagal en el ganado, lo que sugiere que estas causas también se relacionan con la indigestión en cabras.(AU)

Indigestão Vagal Incomum Em Caprino Associada A Abscesso Hepático Por Corynebacterium Pseudotuberculosis / Unusual Vagal Indigestion In Goat Associated With Liver Abscess By Corynebacterium Pseudotuberculosis / Indigestión Vagal Incomum En Caprino Asociados Al Absceso Del Hígado Por Corynebacterium Pseudotuberculosis

Relata-se indigestão vagal incomum em caprino, relacionada com a manifestação visceral da linfadenite caseosa, causada por Corynebacterium pseudotuberculosis. Inicialmente o animal apresentou timpanismo recidivante, seguido de diminuição do apetite, perda de peso, desidratação moderada, distensão abdominal e rúmen hipermotílico com movimentos fracos. Na laparoruminotomia exploratória observou-se aumento de volume do líquido peritoneal, aderências do retículo a órgãos adjacentes e aumento de volume e rigidez do fígado. Na necropsia, observou-se que a lesão hepática decorria de abscesso por C. pseudotuberculosis. Abscessos e aderências envolvendo a parede do retículo estão entre as principais causas de quadros de indigestão vagal em bovinos, o que sugere que, essas causas também estejam relacionadas com a indigestão na espécie caprina.

We report unusual vagal indigestion in goats, related to the visceral manifestation of caseous lymphadenitis, caused by Corynebacterium pseudotuberculosis. Initially, the animal presented recurrent bloat, followed by decreased appetite, weight loss, moderate dehydration, abdominal distention and hypermotile rumen with weak movements. In the exploratory laparoruminotomy, there was an increase in volume of the peritoneal fluid, adhesions of the reticulum to adjacent organs and increase of volume and stiffness of the liver. At necropsy, it was observed that the liver lesion was caused by C. pseudotuberculosis. Abscesses and adhesions involving the reticulum wall are among the main causes of vagal indigestion in bovines, suggesting that these causes are also related to indigestion in the goat species.

Se ha informado de la indigestión vagal incomun en las cabras, en relación con la manifestación visceral de la linfadenitis caseosa causada por Corynebacterium pseudotuberculosis. Inicialmente, el animal mostró hinchazón recurrente, seguido de disminución del apetito, pérdida de peso, deshidratación moderada, distensión abdominal y ruminal hipermotílico con movimientos débiles. En el laparoruminotomia exploratorio observado aumento del volumen de fluido peritoneal, la adhesión retícula a órganos adyacentes y la hinchazón y la rigidez del hígado. En la autopsia, se observó que el absceso lesión hepática se deriva de C. pseudotuberculosis. Abscesos y adherencias que involucran la pared del retículo se encuentran entre las principales causas de los marcos de la indigestión vagal en el ganado, lo que sugiere que estas causas también se relacionan con la indigestión en cabras.

AÇÃO ANTI-INFLAMATÓRIA DE OSMOTINA RECOMBINANTE DE Calotropis procera EM MODELOS DE INFECÇÃO EXPERIMENTAL POR Listeria monocytogenes

Calotropis procera (Ait.) R. Br. é uma planta laticífera da família Apocynaceae, conhecida popularmente na Região Nordeste do Brasil como algodão de seda, flor de seda e queimadeira. O látex de C. procera é rico em proteínas e há evidências de que algumas estejam envolvidas com propriedades anti-inflamatórias observadas em diferentes modelos experimentais. Anteriormente, foi isolada do látex de C. procera uma osmotina nomeada como CpOsm. Osmotinas são proteínas que possuem semelhança estrutural e funcional à adiponectina humana, uma adipocina endógena que exibe efeitos anti-inflamatórios. O presente estudo investigou a hipótese de que uma Osmotina recombinante de C. procera (rCpOsm) obtida através de linhagem de E. coli transformada seria capaz de prevenir o desenvolvimento de um processo inflamatório derivado de uma infecção microbiana sistêmica. CalotropisComo modelo de infecção foi utilizado um isolado clínico de Listeria monocytogenes (cepa 619). Esta espécie é associada a infecções de origem alimentar que acometem animais e seres humanos provocando, dentre outros quadros, abortos e miningoencefalite. Inicialmente, foram realizados ensaios com culturas celulares de macrófagos peritoneais (pMØ) obtidas de camundongos Swiss. rCpOsm foi testada em relação à citotoxicidade em concentrações que variaram entre 6,25 e 400 g / mL. Concentrações não tóxicas de rCpOsm (1 e 10 g / mL) foram utilizadas nos tratamentos de pMØ, seguido de infecção por L. monocytogenes. Foi observado que os tratamentos com rCpOsm reduziram a carga bacteriana intracelular e aumentaram a viabilidade de pMØ infectados em comparação ao grupo sem tratamento, apesar da proteína não inibir o crescimento direto de L. monocytogenes in vitro. Nos grupos tratados, foi observada redução na produção de transcritos de mRNA para as citocinas IL-10 e TNF- e aumento na expressão das citocinas IL-1 e IL-6. A administração endovenosa de rCpOsm em camundongos Swiss foi capaz de diminuir significativamente a infiltração de leucócitos na cavidade peritoneal após inóculo de L. monocytogenes, via intraperitoneal. A quantificação de bactérias viáveis no fluido peritoneal e fígado dos animais tratados com rCpOsm foi superior nos animais que não receberam tratamento. A produção de transcritos de mRNA da citocina anti-inflamatória IL-10 no baço dos animais infectados foi aumentada com os tratamentos com rCpOsm. Dados histológicos mostraram que as concentrações de rCpOsm utilizadas não foram tóxicas ao tecido esplênico e hepático dos camundongos, alémda rCpOsm minimizar os danos no tecido hepático durante a fase aguda, após inoculação de L. monocytogenes. Tomados juntos, os resultados mostraram que rCpOsm foi capaz de prevenir um processo inflamatório grave derivado de uma infecção real, causada por L. monocytogenes, diminuindo também o dano histológico em órgão alvo da infecção. Esses dados são discutidos à luz da literatura.

