Biofumigation with species of the Brassicaceae family: a review / Biofumigação com espécies da família Brassicaceae: uma revisão

Biofumigation involves the release of volatile biocidal compounds in the soil through the incorporation of certain plants and their residues. Species of the Brassicaceae family are the most widely used plants for biofumigation. These plants contain glucosinolates, which produce compounds, such as isothiocyanates, following enzymatic hydrolysis, with scientifically proven fungicidal effects. The most commonly used brassica species belong to the genera Brassica, Raphanus, Sinapis, and Eruca. In addition to the release of compounds in the soil, complementary mechanisms, such as the supply of organic matter and nutrients, and improvement of the soil structure, also play a role in biofumigation. In the past two decades, several studies on the use of brassica residues in biofumigation have been published, showing promising results in the management of soil pathogens (fungi and oomycetes, nematodes, bacteria, and protozoa), weed seeds, and insects. Usage of new biofumigation compounds has also been validated in recent years, including the development of patented technological products such as liquid formulations and pellets. The objective of this article was to review these new developments, beginning with concepts related to biofumigation, and to discuss the mechanisms of action of compounds involving brassica species and the recommendations on usage. Promising examples of the use of this technique are also presented, further detailing the advances in basic and applied knowledge on the subject.(AU)

A biofumigação consiste na liberação de compostos biocidas voláteis no solo a partir da incorporação de determinadas plantas e de seus resíduos. As espécies da família Brassicaceae são as plantas mais utilizadas na biofumigação. Em sua constituição, possuem os glucosinolatos que, após hidrólise enzimática, produzem compostos como os isotiocianatos com efeito biofungicida comprovado cientificamente. As espécies de brássicas mais utilizadas pertencem aos gêneros Brassica, Raphanus, Sinapis e Eruca. Além da liberação de compostos no solo, mecanismos complementares como o fornecimento de matéria orgânica, nutrientes e melhoria da estrutura do solo, também desempenham papel complementar na biofumigação. Diversos estudos foram publicados nas últimas duas décadas com a utilização de resíduos de brássicas na biofumigação e apresentaram resultados promissores no manejo de patógenos de solo (fungos e oomicetos, nematóides, bactérias e protozoários), sementes de plantas daninhas e insetos. Novas formas de utilização também foram validadas nos últimos anos, inclusive com o desenvolvimento de produtos tecnológicos patenteados como formulações líquidas e pellets. Nesta revisão, objetivamos apresentar estes novos desdobramentos iniciando com os conceitos relacionados à biofumigação. Em seguida, apresentamos os mecanismos de ação e compostos envolvidos; as espécies de brássicas, produtos e recomendações para sua utilização; e exemplos promissores de adoção da técnica a nível mundial. Pretende-se, dessa forma, detalhar os avanços no conhecimento básico e aplicado do assunto.(AU)

Segmental enteritis associated with Pythium insidiosum infection in a horse

Background: Pythiosis is an infectious disease caused by the oomycete Pythium insidiosum, with higher occurrence in wetlands and hot climate regions. This microorganism develops its cycle in aquatic plants, and most cases happen because of the contact of animals or people with water containing the motile zoospores (infectious form). Horses are the principal species affected and develop principally cutaneous and subcutaneous lesions, but the gastrointestinal tract is seldom affected. Humans develop various forms of pythiosis, such as a vascular form. The objectives of the current study are to describe an unusual case of intestinal pythiosis, its clinical signs, aspects of pathogenesis, and diagnosis. Case: A 13-year-old Crioula mare, from Santa Maria, RS, Brazil, presented with reduced food and water intake, apathy, restlessness, rolling, nasal reflux, firm abdomen upon palpation, and tachypnea during 2 days. The horses of this farm were fed native pasture and horse feed, and they had access to a nearby pond. Two days following the start of the clinical signs, the horse died and was necropsied on the farm. During necropsy, there was around 400 mL of reddish effusion in the abdominal cavity (modified transudate). A 15 cm segment of jejunum was firm upon palpation and had a severe transmural thickening. The wall of the affected area was up to 3 cm in thickness and firm, with small yellowish and irregular masses that stood out and looked friable, interpreted as kunkers. Microscopically, the yellowish masses (kunkers) were characterized by dense accumulations of intact and degenerate eosinophils (eosinophilic necrosis). Within these kunkers, and also on their periphery, there were multiple negatively stained hyphal profiles. Hyphae were also seen on the wall of small arteries inside the kunkers. These hyphae had nearly parallel walls and were occasionally...

Segmental enteritis associated with Pythium insidiosum infection in a horse

Background: Pythiosis is an infectious disease caused by the oomycete Pythium insidiosum, with higher occurrence in wetlands and hot climate regions. This microorganism develops its cycle in aquatic plants, and most cases happen because of the contact of animals or people with water containing the motile zoospores (infectious form). Horses are the principal species affected and develop principally cutaneous and subcutaneous lesions, but the gastrointestinal tract is seldom affected. Humans develop various forms of pythiosis, such as a vascular form. The objectives of the current study are to describe an unusual case of intestinal pythiosis, its clinical signs, aspects of pathogenesis, and diagnosis. Case: A 13-year-old Crioula mare, from Santa Maria, RS, Brazil, presented with reduced food and water intake, apathy, restlessness, rolling, nasal reflux, firm abdomen upon palpation, and tachypnea during 2 days. The horses of this farm were fed native pasture and horse feed, and they had access to a nearby pond. Two days following the start of the clinical signs, the horse died and was necropsied on the farm. During necropsy, there was around 400 mL of reddish effusion in the abdominal cavity (modified transudate). A 15 cm segment of jejunum was firm upon palpation and had a severe transmural thickening. The wall of the affected area was up to 3 cm in thickness and firm, with small yellowish and irregular masses that stood out and looked friable, interpreted as kunkers. Microscopically, the yellowish masses (kunkers) were characterized by dense accumulations of intact and degenerate eosinophils (eosinophilic necrosis). Within these kunkers, and also on their periphery, there were multiple negatively stained hyphal profiles. Hyphae were also seen on the wall of small arteries inside the kunkers. These hyphae had nearly parallel walls and were occasionally...(AU)

Culture medium and inoculation methodology for the study of soft root rot caused by Phytopythium sp / Meio de cultura e metodologia de inoculação para o estudo da podridão mole de raízes causada por Phytopythium sp

Cassava (Manihot esculenta Crantz) is an important crop in Brazil and Pará is the major producer of roots. High temperature and humidity of tropical regions favor the development of various diseases, among them the cassava root rot. The objective of this study was to evaluate the effect of luminosity and culture medium on the mycelial growth and sporulation of Phytopythium sp. associated with different methods of inoculation on cassava roots. In vitro tests for pathogen growth were established in a 2 x 6 factorial design (luminosity x culture medium) with five replicates and the means were compared by t test (P0.05). The culture medium containing sweet cassava root produced greater mycelial development and higher pathogen sporulation and it was the most suitable medium for pathogen culture. The culture under absence of light generated better mycelial growth than culture under 12 hour of light. Regarding the type of inoculation, the response was better when deeper injuries were induced.(AU)

A mandioca (Manihot esculenta Crantz) é uma importante cultura para o Brasil, onde o Pará é o principal produtor de raízes. Regiões tropicais com alta umidade e temperatura favorecem o desenvolvimento de diversas doenças, como as podridões de raiz. O presente estudo tem como objetivo avaliar o efeito da luminosidade e de meios de cultura no crescimento micelial e na esporulação de Phytopythium sp. e analisar métodos de inoculação do patógeno em raízes de mandioca destacadas. Os ensaios in vitro foram instalados em esquema fatorial 2x6 (luminosidade x meio de cultura), com cinco repetições e as médias comparadas pelo teste t (p0,05). O meio de cultura contendo raiz de mandioca mansa proporcionou maior desenvolvimento micelial e maior esporulação do patógeno e é o mais adequado para o cultivo do patógeno. O cultivo sob ausência de luz gerou melhor crescimento micelial do que o cultivo sob 12 horas de luz. Quanto ao tipo de inoculação, a resposta foi melhor nas raízes que obtiveram ferimentos mais profundos.(AU)

