Molecular characterization of Giardia lamblia and risk factors for giardiasis among immunocompromised patients in southern Brazil / Caracterização molecular de Giardia lamblia e fatores de risco para giardíase em pacientes imunocomprometidos no sul do Brasil

Acute Giardia infections often cause diarrhea and stomach upset. Chronic infections can lead to malnutrition, micronutrient deficiencies, malabsorption and weight loss. This study assessed the prevalence of G. lambia infection and assessed associated risk factors among immunocompomised patients undergoing chemotherapeutic treatment in southern Brazil. A total of 110 immunocompromised patients in Pelotas, RS, Brazil, consented to participate in this study and were recruited. Socioeconomic and epidemiological profile of patients was collected by questionnaire. The prevalence for Giardia were determined through microscopy by the centrifugation-flotation technique using stool samples of every patient. In addition, the genetic characterization of the parasite was carried out by amplifying and sequencing the glutamate dehydrogenase (gdh) gene. By microscopy, the prevalence of giardiasis was 17.3% (19/110). Furthermore, the DNA sequences revealed that 7 (36.8%) out of 19 isolates belonged to assemblage B, while 6 of them (31.6%) belonged to assemblage C, 5 (26.3%) to assemblage A and 1 (5.3%) to assemblage D. Risk factors (p ≤ 0.05) for giardiasis were schooling level (OR=8.0 (1.02 ­ 62.91) sharing a house with more than three people (OR=14.1 (3.77 ­ 52.51), water sources (OR=38.9 (10.4 ­ 145.7), sewage treatment (OR=14.2 (3.1 ­ 65.5), waste destination (OR=7.44 (2.0 ­ 27.3), owning pets (OR=4.6 (1.0 ­ 21.2) and cultivating a vegetable garden (OR=4.2 (1.3 ­ 13.6). The prevalence of G. lamblia in immunocompromised patients was considered elevate with the identification of four assemblage of the parasite (A, B, C and D).

As infecções agudas por Giardia geralmente causam diarreia e dores de estômago. As infecções crônicas podem levar à desnutrição, deficiências de micronutrientes, má absorção e perda de peso. Este estudo avaliou a prevalência da infecção por G. lambia e os fatores de risco associados em pacientes imunocomprometidos em tratamento quimioterápico no sul do Brasil. Um total de 110 pacientes imunocomprometidos de Pelotas, RS, Brasil, consentiram em participar deste estudo e foram recrutados. O perfil socioeconômico e epidemiológico dos pacientes foi coletado por meio de questionário. A prevalência de Giardia foi determinada através de microscopia pela técnica de centrifugação-flutuação utilizando amostras de fezes de cada paciente. Além disso, a caracterização genética do parasita foi realizada pela amplificação e sequenciamento do gene da glutamato desidrogenase (gdh). À microscopia, a prevalência de giardíase foi de 17,3% (19/110). Além disso, as sequências de DNA revelaram que 7 (36,8%) dos 19 isolados pertenciam ao agrupamento B, enquanto 6 deles (31,6%) pertenciam ao agrupamento C, 5 (26,3%) ao agrupamento A e 1 (5,3%) ao agrupamento D. Os fatores de risco (p ≤ 0,05) para giardíase foram, escolaridade (OR=8,0 (1,02 ­ 62,91), dividir casa com mais de três pessoas (OR=14,1 (3,77 ­ 52,51), fontes de água (OR=38,9 (10,4 ­ 145,7), tratamento de esgoto (OR=14,2 (3,1 ­ 65,5), destinação do lixo (OR=7,44 (2,0 ­ 27,3), possuir animais de estimação (OR=4,6 (1,0 ­ 21,2) e cultivar horta (OR=4,2 (1,3 ­ 13.6). A prevalência de G. lamblia em pacientes imunocomprometidos foi considerada elevada com a identificação de quatro conjuntos do parasito (A, B, C e D).

Clostridioides difficile: achados epidemiológicos em animais domésticos em um Hospital Veterinário Universitário em ­ Teresina, PI / Clostridioides difficile: epidemiological findings in domestic animals in a University Veterinary Hospital in Teresina, PI

O objetivo deste estudo foi analisar a prevalência de Clostridioides difficile e suas toxinas (A/B) nas fezes de animais domésticos de um Hospital Veterinário Universitário de Teresina - PI. A detecção de C. difficile e suas toxinas foi realizada por meio de um ensaio imunoenzimático, denominado C. Diff Quik Chek Complete® (TECHLAB), capaz de detectar antígeno Glutamato Desidrogenase (GDH) e as toxinas A/B produzidas pelo bacilo, realizado em amostras fecais de cães (C. lupus) e e gatos (Felis catus) coletadas entre agosto de 2019 a setembro de 2020. Um total de 54 amostras fecais foram analisadas, das quais 16 foram positivas para C. difficile (29,63%). 68,75% (11/16) pertenciam a caninos, enquanto 31,25% (5/16) a felinos. Amostras diarreicas e não diarreicas foram utilizadas para o estudo e uma maior prevalência do bacilo pôde ser identificada em amostras diarreicas (33%). Nenhuma das amostras apresentou toxinas do patógeno. Os achados deste estudo evidenciam que C.difficile está presente no estado do Piauí. Foi possível identificá-lo em todas as espécies e em amostras diarreicas ou não, demonstrando que essa infecção pode se manifestar de formasintomática e assintomática, levantando a possibilidade de infecção cruzada entre o animal e seu tutor.

The aim of this study was to analyze the prevalence of Clostridioides difficile and its toxins (A/B) in the feces of domestic animals at a University Veterinary Hospital in Teresina - PI. The detection of C. difficile and its toxins was performed by an immunogenic enzyme, called C. Diff Quik Chek Complete® (TECHLAB), capable of detecting antigen glutamate dehydrogenase (GDH) and A/B toxins produced by this bacillus, performed in fecal samples of dogs (C. lupus) and cats (Felis catus) collected between August 2019 and September 2020.:54 stools were analyzed, of which 16 were positive for C. difficile (29.63%). 68.75% (11/16) belonged to canines, while 3.25% (5/16) to felines. Diarrheal and non-diarrheal diseases are used for the study and a higher prevalence of bacillus can be identified in diarrheal diseases (33%). None of the samples present pathogen toxins. The results of this study show that C. difficile is present in the state of Piauí. It can be identified in all species and in diarrheal or non-diarrheic samples, demonstrating that this infection can be symptomatic and asymptomatic, giving the possibility of cross-infection between the animal and its owner.

Photosynthetic index and nitrogen assimilation in rapeseed seedlings transplanted in soil with ammonium glufosinate / Índice fotossintético e assimilação de nitrogênio em plântulas de colza transplantadas em resposta a resíduos de glufosinato presentes no solo

Herbicide application is an effective weed control method for mitigating crop yield loss; however, herbicide overuse can cause toxicity in non-target plants. The present study evaluated the effects of glufosinate at recommended dose for agricultural application (0.45 kg ha-1) and at overuse dose (0.90 kg ha-1) glufosinate application on photosynthetic performance and nitrogen assimilation of the rapeseed varieties D148 and Zhongshuang 11 (ZS11). Both glufosinate concentrations significantly decreased the content of chlorophyll and nitrogenous compounds, except free proline, and the activity of glutamine synthetase and glutamate synthase, and increased the activity of glutamic acid dehydrogenase in both varieties. When the concentration of glyphosate was 0.45kg ha-1, the nitrogen assimilation of the two varieties decreased, which indicated that the recommended dosage inhibited the nitrogen assimilation of the two varieties; however, the increase of net photosynthetic rate of D148 and the decrease of that of ZS11 mean that D148 is more tolerant to the recommended dose of glyphosate than ZS11. The 0.90 kg ha-1 dosage was toxic to both rapeseed varieties. Overall, our results indicated that herbicide overuse inhibited the photosynthetic rate and nitrogen assimilation in rapeseed seedlings, and it is essential to apply a suitable glufosinate dose based on the variety grown to minimize adverse effects on crops and environment.(AU)