Calotropis procera (Ait.) R. Br. is a laticifer plant from the Apocynaceae family popularly known as silk cotton, silk flower and burner in Brazil´s Northeast. C. procera latex is rich in proteins and there is evidence that some harbor anti-inflammatory properties reported with different experimental models. Previously, an osmotin named CpOsm was isolated from the latex of C. procera. Osmotins are proteins that have a structural and functional similarity to human adiponectin, an endogenous adipokine that exhibits anti-inflammatory actions. The present study investigated the hypothesis that a recombinant C. procera Osmotin (rCpOsm) obtained from a transformed E. coli strain would be able to prevent the development of an inflammatory process derived from a systemic microbial infection. As a model of infection, a clinical isolate of Listeria monocytogenes (strain 619) was used. This species is associated with food-borne infections that affect animals and humans, causing, among, abortions and miningoencephalitis. Firstlly, assays were performed with peritoneal macrophage cell cultures (pMØ) from Swiss mice. rCpOsm was tested for cytotoxicity at concentrations ranging from 6.25 and 400 g / mL. Non-toxic concentrations of rCpOsm (1 and 10 g / mL) were used in pMØ treatments, followed by infection with L. monocytogenes. Despite the fact that rCpOsm does not inhibit the growth of L. monocytogenes in vitro, protein treatments reduced the intracellular bacterial load and increased the viability of infected pMØ compared to the untreated group. It was observed a reduction in the level of mRNA transcripts for the cytokines IL-10 and TNF- and an increase in the expression of cytokines IL-1 and IL-6 in rCpOsm-treated groups. The intravenous administration of rCpOsm to Swiss mice significantly decrease the infiltration of leukocytes in the peritoneal cavity after inoculation of L. monocytogenes, intraperitoneally. Quantification of viable bacteria in the peritoneal fluid and liver of animals treated with rCpOsm was higher in comparison to animals that did not receive treatment. The production of mRNA transcripts for the anti-inflammatory cytokine IL-10 in the spleen of infected animals was increased with rCpOsm treatments. Histological data showed that the rCpOsm was not toxic to the splenic and hepatic tissue of the mice, and they also minimized damages to the liver tissue during the acute phase of L. monocytogenes after inoculation. Taken together, the results showed that rCpOsm was able to prevent a serious inflammatory process derived from a real infection, caused by L. monocytogenes, also decreasing the damage to target organs of infection. These data are discussed in the light of the literature.

Potencial imunomodulatório da 1,3,7 trimetilxantina em modelos de infecção experimental por Listeria monocytogenes

Doenças bacterianas são uma das principais causas de mortalidade no mundo e há uma grande preocupação nos serviços de saúde quando se trata de cepas resistentes aos antibióticos, necessitando que a ciência sempre investigue novas alternativas de tratamento. Estudos com a cafeína (1,3,7 trimetilxantina) mostram sua influência em processos fisiológicos, incluindo a modulação do sistema imune, apresentando um potencial anti-inflamatório. Neste estudo, a hipótese de que a cafeína seria capaz de influenciar na reposta inflamatória derivada de processos infecciosos foi avaliada utilizando-se como modelo de infecção bacteriana uma cepa virulenta de Listeria monocytogenes. Esta espécie é causadora da listeriose, uma doença transmitida através de alimentos contaminados que acomete seres humanos e animais. Foram realizados testes para determinar se a cafeína teria efeito inibitório sobre o crescimento de L. monocytogenes in vitro. Culturas de macrófagos peritoneais (pM) obtidas de camundongos Swiss foram submetidas à infecção com a bactéria e tratamento com cafeína (0,05; 0,5 e 5 g/mL), utilizando-se dois esquemas: a) tratamento com cafeína seguido de infecção; b) infecção seguida de tratamento com cafeína. A quantificação bacteriana intracelular e viabilidade dos pM foi medida ao fim dos experimentos. Posteriormente, ensaios in vivo foram realizados para determinar o potencial anti-inflamatório da cafeína. Neste caso, os animais do grupo experimental foram infectados, via intraperitoneal, com L. monocytogenes (0,2 mL; 1 x 107 células/mL) e, após 30 minutos, foram tratados com a cafeína, via endovenosa, nas concentrações de 0,05; 0,5 ou 5 mg/Kg. Como controles, foram utilizados animais infectados e administrados com salina fosfatada (PBS) ou com o anti-inflamatório dexametasona (DEXA). Após 6 horas os animais foram sacrificados, a quantidade de leucócitos no fluido peritoneal e sangue determinada, sendo a bactéria quantificada em diferentes tecidos e órgãos. Um fragmento do baço foi dissecado para análise da expressão gênica das citocinas TNF-, IL-1, IL-6, IL-10 e da enzima Óxido Nítrico Sintase induzível (iNOS). Os resultados mostraram que a cafeína não apresenta ação antimicrobiana direta contra L. monocytogenes, mas foi capaz de aumentar a viabilidade dos macrófagos infectados, apesar de não haver maior eliminação da bactéria no interior dos pM. Nos testes in vivo, a administração de cafeína produziu ação anti-inflamatória, reduzindo de forma significante o recrutamento de leucócitos para a cavidade peritoneal e a quantidade de leucócitos circulantes no sangue. Quando comparados ao grupo controle, a expressão gênica das citocinas inflamatórias IL-1 e IL-6 foi diminuída e a da citocina anti-inflamatória IL-10 foi aumentada. A expressão da enzima iNOS também foi diminuída nos grupos tratados com cafeína, quando comparados ao grupo PBS infectado. Os dados aqui apresentados apontam para o potencial da utilização de cafeína como anti-inflamatório na prevenção de processos inflamatórios graves derivados de infecções bacterianas.

Doenças bacterianas são uma das principais causas de mortalidade no mundo e há uma grande preocupação nos serviços de saúde quando se trata de cepas resistentes aos antibióticos, necessitando que a ciência sempre investigue novas alternativas de tratamento. Estudos com a cafeína (1,3,7 trimetilxantina) mostram sua influência em processos fisiológicos, incluindo a modulação do sistema imune, apresentando um potencial anti-inflamatório. Neste estudo, a hipótese de que a cafeína seria capaz de influenciar na reposta inflamatória derivada de processos infecciosos foi avaliada utilizando-se como modelo de infecção bacteriana uma cepa virulenta de Listeria monocytogenes. Esta espécie é causadora da listeriose, uma doença transmitida através de alimentos contaminados que acomete seres humanos e animais. Foram realizados testes para determinar se a cafeína teria efeito inibitório sobre o crescimento de L. monocytogenes in vitro. Culturas de macrófagos peritoneais (pM) obtidas de camundongos Swiss foram submetidas à infecção com a bactéria e tratamento com cafeína (0,05; 0,5 e 5 g/mL), utilizando-se dois esquemas: a) tratamento com cafeína seguido de infecção; b) infecção seguida de tratamento com cafeína. A quantificação bacteriana intracelular e viabilidade dos pM foi medida ao fim dos experimentos. Posteriormente, ensaios in vivo foram realizados para determinar o potencial anti-inflamatório da cafeína. Neste caso, os animais do grupo experimental foram infectados, via intraperitoneal, com L. monocytogenes (0,2 mL; 1 x 107 células/mL) e, após 30 minutos, foram tratados com a cafeína, via endovenosa, nas concentrações de 0,05; 0,5 ou 5 mg/Kg. Como controles, foram utilizados animais infectados e administrados com salina fosfatada (PBS) ou com o anti-inflamatório dexametasona (DEXA). Após 6 horas os animais foram sacrificados, a quantidade de leucócitos no fluido peritoneal e sangue determinada, sendo a bactéria quantificada em diferentes tecidos e órgãos. Um fragmento do baço foi dissecado para análise da expressão gênica das citocinas TNF-, IL-1, IL-6, IL-10 e da enzima Óxido Nítrico Sintase induzível (iNOS). Os resultados mostraram que a cafeína não apresenta ação antimicrobiana direta contra L. monocytogenes, mas foi capaz de aumentar a viabilidade dos macrófagos infectados, apesar de não haver maior eliminação da bactéria no interior dos pM. Nos testes in vivo, a administração de cafeína produziu ação anti-inflamatória, reduzindo de forma significante o recrutamento de leucócitos para a cavidade peritoneal e a quantidade de leucócitos circulantes no sangue. Quando comparados ao grupo controle, a expressão gênica das citocinas inflamatórias IL-1 e IL-6 foi diminuída e a da citocina anti-inflamatória IL-10 foi aumentada. A expressão da enzima iNOS também foi diminuída nos grupos tratados com cafeína, quando comparados ao grupo PBS infectado. Os dados aqui apresentados apontam para o potencial da utilização de cafeína como anti-inflamatório na prevenção de processos inflamatórios graves derivados de infecções bacterianas.