Mastite por Pythium insidiosum em éguas / Mastitis by Pythium insidiosum in mares

Background: Pythiosis is a chronic inflammatory disease caused by the oomycete Pythium insidiosum. This disease hasbeen reported in several species, but most cases occur in horses. In this species, the cutaneous form is more prevalent,with occasional involvement of adjacent lymph nodes and bone tissue. The involvement of the mammary glands was notproperly characterized. Therefore, the aim of this study is to describe cases of pythiosis with the involvement of the mammary glands in mares.Case: A retrospective study of all biopsy samples and necropsy examinations of horses, performed at the Animal PathologyLaboratory of the Federal University of Campina Grande from January 2000 to December 2018, was carried out. During thestudy period, 142 cases of cutaneous pythiosis were identified. Of these, in three the lesions extended to the mammary glands.Mares with 3-, 7- and 12-year-old, mongrel, from the backlands of the Paraiba were affected. On physical examination, themares presented swollen mammary glands and multifocal wounds, which discharge serosanguinolent secretion. Clinicalevolution ranged from 15 to 30 days. The animals had been medicated, but the wounds did not heal and mastectomies wereperformed. Macroscopically, the mammary glands were enlarged and with multifocal areas of ulceration measuring 1 to 3.5cm in diameter. At the cut surface, they exhibited fistulous tracts containing kunkers. In the histopathological evaluation,was observed diffuse and marked inflammatory infiltrate of eosinophils extending through the deep dermis and interlobularmammary stroma; and multifocal areas, sometimes focally extensive, of eosinophilic necrosis with intralesional negativeimages of hyphae. In histological sections stained by periodic acid-Schiff, the walls of the hyphae were weakly stained inblue; but when impregnated by Grocott methenamine silver, they were strongly marked in black...(AU)

Mastite por Pythium insidiosum em éguas / Mastitis by Pythium insidiosum in mares

Background: Pythiosis is a chronic inflammatory disease caused by the oomycete Pythium insidiosum. This disease hasbeen reported in several species, but most cases occur in horses. In this species, the cutaneous form is more prevalent,with occasional involvement of adjacent lymph nodes and bone tissue. The involvement of the mammary glands was notproperly characterized. Therefore, the aim of this study is to describe cases of pythiosis with the involvement of the mammary glands in mares.Case: A retrospective study of all biopsy samples and necropsy examinations of horses, performed at the Animal PathologyLaboratory of the Federal University of Campina Grande from January 2000 to December 2018, was carried out. During thestudy period, 142 cases of cutaneous pythiosis were identified. Of these, in three the lesions extended to the mammary glands.Mares with 3-, 7- and 12-year-old, mongrel, from the backlands of the Paraiba were affected. On physical examination, themares presented swollen mammary glands and multifocal wounds, which discharge serosanguinolent secretion. Clinicalevolution ranged from 15 to 30 days. The animals had been medicated, but the wounds did not heal and mastectomies wereperformed. Macroscopically, the mammary glands were enlarged and with multifocal areas of ulceration measuring 1 to 3.5cm in diameter. At the cut surface, they exhibited fistulous tracts containing kunkers. In the histopathological evaluation,was observed diffuse and marked inflammatory infiltrate of eosinophils extending through the deep dermis and interlobularmammary stroma; and multifocal areas, sometimes focally extensive, of eosinophilic necrosis with intralesional negativeimages of hyphae. In histological sections stained by periodic acid-Schiff, the walls of the hyphae were weakly stained inblue; but when impregnated by Grocott methenamine silver, they were strongly marked in black...

Isolation of Saprolegnia aenigmatica oomycetes and protocol for experimental infection of pacu (Piaractus mesopotamicus) / Isolamento do oomiceto Saprolegnia aenigmatica e protocolo de infecção experimental em pacu (Piaractus mesopotamicus)

Successful disease treatment depends on molecular studies under indoor conditions with experimental infection protocols that facilitate understanding the disease and the drug`s efficacy. The internal transcribed spacer (ITS) region was sequenced from three isolates, which were identified as Saprolegnia aenigmatica. Subsequently, healthy fish were immunosuppressed with dexamethasone (1.2 mg kg-1) and descaled to the skin using a sharp scalpel. These individuals were isolated in individual aquariums maintained at 22°C. Individuals in one group were subcutaneously inoculated with 9,000 zoospores (DDZ treatment), a second group was exposed to oomycetes in water with three colonized baits (DDB), a third group was maintained in water without zoospores (DD), and a control group (C) consisted of healthy animals. After 48 and 96 hours, two animals from each group were euthanized for fungal reisolation. The fish from groups DD and C did not show clinical signs, and no oomycetes were isolated. The animals from the DDZ and DDB groups showed cotton-wool-like masses on the skin, and S. aenigmatica was re-isolated. Thus, for infection using zoospores or baits parasitized by S. aenigmatica, an immunosuppressor (dexamethasone) and a sharp scalpel can be used effectively to establish an experimental infection in P. mesopotamicus.

O sucesso do tratamento de uma enfermidade depende do estudo de moléculas em condições de laboratório por meio de protocolos de infecção experimental que viabilizam a compreensão da doença e da eficácia dos fármacos. Pela sequência ITS foram identificadas três cepas de Saprolegnia aenigmatica. Dessa forma, pacus sadios foram submetidos à imunossupressão com dexametasona (1,2 mg kg-1), esfoliados com auxílio de bisturi e distribuídos em aquários a 22ºC. Após este procedimento, um grupo de animais foi inoculado com 9.000 zoósporos/peixe subcutâneo (DEZ), a outro foram adicionadas três iscas colonizadas com o oomiceto na água (DEI), um terceiro grupo foi mantido sem contato com o oomiceto (DE) e um quarto grupo, de animais sadios, representaram o controle (C). Após 48 e 96h deste procedimento, foram eutanaziados animais de cada grupo para reisolamento. Os animais do grupo DE e C não apresentaram sinais clínicos e não foi reisolado o oomiceto. Porém, tanto os animais do grupo DEZ quanto como os animais do grupo DEI apresentaram micélio branco na pele e foi reisolado Saprolegnia aenigmatica. Assim, a infecção com zoósporos ou com iscas colonizadas por S. aenigmatica, com o uso de dexametasona e abrasivo epitelial são formas eficazes de infecção experimental em P. mesopotamicus.

