Avaliação da tendência temporal e da prevalência de leishmaniose visceral canina e humana dentre os anos de 2010 a 2019 em municípios de Minas Gerais ­ Brasil / Evaluation of the temporal trend and prevalence of canine and human visceral leishmaniosis between 2010 and 2019 in municipalities of Minas Gerais - Brazil / Evaluación de la tendencia temporal y de la prevalencia de leishmaniosis visceral canina y humana entre los años 2010 a 2019 en los municipios de Minas Gerais ­ Brasil

Leishmanioses são causadas por protozoários do gênero Leishmania, parasitos que infectam grande número de mamíferos, incluindo o homem. A Leishmaniose Visceral (LV) é a forma mais severa da doença e invariavelmente leva ao óbito, se não diagnosticada e tratada precocemente. O objetivo deste estudo foi realizar uma análise de natureza documental, descritiva e analítica, de abordagem quantitativa das informações contidas no banco de dados Fundação Ezequiel Dias/Gerenciador de Ambientes Laboratoriais (FUNED/GAL), da Secretaria Estadual de Saúde de Minas Gerais. Os dados epidemiológicos que compõe este estudo são registros de casos positivos e negativos da cidade de Patos de Minas-MG e 18 municípios das mesorregiões do Triângulo Mineiro e Alto Paranaíba, Noroeste de Minas e Norte de Minas. No período compreendido entre janeiro de 2010 e junho de 2019 foram notificados um total de 1170 indivíduos suspeitos de Leishmaniose Visceral Canina e/ou Humana. 304 (25,98%) indivíduos receberam o resultado positivo, enquanto 866 foram negativos, e em alguns casos, inconclusivos. Os dados obtidos no estudo revelaram a tendência temporal crescente e alta prevalência da doença, mostrando que a doença está em expansão na região estudada onde o cão é o principal reservatório doméstico da doença, permanecendo como principal elo de ligação entre o protozoário e o hospedeiro humano.(AU)

Leishmaniasis are caused by protozoa of the genus Leishmania, parasites that infect a large number of mammals, including humans. Visceral Leishmaniasis (VL) is the most severe form of the disease and invariably leads to death if not diagnosed and treated early. The objective of this study was to carry out a documentary, descriptive and analytical analysis, with a quantitative approach to the information contained in the Fundação Ezequiel Dias/Manager of Laboratory Environments (FUNED/GAL) database from the Minas Gerais State Health Secretariat. The epidemiological data that make up this study are records of positive and negative cases in the city of Patos de Minas - MG and of 18 municipalities in the mesoregions of the Triângulo Mineiro and Alto Paranaíba, Northwest of Minas and North of Minas. In the period between January 2010 and June 2019, a total of 1170 individuals suspected of Canine and/or Human Visceral Leishmaniasis were notified. A total of 304 (25.98%) individuals received a positive result, while 866 were considered negative, and in some cases, inconclusive. The data obtained in the study revealed the growing temporal trend and high prevalence of the disease, showing that the disease is expanding in the studied region where the dog is presented as the main domestic reservoir of the disease, remaining as the main link between the protozoan and the human host.(AU)

Leishmaniosis son causadas por protozoos del género Leishmania, parásitos que infectan a un gran número de mamíferos, incluyendo el hombre. La Leishmaniosis Visceral (LV) es la forma más grave de la enfermedad e invariablemente conduce a la muerte, si no se la diagnostica y la trata a tiempo. El objetivo de ese estudio fue realizar un análisis de naturaleza documental, descriptivo y analítico, de enfoque cuantitativo de las informaciones contenidas en la base de datos Fundação Ezequiel Dias/Gerente de Ambientes de Laboratorio (FUNED /GAL), de la Secretaría de Salud del Estado de Minas Gerais. Los datos epidemiológicos que conforman este estudio son registros de casos positivos y negativos en la ciudad de Patos de Minas-MG y 18 municipios de las mesorregiones del Triângulo Mineiro y Alto Paranaíba, Noroeste de Minas y Norte de Minas. En el período comprendido entre enero de 2010 y junio de 2019, se notificó a un total de 1170 personas sospechosas de Leishmaniosis Visceral Canina y/o Humana. 304 (25,98%) individuos recibieron un resultado positivo, mientras que 866 fueron negativos y, en algunos casos, no concluyentes. Los datos obtenidos en el estudio revelaron la tendencia creciente temporal y la alta prevalencia de la enfermedad, mostrando que la enfermedad se está expandiendo en la región estudiada donde el perro es el principal reservorio doméstico de la enfermedad, permaneciendo como principal conexión entre el protozoo y el hospedero humano.(AU)

Avaliação da tendência temporal e da prevalência de leishmaniose visceral canina e humana dentre os anos de 2010 a 2019 em municípios de Minas Gerais ­ Brasil / Evaluation of the temporal trend and prevalence of canine and human visceral leishmaniosis between 2010 and 2019 in municipalities of Minas Gerais - Brazil / Evaluación de la tendencia temporal y de la prevalencia de leishmaniosis visceral canina y humana entre los años 2010 a 2019 en los municipios de Minas Gerais ­ Brasil

Leishmanioses são causadas por protozoários do gênero Leishmania, parasitos que infectam grande número de mamíferos, incluindo o homem. A Leishmaniose Visceral (LV) é a forma mais severa da doença e invariavelmente leva ao óbito, se não diagnosticada e tratada precocemente. O objetivo deste estudo foi realizar uma análise de natureza documental, descritiva e analítica, de abordagem quantitativa das informações contidas no banco de dados Fundação Ezequiel Dias/Gerenciador de Ambientes Laboratoriais (FUNED/GAL), da Secretaria Estadual de Saúde de Minas Gerais. Os dados epidemiológicos que compõe este estudo são registros de casos positivos e negativos da cidade de Patos de Minas-MG e 18 municípios das mesorregiões do Triângulo Mineiro e Alto Paranaíba, Noroeste de Minas e Norte de Minas. No período compreendido entre janeiro de 2010 e junho de 2019 foram notificados um total de 1170 indivíduos suspeitos de Leishmaniose Visceral Canina e/ou Humana. 304 (25,98%) indivíduos receberam o resultado positivo, enquanto 866 foram negativos, e em alguns casos, inconclusivos. Os dados obtidos no estudo revelaram a tendência temporal crescente e alta prevalência da doença, mostrando que a doença está em expansão na região estudada onde o cão é o principal reservatório doméstico da doença, permanecendo como principal elo de ligação entre o protozoário e o hospedeiro humano.(AU)

Leishmaniasis are caused by protozoa of the genus Leishmania, parasites that infect a large number of mammals, including humans. Visceral Leishmaniasis (VL) is the most severe form of the disease and invariably leads to death if not diagnosed and treated early. The objective of this study was to carry out a documentary, descriptive and analytical analysis, with a quantitative approach to the information contained in the Fundação Ezequiel Dias/Manager of Laboratory Environments (FUNED/GAL) database from the Minas Gerais State Health Secretariat. The epidemiological data that make up this study are records of positive and negative cases in the city of Patos de Minas - MG and of 18 municipalities in the mesoregions of the Triângulo Mineiro and Alto Paranaíba, Northwest of Minas and North of Minas. In the period between January 2010 and June 2019, a total of 1170 individuals suspected of Canine and/or Human Visceral Leishmaniasis were notified. A total of 304 (25.98%) individuals received a positive result, while 866 were considered negative, and in some cases, inconclusive. The data obtained in the study revealed the growing temporal trend and high prevalence of the disease, showing that the disease is expanding in the studied region where the dog is presented as the main domestic reservoir of the disease, remaining as the main link between the protozoan and the human host.(AU)

