Manejo de neonatos caninos prematuros / Management of premature neonatal puppies

Dentre as mais importantes causas de morbidade neonatal na prematuridade, destacam-se os distúrbios respiratórios, complicações infecciosas, instabilidade crítica da termorregulação, inabilidade para homeostase energética e falhas na transferência de imunidade passiva. Dentre os problemas de origem pulmonar intimamente relacionados à prematuridade, destaca-se a imaturidade pulmonar por deficiência de surfactante, evoluindo para diminuição da capacidade pulmonar, hipoxemia, hipercapnia e acidose. Os neonatos caninos prematuros apresentam baixa vitalidade, hipotermia, bradipnéia, irregularidade do padrão respiratório, reduzido tônus e responsividade neuro-muscular. As áreas do parênquima pulmonar para efetuar trocas gasosas são limitadas em filhotes prematuros, culminando em alterações do equilíbrio ácidobase. Além disto, os recém-nascidos prematuros apresentam instabilidade energética e falha de transferência de imunidade passiva. Como medida preventiva à morbidade do neonato prematuro, indicase a corticoterapia pré-natal 48 horas antes do parto em cadelas gestantes, induzindo a maturidade funcional do pulmão fetal, além de melhorar a vitalidade e evolução clínica neonatal. Ademais, a corticoterapia antenatal estimula a transferência placentária de imunoglobulinas e absorção de imunoglobulinas colostrais, bem como aumenta a capacidade glicogênica. Nos casos emergenciais, preconiza-se medidas intensivas aos recém-nascidos prematuros, as quais incluem: reanimação respiratória, controle da hipotermia, reposição glicêmica na hipoglicemia e controle imunológico da falha de transferência imune passiva.(AU)

Among the most important causes of neonatal morbidity in prematurity, respiratory disorders, infectious complications, critical instability of thermoregulation, inability for energy homeostasis and failures in the transfer of passive immunity stand out. Among the problems of pulmonary origin closely related to prematurity, pulmonary immaturity due to surfactant deficiency stands out, evolving to decreased lung capacity, hypoxemia, hypercapnia and acidosis. Premature canine neonates have low vitality, hypothermia, bradypnea, irregular breathing pattern, reduced tone and neuromuscular responsiveness. The areas of the lung parenchyma to carry out gas exchange are limited in premature pups, culminating in changes in acid-base balance. In addition, premature newborns have energetic instability and failure to transfer passive immunity. As a preventive measure against premature neonate morbidity, prenatal corticosteroid therapy is indicated 48 hours before delivery in pregnant bitches, inducing functional maturity of the fetal lung, in addition to improving neonatal vitality and clinical evolution. Furthermore, antenatal corticosteroid therapy stimulates the placental transfer of immunoglobulins and the absorption of colostral immunoglobulins, as well as increasing the glycogenic capacity. In emergency cases, intensive measures are recommended for premature newborns, which include: respiratory resuscitation, hypothermia control, glycemic replacement in hypoglycemia and immunological control of passive immune transfer failure.(AU)

Clinical and laboratory evaluation of premature goat kids with and without antenatal corticotherapy / Avaliação clínica e laboratorial de cabritos prematuros com e sem corticoterapia antenatal

This article evaluated the vital parameters, blood gas measurements, cortisol values and radiological findings of goat kids born at term and prematurely during the first 48 hours of life. For this purpose, 24 kids from 24 goats were used and assigned to groups as follows: Group I, eight kids born through cesarean sections performed at 149 days of gestation; Group II, eight kids born through cesarean sections performed at 143 days of gestation; Group III, eight kids born through cesarean sections performed at 143 days of gestation, whose mothers received 20 mg of dexamethasone. Group I had lower heart rate values than the other groups at 60 minutes after birth. In terms of temperature, there was no difference between the groups. The pH values were reduced shortly after birth, rising at 24 and 48 hours in all animals studied. In terms of the cortisol levels, the values increased significantly at birth (M0), with the highest values obtained in animals in group II. These values decreased at 48 hours after birth in the evaluated goats. The animals belonging to group I showed better radiographic aspects, and throughout the 48 hours of evaluation, all newborns exhibited adequate respiratory adaptation. It can be concluded that antenatal dexamethasone administered at 143 days of gestation did not influence neonatal viability, metabolic or radiographic parameters. The metabolic changes found are consistent with the extrauterine adaptation period that animals in this stage of life.

O presente artigo teve como objetivo avaliar os parâmetros vitais, hemogasométricos, valores de cortisol e os achados radiológicos, de cabritos nascidos a termo e prematuros, durante as primeiras 48 horas de vida. Para tanto, foram utilizados 24 cabritos oriundos de 20 cabras, distribuídos nos grupos: grupo I: oito cabritos nascidos por meio de cesarianas realizadas aos 149 dias de gestação; grupo II: oito cabritos nascidos por meio de cesarianas realizadas aos 143 dias de gestação; grupo III: oito cabritos nascidos por meio de cesarianas realizadas aos 143 dias de gestação, cujas mães receberam 20 mg de dexametasona. O grupo I apresentou valores mais baixos de frequência cardíaca quando comparados aos demais grupos aos 60 minutos após o nascimento. Em relação à temperatura, não houve diferença entre os grupos nos momentos avaliados. Os valores de pH apresentaram-se diminuídos logo após o nascimento, vindo a elevar-se nos momentos 24 e 48 horas em todos animais estudados. Em relação à análise dos níveis de cortisol, os valores aumentaram de forma significativa no (M0), com os maiores valores obtidos nos animais do grupo II. Esses valores decresceram às 48 horas após o nascimento nos cabritos avaliados. Os animais pertencentes ao grupo I demonstraram melhores aspectos radiográficos, sendo que, ao longo das 48 horas de avaliação, todos os recém-nascidos possuíam adequada adaptação respiratória. Conclui-se que a dexametasona antenatal realizada aos 143 dias de gestação não exerceu influência sobre a viabilidade neonatal, parâmetros metabólicos e radiográficos. As alterações metabólicas encontradas são condizentes com o período de adaptação extrauterina que animais nessa fase de vida enfrentam.

Assessment of fetal lung maturity using analysis of amniotic fluid from ewes that gave birth prematurely and at term / Avaliação da maturidade pulmonar fetal utilizando a análise de líquido amniótico de ovelhas que deram à luz prematuramente e a termo

The aim of this study was to evaluate the lung maturity of premature and full-term lambs by analyzing amniotic fluid using the following methods: Clements test, Nile blue cytology test, hematoxylin-Shorr stain, lamellar body count, and radiographic tests. The use of these methods is intended to identify high-risk newborns and provide immediate clinical intervention after birth. Altogether, 56 animals (24 ewes and 32 lambs) were included in the study and divided into 3 groups. Group I consisted of 8 ewes that were at approximately 145 days of gestation; this group delivered 10 lambs naturally. Group II consisted of 8 ewes that were at 138 days' gestation; this group delivered 11 lambs by cesarean section. Group III consisted of 8 ewes at 138 days' gestation; this group was administered intramuscular dexamethasone (16mg/animal) 36 hours prior to a cesarean section. Group III delivered11 lambs. Cytological tests were performed using a microscope with a maximum magnification of 1000x, while the Clements test was visually observed by one of the researchers. Amnioticfluid lamellar body counts were measured using transmission electron microscopy. Among the staining methods, hematoxylin-Shorr was reliable, and Group III had a greater number of orangeophilic cells when compared to Group II, probably due to corticoid administration. The Clements test showed pulmonary maturity in approximately 20% of Group I lambs and Group II showed 9.1% of bubbles; however, Group III had the highest pulmonary maturity percentage (36.4%). The lamellar bodies were measured, and all groups had sizes between 0.019 and 0.590μm. Radiographic evaluation revealed that the majority of lambs presented some level of pulmonary radiodensity, indicating an acinar pattern at birth. These results are in line with the expectations of each group. We found that the normal group showed greater pulmonary maturity, whereas Group II presented pulmonary immaturity, which is expected because this group comprised lambs born prematurely and Group III showed pulmonary maturity almost comparable to the normal delivery group (Group I). This is due to the fact that although these animals are premature, the use of dexamethasone helped in pulmonary maturation. Therefore, these pulmonary maturity tests are considered effective when more than one technique is used and can be used routinely in the care of a pregnant ewe in labor, where a simple collection of amniotic fluid can predict a high-risk pregnancy and alert the veterinarian if the newborn needs intensive supportive treatment.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a maturidade pulmonar de cordeiros prematuros e a termo por meio da análise do líquido amniótico utilizando os seguintes métodos: teste de Clements, teste de citologia do azul do Nilo, coloração de hematoxilina-Shorr, contagem de corpos lamelares e testes radiográficos. Um desses métodos tem por objetivo identificar recém-nascidos de alto risco e fornecer intervenção clínica imediata após o nascimento. Ao todo, 56 animais (24 ovelhas e 32 cordeiros) foram incluídos no estudo e divididos em 3 grupos. O grupo I foi composto por 8 ovelhas com aproximadamente 145 dias de gestação; este grupo deu à luz 10 cordeiros naturalmente. O Grupo II foi composto por 8 ovelhas com 138 dias de gestação; este grupo deu à luz 11 cordeiros por cesariana. Grupo III consistiu de 8 ovelhas com 138 dias de gestação; este grupo recebeu dexametasona intramuscular (16 mg / animal) 36 horas antes de uma cesariana. O Grupo III entregou 11 cordeiros. Os testes citológicos foram realizados em microscópio com aumento máximo de 1000x, enquanto o teste de Clements foi observado visualmente por um dos pesquisadores. A contagem de corpos lamelares de líquido amniótico foi medida usando microscopia eletrônica de transmissão. Dentre os métodos de coloração, o hematoxilina-Shorr foi confiável, sendo que o Grupo III apresentou maior número de células orangeofílicas quando comparado ao grupo II, provavelmente devido à administração de corticóide. O teste de Clements mostrou maturidade pulmonar em aproximadamente 20% dos cordeiros do Grupo I e o Grupo II apresentou 9,1% de bolhas; entretanto, o Grupo III apresentou o maior percentual de maturidade pulmonar (36,4%). Os corpos lamelares foram medidos e todos os grupos apresentaram tamanhos entre 0,019 e 0,590μm. A avaliação radiográfica revelou que a maioria dos cordeiros apresentava algum grau de radiodensidade pulmonar, indicando padrão acinar ao nascimento. Esses resultados estão alinhados com as expectativas de cada grupo. Verificamos que o grupo normal apresentou maior maturidade pulmonar, enquanto o Grupo II apresentou imaturidade pulmonar, o que é esperado por se tratar de cordeiros nascidos prematuramente e o Grupo III apresentou maturidade pulmonar quase comparável ao grupo de parto normal (Grupo I). Isso se deve ao fato de que, embora esses animais sejam prematuros, o uso da dexametasona auxiliou na maturação pulmonar. Portanto, esses testes de maturidade pulmonar são considerados eficazes quando mais de uma técnica são utilizadas e podem ser usadas rotineiramente no cuidado de uma ovelha gestante em trabalho de parto, onde uma simples coleta de líquido amniótico pode prever uma gravidez de alto risco e alertar o veterinário se o recém-nascido precisa de tratamento de suporte intensivo.(AU)

