Drug resistance and susceptibility testing of Gram negative bacterial isolates from healthy cattle with different Lactam resistance Phenotypes from Shandong province China

Abstract The objective of this study was to evaluate the effectiveness of common antibiotics against different microorganisms in apparently healthy cattle in Shandong province and its suburb. A total of 220 nasal swab samples were collected and cultured for bacteriological evaluation. All the bacteria isolates after preliminary identification were subjected to antibiogram studies following disc diffusion method. It was found in the study that E. coli is the most commonly associated isolate (21%), followed by Klebsiella spp. (18%), Pseudomonas aeruginosa (13%), Salmonella spp. (15%), Shigella spp (12%), and Proteus spp (11%). While the antibiogram studies reveled that highest number of bacterial isolates showed resistance to Ampicillin (95%), followed by Augmentin (91%), Cefuroxime (85%) and Tetracycline (95%) of (Escherichia coli and Klebsiella spp). In the case of pseudomonas spp. and Salmonella the highest resistance was showed by Ampicillin (90%) followed by Amoxicillin + Clavulanic Acid (80%), Cefixime (90%), and Erythromycin (80%). In Shigella spp and Salmonella spp highest resistance was showed by Amoxicillin, Ceftazidime, Augmentin (60%), and Amoxicillin + Clavulanic Acid (50%). It is concluded that in vitro antibiogram studies of bacterial isolates revealed higher resistance for Ampicillin, Augmentin, Cefuroxime, Cefixime, Tetracycline, Erythromycin, and Amoxicillin + Clavulanic Acid. The high multiple Antibiotics resistance indexes (MARI) observed in all the isolates in this study ranging from 0.6 to 0.9. MARI value of >0.2 is suggests multiple antibiotic resistant bacteria and indicate presence of highly resistant bacteria.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia dos antibióticos comuns contra diferentes microrganismos em bovinos aparentemente saudáveis na província de Shandong e seus subúrbios. Um total de 220 amostras de esfregaço nasal foi coletado e cultivado para avaliação bacteriológica. Todos os isolados de bactérias após identificação preliminar foram submetidos a estudos de antibiograma seguindo o método de difusão em disco. Verificou-se no estudo que E. coli é o isolado mais comumente associado (21%), seguido por Klebsiella spp. (18%), Pseudomonas aeruginosa (13%), Salmonella spp. (15%), Shigella spp (12%) e Proteus spp (11%). Enquanto os estudos de antibiograma revelaram que o maior número de isolados bacterianos apresentou resistência à Ampicilina (95%), seguido por Augmentin (91%), Cefuroxima (85%) e Tetraciclina (95%) de (Escherichia coli e Klebsiella spp). No caso de Pseudomonas spp. e Salmonella, a maior resistência foi apresentada pela Ampicilina (90%) seguida pela Amoxicilina + Ácido Clavulânico (80%), Cefixima (90%) e Eritromicina (80%). Em Shigella spp e Salmonella spp, a maior resistência foi demonstrada por Amoxicilina, Ceftazidima, Augmentina (60%) e Amoxicilina + Ácido Clavulânico (50%). Conclui-se que estudos de antibiograma in vitro de isolados bacterianos revelaram maior resistência para Ampicilina, Augmentina, Cefuroxima, Cefixima, Tetraciclina, Eritromicina e Amoxicilina + Ácido Clavulânico. Os altos índices de resistência a antibióticos múltiplos (MARI) observados em todos os isolados neste estudo variaram de 0,6 a 0,9. O valor MARI de > 0,2 sugere várias bactérias resistentes a antibióticos e indica a presença de bactérias altamente resistentes.

Drug resistance and susceptibility testing of Gram negative bacterial isolates from healthy cattle with different β – Lactam resistance Phenotypes from Shandong province China / Teste de resistência a drogas e suscetibilidade de isolados bacterianos Gram negativos de bovinos saudáveis com diferentes fenótipos de resistência a β - lactâmicos da província de Shandong, China

The objective of this study was to evaluate the effectiveness of common antibiotics against different microorganisms in apparently healthy cattle in Shandong province and its suburb. A total of 220 nasal swab samples were collected and cultured for bacteriological evaluation. All the bacteria isolates after preliminary identification were subjected to antibiogram studies following disc diffusion method. It was found in the study that E. coli is the most commonly associated isolate (21%), followed by Klebsiella spp. (18%), Pseudomonas aeruginosa (13%), Salmonella spp. (15%), Shigella spp (12%), and Proteus spp (11%). While the antibiogram studies reveled that highest number of bacterial isolates showed resistance to Ampicillin (95%), followed by Augmentin (91%), Cefuroxime (85%) and Tetracycline (95%) of (Escherichia coli and Klebsiella spp). In the case of pseudomonas spp. and Salmonella the highest resistance was showed by Ampicillin (90%) followed by Amoxicillin + Clavulanic Acid (80%), Cefixime (90%), and Erythromycin (80%). In Shigella spp and Salmonella spp highest resistance was showed by Amoxicillin, Ceftazidime, Augmentin (60%), and Amoxicillin + Clavulanic Acid (50%). It is concluded that in vitro antibiogram studies of bacterial isolates revealed higher resistance for Ampicillin, Augmentin, Cefuroxime, Cefixime, Tetracycline, Erythromycin, and Amoxicillin + Clavulanic Acid. The high multiple Antibiotics resistance indexes (MARI) observed in all the isolates in this study ranging from 0.6 to 0.9. MARI value of >0.2 is suggests multiple antibiotic resistant bacteria and indicate presence of highly resistant bacteria.

O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia dos antibióticos comuns contra diferentes microrganismos em bovinos aparentemente saudáveis na província de Shandong e seus subúrbios. Um total de 220 amostras de esfregaço nasal foi coletado e cultivado para avaliação bacteriológica. Todos os isolados de bactérias após identificação preliminar foram submetidos a estudos de antibiograma seguindo o método de difusão em disco. Verificou-se no estudo que E. coli é o isolado mais comumente associado (21%), seguido por Klebsiella spp. (18%), Pseudomonas aeruginosa (13%), Salmonella spp. (15%), Shigella spp (12%) e Proteus spp (11%). Enquanto os estudos de antibiograma revelaram que o maior número de isolados bacterianos apresentou resistência à Ampicilina (95%), seguido por Augmentin (91%), Cefuroxima (85%) e Tetraciclina (95%) de (Escherichia coli e Klebsiella spp). No caso de Pseudomonas spp. e Salmonella, a maior resistência foi apresentada pela Ampicilina (90%) seguida pela Amoxicilina + Ácido Clavulânico (80%), Cefixima (90%) e Eritromicina (80%). Em Shigella spp e Salmonella spp, a maior resistência foi demonstrada por Amoxicilina, Ceftazidima, Augmentina (60%) e Amoxicilina + Ácido Clavulânico (50%). Conclui-se que estudos de antibiograma in vitro de isolados bacterianos revelaram maior resistência para Ampicilina, Augmentina, Cefuroxima, Cefixima, Tetraciclina, Eritromicina e Amoxicilina + Ácido Clavulânico. Os altos índices de resistência a antibióticos múltiplos (MARI) observados em todos os isolados neste estudo variaram de 0,6 a 0,9. O valor MARI de > 0,2 sugere várias bactérias resistentes a antibióticos e indica a presença de bactérias altamente resistentes.

Drug resistance and susceptibility testing of Gram negative bacterial isolates from healthy cattle with different β Lactam resistance Phenotypes from Shandong province China / Teste de resistência a drogas e suscetibilidade de isolados bacterianos Gram negativos de bovinos saudáveis com diferentes fenótipos de resistência a β - lactâmicos da província de Shandong, China

