Resumo

The present study was designed to evaluate the strength of association of raised plasma homocysteine concentration as a risk factor for coronary heart disease independent of conventional risk factor. It was a case control study conducted at Punjab Institute of Cardiology Lahore. A total of 210 subjects aged 25 to 60 years comprising of 105 newly admitted patients of CHD as cases and 105 age and sex matched healthy individuals with no history of CHD as control were recruited for the study. Fasting blood samples were obtained from cases and controls. Plasma homocysteine was analyzed by fluorescence polarization immunoassay (FPIA) method on automated immunoassay analyzer (Abbott IMX). Total cholesterol, triglyceride and HDL cholesterol were analyzed using calorimetric kit methods. The concentration of LDL cholesterol was calculated using Friedewald formula. The patients were also assessed for traditional risk factors such as age, sex, family history of CVD, hypertension, smoking and physical activity, and were compared with control subjects. The collected data was entered in SPSS version 24 for analysis and interpretation.The mean age in controls and experimental groups were 43.00± 8.42 years and 44.72± 8.59 years with statistically same distribution (p- value= 0.144). The mean plasma homocysteine for cases was 22.33± 9.22 µmol/L where as it was 12.59±3.73 µmol/L in control group. Highly significant difference was seen between the mean plasma level of homocysteine in cases and controls (p˂0.001).Simple logistic regression indicates a strong association of coronary heart disease with hyperhomocysteinemia (OR 7.45), which remained significantly associated with coronary heart disease by multivariate logistic regression (OR 7.10, 95%C1 3.12-12.83, p=0.000). The present study concludes that elevated levels of Plasma homocysteine is an independent risk factor [...].

O presente estudo foi desenhado para avaliar a força da associação da concentração elevada de homocisteína no plasma como um fator de risco para doença cardíaca coronária independente do fator de risco convencional. Foi um estudo de caso-controle realizado no Punjab Institute of Cardiology Lahore. Um total de 210 indivíduos com idade entre 25 e 60 anos, compreendendo 105 pacientes recém-admitidos de CHD como casos e 105 indivíduos saudáveis pareados por idade e sexo sem histórico de CHD como controle, foi recrutado para o estudo. Amostras de sangue em jejum foram obtidas de casos e controles. A homocisteína plasmática foi analisada pelo método de imunoensaio de polarização de fluorescência (FPIA) em analisador de imunoensaio automatizado (Abbott IMX). Colesterol total, triglicerídeos e colesterol HDL foram analisados usando métodos de kit calorimétrico. A concentração de colesterol LDL foi calculada pela fórmula de Friedewald. Os pacientes também foram avaliados para fatores de risco tradicionais, como idade, sexo, história familiar de DCV, hipertensão, tabagismo e atividade física, e foram comparados com indivíduos de controle. Os dados coletados foram inseridos no SPSS versão 24 para análise e interpretação. A média de idade nos grupos controles e experimentais foi de 43,00 ± 8,42 anos e 44,72 ± 8,59 anos com distribuição estatisticamente igual (p-valor = 0,144). A homocisteína plasmática média para os casos foi de 22,33 ± 9,22 µmol / L, enquanto no grupo controle foi de 12,59 ± 3,73 µmol / L. Diferença altamente significativa foi observada entre o nível plasmático médio de homocisteína em casos e controles (p ˂ 0,001). A regressão logística simples indica uma forte associação de doença cardíaca coronária com hiper-homocisteinemia (OR 7,45), que permaneceu significativamente associada com doença cardíaca coronária por multivariada regressão logística (OR 7,10, 95% C1 3,12-12,83, p = 0,000). O presente estudo conclui [...].

Resumo

ABSTRACT: The fluorescence polarization assay (FPA), two variants (V) of the indirect enzyme-linked immunosorbent assay (I-ELISA) and the competitive enzyme-linked immunosorbent assay (C-ELISA) were evaluated in buffaloes to detect antibodies against Brucella spp. The V1 of I-ELISA identifies them through the monoclonal (M23) anti-bovine IgG (I-ELISAM23) and the V2 through the ProteinA / G (I-ELISA-A/G). Serum samples of 862 buffaloes (Bubalus bubalis) from the Northeast of Argentina (NEA) were analyzed using the complement fixation test (CFT) as the reference. Receiving Operator Characteristic (ROC) analysis defined for the area under the curve (AUC) determined the cutoff points, sensitivity (Se) and specificity (Sp) for each test. CFT identified 107 positive and 755 negative sera. The best AUC (0.986), Concordance with CFT (96.3%) and kappa value (0.843) was obtained by I-ELISA A/G test. This assay showed the highest Se (95.33%) and C-ELISA the highest Sp (97%). FPA failed to measure the antibodies in 23 (2.65%) serum samples due to unsuccessful reading. I-ELISA M23 proved to be ineffective to diagnose brucellosis in bubaline sera. The four serological tests showed cutoff points lower than those standardized for bovines. As conclusion, I-ELISA A/G, C-ELISA and FPA with its limitations would be effective techniques for the diagnosis of brucellosis in buffaloes in the NEA, requiring an appropriate cut-off point to guarantee their maximum performance in this species.

RESUMO: O ensaio de polarização de fluorescência (FPA), duas variantes (V) do ensaio imunoenzimático indireto (I-ELISA) e o ensaio imunoenzimático competitivo (C-ELISA), foram avaliados em búfalos para detectar anticorpos contra Brucella spp. O V1 do I-ELISA os identifica através do IgG monoclonal (M23) anti-bovino (I-ELISAM23) e o V2 ​​através da Proteína A / G (I-ELISA-A / G). Amostras de soro de 862 búfalos (Bubalus bubalis) do Nordeste da Argentina (NEA) foram analisadas usando o teste de fixação do complemento (CFT) como referência. A análise Receiving Operator Characteristic (ROC) definida pela área sob a curva (AUC) determinou os pontos de corte, sensibilidade (Se) e especificidade (Sp) de cada teste. A CFT identificou 107 soros positivos e 755 soros negativos. Os melhores valores de AUC (0.986), concordância com CFT (96.3%) e kappa (0.843) foram obtidos pelo teste I-ELISA A / G. Este ensaio mostrou a maior Se (95.33%) e C-ELISA a maior Sp (97%). O FPA falhou em medir os anticorpos em 23 (2,65%) amostras de soro devido à falha na leitura. O I-ELISA M23 provou ser ineficaz para o diagnóstico de brucelose em soros bubalinos. Os quatro testes sorológicos mostraram pontos de corte inferiores aos padronizados para bovinos. Em conclusão, I-ELISA A / G, C-ELISA e FPA com suas limitações seriam técnicas eficazes para o diagnóstico de brucelose em búfalos no NEA, exigindo um ponto de corte adequado para garantir seu desempenho máximo nesta espécie.

