Cytotoxic and genotoxic potential of industrialized powdered milk for infants and young children

This study aimed to evaluate the cytotoxicity and genotoxicity and determine the LC50 concentration of powdered infant formulas widely marketed in South American countries. To this, milk samples, called as A, B, C and D, were analyzed in root meristem cells of Allium cepa, at concentrations of 0.075; 0.15 and 0.30 g mL-1, for 24 and 48 hours; and through cell viability in culture of normal line cells, via MTT test, for 24 hours, in the concentrations 0.018; 0.0375; 0.075 and 0.15 g mL-1. In A. cepa, all dairy products in the three concentrations caused significant inhibition of cell division in the meristems within the first 24 hours of exposure. In the in vitro evaluation, all milk formulas at 0.15 g mL-1, as well as milk A at a concentration of 0.037 g mL-1, C at 0.075 g mL-1 and D at 0.037 g mL-1, significantly reduced the cellular viability of the cell culture exposed to the foods studied, being potentially toxic. The milk A was considered the most toxic, with LC50 of 0.031 g mL-1, and B as the least toxic, with LC50 of 0.15 g mL-1. Therefore, the milk evaluated caused significant instability in cells of the test systems used and were characterized as cytotoxic.

Cytotoxic and genotoxic potential of industrialized powdered milk for infants and young children

This study aimed to evaluate the cytotoxicity and genotoxicity and determine the LC50 concentration of powdered infant formulas widely marketed in South American countries. To this, milk samples, called as A, B, C and D, were analyzed in root meristem cells of Allium cepa, at concentrations of 0.075; 0.15 and 0.30 g mL-1, for 24 and 48 hours; and through cell viability in culture of normal line cells, via MTT test, for 24 hours, in the concentrations 0.018; 0.0375; 0.075 and 0.15 g mL-1. In A. cepa, all dairy products in the three concentrations caused significant inhibition of cell division in the meristems within the first 24 hours of exposure. In the in vitro evaluation, all milk formulas at 0.15 g mL-1, as well as milk A at a concentration of 0.037 g mL-1, C at 0.075 g mL-1 and D at 0.037 g mL-1, significantly reduced the cellular viability of the cell culture exposed to the foods studied, being potentially toxic. The milk A was considered the most toxic, with LC50 of 0.031 g mL-1, and B as the least toxic, with LC50 of 0.15 g mL-1. Therefore, the milk evaluated caused significant instability in cells of the test systems used and were characterized as cytotoxic.(AU)

Tipos e concentrações de citocinina na multiplicação in vitro de pitangueira

This research aimed to assess the effect of different types (BAP, 2ip, zeatin) and concentrations (zero; five; ten µM) of cytokinin on in vitro multiplication of 'Pitangueira'. The different concentrations were added to the culture medium. The medium used was WPM enriched with 100mg L-1 of myo-inositol, 30g L-1 of sucrose and solidified with agar at sixg L-1 concentration. Stem segments with 3 or 4 buds, without apical meristem, were incubated into flasks containing 30mL of medium. After inoculation, the explants were kept in growth room under 16 hours photoperiod with 27µmol m-2 s-1 radiation and temperature of 25±2°C. At 45th days of cultivation, the average number of leaves and shoots and the shoot length were measured. The results showed that by using lesser concentration of BAP there was better performance and less costs for in vitro multiplication of 'Pitangueira'.

O trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes tipos e concentrações de citocinina na multiplicação in vitro de pitangueira. Os tratamentos constituíram-se de diferentes concentrações de citocinina adicionada ao meio de cultura (zero; cinco; dez µM) e três diferentes citocininas (BAP; 2iP; zeatina). O meio utilizado foi WPM suplementado com 100mg L-1 de mio-inositol, 30g L-1 de sacarose e solidificado com ágar na concentração de seisg L-1. Segmentos caulinares com três ou quatro gemas, sem o ápice, foram incubados em frascos contendo 30mL de meio. Após a inoculação, os explantes foram mantidos em sala de crescimento com 16 horas de fotoperíodo com radiação de 27µmol m-2 s-1 e temperatura de 25±2°C. Aos 45 dias de cultivo, foram avaliados o número médio de folhas, o número médio de brotações e o comprimento das brotações. Os resultados permitiram concluir que, para a multiplicação in vitro de pitangueira, deve-se utilizar a menor concentração de BAP, a qual apresentou resultado satisfatório e tem menor custo.