Leishmaniosis son causadas por protozoos del género Leishmania, parásitos que infectan a un gran número de mamíferos, incluyendo el hombre. La Leishmaniosis Visceral (LV) es la forma más grave de la enfermedad e invariablemente conduce a la muerte, si no se la diagnostica y la trata a tiempo. El objetivo de ese estudio fue realizar un análisis de naturaleza documental, descriptivo y analítico, de enfoque cuantitativo de las informaciones contenidas en la base de datos Fundação Ezequiel Dias/Gerente de Ambientes de Laboratorio (FUNED /GAL), de la Secretaría de Salud del Estado de Minas Gerais. Los datos epidemiológicos que conforman este estudio son registros de casos positivos y negativos en la ciudad de Patos de Minas-MG y 18 municipios de las mesorregiones del Triângulo Mineiro y Alto Paranaíba, Noroeste de Minas y Norte de Minas. En el período comprendido entre enero de 2010 y junio de 2019, se notificó a un total de 1170 personas sospechosas de Leishmaniosis Visceral Canina y/o Humana. 304 (25,98%) individuos recibieron un resultado positivo, mientras que 866 fueron negativos y, en algunos casos, no concluyentes. Los datos obtenidos en el estudio revelaron la tendencia creciente temporal y la alta prevalencia de la enfermedad, mostrando que la enfermedad se está expandiendo en la región estudiada donde el perro es el principal reservorio doméstico de la enfermedad, permaneciendo como principal conexión entre el protozoo y el hospedero humano.(AU)

Avaliação da tendência temporal e da prevalência de leishmaniose visceral canina e humana dentre os anos de 2010 a 2019 em municípios de Minas Gerais ­ Brasil / Evaluation of the temporal trend and prevalence of canine and human visceral leishmaniosis between 2010 and 2019 in municipalities of Minas Gerais - Brazil / Evaluación de la tendencia temporal y de la prevalencia de leishmaniosis visceral canina y humana entre los años 2010 a 2019 en los municipios de Minas Gerais ­ Brasil

Leishmanioses são causadas por protozoários do gênero Leishmania, parasitos que infectam grande número de mamíferos, incluindo o homem. A Leishmaniose Visceral (LV) é a forma mais severa da doença e invariavelmente leva ao óbito, se não diagnosticada e tratada precocemente. O objetivo deste estudo foi realizar uma análise de natureza documental, descritiva e analítica, de abordagem quantitativa das informações contidas no banco de dados Fundação Ezequiel Dias/Gerenciador de Ambientes Laboratoriais (FUNED/GAL), da Secretaria Estadual de Saúde de Minas Gerais. Os dados epidemiológicos que compõe este estudo são registros de casos positivos e negativos da cidade de Patos de Minas-MG e 18 municípios das mesorregiões do Triângulo Mineiro e Alto Paranaíba, Noroeste de Minas e Norte de Minas. No período compreendido entre janeiro de 2010 e junho de 2019 foram notificados um total de 1170 indivíduos suspeitos de Leishmaniose Visceral Canina e/ou Humana. 304 (25,98%) indivíduos receberam o resultado positivo, enquanto 866 foram negativos, e em alguns casos, inconclusivos. Os dados obtidos no estudo revelaram a tendência temporal crescente e alta prevalência da doença, mostrando que a doença está em expansão na região estudada onde o cão é o principal reservatório doméstico da doença, permanecendo como principal elo de ligação entre o protozoário e o hospedeiro humano.(AU)

Leishmaniasis are caused by protozoa of the genus Leishmania, parasites that infect a large number of mammals, including humans. Visceral Leishmaniasis (VL) is the most severe form of the disease and invariably leads to death if not diagnosed and treated early. The objective of this study was to carry out a documentary, descriptive and analytical analysis, with a quantitative approach to the information contained in the Fundação Ezequiel Dias/Manager of Laboratory Environments (FUNED/GAL) database from the Minas Gerais State Health Secretariat. The epidemiological data that make up this study are records of positive and negative cases in the city of Patos de Minas - MG and of 18 municipalities in the mesoregions of the Triângulo Mineiro and Alto Paranaíba, Northwest of Minas and North of Minas. In the period between January 2010 and June 2019, a total of 1170 individuals suspected of Canine and/or Human Visceral Leishmaniasis were notified. A total of 304 (25.98%) individuals received a positive result, while 866 were considered negative, and in some cases, inconclusive. The data obtained in the study revealed the growing temporal trend and high prevalence of the disease, showing that the disease is expanding in the studied region where the dog is presented as the main domestic reservoir of the disease, remaining as the main link between the protozoan and the human host.(AU)

Leishmaniosis son causadas por protozoos del género Leishmania, parásitos que infectan a un gran número de mamíferos, incluyendo el hombre. La Leishmaniosis Visceral (LV) es la forma más grave de la enfermedad e invariablemente conduce a la muerte, si no se la diagnostica y la trata a tiempo. El objetivo de ese estudio fue realizar un análisis de naturaleza documental, descriptivo y analítico, de enfoque cuantitativo de las informaciones contenidas en la base de datos Fundação Ezequiel Dias/Gerente de Ambientes de Laboratorio (FUNED /GAL), de la Secretaría de Salud del Estado de Minas Gerais. Los datos epidemiológicos que conforman este estudio son registros de casos positivos y negativos en la ciudad de Patos de Minas-MG y 18 municipios de las mesorregiones del Triângulo Mineiro y Alto Paranaíba, Noroeste de Minas y Norte de Minas. En el período comprendido entre enero de 2010 y junio de 2019, se notificó a un total de 1170 personas sospechosas de Leishmaniosis Visceral Canina y/o Humana. 304 (25,98%) individuos recibieron un resultado positivo, mientras que 866 fueron negativos y, en algunos casos, no concluyentes. Los datos obtenidos en el estudio revelaron la tendencia creciente temporal y la alta prevalencia de la enfermedad, mostrando que la enfermedad se está expandiendo en la región estudiada donde el perro es el principal reservorio doméstico de la enfermedad, permaneciendo como principal conexión entre el protozoo y el hospedero humano.(AU)

Polymerase chain reaction using conjunctival swab samples for detecting Leishmania DNA in dogs / Reação em cadeia da polimerase usando amostras de Swab de conjuntiva para detecção de DNA de Leishmania em cães

The dog is the main domestic reservoir of Leishmania and font of infection for the vector, constituting an important host for the transmission of the parasite to humans. Non-invasive collection of swab samples for leishmaniasis diagnosis has been a promising alternative. This study analyzed the positivity of polymerase chain reaction (PCR) for the diagnosis of canine leishmaniasis in conjunctiva samples. DNA extraction was performed using SDS 20% and PCR was performed using 13A/13B primers that amplify 120-bp of Leishmania kDNA. Of the 77 dogs analyzed, 50 (64.93%) had ocular changes: 25 (32.47%) dogs had periocular lesion, 41 (53.25%) dogs had purulent eye discharge, and 17 (22.08%) dogs had both signals. PCR was positive in 35 dogs (45.45%), and there was no significant difference between dogs with and without ocular signals (p=0.4074). PCR positivity was significant higher in dogs without periocular injury (p=0.0018). Conjunctive PCR, a less invasive, fast, and painless collection technique, is indicated to complement the diagnosis, especially in dogs without periocular injury, independent of the presence of purulent eye discharge.(AU)

O cão é o principal reservatório doméstico de Leishmania e também fonte de infecção para o vetor, constituindo um importante hospedeiro para a transmissão do parasita ao homem. A coleta não invasiva de amostras em swab para diagnóstico das leishmanioses tem sido uma alternativa promissora. Este estudo analisou a positividade da reação em cadeia da polimerase (PCR) para o diagnóstico de leishmaniose canina em amostras de conjuntiva. A extração do DNA foi realizada com SDS 20%. A PCR foi realizada com primers 13A/13B que amplificam 120-pb do kDNA de Leishmania. Dos 77 cães analisados, 50 (64,93%) tiveram alterações oculares; 25 (32,47%) cães tiveram uma lesão periocular; 41 (53,25%) tiveram secreção ocular purulenta e 17 (22,08%) cães tiveram ambos os sinais. A PCR foi positiva em 35 cães (45,45%) e não houve diferença significativa em cães com e sem sinais oculares (p = 0,4074). A positividade da PCR foi significativamente maior em cães sem lesão periocular (p = 0,0018). PCR em conjuntiva, uma técnica de coleta menos invasiva, rápida e indolor, é indicada para complementar o diagnóstico, principalmente em cães sem lesão periocular, independentemente da presença de secreção ocular purulenta.(AU)

Polymerase chain reaction using conjunctival swab samples for detecting Leishmania DNA in dogs / Reação em cadeia da polimerase usando amostras de Swab de conjuntiva para detecção de DNA de Leishmania em cães

Abstract The dog is the main domestic reservoir of Leishmania and font of infection for the vector, constituting an important host for the transmission of the parasite to humans. Non-invasive collection of swab samples for leishmaniasis diagnosis has been a promising alternative. This study analyzed the positivity of polymerase chain reaction (PCR) for the diagnosis of canine leishmaniasis in conjunctiva samples. DNA extraction was performed using SDS 20% and PCR was performed using 13A/13B primers that amplify 120-bp of Leishmania kDNA. Of the 77 dogs analyzed, 50 (64.93%) had ocular changes: 25 (32.47%) dogs had periocular lesion, 41 (53.25%) dogs had purulent eye discharge, and 17 (22.08%) dogs had both signals. PCR was positive in 35 dogs (45.45%), and there was no significant difference between dogs with and without ocular signals (p=0.4074). PCR positivity was significant higher in dogs without periocular injury (p=0.0018). Conjunctive PCR, a less invasive, fast, and painless collection technique, is indicated to complement the diagnosis, especially in dogs without periocular injury, independent of the presence of purulent eye discharge.