Isolation of Saprolegnia aenigmatica oomycetes and protocol for experimental infection of pacu (Piaractus mesopotamicus) / Isolamento do oomiceto Saprolegnia aenigmatica e protocolo de infecção experimental em pacu (Piaractus mesopotamicus)

Successful disease treatment depends on molecular studies under indoor conditions with experimental infection protocols that facilitate understanding the disease and the drug`s efficacy. The internal transcribed spacer (ITS) region was sequenced from three isolates, which were identified as Saprolegnia aenigmatica. Subsequently, healthy fish were immunosuppressed with dexamethasone (1.2 mg kg-1) and descaled to the skin using a sharp scalpel. These individuals were isolated in individual aquariums maintained at 22°C. Individuals in one group were subcutaneously inoculated with 9,000 zoospores (DDZ treatment), a second group was exposed to oomycetes in water with three colonized baits (DDB), a third group was maintained in water without zoospores (DD), and a control group (C) consisted of healthy animals. After 48 and 96 hours, two animals from each group were euthanized for fungal reisolation. The fish from groups DD and C did not show clinical signs, and no oomycetes were isolated. The animals from the DDZ and DDB groups showed cotton-wool-like masses on the skin, and S. aenigmatica was re-isolated. Thus, for infection using zoospores or baits parasitized by S. aenigmatica, an immunosuppressor (dexamethasone) and a sharp scalpel can be used effectively to establish an experimental infection in P. mesopotamicus.(AU)

O sucesso do tratamento de uma enfermidade depende do estudo de moléculas em condições de laboratório por meio de protocolos de infecção experimental que viabilizam a compreensão da doença e da eficácia dos fármacos. Pela sequência ITS foram identificadas três cepas de Saprolegnia aenigmatica. Dessa forma, pacus sadios foram submetidos à imunossupressão com dexametasona (1,2 mg kg-1), esfoliados com auxílio de bisturi e distribuídos em aquários a 22ºC. Após este procedimento, um grupo de animais foi inoculado com 9.000 zoósporos/peixe subcutâneo (DEZ), a outro foram adicionadas três iscas colonizadas com o oomiceto na água (DEI), um terceiro grupo foi mantido sem contato com o oomiceto (DE) e um quarto grupo, de animais sadios, representaram o controle (C). Após 48 e 96h deste procedimento, foram eutanaziados animais de cada grupo para reisolamento. Os animais do grupo DE e C não apresentaram sinais clínicos e não foi reisolado o oomiceto. Porém, tanto os animais do grupo DEZ quanto como os animais do grupo DEI apresentaram micélio branco na pele e foi reisolado Saprolegnia aenigmatica. Assim, a infecção com zoósporos ou com iscas colonizadas por S. aenigmatica, com o uso de dexametasona e abrasivo epitelial são formas eficazes de infecção experimental em P. mesopotamicus.(AU)

Biological activity of 7beta-acetoxywithanolide D isolated from Acnistus arborescens / Atividade biológica de 7beta-acetoxivitanolido D isolado de Acnistus arborescens

Many oomycete species are plant pathogens and are responsible for causing significant losses in agriculture. Currently, plant pathogen control is carried out by chemical, biological and physical methods. However, due to the development of resistance to these methods by some pathogens, it is imperative that alternative methods are developed. Brazilian biodiversity is well-known for its species richness and is considered a promising source of natural products. Among the vascular plants, the family Solanaceae A. Juss. (Solanaceae) is considered one of the largest, with distributions across all tropical and temperate regions of the world. The Solanaceae family presents a high diversity of species of economic importance as sources of food, medicinal and ornamental properties. Plants of this family are sources of secondary metabolites of various chemical classes that possess potential diverse applications. Therefore, chemical and biological investigations of these compounds are extremely important as they present alternatives for their potential use in the control of plant pathogens. Here, we report for the first time, the biological activity of 7β-acetoxywithanolide D, a compound isolated from Acnistus arborescens, against the oomycete Phytophthora cinnamomi. With these results, we emphasize the importance of such studies on plant secondary metabolites, which may present coadjuvant options in the control of plant pathogens.(AU)

Muitas espécies de oomicetos são fitopatógenos e responsáveis por causar perdas significativas na agricultura. Atualmente, o controle de fitopatógenos é realizado por métodos químicos, biológicos e físicos. No entanto, alguns agentes patogênicos adquirem resistência a esses métodos, por isso é necessário desenvolver constantemente alternativas para controlá-los. A biodiversidade brasileira é conhecida devido à sua riqueza de espécies, sendo considerada uma fonte promissora de produtos naturais. Entre as plantas vasculares, a família Solanaceae A. Juss. (Solanaceae) é considerada uma das maiores, apresentando distribuição em todas as regiões tropicais e temperadas do mundo. A família Solanaceae apresenta alta diversidade de espécies de importância econômica como fonte de alimentos, propriedades medicinais e ornamentais. As plantas desta família são fontes de metabolitos secundários de várias classes químicas com as mais diversas aplicações. Portanto, as investigações químicas e biológicas desses compostos são extremamente importantes e podem se tornar uma alternativa para o controle dos agentes patogênicos das plantas. Aqui, relatamos pela primeira vez a atividade biológica do composto 7β-acetoxivitanolido D isolado de Acnistus arborescens contra o oomiceto Phytophthora cinnamomi. Com este resultado, enfatizamos a importância de estudos com metabolitos secundários de plantas, que podem ser uma opção coadjuvante no controle de fitopatógenos.(AU)

Epidemiologia de micoses, pitiose e micotoxicoses em equinos no sudeste do Rio Grande do Sul

ABSTRACT: The epidemiological aspects of diseases caused by fungi and oomycetes in horses in southeastern Rio Grande do Sul, Brazil, is described. The epidemiological rates, their causes, and health importance in the region were established. A descriptive epidemiology study was carried out in relation of potential risk factors. The impact on these diseases in the region was measured. From 1978 to 2014, pythiosis had a prevalence of 49.71% (86/173), and mycotoxicoses of 30.05% (52/173), with 45 cases of leukoencephalomalacia and 7 of ergotism. The prevalence of fungal infections was 19.65% (34/173) of cases. Dermatophytosis was the most prevalent fungal infection with 58.82% (20/34) of cases. The most isolated dermatophyte species were Trichophyton mentagrophytes 60% (12/20), Trichophyton equinum 25% (5/20) and Microsporum gypseum, Microsporum canis, and Trichophyton verrucosum, both responsible for 5% (1/20) of infections. Rhinosporidose was diagnosed in 35.29% (12/34) of cases. Uterine mycosis caused by Candida albicans and Cryptococcus laurentii was observed at 5.88% (2/34) of cases. Cladosporium sp. allergy was noted in one record. According to the incidence from 1990 to 2014, pythiosis had median incidence (MI) of 2.98 and interquartile range (DI) of 3.82. Mares were 4.18 times likely to develop the disease then males. The disease occurs in the region in every season. Leukoencephalomalacia had MI of 0.0; DI 1.00 and male horses were 3.4 times more likely than mares to develop the disease. Leukoencephalomalacia was 6 times more likely to occur during winter. Ergotism had MI of 0.00; DI of 0.000, rhinosporidiosis MI of 0.00, DI of 0.088 and ringworm MI of 0.00, and DI of 0.935. In the study pythiosis had the highest prevalence among the diseases observed, and may be considered endemic in the region. The magnitude of the diseases observed may be even greater within the equine herd, since these diseases are not of obligatory notification and some are well known by veterinarians and owners, who often do not obtain a laboratory confirmation of the diagnosis.