Tipos e concentrações de citocinina na multiplicação in vitro de pitangueira

This research aimed to assess the effect of different types (BAP, 2ip, zeatin) and concentrations (zero; five; ten µM) of cytokinin on in vitro multiplication of 'Pitangueira'. The different concentrations were added to the culture medium. The medium used was WPM enriched with 100mg L-1 of myo-inositol, 30g L-1 of sucrose and solidified with agar at sixg L-1 concentration. Stem segments with 3 or 4 buds, without apical meristem, were incubated into flasks containing 30mL of medium. After inoculation, the explants were kept in growth room under 16 hours photoperiod with 27µmol m-2 s-1 radiation and temperature of 25±2°C. At 45th days of cultivation, the average number of leaves and shoots and the shoot length were measured. The results showed that by using lesser concentration of BAP there was better performance and less costs for in vitro multiplication of 'Pitangueira'.

O trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes tipos e concentrações de citocinina na multiplicação in vitro de pitangueira. Os tratamentos constituíram-se de diferentes concentrações de citocinina adicionada ao meio de cultura (zero; cinco; dez µM) e três diferentes citocininas (BAP; 2iP; zeatina). O meio utilizado foi WPM suplementado com 100mg L-1 de mio-inositol, 30g L-1 de sacarose e solidificado com ágar na concentração de seisg L-1. Segmentos caulinares com três ou quatro gemas, sem o ápice, foram incubados em frascos contendo 30mL de meio. Após a inoculação, os explantes foram mantidos em sala de crescimento com 16 horas de fotoperíodo com radiação de 27µmol m-2 s-1 e temperatura de 25±2°C. Aos 45 dias de cultivo, foram avaliados o número médio de folhas, o número médio de brotações e o comprimento das brotações. Os resultados permitiram concluir que, para a multiplicação in vitro de pitangueira, deve-se utilizar a menor concentração de BAP, a qual apresentou resultado satisfatório e tem menor custo.

ESTUDO DO PRIMEIRO CICLO PRODUTIVO DA BANANEIRA `NANICÃO' (Musa sp.) DESENVOLVIDA A PARTIR DE DIFERENTES TIPOS DE MUDA

To study the performance of different types of propagation materials of banana `Nanicão' (Musa sp. ) on the productivity of the first year, five propagation materials were used: small sword suckers, big sword suckers, water suckers, rhizome sections and meristem derived material (tissue culture). The parameters studied were weight of bunch, number of hands per bunch, number of fruits per bunch and number of days from planting to harvest (first cicle). Both sizes of sword suckers gave the best average performance (shortest length of the first vegetative cycle, good average weight of bunch, good number of hands and number of fruits per bunch). Rhizome sections showed similar results but took a longer time to produce the first harvest. Meristem derived material showed the worst performance with lowest average weight of bunch, longest lenght of the first vegetative cycle and high somaclonal variation rate.

Para avaliar o primeiro ciclo produtivo de bananeira `Nanicão' foram utilizados 5 tipos de muda: "chifrinho" e "chifrão" (brotações laterais com folhas lanceoladas), "guarda-chuva" (brotações separadas da planta mãe, com folhas normais), pedaços de rizoma e mudas micropropagadas. Foram avaliados o peso dos cachos, o número de pencas, o número de frutos por cacho e número de dias decorridos do plantio até a colheita. Os melhores desempenhos foram obtidos com as mudas "chifrinho" e "chifrão", que apresentaram maior equilíbrio das variáveis estudadas. As mudas constituidas de pedaços de rizoma, embora com uma produção alta, mostraram-se tardias no primeiro ciclo. O pior desempenho foi verificado nas mudas micropropagadas, com produções inferiores aos demais tratamentos, apresentando primeiro ciclo tardio e alta taxa de variação somaclonal.