Resumo O cão é o principal reservatório doméstico de Leishmania e também fonte de infecção para o vetor, constituindo um importante hospedeiro para a transmissão do parasita ao homem. A coleta não invasiva de amostras em swab para diagnóstico das leishmanioses tem sido uma alternativa promissora. Este estudo analisou a positividade da reação em cadeia da polimerase (PCR) para o diagnóstico de leishmaniose canina em amostras de conjuntiva. A extração do DNA foi realizada com SDS 20%. A PCR foi realizada com primers 13A/13B que amplificam 120-pb do kDNA de Leishmania. Dos 77 cães analisados, 50 (64,93%) tiveram alterações oculares; 25 (32,47%) cães tiveram uma lesão periocular; 41 (53,25%) tiveram secreção ocular purulenta e 17 (22,08%) cães tiveram ambos os sinais. A PCR foi positiva em 35 cães (45,45%) e não houve diferença significativa em cães com e sem sinais oculares (p = 0,4074). A positividade da PCR foi significativamente maior em cães sem lesão periocular (p = 0,0018). PCR em conjuntiva, uma técnica de coleta menos invasiva, rápida e indolor, é indicada para complementar o diagnóstico, principalmente em cães sem lesão periocular, independentemente da presença de secreção ocular purulenta.

Synovial fluid as an auxiliary diagnostic tool for different stages of canine visceral leishmaniasis / Líquido sinovial como ferramenta diagnóstica auxiliar da leishmaniose visceral canina em diferentes estádios

Leishmaniasis represents a complex of chronic diseases with a broad geographic distribution and a high significance in public health worldwide. The varied clinical signs in conjunction with the low sensitivity and specificity of canine visceral leishmaniasis (CVL) detection methods make diagnosis of the disease complex. Among the several available laboratory tests, studies have suggested that the detection of parasites in synovial fluid (SF) is a good auxiliary tool in the diagnosis of CVL. However, no study has evaluated the influence of the clinical stage of CVL in the detection of Leishmania sp. in SF. This study aimed to evaluate the detection of Leishmania sp. amastigotes in the SF of dogs at different stages of the disease. The negative control group (G1) comprised 12 dogs that tested negative for CVL. Thirty-six other dogs, tested serologically positive for CVL, were divided into two groups: Group 2 (G2), which included animals at stage II of the disease (moderate; n=18), and Group 3 (G3) included animals at stage III of the disease (severe; n=18). The analysis of SF revealed the presence of parasites in six (33.3%) dogs from G2 and in 16 (88.9%) dogs from G3 (p=0.0437). The present research suggested that SF analysis is of high value as a supplementary tool in the diagnosis of CVL. As a new finding, the present study also indicated that this test has a higher sensitivity in animals presenting with more severe stage of the disease.(AU)

As leishmanioses representam um complexo de doenças de caráter crônico de alta importância na saúde pública mundial e com distribuição geográfica ampla. A apresentação clínica variada e a baixa sensibilidade e especificidade de alguns métodos para a detecção da doença tornam complexo o diagnóstico da leishmainiose visceral canina (LVC). Entre os diversos testes laboratóriais disponíveis, estudos tem sugerido que a pesquisa de parasitos no líquido sinovial (LS) pode ser uma ferramenta auxiliar no diagnóstico da LVC. Apesar disso, inexistem estudos avaliando a relação entre o estágio clínico da doença e a detecção de Leishmania sp. no LS. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a detecção de amastigotas de Leishmania sp. no LS de cães acometidos por diferentes estádios da doença. Foram avaliados 48 cães, sendo 12 negativos para LVC (grupo controle negativo, G1) e 36 soropositivos. O grupo 2 (doença moderada, G2) incluiu animais classificados no estádio II da doença, enquanto o grupo 3 (doença grave, G3) abrangeu animais classificados em estádio III. Na análise do líquido sinovial dos cães, o parasito foi visualizado em seis (33,3%) cães do G2 e 16 (88,9)% dos cães de G3 (p=0.0437). O presente trabalho sugere que a análise do LS apresenta alto valor como ferramenta suplementar no diagnóstico da LVC. Em adição, o presente estudo indica, pela primeira vez, que o teste apresenta uma sensibilidade maior em animais que apresentam a forma grave da doença.(AU)

Avaliação de IFN- e IL-10 em cães naturalmente infectados com Leishmania (Leishmania) chagasi com e sem manifestações clínicas

ABSTRACT: Leishmaniasis has as obligatory intracellular parasitic etiological agents belonging to the genus Leishmania capable of infecting different species of mammals and reproducing them within the mononuclear phagocytic system. Domestic dogs are the main responsible for maintaining the epidemiological chain of the disease, presenting a wide variety of clinical profiles, from apparently healthy to severely affected. The expression of the cytokines from dogs naturally infected with Leishmania (Leishmania) chagasi was evaluated. Blood samples were collected from 50 animals, 20 from positive and symptomatic dogs for Leishmaniasis Canine (CVL), 20 from positive asymptomatic animals and 10 negative. Samples were analyzed by immunochromatographic test Dual Path Platform (DPP/Biomanguinhos®) and by indirect ELISA (EIE/Biomanguinhos®) for detection of anti-Leishmania antibodies. There was statistical difference between the groups observing an increase in IFN- levels in asymptomatic animals and an IL-10 increase in symptomatic.

RESUMO: As leishmanioses têm como agentes etiológicos parasitas intracelulares obrigatórios pertencentes ao gênero Leishmania capazes de infectar diferentes espécies de mamíferos e nestes se reproduzirem dentro do sistema fagocítico mononuclear. Os cães domésticos são os principais responsáveis pela manutenção da cadeia epidemiológica da doença, podendo apresentar uma grande variedade de perfis clínicos, desde aparentemente sadios a severamente acometidos. Avaliou-se a expressão das citocinas de cães naturalmente infectados com Leishmania (Leishmania) chagasi. Foram coletadas 50 amostras, sendo 20 de animais positivos e sintomáticos para Leishmaniose Visceral Canina (LVC), 20 de animais positivos e assintomáticos e 10 de animais sabidamente negativos para a LVC. As amostras foram analisadas pelo teste imunocromatográfico rápido Dual Path Platform (DPP/Biomanguinhos®) e pelo ELISA (EIE/Biomanguinhos®) indireto para detecção de anticorpos anti-Leishmania. Após as confirmações dos testes, foi realizado o ELISA de captura (R & D Systems) para quantificação das citocinas IL-10 e IFN-. Houve diferença estatística entre os grupos observando um aumento nos níveis de IFN- nos animais assintomáticos e um aumento de IL-10 nos sintomáticos.

Quantificação da IL-10 e do INF- em cães com ou sem sinais clínicos de infecção com Leishmania (Leishmania) chagasi

ABSTRACT: Leishmaniasis comprise a complex of diseases caused by intracellular mandatory parasites belonging to the genus Leishmania. Considered as an important public health problem, and domestic dogs are primarily responsible for maintaining the epidemiological chain of the disease, it is estimated that more than the half of the dogs infected do not show clinical signs of the disease. The profile of IL-10 and IFN- dogs naturally infected with Leishmania (Leishmania) chagasi in São Luís/MA was evaluated. Blood samples were collected from 50 animals, 20 from positive and symptomatic dogs for leishmaniasis canine (CVL), 20 from positive asymptomatic animals and 10 negative. Samples were analyzed by immunochromatographic test Dual Path Platform (DPP/Biomanguinhos®) and by indirect ELISA (EIE/Biomanguinhos®) for detection of anti-Leishmania antibodies. After the confirmation of the tests, the capture ELISA was performed for quantification of IL-10 and IFN- cytokines through the Milliplex MAP kit. There was a statistical difference between the groups, observing an increase of IL-10 in blood of symptomatic dogs for CVL, compared to the group of asymptomatic animals, suggesting that animals with this expression of IL-10 may be associated with susceptibility to disease. As well as the increase in IFN- levels in asymptomatic dogs, compared to the symptomatic dog group, could be related to chronicity of the disease.

