Acute and chronic immunomodulatory response mechanisms against Toxocara canis larvae infection in mice / Mecanismos da resposta imunomoduladora aguda e crônica contra a infecção por larvas de Toxocara canis em camundongos

The objective of this work was to evaluate the early and late immunological modulation of an experimental infection of T. canis larvae in mice. Mice were infected with 100 infective larvae and euthanized at different period: 24, 48 hours post infection (HPI), 15- and 30 days post infection (DPI). The humoral response was evaluated by indirect ELISA. Quantitative RT-PCR (qPCR) was used to quantify the mRNA transcription of cytokines IL4, IL10, IL12 and Ym1 in the early and late infection periods. Infection with T. canis was able to generate specific total IgG at 15- and 30- DPI. Analyzing the IgG isotype revealed a significant differentiation for IgG1 compared with IgG2a, IgG2b and IgG3, characterizing a Th-2 response. Evaluating the gene transcription at the early phase of infection, higher transcription levels of IL10, IL4 and Ym1 and a downregulation of IL12 were observed. By the late phase, increased transcription levels of IL4, Ym1 and IL12 were observed, and downregulation of IL-10 transcription was observed. The data obtained suggest that during experimental infection with T. canis, the participation of the IL4, IL10, IL12 cytokines and Ym1 can play an important role in T. canis immunomodulation.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a modulação imunológica precoce e tardia da infecção experimental de larvas de T. canis em camundongos. Estes foram infectados com 100 larvas infectantes e eutanasiados em diferentes períodos: 24 e 48 horas pós infecção (HPI), 15 e 30 dias após a infecção (DPI). A resposta humoral foi avaliada por ELISA indireto. RT-PCR quantitativo (qPCR) foi usado para quantificar a transcrição de mRNA das citocinas IL4, IL10, IL12 e Ym1 nos períodos de infecção precoce e tardia. A infecção por T. canis foi capaz de gerar IgG total específico aos 15 e 30 DPI. A análise do isótipo IgG revelou uma diferenciação significativa para IgG1 em comparação com IgG2a, IgG2b e IgG3, caracterizando uma resposta Th-2. Avaliando-se a transcrição gênica na fase inicial da infecção, foram observados níveis mais elevados de transcrição de IL10, IL4 e Ym1 e a regulação negativa de IL12. Na fase tardia, foram observados níveis aumentados de transcrição de IL4, Ym1 e IL12, e foi observada regulação negativa da transcrição de IL-10. Os dados obtidos sugerem, que durante a infecção experimental com T. canis, a participação das citocinas IL4, IL10, IL12 e Ym1 podem desempenhar um papel importante na imunomodulação de T. canis.(AU)

Effects of ß-glucan from S. cerevisiae on the expression of Casp9, Ccna2 and Sod1 genes in MCF-7 cells