Assessment of fetal lung maturity using analysis of amniotic fluid from ewes that gave birth prematurely and at term / Avaliação da maturidade pulmonar fetal utilizando a análise de líquido amniótico de ovelhas que deram à luz prematuramente e a termo

The aim of this study was to evaluate the lung maturity of premature and full-term lambs by analyzing amniotic fluid using the following methods: Clements test, Nile blue cytology test, hematoxylin-Shorr stain, lamellar body count, and radiographic tests. The use of these methods is intended to identify high-risk newborns and provide immediate clinical intervention after birth. Altogether, 56 animals (24 ewes and 32 lambs) were included in the study and divided into 3 groups. Group I consisted of 8 ewes that were at approximately 145 days of gestation; this group delivered 10 lambs naturally. Group II consisted of 8 ewes that were at 138 days' gestation; this group delivered 11 lambs by cesarean section. Group III consisted of 8 ewes at 138 days' gestation; this group was administered intramuscular dexamethasone (16mg/animal) 36 hours prior to a cesarean section. Group III delivered11 lambs. Cytological tests were performed using a microscope with a maximum magnification of 1000x, while the Clements test was visually observed by one of the researchers. Amnioticfluid lamellar body counts were measured using transmission electron microscopy. Among the staining methods, hematoxylin-Shorr was reliable, and Group III had a greater number of orangeophilic cells when compared to Group II, probably due to corticoid administration. The Clements test showed pulmonary maturity in approximately 20% of Group I lambs and Group II showed 9.1% of bubbles; however, Group III had the highest pulmonary maturity percentage (36.4%). The lamellar bodies were measured, and all groups had sizes between 0.019 and 0.590μm. Radiographic evaluation revealed that the majority of lambs presented some level of pulmonary radiodensity, indicating an acinar pattern at birth. These results are in line with the expectations of each group. We found that the normal group showed greater pulmonary maturity, whereas Group II presented pulmonary immaturity, which is expected because this group comprised lambs born prematurely and Group III showed pulmonary maturity almost comparable to the normal delivery group (Group I). This is due to the fact that although these animals are premature, the use of dexamethasone helped in pulmonary maturation. Therefore, these pulmonary maturity tests are considered effective when more than one technique is used and can be used routinely in the care of a pregnant ewe in labor, where a simple collection of amniotic fluid can predict a high-risk pregnancy and alert the veterinarian if the newborn needs intensive supportive treatment.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a maturidade pulmonar de cordeiros prematuros e a termo por meio da análise do líquido amniótico utilizando os seguintes métodos: teste de Clements, teste de citologia do azul do Nilo, coloração de hematoxilina-Shorr, contagem de corpos lamelares e testes radiográficos. Um desses métodos tem por objetivo identificar recém-nascidos de alto risco e fornecer intervenção clínica imediata após o nascimento. Ao todo, 56 animais (24 ovelhas e 32 cordeiros) foram incluídos no estudo e divididos em 3 grupos. O grupo I foi composto por 8 ovelhas com aproximadamente 145 dias de gestação; este grupo deu à luz 10 cordeiros naturalmente. O Grupo II foi composto por 8 ovelhas com 138 dias de gestação; este grupo deu à luz 11 cordeiros por cesariana. Grupo III consistiu de 8 ovelhas com 138 dias de gestação; este grupo recebeu dexametasona intramuscular (16 mg / animal) 36 horas antes de uma cesariana. O Grupo III entregou 11 cordeiros. Os testes citológicos foram realizados em microscópio com aumento máximo de 1000x, enquanto o teste de Clements foi observado visualmente por um dos pesquisadores. A contagem de corpos lamelares de líquido amniótico foi medida usando microscopia eletrônica de transmissão. Dentre os métodos de coloração, o hematoxilina-Shorr foi confiável, sendo que o Grupo III apresentou maior número de células orangeofílicas quando comparado ao grupo II, provavelmente devido à administração de corticóide. O teste de Clements mostrou maturidade pulmonar em aproximadamente 20% dos cordeiros do Grupo I e o Grupo II apresentou 9,1% de bolhas; entretanto, o Grupo III apresentou o maior percentual de maturidade pulmonar (36,4%). Os corpos lamelares foram medidos e todos os grupos apresentaram tamanhos entre 0,019 e 0,590μm. A avaliação radiográfica revelou que a maioria dos cordeiros apresentava algum grau de radiodensidade pulmonar, indicando padrão acinar ao nascimento. Esses resultados estão alinhados com as expectativas de cada grupo. Verificamos que o grupo normal apresentou maior maturidade pulmonar, enquanto o Grupo II apresentou imaturidade pulmonar, o que é esperado por se tratar de cordeiros nascidos prematuramente e o Grupo III apresentou maturidade pulmonar quase comparável ao grupo de parto normal (Grupo I). Isso se deve ao fato de que, embora esses animais sejam prematuros, o uso da dexametasona auxiliou na maturação pulmonar. Portanto, esses testes de maturidade pulmonar são considerados eficazes quando mais de uma técnica são utilizadas e podem ser usadas rotineiramente no cuidado de uma ovelha gestante em trabalho de parto, onde uma simples coleta de líquido amniótico pode prever uma gravidez de alto risco e alertar o veterinário se o recém-nascido precisa de tratamento de suporte intensivo.(AU)

Avaliação da maturidade pulmonar de cabritos nascidos a termo e prematuros / [Evaluation of lung maturity of term and premature kid]

Avaliou-se a maturidade pulmonar de cabritos no líquido amniótico de suas mães pela coloração de Shor, pelo azul de Nilo e pela contagem de corpos lamelares, bem como a vitalidade e os níveis de glicose e lactato séricos em cabritos nascidos a termo e prematuros. Para tanto, foram utilizados 32 cabritos, divididos em três grupos, a saber: grupo I: cabritos nascidos de cesarianas com 149 dias de gestação; grupo II: cabritos nascidos de cesarianas com 143 dias de gestação; e grupo III: cabritos nascidos de cesarianas com 143 dias de gestação, oriundos de mães que receberam, por via intramuscular, 20mg/cabra de dexametasona, 36 horas antes da cirurgia eletiva. A coloração de Shorr e a contagem de corpos lamelares demonstraram ser métodos diagnósticos promissores para a avaliação da maturidade pulmonar em neonatos caprinos. Contudo, a administração de dexametasona nas cabras no período antenatal não influenciou a maturidade fetal. Constatou-se, entretanto, que a avaliação física do paciente, logo após o nascimento, também se mostra fundamental no que tange à percepção da vitalidade e da viabilidade de cabritos recém-nascidos.(AU)