The objective of this study was to evaluate the effectiveness of common antibiotics against different microorganisms in apparently healthy cattle in Shandong province and its suburb. A total of 220 nasal swab samples were collected and cultured for bacteriological evaluation. All the bacteria isolates after preliminary identification were subjected to antibiogram studies following disc diffusion method. It was found in the study that E. coli is the most commonly associated isolate (21%), followed by Klebsiella spp. (18%), Pseudomonas aeruginosa (13%), Salmonella spp. (15%), Shigella spp (12%), and Proteus spp (11%). While the antibiogram studies reveled that highest number of bacterial isolates showed resistance to Ampicillin (95%), followed by Augmentin (91%), Cefuroxime (85%) and Tetracycline (95%) of (Escherichia coli and Klebsiella spp). In the case of pseudomonas spp. and Salmonella the highest resistance was showed by Ampicillin (90%) followed by Amoxicillin + Clavulanic Acid (80%), Cefixime (90%), and Erythromycin (80%). In Shigella spp and Salmonella spp highest resistance was showed by Amoxicillin, Ceftazidime, Augmentin (60%), and Amoxicillin + Clavulanic Acid (50%). It is concluded that in vitro antibiogram studies of bacterial isolates revealed higher resistance for Ampicillin, Augmentin, Cefuroxime, Cefixime, Tetracycline, Erythromycin, and Amoxicillin + Clavulanic Acid. The high multiple Antibiotics resistance indexes (MARI) observed in all the isolates in this study ranging from 0.6 to 0.9. MARI value of >0.2 is suggests multiple antibiotic resistant bacteria and indicate presence of highly resistant bacteria.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia dos antibióticos comuns contra diferentes microrganismos em bovinos aparentemente saudáveis na província de Shandong e seus subúrbios. Um total de 220 amostras de esfregaço nasal foi coletado e cultivado para avaliação bacteriológica. Todos os isolados de bactérias após identificação preliminar foram submetidos a estudos de antibiograma seguindo o método de difusão em disco. Verificou-se no estudo que E. coli é o isolado mais comumente associado (21%), seguido por Klebsiella spp. (18%), Pseudomonas aeruginosa (13%), Salmonella spp. (15%), Shigella spp (12%) e Proteus spp (11%). Enquanto os estudos de antibiograma revelaram que o maior número de isolados bacterianos apresentou resistência à Ampicilina (95%), seguido por Augmentin (91%), Cefuroxima (85%) e Tetraciclina (95%) de (Escherichia coli e Klebsiella spp). No caso de Pseudomonas spp. e Salmonella, a maior resistência foi apresentada pela Ampicilina (90%) seguida pela Amoxicilina + Ácido Clavulânico (80%), Cefixima (90%) e Eritromicina (80%). Em Shigella spp e Salmonella spp, a maior resistência foi demonstrada por Amoxicilina, Ceftazidima, Augmentina (60%) e Amoxicilina + Ácido Clavulânico (50%). Conclui-se que estudos de antibiograma in vitro de isolados bacterianos revelaram maior resistência para Ampicilina, Augmentina, Cefuroxima, Cefixima, Tetraciclina, Eritromicina e Amoxicilina + Ácido Clavulânico. Os altos índices de resistência a antibióticos múltiplos (MARI) observados em todos os isolados neste estudo variaram de 0,6 a 0,9. O valor MARI de > 0,2 sugere várias bactérias resistentes a antibióticos e indica a presença de bactérias altamente resistentes.(AU)

Resistant enterococci isolated from raw sheep's milk and cheeses from South region of Brazil / Enterococos resistentes isolados de leite cru de ovelha e queijos da região Sul do Brasil

Enterococci have been used as sentinel organisms for monitoring antimicrobial resistance in food, humans, and other animals. In this sense, the present study evaluated the antimicrobial susceptibility profile and the presence of genes associated with resistance to erythromycin (msrC and ermB) and tetracycline [tet(M) and/or tet(L)] in enterococci isolated from raw sheep's milk and cheeses (colonial, feta-, and pecorino-type) from South region of Brazil. A total of 156 enterococci were isolated from milk (n=80) and cheese (n=76) samples, identified by MALDI-TOF. Enterococcus faecalis (50.6%; n=79) was the most frequent species isolated from both samples. According to in vitro susceptibility tests, enterococci strains were not susceptible to the most commonly antimicrobial agents used in human and veterinary medicine. The frequency of MDR strains in enterococci isolated from milk (53.7%) was higher than those from cheese (24.2%). The tet(M) gene was the most commonly detected among tetracycline not-susceptible strains. The present study provided the first evidence of antimicrobial not-susceptible enterococci in raw sheep's milk and cheeses in South Brazil. Drug-resistant strains, particularly those that are MDR, constitute a One Health issue.

Os enterococos têm sido usados como organismos sentinela para monitorar o padrão de suscetibilidade a antimicrobianos em alimentos, humanos e outros animais. Neste sentido, o presente estudo objetivou avaliar o perfil de susceptibilidade a antimicrobianos e os genes associados com a resistência a eritromicina (msrC and ermB) e à tetraciclina [tet(M) and/or tet(L)] em enterococos isolados de leite cru de ovelha e queijos (colonial, tipo-feta e tipo-pecorino) do Sul do Brasil. Um total de 156 enterococos foram isolados de leite (n=80) e queijo (n=76), identificados por MALDI-TOF. Enterococcus faecalis (50,6%; n=79) foi a espécie mais frequentemente isolada de ambas as amostras. De acordo com o teste de suscetibilidade in vitro, as cepas de enterococos não foram susceptíveis aos agentes antimicrobianos mais comumente utilizados na clínica humana e veterinária. A frequência de cepas de enterococos MDR isoladas do leite (53,7%) foi superior à do queijo (24,2%). O gene tet(M) foi o mais comumente detectado entre as cepas não susceptíveis à tetraciclina. O presente estudo fornece as primeiras evidências de enterococos não susceptíveis aos antimicrobianos em leite cru de ovelha e queijos no Sul do Brasil. Cepas resistentes a drogas, particularmente as que são MDR, representam uma preocupação de Saúde Única.

Spectral analysis, in vitro cytotoxicity and antibacterial studies of bioactive principles from the leaves of Conocarpus lancifolius, a common tree of Jazan, Saudi Arabia / Análise espectral, citotoxicidade in vitro e estudos antibacterianos de princípios bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius, uma árvore comum de Jazan, Arábia Saudita

The objective of the present study was to analyse the bioactive compounds of the leaves of Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). The GC-MS analysis of the hot methanolic extract of the leaves (HMEL) of C. lancifolius exhibited the bioactive compounds such as 1-(3-Methoxy-2-nitrobenzyl) iso quinoline, morphin-4-ol-6,7-dione, 1-bromo N-methyl-, phytol, hexadecanoic acid, 2,3-dihydroxypropyl ester, 2,2’:4’,2”-terthiophene, ethyl iso-allocholate, caryophyllene oxide, campesterol, epiglobulol, cholestan-3-ol, 2-methylene-, (3á,5à)-, dasycarpidan-1-methanol, acetate (ester) and oleic acid, eicosyl ester. The FT-IR analysis of HMEL of C. lancifolius showed a unique peak at 3184, 2413, 1657 cm-¹ representing coumaric acid, chlorogenic acid and ferulic acid. The HMEL of C. lancifolius was actively inhibiting the proliferation of breast cancer cells MCF-7 ATCC at the concentration of 72.66 ± 8.21 µg/ml as IC50 value. The HMEL of C. lancifolius also revealed a good spectrum of activity against Gram-positive and Gram negative bacterial cultures screened in this work. The activity observed has shown more or less similar effects against screened bacteria. However, the magnitude of potentiality was significantly lesser compared to standard ciprofloxacin disc at p< 0.001 level (99% confidence intervals). Furthermore, the study demonstrating the bioactive compounds can be isolated from the leaves of C. lancifolius.

O objetivo do presente estudo foi analisar os compostos bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). A análise por GC-MS do extrato metanólico quente das folhas (HMEL) de C. lancifolius exibiu os compostos bioativos como 1- (3-Metoxi-2-nitrobenzil) isoquinolina, morfina-4-ol-6,7- diona, 1-bromo-N-metil-, fitol, ácido hexadecanoico, 2,3-di-hidroxipropil éster, 2,2 ‘: 4’, 2 ” - tertiofeno, isoalocolato de etil, óxido de cariofileno, campesterol, epiglobulol, colestano -3-ol, 2-metileno-, (3á, 5à) -, dasycarpidan-1-metanol, acetato (éster) e ácido oleico, éster eicosílico. A análise FT-IR de HMEL de C. lancifolius mostrou um pico único em 3184, 2413, 1657 cm-¹ representando ácido cumarico, ácido clorogênico e ácido ferúlico. O HMEL de C. lancifolius inibiu ativamente a proliferação de células de câncer de mama MCF-7 ATCC na concentração de 72,66 ± 8,21 µg/ml como valor de IC50. O HMEL de C. lancifolius também revelou bom espectro de atividade contra culturas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas rastreadas neste trabalho. A atividade observada mostrou efeitos mais ou menos semelhantes contra bactérias rastreadas. No entanto, a magnitude da potencialidade foi significativamente menor em comparação com o disco de ciprofloxacina padrão em nível de p < 0,001 (intervalos de confiança de 99%). Além disso, o estudo demonstrando os compostos bioativos pode ser isolado das folhas de C. lancifolius.

