Ocurrence and risk factors associated with Mycoplasma agalactiae infection in dairy goat herds of Paraíba State, Brazil / Ocorrência e fatores de risco associados à infecção por Mycoplasma agalactiae em rebanhos caprinos leiteiros do estado da Paraíba, Brasil

Mycoplasmosis is a disease that may cause severe economical losses in goat and sheep herds, and it is associated with mastitis, polyarthritis, agalactia, conjunctivitis, pneumonia and reproductive failure. The objective of this study was to determine the occurrence of Mycoplasma agalactiae in milk samples and investigate the main risk factors associated with infection in goats from farms of the state of Paraíba, Brazil. For Mycoplasma agalactiae diagnosis, 251 milk samples were submitted to DNA extraction using a commercially available kit, following the manufacturer's instructions and Polymerase Chain Reaction (PCR) was performed. In addition, questionnaires were applied to identify the main risk factors associated with contagious agalactia. Out of the two hundred fifty-one samples analyzed, 50 (19.9%, I.C. 15.1-25.4%) were PCR positive for M. agalactiae. In the risk factors analysis, some associations were observed for the following variables: size of the herd (P<0.001, OR=7.1, I.C. 2.4-20.6), replacement of farm animals (P<0.001, OR=4.7, I.C. 1.8-12.2) and participation of animals in fairs and exhibitions (P=0.029, OR=2.0, I.C.1.0-3.9). The results allowed confirming the occurrence of Mycoplasma agalactiae in milk samples of goats from Paraíba. Therefore, it is strictly necessary to monitor dairy goat flocks and to raise the awareness of farmers about the economic importance of the disease, since it causes severe economic losses for producers of the state. Identification of risk factors is essential for adoption of control measures and for the correction of the management factors in farms where there are animals with positive diagnosis, avoiding, so, pathogen dissemination.(AU)

As micoplasmoses ocasionam prejuízos econômicos nas criações de ovinos e caprinos, e estão associados com quadros de mastite, poliartrite, agalaxia, conjuntivite, pneumonia e falhas reprodutivas. Objetivou-se neste estudo determinar a ocorrência de Mycoplasma agalactiae em amostras de leite e investigar os principais fatores de risco associados à infecção em caprinos provenientes de propriedades rurais do estado da Paraíba, Brasil. Para o diagnóstico de Mycoplasma agalactiae, foram analisadas 251 amostras de leite, que foram submetidas à extração do DNA genômico usando um kit comercial, seguindo as recomendações do fabricante. Para diagnóstico da infecção utilizou-se a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Além disso, foram aplicados questionários para identificar os principais fatores de risco associados infecção à agalaxia contagiosa. Das 251 amostras analisadas, 50 (19,9%; I.C. 15,1-25,4%) foram positivas na PCR para M. agalactiae. Observaram-se na análise dos fatores de risco, algumas associações para as seguintes variáveis: tamanho do rebanho (P<0,001; OR 7,1), reposição de animais da propriedade (P<0,001; OR 4,7) e participação dos animais em feiras e exposições (P= 0,029; OR 2,0). Os resultados permitiram confirmar a ocorrência do Mycoplasma agalactiae em amostras de leite de caprinos da Paraíba. Portanto, é necessário o monitoramento dos rebanhos caprinos leiteiros e a conscientização dos produtores rurais para a importância econômica da doença, visto que a mesma acarreta severos prejuízos econômicos para os produtores do estado. A identificação dos fatores de risco são imprescindíveis para a adoção de medidas de controle e para a correção dos fatores de manejo em propriedades que tenham animais com diagnóstico positivo, evitando assim, a disseminação do patógeno.(AU)

Ocurrence and risk factors associated with Mycoplasma agalactiae infection in dairy goat herds of Paraíba State, Brazil / Ocorrência e fatores de risco associados à infecção por Mycoplasma agalactiae em rebanhos caprinos leiteiros do estado da Paraíba, Brasil