ß-Glucans (ßG) are polysaccharides widely distributed in nature with chemopreventive properties. The aim of this study was to investigate the effects of ßG and the combined treatment with doxorubicin (Dox) on cell viability and mRNA levels of genes involved in cell cycle, apoptosis and antioxidant response. ßG was not cytotoxic. The mRNA levels of CCNA2of cells exposed to ß-glucan was upregulated and the exposure to Dox decreased the expression, while the combination led to an upregulation. Modulation of mRNA levels of CASP9suggest that ßG could inhibit promotion and progression steps of carcinogenesis, eliminatingneoplastic cells. The upregulation of CCNA2gene in combined treatment could be occurred due to ability of ßG in restoring the cell cycle distribution pattern after treatment with Dox. The upregulation of SOD1suggests that ßG can enhance the intracellular antioxidant defense, reducing the levels of superoxide dismutase induced by Dox. This response could reduce oxidative damage and attenuate tissue damage during chemotherapeutic treatment. Our data suggest that the drug combination may be less effective in killing tumor cells than the treatment with Dox alone. Thus, future studies should carefully consider this effect on indication of ßG during chemotherapy.Keywords:caspase-9; cyclin A2; superoxide dismutase 1; cell cycle; antioxidant.Received on July 2, 2020.Accepted on February 7, 2022.IntroductionGlucans are polysaccharides widely distributed in nature and oftenstudied due to chemopreventive properties. They are constituent of the cell wall of plants (oats and barley), algae, bacteria and fungi. ß-glucans (ßG)have a common structure comprising a main chain of ß-(1,3) and/or ß-(1,4) D-glucopyranosyl unit and they differ in length and branching structures. ßG of Saccharomyces cerevisiaehave 1→6 side branches while those of bacteria have 1→4 side branches (Chan, Chan, & Sze, 2009). ßGcan prevent DNA damage induced by chemical and physical agents (Ghavami,Goliaei, Taghizadeh, & Nikoofar, 2014). Some authors showed its significant efficacy in preventing mutagenic effects caused by doxorubicin, cyclophosphamide and cisplatin (Tohamy, El-Ghor, El-Nahas, & Noshy, 2003), methyl methanesulfonate (Oliveira et al., 2007)and hydrogen peroxide (Slamenová, 2003). Moreover, some studies have related the antioxidant ability of ßGagainst reactive free radicals formed by endogenous metabolic processes or exogenous chemicals (Tsiapali et al., 2001; Slamenová,2003; Sener, Eksioglu-Demiralp, Cetiner, Ercan, & Yegen, 2006; Guerra Dore et al., 2007; Kofuji et al., 2012; Lei et al., 2015). Yeast-derived ßGhave modulating action of humoral and cellular immune responses (Vetvicka et al., 2007).This activity provides protection to the organism against infections and cancer development (Samuelsen, Schrezenmeir, & Knutsen, 2014; Roudbary, Daneshmand, Hajimorad, Roudbarmohammadip, & Hassan, 2015). Despite postulated modes of action by which ß-glucan works are lacking information about the molecular mechanisms involved in the chemopreventive activity of this polysaccharide. In addition, compounds with chemopreventive properties can contribute to reduce side effects and toxicity during the chemotherapeutic treatment. Therefore, the aim of this study was to investigate the effects of ßG and the combined treatment with doxorubicin (Dox) on the expression of genes related with apoptosis (CASP9), cell cycle control (CCNA2)and antioxidant defense (SOD1)in human breast cancer MCF-7 cells. Doxorubicin (Dox) was chosen because it is one of the most used chemotherapeutic agent for cancer treatment. The limitation on the use of Dox in cancer treatment is the lack of selectivity against cancer cells and, consequently, its toxicity to patients.(AU)

O probiótico Saccharomyces boulardii modula a resposta de IgG2a em camundongos expostos aos antígenos de Leishmania infantum / Probiotic Saccharomyces boulardii modulates IgG2a response in miceexposed to Leishmania infantum antigens

O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do probiótico Saccharomyces boulardii na modulação da resposta imune humoral de animais expostos a antígenos de Leishmania infantum. Para isso, 16 camundongos BALB/c foram imunizados com antígeno particulado de Leishmania infantum e divididos em dois grupos experimentais, um composto por animais suplementados e outro por animais não suplementados com o probiótico. Amostras de sangue dos animais foram colhidas semanalmente durante o período experimental e submetidas ao Ensaio da Imunoabsorbância Ligado à Enzima indireto para avaliação dos títulos de IgG totais e o perfil dos isotipos de IgG produzidos (IgG1 e IgG2a). A suplementação com o probiótico não exacerbou a produção de IgG total em comparação ao grupo controle, não havendo diferenças significativas entre os dois grupos. Porém, as soroconversões de IgG2a foram mais elevadas no grupo suplementado, no qual registrou-se um aumento de 1,46 vezes no final do experimento. Assim, a suplementação com S. boulardii foi capaz de modular a resposta de IgG2a/IgG1 nos animais expostos aos antígenos de Leishmania infantum.(AU)

The aim of the present study was to evaluate the effects of the Saccharomyces boulardii probiotic on the modulation of humoral immune response in animals exposed to Leishmania infantum antigens. For this, 16 BALB/c mice were immunized with Leishmania infantum particulate antigen and divided into two experimental groups, one consisting of supplemented animals and the other not probiotic supplemented animals. Blood samples from the animals were taken weekly during the experimental period and subjected to the Indirect Enzyme-Linked Immunosorbance Assay for evaluation of total IgG titers and the profile of the produced IgG isotypes (IgG1 and IgG2a). Probiotic supplementation did not exacerbate total IgG production compared to the control group, with no significant differences between the two groups. However, IgG2a seroconversions were higher in the supplemented group, which showed a 1.46-fold increase at the end of the experiment. Thus, supplementation with S. boulardii was able to modulate the IgG2a/IgG1 response in animals exposed to Leishmania infantum antigens.(AU)

