Resumo

Canine leishmaniasis (CanL) is a multifaceted disease triggered by the protozoan Leishmania infantum, characterized by diverse clinical presentations, including osteoarticular complications. Immune-mediated joint diseases invariably initiate at the synovial membrane, implicating its pivotal role in arthritis pathogenesis. This study aimed to investigate the influence of natural L. infantum infection on synovial fluid characteristics and the expression of immune markers, including TLR-2, FOXP3, and COX-2, in the synovial membrane. Twenty naturally infected dogs (NID) with L. infantum were sourced from the Zoonosis Surveillance Unit (ZSU). Clinical-orthopedic assessments were conducted, encompassing lameness, joint edema, crepitus, patellar luxation, and the drawer test. Synovial fluid (SF) parameters, including volume, appearance, viscosity, total nucleated cell count (TNC), neutrophil count, and total protein (TP) content, were determined. After anesthesia and euthanasia, synovial membrane specimens were obtained. SF protein concentrations categorized dogs into three groups: GI (2 to 2.5g/dL), GII (2.5 to 6.0g/dL), and GIII (>6g/dL). Inflammatory infiltrates and synovial membrane changes were assessed, and immunohistochemistry evaluated TLR-2, FOXP3, and COX-2 marker expressions. Clinical evaluations revealed various osteoarticular abnormalities in NID dogs, including lameness (55%), joint edema (25%), crepitus (30%), patellar luxation (20%), and positive drawer test (25%). Post mortem examinations revealed bilateral subchondral bone, meniscus, and trochlea erosion in 30% of cases. Amastigotes of L. infantum were identified extracellularly and within macrophages (60%). An inflammatory infiltrate was predominant in 70% of dogs, with varying intensity among the groups. Mononuclear cells, chiefly macrophages and lymphocytes, and neutrophils comprised the infiltrate. TLR-2 and COX-2 expression levels were elevated in GIII compared to GII and GI. Conversely, FOXP3 showed moderate expression in GI and minimal expression in GII and GIII. This study underscores the contributory role of L. infantum infection in the development of joint lesions in CanL. Additionally, alterations in the expression of immune markers TLR2, FOXP3, and COX2 within the synovial membrane imply the perpetuation and exacerbation of the inflammatory processes, shedding light on the intricate pathogenesis of CanL-induced arthritis.

A leishmaniose canina (LC) é uma doença causada pelo protozoário Leishmania infantum com diversas manifestações clínicas, incluindo alterações osteoarticulares. A membrana sinovial é o local inicial de eventos patogênicos em todos os tipos de doenças articulares mediadas pelo sistema imunológico. Devido a essa relação, o objetivo foi avaliar a influência da infecção natural por L. infantum nas características do líquido sinovial e na expressão de TLR-2, FOXP3 e COX-2 na membrana sinovial. Cães naturalmente infectados por L. infantum (NID, N=20) foram obtidos na Unidade de Vigilância de Zoonoses (UVZ). Critérios clínicos ortopédicos foram avaliados, assim como foram obtidas amostras de líquido sinovial por artrocentese. O volume, aspecto, viscosidade, contagem total de células nucleadas (TNC) e contagem de neutrófilos e proteína total (PT) no líquido sinovial (LS) foram determinados. Os cães foram anestesiados e posteriormente eutanasiados para obtenção da membrana sinovial. Os animais do estudo apresentaram claudicação (55%), edema (25%), crepitação na articulação do joelho (30%) e luxação patelar medial (20%) e foram positivos no teste da gaveta (25%). Trinta por cento (30%) dos cães apresentaram erosão bilateral do osso subcondral, menisco e tróclea. Amastigotas de L. infantum foram visualizadas extracelularmente e dentro de macrófagos (60% dos animais). Os cães foram ainda divididos em três grupos de acordo com a concentração de proteína no líquido sinovial: GI: 2 a 2,5g/dL (valor de referência normal), GII: 2,5 a 6,0g/dL, GIII: >6g/dL. Infiltrado celular inflamatório, bem como aumento da camada da membrana sinovial, foram identificados em 70% (14/20) dos cães. O infiltrado inflamatório estava ausente em membranas sinoviais originadas de GI, presente em GII com intensidade moderada e presente em GIII com intensidade alta. O infiltrado inflamatório era predominantemente composto por macrófagos, linfócitos e neutrófilos. Houve um aumento na expressão dos marcadores TLR2 e COX2 em GIII em comparação com os grupos GII e GI. Contudo, em relação à expressão de FOXP3, houve uma marcação moderada em GI e apenas uma marcação leve em GII e GIII. Este trabalho reforça o papel da infecção por L. infantum no desenvolvimento de lesões articulares em cães. Além disso, nosso estudo indica que a LC modifica a expressão de TLR2, FOXP3 e COX2 na membrana sinovial, o que implica a manutenção e progressão do processo inflamatório.

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As afecções dentárias podem afetar diretamente a higidez da articulação temporo-mandibular (ATM), desencadeando inflamação e consequente dor, levando a redução do desempenho atlético e a problemas comportamentais. Desta forma, o objetivo do presente estudo foi realizar a avaliação fisico-química e citológica do líquido sinovial da articulação temporo-mandibular (ATM) de equinos da raça Quarto-de-Milha participantes de provas de Vaquejada. Foram avaliadas 28 articulações, de 14 equinos (12 machos e duas fêmeas), com peso médio de 384,21±55,01 quilos e idade média de 6,71±4,23 anos, os quais nunca haviam recebido qualquer tipo de tratamento dentário. Todos os animais recebiam o mesmo manejo nutricional composto de ração peletizada comercial (duas vezes ao dia) e viviam em regime intensivo de criação. Realizou-se exame físico geral, avaliação odontológica, centese das ATMs e análise citológica e fisico-química do líquido sinovial. Com os resultados obtidos é possível afirmar que as variáveis analisadas encontram-se dentro dos parâmetros de referência e que as alterações dentárias detectadas ao exame intra-oral não foram capazes de promover alterações na articulação temporomandibular de equinos de Vaquejada. Conclui-se que as alterações orais encontradas não levam a problemas na ATM; que a centese da ATM deve ser realizada em ambiente próximo ao laboratório clínico; para a dosagem de proteínas totais no líquido sinovial, a avaliação mais fidedigna é a do método do biureto e, para o diagnóstico de lesões nesta articulação são imprescindíveis estudos que possibilitem a compreensão da dinâmica articular na resposta inflamatória.

Dental disorders can directly affect the health of the temporomandibular joint (TMJ), triggering inflammation and consequent pain, and leading to reduced athletic performance and behavioral problems. Thus, the present study aimed to carry out a physico-chemical and cytological evaluation of synovial fluid of the temporomandibular joint (TMJ) of Quarter Horses participating in Vaquejada competitions. Twenty-eight joints of 14 horses (12 males and two females) with an average weight of 384.21±55.01 kg and average age of 6.71 ±4.23 were evaluated, which had never received any type of dental treatment. All animals received the same nutritional management, consisting of commercial pelleted feed (twice a day), and lived in an intensive rearing regime. A general physical examination, dental evaluation, TMJ centesis, and cytological and physicochemical analysis of the synovial fluid were performed. From the results obtained, it is possible to affirm that the analyzed variables are within the reference parameters and that the dental alterations detected by the intraoral examination were not able to promote alterations in the temporomandibular joint of Vaquejada horses. It was concluded that the oral alterations found do not lead to TMJ problems; that TMJ centesis should be performed in an environment close to the clinical laboratory; for the measurement of total proteins in the synovial fluid, the most reliable evaluation is the biuret method; and, for the diagnosis of lesions in this joint, studies that enable the understanding of joint dynamics in the inflammatory response are essential.