Influência do parasitismo intestinal sobre os parâmetros hematológicos e de líquido peritoneal em equinos de tração / Influence of intestinal parasitism on peritoneal fluid and hematological parameters in horses used for traction

O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência do parasitismo intestinal crônico sobre parâmetros hematológicos e de líquido peritoneal por meio da comparação dessas características em equinos naturalmente parasitados e após administração de anti-helmíntico. Utilizaram-se 21 cavalos de tração urbana, entre dois e 19 anos, sem raça definida e com resultado de exame parasitológico superior a 300 ovos por grama de fezes. Foi realizada avaliação física e coleta de fezes, de líquido peritoneal e de sangue em dois momentos do experimento (D0 e D15), sendo efetuado tratamento antiparasitário no D0. No fluido peritoneal foram avaliadas características físicas, bioquímicas, bem como contagem de células nucleadas (CTCN) e diferenciação celular. No sangue foram determinados valores eritrocitários, leucocitários, proteínas plasmáticas totais, glicose e fibrinogênio plasmáticos, além de fosfatase alcalina (FA) sérica. A análise dos parâmetros avaliados não demonstrou diferença significativa entre animais parasitados e após administração de anti-helmíntico, exceto para valores de CTCN, contagem de neutrófilos segmentados e grau de turbidez do líquido peritoneal. As médias se mantiveram dentro dos intervalos de referência, com exceção da CTCN do líquido peritoneal no D0. No líquido peritoneal, houve predomínio de neutrófilos segmentados, seguidos por macrófagos, linfócitos e eosinófilos em ambos os momentos de avaliação. Observaram-se tendência do quadro eritrocitário em manter-se próximo aos limites inferiores e leve leucocitose no D0. A infecção parasitária nos animais estudados foi predominantemente moderada, o que oferece poucos riscos clínicos. Nessas condições, pode-se afirmar que a CTCN, a contagem absoluta de neutrófilos segmentados e o grau de turbidez do líquido peritoneal são influenciados e podem ser considerados ferramentas diagnósticas e prognósticas úteis nas parasitoses intestinais crônicas.(AU)

The aim of this study was to evaluate the influence of chronic intestinal parasitism on hematological parameters and peritoneal fluid. It was done by comparing these features in horses used for traction naturally parasitized and after the administration of anthelmintic. Twenty-one horses, between two and nineteen years of age, of mixed breed and with results of parasitological examination of more than 300 eggs per gram of feces were studied. Physical assessment and samples of feces were conducted, as well as blood and peritoneal fluid in the two phases of the experiment (D0 and D15). Antiparasitic treatment in D0 has also been done. The peritoneal fluid was evaluated for physical and biochemical features, and also total count of nucleated cells (TCNC) and cell differentiation. The blood was determined for erythrocyte, leukocyte, plasma total protein, glucose and plasma fibrinogen, and alkaline phosphatase (ALP) levels. The analysis of these parameters showed no significant difference between parasitized animals and after administration of anthelmintic except for TCNC values, segmented neutrophil count and degree of turbidity in peritoneal fluid. The averages remained within the reference ranges, except the TCNC in the peritoneal fluid in D0. In the peritoneal fluid there was a predominance of segmented neutrophils, followed by macrophages, lymphocytes and eosinophils in both time points. A trend was observed in erythrocyte frame to keep close to the lower limits and mild leukocytosis in D0. Parasitic infection of the animals studied was predominantly moderate, which offered minimal clinical risks. After that, it can be affirmed that the TCNC, absolute segmented neutrophil count and targeted degree of turbidity in peritoneal fluid are influenced and can be considered useful diagnostic and prognostic tools in chronic intestinal parasitism.(AU)

Influência do parasitismo intestinal sobre os parâmetros hematológicos e de líquido peritoneal em equinos de tração / Influence of intestinal parasitism on peritoneal fluid and hematological parameters in horses used for traction

O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência do parasitismo intestinal crônico sobre parâmetros hematológicos e de líquido peritoneal por meio da comparação dessas características em equinos naturalmente parasitados e após administração de anti-helmíntico. Utilizaram-se 21 cavalos de tração urbana, entre dois e 19 anos, sem raça definida e com resultado de exame parasitológico superior a 300 ovos por grama de fezes. Foi realizada avaliação física e coleta de fezes, de líquido peritoneal e de sangue em dois momentos do experimento (D0 e D15), sendo efetuado tratamento antiparasitário no D0. No fluido peritoneal foram avaliadas características físicas, bioquímicas, bem como contagem de células nucleadas (CTCN) e diferenciação celular. No sangue foram determinados valores eritrocitários, leucocitários, proteínas plasmáticas totais, glicose e fibrinogênio plasmáticos, além de fosfatase alcalina (FA) sérica. A análise dos parâmetros avaliados não demonstrou diferença significativa entre animais parasitados e após administração de anti-helmíntico, exceto para valores de CTCN, contagem de neutrófilos segmentados e grau de turbidez do líquido peritoneal. As médias se mantiveram dentro dos intervalos de referência, com exceção da CTCN do líquido peritoneal no D0. No líquido peritoneal, houve predomínio de neutrófilos segmentados, seguidos por macrófagos, linfócitos e eosinófilos em ambos os momentos de avaliação. Observaram-se tendência do quadro eritrocitário em manter-se próximo aos limites inferiores e leve leucocitose no D0. A infecção parasitária nos animais estudados foi predominantemente moderada, o que oferece poucos riscos clínicos. Nessas condições, pode-se afirmar que a CTCN, a contagem absoluta de neutrófilos segmentados e o grau de turbidez do líquido peritoneal são influenciados e podem ser considerados ferramentas diagnósticas e prognósticas úteis nas parasitoses intestinais crônicas.(AU)

The aim of this study was to evaluate the influence of chronic intestinal parasitism on hematological parameters and peritoneal fluid. It was done by comparing these features in horses used for traction naturally parasitized and after the administration of anthelmintic. Twenty-one horses, between two and nineteen years of age, of mixed breed and with results of parasitological examination of more than 300 eggs per gram of feces were studied. Physical assessment and samples of feces were conducted, as well as blood and peritoneal fluid in the two phases of the experiment (D0 and D15). Antiparasitic treatment in D0 has also been done. The peritoneal fluid was evaluated for physical and biochemical features, and also total count of nucleated cells (TCNC) and cell differentiation. The blood was determined for erythrocyte, leukocyte, plasma total protein, glucose and plasma fibrinogen, and alkaline phosphatase (ALP) levels. The analysis of these parameters showed no significant difference between parasitized animals and after administration of anthelmintic except for TCNC values, segmented neutrophil count and degree of turbidity in peritoneal fluid. The averages remained within the reference ranges, except the TCNC in the peritoneal fluid in D0. In the peritoneal fluid there was a predominance of segmented neutrophils, followed by macrophages, lymphocytes and eosinophils in both time points. A trend was observed in erythrocyte frame to keep close to the lower limits and mild leukocytosis in D0. Parasitic infection of the animals studied was predominantly moderate, which offered minimal clinical risks. After that, it can be affirmed that the TCNC, absolute segmented neutrophil count and targeted degree of turbidity in peritoneal fluid are influenced and can be considered useful diagnostic and prognostic tools in chronic intestinal parasitism.(AU)