A aplicação de herbicidas é um método eficaz de controle de ervas daninhas para mitigar a perda de produtividade das culturas. No entanto, o uso excessivo de herbicidas pode causar toxicidade em plantas não alvo. O presente estudo avaliou os efeitos da dose recomendada para aplicação agrícola (0.45 kg ha-1) e dose excessiva (0.90 kg ha-1) de glufosinato no desempenho fotossintético e assimilação de nitrogênio das variedades de colza D148 e Zhongshuang 11 (ZS11). Ambas as concentrações de glutamato diminuíram significativamente o teor de clorofila e compostos azotados, exceto a prolina livre, e a atividade de síntese da glutamina e de síntese de glutamato, e aumentaram a atividade de desidrogenase do ácido glutâmico em ambas as variedades. Quando a concentração de glifosato foi 0.45 kg ha-1, a assimilação de azoto das duas variedades diminuiu, o que indicou que a dosagem recomendada de glifosato inibiu a assimilação de azoto das duas variedades de colza. Entretanto, a taxa fotosintética líquida do D148 aumentou enquanto o do ZS11 diminuiu, o que significa que o D148 é mais tolerante a dose recomendada de glifosato do que o ZS11. A dose de 0.90 kg ha-1 de glifosato foi prejudicial para as mudas de duas variedades de colza. Em geral, os nossos resultados indicam que o uso excessivo de glufosinato inibe a taxa fotossintética e a assimilação de nitrogênio em mudas de colza, sendo essencial aplicar uma dose adequada deste herbicida com base na variedade cultivada para minimizar os efeitos adversos nas culturas e no meio ambiente.(AU)

Aplicação de silício no solo: efeito na expressão enzimática de sementes oriundas de plantas de arroz sob estresse salino / Application of silicon to the soil: effect on enzymatic expression in rice seed produced under salt stress

A utilização de silício pode acarretar em aumento da capacidade biológica da planta em resistir às condições adversas do meio ambiente. Diante disso, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a expressão isoenzimática de sementes oriundas de plantas cultivadas com aplicação de cinza da casca de arroz, via solo, sob estresse salino. O delineamento utilizado foi em blocos casualizados, em esquema fatorial A x B (Fator A- Cinco doses de cinza da casca de arroz aplicada via solo: 0; 500; 1000; 1500 e 2000 kg ha-¹; Fator B- Três concentrações salinas: 0, 4 e 8 mM), com quatro repetições. Foram realizados os testes de primeira contagem de germinação e germinação, e expressão dos sistemas isoenzimáticos glutamato oxaloacetato transaminase, álcool desidrogenase, glutamato desidrogenase e sorbitol. Variações nos quatro sistemas eletroforéticos analisados podem estar associados ao estresse salino causado durante o crescimento e desenvolvimento de plantas de arroz. O sistema isoenzimático glutamato oxaloacetato transaminase é uma ferramenta complementar à avaliação do potencial fisiológico de sementes de arroz.

The silicon utilization may result in the increased biological ability of the plants to withstand the harsh conditions of the environment. In this sense, the study aimed to evaluate the effect of the application of rice husk ash to the soil in rice plants under salt stress on isoenzymes expression. The experimental design was a randomized block in factorial A x B (Factor A- Five doses of rice husk ash applied to soil: 0.0, 500, 1000, 1500, and 2000 kg ha-¹, Factor B- Three salt concentrations: 0, 4, and 8 mM), with four replications. Tests were the first count of germination and germination, and expression of isozyme systems glutamate oxaloacetate transaminase, alcohol dehydrogenase, glutamate dehydrogenase, and sorbitol. Variations in the all analyzed electrophoretic systems may be associated with salt stress caused during the growth and development of rice plants. The isoenzyme system glutamate oxaloacetate transaminase is a complementary tool to assess the physiological rice seed quality.

Aplicação de silício no solo: efeito na expressão enzimática de sementes oriundas de plantas de arroz sob estresse salino / Application of silicon to the soil: effect on enzymatic expression in rice seed produced under salt stress

A utilização de silício pode acarretar em aumento da capacidade biológica da planta em resistir às condições adversas do meio ambiente. Diante disso, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a expressão isoenzimática de sementes oriundas de plantas cultivadas com aplicação de cinza da casca de arroz, via solo, sob estresse salino. O delineamento utilizado foi em blocos casualizados, em esquema fatorial A x B (Fator A- Cinco doses de cinza da casca de arroz aplicada via solo: 0; 500; 1000; 1500 e 2000 kg ha-¹; Fator B- Três concentrações salinas: 0, 4 e 8 mM), com quatro repetições. Foram realizados os testes de primeira contagem de germinação e germinação, e expressão dos sistemas isoenzimáticos glutamato oxaloacetato transaminase, álcool desidrogenase, glutamato desidrogenase e sorbitol. Variações nos quatro sistemas eletroforéticos analisados podem estar associados ao estresse salino causado durante o crescimento e desenvolvimento de plantas de arroz. O sistema isoenzimático glutamato oxaloacetato transaminase é uma ferramenta complementar à avaliação do potencial fisiológico de sementes de arroz.(AU)

The silicon utilization may result in the increased biological ability of the plants to withstand the harsh conditions of the environment. In this sense, the study aimed to evaluate the effect of the application of rice husk ash to the soil in rice plants under salt stress on isoenzymes expression. The experimental design was a randomized block in factorial A x B (Factor A- Five doses of rice husk ash applied to soil: 0.0, 500, 1000, 1500, and 2000 kg ha-¹, Factor B- Three salt concentrations: 0, 4, and 8 mM), with four replications. Tests were the first count of germination and germination, and expression of isozyme systems glutamate oxaloacetate transaminase, alcohol dehydrogenase, glutamate dehydrogenase, and sorbitol. Variations in the all analyzed electrophoretic systems may be associated with salt stress caused during the growth and development of rice plants. The isoenzyme system glutamate oxaloacetate transaminase is a complementary tool to assess the physiological rice seed quality.(AU)

Aminotransferase and glutamate dehydrogenase activities in lactobacilli and streptococci

Aminotransferases and glutamate dehydrogenase are two main types of enzymes involved in the initial steps of amino acid catabolism, which plays a key role in the cheese flavor development. In the present work, glutamate dehydrogenase and aminotransferase activities were screened in twenty one strains of lactic acid bacteria of dairy interest, either cheese-isolated or commercial starters, including fifteen mesophilic lactobacilli, four thermophilic lactobacilli, and two streptococci. The strains of Streptococcus thermophilus showed the highest glutamate dehydrogenase activity, which was significantly elevated compared with the lactobacilli. Aspartate aminotransferase prevailed in most strains tested, while the levels and specificity of other aminotransferases were highly strain- and species-dependent. The knowledge of enzymatic profiles of these starter and cheese-isolated cultures is helpful in proposing appropriate combinations of strains for improved or increased cheese flavor.(AU)

Efeitos da Ametrina na bioenergética de mitocôndrias isoladas de fígado de rato

O aumento na demanda de alimentos pela população associado com a exigência de maior produtividade por área faz com que, cada vez mais, os produtores optem pela utilização de praguicidas na lavoura. Sabe-se que o uso destes compostos é crescente em todo o mundo e, paralelo a isso, os riscos de contaminação de organismos não alvos (animais e humanos) tende a aumentar proporcionalmente. A Ametrina é um herbicida da classe das triazinas amplamente empregado em culturas como abacaxi, banana, café, cana-de-açúcar, citros e milho, extremamente móvel no ambiente e altamente persistente na água e solo. Há relatos da presença de resíduos e metabólitos da Ametrina encontrados em águas subterrâneas mesmo depois de longos períodos após sua aplicação. Dados na literatura indicam que o fígado é um órgão alvo da toxicidade da Ametrina, pois ela é capaz de desregular a morfologia e a fisiologia hepática. O fígado desempenha uma função central no metabolismo, pois recebe grandes quantidades de nutrientes e substâncias exógenas (xenobióticos) que são absorvidos por meio do trato digestório e conduzidos pela veia porta para a posterior metabolização e eliminação do organismo. Responsáveis pela síntese da quase totalidade do ATP necessário à manutenção da estrutura e função celular, as mitocôndrias representam um alvo crítico para a ação de drogas e toxinas. O objetivo do presente estudo foi caracterizar os efeitos da Ametrina em mitocôndrias isoladas de fígado de rato. A fração mitocondrial foi isolada por centrifugação diferencial e as concentrações do herbicida utilizadas foram de 25, 50, 100 e 150 µM. Os efeitos da Ametrina nas mitocôndrias foram avaliados pela determinação do consumo de oxigênio mitocondrial, atividades das enzimas relacionadas à cadeia respiratória mitocondrial (NADH desidrogenase e Succinato desidrogenase), potencial de membrana mitocondrial () e níveis de ATP mitocondriais. Quando energizadas com malato + glutamato (substratos do complexo I da cadeia de transporte de elétrons) a Ametrina promoveu uma redução significante no consumo de oxigênio nas concentrações a partir de 50 µM e quando energizadas com succinato (substrato do complexo II da cadeia de transporte de elétrons) não foram observadas alterações. Observou-se a dissipação do potencial de membrana a partir 50 µM em mitocôndrias energizadas com malato + glutamato e somente em 150 µM quando energizadas com succinato. Os níveis mitocondriais de ATP foram reduzidos de maneira dose-dependente a partir de 50 µM da Ametrina. O herbicida afetou a atividade da enzima NADH desidrogenase nas concentrações superiores a 50 µM e da Succinato desidrogenase somente na maior concentração testada (150 µM). Assim, os resultados desse estudo indicam que a toxicidade da Ametrina em hepatócitos pode estar relacionada às alterações na bioenergética mitocondrial.

