Resumo
A túnica vaginal possui características ideais para enxertia e já foi empregada na reparação de diversos tecidos, inclusive do diafragma pélvico. Objetivou-se avaliar a aplicabilidade da túnica vaginal como enxerto autógeno livre, em dupla camada, para a reparação do diafragma pélvico em 14 cães portadores de hérnia perineal, das quais, nove eram unilaterais e cinco, bilaterais. Após a orquiectomia, as túnicas de ambos os testículos foram coletadas, sobrepostas e fixadas entre si por meio de quatro pontos de reparo. Foi realizada abordagem ao saco herniário, inspeção, redução do conteúdo herniário, desbridamento muscular e síntese primária mediante sutura. O enxerto foi fixado à musculatura remanescente por meio de pontos simples separados e, posteriormente, encoberto pela sutura intradérmica e por síntese cutânea. Observações transoperatórias e, posteriormente, avaliações clínicas e ultrassonográficas, por período de um ano, permitiram sugerir que a túnica vaginal possui atributos ideais para a reparação do diafragma pélvico. Conclui-se que o enxerto autógeno livre de túnica vaginal, em dupla camada, é exequível e aplicável para o reparo do diafragma pélvico no tratamento da hérnia perineal em cães.(AU)
The tunica vaginalis has ideal characteristics for grafting and has already been used to repair several tissues, including the pelvic diaphragm. The aim of this study was to evaluate the applicability of the tunica vaginalis as a free double-layer autogenous graft to repair the pelvic diaphragm in 14 dogs with perineal hernia, of which, nine were unilateral and five, bilateral. After orchiectomy, the tunics of both testicles were collected, overlapped and fixed to each other by four repair points. The hernial sac was approached, followed by inspection, reduction of the hernia content, muscle debridement and primary synthesis through suture. The graft was attached to the remaining musculature by simple interrupted stitches and later hidden by intradermal suture and cutaneous synthesis. Intraoperative observations and, later, clinical and sonographic evaluations over a one-year period, allow to suggest that the tunica vaginalis has ideal attributes for the pelvic diaphragm repair. It is concluded that the autogenous graft-free of tunica vaginalis in double layer is feasible and applicable in order to repair the pelvic diaphragm in the perineal hernia treatment in dogs.(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Peritônio/transplante , Diafragma da Pelve/cirurgia , Hérnia/veterinária , Herniorrafia/veterináriaResumo
A túnica vaginal possui características ideais para enxertia e já foi empregada na reparação de diversos tecidos, inclusive do diafragma pélvico. Objetivou-se avaliar a aplicabilidade da túnica vaginal como enxerto autógeno livre, em dupla camada, para a reparação do diafragma pélvico em 14 cães portadores de hérnia perineal, das quais, nove eram unilaterais e cinco, bilaterais. Após a orquiectomia, as túnicas de ambos os testículos foram coletadas, sobrepostas e fixadas entre si por meio de quatro pontos de reparo. Foi realizada abordagem ao saco herniário, inspeção, redução do conteúdo herniário, desbridamento muscular e síntese primária mediante sutura. O enxerto foi fixado à musculatura remanescente por meio de pontos simples separados e, posteriormente, encoberto pela sutura intradérmica e por síntese cutânea. Observações transoperatórias e, posteriormente, avaliações clínicas e ultrassonográficas, por período de um ano, permitiram sugerir que a túnica vaginal possui atributos ideais para a reparação do diafragma pélvico. Conclui-se que o enxerto autógeno livre de túnica vaginal, em dupla camada, é exequível e aplicável para o reparo do diafragma pélvico no tratamento da hérnia perineal em cães.(AU)
The tunica vaginalis has ideal characteristics for grafting and has already been used to repair several tissues, including the pelvic diaphragm. The aim of this study was to evaluate the applicability of the tunica vaginalis as a free double-layer autogenous graft to repair the pelvic diaphragm in 14 dogs with perineal hernia, of which, nine were unilateral and five, bilateral. After orchiectomy, the tunics of both testicles were collected, overlapped and fixed to each other by four repair points. The hernial sac was approached, followed by inspection, reduction of the hernia content, muscle debridement and primary synthesis through suture. The graft was attached to the remaining musculature by simple interrupted stitches and later hidden by intradermal suture and cutaneous synthesis. Intraoperative observations and, later, clinical and sonographic evaluations over a one-year period, allow to suggest that the tunica vaginalis has ideal attributes for the pelvic diaphragm repair. It is concluded that the autogenous graft-free of tunica vaginalis in double layer is feasible and applicable in order to repair the pelvic diaphragm in the perineal hernia treatment in dogs.(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Peritônio/transplante , Diafragma da Pelve/cirurgia , Hérnia/veterinária , Herniorrafia/veterináriaResumo
