Resumo
Ruminal drinking is a condition that has been extensively reported in pre-ruminant calves, and is characterized by an insufficient esophageal groove reflex that causes ingested milk to spill into the reticulum and/or rumen instead of entering the abomasum directly. In calves, milk that spills into the rumen undergoes rapid microbial fermentation, producing lactic acid and other volatile fatty acids, and lowering the ruminal pH. This reduced ruminal pH predisposes the animals to ulceration and necrosis of the rumen mucosa, as well as maldigestion and recurrent tympany. We investigated five cases of ulcerative rumenitis in white-tailed deer (WTD: Odocoileus virginianus) fawns from 2009 to 2014. Four of these fawns were females with ages ranging from 2 to 30 days. Clinical findings in the fawns included poor body condition, severe diarrhea, and sudden death. Gross changes consistently observed included large amount of milk and milk curds in the rumen, reticulum and occasionally omasum, white-colored and bloody diarrhea, severe muscle wasting with extensive loss of visceral fat. On microscopic examination, the most consistent finding among three of the animals was multifocal necroulcerative rumenitis admixed with basophilic globular material (milk), while the other two animals had unremarkable histopathologic findings. Aerobic and anaerobic bacterial cultures of samples collected revealed mixed bacterial growth suggestive of secondary opportunistic invasion. Molecular diagnostics ruled out the possibility of Bluetongue and Epizootic Hemorrhagic viral infections. This report describes for the first time, clinical, gross, and microscopic changes associatedwith reticulo-ruminal milk accumulation in WTD fawns across farms in Texas, and complements those of earlier studies in calves.
Assuntos
Animais , Cervos , Rúmen/fisiopatologia , Texas , Gastropatias/veterináriaResumo
Ruminal drinking is a condition that has been extensively reported in pre-ruminant calves, and is characterized by an insufficient esophageal groove reflex that causes ingested milk to spill into the reticulum and/or rumen instead of entering the abomasum directly. In calves, milk that spills into the rumen undergoes rapid microbial fermentation, producing lactic acid and other volatile fatty acids, and lowering the ruminal pH. This reduced ruminal pH predisposes the animals to ulceration and necrosis of the rumen mucosa, as well as maldigestion and recurrent tympany. We investigated five cases of ulcerative rumenitis in white-tailed deer (WTD: Odocoileus virginianus) fawns from 2009 to 2014. Four of these fawns were females with ages ranging from 2 to 30 days. Clinical findings in the fawns included poor body condition, severe diarrhea, and sudden death. Gross changes consistently observed included large amount of milk and milk curds in the rumen, reticulum and occasionally omasum, white-colored and bloody diarrhea, severe muscle wasting with extensive loss of visceral fat. On microscopic examination, the most consistent finding among three of the animals was multifocal necroulcerative rumenitis admixed with basophilic globular material (milk), while the other two animals had unremarkable histopathologic findings. Aerobic and anaerobic bacterial cultures of samples collected revealed mixed bacterial growth suggestive of secondary opportunistic invasion. Molecular diagnostics ruled out the possibility of Bluetongue and Epizootic Hemorrhagic viral infections. This report describes for the first time, clinical, gross, and microscopic changes associatedwith reticulo-ruminal milk accumulation in WTD fawns across farms in Texas, and complements those of earlier studies in calves.(AU)
Assuntos
Animais , Rúmen/fisiopatologia , Cervos , Texas , Gastropatias/veterináriaResumo
This study aimed to evaluate the muscle changes and the strength of horses, Quarter Horse, athletes submitted to sprint (300 meters) with the use of serum glucose reviews, lactate, creatine kinase and aspartate aminotransferase. For the evaluation, 21 horses were used in the Quarter Horse breed, aged 2 and 4 years old, weighing approximately 500 kg, submitted to race proved short distance (300 meters). Serum aspartate aminotransferase values were measured (AST), creatine kinase (CK), lactate and glucose 15 minutes before and 15 minutes after exercise. When comparing the results using T-Student (p < 0.05), it was observed that there is a statistically significant difference when comparing the groups, it is possible to notice wear and muscle regeneration, as well as adaptation to exercise. Serum tests have demonstrated good sensitivity to monitor the physical condition of the animals before and after undergoing the short run test.