POTENCIAL DA LECTINA CFL (Cratylia argentea) COMO ADJUVANTE TERAPÊUTICO EM CAMUNDONGOS INFECTADOS COM Listeria monocytogenes

Doenças infecciosas causadas por micro-organismos antibiótico-resistentes são uma das principais causas de mortalidade no mundo, gerando constantemente a necessidade de novos tratamentos. A lectina CFL (Cratylia argentea) é capaz de modular a resposta do sistema imunológico e se apresenta como potencial produto fitoterápico. Neste estudo, tal potencial foi avaliado em um modelo de infecção bacteriana causada por Listeria monocytogenes, causadora da listeriose, doença que representa alto risco para a saúde pública e para a economia. Para isso, foram utilizados 32 camundongos. Os animais do grupo experimental foram infectados via intraperitoneal com uma suspensão bacteriana a 1 x 107 UFC/mL e, após 30 minutos, foram tratados com a lectina CFL via endovenosa nas concentrações de 0,1 ou 10 mg/kg. Como controle, foram utilizados animais não tratados e não infectados. Após 24 horas, foi realizada eutanásia dos animais. Em seguida, foi quantificado o número de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) no baço, fígado, pulmão, fluido peritoneal, sangue e macrófagos intraperitoneais dos animais; foram realizadas contagens total e diferencial de leucócitos circulantes no sangue e fluido peritoneal; foi analisado o dano nos tecidos dos órgãos por meio de histopatologia; o RNA do baço dos animais foi extraído para análise da expressão gênica das citocinas IL-1,IL-6, IL-10 e TNF- e da enzima iNOS; e foi avaliado o efeito antimicrobiano direto da lectina CFL contra L. monocytogenes in vitro. Como resultado, observou-se um aumento do peso médio dos órgãos dos animais infectados, mas isso foi prevenido pelo tratamento com a lectina CFL a 10 mg/kg, enquanto a lectina a 0,1 mg/kg foi capaz de prevenir o aumento do fígado. A lectina CFL a 10 mg/kg provocou redução da carga bacteriana no baço, fígado, sangue e macrófagos intraperitoneais dos animais infectados. Não se observou diferenças na contagem de leucócitos totais no sangue e fluido peritoneal entre os grupos animais. O número de neutrófilos, linfócitos, monócitos e eosinófilos não foi alterado no fluido peritoneal dos animais tratados com a lectina. Não foi encontrada diferença significativa na expressão gênica das citocinas, mas os animais infectados e tratados com a lectina CFL a 10 mg/kg tiveram aumento na expressão de iNOS. Os resultados sugerem que a lectina CFL possui efeito antiinfeccioso contra infecção por L. monocytogenes.

Infectious diseases caused by antibiotic-resistant microorganisms are one of the main causes of mortality in the world, constantly generating the need for new treatments. CFL lectin (Cratylia argentea) is capable of modulating the immune system response and presents itself as a potential herbal product. In this study, this potential was evaluated in a model of bacterial infection caused by Listeria monocytogenes, which causes listeriosis, a disease that represents a high risk to public health and to the economy. For this, 32 mice were used. The animals in the experimental group were infected intraperitoneally with a bacterial suspension at 1 x 107 CFU / mL and, after 30 minutes, treated with CFL intravenously at concentrations of 0.1 or 10 mg / kg. As control, untreated and uninfected animals were used. After 24 hours, the animals were euthanized. Then, the number of Colony Forming Units (CFU) in the spleen, liver, lung, peritoneal fluid, blood and intraperitoneal macrophages of the animals was quantified; total and differential counts of leukocytes circulating in blood and peritoneal fluid were performed; damage to organ tissues was analyzed using histopathology; RNA from spleen was extracted to analyze the gene expression of the cytokines IL-1, IL-6, IL10 and TNF- and the enzyme iNOS; and the direct antimicrobial effect of lectin CFL against L. monocytogenes in vitro was evaluated. As a result, an increase in the average organ weight of the infected animals was observed, but this was prevented by treatment with CFL (10 mg / kg), while CFL (0.1 mg / kg) was able to prevent the increase in liver. CFL at 10 mg / kg reduced the bacterial load in the spleen, liver, blood and intraperitoneal macrophages of infected animals. There were no differences in the total leukocyte count in blood and peritoneal fluid between animal groups. The number of neutrophils, lymphocytes, monocytes and eosinophils did not change in the peritoneal fluid of animals treated with the lectin. No significant difference was found in cytokine gene expression, but animals infected and treated with CFL at 10 mg / kg had an increase in iNOS expression. The results suggest that the lectin CFL has an anti-infectious effect against infection by L. monocytogenes.

Contribuições para o diagnóstico e epidemiologia da leptospirose em ovinos criados em condições semiáridas

Em regiões de clima semiárido existem fatores ambientais que são adversos à sobrevivência e propagação das leptospiras, assim o papel das peculiaridades nas rotas de transmissão que independem do ambiente precisam ser melhor investigadas. Dessa forma, buscou-se gerar contribuições para o diagnóstico e epidemiologia da infecção por Leptospira sp. em ovinos criados em condições semiáridas. No Capítulo I, descreveu um estudo a partir de 104 ovelhas fêmeas adultas amostradas durante o período seco e chuvoso, compreendidos entre os anos de 2018 e 2019. Coletou-se na linha de abate amostras de fluido vaginal, urina, bexiga, rim, útero, tuba uterina, ovário e placenta para posterior detecção molecular por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR). As amostras de melhores reações foram amplificadas e submetidas ao sequenciamento genético. Para o cultivo bacteriológico, apenas fluido vaginal e urina foram utilizados, enquanto o sangue foi destinado à investigação sorológica por meio do teste de aglutinação microscópica (SAM). No total, foram detectados anticorpos anti- Leptospira sp. em 26 (25%) dos animais analisados pela SAM na diluição inicial 1:50, enquanto que 69 (66,3%) animais possuíam, no mínimo, um órgão/fluido com presença de DNA leptospiral. Das 758 amostras de órgãos/fluidos dos tratos genital e urinário, em 519 (68,5%) amostras havia presença de DNA. Na análise das variáveis estatísticas de cada tipo de material biológico entre período seco e chuvoso, apenas no fluido vaginal houve diferença significativa entre as proporções (p <0,001), no qual o período seco se sobrepôs. Foi possível realizar o sequenciamento em nove amostras com 99% de similaridade à L. interrogans e isolamento em três amostras de fluido vaginal. E em três cultivos de fluido vaginal foram obtidos resultados positivos na PCR, indicando a recuperação de estirpes viáveis. No Capítulo II foi realizado um estudo para detectar a transmissão vertical de Leptospira sp. em fetos de ovinos abatidos no Semiárido Nordestino. Após abate das progenitoras, os conceptos foram retirados do ambiente uterino e conduzidos ao laboratório, onde foram necropsiados, Amostras de sangue das matrizes e dos fetos foram coletados para investigação da ocorrência de anticorpos anti-Leptospira sp. através da SAM. Para análise molecular através da PCR a partir dos conceptos, foram coletadas amostras do sistema nervoso central (SNC), pulmão, fígado, baço, conteúdo estomacal, líquido peritoneal, rim, bexiga, urina e sistema reprodutor e naqueles que estavam no início da formação, as amostras consistiram apenas em sistema nervoso central e macerado do tórax (ovóide córmico). Foram amostradas 23 progenitoras e destas, sete apresentaram anticorpos a partir do título 50. Em relação aos fetos, foram coletados 29, sendo dois (6,9%) soropositivos na titulação 10 para os sorogrupos Pyrogenes, Tarassovi e Autumnalis. Na PCR, 24 (82,7%) tiveram pelo menos um órgão positivo. De um total de 209 amostras, em 61 (29,2%) foi comprovada a presença de DNA leptospírico. O sequenciamento de DNA leptospírico foi possível em três amostras de fragmentos de rim, SNC e fígado com 99,3% similares a L. interrogans. Na análise macroscópica foram observados que três fetos possuíam múltiplas malformações.