RESUMO: Descrevem-se os aspectos epidemiológicos das doenças causadas por fungos e oomicetos na população de equinos na região sudeste do Rio Grande do Sul, estabelecendo as taxas epidemiológicas, suas causas e sua importância sanitária na região. Foi realizada a epidemiologia descritiva por meio do cálculo da incidência das doenças encontradas ao longo dos anos e verificada a existência de associação entre a ocorrência dessas enfermidades e o sexo, a raça e a estação do ano. Entre os anos de 1978 e 2014 a pitiose teve prevalência de 49,71% (86/173), as micotoxicoses 30,05% (52/173), sendo 45 casos de leucoencefalomalácia e sete de ergotismo. As micoses tiveram prevalência de 19,65% (34/173), sendo as dermatofitoses as mais prevalentes com 58,82% (20/34) dos casos. As espécies de dermatófitos mais frequentemente isoladas foram Trichophyton mentagrophytes 60% (12/20), Trichophyton equinum 25% (5/20) e Microsporum gypseum, Microsporum canis e Trichophyton verrucosum ambos responsáveis por 5% (1/20) das infecções. Rinosporidiose foi diagnosticada em 35,29% (12/34) dos casos. Micoses uterinas causadas por Candida albicans e Cryptococcus laurentii foram observadas em 5,88% (2/34) dos casos. Alergia por Cladosporium sp. teve um registro. De acordo com as incidências calculadas entre 1990 e 2014 a pitiose teve incidência mediana (IM) 2,98 e distância interquartil (DI) =3,82, as fêmeas tiveram chance 4,18 vezes maiores de desenvolver a doença, a enfermidade ocorre independente das estações climáticas. A leucoencefalomalácia teve IM=0,0; DI 1,00 e equinos machos tiveram 3,4 vezes mais chance de desenvolver a doença que fêmeas, no inverno a possibilidade de ocorrência dessa enfermidade foi seis vezes maior. O ergotismo teve IM = 0,00; DI = 0,000, rinosporidiose IM=0,00; DI=0,088 e dermatofitose IM=0,00; DI=0,935. A pitiose foi mais prevalente entre as doenças encontradas, podendo ser considerada endêmica na região. Considera-se que a magnitude das doenças possa ser ainda maior dentro do rebanho equino, uma vez que as doenças descritas não são de notificação obrigatória e algumas são bem conhecidas por veterinários e proprietários, que muitas vezes não fazem a confirmação laboratorial do diagnóstico.

Epidemiologia de micoses, pitiose e micotoxicoses em equinos no sudeste do Rio Grande do Sul / Epidemiology of mycoses, pitiosis and micotoxicosis in horses in southeastern Rio Grande do Sul, Brazil

Descrevem-se os aspectos epidemiológicos das doenças causadas por fungos e oomicetos na população de equinos na região sudeste do Rio Grande do Sul, estabelecendo as taxas epidemiológicas, suas causas e sua importância sanitária na região. Foi realizada a epidemiologia descritiva por meio do cálculo da incidência das doenças encontradas ao longo dos anos e verificada a existência de associação entre a ocorrência dessas enfermidades e o sexo, a raça e a estação do ano. Entre os anos de 1978 e 2014 a pitiose teve prevalência de 49,71% (86/173), as micotoxicoses 30,05% (52/173), sendo 45 casos de leucoencefalomalácia e sete de ergotismo. As micoses tiveram prevalência de 19,65% (34/173), sendo as dermatofitoses as mais prevalentes com 58,82% (20/34) dos casos. As espécies de dermatófitos mais frequentemente isoladas foram Trichophyton mentagrophytes 60% (12/20), Trichophyton equinum 25% (5/20) e Microsporum gypseum, Microsporum canis e Trichophyton verrucosum ambos responsáveis por 5% (1/20) das infecções. Rinosporidiose foi diagnosticada em 35,29% (12/34) dos casos. Micoses uterinas causadas por Candida albicans e Cryptococcus laurentii foram observadas em 5,88% (2/34) dos casos. Alergia por Cladosporium sp. teve um registro. De acordo com as incidências calculadas entre 1990 e 2014 a pitiose teve incidência mediana (IM) 2,98 e distância interquartil (DI) =3,82, as fêmeas tiveram chance 4,18 vezes maiores de desenvolver a doença, a enfermidade ocorre independente das estações climáticas. A leucoencefalomalácia teve IM=0,0; DI 1,00 e equinos machos tiveram 3,4 vezes mais chance de desenvolver a doença que fêmeas, no inverno a possibilidade de ocorrência dessa enfermidade foi seis vezes maior. O ergotismo teve IM = 0,00; DI = 0,000, rinosporidiose IM=0,00; DI=0,088 e dermatofitose IM=0,00; DI=0,935. A pitiose foi mais prevalente entre as doenças encontradas, podendo ser considerada endêmica na região. Considera-se que a magnitude das doenças possa ser ainda maior dentro do rebanho equino, uma vez que as doenças descritas não são de notificação obrigatória e algumas são bem conhecidas por veterinários e proprietários, que muitas vezes não fazem a confirmação laboratorial do diagnóstico.(AU)

The epidemiological aspects of diseases caused by fungi and oomycetes in horses in southeastern Rio Grande do Sul, Brazil, is described. The epidemiological rates, their causes, and health importance in the region were established. A descriptive epidemiology study was carried out in relation of potential risk factors. The impact on these diseases in the region was measured. From 1978 to 2014, pythiosis had a prevalence of 49.71% (86/173), and mycotoxicoses of 30.05% (52/173), with 45 cases of leukoencephalomalacia and 7 of ergotism. The prevalence of fungal infections was 19.65% (34/173) of cases. Dermatophytosis was the most prevalent fungal infection with 58.82% (20/34) of cases. The most isolated dermatophyte species were Trichophyton mentagrophytes 60% (12/20), Trichophyton equinum 25% (5/20) and Microsporum gypseum, Microsporum canis, and Trichophyton verrucosum, both responsible for 5% (1/20) of infections. Rhinosporidose was diagnosed in 35.29% (12/34) of cases. Uterine mycosis caused by Candida albicans and Cryptococcus laurentii was observed at 5.88% (2/34) of cases. Cladosporium sp. allergy was noted in one record. According to the incidence from 1990 to 2014, pythiosis had median incidence (MI) of 2.98 and interquartile range (DI) of 3.82. Mares were 4.18 times likely to develop the disease then males. The disease occurs in the region in every season. Leukoencephalomalacia had MI of 0.0; DI 1.00 and male horses were 3.4 times more likely than mares to develop the disease. Leukoencephalomalacia was 6 times more likely to occur during winter. Ergotism had MI of 0.00; DI of 0.000, rhinosporidiosis MI of 0.00, DI of 0.088 and ringworm MI of 0.00, and DI of 0.935. In the study pythiosis had the highest prevalence among the diseases observed, and may be considered endemic in the region. The magnitude of the diseases observed may be even greater within the equine herd, since these diseases are not of obligatory notification and some are well known by veterinarians and owners, who often do not obtain a laboratory confirmation of the diagnosis.(AU)

Epidemiologia de micoses, pitiose e micotoxicoses em equinos no sudeste do Rio Grande do Sul / Epidemiology of mycoses, pitiosis and micotoxicosis in horses in southeastern Rio Grande do Sul, Brazil

Descrevem-se os aspectos epidemiológicos das doenças causadas por fungos e oomicetos na população de equinos na região sudeste do Rio Grande do Sul, estabelecendo as taxas epidemiológicas, suas causas e sua importância sanitária na região. Foi realizada a epidemiologia descritiva por meio do cálculo da incidência das doenças encontradas ao longo dos anos e verificada a existência de associação entre a ocorrência dessas enfermidades e o sexo, a raça e a estação do ano. Entre os anos de 1978 e 2014 a pitiose teve prevalência de 49,71% (86/173), as micotoxicoses 30,05% (52/173), sendo 45 casos de leucoencefalomalácia e sete de ergotismo. As micoses tiveram prevalência de 19,65% (34/173), sendo as dermatofitoses as mais prevalentes com 58,82% (20/34) dos casos. As espécies de dermatófitos mais frequentemente isoladas foram Trichophyton mentagrophytes 60% (12/20), Trichophyton equinum 25% (5/20) e Microsporum gypseum, Microsporum canis e Trichophyton verrucosum ambos responsáveis por 5% (1/20) das infecções. Rinosporidiose foi diagnosticada em 35,29% (12/34) dos casos. Micoses uterinas causadas por Candida albicans e Cryptococcus laurentii foram observadas em 5,88% (2/34) dos casos. Alergia por Cladosporium sp. teve um registro. De acordo com as incidências calculadas entre 1990 e 2014 a pitiose teve incidência mediana (IM) 2,98 e distância interquartil (DI) =3,82, as fêmeas tiveram chance 4,18 vezes maiores de desenvolver a doença, a enfermidade ocorre independente das estações climáticas. A leucoencefalomalácia teve IM=0,0; DI 1,00 e equinos machos tiveram 3,4 vezes mais chance de desenvolver a doença que fêmeas, no inverno a possibilidade de ocorrência dessa enfermidade foi seis vezes maior. O ergotismo teve IM = 0,00; DI = 0,000, rinosporidiose IM=0,00; DI=0,088 e dermatofitose IM=0,00; DI=0,935. A pitiose foi mais prevalente entre as doenças encontradas, podendo ser considerada endêmica na região. Considera-se que a magnitude das doenças possa ser ainda maior dentro do rebanho equino, uma vez que as doenças descritas não são de notificação obrigatória e algumas são bem conhecidas por veterinários e proprietários, que muitas vezes não fazem a confirmação laboratorial do diagnóstico.(AU)