The increase in the demand for food by the population associated with the demand for greater productivity by area means that, increasingly, producers opt for the use of pesticides in the fields. It is known that the use of these compounds is increasing worldwide and, in parallel, the risks of contamination from non-target organisms (animals and humans) tend to increase proportionately. Ametrine is a triazine herbicide widely used in cultures as pineapple, banana, coffee, sugar cane, citrus and corn, extremely mobile in the environment and highly persistent in water and soil. Ametrine residues and metabolites have been reported to be found in groundwater even after long periods after application. Data in the literature indicate that the liver is a target organ for Ametrine toxicity, as it is capable of deregulating liver morphology and physiology. The liver plays a central role in metabolism, as it receives large amounts of nutrients and exogenous substances (xenobiotics) that are absorbed through the digestive tract and conducted through the portal vein for further metabolism and elimination from the body. Responsible for the synthesis of almost all of the ATP necessary to maintain cellular structure and function, mitochondria represent a critical target for the action of drugs and toxins. The aim of the present study was to characterize the effects of Ametrine in isolated rat liver mitochondria. The mitochondrial fraction was isolated by differential centrifugation and the concentrations of the herbicide used were 25, 50, 100 and 150 µM. The effects of Ametrine on mitochondria were assessed by determining mitochondrial oxygen consumption, enzyme activities related to the mitochondrial respiratory chain (NADH dehydrogenase and Succinate dehydrogenase), mitochondrial membrane potential () and mitochondrial ATP levels. When energized with malate + glutamate (substrates of complex I of the electron transport chain) Ametrine promoted significant reduction of oxygen consumption in concentrations from 50 µM and when energized with succinate (substrate of complex II of the electron transport chain) no changes were observed. The dissipation of the membrane potential from 50 µM was observed in mitochondria energized with malate + glutamate and only in 150 µM when energized with succinate. The mitochondrial level of ATP was reduced in a dose-dependent manner from 50 µM of Ametrine. The herbicide affected the activity of the enzyme NADH dehydrogenase at concentrations greater than 50 µM and Succinate dehydrogenase only at the highest concentration tested (150 µM). Thus, the results of this study indicate that the toxicity of Ametrine in hepatocytes may be related to changes in mitochondrial bioenergetics.

Caracterização in silico dos genes envolvidos no metabolismo do nitrogênio em milho (Zea mays) / In silico characterization of genes involved in nitrogen metabolism in maize (Zea mays) / Caracterización in silico de genes implicados en el metabolismo de nitrógeno en maíz (Zea mays)

O N é o nutriente mineral requerido pelas plantas em maior quantidade e frequentemente limita o crescimento e produtividade. A partir de uma análise in silico foram identificados 26 genes envolvidos na assimilação do nitrogênio: quatro genes que codificam a enzima nitrato redutase (ZmNR), oito nitrato redutase de transporte (ZmNRT), uma nitrito redutase (ZmNRi), uma nitrito de transporte (ZmNRiT), seis glutamina sintetase (ZmGS), quatro glutamato sintase (ZmGOGAT) e duas glutamato desidrogenase (ZmGDH). A árvore filogenética foi construída onde foi possível observar a formação de cinco grupos distintos de acordo com as funções. A análise da estrutura dos genes mostrou que o número de íntrons variou de 0 a 32. A análise dos domínios conservados mostrou que a maioria dos genes identificados possuem o domínios específicos a função que desempenham na rota de assimilação do N em milho. Além disso, esses genes apresentaram padrões de expressão diferenciais em tecidos e órgãos. Os dados gerados neste trabalho forneceram subsídios para selecionar genes-candidatos para futuras análises funcionais a serem utilizados nos programas de melhoramento de milho.(AU)

Nitrogen is a mineral highly requested by plants and often limits both growth and productivity. From an in-silico analysis, a total of 26 genes were identified as being involved in nitrogen assimilation: four genes encoding nitrate reductase enzyme (ZmNR), eight encoding nitrate reductase transporters (ZmNRT), one encoding nitrite reductase (ZmNRi), one encoding nitrite transporter (ZmNRiT), six encoding glutamine synthesis (ZmGOGAT) and two encoding glutamate dehydrogenase (ZmGDH). A phylogenetic tree was generated where the formation of five distinct clusters could be observed according to gene function. Structural genes analysis showed that introns varied from 0 to 32. The analysis of conserved domains showed that most of the identified genes play a domain-specific function in the N assimilation pathway in maize. Moreover, these genes present a differential expression pattern in tissues and organs. Data from this study will provide subsidies to select candidate genes for further functional analyses in maize breeding programs.(AU)

N es el nutriente mineral requerido por las plantas en mayor cantidad y a menudo limita el crecimiento y la productividad. Desde un análisis in silico se ha identificado 26 genes implicados en la asimilación de nitrógeno: cuatro genes que codifican la enzima nitrato reductasa (ZmNR), ocho nitrato reductasa de transporte (ZmNRT), un nitrito reductasa (ZmNRi), un nitrito de transporte (ZmNRiT), seis glutamina sintetasa (ZmGS), cuatro sintasa de glutamato (ZmGOGAT) y dos glutamato deshidrogenasa (ZmGDH). El árbol filogenético se ha construido donde ha sido posible observar la formación de cinco grupos distintos de acuerdo con sus funciones. El análisis de la estructura de los genes ha mostrado que el número de intrones ha variado de 0 a 32. El análisis de los dominios conservados mostró que la mayoría de los genes identificados poseen dominios específicos a la función que desempeñan en la ruta de asimilación de N en maíz. Además, esos genes mostraron patrones de expresión diferenciales en tejidos y órganos. Los datos generados en este estudio proporcionan subvenciones para la selección de genes candidatos para posterior análisis funcional, para ser utilizados en programas de mejoramiento de maíz.(AU)

Caracterização in silico dos genes envolvidos no metabolismo do nitrogênio em milho (Zea mays) / In silico characterization of genes involved in nitrogen metabolism in maize (Zea mays) / Caracterización in silico de genes implicados en el metabolismo de nitrógeno en maíz (Zea mays)

O N é o nutriente mineral requerido pelas plantas em maior quantidade e frequentemente limita o crescimento e produtividade. A partir de uma análise in silico foram identificados 26 genes envolvidos na assimilação do nitrogênio: quatro genes que codificam a enzima nitrato redutase (ZmNR), oito nitrato redutase de transporte (ZmNRT), uma nitrito redutase (ZmNRi), uma nitrito de transporte (ZmNRiT), seis glutamina sintetase (ZmGS), quatro glutamato sintase (ZmGOGAT) e duas glutamato desidrogenase (ZmGDH). A árvore filogenética foi construída onde foi possível observar a formação de cinco grupos distintos de acordo com as funções. A análise da estrutura dos genes mostrou que o número de íntrons variou de 0 a 32. A análise dos domínios conservados mostrou que a maioria dos genes identificados possuem o domínios específicos a função que desempenham na rota de assimilação do N em milho. Além disso, esses genes apresentaram padrões de expressão diferenciais em tecidos e órgãos. Os dados gerados neste trabalho forneceram subsídios para selecionar genes-candidatos para futuras análises funcionais a serem utilizados nos programas de melhoramento de milho.

Nitrogen is a mineral highly requested by plants and often limits both growth and productivity. From an in-silico analysis, a total of 26 genes were identified as being involved in nitrogen assimilation: four genes encoding nitrate reductase enzyme (ZmNR), eight encoding nitrate reductase transporters (ZmNRT), one encoding nitrite reductase (ZmNRi), one encoding nitrite transporter (ZmNRiT), six encoding glutamine synthesis (ZmGOGAT) and two encoding glutamate dehydrogenase (ZmGDH). A phylogenetic tree was generated where the formation of five distinct clusters could be observed according to gene function. Structural genes analysis showed that introns varied from 0 to 32. The analysis of conserved domains showed that most of the identified genes play a domain-specific function in the N assimilation pathway in maize. Moreover, these genes present a differential expression pattern in tissues and organs. Data from this study will provide subsidies to select candidate genes for further functional analyses in maize breeding programs.