Pulmonary maturity of goats in their amniotic fluid was evaluated by Shor, Nile blue staining, and lamellar body count, as well as vitality and serum glucose and lactate levels in term and premature goats. Twenty-four kids were divided into three groups: group I: comprised of eight animals born by cesarean section with 149 days of gestation; group II: comprised of eight animals born by cesarean section with 143 days of gestation; and group III: comprised of eight animals born by cesarean section with 143 days of gestation, in which the does received intramuscular dexamethasone (20mg/goat) 36 hours prior to elective cesarean section. Shorr staining and lamellar body count have shown to be promising diagnostic methods for the assessment of lung maturity in goat neonates. However, the administration of dexamethasone to goats during antenatal period did not influence fetal maturity. It was verified that the physical evaluation of the patient, shortly after birth, is fundamental for the perception of vitality and viability of newborn goats.(AU)

Avaliação da maturidade pulmonar de cabritos nascidos a termo e prematuros / [Evaluation of lung maturity of term and premature kid]

Avaliou-se a maturidade pulmonar de cabritos no líquido amniótico de suas mães pela coloração de Shor, pelo azul de Nilo e pela contagem de corpos lamelares, bem como a vitalidade e os níveis de glicose e lactato séricos em cabritos nascidos a termo e prematuros. Para tanto, foram utilizados 32 cabritos, divididos em três grupos, a saber: grupo I: cabritos nascidos de cesarianas com 149 dias de gestação; grupo II: cabritos nascidos de cesarianas com 143 dias de gestação; e grupo III: cabritos nascidos de cesarianas com 143 dias de gestação, oriundos de mães que receberam, por via intramuscular, 20mg/cabra de dexametasona, 36 horas antes da cirurgia eletiva. A coloração de Shorr e a contagem de corpos lamelares demonstraram ser métodos diagnósticos promissores para a avaliação da maturidade pulmonar em neonatos caprinos. Contudo, a administração de dexametasona nas cabras no período antenatal não influenciou a maturidade fetal. Constatou-se, entretanto, que a avaliação física do paciente, logo após o nascimento, também se mostra fundamental no que tange à percepção da vitalidade e da viabilidade de cabritos recém-nascidos.(AU)

Pulmonary maturity of goats in their amniotic fluid was evaluated by Shor, Nile blue staining, and lamellar body count, as well as vitality and serum glucose and lactate levels in term and premature goats. Twenty-four kids were divided into three groups: group I: comprised of eight animals born by cesarean section with 149 days of gestation; group II: comprised of eight animals born by cesarean section with 143 days of gestation; and group III: comprised of eight animals born by cesarean section with 143 days of gestation, in which the does received intramuscular dexamethasone (20mg/goat) 36 hours prior to elective cesarean section. Shorr staining and lamellar body count have shown to be promising diagnostic methods for the assessment of lung maturity in goat neonates. However, the administration of dexamethasone to goats during antenatal period did not influence fetal maturity. It was verified that the physical evaluation of the patient, shortly after birth, is fundamental for the perception of vitality and viability of newborn goats.(AU)

Evaluation of pulmonary maturity in bovine neonates: analysis of amniotic fluid

ABSTRACT: Considering the representativeness of dairy cattle in our country, the concern about the mortality rates of the animals increases each time. Regarding to calf mortality, the Respiratory Distress Syndrome (RDS) has an important relevance during the neonatal period, and it is present in immature lungs. The amniotic fluid is in direct contact with the fetus, and it is able to offer evidence about his maturity. The aim of this study was to standardize the characteristics of the amniotic fluid, color, aspect, viscosity, quantification of lamellar body and surfactant evaluation by the Clements test and cytology, of term-born, mature and healthy calves. There were used 50 Black and White Holstein calves, which mothers were observed at calving in order to collect the amniotic fluid by puncture in the moment of exposure of the fetal membrane through the vaginal canal. Most amniotic fluid had a clear and hazy appearance due to varying degrees of viscosity and the presence or absence of clots. The Clements test could be adapted to the bovine species by the modification consisting in the addition of 3mL of amniotic fluid and 1mL of 95% ethanol. The methodology of the lamellar body count by the automated particle counter is not applicable for the bovine because of the small size of their lamellar body. The Nile Blue staining is unsatisfactory on predicting fetal maturity on the bovine species, different from cytology using Hematoxylin-Shorr stain. The presence of orange cells, increase in large amounts at the end of pregnancy. The cell stained orange counting, cells which are found in great amounts at the end of pregnancy. The present study stablished new parameters for evaluation of fetal and pulmonary maturity in the bovine species.

RESUMO: O objetivo desse estudo foi reunir novos dados práticos sobre a avaliação da maturidade pulmonar em neonatos bovinos, padronizando as características do líquido amniótico de bezerros maduros e hígidos, o que proporcionará a oportunidade de tratamento precoce dos animais prematuros, evitando prejuízos econômicos, principalmente quando consideramos os animais de alto valor genético. Amostras de líquido amniótico foram coletadas de 50 vacas da Raça Holandesa Preta e Branca. Corpos lamelares foram identificados por microscopia eletrônica de transmissão como estruturas de tamanho aproximado de 130nm, o que impede sua contagem em analisadores automáticos. O teste de Clements sofreu adaptações de técnica e se mostrou viável com a diluição de 3mL de líquido amniótico em 1mL de etanol a 95%. A citologia utilizando o método de Hematoxilina-Shorr, diferentemente do teste de Azul de Nilo, foi eficaz na identificação das células orangiofílicas, indicativas de maturidade fetal. Esses métodos mostraram-se originais e úteis ferramentas para a avaliação de maturidade pulmonar na espécie bovina, porém estudos com bezerros prematuros ainda são necessários.

Evaluation of pulmonary maturity in bovine neonates: analysis of amniotic fluid / Avaliação maturidade pulmonar em neonatos bovinos: análise do líquido amniótico

Considering the representativeness of dairy cattle in our country, the concern about the mortality rates of the animals increases each time. Regarding to calf mortality, the Respiratory Distress Syndrome (RDS) has an important relevance during the neonatal period, and it is present in immature lungs. The amniotic fluid is in direct contact with the fetus, and it is able to offer evidence about his maturity. The aim of this study was to standardize the characteristics of the amniotic fluid, color, aspect, viscosity, quantification of lamellar body and surfactant evaluation by the Clements test and cytology, of term-born, mature and healthy calves. There were used 50 Black and White Holstein calves, which mothers were observed at calving in order to collect the amniotic fluid by puncture in the moment of exposure of the fetal membrane through the vaginal canal. Most amniotic fluid had a clear and hazy appearance due to varying degrees of viscosity and the presence or absence of clots. The Clements test could be adapted to the bovine species by the modification consisting in the addition of 3mL of amniotic fluid and 1mL of 95% ethanol. The methodology of the lamellar body count by the automated particle counter is not applicable for the bovine because of the small size of their lamellar body. The Nile Blue staining is unsatisfactory on predicting fetal maturity on the bovine species, different from cytology using Hematoxylin-Shorr stain. The presence of orange cells, increase in large amounts at the end of pregnancy. The cell stained orange counting, cells which are found in great amounts at the end of pregnancy. The present study stablished new parameters for evaluation of fetal and pulmonary maturity in the bovine species.(AU)

O objetivo desse estudo foi reunir novos dados práticos sobre a avaliação da maturidade pulmonar em neonatos bovinos, padronizando as características do líquido amniótico de bezerros maduros e hígidos, o que proporcionará a oportunidade de tratamento precoce dos animais prematuros, evitando prejuízos econômicos, principalmente quando consideramos os animais de alto valor genético. Amostras de líquido amniótico foram coletadas de 50 vacas da Raça Holandesa Preta e Branca. Corpos lamelares foram identificados por microscopia eletrônica de transmissão como estruturas de tamanho aproximado de 130nm, o que impede sua contagem em analisadores automáticos. O teste de Clements sofreu adaptações de técnica e se mostrou viável com a diluição de 3mL de líquido amniótico em 1mL de etanol a 95%. A citologia utilizando o método de Hematoxilina-Shorr, diferentemente do teste de Azul de Nilo, foi eficaz na identificação das células orangiofílicas, indicativas de maturidade fetal. Esses métodos mostraram-se originais e úteis ferramentas para a avaliação de maturidade pulmonar na espécie bovina, porém estudos com bezerros prematuros ainda são necessários.(AU)

Evaluation of pulmonary maturity in bovine neonates: analysis of amniotic fluid / Avaliação maturidade pulmonar em neonatos bovinos: análise do líquido amniótico