O Botulismo é uma doença causada pela ação da toxina produzida pelo Clostridium botulinumque age no sistema nervoso periférico causando paralisia flácida devido à interrupção da transmissão neuromuscular. Adiciona-se aos sintomas: o decúbito externa ou lateral, visão dupla, turva, além de anorexia, falta de coordenação e ataxia. Em ruminantes, a transmissão dessa doença ocorre principalmente pela ingestão de toxina via alimentos incorretamente armazenados (silagem, ração e feno) e carcaças abandonada nas pastagens. Está diretamente relacionada à osteofagia, decorrente da deficiência mineral (fósforo) nos solos e consequentemente nas forrageiras. O diagnóstico é baseado no histórico e quadro clínico-patológico e o tratamento no fornecimento, o mais breve possível, de solução saturada de hidróxido de magnésio e a administração de soro antibotulínico a fim de facilitar a eliminação da toxina circulante na musculatura do animal. Entretanto, nos quadros mais graves da doença a letalidade em geral pode chegar a 100%. Sendo assim, o objetivo desse trabalho é fornecer informações descritivas sobre as principais causas, sintomas, tratamento e prevenção do Botulismo em búfalos.(AU)
Botulism is a disease caused by the toxin produced by Clostridium botulinumthat acts on the peripheral nervous system causing flaccid paralysis due to the interruption of the neuromuscular transmission. Adds to the symptoms: external or lateral decubitus, doube vision, blurred, besides anorexia, lack of coordination and ataxia. In ruminants, the transmission of this disease occurs mainly by the ingestion of toxin via improperly stored food (silage, feed and hay) and abandoned carcasses in the pastures. It is directly related to osteophage, due to mineral deficiency (phosphorus) in soils and consequently in forages. Thus, the spore develops producing toxins that permeate the porous bones, tendons and ligaments which are later ingested by the animals. The diagnosis is based on the history and clinical-pathological picture and treatment in the shortest possible supply of saturated magnesium hydroxide solution and the administration of antibotulin serum in order to facilitate the elimination of the circulating toxin in the musculature of the animal. However, in the most severe cases of the disease, lethality in general can reach 100%. Thus, the objective of this work is to provide descriptive information on the main causes, symptoms, treatment and prevention of botulism in buffaloes.(AU)
El botulismo es una enfermedad causada por la acción de la toxina producida por el Clostridium botulinum que actúa en el sistema nervioso periférico causando parálisis flácida debido a la interrupción de la transmisión neuromuscular. Se agrega a los síntomas: el decúbito externo o lateral, visión doble, turbia, además de anorexia, falta de coordinación y ataxia. En rumiantes, la transmisión de esta enfermedad ocurre principalmente por la ingestión de toxina vía alimentos incorrectamente almacenados (silaje, ración y heno) y canales abandonadas en los pastizales. Está directamente relacionada a la osteofagia, derivada de la deficiencia mineral (fósforo) en los suelos y consecuentemente en las forrajeras. Así, la espora se desarrolla produciendo toxinas que impregnan en los huesos porosos, tendones y ligamentos que serán posteriormente ingeridos por los animales. El diagnóstico se basa en el historial y cuadro clínico-patológico y el tratamiento en el suministro lo más breve posible de solución saturada de hidróxido de magnesio y la administración de suero antibotulínico para facilitar la eliminación de la toxina circulante en la musculatura del animal. Sin embargo, en los cuadros más graves de la enfermedad la letalidad en general puede llegar al 100%. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo es proporcionar información descriptiva sobre las principales causas, síntomas, tratamiento y prevención del botulismo en búfalos.(AU)
Assuntos
Animais , Búfalos , Botulismo/diagnóstico , Botulismo/etiologia , Botulismo/prevenção & controle , Botulismo/veterinária , Infecções por Clostridium/veterinária , Clostridium botulinum , NeurotoxinasResumo
O Botulismo é uma doença causada pela ação da toxina produzida pelo Clostridium botulinumque age no sistema nervoso periférico causando paralisia flácida devido à interrupção da transmissão neuromuscular. Adiciona-se aos sintomas: o decúbito externa ou lateral, visão dupla, turva, além de anorexia, falta de coordenação e ataxia. Em ruminantes, a transmissão dessa doença ocorre principalmente pela ingestão de toxina via alimentos incorretamente armazenados (silagem, ração e feno) e carcaças abandonada nas pastagens. Está diretamente relacionada à osteofagia, decorrente da deficiência mineral (fósforo) nos solos e consequentemente nas forrageiras. O diagnóstico é baseado no histórico e quadro clínico-patológico e o tratamento no fornecimento, o mais breve possível, de solução saturada de hidróxido de magnésio e a administração de soro antibotulínico a fim de facilitar a eliminação da toxina circulante na musculatura do animal. Entretanto, nos quadros mais graves da doença a letalidade em geral pode chegar a 100%. Sendo assim, o objetivo desse trabalho é fornecer informações descritivas sobre as principais causas, sintomas, tratamento e prevenção do Botulismo em búfalos.