Resumo

The fluorescence polarization assay (FPA), two variants (V) of the indirect enzyme-linked immunosorbent assay (I-ELISA) and the competitive enzyme-linked immunosorbent assay (C-ELISA) were evaluated in buffaloes to detect antibodies against Brucella spp. The V1 of I-ELISA identifies them through the monoclonal (M23) anti-bovine IgG (I-ELISAM23) and the V2 through the ProteinA / G (I-ELISA-A/G). Serum samples of 862 buffaloes (Bubalus bubalis) from the Northeast of Argentina (NEA) were analyzed using the complement fixation test (CFT) as the reference. Receiving Operator Characteristic (ROC) analysis defined for the area under the curve (AUC) determined the cutoff points, sensitivity (Se) and specificity (Sp) for each test. CFT identified 107 positive and 755 negative sera. The best AUC (0.986), Concordance with CFT (96.3%) and kappa value (0.843) was obtained by I-ELISA A/G test. This assay showed the highest Se (95.33%) and C-ELISA the highest Sp (97%). FPA failed to measure the antibodies in 23 (2.65%) serum samples due to unsuccessful reading. I-ELISA M23 proved to be ineffective to diagnose brucellosis in bubaline sera. The four serological tests showed cutoff points lower than those standardized for bovines. As conclusion, I-ELISA A/G, C-ELISA and FPA with its limitations would be effective techniques for the diagnosis of brucellosis in buffaloes in the NEA, requiring an appropriate cut-off point to guarantee their maximum performance in this species.

O ensaio de polarização de fluorescência (FPA), duas variantes (V) do ensaio imunoenzimático indireto (I-ELISA) e o ensaio imunoenzimático competitivo (C-ELISA), foram avaliados em búfalos para detectar anticorpos contra Brucella spp. O V1 do I-ELISA os identifica através do IgG monoclonal (M23) anti-bovino (I-ELISAM23) e o V2 ​​através da Proteína A / G (I-ELISA-A / G). Amostras de soro de 862 búfalos (Bubalus bubalis) do Nordeste da Argentina (NEA) foram analisadas usando o teste de fixação do complemento (CFT) como referência. A análise Receiving Operator Characteristic (ROC) definida pela área sob a curva (AUC) determinou os pontos de corte, sensibilidade (Se) e especificidade (Sp) de cada teste. A CFT identificou 107 soros positivos e 755 soros negativos. Os melhores valores de AUC (0.986), concordância com CFT (96.3%) e kappa (0.843) foram obtidos pelo teste I-ELISA A / G. Este ensaio mostrou a maior Se (95.33%) e C-ELISA a maior Sp (97%). O FPA falhou em medir os anticorpos em 23 (2,65%) amostras de soro devido à falha na leitura. O I-ELISA M23 provou ser ineficaz para o diagnóstico de brucelose em soros bubalinos. Os quatro testes sorológicos mostraram pontos de corte inferiores aos padronizados para bovinos. Em conclusão, I-ELISA A / G, C-ELISA e FPA com suas limitações seriam técnicas eficazes para o diagnóstico de brucelose em búfalos no NEA, exigindo um ponto de corte adequado para garantir seu desempenho máximo nesta espécie.

Resumo

a Colômbia, a brucelose bovina é uma doença endêmica, mas foi observado um aumento no número de bovinos soropositivos na região leiteira de Antioquia, considerada a principal área responsável pela produção de leite. O alarmante aumento do número de casos fez com que o Instituto Colombiano de Agricultura (ICA) declarasse quarentena na região desde 2018. O objetivo deste trabalho foi determinar a prevalência sorológica e molecular de brucelose em bovinos na principal região leiteira da Colômbia, identificando a presença de anticorpos, do material genético do agente etiológico e dos fatores individuais e de rebanho associados à ocorrência da doença. Foi realizado um estudo epidemiológico do tipo transversal, a traves de um questionário epidemiológico conduzido por entrevistadores previamente treinados, com informações epidemiológicas para identificar fatores associados a presencia de bruceloses bovina na região de estudo. Um total de 656 amostras de sangue total e soro sanguíneo foram obtidas de vacas 2 anos de idade, de 40 rebanhos, em quatro municípios do norte de Antioquia. O Teste Rosa de Bengala (RBT) foi usado como teste de triagem. Amostras RBT positivas foram confirmadas pelo Ensaio de Polarização de Fluorescência (FPA) e ELISA competitiva (cELISA) no Laboratório Nacional de Diagnóstico Veterinário do ICA. A detecção molecular foi realizada por ensaio de PCR em tempo real baseado em sonda (qPCR), usando a amplificação do gene bcsp31. As Brucella-DNA cepas de campo e as cepas vacinais, foram genotipadas mediante um ensaio baseado em marcadores SNP (Single Nucleotide Polimorphism). A ferramenta de geoprocessamento QGIS, foi utilizada para obter a georreferenciamento dos rebanhos positivos. Os fatores associados a presença de Brucella-DNA foram avaliados por meio de modelos de regressão logística. O ensaio qPCR detectou 9,5% (n=62/656; IC 95%: 7,3, 12,0) dos animais com presença de Brucella-DNA, enquanto o teste sorológico detectou 6,6% (n=43/656; IC: 4,8, 8,7). Foi observado que 62,5% (n=25/40; IC 95%: 45,8, 77,3) dos casos positivos foram detectados no rebanho pela qPCR, enquanto apenas 27,5% (n=11/40; IC 95%: 14,6, 43,9) foram detectados pelo teste sorológico. O teste Cohen´s Kappa determinou uma fraca concordância entre os métodos sorológicos e moleculares. O ensaio qPCR, apresentou uma eficiência de 92,35%, e teve uma duração de 32 min. A acurácia diagnóstica da qPCR pela área sob a Curva Receptor-Operador (ROC) teve desempenho igual a 0,75 ±0,047 (IC 95%: 0,65, 0,84). Toda as amostras positivas pela qPCR foram genotipadas como cepas de Brucella spp. de campo empregando o ensaio SNP. O estudo conseguiu diferenciar as cepas de Brucella abortus de campo da cepa vacinal RB51. Nos modelos de regressão logística, foi observado que as práticas de manejo, associadas principalmente à reprodução, assim como a presença de espécies silvestres e a proximidade dos rebanhos das estradas, oferecem condições favoráveis para o processo de disseminação da Brucella spp. Esta pesquisa concluiu que a introdução de técnicas moleculares, a partir de amostras clínicas coletadas a campo, atuam como ferramentas para complementar o diagnóstico sorológico de bruceloses bovina, melhorando a acurácia dos resultados, permitindo uma detecção precoce de Brucella spp. circulantes. Tanto as prevalências sorológicas quanto as prevalências moleculares estiverem de acordo com a declaração de quarentena na região, sendo a prevalência molecular muito maior. Por fim, as técnicas moleculares permitem reconhecer fatores epidemiológicos associados à presença do agente etiológico no animal e não associados apenas à presença de anticorpos, possibilitando direcionar ações de prevenção e controle ajustadas ao nível local e detectadas a partir de fases de infecção de difícil diagnostico, como aquelas iniciais ou crônicas.