Considering the representativeness of dairy cattle in our country, the concern about the mortality rates of the animals increases each time. Regarding to calf mortality, the Respiratory Distress Syndrome (RDS) has an important relevance during the neonatal period, and it is present in immature lungs. The amniotic fluid is in direct contact with the fetus, and it is able to offer evidence about his maturity. The aim of this study was to standardize the characteristics of the amniotic fluid, color, aspect, viscosity, quantification of lamellar body and surfactant evaluation by the Clements test and cytology, of term-born, mature and healthy calves. There were used 50 Black and White Holstein calves, which mothers were observed at calving in order to collect the amniotic fluid by puncture in the moment of exposure of the fetal membrane through the vaginal canal. Most amniotic fluid had a clear and hazy appearance due to varying degrees of viscosity and the presence or absence of clots. The Clements test could be adapted to the bovine species by the modification consisting in the addition of 3mL of amniotic fluid and 1mL of 95% ethanol. The methodology of the lamellar body count by the automated particle counter is not applicable for the bovine because of the small size of their lamellar body. The Nile Blue staining is unsatisfactory on predicting fetal maturity on the bovine species, different from cytology using Hematoxylin-Shorr stain. The presence of orange cells, increase in large amounts at the end of pregnancy. The cell stained orange counting, cells which are found in great amounts at the end of pregnancy. The present study stablished new parameters for evaluation of fetal and pulmonary maturity in the bovine species.(AU)

O objetivo desse estudo foi reunir novos dados práticos sobre a avaliação da maturidade pulmonar em neonatos bovinos, padronizando as características do líquido amniótico de bezerros maduros e hígidos, o que proporcionará a oportunidade de tratamento precoce dos animais prematuros, evitando prejuízos econômicos, principalmente quando consideramos os animais de alto valor genético. Amostras de líquido amniótico foram coletadas de 50 vacas da Raça Holandesa Preta e Branca. Corpos lamelares foram identificados por microscopia eletrônica de transmissão como estruturas de tamanho aproximado de 130nm, o que impede sua contagem em analisadores automáticos. O teste de Clements sofreu adaptações de técnica e se mostrou viável com a diluição de 3mL de líquido amniótico em 1mL de etanol a 95%. A citologia utilizando o método de Hematoxilina-Shorr, diferentemente do teste de Azul de Nilo, foi eficaz na identificação das células orangiofílicas, indicativas de maturidade fetal. Esses métodos mostraram-se originais e úteis ferramentas para a avaliação de maturidade pulmonar na espécie bovina, porém estudos com bezerros prematuros ainda são necessários.(AU)

Estudio de la madurez fetal canina al final del embarazo: aplicabilidad de diagnóstico / Study of canine fetal maturity, emphasizing final stage of gestation, and diagnostic applicability / Estudo da maturidade fetal canina em fase final de gestação: aplicabilidade diagnóstica

En la medicina, las técnicas para la evaluación de la madurez esquelética, pulmón, riñón y corazón ya se usan de forma rutinaria en obstetricia, a diferencia de veterinaria que estas evaluaciones están siendo estudiados recientemente. La evaluación de los fluidos fetales se convierte en obstetricia humana para un parámetro para la determinación de la madurez fetal, embarazo de alto riesgo, muerte fetal, infección fetal y el sexo. Mientras que para los pequeños animales es necesario desarrollar técnicas aplicables para determinar la maduración fetal ción de los fetos, el presente trabajo tiene como objetivo revisar o describir la aplicación de estos métodos y la evaluación de la madurez fetal en animales pequeños.(AU)

In medicine, techniques for assessing skeletal maturity, lung, kidney and heart are already routinely used in obstetrics, unlike veterinary that these assessments are being studied recently. The assessment of fetal fluids becomes for obstetrics human a parameter for determining fetal maturity, high-risk pregnancy, fetal death, fetal infection and sex. Whereas for small animals it is necessary to develop techniques applicable to determine the fetal maturation of fetuses, this paper aims to review or describe the application of these methods and assessment of fetal maturity in small animals.(AU)

Em medicina, técnicas para avaliar maturidade óssea, pulmonar, renal e cardíaca são rotineiramente utilizadas em obstetrícia, diferentemente da veterinária em que essas avaliações estão sendo recentemente estudadas. A avaliação dos fluidos fetais torna-se para a obstetrícia humana um parâmetro de determinação da maturidade fetal, gestação de alto risco, morte fetal, infecção e sexo fetais. Considerando que para pequenos animais faz-se necessário o desenvolvimento de técnicas para determinação da maturação fetal dos conceptos, a presente revisão tem como objetivo descrever a aplicação de métodos diagnósticos para avaliação da maturidade fetal em pequenos animais.(AU)

TREMATODIASE RENAL EM Puffinus puffinus NO LITORAL DO ESTADO DO PARANÁ

Puffinus puffinus, conhecido como pardela-sombria, pertence a ordem Procellariiformes. Estas aves marinhas mantêm sítios de reprodução na Europa e migram para o Atlântico Sul entre os meses de setembro e fevereiro. Estudos sobre a fauna parasitária destes animais também podem fornecer informações sobre a distribuição e o estoque populacional dos hospedeiros e os impactos sobre a saúde dos oceanos. Objetivou-se com este trabalho identificar por métodos morfológicos e moleculares os trematódeos renais de Puffinus puffinus encalhados no litoral do Estado do Paraná e avaliar a associação entre a presença destes parasitos com as alterações renais e sistêmicas e a ocorrência de interação antrópica. A coleta dos animais, dos digenéticos e as autópsias foram realizadas no período de setembro de 2015 a dezembro de 2017 pela equipe do Projeto de Monitoramento de Praias, do Centro de Estudo do Mar, Universidade Federal do Paraná, como condicionante pela exploração de petróleo e gás do pré-sal na Bacia de Santos. Durante a autópsia foram coletadas informações como sexo, idade, condição corporal e interação antrópica. Fragmentos de órgãos foram colhidos e fixados em solução formalina tamponada a 10% para posterior processamento histológico. Determinou-se um escore de lesão no rim que utilizou os seguintes parâmetros: hiperplasia do epitélio tubular, degeneração e necrose do epitélio tubular e infiltrado inflamatório. Para avaliar o índice de saúde, utilizou-se também quatro parâmetros: condição corporal e lesões tegumentares, sistêmicas e organizadas. Os parasitos foram caraterizados por técnicas histológicas e moleculares (reação em cadeia da polimerase e sequenciamento) e por microscopia eletrônica de varredura. Foram encontrados 341 P. puffinus, com maior ocorrência durante o mês de novembro. Destes, 85 foram submetidos às avaliações macro e microscópicas. Deste total, 71 (84%) apresentaram digenéticos renais. Em 78 animais foi possível determinar o sexo (44 fêmeas e 34 machos), sendo a maioria juvenis. Interação antrópica foi observada somente em aves parasitadas (17/71), sendo a presença de óleo a principal interação (6/17). As alterações renais mais frequentes nos animais parasitados foram nefrite (53/71) e necrose tubular (17/71). Condição corporal ruim foi observada na maioria das aves parasitadas (46/71) e não parasitadas (12/14). As principais lesões sistêmicas observadas em aves parasitadas e não parasitadas foram necrose cardíaca e muscular, congestão e hemorragia pulmonar. A presença dos digenéticos não teve correlação com o sexo, a maturidade sexual, o escore de lesão renal e o índice de saúde. No entanto, verificou-se correlação significativa entre interação antrópica e o parasitismo renal. A partir dos resultados morfológicos e moleculares foi possível identificar o renicolídeo Renicola sloanei pela primeira vez em P. puffinus. Além disso, os resultados moleculares também sugerem que este digenético pode ser a forma adulta de Cercaria pythionike. Os achados histopatológicos e a análise estatística corroboram o fato do parasitismo por R. sloanei acarretar lesões renais não letais, ou seja, que não estão associadas ao encalhe e óbito de P. puffinus. Portanto, a mortalidade destes animais pode estar associada ao excessivo esforço energético e muscular durante o período migratório, observados pela baixa condição corporal e lesões cardíaca e muscular.