N es el nutriente mineral requerido por las plantas en mayor cantidad y a menudo limita el crecimiento y la productividad. Desde un análisis in silico se ha identificado 26 genes implicados en la asimilación de nitrógeno: cuatro genes que codifican la enzima nitrato reductasa (ZmNR), ocho nitrato reductasa de transporte (ZmNRT), un nitrito reductasa (ZmNRi), un nitrito de transporte (ZmNRiT), seis glutamina sintetasa (ZmGS), cuatro sintasa de glutamato (ZmGOGAT) y dos glutamato deshidrogenasa (ZmGDH). El árbol filogenético se ha construido donde ha sido posible observar la formación de cinco grupos distintos de acuerdo con sus funciones. El análisis de la estructura de los genes ha mostrado que el número de intrones ha variado de 0 a 32. El análisis de los dominios conservados mostró que la mayoría de los genes identificados poseen dominios específicos a la función que desempeñan en la ruta de asimilación de N en maíz. Además, esos genes mostraron patrones de expresión diferenciales en tejidos y órganos. Los datos generados en este estudio proporcionan subvenciones para la selección de genes candidatos para posterior análisis funcional, para ser utilizados en programas de mejoramiento de maíz.

Diversidade molecular de Giardia duodenalis em animais domésticos na região de Botucatu, sp

Giardia é um importante protozoário relacionado a quadros de diarreia em animais e seres humanos, transmitido por via fecal-oral. Apesar de representar um importante problema de saúde pública mundial, pouco se conhece sobre o papel efetivo dos animais na epidemiologia da giardíase, mesmo com o desenvolvimento de técnicas moleculares que permitiram consideráveis progressos na identificação e classificação deste protozoário. O objetivo do presente estudo foi determinar a prevalência de Giardia sp. em cães, gatos e pequenos ruminantes, além de detectar a diversidade molecular de Giardia duodenalis pela avaliação dos loci gdh (glutamato desidrogenase), bg (-giardina) e tpi (triose fosfato isomerase) em cães e gatos da região de Botucatu, SP, determinando os assemblages e o papel dos animais de companhia como potenciais reservatórios do parasita para a infecção em seres humanos. Amostras de fezes foram avaliadas pela técnica coproparasitológica de centrifugo-flutuação de sulfato de zinco, com prevalências de 8,7%, 10,4% e 6,6% para cães, gatos e pequenos ruminantes, respectivamente. Houve uma maior prevalência dos assemblages C, D, A, respectivamente para os cães e para os gatos foram detectados os assemblages A, B, C, E e F, sendo o assemblage A de maior prevalência, seguida por F. Não houve correlação entre os assemblages zoonóticos e o ambiente domiciliado. A detecção dos assemblages A e B é um passo importante para sugerir um potencial zoonótico e indicar a participação dos cães, gatos e dos seres humanos no ciclo de transmissão da G. duodenalis, aumentando a possibilidade de um problema de saúde pública envolvendo a giardíase.

Giardia is an important intestinal protozoon related to diarrhea in animals and humans, transmitted by fecal oral route. Despite giardiasis representing an important word public health problem, little is known about the effective role of animals in epidemiology, even with the development of molecular techniques that allowed considerable progress in the identification and classification of this protozoan. The aim of the present study was set the prevalence of Giardia sp. in dogs, cats and small ruminants, in addition to detect the molecular diversity of Giardia duodenalis assessing gdh (glutamate dehydrogenase), bg (-giardin) and tpi (phosphate isomerase) loci in dogs and cats from Botucatu, SP. The assessment of what assemblages are involved is important for evaluate the role of companion and production animals as potential reservoirs of human infection. Fecal samples were evaluated by centrifugal-flotation method, with prevalence of 8.7%, 10.4% and 6.6% for dogs, cats and small ruminants, respectively. From the molecular analyzes there was a higher prevalence of assemblages C, D, A, respectively for dogs, and for cats assemblages A, B, C, E and F were detected, with assemblage A the most prevalent, followed by F. There was no correlate between zoonotic assemblages and domiciled animals. The detection of assemblages A and B is an important step to suggest a zoonotic potential and to indicate the participation of dogs, cats and humans in the transmission of G. duodenalis, increasing the possibility of a public health problem involving giardiasis.

FREQUÊNCIA E VARIABILIDADE GENÉTICA DE Giardia duodenalis EM CÃES DO MUNICÍPIO DE CUIABÁ - MATO GROSSO, BRASIL

Giardia duodenalis é um protozoário unicelular, eucarioto e flagelado. Duas formas evolutivas são observadas no ciclo de vida: trofozoíto e cisto, sendo o cisto a forma infectante. Este protozoário é responsável por causar quadros de diarreia em humanos, cães, gatos, roedores e animais ungulados. Apesar de serem morfologicamente iguais, os isolados de G. duodenalis escondem grande diversidade genética e dificultam a estabilidade e unanimidade da classificação taxonômica. Até o momento foram identificados oito assemblages denominados de A-H. Atualmente, a genotipagem multilocus é utilizada para a identificação molecular das espécies e/ou genótipos de Giardia. Com o objetivo de identificar a frequência de G. duodenalis nas fezes de cães domiciliados no município de Cuiabá, Mato Grosso, e caracterizar a variabilidade genética das amostras positivas, foram coletadas amostras de fezes de 147 cães. Para realização de triagem, todas as amostras foram submetidas ao exame de centrífugo-flutuação para visualização em microscopia. De todas as amostras coletadas, 26 cães estavam infectados por parasitos intestinais, sendo 38% (10) acometidos por G. duodenalis. A frequência de G. duodenalis em cães foi de 6,8%. Outros parasitos foram observados, como Cystoisospora sp. (15%) e Entamoeba sp. (2%), além dos nematoides Ancylostoma sp. (27%), Trichuris sp. (2%) e Toxocara sp. (1%). As amostras positivas para G. duodenalis foram submetidas à extração de DNA para realização da Reação em Cadeia pela Polimerase dos genes triosefosfato isomerase (tpi) e glutamato desidrogenase (gdh) para amplificação do fragmento de 530 e 659 pb, respectivamente, para caracterização genotípica. A análise dos fatores de risco para os cães infectados por G. duodenalis., não foi significativa quanto à sexo, raça, idade, presença de diarreia e dieta. Somente cães com contactantes foram significativamente positivos para giardíase. Após análise molecular dos isolados de G. duodenalis, apenas três amostras amplificaram fragmento do gene tpi apresentando 100% de identidade com Assemblage C. Para análise genética das sequências, foi construído a árvore filogenética a partir das sequências concatenadas dos genes gdh e tpi para determinar o assemblage com maior precisão. A amostra identificada neste estudo ficou agrupada no mesmo clado do assemblage C corroborando com a sequência obtida pelo tpi. A genotipagem multilocus é o método mais confiável para determinar os assemblages de G. duodenalis, uma vez que discrepâncias entre os locus de um mesmo isolado podem ocorrer devido a infecções mistas e/ou heterozigose

Giardia duodenalis is a unicellular, eukaryotic and flagellated protozoan. Two evolutionary forms are observed in the life cycle: trophozoite and cyst, the cyst being the infectious form. This protozoan is responsible for causing diarrhea in humans, dogs, cats, rodents and ungulate animals. Despite being morphologically equal, the isolates of G. duodenalis hide great genetic diversity and hinder the stability and unanimity of the taxonomic classification. So far, eight assemblages called A-H have been identified. Currently, multilocus genotyping is used for the molecular identification of Giardia species and / or genotypes. In order to identify the frequency of G. duodenalis in the feces of dogs domiciled in the city of Cuiabá, Mato Grosso, and to characterize the genetic variability of positive samples, fecal samples were collected from 147 dogs. To perform screening, all samples were subjected to centrifugalfluctuation examination for viewing under a microscopy. Of all samples collected, 26 dogs were infected with intestinal parasites, 38% (10) of whom were affected by G. duodenalis. The frequency of G. duodenalis in dogs was 6.8%. Other parasites have been observed, such as Cystoisospora sp. (15%) and Entamoeba sp. (2%), in addition to the Ancylostoma sp. (27%), Trichuris sp. (2%) and Toxocara sp. (1%). The positive samples for G. duodenalis were submitted to DNA extraction to perform the Chain Reaction by the Polymerase of the genes triosephosphate isomerase (tpi) and glutamate dehydrogenase (gdh) for amplification of the fragment of 530 and 659 bp, respectively, for genotypic characterization. The analysis of risk factors for dogs infected with G. duodenalis, was not significant regarding sex, breed, age, presence of diarrhea and diet. Only dogs with contacts were significantly positive for giardiasis. After molecular analysis of G. duodenalis isolates, only three samples amplified a fragment of the tpi gene showing 100% identity with Assemblage C. For genetic analysis of the sequences, the phylogenetic tree was built from the concatenated sequences of the gdh and tpi genes to determine the assemblage with greater precision.The sample identified in this study was grouped in the same clade as assemblage C, corroborating the sequence obtained by the tpi. Multilocus genotyping is the most reliable method for determining the assemblages of G. duodenalis, since discrepancies between the loci of the same isolate can occur due to mixed infections and / or heterozygosis.

