Induced aerocystitis and hemato-immunological parameters in Nile tilapia fed supplemented diet with essential oil of Lippia alba / Aerocistite induzida e parâmetros hemato-imunológicos em tilápia do Nilo suplementada com óleo essencial de Lippia alba

The present study evaluated the dietary supplementation with essential oil of Lippia alba on the hemato-immunological parameters of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) submitted to acute inflammation induced by carrageenin injection in the swim bladder. For a period of 45 days, 96 fish were divided in four treatments in triplicate, as follows: fish fed supplemented diet with essential oil of L. alba (4 mL kg-1 dry ration) injected with carrageenin; fish fed supplemented diet with cereal alcohol injected with carrageenin; fish fed unsupplemented diet with essential oil injected with carrageenin; fish fed unsupplemented diet and noninjected. Cortisol levels, erythrogram, leukogram and the inflammatory infiltrate were analyzed 6 h after inflammatory stimulus. Carrageenin-injected fish showed acute inflammatory reaction in the swim bladder characterized by higher infiltrate of neutrophils and monocytes. The circulating neutrophils number was significantly higher in fish fed L. alba when compared to other treatments. No difference in cortisol levels was found. For dose, time and administration form tested, supplementation with essential oil of L. alba did not present anti-inflammatory activity. On the other hand, influence of dietary supplementation was observed on the neutrophils number after induced aerocystitis highlighting its immunomodulatory characteristic.(AU)

O presente estudo avaliou a suplementação dietária com óleo essencial de Lippia alba sobre os parâmetros hemato-imunológicos em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) submetidas à inflamação aguda induzida por carragenina na bexiga natatória. Pelo período de 45 dias, 96 peixes foram divididos em quarto tratamentos em triplicata: a) peixes suplementados com óleo esencial de L. alba (4 mL kg-1 de ração) injetados com carragenina; b) peixes suplementados com álcool de cereais injetados com carragenina; peixes não suplementados com óleo essencial injetados com carragenina; c) peixes não suplementados não injetados. Os níveis de cortisol, eritrograma, leucograma e o infiltrado inflamatório foram analisados seis horas após o estímulo inflamatório. Peixes injetados com carragenina apresentaram reação inflamatória aguda na bexiga natatória caracterizada por maior infiltrado de neutrófilos e monócitos. O número de neutrófilos circulantes foi significativamente maior nos peixes suplementados com L. alba quando comparado aos outros tratamentos. Não houve diferença nos níveis de cortisol. Para a dose, o tempo e a forma de administração testada, a suplementação com óleo essencil de L. alba não apresentou atividade anti-inflamatória. Por outro lado, foi constatada influência da suplementação dietária no número de neutrófilos após a aerocistite enfatizando a sua característica imunomoduladora.(AU)

Induced aerocystitis and hemato-immunological parameters in Nile tilapia fed supplemented diet with essential oil of Lippia alba / Aerocistite induzida e parâmetros hemato-imunológicos em tilápia do Nilo suplementada com óleo essencial de Lippia alba

The present study evaluated the dietary supplementation with essential oil of Lippia alba on the hemato-immunological parameters of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) submitted to acute inflammation induced by carrageenin injection in the swim bladder. For a period of 45 days, 96 fish were divided in four treatments in triplicate, as follows: fish fed supplemented diet with essential oil of L. alba (4 mL kg-1 dry ration) injected with carrageenin; fish fed supplemented diet with cereal alcohol injected with carrageenin; fish fed unsupplemented diet with essential oil injected with carrageenin; fish fed unsupplemented diet and noninjected. Cortisol levels, erythrogram, leukogram and the inflammatory infiltrate were analyzed 6 h after inflammatory stimulus. Carrageenin-injected fish showed acute inflammatory reaction in the swim bladder characterized by higher infiltrate of neutrophils and monocytes. The circulating neutrophils number was significantly higher in fish fed L. alba when compared to other treatments. No difference in cortisol levels was found. For dose, time and administration form tested, supplementation with essential oil of L. alba did not present anti-inflammatory activity. On the other hand, influence of dietary supplementation was observed on the neutrophils number after induced aerocystitis highlighting its immunomodulatory characteristic.(AU)

O presente estudo avaliou a suplementação dietária com óleo essencial de Lippia alba sobre os parâmetros hemato-imunológicos em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) submetidas à inflamação aguda induzida por carragenina na bexiga natatória. Pelo período de 45 dias, 96 peixes foram divididos em quarto tratamentos em triplicata: a) peixes suplementados com óleo esencial de L. alba (4 mL kg-1 de ração) injetados com carragenina; b) peixes suplementados com álcool de cereais injetados com carragenina; peixes não suplementados com óleo essencial injetados com carragenina; c) peixes não suplementados não injetados. Os níveis de cortisol, eritrograma, leucograma e o infiltrado inflamatório foram analisados seis horas após o estímulo inflamatório. Peixes injetados com carragenina apresentaram reação inflamatória aguda na bexiga natatória caracterizada por maior infiltrado de neutrófilos e monócitos. O número de neutrófilos circulantes foi significativamente maior nos peixes suplementados com L. alba quando comparado aos outros tratamentos. Não houve diferença nos níveis de cortisol. Para a dose, o tempo e a forma de administração testada, a suplementação com óleo essencil de L. alba não apresentou atividade anti-inflamatória. Por outro lado, foi constatada influência da suplementação dietária no número de neutrófilos após a aerocistite enfatizando a sua característica imunomoduladora.(AU)

GENOMIC ANALYSIS FOR PREWEANING CALF MORTALITY IN NELLORE CATTLE

A mortalidade pré-desmame de bezerros é uma das principais causas de perdas econômicas em bovinos de corte, uma vez que a maior parte da renda econômica é representada pelo número de bezerros desmamados disponíveis para venda. Esta também é prejudicial para o progresso genético devido à redução de candidatos jovens para a seleção. A inclusão de marcadores moleculares na análise genética permite uma melhor compreensão dos mecanismos genéticos subjacentes à mortalidade de bezerros. Os objetivos deste estudo foram: i) estimar a herdabilidade direta e materna da mortalidade pré-desmame em bovinos Nelore e ii) buscar regiões genômicas e genes candidatos afetando os efeitos diretos e maternos da mortalidade pré-desmame em bovinos Nelore. Os componentes de variância foram estimados por Inferência Bayesiana usando um modelo animal de limiar, que incluiu os efeitos sistemáticos do grupo contemporâneo, peso ao nascer como covariável linear e a idade da mãe ao parto como covariável linear e quadrática. Os efeitos genéticos diretos e maternos, e o resíduo foram ajustados como efeitos aleatórios. O conjunto final de dados utilizado continha registros fenotípicos em 67.196 animais, descendentes de 1.469 touros e 30.970 vacas. Os efeitos dos SNPs foram estimados com base na abordagem weighted single step GBLUP, usando informações de 8.443 animais genotipados com 410.936 SNPs. As estimativas de herdabilidade direta e materna foram de 0,2143±0,0348 e 0,0137±0,0066, respectivamente. As dez principais regiões genômicas explicaram 13,61 e 14,23% da variação genética aditiva direta e materna e abrigaram um total de 63 e 48 genes candidatos posicionais, respectivamente. Duas regiões sobrepostas localizadas no BTA2 foram identificadas, abrigando genes candidatos comuns para efeitos diretos e maternos. Os genes candidatos RUNX3, CLIC4 e RCAN3, presentes nessas regiões, estão envolvidos na via apoptótica, transdução de sinalização, resposta a estímulos e sistema imunológico. Os genes CD53, LAMTOR5, ARF6, STPG1, CTNNA2, RALYL, CDKL1 e PROK1, foram identificados como candidatos para o efeito direto da mortalidade pré-desmame, uma vez estão envolvidos na regulação, preservação e sobrevivência celular. Os genes CRADD e MAP3K5 foram associados ao efeito materno. Esses genes estão envolvidos em apoptose celular, uma rota importante para o desenvolvimento normal da gravidez. Esses papéis fisiológicos podem controlar os mecanismos genéticos subjacente à mortalidade pré-desmame de bezerros.