Puffinus puffinus, known as Manx shearwaters, belongs to the order Procellariiformes. These seabirds maintain breeding sites in Europe and migrate to the South Atlantic between September to February. Studies on the parasitic fauna of migratory seabirds can also provide information on the host population distribution and stock and the health impacts of the oceans. The aim of this work was to characterize the renal digeneans of Puffinus puffinus stranded on the coast of Paraná state by morphological and molecular methods and to evaluate the association between the presence of these parasites, the renal and systemic alterations and the occurrence of anthropic interaction. The sampling of animals, digeneans and autopsy were carried out from September 2015 to December 2017 through the Beach Monitoring Project, of the Centro de Estudos do Mar, Universidade Federal do Paraná, as a condition for the pre-salt exploration in the Santos Basin. During the autopsy, data concerning sex, age, body condition and anthropic interaction were collected. Tissues samples were fixed in 10% buffered formalin solution for histological analysis. A lesion score in the kidney was determined using the following parameters: tubular epithelium hyperplasia, tubular epithelium degeneration and necrosis, and inflammatory infiltrate. To evaluate the health status, four parameters were also used: body condition and, integumentary, systemic and organized lesions. The parasites were characterized by histological and molecular (polymerase chain reaction and sequencing), and scanning electron microscopy assays. In this study, 341 P. puffinus were stranded, with highest occurrence on November. From these, 85 were submitted to macro and microscopic evaluations. Digeneans in renal tissue were observed in 71 (84%) of these animals. In 78 animals it was possible to determine the sex (44 females and 34 males), most of them juveniles. Anthropic interaction was observed only in parasitized birds (17/71), with the presence of oil being the main interaction (6/17). The most frequent renal changes in the parasitized animals were nephritis (53/71) and tubular necrosis (17/71). Poor body condition was observed in most parasitized (46/71) and non-parasitized (12/14) birds. The main systemic lesions observed in parasitized and non-parasitized birds were cardiac and muscular necrosis, congestion and pulmonary hemorrhage. The presence of digeneans had no correlation with sex, sexual maturity, renal injury score, and health index. However, there was a significant correlation between anthropic interaction and renal parasitism. From the morphological and molecular results it was possible to identify Renicola sloanei for the first time in P. puffinus. In addition, molecular results also suggest that this parasite is the mature form of Cercaria pythionike. The histopathological findings and the statistical analysis corroborate the fact that parasitism by R. sloanei causes non-lethal renal lesions, and is not associated with the stranding and death of P. puffinus. Therefore, the mortality of these animals may be associated with excessive energetic and muscular efforts during the migratory period, observed by poor body condition and cardiac and muscle injury.

ULTRASSONOGRAFIA MODO B E ELASTOGRAFIA ACOUSTIC RADIATION FORCE IMPULSE (ARFI) DE TECIDOS MATERNO FETAIS DURANTE A GESTAÇÃO EM OVINOS

O objetivo deste estudo foi avaliar a rigidez de tecidos materno fetais em ovinos a partir da décima semana de gestação, por meio da elastografia ARFI (AcousticRadiation Force Impulse), determinando padrões qualitativos e quantitativos, com o intuito de verificar a aplicabilidade da técnica elastográfica no estudo do desenvolvimento desses tecidos. Foram avaliadas 24 ovelhas multíparas, com peso entre 40 e 60 quilos e idade entre 2 e 5 anos, da raça Santa Inês. Após a realização de exames prévios e verificada a higidez dos animais, estes foram submetidos a um protocolo de sincronização de estro seguido da monta natural. Quando confirmada a prenhez, foram submetidos aos exames ultrassonográfico convencional e elastografia (método ARFI quantitativo e qualitativo) do tecido pulmonar, hepático, renal e placentônios, com a utilização do aparelho ultrassonográfico ACUSON S2000/SIEMENS e softwares específicos. Os exames foram realizados semanalmente, a partir da décima semana gestacional (64 a 70 dias) até a semana da parição, sendo verificados os achados sonográficos destes tecidos, velocidade de cisalhamento (avaliação elastográfica quantitativa) e suas características de rigidez (avaliação elastográfica qualitativa). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado e se utilizou nível de significância de 5% para todos os testes realizados. Os animais não apresentaram quaisquer alterações clínicas e obstétricas durante o período gestacional e parto. Os neonatos apresentaram-se saudáveis e normais. A elastografia ARFI foi realizada de forma consistente e sem qualquer dificuldade. A elastografia qualitativa de todos os tecidos não se apresentou deformável, demonstrando imagem homogênea. À avaliação quantitativa, as velocidades de cisalhamento pulmonar (95% CI = 0.70 a 0.62 m/s) e hepática (95% IC = 0,79 a 0,96 m/s) variaram ao longo das semanas gestacionais (p < 0,001), enquanto as velocidades renal (95% IC = 1,53 a 1,36 m/s) e do placentônio (95% IC = 2,34 a 2,28 m/s) não apresentaram diferença (p = 0,076 e 0,34 respetivamente). A elastografia ARFI demostrou ser uma técnica prática e segura para a avalição do binômio materno-fetal, permitindo identificar os padrões de rigidez do placentônio, pulmão, fígado e rim fetais; apresentando correlação com o desenvolvimento gestacional das ovelhas por meio dos resultados da velocidade de cisalhamento dos tecidos pulmonares e hepáticos. Sugere-se que este método pode ser utilizado para estudos fisiológicos e patológicos na gestação de diversas espécies mamíferas.

The aim of this study was to evaluate the stiffness of maternal fetal tissues of ovines from the tenth week of gestation, using elastography ARFI (Acoustic Radiation Force Impulse), with the purpose of verifying the applicability of the elastographic technique in the study of the development of these tissues throughout the gestational period. Twenty - four multiparous ewes, weighing between 40 and 60 kilos and age between 2 and 5 years, of the Santa Inês breed were evaluated. After conducting preliminary exams and checked the healthiness of the animals, these were submitted to an estrus synchronization protocol and natural mating. When the pregnancy was confirmed, they were submitted to the conventional ultrasound examinations and elastography (quantitative and qualitative method ARFI) with the use of the ultrasound equipment ACUSON S2000 / SIEMENS and specific software. The exams were performed weekly, from the 10th gestational week (64 to 70 days) until the week of parturition and the shear wave velocity (quantitative elastographic evaluation) and stiffness characteristics were verified (Qualitative elastographic evaluation).The experimental lineation was completely randomized and used 5% significance level for all tests. The animals did not present any clinical and obstetric alterations during pregnancy and birth. The newborns presented themselves healthy and normal. ARFI elastography was performed consistently and without any difficulty. Qualitative elastography did not appear deformable, demonstrating homogeneous image. For quantitative evaluation, pulmonar (95% CI = 0.70 to 0.62 m/s) and hepatic (95% CI = 0.79 to 0.96 m/s) shear waves velocities varied over the gestational weeks (P <0.001), whereas renal (95% CI = 1.53 a 1.36 m/s) and placentomes velocities (95% CI = 2.34 to 2.28 m / s) did not present difference (p = 0.076 and 0.34 respectively). ARFI-elastography has shown to be an applicable and safe technique for placentomes, pulmonary, renal and hepatic fetal tissues stiffness evaluation in ovine experimental model. Enabled qualitative and quantitative tissues elastographic characterization, and allowed to detect pulmonary and hepatic stiffness modifications related with fetal development and gestational age. We suggest that these results could be used as reference for pregnancy pathophysiological studies in ovine and extrapolated for gestational researches in other mammal species.

ULTRASSONOGRAFIA MODO B E ELASTOGRAFIA ARFI PULMONAR E HEPÁTICA FETAL COMO MÉTODO PREDITIVO PARA A MATURIDADE DOS CONCEPTOS EM FASE FINAL DE GESTAÇÃO DE CADELAS

O objetivo deste estudo foi avaliar a rigidez do parênquima pulmonar e hepático de fetos caninos em fase final da gestação, por meio da elastografia ARFI (Acoustic Radiation Force Impulse), determinando padrões qualitativos e quantitativos, com o intuito de predizer a maturidade dos conceptos caninos. Foram avaliadas 15 cadelas primíparas e multíparas, com peso médiode 7,03 ± 3,64 kg, idade média de 2,5 ± 1,21 anos, de raças variadas. Após a realização de exames prévios e verificada a higidez dos animais, estes foram submetidos aos exames ultrassonográfico convencional e elastografia (método ARFI quantitativo e qualitativo) do tecido pulmonar e hepático, com a utilização do aparelho ultrassonográfico ACUSON S2000/SIEMENS e softwares específicos. Os exames foram realizados diariamente, a cada 12 horas, a partir da oitava semana gestacional até o dia de parição, sendo verificados os achados sonográficos dos pulmões e fígados fetais, valores de ecogenicidade, velocidade de cisalhamentodos parênquimas avaliados (avaliação elastográfica quantitativa) e suas características de rigidez (avaliação elastográfica qualitativa).O delineamento experimental foi inteiramente casualizado e se utilizou nível de significância de 5% para todos os testes realizados. Os animais não apresentaram quaisquer alterações clínicas e obstétricas durante o período gestacional e parto. Os neonatos apresentaram-se saudáveis e normais. A elastografia ARFI foi realizada de forma consistente e sem qualquer dificuldade. A elastografia qualitativa do parênquima pulmonar dos fetos caninos não se apresentou deformável, demonstrando imagem homogênea, de colocaração cinza médio a claro e rígido. À avaliação quantitativa, a velocidade média de cisalhamento foi de (IC = 0,84 ± 0,11 m/s), sendo que as velocidades foram estatisticamente semelhantes em todos os momentos experimentais (p = 0,69). À avaliação qualitativa, o parênquima hepático dos fetos caninos não se apresentou deformável, sendo homogêneo e de coloração cinza médio a escuro e com maior rigidez ao tecido pulmonar, em todos os momentos de coleta. Em relação à avaliação quantitativa, a velocidade média de cisalhamento foi de (IC = 0,98 ± 0,12 m/s). Houve um efeito significativo de tempo para o valor médio do número de pixels, e a intensidade de pixel mínima e máxima do tecido pulmonar, estes valores diminuíram significativamente de 96 a 24 horas antes do parto e, subsequentemente, os valores aumentaram no momento do parto (p = 0,04). A heterogeneidade de pixels dos pulmões dos fetos não variou significativamente durante a última semana de gestação e não houve diferença significativa (p = 0,32).

