Resumo

O microbioma oral é composto por uma variedade de bactérias que estão presentes na cavidade oral saudável e principalmente nos estágios mais avançados da doença periodontal (DP). O objetivo deste estudo foi avaliar a diversidade bacteriana da placa subgengival de 40 cães antes e após tratamento com gel odontológico veterinário, divididos em quatro grupos experimentais com 10 animais cada: cavidade oral saudável (G1), periodontite leve (G2), moderada (G3) e grave (G4), através de análises metagenômicas. Foram coletadas placas bacterianas dos dentes superiores de todos os animais antes do tratamento, 30 dias e 60 dias após o início do tratamento com o gel Tropiclean Fresh Breath Clean Teeth Gel® que contém Aloe vera e chá verde. Após extração de DNA e preparação de bibliotecas bacterianas, foi realizado o sequenciamento de amplicons de rRNA 16S pela plataforma Illumina MiSeq. Através do sequenciamento e auxílio da bioinformática, foram identificadas 16 gêneros do filo Bacteroidetes, (Porphyromonas sp., Bacteroides sp., Capnocytophaga sp., Bergeyella sp., e Barnesiella sp.), do filo Firmicutes (Clostridium sp.), do filo Fusobacteria (Fusobacterium sp. e Cavibacter sp.), do filo Proteobacteria (Moraxella sp., Desulfomicrobium sp., Neisseria sp. Campylobacter sp. e Pasteurella sp.), Filo Synergistetes (Aminobacterium sp.), Espiroquetas (Treponema sp.), e Filo Tenericutes (Acholeplasma sp.). em todos os grupos de tratamento. Observou-se que o número de OTUs não apresentaram modificações em termos de filos e gêneros, mas modificou em relação às espécies sendo encontradas maior proporção nos grupos de cães com periodontite crônica, do que nos grupos controle e leve. Concluiu-se que as análises metagênomicas foram satisfatórias para identificação de diferentes OTUs na cavidade oral de cães, apresentando diferentes fases da doença periodontal. O uso do gel não alterou no número de OTUs identificadas em cada grupo, antes do tratamento, 30 e 60 dias após o tratamento.

The oral microbe comprises one of the periodontal diseases that are available in the more advanced oral variety and mainly in the more advanced courses of periodontal disease (PD). The aim of this study was to evaluate the bacterial diversity of the subgingival subclass of 40 experimentally biological dogs and after the separate objective in treatment with four experimental biological animals, after this study was divided into four experimental biological plaque groups, after completion of the treatment with 10 animals, increasingly healthy oral (G1), moderate (G3) and severe (G4), through metagenomic evaluations. Bacterial plaques were collected from the upper teeth of all animals before treatment, 30 days and 60 days after starting treatment with Tropiclean Fresh Breath Clean Teeth Gel® containing Aloe vera and green tea. After collecting DNA and preparing bacterial libraries, sequencing of 16S rRNA rRNA amplicons was performed on the Illumina MiSeq platform. Through sequencing and the aid of bioinformatics, 16 genera of the phylum Bacteroidetes, (Porphyromonas sp., Bacteroides sp., Capnocytophaga sp., Bergeyella sp., and Barnesiella sp.), of the phylum Firmicutes (Clostridium sp.), of the phylum Fusobacteria (Fusobacterium sp. and Cavibacter sp.), of the phylum Proteobacteria (Moraxella sp., Desulfomicrobium sp., Neisseria sp. Campylobacter sp. and Pasteurella sp.), Phylum Synergistetes (Aminobacterium sp.), Spirochetes (Treponema sp.), and Phylum Tenericutes (Acholeplasma sp.). in all treatment groups. It was observed that the number of OTUs was not thought of in terms of chronic phyla related to genera and but modified in terms of proportion in the groups of genera with humans, than in the control and modified groups. The differences between the different metagnomic phases were conclusive for the identification of the different phases of periodontal disease, presenting different phases of periodontal disease. The use of the gel did not change the number of OTUs treated in each group, before treatment, 30 and 60 days after treatment.