In Colombia, bovine brucellosis is an endemic disease, but an unusual increase in the number of seropositive cases in a leading dairy region, given raised an alarm and caused the Colombian Institute of Agriculture to quarantine for brucellosis in the Antioquia region in 2018. This epidemiological study was conducted to determine the seroprevalence and molecular prevalence of bovine brucellosis in the leading dairy region of Colombia that was declared quarantined for brucellosis, and to evaluate the factors associated with the presence of antibodies against Brucella spp, as well as the presence of Brucella-DNA at the animal and the herd level. A cross-sectional epidemiological study was carried out, using an epidemiological questionnaire, conducted by previously trained interviewers, with epidemiological information to identify factors associated with the presence of bovine brucellosis in the study region. A total of 656 serum and whole blood samples from 2-year-old cows in 40 herds were used screened The Rose Bengal Test (RBT) was used as the screening test. Positives RBT samples were confirmed by the Fluorescence Polarization Assay (FPA) and c ELISA at the National Veterinary Diagnostic Laboratory of the Colombian Agricultural Institute (ICA). Molecular detection was performed by Probe-based Real-time PCR (Probe-qPCR) assay, using the bcsp31 gene amplification. Brucella-DNA field strains and vaccine strains were genotyped employing the Single Nucleotide Polimorphism (SNP). The geoprocessing tool QGIS was used to obtain the georeferencing of positive herds. Factors associated with the presence of Brucella-DNA were evaluated using logistic regression models. The qPCR assay detected 9.5% (n=62/656; 95% CI: 7.3, 12.0) of the animals with Brucella-DNA presence, while the serological test detected a 6.6% (n=43/656; CI: 4.8, 8.7). 62.5% (n=25/40; 95% CI: 45.8, 77.3) of positive cases were detected at the herd-level by the qPCR, while only 27.5% (n=11/40; 95% CI: 14.6, 43.9) were detected by the serological test. The Cohen´s Kappa test determined a weak agreement between methods. The qPCR assay was accomplished in 32 min and had an efficiency of 92.35%. The diagnostic accuracy of the qPCR by the area under the Receiver-Operator Curve (ROC), had performance equal to 0.75 ±0.047 (95% CI: 0.65, 0.84). In the results obtained, it was observed that all positive herds by serology tests were also positive by the qPCR. However, not all positive herds by the qPCR were positive on the serology test. All positive samples were identified as field Brucella abortus strains employing the SNP-based assay. In logistic regression models, it was observed that management practices, mainly associated with reproduction, presence of wild species and the proximity of herds to the roads, offer favorable conditions for the process of dissemination of Brucella spp. among animals and in herds. This research concluded that the introduction of molecular techniques from clinical samples collected in the field act as tools to complement the diagnosis of bovine brucellosis. Molecular techniques also provide an improvement in the confidence of the results, when compared with serological techniques, and also allow for early detection of Brucella spp. circulating in the animal. The serological and molecular prevalence were in accordance with the declaration of quarantine in the region, with the molecular prevalence being much higher. Lastly, molecular techniques allow the researcher to recognize epidemiological factors associated with the presence of the etiological agent in the animal and not associated only with the presence of antibodies, making it possible to direct prevention and control actions adjusted at the local level and detected from difficult-to-diagnose infection phases, such as initial or chronic ones.

Resumo

The study aimed to analyze the antibody response induced by vaccination with the standard dose of 60-120x109 organisms of Brucella abortus strain 19 in Tabapuã heifers, aged between 3 and 8 months, by serological tests recommended by the National Program for Brucellosis and Tuberculosis Control and Eradication (PNCEBT) for the diagnosis of bovine brucellosis. Serum samples of 72 animals were examined by four serological tests: rose Bengal test (RBT), standard agglutination test with the 2-mercaptoetanol (2-ME) test, complement fixation test (CFT) and fluorescence polarization assay (FPA), which was interpreted in two ways: variable cutoff and fixed cutoff. Heifers were bled immediately prior to vaccination, and after 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330 and 360 days. Specificity of the tests was calculated, and the results were compared using the kappa statistic. FPA had a higher specificity than the other tests on the samples collected from 30 to 90 days after vaccination, but over time this difference decreased. At 270 days of vaccination, the specificity of RBT, 2-ME and RFC was 93.74%. The specificity of the FPA with variable cutoff was 87.5%, and with fixed cutoff was 100.0%. It was concluded that FPA had a higher discrimination ability for vaccination antibody titers shortly after vaccination, when compared with other tests recommended by the PNCEBT, and is a useful tool for the diagnosis of bovine brucellosis, besides being easy and quick to perform

Foi avaliada a resposta sorológica induzida pela vacinação com a dose padrão de 60-120x109 organismos da cepa B19 de Brucella abortus em bezerras Tabapuãs, entre 3 e 8 meses de idade, pelos testes sorológicos preconizados pelo Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT) para diagnóstico da brucelose bovina. Foram examinadas amostras de soro sanguíneo de 72 animais em quatro provas sorológicas: antígeno acidificado tamponado (AAT), teste de soroaglutinação lenta juntamente com o teste de 2-mercaptoetanol (2-ME), reação de fixação de complemento (RFC) e teste de polarização fluorescente (TPF), o qual foi interpretado de duas formas: ponto de corte variável e ponto de corte fixo. As amostras de soro sanguíneo foram colhidas imediatamente antes da vacinação, e após 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330 e 360 dias. Foi calculada a especificidade dos testes e os resultados foram comparados pelo indicador kappa. O TPF apresentou especificidade mais elevada do que os outros testes nas amostras colhidas entre 30 e 90 dias após a vacinação. Aos 270 dias de vacinação, observou-se especificidade de 93,74% no AAT, no 2-ME e na RFC. No TPF com ponto de corte variável a especificidade foi 87,5% e com ponto de corte fixo foi 100,0%. O TPF apresentou maior capacidade de discriminação dos títulos de anticorpos vacinais logo após a vacinação, quando comparado com os outros testes preconizados pelo PNCEBT, mostrando-se um teste útil para o diagnóstico da brucelose bovina

Resumo

A serological survey in free-ranging crab-eating foxes (Canidae: Cerdocyon thous) and brown-nosed coatis (Procyonidae: Nasua nasua) was performed in the Nhecolândia sub-region of the Brazilian Pantanal to evaluate the presence of anti-smooth Brucella antibodies on those wild populations. The detection of anti-smooth Brucella antibodies was performed by the Rose Bengal Test (RBT) as screening test and the Fluorescence Polarization Assay (FPA) as a confirmatory test. The frequency of smooth Brucella seropositive animals were 13.2% (5/38, 95% CI: 4.4% - 28.1%) for crab-eating foxes and 8.8% (3/34, 95% CI: 1.9% -23.7%) for brown-nosed coatis. No association was found between seropositivity for brucellosis and gender or age. The results of this study suggest exposure to or infection of crab-eating fox and brown-nosed coati from the Brazilian Pantanal by Brucella spp.

Um inquérito sorológico em quatis (Procyonidae: Nasua nasua) e lobinhos (Canidae: Cerdocyon thous) de vida livre foi conduzido na sub-região da Nhecolândia do Pantanal Sulmatogrossense para avaliar a presença de anticorpos anti-Brucella (fenótipo liso). A pesquisa de anticorpos anti-Brucella foi realizada pelo teste do antígeno acidificado tamponado, utilizado como teste de triagem e pelo teste de polarização fluorescente, utilizado como teste confirmatório. A frequência de animais soropositivos para anticorpos anti-Brucella foi de 13,2% (5/38, IC 95%: 4,4% - 28,1%) para lobinhos e de 8,8% (3/34, IC 95%: 1,9% - 23,7%) para coatis. Não foi encontrada associação entre a soropositividade para brucelose e gênero ou idade. Os resultados deste estudo sugerem exposição a ou infecção de lobinhos e quatis do Pantanal Brasileiro por Brucella spp.