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Streptococcus suis is a Gram-positive pathogen that inhabits the upper respiratory tract and can cause severe systemic inflammatory disease in pigs, mainly during the nursery phase. Streptococcus suis is a reemergent pathogen, and outbreaks of its inducing disease represent significant economic losses for the pig industry worldwide. In this study, we described the clinical, pathological, and molecular aspects of an outbreak of S. suis infection with atypically high mortality. The outbreak occurred in nursery farms integrated into a cooperative in the state of Paraná, Brazil. Of the 30 nurseries, 10 were severely affected by the pathogen and had high economic losses. Clinical signs usually started approximately 10 days after weaning and were mainly characterized by acute nervous and locomotor disorders. The mortality of the affected batches usually ranged between 8% and 10%, but in some cases, it reached 18%. Nine piglets were submitted to post mortem examination. Macroscopically, the synovial joints were enlarged and contained fibrinous exudates. In the central nervous system, there was hyperemia of the leptomeningeal vessels associated with deposition of fibrin and purulent exudate in the leptomeninges. In three piglets, there was thickening of the choroid plexus associated with dilation of the lateral ventricles. Microscopic lesions were characterized mainly by fibrinosuppurative inflammation, which involved the synovial membranes, leptomeninges of the brain, and spinal cord. Furthermore, it also affects the choroid plexus, ependyma, nerve roots, and central canal of the spinal cord. S. suis was isolated from the cerebrospinal fluid, meningeal swabs, and/or synovial fluid of 8/9 piglets, and typified as serotype 9 by multiplex PCR.

Streptococcus suis é um patógeno Gram positivo que habita o trato respiratório superior e pode causar doença inflamatória sistêmica grave em suínos, principalmente durante a fase de creche. Streptococcus suis é um patógeno reemergente e surtos representam perdas econômicas significativas a suinocultura mundial. Neste estudo descrevemos os aspectos clínicos, patológicos e moleculares de um surto de infecção por S. suis com mortalidade atipicamente alta. O surto ocorreu em creches integradas a uma cooperativa do estado do Paraná, Brasil. Das 30 creches, 10 foram severamente afetadas pelo patógeno e apresentavam elevadas perdas econômicas. Os sinais clínicos iniciavam em torno de 10 dias após o desmame e eram caracterizados principalmente por sinais clínicos nervosos e locomotores agudos. A mortalidade dos lotes afetados variava entre 8% e 10%, mas em alguns casos ultrapassava 18%. Nove leitões foram submetidos ao exame post mortem. Macroscopicamente, as articulações sinoviais estavam aumentadas e continham exsudato fibrinoso. No sistema nervoso central havia hiperemia dos vasos leptomeníngeos associada a deposição de fibrina e exsudato purulento nas leptomeninges. Em três leitões havia espessamento do plexo coroide associado a dilatação dos ventrículos laterais. As lesões microscópicas eram caracterizadas principalmente por inflamação fibrinossupurativa que envolvia as membranas sinoviais, as leptomeninges do cérebro e medula espinhal. Além disso, também afetava o plexo coroide, epêndima, raízes nervosas e canal central da medula espinhal. S. suis foi isolado do líquido cefalorraquidiano, suabe de meninge e/ou líquido sinovial de 8/9 leitões e tipificado como sorotipo 9 por PCR multiplex.

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ABSTRACT: Etiology, multiple antibiotic resistance index, and acute-phase protein profile in the serum and synovial fluid of 44 horses presenting septic arthritis were investigated. Young animals up to 24 months of age not yet submitted to taming were sampled. Synovial samples from the horses were submitted to culture and bacterial isolates subjected to 18 antimicrobials to investigate the in vitro multidrug resistance pattern. Also, hematological aspects, fibrinogen, and serum levels of some acute-phase proteins (total protein, albumin, globulin, amyloid A, and C-reactive protein) were assessed. To statistical analysis, microbiological isolation were divided into four groups: G1 = animals with negative isolation, G2 = isolation of Gram-negative bacteria, G3 = isolation of Gram-positive bacteria), and G4 = isolation of fungi. Microbial isolation was obtained from 77.2% (32/44) of the synovial samples. Escherichia coli (7/44 = 15.9%), Staphylococcus aureus (5/44 = 11.4%), Streptococcus equi subsp. equi (3/44 = 6.8%), Aspergillus niger (3/44 = 6.8%), Pseudomonas aeruginosa (2/44 = 4.5%), Streptococcus equi subsp. zooepidemicus (1/44 = 2.3%), Trueperella pyogenes (1/44 = 2.3%), and Rhodococcus equi (1/44 = 2.3%) were prevalent bacterial agents. Aspergillus niger is reported by the first time as a primary agent of septic arthritis in horses. Gentamicin (84.9%), marbofloxacin (79.3%) and ceftriaxone (72.4%) were the most effective antimicrobials, whereas high resistance of the isolates (>50%) was found to erythromycin (75.9%), clarithromycin (75.9%), penicillin (69%), clindamycin (58.6%), and streptomycin (55.2%). Multiple antibiotic resistance index (≥ 0.3) was identified in 50% (16/32) of the isolates, with highest resistance in Gram-negative bacterial isolates. Serum levels of amyloid A, C-reactive protein, fibrinogen, globulin, and total protein, as well as the number of nucleated cells in the synovial fluid had values above the reference for horses, reinforcing acute-phase proteins as biomarkers in diagnosis of septic arthritis. We highlighted the diversity of microorganisms that may be involved in equine septic arthritis, the high resistance of bacterial isolates to conventional antimicrobials, the high lethality of young horses with septic arthritis, and importance of in vitro antimicrobial susceptibility pattern tests to therapeutic approaches in the disease.

RESUMO: Foram investigados a etiologia, o índice de resistência múltipla aos antibióticos e o perfil de proteínas de fase aguda, no soro ou líquido sinovial, de 44 equinos com sinais clínicos compatíveis com artrite séptica. Foram amostrados animais até 24 meses de idade não submetidos a doma. As amostras de líquido sinovial dos 44 animais foram submetidas à cultura bacteriológica e fúngica, e os isolados bacterianos submetidos in vitro diante de 18 antimicrobianos visando investigar a multirresistência. Também foram avaliados os aspectos hematológicos e o fibrinogênio sérico, bem como os níveis séricos de certas proteínas de fase aguda (proteína total, albumina, globulina, amilóide sérico A e proteína C reativa). O isolamento microbiano das amostras foi dividido em quatro grupos: G1 = animais com isolamento negativo; G2 = isolamento de bactérias Gram-negativas; G3 = isolamento de bactérias Gram-positivas e G4 = isolamento fúngico. O isolamento microbiano foi obtido em 77,2% (32/44) das amostras de líquido sinovial. Escherichia coli (7/44 = 15,9%), Staphylococcus aureus (5/44 = 11,4%), Streptococcus equi subsp. equi (3/44 = 6,8%), Aspergillus niger (3/44 = 6,8%), Pseudomonas aeruginosa (2/44 = 4,5%), Streptococcus equi subsp. zooepidemicus (1/44 = 2,3%), Trueperella pyogenes (1/44=2,3%) e Rhodococcus equi (1/44 = 2,3%) foram os patógenos mais frequentes. Aspergillus niger é relatado pela primeira vez como agente primário de artrite séptica em cavalos. Gentamicina (84,9%), marbofloxacino (79,3%) e ceftriaxona (72,4%) foram os antimicrobianos mais eficazes, enquanto elevada resistência dos isolados (>50%) foi encontrada para eritromicina (75,9%), claritromicina (75,9%), penicilina (69%), clindamicina (58,6%) e estreptomicina (55,2%). O índice de resistência múltipla aos antibióticos (≥ 0,3) foi identificado em 50% (16/32) dos isolados, com maior resistência obervada em bactérias Gram-negativas. Os níveis séricos de amilóide A, proteína C reativa, fibrinogênio, globulina e concentração total de proteínas, bem como o número de células nucleadas no líquido sinovial apresentaram valores acima da referência para equinos saudáveis, reforçando o uso destas proteínas de fase aguda como biomarcadores no diagnóstico da doença. O presente estudo enfatiza a diversidade de microrganismos que podem estar envolvidos na artrite séptica equina, a alta resistência dos isolados aos antimicrobianos convencionais, a alta mortalidade de equinos jovens com artrite séptica e a importância de realizar o tratamento da afecção com respaldo em testes de sensibilidade microbiana in vitro.