O probiótico Saccharomyces boulardii modula a resposta de IgG2a em camundongos expostos aos antígenos de Leishmania infantum / Probiotic Saccharomyces boulardii modulates IgG2a response in miceexposed to Leishmania infantum antigens

O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do probiótico Saccharomyces boulardii na modulação da resposta imune humoral de animais expostos a antígenos de Leishmania infantum. Para isso, 16 camundongos BALB/c foram imunizados com antígeno particulado de Leishmania infantum e divididos em dois grupos experimentais, um composto por animais suplementados e outro por animais não suplementados com o probiótico. Amostras de sangue dos animais foram colhidas semanalmente durante o período experimental e submetidas ao Ensaio da Imunoabsorbância Ligado à Enzima indireto para avaliação dos títulos de IgG totais e o perfil dos isotipos de IgG produzidos (IgG1 e IgG2a). A suplementação com o probiótico não exacerbou a produção de IgG total em comparação ao grupo controle, não havendo diferenças significativas entre os dois grupos. Porém, as soroconversões de IgG2a foram mais elevadas no grupo suplementado, no qual registrou-se um aumento de 1,46 vezes no final do experimento. Assim, a suplementação com S. boulardii foi capaz de modular a resposta de IgG2a/IgG1 nos animais expostos aos antígenos de Leishmania infantum.

The aim of the present study was to evaluate the effects of the Saccharomyces boulardii probiotic on the modulation of humoral immune response in animals exposed to Leishmania infantum antigens. For this, 16 BALB/c mice were immunized with Leishmania infantum particulate antigen and divided into two experimental groups, one consisting of supplemented animals and the other not probiotic supplemented animals. Blood samples from the animals were taken weekly during the experimental period and subjected to the Indirect Enzyme-Linked Immunosorbance Assay for evaluation of total IgG titers and the profile of the produced IgG isotypes (IgG1 and IgG2a). Probiotic supplementation did not exacerbate total IgG production compared to the control group, with no significant differences between the two groups. However, IgG2a seroconversions were higher in the supplemented group, which showed a 1.46-fold increase at the end of the experiment. Thus, supplementation with S. boulardii was able to modulate the IgG2a/IgG1 response in animals exposed to Leishmania infantum antigens.

O probiótico Saccharomyces boulardii modula a resposta de IgG2a em camundongos expostos aos antígenos de Leishmania infantum / Probiotic Saccharomyces boulardii modulates IgG2a response in mice exposed to Leishmania infantum antigens

O objetivo do presente estudo foiavaliar os efeitos do probiótico Saccharomyces boulardii na modulação da resposta imune humoral de animais expostos a antígenos de Leishmania infantum. Para isso, 16 camundongos BALB/c foram imunizados com antígeno particulado de Leishmania infantum e divididos em dois grupos experimentais, um composto por animais suplementados e outro por animais não suplementados com o probiótico. Amostras de sangue dos animais foram colhidas semanalmente durante o período experimental e submetidas ao Ensaio da Imunoabsorbância Ligado à Enzima indireto para avaliação dos títulos de IgG totais e o perfil dos isotipos de IgG produzidos (IgG1 e IgG2a). A suplementação com o probiótico não exacerbou a produção de IgG total em comparação ao grupo controle, não havendo diferenças significativas entre os dois grupos. Porém, as soroconversões de IgG2a foram mais elevadas no grupo suplementado, no qual registrou-se um aumento de 1,46 vezes no final do experimento. Assim,a suplementação com S. boulardii foi capaz de modular a resposta de IgG2a/IgG1 nos animais expostos aos antígenos de Leishmania infantum.

The aim of the present study was to evaluate the effects of the Saccharomyces boulardii probiotic on the modulation of humoral immune response in animals exposed to Leishmania infantum antigens. For this, 16 BALB/c mice were immunized with Leishmania infantum particulate antigen and divided into two experimental groups, one consisting of supplemented animals and the other not probiotic supplemented animals. Blood samples from the animals were taken weekly during the experimental period and subjected to the Indirect Enzyme-Linked Immunosorbance Assay for evaluation of total IgG titers and the profile of the produced IgG isotypes (IgG1 and IgG2a). Probiotic supplementation did not exacerbate total IgG production compared to the control group, with no significant differences between the two groups. However, IgG2a seroconversions were higher in the supplemented group, which showed a 1.46-fold increase at the end of the experiment. Thus, supplementation with S. boulardii was able to modulate the IgG2a/IgG1 response in animals exposed to Leishmania infantum antigens.