Resumo

A vacinação com a amostra B19 de Brucella abortus é fundamental nos programas de controle dessa infecção. Contudo, a vacina induz títulos decrescentes de anticorpos, mas que podem provocar resultados falso-positivos. Muitas técnicas sorológicas já foram avaliadas para discriminar anticorpos vacinais, e há estudos mostrando que o teste de polarização fluorescente (TPF) apresenta elevada capacidade de discriminação mesmo em animais vacinados há pouco tempo. O estudo teve por objetivo comparar os resultados obtidos pelo TPF com aqueles obtidos pela reação de fixação de complemento (RFC) 30 dias após a aplicação da dose-padrão de vacina B19 em 71 bezerras da raça Tabapuã. Antes da vacinação, nenhuma das bezerras apresentava títulos de anticorpos. O TPF foi realizado e interpretado conforme as recomendações do fabricante (Diachemix, USA), e a para a RFC foi utilizada a microtécnica 50% de hemólise recomendada por Alton et al. (1988). Os resultados obtidos nas técnicas foram comparados por meio de análise de regressão, após os títulos observados na RFC serem transformados em logaritmo de base 2. Os dados classificados em positivos e negativos foram comparados entre si usando o indicador kappa e o teste binomial. As análises de dados foram efetuadas por meio do software R. Apenas 6 animais apresentaram resultados negativos na RFC, e os títulos observados nesse teste chegaram a 1:128 (3 animais). O título mais frequente foi 1:16. O resultado mais elevado observado pelo TPF foi 127,3 mP. Observou-se uma associação positiva entre os resultados dos dois testes, com coeficiente de regressão 9,375 (IC 95%: 6,762 - 11,988; P = 1,149 x 10-9 ) e R² ajustado 0,4092. Na RFC, 8,45% dos animais apresentaram resultado negativo, ao passo que no TPF a proporção de negativos foi o dobro (16,9%). A diferença entre esses resultados foi estatisticamente significativa pelo teste binomial (P = 0,03125), e a concordância entre os resultados foi boa, com kappa 0,62 (IC 95%: 0,41 - 0,84). Os dados obtidos indicam que o TPF apresentou melhor capacidade do que a RFC para discriminar anticorpos induzidos pela vacina B19, porém essa capacidade não foi tão elevada quanto a descrita por outros autores.

Vaccination with Brucella abortus B19 is critical for the control programs of this infection. However, the vaccine induces decreasing antibodies titers, which can cause false-positive results. Many serological techniques have been evaluated to discriminate vaccine antibodies, and there are studies showing that the fluorescence polarization assay (FPA) has high discrimination ability even in animals recently vaccinated. The study aimed to compare the results obtained by FPA with those obtained by the complement fixation test (CFT) 30 days after standard vaccination with B19 of 71 Tabapuã heifers. Before vaccination, none of the calves showed antibody titers. The FPA was performed and interpreted according to the manufacturer's recommendations (Diachemix, USA). The CFT used the micro-technique with 50% haemolytic units as recommended by Alton et al. (1988). The results obtained with the two techniques were compared using regression analysis, after the titers observed for CFT were transformed into base-2 logarithm. The data, classified into positive and negative, were compared using the kappa index and the binomial test. Data analyses were performed using the software R. Only 6 animals tested negative according to CFT while the titers observed in this test reached 1:128 (3 animals). The most common titer was 1:16. The highest result was 127.3 mP observed by FPA. There was a positive association between the results of the two tests, with regression coefficient 9.375 (95% CI: 6.762 to 11.988, P = 1.149 x 10-9 ) and adjusted R² 0.4092. In CFT, 8.45% of the animals were negative, whereas the proportion of negative results according to FPA was double (16.9%). The difference between these results was statistically significant by the binomial test (P = 0.03125), and the agreement between the results was good, with kappa 0.62 (95% CI: 0.41 to 0.84). The data obtained indicate that the FPA was more efficient that CFT to discriminate B19 vaccine-induced antibodies, but this capability was not as high as that reported by other authors.

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A brucelose é uma antropozoonose infectocontagiosa de evolução crônica e distribuição mundial que causa sérios prejuízos econômicos. Na tentativa de controlar e erradicar a doença no país, foi criado um Programa Nacional que visa a vacinação de bezerras com a cepa B19 de Brucella abortus e diagnóstico para identificação de animais infectados. Para o diagnóstico sorológico, existe um amplo número de testes, entre eles o teste de polarização fluorescente (TPF), recentemente validado no Brasil e que vem se mostrando uma grande ferramenta para diferenciar animais vacinados com persistência de anticorpos daqueles naturalmente infectados. O objetivo deste estudo foi acompanhar a resposta sorológica de bezerras da raça Tabapuã à vacinação com a cepa B19 de Brucella abortus pelo TPF em comparação com os demais testes preconizados pelo Programa Nacional. Foram selecionadas 72 bezerras da raça Tabapuã com idade de vacinação. Os animais foram vacinados por via subcutânea na dose padrão recomendada. Amost

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The objective of the present study was to compare the performance of three serological tests for diagnosis of Brucella abortus infections in buffaloes (Bubalus bubalis). Serum samples collected from 696 adult females were submitted to the competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA-C), (I-ELISA), fluorescence polarization test (FPA), 2-mercaptoethanol test (2-ME) and complement fixation test (CFT). The gold standard was the combination of CFT and 2-ME, considering as positive the reactors in both CFT and 2-ME, and as negative those non-reactors. ROC analyses were done for C-ELISA, I-ELISA and FPA and the Kappa agreement index were also calculated. The best combinations of relative sensitivity (SEr) and relative specificity (SPr) and Kappa were given by C-ELISA (96.9%, 99.1%, and 0.932, respectively) and FPA (92.2%, 97.6 and 0.836, respectively). The C-ELISA and FPA were the most promising confirmatory tests for the serological diagnosis of brucellosis in buffaloes, and for these tests, cut-off values for buffaloes may be the same as those used for bovines.

O presente estudo objetivou comparar o desempenho de três testes para o sorodiagnóstico da Brucella abortus em búfalos (Bubalus bubalis). Soros de 696 fêmeas bubalinas adultas foram submetidos aos testes: teste imunoenzimático indireto (ELISA-I), teste imunoenzimático competitivo (ELISA-C), teste de polarização fluorescente (TPF), 2-mercaptoetanol (2-ME) e teste de fixação do complemento (FC). Foi empregada, como gold standard, a combinação de dois testes, FC e 2-ME. A curva ROC foi construída para os três testes: ELISA-I, ELISA-C e PF e, com base nos resultados desta análise, foi calculado o índice de concordância Kappa para cada teste. As melhores combinações de sensibilidade (Sr) e especificidade (Er) e os melhores resultados de Kappa foram alcançados pelo ELISA-C (96,9%, 99,1% e 0,932, respectivamente), seguido pelo PF (92,2%, 97,6%, e 0,836, respectivamente). Concluiu-se que os resultados dos estudos com os testes ELISA-C e PF em bovinos podem ser inferidos para búfalos com razoável segurança e que ambos demonstraram ser testes confirmatórios promissores para a espécie estudada.