Spectral analysis, in vitro cytotoxicity and antibacterial studies of bioactive principles from the leaves of Conocarpus lancifolius, a common tree of Jazan, Saudi Arabia / Análise espectral, citotoxicidade in vitro e estudos antibacterianos de princípios bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius, uma árvore comum de Jazan, Arábia Saudita

The objective of the present study was to analyse the bioactive compounds of the leaves of Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). The GC-MS analysis of the hot methanolic extract of the leaves (HMEL) of C. lancifolius exhibited the bioactive compounds such as 1-(3-Methoxy-2-nitrobenzyl) iso quinoline, morphin-4-ol-6,7-dione, 1-bromo N-methyl-, phytol, hexadecanoic acid, 2,3-dihydroxypropyl ester, 2,2:4,2”-terthiophene, ethyl iso-allocholate, caryophyllene oxide, campesterol, epiglobulol, cholestan-3-ol, 2-methylene-, (3á,5à)-, dasycarpidan-1-methanol, acetate (ester) and oleic acid, eicosyl ester. The FT-IR analysis of HMEL of C. lancifolius showed a unique peak at 3184, 2413, 1657 cm-¹ representing coumaric acid, chlorogenic acid and ferulic acid. The HMEL of C. lancifolius was actively inhibiting the proliferation of breast cancer cells MCF-7 ATCC at the concentration of 72.66 ± 8.21 µg/ml as IC50 value. The HMEL of C. lancifolius also revealed a good spectrum of activity against Gram-positive and Gram negative bacterial cultures screened in this work. The activity observed has shown more or less similar effects against screened bacteria. However, the magnitude of potentiality was significantly lesser compared to standard ciprofloxacin disc at p< 0.001 level (99% confidence intervals). Furthermore, the study demonstrating the bioactive compounds can be isolated from the leaves of C. lancifolius.(AU)

O objetivo do presente estudo foi analisar os compostos bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). A análise por GC-MS do extrato metanólico quente das folhas (HMEL) de C. lancifolius exibiu os compostos bioativos como 1- (3-Metoxi-2-nitrobenzil) isoquinolina, morfina-4-ol-6,7- diona, 1-bromo-N-metil-, fitol, ácido hexadecanoico, 2,3-di-hidroxipropil éster, 2,2 ‘: 4, 2 ” - tertiofeno, isoalocolato de etil, óxido de cariofileno, campesterol, epiglobulol, colestano -3-ol, 2-metileno-, (3á, 5à) -, dasycarpidan-1-metanol, acetato (éster) e ácido oleico, éster eicosílico. A análise FT-IR de HMEL de C. lancifolius mostrou um pico único em 3184, 2413, 1657 cm-¹ representando ácido cumarico, ácido clorogênico e ácido ferúlico. O HMEL de C. lancifolius inibiu ativamente a proliferação de células de câncer de mama MCF-7 ATCC na concentração de 72,66 ± 8,21 µg/ml como valor de IC50. O HMEL de C. lancifolius também revelou bom espectro de atividade contra culturas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas rastreadas neste trabalho. A atividade observada mostrou efeitos mais ou menos semelhantes contra bactérias rastreadas. No entanto, a magnitude da potencialidade foi significativamente menor em comparação com o disco de ciprofloxacina padrão em nível de p < 0,001 (intervalos de confiança de 99%). Além disso, o estudo demonstrando os compostos bioativos pode ser isolado das folhas de C. lancifolius.(AU)

Spectral analysis, in vitro cytotoxicity and antibacterial studies of bioactive principles from the leaves of Conocarpus lancifolius, a common tree of Jazan, Saudi Arabia

Abstract The objective of the present study was to analyse the bioactive compounds of the leaves of Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). The GC-MS analysis of the hot methanolic extract of the leaves (HMEL) of C. lancifolius exhibited the bioactive compounds such as 1-(3-Methoxy-2-nitrobenzyl) iso quinoline, morphin-4-ol-6,7-dione, 1-bromo-N-methyl-, phytol, hexadecanoic acid, 2,3-dihydroxypropyl ester, 2,2':4',2-terthiophene, ethyl iso-allocholate, caryophyllene oxide, campesterol, epiglobulol, cholestan-3-ol, 2-methylene-, (3á,5à)-, dasycarpidan-1-methanol, acetate (ester) and oleic acid, eicosyl ester. The FT-IR analysis of HMEL of C. lancifolius showed a unique peak at 3184, 2413, 1657 cm-1 representing coumaric acid, chlorogenic acid and ferulic acid. The HMEL of C. lancifolius was actively inhibiting the proliferation of breast cancer cells MCF-7 ATCC at the concentration of 72.66 ± 8.21 µg/ml as IC50 value. The HMEL of C. lancifolius also revealed a good spectrum of activity against Gram-positive and Gram-negative bacterial cultures screened in this work. The activity observed has shown more or less similar effects against screened bacteria. However, the magnitude of potentiality was significantly lesser compared to standard ciprofloxacin disc at p 0.001 level (99% confidence intervals). Furthermore, the study demonstrating the bioactive compounds can be isolated from the leaves of C. lancifolius.

Resumo O objetivo do presente estudo foi analisar os compostos bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). A análise por GC-MS do extrato metanólico quente das folhas (HMEL) de C. lancifolius exibiu os compostos bioativos como 1- (3-Metoxi-2-nitrobenzil) isoquinolina, morfina-4-ol-6,7- diona, 1-bromo-N-metil-, fitol, ácido hexadecanoico, 2,3-di-hidroxipropil éster, 2,2 ': 4', 2 - tertiofeno, isoalocolato de etil, óxido de cariofileno, campesterol, epiglobulol, colestano -3-ol, 2-metileno-, (3á, 5à) -, dasycarpidan-1-metanol, acetato (éster) e ácido oleico, éster eicosílico. A análise FT-IR de HMEL de C. lancifolius mostrou um pico único em 3184, 2413, 1657 cm-1 representando ácido cumarico, ácido clorogênico e ácido ferúlico. O HMEL de C. lancifolius inibiu ativamente a proliferação de células de câncer de mama MCF-7 ATCC na concentração de 72,66 ± 8,21 µg / ml como valor de IC50. O HMEL de C. lancifolius também revelou bom espectro de atividade contra culturas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas rastreadas neste trabalho. A atividade observada mostrou efeitos mais ou menos semelhantes contra bactérias rastreadas. No entanto, a magnitude da potencialidade foi significativamente menor em comparação com o disco de ciprofloxacina padrão em nível de p 0,001 (intervalos de confiança de 99%). Além disso, o estudo demonstrando os compostos bioativos pode ser isolado das folhas de C. lancifolius.

Evaluation of the interaction of citral, geraniol and thymol on the poultry red mite Dermanyssus gallinae (DE GEER, 1778) under in vitro conditions / Avaliação da interação de citral, geraniol e timol no ácaro-vermelho-das-aves Dermanyssus gallinae(DE GEER, 1778) em condições in vitro

The control of Dermanyssus gallinaein small productions of laying hens is carried out by using chemical methods. However, its indiscriminate use has generated resistance and environmental pollution problems. This problem has encouraged the use of natural substances to control mites. Thus, the objective of this work was to evaluate the acaricidal activity of the bioactivecitral (Ci), geraniol (Ge) and thymol (Thy) on D. gallinae under in vitro conditions using six concentrations (0.05, 1, 2, 3, 4 and 5g/mL). In addition, the interactions of the mixtures of the three bioactive were evaluated through binary (1:1) and tertiary (1:1:1) combinations. The interaction between of the combination of bioactive was performed by using CompuSyn software and calculating the combination index (CI). LC50, LC90, and LC99with 95% confidence limits were estimated by Probit analysis. The bioactive Ci, Ge and Thy showacaricidal activity on the poultry red mite. The combination of Ge:Thy and Ci:Ge showed very strong synergism with CI of 0.084 and 0.052, whereas Ci:Thy showed strong synergism with CI of 0.122 at a concentration of 0.05g/mL. Thetertiary combination in 1:1:1 showed a higher toxic effect and strong synergistic effects at low concentrations with 100% mortality at 1g/mL concentration with a CI of 0.147. The combination of natural bioactive could be an additional way to control D. gallinae without putting thewelfare of the birds at risk and would be an environmentally friendly measure.(AU)

O controle de Dermanyssus gallinaeem pequenas produções de poedeiras é realizado por métodos químicos.No entanto, seu uso indiscriminado tem gerado problemas de resistência e poluição ambiental. Este problema tem incentivado o uso de substâncias naturais para o controle de ácaros. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade acaricida dos bioativos citral (Ci), geraniol (Ge) e timol (Thy) sobre D. gallinaeem condições in vitro utilizando seis concentrações (0,05, 1, 2, 3, 4 e 5g/mL). Além disso, as interações das misturas dos três bioativos foram avaliadas por meio decombinações binárias (1:1) e terciárias (1:1:1). O sinergismo da combinação dos bioativos foi realizado utilizando o software CompuSyn e calculando o índice de combinação (CI). LC50, LC90e LC99com limites de confiança de 95% foram estimados por análise Probit. Os bioativos Ci, Ge e Thy apresentam atividade acaricida sobre o ácaro-vermelho-da-aves. A combinação de Ge:Thy e Ci:Ge apresentou sinergismo muito forte com CI de 0,084 e 0,052, enquanto Ci:Thy apresentou forte sinergismo com CI de 0,122 na concentração de 0,05g/mL. A combinação terciária em 1:1:1 apresentou maior efeito tóxico e fortes efeitos sinérgicos em baixas concentrações com 100% de mortalidade em concentração de 1g/mL com CI de 0,147. A combinação de bioativos naturais poderia ser uma forma adicional de controle deD. gallinaesem colocar em risco o bem-estar das aves e seria uma medida ecologicamente correta.(AU)