Mycoplasmosis is a disease that may cause severe economical losses in goat and sheep herds, and it is associated with mastitis, polyarthritis, agalactia, conjunctivitis, pneumonia and reproductive failure. The objective of this study was to determine the occurrence of Mycoplasma agalactiae in milk samples and investigate the main risk factors associated with infection in goats from farms of the state of Paraíba, Brazil. For Mycoplasma agalactiae diagnosis, 251 milk samples were submitted to DNA extraction using a commercially available kit, following the manufacturer's instructions and Polymerase Chain Reaction (PCR) was performed. In addition, questionnaires were applied to identify the main risk factors associated with contagious agalactia. Out of the two hundred fifty-one samples analyzed, 50 (19.9%, I.C. 15.1-25.4%) were PCR positive for M. agalactiae. In the risk factors analysis, some associations were observed for the following variables: size of the herd (P<0.001, OR=7.1, I.C. 2.4-20.6), replacement of farm animals (P<0.001, OR=4.7, I.C. 1.8-12.2) and participation of animals in fairs and exhibitions (P=0.029, OR=2.0, I.C.1.0-3.9). The results allowed confirming the occurrence of Mycoplasma agalactiae in milk samples of goats from Paraíba. Therefore, it is strictly necessary to monitor dairy goat flocks and to raise the awareness of farmers about the economic importance of the disease, since it causes severe economic losses for producers of the state. Identification of risk factors is essential for adoption of control measures and for the correction of the management factors in farms where there are animals with positive diagnosis, avoiding, so, pathogen dissemination.(AU)

As micoplasmoses ocasionam prejuízos econômicos nas criações de ovinos e caprinos, e estão associados com quadros de mastite, poliartrite, agalaxia, conjuntivite, pneumonia e falhas reprodutivas. Objetivou-se neste estudo determinar a ocorrência de Mycoplasma agalactiae em amostras de leite e investigar os principais fatores de risco associados à infecção em caprinos provenientes de propriedades rurais do estado da Paraíba, Brasil. Para o diagnóstico de Mycoplasma agalactiae, foram analisadas 251 amostras de leite, que foram submetidas à extração do DNA genômico usando um kit comercial, seguindo as recomendações do fabricante. Para diagnóstico da infecção utilizou-se a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Além disso, foram aplicados questionários para identificar os principais fatores de risco associados infecção à agalaxia contagiosa. Das 251 amostras analisadas, 50 (19,9%; I.C. 15,1-25,4%) foram positivas na PCR para M. agalactiae. Observaram-se na análise dos fatores de risco, algumas associações para as seguintes variáveis: tamanho do rebanho (P<0,001; OR 7,1), reposição de animais da propriedade (P<0,001; OR 4,7) e participação dos animais em feiras e exposições (P= 0,029; OR 2,0). Os resultados permitiram confirmar a ocorrência do Mycoplasma agalactiae em amostras de leite de caprinos da Paraíba. Portanto, é necessário o monitoramento dos rebanhos caprinos leiteiros e a conscientização dos produtores rurais para a importância econômica da doença, visto que a mesma acarreta severos prejuízos econômicos para os produtores do estado. A identificação dos fatores de risco são imprescindíveis para a adoção de medidas de controle e para a correção dos fatores de manejo em propriedades que tenham animais com diagnóstico positivo, evitando assim, a disseminação do patógeno.(AU)