Preweaning calf mortality is one of main causes of economic losses in beef cattle, since most of economic incomes are represented by the number of weaned calves available for sale. It is also detrimental for genetic progress due to the reduction of young candidates for selection. The inclusion of molecular markers in genetic analysis allows a better understanding of genetic mechanisms underlying calf mortality. The objectives of this study were: i) to estimate direct and maternal heritability of preweaning calf mortality in Nellore cattle and ii) to seek for genomic regions and candidate genes affecting direct and maternal effects of preweaning calf mortality in Nellore cattle. Variance components were estimated via Bayesian Inference using a threshold animal model, that included the systematic effects of contemporary group, birth weight as linear covariate, and age of dam at calving as linear and quadratic covariates. The direct and maternal genetics, and the residual were fitted as random effects. The final dataset used contained phenotypic records on 67,196 animals, offspring of 1,469 sires and 30,970 dams. The SNPs effects were estimated based on the weighted single-step GBLUP approach, using information of 8,443 genotyped animals with 410,936 SNPs. Direct and maternal heritability estimates were of 0.2143±0.0348 and 0.0137±0.0066, respectively. The top 10 genomic regions accounted for 13.61 and 14.23% of direct and maternal additive genetic variance and harbored a total of 63 and 48 positional candidate genes, respectively. Two overlapping regions located on BTA2 were identified, harboring common candidate genes for direct and maternal effects. The candidate genes RUNX3, CLIC4 and RCAN3, present into these regions, are involved in apoptotic pathway, signaling transducing, response to stimulus and immunological system. The genes CD53, LAMTOR5, ARF6, STPG1, CTNNA2, RALYL, CDKL1, and PROK1, were identified as candidates for direct effects of preweaning mortality as they are involved in cell regulation, preservation and survival. The genes CRADD and MAP3K5 were associated with maternal effects. These genes are involved in apoptosis, an important pathway for the normal development of pregnancy. These physiological roles may control genetic mechanism underlying preweaning calf mortality.

Avaliação do efeito da medicação homeopática Antimonium crudum em culturas de Leishmania (Leishmania) infantum chagasi

Atualmente a busca por opções de tratamento com medicações financeiramente mais acessíveis e menos agressivas ao organismo, aliada à uma visão mais humana de tratar o paciente, fez da homeopatia uma prática mais utilizada. Em se tratando de uma das sete endemias de maior impacto mundial, a Leishmaniose é uma doença negligenciada causada pelo parasita do gênero Leishmania, com estimativas alarmantes de novos casos e óbitos por ano, se tornando um grande problema de saúde pública. No Brasil, a Leishmaniose Visceral em áreas urbanas se destaca pelo fato de ser uma zoonose que possui como principal reservatório também o cão, que sempre esteve presente e em estreito contato com grande parte das familias brasileiras. O mesmo quando infectado pela doença, é submetido à eutanasia como norma do Ministério da Saúde, por apresentar riscos à população. Utilizando-se a Lei da Similitude, instruída por Hahnemann, chegou-se à medicação Antimonium crudum para possível tratamento e profilaxia da Leishmaniose Visceral Canina. Portanto, no presente trabalho, visou-se o estudo da ação da medicação homeopática Antimonium crudum, in vitro, diretamente em promastigotas de Leishmania (Leishmania) infantum chagasi, através do teste de MTT (brometo de 3-[4.5 - dimetitiazol - 2 - il] - 2,5 difenil - 2 H - tetrazólio), que visa mensurar a atividade metabólica e a observação da curva de crescimento do parasito na forma promastigota, bem como a ação na infecção das Leishmanias em macrófagos da linhagem J774, em sua forma amastigota. Os resultados obtidos para a forma promastigota mostram que o estímulo homeopático não teve influência direta sobre os parasitos, tanto no teste de MTT quanto na curva de crescimento, corroborando os estudos que sugerem que a homeopatia não age diretamente sobre o parasito e sim em conjunto com o sistema imune do hospedeiro. Já nos resultados dos ensaios infectivos, observa-se, em geral, maior porcentagem de macrófagos infectados, assim como maior taxa de fagocitose nos grupos tratados com Antimonium crudum, o que sugere uma maior atividade dos mesmos levando à uma resposta imune secundária mais representativa e consequentemente, à destruição do antígeno. Quando se verificou o pré e o pós-tratamento de macrófagos, observou-se que as potências mais baixas, CH6 e CH12, parecem ter maior eficiência e quando a infecção ja está instalada, a potência CH30 parece ter uma maior significância na profilaxia da infecção. Apesar disso, a resolução da doença dependerá da ação imunológica de cada hospedeiro, que irá controlar o crescimento e manutenção do parasito ou não.

Currently, the search for treatments with medicines that are financially affordable, less agressive to the host, and more humane in treating the patient, homeopathy is the most practical course. When it comes to one of the seven largest worldwide impact endemics, Leishmaniasis is a neglected public health complex with alarming estimates of new cases and deaths per year. In Brazil, urban Visceral Leishmaniasis also stands out because the reproductive cycle of this zoonotic disease can include the dog, which has Always been presente and in close contact with most Brazilian families. Dogs, when infected by the disease are euthanized as a rule from the Ministry of Health to prevent risks to the population. Using the Law of Similars, developed by Hahnemann, the medication Antonium crudum was identified as possible treatment and prophylaxis for Canine Visceral Leishmaniasis. Therefore, the presente work was to study the direct action of the homeopathic medicine Antimonium crudum in vitro against the promastigotes of Leishmania (Leishmania) infantum chagasi, through the MTT test (3-[4.5 dimetitiazol-2-yl) 2.5 diphenyl tetrazolium H 2), which aims to measure the metabolic activity; the promastigote growth curve ; as well as the performance of promastigote infectivity in J774 macrophages. The results from both the MTT assay as well as the growth curve show that the homeopathic stimulus did not directly influence the promastigote form of the parasites, corroborating studies that suggest that homeopathy has no direct action on the parasite, but may funcion together with the hosts imune system. Treatment with Antimonium crudum led to a higher percentage of infected macrophages in the infectivity assays and a higher rate of phagocytosis, which suggests increased activity leading to a stronger secondary immune response and as a result, antigen destruction. Assays in which macrophages were treated before or after infection suggest that lower concentrations (CH6 anda CH12) seem most effective when the cells are already infected, however a higher concentration (CH30) appears to have greater activity in preventing infection. Ultimately, the resolution of the disease depends on the immunological action of each host, which may control the growth and maintenance of parasite.