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ABSTRACT: Intravenous regional limb perfusion (IRLP) is an efficient method to treat horses with synovial infections. However, information on the dose, volume, and intervals of administration is lacking. The aim of this study was to evaluate the intra-articular concentration of gentamicin administered by IRLP in horses over 24 h post-administration and evaluate the influence of the total perfused volume. Twenty horses were assigned to two treatment groups. Gentamicin 60 group (G60, n=10) and Gentamicin 250 group (G250, n=10) received IRLP of 6.6 mg/kg of gentamicin diluted in Ringer's lactate for a total volume of 60 ml (G60) and 250 ml (G250), respectively. Synovial fluid harvests were performed in the metacarpophalangeal joint before (0) and 4, 8, 12, 16, 20, and 24 hours after IRLP. Agar diffusion was the assay for measuring gentamicin concentrations. Four hours after IRLP, the intra-articular concentration of gentamicin was 47.58±49.21 μg/ml in G60 and 10.92±6.11 μg/ml in G250. During the 24 h of harvest, the intra-articular concentration of gentamicin remained above the minimum inhibitory concentration for horses (MIC; 2 μg/ml) in both experimental groups. In G60, the concentration of gentamicin in synovial fluid reached the maximal concentration and remained 8 to 10-fold higher than the MIC (Cmax: 16 to 20 μg/ml) during 12 h after IRLP. These findings support that IRLP with 6.6 mg/kg of gentamicin diluted to a volume of 60 ml promotes intra-articular concentrations higher than 250 ml, remaining above the MIC for 24 h and at the maximum concentration for 12 h.

RESUMO: A perfusão regional intravenosa (PRI) em membros de equinos é um método comprovadamente eficiente para o tratamento de infecções sinoviais, porém ainda existem lacunas quanto à dose, volume e intervalos de administração a serem utilizados. Neste estudo, objetivou-se avaliar a concentração intra-articular da gentamicina administrada por PRI em equinos, ao longo de 24 horas pós-administração, bem como avaliar a influência do volume total perfundido. Vinte equinos foram distribuídos em dois grupos experimentais, Grupo Gentamicina 60 (G60) e Grupo Gentamicina 250 (G250), representados por 10 equinos em cada grupo que receberam, por PRI, 6,6 mg/kg de gentamicina diluída em Ringer lactato para um total de 60 ml (G60) ou 250 ml (G250). As colheitas de líquido sinovial foram realizadas, na articulação metacarpo-falangeana, antes do início do experimento e após 4, 8, 12, 16, 20, e 24 horas. Difusão em ágar foi o método para doseamento das concentrações de gentamicina. Quatro horas após a PRI, a concentração intra-articular da gentamicina era de 47,58±49,21 µg/ml no G60 e 10,92±6,11 µg/ml no G250. Durante as 24 horas de colheita, a concentração intra-articular de gentamicina permaneceu acima da concentração inibitória mínima (CIM) (2 μg/ml) em ambos os grupos experimentais. No G60, as concentrações de gentamicina no líquido sinovial atingiram a concentração máxima e mantiveram-se 8 a 10 vezes mais elevadas que a CIM (Cmáx: 16 a 20 μg/ml) durante 12 horas após a PRI. Conclui-se que a PRI em membros, com 6,6 mg/kg de gentamicina diluída para o volume de 60 ml, promove concentrações intra-articulares mais elevadas que o volume de 250 ml, permanecendo acima da CIM durante 24 horas e em concentração máxima durante 12 horas.

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Abstract A free-living, adult male maned wolf (Chrysocyon brachyurus) was referred to the Governador "Laudo Natel" - FCAV/Unesp veterinary hospital after being found with skin lesions and a fracture on the right pelvic limb, which had to be amputated due to compromised integrity. Around 20 days later, bilateral accentuated swollen on humerus-radius-ulna articulation was observed. The synovial liquid was drained and sent to the laboratory for synovial cytology with Rosenfeld staining that revealed predominantly degenerated neutrophils with karyolytic chromatin associated with intracellular inclusions suggestive of Hepatozoon sp. gametocytes. Blood and synovial liquid samples were submitted to molecular analysis, aiming to amplify the Hepatozoon spp. 18S rRNA gene fragment. Despite the positioning of the found Hepatozoon sequence together with Hepatozoon canis previously detected in domestic carnivores, the BLAST analysis showed only 98% identity with H. canis. To the best of the authors' knowledge, this is the first time a Hepatozoon was detected in the synovial liquid by clinical pathology and molecular analyses.

Resumo Um lobo guará (Chrysocyon brachyurus) adulto, macho, de vida livre foi encaminhado para atendimento no hospital veterinário Governador "Laudo Natel" - FCAV/Unesp após ser encontrado com lesões de pele e fratura em membro pélvico direito, sendo amputado devido a comprometimento da integridade do membro. Aproximadamente 20 dias após a chegada ao hospital, foi notado acentuado aumento de volume bilateral em região de articulação úmero-rádio-ulnar. O líquido sinovial foi drenado e enviado para análise citológica com coloração de Rosenfeld, revelando a presença de neutrófilos degenerados com cromatina cariolítica associados a inclusões intracelulares sugestivas de gametócitos de Hepatozoon sp. Amostras de sangue e líquido sinovial foram submetidas a análises moleculares visando amplificar um fragmento do gene 18S rRNA de Hepatozoon spp. Apesar da sequência de Hepatozoon detectada se posicionar filogeneticamente no mesmo clado que H. canis previamente detectado em carnívoros domésticos, o resultado da análise do BLAST mostrou somente 98% de identidade com H. canis. De acordo com o conhecimento dos autores, esta é a primeira vez que Hepatozoon foi detectado no líquido sinovial por meio de patologia clínica e análises moleculares.

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ABSTRACT: Several studies, mainly in vitro, have shown that chondroitin sulfate (CS) and glucosamine (GlcN) do have chondro protective and anti-inflammatory actions. The aim of the present study was to investigate whether oral CS/GlcN supplementation has effects on the CS, hyaluronic acid (HA) and prostaglandin E2 (PGE2) concentrations on synovial fluid of equine osteoarthritic joints. Horses with mild osteoarthritis (OA) in tibiotarsal joint received daily PO doses of CS and GlcN (2.8/3.1 g) for 25 days. Synovial fluid (SF) and urine samples were collected before treatment (day 0), and every 7 days, until day 55 (30 days after the end of treatment). Urinary CS increased upon oral treatment, indicating that this compound was systemically distributed. Concerning the SF, CS concentration increased after the end of the treatment and returning to baseline afterwards, while HA and PGE2 concentrations did not change. Despite the systemic distribution, oral supplementation of CS/GlcNfor 25 days was insufficient as an anti-inflammatory support. However, it is possible to infer that there was an anabolic effect upon cartilage matrix.

RESUMO: Vários estudos, principalmente in vitro, têm mostrado que o condroitim sulfato (CS) e a glucosamina (GLcN) possuem ação condroprotetora e anti-inflamatória. O objetivo deste trabalho foi investigar se a administração oral de CS/GLcN possui efeito sobre as concentrações de CS, ácido hialurônico (AH) e prostaglandina E2 (PGE2) do liquido sinovial (LS) de articulações equinas com osteoartrite (OA). Cavalos diagnosticados com OA tibiotársica grau leve receberam por via oral doses diárias de CS e GlcN (2,8g/3,1g) por 25 dias. Amostras de LS e urina foram coletadas antes do tratamento (dia 0) e a cada 7 dias até o dia 55 (30 dias após o fim do tratamento). Houve aumento do CS urinário, indicando a distribuição sistêmica desse composto. No LS, a concentração de CS aumentou após o final do tratamento e retornou aos valores basais em seguida, enquanto as concentrações de HA e PGE2 não apresentaram alterações. Apesar da distribuição sistêmica, a suplementação oral de CS/GlcNpor 25 dias foi insuficiente como medida anti-inflamatória. Contudo, pode-se inferir que houve efeito anabólico sobre a matriz cartilagínea.

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ABSTRACT: Leishmaniasis represents a complex of chronic diseases with a broad geographic distribution and a high significance in public health worldwide. The varied clinical signs in conjunction with the low sensitivity and specificity of canine visceral leishmaniasis (CVL) detection methods make diagnosis of the disease complex. Among the several available laboratory tests, studies have suggested that the detection of parasites in synovial fluid (SF) is a good auxiliary tool in the diagnosis of CVL. However, no study has evaluated the influence of the clinical stage of CVL in the detection of Leishmania sp. in SF. This study aimed to evaluate the detection of Leishmania sp. amastigotes in the SF of dogs at different stages of the disease. The negative control group (G1) comprised 12 dogs that tested negative for CVL. Thirty-six other dogs, tested serologically positive for CVL, were divided into two groups: Group 2 (G2), which included animals at stage II of the disease (moderate; n=18), and Group 3 (G3) included animals at stage III of the disease (severe; n=18). The analysis of SF revealed the presence of parasites in six (33.3%) dogs from G2 and in 16 (88.9%) dogs from G3 (p=0.0437). The present research suggested that SF analysis is of high value as a supplementary tool in the diagnosis of CVL. As a new finding, the present study also indicated that this test has a higher sensitivity in animals presenting with more severe stage of the disease.