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Este estudo objetivou avaliar a eficácia do uso de IgY- anti gingipaínas, através da quantificação de Porphyromonas gingivalis (Pg) na cavidade bucal de cães com doença periodontal (DP) estágio 1, e seus efeitos sobre índices visuais de placa (IP), cálculo (IC) e gengivite (IG). Foram utilizados 30 cães, submetidos a limpeza mecânica da cavidade bucal, divididos em 3 grupos, onde GT (grupo tratamento) utilizaram IgY- anti gingipaínas (200 mg/dia), GP (grupo placebo) e GC (grupo controle). Realizou-se curetagem subgengival em 3 tempos onde T1 (antecedeu a limpeza mecânica), T2 (imediatamente após limpeza mecânica) e T3 (28 dias após limpeza mecânica). Os produtos da curetagem foram submetidos a reação em cadeia pela polimerase (PCR) para Pg e Fusobacterium spp (Fs) e quantitativa (qPCR) para Pg, e realizadas as análises visuais para os grupos. Em T3, GP e GT demonstraram redução no número de Pg em relação ao GC, à detecção de Fs foi menor em GT quando comparado a GC e GP, não notou-se diferença entre grupos sobre IP, IC e IG. O uso tópico de IgY- anti gingipaínas não alterou o número de Pg, mas promoveu redução na detecção de animais positivos para Fs, que é um mediador da adesão de Pg na evolução DP, uma vez que a periodontite instalada não é reversível mesmo após terapias bem sucedidas. Estes resultados encorajam estudos com IgY- anti gingipaínas.

This study aimed to evaluate the effectiveness of IgY-anti gingipaínas, through the detection and quantification of Porphyromonas gingivalis (Pg) in the oral cavity of dogs with stage I periodontal disease (PD), and there effects on visual card indexes (IP), calculus (IC) and gingivitis (IG). 30 dogs were used, namely GT (treatment group) for those used IgY- anti gingipaínas (200 mg/day), GP (placebo group) and GC (control group). Subgingival curettage was performed in 3 days where T1 (preceded the mechanical cleaning), T2 (immediately after mechanical cleaning) and T3 (28 days after mechanical cleaning). Curettage products have undergone qualitative polymerase chain reaction (PCR) for Pg and Fusobacterium spp (Fs) and quantitative (qPCR) to Pg, the visual analysis at T3 to the groups. In T3, GP and GT showed reduction in the number of PG compared to GC, the detection of Fs was lower in GT when compared to GP and GC, no difference was noted between groups over IP, IC and IG. The topical use of IgY-anti gingipaínas not change the number of Pg, but promoted reduction in the number of positive animals to Fs, what is a evolution mediator of PG on the DP. Different approaches are proposed for prevention of early dogs, DP once periodontitis installed is not reversible, even after successful therapies. These results encourages studies with IgY- anti gingipaíns.

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The objective was to determine microbiote of the subgingival bacterial plaque of dogs with periodontal disease (PD) and establish the effect of antibioticotherapy on its reduction. Twenty dogs with varied stages of PD were evaluated and samples of their subgingival bacterial plaque were collected. Distinct antibiotic protocols were used in two groups with ten animals each: clindamycin (G1) and metronidazole + espiramycin (G2). New subgingival samples were collected 15 days after antibiotic therapy started. There were observed subgingival bacterial culture on most dogs with PD and correlation between severity of PD and age. There was reduction of bacterial growth in 20% of the samples after treatment and antibiogram showed higher sensibility to clindamycin, followed by espiramycin - all microorganisms were resistant to metronidazole.

Objetivou-se determinar a microbiota da placa bacteriana subgengival de cães com doença periodontal (DP) e estabelecer o efeito da antibioticoterapia. Avaliaram-se 20 cães com graus variados de DP e coletaram-se amostras da placa bacteriana subgengival antes e após antibioticoterapia. Preconizou-se antibioticoterapia distinta em dois grupos, com 10 animais cada: clindamicina (G1) e metronidazol + espiramicina (G2). Observou-se crescimento bacteriano subgengival na maioria dos cães com DP e correlação entre a severidade da DP e a idade dos animais. Houve redução significativa no crescimento bacteriano após a antibioticoterapia e o antibiograma demonstrou maior sensibilidade à clindamicina, seguido da espiramicina; todos os microrganismos foram resistentes ao metronidazol.

