Expressão de genes em feridas cutâneas induzidas em coelhos e tratadas com plasma rico em plaquetas e rosuvastatina

A cicatrização de feridas abrange processos complexos de eventos celulares e bioquímicos que interagem para a regeneração do tecido lesionado, envolve células, matriz extracelular, citocinas e fatores de crescimento (FC). Os FC e as citocinas atuam no reparo e cicatrização tecidual, modulando a proliferação, migração e aumento da atividade metabólica das células. O sangue é uma farta fonte para obtenção de produtos terapêuticos celulares ou proteicos. Diante da riqueza de hemocomponentes encontrados no sangue total e importância dos mesmos na utilização clínica em medicina regenerativa, destacamos as plaquetas. As plaquetas têm função primária de hemostasia e secundária de angiogênese, imunidade inata e cicatrização de tecidos danificados, sendo ricas em FC. Fundamentando a plaqueta como um veículo de armazenamento de FC, o Plasma Rico em Plaquetas (PRP), é exibido como um ótimo estimulador na reparação de uma ampla variedade de tecidos. O PRP é um concentrado de plasma rico em plaquetas cinco vezes maior que o valor basal, obtido a partir de sangue autógeno, sendo-lhe atribuídas propriedades anti-inflamatórias e regenerativas, com elevado potencial terapêutico baseado no aumento da concentração dos FC. A fim de promover a melhora da cicatrização de feridas e reparo tecidual, estudos trazem propostas de intervenções terapêuticas que atenuem a resposta inflamatória aguda e diminuam a expressão das citocinas após lesões, oferecendo oportunidades de redução da taxa de mortalidade e melhora da qualidade de vida de pacientes além de contribuir na redução de custos em cuidados com a saúde. Com essa finalidade, utilizamos em nosso estudo uma estatina sintética de segunda geração, a rosuvastatina (RSV), por ser alvo de investigações experimentais quanto a efeitos pleiotrópicos, dentre eles atividades anti-inflamatórias, antioxidantes, de proliferação celular, entre outros. Foram utilizados oito coelhos machos adultos, da raça Nova Zelândia, mantidos em gaiolas individuais, com temperatura controlada ração e água à vontade. Foram confeccionadas quatro feridas que receberam diferentes tratamentos: solução de cloreto de sódio a 0,9%®, PRP autólogo na forma gel, gel de RSV a 1,2% e associação de RSV 1,2% e PRP autólogo na forma gel. O procedimento foi analisado nos momentos 0, 7, 14 e 17 dias utilizando-se a técnica de qPCR Array, método que possibilita a amplificação in vitro do DNA. Os resultados apontaram que a expressão de COL1A1 e COL3A1 foram estatisticamente superiores no grupo PRP em relação aos grupos RSV e PRP+RSV, porém não diferiu do grupo controle. A abundância relativa dos genes AIF1, B2M e VEGFA não apresentou diferença significativa entre os grupos de tratamento. Observou-se que houve aumento crescente da expressão de COL1A1 no decorrer do tempo analisado, porém os dados não foram estatisticamente significantes (p=0,13), já o gene COL3A1 apresentou aumento significativo a partir do M7 (p=0,02), continuando até o final do experimento (M17). Pode-se concluir que o PRP isoladamente trouxe maior benefício ao processo cicatricial em relação a RSV isolada ou associada ao PRP. Embora havendo aumento crescente dos genes COL1A1 e COL3A1, não implicou no fechamento mais rápido da ferida tratada com PRP.

Wound healing encompasses complex processes of cellular and biochemical events that interact for the regeneration of injured tissue, involving cells, extracellular matrix, cytokines and growth factors (GF). The GF and cytokines act in tissue repair and healing, modulating the proliferation, migration and increase of the metabolic activity of the cells. Blood is a rich source for obtaining therapeutic cellular or protein products. In view of the richness of hemocomponents found in the total blood and their importance in the clinical use in regenerative medicine, we highlight the platelets. Platelets have primary function of hemostasis and secondary angiogenesis, innate immunity and healing of damaged tissues, being rich in GF. Based on platelets as a GF storage vehicle, platelet rich Plasma (PRP) is shown as a great stimulator in repairing a wide range of tissues. The PRP is a platelet-rich plasma concentrate five times higher than the basal value obtained from autogenous blood, being attributed anti-inflammatory and regenerative properties with high therapeutic potential based on increased concentration of the GF. In order to promote the improvement of wound healing and tissue repair, studies bring proposals for therapeutic interventions that attenuate the acute inflammatory response and decrease the expression of cytokines after injuries, offering opportunities to reduce the rate of mortality and improvement in the quality of life of patients besides contributing to the reduction of costs in health care. For this purpose, we used in our study a second-generation synthetic statin, rosuvastatin (RSV), for being the target of experimental investigations of inflammatory activities, antioxidants, cell proliferation, among others. Eight New Zealand adult male rabbits were used, kept in individual cages, with controlled temperature ration and water at will. Four wounds were made that received different treatments: 0.9% sodium chloride solution, autologous PRP in gel form, RSV Gel 1.2% and association of RSV 1.2% and autologous PRP in gel form. The procedure was analyzed at moments 0, 7, 14 and 17 days using the qPCR Array technique, a method that enables in vitro amplification of DNA. The results showed that the expression of COL1A1 and COL3A1 were statistically higher in the PRP group compared to the RSV and PRP + RSV groups, but did not differ from the control group. The relative abundance of the genes AIF1, B2M and VEGFA showed no significant difference between the treatment groups. It was observed that there was an increase in the expression of COL1A1 during the time analyzed, but the data were not statistically significant (P = 0.13), already the COL3A1 gene showed a significant increase from the M7 (P =0.02), continuing until the end of experiment (M17). It can be concluded that the PRP alone brought greater benefit to the scar process in relation to RSV alone or associated with PRP. Although there was a growing increase in the COL1A1 and COL3A1 genes, it did not imply the faster closure of the wound treated with PRP.