Efeito da suplementação de Bacillus cereus var. Toyoi na resposta humoral de animais vacinados experimentalmente com antígeno particulado de Leishmania infantum chagasi

A imunização por meio da vacinação tem se mostrado uma alternativa eficiente no 9 controle sanitário. Porém apesar do grande avanço tecnológico, muitas vacinas são 10 pouco imunogênicas ou não oferecem uma resposta imune capaz de prevenir a 11 infecção, como no caso da Leishmaniose visceral canina. Uma alternativa para a 12 melhoria da eficiência destas vacinas seria a modulação do sistema imunológico pelo 13 uso dos probióticos, que são micro-organismos vivos que conferem benefícios a 14 saúde do hospedeiro. Esse trabalho teve como objetivo avaliar o efeito 15 imunomodulador do probiótico Bacillus cereus var. Toyoi em camundongos vacinados 16 experimentalmente contra Leishmania infantum chagasi, durante o período da 17 administração do probiótico e após a suspensão do mesmo. Foram utilizados 24 18 camundongos Balb/c, com 21 dias de idade, vacinados experimentalmente contra 19 Leishmania infantun chagasi, divididos em três grupos experimentais. Um grupo sem 20 suplementação (A) e os outros dois (B e C) suplementados por via oral com Bacillus 21 cereus var. Toyoi, na concentração de 106 UFC/g-1 incorporado na ração, em 22 diferentes períodos. Para a investigação da cinética da produção dos anticorpos foram 23 coletadas amostras de sangue e os soros foram submetidos ao Ensaio da 24 Imunoabsorbância Ligado a Enzima indireto, utilizando antígeno particulado. Os 25 animais de todos os grupos apresentaram soroconversão de IgG total contra o 26 antígeno utilizado, porém não foi identificado diferença estatística (nível de p> 0,05) 27 entre os grupos suplementados e o controle. Na análise de isotipagem, o grupo 28 suplementado com probiótico no período contínuo apresentou resultados de 29 soroconversão de IgG2a/IgG1 superior quando comparado ao grupo C (1,8 vezes no 30 dia 63), mantendo o seu título até o final do experimento (1,2 vezes no dia 84), 31 mostrando que a administração do probiótico por período contínuo modulou 32 positivamente a resposta imune humoral contra o antígeno vacinal utilizado no estudo. 33 Todos os procedimentos realizados estão de acordo com a Legislação Brasileira e as 34 normas do Conselho Nacional de Controle de Experimentação Animal (CONCEA) sob 35 aprovação pelo Comitê de Ética de Experimentação Animal da Universidade Federal 36 de Pelotas (UFPel), protocolo nº 5758.

Immunization through vaccination has been shown to be an efficient alternative in 10 sanitary control. But despite the great technological advance, many vaccines are 11 poorly immunogenic or do not offer an immune response capable of preventing 12 infection, as in the case of canine visceral leishmaniasis. An alternative to improving 13 the efficiency of these vaccines would be the modulation of the immune system using 14 probiotics, which are living microorganisms that confer benefits to host health. This 15 work aimed to evaluate the immunomodulatory effect of the probiotic Bacillus cereus 16 var. Toyoi in experimentally vaccinated mice against Leishmania infantum chagasi, 17 during the period of administration of the probiotic and after the suspension of the 18 probiotic. 24 Balb/c mice, 21 days old, experimentally vaccinated against Leishmania 19 infantun chagasi, were divided in three experimental groups. One group without 20 supplementation (A) and the other two (B and C) supplemented orally with Bacillus 21 cereus var. Toyoi, at the concentration of 106 CFU / g-1 incorporated in the diet, at 22 different periods. To investigate the kinetics of antibody production, blood samples 23 were collected and the sera were submitted to the indirect enzyme-linked 24 immunoabsorbance assay, using particulate antigen. Animals of all groups presented 25 total IgG seroconversion against the antigen used, but no statistical difference (p> 0.05 26 level) was found between the supplemented and control groups. In the isotype 27 analysis, the group supplemented with probiotic in the continuous period presented 28 higher IgG2a / IgG1 seroconversion results when compared to group C (1.8 times on 29 day 63), maintaining its titre until the end of the experiment (1,2 Times at day 84), thus 30 suggesting that administration of the probiotic for a continuous period positively 31 modulated the humoral immune response against the vaccine antigen used in the 32 study. All the procedures performed are in accordance with the Brazilian legislation 33 and the norms of the National Council of Control of Animal Experimentation 34 (CONCEA), approved by the Ethics Committee of Animal Experimentation of the 35 Federal University of Pelotas (UFPel), protocol no. 5758.