RESUMO: As leishmanioses compreendem um complexo de doenças causadas por parasitos intracelulares obrigatórios pertencentes ao gênero Leishmania. Consideradas como importante problema de saúde pública, sendo os cães domésticos os principais responsáveis pela manutenção da cadeia epidemiológica da doença, estima-se que mais da metade dos cães infectados não manifestam sinais clínicos da enfermidade. Avaliou-se o perfil de IL-10 e INF- de cães naturalmente infectados com Leishmania (Leishmania) chagasi no município de São Luís-MA. Foram coletadas 50 amostras, sendo 20 de animais positivos e sintomáticos para Leishmaniose Visceral Canina (LVC), 20 de animais positivos e assintomáticos e 10 de animais sabidamente negativos para a LVC. As amostras foram analisadas pelo teste imunocromatográfico rápido Dual Path Platform (DPP/Biomanguinhos®) e pelo ELISA (EIE/Biomanguinhos®) indireto para detecção de anticorpos anti-Leishmania. Após as confirmações dos testes, foi realizado o ELISA de captura para quantificação das citocinas IL-10 e INF- através do kit Milliplex MAP. Houve diferença estatística entre os grupos, observando um aumento de IL-10 em soros de cães sintomáticos para LVC, comparado com o grupo de animais assintomáticos, sugerindo que animais com essa expressão de IL-10 podem estar associados à susceptibilidade a doença. Assim como o aumento dos níveis de INF- observados em cães assintomáticos, comparado com o grupo de cães sintomáticos, poderiam estar relacionados à cronicidade da doença.

La práctica del tratamiento en na leishmaniosis visceral canina (LVC) en clínicas veterinárias, cuidados y protocolos / A prática do tratamento na leishmaniose visceral canina (LVC) em clínicas veterinárias, cuidados e protocolos / Treatment practice in canine visceral leishmaniasis (CVL) in veterinary clinics, care and protocols

La leishmaniasis son un grupo de enfermedades infecciosas que afectan a los seres humanos, animales domésticos (perros y gatos) y salvajes causadas por protozoos del género Leishmania. La transmisión se produce a través de la picadura del mosquito género Phlebotomus en el Viejo Mundo, y Lutzomyia en el Nuevo Mundo. La Leishmaniasis Visceral Canina (LVC), es la causa más agresiva, y más frecuente de la enfermedad clínica en perros, y gatos de vez en cuando. Sus depósitos varían según la región y pueden ser animales domésticos o salvajes. Leishmania (leishmania) infantum está presente en el sur de México hasta América del Sur. En el caso de la LVC, la recomendación del Consejo Federal de Medicina Veterinaria es la eutanasia y el tratamiento se consideraba ilegal hasta 2013, cuando se produjo la autorización del tratamiento por el Tribunal Regional 3ª Región Federal en todo el país, desde que no se utilizan fármacos para el tratamiento de la leishmaniasis humana. Tratar o no, indicar o no la eutanasia es tema polémico para los veterinarios porque el tratamiento no elimina totalmente la carga parasitaria de los animales, y es una zoonosis. En Brasilia, la leishmaniasis visceral se considera endémica, teniendo en cuenta el comportamiento epidemiológico y la confirmación de los casos humanos autóctonos. En este estudio, se aplicó un cuestionario para evaluar la práctica del tratamiento de esta enfermedad en nueve clínicas veterinarias para pequeños animales en Brasilia. Cinco clínicas realizán el tratamiento de LVC. Todas recomiendan alopurinol, cuatro miltefosina, tres marbofloxacinam, dos anfotericina B y antimonio pentavalente. Dos clínicas se negaron a contestar el cuestionario, y dos no realizaron el tratamiento, recomendando la eutanasia.(AU)

The leishmaniasis are a group of infectious diseases that affect humans, dogs, cats and wild animals worldwide. It is caused by protozoa of the genus Leishmania. The infection is transmitted by sandflies of the genus Phlebotomus in the Old World and Lutzomyia in the New World. The Canine Visceral Leishmaniasis (CVL), the most severe disease form, is a frequent cause of clinical illness in dogs depending on the region, being less common in cats. The Brazilian Federal Counsel of Veterinary Medicine recommendation for the CVL illness is euthanasia, being illegal to treat until 2013, when the Third Region Federal Court authorized it all over the Country, as long as the medication isnt the same used in humans. Whether to treat or not and sacrifice the animal is a polemic veterinary issue, since the treatment does not eliminate the entire parasite load, and it is a zoonosis. In Brasilia, Visceral Leishmaniasis is endemic, considering its epidemiological behavior and the confirmation of autochthony of human cases. In this study, small animal veterinarians were questioned about the treatment of Canine Visceral Leishmaniosis in Brasilia, DF, Brazil to evaluate the treatment practice of the CVL. Five out of nine do the treatment. All of the clinicians use alupurinol, four use miltefosin, three of them use marbofloxacin, two use pentavalents antimonial and anfotericin B. However, two veterinary clinics do not treat and recommend euthanasia, two clinics didn't want to discuss their protocol.(AU)

As leishmanioses são um grupo de doenças infecciosas que afetam humanos, animais domésticos (cães e gatos) e silvestres, causadas por protozoários do gênero Leishmania. A transmissão ocorre pela picada do mosquito do gênero Phlebotomus no Velho Mundo e Lutzomyia no Novo Mundo. A Leishmaniose Visceral Canina (LVC), a forma mais agressiva, é causa frequente de doença clínica em cães e, ocasionalmente em gatos. Seus reservatórios variam de acordo com a região, podendo ser animais domésticos ou silvestres. Leishmania infantum está presente do sul do México até a América do Sul. No caso da LVC, a recomendação do Conselho Federal de Medicina Veterinária é a eutanásia. O tratamento era considerado ilegal até 2013, quando houve autorização do tratamento pelo Tribunal Regional Federal da 3ª Região em todo País, desde que não se utilizassem medicamentos para o tratamento da leishmaniose humana. Tratar ou não, indicar ou não eutanásia é questão polêmica para os clínicos veterinários, pois o tratamento não elimina totalmente a carga parasitária dos animais, e trata-se de uma zoonose. Em Brasília, a leishmaniose visceral é considerada endêmica, considerando o comportamento epidemiológico e a confirmação da autoctonia dos casos humanos. No presente estudo, foi aplicado questionário para se avaliar a prática do tratamento dessa enfermidade, em clínicas veterinárias de pequenos animais de Brasília. Cinco delas realizam o tratamento da LVC. Todas recomendam o alopurinol, quatro a miltefosina, três a marbofloxacina e duas a anfotericina B e antimoniais pentavalentes. Duas clínicas se recusaram a responder o questionário, e outras duas não realizam o tratamento, recomendando eutanásia.(AU)

La práctica del tratamiento en na leishmaniosis visceral canina (LVC) en clínicas veterinárias, cuidados y protocolos / A prática do tratamento na leishmaniose visceral canina (LVC) em clínicas veterinárias, cuidados e protocolos / Treatment practice in canine visceral leishmaniasis (CVL) in veterinary clinics, care and protocols

La leishmaniasis son un grupo de enfermedades infecciosas que afectan a los seres humanos, animales domésticos (perros y gatos) y salvajes causadas por protozoos del género Leishmania. La transmisión se produce a través de la picadura del mosquito género Phlebotomus en el Viejo Mundo, y Lutzomyia en el Nuevo Mundo. La Leishmaniasis Visceral Canina (LVC), es la causa más agresiva, y más frecuente de la enfermedad clínica en perros, y gatos de vez en cuando. Sus depósitos varían según la región y pueden ser animales domésticos o salvajes. Leishmania (leishmania) infantum está presente en el sur de México hasta América del Sur. En el caso de la LVC, la recomendación del Consejo Federal de Medicina Veterinaria es la eutanasia y el tratamiento se consideraba ilegal hasta 2013, cuando se produjo la autorización del tratamiento por el Tribunal Regional 3ª Región Federal en todo el país, desde que no se utilizan fármacos para el tratamiento de la leishmaniasis humana. Tratar o no, indicar o no la eutanasia es tema polémico para los veterinarios porque el tratamiento no elimina totalmente la carga parasitaria de los animales, y es una zoonosis. En Brasilia, la leishmaniasis visceral se considera endémica, teniendo en cuenta el comportamiento epidemiológico y la confirmación de los casos humanos autóctonos. En este estudio, se aplicó un cuestionario para evaluar la práctica del tratamiento de esta enfermedad en nueve clínicas veterinarias para pequeños animales en Brasilia. Cinco clínicas realizán el tratamiento de LVC. Todas recomiendan alopurinol, cuatro miltefosina, tres marbofloxacinam, dos anfotericina B y antimonio pentavalente. Dos clínicas se negaron a contestar el cuestionario, y dos no realizaron el tratamiento, recomendando la eutanasia.