RESUMO: As leishmanioses representam um complexo de doenças de caráter crônico de alta importância na saúde pública mundial e com distribuição geográfica ampla. A apresentação clínica variada e a baixa sensibilidade e especificidade de alguns métodos para a detecção da doença tornam complexo o diagnóstico da leishmainiose visceral canina (LVC). Entre os diversos testes laboratóriais disponíveis, estudos tem sugerido que a pesquisa de parasitos no líquido sinovial (LS) pode ser uma ferramenta auxiliar no diagnóstico da LVC. Apesar disso, inexistem estudos avaliando a relação entre o estágio clínico da doença e a detecção de Leishmania sp. no LS. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a detecção de amastigotas de Leishmania sp. no LS de cães acometidos por diferentes estádios da doença. Foram avaliados 48 cães, sendo 12 negativos para LVC (grupo controle negativo, G1) e 36 soropositivos. O grupo 2 (doença moderada, G2) incluiu animais classificados no estádio II da doença, enquanto o grupo 3 (doença grave, G3) abrangeu animais classificados em estádio III. Na análise do líquido sinovial dos cães, o parasito foi visualizado em seis (33,3%) cães do G2 e 16 (88,9)% dos cães de G3 (p=0.0437). O presente trabalho sugere que a análise do LS apresenta alto valor como ferramenta suplementar no diagnóstico da LVC. Em adição, o presente estudo indica, pela primeira vez, que o teste apresenta uma sensibilidade maior em animais que apresentam a forma grave da doença.

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The aim of the study was to determine the concentration pattern of intra-articular acute phase proteins (APPs) and immunoglobulins in healthy crossbred cattle. Synovial fluid (SF) samples were collected from the radiocarpal joint of 25 heifers and 25 steers. Concentrations of APPs were measured by SDS-PAGE. The results were submitted to analysis of variance using the SAS statistical program, and means were compared by the Student-Newman-Keuls test (P<0.05). Thirty-seven proteins with molecular weights ranging from 7 to 37kDa were identified in SF of all animals. Eight were nominally identified with immunoglobulin A (IgA) and G (IgG), ceruloplasmin (Cp), transferrin (Tf), albumin (Ab), α1-antitripsin (AAT), α1-acid glycoprotein (AGP), and haptoglobin (Hp). The α1-antitripsin was only identified in the Sf of the heifers. The SF values of Cp, Hp, AGP and IgA were significantly higher in heifers than in steers. In sera, 34 proteins with molecular weights between 7 and 244kDa were identified in heifers and steers. Similar proteins were nominally identified in the sera, however the α1-antitrypsin was identified only in SF. The serum values Tf, AGP and IgG were significantly higher in heifers compared with steers. In conclusion, the physiological acute-phase proteins concentrations in synovial fluid of healthy ruminants can be useful in the interpretation of samples from animals with joint diseases. The SF electrophoretic profile of healthy ruminants differs depending on gender. Similar proteins were nominally identified in the sera, but only the SF of α1-antitrypsin.(AU)

O objetivo do estudo foi determinar o padrão de concentração de proteínas de fase aguda e de imunoglobulinas intra-articulares (APPs) em bovinos mestiços saudáveis. As amostras de fluido sinovial (SF) foram coletadas da articulação radiocárpica de 25 novilhas e 25 novilhos. As concentrações de APPs foram mensuradas por SDS-PAGE. Os resultados foram submetidos à análise de variância usando o programa estatístico SAS, e os meios foram comparados pelo teste Student-Newman-Keuls (P<0,05). Trinta e sete proteínas com pesos moleculares variando de 7 a 37kDa foram identificadas no SF de todos os animais. Oito foram nominalmente identificadas como imunoglobulina A (IgA) e G (IgG), ceruloplasmina (Cp), transferrina (Tf), albumina (Ab), a1-antitripsina (AAT), glicoproteína a1-ácido (AGP) e haptoglobina (Hp). A α1-antitripsina foi identificada apenas no SF das novilhas. Os valores de Cp, Hp, AGP e IgA no SF foram significativamente maiores em novilhas do que em novilhos. No soro, 34 proteínas com pesos moleculares entre 7 e 244kDa foram identificadas nas novilhas e novilhos. Proteínas similares foram identificadas nos soros, mas apenas o SF das novilhas apresentou a α1-antitripsina. Os valores séricos de Tf, AGP e IgG foram significativamente maiores em novilhas em relação aos novilhos. Conclui-se que a mensuração das concentrações das proteínas da fase aguda no líquido sinovial de animais saudáveis pode ser útil na avaliação de amostras oriundas de bovinos com afecções articulares. O perfil eletroforético do SF de ruminantes saudáveis difere em função do gênero e as diferenças devem ser levadas em consideração na interpretação dos achados.(AU)

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This study aimed to grade joint abnormalities in horses submitted to therapeutic arthroscopy using score-based protocols for equine joint assessment, correlated with arthroscopic treatment outcomes and owner satisfaction. In this prospective study, we evaluated 126 joints of athletic horses referred for arthroscopy. The joints were scored according to findings of medical history and physical, radiographic, ultrasonographic and arthroscopic examination. Lameness, positive response to flexion test and decreased maximum joint flexion angle were detected in more than 50% of joints. Soft tissue swelling, sclerosis, subchondral bone osteolysis and single osteochondral fragments were the most common radiographic findings. Ultrasonographic examination revealed changes in synovial fluid volume and appearance, and subchondral bone irregularities. Increased vascularity of the synovial villi, chondral fibrillation, chondral fissures and superficial cartilage erosions were the most significant arthroscopic findings. The approaches that demonstrated greater sensitivity and correlation with treatment outcome and owner satisfaction were medical history, ultrasonographic and arthroscopic examination. The scoring protocol employed to grade joint abnormalities enabled the creation of a joint score system for the objective assessment, thus determining the most frequent findings and establishing an

O objetivo desse estudo foi avaliar as anormalidades articulares observadas em equinos submetidos à artroscopia terapêutica, utilizando protocolos baseados em pontuações e correlacionando os resultados do tratamento cirúrgico com a satisfação do proprietário. Neste estudo prospectivo, foram avaliadas 126 articulações de cavalos atletas, encaminhados para artroscopia. As articulações foram pontuadas de acordo com os achados da anamnese e exame físico, exame radiográfico, exame ultrassonográfico e avaliação artroscópica. A claudicação, resposta positiva ao teste de flexão e diminuição do ângulo máximo de flexão articular foram detectados em mais de 50% das articulações. Aumento de volume dos tecidos moles, esclerose subcondral, osteólise subcondral e fragmentos osteocondrais únicos foram os achados radiográficos mais comuns. O exame ultrassonográfico revelou, com frequência, as alterações no volume e na aparência do líquido sinovial, além de irregularidades osteocondrais. O aumento da vascularização das vilosidades sinoviais, fibrilação condral, fissuras condrais e erosões superficiais da cartilagem foram os achados artroscópicos mais significativos. As abordagens diagnósticas que demonstraram maior sensibilidade e melhor correlação entre o resultado do tratamento e satisfação do proprietário foram história médica, exame ultrassonográfico e artroscópico. O protocolo de avaliação

Resumo

This study aimed to grade joint abnormalities in horses submitted to therapeutic arthroscopy using score-based protocols for equine joint assessment, correlated with arthroscopic treatment outcomes and owner satisfaction. In this prospective study, we evaluated 126 joints of athletic horses referred for arthroscopy. The joints were scored according to findings of medical history and physical, radiographic, ultrasonographic and arthroscopic examination. Lameness, positive response to flexion test and decreased maximum joint flexion angle were detected in more than 50% of joints. Soft tissue swelling, sclerosis, subchondral bone osteolysis and single osteochondral fragments were the most common radiographic findings. Ultrasonographic examination revealed changes in synovial fluid volume and appearance, and subchondral bone irregularities. Increased vascularity of the synovial villi, chondral fibrillation, chondral fissures and superficial cartilage erosions were the most significant arthroscopic findings. The approaches that demonstrated greater sensitivity and correlation with treatment outcome and owner satisfaction were medical history, ultrasonographic and arthroscopic examination. The scoring protocol employed to grade joint abnormalities enabled the creation of a joint score system for the objective assessment, thus determining the most frequent findings and establishing an