Botulism is a disease caused by the toxin produced by Clostridium botulinumthat acts on the peripheral nervous system causing flaccid paralysis due to the interruption of the neuromuscular transmission. Adds to the symptoms: external or lateral decubitus, doube vision, blurred, besides anorexia, lack of coordination and ataxia. In ruminants, the transmission of this disease occurs mainly by the ingestion of toxin via improperly stored food (silage, feed and hay) and abandoned carcasses in the pastures. It is directly related to osteophage, due to mineral deficiency (phosphorus) in soils and consequently in forages. Thus, the spore develops producing toxins that permeate the porous bones, tendons and ligaments which are later ingested by the animals. The diagnosis is based on the history and clinical-pathological picture and treatment in the shortest possible supply of saturated magnesium hydroxide solution and the administration of antibotulin serum in order to facilitate the elimination of the circulating toxin in the musculature of the animal. However, in the most severe cases of the disease, lethality in general can reach 100%. Thus, the objective of this work is to provide descriptive information on the main causes, symptoms, treatment and prevention of botulism in buffaloes.
El botulismo es una enfermedad causada por la acción de la toxina producida por el Clostridium botulinum que actúa en el sistema nervioso periférico causando parálisis flácida debido a la interrupción de la transmisión neuromuscular. Se agrega a los síntomas: el decúbito externo o lateral, visión doble, turbia, además de anorexia, falta de coordinación y ataxia. En rumiantes, la transmisión de esta enfermedad ocurre principalmente por la ingestión de toxina vía alimentos incorrectamente almacenados (silaje, ración y heno) y canales abandonadas en los pastizales. Está directamente relacionada a la osteofagia, derivada de la deficiencia mineral (fósforo) en los suelos y consecuentemente en las forrajeras. Así, la espora se desarrolla produciendo toxinas que impregnan en los huesos porosos, tendones y ligamentos que serán posteriormente ingeridos por los animales. El diagnóstico se basa en el historial y cuadro clínico-patológico y el tratamiento en el suministro lo más breve posible de solución saturada de hidróxido de magnesio y la administración de suero antibotulínico para facilitar la eliminación de la toxina circulante en la musculatura del animal. Sin embargo, en los cuadros más graves de la enfermedad la letalidad en general puede llegar al 100%. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo es proporcionar información descriptiva sobre las principales causas, síntomas, tratamiento y prevención del botulismo en búfalos.
Assuntos
Animais , Botulismo/diagnóstico , Botulismo/etiologia , Botulismo/prevenção & controle , Botulismo/veterinária , Búfalos , Clostridium botulinum , Infecções por Clostridium/veterinária , NeurotoxinasResumo
Objetivou-se avaliar o perfil de ácidos graxos e a maciez da carne de bovinos Nelore e Rubia Gallega x Nelore, e entender as diferenças na qualidade da carne por meio da avaliação de parâmetros bioquímicos e metabólicos sanguíneos, da expressão de genes envolvidos no metabolismo lipídico e na proteólise post mortem, e da avaliação da abundância de proteínas envolvidas no processo proteolítico e crescimento muscular. Foram utilizados 16 bovinos Nelore (N) e 16 bovinos Rubia Gallega x Nelore (RGN), machos não castrados, com idade média de 11 meses e 280 kg ± 15 kg de peso vivo inicial. Os animais foram mantidos nas mesmas condições de manejo e receberam a mesma dieta ad libitum. Após 120 dias de confinamento, os animais foram abatidos. Durante o abate, foram coletadas amostras de sangue para as análises de parâmetros bioquímicos e metabólicos e amostras do músculo longissimus para a extração de RNA e abundância proteica (zero dia). As amostras de músculo longissimus utilizadas nas análises de força de cisalhamento (FC), cor (COR), perda por cocção (PPC), degradação proteica, perfil de ácidos graxos e lipídeos totais (LT) foram coletadas durante a desossa. As amostras destinadas à FC, PPC, COR e degradação proteica foram maturadas por zero, 7, 14 e 21 dias. A expressão relativa de mRNA foi avaliada para os seguintes genes: C/EBP, ZFP423, FABP4, ACC, LPL, ACOX, LEP, SCD, TGF, MSTN, CAPN1, CAPN2 e CAST. A abundância proteica