The objective of this study was to evaluate the stiffness of the lung and hepatic parenchyma of canine fetuses in late pregnancy of bitches, through elastography ARFI (Acoustic Radiation Force Impulse), determining qualitative and quantitative standards, in order to predict the maturity of canine fetuses. Were evaluated 15 female dogs primiparous and multiparous, with an average weight of 7.03 ± 3.64 kg, mean age 2.5 ± 1.21 years, of various races. After conducting preliminary exams and checked the healthiness of the animals, these were submitted to the conventional ultrasound examinations and elastography (quantitative and qualitative method ARFI) of lung and liver tissue, with the use of the ultrasound equipment ACUSON S2000 / SIEMENS and specific software.The examinations were performed daily, ever 12 hours, from the eighth week of pregnancy until the day of birth, sonographic findings of lung and fetal livers,being checked, echogenicity values, shear rateof the evaluated parenchyma (elastography quantitative assessment) and their rigidity characteristics (elastography qualitative assessment).The experimental lineation was completely randomized and used 5% significance level for all tests. The animals did not present any clinical and obstetric changes during pregnancy and birth. The newborns presented themselves healthy and normal. ARFI elastography was performed consistently and without any difficulty. Qualitative elastography of lung parenchyma of canine fetuses did not appear deformable, demonstrating homogeneous image, medium gray coloration to the light and hard. For quantitative evaluation,the average shear speed was of (CI = 0.84± 0.11 m/s), and the velocities were statistically similar in all experimental time (p = 0.69). In the qualitative assessment, the liver parenchyma of canine fetuses did not appear deformable, being homogeneous and medium gray to dark and greater rigidity to the lung tissue, in every moment of collection.In the qualitative assessment, the liver parenchyma of canine fetuses did not appear deformable, being homogeneous and medium gray to dark and greater rigidity to the lung tissue, in every moment of collection. For the quantitative evaluation, the average shear speed was (CI= 0.98 ± 0.12 m/s).There was a significant effect of time for the mean values of pixels number, and the minimum and maximum pixel intensity of lung tissue, these values decreased significantly from 96 to 24 hours before birth and subsequently the values increase to the time of birth (p = 0.04). The heterogeneity of pixel of the lungs of fetuses did not vary significantly during the last week of gestation and there was no significant difference (p = 0.32).

Avaliação da maturidade pulmonar de cabritos nascidos a termo e prematuros pela análise citológica, teste de Clements e contagem de corpos lamelares do líquido amniótico

O objetivo do estudo foi avaliar a maturidade pulmonar de cabritos, por meio do teste de Clements, da análise citológica pela coloração de Azul de Nilo e Shorr, e da contagem de corpos lamelares no líquido amniótico de cabras. Utilizando- se também a avaliação do escore Apgar, dos parâmetros vitais, dos valores glicêmicos e de lactato, dos parâmetros hemogasométricos, dos valores de cortisol, de hemoglobina e volume globular, bem como os achados radiográficos de cabritos nascidos a termo e prematuros. Obtendo-se assim uma avaliação completa quanto ao grau de maturidade pulmonar desses animais. Para tanto, foram utilizados 44 animais (20 cabras e 24 cabritos), divididos em três grupos, a saber: Grupo I: constituído por oito cabras, com gestação de 149 dias, e por oito cabritos nascidos de cesarianas; grupo II: composto por seis cabras, com 143 dias de gestação, e por oito cabritos nascidos de cesarianas; e, grupo III : constituído por seis cabras com 143 dias de gestação e que receberam 20mg/cabra de dexametasona, por via intramuscular, 36 horas antes da cirurgia eletiva, e por oito cabritos delas nascidos. Foi observado que a citologia pela coloração de Shorr, assim como o a contagem de corpos lamelares mostraram ser meios diagnósticos eficazes para a avaliação da maturidade pulmonar em neonatos caprinos. Enquanto o teste de Clements modificado no presente estudo, apresentou um alto índice de resultados inconclusivos. As análises clínicos-laboratoriais evidenciaram que os animais do presente estudo estavam perfeitamente adaptados as 48 horas de vida, ao meio extrauterino. Cabritos com idade gestacional de 143 dias são perfeitamente viáveis, contrariando o relato de alguns autores. O tratamento materno com dexametasona não mostrou resultados significativos em relação à maturidade fetal nos cabritos do presente estudo.

The study aimed to evaluate lung maturity of goat kids using Clements test, cytologic analysis through Nile Blue and Shorr staining, and lamellar body count from the amniotic fluid of goat does. In addition, evaluation of Apgar score, vital parameters, blood glucose and lactate, blood gas parameters, cortisol, hemoglobin and packed cell volume, as well as radiographic findings of full-term and premature goat kids were carried out in order to obtain a complete assessment of the degree of lung maturity of these animals. Forty-four animals (20 does and 24 kids) were enrolled in the study and divided into three groups: Group I: constituted by eight does with 149 days of gestation, and eight kids delivered by cesarean section; Group II: constituted by six does with 143 days of gestation, and eight kids delivered by cesarean section; and Group III: constituted by six does with 143 days of gestation, which received intramuscular dexamethasone (20mg/doe) 36 hours prior to elective cesarean section, and their eight kids. It was observed that the staining of cytological Shorr, as well as the a count of lamellar bodies found to be effective diagnostic tools for assessing the lung maturity in goats neonates. While the shake test modified in this study showed a high rate of inconclusive results. The clinical-laboratory tests showed that the animals in this study were perfectly adapted to the 48 hours of life, in half extrauterino. Goats with gestational age of 143 days are perfectly feasible, contrary to the reports of some authors. Maternal treatment with dexamethasone did not show significant results in relation to fetal maturity in goats in this study.

MATURIDADE PULMONAR E FETAL DE BEZERROS DA RAÇA HOLANDESA PRETA E BRANCA RECÉM-NASCIDOS, A TERMO E HÍGIDOS: ANÁLISE DO LÍQUIDO AMNIÓTICO

Considerando a representatividade da bovinocultura de leite em nosso país, a preocupação com índices de mortalidade dos animais torna-se cada vez maior. No que se refere à mortalidade em bezerros, a Síndrome de Angústia Respiratória (SAR) tem importante relevância no período perinatal, sendo causada pela inadequada produção do surfactante no pulmão imaturo. Animais advindos de técnicas como fertilização in vitro e clonagem são acometidos pela SAR com maior frequência, assim como neonatos prematuros. O líquido amniótico encontra-se em contato íntimo com o feto, podendo fornecer indícios de sua maturidade. O objetivo deste estudo foi padronizar as características do líquido amniótico - coloração, aspecto, viscosidade, avaliação dos corpos lamelares e do surfactante presente pelo teste de Clements e citologia - de bezerros nascidos a termo, maduros, hígidos e com vitalidade comprovadas por escore Apgar, exame físico geral e medidas de coluna, amplitude respiratória (expansão torácica) e pH sanguíneo. Para tal finalidade, foram utilizados 50 bezerros da raça Holandesa Preta e Branca, cujas mães tiveram o parto acompanhado para colheita do líquido amniótico por punção no momento da exposição da bolsa fetal no canal vaginal. O líquido amniótico apresentou coloração clara e com turvação decorrente de variados graus de viscosidade e presença ou ausência de grumos. O teste de Clements foi adaptado à espécie bovina por meio de modificação caracterizada pela adição de 3mL de líquido amniótico em 1mL de etanol 95%. A metodologia de contagem de corpos lamelares no contador de partículas automático (hematológico) não foi aplicável à espécie bovina devido ao pequeno tamanho do corpo lamelar, que apresentou diâmetro aproximado de 130nm. O teste do Azul de Nilo não foi satisfatório para predizer a maturidade fetal na espécie bovina, diferentemente da citologia usando a coloração de HematoxilinaShorr, que se mostrou eficiente para a contagem das células orangiofílicas, que atingem grande proporção no final da gestação. Medidas do comprimento de coluna e da amplitude torácica são úteis para o clínico que deseja avaliar a maturidade fetal, dentro de um conjunto de ferramentas utilizadas com esta finalidade. O presente trabalho estabeleceu novos parâmetros de avaliação da maturidade fetal e pulmonar para a espécie bovina, porém são necessários mais estudos para que os conhecimentos sobre o amadurecimento fetal no âmbito da Medicina Veterinária evoluam a patamares semelhantes aos da Medicina.