The epidemiological aspects of diseases caused by fungi and oomycetes in horses in southeastern Rio Grande do Sul, Brazil, is described. The epidemiological rates, their causes, and health importance in the region were established. A descriptive epidemiology study was carried out in relation of potential risk factors. The impact on these diseases in the region was measured. From 1978 to 2014, pythiosis had a prevalence of 49.71% (86/173), and mycotoxicoses of 30.05% (52/173), with 45 cases of leukoencephalomalacia and 7 of ergotism. The prevalence of fungal infections was 19.65% (34/173) of cases. Dermatophytosis was the most prevalent fungal infection with 58.82% (20/34) of cases. The most isolated dermatophyte species were Trichophyton mentagrophytes 60% (12/20), Trichophyton equinum 25% (5/20) and Microsporum gypseum, Microsporum canis, and Trichophyton verrucosum, both responsible for 5% (1/20) of infections. Rhinosporidose was diagnosed in 35.29% (12/34) of cases. Uterine mycosis caused by Candida albicans and Cryptococcus laurentii was observed at 5.88% (2/34) of cases. Cladosporium sp. allergy was noted in one record. According to the incidence from 1990 to 2014, pythiosis had median incidence (MI) of 2.98 and interquartile range (DI) of 3.82. Mares were 4.18 times likely to develop the disease then males. The disease occurs in the region in every season. Leukoencephalomalacia had MI of 0.0; DI 1.00 and male horses were 3.4 times more likely than mares to develop the disease. Leukoencephalomalacia was 6 times more likely to occur during winter. Ergotism had MI of 0.00; DI of 0.000, rhinosporidiosis MI of 0.00, DI of 0.088 and ringworm MI of 0.00, and DI of 0.935. In the study pythiosis had the highest prevalence among the diseases observed, and may be considered endemic in the region. The magnitude of the diseases observed may be even greater within the equine herd, since these diseases are not of obligatory notification and some are well known by veterinarians and owners, who often do not obtain a laboratory confirmation of the diagnosis.(AU)

Isolamento e caracterização de espécies de Pythium de ambientes aquáticos no Estado do Rio Grande do Sul e avaliação da patogenicidade em modelo experimental / Isolation and characterization of Pythium species from swampy areas in the Rio Grande do Sul, Brazil, and evaluation of pathogenicity in an experimental model

Foram coletadas 186 amostras de água de ambientes pantanosos em 13 municípios das regiões Sul, Central e Oeste do Rio Grande do Sul, Brasil, com o objetivo de isolar e caracterizar espécies de Pythium e avaliar a sua patogenicidade empregando coelhos como modelo experimental. Em 11,8% (n=22) das águas coletadas foram isoladas diferentes espécies de Pythium incluindo: P. insidiosum (n=1), P. catenulatum (n=3), P. pachycaule voucher (n=1), P. rhizo-oryzae (n=3), P. torulosum (n=4) e Pythium spp. (n=10). Zoósporos desses micro-organismos foram produzidos in vitro e inoculados por via subcutânea em coelhos, os quais foram avaliados durante 45 dias. Dentre os oomicetos testados, apenas P. insidiosum evidenciou patogenicidade, causando pitiose no modelo experimental, evidenciando que, em nossas condições, apenas esta espécie de Pythium é patógena para mamíferos.(AU)

One hundred and eighty-six water samples from swampy areas were collected in 13 municipalities of South, Central and West regions of Rio Grande do Sul, Brazil, in order to isolate and characterize Pythium species and assess their pathogenicity using rabbits as experimental model. Different Pythium species were isolated from 22 (11.8%) water samples, including P. insidiosum (n=1), P. catenulatum (n=3), P. pachycaule voucher (n=1), P. rhizo-oryzae (n=3), P. torulosum (n=4) e Pythium spp. (n=10). Zoospores of these microorganisms were produced in vitro and inoculated subcutaneously into rabbits, which were assessed over 45 days. Only P. insidiosum showed pathogenicity, causing pythiosis in the experimental model.(AU)

Isolamento e caracterização de espécies de Pythium de ambientes aquáticos no Estado do Rio Grande do Sul e avaliação da patogenicidade em modelo experimental / Isolation and characterization of Pythium species from swampy areas in the Rio Grande do Sul, Brazil, and evaluation of pathogenicity in an experimental model

Foram coletadas 186 amostras de água de ambientes pantanosos em 13 municípios das regiões Sul, Central e Oeste do Rio Grande do Sul, Brasil, com o objetivo de isolar e caracterizar espécies de Pythium e avaliar a sua patogenicidade empregando coelhos como modelo experimental. Em 11,8% (n=22) das águas coletadas foram isoladas diferentes espécies de Pythium incluindo: P. insidiosum (n=1), P. catenulatum (n=3), P. pachycaule voucher (n=1), P. rhizo-oryzae (n=3), P. torulosum (n=4) e Pythium spp. (n=10). Zoósporos desses micro-organismos foram produzidos in vitro e inoculados por via subcutânea em coelhos, os quais foram avaliados durante 45 dias. Dentre os oomicetos testados, apenas P. insidiosum evidenciou patogenicidade, causando pitiose no modelo experimental, evidenciando que, em nossas condições, apenas esta espécie de Pythium é patógena para mamíferos.(AU)

One hundred and eighty-six water samples from swampy areas were collected in 13 municipalities of South, Central and West regions of Rio Grande do Sul, Brazil, in order to isolate and characterize Pythium species and assess their pathogenicity using rabbits as experimental model. Different Pythium species were isolated from 22 (11.8%) water samples, including P. insidiosum (n=1), P. catenulatum (n=3), P. pachycaule voucher (n=1), P. rhizo-oryzae (n=3), P. torulosum (n=4) e Pythium spp. (n=10). Zoospores of these microorganisms were produced in vitro and inoculated subcutaneously into rabbits, which were assessed over 45 days. Only P. insidiosum showed pathogenicity, causing pythiosis in the experimental model.(AU)

Óleo de girassol ozonizado: atividade anti-Pythium insidiosum / Ozonated sunflower seed oil: anti-Pythium insidiosum activity / Aceite de girasol ozonizado: actividad anti-Pythium incidiosum

Pythium insidiosum é um oomiceto aquático e agente etiológico da pitiose, uma doença de prognóstico desfavorável que acomete mamíferos. Apesar dos avanços nas pesquisas em protocolos terapêuticos, a pitiose continua sendo uma enfermidade de difícil tratamento. Neste trabalho verificou-se a atividade antimicrobiana in vitro do óleo de girassol ozonizado (OGO) frente a P.insidiosum, bem como foi avaliada a inibição do crescimento do oomiceto a partir de kunkers submetidos ao tratamento com OGO. O inóculo utilizado no teste de suscetibilidade in vitro foi preparado a partir de cultura micelial de P.insidiosum (n=30) e os ensaios foram realizados de acordo com o protocolo M38-A2 (CLSI). O OGO foi obtido comercialmente e as concentrações testadas variaram de 56.000 119/mL a 0,05119/mL. A leitura foi realizada em 48h de incubação e a presença ou ausência de hifas foi levada em consideração. Os resultados dos testes de suscetibilidade demonstraram que a CIM50 e CIM90 foram de 3500 119/mL e 28000 119/mL, respectivamente. Nos ensaios de inibição do crescimento de P. insidiosum a partir de kunkers observou-se que o OGO inibiu completamente o crescimento do oomiceto. Os resultados obtidos permitem inferir que o OGO apresenta relevante atividade anti-P. insidiosum podendo ser um potente aliado nos protocolos terapêuticos da pitiose.