foi realizada para as proteínas: troponina, calpaína, HSP 27, HSP 70 e miostatina. O delineamento foi inteiramente casualizado, considerando cada animal uma unidade experimental. Para as análises avaliadas ao longo do tempo de maturação, os dados foram analisados em parcelas subdivididas, considerando um arranjo fatorial 2x4, sendo os efeitos fixos: os grupos genéticos (N e RGN), os tempos de maturação (zero, 7, 14 e 21 dias) e suas interações. A significância foi declarada quando P 0,05. Bovinos RGN apresentaram carnes mais macias, com menor PPC e menor teor de LT (P 0,05) quando comparados aos N. Bovinos N apresentaram maiores concentrações de ácidos graxos hipercolesterolêmicos, 14:0 e 16:0 e maior atividade da enzima 9 dessaturase (P 0,05). Por outro lado, o grupo RGN apresentou melhor índice 11 de saúde (P 0,05) na carne, além de menor concentração sérica de colesterol total, HDL e LDL nos animais, quando comparados ao grupo N (P 0,05). Em relação aos hormônios, as concentrações de hormônio do crescimento (GH) e leptina não foram influenciadas pelos grupos genéticos (P > 0,05), diferentemente do IGF-1 e da insulina que apresentaram maiores e menores concentrações em RGN, respectivamente, (P 0,05). Ademais, os genes TGF, MSTN, C/EBP, LPL e ACOXforam mais expressos em animais cruzados RGN, indicando diferenças na formação de fibras musculares e no metabolismo lipídico entre os grupos genéticos. Não foram encontradas alterações na expressão gênica de CAPN1, CAPN2 e CAST entre os grupos genéticos estudados (P > 0,05) apesar de terem apresentado valores de FC diferentes. Por outro lado, bovinos RGN apresentaram maior degradação de troponina-T (P = 0,0244). No entanto, não houve diferença entre os grupos genéticos para autólise de µ-calpaína (P = 0,9854), havendo apenas para o tempo de maturação (P < 0,0001). Observou-se interação para degradação de HSP 27 (P = 0,0006), indicando que a degradação desta proteína é maior e mais rápida em bovinos RGN. A abundância de HSP 70 foi alterada pelo tempo de maturação (P < 0,0001). A abundância proteica da miostatina não foi alterada pelo grupo genético (P = 0,3489). De modo geral, bovinos Rubia Gallega x Nelore apresentam carnes mais macias e mais desejável à saúde humana, quando comparados à raça Nelore. Estas diferenças podem ser explicadas pelos resultados hormonais de IGF-1 e insulina, pelos genes TGF, MSTN, LPL, ACOXe pela degradação de troponina-T e abundância de HSPs.
The objective of this study was to evaluate the fatty acid profile and meat tenderness of Nelore and Rubia Gallega x Nelore cattle, and to understand the differences in meat quality through the evaluation of blood biochemical and metabolic parameters, expression of genes involved in lipid metabolism and post mortem proteolysis, and evaluation of the abundance of proteins involved in proteolytic process and muscle growth. Sixteen Nelore (N) and 16 crossbred Rubia Gallega x Nelore (RGN), noncastrated males, with an average age of 11 months and 280 kg ± 15 kg of initial live weight were used. The animals were kept under the same management conditions and received the same diet ad libitum. After 120 days of feedlot finishing, the animals were harvested. During harvest, blood samples were collected for analysis of biochemical and metabolic parameters and longissimus muscle samples for RNA extraction and protein abundance (zero day). The longissimus muscle samples used in the shear force (SF), color, cooking loss (CL), protein degradation, fatty acid profile and total lipids analysis were collected during deboning. Samples from SF, color, CL, and protein degradation were aged for zero, 7, 14 and 21 days. Relative mRNA expression was evaluated for the following genes: C/EBP, ZFP423, FABP4, ACC, LPL, ACOX, LEP, SCD, TGF, MSTN, CAPN1, CAPN2, and CAST. Protein abundance was performed for the proteins: troponin, calpain, HSP 27, HSP 70 and myostatin. The design was completely randomized, considering each animal an experimental unit. For analysis evaluated over the aging time, the data were analyzed in subdivided plots, considering a 2x4 factorial arrangement. The model included the fixed effects: genetic groups (N and RGN), the maturation times (zero, 7, 14 and 21 days) and their interactions. Significance was declared when P 0.05. RGN cattle had more tender meat, lower CL and lower total lipids content (P 0.05) when compared to