Spectral analysis, in vitro cytotoxicity and antibacterial studies of bioactive principles from the leaves of Conocarpus lancifolius, a common tree of Jazan, Saudi Arabia / Análise espectral, citotoxicidade in vitro e estudos antibacterianos de princípios bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius, uma árvore comum de Jazan, Arábia Saudita

Abstract The objective of the present study was to analyse the bioactive compounds of the leaves of Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). The GC-MS analysis of the hot methanolic extract of the leaves (HMEL) of C. lancifolius exhibited the bioactive compounds such as 1-(3-Methoxy-2-nitrobenzyl) iso quinoline, morphin-4-ol-6,7-dione, 1-bromo-N-methyl-, phytol, hexadecanoic acid, 2,3-dihydroxypropyl ester, 2,2':4',2"-terthiophene, ethyl iso-allocholate, caryophyllene oxide, campesterol, epiglobulol, cholestan-3-ol, 2-methylene-, (3á,5à)-, dasycarpidan-1-methanol, acetate (ester) and oleic acid, eicosyl ester. The FT-IR analysis of HMEL of C. lancifolius showed a unique peak at 3184, 2413, 1657 cm-1 representing coumaric acid, chlorogenic acid and ferulic acid. The HMEL of C. lancifolius was actively inhibiting the proliferation of breast cancer cells MCF-7 ATCC at the concentration of 72.66 ± 8.21 µg/ml as IC50 value. The HMEL of C. lancifolius also revealed a good spectrum of activity against Gram-positive and Gram-negative bacterial cultures screened in this work. The activity observed has shown more or less similar effects against screened bacteria. However, the magnitude of potentiality was significantly lesser compared to standard ciprofloxacin disc at p< 0.001 level (99% confidence intervals). Furthermore, the study demonstrating the bioactive compounds can be isolated from the leaves of C. lancifolius.

Resumo O objetivo do presente estudo foi analisar os compostos bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). A análise por GC-MS do extrato metanólico quente das folhas (HMEL) de C. lancifolius exibiu os compostos bioativos como 1- (3-Metoxi-2-nitrobenzil) isoquinolina, morfina-4-ol-6,7- diona, 1-bromo-N-metil-, fitol, ácido hexadecanoico, 2,3-di-hidroxipropil éster, 2,2 ': 4', 2 " - tertiofeno, isoalocolato de etil, óxido de cariofileno, campesterol, epiglobulol, colestano -3-ol, 2-metileno-, (3á, 5à) -, dasycarpidan-1-metanol, acetato (éster) e ácido oleico, éster eicosílico. A análise FT-IR de HMEL de C. lancifolius mostrou um pico único em 3184, 2413, 1657 cm-1 representando ácido cumarico, ácido clorogênico e ácido ferúlico. O HMEL de C. lancifolius inibiu ativamente a proliferação de células de câncer de mama MCF-7 ATCC na concentração de 72,66 ± 8,21 µg / ml como valor de IC50. O HMEL de C. lancifolius também revelou bom espectro de atividade contra culturas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas rastreadas neste trabalho. A atividade observada mostrou efeitos mais ou menos semelhantes contra bactérias rastreadas. No entanto, a magnitude da potencialidade foi significativamente menor em comparação com o disco de ciprofloxacina padrão em nível de p < 0,001 (intervalos de confiança de 99%). Além disso, o estudo demonstrando os compostos bioativos pode ser isolado das folhas de C. lancifolius.

Pseudomonas aeruginosa associated pulmonary infections and in vitro amplification virulent rhamnolipid (rhlR) gene / Infecções pulmonares associadas a Pseudomonas aeruginosa e gene ramnolipídeo virulento (rhlR) da amplificação in vitro

Background: Pseudomonas aeruginosa is a common opportunistic pathogenic bacterium with the ability to develop a strong communication pathway by quorum sensing system and different virulent factors. Among the various important secretions of P. aeruginosa rhamnolipid is important biological detergent, believed to be involved in the development of the biofilm and intercellular communication. It readily dissolves the lung surfactants that are then easily catalyzed by the phospholipases and in this way is involved in the acute pulmonary infection. Objective: research work was designed to investigate virulence and gene associated with virulence in P. aeruginosa responsible for pulmonary infections. Methods: In current study polymerase chain reaction (PCR) was used for the detection of the rhlR (rhamnolipid encoding) gene of isolated strains. A number of assays were performed that ensured its virulent behavior. Disc diffusion method was used to check its antibiotic resistance. Isolated strains were resistant to a number of antibiotics applied. Result: It was found that males are more prone to respiratory infections as compared to females. Male members with age of 44-58 and 59-73 are at a higher risk, while females with age of 44-58 are also at a risk of pulmonary infections. Antibiotic resistance was observed by measuringzone of inhibition in strains GCU-SG-M4, GCU-SG-M3, GCU-SG-M5, GCU-SG-M2, GCU-SG-M1 and GCU-SG-M6. GCU-SG-M2 was resistant to fluconazole (FLU), clarithromycin (CLR), cefixime (CFM) and Penicillin (P10). No zone of inhibition was observed. But it showed unusual diffused zone around the Ak and MEM antibiotic discs. rhl R gene and 16s rRNA gene were characterized and analyzed. Conclusion: Findings from current study would help[...].

Antecedentes: Pseudomonas aeruginosa é uma bactéria patogênica oportunista comum, com a capacidade de desenvolver uma forte via de comunicação pelo sistema de detecção de quorum e diferentes fatores virulentos. Entre as várias secreções importantes de P. aeruginosa rhamnolipid, há um importante detergente biológico, que se acredita estar envolvido no desenvolvimento do biofilme e na comunicação intercelular. Dissolve rapidamente os surfactantes pulmonares que são facilmente catalisados pelas fosfolipases e, dessa maneira, estão envolvidos na infecção pulmonar aguda. Objetivo: O trabalho de pesquisa foi desenhado para investigar a virulência e o gene associado à virulência em P. aeruginosa responsável por infecções pulmonares. Métodos: No presente estudo, a reação em cadeia da polimerase (PCR) foi utilizada para a detecção do gene rhlR (codificação ramnolipídeo) de cepas isoladas. Foram realizados vários ensaios que garantiram seu comportamento virulento. O método de difusão em disco foi utilizado para verificar sua resistência a antibióticos. As estirpes isoladas foram resistentes a vários antibióticos aplicados. Resultado: Verificou-se que os homens são mais propensos a infecções respiratórias em comparação às mulheres. Membros do sexo masculino com idade entre 44 e 58 e 59 e 73 anos correm maior risco, enquanto mulheres com idade entre 44 e 58 anos também correm risco de infecções pulmonares. A resistência aos antibióticos foi observada medindo a zona de inibição nas cepas GCU-SG-M4, GCU-SG-M3, GCU-SG-M5, GCU-SG-M2, GCU-SG-M1 e GCU-SG-M6. O GCU-SG-M2 foi resistente ao fluconazol (FLU), claritromicina (CLR), cefixima (CFM) e penicilina (P10). Nenhuma zona de inibição foi observada. Mas se notou uma zona difusa incomum ao redor dos discos antibióticos Ak e MEM. Os genes rhl R e 16s rRNA foram caracterizados e analisados. Conclusão: As conclusões do presente estudo ajudariam a aumentar a conscientização sobre a resistência a antibióticos de, [...].

Pseudomonas aeruginosa associated pulmonary infections and in vitro amplification virulent rhamnolipid (rhlR) gene / Infecções pulmonares associadas a Pseudomonas aeruginosa e gene ramnolipídeo virulento (rhlR) da amplificação in vitro

Background: Pseudomonas aeruginosa is a common opportunistic pathogenic bacterium with the ability to develop a strong communication pathway by quorum sensing system and different virulent factors. Among the various important secretions of P. aeruginosa rhamnolipid is important biological detergent, believed to be involved in the development of the biofilm and intercellular communication. It readily dissolves the lung surfactants that are then easily catalyzed by the phospholipases and in this way is involved in the acute pulmonary infection. Objective: research work was designed to investigate virulence and gene associated with virulence in P. aeruginosa responsible for pulmonary infections. Methods: In current study polymerase chain reaction (PCR) was used for the detection of the rhlR (rhamnolipid encoding) gene of isolated strains. A number of assays were performed that ensured its virulent behavior. Disc diffusion method was used to check its antibiotic resistance. Isolated strains were resistant to a number of antibiotics applied. Result: It was found that males are more prone to respiratory infections as compared to females. Male members with age of 44-58 and 59-73 are at a higher risk, while females with age of 44-58 are also at a risk of pulmonary infections. Antibiotic resistance was observed by measuringzone of inhibition in strains GCU-SG-M4, GCU-SG-M3, GCU-SG-M5, GCU-SG-M2, GCU-SG-M1 and GCU-SG-M6. GCU-SG-M2 was resistant to fluconazole (FLU), clarithromycin (CLR), cefixime (CFM) and Penicillin (P10). No zone of inhibition was observed. But it showed unusual diffused zone around the Ak and MEM antibiotic discs. rhl R gene and 16s rRNA gene were characterized and analyzed. Conclusion: Findings from current study would help[...].(AU)