Reducing lactate secretion by ldhA Deletion in L-glutamate- producing strain Corynebacterium glutamicum GDK-9

L-lactate is one of main byproducts excreted in to the fermentation medium. To improve L-glutamate production and reduce L-lactate accumulation, L-lactate dehydrogenase-encoding gene ldhA was knocked out from L-glutamate producing strain Corynebacterium glutamicum GDK-9, designated GDK-9ΔldhA. GDK-9ΔldhA produced approximately 10.1% more L-glutamate than the GDK-9, and yielded lower levels of such by-products as α-ketoglutarate, L-lactate and L-alanine. Since dissolved oxygen (DO) is one of main factors affecting L-lactate formation during L-glutamate fermentation, we investigated the effect of ldhA deletion from GDK-9 under different DO conditions. Under both oxygen-deficient and high oxygen conditions, L-glutamate production by GDK-9ΔldhA was not higher than that of the GDK-9. However, under micro-aerobic conditions, GDK-9ΔldhA exhibited 11.61% higher L-glutamate and 58.50% lower L-alanine production than GDK-9. Taken together, it is demonstrated that deletion of ldhA can enhance L-glutamate production and lower the unwanted by-products concentration, especially under micro-aerobic conditions.

SÍNDROME DO CORPO ESTRANHO METÁLICO EM BOVINOS: ESTUDO CLÍNICO, LABORATORIAL, ULTRASONOGRÁFICO E ANATOMOPATOLÓGICO.

A síndrome do corpo estranho metálico é uma das principais enfermidades digestivas que acometem os bovinos. A associação do exame clínico aos exames complementares, laboratoriais e ultrassonográfico podem auxiliar no estabelecimento do diagnóstico precoce e prognóstico da enfermidade aprimorando a adoção de medidas preventivas. Este trabalho objetivou avaliar as implicações clínicas, laboratoriais, ultrassonográficas e anatomopatológicas de 37 bovinos portadores da síndrome do corpo estranho provenientes do Agreste Meridional de Pernambuco. Os animais foram submetidos ao exame clínico, laboratoriais e ultrassonográfico, sendo distribuídos em retículo peritonite (GI; n=21) e reticulo pericardite (GII; n=16) traumáticas baseado nos achados anatomopatológicos. Foram colhidas amostras de sangue, com e sem anticoagulante, para realização do hemograma, determinação da proteína plasmática total e fibrinogênio plasmático, obtenção de soro para mensuração de proteína total, albumina, globulinas, gama glutamiltransferase (GGT), aspartato aminotransferase (AST), glutamato desidrogenase (GLDH), creatinina, ureia, cortisol, creatina quinase (CK), creatina quinase - MB (CK-MB), troponina cardíaca-I (cTn-I), e plasma para determinação de glicose e L-lactato. A abdominocentese foi produtiva em oito animais do GI (n=8) e sete do GII (n=7) permitindo avaliar características físicas, citológicas e bioquímicas do líquido peritoneal como concentrações de proteína total, albumina, GLDH, AST, GGT, CK, glicose e L-lactato. Foram obtidas imagens ultrassonográficas de 18 animais do GI (n=18) e 12 animais do GII (n=12). Os resultados referentes às observações clínicas, análise de líquido peritoneal, achados ultrassonográficos e anatomopatológicos foram analisados por meio de estatística descritiva. Os dados hematológicos, de bioquímica sanguínea e do líquido peritoneal foram analisados e comparados entre os grupos empregando à análise de variância (ANOVA one way) e teste F da ANOVA, com nível de 5% de significância (p<0,05%). Ambos os grupos apresentaram alterações de comportamento, apetite, desidratação e variação de temperatura de 38-39°C, no entanto, estas características foram mais expressivas nos animais do GII. Os achados hematológicos evidenciaram leucocitose por neutrofilia com desvio à esquerda regenerativo e hiperfibrinogenemia em ambos os grupos. A análise bioquímica sanguínea de ambos os grupos demonstrou aumento da concentração de globulinas e L-lactato e da atividade sérica de GGT, GLDH, CK e CK-MB, além de elevação significativa da cTnI nos bovinos do GII. O líquido peritoneal encontrava-se alterado com concentrações proteicas elevadas e predomínio de polimorfonucleares, dentre as variáveis bioquímicas o L-lactato mostrou ser um indicador de alteração abdominal. O exame ultrassonográfico permitiu a visualização de irregularidade de contorno, aderência, deslocamento e alteração de motilidade reticular em ambos os grupos, líquido na cavidade abdominal, pericárdica e torácica no GII e apenas abdominal no GI, além de alterações cardíacas e hepáticas principalmente no GII e esplênicas no GI. As lesões anatomopatológicas ratificaram os achados ultrassonográficos observados em ambos os grupos confirmando o diagnóstico da síndrome. A gravidade das implicações sistêmicas verificadas nesta síndrome, justificam a importância da intervenção precoce de forma não invasiva na realização do diagnóstico preciso e precoce, no estabelecimento do prognóstico e na adoção de medidas preventivas voltadas para o rebanho, visando minimizar o impacto econômico acarretado por esta síndrome à criação de bovinos, principalmente os de aptidão leiteira.

Metallic foreign body syndrome is one of the main digestive diseases affecting cattle. The association of clinical examination with complementary, laboratory and ultrasound examinations can help in the establishment of early diagnosis and prognosis of the disease, improving the adoption of preventive measures. This study aimed to evaluate the clinical, laboratory, ultrasonographic and anatomopathological implications of 37 cattle with foreign body syndrome from the Southern Agreste of Pernambuco. The animals were submitted to clinical, laboratory and ultrasonographic examination, being distributed in reticuloperitonitis (GI; n = 21) and reticulopericarditis (GII; n = 16) traumatic, based on anatomopathological findings. Blood samples were taken with or without anticoagulant for blood counts, determination of total plasma protein and plasma fibrinogen, serum obtained for measurement of total protein, albumin, globulins, gamma glutamyltransferase (GGT), aspartate aminotransferase (AST), glutamate dehydrogenase (GLDH), creatinine, urea, cortisol, creatine kinase (CK), creatine kinase-MB (CK-MB), cardiac troponin-I (cTn-I), and plasma for glucose and L-lactate determination. The abdominocentesis was productive in eight GI (n = 8) and seven GII (n = 7) animals, allowing the evaluation of physical, cytological and biochemical characteristics of the peritoneal fluid as concentrations of total protein, albumin, GLDH, AST, GGT, glucose and L-lactate. Ultrasonographic images of 18 GI (n = 18) and 12 GII (n = 12) animals were obtained. Results regarding clinical observations, peritoneal fluid analysis, ultrasonographic and anatomopathological findings were analyzed using descriptive statistics. Hematological, blood biochemical and peritoneal fluid data were analyzed and compared between groups using ANOVA one way and ANOVA F test, with a significance level of 5% (p <0.05%). Both groups showed changes in behavior, appetite, dehydration and temperature variation of 38-39 ° C, however, these characteristics were more expressive in GII animals. The hematological findings showed leukocytosis due to neutrophilia with regenerative left deviation and hyperfibrinogenemia in both groups. Blood biochemical analysis of both groups showed increased globulin and L-lactate concentration and serum GGT, GLDH, CK and CK-MB activity, as well as significant elevation of cTnI in GII cattle. The peritoneal fluid was altered with high protein concentrations and a predominance of polymorphonuclear cells. Among the biochemical variables, L-lactate showed to be an indicator of abdominal alteration. Ultrasound examination allowed visualization of contour irregularity, adhesion, displacement and alteration of motility in reticle in both groups, fluid in the abdominal cavity, pericardial and thoracic cavity in the GII and only abdominal in the GI, besides cardiac and hepatic alterations mainly in the GII and in the GI.The anatomopathological lesions confirmed the ultrasound findings observed in both groups confirming the diagnosis of the syndrome. The severity of the systemic implications of this syndrome justifies the importance of early intervention in a non-invasive way in the accurate and early diagnosis, in the establishment of prognosis and in the adoption of preventive measures aimed at the herd, in order to minimize the economic impact caused by this to the breeding of cattle, especially dairy cattle.