Influência do ciclo da muda de penas nas respostas imune e inflamatória de pinguins-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus) mantidos em cativeiro

A mudança anual de penas é um componente crítico do ciclo biológico de todas as espécies de aves e pode modificar as respostas imunológicas individuais, sendo que suas consequências são pouco estudadas. Neste contexto, uma vez que são escassos os estudos acerca do perfil clínico e parâmetros imunológicos de pinguinsde- Magalhães em diferentes fases da muda, este estudo propôs avaliar determinados aspectos relacionados a esses perfis, em animais mantidos em ambiente controlado. Foram estudados 21 indivíduos adultos (dez machos e 11 fêmeas) e os parâmetros avaliados foram: teste de hipersensibilidade cutânea tardia à fitohemaglutinina (FHA) com a avaliação histopatológica de biópsias que incluíram a análise qualitativa e quantitativa dos tipos celulares presentes na reação e no controle às 6, 24 e 48 horas; parâmetros clínicos (massa corpórea e hematologia); fagocitose e burst oxidativo; fenotipagem e resposta linfoproliferativa. O teste de FHA demonstrou diferença significativa na espessura da membrana interdigital de ambas as patas inoculadas com FHA e com o controle (PBS) quando comparadas antes da inoculação e antes da biópsia às 24 e 48 horas. A análise histomorfométrica revelou não haver diferenças significativas na frequência relativa de granulócitos (heterófilos/ eosinófilos), linfócitos, macrófagos ou trombócitos entre as patas inoculadas com FHA e PBS em nenhum dos momentos analisados. Este resultado sugere que a diferença na espessura da membrana interdigital das patas inoculadas seja em decorrência do edema e não do infiltrado inflamatório. Para analisar os efeitos do ciclo da muda nos parâmetros clínicos e hematológicos, os animais foram divididos em três grupos: pré-muda (-5 a 0 dias da muda), muda (10º ao 21º dia da muda) e padrão basal (>120 dias da muda). Os resultados mostraram que em relação ao momento basal: houve aumento significativo na massa corpórea dos animais no momento da pré-muda; diminuição significativa de proteínas totais, hematócrito, eritrócitos totais e leucócitos totais na pré-muda e muda. Não houve diferença no número total de monócitos e heterófilos, contudo, houve eosinofilia e linfopenia na pré-muda e muda, respectivamente. Com relação aos parâmetros imunológicos, houve aumento no burst oxidativo gerado pelo estímulo biológico (Staphylococcus aureus) na pré-muda em relação à muda e ao padrão basal; ocorreu aumento do burst oxidativo gerado pelo estímulo químico (éster de forbol) na pré-muda em relação à muda. Em relação à fagocitose, houve diminuição desta capacidade dos leucócitos dos animais na pré-muda e muda em relação ao padrão basal quando o agente foi bacteriano; entretanto, o mesmo não foi observado para a fagocitose de leveduras (Zymosan A); houve diminuição de linfócitos T CD4+ circulantes na pré-muda e muda em relação ao padrão basal e o índice de proliferação de linfócitos aumentou durante o período de muda em relação ao basal. Esses resultados tomados em conjunto sugerem que as mudanças fisiológicas observadas durante o ciclo da muda interferem na modulação de parâmetros imunológicos e são sugestivas de serem consequência do prejuízo energético sofrido, mesmo em animais mantidos em ambientes controlados.

The annual replacement of feathers is a critical component of the biological cycle of all bird species. Molt can modify their individual immune response, and the consequences of this are not well known. Within this context, and the few studies on the clinical profile and immunological parameters of Magellanic penguins at different stages of their molt, this study aimed to evaluate certain aspects related to the clinical profiles of animals kept in a controlled environment. A total of 21 adult individuals (ten males and 11 females) was analyzed and the parameters evaluated in this study were: delayed-type hypersensitivity test to phytohemagglutinin (PHA) based on the histopathological evaluation of foot web biopsies that included qualitative and quantitative analysis of cell types present in the essay and control at 6, 24 and 48 hours; clinical parameters (body mass and hematology); phagocytosis and oxidative burst; phenotyping and lymphoproliferative response. The PHA test showed significant differences in the thickness of the webbing of both feet inoculated with PHA and control (PBS), when compared before inoculation and before biopsy at 24 and 48 hours. Histomorphometric analysis revealed no significant differences in the relative frequencies of granulocytes (heterophils/ eosinophils), lymphocytes, macrophages, thrombocytes, or between the feet inoculated with PHA and with PBS in any of the samples. This result suggests that the difference in thickness of the foot webbing is due to edema and not an inflammatory infiltrate. To analyze the effects of the molting cycle on clinical and hematological parameters, the birds were divided into three groups: pre-molt (from -5 days to the start of the molt, day 0), molt (10th to 21st days of molt) and baseline (>120 days after the completion of the molt). The results showed that in comparison with baseline values: a significant increase in body mass occurred during pre-molt; and a significant decrease in total protein, hematocrit, total erythrocytes and total leukocytes occurred during pre-molt and molt. There was no difference in the total numbers of monocytes and heterophils, however, there were eosinophilia and lymphopenia during pre-molt and molt, respectively. There was an increase in the oxidative burst generated by the biological stimulus (Staphylococcus aureus) in the pre-molt compared to molt and baseline levels; and there was an increased oxidative burst generated by the chemical stimuli (phorbol esters) in the pre-molt in relation to the molt. There was a decreased capacity of phagocytosis for the leukocytes in animals during pre-molt and molt compared to baseline when the agent was bacterial; however, this was not observed for the phagocytosis of yeast (Zymosan A). There was a decrease of circulating CD4+ T lymphocytes in the pre-molt and molt compared to baseline, and the lymphocyte proliferation index increased during the molt compared to baseline. The results suggest that the physiological changes observed during the molt cycle does interfere with the modulation of immune parameters, and are suggestive of resulting as a consequence of from the high energy demands of molt, even for birds kept in controlled environments

Suplementação dietária com óleo essencial de Lippia alba sobre os parâmetros hemato-imunológicos de tilápia do Nilo

O presente estudo avaliou o efeito da suplementação dietária com óleo essencial de Lippia alba sobre os parâmetros hemato-imunológicos de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) submetidas ao quadro de inflamação aguda induzida por injeção de carragenina na bexiga natatória. Pelo período de 45 dias, 96 peixes foram divididos em quatro tratamentos em triplicata, sendo eles: peixes suplementados com óleo essencial de L. alba (4 mL.kg-1 de ração) injetados com carragenina; peixes suplementados com álcool de cereais injetados com carragenina; peixes não suplementados com óleo essencial injetados com carragenina; peixes não suplementados e não injetados. Seis horas após o estímulo inflamatório, foram analisados os níveis de cortisol sérico, eritrograma, leucograma e infiltrado inflamatório. Peixes injetados com carragenina apresentaram o quadro de inflamação aguda, caracterizado pela maior infiltração de neutrófilos e monócitos. O número de neutrófilos circulantes foi maior nos animais suplementados com L. alba quando comparado aos demais tratamentos (p = 0,004). Não houve diferença nos níveis de cortisol sérico. A suplementação com óleo essencial de L. alba, para a dose, tempo e forma de administração testadas, não apresentou atividade anti-inflamatória. Por outro lado, observou-se influência da suplementação dietária sobre o número total de neutrófilos após o quadro de aerocistite, destacando sua característica imunomoduladora

The present study evaluate the dietary supplementation with essential oil of Lippia alba on the hemato-immunological parameters of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) submitted to acute inflammation induced by carrageenin injection in the swim bladder. For a period of 45 days, 96 fish were divided in four treatments in triplicate, as follows: fish supplemented with essential oil of L. alba (4 mL.kg-1 dry ration) injected with carrageenin; fish supplemented with cereal alcohol injected with carrageenin; fish non-supplemented with essential oil injected with carrageenin; fish non-supplemented and non-injected. Cortisol levels, erythrogram, leukogram and the inflammatory infiltrate were analyzed six hours after inflammatory stimulus. Fish injected with carrageenin showed acute inflammatory reaction characterized by higher infiltrate of neutrophils and monocytes. The circulating neutrophils number was higher in fish supplemented with L. alba when compared to other treatments (p = 0.004). No difference in cortisol levels was found. For dose, time and administration form tested, the supplementation with essential oil of L. alba did not present anti-inflammatory activity. On the other hand, it was observed influence of dietary supplementation on the neutrophils number after induced aerocystitis highlighting its immunomodulation characteristic

Efeito dos leucócitos do colostro materno na resposta imune de bezerros recém-nascidos