In regions with a semiarid climate, there are environmental factors that are adverse to the survival and spread of leptospires, so the role of peculiarities in transmission routes that are independent of the environment needs to be further investigated. Thus, it sought to generate contributions to the diagnosis and epidemiology of infection by Leptospira sp. in sheep reared in semiarid conditions. In Chapter I, a study was described of 104 adult female sheep sampled during the dry and rainy period, between the years 2018 and 2019. Samples of vaginal fluid, urine, bladder, kidney, uterus, uterine tube, ovary and placenta were collected in the slaughter line for subsequent molecular detection through the polymerase chain reaction (PCR). The samples with the best reactions were amplified and subjected to genetic sequencing. For bacteriological culture, only vaginal fluid and urine were used, while the blood was destined for serological investigation through the microscopic agglutination test (SAM). In total, anti-Leptospira sp. in 26 (25%) of the animals analyzed by SAM in the initial 1:50 dilution, while 69 (66.3%) animals had at least one organ/fluid with the presence of leptospiral DNA. Of the 758 samples of organs/fluids from the genital and urinary tracts, in 519 (68.5%) samples there was DNA. In the analysis of the statistical variables of each type of biological material between dry and rainy periods, only in the vaginal fluid had a significant difference between the proportions (p <0.001), in which the dry period overlapped. It was possible to perform the sequencing in nine samples with 99% similarity to L. interrogans and isolation in three samples of vaginal fluid. And in three cultures of vaginal fluid, positive results were obtained in PCR, indicating the recovery of viable strains. In Chapter II, a study was carried out to detect vertical transmission of Leptospira sp. in fetuses of sheep slaughtered in the Northeastern Semiarid. After slaughtering the progenitors, the fetuses were removed from the uterine environment and taken to the laboratory, where they were necropsied. Blood samples from the matrices and fetuses were collected to investigate the occurrence of anti-Leptospira sp. through SAM. For molecular analysis through PCR from the conceptuses, samples of the central nervous system (SNC), lung, liver, spleen, stomach contents, peritoneal fluid, kidney, bladder, urine and reproductive system were collected and from those who were at the beginning of formation , the samples consisted only of central nervous system and macerated chest (choroid ovoid). 23 progenitors were sampled and of these, seven showed antibodies from the title 50. Regarding the fetuses, 29 were collected, two (6.9%) of whom were seropositive in titration 10 for the serogroups Pyrogenes, Tarassovi and Autumnalis. In PCR, 24 (82.7%) had at least one positive organ. Of a total of 209 samples, 61 (29.2%) demonstrated the presence of leptospiric DNA. Leptospiric DNA sequencing was possible in three samples of kidney, CNS and liver fragments with 99.3% similar to L. interrogans. In macroscopic analysis, it was observed that three fetuses had multiple malformations.

PROPRIEDADES ANTI-INFLAMATÓRIAS DE PROTEASES CISTEÍNICAS DO LÁTEX DA PLANTA MEDICINAL Calotropis procera (Ait.) R. Br. APLICADAS AO CONTROLE DE INFECÇÕES POR Salmonella

Calotropis procera (Apocynaceae) é uma planta medicinal, cujas proteínas extraídas do seu látex têm sido reportadas por apresentar importantes atividades biológicas. Em particular, foi identificado que uma fração proteica rica em proteases cisteínicas (LPPII), quando administradas em animais de laboratório, demonstra relevante ação anti-inflamatória e mantem a homeostase da coagulação sanguínea em camundongos infectados por Salmonella. No presente estudo, um modelo murino de infecção sistêmica causada por Salmonella Typhimurium foi utilizado para avaliar a influência de LPPII sobre o controle da inflamação decorrente da infecção. Dois esquemas de tratamentos foram avaliados, preventivo e curativo. No modelo de tratamento preventivo, os animais experimentais receberam LPPII (10mg/kg) por via endovenosa (ev), enquanto os grupos controles foram administrados com LPPII+IAA (10mg/kg), cujas as proteases foram inativadas com Iodoacetamida, PBS (ev) ou dexametasona (0,5mg/cavidade). Após 30 min, os animais foram desafiados com S. Typhimurium (105 UFC/mL), por via intraperitoneal (ip). Após 6 horas da infecção, os camundongos foram submetidos aos procedimentos de eutanásia e análises. No modelo de tratamento curativo, os animais foram infectados com S. Typhimurium (105 UFC/mL) (ip) e durante dois dias consecutivos foram tratados com LPPII (10mg/kg) ou administrados com LPII+IAA (10mg/kg), PBS (ev) ou dexametasona (ip). Após 72 horas de infecção, os grupos foram submetidos aos procedimentos de eutanásia para coleta de amostras e análises. Os resultados demonstraram que, nos dois esquemas de tratamento, não houve depuração bacteriana no baço, fígado, fluido peritoneal e sangue dos animais experimentais quando comparados aos controles. Também foi possivel observar que o tratamento com LPPII reduziu significativamente a quantidade de leucócitos na cavidade peritoneal dos animais, em relação aos grupos controles LPPII+IAA e PBS. Também houve redução da expressão gênica de TNF-, IL-12 e IFN- nos animais que receberam LPPII. Ainda, não houve aumento da sobrevida de animais tratados com LPPII e infectados com Salmonella. Finalmente, uma osmotina obtida de LPPII foi exposta a culturas de macrófagos peritoneais previamente estimulados com LPS. Foi observado que os tratamentos reduziram de forma significativa da expressão gênica de IL-1, mas não TNF-. Conlui-se que proteases cisteínicas presentes no látex de C. procera são capazes de diminuir a inflamação no peritoneo de camundongos infectados com Salmonella Typhimurium. Apesar dos mecanismos envolvidos neste efeito não estejam completamente elucidados, foi demonstrado que uma osmotina presente em LPPII apresenta potencial anti-inflamatório e possível relevância terapêutica.