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O desempenho do teste de polarização fluorescente (TPF) foi avaliado em diferentes situações epidemiológicas no diagnóstico da brucelose bovina. A avaliação foi feita através da comparação do TPF com as provas do antígeno acidificado tamponado (AAT) e do 2-mercaptoetanol (2-ME/SAL), que são preconizadas para o diagnóstico da brucelose bovina pelo Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT). Foram utilizadas 1666 amostras de soro bovino provenientes de propriedades certificadas como livres ou como monitoradas pelo PNCEBT e de propriedades não certificadas onde haviam animais previamente classificados como positivos. O TPF identificou amostras falso-negativas deixadas pelo teste de triagem (AAT), e teve bons valores de sensibilidade, altos valores relativos de especificidade e de valores preditivos positivo e negativo. A concordância entre os testes do TPF com o AAT e com o 2-ME/SAL na análise geral das amostras foi boa, com índices kappa de 0,7921 e 0,7145 respectivamente. O desempenho do TPF foi satisfatório para ser utilizado no diagnóstico da brucelose bovina

It was evaluated the performance of the fluorescence polarization assay (TPF) in different epidemiological situations for the diagnosis of bovine brucellosis. The TPF was compared with the acidified suffered antigen (AAT) and 2-mercaptoethanol (2-ME / SAL) tests, both recommended for the diagnosis of bovine brucellosis by the National Program for Control and Eradication of Brucellosis and Tuberculosis (PNCEBT). A total of 1666 serum samples were tested from farms considered as free or monitored for brucellosis by the PNCEBT and from non-accredited properties, where previously positive animal for the disease were found. The TPF identified false-negative samples left as negatives by the screening test (AAT), and presented good sensitivity, high relative values for specificity and predictive values (positive and negative). The agreement between the TPF tests with the AAT and the 2-ME / SAL was good in the overall analysis of the samples, with kappa indexes of 0.7921 and 0.7145. The TPF was considered a satisfactory test to be used in the diagnosis of bovine brucellosis.

Resumo

Os objetivos deste estudo foram determinar a soroprevalência da infecção por Brucella canis e Brucella abortus e avaliaros possíveis fatores de risco associados à infecção em cães no município de Araguaína, Tocantins. Soros de 374 cães,pertencentes à zona urbana do município de Araguaína-Tocantins, foram analisados pelas técnicas de imunodifusãoem ágar gel (IDGA), para pesquisa de anticorpos contra Brucella canis, e antígeno acidificado tamponado (AAT)e polarização fluorescente (FPA) para detecção de anticorpos contra Brucella abortus. Dos 374 soros testados parapresença de anticorpos contra B. abortus, 21 foram reagentes no AAT, entretanto todos foram negativos pela FPA. Àprova do IDGA 167 animais foram reagentes resultando em uma prevalência para B. canis de 44,53% (IC 95%; 39,43 a49,72). A avaliação de possíveis fatores de risco associados à soropositividade para B. canis não revelou a existência derelação entre a infecção e as variáveis individuais estudadas. Assim, o presente estudo permite concluir que não houveanimais infectados por B. abortus e que a infecção por B. canis está disseminada nos cães do município de Araguaína,Tocantins.

The aims of the present study were to determine the seroprevalence of infection by Brucella canis and Brucella abortusand to evaluate possible risk factors for infection in dogs from Araguaína, Tocantins, Brazil. Sera from 374 dogs, of theurban zones of the municipality, from both sexes, were submitted to the agar-gel immunodiffusion for Brucella canisantibodiesand to rose Bengal test (AAT) and fluorescence polarization assay (FPA) for Brucella abortus-antibodies.From the 374 tested dogs, 21 reacted in the AAT, but no one was positive in the FPA. The seroprevalence of B. canisinfection found in Araguaína, Tocantins, Brazil, was 44.53% (95% IC; 39.43 to 49.72). No association was found amongseropositivity for B. canis and the risk factors studied. Thus, data from the present study showed that there was noinfection by B. abortus among dogs in the sample and that infection by B. canis is widespread and at high prevalence inAraguaína, Tocantins, Brazil.

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The purpose of this research was the interlaboratorial validation of the polarization fluorescence assay (PFA) for the serodiagnosis of bovine brucellosis, verifying the relative sensitivity, the relative specificity and the reproducibility of the test in four Brazilian laboratories. Serum samples from 1,389 bovines were selected and submitted to the rose Bengal (RBT) and 2-mercaptoethanol tests in one of the laboratories. The same samples were tested by the complement fixation (CFT) test and by the PFA in the four laboratories participating of the research. The reference population (golden standard) used to evaluate the PFA was the combination of the results of RBT, CFT and 2-ME. TG-ROC analysis was used to obtain the cut-off that provided the best combination of sensitivity and specificity. The agreement between laboratories was obtained by the kappa statistic and Pearson correlation coefficient (r). The PFA cut-off values were from 85.2 to 93.6. The sensitivity of the PFA assay varied from 91.7% to 97.3%, and the specificity values varied from 82.6% to 98.3%. When comparing PFA results from the four laboratories, the kappa values was between 0.69 and 0.95, which indicates, in most situations, excellent reproducibility, and the correlation coefficient varied from 0.76 to 0.99. The results showed that the PFA had a good performance, with high sensitivity and specificity. Compared to the conventional tests, the PFA has the advantages of being easy and quick to perform, and it is not prone to the occurrence of prozone, as the CFT or the 2-ME, nor to the occurrence of anti-complementary effect, as the CFT.

Esta investigação teve por objetivo validar o teste de polarização fluorescente (TPF) para o diagnóstico sorológico da brucelose bovina, determinando a sensibilidade (SE) e a especificidade relativas (SP) e verificando a reprodutibilidade do teste em quatro laboratórios no Brasil. Foram selecionadas 1.389 amostras de soro sanguíneo, as quais foram inicialmente submetidas aos testes do antígeno acidificado tamponado (AAT) e mercaptoetanol (2-ME). As mesmas amostras foram submetidas à reação de fixação de complemento (RFC) e ao TPF. Para a avaliação do TPF, foi adotada a combinação dos resultados do AAT, da RFC e do 2-ME, utilizados como população de referência (padrão-ouro). Para a determinação do ponto de corte do TPF que proporciona a melhor combinação de sensibilidade e especificidade, foi usada a análise TG-ROC. A concordância entre os resultados dos quatro laboratórios foi determinada com base no indicador kappa e no coeficiente de correlação de Pearson. Os pontos de corte do TPF situaram-se entre 85,2 e 93,6 mP, conforme o laboratório. A sensibilidade variou de 91,7 a 97,3%, e a especificidade situou-se na faixa de 82,6 a 98,3%. Na comparação entre os resultados do TPF dos quatro laboratórios, o indicador kappa ficou entre 0,69 e 0,95, o que indica, na maioria das situações, reprodutibilidade excelente, e o coeficiente de correlação variou entre 0,76 e 0,99. Os resultados indicaram que o TPF apresentou bom desempenho, na maioria das situações, com sensibilidade e especificidade elevadas. Em comparação com os testes convencionais, o TPF apresenta as vantagens de ser de execução mais rápida e mais fácil e não estar sujeito à ocorrência de prozona, como a RFC e o 2-ME, nem de atividade anticomplementar, como a RFC.