Clonagem do cDNA e sequenciamento parcial do gene que codifica a enzima glutamato desidrogenase hepática de ovino / Cloning of the cDNA and partial sequencing of the gene that codifi es the sheep hepatic enzyme glutamate dehydrogenase

A enzima mitocondrial glutamato desidrogenase (GDH: EC 1.4.1.2) catalisa a desaminação reversível do L-glutamato para 2-oxoglutarato (α-cetoglutarato) usando o NAD+ e NADP+ como coenzimas. É uma das mais importantes enzimas hepáticas encontradas em hepatócitos de bovinos, ovinos e caprinos. Infecções por Fasciola spp., intoxicação grave aguda por toxinas de plantas, tais como Xanthium spp. e Senecio spp. e intoxicação por cobre resultam na liberação dessa enzima no sangue. O aumento da GDH indica danos ou necrose hepática em bovinos e ovinos. Esta é a enzima de escolha para avaliar a função hepática dos ruminantes. No presente trabalho o cDNA que codifica a enzima GDH do hepatócito de ovino foi sintetizado por meio de RT-PCR utilizando mRNA extraído do fígado de ovino. Parte da região de codificação do cDNA da GDH de ovino foi amplificada por PCR usando oligonucleotídeos iniciadores sintetizados a partir do alinhamento de sequências de ORFs de Ovis aries, Bos taurus, Homo sapiens, Rattus norvegicus e Mus musculus disponíveis em banco de dados. O cDNA foi clonado no vetor pGEM® -T Easy (Promega) e inserido em células cálcio-competentes de Escherichia coli DH10B através de choque térmico. O DNA plasmidial foi purificado e após o sequenciamento a presença de um inserto de 1292 pb foi confirmado. O alinhamento da sequência deduzida de aminoácidos com outras espécies revelou alta homologia entre as GDH.

The mitochondrial enzyme Glutamate Dehydrogenase (GDH: EC 1.4.1.2) catalyzes the reversible deamination of the L-glutamate for 2-oxoglutarate (α-ketoglutarate) using NAD+ and NADP+ as coenzymes. It is one of the most important liver enzymes found in hepatocytes of cattle, sheep and goats. Infections by Fasciola spp., severe acute intoxication by toxins of plants such as Xanthium spp. and Senecio spp. as well as intoxication by copper result in the release of this enzyme in blood. The increase of the GDH indicates damage or hepatic necrosis in cattle and sheep. This is an enzyme of choice to evaluate the function of the ruminants. In the present study the cDNA, that codifies the GDH enzyme of the hepatocyte of sheep, was synthesized by means of RT-PCR making use of mRNA extracted from the liver of sheep. Part of the region where the cDNA of the GDH of the ovine is codified was amplified by PCR from primers synthesized through the comparison of the aligned sequences of Ovis aries, Bos taurus, Homo sapiens, Rattus norvegicus and Mus musculus available in the database. The cDNA was cloned in the vector pGEM®-T Easy (Promega) and inserted in Escherichia coli DH10B calcium competent cells by heat shock procedure. The plasmid DNA was purified and after sequencing, the presence of 1292 pb was confirmed. The alignment of the sequence deduced of amino acid with other species revealed high homology among the GDHs.

Clonagem do cDNA e sequenciamento parcial do gene que codifica a enzima glutamato desidrogenase hepática de ovino / Cloning of the cDNA and partial sequencing of the gene that codifi es the sheep hepatic enzyme glutamate dehydrogenase

A enzima mitocondrial glutamato desidrogenase (GDH: EC 1.4.1.2) catalisa a desaminação reversível do L-glutamato para 2-oxoglutarato (α-cetoglutarato) usando o NAD+ e NADP+ como coenzimas. É uma das mais importantes enzimas hepáticas encontradas em hepatócitos de bovinos, ovinos e caprinos. Infecções por Fasciola spp., intoxicação grave aguda por toxinas de plantas, tais como Xanthium spp. e Senecio spp. e intoxicação por cobre resultam na liberação dessa enzima no sangue. O aumento da GDH indica danos ou necrose hepática em bovinos e ovinos. Esta é a enzima de escolha para avaliar a função hepática dos ruminantes. No presente trabalho o cDNA que codifica a enzima GDH do hepatócito de ovino foi sintetizado por meio de RT-PCR utilizando mRNA extraído do fígado de ovino. Parte da região de codificação do cDNA da GDH de ovino foi amplificada por PCR usando oligonucleotídeos iniciadores sintetizados a partir do alinhamento de sequências de ORFs de Ovis aries, Bos taurus, Homo sapiens, Rattus norvegicus e Mus musculus disponíveis em banco de dados. O cDNA foi clonado no vetor pGEM® -T Easy (Promega) e inserido em células cálcio-competentes de Escherichia coli DH10B através de choque térmico. O DNA plasmidial foi purificado e após o sequenciamento a presença de um inserto de 1292 pb foi confirmado. O alinhamento da sequência deduzida de aminoácidos com outras espécies revelou alta homologia entre as GDH.(AU)

The mitochondrial enzyme Glutamate Dehydrogenase (GDH: EC 1.4.1.2) catalyzes the reversible deamination of the L-glutamate for 2-oxoglutarate (α-ketoglutarate) using NAD+ and NADP+ as coenzymes. It is one of the most important liver enzymes found in hepatocytes of cattle, sheep and goats. Infections by Fasciola spp., severe acute intoxication by toxins of plants such as Xanthium spp. and Senecio spp. as well as intoxication by copper result in the release of this enzyme in blood. The increase of the GDH indicates damage or hepatic necrosis in cattle and sheep. This is an enzyme of choice to evaluate the function of the ruminants. In the present study the cDNA, that codifies the GDH enzyme of the hepatocyte of sheep, was synthesized by means of RT-PCR making use of mRNA extracted from the liver of sheep. Part of the region where the cDNA of the GDH of the ovine is codified was amplified by PCR from primers synthesized through the comparison of the aligned sequences of Ovis aries, Bos taurus, Homo sapiens, Rattus norvegicus and Mus musculus available in the database. The cDNA was cloned in the vector pGEM®-T Easy (Promega) and inserted in Escherichia coli DH10B calcium competent cells by heat shock procedure. The plasmid DNA was purified and after sequencing, the presence of 1292 pb was confirmed. The alignment of the sequence deduced of amino acid with other species revealed high homology among the GDHs.(AU)

Caracterização molecular de Giardia spp. em bezerros bubalinos

Giardia duodenalis é um protozoário flagelado que coloniza o trato intestinal de hospedeiros vertebrados. A caracterização molecular de G. duodenalis revolucionou a compreensão da taxonomia, diversidade genética e epidemiologia da giardíase em seres humanos e animais. Em nosso estudo, realizamos a caracterização molecular de G. duodenalis em bezerros bubalinos do Estado de São Paulo, Brasil. Assim, foram colhidas 183 amostras fecais de animais da raça Murrah, com até seis meses de idade. Estas amostras foram examinadas por meio da reação em cadeia pela polimerase tipo para amplificação da subunidade menor do gene do RNA ribossômico, todas as amostras positivas por esse gene, foram caracterizadas para amplificação parcial dos genes beta-giardina, glutamato desidrogenase e triosefosfato isomerase. G. duodenalis foi verificada em 6,56% das amostras fecais e por meio da análise das sequências, verificou-se 100% de similaridade genética com assemblage E. Esta foi a primeira detecção de G. duodenalis assemblage E em bezerros bubalinos no Brasil.

Giardia duodenalis is a flagellated protozoan that colonizes the int estinal tract of vertebrate hosts. A molecular characterization of G. duodenalis revolutionized an understanding of the taxonomy, genetic diversity and epidemiology of giardiasis in humans and animals. In our stud, we performed the molecularly characterization of Giardia duodenalis in buffalo calves from State of São Paulo, Brazil. Then, 183 fecal samples of Murrah buffaloes were collected up to six months of age. These samples were examined by nested polymerase chain reaction for parcial amplification of the small subunit of the ribosomal RNA gene. All G. duodenalis-positive samples were characterized by beta-giardin, glutamate dehydrogenase and triosephosphate isomerase genes. G. duodenalis was detected in 6,56% of the faecal samples, and sequence analysis showed 100% genetic similarity with assemblage E. This was the first detection of G. duodenalis assemblage E in buffalo calves in Brazil.