Esta pesquisa avaliou o efeito da transferência passiva dos leucócitos do colostro bovino na imunidade específica de bezerras recém-nascidas. Foram acompanhadas 20 bezerras Holandesas durante o período neonatal, distribuídas em dois grupos experimentais: grupo COL+ recebeu colostro fresco (4L) proveniente de suas respectivas mães; e grupo COL, recebeu colostro congelado e acelular (4L), oriundo de vacas doadoras de colostro. As avaliações foram realizadas antes da mamada do colostro (M0), 1-2 (M1), 7 (M2), 14 (M3), 21 (M4) e 28 dias pós-nascimento (M5). As bezerras foram submetidas ao exame clínico, seguido da colheita das amostras sanguíneas para realização de hemograma, imunofenotipagem e cultivo celular. Os dois grupos foram colostrados com colostro de igual qualidade com relação à concentração de imunoglobulinas. A média da concentração de células (1.895.849 células/mL) do colostro foi obtida a partir do pool de colostro fresco fornecido ao grupo COL+. Não foi possível encontrar diferenças para as funções vitais em relação aos grupos experimentais. O exame específico dos sistemas revelou um caso de broncopneumonia, três de inflamação umbilical e maiores índices de diarreia de escore 3 no COL-. As alterações clínicas foram refletidas no eritrograma das bezerras, sendo encontrado menor valor médio para a variável hemoglobina (HGB) no M3 para o COL-. Em relação à idade, observou-se redução gradativa dos valores médios para He (hemácias), HGB e HCT (hematócrito). Os índices hematimétricos também apresentaram diminuição dos valores médios no primeiro mês de vida. A frequência de bezerras anêmicas foi maior no grupo COL- nos momentos M4 e M5. Em relação ao leucograma, observou-se diferença entre os grupos para linfócitos no M0 e M2 com valores superiores no COL- e entre os momentos foi possível detectar leucocitose por neutrofilia do M0 ao M1 e inversão da relação neutrófilo:linfócito. Os valores de CD45+CD45RO- foram maiores em M0 no COL-, além disso, observou-se aumento da expressão do marcador de memória celular CD45RO+ do M0 ao M1 nos dois grupos. O CD3+gamma-delta- aumentou no decorrer do estudo até M2, sendo possível detectar maiores proporções de células CD3+gamma-delta+ no COL- em M2. Foi detectado também aumento dos valores de CD14+MHCII+ no primeiro mês de vida indicando maturação das células apresentadoras de antígeno. Em relação à produção de citocinas pelas células mononucleares do sangue das bezerras, foi possível identificar maior concentração de IFN-gamma em M4, quando as células do COL- foram estimuladas com S. aureus (1 mononuclear:10 bactérias inativadas). A concentração de IL-17 detectada a partir das células do COL+ foi maior em M3, quando as células foram estimuladas com ConA. Com base nos resultados obtidos, pode-se concluir que: a) bezerras COL- apresentaram maior frequência e intensidade de doenças que evoluíram para anemia da inflamação; b) bezerras COL- apresentaram maior número absoluto de linfócitos, representadas especialmente pela subpopulação CD3+gamma-delta+ nos episódios de maior frequência de diarreias; c) Linfócitos de memória CD45RO+ aumentaram após a colostragem em ambos os grupos, sugerindo que outros componentes acelulares do colostro podem apresentar papel fundamental no desenvolvimento da resposta imunológica de bezerras recém-nascidas; d) a subpopulação CD3+gamma-delta- e as células CD14+MHCII- e CD14+MHCII+ aumentaram durante o primeiro mês de vida, indicando maturação imunológica; e) as células mononucleares das bezerras não responderam ao Herpesvírus Bovino tipo 1, porém responderam aos estímulos bacterianos, especialmente para a Escherichia coli; a interpretação do leucograma em conjunto com a análise das variações apresentadas para as citocinas inflamatórias IFN-gamma e IL-17 permitem afirmar que bezerras COL- apresentaram resposta inflamatória retardada e de menor magnitude que COL+.

This study evaluated the effect of leukocytes passive transference from bovine colostrum in specific immunity of newborn calves. During neonatal period, 20 Holstein calves were followed. Animals were distributed in two experimental groups: COL+ which received fresh colostrum (4L) from their mothers, and COL- which received frozen and acellular colostrum (4L) that came from donor cows. The evaluations were performed in the following moments: before colostrum intake (M0), 1-2 (M1), 7 (M2), 14 (M3), 21 (M4) and 28 days after birth (M5). Heifers were submitted to clinical examination. Then, blood samples were harvested for hemogram, immunophenotyping and cell culture. Both groups were fed with the same quality of colostrum (concentration and immunoglobulins). Mean of colostrum cells concentration (1.895.849 cells/mL) was obtained from fresh colostrum pool provided to COL+ group. It was not possible to detect differences in vital functions concerning the experimental groups. The system specific examination reveled one case of bronchopneumonia, three cases of umbilical inflammation and major rates of diarrhea score 3 in group COL-. Clinical alterations were reflected in calves erythrogram. It was found lower mean value for hemoglobin (HGB) in M3 for COL-. Regarding age, a gradual reduction in mean values for RBCs, HGB and HCT (hematocrit) were observed. Hematimetric rates also presented decrease in mean values in the first month of life. The frequency of anemic heifers was higher in COL group at moments M4 and M5. Regarding leukogram, it was observed difference between groups for lymphocytes in M0 and M2 with higher values in COL-. Concerning moments, it was possible to detect leukocytosis by neutrophilia from M0 up to M1 and inversion of neutrophil:lymphocyte relation. Values of CD45+CD45RO- was higher in M0 for COL-, furthermore, increase of cellular memory marker expression CD45RO+ was observed from M0 to M1 in both groups. The CD3+gamma-delta- increased during the study up to M2, and it was possible to detect larger proportions of CD3+gamma-delta+ cells in M2 of COL-. Increase of CD14+MHCII+ values were also detected in the first month of life, indicating maturation of antigen presenting cells. Regarding cytokine production by mononuclear cells of heifers blood, it was possible to identify higher concentration of IFN-gamma in M4 when cells of COL- were stimulated with S. aureus (1 mononuclear: 10 inactivated bacteria). The concentration of IL-17 detected from COL+ cells was higher in M3, when cells were stimulated with ConA. Based on these results, it can be concluded that: a) COL heifers presented higher frequency and intensity of diseases that evolved to anemia of inflammation; b) COL heifers presented higher lymphocyte absolute number, represented specially by CD3+gamma-delta+ subsets in episodes of higher frequency of diarrhea; c) memory lymphocytes CD45RO+ increased after colostrum intake in both groups, suggesting that other acellular colostrum components can present fundamental role in development of immunological response in newborn heifers; d) the subset of CD3+gamma-delta- and the cells CD14+MHCII- and CD14+MHCII+ increased during the first month of life, indicating immunological maturation; e) heifers mononuclear cells did not respond for herpes virus bovine type 1, however, responded for bacterial stimulus, specially Escherichia coli. The interpretation of leukogram with the variation of presented analyses for inflammatory cytokines IFN-gamma and IL-17, allow to state that COL heifers presented delayed inflammatory response and of lesser magnitude than COL+.

Influence of sulfur amino acid levels in diets of broiler chickens submitted to immune stress

Several changes in amino acid levels occur during an infection. As a rule, glycine, taurine and serine levels diminish considerably, while cysteine levels increase. Such changes may be attributed to the intense consumption of sulfur amino acids (SAA- methionine+cysteine) during infectious challenge. Methionine plays an important role in humoral and cellular immune responses. It has been suggested that such effect is exerted by intracellular glutathione and cysteine levels. Four-hundred thirty-two day-old Ross male broiler chickens were fed (from 1 to 42 days of age) three SAA levels in the diet (0.72, 0.82, and 0.92% from 1 to 21 days of age; 0.65, 0.75, and 0.85% from 22 to 42 days of age) and submitted to two immunological stimulus series. Vaccines against Marek's disease, Fowlpox, Infectious Bronchitis and Infectious Bursal disease, Freund's Complete Adjuvant, and avian tuberculin were used as immunological stimuli. The experiment comprised 6 treatments, with 6 replications using 12 birds per replicate. Performance data were collected weekly. Gumboro antibodies were measured by ELISA, and the cellular immune response by the tuberculin test. SAA levels tested did not influence immune response. Nevertheless, the vaccines applied on the 1st day impaired chick performance up to the 21 days of age. The SAA levels generally adopted in poultry husbandry may not be enough to assure weight gain, especially when birds are raised if a low-challenge infectious environment.