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No Brasil, alguns estados, como Mato Grosso e Goiás, que possuem regiões alagadiças e pouco exploradas, têm a bovinocultura de corte extensiva como um dos pilares da economia. Isso faz com que bovinos e animais selvagens compartilhem o mesmo ambiente, facilitando uma possível transmissão cruzada de doenças infectocontagiosas entre eles e até mesmo para humanos. Com o objetivo de identificar anticorpos e detectar o DNA de Leptospira spp. e Brucella spp. nos diferentes materiais oriundos de tartarugas-da-amazônia (Podocnemis expansa) e do meio onde vivem, foram examinados 600 Testudines. As técnicas de diagnóstico sorológico empregadas foram a soroaglutinação microscópica (SAM), utilizada para a identificação de anticorpos anti-Leptospira, e a prova do antígeno acidificado tamponado (AAT), o teste da polarização fluorescente (TPF) e a reação de fixação de complemento (RFC), utilizados para a identificação de anticorpos anti- Brucella. Já a detecção de DNA dos agentes foi realizada pela reação em cadeia da polimerase (PCR). Empregando-se a SAM observou-se que 483 (80,5%) amostras foram reagentes ao teste. Quatro amostras foram reagentes na AAT, porém no TPF e na RFC, não houve reagentes. Detectou-se DNA de Leptospira spp. e Brucella spp. nos materiais oriundos dos animais e no ambiente onde vivem. Tal achado demonstra que há possibilidade da P. expansa ser hospedeiro natural da Leptospira spp. assim como da Brucella spp., permitindo a disseminação do agente para animais domésticos, outras espécies selvagens e humanos

In Brazil, States such as Mato Grosso and Goiás, having flooded and little explored regions, maintain beef cattle as a pillar of their economies. This results in both cattle and wild animals sharing the same environment, and thus facilitating the potential cross transmission of infectious diseases among them and even to humans. With the goal of identifying antibodies and detecting the DNA of Leptospira spp. and Brucella spp. in various tissues and fluids from giant Amazon turtles (P. expansa) and the environment where they live, 600 Testudines were examined. The serological diagnostic techniques employed included the microscopic agglutination test (MAT) for the identification of anti-Leptospira antibodies, and the rose bengal plate test (RBPT), the fluorescence polarization assay (FPA) and the complement fixation test (CFT) for the identification of anti-Brucella antibodies. The detection of DNA was carried out by polymerase chain reaction (PCR). The MAT results showed that 483 (80.5%) of the samples tested were reagents to Leptospira spp. Four samples were reagents in RBPT, but in FPA and CFT, there weren`t reagents. The DNA of these bacteria was detected in the biologic material from tested animals and in the environment where they live. This demonstrates the possibility of P. expansa being a natural host of Leptospira spp. as well as a natural host of Brucella spp. thus allowing dissemination of the agents to domestic animals, other wildlife and humans

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A ferramenta mais importante para o controle da brucelose em bubalinos e bovinos é a vacinação compulsória, utilizando-se a vacina viva atenuada contendo a estirpe B19 de Brucella abortus. A vacina B19 confere imunidade duradoura à infecção nos animais vacinados, e sua aplicação é restrita às fêmeas com idade entre 3 e 8 meses. A vacina B19 induz a produção de anticorpos que interferem no sorodiagnóstico da infecção, de forma que o diagnóstico sorológico de animais vacinados deve ser realizado apenas após os 24 meses de idade, idade na qual os anticorpos de origem vacinal já declinaram para níveis não detectáveis. O desempenho, a cinética humoral e o período de clearance da estirpe vacinal são bem conhecidos nos bovinos, contudo há poucas informações referentes a estes aspectos na espécie bubalina. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a eliminação da estirpe B19 pelas fêmeas bubalinas vacinadas com a dose padrão contendo de 60 a 120 bilhões de UFC, assim como o perfil da resposta imune humoral induzido pela vacinação e a eficiência dos principais testes laboratoriais em diferenciar anticorpos vacinais dos anticorpos induzidos pela infecção natural. Foram utilizadas 44 fêmeas bubalinas provenientes de duas propriedades, negativas para brucelose, localizadas no interior do Estado de São Paulo, sendo 33 animais da propriedade A e 11 da propriedade B. Os animais foram vacinados e amostras de sangue, swab vaginal e urina foram coletas semanalmente, desde o dia em que a vacinação foi realizada (D0) até que os animais completassem 24 meses de idade. Os soros obtidos a partir das amostras de sangue foram utilizados na avaliação sorológica, empregando-se os seguintes testes: antígeno acidificado tamponado (AAT), 2-mercaptoetanol (2ME), fixação de complemento (FC) e polarização fluorescente (PF). As amostras de urina e swab vaginal foram submetidas ao cultivo microbiológico para isolamento de Brucella spp. e à reação em cadeia pela polimerase (PCR) para avaliar a eliminação da estirpe vacinal. Na PCR, as amostras foram amplificadas primeiramente utilizando-se primers direcionados à região interespaçadora do RNA ribossomal de Brucella spp. (PCR-ITS) para a detecção de qualquer componente do gênero. Amostras com resultados positivos pela PCR-ITS foram submetidas à PCR utilizando-se primers direcionados ao gene eri de Brucella spp, num ensaio específico para a detecção da estirpe B19 (PCR-B19). Foi calculada a especificidade de cada teste sorológico em detectar como negativos os animais vacinados. Todos os animais apresentaram-se reagentes aos sete dias pós-vacinação no teste de AAT, aos 14 dias no teste de 2ME, aos 126 no teste de FC. No teste de PF, o D28 foi o período em que o maior número de animais apresentaram resultados positivos. Dezesseis animais não soroconverteram em nenhum momento do experimento pelo teste de PF. A PF foi o teste mais eficiente na diferenciação de anticorpos vacinais, sendo que todos os animais apresentaram resultados negativos aos 151 e 232 dias pós-vacinais nas propriedades A e B, respectivamente. No teste de FC, 100% animais apresentaram resultados negativos no D552 (propriedade A) e no D331 (propriedade B). No D552 na propriedade A as especificidades foram de 92,31% para o teste de 2ME e 69,23% para o teste de AAT. A propriedade B apresentou nos dias D366 especificidades de 72,73% e 36,36% para os testes 2ME e AAT, respectivamente. Todos os animais foram negativos pelo cultivo microbiológico em todo o período de monitoramento. Na PCR foram verificadas 19 das 1144 amostras positivas (1,66%). Das 44 bezerras avaliadas, 15 (34,1%) apresentou resultado positivo em pelo menos uma colheita, em amostras de urina e/ou swab vaginal. De acordo com os resultados apresentados, pode-se concluir que a prova sorológica mais eficiente para a diferenciação dos anticorpos de origem vacinal dos da infecção natural é o teste de PF e que, a eliminação da estirpe vacinal pode ocorrer de forma intermitente, durante períodos prolongados nas fêmeas bubalinas vacinadas