N. Beef from N Cattle presented higher concentrations of hypercholesterolemic fatty acids, 14: 0 and 16: 0 and higher enzyme activity 9 desaturase (P 0.05). On the other hand, RGN group had better health index (P 0.05) in meat, besides lower serum total cholesterol, HDL and LDL in animals when compared 13 to N group (P 0.05). Regarding hormones, growth hormone (GH) and leptin concentrations were not influenced by genetic groups (P > 0.05), unlike IGF-1 and insulin, which presented higher and lower RGN concentrations, respectively, (P 0.05). In addition, TGF, MSTN, C/EBP, LPL, and ACOXgenes were more expressed in RGN animals, indicating differences in muscle fiber formation and lipid metabolism between genetic groups. No There were no differences in gene expression of CAPN1, CAPN2 and CAST between the genetic groups studied (P > 0.05), although different SF values. On the other hand, RGN cattle showed greater degradation of troponin-T (P = 0.0244). However, there was no difference between the genetic groups for µ-calpain autolysis (P = 0.9854), except for aging time (P <0.0001). There was interaction for degradation of HSP 27 (P = 0.0006), indicating that the degradation of this protein is greater and faster in RGN cattle than N. HSP 70 abundance was altered by aging time (P < 0.0001). Myostatin protein abundance was not influenced by genetic group (P = 0.3489). In general, Rubia Gallega x Nelore cattle provide more tender beef and more desirable to human health when compared to Nelore breed. These differences can be explained by the hormonal results of IGF-1 and insulin, besides TGF, MSTN, LPL, ACOX genes and troponin-T degradation and abundance of HSPs.
Resumo
Objetivou-se neste estudo avaliar e comparar a taxa de crescimento, desempenho, características de carcaça e qualidade da carne de bovinos Nelore e cruzados Rubia Gallega e Nelore, terminados em confinamento. Foram utilizados 16 Nelore (N) e 16 Rubia Gallega x Nelore (RGN), machos não castrados, com peso médio inicial de 280 kg ± 15 kg e 11 ± 2 meses de idade, confinados por 120 dias e a cada 28 dias form realizadas pesagem e ultrassonografia, considerando um delineamento inteiramente casualizado. Os bovinos receberam duas dietas, terminação 1 - 70% de concentrado, e terminação 2 - 85% de concentrado. Foi avaliada a ingestão de matéria seca (IMS), peso vivo médio inicial e final (PI, PF), ganho de peso médio diário (GMD) e eficiência alimentar (EA). No abate foi determinado o peso de carcaça quente (PCQ) e o rendimento de carcaça (RC), e foram colhidas amostras do músculo Longissimus thoracis (LTH) para determinação do tipo, número e diâmetro de fibras musculares. Durante a desossa, foram avaliados o pH, área do olho de lombo (AOL), espessura de gordura subcutânea (EGS) e marmorização (MARB), e coletadas amostras para a análise de perdas por cocção (PPC), maciez objetiva (FC), maciez subjetiva (sensorial), cor, lipídios totais (LT) e colágeno no músculo LTH. A maciez objetiva, PPC e cor foi realizada em amostras maturadas por zero, 7, 14 e 21 dias a 2°C. Para a análise sensorial da carne, os bifes foram maturados por zero e 14 dias a 2°C. Os resultados foram submetidos à análise de variância (ANOVA), utilizando o proc MIXED do SAS versão 9.3, considerando P < 0,05. Bovinos RGN apresentaram melhor desempenho e características de carcaça superiores ao N (P < 0,05), obtendo 500 g de GMD a mais por dia e, RC 1,3% maior que os animais N. Observou-se interação linear para as características de espessura de gordura da carcaça, avaliadas por ultrassom, com a evolução do tempo de confinamento (P < 0,05), sugerindo que a deposição de gordura foi mais rápida e maior em bovinos N. Houve diferença entre os grupos genéticos para FC, PPC, cor (L*, a* e b*) e LT (P < 0,05), indicando maior maciez e menor quantidade de gordura na carne de animais cruzados. No entanto, não foram encontradas alterações na quantidade de colágeno e no número e diâmetro das fibras musculares (P > 0,05). Também não houve diferença sensorial na carne dos diferentes grupos, havendo apenas para o tempo de maturação (P < 0,0001). Assim, de modo geral, o uso do cruzamento industrial potencializa a produtividade, proporcionando maior taxa de crescimento muscular, no entanto, não gera grandes influências na qualidade da carne, mas pode ser uma alternativa ao consumidor que busca alimentos com menor conteúdo de gordura.