Resumo

A doença periodontal é uma das afecções da cavidade oral que mais afeta os gatos domésticos. É de origem bacteriana, onde os microrganismos se aderem à superfície dos dentes formando a placa bacteriana, que destrói os tecidos periodontais, que são: a gengiva, o osso alveolar, o ligamento periodontal e o cemento. Após algum tempo, esta placa bacteriana se mineraliza formando o cálculo dentário. Este, por sua vez, pode estar localizado na região supragengival ou subgengival. A doença periodontal tem várias fases, que se inicia com uma gengivite, onde os sinais clínicos são dor, inflamação gengival e mau hálito. Depois, evolui para a periodontite que é a fase irreversível da doença, ocorrendo perda de inserção do ligamento periodontal, destruição dos tecidos periodontais e reabsorção do osso alveolar. Porém, se a doença periodontal for tratada corretamente pode ser controlada interrompendo o avanço da mesma. Para o diagnóstico, é necessária a realização de exame clínico minucioso e de radiografias intra-orais, onde muitas vezes são descobertas lesões bucais ou dentárias concomitantes, como a lesão de reabsorção dentária, comum na espécie felina. O tratamento ideal para a doença periodontal inclui remoção do cálculo, aplainamento radicular e polimento. Dependendo da gravidade da doença, pode-se realizar intervenção cirúrgica periodontal complementar como exodontia, raspagem aberta, enxerto ósseo, gengivectomia ou gengivoplastia, associada ao uso de antinflamatórios e antissépticos. Um felino de 9 anos de idade, apresentando doença periodontal moderada foi submetido a tratamento periodontal completo. Durante a raspagem, foi observada a presença de lesão de reabsorção em alguns dentes,comprovada por imagens radiográficas intra-orais. Os dentes com comprometimento periodontal e com lesão reabsortiva foram extraídos, e o proprietário relatou melhora significativa da hiporexia e apatia do animal após o tratamento.

Periodontal disease is one of the affections of the oral cavity that affects domestic cats. It is of bacterial origin, where the microorganisms adhere to the tooth surface to form plaque, which destroys periodontal tissues, which are: the gingiva, alveolar bone, periodontal ligament and cementum. After some time, this plaque is forming the mineralized dental calculus. This, in turn, may be located in supragingival or subgingival region. Periodontal disease has several phases, which begins with gingivitis, where clinical symptoms are pain, gingivitis and bad breath. Then, it develops into periodontitis is irreversible stage of the disease, occurring insertion loss of the periodontal ligament, the periodontalt issue destruction and resorption of alveolar bone. However, if periodontal disease is treated properly can be controlled by stopping the advance of same. For diagnosis, it is necessary to perform a thorough clinical examination and intraoral radiographs, which are often discovered concomitant oral or dental injuries such as dental injury, common resorption infeline species. The ideal treatment for periodontal disease includes removal of calculus, root planing and polishing. Depending on the severity of the disease, one can perform additional periodontal surgery such as extraction, open scraping bone graft or gingivectomy gingivoplasty associated with the use of anti-inflammatory agents and antiseptics. A cat of 9 years of age, with moderate periodontal disease underwent complete periodontal treatment. During the sweep, the presence of resorptive lesion in some teeth, proven by intraoral radiographic images was observed. Teeth with periodontal involvement and resorptive lesion were extracted, and the owner reported a significant improvement of appetite loss and apathy of the animal after treatment.