Efeito da suplementação com Saccharomyces boulardii sobre a resposta imune de camundongos vacinados experimentalmente contra Leishmania infantum chagasi

A leishmaniose canina é considerada um grave problema de cunho médico veterinário, em virtude das altas taxas de incidência, dos sinais clínicos e gravidade variáveis. Além disso, os mecanismos desenvolvidos por Leishmania spp. para evadir da resposta imunológica dificultam a elaboração de medidas profiláticas, sobretudo a formulação de vacinas eficientes. Entretanto, a associação com probióticos, ou seja, micro-organismos não patogênicos que conferem efeitos benéficos ao hospedeiro, parece ser uma alternativa para melhoria do efeito vacinal. Dessa maneira, avaliou-se a eficiência da utilização da levedura Saccharomyces boulardii para a modulação das defesas do hospedeiro quando estimulado com antígeno particulado de Leishmania infantum chagasi. Para isso, 16 camundongos BALB/c foram imunizados e divididos em dois grupos, sendo um controle (não suplementado) e o outro suplementado continuamente com o probiótico na ração diária. Foram coletadas semanalmente amostras de sangue dos animais para obtenção do soro e posterior analise da cinética de produção de anticorpos e a identificação das subclasses de imunoglobulinas produzidas. Para esse fim, adotou-se o Ensaio da Imunoabsorbância Ligado à Enzima (ELISA). Os resultados foram expressos em soroconversão e as médias comparadas pela análise de variância (ANOVA), com nível de significância de 5%. A modulação da reposta humoral foi detectada nos animais suplementados e se manteve mesmo com a parada da suplementação. Não foi detectada diferença estatística entre as soroconversões das IgG totais entre os grupos, porém o grupo suplementado apresentou uma maior elevação de IgG2a, evidenciado pela razão das soroconversões de IgG2a/IgG1. Tais resultados demonstram a eficiência de S. boulardii na modulação das respostas humorais do hospedeiro, em especial a elevação dos títulos de IgG2a que estão associados a uma resposta Th1, eficiente nos casos de leishmaniose

Canine leishmaniasis is considered a serious veterinary medical problem due to the high incidence rates and variable signs and severity. In addition, the mechanisms developed by Leishmania spp. to evade the immune response make difficult the elaboration of protective measures, especially the formulation of efficient vaccines. However, the association with probiotics, that is, non-pathogenic microorganisms which confer beneficial effects on the host, seems to be an alternative to improve the vaccine effect. In this way, the efficiency of the use of Saccharomyces boulardii yeast for the modulation of host defenses when stimulated with Leishmania infantum chagasi particulate antigen was evaluated. For this, 16 BALB/c mice were immunized and divided into two groups, one control (not supplemented) and the other continuously supplemented with the probiotic in the daily ration. Blood samples were collected weekly from the animals to obtain the serum and subsequent analysis of the kinetics of antibody production and identification of the subclasses of immunoglobulins produced. For this, the Enzyme Linked Immunoabsorbance Assay (ELISA) was adopted. The results were expressed in seroconversion and the means were compared by analysis of variance (ANOVA) with significance level of 5%. Modulation of the humoral response was detected in the supplemented animals and was maintained even with the stopping of the supplementation. No statistical difference was detected between total IgG seroconversions between groups, but the supplemented group had a higher IgG2a elevation as evidenced by the IgG2a / IgG1 seroconversion ratio. These results demonstrate the efficiency of S. boulardii in the modulation of the humoral responses of the host, especially the elevation of IgG2a titers that are associated with a Th1 response, efficient in cases of leishmaniasis.