Pythium insidiosum is an aquatic oomycete and etiologic agent of pythiosis. This disease has an unfavorable prognosis and affecting mammals. Despite advances in treatment, pythiosis remains a difficult disease to treat. In this work, the in vitro ozonated sunflower seed oil (OGO) antimicrobial activity was verified against P.insidiosum isolates. Additionally, we evaluated the oomycete growth inhibition from kunkers submitted to OGO treatment. The inoculum was prepared from P. insidiosum mycelial culture (n=30) and susceptibility tests were performed according to CLSIM38-A2 protocol. OGO was obtained commercially and the concentrations tested ranged from 56,000 119/mL to 0.05119/mL. The reading of results was done at 48h of incubation, and the visual presence or absence of hyphae was taken into consideration. The susceptibility test results showed that the MIC50 and MIC90were 3,500 119/mL and 28,000 119/mL, respectively. In the growth inhibition assays from kunkers it was observed that OGO completely inhibited the oomycete growth. The results allow us to infer that OGO has relevant anti-P. insidiosum activity and may be a potent assistant in the therapeutic protocols of pythiosis.

Pythium insidiosum es un oomiceto acuático y agente etiológico de la pitiosis, una enfermedad con un pronóstico desfavorable que afecta a los mamíferos. Apesar de los avances en la investigación en tratamientos, la pitiosis sigue una enfermedad difícil de tratar. En este trabajo, se verificó la actividad antimicrobiana in vitro del aceite de girasol ozonizado (OGO) contra P.insidiosum, y se evaluó la inhibición del crecimiento del oomiceto en kunkers sometidos al tratamiento con OGO. El inóculo utilizado en la prueba de susceptibilidad se preparó a partir del cultivo micelial de P.insidiosum (n=30) y los ensayos se realizaron de acuerdo con el protocolo M38-A2 (CLSI). El OGO se obtuvo comercialmente y las concentraciones variaron de 56.000 119/mL a 0,05119/mL. La lectura se realizó a las 48h de incubación y se tuvo en cuenta la presencia o ausencia de hifas. Los resultados de los ensayos de susceptibilidad mostraron que CIM50 y CIM90 fueron 3.500 119/mL y 28.000 119/mL, respectivamente. En los ensayos de inhibición del crecimiento de P. insidiosum de los kunkers se observó que OGO inhibía completamente el crecimiento del oomiceto. Los resultados nos permiten inferir que OGO tiene una relevante actividad anti-P. insidiosum y puede ser un poderoso aliado de los protocolos terapéuticos en la pitiosis.

Óleo de girassol ozonizado: atividade anti-Pythium insidiosum / Ozonated sunflower seed oil: anti-Pythium insidiosum activity / Aceite de girasol ozonizado: actividad anti-Pythium incidiosum

Pythium insidiosum é um oomiceto aquático e agente etiológico da pitiose, uma doença de prognóstico desfavorável que acomete mamíferos. Apesar dos avanços nas pesquisas em protocolos terapêuticos, a pitiose continua sendo uma enfermidade de difícil tratamento. Neste trabalho verificou-se a atividade antimicrobiana in vitro do óleo de girassol ozonizado (OGO) frente a P.insidiosum, bem como foi avaliada a inibição do crescimento do oomiceto a partir de kunkers submetidos ao tratamento com OGO. O inóculo utilizado no teste de suscetibilidade in vitro foi preparado a partir de cultura micelial de P.insidiosum (n=30) e os ensaios foram realizados de acordo com o protocolo M38-A2 (CLSI). O OGO foi obtido comercialmente e as concentrações testadas variaram de 56.000 119/mL a 0,05119/mL. A leitura foi realizada em 48h de incubação e a presença ou ausência de hifas foi levada em consideração. Os resultados dos testes de suscetibilidade demonstraram que a CIM50 e CIM90 foram de 3500 119/mL e 28000 119/mL, respectivamente. Nos ensaios de inibição do crescimento de P. insidiosum a partir de kunkers observou-se que o OGO inibiu completamente o crescimento do oomiceto. Os resultados obtidos permitem inferir que o OGO apresenta relevante atividade anti-P. insidiosum podendo ser um potente aliado nos protocolos terapêuticos da pitiose.(AU)

Pythium insidiosum is an aquatic oomycete and etiologic agent of pythiosis. This disease has an unfavorable prognosis and affecting mammals. Despite advances in treatment, pythiosis remains a difficult disease to treat. In this work, the in vitro ozonated sunflower seed oil (OGO) antimicrobial activity was verified against P.insidiosum isolates. Additionally, we evaluated the oomycete growth inhibition from kunkers submitted to OGO treatment. The inoculum was prepared from P. insidiosum mycelial culture (n=30) and susceptibility tests were performed according to CLSIM38-A2 protocol. OGO was obtained commercially and the concentrations tested ranged from 56,000 119/mL to 0.05119/mL. The reading of results was done at 48h of incubation, and the visual presence or absence of hyphae was taken into consideration. The susceptibility test results showed that the MIC50 and MIC90were 3,500 119/mL and 28,000 119/mL, respectively. In the growth inhibition assays from kunkers it was observed that OGO completely inhibited the oomycete growth. The results allow us to infer that OGO has relevant anti-P. insidiosum activity and may be a potent assistant in the therapeutic protocols of pythiosis.(AU)

Pythium insidiosum es un oomiceto acuático y agente etiológico de la pitiosis, una enfermedad con un pronóstico desfavorable que afecta a los mamíferos. Apesar de los avances en la investigación en tratamientos, la pitiosis sigue una enfermedad difícil de tratar. En este trabajo, se verificó la actividad antimicrobiana in vitro del aceite de girasol ozonizado (OGO) contra P.insidiosum, y se evaluó la inhibición del crecimiento del oomiceto en kunkers sometidos al tratamiento con OGO. El inóculo utilizado en la prueba de susceptibilidad se preparó a partir del cultivo micelial de P.insidiosum (n=30) y los ensayos se realizaron de acuerdo con el protocolo M38-A2 (CLSI). El OGO se obtuvo comercialmente y las concentraciones variaron de 56.000 119/mL a 0,05119/mL. La lectura se realizó a las 48h de incubación y se tuvo en cuenta la presencia o ausencia de hifas. Los resultados de los ensayos de susceptibilidad mostraron que CIM50 y CIM90 fueron 3.500 119/mL y 28.000 119/mL, respectivamente. En los ensayos de inhibición del crecimiento de P. insidiosum de los kunkers se observó que OGO inhibía completamente el crecimiento del oomiceto. Los resultados nos permiten inferir que OGO tiene una relevante actividad anti-P. insidiosum y puede ser un poderoso aliado de los protocolos terapéuticos en la pitiosis.(AU)

Genotipagem e Aspectos Filogenéticos e Evolutivos De Pythium insidiosum..