The leishmaniasis are a group of infectious diseases that affect humans, dogs, cats and wild animals worldwide. It is caused by protozoa of the genus Leishmania. The infection is transmitted by sandflies of the genus Phlebotomus in the Old World and Lutzomyia in the New World. The Canine Visceral Leishmaniasis (CVL), the most severe disease form, is a frequent cause of clinical illness in dogs depending on the region, being less common in cats. The Brazilian Federal Counsel of Veterinary Medicine recommendation for the CVL illness is euthanasia, being illegal to treat until 2013, when the Third Region Federal Court authorized it all over the Country, as long as the medication isn’t the same used in humans. Whether to treat or not and sacrifice the animal is a polemic veterinary issue, since the treatment does not eliminate the entire parasite load, and it is a zoonosis. In Brasilia, Visceral Leishmaniasis is endemic, considering its epidemiological behavior and the confirmation of autochthony of human cases. In this study, small animal veterinarians were questioned about the treatment of Canine Visceral Leishmaniosis in Brasilia, DF, Brazil to evaluate the treatment practice of the CVL. Five out of nine do the treatment. All of the clinicians use alupurinol, four use miltefosin, three of them use marbofloxacin, two use pentavalents antimonial and anfotericin B. However, two veterinary clinics do not treat and recommend euthanasia, two clinics didn't want to discuss their protocol.

As leishmanioses são um grupo de doenças infecciosas que afetam humanos, animais domésticos (cães e gatos) e silvestres, causadas por protozoários do gênero Leishmania. A transmissão ocorre pela picada do mosquito do gênero Phlebotomus no Velho Mundo e Lutzomyia no Novo Mundo. A Leishmaniose Visceral Canina (LVC), a forma mais agressiva, é causa frequente de doença clínica em cães e, ocasionalmente em gatos. Seus reservatórios variam de acordo com a região, podendo ser animais domésticos ou silvestres. Leishmania infantum está presente do sul do México até a América do Sul. No caso da LVC, a recomendação do Conselho Federal de Medicina Veterinária é a eutanásia. O tratamento era considerado ilegal até 2013, quando houve autorização do tratamento pelo Tribunal Regional Federal da 3ª Região em todo País, desde que não se utilizassem medicamentos para o tratamento da leishmaniose humana. Tratar ou não, indicar ou não eutanásia é questão polêmica para os clínicos veterinários, pois o tratamento não elimina totalmente a carga parasitária dos animais, e trata-se de uma zoonose. Em Brasília, a leishmaniose visceral é considerada endêmica, considerando o comportamento epidemiológico e a confirmação da autoctonia dos casos humanos. No presente estudo, foi aplicado questionário para se avaliar a prática do tratamento dessa enfermidade, em clínicas veterinárias de pequenos animais de Brasília. Cinco delas realizam o tratamento da LVC. Todas recomendam o alopurinol, quatro a miltefosina, três a marbofloxacina e duas a anfotericina B e antimoniais pentavalentes. Duas clínicas se recusaram a responder o questionário, e outras duas não realizam o tratamento, recomendando eutanásia.

Quantificação da IL-10 e do INF-γ em cães com ou sem sinais clínicos de infecção com Leishmania (Leishmania) chagasi / Quantification of IL-10 and IFN-γ in dogs with or without clinical signs of Leishmania (Leishmania) chagasi infection

As leishmanioses compreendem um complexo de doenças causadas por parasitos intracelulares obrigatórios pertencentes ao gênero Leishmania. Consideradas como importante problema de saúde pública, sendo os cães domésticos os principais responsáveis pela manutenção da cadeia epidemiológica da doença, estima-se que mais da metade dos cães infectados não manifestam sinais clínicos da enfermidade. Avaliou-se o perfil de IL-10 e INF- γ de cães naturalmente infectados com Leishmania (Leishmania) chagasi no município de São Luís-MA. Foram coletadas 50 amostras, sendo 20 de animais positivos e sintomáticos para Leishmaniose Visceral Canina (LVC), 20 de animais positivos e assintomáticos e 10 de animais sabidamente negativos para a LVC. As amostras foram analisadas pelo teste imunocromatográfico rápido Dual Path Platform (DPP/Biomanguinhos®) e pelo ELISA (EIE/Biomanguinhos®) indireto para detecção de anticorpos anti-Leishmania. Após as confirmações dos testes, foi realizado o ELISA de captura para quantificação das citocinas IL-10 e INF-γ através do kit Milliplex MAP. Houve diferença estatística entre os grupos, observando um aumento de IL-10 em soros de cães sintomáticos para LVC, comparado com o grupo de animais assintomáticos, sugerindo que animais com essa expressão de IL-10 podem estar associados à susceptibilidade a doença. Assim como o aumento dos níveis de INF-γ observados em cães assintomáticos, comparado com o grupo de cães sintomáticos, poderiam estar relacionados à cronicidade da doença.(AU)

Leishmaniasis comprise a complex of diseases caused by intracellular mandatory parasites belonging to the genus Leishmania. Considered as an important public health problem, and domestic dogs are primarily responsible for maintaining the epidemiological chain of the disease, it is estimated that more than the half of the dogs infected do not show clinical signs of the disease. The profile of IL-10 and IFN-γ dogs naturally infected with Leishmania (Leishmania) chagasi in São Luís/MA was evaluated. Blood samples were collected from 50 animals, 20 from positive and symptomatic dogs for leishmaniasis canine (CVL), 20 from positive asymptomatic animals and 10 negative. Samples were analyzed by immunochromatographic test Dual Path Platform (DPP/Biomanguinhos®) and by indirect ELISA (EIE/Biomanguinhos®) for detection of anti-Leishmania antibodies. After the confirmation of the tests, the capture ELISA was performed for quantification of IL-10 and IFN-γ cytokines through the Milliplex MAP kit. There was a statistical difference between the groups, observing an increase of IL-10 in blood of symptomatic dogs for CVL, compared to the group of asymptomatic animals, suggesting that animals with this expression of IL-10 may be associated with susceptibility to disease. As well as the increase in IFN-γ levels in asymptomatic dogs, compared to the symptomatic dog group, could be related to chronicity of the disease.(AU)

Avaliação de IFN-γ e IL-10 em cães naturalmente infectados com Leishmania (Leishmania) chagasi com e sem manifestações clínicas / Evaluation of INF-γ and IL-10 in dogs naturally infected by Leishmania (Leishmania) chagasi with and without clinic events

As leishmanioses têm como agentes etiológicos parasitas intracelulares obrigatórios pertencentes ao gênero Leishmania capazes de infectar diferentes espécies de mamíferos e nestes se reproduzirem dentro do sistema fagocítico mononuclear. Os cães domésticos são os principais responsáveis pela manutenção da cadeia epidemiológica da doença, podendo apresentar uma grande variedade de perfis clínicos, desde aparentemente sadios a severamente acometidos. Avaliou-se a expressão das citocinas de cães naturalmente infectados com Leishmania (Leishmania) chagasi. Foram coletadas 50 amostras, sendo 20 de animais positivos e sintomáticos para Leishmaniose Visceral Canina (LVC), 20 de animais positivos e assintomáticos e 10 de animais sabidamente negativos para a LVC. As amostras foram analisadas pelo teste imunocromatográfico rápido Dual Path Platform (DPP/Biomanguinhos®) e pelo ELISA (EIE/Biomanguinhos®) indireto para detecção de anticorpos anti-Leishmania. Após as confirmações dos testes, foi realizado o ELISA de captura (R & D Systems) para quantificação das citocinas IL-10 e IFN-γ. Houve diferença estatística entre os grupos observando um aumento nos níveis de IFN-γ nos animais assintomáticos e um aumento de IL-10 nos sintomáticos.(AU)