Calotropis procera (Apocynaceae) is a medicinal plant by which its laticifer proteins have been reported as having important biological activities. In particular, a protein fraction rich in cysteine proteases (LPPII) was shown antinflammatory and capable to maintain blood clotting homeostasis in Salmonella-infected mice. In the present study, a murine model of systemic infection caused by Salmonella Typhimurium was used to evaluate the influence of LPPII on control of infection-induced inflammation. Preventive and curative treatment regimens were evaluated. In the preventive treatment schedule, experimental animals received LPPII (10mg/kg) intravenously (ev), whereas the control groups were administered with LPPII + IAA (10mg/kg), whose proteases were inactivated with Iodoacetamide, PBS intravenously or dexamethasone (0.5mg/animal) (ip). After 30 min, the animals were challenged with S. Typhimurium (105 CFU/mL) intraperitoneally (ip). After 6 hours of infection, the mice were submitted to euthanasia procedures and analyzes. In the curative treatment schedule, the animals were infected with S. Typhimurium (105 CFU/mL) (ip) and for two consecutive days were treated with LPPII (10mg/kg) or administered with LPII + IAA (10mg/kg), PBS intravenously or dexamethasone (ip). After 72 hours of infection, the groups were submitted to euthanasia procedures for sample collection and analysis. The results showed that, in the two treatment regimens, there was no bacterial clearance in the spleen, liver, peritoneal fluid and blood of the experimental animals when compared to the controls. The treatments with LPPII significantly reduced the amount of leukocytes in the peritoneal cavity of the animals in comparison to the LPPII + IAA and PBS control groups. The treatments also reduced gene expression of TNF-, IL-12 and IFN- in animals receiving LPPII. Furthermore, there was no increase in survival of LPPII-treated and Salmonella-infected animals. Finally, peritoneal macrophages previously stimulated with LPS were exposed to an osmotin isolated from LPPII. It was observed that the treatments significantly reduced the IL-1 gene expression, but not TNF-. We have shown that cysteine proteases present in the latex of C. procera are capable to decrease inflammation in the peritoneum of Salmonella Typhimurium-infected mice. Although the mechanisms involved in this effect are not fully elucidated, it has been demonstrated that an osmotin present in LPPII possesses anti-inflammatory potential and possible therapeutic relevance.

CARACTERIZAÇÃO IMUNOMODULATÓRIA DE PROTEASES CISTEÍNICAS OBTIDAS DO LÁTEX DE CALOTROPIS PROCERA EM CULTURAS DE MACRÓFAGOS

Calotropis procera, planta medicinal conhecida popularmente em Pernambuco como algodão-de-seda. É uma planta laticífera que pertence à família Apocynaceae, sendo encontrada com facilidade no nordeste brasileiro. Dados da literatura corrente mostram que proteínas obtidas de seu látex possuem ação anti-inflamatória. Diante disso, neste trabalho, uma fração proteica obtida por cromatografia de troca iônica, chamada LPPII, rica em proteases cisteínicas, foi avaliada quanto à sua atividade imunomodulatória em culturas de macrófagos peritoneais infectadas por Salmonella enterica Sor. Typhimurium. Os macrófagos foram obtidos a partir da lavagem peritoneal de camundongos Swiss com meio de cultura RPMI contendo antibióticos penicilina e estreptomicina. As células do fluido obtido foram ajustadas a 1 x 106 cél/ mL e incubadas em estufa a 37ºC e CO2 5%, em placas de cultura de células, e os macrófagos aderentes utilizados nos ensaios. Os ensaios de quantificação bacteriana se deram de forma preventiva, onde os macrófagos foram tratados com LPPII (1 g/mL ou 10 g/mL) ou LPPII+IAA (10 g/mL) (inativada com iodoacetamida) seguido de infecção com S. Typhimurium (1 x 108 UFC/mL), e de forma curativa, onde primeiro se deu infecção dos macrófagos por S. Typhimurium (1 x 108 UFC/mL) seguido de tratamento com LPPII (1 g/mL ou 10 g/mL) ou LPPII+IAA (10 g/mL). O ensaio de viabilidade celular foi realizado de forma curativa com macrófagos infectados com S. Typhimurium (1 x 108 UFC/mL). Para ensaios de expressão gênica de citocinas IL1- , TNF, IL-6, iNOS e TLR-4, os macrófagos receberam apenas tratamento com LPPII (1 g/mL ou 10 g/mL) ou LP+IAA (10 g/mL), ou houve estímulo de LPS bacteriano, seguidos de tratamentos de forma curativa ou preventiva com LPPII (1 g/mL ou 10 g/mL) ou LP+IAA (10 g/mL). Os resultados mostram que macrófagos infectados com uma cepa de S. Typhimurium C5 e tratados com LPPII de forma preventiva ou curativa, reduziram o número de bactérias viáveis no ambiente intracelular. Neste caso, macrófagos tratados de forma preventiva com LPPII 10 g/mL, demonstraram diminuição significativa (p<0,05) na quantidade de bactérias intracelulares quando comparados ao controle, macrófagos sem tratamento com LPPII. Na forma curativa, observou-se diminuição significativa de S. Typhimurium intracelular em macrófagos tratados com LPPII1g/mL, quando comparados ao controle, células sem tratamento com LPPII. Por outro lado, os grupos tratados com LPPII+IAA tiveram um maior número de bactérias intracelulares, sugerindo a ação das proteases cisteínicas no efeito antimicrobiano observado. O tratamento curativo com LPPII também aumentou a viabilidade dos macrófagos infectados em relação aos grupos controles sem tratamento. Deste modo, grupos tratados com LPPII1g/mL obtiveram viabilidade 14,74% maior que o grupo controle sem tratamento, enquanto que macrófagos tratados com LPPII10g/mL obtiveram 24,11%. Grupos de macrófagos estimulados com LPS e, a seguir, tratados com LPPII, tiveram redução na expressão gênica das citocinas inflamatórias TNF, IL1- e IL-6, além de receptor do tipo Toll-4. Tomados esses resultados em conjunto, observamos que LPPII obtida do látex de C. procera apresenta biomoléculas com atividade imunomodulatória benéfica ao controle de infecções por S. Typhimurium.