Oomicetos são micro-organismos eucariontes pertencentes a um supergrupo denominado de Stramenopiles-Alveolata-Rhizaria (SAR) que inclui integrantes com características sapróbias e patogênicas. Pythium insidiosum, um patógeno de plantas e mamíferos, destaca-se entre os gêneros de maior importância na linhagem peronosporalean. A pitiose é uma doença granulomatosa crônica de prognóstico desfavorável, amplamente distribuída no mundo. Observa-se, nos últimos anos, um aumento de casos de pitiose, especialmente em animais e humanos, sendo os locais de maior incidência o Brasil e a Tailândia, respectivamente. Destaca-se que muitas lacunas do conhecimento sobre aspectos importantes dessa enfermidade devem ser preenchidas, especialmente em relação à biologia e evolução do agente etiológico, à epidemiologia, ao diagnóstico e à terapêutica. Desta forma, os objetivos do estudo são: (i) utilizar a reação em cadeia da polimerase (PCR) baseada em polimorfismos de nucleotídeos únicos (SNPs) de sequência de DNA ribossomal (rDNA) para identificar e genotipar isolados sulamericanos de P. insidiosum e (ii) analisar as relações filogenéticas e aspectos evolutivos dos peronosporaleans, especialmente de P. insidiosum usando uma abordagem multilocus com um gene mitrocondrial e três genes nucleares. O objetivo (i) foi alcançado através da identificação de P. insidiosum pela técnica de PCR-multiplex baseada em três SNPs. Adicionalmente, o método permitiu identificar a formação de três clados de P. insidiosum (clado I: isolados americanos, incluindo pela primeira vez, um isolado do Uruguai, clado II: isolados tailandeses, japonês e indiano e clado III: isolado tailândes). Os resultados que contemplam o objetivo (ii) corresponde a análise multilocus de 55 oomicetos pelos métodos de Máxima Verossimilhança e Análise Bayesiana. P. insidiosum formou um clado principal monofilético e politômico de isolados americanos; no entanto, Pythium spp. foi parafilético com Phytopythium sp. e Phytophthora spp. Albugo candida foi posicionado como um ramo inicial de peronosporaleans, que foi subdividido em três clados, um dos quais evidenciaram a estreita relação de P. insidiosum, P. aphanidermatum e P. arrhenomanes. Os peronosporaleans divergiram há 136 milhões de anos e P. insidiosum diversificou-se há aproximadamente 24 milhões de anos atrás, com a divergência de isolados americanos e tailandeses, em aproximadamente 17 milhões de anos atrás e diversificação americana posterior ocorrendo há 2,4 milhões de anos atrás. A reconstrução de caráter de estado ancestral sugere que os ancestrais de peronosporaleans apresentavam propriedades fitopatogênicas, com os ancestrais de Pythium + Phytopythium + Phythophthora apresentando propriedades necrotróficas. Conclui-se nesta tese a aplicabilidade da multiplex-PCR para identificação e genotipagem dos isolados sul-americanos de P. insidiosum, a qual evidenciou características genéticas semelhantes entre esses isolados. Adicionalmente, a análise multilocus permitiu verificar relações filogenéticas e importantes aspectos evolutivos de oomicetos, enfatizando P. insidiosum.

Oomycetes are eukaryote microorganisms belonging to a supergroup called Stramenopiles-Alveolata-Rhizaria (SAR) that includes members with saprobic and pathogenic characteristics. Pythium insidiosum, a pathogen of plants and mammals, stands out among the genera of major importance in the peronosporalean lineage. Pythiosis is a chronic granulomatous disease with an unfavorable prognosis, widely distributed throughout the world. In recent years, there has been an increase in cases of pythiosis, especially in animals and humans, and Brazil and Thailand, respectively. It should be noted that many gaps in knowledge about important aspects of this disease must be fulfilled, especially in relation to the biology and evolution of the etiological agent, epidemiology, diagnosis and therapy. Thus, the objectives of the study are: (i) to use polymerase chain reaction (PCR) based on single nucleotide polymorphisms (SNPs) of ribosomal DNA sequence (rDNA) to identify and genotype South American isolates of P. insidiosum and (ii) to analyze phylogenetic relationships and evolutionary aspects of peronosporaleans, especially P. insidiosum using a multilocus approach with one mitrocondrial gene and three nuclear genes. Objective (i) was achieved through the identification of P. insidiosum by the PCR-multiplex technique based on three SNPs. In addition, the method allowed to identify the formation of three clades of P. insidiosum (clade I: American isolates, including for the first time, a Uruguayan isolate, clade II: Thai, Japanese and Indian isolates and clade III: Thai isolates). The results that encompass objective (ii) correspond to the multilocus analysis of 55 oomycetes by the Maximum Likelihood and Bayesian Analysis methods. P. insidiosum formed a major monophyletic and polytomic clade of American isolates; however, Pythium spp. was paraphyletic with Phytopythium sp. and Phytophthora spp. Albugo candida was positioned as an initial branch of peronosporaleans, which was subdivided into three clades, one of which evidenced the close relationship of P. insidiosum, P. aphanidermatum and P. arrhenomanes. Peronosporaleans diverged 136 million years ago and P. insidiosum diversified approximately 24 million years ago, with the divergence of American and Thai isolates, approximately 17 million years ago and subsequent American diversification occurring there are 2.4 million years ago. The reconstruction of the ancestral state characterizes that the ancestors of peronosporaleans presented phytopathogenic properties, with the ancestors of Pythium + Phytopythium + Phythophthora presenting necrotrophic properties. The applicability of the multiplex-PCR for identification and genotyping of the South American isolates of P. insidiosum, which showed similar genetic characteristics among these isolates, was concluded in this thesis. In addition, the multilocus analysis allowed verifying phylogenetic relationships and important evolutionary aspects of oomycetes, emphasizing P. insidiosum.

Utilização de Acetonida de Triancinolona para tratamento da pitiose cutânea em um equino / Use of triamcinolone acetonide for treatment of cutaneous pitiosis in a horse / Uso de acetonido de triamcinolona para el tratamiento de la pitiosis cutánea en un caballo

A espécie equina é aque que mais sofre com afecções dermatológicas, cabendo especial atenção ao estudo da Pitiose, causada pelo Pythium Insidiosum. As principais alterações da doença são formação de granulomas ulcerados, com formato de cratera, sendo também comum a presença de trajetos fistulosos e cavitações formadas pelos comicetos, bem como deconcreções denominadas de "Kunkers".O tratamento atual é realizado com o uso de fármacos como o iodeto de potássio, vacinas, debridamento cirúrgico, entre outras terapias, com resultados muitas vezes inconsistentes. Porém, foi proposta a utilização da Acetonida de Triancinolona para o tratamento dessa afecção com resultados clínicos bastante promissores. O presente trabalho teve como objetivo relatar a utilização de Acentonida de Triancinolonapara tratamento de um caso de Pitioseatendido no CDP-EMEVZ-UFBA, com acompanhamento da evolução e constatação da cura do animal.

The equine species is the one that most suffers from dermatological disorders, with special attention to the study of Pythiosis, caused by Pythium Insidiosum. The main alterations of the disease are the formation of crater-shaped ulcerated granulomas, as well as the presence of fistulous pathways and cavitations formed by the oomycetes, as well as concretions called “Kunkers". Current treatment is performed with the use of drugs such as potassium iodide, vaccines, surgical debridement, among other therapies, with often inconsistent results. However, it has been proposed to use triamcinolone acetonide to treat this condition with very promising clinical results. The present study aimed to report the use of triamcinolone acentonide for the treatment of a case of Pitiosis treated at CDP-EMEVZ-UFBA, with follow- up of the evolution and healing of the animal.