Este trabalho teve como objetivo avaliar as alterações musculares e a resistência de equinos, Quarto de Milha, atletas, submetidos à corrida de curta distância (300 metros), com a utilização das avaliações séricas de glicose, lactato, creatina quinase e aspartato aminotransferase. Para a avaliação, foram utilizados 21 equinos da raça Quarto de Milha, com idade entre 2 e 4 anos, com peso aproximado de 500 kg, submetidos à prova de corrida em curta distância (300 metros). Foram mensurados valores séricos de aspartato aminotransferase (AST), creatina quinase (CK), lactato e glicose, 15 minutos antes e 15 minutos após o exercício físico. Ao comparar os resultados utilizando-se T- Student (p < 0,05), foi possível observar que há diferença estatística significativa ao comparar os grupos, sendo possível notar desgaste e regeneração muscular, além de adaptação ao exercício físico. Os exames séricos demonstraram ter boa sensibilidade para acompanhar o estado físico dos animais antes e depois de submetidos à prova de corrida curta.
Assuntos
Animais , Aspartato Aminotransferases/sangue , Cavalos/sangue , Corrida , Creatina Quinase/sangue , Glicemia/análise , Ácido Láctico/sangue , Contagem de Células Sanguíneas/veterináriaResumo
This study aimed to evaluate the muscle changes and the strength of horses, Quarter Horse, athletes submitted to sprint (300 meters) with the use of serum glucose reviews, lactate, creatine kinase and aspartate aminotransferase. For the evaluation, 21 horses were used in the Quarter Horse breed, aged 2 and 4 years old, weighing approximately 500 kg, submitted to race proved short distance (300 meters). Serum aspartate aminotransferase values were measured (AST), creatine kinase (CK), lactate and glucose 15 minutes before and 15 minutes after exercise. When comparing the results using T-Student (p < 0.05), it was observed that there is a statistically significant difference when comparing the groups, it is possible to notice wear and muscle regeneration, as well as adaptation to exercise. Serum tests have demonstrated good sensitivity to monitor the physical condition of the animals before and after undergoing the short run test.(AU)
Este trabalho teve como objetivo avaliar as alterações musculares e a resistência de equinos, Quarto de Milha, atletas, submetidos à corrida de curta distância (300 metros), com a utilização das avaliações séricas de glicose, lactato, creatina quinase e aspartato aminotransferase. Para a avaliação, foram utilizados 21 equinos da raça Quarto de Milha, com idade entre 2 e 4 anos, com peso aproximado de 500 kg, submetidos à prova de corrida em curta distância (300 metros). Foram mensurados valores séricos de aspartato aminotransferase (AST), creatina quinase (CK), lactato e glicose, 15 minutos antes e 15 minutos após o exercício físico. Ao comparar os resultados utilizando-se T- Student (p < 0,05), foi possível observar que há diferença estatística significativa ao comparar os grupos, sendo possível notar desgaste e regeneração muscular, além de adaptação ao exercício físico. Os exames séricos demonstraram ter boa sensibilidade para acompanhar o estado físico dos animais antes e depois de submetidos à prova de corrida curta.(AU)
Assuntos
Animais , Cavalos/sangue , Glicemia/análise , Ácido Láctico/sangue , Creatina Quinase/sangue , Aspartato Aminotransferases/sangue , Corrida , Contagem de Células Sanguíneas/veterináriaResumo
A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma importante e severa doença músculo degenerativa causada pela mutação do gene da distrofina. Na ausência da distrofina, o sarcolema das células torna-se vulnerável devido a danos induzidos por ciclos contínuos de degeneração e regeneração. Consequentemente, a força muscular diminui e as miofibras são substituídas por tecido fibrótico. Dentre os músculos esqueléticos afetados, o diafragma, destaca-se por ser o principal músculo respiratório acometido na DMD. Similarmente a DMD humana, o modelo mdx, apesar de exibir um fenótipo suave, este apresenta um severo acometimento no músculo diafragma, assim como observado em nosso estudo prévio, aqui descritos. Entretanto, este é considerado um modelo pobre, porque ele não consegue reproduzir, o fenótipo severo observado nos pacientes. O camundongo mdx/utrn+/- (dystrophin-null heterozygous urtrophin mice) com haploinsuficiência da utrofina, tem sido hipotetizado como um modelo com um fenótipo intermediário, ganhando