ESTUDO DO PRIMEIRO CICLO PRODUTIVO DA BANANEIRA `NANICÃO' (Musa sp.) DESENVOLVIDA A PARTIR DE DIFERENTES TIPOS DE MUDA

To study the performance of different types of propagation materials of banana `Nanicão' (Musa sp. ) on the productivity of the first year, five propagation materials were used: small sword suckers, big sword suckers, water suckers, rhizome sections and meristem derived material (tissue culture). The parameters studied were weight of bunch, number of hands per bunch, number of fruits per bunch and number of days from planting to harvest (first cicle). Both sizes of sword suckers gave the best average performance (shortest length of the first vegetative cycle, good average weight of bunch, good number of hands and number of fruits per bunch). Rhizome sections showed similar results but took a longer time to produce the first harvest. Meristem derived material showed the worst performance with lowest average weight of bunch, longest lenght of the first vegetative cycle and high somaclonal variation rate.

Para avaliar o primeiro ciclo produtivo de bananeira `Nanicão' foram utilizados 5 tipos de muda: "chifrinho" e "chifrão" (brotações laterais com folhas lanceoladas), "guarda-chuva" (brotações separadas da planta mãe, com folhas normais), pedaços de rizoma e mudas micropropagadas. Foram avaliados o peso dos cachos, o número de pencas, o número de frutos por cacho e número de dias decorridos do plantio até a colheita. Os melhores desempenhos foram obtidos com as mudas "chifrinho" e "chifrão", que apresentaram maior equilíbrio das variáveis estudadas. As mudas constituidas de pedaços de rizoma, embora com uma produção alta, mostraram-se tardias no primeiro ciclo. O pior desempenho foi verificado nas mudas micropropagadas, com produções inferiores aos demais tratamentos, apresentando primeiro ciclo tardio e alta taxa de variação somaclonal.

Crescimento e produção de clones de alho provenientes de cultura de tecidos e de propagação convencional

The objective of the present study was to evaluate growth and production of micropropagated plants (apical meristem culture) compared with plants conventionally multiplied. Treatments consisted of two forms of multiplication (meristem culture and conventional plants), four garlic cultivars, five evaluation times (30, 60, 90, 120 and 150 days after planting) and randomized block design with four replications, in a split-plot scheme. Plant height and number of leaves/plant were taken. Pseudostalk diameter/bulb ratio was measured after 60 days of planting. After harvest, mean weights of bulbs, total and commercial yields were obtained. The tissue culture plants have increased their cycle about 18 days as compared with conventional ones. Shoot growth expressed by plant height and number of leaves/plant and growth of bulb expressed by pseudostalk diameter/bulb ratio of tissue culture plants were superior to conventional plants, and these differences were greater for the cultivars "Gigante Roxão" and "Gravatá". In the same way, all characteristics related to yield (mean bulb weight, total and commercial yields) of plants multiplied "in vitro" were superior compared with conventional ones. As for tissue culture multiplication, cultivars "Gravatá" and "Gigante Roxão" were the most productive, while for conventional multiplication the cultivars "Gravatá" and "Lavínia" presented the highest production.