Influence of sulfur amino acid levels in diets of broiler chickens submitted to immune stress

Several changes in amino acid levels occur during an infection. As a rule, glycine, taurine and serine levels diminish considerably, while cysteine levels increase. Such changes may be attributed to the intense consumption of sulfur amino acids (SAA- methionine+cysteine) during infectious challenge. Methionine plays an important role in humoral and cellular immune responses. It has been suggested that such effect is exerted by intracellular glutathione and cysteine levels. Four-hundred thirty-two day-old Ross male broiler chickens were fed (from 1 to 42 days of age) three SAA levels in the diet (0.72, 0.82, and 0.92% from 1 to 21 days of age; 0.65, 0.75, and 0.85% from 22 to 42 days of age) and submitted to two immunological stimulus series. Vaccines against Marek's disease, Fowlpox, Infectious Bronchitis and Infectious Bursal disease, Freund's Complete Adjuvant, and avian tuberculin were used as immunological stimuli. The experiment comprised 6 treatments, with 6 replications using 12 birds per replicate. Performance data were collected weekly. Gumboro antibodies were measured by ELISA, and the cellular immune response by the tuberculin test. SAA levels tested did not influence immune response. Nevertheless, the vaccines applied on the 1st day impaired chick performance up to the 21 days of age. The SAA levels generally adopted in poultry husbandry may not be enough to assure weight gain, especially when birds are raised if a low-challenge infectious environment.

Effects of methionine and arginine dietary levels on the immunity of broiler chickens submitted to immunological stimuli

The present study aimed at assessing the effects of methionine and arginine on the immune response of broiler chickens submitted to immunological stimuli. Three methionine concentrations (0.31, 0.51, and 0.66% from 1 to 21 days of age; 0.29, 0.49, and 0.64% from 22 to 42 days of age) and 2 arginine concentrations (1.33 and 1.83%; 1.14 and 1.64% for the same life periods) were tested. Birds were divided into two groups for immunological stimuli (3x2x2 arrangement). Vaccines against Marek's disease, fowl pox, infectious bronchitis, Freund's Complete Adjuvant, Sheep red blood cells (SRBC), and avian tuberculin were administered to one group as immunological stimuli; the other group did not receive any stimulus. The experiment was carried out with 432 one-day-old male Ross broilers, distributed into 12 treatments with 6 replicates of 6 birds each. Performance data were weekly collected. Anti-SRBC antibodies were collected by hemagglutination test and cell immune response (CIR) was measured by tubercularization reaction in one wattle 24 hours after administration of the second tuberculin injection at 42 days of age. The weight difference between the two wattles of each bird (one injected with tuberculin and the other not) was the measure of CIR. Arginine levels did not influence either bird performance or immune response. Methionine concentrations higher or lower than usually adopted in broiler production (0.51 and 0.49%) equally failed to influence the birds' immune humoral response, but the best CIR was observed at the intermediate methionine level. Vaccines administered on the first day of age impaired bird performance up to the 21st day of age.

Effects of methionine and arginine dietary levels on the immunity of broiler chickens submitted to immunological stimuli

The present study aimed at assessing the effects of methionine and arginine on the immune response of broiler chickens submitted to immunological stimuli. Three methionine concentrations (0.31, 0.51, and 0.66% from 1 to 21 days of age; 0.29, 0.49, and 0.64% from 22 to 42 days of age) and 2 arginine concentrations (1.33 and 1.83%; 1.14 and 1.64% for the same life periods) were tested. Birds were divided into two groups for immunological stimuli (3x2x2 arrangement). Vaccines against Marek's disease, fowl pox, infectious bronchitis, Freund's Complete Adjuvant, Sheep red blood cells (SRBC), and avian tuberculin were administered to one group as immunological stimuli; the other group did not receive any stimulus. The experiment was carried out with 432 one-day-old male Ross broilers, distributed into 12 treatments with 6 replicates of 6 birds each. Performance data were weekly collected. Anti-SRBC antibodies were collected by hemagglutination test and cell immune response (CIR) was measured by tubercularization reaction in one wattle 24 hours after administration of the second tuberculin injection at 42 days of age. The weight difference between the two wattles of each bird (one injected with tuberculin and the other not) was the measure of CIR. Arginine levels did not influence either bird performance or immune response. Methionine concentrations higher or lower than usually adopted in broiler production (0.51 and 0.49%) equally failed to influence the birds' immune humoral response, but the best CIR was observed at the intermediate methionine level. Vaccines administered on the first day of age impaired bird performance up to the 21st day of age.

Immunological evaluation of the intestinal mucosa of broiler chicks treated with Lactobacillus Spp. and challenged with Salmonella Enteritidis

This study aimed at the antibody production by intestinal mucosa of broilers chicks were orally inoculated with Lactobacillus spp. at one and/or 21 days of age, and subsequently challenged with Salmonella enterica, subspecies enterica, serotype Enteritidis (S. Enteritidis). A total number of 288 drug-free broiler chicks was divided into 6 groups (groups A, B, C, D, E, and F), according to age at Lactobacillus spp. inoculation and SE challenge. The intestinal mucosa immune response was determined as the production of immunoglobulin A against S. Enteritidis, and evaluated by the Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) technique in intestinal washing fluid. Groups treated with Lactobacillus spp. presented higher IgA production only when the chicks were challenged with S. Enteritidis at 21 days of age. Nevertheless, the expected stimulus for intestinal mucosa antibody production induced by Lactobacillus spp was observed in only some of the treated groups, demonstrating that the protocol utilized in the present experiment resulted in few beneficial effects for chicks, particularly during the first days of life.

Immunological evaluation of the intestinal mucosa of broiler chicks treated with Lactobacillus Spp. and challenged with Salmonella Enteritidis

This study aimed at the antibody production by intestinal mucosa of broilers chicks were orally inoculated with Lactobacillus spp. at one and/or 21 days of age, and subsequently challenged with Salmonella enterica, subspecies enterica, serotype Enteritidis (S. Enteritidis). A total number of 288 drug-free broiler chicks was divided into 6 groups (groups A, B, C, D, E, and F), according to age at Lactobacillus spp. inoculation and SE challenge. The intestinal mucosa immune response was determined as the production of immunoglobulin A against S. Enteritidis, and evaluated by the Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) technique in intestinal washing fluid. Groups treated with Lactobacillus spp. presented higher IgA production only when the chicks were challenged with S. Enteritidis at 21 days of age. Nevertheless, the expected stimulus for intestinal mucosa antibody production induced by Lactobacillus spp was observed in only some of the treated groups, demonstrating that the protocol utilized in the present experiment resulted in few beneficial effects for chicks, particularly during the first days of life.