Antecedentes: Pseudomonas aeruginosa é uma bactéria patogênica oportunista comum, com a capacidade de desenvolver uma forte via de comunicação pelo sistema de detecção de quorum e diferentes fatores virulentos. Entre as várias secreções importantes de P. aeruginosa rhamnolipid, há um importante detergente biológico, que se acredita estar envolvido no desenvolvimento do biofilme e na comunicação intercelular. Dissolve rapidamente os surfactantes pulmonares que são facilmente catalisados pelas fosfolipases e, dessa maneira, estão envolvidos na infecção pulmonar aguda. Objetivo: O trabalho de pesquisa foi desenhado para investigar a virulência e o gene associado à virulência em P. aeruginosa responsável por infecções pulmonares. Métodos: No presente estudo, a reação em cadeia da polimerase (PCR) foi utilizada para a detecção do gene rhlR (codificação ramnolipídeo) de cepas isoladas. Foram realizados vários ensaios que garantiram seu comportamento virulento. O método de difusão em disco foi utilizado para verificar sua resistência a antibióticos. As estirpes isoladas foram resistentes a vários antibióticos aplicados. Resultado: Verificou-se que os homens são mais propensos a infecções respiratórias em comparação às mulheres. Membros do sexo masculino com idade entre 44 e 58 e 59 e 73 anos correm maior risco, enquanto mulheres com idade entre 44 e 58 anos também correm risco de infecções pulmonares. A resistência aos antibióticos foi observada medindo a zona de inibição nas cepas GCU-SG-M4, GCU-SG-M3, GCU-SG-M5, GCU-SG-M2, GCU-SG-M1 e GCU-SG-M6. O GCU-SG-M2 foi resistente ao fluconazol (FLU), claritromicina (CLR), cefixima (CFM) e penicilina (P10). Nenhuma zona de inibição foi observada. Mas se notou uma zona difusa incomum ao redor dos discos antibióticos Ak e MEM. Os genes rhl R e 16s rRNA foram caracterizados e analisados. Conclusão: As conclusões do presente estudo ajudariam a aumentar a conscientização sobre a resistência a antibióticos de, [...].(AU)

Synergistic effect of oxytetracycline as a combination treatment with Carboplatin on MCF-7 breast cancer cell line / Efeito sinérgico da oxitetraciclina em um tratamento combinado com Carboplatina na linhagem de células cancerígenas pulmonares MCF-7

In breast cancer treatment, chemotherapy resistance is a major problem where many receptive tumors rebound and develop resistance. When provided in combination, cancer drugs are most successful, thus reducing the risk of developing resistant cancer cells. However, the evaluation of combination therapies has increased rapidly in recent years. Consequently, by repurposing old treatments, the discovery of additional medicines that may interact synergistically with chemotherapy is considered a current medical aim through discovering a new cancer medication or therapeutic strategy. The purpose of this research is to increase the anti-cancer activity of carboplatin (CP) by increasing the apoptotic effect of breast cancer cells (MCF-7) during in vitro experiments in combination with oxytetracycline. Our results showed a high synergistic effect between oxytetracycline and carboplatin, MCF-7 representative cell treated with carboplatin with/without different concentrations of oxytetracycline (5% and 10% of IC50). Oxytetracycline, which potentiated the action of carboplatin and/or had notable activity was reported as a single agent. This research demonstrated the synergistic relationship between oxytetracycline and carboplatin in viability assays. Surprisingly, our findings suggest that inhibiting treatment strategies can extend carboplatin's therapeutic window, potentially allowing for cancer therapy.(AU)

No tratamento do câncer de pulmão a resistência à quimioterapia é o maior problema no qual muitos tumores receptivos apresentam um rebote e desenvolvem a resistência. Quando oferecidas em combinações, as drogas anticancerígenas apresentam maior taxa de sucesso, reduzindo assim o risco de desenvolvimento de células cancerígenas resistentes. Contudo, a avaliação das terapias de combinação tem crescido muito rapidamente. Consequentemente, por reaproveitamento de tratamentos antigos, a descoberta de novos medicamentos adicionais que podem interagir sinergicamente com a quimioterapia que é considerada como auxílio médico na corrente busca à descoberta de novas medicações anticancerígenas ou estratégias terapêuticas. O propósito da presente pesquisa é aumentar a atividade anticancerígena da Carboplatina (CP) pelo incremento do efeito apoptótico de células de câncer pulmonar (MCF-7) em experimentos in vitro pela combinação com oxitetraciclina. Os resultados obtidos confirmaram elevado efeito sinérgico entre oxitetraciclina e Carboplatina em células MCF-7 representativas tratadas com Carboplatina, com e sem diferentes concentrações de oxitetraciclina (5% e 10% de IC50). A oxitetracilina que potencializou a ação da Carboplatina e/ou teve uma notável atividade relatada como um agente isolado. A pesquisa demonstrou a relação sinérgica entre oxitetraxiclina e Carboplatina nos ensaios de viabilidade. Surpreendentemente, os resultados obtidos sugeriram que as estratégias de tratamento inibidor podem aplicar um janela terapêutica da Carboplatina com potencial para a terapia do câncer.(AU)

Colistin resistance profiles and genotypes of Escherichia coli isolates from dogs and cats

Background: Nowadays, antibiotic resistance has become an important problem, posing a serious threat to both human and animal medicine. Colistin is one of the last-resort drugs for the treatment of particularly caused by multidrug resistant bacteria. The aim of this study was to investigate the resistance of Escherichia coli strains against colistin and the presence of colistin resistance genes (mcr1, mcr2 and mcr3) in them. Antibiotyping and genotyping of all strains was also aimed. Materials, Methods & Results: A total of 75 isolates of Escherichia coli from healthy animals (38 dogs and 37 cats) were screened for colistin resistance by cultivation in a screening agar and then microbroth dilution method was performed. Antibiotic susceptibilities of the isolates were determined by KBDDM. The presences of mcr1, mcr2 and mcr3 genes were investigated by PCR. The colistin resistant strains were genotyped by using RAPD-PCR, and antibiotyped based on resistance profiles. In the screening test, 1 strain in cats and 2 strains in dogs were colistin-resistant. However, 18.6% of strains (from 14 cats and 3 dogs) were found as colistin-resistant in the microdilution test. MDR status was 76.31% and 97.29% in dog and cat strains, respectively. The colistin-resistant strains showed 78-100% and 65-90% similarities with respect to their antibiotypes and genotypes, respectively. mcr1, mcr2 and mcr3 genes were not found in any of the strains. Discussion: There is an increase in infections brought on by Gram negative bacteria with various antibiotic resistances in addition to infections brought on by bacteria that are antibiotic-resistant. In order to cure illnesses caused by resistant bacteria, the repurposing of outdated antibiotics may be on the table. Colistin is a crucial antibiotic in veterinary medicine, according to a number of published perspectives, although it should only be administered with caution. However, the discovery of the plasmid-derived mcr1 gene and subsequent reports that this gene has propagated around the world. Escherichia coli strains isolated from companion animals have been found to carry the mcr1 (colistin resistance gene), and possible human-animal cross-contamination has been looked into. The findings demonstrated that mcr1-carrying E. coli might inhabit pets and spread between people and animals. The cat and dog strains used in this investigation had variable colistin resistance rates, which varied between trials. Although no isolates were found to be positive for the mcr1-3 genes in this study, it is believed that colistin resistance, which is determined phenotypically, should not be ignored in terms of spreading both in cat and dog populations as well as in terms of risk to human health, given the possibility that resistance could occur with other different mechanisms. Epidemiological research still uses in vitro antibacterial susceptibility patterns. Our antibiotyping method, which was based on an analysis of several antibiotic resistances, provided quantitative data. Commercial software was utilized to conduct the evaluation. There are no reports or publications that provide quantitative antibiotyping data for E. coli strains in the literature. A popular technique for genotyping different bacterial species is RAPD-PCR. By determining if certain specific genotypes are similar to those of other resistance strains, RAPD-PCR and other genotyping data can be compared with antibiotic resistance profiles to determine the specific risk of treatment resistance in infectious diseases. All organisms that were colistin resistant exhibited multiple antibiotic resistance, and these findings were also related to RAPD genotypes. The findings indicated that colistin-resistant E. coli bacteria could potentially represent a risk to human health and were thought to be transmitted from cats and dogs to humans and vice versa.