La especie equina es la que más sufre de trastornos dermatológicos, con especial atención al estudio de la pitiosis, causada por Pythium insidiosum. Las principales alteraciones de la enfermedad son la formación de granulomas ulcerados en forma de cráter, así como la presencia de vías fistulosas y cavitaciones formadas por los oomicetos, así como concreciones llamadas "Kunkers". El tratamiento actual se realiza con el uso de medicamentos como yoduro de potasio, vacunas, desbridamiento quirúrgico, entre otras terapias, con resultados a menudo inconsistentes. Sin embargo, se ha propuesto utilizar acetónido de triamcinolona para tratar esta afección con resultados clínicos muy prometedores. El presente estudio tuvo como objetivo informar el uso de acentonida de triamcinolona para el tratamiento de un caso de pitiosis tratado en CDP-EMEVZ-UFBA, con un seguimiento de la evolución y la curación del animal.

Utilização de Acetonida de Triancinolona para tratamento da pitiose cutânea em um equino / Use of triamcinolone acetonide for treatment of cutaneous pitiosis in a horse / Uso de acetonido de triamcinolona para el tratamiento de la pitiosis cutánea en un caballo

A espécie equina é aque que mais sofre com afecções dermatológicas, cabendo especial atenção ao estudo da Pitiose, causada pelo Pythium Insidiosum. As principais alterações da doença são formação de granulomas ulcerados, com formato de cratera, sendo também comum a presença de trajetos fistulosos e cavitações formadas pelos comicetos, bem como deconcreções denominadas de "Kunkers".O tratamento atual é realizado com o uso de fármacos como o iodeto de potássio, vacinas, debridamento cirúrgico, entre outras terapias, com resultados muitas vezes inconsistentes. Porém, foi proposta a utilização da Acetonida de Triancinolona para o tratamento dessa afecção com resultados clínicos bastante promissores. O presente trabalho teve como objetivo relatar a utilização de Acentonida de Triancinolonapara tratamento de um caso de Pitioseatendido no CDP-EMEVZ-UFBA, com acompanhamento da evolução e constatação da cura do animal.(AU)

The equine species is the one that most suffers from dermatological disorders, with special attention to the study of Pythiosis, caused by Pythium Insidiosum. The main alterations of the disease are the formation of crater-shaped ulcerated granulomas, as well as the presence of fistulous pathways and cavitations formed by the oomycetes, as well as concretions called “Kunkers". Current treatment is performed with the use of drugs such as potassium iodide, vaccines, surgical debridement, among other therapies, with often inconsistent results. However, it has been proposed to use triamcinolone acetonide to treat this condition with very promising clinical results. The present study aimed to report the use of triamcinolone acentonide for the treatment of a case of Pitiosis treated at CDP-EMEVZ-UFBA, with follow- up of the evolution and healing of the animal.(AU)

La especie equina es la que más sufre de trastornos dermatológicos, con especial atención al estudio de la pitiosis, causada por Pythium insidiosum. Las principales alteraciones de la enfermedad son la formación de granulomas ulcerados en forma de cráter, así como la presencia de vías fistulosas y cavitaciones formadas por los oomicetos, así como concreciones llamadas "Kunkers". El tratamiento actual se realiza con el uso de medicamentos como yoduro de potasio, vacunas, desbridamiento quirúrgico, entre otras terapias, con resultados a menudo inconsistentes. Sin embargo, se ha propuesto utilizar acetónido de triamcinolona para tratar esta afección con resultados clínicos muy prometedores. El presente estudio tuvo como objetivo informar el uso de acentonida de triamcinolona para el tratamiento de un caso de pitiosis tratado en CDP-EMEVZ-UFBA, con un seguimiento de la evolución y la curación del animal.(AU)

Doenças de equinos na região Sul do Rio Grande do Sul / Equine diseases in Southern Brazil

A retrospective study of the diagnoses of injuries and deaths in equine in Southern Brazil was conducted between 1978 and 2012. All necropsy protocols and other materials of the Regional Diagnostic Laboratory of the Veterinary School of the Federal University of Pelotas were reviewed. The collected data consisted of 2,026 equine materials, including 514 necropsy protocols of and 1,512 other biologic materials, including the protocols of biopsies, organs, swabs, feces, blood, and skin scrapings. From the resulting 2,026 diagnoses, 467 (23.05%) corresponded to neoplasms and tumor like lesions; 168 (8.29%) to parasitic diseases; 135 (6.66%) to bacterial diseases; 31 (1.53%) to viral diseases; 86 (4.24%) to diseases caused by fungi and oomycetes; 50 (2.47%) to intoxication and poisoning by mycotoxins; 9 (0.44%) to metabolic diseases; 60 (2.96%) to other diseases; and 75 (3.70%) to non-transmittable diseases of the digestive tract. Three hundred twenty cases (15.79%) were classified as diseases of unknown etiology. Other diagnoses accounted for 489 of the total 2,026 cases (24.14%). In 44 (8.56%) of the 514 necropsies and 91 (9.47%) of the 961 biopsies of organs mailed into the laboratory, the diagnoses were inconclusive, totaling 135 (9.15%) of the 1,475 in the category. This study demonstrates the importance of skin lesions in horses, as 31.88% (642) of the biopsies received were lesions on the skin of the animals. The most significant tumors observed were equine sarcoid, at 33.18%, and squamous cell carcinoma, at 7.94%. The most common observed causes of death were leucoenceflomalacia (7.59%), rabies (3.70%) thromboembolism by Strongylus vulgaris (2.33%) and monocytic ehrlichiosis (1.75%).(AU)

Foi realizado um estudo retrospectivo dos diagnósticos de causas de morte e de lesões em equinos na região Sul do Rio Grande do Sul entre 1978 e 2012. Foram revisados os protocolos de necropsia e materiais desta espécie encaminhados ao Laboratório Regional de Diagnóstico da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal de Pelotas no período. Foram recebidos 514 cadáveres de equinos e 1500 materiais (biopsias, órgãos, suabes, fezes, sangue e raspado de pele), totalizando 2026 materiais de equinos recebidos no período. Dos 2026 casos 467 (23,05%) corresponderam a neoplasmas e lesões tumorifores, 168 (8,29%) a doenças parasitárias; 135 (6,66%) a doenças bacterianas, 31 (1,53%) a doenças virais, 86 (4,24%) a doenças causadas por fungos e oomicetos, 50 (2,47%) a intoxicações e micotoxicoses, nove (0,44%) a doenças metabólicas, 60 (2,96%) a outras doenças e 75 (3,70%) a doenças não transmissíveis do trato digestivo. Trezentos e vinte (15,79%) foram classificados como doenças de etiologia indeterminada. Outros diagnósticos representaram 489/2026 (24,14%) casos. Em 44/514 (8,56%) das necropsias e em 91/961 (9,47%) de biopsias e órgãos remetidos ao laboratório o diagnóstico foi inconclusivo, perfazendo um total de 135/1475 (9,15%) casos incluídos nesta categoria. Ficou evidenciado neste trabalho a importância das lesões dermatológicas em equinos, sendo que 31,88% (642/2014) dos casos recebidos eram biopsias de lesões observadas na pele dos animais. Os principais tumores encontrados foram o sarcoide equino com 33,18% e o carcinoma de células escamosas com 7,94% das biopsias recebidas. Algumas causas de morte mais importantes diagnosticadas no período foram a leucoencefalomalacia (7,59%), a raiva (3,70%), o tromboembolismo por Strongylus vulgaris (2,33%) e a erliquiose monocítica (1,75%).(AU)