INVESTIGAÇÃO DA EXCREÇÃO DE RNA DO VÍRUS DA HEPATITE E (HEV) EM BOVINOS LEITEIROS DO ESTADO DE MATO GROSSO, BRASIL

O vírus da Hepatite E (HEV) é a principal causa de hepatite em países em desenvolvimento e ocidentais, responsável por infectar mais de 20 milhões de pessoas, ocasionando aproximadamente 60 mil mortes por ano no mundo. A transmissão do HEV foi confirmada a partir de suínos, bovinos e camelos, para primatas humanos e não humanos; por esta razão, a agricultura tradicional envolvendo a criação de diversas espécies e a proximidade entre elas pode potencialmente expandir as fontes zoonóticas e contribuir com a alta prevalência de HEV. Recentemente, o material genético do HEV foi detectado em amostras de leite e fezes de vacas leiteiras nos continentes europeu, asiático e africano, sugerindo a possibilidade de infecção em humanos através da ingestão de leite contaminado com o vírus. Diante da provável transmissão zoonótica do vírus para humanos através do leite, pela prática comum de criação mista de animais e pela circulação do HEV em suínos no Estado de Mato Grosso, o objetivo deste estudo foi investigar a excreção do vírus em vacas leiteiras, a partir de amostras de fezes e leite, através da identificação da ORF1 e ORF2 do HEV por meio da técnica de transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase (RT-PCR). Neste estudo, 430 amostras de fezes e leite de bovinos leiteiros do Estado do Mato Grosso foram coletadas e avaliadas quanto à presença do HEV por meio de técnicas moleculares. Foram selecionados 14 municípios em quatro mesorregiões do Estado, sendo que 215 vacas leiteiras provenientes de 49 propriedades foram amostradas. As principais características dos rebanhos foram levantadas por meio de um questionário epidemiológico. As propriedades selecionadas apresentavam a criação de diferentes tipos de animais domésticos conjuntamente, como suínos (71,4%), equinos (61,2%), caprinos (4%), ovinos (18,3%), aves (51%), cães (32,6%) e gatos (8,1%). Embora estudos anteriores tenham demonstrado a circulação do HEV nos suínos em Mato Grosso, neste estudo não foi possível a amplificação das ORF1 e ORF2 nas amostras fecais e de leite dos bovinos avaliados e, apesar de alguns autores sugerirem que as criações mistas podem ser fator determinante para a infecção nos bovinos, não foi observado uma associação positiva desta prática com a excreção viral em bovinos da mesma propriedade. Neste sentido, este estudo representa a primeira investigação molecular da excreção de HEV em bovinos no Brasil e ressalta-se a importância da realização de estudos adicionais abrangentes envolvendo este agente viral para verificar a circulação do vírus em bovinos, assim como investigar a participação de outras espécies animais na epidemiologia desta virose.

Hepatitis E virus (HEV) is the leading cause of hepatitis in developing and Western countries, responsible for infecting more than 20 million people, causing approximately 60,000 deaths each year worldwide. HEV transmission has been confirmed from pigs, cows and camels to human and non-human primates; for this reason, traditional agriculture involving farming of several species and the proximity between them can potentially expand zoonotic sources and contribute to the high prevalence of HEV. Recently, HEV RNA was detected in samples of milk and faeces from dairy cows in Europe, Asia and Africa, suggesting the possibility of infection in humans through ingestion of milk contaminated with the virus. Given the probable zoonotic transmission of the virus to humans through milk, the common practice of mixed farming and the circulation of HEV in pigs in the state of Mato Grosso, the aim of this study was to investigate the excretion of the virus in faecal and milk samples from dairy cows, by means of the identification of ORF1 and ORF2 of HEV through the reverse transcription followed by polymerase chain reaction (RT-PCR) technique. In this study, 430 samples of feces and milk from dairy cows from the state of Mato Grosso were collected and evaluated for the presence of HEV using molecular techniques. Fourteen cities were selected from four mesoregions of the state, where 215 dairy cows from 49 properties were sampled. The main characteristics of the herds were obtained through an epidemiological questionnaire. The selected farms had the common practice of farming different domestic animals together, such as pigs (71.4%), horses (61.2%), goats (4%), sheep (18.3%), chickens (51%), dogs (32.6%), and cats (8.1%). Although previous studies have demonstrated that HEV circulates in swine in Mato Grosso, it was not possible to amplify ORF1 and ORF2 in the fecal and milk samples from the evaluated cattle and, despite some authors suggest that mixed farming may be a determining factor for infection in cattle, a positive association between this practice and viral excretion in cattle on the same property was not observed. In this sense, this study represents the first molecular investigation of HEV RNA excretion in cattle from Brazil and emphasizes the importance of conducting additional comprehensive studies involving this viral agent to verify the virus circulation in cattle, as well as to investigate the participation of other animal species in the epidemiology of this viral infection.