La enfermedad periodontal es una de las alteraciones de la cavidad oral que más afecta ai gato doméstico. De origen bacteriana, en la cual, los microorganismos se alojan en la superficie de los dientes y van formando la placa bacteriana, destruyendo los tejidos periodontales, que son: La encía, el hueso alveolar, el ligamento periodontal y el cemento. Después de algún tiempo, esta placa bacteriana se mineraliza formando el calculo dentario. Este a su vez, puede estar localizado en la región supragingival o subgingival. La enfermedad periodontal tiene varias fases, iniciando con gingivitis, con síntomas como dolor, inflamación gingival y halitosis. Posteriormente evoluciona para periodontitis, que es la fase irreversible de la enfermedad, presentándose perdida de la inserción del ligamento periodontal, destrucción de los tejidos periodontales y reabsorción del hueso alveolar. Sin embargo, si la enfermedad periodontal es tratada correctamente, se puede detener su evolución. Para el diagnóstico es necesario un examen clínico minucioso, acornpariado de radiografías intraorales, que a menudo se descubren lesiones bucales o dentales concomitantes, como el dano a la resorción, comunes en los felinos. El tratamiento para la enfermedad periodontal incluye remoción del calculo dentario, aplanamiento radicular y pulimiento. Dependiendo de la gravedad de la enfermedad, puede ser necesaria la realización de intervención quirúrgica periodontal con curetaje a cielo abierto, injerto óseo, gingivectomia y/o gingivoplastia asociada al uso de antibióticos y antisépticos. Un felino de 9 anos de edad, presentando enfermedad periodontal moderada fue sometido a tratamiento periodontal completo. Durante el curetaje fue observada la presencia de lesión reabsortiva en varios dientes, comprobada por imágenes radiográficas intraorales.

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The purpose of this study was to determine the prevalence of enteric bacteria and yeasts in biofilm of 80 HIV-positive patients with plaque-associated gingivitis or necrotizing periodontitis. Patients were subjected to extra, intra oral and radiographic examinations. The oral hygiene, bleeding on probing, gingival conditions, and attachment loss were evaluated. Clinical specimens were collected from gingival crevices or periodontal pockets, transferred to VMGA III, diluted and transferred to Sabouraud Dextrose agar with 100 µg/ml of chloramphenicol, peptone water, EVA broth, EMB agar, SS agar, Bile esculin agar and Brilliant green agar. Isolation of yeasts was carried out at room temperature, for 3-7 days; and for the isolation of enteric microorganisms plates were incubated at 37ºC, for 24-48 h. The yeasts identification was performed according to the carbon and nitrogen assimilation, fermentation of carbohydrates and germ tube formation. Bacteria were identified according to their colonial and cellular morphologies and biochemical tests. Yeasts were identified as Candida albicans and its occurrence was more common in patients with CD4+ below 200/mm³ and was affected by the extension of periodontal involvement (P = 0.0345). Enteric bacteria recovered from clinical specimens were identified as Enterobacter sakazakii, Enterobacter cloacae, Serratia liquefaciens, Klebsiella oxytoca and Enterococcus sp. Enterobacteriaceae and enterococci were detected in 32.5 percent of clinical samples from patients with necrotizing periodontitis. In conclusion, non-oral pathogenic bacteria and C. albicans were more prevalent in periodontal sites of HIV-positive patients with necrotizing periodontitis and chronic gingivitis.

O objetivo desse estudo foi avaliar a ocorrência de bactérias entéricas e leveduras no biofilme subgengival de pacientes HIV-positivos com gengivite crônica ou periodontite necrosante. Os pacientes foram submetidos a exame clínico e radiográfico e de higiene bucal, sangramento à sondagem, condições gengivais e a perda de inserção. Os espécimes clínicos de sulcos gengivais ou bolsas periodontais foram inoculados em ágar Sabouraud dextrose com 100 mg/ml de cloranfenicol, água peptonada, caldo EVA, ágar EMB, ágar SS, ágar Bile esculina e ágar verde brilhante. O cultivo de leveduras foi realizado à temperatura ambiente, de 3-7 dias; das enterobactérias a 37ºC de 24-48 h. A identificação das leveduras foi realizada pela assimilação de carbono e nitrogênio, fermentação de açucares e formação de tubo germinativo. As bactérias de acordo com a morfologia celular e colonial e testes bioquímicos. Foram identificadas Candida albicans e sua prevalência foi maior em pacientes com contagens de CD4+ < 200/mm³, e sua ocorrência foi afetada pela extensão da destruição periodontal (P = 0,0345). Enterobacteriaceae e enterococos foram detectados em 32,5 por cento dos pacientes com periodontite necrosante. As enterobactérias foram Enterobacter sakazakii, E. cloacae, Serratia liquefaciens, Klebsiella oxytoca e Enterococcus sp. Concluiu-se que bactérias patogênicas exógenas à cavidade bucal e C. albicans podem ser detectadas no biofilme subgengival de pacientes HIV-positivos com periodontite necrosante e gengivite.