O objetivo desse estudo foi avaliar as anormalidades articulares observadas em equinos submetidos à artroscopia terapêutica, utilizando protocolos baseados em pontuações e correlacionando os resultados do tratamento cirúrgico com a satisfação do proprietário. Neste estudo prospectivo, foram avaliadas 126 articulações de cavalos atletas, encaminhados para artroscopia. As articulações foram pontuadas de acordo com os achados da anamnese e exame físico, exame radiográfico, exame ultrassonográfico e avaliação artroscópica. A claudicação, resposta positiva ao teste de flexão e diminuição do ângulo máximo de flexão articular foram detectados em mais de 50% das articulações. Aumento de volume dos tecidos moles, esclerose subcondral, osteólise subcondral e fragmentos osteocondrais únicos foram os achados radiográficos mais comuns. O exame ultrassonográfico revelou, com frequência, as alterações no volume e na aparência do líquido sinovial, além de irregularidades osteocondrais. O aumento da vascularização das vilosidades sinoviais, fibrilação condral, fissuras condrais e erosões superficiais da cartilagem foram os achados artroscópicos mais significativos. As abordagens diagnósticas que demonstraram maior sensibilidade e melhor correlação entre o resultado do tratamento e satisfação do proprietário foram história médica, exame ultrassonográfico e artroscópico. O protocolo de avaliação

Resumo

A osteoartrite caracteriza-se por dor e claudicação, sendo considerada processo não específico, mais sim uma sequela comum a várias formas de lesão articular, com envolvimento de fatores biológicos e mecânicos. Desta forma, o objetivo da presente revisão foi discorrer sobre alguns aspectos da cartilagem articular (generalidades, histogênese), patogênese da osteoartrite, bem como algumas possibilidades de tratamentos intra-articulares para a osteoatrite. A cartilagem articular, juntamente com o líquido sinovial, tem papel mecânico importante nas articulações diartrodiais. Os condrócitos estão entre os principais componentes da cartilagem articular e são apontados como células altamente diferenciadas com capacidade limitada de proliferação e migração. O outro componente é a matriz extracelular constituída de colágeno tipo II, proteoglicanos, proteínas não colagenosas, glicoproteínas, água e eletrólitos. A osteoartrite é classificada como doença articular não inflamatória, com múltiplas interações bioquímicas e biomecânicas. Todos os componentes da articulação podem ser comprometidos, porém a cartilagem é considerada o tecido alvo. A afecção pode ser classificada como primária, que ocorre predominantemente em animais idosos, e secundária, decorrente de doenças que afetam a articulação e as estruturas de suporte. Entre os tratamentos intra-articulares para a osteoartrite estão a viscossuplementação com ácido hialurônico, o uso de corticosteroides, e a combinação de ácido hialurônico e corticosteroides. Contudo, há ainda várias controvérsias quanto à eficácia.

Osteoarthritis is characterized by pain and lameness, being considered a non-specific process, but rather a common sequel to various forms of joint lesion, with involvement of biological and mechanical factors. Therefore, the purpose of the present review is to discuss some aspects of articular cartilage (generalities and histogenesis), pathogenesis of osteoarthritis, as well as some possibilities of intra-articular treatments for osteoarthritis. The articular cartilage, along with the synovial fluid, have an important mechanical role in diarthrodial joints. Chondrocytes are one of principal components of articular cartilage and are designated as highly differentiated cells with limited proliferation and migration capacity. The other component is the extracellular matrix composed of collagen type II, proteoglycans, non-collagenous proteins, glycoproteins, water and electrolytes. Osteoarthritis is classified as a non-inflammatory joint disease with multiple biochemical and biomechanical interactions. All components of the joint can be compromised, but cartilage is considered the target tissue. The osteoarthritis can be classified as primary, which occurs predominantly in elderly animals, and secondary, due to diseases that affect the joint and supporting structures. Among the intra-articular treatments for osteoarthritis are viscosupplementation with hyaluronic acid, the use of corticosteroids, and the combination of hyaluronic acid and corticosteroids. However, there are still several controversies regarding efficacy.

La osteoartritis se caracteriza por dolor e claudicación, considerándose como un proceso no especifico, y si, una secuela común a varias formas de lesión articular, involucrando factores biológicos e mecánicos. De esta forma, el objetivo de la presente revisión es mencionar algunos aspectos del cartílago articular (generalidades, histogénesis), patogénesis de la osteoartritis, así como algunas posibilidades de tratamientos intra-articulares para la osteoartritis. El cartílago articular, junto con el líquido sinovial, tienen un papel mecánico importante en las articulaciones diartrodiales. Los condrocitos están entre los principales componentes del cartílago articular y son fijados como células altamente diferenciadas con capacidad limitada de proliferación y migración. El otro componente es la matriz extracelular constituida de colágeno tipo II, proteoglicanos, proteínas no colagenosas, glicoproteínas, agua y electrólitos. La osteoartritis es clasificada como una enfermedad articular no inflamatoria, con múltiples interacciones bioquímicas y biomecánicas. Todos los componentes de la articulación pueden ser comprometidos, sin embargo, el cartílago articular es considerado el tejido de interés. La afección puede ser clasificada como primaria, que ocurre predominantemente en animales de edad avanzada, y secundaria, debido a enfermedades que afectan la articulación y las estructuras de soporte. Entre los tratamientos intra-articulares para la osteoartritis esta la viscosuplementación con ácido hialurônico, el uso de corticosteroides, e la combinación de ácido hialurônico e corticosteroides. Sin embargo, hay aun varias controversias en cuanto la eficacia.

Resumo

ABSTRACT: Peritendinous adhesions are a significant problem in tendon surgery. One of the most preferred methods for preventing adhesion formation is anti-adhesive applications. This study aimed to investigate the efficacy of natural synovial fluid as an alternative viscoelastic agent for preventing adhesion in the healing period compared to hyaluronic acid. Thirty adult New Zealand rabbits were used in the study to form three experimental models. In all groups, a rupture was induced in the Achilles tendons. Following tenorrhaphy, hyaluronic acid was applied in one group and synovial fluid in the other group for anti-adhesive purposes. In the control group, no viscoelastic application was made. Bandage was applied to the operated extremities for three weeks post-operatively. At the end of five weeks, euthanasia was performed on the animals using pentobarbital sodium. Surgical sites in all groups were macroscopically examined for healing status as well as the presence and extent of adhesions. Biomechanical tests and histopathological examinations were then performed on the tendons in all groups. Findings established once again the positive contribution of hyaluronic acid to preventing adhesion formation as well as to healing and tensile strength in tendon surgery. Although, we found that it is possible to use synovial fluid, which is a natural source of hyaluronic acid, as a viscoelastic material, it is not superior to commercial hyaluronic acid preparation.

RESUMO: Asderências peritendinares são um problema significativo na cirurgia tendínea. Um dos métodos mais empregados para evitar a formação de adesão são as aplicações anti-adesivas. Este estudo tem como objetivo investigar a eficácia do líquido sinovial natural como um agente viscoelástico alternativo para prevenir a adesão no período de cicatrização comparado ao ácido hialurônico. Trinta coelhos adultos da Nova Zelândia foram utilizados no estudo para formar três modelos experimentais. Em todos os grupos, uma ruptura foi induzida nos tendões de Aquiles. Após tenorrafia, o ácido hialurônico foi aplicado em um grupo e o líquido sinovial no outro grupo para fins anti-adesivos. No grupo controle, não foi feita qualquer aplicação viscoelástica. A bandagem foi aplicada às extremidades operadas por três semanas pós-operatório. No final de cinco semanas, a eutanásia foi realizada nos animais utilizando pentobarbital sódico. Os locais cirúrgicos em todos os grupos foram examinados macroscopicamente quanto ao estado de cura, bem como a presença e extensão das aderências. Testes biomecânicos e exames histopatológicos foram realizados nos tendões em todos os grupos. Os achados estabeleceram mais uma vez a contribuição positiva do ácido hialurônico para prevenir a formação de aderências, bem como para a cicatrização e resistência à tração na cirurgia do tendão. Embora se tenha constatado que é possível utilizar fluido sinovial, que é uma fonte natural de ácido hialurónico, como material viscoelástico, não é superior à preparação de ácido hialurónico comercial.