DETECÇÃO DE HEMOPATÓGENOS E Neospora caninum E SOROPREVALÊNCIA DE Toxoplasma gondii EM REBANHOS COMERCIAIS DE OVINOS LEITEIROS DO ESTADO DE MINAS GERAIS, BRASIL

O Brasil contabiliza aproximadamente 13,5 milhões de ovinos em estabelecimentos agropecuários, sendo que a ovinocultura leiteira brasileira se mostra em ascensão. Em busca de expandir o mercado e alcançar altos níveis de produção de leite, a manutenção da saúde do rebanho ovino por meio de um adequado manejo sanitário é imprescindível. Neste contexto, conhecer a prevalência das enfermidades no rebanho é fundamental, auxiliando na adoção de medidas corretivas e profiláticas. Assim, o objetivo deste trabalho foi realizar levantamento molecular de hemopatógenos e Neospora caninum e soroepidemiológico de Toxoplasma gondii, busca por ectoparasitos e levantamento dos fatores de risco associados a esses patógenos em propriedades comerciais de ovinos leiteiros do estado de Minas Gerais. O estudo foi realizado em três municípios: Glaura, Itapecerica e Jaboticatubas, totalizando quatro propriedades e 270 amostras sanguíneas. Para as análises moleculares foi realizada a Reação em Cadeia de Polimerase PCR e para as análises sorológicas o Ensaio de Imunoabsorção Enzimática ELISA. Ademais, análises parasitológicas em amostras de sangue foram realizadas, como esfregaço sanguíneo periférico e de sangue total, buffy coat, técnica de Woo e mensuração do volume globular. Ainda, a contagem de ovos por grama de fezes OPG foi realizada em amostras de 197 animais a procura de ovos de tricostrongilídeos a fim de associar com a presença de anemia. A busca por ectoparasitos foi realizada por meio de catação manual e por puçá. Ainda, por meio do questionário zoosanitário aplicado nas propriedades, verificou-se quais os fatores de risco para as enfermidades estudadas neste trabalho. Os resultados foram expostos de acordo com a frequência de positividade, apresentados em percentual. Com os dados dos questionários, os resultados dos testes moleculares, sorológicos, VG, OPG e presença/ausência de ectoparasitos, as associações entre as variáveis foram realizadas por meio do teste estatístico Razão de Verossimilhança. Contudo, em situações onde frequência foi igual a zero, o teste utilizado foi utilizado o Teste Exato de Fischer. O nível de significância nas análises foi de 5% (p0,05). Apenas em uma propriedade foram encontrados ectoparasitos, sendo uma pulga (Ctenocephalides felis felis) e uma ninfa de carrapato (Amblyomma sp.). Por meio da PCR, resultados positivos foram obtidos para os hemopatógenos: Mycoplasma ovis (71,48%), Anaplasma spp. (4,07%), Anaplasma marginale (2,96%), Ehrlichia monocítica (2,96%), Babesia spp. (0,74%), e Ehrlichia/Anaplasma de granulócitos (0,38%). Todas as propriedades apresentaram coinfecções entre algum dos agentes estudados neste trabalho. A PCR para N. caninum apresentou 25,55% de positividade. A sororreatividade para T. gondii foi encontrada em 59 amostras (22,1%) com o índice de reatividade (I.R.) 1,0. Por meio da análise dos esfregaços sanguíneos, buffy coat e Técnica de Woo, não foi encontrado nenhum patógeno. Já a mensuração do volume globular demonstrou que 43,71% dos animais apresentavam-se anêmicos no momento da coleta. O resultado do OPG foi negativo em 42,13% (83/197) das amostras analisadas e contagem com valores inferiores a 500 ovos ocorreu em 20,81% (41/197) das amostras analisadas. Infecção grau leve (500-800 ovos) foi detectada em 6,59% (13/197) das amostras, grau moderado (800-1.500 ovos) em 4,56% (09/197) e grau elevado (<1.500 ovos) em 26,90% (53/197). Os fatores de riscos com significância na positividade para os patógenos foram: o reuso de agulhas para M. ovis; a presença de ectoparasitos para Anaplasma spp. e Ehrlichia monocítica; propriedades com as fontes de água poço, nascente e cisterna para N. caninum; ovinos pertencentes à categoria >24 meses de vida para N. caninum; e na sororreatividade para T. gondii a presença de gatos, fontes de água poço e nascente e a ocorrência de distúrbios reprodutivos. As hemoparasitoses estavam presentes em todos os rebanhos analisados devendo ser considerada um diagnóstico diferencial para ovinos anêmicos. Além disso, são indispensáveis o estabelecimento de medidas para o controle da toxoplasmose nos rebanhos e o maior entendimento do papel de N. caninum nos distúrbios reprodutivos desses animais.