Inibição in vitro de Salmonella spp. Isolada de bezerros do sertão alagoano com extratos etanólicos de plantas da mata atlântica / In vitro inhibition of Salmonella spp. Isolated from calves of the sertão of Alagoas with ethanolic extracts of plants from the mata atlantica / Inhibición in vitro de Salmonella spp. Aislado de terneros del sertão de Alagoas con extractos etanólicos de plantas del mata atlântica

O objetivo do estudo foi verificar a inibição in vitro de Salmonella spp. a diferentes tipos de extratos de plantas com indicações medicinais em diferentes diluições de etanol. Para isso, foram obtidas 12 partes de plantas, entre folhas e caules, que fazem parte da terapêutica popular de toxinfecções gastrintestinais da mesorregião de Alagoas, Brasil, e que estão presentes na Mata Atlântica. Essas plantas foram submetidas à procedimentos de secagem, trituração, maceração e prensagem, permitindo diferentes concentrações de extrato. As amostras de Salmonella spp. testadas são oriundas de bezerros de propriedades rurais da região que apresentavam quadros de diarreia e que foram devidamente detectadas por testes bioquímicos e moleculares. Para verificar a sensibilidade, foi realizado o teste de Disco Difusão em Placas com três estirpes de Salmonella spp., sendo substituídos os discos com antibióticos por discos de extratos etanólicos nas concentrações de 10, 100, 500 e 1000mg/L. Como resultado, a folha de Varronia multispicata, popularmente conhecida como Cavarucaá, apresentou resultado positivo na inibição dos três isolados de Salmonella spp. nas concentrações de 500 e 1000mg/L. Os demais extratos não revelaram resultados de sensibilidade in vitro com a bactéria, em nenhuma das concentrações. Mais estudos com Varronia multispicata precisam ser desenvolvidos, com diferentes métodos de obtenção dos fitoconstituintes e com outras estirpes de Salmonella spp. da região.(AU)

The objective of the study was to verify the in vitro inhibition of Salmonella spp. to different types of plant extracts with medicinal indications in different ethanol dilutions. For this, 12 plant parts were obtained, among leaves and stems, which are part of the popular therapeutics of gastrointestinal toxinfections in the mesoregion of Alagoas, Brazil, and that are present in the Mata Atlântica. These plants were submitted to drying, trituration, maceration and pressing procedures, allowing different extract concentrations. The Salmonella spp. samples tested came from calves from rural properties in the region that presented with diarrhea and were duly detected by biochemical and molecular tests. To verify sensitivity, the Disc Diffusion Plates test was performed with three strains of Salmonella spp., and the discs with antibiotics were replaced by discs of ethanolic extracts at concentrations of 10, 100, 500 and 1000mg/L. As a result, the leaf of Varronia multispicata, popularly known as Cavarucaá, showed positive results in inhibiting the three isolates of Salmonella spp. at concentrations of 500 and 1000mg/L. The other extracts did not show in vitro sensitivity results with the bacteria in any of the concentrations. Further studies with Varronia multispicata need to be developed, with different methods of obtaining phytoconstituents and with other strains of Salmonella spp. from the region.(AU)

El objetivo del estudio fue verificar la inhibición in vitro de Salmonella spp. a diferentes tipos de extractos de plantas con indicaciones medicinales en diferentes diluciones de etanol. Para ello, se obtuvieron 12 partes de plantas, incluyendo hojas y tallos, que forman parte de la terapéutica popular para las toxinfecciones gastrointestinales en la mesoregión de Alagoas, Brasil, y que están presentes en el Mata Atlântica. Estas plantas fueron sometidas a procedimientos de secado, trituración, maceración y prensado, permitiendo diferentes concentraciones de extracto. Las muestras de Salmonella spp. analizadas procedían de terneros de explotaciones de la región que presentaban diarrea y fueron detectadas mediante pruebas bioquímicas y moleculares. Para verificar la sensibilidad, se realizó la prueba de difusión en disco con tres cepas de Salmonella spp. y se sustituyeron los discos con antibióticos por discos de extractos etanólicos a concentraciones de 10, 100, 500 y 1000mg/L. Como resultado, la hoja de Varronia multispicata, conocida popularmente como Cavarucaá, mostró resultados positivos en la inhibición de los tres aislados de Salmonella spp. a concentraciones de 500 y 1000mg/L. Los otros extractos no revelaron resultados de sensibilidad in vitro con la bacteria, en ninguna de las concentraciones. Es necesario desarrollar más estudios con Varronia multispicata, con diferentes métodos de obtención de fitoconstituyentes y con otras cepas de Salmonella spp. de la región.(AU)

Acaricidal effect of major compounds to control Rhipicephalus microplus (Canestrini, 1887) in dairy cows and possible alternatives for reversing multidrug resistance / Efeito acaricida dos principais compostos no controle de Rhipicephalus microplus (Canestrini, 1887) em vacas leiteiras e possíveis alternativas para reverter a resistência múltipla às drogas

Tick control represent a great challenge to animal health. The objective of this study was to evaluate the efficacy of acaricidal compounds against Rhipicephalus microplus from dairy cattle systems in Paraná State, Brazil. Six farms (PR1-PR6) were selected, where anti-tick products were applied at fixed intervals. Two other farms that adopted alternative protocols; target selective treatment (PRS), and individual-based agroecological protocol (PRA) were also included in the trial. Fully engorged R. microplus were collected for the in vitro adult immersion test (AIT), and the egg hatch test (EHT) in all eight populations. The larval packet test (LPT) was used on PR6 and PRA tick populations. The treatment groups were composed of G1: dichlorvos 45% plus cypermethrin 5%, G2: deltamethrin 2.5%, G3: cypermethrin 15%, chlorpyriphos 25%, plus citronellal 1%, and G4: amitraz 12.5%. The efficacy at PR1 to PR6 revealed that G3 and G4 achieved moderate to high efficacy, from 75.0 to 100.0% and 73 to 98%, respectively. In the LPT, the efficacy at PR6 was 76.0, 67.0, 93.0 and 30.6%, while PRA presented 100.0, 100.0, 100.0, and 54.0%, for G1, G2, G3 and G4, respectively. Sustainable parasite control strategies are discussed.(AU)

O controle do carrapato representa um grande desafio na saúde animal. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia de compostos acaricidas contra Rhipicephalus microplus em sistemas de pecuária leiteira no Paraná, Brasil. Foram selecionadas seis fazendas (PR1-PR6), onde são aplicados produtos carrapaticidas regularmente. Duas outras fazendas que adotaram protocolos alternativos, PRS (tratamento seletivo) e PRA (controle agroecológico individual), também foram incluídas nos testes. R. microplus ingurgitadas foram coletados para testes in vitro de imersão em adultos (TIA) e teste de eclosão de ovos (TEO) em todas as oito populações. O teste de envelope de larvas (TEL) foi utilizado nas populações PR6 e PRA. Os grupos de tratamento foram compostos por G1: diclorvos 45% mais cipermetrina 5%, G2: deltametrina 2,5%, G3: cipermetrina 15%, clorpirifos 25% e mais citronelal 1% e G4: amitraz 12,5%. A eficácia em PR1 a PR6 revelou que G3 e G4 obtiveram eficácia de moderada a alta, variando de 75,0% a 100,0% e 73% a 98%, respectivamente. No TEL, a eficácia em PR6 foi de 76,0%, 67,0%, 93,0% e 30,6%, enquanto em PRA apresentou 100,0%, 100,0%, 100,0% e 54,0%, para G1, G2, G3 e G4, respectivamente. Estratégias sustentáveis de controle são discutidas neste documento.(AU)

In vitro bacterial probiotic selection from Nannostomus beckfordi, an Amazon ornamental fish / [Seleção in vitro de bactérias probióticas do peixe ornamental Amazônico Nannostomus beckfordi]

This study aimed to isolate and select in vitro bacteria with probiotic potential for the Amazon ornamental fish Nannostomus beckfordi. For isolate, twelve fish underwent surgery procedure to remove their intestinal tract, macerate and then inoculate in the plate petri containing de Man Rugosa Sharped Agar (MRS). After bacterial growth (48 hours at 35ºC), selected strains were inoculated in MRS broth and submitted to resistance test with NaCl (0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 and 3.0%), pH (4, 5, 6, 8 and 9) and bile salts (5% w/v). Inhibition test against pathogenic bacteria Aeromonas hydrophila, Pseudomonas aeroginosa, Streptococcus agalactiae and Aeromonas Jandaei was also performed. Within the isolated strains group (23 strains), only six (S1, S2, S3, S4, S5 and S6) showed probiotic potential. Strains S1 and S6 showed the greater resistance for NaCl (0.5% and 1%) and pH (5 and 6), but only S1 obtained better results to resist the bile salts. Even against pathogenic bacteria, the S1 showed the best results with inhibition halos greater than 9 mm. In the end, this bacterial strain (S1) was identified as Enterococcus faecium 11037CHB. Thus, this is the first report regarding isolated autochthonous bacterium E. faecium with probiotic potential of N. beckfordi.