Leishmaniasis has as obligatory intracellular parasitic etiological agents belonging to the genus Leishmania capable of infecting different species of mammals and reproducing them within the mononuclear phagocytic system. Domestic dogs are the main responsible for maintaining the epidemiological chain of the disease, presenting a wide variety of clinical profiles, from apparently healthy to severely affected. The expression of the cytokines from dogs naturally infected with Leishmania (Leishmania) chagasi was evaluated. Blood samples were collected from 50 animals, 20 from positive and symptomatic dogs for Leishmaniasis Canine (CVL), 20 from positive asymptomatic animals and 10 negative. Samples were analyzed by immunochromatographic test Dual Path Platform (DPP/Biomanguinhos®) and by indirect ELISA (EIE/Biomanguinhos®) for detection of anti-Leishmania antibodies. There was statistical difference between the groups observing an increase in IFN-γ levels in asymptomatic animals and an IL-10 increase in symptomatic.(AU)

Avaliação de IFN-γ e IL-10 em cães naturalmente infectados com Leishmania (Leishmania) chagasi com e sem manifestações clínicas / Evaluation of INF-γ and IL-10 in dogs naturally infected by Leishmania (Leishmania) chagasi with and without clinic events

As leishmanioses têm como agentes etiológicos parasitas intracelulares obrigatórios pertencentes ao gênero Leishmania capazes de infectar diferentes espécies de mamíferos e nestes se reproduzirem dentro do sistema fagocítico mononuclear. Os cães domésticos são os principais responsáveis pela manutenção da cadeia epidemiológica da doença, podendo apresentar uma grande variedade de perfis clínicos, desde aparentemente sadios a severamente acometidos. Avaliou-se a expressão das citocinas de cães naturalmente infectados com Leishmania (Leishmania) chagasi. Foram coletadas 50 amostras, sendo 20 de animais positivos e sintomáticos para Leishmaniose Visceral Canina (LVC), 20 de animais positivos e assintomáticos e 10 de animais sabidamente negativos para a LVC. As amostras foram analisadas pelo teste imunocromatográfico rápido Dual Path Platform (DPP/Biomanguinhos®) e pelo ELISA (EIE/Biomanguinhos®) indireto para detecção de anticorpos anti-Leishmania. Após as confirmações dos testes, foi realizado o ELISA de captura (R & D Systems) para quantificação das citocinas IL-10 e IFN-γ. Houve diferença estatística entre os grupos observando um aumento nos níveis de IFN-γ nos animais assintomáticos e um aumento de IL-10 nos sintomáticos.(AU)

Leishmaniasis has as obligatory intracellular parasitic etiological agents belonging to the genus Leishmania capable of infecting different species of mammals and reproducing them within the mononuclear phagocytic system. Domestic dogs are the main responsible for maintaining the epidemiological chain of the disease, presenting a wide variety of clinical profiles, from apparently healthy to severely affected. The expression of the cytokines from dogs naturally infected with Leishmania (Leishmania) chagasi was evaluated. Blood samples were collected from 50 animals, 20 from positive and symptomatic dogs for Leishmaniasis Canine (CVL), 20 from positive asymptomatic animals and 10 negative. Samples were analyzed by immunochromatographic test Dual Path Platform (DPP/Biomanguinhos®) and by indirect ELISA (EIE/Biomanguinhos®) for detection of anti-Leishmania antibodies. There was statistical difference between the groups observing an increase in IFN-γ levels in asymptomatic animals and an IL-10 increase in symptomatic.(AU)

Quantificação da IL-10 e do INF-γ em cães com ou sem sinais clínicos de infecção com Leishmania (Leishmania) chagasi / Quantification of IL-10 and IFN-γ in dogs with or without clinical signs of Leishmania (Leishmania) chagasi infection

As leishmanioses compreendem um complexo de doenças causadas por parasitos intracelulares obrigatórios pertencentes ao gênero Leishmania. Consideradas como importante problema de saúde pública, sendo os cães domésticos os principais responsáveis pela manutenção da cadeia epidemiológica da doença, estima-se que mais da metade dos cães infectados não manifestam sinais clínicos da enfermidade. Avaliou-se o perfil de IL-10 e INF- γ de cães naturalmente infectados com Leishmania (Leishmania) chagasi no município de São Luís-MA. Foram coletadas 50 amostras, sendo 20 de animais positivos e sintomáticos para Leishmaniose Visceral Canina (LVC), 20 de animais positivos e assintomáticos e 10 de animais sabidamente negativos para a LVC. As amostras foram analisadas pelo teste imunocromatográfico rápido Dual Path Platform (DPP/Biomanguinhos®) e pelo ELISA (EIE/Biomanguinhos®) indireto para detecção de anticorpos anti-Leishmania. Após as confirmações dos testes, foi realizado o ELISA de captura para quantificação das citocinas IL-10 e INF-γ através do kit Milliplex MAP. Houve diferença estatística entre os grupos, observando um aumento de IL-10 em soros de cães sintomáticos para LVC, comparado com o grupo de animais assintomáticos, sugerindo que animais com essa expressão de IL-10 podem estar associados à susceptibilidade a doença. Assim como o aumento dos níveis de INF-γ observados em cães assintomáticos, comparado com o grupo de cães sintomáticos, poderiam estar relacionados à cronicidade da doença.(AU)

Leishmaniasis comprise a complex of diseases caused by intracellular mandatory parasites belonging to the genus Leishmania. Considered as an important public health problem, and domestic dogs are primarily responsible for maintaining the epidemiological chain of the disease, it is estimated that more than the half of the dogs infected do not show clinical signs of the disease. The profile of IL-10 and IFN-γ dogs naturally infected with Leishmania (Leishmania) chagasi in São Luís/MA was evaluated. Blood samples were collected from 50 animals, 20 from positive and symptomatic dogs for leishmaniasis canine (CVL), 20 from positive asymptomatic animals and 10 negative. Samples were analyzed by immunochromatographic test Dual Path Platform (DPP/Biomanguinhos®) and by indirect ELISA (EIE/Biomanguinhos®) for detection of anti-Leishmania antibodies. After the confirmation of the tests, the capture ELISA was performed for quantification of IL-10 and IFN-γ cytokines through the Milliplex MAP kit. There was a statistical difference between the groups, observing an increase of IL-10 in blood of symptomatic dogs for CVL, compared to the group of asymptomatic animals, suggesting that animals with this expression of IL-10 may be associated with susceptibility to disease. As well as the increase in IFN-γ levels in asymptomatic dogs, compared to the symptomatic dog group, could be related to chronicity of the disease.(AU)

PADRONIZAÇÃO DE ENSAIO ELISA IN HOUSE PARA DIAGNÓSTICO DE LEISHMANIOSE EM EQUINOS E CANINOS

As leishmanioses são doenças causadas pelo protozoário Leishmania spp. e estão distribuídas globalmente. Na América do Sul, o Brasil concentra o maior número de casos de leishmaniose visceral e cutânea em humanos. No estado do Rio Grande do Sul, na região da fronteira Oeste, é descrita a presença do flebotomíneo vetor e, também, a infecção em humanos, caninos e equinos. O cão doméstico é o principal reservatório nas zonas urbanas, entretanto, a participação dos equinos na manutenção do parasito vem sendo discutida. Diferentes técnicas diagnósticas estão disponíveis para identificação tanto do agente quanto da resposta imunológica do indivíduo. O teste de ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) permite a identificação da resposta imune por meio da ligação antígeno anticorpo. Em 2011, foi definido como teste confirmatório para Leishmaniose visceral canina (LVC) pelo Ministério da Saúde. Tendo em vista a importância da Leishmaniose em cães no município de Uruguaiana e, a necessidade de estudos referentes à manutenção da doença e possíveis reservatórios, o presente trabalho teve por objetivo a padronização de um protocolo in house de ELISA indireto para detecção de resposta imunológica contra Leishmania spp. nas espécies canina e equina, bem como a avaliação sorológica de amostras provenientes dos municípios de Uruguaiana e Barra do Quaraí-RS. Inicialmente, foram padronizados os protocolos para o cultivo de Leishmania no laboratório. As cepas de Leishmania infantum, espécie utilizada como antígeno, foram disponibilizadas pela FRIOCRUZ/RJ. A fixação do antígeno foi realizada utilizando as formas promastigotas do parasito, sendo que, a concentração de 10ug/ml demonstrou melhores resultados. O protocolo de ELISA utilizado para as espécies equina e canina foram iguais. O teste das diluições do anticorpo primário variou entre as espécies: para equinos foram utilizadas as concentrações 1/100, 1/200, 1/400, 1/800 e 1/1000; e para caninos 1/100, 1/400 e 1/800. As concentrações de anticorpo secundário utilizadas nos testes foram de: 1/5000 e 1/10000 para equinos e caninos. Após a padronização, foram realizados os testes sorológicos em amostras provenientes de caninos e equinos dos municípios de Barra do Quaraí e Uruguaiana. Foram testados 51 cães e 159 equinos. Dentre os 51 caninos testados, 17 (33%) foram positivos na técnica de ELISA sendo que, 16 destes foram também positivos no teste imunocromatográfico DPP®. Referente aos equinos testados, 159 animais, 16 (10%) foram positivos no ELISA. Com isso, pode-se concluir que, foi possível a padronização de um protocolo de ELISA indireto in house para diagnóstico da leishmaniose em equinos e caninos e, a presença de animais positivos demonstra que há circulação da doença na população estudada.