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Actinobacillus actinomycetemcomitans is considered a major etiologic agent of aggressive periodontitis but this species has also been associated with other forms of periodontal disease. Further, highly leukotoxic strains are related to severity of disease. This investigation determined the prevalence of A. actinomycetemcomitans and the occurrence of the leukotoxin gene 530-bp deletion in Brazilian subjects with chronic periodontitis. Twenty periodontally healthy and 20 chronic periodontitis subjects were selected. Full-mouth clinical examination was carried out at 6 sites/tooth. Subgingival biofilm samples were collected from the 3 deepest sites and 3 healthy sites from periodontitis subjects, as well as from 3 sites of individuals with periodontal health. A. actinomycetemcomitans and the genetic deletion were determined by the polymerase chain reaction. Significant differences were sought by Mann-Whitney, Chi-square, and Wilcoxon sign tests. Periodontitis subjects presented a higher prevalence (75 percent) of A. actinomycetemcomitans than individuals with health (45 percent) (p = 0.053). A mean frequency of 57.5 percent of A. actinomycetemcomitans - positive sites was observed in the periodontitis group. Of those, 75 percent were diseased, whereas 40 percent were healthy sites (p = 0.0001). Healthy subjects showed a mean frequency of 35 percent of positive sites. In contrast, the genetic deletion was detected only in 4 diseased sites from 2 chronic periodontitis patients. A high prevalence of A. actinomycetemcomitans was observed in Brazilians with chronic periodontitis. However, the leukotoxin gene 530-bp deletion was rarely detected in the subgingival biofilm of these subjects.

Actinobacillus actinomycetemcomitans tem sido associado com diferentes formas de doenças periodontais, mas tal espécie é considerada o principal agente etiológico da doença periodontal agressiva. Algumas cepas de A. actinomycetemcomitans apresentam uma deleção de 530 pb na região promotora do operon do gene da leucotoxina, produzindo assim maiores quantidades desta toxina. Tal fato pode ter um importante papel na patogênese das doenças periodontais. A proposta do presente estudo foi determinar a prevalência do A. actinomycetemcomitans em amostras de biofilme subgengival de indivíduos brasileiros com periodontite crônica e saúde periodontal; bem como avaliar a distribuição do tipo genético leucotóxico desta espécie nestes indivíduos. Vinte pacientes com periodontite crônica e 20 controles com saúde periodontal foram selecionados. O exame clínico periodontal foi realizado em 6 sítios/dente em todos os dentes. Amostras de biofilme subgengival foram coletadas de 3 sítios com a maior profundidade de bolsa e 3 sítios sem doença dos pacientes com periodontite, assim como de 3 sítios aleatórios dos controles. A detecção do A. actinomycetemcomitans e a ocorrência da deleção genética foram realizadas utilizando a técnica de PCR diretamente nas amostras de biofilme. Pacientes com periodontite crônica apresentaram uma alta prevalência de A. actinomycetemcomitans (75 por cento) quando comparados aos indivíduos sem doença periodontal (45 por cento), porém essa diferença não foi significativa (p = 0.053). Foi observada uma freqüência média de 57.5 por cento de sítios com A. actinomycetemcomitans no grupo com periodontite. Destes sítios, 75 por cento eram sítios com doença, enquanto 40 por cento eram sítios saudáveis (p = 0.0001). Indivíduos sem doença periodontal apresentaram uma freqüência média de 35 por cento de sítios com A. actinomycetemcomitans. A deleção de 530-pb foi encontrada somente em 4 sítios doentes de 2 pacientes com periodontite crônica. Entretanto...