Brazil accounts for approximately 13.5 million sheep in agricultural establishments and the Brazilian dairy sheep industry is on the rise. In order to expand the market and achieve high levels of milk production, maintaining the health of the sheep herd through proper sanitary management is essential. In this context, knowing the prevalence of diseases in the herd is essential, helping in the adoption of corrective and prophylactic measures. Thus, the objective of this work was to carry out a molecular survey of hemopathogens and Neospora caninum and Toxoplasma gondii seroepidemiological, search for ectoparasites and survey of risk factors associated with these pathogens in commercial properties of dairy sheep in the state of Minas Gerais. The study was carried out in three municipalities: Glaura, Itapecerica and Jaboticatubas, totaling four properties and 270 blood samples. For the molecular analyzes, the Polymerase Chain Reaction PCR was performed and for the serological analyzes the Enzyme Immunoabsorbent Assay ELISA. In addition, parasitological analyzes on blood samples were performed, such as peripheral and whole blood smear, buffy coat, Woo technique and measurement of globular volume. Also, the eggs per gram EPG was carried out on samples from 197 animals looking for trichostrongylid eggs in order to associate with the presence of anemia. The search for ectoparasites was carried out by manual collection and by puçá. Still, through the zoosanitary questionnaire applied in the properties, it was verified which are the risk factors for the diseases studied in this work. The results were exposed according to the frequency of positivity, presented as a percentage. With the data from the questionnaires, the results of the molecular, serological, VG, EPG tests and the presence / absence of ectoparasites, the associations between the variables were performed using the Likelihood Ratio statistical test. However, in situations where frequency was equal to zero, the test used was the Fischer Exact Test. The level of significance in the analyzes was 5% (p0.05). Ectoparasites were found in only one property, being a flea (Ctenocephalides felis felis) and a tick nymph (Amblyomma sp.). Through PCR, positive results were obtained for hemopathogens: Mycoplasma ovis (71.48%), Anaplasma spp. (4.07%), Anaplasma marginale (2.96%), Ehrlichia monocítica (2.96%), Babesia spp. (0.74%), and Ehrlichia / Anaplasma Granulocyte (0.38%). All properties showed co-infections among some of the agents studied in this work. The PCR for N. caninum showed 25.55% positivity. The seroreactivity for T. gondii was 59 (22.1%) with a reactivity index (I.R.) 1.0. Through the analysis of blood smears, buffy coat and Woo's technique, no pathogen was found. The measurement of the globular volume showed that 43.71% of the animals were anemic at the time of collection. The EPG result was negative in 42.13% (83/197) of the analyzed samples and counting with values below 500 eggs occurred in 20.81% (41/197) of the analyzed samples. Mild grade infection (500-800 eggs) was detected in 6.59% (13/197) of the samples, moderate grade (800-1,500 eggs) in 4.56% (09/197) and high grade (<1,500 eggs) in 26.90% (53/197). The risk factors with significance in the positivity for the pathogens were: the reuse of needles for M. ovis, the presence of ectoparasites for Anaplasma spp. and Ehrlichia monocytic; properties with well, spring and cistern water sources for N. caninum; sheep belonging to the categories > 24 months old for N. caninum; and in seroreactivity for T. gondii the presence of cats, well and spring water sources and the occurrence of reproductive disorders. Hemoparasitosis were present in all the herds analyzed and should be considered a differential diagnosis for anemic sheep. In addition, it is essential to establish measures for the control of toxoplasmosis in herds and a greater understanding of the role of N. caninum in the reproductive disorders of these animals.