Leptospirose Experimental: IgG Anti-Eritrócitos , Alterações Hemostáticas e Redução da Lesão Renal por Deferoxamina

Leptospirose aguda tem grande parte de suas manifestações clínicas em função da lesão vascular com dano às células endoteliais proporcionada pela infecção. Febre, icterícia, insuficiência renal, nefrite, anemia hemolítica, hemoglobinúria, e hemorragia pulmonar fatal são características clínicas relevantes. A lesão é provavelmente devida a depósitos de complexos imunes nos pequenos vasos dos órgãos acometidos. A ativação da resposta imune determina a liberação de diversos fatores humorais, gerando o processo inflamatório. Mecanismos oxidativos estão diretamente envolvidos e se correlacionam com alterações no metabolismo do ferro durante a doença. O tecido renal é fortemente afetado pela infecção. No entanto, os mecanismos envolvidos na anemia, com ou sem hemólise, trombocitopenia relacionada ou não com sangramento clínico e fisiopatologia antioxidante renal durante a infecção aguda estão poucos compreendidos. O objetivo deste trabalho foi determinar, em um primeiro experimento, a presença de imunoglobulinas associadas à parede dos eritrócitos e plaquetas, estabelecer a magnitude do envolvimento de micropartículas plaquetárias e sua relação com marcadores laboratoriais clássicos de hemostasia. Para tanto foram utilizados, 18 animais, machos, com 60 dias divididos em 2 grupos (6 controles saudáveis e 12 infectados por inoculação experimental com Leptospira interrogans Sorovar Canicola), os quais tiveram amostras de sangue coletadas no 4° dias pós infecção experimental. Num segundo experimento objetivou-se avaliar o efeito antioxidante e histoprotetor de deferoxamina em nível de tecido renal, utilizando 18 animais, divididos em 4 grupos : C e CT (controle e controle tratado) 3 animais cada, I e IT (infectado e infectado tratado) 6 animais cada, os quais foram submetidos à mesma inoculação. Os animais dos grupos CT e IT receberam 50mg/kg de deferoxamina nos dias -1, 0, 1, 2 e 3. Fez-se a coleta de sangue para dosagens séricas de metabolismo férrico e a eutanásia foi realizada também no 4º dia pós infecção. Tecido renal foi submetido à avaliação de lesão oxidativa, status antioxidante e inflamatório e avaliação histopatológica. Os animais infectados apresentaram sangramento clínico, decréscimo na contagem de plaquetas, alterações nos parâmetros hemostáticos (aumento de TP, TTPA, e decréscimo de fibrinogênio) aumento de micropatículas plaquetárias e aumento da IgG anti-eritrocitária. O tratamento com deferoxamina proporcionou redução de dano renal avaliada por TBARS, razão GSSH/GSSG, acetilcolinesterase teciduais. Avalição histopatológica mensurou a agressão tecidual causada pela infecção e apontou proteção, sobretudo em nível tubular, por deferoxamina. Foi possível concluir, portanto, que a infecção experimental provoca alterações importantes do ponto de vista fisiopatológico demonstrando envolvimento do sistema imune em nível eritrocitário pré-hemolítco e que fatores imunomediados não parecem estar correlacionados com a trombocitopenia. Há envolvimento de micropartículas na modulação de resposta trombótica e, ainda, deferoxamina apresentou importante ação antioxidante, antiinflamatória e histoprotetora no tecido renal.