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The oral cavity may act as a reservoir for several pathogens related to systemic infections. Therefore, the purpose of this study was to determine the prevalence and levels of pathogenic bacteria in the subgingival biofilm of chronic periodontitis lesions and healthy periodontal sites using the checkerboard DNA-DNA hybridization technique. 200 samples of subgingival biofilm from sites with periodontitis (probing pocket depth > 4 mm and /or clinical attachment level > 4 mm) and 200 samples from healthy sites of 14 patients with chronic periodontitis, as well as 200 samples from 3 periodontally healthy patients were obtained. The presence and levels of 11 pathogenic bacteria were determined using whole genomic DNA probes and the checkerboard method, computed for each site and then across sites within each subject group. Significance of differences in clinical and microbiological parameters among groups were examinated using the Mann-Whitney and Wilcoxon sign tests. The predominant species in all 600 samples included Corynebacterium diphtheriae, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus,Acinetobacter baumannii and Escherichia coli. In general, most of the species were detected in greater prevalence and levels in sites with and without disease from patients with periodontitis in comparison to the periodontally healthy group. In particular, C. diphtheriae, E. coli, E. faecalis, P. aeruginosa and S. aureus were significantly more prevalent and detected in higher counts in diseased sites of patients with periodontal disease compared to healthy subjects (p < 0.05). Clinical signs of disease presented a positive correlation with the species A. baumannii, Streptococcus pyogenes, E. coli, S. aureus and P. aeruginosa. In conclusion, "non-oral" pathogenic bacteria are detected in high prevalence and levels in periodontal sites of chronic periodontitis patients.

Apesar da extensa literatura sobre a associação de bactérias orais e doenças sistêmicas, tem se dado pouca atenção à cavidade oral como um reservatório de bactérias patogênicas "não-orais". A microbiota oral é constituída de mais de 300 espécies bacterianas já caracterizadas, além de organismos não cultiváveis que vêm sendo descobertos através de técnicas moleculares. O objetivo do presente estudo foi determinar a prevalência e os níveis de 11 bactérias patogênicas "não-orais" em sítios periodontais de pacientes com periodontite e de pacientes saudáveis, utilizando a técnica do "Checkerboard DNA-DNA hybridization". 200 amostras de biofilme subgengival de sítios doentes (PBS > 4mm e/ou NCI > 4mm), 200 amostras de sítios saudáveis de 14 pacientes com periodontite e 200 amostras de sítios de 3 pacientes saudáveis foram selecionadas. A prevalência ( por cento de sítios colonizados) e os níveis de cada espécie bacteriana foram computados para cada sítio e dentro de cada grupo. Diferenças clínicas e microbiológicas entre os grupos foram avaliadas através dos testes de Mann-Whitney e Wilcoxon. As espécies que predominaram nas 600 amostras analisadas incluíram Corynebacterium diphtheriae, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Acinetobacter baumannii e Escherichia coli. Em geral, a maioria das espécies estudadas foi detectada com maior freqüência e em níveis elevados nos sítios com e sem doença nos pacientes com periodontite em relação ao grupo com saúde periodontal. Em particular, C. diphtheriae, E. coli, E. faecalis, Pseudomonas. aeruginosa e S. aureus foram significantemente mais prevalentes e detectadas em maior número nos sítios doentes de pacientes com periodontite em relação aos sítios de indivíduos com saúde periodontal (p < 0,05). Sinais clínicos de doença periodontal apresentaram uma correlação positiva com as espécies A. baumannii, Streptococcus pyogenes, E. coli, S. aureus e P. aeruginosa. Além disso, as espécies S. pyogenes...