popularidade nos laboratórios. Porém, infelizmente, até os dias de hoje, não existe evidências fisiológicas e funcionais suficientes que justifiquem a escolha deste modelo para as terapias experimentais. Portanto, neste estudo objetivou-se esclarecer a real contribuição do camundongo mdx/utrn+/- para as terapias experimentais. Para testar esta hipótese, elegeu-se analisar a morfologia e a função muscular do músculo diafragma do mdx e mdx/utrn+/- com 2 e 6 meses de idade. Para elucidar a morfopatologia do diafragma foi utilizado microscopia de luz e análises de imunohistoquímica. A função muscular do diafragma foi analisada através da avaliação das propriedades contráteis e passivas. A forma de como executar a função muscular do diafragma foi atualizada através da criação de dois clips, os quais permitiram avaliar o músculo de forma segura. A adaptação de um novo protocolo de avaliação da função muscular mostrou-se eficaz e capaz de ser utilizada para avaliar as propriedades contráteis e passivas. Aos 2 meses de idade, as colorações de Hematoxilina e eosina, Tricômio de Masson e Alizarina vermelha revelaram que o mdx/utrn+ apresentou maior quantidade de infiltrado inflamatório, tecido conectivo e áreas de calcificação do que o mdx. Já aos 6 meses de idade, não houve diferença morfológica entre o mdx e o mdx/utrn+/-. Na análise de imunohistoquímica para eMyHC (miosina embrionária de cadeia pesada eMyHC), não foi observada diferença entre o mdx e o mdx/utrn+/-aos 2 e 6 meses de idade. Entretanto, os resultados obtidos em ambas as idades, demonstraram a presença de regeneração muscular. Na marcação da proteína distrofina e utrofina, as células inflamatórias e os tipos de fibras musculares também foram detectados por imunohistoquímicas. A marcação da proteína distrofina, mostrou-se ausente no mdx e mdx/utrn+/- com 2 e 6 meses de idade. A marcação da proteína utrofina mostrou-se mais evidente no mdx do que no mdx/utrn+/-, evidenciando a haploinsuficiência nos mdx/utrn+/-. Macrófagos foram encontrados em maior quantidade no camundongo mdx/utrn+/- com 2 e 6 meses do que no mdx, mostrando que o processo de inflamação encontrou-se aumentado nos mdx/utrn+/- Neutrófilos encontraram-se aumentados no mdx/utrn+/- com 2 meses, evidenciando a fase aguda da inflamação. Entretanto nos animais de 6 meses, quantidades semelhantes de neutrófilos foram detectadas no mdx/utrn+/- e mdx. Fibras marcadas pelas isoformas MyHC- I, IIa e IIx foram detectadas em maior porcentagem no BL10 do que no mdx e mdx/utrn+/- aos 2 meses de idade, demonstrando que a diminuição destas, no mdx e mdx/utrn+/- pode colaborar para a diminuição da força nestes animais. Aos 6 meses, porcentagem similares de MyHC- I foram detectadas no BL10, mdx e mdx/utrn+/-. MyHC-IIa não foram encontradas nos animais de 6 meses. MyHC-IIx encontraram-se em maior porcentagem no BL10 do que no mdx e mdx/utrn+/- com 6 meses de idade. Baixa porcentagem de isoformas de MyHC- I/IIa foram detectadas no mdx e mdx/utrn+/- aos 2 e 6 meses de idade e encontraram-se ausentes no BL10 de mesma idade. Fibras marcadas pela isoformas MyHC-IIa/IIx apresentaram-se aumentadas no mdx e mdx/utrn+/- aos 2 e 6 meses, podendo este aumento auxiliar na manutenção da força muscular. MyHC-IIx-IIb foram detectadas em maior porcentagem no mdx, reduzidas no BL10 e ausentes no mdx/utrn+/- com 2 meses de idade. Estas não foram identificadas nos animais de 6 meses. As propriedades contráteis do camundongo mdx/utrn+/- aos 2 meses de idade apresentaram-se mais comprometidas do que no mdx. Pt (contração isométrica máxima), sPt (força específica de Pt), Po (Força tetânica máxima) e sPo (força específica de Po) exibiramse mais afetadas no mdx/utrn+/- do que no mdx. Porém aos 6 meses de idade não houve diferença significativa de força entre o mdx/utrn+/- e o mdx. As propriedades passivas do mdx/utrn+/- com 2 meses apresentou mais acometida do que no mdx. Entretanto, aos 6 meses, esta propriedade não se diferenciou entre o mdx/utrn+/- e o mdx. Em suma, conclui-se que o mdx/utrn+/- representa um modelo superior ao mdx com 2 meses de idade, uma vez que este apresentou morfologia, propriedades contráteis e passiva mais comprometidas do que no mdx. Aos 6 meses as propriedades contráteis e passivas e morfológicas do camundongo mdx/utrn+/- não se diferenciou do mdx. Sugerimos que o uso do mdx/utrn+/- com 2 meses de idade pode potencializar os testes pré-clinicos.
Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) is an important and severe muscle wasting disease caused by a dystrophin mutation. In the absence of dystrophin, sarcolemma becomes vulnerable to damage due a damage caused by continuous cycles of degenerationregeneration. Consequently, the muscle force reduces and the myofibers are replaced by fibrotic tissue. Between the skeletal muscles, the diaphragm is main affected muscle in DMD. Similarly, to a human DMD, despite the mdx model exhibit a milder phenotype, he presents the diaphragm muscle severely affected, as it was observed in our previous study, here described. However, it is also considered a poor model because it cannot reproduce the severe dystrophic phenotype seen in patients. An utrophin heterozygous utrophin mice (mdx/utrn+/- ), has been hypothesized as an intermediate model and they are gaining popularity in many laboratories. However unfortunately there is currently, no physiological enough evidence to justify the choice of this model for experimental therapies. Therefore, in this study, we aimed to elucidate the real contribution of the mdx/utrn+/- for the experimental therapies. To test this hypothesis, we evaluated the diaphragm muscle morphology and muscle function of the mdx and mdx/utrn+/- with 2 and 6 months. To elucidate the diaphragm morphology, we used light microscopy techniques and immunostaining analysis. Muscle function was evaluated through the active and passive properties. The clamps allowed to safe evaluate the diaphragm function. The update of the new protocol was efficient and able to evaluate the active and passive properties. At 2 months, the Hematoxylin and eosin, Masson Thrichome, Alisarine red, revealed that the mdx/utrn+ showed more inflammatory infiltrate, connective tissue and more areas with calcification than mdx model. At 6 months, there was no significant differences between mdx and mdx/utrn+. In the immunohistochemical analysis for eMyHC (embryonic myosin heavy chain), there was no difference between mdx and mdx/utrn+/- at 2 and 6 months. However, the results obtained in both ages, showed muscle regeneration Marking for dystrophin and utrophin protein, inflammatory cells and fiber type were also detected by immunohistochemistry. Marking for dystrophin was absent in mdx and mdx/utrn+/- with 2 and 6 months. Marking for utrophin protein was more evident in mdx than in mdx/utrn+/- mice, evidencing the utrophin haploinsufficiency in mdx/utr+/-. Macrophages were increased in mdx/utrn+/- than in mdx mice with 2 and 6 months, showing an inflammation. Neutrophils were increased in mdx/utrn+/- at 2 month-old, evidencing the acute phase of inflammation. However, at 6 months similar amounts of neutrophil were detected in mdx and mdx/utrn+/-. Fibers marked by MyHC-I, IIa and IIx were detected in a higher percentage in BL10 than in mdx and mdx/utrn+/- at 2 months, showing that this change could collaborate with force decrease in these animals. At 6 months, similar percentage of MyHC-I was detected in BL10, mdx and mdx/utrn+/-. MyHC-IIa animals were not found at 6 months. Higher percentage of MyHC-IIx was found in BL10 than in mdx and mdx/utrn+/- with 6 months. Low percentage of MyHC- I/IIa was detected in mdx and mdx/utrn+/- at 2 and 6 months and it was absent in BL10 in the same age. Fibers marked by MyHC-IIa/IIx isoforms were increased in mdx and mdx/utrn+/- with 2 and 6 months. These changes could help to maintain the muscle force. MyHC-IIx-IIb was detected in higher percentage in mdx, reduced the BL10 and it was absent in mdx/utrn+/- with 2 months. MyHC-IIx-IIb was not identified in the animals with 6 months. Contractile properties in mdx/utrn+/- at 2 months were more affected than in mdx mice. Pt (maximal twitch force), sPt (specific twitch force), Po (maximal tetanic force) and sPo (specific tetanic force) showed more severely affected in mdx/utrn+/- than in mdx mice. At 6 months there were no significant difference in Pt, sPt, Po and sPo between mdx/utrn+/- and mdx mice. Passive properties of mdx/utrn+/- with 2 months presented more affected than the in mdx mice. However, at 6 months, this property did not differ between mdx/utrn+/- and mdx mice. In summary, we concluded that the mdx/utrn+/- at 2 month represent a superior model than the mdx with matched-age, since they presented morphology and contractile and passive properties more compromised than mdx mice. At 6 months, the mdx/utrn+/-contractile and the passive properties and morphology did not differ from the mdx mice age-matched. We suggest that the use of mdx/utrn+/- with 2 months-old would represent would represent a better model to test the potential of the therapies than mdx mice.