EFEITO HEPATOTÓXICO E NEFROTÓXICO NOS EQUINOS SUBMETIDOS A INOCULAÇÃO DE VENENO BOTRÓPICO

O tratamento de acidentes por animais peçonhentos tem sido um desafio médico e veterinário. O único tratamento disponível e preconizado pela Organização Mundial da Saúde e pelo Ministério da Saúde é a soroterapia que vem sendo utilizada a mais de um século. O objetivo do presente estudo foi avaliar a função hepática e renal dos equinos submetidos ao protocolo de imunização empregado atualmente pelo Instituto Vital Brazil para produção do soro antibotrópico. Foram realizados exames ultrassonográfico hepático e renal, exame hematológico, urinálise e bioquímico. Foram avaliados 05 equinos com inoculação de veneno Botrópico. A avaliação da função hepática e renal desses animais é fundamental para ampliar o conhecimento acerca destes protocolos de inoculação de veneno em causar lesões hepática e renal em equinos. . Os dados bioquímicos que apresentaram diferenças significativas, em todos os animais, comparados ao tempo basal, foram aspartato amino transferase (AST), alanina amino transferase (ALT), gama glutamiltransferase (GGT), fosfatase alcalina FA, glutamato desidrogenase (GLDH) e Proteína sérica. Creatinina não apresentou alteração ao longo do experimento. O hemograma apresentou alteração de eritrócito, hemoglobina e leucócitos. Já os exames ultrassonográficos dos rins não apresentaram alterações significativas diferente do fígado. Os resultados obtidos sugerem que ao longo dos três ciclos de imunização podem ocorrer alterações hepáticas (sobre a metodologia proposta). Há uma grande necessidade de novos estudos com objetivo de ampliar o conhecimento acerca dos protocolos de inoculação de veneno nos equinos soroprodutores e minimizar os efeitos adversos da imunização.

The treatment of accidents by venomous animals has been a medical and veterinary challenge. The only treatment available and recommended by the World Health Organization and the Ministry of Health is serum therapy that has been used for more than a century. The present study was to evaluate their hepatic and renal function to the immunization protocol investigated by the Vital Brazil Institute for the production of anti venom serum. Hepatic and renal ultrasound examinations, hematological examination, urinalysis and biochemistry were performed. We evaluated 05 horses with inoculation of Bothropic venom. Assessment of hepatic and renal function is critical for hepatic and renal allergy in horses. . Aspartate amino acid transferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), gamma glutamyltransferase (GGT), alkaline phosphatase FA, glutamate dehydrogenase (GLDH), and serum protein were the biochemical data that accompany aspartate in all animals compared to baseline. . Creatinine was not changed for the duration of the experiment. The hemogram showed alterations of erythrocyte, hemoglobin and leukocytes. Already the sonographic tests of the small kidneys have suffered different from the liver. The results may be further along the three cycles of immunization. There is a great challenge of further studies with the future on poisonous and seropositive inoculation protocols and decrease the adverse effects of immunization.

METABOLISM OF GLYCEROL IN PIGS FED DIETS CONTAINING MIXED CRUDE GLYCERIN AND -ADRENERGIC AGONIST

O glicerol é um importante componente do metabolismo animal que pode ser destinado à síntese de triacilgliceróis, glicose ou ser oxidado para produção de energia. A glicerina bruta apresenta elevada concentração de glicerol (70 a 95%) e alto valor energético (cerca de 4.320 kcal de energia bruta/kg) e, assim, vem sendo estudada como fonte energética na alimentação de animais de produção, como os suínos. A ractopamina, por sua vez, tem sido utilizada como suplemento dietético para suínos, a fim de se obter carcaças com menores teores de gordura e maior quantidade de massa magra, potencializando o processo de produção e tornando a carne desses animais mais competitiva no mercado. Neste sentido, a otimização do uso de glicerina bruta mista (GBM) e cloridrato de ractopamina (RAC) em dietas para suínos em terminação requer uma melhor compreensão do metabolismo do glicerol. Portanto, este estudo foi conduzido para avaliar o desempenho, parâmetros sanguíneos, teores de metabólitos no músculo e a atividade de enzimas no fígado, tecido adiposo e rim de suínos alimentados com dietas contendo GBM e/ou RAC. De acordo com o peso inicial, 64 suínos machos castrados foram distribuídos em esquema fatorial 4 x 2, correspondendo a quatro concentrações de GBM (0, 100, 150 e 200 g/kg ou 0, 10, 15 e 20%) em dietas contendo 0 ou 10 mg/kg de RAC. Cada dieta foi avaliada em oito repetições. O desempenho durante o período experimental de 28 dias foi avaliado. Ao final do experimento, amostras de sangue, músculo Longissimus lumborum, fígado, gordura subcutânea e rim foram coletadas. Não houve interação GBM x RAC para todos os parâmetros avaliados. Além disso, não houve efeito isolado da GBM ou RAC da dieta sobre o ganho de peso e as concentrações sanguíneas de glicose, insulina, triacilgliceróis, colesterol total, proteína total, albumina, creatinina, cortisol e lactato. Entretanto, independente da suplementação de RAC na dieta, o aumento da concentração de GBM na dieta afetou o consumo de ração diário e o consumo diário de GBM, elevando o nível de glicerol no sangue e no músculo e aumentando a atividade da glicerol quinase (GK) no fígado e da enzima málica no tecido adiposo. Por outro lado, independente da concentração dietética de GBM, a inclusão de RAC na dieta melhorou a conversão alimentar, reduziu a concentração de glicerol no músculo, diminuiu a atividade da GK e glicerol-3-fosfato desidrogenase no fígado e da glicose-6-fosfato desidrogenase no tecido adiposo, além de aumentar a atividade da glutamato desidrogenase hepática. Conclui-se que há maior taxa de fosforilação do glicerol no fígado, estímulo da lipogênese no tecido adiposo e provável aumento do aproveitamento do glicerol pelas fibras musculares em resposta ao aumento da concentração de glicerol circulante proveniente da dieta. Por outro lado, quando a dieta contém até 200 g/kg de GBM e 10 mg/kg de RAC há indicativos de menor aproveitamento do glicerol para a síntese de triacilgliceróis no tecido muscular, fígado e no tecido adiposo, além de aumento da oxidação de aminoácidos no fígado acompanhado de melhoria na conversão alimentar dos suínos.

Glycerol is an important component of animal metabolism that can be directed for triacylglycerols or glucose synthesis or be oxidized for energy production. Crude glycerin has a high concentration of glycerol (70 to 95%) and high energy (approximately 4.320 kcal gross energy / kg) and, therefore, has been studied as an energy source in the diet of farm animals, such as pigs. Ractopamine, in turn, has been used as a dietary supplement for pigs, in order to obtain carcasses with lower fat content and higher lean mass, improving the production process and making the meat of these animals more competitive in market. Thereby, the optimization of the use of mixed crude glycerin (MCG) and the ractopamine hydrochloride (RH) in diets for finishing pigs requires a better understanding of glycerol metabolism. Therefore, this study evaluated the performance of blood parameters, metabolite levels in the Longissimus lumborum muscle and the activity of enzymes in the liver, subcutaneous adipose tissue and kidney of pigs fed diets containing MCG and/or RH. According to the initial weight, 64 barrows were distributed in a 4 x 2 factorial design, corresponding to four concentration of MCG (0, 100, 150, and 200 g/kg) in diets containing 0 or 10 mg/kg RH. Each animal was considered an experimental unit, being used eight repetitions per treatment. The performance during the experimental period of 28 days was evaluated. At the end of the experiment, samples of blood, muscle Longissimus lumborum, liver, subcutaneous fat, and kidney were collected. There was no interaction between MCG x RH for all the evaluated parameters. Moreover, there was no isolated effect of dietary MCG or RH on the weight gain and the blood concentrations of glucose, insulin, triacylglycerols, total cholesterol, total protein, albumin, creatinine, cortisol, and lactate. However, regardless the supplementation of RH in the diet, the increase of MCG concentration in the diet affected the daily feed intake and the daily intake of MCG, increasing the level of glycerol kinase (GK) in the liver and the malic enzyme at the adipose tissue. On the other hand, regardless the dietetic concentration of MCG, the inclusion of RH in the diet improved food conversion rate, reduced the glycerol concentration in the muscle, decreased the GK activity and glycerol-3-phosphate dehydrogenase in the liver and glucose-6-phosphate dehydrogenase in adipose tissue, also increasing the activity of hepatic glutamate dehydrogenase. There was a higher rate of phosphorylation of glycerol in the liver, stimulation of lipogenesis in adipose tissue and a likely increase in the utilization of glycerol by muscle fibers in response to an increased concentration of circulating glycerol from the diet. On the other hand, when the diet contained up to 200 g/kg MCG and 10 mg/kg RH, there were indications of lower utilization of glycerol for the synthesis of triacylglycerols in muscle, liver and adipose tissue, besides increased oxidation of amino acids in the liver followed by improved feed conversion of pigs.