Relação entre gênero e perfil comportamental de cães e seu sistema imunológico / Relationship between gender and behavioral profile of dogs and their immune system

Os comportamentos para formação da hierarquia surgem em cães domésticos (Canis familiaris) nas primeiras semanas de vida, na forma de posturas e brincadeiras. [...] Para estudar os efeitos de características da personalidade e gênero sobre parâmetros imunológico de cães domésticos, utilizamos 30 cães beagle (15 machos e 15 fêmeas). O comportamento foi observado, por meio de análise animal-focal, e determinamos seu perfil em relação ao ranking hierárquico. Foram avaliados o cortisol, a testosterona, a contagem de leucócitos totais e diferenciais, a atividade de neutrófilos (burst oxidativo e fagocitose) e a fenotipagem de linfócitos, no momento basal, após o estímulo estressor de transporte, e 15 dias após uma alteração de agrupamento. Os resultados mostram que, sem estímulos estressores, o burst oxidativo de neutrófilos é maior em fêmeas. O estímulo estressor do transporte aumenta a atividade de neutrófilos, independente do gênero. Foi observado que, sem estímulos estressores, o perfil de dominância não influencia os parâmetros analisados, porém após o transporte e o reagrupamento, animais com atitudes dominantes tiveram maior porcentagem e intensidade de fagocitose dos neutrófilos. Portanto, nosso trabalho, sendo pioneiro no assunto, mostra que estímulos estressores, o gênero e a personalidade do animal podem influenciar parâmetros imunológicos. Novas pesquisas devem ser realizadas a fim de elucidar o (s) mecanismo (s) de ação que promove (m) estes resultados e demais aspectos envolvidos nesta relação

Behaviors leading to the establishment of hierarchy appear in domestic dogs (Canis familiaris) in the first weeks of life, in the form of postures and games. [...] To study the effects of personality traits and gender on immune parameters of dogs, we used 30 beagles (15 males and 15 females). Behavior was observed, assessed and recorded, by animal-focal analyses, and the profile of each individual animal in its group, based on hierarchy ranking was described. We evaluated cortisol, testosterone, total leukocyte counts, and differential activity of neutrophils (oxidative burst and phagocytosis) and lymphocyte phenotyping. These parameters were assessed at baseline, after the stressor (stimulus of transportation), and 15 days after a change of the groups. Results show that without stressors, oxidative burst of neutrophils is higher in females. The stressor stimulus of transportation increases the activity of neutrophils regardless of gender. Without stressors, the profile of dominance does not influence the parameters measured, but after transport and reassembly, animals with dominant attitudes had the highest percentage and intensity of phagocytosis in neutrophils. Therefore, our work, being a pioneer in this subject, shows that depending on stressor stimuli, gender and personality of the animal influence immunological parameters. Further research should be conducted to elucidate the mechanism(s) of action that promotes these results and other aspects involved in this relationship

Relação entre gênero e perfil comportamental de cães e seu sistema imunológico / Relationship between gender and behavioral profile of dogs and their immune system

Os comportamentos para formação da hierarquia surgem em cães domésticos (Canis familiaris) nas primeiras semanas de vida, na forma de posturas e brincadeiras. [...] Para estudar os efeitos de características da personalidade e gênero sobre parâmetros imunológico de cães domésticos, utilizamos 30 cães beagle (15 machos e 15 fêmeas). O comportamento foi observado, por meio de análise animal-focal, e determinamos seu perfil em relação ao ranking hierárquico. Foram avaliados o cortisol, a testosterona, a contagem de leucócitos totais e diferenciais, a atividade de neutrófilos (burst oxidativo e fagocitose) e a fenotipagem de linfócitos, no momento basal, após o estímulo estressor de transporte, e 15 dias após uma alteração de agrupamento. Os resultados mostram que, sem estímulos estressores, o burst oxidativo de neutrófilos é maior em fêmeas. O estímulo estressor do transporte aumenta a atividade de neutrófilos, independente do gênero. Foi observado que, sem estímulos estressores, o perfil de dominância não influencia os parâmetros analisados, porém após o transporte e o reagrupamento, animais com atitudes dominantes tiveram maior porcentagem e intensidade de fagocitose dos neutrófilos. Portanto, nosso trabalho, sendo pioneiro no assunto, mostra que estímulos estressores, o gênero e a personalidade do animal podem influenciar parâmetros imunológicos. Novas pesquisas devem ser realizadas a fim de elucidar o (s) mecanismo (s) de ação que promove (m) estes resultados e demais aspectos envolvidos nesta relação (AU)

Behaviors leading to the establishment of hierarchy appear in domestic dogs (Canis familiaris) in the first weeks of life, in the form of postures and games. [...] To study the effects of personality traits and gender on immune parameters of dogs, we used 30 beagles (15 males and 15 females). Behavior was observed, assessed and recorded, by animal-focal analyses, and the profile of each individual animal in its group, based on hierarchy ranking was described. We evaluated cortisol, testosterone, total leukocyte counts, and differential activity of neutrophils (oxidative burst and phagocytosis) and lymphocyte phenotyping. These parameters were assessed at baseline, after the stressor (stimulus of transportation), and 15 days after a change of the groups. Results show that without stressors, oxidative burst of neutrophils is higher in females. The stressor stimulus of transportation increases the activity of neutrophils regardless of gender. Without stressors, the profile of dominance does not influence the parameters measured, but after transport and reassembly, animals with dominant attitudes had the highest percentage and intensity of phagocytosis in neutrophils. Therefore, our work, being a pioneer in this subject, shows that depending on stressor stimuli, gender and personality of the animal influence immunological parameters. Further research should be conducted to elucidate the mechanism(s) of action that promotes these results and other aspects involved in this relationship (AU)

Aspectos clínicos e imunopatológicos da ceratoplastia com membrana amniótica xenógena fresca e conservada em glicerina: estudo experimental em coelhos / Clinical and immunopathological aspects of keratoplasty with fresh and preserved in glycerin xenogenous amniotic membrane: experimental study in rabbits

Avaliaram-se, por meio da análise clínica, histopatologia e imunoistoquímica, os efeitos da aplicação da membrana amniótica xenógena fresca e conservada em glicerina, sobre os mecanismos imunológicos da superfície ocular. Para tal, utilizaram-se 40 coelhos, distribuídos em dois grupos experimentais, os quais foram avaliados por 21 dias. A avaliação clínica revelou que a membrana amniótica xenógena conservada em glicerina estimulou uma resposta inflamatória aguda maior que a membrana aplicada fresca. A análise histopatológica indicou que ambas se comportaram de forma semelhante a partir da primeira semana de pós-operatório, apresentando as alterações clássicas da resposta inflamatória da córnea, com o predomínio de infiltrado do tipo polimorfonuclear. A análise imunoistoquímica indicou que, ainda aos 21 dias, a resposta imune local é inespecífica, permitindo concluir que a resposta imune específica na córnea é tardia e que a córnea é um sítio privilegiado para aplicação de enxertos com características imunológicas diferentes, visto que não houve o estímulo para o desenvolvimento de uma resposta mais específica nos grupos avaliados durante toda a execução do experimento.(AU)

The dynamics of the inflammatory response and the mechanism involved in the healing process of cornea treated by keratoplasty, applying fresh and glycerin preserved xenogenous amniotic membranes as method to cover experimental ulcers were studied using 40 rabbits. The animals were allotted into two groups and evaluated during 21 days. The eyes were evaluated by histopathological study and immunohistochemical reaction. The clinical evaluation showed that the xenogenous amniotic membrane preserved in glycerin stimulated a greater acute inflammatory response than the one caused by fresh membrane. The histopathological analysis indicated that both membranes reacted in a very similar way from the first week post-surgery, presenting the classical alterations of the inflammatory response on the cornea. The immunohistochemical technique indicated that in no moment of the observation, the local immunologic response was specific. It was concluded that the specific immunologic response on the cornea took place later and that is a privileged site to use grafts with different immunological characteristics, once there was not a stimulus to the development of a more specific response in none of the evaluated groups throughout the experiment.(AU)

Induced aerocystitis and hemato-immunological parameters in Nile tilapia fed supplemented diet with essential oil of Lippia alba / Aerocistite induzida e parâmetros hemato-imunológicos em tilapia do Nilo suplementada com óleo essencial de Lippia alba

The present study evaluated the dietary supplementation with essential oil of Lippia alba on the hemato-immunological parameters of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) submitted to acute inflammation induced by carrageenin injection in the swim bladder. For a period of 45 days, 96 fish were divided in four treatments in triplicate, as follows: fish fed supplemented diet with essential oil of L. alba (4 mL kg-1 dry ration) injected with carrageenin; fish fed supplemented diet with cereal alcohol injected with carrageenin; fish fed unsupplemented diet with essential oil injected with carrageenin; fish fed unsupplemented diet and noninjected. Cortisol levels, erythrogram, leukogram and the inflammatory infiltrate were analyzed 6 h after inflammatory stimulus. Carrageenin-injected fish showed acute inflammatory reaction in the swim bladder characterized by higher infiltrate of neutrophils and monocytes. The circulating neutrophils number was significantly higher in fish fed L. alba when compared to other treatments. No difference in cortisol levels was found. For dose, time and administration form tested, supplementation with essential oil of L. alba did not present anti-inflammatory activity. On the other hand, influence of dietary supplementation was observed on the neutrophils number after induced aerocystitis highlighting its immunomodulatory characteristic.