CONTRIBUIÇÕES PARA A EPIDEMIOLOGIA E CONTROLE DA LEPTOSPIROSE EM RUMINANTES DO NORDESTE DO BRASIL

Esta tese é composta por três capítulos, no capítulo I são descritas as estratégias de controle de um surto de infecção por leptospirose em bovinos leiteiros no estado do Maranhão, Nordeste do Brasil. O diagnóstico de leptospirose foi baseado na sorologia, cultura bacteriológica e reação em cadeia da polimerase. De todos os animais da fazenda, 136 (48,6%) foram soropositivos para Leptospira sp. Oito dos animais com problemas reprodutivos foram positivos na PCR. O sequenciamento genético de uma amostra PCR positiva de fluido vaginal revelou Leptospira borgpetersenii. Um ano após a adoção de medidas de controle, não foram observados problemas reprodutivos. Assim, a leptospirose provavelmente causou falhas reprodutivas no rebanho, e as medidas de controle e prevenção implementadas foram eficientes no controle da doença. No capítulo II é descrita a caracterização sorológica e molecular de Leptospira sp. em rebanhos bovinos e ovinos em condições semiáridas do Nordeste brasileiro. Foi realizado diagnóstico sorológico, molecular e tentativa de isolamento de Leptospira sp. de 99 fêmeas em idade reprodutiva. Destes 38,4% foram reagentes no teste sorológico, sendo 49% fêmeas bovinas e 27,1% fêmeas ovinas. Os sorogrupos detectados em bovinos foram Sejroe, Hebdomadis, Australis, Djasiman, Balum, Pomona e Cynopteri. Nos ovinos, os sorogrupos reagentes foram Australis, Balum, Djasiman, Tarassovi, Icterohaemorrhagiae e Cynopteri. Na PCR, foi detectado DNA leptospírico em nove amostras de urina. Não foi observado crescimento do agente em meio de cultura em amostras de urina. Em condições semiáridas, a transmissão entre animais da mesma espécie parece ser a principal forma de disseminação de leptospiras nos rebanhos ovinos e bovinos, porém a participação de outros animais domésticos e silvestres não pode ser descartada. Sugere-se ainda que a prática da criação consorciada de bovinos e ovinos e o estreito convívio entre eles propicia a disseminação do agente nas propriedades rurais. O capítulo III determinou a soropositividade para leptospirose e os sorogrupos predominantes nos testes sorológicos realizados no Laboratório de Doenças Transmissíveis (LDT) da Universidade Federal de Campina Grande (UFCG), Patos, Paraíba, Nordeste do Brasil, em bovinos, caprinos, ovinos e bubalinos no período de 2010 a 2017. Foram computados os registros dos exames sorológicos para leptospirose de 5.594 animais, provenientes de quatro estados brasileiros. Foram positivas 662 amostras no teste sorológico, resultando em uma frequência de 11,8%. Sejroe, Autumnalis e Icterohaemorrhagiae foram os sorogrupos mais frequentes para todas as espécies. As frequências individuais de bovinos, caprinos, ovinos e bubalinos foram de 20%, 8,3%, 7,9%, e 27,9%, respectivamente. Com relação aos sorogrupos mais frequentes por espécie animal, o Sejroe predominou em bovinos, Autumnalis foi o mais frequente em caprinos e ovinos e Australis predominou nos bubalinos. infecção por Leptospira sp., determinada por sorologia, encontra-se difundida em ruminantes (bovinos, caprinos, ovinos e bubalinos) do Nordeste do Brasil, o que sugere a existência de vias de transmissão alternativas menos dependentes de fatores ambientais, bem como a identificação dos sorogrupos mais frequentes sugere a necessidade de melhoria das condições sanitárias e implementação de medidas de controle eficientes e direcionadas para as principais fontes de infecção.