O objetivo deste estudo foi isolar e selecionar in vitro bactérias com potencial probiótico do peixe ornamental Amazônico Nannostomus beckfordi. Para o isolamento, retirou-se o intestino de 12 espécimes, que foram macerados, homogeneizados e semeados em placa de petri contento Ágar Man Rogosa e Sharpe (MRS). Posteriormente ao crescimento bacteriano (48 horas a 35ºC), as cepas selecionadas foram mantidas em caldo MRS e submetidas a testes de resistência a NaCl (0,5, 1,0, 1,5, 2,0 e 2,5 e 3,0%), pH (4, 5, 6, 8 e 9) e sais biliares (5% p/v). O antagonismo foi realizado frente as bactérias patogênicas Aeromonas hydrophila, Pseudomonas aeroginosa, Streptococcus agalactiae e Aeromonas jandaei. Das cepas isoladas (23 cepas), apenas seis (C1, C2, C3, C4, C5 e C6) apresentaram potencial probiótico. As cepas C1 e C6 tiveram maior resistência (p<0,05) para o NaCl (0,5 e 1%) e pH (5 a 6), na presença de sais biliares somente a C1 teve a melhor resistência de crescimento. Para o antagonismo frente as bactérias patogênicas, a C1 apresentou halo de inibição maior que 9 mm. Sendo esta cepa bactéria (C1) identificada como Enterococcus faecium 11037 CHB. Portanto, este é o primeiro relato do isolamento da bactéria autóctone E. faecium em N. beckfordi com potencial probiótico.

Pseudomonas aeruginosa associated pulmonary infections and in vitro amplification virulent rhamnolipid (rhlR) gene

Abstract Background Pseudomonas aeruginosa is a common opportunistic pathogenic bacterium with the ability to develop a strong communication pathway by quorum sensing system and different virulent factors. Among the various important secretions of P. aeruginosa rhamnolipid is important biological detergent, believed to be involved in the development of the biofilm and intercellular communication. It readily dissolves the lung surfactants that are then easily catalyzed by the phospholipases and in this way is involved in the acute pulmonary infection. Objective research work was designed to investigate virulence and gene associated with virulence in P. aeruginosa responsible for pulmonary infections. Methods In current study polymerase chain reaction (PCR) was used for the detection of the rhlR (rhamnolipid encoding) gene of isolated strains. A number of assays were performed that ensured its virulent behavior. Disc diffusion method was used to check its antibiotic resistance. Isolated strains were resistant to a number of antibiotics applied. Result It was found that males are more prone to respiratory infections as compared to females. Male members with age of 44-58 and 59-73 are at a higher risk, while females with age of 44-58 are also at a risk of pulmonary infections. Antibiotic resistance was observed by measuring zone of inhibition in strains GCU-SG-M4, GCU-SG-M3, GCU-SG-M5, GCU-SG-M2, GCU-SG-M1 and GCU-SG-M6. GCU-SG-M2 was resistant to fluconazole (FLU), clarithromycin (CLR), cefixime (CFM) and Penicillin (P10). No zone of inhibition was observed. But it showed unusual diffused zone around the Ak and MEM antibiotic discs. rhl R gene and 16s rRNA gene were characterized and analyzed. Conclusion Findings from current study would help in raising awareness about antibiotic resistance of P. aeruginosa, and also the sequence of rhl R gene can be used as the diagnostic marker sequence to identify the virulent rhl R gene sequence from the samples when isolated from sputum of Pneumonia patients.

Resumo Antecedentes Pseudomonas aeruginosa é uma bactéria patogênica oportunista comum, com a capacidade de desenvolver uma forte via de comunicação pelo sistema de detecção de quorum e diferentes fatores virulentos. Entre as várias secreções importantes de P. aeruginosa rhamnolipid, há um importante detergente biológico, que se acredita estar envolvido no desenvolvimento do biofilme e na comunicação intercelular. Dissolve rapidamente os surfactantes pulmonares que são facilmente catalisados pelas fosfolipases e, dessa maneira, estão envolvidos na infecção pulmonar aguda. Objetivo O trabalho de pesquisa foi desenhado para investigar a virulência e o gene associado à virulência em P. aeruginosa responsável por infecções pulmonares. Métodos No presente estudo, a reação em cadeia da polimerase (PCR) foi utilizada para a detecção do gene rhlR (codificação ramnolipídeo) de cepas isoladas. Foram realizados vários ensaios que garantiram seu comportamento virulento. O método de difusão em disco foi utilizado para verificar sua resistência a antibióticos. As estirpes isoladas foram resistentes a vários antibióticos aplicados. Resultado Verificou-se que os homens são mais propensos a infecções respiratórias em comparação às mulheres. Membros do sexo masculino com idade entre 44 e 58 e 59 e 73 anos correm maior risco, enquanto mulheres com idade entre 44 e 58 anos também correm risco de infecções pulmonares. A resistência aos antibióticos foi observada medindo a zona de inibição nas cepas GCU-SG-M4, GCU-SG-M3, GCU-SG-M5, GCU-SG-M2, GCU-SG-M1 e GCU-SG-M6. O GCU-SG-M2 foi resistente ao fluconazol (FLU), claritromicina (CLR), cefixima (CFM) e penicilina (P10). Nenhuma zona de inibição foi observada. Mas se notou uma zona difusa incomum ao redor dos discos antibióticos Ak e MEM. Os genes rhl R e 16s rRNA foram caracterizados e analisados. Conclusão As conclusões do presente estudo ajudariam a aumentar a conscientização sobre a resistência a antibióticos de P. aeruginosa e, também, a sequência do gene rhl R pode ser usada como sequência de diagnóstico para identificar a sequência virulenta do gene rhl R das amostras quando isoladas do escarro de pacientes com pneumonia.

Blue and red light photoemitters as approach to inhibit Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa growth

Abstract The ability of pathogenic bacteria acquire resistance to the existing antibiotics has long been considered a dangerous health risk threat. Currently, the use of visible light has been considered a new approach to treat bacterial infections as an alternative to antibiotics. Herein, we investigated the antimicrobial effect of two range of visible light, blue and red, on Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa, two pathogenic bacterial commonly found in healthcare settings-acquired infections and responsible for high rate of morbidity and mortality. Bacterial cultures were exposed to blue or red light (470 nm and 660 nm) provided by light-emitting diodes - LED. The fluencies and irradiance used for blue and red light were 284.90 J/cm2, 13.19 mW/cm2 and 603.44 J/cm2, 27.93 mW/cm2 respectively. Different experimental approaches were used to determine the optimal conditions of light application. Only exposure to blue light for 6 hours was able to inhibit about 75% in vitro growth of both bacterial species after 24 hours. The surviving exposed bacteria formed colonies significantly smaller than controls, however, these bacteria were able to resume growth after 48 hours. Blue light was able to inhibit bacterial growth upon inoculation in both saline solution and BHI culture medium. We can conclude that blue light, but not red light, is capable of temporarily retarding the growth of gram negative and gram positive bacteria.

Resumo A capacidade das bactérias patogênicas adquirirem resistência aos antibióticos existentes há muito tempo é considerada uma ameaça perigosa à saúde. Atualmente, o uso da luz visível tem sido considerado uma nova abordagem no tratamento de infecções bacterianas como alternativa aos antibióticos. Neste trabalho, investigamos o efeito antimicrobiano de duas faixas de luz visível, azul e vermelha, em Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa, duas bactérias patogênicas comumente encontradas em infecções adquiridas em instituições de saúde e responsáveis por alta taxa de morbimortalidade. As culturas bacterianas foram expostas à luz azul ou vermelha (470 nm e 660 nm) fornecida por diodos emissores de luz - LED. As fluências e irradiâncias utilizadas para luz azul e vermelha foram 284,90 J/cm2, 13,19 mW/cm2 e 603,44 J/cm2, 27,93 mW/cm2, respectivamente. Várias abordagens experimentais foram utilizadas para determinar as condições ótimas de aplicação da luz. Apenas a exposição à luz azul por 6 horas foi capaz de inibir cerca de 75% o crescimento in vitro de ambas as espécies bacterianas após 24 horas. As bactérias expostas sobreviventes formaram colônias com um tamanho significativamente menor do que os controles, contudo, essas bactérias conseguiram retomar o crescimento normal após 48 horas. A luz azul foi capaz de inibir o crescimento das bactérias após sua inoculação em solução salina ou no meio de cultura rico em nutrientes BHI. Podemos concluir que a luz azul mas não a luz vermelha é capaz de retardar temporariamente o crescimento de bactérias Gram-negativas e Gram-positivas.