Resumo

This study evaluated the effects of a physiotherapy protocol applied in joints with osteochondritis dissecans submitted to arthroscopy. Twelve horses totaling twenty joints were used and divided into two uniform groups, according to articular lesion grade. Treated Group (TG) received the physiotherapy protocol (cryotherapy, passive rage motion and controlled exercise) that initiate just after anesthetic recovery and extended for five days. Control Group (CG) remained resting in stall during the same period. Physical examination and synovial fluid analysis were used to evaluate the treatment. The synovial fluid examination consisted of physical analysis (color, aspect, and viscosity), mucin clot evaluation, Serum Amyloid A, Prostaglandin E2 and urea concentration. Synovial samples were collected by arthrocentesis at the beginning of the surgical procedure (D1), 48 hours (D3) and 96 hours (D5) after surgery. Before arthroscopy and daily during the postoperative period joints were evaluated by physical exam: superficial temperature (°C), range of motion (degrees) and circumference (centimeters). The joint physical examination showed no significant difference between groups and neither along the days for the same group. The parameters of synovial fluid showed difference over the moments in each group but didn't have difference between groups. Color and aspect had the same patterns across moments, in CG fluid had significant change when compared D1 with D3 (color and aspect: p<0.001) and D5 (color: p<0.001; aspect: p<0.05) becoming mostly bloody and cloudy in D3 and D5. However in TG the difference was significant just between D1 and D3 (color and aspect: p<0.05), showing an improvement of synovial fluid in D5 (color and aspect: p<0.05). Viscosity and mucin clot evaluation showed significant change in CG between D1 and D3 (viscosity: p<0.01; mucin clot: p<0.05) and between D1 and D5 (viscosity: p<0.01;mucin clot: p<0.01). In TG no significant difference of viscosity and mucin clot was observed over the moments, showing an early improvement of synovial fluid quality. The Serum Amyloid A concentration showed an extremely significant increase in CG (p<0.001) when compared D1 (1217.13±664.47µg/mL) and D3 (42423.80±52309.31µg/mL). The comparison between D1 and D5 in CG, and across moments in TG, had no statistical difference. The PGE2 eicosanoid remained statistically unchanged all over the time. Urea showed significant increase in D3 when compared to D1 (p<0.001) in CG, and had no variation in TG. The physiotherapy protocol minimized the inflammatory mediators and provided minor alterations in synovial fluid after arthroscopy.(AU)

Este estudo avaliou os efeitos de um protocolo fisioterápico, aplicado em articulações com osteocondrite dissecante, submetidas à artroscopia. Foram utilizados 12 cavalos, totalizando 20 articulações, divididas em dois grupos homogêneos de acordo com a graduação da lesão articular. O grupo tratado (GT) recebeu o protocolo fisioterápico (crioterapia, movimentação passiva e exercício controlado) que se iniciou imediatamente após a recuperação anestésica e se estendeu por cinco dias. O grupo controle (GC) permaneceu em repouso na baia, pelo mesmo período. Exame físico da articulação e análise do líquido sinovial foram utilizados para avaliar o tratamento. O exame do líquido sinovial consistiu em análise física (cor, aspecto e viscosidade), avaliação do coágulo de mucina e concentrações de amiloide sérica A, prostaglandina E2 e ureia. Amostras de líquido sinovial foram colhidas por artrocentese no início do procedimento cirúrgico (D1) e após 48 (D3) e 96 horas (D5) do procedimento cirúrgico. Antes da artroscopia e diariamente no período pós-operatório, as articulações foram avaliadas por exame físico: temperatura superficial (°C), ângulo de flexão (graus), circunferência (centímetros). A avaliação física das articulações não apresentou diferença significativa entre os grupos nem ao longo dos dias em cada grupo. Nas análises do líquido sinovial, observou-se uma variação diferente entre os momentos em cada grupo porém sem diferença significativa entre os grupos. A cor e o aspecto tiveram resultados semelhantes ao longo do tempo, no GC houve uma alteração significativa quando comparados D1 e D3 (cor e aspecto: p<0,001) e D1 e D5 (cor: p<0,001; aspecto: p<0,05) tornando-se sanguinolento e turvo na maioria das amostras em D3 e D5. Já no GT, houve diferença significativa apenas entre D1 e D3 (cor e aspecto: p<0,05), demonstrando melhora no líquido sinovial em D5 (cor e aspecto: p<0,05). A viscosidade e o coágulo de mucina apresentou alteração significativa no GC entre D1 e D3 (viscosidade: p<0,01; coágulo de mucina: p<0,05) e entre D1 e D5 (viscosidade e coágulo de mucina: P<0,01). No grupo tratado não foram observadas alterações significativas em viscosidade e coágulo de mucina, ao longo dos momentos, demonstrando uma melhora precoce na qualidade do líquido sinovial. A amiloide sérica A apresentou um aumento extremamente significante no GC (p<0,001) quando comparados D1 (1217,13±664,47µg/dL) e D3 (42423,80±52309,31µg/dL). Quando comparados D1 e D5 no GC e ao longo do tempo no GT não foram observadas diferenças significativas. A concentração de PGE2 permaneceu sem alterações. As mensurações de ureia apresentaram aumento significativo em D3 quando comparado a D1 (p<0,001) no GC e não apresentou variação no GT. O protocolo fisioterápico minimizou os mediadores inflamatórios e proporcionou menor alteração do líquido sinovial após artroscopia.(AU)

Resumo

Os constantes impactos no sistema locomotor de equinos atletas gerados pelo intenso exercício físico levam ao surgimento de lesões articulares, como a inflamação da membrana sinovial que, se não tratada, pode evoluir para um quadro de osteoartrite (OA) e posterior afastamento do esporte. A utilização de células tronco mesenquimais (CTMs) vem ganhando destaque nestes casos como uma possibilidade de tratamento que busca modificar a progressão desta enfermidade. O objetivo do presente trabalho foi investigar o efeito das CTMs alogênicas derivadas da membrana sinovial (CTMms) sobre a síntese e degradação da cartilagem articular em casos de sinovite aguda em equinos. A sinovite foi induzida utilizando 0,5ng de LPS via intra-articular (IA) e os animais foram tratados 8 horas após a indução. O grupo controle recebeu como tratamento 2 mL de PBS IA, enquanto o grupo tratado recebeu 107 CTMms IA. Foi realizada a determinação da concentração sinovial dos biomarcadores de síntese e degradação de colágeno, CPII e C2C respectivamente, e de síntese de agrecam, CS846, através de teste imunoenzimático (ELISA). A análise revelou aumento significativo nos níveis de CPII (P= 0,019) e de CS846 (P=0,032) no grupo controle no momento 14 dias e também aumento nos níveis de C2C (P= 0,015) no momento 24h, quando comparados com o grupo tratado. Os dados avaliados sugerem que as CTMs interagiram na manutenção da homeostase da cartilagem articular, exercendo uma atividade no ambiente que resultou em menor dano nas primeiras 24 horas e, consequentemente, menor necessidade de reparo posterior

The constant impacts on the locomotor system of equine athletes generated by intense physical exercise lead to the emergence of joint injuries, such as inflammation of the synovial membrane that, if left untreated, can progress to osteoarthritis (OA) and subsequent withdrawal from sport. The use of mesenchymal stem cells (MSCs) has been gaining prominence in these cases as a possible treatment that seeks to modify the progression of this disease. The aim of the present work was to investigate the effect of allogeneic MSCs derived from the synovial membrane (mMSCs) on the synthesis and degradation of articular cartilage in cases of acute synovitis in horses. Synovitis was induced using 0.5ng of LPS via intra-articular (IA) and the animals were treated 8 hours after induction. The control group received 2 mL of PBS IA as treatment, while the treated group received 107 mMSCs IA. The synovial concentration of collagen synthesis and degradation biomarkers, CPII and C2C, respectively, and aggrecan synthesis biomarkers, CS846, were determined by enzyme immunoassay (ELISA). The analysis revealed a significant increase in the levels of CPII (P=0.019) and CS846 (P=0.032) in the control group at 14 days and also an increase in C2C levels (P=0.015) at 24h, when compared with the group treated. The evaluated data suggest that MSCs interacted in the maintenance of articular cartilage homeostasis, exerting an activity in the environment that resulted in less damage in the first 24 hours and, consequently, less need for later repair.