Considering the representativeness of dairy cattle in our country, the concern about the mortality rates of the animals increases each time. Regarding to calf mortality, the Respiratory Distress Syndrome (RDS) has an important relevance during the neonatal period, and it is present in immature lungs. The amniotic fluid is in direct contact with the fetus, and it is able to offer evidence about his maturity. The aim of this study was to standardize the characteristics of the amniotic fluid color, aspect, viscosity, lamellar body and presence of surfactant evaluation by the Clements test and cytology of term-born, mature, healthy calves and with proved vitality by the Apgar score, general physical exam and measurement of the spinal column and respiratory amplitude (thoracic expansion). There were used 50 Black and White Holstein calves, which mothers were observed at calving in order to collect the amniotic fluid by puncture in the moment of exposure of the fetal membrane through the vaginal canal. The amniotic fluid had a clear color and it was hazy because of the different degrees of viscosity and the presence or absence of clots. The Clements test could be adapted to the bovine species by the modification consisting in the addition of 3mL of amniotic fluid and 1mL of 95% ethanol. The methodology of the lamellar body count by the automated particle counter is not applicable for the bovine because of the small size of their lamellar body. The Nile Blue staining is unsatisfactory on predicting fetal maturity on the bovine species, different from cytology using Hematoxylin-Shorr stain. The cell stained orange counting, cells which are found in great amounts at the end of pregnancy. Measurements of the spine and thoracic amplitude are useful for the clinician who wants to evaluate fetal maturity, within a set of tools used with this purpose. The present study stablished new parameters for evaluation of fetal and pulmonary maturity in the bovine species.

Avaliação da resposta imune inata respiratória em bezerros sadios durante o segundo trimestre de vida

A idade entre o terceiro e o sexto mês de vida é um período peculiar para o estabelecimento da imunidade própria dos bezerros. Nesse intervalo, há susceptibilidade e índice de letalidade à broncopneumonias maiores, provavelmente devido à imaturidade do sistema imunológico pulmonar, quer seja por uma insuficiente resposta, nos primeiros momentos, quer seja por uma resposta citotóxica exagerada, no momento subsequente. A par disso, este trabalho teve o intuito de verificar o momento em que ocorre a maturidade do sistema imunológico, como se comportam os perfis Th1 e Th2 e a existência de uma resposta citotóxica exagerada, durante esta fase de estabelecimento da imunidade ativa dos bezerros. Para tal, estudaram-se as funções de fagocitose e metabolismo oxidativo de leucócitos sanguíneos e broncoalveolares, as classes de imunoglobulinas e citocinas incriminadas nos padrões de resposta linfocitária Th1 e Th2, em 10 bezerros da raça holandesa, sadios, avaliados em sete momentos experimentais, com intervalo quinzenal, entre o terceiro e o sexto mês de vida. Os dados foram submetidos à análise estatística, pela comparação entre as médias ou medianas, confrontadas pelo teste de Anova e Tukey, quando paramétricas, e pelo teste de Kruskal Wallis e Dunn, quando não paramétricas, considerando nível de significância P 0,05 e tendência P 0,10. Os dados que apresentaram dinâmicas semelhantes entre si foram submetidos ao teste de correlação de Pearson. Na região broncoalveolar, observaram-se um aumento progressivo das funções dos macrófagos alveolares, equilíbrio de secreção dos isotipos IgG1 e IgG2 e predominância de citocinas compatíveis com padrão de resposta Th1, até os 150 dias de vida dos bezerros. Aos 165 dias de vida, ocorreram diminuição da função celular, aumento dos títulos de IgG2 e aumento da citocina regulatória IL-10. Aos 180 dias, retornou-se o equilíbrio entre secreção de IgG1 e IgG2, diminuiram os teores de IL-10 e ocorreu tendência a aumento de IL-12, TNF- e metabolismo oxidativo de macrófagos alveolares, o que permitiu concluir que a resposta imune tem característica própria, nesta faixa etária, e não se torna matura até os seis meses de vida. Apesar de os fagócitos pulmonares já estarem eficientes, a partir dos 135 dias de vida, tornam-se hiperresponsivos aos 150 dias de vida, momento em que gera consequentemente uma resposta regulatória e/ou humoral aos 165 dias de vida, para que aos 180 dias de vida, o equilíbrio entre os perfis Th1 e Th2 seja atingido.

The age between the third and sixth month of life is a peculiar period for the establishment of active immunity of calves. There is a greater susceptibility and lethality by bronchopneumonia, probably due to the immaturity of the pulmonary immune system, whether by an insufficient response , in the first moments , whether by an exaggerated cytotoxic response in the subsequent time. So, this work aimed to verify when the maturity of the immune system occurs, how the Th1 and Th2 profiles behave and if there is an exaggerated cytotoxic response during this active phase for immunity of the calves without maternal interference. For this purpose we studied the functions of phagocytosis and oxidative metabolism of blood and bronchoalveolar leukocytes, classes of immunoglobulins and cytokines incriminated in lymphocyte response patterns Th1 and Th2, in 10 holstein healthy calves. They were sampled every fifteen days, during the third until sixth month of life. Data were statistically analyzed by comparing the means or medians, confronted by ANOVA test and Tukey, when the data were parametric, and by Kruskal Wallis and Dunn's test, when the data were nonparametric, level of significance p 0.05 and trend p 0.10. The data that showed similar dynamics between them were subjected to Pearson correlation test. In bronchoalveolar region, until 150 days of age, the alveolar macrophages functions increased progressively, the IgG1 and IgG2 isotypes secretion showed a balance, and the cytokines profile were compatible with Th1 response. At 165 days of age, there was a decrease of cellular function, an increased of IgG2 titers and the IL-10 secretion, a regulatory cytokine, increased. At 180 days of life, we observed a balance of IgG1 and IgG2 secretion, a decreased of IL-10 levels and a tendency to increase IL-12, TNF- and alveolar macrophage oxidative metabolism. These results indicated that the calves have an active immune response with particularities for this age group and it does not become mature until six months of life. Despite of the macrophages alveolar are already efficiency from the 135 days of age, they become more reactive at 150 days. After this moment, a regulatory and/or humoral response begins at 165 days of life, as the balance of Th1 and Th2 profiles are reached at 180 days of calves life.

USO DO TESTE DE CLEMENTS MODIFICADO E DENSIDADE ÓPTICA DO LÍQUIDO AMNIÓTICO E ALANTOIDEANO PARA AVALIAÇÃO DA MATURIDADE PULMONAR EM CÃES

O feto prematuro não sobrevive à vida extra-uterina devido à imaturidade de órgãos vitais, como os pulmões. O objetivo desse trabalho foi avaliar a maturidade pulmonar pelo teste de Clements modificado e densidade óptica dos fluidos fetais. Foram avaliadas 40 amostras de líquidos amniótico e alantoideano colhidos durante a cesariana de 16 cadelas. Ajustes realizados no teste de Clements permitiram a análise dos líquidos fetais na espécie canina, promovendo resultados confiáveis (p 0,05) para as diluições gradativas (de 0,9mL a 0,6mL) com etanol a 95%. Na densidade óptica (DO) dos líquidos fetais foram encontrados valores médios de 0,220±0,190 para o amniótico e 0,250±0,02 para o alantoideano, sendo indicativo de maturidade pulmonar, visto que são superiores a 0,150, valor proposto na medicina humana como indicativo de maturidade do orgão. Portanto, conclui-se que informações básicas sobre a maturidade e a viabilidade do feto canino podem ser avaliadas pelo teste de Clements modificado e densitometria óptica dos fluidos fetais. Palavras-chave: maturidade, fluidos fetais, canino. USE OF CLEMENTS  MODIFIED TEST AND OPTICAL DENSITY IN AMNIOTIC AND ALLANTOID FLUIDS FOR EVALUATION OF PULMONARY MATURITY IN DOGSABSTRACT  The premature fetus cannot survive in the extra uterine life due to immaturity of vital organs like the lungs. The aim of this study was to assess lung maturity

Uso do teste de clements modificado e densidade óptica do líquido amniótico e alantoideano para avaliação da maturidade pulmonar em cães

O feto prematuro não sobrevive à vida extra-uterina devido à imaturidade de órgãos vitais, como os pulmões. O objetivo desse trabalho foi avaliar a maturidade pulmonar pelo teste de Clements modificado e densidade óptica dos fluidos fetais. Foram avaliadas 40 amostras de líquidos amniótico e alantoideano colhidos durante a cesariana de 16 cadelas. Ajustes realizados no teste de Clements permitiram a análise dos líquidos fetais na espécie canina, promovendo resultados confiáveis (p 0,05) para as diluições gradativas (de 0,9mL a 0,6mL) com etanol a 95%. Na densidade óptica (DO) dos líquidos fetais foram encontrados valores médios de 0,220±0,190 para o amniótico e 0,250±0,02 para o alantoideano, sendo indicativo de maturidade pulmonar, visto que são superiores a 0,150, valor proposto na medicina humana como indicativo de maturidade do orgão. Portanto, conclui-se que informações básicas sobre a maturidade e a viabilidade do feto canino podem ser avaliadas pelo teste de Clements modificado e densitometria óptica dos fluidos fetais. Palavras-chave: maturidade, fluidos fetais, canino. USE OF CLEMENTS  MODIFIED TEST AND OPTICAL DENSITY IN AMNIOTIC AND ALLANTOID FLUIDS FOR EVALUATION OF PULMONARY MATURITY IN DOGSABSTRACT  The premature fetus cannot survive in the extra uterine life due to immaturity of vital organs like the lungs. The aim of this study was to assess lung maturity