Acute leptospirosis has a large part of its clinical manifestations as a function of the vascular injury with endothelial cell damage provided by the infection. Fever, jaundice, renal failure, nephritis, hemolytic anemia, hemoglobinuria, and fatal pulmonary haemorrhage are relevant clinical features. The lesion is probably due to deposits of immune complexes in the small vessels of the affected organs. The activation of the immune response determines the release of several humoral factors, generating the inflammatory process. Oxidative mechanisms are directly involved and correlate with changes in iron metabolism during disease. Kidney tissue is strongly affected by infection. However, the mechanisms involved in anemia, with or without hemolysis, thrombocytopenia related to non-clinical bleeding, and renal antioxidant pathophysiology during acute infection are poorly understood. The objective of this work was to determine, in a first experiment, the presence of immunoglobulins associated with the erythrocyte and platelet wall, to establish the magnitude of the involvement of platelet microparticles and its relation with classic laboratory hemostasis markers. For this purpose, 18 male animals were used, with 60 days divided into 2 groups (6 healthy controls and 12 infected by experimental inoculation with Leptospira interrogans Sorovar Canicola), which had blood samples collected on the 4th day after experimental infection. In a second experiment the objective was to evaluate the antioxidant and histoprotective effect of deferoxamine at renal tissue level. Also, 18 animals were submitted to the same inoculation, divided into 4 groups: C and CT (control and treated) 3 animals each, I and IT (infected and infected treated) 6 animals each. Animals of the CT and IT groups received 50mg / kg of deferoxamine on days -1, 0, 1, 2 and 3. Blood was collected and serum dosages of ferric metabolism and euthanasia were also performed on the 4th day post infection. Renal tissue was submitted to evaluation of oxidative lesion, antioxidant and inflammatory status and histopathological evaluation. Infected animals presented clinical bleeding, decreased platelet count, changes in hemostatic parameters (increase in PT, APTT, and decrease in fibrinogen), increase in platelet microparticles and increase in anti-erythrocyte IgG. Treatment with deroxamine provided reduction of renal damage assessed by TBARS, GSSH / GSSG ratio, tissue acetylcholinesterase. Histopathological evaluation measured the tissue aggression caused by the infection and pointed to protection, at the tubular level, by deferoxamine. It was possible to conclude, therefore, that the experimental infection causes important changes from the pathophysiological point of view demonstrating involvement of the immune system in the pre-hemolytic erythrocyte level and that immune-mediated factors do not seem to be correlated with thrombocytopenia. There is involvement of microparticles in the modulation of thrombotic response and, furthermore, deferoxamine presented an important antioxidant, antiinflammatory and histoprotective action in renal tissue.

EFEITO DO ÁCIDO LINOLEICO CONJUGADO E DA LUTEÍNA NO DESEMPENHO E NA RESPOSTA IMUNE DE FRANGOS DE CORTE

Tanto a luteína quanto o ácido linoleico conjugado (CLA) são nutrientes que já demonstraram efeitos benéficos na modulação do sistema imune em diferentes modelos experimentais, porém o uso de ambos em conjunto ainda não foi explorado. O CLA é incorporado nas membranas celulares e hipotetiza-se que a luteína, com seu potencial antioxidante, possa proteger a estrutura do CLA em situações de estresse oxidativo. Outra razão para se pensar na interação entre estes nutrientes é que já foram observados de forma individual, efeitos modulatórios do CLA e da luteína sobre receptores celulares que atuam em conjunto e possuem papel chave na regulação da resposta imune (receptores PPAR e RXR). Objetivou-se com o presente estudo avaliar o efeito da suplementação dietética de CLA e luteína no desempenho e na resposta imune de frangos de corte de 1 a 22 dias de idade. Foram testados 3 níveis de inclusão de CLA (0, 1 e 2%) em conjunto com luteína (0 e 50 mg/kg) na presença ou ausência de desafio imunológico com LPS. O CLA e a luteína apresentaram efeitos imunomodulatórios positivos, porém, não foi observada interação entre ambos os nutrientes para as avaliações relacionadas ao sistema imune. O CLA, adicionado em 2% na dieta, elevou a produção de IgY em resposta ao estímulo com albumina de soro bovino (BSA) e também foi capaz de aumentar a expressão de RXR no fígado. A luteína diminuiu o óxido nítrico plasmático e também a expressão de TLR-4 no baço e de IL-1 e IL-12 no fígado apesar de ter aumentado a expressão de TLR-4 hepática. O desafio com LPS estimulou a resposta inflamatória aguda, evidenciado pela queda no ganho de peso, pelo aumento da relação fígado:peso corporal, pelo aumento na expressão de IL-1 e IL-12 hepáticos e diminuição na expressão de PPAR no duodeno e fígado e de PPAR e RXR no baço. Entretanto, nem a luteína e nem o CLA foram capazes de reverter ou atenuar os efeitos causados pelo desafio com LPS. Para desempenho, uma forte interação entre CLA e luteína foi observada, de forma que a suplementação com 1 ou 2% de CLA pioraram o peso corporal, o ganho de peso e a eficiência alimentar de 1 a 20 dias de idade, mas estes efeitos foram revertidos quando a luteína foi incluída na dieta com 1% de CLA. Concluiu-se que o CLA teve efeito benéfico sobre a resposta imune humoral, na dependência da sua dose. A luteína se mostrou como nutriente anti- inflamatório e também capaz de reverter o efeito negativo da inclusão dietética de 1% de CLA sobre o desempenho de frangos de corte.