The most important tool for the control of brucellosis in buffalo and cattle is compulsory vaccination, using a live and attenuated vaccine containing the S19 strain of Brucella abortus. The S19 vaccine confers long-lasting immunity to infection in vaccinated animals and the application is restricted to females aged between 3 and 8 months. The S19 vaccine induces production of antibodies that interfere with serodiagnosis of infection, so that the serological diagnosis of vaccinated animals must be only realized after 24 months of age, when the vacinal antibodies declined to undetectable levels. The performance, kinetics and humoral clearance period of the strain 19 vaccine are well known in cattle, however there is little information concerning these aspects in buffalo. This study aimed to evaluate the elimination of strain S19 by buffalo females vaccinated with the standard dose containing 60-120 billion CFU, as well as the profile of the humoral immune response induced by vaccination and efficiency of principals laboratory tests to differentiate vaccinal antibodies of the antibodies induced by natural infection. We used 44 female buffalo from two farms negative for brucellosis, located in the State of São Paulo, being 33 animals of the property A and 11 of the property B. The animals were immunized and blood samples, urine and vaginal swabs were collected weekly from the time that vaccination is performed (D0) until complete 24 months of age. The sera obtained from the blood samples were used for serological testing, using the following tests: rose bengal test (RBT), 2-mercaptoethanol (2ME), complement fixation test (CFT) and fluorescence polarization assay (FPA). The urine samples and vaginal swabs were tested by microbiological culture for isolation of Brucella spp. and polymerase chain reaction (PCR) to evaluate the clearance of the vaccine strain. In PCR, the samples were first amplified using primers directed to the interspace region of the ribosomal RNA Brucella spp. (ITS-PCR) for the detection of any component of the genus. Samples with positive results by ITS-PCR were subjected to PCR using primers directed to the gene of ery of Brucella spp, in a specific assay for the detection of strain B19 (B19-PCR). Were calculated the specificity of each serological test to detect as negative the vaccinated animals. All animals showed reagents at seven days post-vaccination in the RBT test, at 14 days in the test 2ME, 126 on the CFT test. In the test of FPA, D28 is the period in which the highest number of animals tested positive. Sixteen animals do not seroconverted at any time of the experiment by FPA. The FPA test was more effective in differentiating antibodies of vaccination, and all animals were negative at 151 and 232 days post vaccination in the properties A and B, respectively. In test CFT, 100% animals showed negative results in D552 (property A) and D331 (property B). In the property A, at D552, the specificities were 92.31% for the test 2ME and 69.23% for the test RBT. Property B had in the days D366 specificities of 72.73% and 36.36% for the tests 2ME and RBT, respectively. All animals were negative by microbiological culture throughout the monitoring period. In the PCR were verified 19 samples positives in 1144 (1.66%). Of the 44 heifers evaluated, 15 (34.1%) showed positive results in at least one sample, in samples of urine and/or vaginal swabs. According to the presented results, we can conclude that the most effective serological test for differentiation of antibodies of natural infection of vaccine testing is FPA and the elimination of the vaccine strain may occur intermittently during periods prolonged in buffalo females vaccinated

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O trabalho teve como objetivo analisar a resposta sorológica induzida pela vacinação com a dose padrão de 60-120x109 organismos da amostra B19 de Brucella abortus em bezerras da raça Tabapuã, com idade entre 3 e 8 meses, pelos testes sorológicos preconizados pelo Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT) para diagnóstico da brucelose bovina. Foram examinadas amostras de soro sanguíneo de 72 animais em quatro provas sorológicas: antígeno acidificado tamponado (AAT), teste de soroaglutinação lenta juntamente com o teste de 2-mercaptoetanoll (2-ME), reação de fixação de complemento (RFC) e teste de polarização fluorescente (TPF), o qual foi interpretado de duas formas: ponto de corte variável e ponto de corte fixo. As amostras de soro sanguíneo foram colhidas imediatamente antes da vacinação, e após 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330 e 360 dias. Foi calculada a especificidade dos testes, e os resultados foram comparados pelo indicador kappa e pelo teste ?² de McNemar. O TPF apresentou especificidade mais elevada do que os outros testes nas amostras colhidas dos 30 aos 90 dias após a vacinação, mas com o passar do tempo a diferença entre a especificidade do TPF e a dos outros testes diminuiu. Aos 270 dias de vacinação, observou-se especificidade de 93,74% no AAT, no 2-ME e na RFC. No TPF com ponto de corte variável a especificidade foi 87,5%, e com ponto de corte fixo foi 100,0%. Foi possível concluir que o TPF apresentou maior capacidade de discriminação dos títulos de anticorpos vacinais logo após a vacinação, quando comparado com os outros testes preconizados pelo PNCEBT, apresentando-se, portanto, como uma ferramenta útil para o diagnóstico da brucelose bovina, além de ser de execução fácil e rápida

The study aimed to analyze the antibody response induced by vaccination with the standard dose of 60-120x109 organisms of Brucella abortus strain 19 in Tabapuã heifers, aged between 3 and 8 months, by serological tests recommended by the National Program for Brucellosis and Tuberculosis Control and Eradication (PNCEBT) for the diagnosis of bovine brucellosis. Serum samples of 72 animals were examined by four serological tests: rose Bengal test (RBT), standard agglutination test with the 2-mercaptoetanol (2-ME) test, complement fixation test (CFT) and fluorescence polarization assay (FPA), which was interpreted in two ways: variable cutoff and fixed cutoff. Heifers were bled immediately prior to vaccination, and after 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330 and 360 days. Specificity of the tests were calculated, and the results were compared using the kappa statistic and the McNemar's ?² test. The FPA had a higher specificity than the other tests on the samples collected from 30 to 90 days after vaccination, but over time this difference decreased. At 270 days of vaccination, the specificity of RBT, 2-ME and RFC was 93.74%. The specificity of the FPA with variable cutoff was 87.5%, and with fixed cutoff was 100.0%. It was concluded that FPA had a higher discrimination ability for vaccination antibody titers shortly after vaccination, when compared with other tests recommended by the PNCEBT, and is a useful tool for the diagnosis of bovine brucellosis, besides being easy and quick to perform

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The aim of this survey was to verify the occurrence of anti-Leptospira spp. antibodies in captive animals in the Parque Zoobotânico Arruda Câmara, João Pessoa, Paraíba State, Northeastern Brazil. Blood samples were collected from 49 animals: 26 mammals of the species Sapajus libidinosus, Cebus flavius, Saimiri sciureu, Coendu sp., Pseudalopex vetulus, Leopardus pardalis, Leopardus tigrinus, Galactitis vitata, Eira barbara, Nasua nasua, Tayassu tajacu and Ratus norvegicus; 10 birds of the species Penelope jacucaca, Pavo cristatus, Anodorhynchus hyacinthinus, Ara chlorothpterus, Pionites leucogaster, Polyborus plancus, Geranoaetus melanoleucus and Urubitinga urubitinga; and 13 reptiles of the species Caiman latirostris, Paleosuchus trigonatus, Caiman crocodilus, Tupinabis merinae, Tupinambis teguixin, Boa constrictor, Corallus hortulanus, Python molurus, Bufocephala vanderhaegei, Geochelone denticulata and Geochelone carboraria. Sera were examined by the microscopic agglutination teste (MAT) using 24 serovars as antigens and cut-off point of 1:100. One ocelot (Leopardo pardalis) presented positive reaction for the Icterohaemorrhagiae serovar with titer of 100, however, it did not show any clinical sign of the infection. Sinantropic rodents are the main reservoirs of this serovar, which suggests the need of maintenance and continuous evaluation of rodent control programs.