Resumo

A osteoartrite é uma das maiores causas de morbidade em equinos. É caracterizada pela degeneração e proliferação óssea, lesões nas cartilagens e espessamento da membrana sinovial e da cápsula articular. O estudo de miRNAs é um campo emergente na determinação dos mecanismos que regulam enfermidades inflamatórias, podendo-se criar modelos para estudar as vias de sinalização para enfermidades articulares. Foram utilizados seis equinos atletas da raça Quarto de Milha, divididos em dois grupos: Grupo Controle (CT) - sem qualquer enfermidade ósteoarticular, e Grupo Osteoartrite (OA) - diagnosticados com osteoartrite tibiotársica primária traumática subclínica. Foram coletadas amostras de sangue venoso e de líquido sinovial para realizar a extração do RNAtotal por meio do kit Alternative Protocol for Extraction of RNA from Cells Captured on LeukoLOCK Filters Using TRI Reagent® (Thermo Fisher Scientific®). O microarranjo foi realizado com o kit Affymetrix® miRNA 4.1 Array Strip e equipamento GeneAtlas Affymetrix®. As análises estatísticas foram realizadas com o programa Transcriptome Analysis Console (TAC). Quando comparados os grupos, foram identificados 42 miRNAs diferencialmente expressos no sangue dos equinos (36 regulados positivamente e 6 regulados negativamente). Já no líquido sinovial, foram identificados 13 miRNAs diferencialmente expressos (regulados positivamente). A intersecção desses resultados revelou miRNAs que podem ser utilizados como biomarcadores sistêmicos para osteoartrite tibiotársica. A detecção do aumento na expressão destes miRNAs (eca-miR-15a, eca-miR-15b, eca-miR-17, eca-miR-18a, eca-miR-19b, eca-miR-20a, eca-miR-106a, eca-miR-106b, eca-miR-191, eca-miR- 361-5p, eca-miR-450b-5p, eca-miR-451 e eca-miR-486-5p) no sangue venoso de equinos Quarto de Milha, indica que estes podem ser utilizados como biomarcadores para detecção precoce de osteoartrite tibiotársica primária traumática subclínica em equinos de maneira menos invasiva e sistêmica.

Osteoarthritis (OA) is one of the major causes of morbidity in horses. It is characterized by articulation degeneration and bone proliferation, structures of the synovial membrane and joint capsule. The study of miRNA is an emerging field in determining the mechanisms that regulate inflammatory diseases, and can be present in models that might predict its effect on OA signaling pathways. Six athletic Quarter Horses were used, divided into two groups: Control Group (CT) - without any disease, and Osteoarthritis Group (OA) - diagnosed with subclinical traumatic primary tibiotarsal osteoarthritis. Venous blood and synovial fluid samples were collected to perform total RNA extraction using the Alternative Protocol for Extraction of RNA from Cells Captured on LeukoLOCK Filters Using TRI Reagent® kit (Thermo Fisher Scientific®). The microarray was performed with the kit Affymetrix® miRNA 4.1 Array Strip kit and GeneAtlas Affymetrix® equipment. Statistical analyzes were performed using the Transcriptome Analysis Console (TAC) program. When comparing groups, 42 miRNAs were identified differentially expressed in the venous blood of horses (36 upregulated and 6 down-regulated). In the synovial fluid, 13 differentially expressed (upregulated) miRNAs were identified. The intersection of these results revealed miRNAs that can be used as systemic biomarkers for tibiotarsal OA. The simultaneous detection of increased expression of these miRNAs (eca-miR-15a, eca-miR-15b, ecamiR-17, eca-miR-18a, eca-miR-19b, eca-miR-20a, eca-miR-106a, eca-miR-106b, eca-miR-191, eca-miR-361-5p, eca-miR-450b-5p, eca-miR-451 e eca-miR-486-5p) in venous blood of Quarter Horses, indicates that these molecules can be used as biomarkers for early detection of subclinical traumatic primary tibiotarsal osteoarthritis in horses in a less invasive and systemic way.

Resumo

Devido ao baixo potencial de reparação apresentado pela cartilagem articular, as enfermidades articulares são causas frequentes de dor e diminuição de desempenho. Por seu caráter crônico, a osteoartrite representa um desafio aos tratamentos disponíveis. Assim, novas estratégias e abordagens são necessárias para aprimorar o reparo do tecido cartilaginoso. A engenharia tecidual se destaca neste sentido, valendo-se da associação entre biomateriais, células e fatores de crescimento, para promover um aporte biomecânico e celular potencialmente benéfico para a reparação condral. O objetivo do presente trabalho foi avaliar os biomarcadores articulares após tratamento da osteoartrite experimental em 32 ovinos, utilizando diferentes membranas sintéticas associadas ou não a células-tronco mesenquimais. As membranas constituídas por polidioxanona apresentaram os resultados mais relevantes, incluindo maior concentração de biomarcadores de síntese e menor concentração de biomarcadores de degradação de matriz extracelular. A comparação dos resultados nos diferentes grupos indica que a associação de diferentes princípios da engenharia tecidual, como a inclusão de uma fonte celular em um arcabouço, é a estratégia que gera melhores parâmetros nos biomarcadores do metabolismo da matriz extracelular condral

Due to the limited repair potential of articular cartilage, joint diseases are a common cause of pain and low performance. The chronic nature of osteoarthritis is a challenge for the current treatments. Thus, new strategies and approaches are required to improve cartilage repair. Tissue engineering rises as a potential treatment option, associating biomaterials, cells, and growth factors to provide biomechanical and cellular support for chondral repair. The aim of the present study was to evaluate joint biomarkers after treatment of experimental osteoarthritis in 32 sheep, using different synthetic membranes associated or not with mesenchymal stem cells. Membranes made of polydioxanone presented the most relevant results, including greater concentration of biomarkers of extracellular matrix synthesis and lower levels of biomarkers of extracellular matrix degradation. The comparison of the results in the different groups indicates that the association of different principles of tissue engineering, such as the inclusion of a cellular source in a scaffold, is the strategy that generates better parameters in the biomarkers of extracellular matrix metabolism.

Resumo

Na osteocondrite dissecante (OCD), a articulação do ombro é mais comumente afetada, mas o joelho é ocasionalmente lesionado, o que, muitas vezes, passa desapercebido. O tratamento cirúrgico precoce é indicado para remover cartilagem solta, aliviar a dor e minimizar a artrose. Benefícios putativos da transferência de autoenxerto osteocondral em relação às técnicas convencionais incluem a reconstrução exata do contorno subcondral e articular, recobrimento da superfície com cartilagem hialina e criação de uma barreira imediata entre o líquido sinovial e o osso subcondral. O objetivo deste trabalho é relatar a técnica de transferência de autoenxerto osteocondral para o tratamento da osteocondrite do côndilo femoral. Um cão da raça Bull Terrier foi tratado cirurgicamente por meio da técnica de transferência de autoenxerto osteocondral, após ter sido diagnosticado com OCD do côndilo femoral, apresentando melhora clínica significativa e completa recuperação aos 30 dias de pós-operatório.(AU)

In osteochondritis dissecans (OCD), the shoulder joint is most commonly involved, but the stifle is occasionally involved and often goes unnoticed. Early surgical treatment is indicated to remove loose cartilage and minimize osteoartrosis. Putative benefits of Osteochondral Autograft Transfer (OAT) over conventional techniques include accurate reconstruction of subchondral and articular contour, resurfacing with hyaline or hyaline-like cartilage, and creation of an immediate barrier between synovial fluid and subchondral bone. The purpose of this work is to report the technique of OATs for the treatment of osteochondritis of the femoral condyle. A canine attended the Laboratory of Comparative Orthopedics and Traumatology USP-FMVZ underwent surgery after being diagnosed with OCD of the femoral condyle, with significant clinical improvement at 30 days postoperatively.(AU)