This work aimed to evaluate and compare performance, carcass traits and meat quality of Nelore and Rubia Gallega x Nelore cattle, finished in feedlot. Sixteen Nelore (N) and 16 crossbred Rubia Gallega x Nelore (RGN), non-castrated males, with an average age of 11 months and 280 kg ± 15 kg of initial live weight were used, confined for 120 days and weighing and ultrasonography were performed every 28 days, considering a completely randomized design. The cattle received two diets, according to the finishing phase (finishing 1 - 70% of concentrate; finishing 2 - 85% of concentrate). Dry matter intake (DMI, kg), initial weight and final weight (IW, FW, kg), average daily gain (ADG, kg) and feed efficiency (FE) it were evaluated throughout the trial period. Hot carcass weight (HCW) and carcass dressing percentage (CD) were discerned at slaughter, and samples of the Longissimus thoracis (LTH) muscle were collected for determination of the type, number and diameter of muscle fibers. After 24 hours, in deboning , pH, rib eye area (REA), fat thickness (FT) and marbing (MARB) were evaluated in LTH muscle, between the 12th and 13th rib. For analysis cooking loss (CL), shear force (SF), Sensory analysis (SA), color, total lipids (TL) and collagen samples of the same muscle were collected. Samples for SF, CL and color were aged for zero, 7, 14 and 21 days. For SA samples were aged for zero and 14 days at 2 °C. The results were submitted to analysis of variance (ANOVA), using the SAS version 9.3 MIXED proc, considering P < 0,05. RGN cattle had better performance and superiors carcass traits (P < 0,05) when compared to N, getting higher ADG 500 g and, 1,3% CD more to N animals. There was linear interaction for fat, evaluated by ultrasound, with the evolution of the feedlot time (P <0.05), suggesting that the fat deposition was faster and higher in N. For SF, CL, color (L*, a* e b*) and TL, there were difference between the genetic groups (P < 0,05), indicating more tender and less fat meat of crossbred animals. However, there were no difference in amount of collagen and in the number and diameter of muscle fibers (P > 0,05). There was also no difference in AS between genetic groups, there being only for the aging time, (P < 0,0001). In general, the use of crossing enhances productivity, providing a higher rate of muscle growth, however, it does not affect on meat quality, but it can be an alternative for consumers looking for meat with less fat.
Resumo
Em várias raças de bovinos de corte é observada a síndrome da musculatura dupla, caracterizada pela presença do fenótipo de hipertrofia muscular, sendo esta uma condição hereditária e controlada pelo gene GDF-8 (Growth Differentiation Factor-8). Em bovinos da raça Senepol, a mutação nt821, localizada no exon III deste gene, é responsável por esta síndrome. Neste contexto, os objetivos deste trabalho foram avaliar três metodologias de genotipagem desta mutação, com o intuito de verificar qual a mais adequada em relação a custo/benefício e verificar a associação do alelo mutado com características de interesse econômico em touros jovens da raça Senepol. Foram extraídos DNA genômico de amostras biológicas de 17 bezerros, sendo sete com o fenótipo da musculatura dupla e dez sem o fenótipo. As amostras de DNA foram quantificadas por espectrofotometria e suas integridades avaliadas em gel de agarose 0,8%. Posteriormente, foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) para amplificação do exon III. Foram testadas as metodologias: 1) sequenciamento direto do exon III do gene GDF-8; 2) detecção de fragmentos de DNA em gel de agarose a 4% e 3) detecção de fragmentos em sequenciador automático de DNA. Na primeira metodologia testada, foi possível detectar com precisão os genótipos de todos os indivíduos, entretanto, esta metodologia foi a mais onerosa. A técnica de detecção de fragmentos em gel de agarose a 4% resultou em 100% de concordância com os genótipos obtidos destes mesmos animais por sequenciamento. Porém, em toda corrida eletroforética é necessário acrescentar amostras de DNA controle de animais previamente genotipados, para garantir uma melhor visualização dos genótipos esperados, reduzindo, assim, artefatos técnicos. Esta metodologia foi a que apresentou o menor custo. Com o desenvolvimento de um sistema poolplexing, a detecção de fragmentos em sequenciador automático apesar de ser uma metodologia mais onerosa e laboriosa do que a técnica de detecção de fragmentos em gel de agarose apresenta a grande vantagem de poder ser realizada junto com os testes de paternidade de bovinos que são realizados rotineiramente pelos produtores, apresentando, assim, a melhor relação custo/benefício. Por meio do sistema poolplexing, foram genotipados 346 touros jovens Senepol, dos quais 70 animais (20,23%) apresentaram o genótipo heterozigoto (+/del) e 276 apresentaram o genótipo homozigoto (+/+), sem a presença da deleção nt821. Os touros Senepol heterozigotos apresentaram maior área de olho de lombo (AOL) e menor perímetro escrotal (PE), ambas as características ajustadas para 550 dias. Para os outros fenótipos avaliados não foram observadas diferenças estatísticas significativas (p<0,05). Alguns desses efeitos causados pela mutação nt821 podem ser considerados vantajosos do ponto de vista do produtor, como AOL enquanto que outros são desvantajosos, como foi para PE. Neste sentido, cabe ao produtor à decisão de manter ou não este alelo na população.