Both lutein and conjugated linoleic acid (CLA) have beneficial effects on the modulation of the immune system. However, the simultaneous supplementation of both lutein and CLA has not yet been examined. CLA is incorporated into cell membranes, and it is hypothesized that lutein, as an antioxidant, protects CLA structure during oxidative stress. Additionally, an examination of the interaction of lutein and CLA is vital because individual effects of CLA and lutein on nuclear receptors that work together and have important roles in the immune response have been observed (PPAR and RXR receptors). The objective of this study was to evaluate the effects of dietary CLA and lutein supplementation on the performance and immune response of 1- to 22-d-old broiler chickens. Three CLA inclusion levels (0, 1 and 2%) and two lutein levels (0 and 50 mg/kg) were tested in the presence and absence of LPS immune challenge. Lutein and CLA showed positive immunomodulatory effects, but no interaction between these nutrients on the immune system was observed. A 2% CLA supplementation increased plasmatic IgY anti-BSA production and hepatic RXR expression. Lutein decreased plasmatic nitric oxide and TLR-4 in the spleen and IL-1 and IL-12 in the liver in addition to increasing hepatic TLR-4. LPS challenge effectively promoted an acute inflammatory response, as illustrated by decreased body weight gain, increased liver:body weight ratio, increased expression of hepatic IL-1 and IL-12, decreased expression of PPAR in the duodenum and liver and decreased expression of PPAR and RXR in the spleen. However, neither lutein nor CLA reversed or attenuated the effects of the LPS challenge. A strong interaction between CLA and lutein was observed on performance: CLA supplementation at 1 or 2% decreased body weight, body weight gain and feed efficiency from 1 to 20 d old. However, these negative effects were reversed when lutein was included in the 1% CLA diet. In conclusion, CLA improved the humoral immune response (depending on CLA dose). Lutein was anti-inflammatory and could reverse the negative effects of dietary 1% CLA supplementation on broiler chicken performance.

Effect of mannanoligosaccharides and/or enzymes on antibody titers against infectious bursal and Newcastle disease viruses / Efeito do mananoligossacarídeo e/ou enzimas sobre títulos de anticorpos contra os vírus das doenças de Gumboro e de Newcastle

The effect of including mannanoligosaccharides (MOS) and/or enzymes in broiler diets on antibody titers against infectious bursal disease virus (IBDV) and Newcastle disease virus (NDV) was evaluated. A total of 750 broilers were distributed into a completely randomized experimental design in a factorial arrangement 2 x 2 + 1 with two levels of MOS (0 and 0.1 percent until 21 days and 0.05 percent from 22 to 42 days of age), two levels of enzymes (0 and 0.05 percent) and a positive control diet containing antibiotic, totaling five treatments with five replicates each. For antibody analyses, blood samples were weekly collected by jugular vein puncture in the same two birds per replicate. The first and last collections were done at 7 and 42 days of age, respectively. The inclusion of MOS resulted in increased antibody titers against IBDV in the fourth (P<0.03) and fifth (P<0.02) weeks, and against NDV in the third (P<0.01), fourth (P<0.03) and fifth (P<0.03) weeks of age. MOS was effective in stimulating the humoral immune responses against IBDV and NDV vaccine viruses.(AU)

O efeito da inclusão de mananoligossacarídeo (MOS) e/ou enzimas em dietas de frangos sobre os títulos de anticorpos contra os vírus das doenças de Gumboro (VDG) e de Newcastle (VDN). Setecentos e cinqüenta aves foram distribuídas em um delineamento experimental inteiramente ao acaso, em arranjo fatorial 2 x 2 + 1, com dois níveis de MOS (0 e 0,1 por cento até 21 dias e 0,05 por cento de 22 até 42 dias de idade), dois níveis de enzimas (0 e 0,05 por cento) e uma dieta-controle-positivo contendo antibióticos, totalizando cinco tratamentos com cinco repetições. Para análise dos anticorpos, amostras de sangue foram colhidas semanalmente por punção da veia jugular em duas aves de cada repetição. A primeira e a última colheita foram realizadas aos sete e 42 dias de idade, respectivamente. A inclusão de MOS resultou em aumento dos títulos contra VDG na quarta (P<0,03) e quinta (P<0,02) semanas, e contra VDN na terceira (P<0,01), quarta (P<0,03) e quinta (P<0,03) semanas de idade. O MOS foi efetivo em estimular a resposta imune humoral contra VDG e VDN vacinais.(AU)