O presente estudo avaliou a suplementação dietária com óleo essencial de Lippia alba sobre os parâmetros hemato-imunológicos em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) submetidas à inflamação aguda induzida por carragenina na bexiga natatória. Pelo período de 45 dias, 96 peixes foram divididos em quarto tratamentos em triplicata: a) peixes suplementados com óleo esencial de L. alba (4 mL kg-1 de ração) injetados com carragenina; b) peixes suplementados com álcool de cereais injetados com carragenina; peixes não suplementados com óleo essencial injetados com carragenina; c) peixes não suplementados não injetados. Os níveis de cortisol, eritrograma, leucograma e o infiltrado inflamatório foram analisados seis horas após o estímulo inflamatório. Peixes injetados com carragenina apresentaram reação inflamatória aguda na bexiga natatória caracterizada por maior infiltrado de neutrófilos e monócitos. O número de neutrófilos circulantes foi significativamente maior nos peixes suplementados com L. alba quando comparado aos outros tratamentos. Não houve diferença nos níveis de cortisol. Para a dose, o tempo e a forma de administração testada, a suplementação com óleo essencil de L. alba não apresentou atividade anti-inflamatória. Por outro lado, foi constatada influência da suplementação dietária no número de neutrófilos após a aerocistite enfatizando a sua característica imunomodulado

Induced aerocystitis and hemato-immunological parameters in Nile tilapia fed supplemented diet with essential oil of Lippia alba / Aerocistite induzida e parâmetros hemato-imunológicos em tilapia do Nilo suplementada com óleo essencial de Lippia alba

The present study evaluated the dietary supplementation with essential oil of Lippia alba on the hemato-immunological parameters of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) submitted to acute inflammation induced by carrageenin injection in the swim bladder. For a period of 45 days, 96 fish were divided in four treatments in triplicate, as follows: fish fed supplemented diet with essential oil of L. alba (4 mL kg-1 dry ration) injected with carrageenin; fish fed supplemented diet with cereal alcohol injected with carrageenin; fish fed unsupplemented diet with essential oil injected with carrageenin; fish fed unsupplemented diet and noninjected. Cortisol levels, erythrogram, leukogram and the inflammatory infiltrate were analyzed 6 h after inflammatory stimulus. Carrageenin-injected fish showed acute inflammatory reaction in the swim bladder characterized by higher infiltrate of neutrophils and monocytes. The circulating neutrophils number was significantly higher in fish fed L. alba when compared to other treatments. No difference in cortisol levels was found. For dose, time and administration form tested, supplementation with essential oil of L. alba did not present anti-inflammatory activity. On the other hand, influence of dietary supplementation was observed on the neutrophils number after induced aerocystitis highlighting its immunomodulatory characteristic.

O presente estudo avaliou a suplementação dietária com óleo essencial de Lippia alba sobre os parâmetros hemato-imunológicos em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) submetidas à inflamação aguda induzida por carragenina na bexiga natatória. Pelo período de 45 dias, 96 peixes foram divididos em quarto tratamentos em triplicata: a) peixes suplementados com óleo esencial de L. alba (4 mL kg-1 de ração) injetados com carragenina; b) peixes suplementados com álcool de cereais injetados com carragenina; peixes não suplementados com óleo essencial injetados com carragenina; c) peixes não suplementados não injetados. Os níveis de cortisol, eritrograma, leucograma e o infiltrado inflamatório foram analisados seis horas após o estímulo inflamatório. Peixes injetados com carragenina apresentaram reação inflamatória aguda na bexiga natatória caracterizada por maior infiltrado de neutrófilos e monócitos. O número de neutrófilos circulantes foi significativamente maior nos peixes suplementados com L. alba quando comparado aos outros tratamentos. Não houve diferença nos níveis de cortisol. Para a dose, o tempo e a forma de administração testada, a suplementação com óleo essencil de L. alba não apresentou atividade anti-inflamatória. Por outro lado, foi constatada influência da suplementação dietária no número de neutrófilos após a aerocistite enfatizando a sua característica imunomodulado

Avaliação dos efeitos do LPS sobre parâmetros comportamentais e imunológicos em camundongos idosos / Assessment of LPS effects on behavioral and immunological parameters in aged mice

Através do presente trabalho investigou-se a expressão do comportamento doentio e a atividade de neutrófilos sanguíneos de camundongos adultos, de meia idade e idosos, após o tratamento com lipopolissacarídeo de bactéria gram negativa (Escherichia coli). O comportamento doentio foi avaliado através da ingestão de alimentos e do peso corpóreo. Nos aparatos comportamentais Campo Aberto e Labirinto em cruz elevado, o comportamento doentio foi avaliado através da atividade geral, da exploração e dos níveis de ansiedade. A atividade de neutrófilos sanguíneos foi estudada através de citometria de fluxo, analisando-se a intensidade e porcentagem de neutrófilos que realizaram fagocitose e da intensidade e porcentagem de neutrófilos que realizaram burst oxidativo, ambos induzidos pelo estímulo in vitro da bactéria Staphylococcus aureus. Os animais foram tratados com solução salina ou LPS (na dose de 200 µg/kg) avaliações foram realizadas 2 horas após o tratamento. No caso da ingestão de alimentos e do peso corpóreo, as avaliações foram realizadas durante 3 dias anteriores ao experimento, e durante 7 dias posteriores ao experimento. Os resultados demonstraram que animais idosos apresentaram diferenças na expressão do comportamento doentio, sendo que houve uma maior motivação em explorar os aparatos comportamentais. Apesar da manutenção da exploração no Campo Aberto e Labirinto em Cruz elevado, a redução da ingestão de alimentos e do peso corpóreo apresentou-se mais acentuada nos camundongos de meia idade e idosos, após tratamento com LPS. A atividade de neutrófilos sanguíneos, avaliadas pela fagocitose e burst oxidativo, apresentou-se aumentada em camundongos idosos após tratamento com LPS. A menor migração de neutrófilos sanguíneos à cavidade peritoneal parece ser responsável por esse aumento de atividade dos neutrófilos de camundongos idosos. Esses resultados sugerem que a expressão do comportamento doentio de camundongos idosos é diferente, com manutenção do comportamento de exploração, e que esses camundongos seriam mais susceptíveis aos efeitos do choque endotóxico, devido à presença de maior quantidade de neutrófilos ativados no sangue

Through the present work, it has been investigated the expression of sickness behavior and blood neutrophils activity in adult, middle-aged and aged mice, after gram negative (Escherichia coli) lipopolysaccharide treatment. Sickness behavior was evaluated through food ingestion and body weight. On the behavioral apparatus Open Field and Elevated Plus Maze, sickness behavior was evaluated through general activity, exploration and anxiety levels. Blood neutrophils activity was studied through flow cytometric analysis, assessing neutrophil\'s intensity and percentage of phagocytosis and neutrophil\'s intensity and percentage of oxidative burst, both induced by in vitroM stimulus of Staphylococcus aureus bacteria. Animals were treated either with saline solution or LPS (in the 200 µg/kg dose) and analysis were done 2 hours after treatment. In the case of food ingestioin and body weight, analysis were done through 3 days before experiment, and during 7 days after experiment. Results demonstrated that aged animals showed differences in sickness behavior expression, with a greater motivation to explore behavioral apparatus. Despite maintenance of Open Field and Elevated Plus Maze exploration, reduction in food ingestion and body weight were more pronounced in middle-aged and aged mice, after LPS treatment. Blood neutrophils activity, analysed through phagocytosis and oxidative burst, were higher in aged mice after LPS treatment. Lesser blood neutrophils migration to peritoneal cavity seems to be responsible for this enhancement in neutrophil activity. These results suggest that the expression of sickness behavior in aged mice is different, with maintenance of exploratory behavior, and that these mice would be more susceptible to endotoxic effects, due to the presence of higher quantity of activated neutrophils in blood