Leishmaniasis are diseases caused by the protozoan Leishmania spp. and are distributed globally. In South America, Brazil concentrates the most significant number of visceral and cutaneous leishmaniasis cases in humans. In the western border of the state of Rio Grande do Sul, Brazil, there are reports about sandflies (the vectors) and the infection in humans, canines, and horses. The domestic dog is the main reservoir in urban areas; however, there is a discussion about horses' participation in the maintenance of the parasite. Several diagnostic techniques are available to identify both the agent and the individual's immune response. The ELISA test (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) allows identifying the immune response through antibody-antigen binding. In 2011, it was defined as a confirmatory test for canine visceral Leishmaniasis (LVC) by the Ministry of Health. Given the importance of Leishmaniasis in dogs in the municipality of Uruguaiana and the need for studies regarding the maintenance of the disease and possible reservoirs, the present work aimed to standardize an in house indirect ELISA protocol to detect an immune response against Leishmania spp. in canine and equine species, as well as the serological evaluation of samples from the municipalities of Uruguaiana and Barra do Quaraí-RS. Initially, protocols for the cultivation of Leishmania in the laboratory were standardized. The strains of Leishmania infantum, a species used as an antigen, were made available by FRIOCRUZ / RJ. Antigen fixation was performed using the parasite's promastigote forms, and the concentration of 10ug/ml demonstrated the best results. The ELISA protocol used for equine and canine species was the same. The test of the dilutions of the primary antibody varied between species: for horses, the concentrations 1/100, 1/200, 1/400, 1/800, and 1/1000 were used; and 1/100, 1/400, and 1/800 for canines. The secondary antibody concentrations used in the tests were: 1/5000 and 1/10000 for horses and canines. After standardization, serological tests were carried out on samples from canines and horses from the municipalities of Barra do Quaraí and Uruguaiana. Testes englobed 51 dogs and 159 horses. Among the 51 canines tested, 17 (33%) were positive in the ELISA technique, 16 of which were also positive in the DPP® immunochromatographic test. Regarding the tested horses, 159 animals, 16 (10%) were positive in the ELISA. With this, it was possible to conclude that it was possible to standardize an indirect ELISA protocol in house to diagnose Leishmaniasis in horses and canines. The presence of positive animals demonstrates that the disease is occurring in the studied population.

Presence of antibodies against Leishmania spp. in domestic dogs from Toledo, Paraná, Brazil / Ocorrência de anticorpos anti-Leishmania spp. em cães domiciliados da região de Toledo, Paraná, Brasil

Leishmaniases are a group of diseases caused by Leishmania protozoa affecting various vertebrate hosts, including humans and dogs. Dogs represent the most important domestic reservoir of leishmaniasis. For this reason, the aim of this study was to detect the presence of antibodies against Leishmania spp. in dogs being treated at the veterinary hospital of our institution. Samples were obtained from 175 animals by jugular or cephalic venipuncture, and serum was subsequently separated. Anti-Leishmania spp. IgG antibodies were detected in these specimens using indirect immunofluorescence. This revealed that of the 175 serum samples, those of four (2.28%) animals reacted positively and the antibodies title was 40. These data are consistent with the transmission of Leishmania spp. in the region, suggesting that dogs represent a reservoir of American cutaneous leishmaniasis. This is the first description of circulating antibodies against Leishmania spp. in the West region of Paraná State.

As leishmanioses são doenças causadas pelo protozoário Leishmania e acometem vários hospedeiros vertebrados, incluindo humanos e cães. Cães representam o reservatório doméstico mais importante da leishmaniose. O objetivo do presente trabalho foi detectar a presença de anticorpos contra Leishmania spp. em cães atendidos na rotina de animais de companhia do Hospital Veterinário desta instituição de ensino. Amostras de sangue de 175 animais foram obtidas por venopunção jugular ou cefálica com posterior obtenção dos soros. Estas amostras foram submetidas à reação de imunofluorescência indireta para detecção de anticorpos da classe IgG anti-Leishmania. A reação sorológica dos 175 soros realizados revelou quatro (2,28%) animais reagentes com título 40. Estes dados revelam a presença de espécies de Leishmania spp. circulando na região, sugerindo o papel de cães como reservatórios para leishmaniose cutânea americana. Esta é a primeira descrição da circulação de anticorpos contra Leishmania spp. na região Oeste do Paraná.

Presence of antibodies against Leishmania spp. in domestic dogs from Toledo, Paraná, Brazil / Ocorrência de anticorpos anti-Leishmania spp. em cães domiciliados da região de Toledo, Paraná, Brasil

Leishmaniases are a group of diseases caused by Leishmania protozoa affecting various vertebrate hosts, including humans and dogs. Dogs represent the most important domestic reservoir of leishmaniasis. For this reason, the aim of this study was to detect the presence of antibodies against Leishmania spp. in dogs being treated at the veterinary hospital of our institution. Samples were obtained from 175 animals by jugular or cephalic venipuncture, and serum was subsequently separated. Anti-Leishmania spp. IgG antibodies were detected in these specimens using indirect immunofluorescence. This revealed that of the 175 serum samples, those of four (2.28%) animals reacted positively and the antibodies title was 40. These data are consistent with the transmission of Leishmania spp. in the region, suggesting that dogs represent a reservoir of American cutaneous leishmaniasis. This is the first description of circulating antibodies against Leishmania spp. in the West region of Paraná State.(AU)

As leishmanioses são doenças causadas pelo protozoário Leishmania e acometem vários hospedeiros vertebrados, incluindo humanos e cães. Cães representam o reservatório doméstico mais importante da leishmaniose. O objetivo do presente trabalho foi detectar a presença de anticorpos contra Leishmania spp. em cães atendidos na rotina de animais de companhia do Hospital Veterinário desta instituição de ensino. Amostras de sangue de 175 animais foram obtidas por venopunção jugular ou cefálica com posterior obtenção dos soros. Estas amostras foram submetidas à reação de imunofluorescência indireta para detecção de anticorpos da classe IgG anti-Leishmania. A reação sorológica dos 175 soros realizados revelou quatro (2,28%) animais reagentes com título 40. Estes dados revelam a presença de espécies de Leishmania spp. circulando na região, sugerindo o papel de cães como reservatórios para leishmaniose cutânea americana. Esta é a primeira descrição da circulação de anticorpos contra Leishmania spp. na região Oeste do Paraná.(AU)

Seroepidemiology of Leishmania infantum in dogs in the city of Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil / Soroepidemiologia de Leishmania infantum em cães de uma área com ocorrência de casos no município de Porto Alegre, Rio Grande do Sul

Leishmaniosis are zoonoses that present several clinical manifestations in humans and have dogs as their main reservoir in the urban environment. Visceral leishmaniasis (VL) is the most severe form of the parasitosis and has been increasing in Brazil, despite the actions of public health agencies. Until 2002, the State of Rio Grande do Sul (RS) was considered free of human and canine leishmaniasis. The firsthuman case of cutaneous leishmaniasis in RS was recorded in 2003. In 2009, the first autochthonous cases of human VL and canine visceral leishmaniasis (CVL) were confirmed in São Borja, RS, and the occurrence of the insect vector was recorded for the first time in the state. In 2010, the first confirmed case of CVL was reported and seropositive dogs were identified in the city of Porto Alegre, RS. Given the importance of this zoonosis and the difficulties of a reliable diagnosis in dogs, this study aimed to identify epidemiological aspects of CVL in dogs in an area of Porto Alegre where cases of the disease have been reported. A total of 300 blood samples were collected from dogs in this area, which were then tested by the methods of RT-DPP® and ELISA for diagnosis of Leishmania infantum. An epidemiological questionnaire was completed by dog owners, containing aspects related to care of the animals, characteristics of theirenvironment, and their living conditions. We observed that 83% (250/300) of the studied dogs were of mixed breed, 58% (175/300) were female, 78% (238/300) slept outdoors, and 61% (183/300) shared their living quarters with other species. Clinically, we observed that 90% (270/300) of the animals were infested by ectoparasites, 70% (210/300) had dermatopathies, 24% (72/300) presented weight loss and anorexia, and 22% (65/300) had ocular disorders. The results of the two serological tests were 100% concordant for the three seropositive samples (1%), and the remaining 297 (99%) were negative for both tests.[...]