Ceftiofur efficacy in the intramammary extended treatment of staphylococcal subclinical mastitis in primiparous cows / Eficácia do ceftiofur no tratamento estendido intramamário da mastite subclínica por estafilococos em vacas primíparas

Extended therapy is an alternative approach to treat nonresponsive staphylococcal mastitis, although it has been used mainly in adult cows. This study investigated the efficacy of intramammary ceftiofur in the treatment of staphylococcal subclinical mastitis in primiparous cows. Sixty primiparous cows Holstein were divided into four groups (G1 = Group negative to staphylococci infection, G2 = Group positive to staphylococci infection untreated with intramammary ceftiofur, Group, G3 = Group treated with intramammary ceftiofur early lactation, G4 = Group treated with intramammary ceftiofur late lactation group) with milk samples collected at five moments (M0 = diagnosis of subclinical mastitis, M1 = 7 days after diagnosis of subclinical mastitis and early extended therapy, M2 = 14 after the diagnosis of subclinical mastitis, M3 = 21 days after diagnosis of mastitis) and M4 = 28 days after diagnosis of mastitis). In groups G3 and G4, which were treated with intramammary ceftiofur, the microbiological cure was evidenced by a reduction in SCC of 73.3% and 46.7%, respectively. Thus, in the treated groups (G3 + G4) and untreated (G2), cure rates were 60% and 26.7%, respectively (P <0.05). Forty-five strains of staphylococci were Motta, R. G. et al.1958Semina: Ciênc. Agrár. Londrina, v. 43, n. 5, p. 1957-1974, set./out. 2022isolated, with a predominance of S. aureus (51,1%) and S. intermedius (48,8%). The in vitro antimicrobial susceptibility pattern showed higher sensitivity indices of isolates for oxacillin (80%), ceftiofur (77.8%), cephalexin (77.8%), ciprofloxacin (66.7%), and gentamicin (60%). In contrast, cloxacillin (24.4%), penicillin (35.6%), and tetracycline (44.5%) were ineffective antimicrobials for staphylococci isolates. Among the milk samples taken when M0 and M1 (7 days after isolation), 13.3% were positive for the detection of the inhibiting substances (antimicrobials) in Delvotest™ and all negative in the Snap test™, whereas in the M2 (14 days after isolation), 55% were positive in Delvotest™ and 46.7% in the Snap test™. Twenty-one days after diagnosis (M3), 16.7% revealed positive results in Delvotest™ and 11.7% in the Snap test™. For M4 (28 days after isolation), 11.7% showed positive results in Delvotest™, and 8.3% revealed positive results in the Snap test™. There was a reduction in SCC among all cured animals. Significant results were identified for milk production in the M0, so G1 produced more milk than the other three groups, G2, G3, and G4. A statistical association was observed between the reduction in the volume of daily milk and production in animals with subclinical mastitis, denoting losses in milk production in primiparous bovines infected during lactation by staphylococci. Extended intramammary therapy with ceftiofur in bovine primiparous cows subclinically affected by staphylococcal mastitis is effective mainly in cases treated at the beginning of lactation, showing microbiological cure and reduction in SCC.(AU)

O estudo presente investigou a eficácia do ceftiofur intramamário no tratamento da mastite subclínica por estafilococos em primíparas bovinas. Foram utilizados 60 animais da raça holandesa, divididos em quadro grupos (G1 = Grupo negativo, G2 = Grupo positivo não tratado com ceftiofur intramamário, G3 = Grupo tratado com ceftiofur intramamário no início da lactação, G4 = Grupo tratado com ceftiofur intramamário no final da lactação), com amostras de leite coletadas em cinco momentos (M0 = diagnóstico da mastite subclínica, M1 = 7 dias após diagnóstico e início da terapia estendida, M2 = dia 14 após o diagnóstico da mastite subclínica, M3 = dia 21 após o diagnóstico da mastite, M4 = dia 28 após o diagnóstico da mastite). Nos grupos tratados com ceftiofur intramamário, foi evidenciada a cura microbiológica com redução na CCS em 73,3% no G3 e 46,7% no G4. Nos grupos tratados (G3+G4) e não tratado (G2), as taxas de cura foram, respectivamente, 60% e 26,7% (p<0,05). Foram isoladas 45 linhagens de estafilococos, com predomínio de S. aureus (51,1%) e S. intermedius (48,8%). O perfil de sensibilidade microbiana "in vitro" dos isolados apresentou maiores índices de sensibilidade para oxacilina (80%), ceftiofur (77,8%) e cefalexina (77,8%), ciprofloxacino (66,7%) e gentamicina (60%). Em contraste, cloxacilina (24,4%), penicilina (35,6%) e tetraciclina (44,5%) foram os antimicrobianos menos efetivos diante dos estafilococos isolados. Nas amostras de leite colhidas nos momentos M0 e M1, 13,3% foram positivas para o teste de detecção de substâncias inibidoras na prova de Delvotest™ e todas negativas no Snap test™. Já, no M2, 55% foram positivas no Delvotest™ e 46,7% no Snap test™. No M3, 16,7% positivas no Delvotest™ e no 11,7% no Snap test™. No M4, 11,7% positivas no Delvotest™ e 8,3% no Snaptest™, dois dias após o término do tratamento (M2). Foram identificados nos grupos G3 e G4 a presença de animais positivos em 96,7% para o Delvotest™ e 90% para o Snap test™. Ocorreu redução na CCS em todos os animais curados. Foram identificados resultados significativos para a produção de leite no MO, posto que o G1 produziu mais leite se comparado aos outros três grupos G2, G3 e G4. Foi observada associação estatística entre a redução no volume de leite diário e a produção nos animais com mastite subclínica, denotando prejuízos na produção de leite em primíparas bovinas infectadas na lactação por estafilococos. A terapia intramamária estendida com ceftiofur em primíparas com mastite estafilocócica é eficaz principalmente nos casos tratados no início da lactação, mostrando cura microbiológica e redução da CCS, indicando que esta abordagem terapêutica alternativa pode ser utilizada para o tratamento de novilhas.(AU)

Eficiência de acaricidas comerciais sobre o Rhipicephalus (Boophilus) microplus de uma propriedade rural do município de Vazante, MG, Brasil / Efficiency of commercial acaricides on Rhipicephalus (Boophilus) microplus from a rural property in the city of Vazante, MG

Os carrapatos são os ectoparasitos que causam maiores prejuízos para a produção de bovinos, e em particular o Rhipicephalus (Boophilus) microplus é responsável por graves prejuízos para os produtores de carne e leite, e seu controle vem sendo dificultado pela resistência desses ácaros de pequeno porte aos carrapaticidas comerciais. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a eficiência in vitro de 08 (oito) bases químicas presentes nos principais acaricidas do mercado, sobre o Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Para tanto, amostras de carrapatos foram coletadas de uma propriedade rural do município de Vazante, MG, para a realização do teste de imersão de teleóginas (biocarrapaticidograma). As associações das bases químicas Cipermetrina 20% + Clorpirifós 50%; Cirpemetrina 15% + Clorpirifós 30% + Fention 15%; Cipermetrina 15% + Clorpirifós 25% + Butóxido de Piperonila 15%+ Citronela 1% e Clorpirifós 50% + Cipermetrina 6%, apresentaram eficiência de 100% no teste in vitro. Entretanto, Diclorvós 50% + Clorpirifós 20%; Supona 50%; Amitraz 12,5% e a Deltametrina 25% apresentaram eficiência menor que 95%. Os resultados obtidos sugerem uma relação direta entre produtos presentes no mercado versus resistência do Rhipicephalus (Boophilus) microplus, enfatizando a necessidade do monitoramento dos mecanismos de resistência associado à implementação de um programa de controle estratégico de carrapatos, levando ao manejo adequado de acaricidas e uma política de fiscalização atuante por parte dos órgãos competentes com relação aos produtos químicos disponíveis no mercado para o controle do Rhipicephalus (Boophilus) microplus.(AU)

Ticks are the ectoparasites that cause greater damage to the production of cattle, and in particular Rhipicephalus (Boophilus) microplus is responsible for serious damage to meat and milk producers, and its control has been hampered by the resistance of these mites. small scale to commercial ticks. The objective of the present work was to evaluate the in vitro efficiency of 08 (eight) chemical bases present in the main acaricides in the market, on Rhipicephalus (Boophilus) microplus. For that, samples of ticks were collected from a rural property in the municipality of Vazante, MG., Brazil, to perform the teleogener immersion test (biocarrapaticidogram). The associations of the chemical bases Cypermethrin 20% + Chlorpyrifos 50%; Cirpemetrina 15% + Chlorpyrifos 30% + Fention 15%; Cypermethrin 15% + Chlorpyrifos 25% + Piperonyl Butoxide 15% + Citronella 1% and Chlorpyrifos 50% + Cypermethrin 6%, showed 100% efficiency in the in vitro test. However, Dichlorvós 50% + Chlorpyrifos 20%; Suppose 50%; Amitraz 12.5% and Deltamethrin 25% showed efficiency less than 95%. The results obtained suggest a direct relationship between products present in the market versus resistance of Rhipicephalus (Boophilus) microplus, emphasizing the need to monitor resistance mechanisms associated with the implementation of a strategic tick control program, leading to the appropriate management of mites and a active inspection policy by the competent bodies regarding the chemicals available on the market for the control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus.(AU)