Estudio de la madurez fetal canina al final del embarazo: aplicabilidad de diagnóstico / Study of canine fetal maturity, emphasizing final stage of gestation, and diagnostic applicability / Estudo da maturidade fetal canina em fase final de gestação: aplicabilidade diagnóstica

En la medicina, las técnicas para la evaluación de la madurez esquelética, pulmón, riñón y corazón ya se usan de forma rutinaria en obstetricia, a diferencia de veterinaria que estas evaluaciones están siendo estudiados recientemente. La evaluación de los fluidos fetales se convierte en obstetricia humana para un parámetro para la determinación de la madurez fetal, embarazo de alto riesgo, muerte fetal, infección fetal y el sexo. Mientras que para los pequeños animales es necesario desarrollar técnicas aplicables para determinar la maduración fetal ción de los fetos, el presente trabajo tiene como objetivo revisar o describir la aplicación de estos métodos y la evaluación de la madurez fetal en animales pequeños.

In medicine, techniques for assessing skeletal maturity, lung, kidney and heart are already routinely used in obstetrics, unlike veterinary that these assessments are being studied recently. The assessment of fetal fluids becomes for obstetrics human a parameter for determining fetal maturity, high-risk pregnancy, fetal death, fetal infection and sex. Whereas for small animals it is necessary to develop techniques applicable to determine the fetal maturation of fetuses, this paper aims to review or describe the application of these methods and assessment of fetal maturity in small animals.

Em medicina, técnicas para avaliar maturidade óssea, pulmonar, renal e cardíaca são rotineiramente utilizadas em obstetrícia, diferentemente da veterinária em que essas avaliações estão sendo recentemente estudadas. A avaliação dos fluidos fetais torna-se para a obstetrícia humana um parâmetro de determinação da maturidade fetal, gestação de alto risco, morte fetal, infecção e sexo fetais. Considerando que para pequenos animais faz-se necessário o desenvolvimento de técnicas para determinação da maturação fetal dos conceptos, a presente revisão tem como objetivo descrever a aplicação de métodos diagnósticos para avaliação da maturidade fetal em pequenos animais.

Parâmetros clínicos, hemogasométricos e radiográficos para avaliação respiratória de neonatos caninos nascidos em eutocia ou cesariana eletiva / Canine neonatal clinical, hemogasometric and radiographic assessment in eutocia or elective cesarean section

Estima-se que a mortalidade neonatal canina nas primeiras semanas de vida seja de 30%, em razão de diversas causas, dentre elas falhas de assistência neonatal. Em Medicina Humana, protocolos de assistência cardio-respiratória ao recém-nascido estão bem estabelecidos e são utilizados de rotina. Porém, os cuidados direcionados aos neonatos debilitados em Medicina Veterinária são, em geral, empíricos e passíveis de causar traumas e contusões. Deste modo, objetivou-se comparar o padrão do aparelho respiratório ao nascimento e a evolução durante a primeira hora de vida em neonatos nascidos em eutocia via vaginal ou cesariana eletiva; propor um protocolo de conduta para a avaliação do aparelho respiratório de neonatos nascidos em eutocia ou cesariana, por meio da auscultação cardio-torácica, do escore Apgar, hemogasometria, avaliação radiográfica pulmonar e da determinação do surfactante no líquido amniótico; relacionar o exame clínico geral com a avaliação específica do aparelho respiratório; estabelecer a análise de maior sensibilidade e especificidade na identificação de distúrbios respiratórios neonatais; quantificar os fosfolipídeos lecitina (L) e esfingomielina (E) no líquido amniótico; estabelecer a relação L/E, como indício de maturidade pulmonar. Utilizou-se 41 neonatos divididos em 2 grupos conforme a condição obstétrica: eutocia (1) ou cesariana eletiva (2). Foram avaliados o escore Apgar, temperatura corpórea e exame físico completo aos 0, 5 e 60 minutos pós-natal; hemogasometria venosa aos 0 e 60 minutos do nascimento e padrão radiográfico pulmonar ao nascimento. Houve significativo aumento dos valores de Apgar no decorrer da primeira hora de vida. Entretanto, o grupo 2 apresentou escore inferior ao nascimento e após 5 minutos. A temperatura corpórea neonatal apresentou significativa queda ao longo da primeira hora de vida, para ambos os grupos, com hipotermia após 5 e 60 minutos do nascimento. A auscultação pulmonar indicou irregularidade do padrão respiratório, presença de ruído respiratório de moderado a intenso e episódios de agonia respiratória, com evolução satisfatória ao longo da primeira hora de vida para ambos os grupos. Filhotes nascidos de cesariana apresentaram maior percentual de alterações radiográficas, com moderada a intensa opacificação pulmonar difusa, com pouca ou nenhuma definição da silhueta cardíaca e luz dos brônquios principais. Ao nascimento e após 1 hora, todos os neonatos apresentaram acidemia, sendo esta do tipo mista para o grupo 1 e do tipo respiratória para o grupo 2. Após 60 minutos houve parcial evolução do desequilíbrio ácido-básico em ambos os grupos. Não houve diferença estatística entre a relação L/E dos grupos 1 e 2 com valores de 7,29 (±3,55) e 5,89 (±4,87), respectivamente. Conclui-se que o padrão de análise do aparelho respiratório neonatal variou conforme a condição obstétrica; as variáveis de maior sensibilidade e especificidade para identificação de neonatos com distúrbios respiratórios ao nascimento foram auscultação torácica associada à avaliação hemogasométrica das variáveis pH e pCO2; os fosfolipídeos lecitina e esfingomielina presentes no líquido amniótico foram quantificados e a relação L/E estabelecida e indicou maturidade pulmonar independente da condição obstétrica

Technical and scientific deficit related to veterinary neonatology is conspicuous. It is known that the canine mortality rate is up to 30% in the first weeks of life. In Human Medicine, neonatal cardio-respiratory assistance is well established and widely used. Thus, the objectives of the present study were to compare the respiratory system pattern at birth and its evolution during the first hour of life in puppies born through eutocia or cesarian section; to standardize neonatal respiratory system assessment under distinct obstetrics conditions; to correlate clinical general variables to the specific respiratory ones; to identify the most sensible and specific variables in order to attain neonatal respiratory diagnosis; to quantify the phospholipids lecithin (L) and sphingomielin (S) in amniotic fluid; to establish the L/S ratio and its correlation with lung maturity. Forty-one canine neonates were allocated into 2 groups according to the whelping condition: group 1 - eutocia and group 2 - elective cesarean section. The following assessments were performed at 0, 5 and 60 minutes after birth: Apgar score and rectal temperature. Venous hemogasometric evaluation was attained after birth and 1 hour later. Lung x-ray was performed between 0 and 5 minutes of life. Group 2 neonates showed lower vitality, with Apgar score significantly inferior at birth and after 5 minutes. Nevertheless, there was full satisfactory recovery at 5 minutes in both groups, with the Apgar score superior to 7. There was a significant reduction in rectal temperature with hypothermia at 5 and 60 minutes of birth in both groups. Respiratory pattern was irregular at lung auscultation, with mild to moderate sounds, but all neonates evolved properly among the first hour of life. Lung x-rays indicated relevant alterations in 17% of the puppies of group 1 and 30% of group 2. Cardiac silhouette and the main caudal bronchi were clearly visualized and the image of the thymus appeared like an enlarged domed volume in cranial mediastin, adjacent to the heart. The radiographic findings ranged from mild to moderate diffuse or restricted opacification of pulmonary parenchyma. Little or no definition of the cardiac silhouette, the main bronchi and the vagueness of the thymus were all findings consistent with pulmonary edema. All puppies presented acidemia at 0 and 60 minutes after birth, with partial recovery of the acid-base disorder in both groups during the first hour of life. L/S ratio was 7,29 (±3,55) for group 1 and 5,89 (±4,87) for group 2, with no statistical difference between them. In conclusion, obstetric condition influences neonatal respiratory pattern evaluation; lung auscultation associated with pH and pCO2 hemogasometric values, which were more sensible and specific to identify respiratory disorders at birth; lecithin and sphingomielin were quantified in the amniotic fluid; L/S ratio was established and indicated lung maturity regardless of the whelping condition