Calotropis procera, is a medicinal plant known in Pernambuco as silk-cotton. Is laticífer plant belonging to the family Apocynaceae broadly found in the Brazilian Northeast. Current literature data show that proteins obtained from its latex harbour anti-inflammatory action. In the present study, a protein fraction obtained by ion-exchange chromatography named LPPII, which is rich in cysteine proteases, had its immunmodulatory activity evaluated in cultures of peritoneal macrophages infected by Salmonella enterica Sor. Typhimurium. Macrophages were obtained from the peritoneal cavity of Swiss mice using RPMI culture medium containing antibiotics. The cells obtained were adjusted to 1 x 106 cell/mL and incubated at 37° C and 5% CO2, in cell culture plates, and the adherent macrophages used in the assays. The bacterial quantification assays were performed in a preventive manner, where the macrophages were treated with LPPII (1 g/ mL or 10 g/ mL) or LPPII+IAA (10 g / mL) (inactivated with iodoacetamide) followed by infection with S. Typhimurium (1 x 108 CFU / mL), and in a curative manner, where macrophages were first infected with S. typhimurium (1 x 108 CFU / mL) followed by treatment with LPPII (1 g/ mL or 10 g/ mL) or LPPII+IAA (10 g/ ml). The cell viability assay was performed curatively with macrophages infected with S. Typhimurium (1 x 108 CFU / ml). For IL1, TNF, IL-6, iNOS and TLR-4 cytokine gene expression assays, macrophages were only treated with LPPII (1 g/ mL or 10 g/ mL) or LP+IAA (10 g / mL), or bacterial LPS stimulation, followed by curative or preventative treatments with LPPII (1 g/ mL or 10 g/ mL) or LP+IAA (10 g/ mL). The results show that macrophages infected with a S. Typhimurium C5 and treated with LPPII in a preventative or curative manner, reduced the number of viable bacteria in the intracellular environment. In this case, macrophages treated preventively with LPPII 10 g/ mL, showed a significant decrease (p <0.05) in the amount of intracellular bacteria when compared to the control, macrophages without LPPII treatment. In the curative form, significant decrease of intracellular S. Typhimurium was observed in LPPII1g/ mL-treated macrophages compared to control cells, without LPPII treatment. On the other hand, the groups treated with LPPII+IAA had a greater number of intracellular bacteria, suggesting the action of cysteine proteases on the observed antimicrobial effect. Curative treatment with LPPII also increased the viability of infected macrophages relative to the untreated control groups. Thus, groups treated with LPPII1g/ mL obtained viability 14.74% greater than the control group without treatment, whereas macrophages treated with LPPII10g/ mL obtained 24.11%. Groups of macrophages stimulated with LPS and then treated with LPPII had a reduction in the gene expression of the inflammatory cytokines TNF, IL1- and IL-6, in addition to Toll-like receptor 4. Taken together, we found that LPPII obtained from latex of C. procera presents biomolecules with immunomodulatory activity beneficial to the control of S. Typhimurium infections.

Peritoneal fluid changes in horses subjected to small colon distension / Alterações no líquido peritoneal de equinos submetidos a distensão do cólon menor

Intestinal devitalization in cases of small colon obstruction may be difficult to detect based only in clinical signs. The purpose was to serially evaluate blood and peritoneal fluid of horses subjected to small colon distension. Seventeen adult horses were allotted in three groups. In the small colon-distended group (DG, n=7) a surgically-implanted latex balloon was inflated to promote intraluminal small colon distension. In the shamoperated group (SG, n=5), the balloon was implanted but not inflated, and no surgery was done in the control group (CG, n=5). Blood and peritoneal fluid were sampled before and after (6 samples with a 30-minute interval) intestinal obstruction for cytological and biochemical analyses. No significant changes in clinical signs occurred within groups or across time during the experimental period. There were no statistical differences among SG and SG groups in hematologic and blood chemistry variables. Although total protein concentration and lactate dehydrogenase (LDH) activity in peritoneal fluid remained most of the time within reference values during the experimental period in all groups, increases from baseline values were detected in SG and DG groups. Such increases occurred earlier, progressively and with greater magnitude in the DG when compared with the SG (P<0.05). Increases from baselines values were also observed in total nucleated cells and neutrophils counts in the DG (P<0.05). In conclusion, distension of the equine small colon induced progressive subtle increases in total protein and LDH concentrations in the peritoneal fluid during the first hours. Serial evaluation of these variables in peritoneal fluid may be useful for early detection of intestinal devitalization in clinical cases of equine small colon obstruction.(AU)

A desvitalização do cólon menor em equinos pode ser difícil de ser detectada baseando-se apenas em sinais clínicos. O objetivo foi realizar uma avaliação seriada do líquido peritoneal de equinos submetidos à distensão do cólon menor. Dezessete cavalos adultos foram divididos aleatoriamente em três grupos. No grupo distendido (DG, n=7) um balão implantado cirurgicamente foi inflado para promover distensão do cólon menor. No grupo instrumentado (SG, n=5) o balão foi implantado, mas sem promover distensão e no grupo controle (CG, n=5) não houve anestesia ou cirurgia. Sangue e fluido peritoneal foram colhidos antes e durante 180 minutos após a cirurgia para análises citológicas e bioquímicas. Nenhuma interação significativa ocorreu entre grupos e tempos nas variáveis clínicas e hematológicas. Apesar dos valores de proteínas totais e da atividade da lactato desidrogenase (LDH) permanecerem dentro da normalidade durante quase todo o experimento, aumentos em relação aos valores basais ocorreram nos grupos SG e DG. Contudo, tais aumentos foram precoces, progressivos e em maior magnitude em DG quando comparados ao SG, mostrando que a distensão promoveu alterações significativas nessas variáveis (P<0.05). Aumentos em relação aos valores basais também ocorreram nas contagens de células totais nucleadas e neutrófilos (P<0.05). Em conclusão, a distensão experimental do cólon menor promove, nas primeiras horas, alterações subliminares progressivas nas concentrações de proteínas totais e na atividade de LDH no líquido peritoneal. Os resultados indicam que a avaliação seriada do liquido peritoneal pode ser útil para detectar desvitalização intestinal em casos clínicos de obstrução do cólon menor equino.(AU)

AVALIAÇÃO CLÍNICO-LABORATORIAL E DA EXPRESSÃO DE METALOPROTEINASES 2 E 9 DE EQUINOS COM OBSTRUÇÃO EXPERIMENTAL DO CÓLON MENOR

A síndrome do abdômen agudo é uma das afecções que mais se destaca no atendimento clínico cirúrgico para a espécie equina. A obstrução do cólon menor é causada principalmente pela compactação de massas ou por enterólitos, acarreta em distensão intraluminal e, consequentemente obstrução dos vasos sanguíneos que irrigam a parede do órgão, desencadeando processo isquêmico. Por conseguinte, ocorrem no organismo alterações metabólicas e enzimáticas, como ativação leucocitária e liberação de enzimas proteolíticas, em direção ao local da injúria. Foram avaliadas as alterações clínicas, hematológicas, celularidade do líquido peritoneal, além da expressão de metaloproteinase 2 e 9 (MMP-2 e MMP-9), em oito equinos, hígidos, adultos, submetidos experimentalmente à obstrução simples de cólon menor, durante 4 horas, por meio de inserção de balão de látex, sob pressão de 80mmHg. Os parâmetros clínicos, hematológicos e o fluido peritoneal foram avaliados antes da obstrução intestinal (M0), imediatamente após a obstrução intestinal (M4) e em intervalos de 12 horas até completarem 72 horas após desobstrução do cólon menor (M72). As atividades gelatinolíticas de MMP-2 e MMP-9, no plasma e líquido peritoneal foram obtidas em M0, M4 e M72, posteriormente submetidas à análise zimográfica. Através do exame físico constatou-se aumento da frequência cardíaca e temperatura retal em M12 e da frequência respiratória em M24. A porção eritrocitária do hemograma não apresentou diferenças significativas, mas evidenciou diminuição discreta de hemácias, hemoglobina, hematócrito e plaquetas em M4. Já o leucograma indicou aumento de leucócitos em M12 e M24 e diminuição na resposta leucocitária a partir de M36 (p0,05). Em relação à celularidade do líquido peritoneal verificou-se aumento estatístico dos valores de hemácias, hemoglobina e hematócrito em M4, dos leucócitos, polimorfonucleares e mononucleares em M12. A análise da expressão das MMPs evidenciou apenas expressão das MMPs em sua forma inativa (PróMMP-2 e PróMMP-9). No plasma, só a expressão da PróMMP-2 diferiu estatisticamente entre os momentos avaliados, exceto quando comparado M0 e M72. Já no líquido peritoneal, a PróMMP-2 apresentou diferença estatística em M72 quando comparado aos demais momentos e a PróMMP-9 apresentou diferença estatística somente em M4. Com base nos resultados obtidos neste trabalho é possível concluir que o modelo experimental para obstrução simples do cólon menor promoveu alterações funcionais relevantes, essencialmente, ativação da resposta inflamatória tanto no sangue como no líquido peritoneal, principalmente pelo aumento do número de polimorfonucleares que são responsáveis pela liberação de MMPs.