Resumo
A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma doença hereditária ligada ao cromossomo X que tem como principais características a atrofia e fraqueza muscular progressiva, chegando até mesmo ao comprometimento da musculatura cardíaca e respiratória. A ausência e/ou disfunção da proteína distrofina na DMD faz com que qualquer esforço muscular contribua para deterioração do tecido muscular. Portanto, presente estudo avaliou pela primeira vez os niveis de metilação e hidroximetilação global no músculo esquelético de animais portadores e afetados pela DMD e analisou os efeitos do acido ursólico sobre a viabilidade e producao proteina de linhagens celulas musculares isoladas de animais portadores e afetados pela GRMD. As análises dos niveis de metilação e hidroximetilação sugerem que as células musculares de caes portadores apresentam maiores níveis de hidroximetilação, em geral, o que pode estar associado com a estabilidade e capacidade de reparo celular; o tratamento com ácido ursólico in vitro, aumentou a concentração de proteinas sobre as células cultivadas;no entanto apresentou-se tóxico às células cultivadas in vitro quando em baixas concentrações, para animais portadores e afetados com 6 meses de idade. Ainda que ensaio de viabilidade celular demonstrou que o ácido ursólico pode ser tóxico em determinada concentração, quando comparado com o controle, entretanto, a utilização deste componente parece ser favorável às células.
The Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a hereditary 'X'-linked wasting muscle disease which is characterized by atrophy and progressive muscle weakness that in later stages affects cardiac and respiratory muscles leading to death. The lack and/or dysfunction of dystrophin in DMD induces muscle injury after each muscles contraction leading severe wasting of the muscle tissue. Therefore, for the first time this study assessed the global levels of methylation levels and hydroxymethylation in skeletal muscle of carrier and affected dogs by DMD. Also, we assessed the effects of ursolic acid on the cell viability and protein production of muscle cells lineages isolated from carrier and affected dogs by DMD. The analysis of global levels of methylation and hydroxymethylation showed that muscle cells from carrier dogs had higher levels of global hydroxymethylation when compared to heir affected counterparts, which may be associated with the cellular stability and repair capacity. Taken together, our results showed that there is a difference on global methylation of DNA the skeletal muscle between carrier and affected dogs by DMD, which can be a new prognostic tool for disease progression. Also, the treatment with ursolic acid in vitro increased protein concentration in cultured cells, however ursolic acid showed to be toxic to muscle cells lineages isolated from carrier and affected dogs by DMD at low concentrations. Although cell viability assay showed that ursolic acid may be toxic in certain concentrations, when compared with the control, however, the use of this component appears to be favorable to the cells.