This thesis consists of three chapters, in Chapter I, the strategies of control of an outbreak of leptospirosis infection in dairy cattle in the state of Maranhão, Northeastern Brazil, are described. The diagnosis of leptospirosis was based on serology, bacteriological culture and polymerase chain reaction. Of all farm animals, 136 (48.6%) were seropositive for Leptospira sp. Eight of the animals with reproductive problems were PCR positive. Genetic sequencing of a positive PCR sample of vaginal fluid revealed Leptospira borgpetersenii. One year after the adoption of control measures, no reproductive problems were observed. Thus, leptospirosis probably caused reproductive failures in the herd, and the control and prevention measures implemented were efficient in controlling the disease. In Chapter II the serological and molecular characterization of Leptospira sp. in cattle and sheep in semi-arid conditions of Northeast Brazil. Serological, molecular and and attempt isolation of Leptospira sp. of 99 females of reproductive age. Of these 38.4% were reagents in the serological test, being 49% bovine females and 27.1% ovine females. Serogroups detected in cattle were Sejroe, Hebdomadis, Australis, Djasiman, Balum, Pomona and Cynopteri. In sheep, the reactive serogroups were Australis, Balum, Djasiman, Tarassovi, Icterohaemorrhagiae and Cynopteri. In PCR, leptospiral DNA was detected in nine urine samples. Growth of the agent in culture medium was not observed in urine samples. In semi-arid conditions, transmission between animals of the same species seems to be the main form of dissemination of leptospires in sheep and cattle, but the participation of other domestic and wild animals can not be ruled out. It is also suggested that the practice of intercropping cattle and sheep and the close coexistence between them facilitates the dissemination of the agent in the rural properties. Chapter III determined the seropositivity for leptospirosis and the serogroups prevalent in the serological tests carried out at the Transmissible Diseases Laboratory (TDL) of the Federal University of Campina Grande (UFCG), Patos, Paraíba, Northeast Brazil, in cattle, goats, sheep and buffaloes in the period from 2010 to 2017. The records of the serological tests for leptospirosis of 5,594 animals from four Brazilian states were computed. A total of 662 samples were positive in the serological test, resulting in a frequency of 11.8%. Serjoe, Autumnalis and Icterohaemorrhagiae were the most frequent serogroups for all species. The individual frequencies of cattle, goats, sheep and buffaloes were 20%, 8.3%, 7.9%, and 27.9%, respectively. In relation to the most frequent serogroups by animal species, Serjoe predominated in cattle, Autumnalis was the most frequent in goats and sheep and Australis predominated in buffaloes. Leptospira sp. infection, determined by serology, is widespread in ruminants (cattle, goats, sheep and buffalo) in Northeast Brazil, suggesting the existence of alternative transmission routes less dependent on environmental factors, as well as identification of the most frequent serogroups suggests the need to improve sanitary conditions and implement efficient and targeted control measures for the main sources of infection.

Diagnóstico e caracterização molecular de Giardia duodenalis e Cryptosporidium spp. em amostras fecais de bovinos e ovinos

Os protozoários Giardia duodenalis e Cryptosporidium spp. são comprovadamente patógenos potenciais para bovinos e ovinos (particularmente em bezerros e cordeiros). Recentemente, o uso de técnicas moleculares demonstrou que Giardia duodenalis e Cryptosporidium spp. são espécies compostas de populações morfologicamente indistinguíveis, porém com grande diversidade genética. Os isolados de Giardia duodenalis obtidos de amostras fecais de ruminantes podem pertencer a grupos genéticos hospedeiro-específicos (genótipo E) ou a grupos genéticos potencialmente zoonóticos (genótipo A e B). Quatro espécies/genótipos de Cryptosporidium spp. com diferenças biológicas e genéticas consideráveis, são capazes de infectar bovinos: Cryptosporidium parvum, Cryptosporidium andersoni, Cryptosporidium bovis e Cryptosporidium genótipo deer-like. Em ovinos uma longa lista de espécies/genótipos tem sido identificados, alguns dos quais ainda são descritos como espécies/genótipos desconhecidos. O objetivo desse estudo foi determinar a ocorrência de Giardia duodenalis e Cryptosporidium spp. em 10 propriedades de bovinos leiteiros e 1 propriedade de ovinos no Estado de São Paulo, realizando o diagnóstico por meio das técnicas de microscopia óptica (Centrifugo-flutuação em sulfato de zinco modificada e coloração por fucsina carbólica modificada), Ensaio imunoenzimático (ELISA) e Reação em Cadeia da Polimerase (PCR); e caracterizando geneticamente esses protozoários com o emprego da técnica de polimorfismo no tamanho dos fragmentos de restrição (RFLP). A ocorrência de Giardia duodenalis e Cryptosporidium em 200 bovinos foi de 8 e 14%, respectivamente. O diagnóstico das infecções em bezerros foi significativamente maior do que em animais adultos. A técnica da PCR demonstrou uma sensibilidade diagnóstica superior quando comparada às técnicas de microscopia óptica e ensaio imunoenzimático