Este trabalho teve como objetivo avaliar o crescimento e a produção de plantas de quatro cultivares de alho provenientes de cultura de tecidos (propagação por meristemas apicais), em relação às plantas da mesma cultivar multiplicadas de forma convencional. Utilizou-se um delineamento experimental de blocos ao acaso com quatro repetições, em esquema de parcelas subdivididas no tempo, com oito tratamentos (plantas de cultura de meristemas apicais e de multiplicação convencional de quatro cultivares) nas parcelas e cinco épocas de avaliação (30, 60, 90, 120 e 150 dias após o plantio) como sub-parcelas. Nestas épocas, avaliou-se a altura da planta, número médio de folhas por planta. A razão bulbar foi avaliada a partir dos 60 dias. No final do experimento, estimou-se o peso médio do bulbo e as produções total e comercial. As plantas de cultura de tecidos tiveram seu ciclo prolongado, retardando a colheita em 18 dias em relação às convencionais. O crescimento da parte aérea, expresso pela altura e número de folhas/planta, e do bulbo, de acordo com a razão bulbar, de plantas oriundas de cultura de tecidos mostrou-se superior ao das plantas convencionais, sendo que estas diferenças mostraram-se mais efetivas para as cultivares Gigante Roxão e Gravatá. Da mesma forma, para todas as características relacionadas à produção (peso médio de bulbo, produção total e comercial), as plantas multiplicadas "in vitro" superaram as convencionais. Considerando a multiplicação por cultura de tecidos, as cultivares Gravatá e Gigante Roxão foram as mais produtivas, enquanto que na multiplicação convencional destacaram-se as cultivares Gravatá e Lavínia.

Crescimento e produção de clones de alho provenientes de cultura de tecidos e de propagação convencional

The objective of the present study was to evaluate growth and production of micropropagated plants (apical meristem culture) compared with plants conventionally multiplied. Treatments consisted of two forms of multiplication (meristem culture and conventional plants), four garlic cultivars, five evaluation times (30, 60, 90, 120 and 150 days after planting) and randomized block design with four replications, in a split-plot scheme. Plant height and number of leaves/plant were taken. Pseudostalk diameter/bulb ratio was measured after 60 days of planting. After harvest, mean weights of bulbs, total and commercial yields were obtained. The tissue culture plants have increased their cycle about 18 days as compared with conventional ones. Shoot growth expressed by plant height and number of leaves/plant and growth of bulb expressed by pseudostalk diameter/bulb ratio of tissue culture plants were superior to conventional plants, and these differences were greater for the cultivars "Gigante Roxão" and "Gravatá". In the same way, all characteristics related to yield (mean bulb weight, total and commercial yields) of plants multiplied "in vitro" were superior compared with conventional ones. As for tissue culture multiplication, cultivars "Gravatá" and "Gigante Roxão" were the most productive, while for conventional multiplication the cultivars "Gravatá" and "Lavínia" presented the highest production.

Este trabalho teve como objetivo avaliar o crescimento e a produção de plantas de quatro cultivares de alho provenientes de cultura de tecidos (propagação por meristemas apicais), em relação às plantas da mesma cultivar multiplicadas de forma convencional. Utilizou-se um delineamento experimental de blocos ao acaso com quatro repetições, em esquema de parcelas subdivididas no tempo, com oito tratamentos (plantas de cultura de meristemas apicais e de multiplicação convencional de quatro cultivares) nas parcelas e cinco épocas de avaliação (30, 60, 90, 120 e 150 dias após o plantio) como sub-parcelas. Nestas épocas, avaliou-se a altura da planta, número médio de folhas por planta. A razão bulbar foi avaliada a partir dos 60 dias. No final do experimento, estimou-se o peso médio do bulbo e as produções total e comercial. As plantas de cultura de tecidos tiveram seu ciclo prolongado, retardando a colheita em 18 dias em relação às convencionais. O crescimento da parte aérea, expresso pela altura e número de folhas/planta, e do bulbo, de acordo com a razão bulbar, de plantas oriundas de cultura de tecidos mostrou-se superior ao das plantas convencionais, sendo que estas diferenças mostraram-se mais efetivas para as cultivares Gigante Roxão e Gravatá. Da mesma forma, para todas as características relacionadas à produção (peso médio de bulbo, produção total e comercial), as plantas multiplicadas "in vitro" superaram as convencionais. Considerando a multiplicação por cultura de tecidos, as cultivares Gravatá e Gigante Roxão foram as mais produtivas, enquanto que na multiplicação convencional destacaram-se as cultivares Gravatá e Lavínia.