In several breeds of beef cattle, double musculature syndrome is observed, characterized by the presence of muscle hypertrophy phenotype, which is a hereditary condition controlled by the GDF-8 (Growth Differentiation Factor-8) gene. In Senepol cattle, the mutation nt821, located in exon III of this gene, is responsible for this syndrome. In this context, the objectives of this work were to evaluate three genotyping methodologies of this mutation, in order to verify the most appropriate cost/benefit relationship and verify the association of the mutated allele with economic traits in young Senepol bulls. Genomic DNA was extracted from biological samples of 17 calves, seven with the phenotype of the double musculature and ten without the phenotype. The DNA samples were quantified by spectrophotometry and their integrity evaluated in 0.8% agarose gel. Subsequently, they were submitted to the polymerase chain reaction (PCR) for exon III amplification. The methodologies were tested: 1) direct sequencing of exon III of the GDF-8 gene; 2) detection of DNA fragments in 4% agarose gel and 3) detection of fragments in automatic DNA sequencing. In the first methodology tested, it was possible to accurately detect the genotypes of all individuals, however, this methodology was the most onerous. The detection technique of 4% agarose gel fragments resulted in 100% agreement with the genotypes obtained from these same animals by sequencing. However, in every electrophoretic run it is necessary to add control DNA samples from previously genotyped animals to ensure a better visualization of the expected genotypes, thus reducing technical artifacts. This methodology was the one that presented the lowest cost. With the development of a poolplexing system, the detection of fragments in an automatic sequencing despite being a more costly and laborious methodology than the technique of detecting fragments in agarose gel has the great advantage of being able to be carried out together with the paternity tests of cattle that are routinely carried out by producers, thus presenting the best cost/benefit ratio. A total of 346 Senepol bulls were genotyped, of which 70 animals (20.23%) had the heterozygous genotype (+/del) and 276 had the genotype homozygous (+/+), without the presence of the nt821 deletion. Heterozygous Senepol bulls presented greater loin eye area (AOL) and lower scrotal circumference (PE), both traits adjusted for 550 days. For the other phenotypes evaluated, no significant statistical differences were observed (p<0.05). Some of these effects caused by the nt821 mutation can be considered advantageous from the producer's point of view, such as AOL while others are disadvantageous, as it was for PE. In this sense, it is up to the producer to decide whether or not to maintain this allele in the population.
Resumo
Identificou-se e determinou-se a freqüência do gene miostatina (GDF-8) normal e mutante em rebanhos Marchigiana, em 377 bovinos da raça Marchigiana, criados nos estados de São Paulo e Paraná. Identificaram-se 37,9 por cento de animais normais, 55,2 por cento de portadores e 6,9 por cento homozigotos afetados para musculatura dupla. Estes resultados indicam que os criadores têm interesse na característica musculatura dupla, promovendo, ainda que aleatoriamente, selecão a favor da mutação.(AU)
The frequency of the normal myostatin gene (GDF-8) and the mutant allele in Marchigiana herds was detected. Three hundred and seventy-seven animals of Marchigiana breed raised in São Paulo and Paraná States, Brazil, were tested. The results showed that 37.9 percent were homozygous normal animals, 55.2 percent heterozygous and 6.9 percent homozygous double muscling. The results suggest the interest of the breeders in having interest in the character double muscling, randomly promoting, the selection in favor of the mutation.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Frequência do Gene , Desenvolvimento Muscular , Mutação/genética , Reação em Cadeia da Polimerase/métodosResumo