As leishmanioses são zoonoses que apresentam diversas manifestações clínicas no homem e tem ocão como seu principal reservatório no ambiente urbano. A Leishmaniose visceral (LV) é a forma mais grave da parasitose e sua ocorrência tem aumentado no Brasil, apesar das ações dos órgãos de saúde pública. Até o do ano de 2002, o Estado do Rio Grande do Sul era área indene para as leishmanioses humana e canina. Em 2003 foi registrado o primeiro caso humano da forma tegumentar. Em 2009, foram confirmados os primeiros casos autóctones humanos de LV e caninos de Leishmaniose visceral canina (LVC) no município de São Borja/RS e registrada, pela primeira vez, a ocorrência do inseto vetor no estado. Em 2010, foi notificado o primeiro caso confirmado de LVC e identificados cães sororreagentes em Porto Alegre/RS. Tendo em vista a importância desta zoonose e as dificuldades de um diagnóstico confiável em cães, o presente estudo objetivou identificar aspectos epidemiológicos da LVC em cães em uma região com registros de casos no município de Porto Alegre/RS. Coletaram-se 300 amostras de sangue de cães desta região as quais foram testas pelos métodos Dual Path Platform (TR-DPP®) e ELISA para diagnóstico de Leishmania infantum. Um questionário epidemiológico foi aplicado durante entrevista com os tutores, contendo aspectos relativos à criação dos animais e fatores ambientais. Verificou-se que 83% (250/300) dos cães não tinham raça definida, 58% (175/300) eram fêmeas, 78% (238/300) dormiamao ar livre e 61% (183/300) conviviam com outras espécies animais. Clinicamente, observou-se que 90% (270/300) dos animais apresentavam infestação por ectoparasitos, 70% (210/300) apresentavam alterações dermatológicas, 24% (72/300) emagrecimento e anorexia e 22% (65/300) alterações oculares.[...]

Seroepidemiology of Leishmania infantum in dogs in the city of Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil / Soroepidemiologia de Leishmania infantum em cães de uma área com ocorrência de casos no município de Porto Alegre, Rio Grande do Sul

Leishmaniosis are zoonoses that present several clinical manifestations in humans and have dogs as their main reservoir in the urban environment. Visceral leishmaniasis (VL) is the most severe form of the parasitosis and has been increasing in Brazil, despite the actions of public health agencies. Until 2002, the State of Rio Grande do Sul (RS) was considered free of human and canine leishmaniasis. The firsthuman case of cutaneous leishmaniasis in RS was recorded in 2003. In 2009, the first autochthonous cases of human VL and canine visceral leishmaniasis (CVL) were confirmed in São Borja, RS, and the occurrence of the insect vector was recorded for the first time in the state. In 2010, the first confirmed case of CVL was reported and seropositive dogs were identified in the city of Porto Alegre, RS. Given the importance of this zoonosis and the difficulties of a reliable diagnosis in dogs, this study aimed to identify epidemiological aspects of CVL in dogs in an area of Porto Alegre where cases of the disease have been reported. A total of 300 blood samples were collected from dogs in this area, which were then tested by the methods of RT-DPP® and ELISA for diagnosis of Leishmania infantum. An epidemiological questionnaire was completed by dog owners, containing aspects related to care of the animals, characteristics of theirenvironment, and their living conditions. We observed that 83% (250/300) of the studied dogs were of mixed breed, 58% (175/300) were female, 78% (238/300) slept outdoors, and 61% (183/300) shared their living quarters with other species. Clinically, we observed that 90% (270/300) of the animals were infested by ectoparasites, 70% (210/300) had dermatopathies, 24% (72/300) presented weight loss and anorexia, and 22% (65/300) had ocular disorders. The results of the two serological tests were 100% concordant for the three seropositive samples (1%), and the remaining 297 (99%) were negative for both tests.[...](AU)

As leishmanioses são zoonoses que apresentam diversas manifestações clínicas no homem e tem ocão como seu principal reservatório no ambiente urbano. A Leishmaniose visceral (LV) é a forma mais grave da parasitose e sua ocorrência tem aumentado no Brasil, apesar das ações dos órgãos de saúde pública. Até o do ano de 2002, o Estado do Rio Grande do Sul era área indene para as leishmanioses humana e canina. Em 2003 foi registrado o primeiro caso humano da forma tegumentar. Em 2009, foram confirmados os primeiros casos autóctones humanos de LV e caninos de Leishmaniose visceral canina (LVC) no município de São Borja/RS e registrada, pela primeira vez, a ocorrência do inseto vetor no estado. Em 2010, foi notificado o primeiro caso confirmado de LVC e identificados cães sororreagentes em Porto Alegre/RS. Tendo em vista a importância desta zoonose e as dificuldades de um diagnóstico confiável em cães, o presente estudo objetivou identificar aspectos epidemiológicos da LVC em cães em uma região com registros de casos no município de Porto Alegre/RS. Coletaram-se 300 amostras de sangue de cães desta região as quais foram testas pelos métodos Dual Path Platform (TR-DPP®) e ELISA para diagnóstico de Leishmania infantum. Um questionário epidemiológico foi aplicado durante entrevista com os tutores, contendo aspectos relativos à criação dos animais e fatores ambientais. Verificou-se que 83% (250/300) dos cães não tinham raça definida, 58% (175/300) eram fêmeas, 78% (238/300) dormiamao ar livre e 61% (183/300) conviviam com outras espécies animais. Clinicamente, observou-se que 90% (270/300) dos animais apresentavam infestação por ectoparasitos, 70% (210/300) apresentavam alterações dermatológicas, 24% (72/300) emagrecimento e anorexia e 22% (65/300) alterações oculares.[...](AU)

Canine cutaneous leishmaniasis by Leishmania (Viannia) braziliensis in an agricultural settlement, endemic area for leishmaniasis / Leishmaniose tegumentar canina por Leishmania (Viannia) braziliensis em um assentamento agrícola, área endêmica para leishmanioses

Cutaneous leishmaniasis has several species of Leishmania as agents, and a wide variety of wild and domestic animals as hosts and different species of phlebotomines as vectors. A case of cutaneous leishmaniasis in a dog coming from an agricultural settlement is described. This is the first report of parasitism in a dog by Le. (Viannia) braziliensis in Mato Grosso do Sul State. Attention is called to the importance of including this protozoonosis in the differential diagnosis of dermopathies in dogs as also the need to assess the importance of the domestic dog as a possible reservoir of Le. braziliensis.(AU)

As leishmanioses tegumentares são antropozoonoses metaxênicas de importância em saúde pública. Possuem como agentes etiológicos várias espécies de Leishmania, com ampla variedade de hospedeiros, como animais selvagens e domésticos, e diferentes espécies de flebotomíneos como vetores. Um caso de leishmaniose tegumentar em um cão procedente de um assentamento agrícola em Mato Grosso do Sul é descrito, sendo este o primeiro relato de parasitismo em cão doméstico nesse estado por Le. (Viannia) braziliensis. Alerta-se para a importância de se incluir essa protozoonose no diagnóstico diferencial de dermopatias em cães e para a necessidade de se avaliar o papel do cão doméstico como reservatório de Le. (Vi.) braziliensis.(AU)