Desempenho, intermediários metabólicos e parâmetros hematológicos de juvenis de tambaqui (colossoma macropomum) alimentados com diferentes proporções proteína bruta e fubá de milho e proteína bruta e banana in natura

A maximização da retenção de proteína e o uso do carboidrato como energia em rações para crescimento é o principal objetivo dos nutricionistas de peixes no desenvolvimento de dietas economicamente eficientes e sustentáveis. Assim, o objetivo destes estudos foi verificar a melhor proporção de proteína bruta/fubá de milho e proteína bruta/Banana in natura na alimentação do tambaqui (Colossoma macropomum). Foram testadas quatro dietas com três repetições e diferentes proporções de proteína bruta/fubá de milho (PB/FM) e proteína bruta/banana in natura (PB/BI) de 30/30, 28/36, 26/42 e 24/48% nas rações experimentais durante 60 dias de alimentação. Para cada experimento, foram utilizados 120 juvenis com peso médio inicial de 15,5g ± 2,2g. Os peixes foram alimentados ad libitum, duas vezes ao dia. Foram analisados parâmetros metabólicos: glicemia, aminoácidos totais livres, colesterol, triglicerídeos, albumina no plasma e glicogênio hepático. Os parâmetros hematológicos analisados foram hematócrito, eritrócitos, hemoglobina, volume corpuscular médio, hemoglobina corpuscular média e concentração de hemoglobina corpuscular média. As enzimas metabólicas analisadas foram amilase, lipase e protease alcalina inespecífica. No primeiro experimento, o tratamento com melhor desempenho foi o com 26/42% PB/FM, a proporção de PB/FM influenciou os parâmetros de desempenho, triglicerídeos, colesterol e das enzimas glutamato desidrogenase e aspartato aminotransferase. O perfil metabólico do tambaqui sofreu algumas alterações, mas foi adaptado aos níveis de proteína bruta e fubá de milho das dietas testadas. No segundo experimento o melhor desempenho obtido foi com a proporção 26/42 PB/BI. O perfil metabólico se adapta as variações de proteína e banana in natura na alimentação do tambaqui. Os parâmetros hematológicos de VCM, HCM, CHCM e de albumina plasmática demostram reflexos responsivos às dietas testadas. A atividade das enzimas digestivas de protease alcalina inespecífica e lipase respondem as modificações das rações com variação de proteína e banana in natura. A amilase não modificou sua atividade nas condições experimentais.

The maximizing the protein retention and use of carbohydrates as energy to feed growing is the main objective Fish nutritionists to develop economically efficient and sustainable diets. The objective of these studies was to determine the best ratio of crude protein / corn meal and crude protein/Banana in natura the feeding of tambaqui (Colossoma macropomum). Evaluated the performance, metabolic intermediates and hematological parameters of tambaqui juveniles. Four diets were tested with three replicates and different proportions of crude protein/corn meal and crude protein/ banana in natura (CP/BI) 30/30, 28/36, 26/42 and 24/48% in the experimental diets during 60 days of feeding. For each experiment, 120 juveniles were used with initial average weight of 15.5g. The fish were fed ad libitum twice daily. Metabolic parameters were analyzed: blood glucose, total free amino acids, cholesterol, triglyceride, albumin in plasma and liver glycogen. The hematological parameters analyzed were hematocrit, erythrocytes, hemoglobin, mean corpuscular volume, mean corpuscular hemoglobin and mean corpuscular hemoglobin concentration. The analyzed metabolic enzymes are amylase, lipase and nonspecific alkaline protease. In the first experiment, treatment with best performance was with the 26/42% CP/ CM, the proportion of CP/CM influenced the performance parameters, triglycerides, cholesterol and glutamate dehydrogenase enzyme aminotransferase and aspartate. Hematological parameters were not affected by diets tested. The metabolic profile of tambaqui has undergone some changes, but has been adapted to the levels of crude protein and corn meal of the diets tested. In the second experiment the best performance was obtained with the ratio 26/42 PB/BI. The metabolic profile fits the protein variations and banana in natura tambaqui feed. The hematological parameters of MCV, MCH, VHCM and plasma albumin demonstrate responsive reflexes to the diets tested. The activity of digestive enzymes of alkaline protease and lipase respond nonspecific changes of diets with varying protein and banana in natura. The amylase did not change their activity in experimental conditions.

Haematological and biochemical parameters in Churra-da-Terra-Quente ewes from the northeast of Portugal / Parâmetros hematológicos e bioquímicos de ovelhas da raça Churra da Terra Quente do nordeste de Portugal

Hematological and biochemical parameters, including plasma electrolytes and thyroid hormones, were determined in 73 clinically healthy Churra-da-Terra-Quente ewes, a typical breed from the northeast of Portugal. The hemogram values were: erythrocytes 9.8±1.5×10(12)/L; haemoglobin 118.1±19.1g/L; haematocrit 40.8±5.9 percent; leukocytes 5.7±1.8×10(9)/L; and platelets 544.3±177.2×10(9)/L. The thrombin time was 17.3±1.7 seconds. The values of biochemical parameters were: total protein 76.4±6.1g/L; glucose 2.87±0.60mmol/L; total cholesterol 1.65±0.33mmol/L; aspartate aminotransferase 155.9±49.2U/L; alanine aminotransferase 23.2±9.6U/L; γ-glutamyl transferase 48.0±18.7U/L; total alkaline phosphatase 121.6±76.1U/L; glutamate dehydrogenase 6.4±3.7U/L; urea 7.32±2.22mmol/L; creatinine 123.0±54.1μmol/L; total calcium 2.53±0.25mmol/L; phosphorus 2.10±0.46mmol/L; magnesium 1.01±0.09mmol/L; sodium 152.04±3.65mmol/L; potassium 4.7±0.4mmol/L; ionized calcium 1.32±0.07mmol/L; total thyroxine 111.75±42.29nmol/L; total triiodothyronine 1.01±0.28nmol/L; free T4 11.93±1.78pmol/L; free T3 4.22±1.33pmol/L; and thyroid-stimulating hormone 0.18±0.19μIU/mL. Although differences among the Churra-da-Terra-Quente breed and other breeds may occur, the hematological and biochemical parameters, plasma electrolytes, and thyroid hormones, for this indigenous breed, were generally situated within the reference intervals previously reported for sheep.(AU)

Os valores hematológicos e bioquímicos, incluindo os eletrólitos plasmáticos e os hormônios da tireoide, foram determinados em 73 ovelhas, clinicamente saudáveis, da raça Churra da Terra Quente, raça ovina característica do nordeste de Portugal. Os valores obtidos para o hemograma foram: eritrócitos 9,8±1,5×10(12) /L; hemoglobina 118,1±19,1g/L; hematócrito 40,8±5,9 por cento; leucócitos 5,7±1,8×10(9) /L e plaquetas 544,3±177,2×10(9)/L. O tempo de trombina foi de 17,3±1,7 segundos. Os valores dos parâmetros bioquímicos avaliados foram: proteínas totais 76,4±6,1g/L; glicose 2,87±0,60mmol/L; colesterol total 1,65±0,33mmol/L; aspartato amino transferase 155,9±49,2U/L; alanina amino transferase 23,2±9,6U/L; gama-glutamil transferase 48,0±18,7U/L; fosfatase alcalina total 121,6±76,1U/L; glutamato desidrogenase 6,4±3,7U/L; ureia 7,32±2,22mmol/L; creatinina 123,0±54,1μmol/L; cálcio total 2,53±0,25mmol/L; fósforo 2,10±0,46mmol/L e magnésio 1,01±0,09mmol/L; sódio 152,04±3,65mmol/L; potássio 4,7±0,4mmol/L e cálcio ionizado 1,32±0,07mmol/L; tiroxina total 111,75±42,29nmol/L; tri-iodotironina total 1,01±0,28nmol/L; T4 livre 11,93±1,78pmol/L; T3 livre 4,22±1,33pmol/L e hormônio estimulante da tireoide 0,18±0,19μIU/mL. Apesar de terem sido observadas algumas diferenças entre a raça Churra da Terra Quente e outras raças, os valores hematológicos e bioquímicos, eletrólitos plasmáticos e hormônios da tireóide, desta raça autóctone apresentam-se no geral situados dentro dos intervalos de referência publicados para a espécie ovina.(AU)