Leptospirose canina: diagnóstico etiológico, sorológico e molecular e avaliação da proteção cruzada entre os sorovares icterohaemorrhagiae e copenhageni / Canine leptospirosis: e etiological, serological and molecular diagnosis and evaluation of cross-protection between sevorars icterohaemorrhagiae and copenhageni

Realizou-se a pesquisa de anticorpos aglutinantes (AcA) anti-leptospira, através da técnica de soroaglutinação microscópica (SAM) e tentativas de isolamento do agente etiológico em 29 cães com suspeita clínica de leptospirose. Foi também realizada a pesquisa de material genético de Leptospira spp., utilizando-se a técnica de reação em cadeia de polimerase (PCR) em 24 amostras de urina dos mesmos cães. Com o objetivo de determinar a proteção cruzada entre os sorovares icterohaemorrhagiae e copenhageni, 24 cães adultos foram avaliados antes e após a vacinação com uma dose de vacina contendo os antígenos icterohaemorrhagiae, canicola, grippotyphosa e pomona, utilizando-se o teste de inibição de crescimento in vitro (TIC) dos sorovares canicola, copenhageni e icterohaemorrhagiae. Os títulos de AcA anti-copenhageni foram os mais freqüentemente observados nos cães com suspeita clínica de leptospirose, havendo entretanto, reação cruzada entre diferentes sorovares. Foram isoladas quatro amostras de leptospira, das quais três foram caracterizadas por anticorpos policlonais e por Variable Number Tandem Repeat (VNTR) como sorovar canicola. A quarta amostra isolada reagiu em alto título com o anti-soro policlonal anti-sorovar copenhageni (51.200), não tendo sido testado com o anti-soro anti-icterohaemorrhagiae. Pela técnica de VNTR, essa amostra foi classificada como pertencente ao sorogrupo icterohaemorrhagiae e, finalmente, pelo uso dos anticorpos monoclonais F70 C24, F70 C14-10, F12 C3-11 e F89 C12, para a diferenciação dos representantes do sorogrupo icterohaemorrhagiae, essa amostra isolada apresentou o comportamento imunológico do sorovar copenhageni (cepa padrão L1 130, FIOCRUZ - Bahia). Considerando-se como critério sorológico de confirmação do diagnóstico clínico de leptospirose, títulos maiores ou iguais a 800 em amostra única de soro, ou o aumento ou declínio de quatro vezes os títulos de AcA (duas diluições) em duas amostras pareadas de soro, houve a confirmação do diagnóstico etiológico em 9 de 24 cães (37,5%) pela SAM. Por outro lado, 11 das 24 amostras de urina (45,8%) foram positivas à PCR. A associação das duas técnicas permitiu a confirmação diagnóstica em 15 cães (62,5%). Os títulos de anticorpos neutralizantes (AcN) (TL50) pré-vacinais contra os sorovares icterohaemorrhagiae, canicola e copenhageni foram respectivamente de 1,444±0,278, 0,725±0,317 e 0,583±0,322, e os títulos pós-vacinais foram respectivamente de 1,455±0,287, 1,475±0,270 e 0,510±0,304. Considerando-se o título de AcN maior ou igual a 1 como título protetor contra a infecção leptospírica, no momento pré-vacinal, os cães ainda apresentavam AcN contra o sorovar icterohaemorrhagiae capazes de protegê-los contra a infecção natural, não tendo havido também uma resposta adicional ao estímulo vacinal. Com relação ao sorovar canicola, houve aumento significativo dos títulos de AcN após a imunização (p=0,001) quando comparado ao momento pré-vacinal, tendo sido desenvolvida uma resposta protetora. Embora os animais não tenham sido vacinados contra o sorovar copenhageni, a presença de AcN pré-vacinal e pós-vacinal pode ser justificada pela reatividade cruzada entre ambos, copenhageni e icterohaemorrhagiae, pertencentes ao mesmo sorogrupo; entretanto os títulos pré- e pós-vacinais não foram da mesma magnitude dos produzidos contra o sorovar icterohaemorrhagiae. Portanto, a vacina contendo bacterina do sorovar icterohaemorrhagiae não é capaz de eliciar resposta protetora contra o sorovar heterólogo copenhageni

A research on agglutinating antibodies (AAc) anti-leptospira has been performed, through microscopic agglutination test (MAT) and attempts of isolation of the etiologic agent in 29 dogs with clinical suspicious of leptospirosis. There was also made a research of Leptospira spp.´s genetic material, using polimerase chain reaction (PCR) in 24 urine samples of the same dogs. With the aim to determine the cross protection between serovars icterohaemorrhagiae and copenhageni, 24 adult dogs were evaluated before and after vaccination with one dose of a vaccine containing icterohaemorrhagiae, canicola, grippotyphosa and pomona antigens, by the in vitro inhibition growth test (GIT) of serovars canicola, icterohaemorrhagiae and copenhageni. The AAc anti-copenhageni titers were the most frequently obseeved in the dogs with clinical suspicious of leptospirosis, existing however, cross reaction among different serovars. There were isolated four samplas of leptospira, of witch three were all characterizated by polyclonal antibodies and Variable Nunber Tandem Repeat (VNTR) as serovar canicola. The fourth isolated sample reacted in high titers to polyclonal antisera anti-copenhageno (51.200), but is was not tested with antisera anti-icterohaemorrhagiae. By VNTR technique, this sample was classified as belonging to the serogroup icterohaemorrhagiae, and finally by the use of monoclonal antibodies F70 C24, F70 C14-10, F12 C3-11 and F89 C12, for differentiation of the representatives of serogroup icterohaemorrhagiae. This isolated sample presented the immunological behavior of serovar copenhageni (standard strain LI 130, FIOCRUZ - Bahia). Considering the sorologic criteria confirmation of clinical diagnosis of leptospirosis, titers higher or equal than 800 in a unique serum sample, or the increase or decrease of four times of AAc titers (two dilutions) in two paired serum samples, there was the conformation of etiologic diagnosis in 9 of the 24 dogs (37,5%) by MAT. However, 11 out of 24 urine samples (45,8%) were positive at PCR. The association of both techniques allowed the diagnostic conformation in 15 dogs (62,5%). The prevaccinal neutralizing antibodies (NAc) titers (TL50) were respectively 1,444±0,278, 0,725±0,317 and 0,583±0,322. And the postvaccinal titers were respectively 1,455±0,287, 1,475±0,270 and 0,510±0,304. Considering the NAc titer higher than 1 as a protective titer against leptospiral infection, at prevaccinal moment the dogs still presented NAc against serovar icterohaemorrhagiae capable to protect them against natural infection, an adictional response to the vaccinal stimulus had not occurred. Concerning serovar canicola, there was a significant increase of NAc titers after immunization (p=0,001) when compared to prevaccinal moment, and a protective response was developed. Although the animals were not vacinated against serovar copenhageni, the presence of prevaccinal and postvaccinal NAc can be explained by cross reactivity between both, copenhageni and icterohaemorrhagiae, belonging to same serogroup; however, the pre- and postvaccinal titers were not of the same magnitude of those produced against serovar icterohaemorrhagiae. Therefore, the vaccine containing bacterins of serovar icterohaemorrhagiae is not capable of eliciting protective response against the heterologous serovar copenhageni