Estabelecimento de pereira (Pyrus spp.) in vitro a partir de meristemas e gemas

The work had the purpose to determine the best type of explant and its best time of collection aiming to establish the in vitro culture for pear. In the first trial, pear buds and meristems from Carrick and Garber cultivars were isolated 28 days after the beginning of mother plants shooting. In the second trial, meristems from Carrick, Garber and Smith pear cultivars were isolated at 28, 35, 42, 49 and 56 days after shooting. The culture medium used was the MS salts added with BAP (4.44muM), NAA (0.05muM) and GA3 (0.29muM). After the inoculation the explants were subjected to a dark room for four days at temperature 25 ± 2ºC and then transferred to a growth room in a 16 - hour photoperiod, 25µmo IMG SRC="http:/img/fbpe/cr/v32n4/a05img01.gif">es.m-2.s-1 radiation and at 25 ± 2ºC. It could be concluded that: (i) for the in vitro establishment of the Carrick cultivar buds and meristems could be used, although for Garber cv., meristem is the best explant; and (ii) the time of meristem isolation showed a linear behavior to establish percentage achieving 92.9% for the meristems collected at 56 days after shooting.

O trabalho objetivou determinar o melhor tipo de explante e a melhor época de coleta destes, visando ao estabelecimento de cultivo in vitro da pereira. No experimento I, gemas e meristemas de pereira das cultivares Carrick e Garber foram isoladas 28 dias após o início da brotação das plantas matrizes. No experimento II, meristemas das cultivares Carrick, Garber e Smith foram isolados aos 28, 35, 42, 49 e 56 dias após o início da brotação. O meio de cultura utilizado foi o MS, acrescido de BAP (4,44miM), ANA (0,054miM) e AG3 (0,29miM). Após a inoculação, os explantes foram submetidos ao escuro sob temperatura de 25 ± 2ºC por um período de 4 dias e, em seguida, transferidos para sala de crescimento com 16 horas de fotoperíodo com radiação de 25µmo IMG SRC="http:/img/fbpe/cr/v32n4/a05img01.gif">es.m-2.s-1 e temperatura de 25 ± 2ºC. Os resultados permitiram concluir que, para o estabelecimento in vitro da cultivar Carrick, foi possível a utilização de gemas ou meristemas. Já para a cultivar Garber, o melhor explante foi o meristema; as épocas de isolamento dos meristemas mostraram comportamento linear para a percentagem de estabelecimento, obtendo-se 92,9% de estabelecimento nos meristemas isolados aos 56 dias após o início da brotação.

Estabelecimento de pereira (Pyrus spp.) in vitro a partir de meristemas e gemas

The work had the purpose to determine the best type of explant and its best time of collection aiming to establish the in vitro culture for pear. In the first trial, pear buds and meristems from Carrick and Garber cultivars were isolated 28 days after the beginning of mother plants shooting. In the second trial, meristems from Carrick, Garber and Smith pear cultivars were isolated at 28, 35, 42, 49 and 56 days after shooting. The culture medium used was the MS salts added with BAP (4.44muM), NAA (0.05muM) and GA3 (0.29muM). After the inoculation the explants were subjected to a dark room for four days at temperature 25 ± 2ºC and then transferred to a growth room in a 16 - hour photoperiod, 25µmo IMG SRC="http:/img/fbpe/cr/v32n4/a05img01.gif">es.m-2.s-1 radiation and at 25 ± 2ºC. It could be concluded that: (i) for the in vitro establishment of the Carrick cultivar buds and meristems could be used, although for Garber cv., meristem is the best explant; and (ii) the time of meristem isolation showed a linear behavior to establish percentage achieving 92.9% for the meristems collected at 56 days after shooting.