Coagulação intravascular disseminada após parada cardíaca / Disseminated intravascular coagulation after cardiac arrest

Foi demonstrado em estudos com animais que uma ativação da coagulação sanguínea e alterações que indicam CID podem ser encontradas em leitos capilares após uma parada cardíaca e ressuscitação cardiopulmonar (RCP). Este resumo tem como objetivo relatar o caso e as alterações laboratoriais apresentadas por um cão que após uma parada cardíaca durante procedimento cirúrgico e RCP desenvolveu um quadro de CID.

Coagulação intravascular disseminada após parada cardíaca / Disseminated intravascular coagulation after cardiac arrest

Foi demonstrado em estudos com animais que uma ativação da coagulação sanguínea e alterações que indicam CID podem ser encontradas em leitos capilares após uma parada cardíaca e ressuscitação cardiopulmonar (RCP). Este resumo tem como objetivo relatar o caso e as alterações laboratoriais apresentadas por um cão que após uma parada cardíaca durante procedimento cirúrgico e RCP desenvolveu um quadro de CID.(AU)

Reações transfusionais após a administração de concentrados de plaquetas em cães / Transfusion reactions after administration of platelet concentrates in dogs

A transfusão de plaquetas pode ser terapêutica quando indicada para interrupção de sangramento ativo ou profilática com o objetivo de prevenir hemorragias. Os concentrados de plaquetas apresentam um volume menor quando comparado ao sangue fresco total e ao plasma rico em plaquetas elevando a contagem plaquetária rapidamente minimizando, assim, a transfusão de componentes desnecessários e o risco de reações transfusionais o que no entanto podem ocorrer. Em cães, a literatura é escassa em relação à ocorrência de reações transfusionais frente ao emprego de concentrados de plaquetas. Sendo assim, este estudo tem como objetivo documentar a ocorrência de efeitos adversos em relação à administração de concentrados de plaquetas em cães em caráter clínico. Realizou-se a transfusão de concentrados de plaquetas em vinte e oito cães trombocitopênicos com manifestações clínicas de diáteses hemorrágicas ou antes de procedimentos cirúrgicos. Estes hemo componentes foram preparados por centrifugação diferencial seriada do sangue total padronizando-se o fracionamento sanguíneo para cães. Determinou-se um controle de qualidade destes concentrados monitorando-se o pH, níveis de glicose, temperatura de armazenamento, rendimento plaquetário, contaminação bacteriana e swirling. Adotou-se uma proporção de 1 concentrado de plaquetas para cada 10 Kg. Dentre os vinte e oito cães transfundidos, presenciou-se a ocorrência de reações adversas em dez pacientes (35,7%) caracterizadas por manifestações gastrintestinais (6/28), seguidas das alérgicas (5/28) e inflamatórias (2/28). A hipertermia, principal reação relatada em seres humanos, foi constatada apenas em um paciente. O incremento plaquetário observado em 1 e 24 horas foi considerado satisfatório na maioria dos cães transfundidos sendo, em média, de 38.000 e 31.000 plaquetas/µL respectivamente

Platelet transfusion may be either therapeutic or praphylactic when used to interrupt active bleeding or to avoid it, respectively. Plate1et concentrates have a smaller volume when compared to fresh whole blood and to plate1et-rich plasma. Their use quickly increases plate1et counts and, therefore, minimizes unnecessary transfusion of blood components and subsequent transfusion reactions. Literature is scarce concerning transfusion reactions after the administration of platelet concentrates in dogs. Therefore, the objective of this study was to record c1inical adverse effects after its administration in dogs. Platelet concentrates were administered in twenty-eight thrombocytopenic dogs with c1inical signs of hemorrhage or before surgical procedures. These hemocomponents were prepared by serial differential centrifugation of the whole blood standardizing the whole blood fractionation method to dogs. Quality contraI of platelet concentrates was performed by monitoring pH, glucose, storage temperature, platelet count, bacterial contamination and swirling. The dose administrated was one unit per 10 kg. Transfusion reactions occurred in ten dogs (35.7%), characterized by gastrointestinal manifestations (6/28), followed by allergic (5/28) and inflammatory reactions (2/28). Hyperthermia, the most frequent1y reported reaction in humans, was observed in only one dog. The platelet increment observed 1 and 24 hours post-transfusion was considered satisfactory in the majority of the transfused dogs, being, on the average, 38,000 and 31,000 platelets/ µL, respectively