Canine brucellosis is an infectious disease of worldwide distribution that can affect dogs, wild canids and man. It is caused by Brucella canis, but dogs can also be infected by smooth Brucella such as B. abortus and B. suis. Due to the increasing importance of dogs in our society, to the scarcity of information about canine brucellosis in the country and its zoonotic character, the aims of the present study were (i) to conduct a survey on the infection by B. canis and smooth Brucella in dogs from the municipality of Araguaína, Tocantins, Brazil, and (ii) to evaluate the risk factors associated with these infections. Sera from 241 dogs were analyzed by agar gel immunodiffusion (AGID) to detect B. canisantibodies, and Buffered Acidified Plate Antigen test (BAPA) and fluorescence polarization assay (FPA) to detect antibodies to smooth Brucella. From the 241 tested dogs, 132 reacted in the AGID and 128 reacted in the BAPA, but only two were positive in FPA. The seroprevalences of B. canis and smooth Brucella infections in dogs in Araguaína were 54.77% (95% CI: 48.25 to 61.17%) and 0.83% (95% CI: 0.10 to 2.97%), respectively. The analysis of risk factors showed associations between B. canis infection and vaccination against leptospirosis, and between B. canis infection and use of manufactured food. In conclusion, data from the present study showed a low prevalence of infection by s

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O objetivo deste trabalho foi analisar os aspectos epidemiológicos da brucelose suína, estudando a disseminação da enfermidade num surto detectado em julho de 2006, em um rebanho em Jaboticabal, no Estado de São Paulo, Brasil. De 271 matrizes examinadas, 254 (93,7%) foram positivas na reação de fixação de complemento (RFC), e de 62 animais da terminação testados, 17 (27,4%) foram positivos na mesma prova. Todos os 33 bovinos, 5 equinos, 126 ovinos e 25 gansos foram negativos no teste do antígeno acidificado tamponado (AAT), porém 3 (23,07%) dos 13 cães da propriedade foram positivos na RFC. Foram colhidas amostras de sangue dos 14 trabalhadores da granja; 3 (21,42%) deles apresentaram títulos de anticorpos contra brucelas lisas na prova de soroaglutinação em tubos, e apenas 1 (7,14%) apresentou sinais clínicos da doença. O biovar 1 de Brucella suis foi cultivado a partir de 14 fetos abortados e de 6 matrizes necropsiadas, e a identificação foi confirmada por provas de rotina. Não foram encontrados anticorpos específicos contra amostras lisas de Brucella em 1.100 amostras sanguíneas de suínos e em 24 de funcionários de um frigorífico do Estado de São Paulo. Foi avaliado o desempenho de 6 técnicas sorológicas, AAT, 2-mercaptoetanol realizado simultaneamente à soroaglutinação lenta (SAL+ME), RFC, antígeno acidificado tamponado após tratamento com rivanol (AAT-RIV), e teste de polarização fluorescente (TPF) no diagnóstico da brucelose suína a partir do soro sanguíneo colhidos de 333 suínos da fazenda do foco e de mais 1.100 animais abatidos no frigorífico. As informações relatadas neste trabalho indicaram que, apesar da redução da incidência da brucelose suína no Brasil, ainda ocorre infecção por B.suis, sendo um risco para a saúde animal e a saúde pública

The purpose of this study was to analyze epidemiological aspects of swine brucellosis, studying an outbreak in a herd in Jaboticabal, State of São Paulo, Brazil, detected in July 2006. Of 271 sows, 254 (93.7%) tested positive by the complement fixation test (CFT), and among 62 randomly bled fattening animals, 17 (27.4%) tested positive. All the 33 cattle, 5 horses, 126 sheep and 25 geese tested negative by the rose Bengal test (RBPT), however, 3 of the 13 dogs in the farm tested positive by the CFT. Blood samples were taken from 14 farm workers; 3 (21.42%) of them had antibody titers to smooth Brucella by the slow agglutination test, and 1 (7.14%) presented clinical signs. B.suis biovar 1 was cultured from 14 aborted fetuses and 6 sows. Brucella identification was accomplished by routine methods. Blood samples were taken from 1,100 pigs and 24 abaittor workers in a slaughterhouse in the state of São Paulo; all the animal and human sera tested negative to smooth Brucella antibodies. The performance of 6 serological tests were evaluated, RBPT, standart tube agglutination test plus mercaptoethanol test (STAT+2-ME), CFT, rose Bengal plate test after serum treatment with rivanol (RBPT-RIV), and fluorescence polarization assay (FPA), for the diagnosis of swine brucellosis in serum samples of 333 pigs from the outbreak and 1,100 pigs from the slaughterhouse. The results showed that, in spite of the reduction of swine brucellosis prevalence in Brazil, B.suis infection still occurs, posing a risk to animal and human health

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The objective of this study was to determine the prevalence of anti-Brucella antibodies in feral pigs and bovines simpatrics in the Pantanal subregions of Paiaguás and Nhecolândia. The study was conducted in the municipality of Corumbá, Mato Grosso do Sul State, Brazil. A total of 105 feral pigs and 256 cattle were sampled in 12 farms, in all animals blood samples were collected for the serological diagnosis with Rose Bengal Test (RBT) for screening, 2-Mercaptoethanol (2-ME) confirmatory test and comparative test with Fluorescence Polarization Assay (FPA). The prevalence of positive feral pigs were 1% (1/105) in the RBT and FPA and no positive AAT results were confirmed in the 2-ME test. The prevalence of positive cattle sampled was 11.32%, 4.3% and 7.42% in the RBT, 2-ME and FPA tests respectively. The degree of agreement obtained between the serological tests used in cattle was Kappa = 0.506 (p 0.001), 95% CI (0.282 - 0.729). The results of the serological tests demonstrated that brucellosis is widespread in bovine herds of the region studied, but the same type of exposure to the agent did not occur in feral pigs according to the diagnostic tests used.

O objetivo deste estudo foi estimar a prevalência de anticorpos anti-Brucella em porcos ferais e bovinos simpátricos nas sub-regiões pantaneiras do Paiaguás e Nhecolândia. O estudo foi conduzido no município de Corumbá, Estado de Mato Grosso do Sul, Brasil. Foram amostrados 105 porcos ferais e 256 bovinos em 12 propriedades, em todos os animais foram coletadas amostras de sangue para o diagnóstico sorológico com Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) para triagem, teste confirmatório 2-Mercaptoetanol (2-ME) e comparativo com Teste de Polarização Fluorescente (TPF). A prevalência de porcos ferais positivos foi de 1% (1/105) no AAT e TPF, não tendo sido confirmado nenhum resultado positivo do AAT no 2-ME. A prevalência de bovinos positivos amostrados foi de 11,32% (29/256), 4,3% (10/256) e de 7,42% (19/256) nos testes AAT, 2-ME e no TPF, respectivamente. O grau de concordância obtido entre os testes sorológicos utilizados nos bovinos foi de Kappa = 0,506 (p 0.001), 95% CI (0.282 0.729). Os resultados dos testes sorológicos demonstraram que a brucelose está disseminada nos rebanhos bovinos da região estudada, porém o mesmo tipo de exposição ao agente não ocorreu nos porcos ferais de acordo com os testes de diagnóstico utilizados.