O trabalho objetivou determinar o melhor tipo de explante e a melhor época de coleta destes, visando ao estabelecimento de cultivo in vitro da pereira. No experimento I, gemas e meristemas de pereira das cultivares Carrick e Garber foram isoladas 28 dias após o início da brotação das plantas matrizes. No experimento II, meristemas das cultivares Carrick, Garber e Smith foram isolados aos 28, 35, 42, 49 e 56 dias após o início da brotação. O meio de cultura utilizado foi o MS, acrescido de BAP (4,44miM), ANA (0,054miM) e AG3 (0,29miM). Após a inoculação, os explantes foram submetidos ao escuro sob temperatura de 25 ± 2ºC por um período de 4 dias e, em seguida, transferidos para sala de crescimento com 16 horas de fotoperíodo com radiação de 25µmo IMG SRC="http:/img/fbpe/cr/v32n4/a05img01.gif">es.m-2.s-1 e temperatura de 25 ± 2ºC. Os resultados permitiram concluir que, para o estabelecimento in vitro da cultivar Carrick, foi possível a utilização de gemas ou meristemas. Já para a cultivar Garber, o melhor explante foi o meristema; as épocas de isolamento dos meristemas mostraram comportamento linear para a percentagem de estabelecimento, obtendo-se 92,9% de estabelecimento nos meristemas isolados aos 56 dias após o início da brotação.

Micropropagação do porta-enxerto de macieira 'Seleção 69' tolerante à podridão do colo (Phytophthora cactorum)

The use of tolerant apple rootstocks to phytossanitary problems as the rotting (Phytophthora cactorum) is able to increase the production with cost reduction. The objective of the present study is to establish in vitro micropropagation protocol of the '69 Selection' rootstocks tolerant to the rotting. Meristems was cultivated in vitro on MS medium supplemented with 4.4mM of 6-Benzilaminopurine (BAP), 2.5mM of Indol Butiric Acid (IBA), 0.3mM of Giberilic Acid (GA3), 3% of sucrose and 0.6% of agar. The effect of BAP concentration (2.2 and 4.4mM) and the effect of culture media (MS, Cheng and Quoirin & Lepoivre) were tested in the shoot multiplication. In the shoot elongation phase, the effects of GA3 (0; 0.5; 1.0 and 1.5mM) and IBA (0; 0.5 and 1.0mM) were tested. During the rooting ex vitro and acclimatization phase, different IBA concentrations (0; 1 and 2g L-1) were tested. The rate of acme meristems development was 30% of the meristems cultivated in vitro. For the shoot number, the best BAP concentration was 2.2mM that provided 2.6 shoots/explant. The MS medium provided the largest shoot number for explant (2.5), however it was not differing of Cheng medium (2.0 shoots/explant). For the shoot elongation phase, the MS medium supplemented 1.0mM of IBA provided the largest height of shoots (23mm). In the ex vitro rooting and acclimatization phase, the 0, 1.0 and 2.0g L-1 of IBA concentrations, were able to achieve on average of 77,3% of microcuttings rooting.

A utilização de porta-enxertos anões, tolerantes a problemas fitossanitários da cultura da macieira, como a podridão do colo (Phytophthora cactorum), pode aumentar o rendimento e reduzir os custos de produção. Com o presente trabalho, objetivou-se estabelecer um protocolo de micropropagação do porta-enxerto 'Seleção 69', tolerante à podridão do colo. Ápices meristemáticos foram cultivados in vitro em meio de cultura MS, suplementado com 4,4mM de 6-Benzilaminopurina (BAP), 2,5mM de Ácido indolbutírico (AIB), 0,3mM de Ácido giberélico (GA3), 3% de sacarose e 0,6% de ágar. Foram testados o efeito da concentração de BAP (2,2 e 4,4mM) e o efeito dos meios de cultura (MS, Cheng e Quoirin & Lepoivre) na multiplicação das brotações. No alongamento das brotações, foram testados os efeitos do GA3 (0; 0,5; 1,0 e 1,5mM) e AIB (0; 0,5 e 1,0mM). Para a fase de enraizamento ex vitro e aclimatização, foram testadas diferentes concentrações de AIB (0; 1 e 2g L-1). A taxa de desenvolvimento dos ápices meristemáticos cultivados in vitro foi de 30%. Para estimular a brotação, a melhor concentração de BAP foi 2,2mM, a qual proporcionou 2,6 brotações por explante. O meio MS proporcionou o maior número de brotações por explante (2,5), porém não diferiu estatisticamente do meio Cheng (2,0 brotações por explante). Para a fase de alongamento, o meio MS suplementado com 2,2mM de BAP e 1,0mM de AIB, proporcionou a maior altura das brotações (23mm). Na fase de enraizamento ex vitro e aclimatização, as concentrações de 0, 1 e 2g L-1 de AIB possibilitaram em média, 77,3% de enraizamento das microestacas.