The syndrome of acute abdomen is one of the diseases that most stands out in the surgical clinical care to the equine species. The obstruction of the lower colon is mainly caused by mass or compression for enterólitos, carries on intraluminal distension and, consequently clogging of blood vessels supplying the organ, triggering ischemic process. Therefore, occur in the body and metabolic changes of enzymes, such as leukocyte activation and proteolytic enzymes release, toward the site of the injury. Were evaluated clinical, haematological changes, peritoneal fluid cellularity, beyond the expression of metalloproteinase 2 and 9 (MMP-2 and MMP-9), in eight horses, healthy adults, subjected experimentally to simple obstruction of colon minor, during 4 hours, through the insertion of latex balloon, under pressure of 80mmHg. Clinical, hematological parameters and the peritoneal fluid were evaluated before the intestinal obstruction (M0), immediately after the bowel obstruction (M4) and at intervals of 12 hours until they reach 72 hours after clearing the lower colon (M72). Gelatinolíticas activities of MMP-2 and MMP-9, plasma and peritoneal fluid were obtained in M0, M4 and M72, subsequently submitted to zimográfica analysis. Through the physical exam found an increase in heart rate and rectal temperature in M12 and the respiratory rate in M24. The portion of the erythrocyte hemogram showed no significant differences, but showed discrete red blood cells, hemoglobin decrease, hematocrit and platelets in M4. Already the WBC indicated increase of leukocytes in M12 and M24 and decreased leukocyte response from M36 (p 0.05). Regarding the cellularity of peritoneal fluid was found statistical increase of the values of red blood cells, hemoglobin and hematocrit in M4, leukocytes, mononuclear and polymorphonuclear in M12. The analysis of the expression of MMPs showed just expression of MMPs in its inactive form (PróMMP-2 and PróMMP-9). In the plasma, just the expression of PróMMP-2 differed statistically among the evaluated moments, except when compared M0 and M72. In the peritoneal fluid, the PróMMP-2 showed statistical difference in M72 when compared to other times and the PróMMP-9 presented statistical difference only in M4. Based on the results obtained in this work it is possible to conclude that the experimental model for simple obstruction of the colon less promoted relevant functional changes, essentially, activation of the inflammatory response in both the blood as in the peritoneal fluid, primarily by increasing the number of polymorphonuclear which are responsible for the release of MMPs.

Neoangiogênese peritoneal e inibição do crescimento tumoral em camundongos portadores do tumor ascítico de Ehrlich tratados com albendazol

A dependência da neovascularização para o crescimento é uma característica central da biologia tumoral. A vasculatura governa a fisiopatologia dos tumores sólidos, incluindo os processos de crescimento, invasão, metastatização e a ascite maligna. A formação da ascite em pacientes com câncer em estágio avançado é um problema de difícil manejo na clínica oncológica. Previamente foi demonstrada a supressão da efusão em camundongos nude portadores de carcinoma ovariano, tratados intraperitonealmente com albendazol (ABZ). Neste estudo testou-se a eficácia do ABZ contra o desenvolvimento do tumor de Ehrlich na forma ascítica, avaliando-se o derrame cavitário, a celularidade tumoral e a angiogênese peritoneal. Métodos: Vinte e quatro camundongos BALB/c fêmeas com 8 semanas de idade foram inoculadas intraperitonealmente com 5 x 106 células tumorais, e 6 animais mantidos sem manipulação. Após 7 dias, os camundongos inoculados foram aleatoriamente distribuídos em grupos SHAM, recebendo 1,0 mL hidroperoxi-metil-celulose(HPMC)/ip.; e ABZ, recebendo 1,0 mL albendazol (150mg/kg) suspenso em HPMC/ip. Os animais foram eutanasiados 3 e 5 dias após o tratamento. O fluido ascítico e as células tumorais foram colhidos e quantificados. O peritônio foi fixado em formol a 10%, histologicamente processado e submetido à imunomarcação para o fator VIII, procedendo-se amplificação com o método da streptavidina-biotina-peroxidase. Resultados: Não houve diferença quantitativa em relação ao processo efusivo, porém, a celularidade tumoral foi significantemente reduzida em animais do grupo ABZ em comparação aos do grupo SHAM (p<0,001,ANOVA/Tukey-Kramer). Em oposição, evidenciou-se um aumento na angiogênese em animais tratados com ABZ quando comparados aos do grupo SHAM (p<0,001, ANOVA/Tukey-Kramer). Conclusão: ABZ é um carbamato benzimidazólico anti-helmíntico largamente utilizado, atuando como uma droga ligante de microtúbulos, uma possível explicação para o efeito antiproliferativo identificado sobre o tecido tumoral. Estudos adicionais serão necessários para elucidar os mecanismos envolvidos nessa resposta.

The dependence of tumor growth on the development of neoangiogenesis is characteristic of cancer biology. The resulting tumor vasculature governs the pathophysiology of solid tumors and thus their growth, invasion, metastasis and malignant ascites. The formation of ascites in patients with advanced-stage cancer is a difficult problem to manage in clinical oncology. Study in OVCAR-3 tumor-bearing nude mice treated with intraperitoneal albendazole (ABZ) demonstrated the supression of malignant ascites. In the present study we tested the efficacy of ABZ against tumor growth, ascitic development and local angiogenesis on mice bearing the ascitic Ehrlichs tumor. Methods: Twenty four BALB/c female mice 8 weeks old were inoculated with 5 x 106 tumor cells, and six animals were preserved without manipulation. Seven days after, the inoculated mice were randomly distributed in groups: SHAM, receiving 1,0 mL hidroperoxi-metil-celulose(HPMC)/ip.; and ABZ, receiving 1,0 mL albendazol (150mg/kg) suspended in HPMC/ip. The animals were sacrificed 3 and 5 days after treatment. The ascitic fluid were collected and quantified, and the tumoral cells counted. The peritoneal walls were fixed in 10% formalin, histologically processed and factor VIII antibody was applied to sections by streptavidin/biotin/HRP method. Results: The tumor celullarity of ABZ animals was significantly reduced compared with SHAM animals (p<0,001,ANOVA). In contrast we identified an increased angiogenesis in ABZ treated animals when compared with SHAM group (p<0,001, ANOVA), without effect upon malignant ascites. Conclusion: ABZ is a widely used benzimidazole carbamate antihelmintic, acting as a microtubule-targeted drug, a possible explanation for the antiproliferative effect observed. Further studies will be necessary to elucidate the exact mechanisms involved.