A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma doença recessiva ligada ao cromossomo ?X?, causada pela ausência da proteína distrofina que ocorre em vários tecidos, sendo caracterizada por uma severa disfunção da musculatura esquelética ocasionando morte prematura do paciente. Embora controverso, alguns autores reportaram que o GH (hormônio do crescimento) estaria implicado no desenvolvimento da doença e poderia ser utilizado no tratamento da mesma. Desta forma, neste estudo a dosagem sérica de IGF-I (Fator I de crescimento Similar à insulina) um peptídeo GH-dependente que regula as ações do hormônio do crescimento, foi realizada no intuito de verificar se existe correlação ou não entre o desenvolvimento da doença e a concentração sérica de IGF-I. As variações nos níveis deste hormônio foram demonstradas com o decorrer da idade sendo que, nos três primeiros meses todos os animais apresentaram comportamento semelhante com aumento dos níveis de IGF-I, porém no quarto mês os animais Distróficos benignos apresentaram redução média de 34% deste hormônio, enquanto ocorreu aumento de 1% no animal não Distrófico. Ainda, as células granulares adenohipofisárias relacionadas à produção do hormônio de crescimento em cães Golden Retriever com Distrofia Muscular apresentam-se maiores do que nos cães Golden Retriever não distróficos quanto aos seguintes parâmetros (eixo longo, área seccional e volume celular). À microscopia eletrônica de transmissão observamos que as células estudadas apresentam grânulos elétron-densos de parede dupla e distribuídos por todo o citosol. Estes grânulos apresentaram-se maiores nos animais Distróficos quando comparados aos animais não Distróficos
The Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) is a X linked recessive disease, caused by the absence of dystrophin which is found in a variety of tissues and characterized by a severe disfunction of the skeletal musculature that results in a premature death of the patient. Theoretically, the growth hormone (GH) is considered to be associated to the development of Muscular Dystrophy and that could be used in its treatment. Hence in this study, a IGF-I (Insulin like growth factor-I) seric dosage was performed to verify whether or not there might be a between the evolution of the disease and IGF´s seric concentration. IGF-I is a GH-peptide dependent that regulates the GH actions during the growth. Changes in IGF-I levels were recorded during the dog?s post-natal development. On the first trimester, all animals presented similar IGF-I levels, although in the fourth month, a stark 34% decrease was observed in the dystrophic animals whereas a 1% increase was seen in the healthy dog. Furthermore, the GRMD´s granule-containing cells were larger when compared to the healthy animals. The following parameters in this comparison: long axis, cross-sectional area and cell volume. The ultrastructural study showed electron-dense granules composed by a double membrane and homogeneously distributed through the cell. These granules were larger in the dystrophic animals then in healthy dogs
Resumo
Foram genotipados por DNA 377 bovinos da raça Marchigiana e 20 mestiços Marchigiana x Nelore, criados em São Paulo e Paraná, para determinação da presença do gene da miostatina (GDF-8). Os resultados obtidos mostraram porcentagem de 37,9% de animais normais (NN), 55,2% de portadores (DN) e 6,9% homozigotos para musculatura dupla (DD). Esses resultados indicam que os criadores têm interesse na característica musculatura dupla e têm selecionado a favor desse fenótipo, apesar de não ser esse procedimento baseado em testes genéticos para detecção do caracter. Foi realizada, também, a análise por ANOVA (SAS,1996)de 305 registros zootécnicos, para avaliação dos efeitos do gene GDF-8 e fatores não genéticos no peso, ganho de peso (GMD) e altura da cernelha desses animais. O modelo utilizado incluiu ano e estação de nascimento, idade, sexo do animal, genótipo e efeito de fazenda. Neste estudo os animais não diferiram significativamente em peso e ganho de peso entre ano e estação de nascimento, genótipo e efeito de fazenda (P>.05). Apenas aos 48 meses de idade foram observadas diferenças entre os animais dos três genótipos. As médias e desvios padrão para peso (kg) e ganho de peso (kg), de acordo com as idades foram, respectivamente: 70.32±11.71 e 1.14±.56 para 1 mês, 286.05±40.94 e 1.15±.22 para 7 meses, 351.32±70.25 e 1.19±.27 para 9 meses, 444.85±56.61 e 1.17±.14 para 12 meses, 528.91±58.02 e 1.13±.14 para 15 meses, 602.79±63.20 e 1.10±.11 para 18 meses, 691.03±82.14 e 1.04±.11 para 24 meses, 857.59±106.49 e .920±.10 para 36 meses e 990.72±77.56 e .760±.09 para 48 meses. A altura de cernelha não foi significativamente diferente entre ano e estação de nascimento, genótipo e efeito de fazenda (P>.05), mas foi significativa para sexo e idade (P<.05). As médias e desvios padrão para altura de cernelha (m), de acordo com as idades foram 1.22±0.010 para 12 meses, 1.32±0.009 para 15 meses, 1.36±0.008 para 18 meses, 1.39±0.006 para 24 meses e 1.41±0.016 para 36 meses. O estudo demonstrou que não há diferenças nas medições de altura de cernelha em animais Marchigiana criados no Brasil, comparando-se os animais normais com os que apresentam o gene mutante da miostatina