Giardia duodenalis and Cryptosporidium spp. are protozoan organisms that can infect the intestinal tract of many animal species including mammals. Clinical signs reported in calves and lambs infected with theses parasites include dullness, lethargy, anorexia, fever, dehydration, gastritis, reduced milk yield and poor weight gain and therefore have a potential clinical and economic impact. Despite morphological uniformity, considerable biotypic and genetic diversity exists within the G. duodenalis and Cryptosporidium species. G. duodenalis is a species complex comprising at least seven major assemblages or genotypes (A, B, C, D, E, F and G). These assemblages, which differ from each other significantly, appear to have distinct host preferences or have a limited host range. Recent studies suggest that cattle are infected with at least four Cryptosporidium parasites: C. parvum, Cryptosporidium bovis, Cryptosporidium andersoni and the Cryptosporidium deer-like genotype . In sheep, however, most prevalence information is based on microscopy and thus there is little information on Cryptosporidium species or genotypes. This study was undertake to determine the occurrence of Giardia and Cryptosporidium infections in dairy cattle and sheep in São Paulo State, Brazil through the use of microscopy, Enzyme Immunoabsorbent assay (EIA) and Polymerase chain Reaction (PCR); and to determine the species/genotypes by PCR-RFLP. Ten dairy farms in Botucatu city region are sampled. At each farm, 20 specimens are randomly collected. Giardia and Cryptosporidium was identified in 80% and 90% of farm locations, respectively. Of the 200 specimens collected, 8% and 14% has Giardia and Cryptosporidium DNA, respectively. Most infections were Giardia duodenalis Assemblage E (87,5%) and Cryptosporidium andersoni (82%) which are not zoonotic; however, one calf was infected with zoonotic Giardia duodenalis Assemblage AII and another with B

Variação dos perfis metabólico, hematológico e lácteo em ovinos leiteiros na serra gaúcha

A ovinocultura no Rio Grande do Sul (RS), tem mostrado mudanças no tipo de exploração nos últimos 20 anos. A produção de lã, que por muito tempo movimentou a economia do setor primário, cedeu lugar para a produção de cordeiros. Recentemente, a ovinocultura leiteira começa a dar seus primeiros passos dentro do sistema de produção ovina. Esta dissertação tem por objetivo apresentar a variação dos perfis metabólico, hematológico e lácteo em ovinos leiteiros na Serra Gaúcha e discutir seus resultados. O trabalho foi realizado em ovelhas da raça Lacaune, criadas em regime de confinamento no município de Bento Gonçalves (RS). As observações se estenderam pelo período de dois anos consecutivos. Para determinação do perfil bioquímico foram coletadas amostras de sangue por venipunção jugular sem anticoagulante. O mesmo procedimento foi empregado na coleta de amostras para o hemograma, utilizando-se, nesse caso, tubos contendo EDTA, como anticoagulante. As amostras foram coletadas de sete animais ao acaso nos seguintes períodos fisiológico: (a) ovelhas vazias; (b) início, (c) meio e (d) final da gestação e (e) aos 7, (f) 30, (g) 60 e (h) 140 dias de lactação. Durante os mesmos períodos da lactação foram coletadas amostras para a determinação dos componentes físico-químicos do leite. Os valores dos parâmetros físico-químicos do leite estudados discordam com os resultados citados pela literatura em outros países. A acidez em °Dornic (°D) foi maior que a relatada em outros estudos. Os valores de proteína e gordura foram inferiores aos citados na literatura. Os parâmetros com variação estatística (P<0,05) no período da lactação foram: pH, acidez em °D, densidade, proteína, lactose, gordura, ESTe ESD. O perfil metabólico apresentou as maiores variações com relação à média no final da gestação e início da lactação. Não foi observada diferença significativa nos parâmetros analisados entre o grupo de ovelhas vazias e prenhes, com exceção do cálcio que foi maior nas ovelhas vazias (P<0,05). Dentre os parâmetros do metabolismo nitrogenado, apenas a uréia mostrou variação durante a gestação e a lactação (P<0,05). Os valores de glicose e fructosamina diminuíram e os de BHB aumentaram significativamente (P<0,05) no final da gestação. Durante a lactação a glicose diminuiu e o colesterol aumentou significativamente (P<0,05) com o avanço do período. O nível de magnésio aumentou no final da lactação e o fósforo apresentou um diminuição nos valores aos 30 dias após o parto (P<0,05). Os parâmetros hematológicos mostraram não haver diferença significativa nos diferentes períodos fisiológicos estudados, com exceção dos neutrófilos segmentados que aumentaram com o avanço da gestação. Os dados encontrados servem como referência para estudos sobre nutrição, metabolismo e qualidade do leite em ovelhas leiteiras