Resumo

Septic arthritis is a debilitating joint infectious disease of equines that requires early diagnosis and immediate therapeutic intervention to prevent degenerative effects on the articular cartilage, as well as loss of athletic ability and work performance of the animals. Few studies have investigated the etiological complexity of this disease, as well as multidrug resistance of isolates. In this study, 60 horses with arthritis had synovial fluid samples aseptically collected, and tested by microbiological culture and in vitro susceptibility test (disk diffusion) using nine antimicrobials belonging to six different pharmacological groups. Bacteria were isolated in 45 (75.0%) samples, as follows: Streptococcus equi subsp. equi (11=18.3%), Escherichia coli (9=15.0%), Staphylococcus aureus (6=10.0%), Streptococcus equi subsp. zooepidemicus (5=8.3%), Staphylococcus intermedius (2=3.3%), Proteus vulgaris (2=3.3%), Trueperella pyogenes (2=3.3%), Pseudomonas aeruginosa (2=3.3%), Klebsiella pneumoniae (1=1.7%), Rhodococcus equi (1=1.7%), Staphylococcus epidermidis (1=1.7%), Klebsiella oxytoca (1=1.7%), Nocardia asteroides (1=1.7%), and Enterobacter cloacae (1=1.7%). Ceftiofur was the most effective drug (>70% efficacy) against the pathogens in the disk diffusion test. In contrast, high resistance rate (>70% resistance) was observed to penicillin (42.2%), enrofloxacin (33.3%), and amikacin (31.2%). Eleven (24.4%) isolates were resistant to three or more different pharmacological groups and were considered multidrug resistant strains. The present study emphasizes the etiological complexity of equine septic arthritis, and highlights the need to institute treatment based on the in vitro susceptibility pattern, due to the multidrug resistance of isolates. According to the available literature, this is the first report in Brazil on the investigation of the etiology. of the septic arthritis in a great number of horses associated with multidrug resistance of the isolates.(AU)

Artrite séptica é uma artropatia infecciosa debilitante de equinos, que requer diagnóstico precoce e intervenção terapêutica imediata, com intuito de evitar a degeneração de a cartilagem articular e a perda da capacidade atlética e de trabalho dos animais. Poucos estudos têm investigado a complexidade etiológica da afecção, bem como a presença de multirresistência dos isolados aos antimicrobianos. Foram investigados 60 equinos portadores de artrite, submetidos à colheita asséptica de líquido sinovial para a realização de cultivo microbiológico e teste de sensibilidade microbiana in vitro (difusão com discos) com nove antimicrobianos pertencentes a seis diferentes grupos farmacológicos. Foi obtido isolamento microbiano em 45 (75,0%) amostras, como segue: Streptococcus equi subsp. equi (11=18,3%), Escherichia coli (9=15,0%), Staphylococcus aureus (6=10,0%), Streptococcus zooepidemicus (5=8,3%), Staphylococcus intermedius (2=3,3%), Proteus vulgaris (2=3,3%), Trueperella pyogenes (2=3,3%), Pseudomonas aeruginosa (2=3,3%), Klebsiella pneumoniae (1=1,7%), Rhodococcus equi (1=1,7%), Staphylococcus epidermidis (1=1,7%), Klebsiella oxytoca (1=1,7%), Nocardia asteroides (1=1,7%) e Enterobacter cloacae (1=1,7%). Ceftiofur foi o antimicrobiano mais efetivo (>70% eficácia) in vitro diante dos patógenos. Em contraste, alta resistência dos isolados (>70% de resistência) foi observada para penicilina (42,2%), enrofloxacino (33,3%) e amicacina (31,2%). Onze (24,4%) isolados foram resistentes a três ou mais diferentes grupamentos de fármacos e considerados com resistência múltipla aos antimicrobianos. O presente estudo enaltece a complexidade etiológica envolvida na artrite séptica em equinos e ressalta a necessidade de instituir o tratamento dos animais com respaldo de testes de sensibilidade microbiana in vitro em virtude da resistência múltipla dos isolados. De acordo com a literatura consultada, esta é a primeira descrição no país da etiologia da artrite séptica em grande número de equinos associada a multirresistência dos isolados aos fármacos testados.(AU)

Resumo

A luxação de patela é uma das causas mais comuns de claudicação em cães. Pode ser uni ou bilateral, medial ou lateral, sendo esta última menos comum e é considerada uma das principais causas de doença degenerativa do joelho de cães. Marcadores inflamatórios já são estudados há alguns anos nos casos de doenças inflamatórias crônicas e o aprofundamento de seu estudo é de grande valia, pois permite o conhecimento mais abrangente sobre a patogênese das afecções, e abre horizontes para as estratégias de tratamento. O objetivo do trabalho foi mensurar o Fator de Necrose Tumoral (TNF) no líquido sinovial da articulação fêmoro-tíbio-patelar e relacioná-lo com outros marcadores já consolidados deste tipo de afecção articular: como o escore clínico da luxação patelar, escore de claudicação e grau de osteoartrose articular. Foram selecionados 15 (n=15) animais para o estudo, sendo 10 previamente diagnosticados clinicamente com luxação patelar, agrupados no Grupo Doente (GD), e 5 animais não doentes (sem luxação patelar evidenciada clinicamente), considerados Grupo Controle (GC). Os animais do GD foram clinicamente avaliados em sua luxação patelar de acordo com os seguintes critérios: grau de luxação, grau de claudicação e grau de osteoartrite evidenciado na imagem radiográfica. Para avaliação radiográfica todos os animais foram sedados em neuroleptoanalgesia (midazolam + metadona + acepromazina), quando também foi coletada amostra de líquido sinovial para dosagem do TNF através de ensaio imunoenzimático. Por fim todos os dados foram entrecruzados para avaliação de sua correlação. A correlação foi avaliada de acordo com o fator de correlação de Postos de Spearman (). Como resultado, encontramos uma correlação positiva forte entre o grau de claudicação (GCl) e o grau de osteoartrite (GOA) (=0,8251, p=0,0001) e entre o grau de luxação (GL) e o grau de claudicação (=0,8172, p=0,0002), porém, não se encontrou correlação positiva importante quando correlacionados ao TNF (GCl =-0,0078, p=9780; GL = -0,1354, p=0,6304; GOA = -0,2971, p=0,2822). Sugere-se mais estudos para a conclusão da correlação deste biomarcador sinovial e a luxação patelar em cães.

Patellar luxation is one of the most common causes of dog lameness. It can be unilateral or bilateral, medial or lateral, being this last one the less common, and it is one of the most important causes of articular knee degeneration in dogs. Inflammatory markers have been studied for years in cases of inflammatory diseases, and its study has a main importance in the knowledge of its pathogenesis, and it opens up the possibilities for new treatments. In this study, ten dogs with patellar luxation were analyzed in order to correlate their proved radiographic and clinical luxation grade with inflammatory markers such as Tumoral Necrosis Factor and their clinical lameness score, those results were confronted with the results of 5 dogs considered control. The aim of this study was to measure the Tumor Necrosis Factor (TNF) in the synovial fluid of the knee, and relate with other yet consolidated markers of this type of condition, such as clinical score of patellar luxation, lameness score and radiographic osteoarthritis score. There was selected 15 dogs (n=15) for this study, 10 of them were previously clinically diagnosed with patellar luxation and were considered Disease Group (GD), and the other 5 not affected dogs (those who did not clinically showed patellar luxation) were considered Control Group (GC). The GD animals were then clinically evaluated for their patellar luxation according to the criteria: luxation grade, lameness grade and radiographic osteoarthritis grade. For the radiographic evaluation the dogs were put on sedation with methadone, midazolam and acepromazin, and then the synovial liquid was obtained. In the end, this liquid was sent for TNF dosage by ELISA. The correlation was evaluated by the correlation factor of Pearson. The results found have shown a strong positive correlation between the lameness score (GCl) and the osteoarthritis score (GOA) (=0,8251, p=0,0001) and the lameness score and luxation score (GL) (=0,8172, p=0,0002), however there was no positive or important correlation with TNF (GCl =-0,0078, p=9780; GL = -0,1354, p=0,6304; GOA = -0,2971, p=0,2822). It is suggested that more studies should be developed in order to get a definite conclusion to the relation between this biomarker and patellar luxation in dogs.