Resumo
São descritos sete casos de doença neurológica em ovinos por Listeria monocytogenes no Rio Grande do Sul e Paraná entre 2000 e 2007. Foram afetados ovinos com idades entre 12-24 meses. Os casos ocorreram no verão e início da primavera e os índices gerais de morbidade e letalidade foram de 3,15% e 100%, respectivamente. Quando essa informação estava disponível, nenhum dos ovinos afetados era alimentado com silagem. Em três propriedades havia contato próximo dos ovinos afetados com outras espécies. A evolução do quadro clínico foi de 12 horas a três dias e os sinais clínicos foram caracterizados por decúbito (7/7), desvio da cabeça (4/7), incoordenação (3/7), depressão (3/7), andar em círculos (2/7), cegueira unilateral, emagrecimento progressivo, febre, midríase, movimentos de pedalagem, nistagmo lateral, opistótono, paralisia flácida dos membros pélvicos ou dos quatro membros, salivação excessiva e tremores (1/7 cada). Histologicamente observou-se encefalite com microabscessos, predominantemente unilateral com variáveis graus de gliose e alterações degenerativas como esferóides axonais e infiltração de células Gitter. As lesões se estendiam desde a medula oblonga até o mesencéfalo. Antígenos de Listeria monocytogenes foram detectados por imuno-histoquímica em seções de tronco encefálico de todos os ovinos afetados. O diagnóstico foi realizado com base nos achados epidemiológicos e clinico-patológicos, e confirmado pela imuno-histoquímica (IHQ) utilizando anticorpo policlonal anti-L. monocytogenes.(AU)
Seven cases of neurological disease in sheep caused by Listeria monocytogenes in Rio Grande do Sul and Paraná state, southern Brazil are described. The cases occurred between 2000 and 2007 and 12-24-month-old sheep were affected. Overall morbidity and lethality rates were 3.15% and 100%, respectively. Cases occurred in the summer and early spring. When this information was available, affected sheep had not been fed with silage. In three farms there were close contact among affected sheep and other species. Clinical signs were characterized by recumbency (7/7), head tilt (4/7), incoordination (3/7), depression (3/7), circling (2/7), unilateral blindness, wasting, fever, midriasis, paddling, opisthotonus, hind or hind and fore limb paralysis, drooling, and muscle tremors (1/7 each). Clinical evolution varied from 12 hours to three days. Histological findings consisted of predominantly unilateral, microabscedative encephalitis with variable degrees of gliosis and degenerative lesions characterized by axonal spheroids and infiltration by Gitter cells. These lesions were observed extending from medulla oblongata to mesencephalon. Listeria monocytogenes antigen was showed by imunohistochemistry in routinely processed sections of brainstem from all seven affected sheep. The diagnostic was based on epidemiological, clinical, and pathological findings and confirmed by immunohistochemistry (IHQ) using polyclonal anti-L. monocytogenes antibody.(AU)
Assuntos
Animais , Meningite por Listeria/diagnóstico , Meningite por Listeria/fisiopatologia , Listeriose/patologia , Listeriose/veterinária , Listeria monocytogenes , Ovinos , Imuno-Histoquímica/veterináriaResumo
This study comprised 12 hearts of Wiedïs black-tufted-ear marmoset, Callithrix kuhlii (Coimbra-Filho 1985), 6 with Wasting Marmoset Syndrome (WMS) and 6 non-affected. Biometry was performed after death. After necropsy, the hearts were weighed, dissected, fixed in 10 percent formalin solution (pH 7.2), and processed for optical microscopy at 5µm sections stained with Haematoxylin-Eosin. Quantitative analysis was performed by stereological techniques. The statistical differences between the biometrical and stereological parameters were assessed by the Mann-Whitney test. The morphometric results showed that WMS causes a significant reduction in body and cardiac weights, and also in the volume density of vessels in those animals. Further studies are necessary to understand some of the results shown here.(AU)
Neste estudo, foram utilizados corações de 12 Sagui-de-Wied, Callitrhix kuhlii (Coimbra-Filho 1985), sendo 6 animais afetados pela SEP e 6 animais normais. Após a morte foi realizada a biometria seguida de necropsia. Os corações foram fixados em formol tamponado a 10 por cento, pesados e dissecados, sendo processados através de técnicas histológicas de rotina para microscopia óptica em cortes de 5µm corados por Hematoxilina-Eosina. As análises quantitativas foram feitas com o uso de técnicas estereológicas. As diferenças estatísticas entre os parâmetros biométricos e estereológicos foram avaliadas usando o test Mann-Whitney. Os resultados encontrados através da morfometria mostraram que a SEP causa uma redução significante do peso tanto corporal quanto do músculo cardíaco, e também uma redução no volume dos vasos nestes animais. Novos estudos são necessários para entender alguns dos resultados mostrados aqui.(AU)