Micropropagação do porta-enxerto de macieira 'Seleção 69' tolerante à podridão do colo (Phytophthora cactorum)

The use of tolerant apple rootstocks to phytossanitary problems as the rotting (Phytophthora cactorum) is able to increase the production with cost reduction. The objective of the present study is to establish in vitro micropropagation protocol of the '69 Selection' rootstocks tolerant to the rotting. Meristems was cultivated in vitro on MS medium supplemented with 4.4mM of 6-Benzilaminopurine (BAP), 2.5mM of Indol Butiric Acid (IBA), 0.3mM of Giberilic Acid (GA3), 3% of sucrose and 0.6% of agar. The effect of BAP concentration (2.2 and 4.4mM) and the effect of culture media (MS, Cheng and Quoirin & Lepoivre) were tested in the shoot multiplication. In the shoot elongation phase, the effects of GA3 (0; 0.5; 1.0 and 1.5mM) and IBA (0; 0.5 and 1.0mM) were tested. During the rooting ex vitro and acclimatization phase, different IBA concentrations (0; 1 and 2g L-1) were tested. The rate of acme meristems development was 30% of the meristems cultivated in vitro. For the shoot number, the best BAP concentration was 2.2mM that provided 2.6 shoots/explant. The MS medium provided the largest shoot number for explant (2.5), however it was not differing of Cheng medium (2.0 shoots/explant). For the shoot elongation phase, the MS medium supplemented 1.0mM of IBA provided the largest height of shoots (23mm). In the ex vitro rooting and acclimatization phase, the 0, 1.0 and 2.0g L-1 of IBA concentrations, were able to achieve on average of 77,3% of microcuttings rooting.

A utilização de porta-enxertos anões, tolerantes a problemas fitossanitários da cultura da macieira, como a podridão do colo (Phytophthora cactorum), pode aumentar o rendimento e reduzir os custos de produção. Com o presente trabalho, objetivou-se estabelecer um protocolo de micropropagação do porta-enxerto 'Seleção 69', tolerante à podridão do colo. Ápices meristemáticos foram cultivados in vitro em meio de cultura MS, suplementado com 4,4mM de 6-Benzilaminopurina (BAP), 2,5mM de Ácido indolbutírico (AIB), 0,3mM de Ácido giberélico (GA3), 3% de sacarose e 0,6% de ágar. Foram testados o efeito da concentração de BAP (2,2 e 4,4mM) e o efeito dos meios de cultura (MS, Cheng e Quoirin & Lepoivre) na multiplicação das brotações. No alongamento das brotações, foram testados os efeitos do GA3 (0; 0,5; 1,0 e 1,5mM) e AIB (0; 0,5 e 1,0mM). Para a fase de enraizamento ex vitro e aclimatização, foram testadas diferentes concentrações de AIB (0; 1 e 2g L-1). A taxa de desenvolvimento dos ápices meristemáticos cultivados in vitro foi de 30%. Para estimular a brotação, a melhor concentração de BAP foi 2,2mM, a qual proporcionou 2,6 brotações por explante. O meio MS proporcionou o maior número de brotações por explante (2,5), porém não diferiu estatisticamente do meio Cheng (2,0 brotações por explante). Para a fase de alongamento, o meio MS suplementado com 2,2mM de BAP e 1,0mM de AIB, proporcionou a maior altura das brotações (23mm). Na fase de enraizamento ex vitro e aclimatização, as concentrações de 0, 1 e 2g L-1 de AIB possibilitaram em média, 77,3% de enraizamento das microestacas.